FI94418C

FI94418C - Menetelmä uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten A-nor-steroidi-3-karboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi

Info

Publication number: FI94418C
Application number: FI906438A
Authority: FI
Inventors: Gary Alan Flynn; Philippe Bey; Thomas Robert Blohm
Original assignee: Merrell Dow Pharma
Priority date: 1989-12-29
Filing date: 1990-12-28
Publication date: 1995-09-11
Also published as: EP0435321A3; HU908495D0; IE904720A1; ATE126232T1; HUT56379A; AU634326B2; PT96394A; DE69021530T2; NO180719C; GR3017559T3; FI94418B; CN1052866A; JP3039996B2; EP0435321A2; MX9203338A; IE67511B1; NZ236589A; CA2033392A1; KR0178468B1; CN1036200C

Description

1 94418

Menetelmä uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten A-nor-steroidi-3-karboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi

Esillä oleva keksintö koskee menetelmää uusien, 5 terapeuttisesti käyttökelpoisten A-nor-steroidi-3-karbok-syylihappojohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava (A), (B) (C) tai (D)

Cy*2 Hj CHi R2 15 C'00R> ”,(A) CH3 R2 COORi ^ COOH (D) jolloin .25 katkoviiva merkitsee valinnaista kaksoissidosta; • ·

Rj on vety tai C^-Ce-alkyyli; ja R2 on Cj^-Cg-alkanoli; C^-Cg-alkanoni; CON(R3)(R4), jossa R3 ja R4 ovat kumpikin riippumattomasti vety, C^-Cg-alkyyli tai -(CH2)x-Ar-(M)y, jossa x on 0, 1 tai 2, Ar on 30 fenyyli, y on 0, 1 tai 2 ja M on Cj-C6-alkoksi, halogeeni, * C^-Cg-alkyyli tai -S(0)tR5, jossa R5 on C^-Cg-alkyyli ja z on 0, 1 tai 2.

Nämä uudet A-nor-steroidi-3-karboksyylihappojohdannaiset ovat käyttökelpoisia nisäkkäiden steroidi-5-a-re-35 duktaasin ehkäisyaineina.

2 94418

Nisäkkäiden steroidi-5-a-reduktaasi on entsyymi, jota esiintyy nisäkkäiden kudoksissa, kuten ihossa, miesten sukuelimissä ja eturauhasessa ja joka katalysoi ste-roidaalisen hormonin, testosteronin muuttumisen steroidaa-5 liseksi hormoniksi, dihydrotestosteroniksi (5-a-androstaa-ni-17-B-oli-3-oni). Testosteroni ja dihydrotestosteroni (DHT) ovat hormoniluokan jäseniä, joita kutsutaan miespuolisiksi hormoneiksi, jotka ovat ensisijassa vastuussa niiden fysikaalisten ominaisuuksien aikaansaamisesta, jotka 10 erottavat miespuoliset naispuolisista henkilöistä. Testosteroni ja DHT ovat primääriset androgeeniset steroidit miespuolisissa henkilöissä. Kuitenkin DHT, pikemminkin kuin testosteroni, on voimakkain androgeenisen pääte-elimen vaikuttaja määrätyissä kudoksissa, erityisesti kasvun 15 välittäjänä. Sitä paitsi DHT muodostuu enimmäkseen itse kyseisissä soluissa testosteronin pelkistyessä 5-a-reduk-taasin vaikutuksesta.

On tunnettua, että iho reagoi miespuolisille hormoneille ja on miespuolisen hormonin metabolismin aktiivinen 20 sijaintikohta. Erityisesti testosteroni muuttuu ihossa tapahtuvassa aineenvaihdunnassa DHT: ksi 5-a-reduktaasin vaikutuksesta. Testosteronin metabolismi ihossa voi toisinaan olla epänormaalilla tavalla liiallista ja sillä voi olla ei-toivottavia vaikutuksia. On olemassa merkittäviä todis-25 teitä siitä, että DHT aiheuttaa märkänäppylän, jollainen on mm. acne vulgaris, syntymisen samoin kuin muita miespuoliseen hormoniin liittyviä tiloja [katso: Price, Arch.

Dermatol. Ill, 1496 (1975)]. Sellaiset aineet, jotka kykenevät estämään DHT:n muodostumisen testosteronista ihossa, 30 kuten ehkäisemällä 5-a-reduktaasin aktiviteetin, olisivat ·· sen vuoksi tehokkaita märkänäppylän käsittelyssä.

• · ·

Miespuolisen hormonin kohonneeseen aktiviteettiin liittyy lisäksi muita fysikaalisia tiloja ja sairaustiloja, joita ovat mm. hyvänlaatuinen eturauhasen liikakasvu, 35 miespuolisen hormonin aiheuttama kaljupäisyys (tavallinen 3 · 94418 hiustenlähtö, joka on miespuolisen hormonin aiheuttama sukupuolisesti herkissä miehissä ja naisissa), talirauhasten liian vilkas toiminta sekä liikakarvaisuus naisilla. Sellaiset aineet, jotka kykenevät estämään DHT:n muodostuin! -5 sen testosteronista, olisivat myös tehokkaita näiden sairaustilojen käsittelyssä.

Termi "C^-Cg-alkyyli" tarkoittaa tässä käytettynä tyydytettyä alkyyliryhmää, jossa on 1 - 6 hiiliatomia ja on rakenteeltaan suora, haarautunut tai syklinen. Tämän 10 termin puitteisiin kuuluvat metyyli, etyyli, n-propyyli, isopropyyli, butyyli, isobutyyli, tertiäärinen butyyli, pentyyli, heksyyli, sykloheksyyli ja näiden kaltaiset.

Osa "-(CHj),-" tarkoittaa suoraketjuista alkyleeni-radikaalia, jossa x on 0, 1 tai 2. Termi Ar—(M)yH tar-15 koittaa fenyyli- tai naftyyliryhmää, joka voi olla ei-sub-stituoitu (y 0), mono-substituoitu (y * 1) tai di-sub-stituoitu (y 2), jolloin substituentteja on kuvattu termillä "M". Termi "M" tarkoittaa C^-Cg-alkoksi-, halogeeni-, C1-C6-alkyyli- tai -SiO^Rj-osia.

20 Termi "C^-Cg-alkoksi" tarkoittaa tässä käytettynä tyydytettyä alkyyliryhmää, jossa on 1 - 6 hiiliatomia ja jolla on suora, haarautunut tai syklinen rakenne ja jossa on happiradikaali. Tämän termin puitteisiin kuuluvat me-toksi, etoksi, propoksi, isopropoksi, butoksi, isobutoksi, ,.?5 tertiäärinen butoksi, pentoksi, heksoksi, sykloheksyylioksi ja näiden kaltaiset. Termi "halogeeni” tai "halo" tarkoittavat tässä käytettynä fluori-, kloori-, bromi- tai j odiradikaalia.

Termi "C^-Cg-alkanoli" tarkoittaa tässä käytettynä 30 tyydytettyä alkyyliryhmää, jossa on 1 - 6 hiiliatomia ja jolla on suora, haarautunut tai syklinen rakenne ja jossa « · on hydroksiryhmä. Tämän termin puitteisiin kuuluvat seu- raavat ryhmät: -CH20H; -CH(0H)CH3; -C(CH3)20H; -CH(0H)CH2CH3; -CH (OH )CH2CH( CH3) 2; -CH (CH3) CH20H; 4 94418 -CH(OH) — ja -CH(OH)CH·^ ^CH3 5

Termi "C1-C6-alkanoni" tarkoittaa tässä käytettynä tyydytettyä alkyyliryhmää, jossa on 1 - 6 hiiliatomia ja jolla on suora, haarautunut tai syklinen rakenne ja jossa on siihen kaksoissidoksella liittynyt happiatomi. Tämän 10 termin puitteisiin kuuluvat seuraavat ryhmät: -CH=0; -C(0)CH3; -CH(0)CH2CH3; -CH(0)CH(CH3)2;

ja -C‘0^O

15

Termi "CON(R3)(R4)" tarkoittaa tässä käytettynä kar-boksiamidiryhmää, jossa R3 ja R4 ovat kumpikin riippumattomasti vety, Cj-Cg-alkyyli tai -(CH2)x-Ar-(M)y sellaisina kuin edellä on määritelty.

20 Uusia kaavojen (A), (B), (C) ja (D) mukaisia A-nor- steroidi-3-karboksyylihappojohdannaisia voidaan valmistaa käyttämällä tavanomaisia menetelmiä ja tekniikkaa, jotka ovat alan ammattimiesten hyvin tuntemia.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle mainittujen 25 uusien A-nor-steroidi-3-karboksyylihappojohdannaisten vai-< · mistamiseksi on tunnusomaista se, mitä on esitetty patenttivaatimuksen 1 tunnusmerkkiosassa.

Eräs yleinen synteettinen menetelmä kaavan (A) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi esitetään kaaviossa A.

30 Kaaviossa A ovat kaikki substituentit sellaisia kuin edel- *·7 ia on määritelty. Termi "Rj" tarkoittaa kaikkia niitä sym bolin R2 tarkoittamia osia paitsi vetyä.

5 54418

Kaavio A

CHj R2 CHj R2 vaihe*a b (1) (2) CHj R2 ^'J2 0 >C L (3) °Me w 15 «* ,RZ CH3 R2 vaihe*e O (5) COOR,· (A,) ch, r2 j«3 Rz I? vaihe f COORr (Ai) C00H <a2> 30 Kaavan (A) mukaista sopivaa yhdistettä voidaan yleisesti valmistaa 5-vaiheisessa menetelmässä rakenteen (1) mukaisesta sopivasta steroidij ohdannaisesta.

Vaiheessa a hapetetaan rakenteen (1) mukaisen sopivan steroidi johdannaisen olefiini f unktionaliteetti vastaa-35 vaksi epoksidifunktionaaliteetiksi. Esimerkiksi voidaan 6 94418 rakenteen (2) mukaista epoksisteroidijohdannaista valmistaa hapettamalla rakenteen (1) mukainen steroidijohdannainen vetyperoksidin avulla emäksen, kuten natriumhydroksidin, läsnäollessa sopivassa liuotinjärjestelmässä, kuten 5 tetrahydrofuraanin ja metanolin seoksessa.

Valheessa b muutetaan rakenteen (2) mukaisen epoksisteroidi johdannaisen epoksidifunktionaliteetti vastaavaksi metyylienolieetterifunktionaliteetiksi. Esimerkiksi rakenteen (3) mukaista metyylienolieetteristeroidia voi-10 daan valmistaa rakenteen (2) mukaisen steroidijohdannaisen epoksidifunktionaliteetin enolieetterilisäyksen/eliminoi-misen avulla käyttäen natriummetoksidia, sopivassa alkoho-liliuottimessa, kuten metanolissa.

Vaiheessa c pelkistetään rakenteen (3) mukaisen 15 metyylienolieetteristeroidin ketonifunktionaliteetti vas taavaksi alkoholifunktionallteetiksl. Esimerkiksi rakenteen (3) mukainen metyylienolieetteristeroidi voidaan pelkistää vastaavaksi rakenteen (4) mukaiseksi hydroksiste-roidijohdannaiseksi natriumboorihydridin avulla sopivassa 20 proottisessa liuottimessa, kuten etanolissa.

Vaiheessa d muutetaan rakenteen (4) mukainen hyd-roksisteroidijohdannainen vastaavaksi rakenteen (5) mukaiseksi 4-keto-A*-steroidi johdannaiseksi. Esimerkiksi rakenteen (4) mukainen hydroksisteroidijohdannainen voidaan £.5 hydrolysoida vastaavaksi rakenteen (5) mukaiseksi 4-keto- A5-steroidijohdannaiseksi sopivan hapon, kuten perklooriha-pon avulla, sopivassa liuotinseoksessa, kuten metyleeni-kloridin ja asetonitriilin seoksessa.

Vaiheessa e voidaan kaavan (At) mukaista A-nor-A5-30 steroidi-3-karboksyylihapon esteriä valmistaa käsittele- . mällä rakenteen (5) mukaista sopivaa 4-keto-A5-steroidijoh- t dannaista sellaisen reagentin kanssa, jossa on hyperva-lenttista jodia, sopivan alkoholin (1^'OH) ja emäksen läsnäollessa. Tästä käsittelystä on tuloksena rakenteen (5) 35 mukaisen 4-keto-A5-steroidijohdannaisen renkaan kutistumi- 7 94418 nen ja esteröityminen, jolloin saadaan vastaava A-nor-Δ5-steroidi-3-karboksyylihapon esterin johdannainen (Aj).

4-keto-A5-steroidijohdannaisen (5) käsittelystä 5 emäksen kanssa on tuloksena vastaavan ristikkäin konjugoi-dun dienolaatin muodostuminen. Edullisia voimakkaita emäksiä tätä reaktiota varten ovat alkalimetallien hydroksidit, kuten kaliumhydroksidi ja natriumhydroksidi.

Ristikkäin konjugoituun enolaattiin suoritetaan sen 10 jälkeen hypervalenttisen jodin tai tallium^-suolan elek-trofiilinen lisäys enolaatin 3-asemaan. Hypervalenttisen jodin lisäämistä suositellaan. Reagentteja, joissa on hy-pervalenttista jodia ja jotka ovat käyttökelpoisia tässä reaktiossa, ovat sellaiset reagentit, kuten iodosobentsee-15 ni. Iodosobentseeni on edullinen reagentti käytettäväksi edellä kuvatussa reaktiossa. Iodosobentseeniä voidaan valmistaa menetelmillä, jotka ovat tällä alalla hyvin tunnettuja ja arvostettuja. Sitä voidaan lisätä reaktioseokseen suoraan tai sitä voidaan muodostaa in situ lisäämällä 20 edeltäjäainetta, kuten iodobentseenidiasetaattia reaktio-seokseen, joka sisältää emästä.

Reaktioseoksessa läsnäoleva alkoholi (R1'0H) tarttuu 3-ketoryhmään, jolloin muodostuu vastaava A-nor-Δ5-steroidi-3-karboksyylihapon esterijohdannainen (Ax). Siinä ta-.25 pauksessa, että halutaan sellainen esillä olevan keksinnön yhdiste, jossa Rx on jokin muu substituentti kuin vety, niin valitaan sopiva alkoholi (R1'0H) toivotun substituen-tin Rlr saamiseksi lopputuotteeseen. Jos esimerkiksi halutaan sellainen kaavan (A) mukainen yhdiste, jossa Rt on 30 etyyli, niin käytetään etanolia vaiheessa e. Vaihtoehtoi-• sesti voidaan sellaisia kaavan (A) mukaisia yhdisteitä, joissa Rx ei ole vety, valmistaa sellaisista kaavan (A) mukaisista yhdisteistä, joissa Ri on vety, käyttämällä tavanomaisia esteröintimenetelmiä ja -tekniikkaa, jotka ovat 35 hyvin tunnettuja tällä alalla.

β 94418

Vaiheessa f voidaan sopivan A-nor-Ä5_steroidi-3-kar-boksyylihapon esterijohdannaisen (Ax) esterifunktionali-teetti muuttaa vastaavaksi karboksyylihappofunktionalitee-tiksi huolellisesti valvotuissa olosuhteissa. Esimerkiksi 5 sopiva A-nor-A5-steroidi-3-karboksyylihapon esterijohdan-nainen (Ax) voidaan muuttaa vastaavaksi A-nor-A5-steroidi- 3-karboksyylihapoksi (A2) ei-hydrolyyttisissä olosuhteissa, kuten reagoittamalla trimetyylisilyylijodidin kanssa sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridis-10 sa.

Lähtöaineena käytetty steroidijohdannainen (1) valitaan siten, että saadaan toivottu substituentti symbolina R2 lopputuotteeseen. Steroidijohdannaiset, joissa on sopiva substituentti symbolille R2, ovat helposti saatavis-15 sa tai niitä voidaan valmistaa saatavissa olevista johdannaisista käyttämällä menetelmiä ja tekniikkaa, jotka ovat alan ammattimiesten hyvin tuntemia ja arvostamia.

Seuraavat esimerkit esittävät tyypillisiä kaavion A kuvaamia synteesejä. Näiden esimerkkien on tarkoitettu 20 olevan ainoastaan asiaa valaisevia. Seuraavissa esimer keissä käytettyinä on seuraavilla termeillä seuraavassa ilmoitetut merkitykset: "g" tarkoittaa grammoja, "mmol" tarkoittaa millimooleja, "ml" tarkoittaa millilitroja, "°C" tarkoittaa Celsius-asteita, "TLC" tarkoittaa ohutker-?J5 roskromatografiaa, "mg" tarkoittaa milligrammoja, "THF" tarkoittaa tetrahydrofuraania, "μΐ" tarkoittaa mik-rolitroja, "HPLC" tarkoittaa korkeapainenestekromatogra-fiaa.

Lisäksi, mitä tulee tässä mainittujen erityisten 30 yhdisteiden nimistöön, niin termi "20a" tarkoittaa yhdis- . tettä, jossa on S-absoluuttinen konfiguraatio 20-asemassa.

9 94418

Esimerkki 1 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-5-eeni-3a-karboksyylihappo ja metyyliesteri

Vaihe a: 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-and-5 rost-4,5-epoksi-3-oni

Seos, joka sisältää 3-okso-4-androsteeni-176-kar-boksyylihappoa (11,2 g, 35,4 mmol) ja metyleenikloridia (100 ml), saatetaan typpiatmosfäärin alaiseksi ja jäähdytetään 0 °C:seen jääkylvyn avulla. Joukkoon lisätään tri-10 etyyliamiinia (4,1 g, 40,6 mmol) ja sen jälkeen tipoittain oksalyylikloridia (3,8 ml, 4,4 mmol). Seoksen annetaan lämmetä 25 °C:seen ja sitä hämmennetään 30 minuuttia. Reaktioseos jäähdytetään 0 °C:seen ja siihen lisätään ti-pottain lisää oksalyylikloridia (2,91 g, 22,9 mmol). Seok-15 sen annetaan lämmetä 25 eC:seen ja sitä hämmennetään tunnin ajan. Seos jäähdytetään 0 *C:seen ja siihen lisätään tipottain di-isopropyyliamiinia (23,7 ml, 169 mmol) pysyttämällä samalla lämpötila 40 °C:n alapuolella. Seosta hämmennetään yön yli 25 °C:ssa, joukkoon lisätään jäävettä ja 20 orgaaninen faasi erotetaan. Vesifaasi uutetaan etyyliasetaatilla (2 X), yhdistetyt orgaaniset faasit pestään 10 %:isella kloorivetyhapolla, 10 %:isella kaliumhydroksi-dilla, vedellä ja sen jälkeen kyllästetyllä natriumklori-diluoksella. Orgaaninen faasi kuivataan ja liuotin haihdu- •25 tetaan tyhjössä, jolloin saadaan epäpuhdasta tuotetta.

• ·

Tuote pudistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-and-rost-4-eeni-3-onia.

Liuotetaan 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-30 androst-4-eeni-3-onia (10 g, 25 mmol) seokseen, jossa on tetrahydrofuraania (40 ml) ja metanolia (25 ml). Liuos jäähdytetään 5 °C:seen ja sitä käsitellään 30 %:isen vetyperoksidin (10,8 ml) ja 10 %:isen natriumhydroksidin (5 ml) kanssa. Kun reaktio on tapahtunut täydellisesti, 35 haihdutetaan liuotin tyhjössä ilman kuumennusta ja jäännös 10 94418 otetaan etyyliasetaatti/vesi-seokseen. Orgaaninen faasi erotetaan, pestään hyvin vedellä ja sen jälkeen kyllästetyllä natriumkloridiluoksella. Faasi kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 10,5 g epä-5 puhtaita otsikossa mainittuja epoksideja.

Vaihe b: 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-and-rost-4-eeni-4-metoksi-3-oni

Liuotetaan natriumhydroksidia (10 g) kuumaan meta-noliin (125 ml) ja kuumennetaan palautusjäähdytysolosuh-10 teissä. Lisätään samalla hämmentäen 176-( N,N-di-isopropyy-likarboksiamidi)-androst-4,5-epoksi-3-onia (10,5 g) meta-nolissa (10 ml). Hämmennetään 15 minuuttia, kaadetaan veteen ja uutetaan etyyliasetaattiin. Orgaaninen faasi erotetaan, pestään vedellä ja kuivataan. Liuotin haihdutetaan 15 tyhjössä ja puhdistetaan piihappogeelikromatografian (25 %:inen etyyliasetaatti/heksaani-seos) avulla, jolloin saadaanl,5 g otsikkoyhdistettä kiteisenä aineena; s.p.

223 -225 °C.

NMR-miljoonasosia δ (CDC13) 300MHz: 4,19 (h, 1H, 20 J=7Hz); 3,60 (s, 3H); 3,40 (h, 1H; J=7Hz); 3,08 (dt, 1H, jd-10Hz, Jt=2Hz); 2,63 (t, 1H, J=7Hz); 1,43 (d, 3H, J=7Hz); 1,40 (d, 3H, J-7Hz); 1,23 (d, 3H, J=7Hz); 1,21 (2, 3H); 1,15 (d, 3H, 7Hz); 0,82 (s, 3H).

Vaihe c: 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-and- 25 rost-4-eeni-4-metoksi-3-oli • · · '** Liuotetaan 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)- androst-4-eeni-4-metoksi-3-onia (2,0 g, 4,6 mmol) absoluuttiseen etanoliin (20 ml) ja saatetaan typpiatmosfäärin alaiseksi. Liuosta käsitellään natriumboorihydridin 3G (100 mg) kanssa 2 tuntia 25 °C:ssa. Lisätään vettä ja hämmennetään 30 minuuttia. Liuos kaadetaan etyyliasetaattiin, orgaaninen faasi erotetaan ja pestään hyvin vedellä. Kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 1,9 g otsikkoyhdistettä kiinteänä aineena.

11 54418

Vaihe d: 178-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-and-rost-5-eeni-4-oni

Liuotetaan 178-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-androst-4-eeni-4-metoksi-3-olia seokseen, jossa on vasta-5 tislattua asetonitriiliä (20 ml) ja vedetöntä metyleeni-kloridia (15 ml). Lisätään 70 %:ista perkloorihappoa (4 tippaa) ja hämmennetään 25 °C:ssa. 10 minuutin kuluttua kaadetaan keltainen liuos kyllästettyyn natriumvetykarbo-naattiliuokseen ja uutetaan metyleenikloridiin. Orgaaninen 10 faasi erotetaan ja kuivataan (MgS04). Aine puhdistetaan piihappogeelikromatografian (12 %:lnen etyyliasetaatti/-heksaani-seos) avulla, jolloin saadaan 1,0 g otsikkoyh-distettä; s.p. 138 - 189 °C.

NMR-miljoonasosia 6 (CDC13) 300MHz: 6,42 (dd, 1H, 15 Jx-5Hz, J2=3Hz); 4,23 (h, 1H, J=7Hz); 3,39 (h, 1H, J=7Hz); 2,64 (t, 1H, J-7Hz); 1,42 (d, 3H, J-7Hz); 1,37 (d, 3H, J-7Hz); 1,22 (d, 3H, J«7Hz); 1,13 (d, 3H, J=7Hz); 0,96 (s, 3H); 0,78 (s, 3H).

Vaihe e: 178-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A- 20 nor-androst-5-eeni-3a-karboksyylihappo, metyyliesteri

Liuotetaan kaliumhydroksidia (110 mg) vedettömään metanoliin (2 ml), liuos saatetaan typpiatmosfäärin alaiseksi ja jäähdytetään 0 °C:seen. Lisätään 178-(N,N-di-iso-propyylikarboksiamidi)-androst-5-eeni-4-onia (120 mg, •25 0,30 mmol) ja sen jälkeen jodibentseeniasetaattia (200 mg, 0,60 mmol). Vaaleankeltaista liuosta hämmennetään yhden tunnin ajan välillä 0 - 5 °C ja kaadetaan laimeaan kloori-vetyhappoon. Uutetaan metyleenikloridiin, orgaaninen faasi erotetaan ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan tyh-30 jössä ja jäännöstä käsitellään ylimäärin käytetyn diatso- * metaanin kanssa. Liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin « .

saadaan otsikkoyhdistettä keltaisena kalvona.

NMR-miljoonasosia δ (CDC13) 300MHz: 5,48 (m, 1H); 4,23 (h, 1H, J«7Hz); 3,70 (s, 3H); 3,41 (h, 1H, J-7Hz); 35 2,65 (t, 1H, J-7Hz); 1,43 (d, 3H, J*7Hz); 1,40 (d, 3H, 12 94418 J-7Hz); 1,22 (d, 1H, J-7Hz); 1,15 (d, 3H, J-7Hz); 0,95 (s, 3H); 0,78 (s, 3H).

Vaihe £: 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A- nor-androst-5-eeni-3a-karboksyy1ihappo 5 Liuotetaan 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)- A-nor-androst-5-eeni-3a-karboksyylihapon metyyliesteriä (100 mg, 0,233 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja käsitellään trimetyylisiliyylijodidin (78 mg, 0,5 mmol) kanssa.

Sen jälkeen kun reaktio on tapahtunut täydellisesti, kaa-10 detaan reaktioseos puskuriliuokseen ja orgaaninen faasi erotetaan. Orgaaninen faasi pestään hyvin vedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Tuote puhdistetaan piihappogeelikromatografiän avulla, jolloin saadaan otsikkoyhdistettä.

15 Esimerkki 2 17B-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-5-eeni-3o-karboksyylihappo ja isopropyyliesteri

Vaihe a: 17B-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst- 4,5-epoksi-3-oni 20 Sekoitetaan keskenään 3-okso-4-androsteeni-17B-kar- boksyylihappoa (11,2 g, 35,4 mmol) ja metyleenikloridia (100 ml), seos saatetaan typpiatmosfäärin alaiseksi ja jäähdytetään 0 °C:seen jääkylvyn avulla. Lisätään trietyy-liamiinia (4,1 g, 40,6 mmol), sen jälkeen tipottain oksa-£6 lyylikloridia (3,8 ml, 4,4 mmol). Seoksen annetaan lämmetä 25 °C:seen ja sitä hämmennetään 30 minuuttia. Reaktioseos jäähdytetään 0 °C:seen ja siihen lisätään tipottain vielä oksalyylikloridia (2,91 g, 22,9 mmol). Seoksen annetaan lämmetä 25 °C:seen ja sitä hämmennetään yhden tunnin ajan.

30 Jäähdytetään 0 °C:seen ja joukkoon lisätään tipottain . t-butyyliamiinia (17,8 ml, 169 mmol), pysyttämällä lämpö- tila samalla 40 °C:n alapuolella. Hämmennetään 25 °C:ssa 30 minuuttia, lisätään jäävettä ja orgaaninen faasi erotetaan. Vesifaasi uutetaan etyyliasetaatilla (2X), yhdiste-35 tyt orgaaniset faasit pestään 10 %:isella kloorivetyhapol- i3 94418 la, 10 %:isella kaliumhydroksidilla, vedellä ja sen jälkeen kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella. Kuivataan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 13,4 g keltaista kiinteätä ainetta. Puhdistetaan piihappogeelikroma-5 tografian (etyyliasetaatti/heksaani) (6:4)-seoksella suurentamalla polariteetti etyyliasetaatti/heksaani (4:6)— seokseksi avulla, jolloin saadaan 7,9 g (60 %) 178-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst-4-eeni-3-onia; s.p. 226 -227 eC.

10 NMR-miljoonasosia δ (CDC13) 300MHz: 5,72 (s, 1H); 5,07 (bs, 1H); 1,34 (s, 9H); 1,17 (s, 3H); 0,82 (s, 3H).

Liuotetaan 178-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst- 4-eeni-3-onia (8,5 g, 23 mmol) seokseen, jossa on tetra-hydrofuraania (100 ml) ja metanolia (100 ml). Jäähdytetään 15 0 °C:seen ja käsitellään 30 %:isella vetyperoksidilla (34 ml) ja 10 %:isella natriumhydroksidilla (10 ml). Hämmennetään 0 °C:ssa 4 tuntia, varastoidaan -4 °C:ssa 12 tuntia ja sen jälkeen hämmennetään välillä 0 - 5 °C 4 tuntia. Kaadetaan metyleenikloridin ja veden seokseen ja 20 erotetaan orgaaninen faasi. Uutetaan vesifaasi metyleeni-kloridilla, orgaaniset faasit yhdistetään ja pestään vedellä. Kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 8,7 g epäpuhtaita otsikossa mainittuja epoksideJa.

25 Vaihe b: 178-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst-4- eeni-4-metoksi-3-oni

Liuotetaan natriumhydroksidia (8 g) kuumaan metano-liin (120 ml) ja kuumennetaan palautusjäähdytysolosuh-teissa typpiatmosfäärin alaisena. Joukkoon lisätään samal-30 la hämmentäen raakaa 178-(N-t-tutyylikarboksiamidi)-and- rost-4,5-epoksi-3-onia (8,7 g) metanolissa (20 ml). Kuumennetaan 10 minuuttia palautustislausolosuhteissa, kaadetaan veteen ja uutetaan metyleenikloridiin. Orgaaninen faasi erotetaan ja kuivataan. Liuotin haihdutetaan tyhjös-35 sä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 2,0 g otsikkoyhdistettä kiinteänä i4 94418 aineena; s.p. 190 - 193 °C.

NMR-miljoonasosia 6 (CDC13) 300MHz: 5,10 (bs, 1H); 3,61 (s, 3H); 3,08 (dt, 1H, Jd=12Hz, Jt=2Hz); 1,37 (s, 9H); 1,21 (s, 3H); 0,84 (s, 3H).

5 Vaihe c: 17B-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst-4- eeni-4-metoksi-3-oli

Liuotetaan 178-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst- 4-eeni-4-metoksi-3-onia (2,0 g) absoluuttiseen etanoliin (20 ml). Käsitellään natriumboorihydridin (200 mg) kanssa 10 2 tuntia 25 °C:ssa. Lisätään vettä ja seos kaadetaan mety- leenikloridiin. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään vedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 2,1 g otsikkoyhdistettä vaahtona.

Vaihe d: 178-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst-5-15 eeni-4-oni

Liuotetaan 178-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst-4-eeni-4-metoksi-3-olia (2,1 g) seokseen, jossa on vasta-tislattua asetonitriiliä (8 ml) ja vedetöntä metyleeniklo-ridia (25 ml). Lisätään 70 %:ista perkloorihappoa (2 tip-20 paa) ja hämmennetään 25 °C:ssa. 15 minuutin kuluttua kaadetaan liuos kyllästettyyn natriumvetykarbonaattiliuokseen ja uutetaan metyleenikloridiin. Orgaaninen faasi erotetaan ja kuivataan (MgS04). Puhdistetaan piihappogeelikromatogra-fian (30 %:inen - 50 %:inen etyyliasetaatti/heksaani-seos) 25 avulla, jolloin saadaan 1,0 g steroidia. Puhdistetaan edelleen piihappogeelikromatografiän (25 %;inen etyyliasetaatti/heksaani-seos) avulla, jolloin saadaan 460 mg otsikkoyhdistettä vaahtona.

NMR-miljoonasosia δ (CDC13) 300MHz: 6,43 (dd, 1H, 30 J^öHz, J2=3Hz); 5,12 (bs, 1H); 1,36 (s, 9H); 0,96 (s, 3H); 0,82 (s, 3H).

Vaihe e: 178-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-5-eeni-3a-karboksyy1ihappo, isopropyyliesteri

Liuotetaan kaliumhydroksidia (110 mg) isopropano-35 liin (3 ml), liuos saatetaan typpiatmosfäärin alaiseksi ja 94418

Id jäähdytetään O eC:seen. Lisätään 176-(N-t-butyylikarboksi-amidi)-androst-5-eeni-4-onia (112 mg, 0,30 nunol) ja sen jälkeen jodibentseenidiatsetaattia (200 mg, 0,60 mmol). Liuosta hämmennetään 2 tuntia välilä 0 - 5 "C ja kaadetaan 5 etyyliasetaattiin. Orgaaninen faasi erotetaan, pestään vedellä ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 50 mg otsikkoyhdistettä ja sen 36-iso-meeriä, joka voidaan erottaa kromatografian avulla.

10 NMR-miljoonasosia δ (CDC13) 300MHz: 5,55 (m, 1H); 5,02 (h, 1H, J«7Hz); 3,30 (dd, 1H, J^Hz, J2=6Hz); 1,37 (s, 9H); 1,25 (d, 6H, J-7Hz); 0,95 (s, 3H); 0,82 (s, 3H).

Vaihe f: 176-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-5-eeni-3a-karboksyy1ihappo 15 Liuotetaan 176-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor- androst-5-eeni-3a-karboksyy1ihapon isopropyy1iesteriä (100 mg, 0,2 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja käsitellään trimetyylisiliyylijodidin (78 mg, 0,5 mmol) kanssa.

Sen jälkeen kun reaktio on tapahtunut täydellisesti, kaa-20 detaan reaktioseos puskuriliuokseen ja erotetaan orgaaninen faasi. Orgaaninen faasi pestään hyvin vedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan otsikkoyhdistettä.

p5 Yleinen synteettinen menetelmä kaavan (A) mukaisten » steroidijohdannaisten valmistamiseksi vaihtoehtoisesti, joissa johdannaisissa Rx on vety, sekä kaavan (D) mukaisten steroidijohdannaisten valmistamiseksi esitetään kaaviossa B. Kaaviossa B kaikki substituentit ovat sellaisia kuin 30 edellä on määritelty.

16 94418

Kaavio B

CHj Rj COOR, (A,) 10 D Hydrolyysi 2) Erotus '' CHj R2 COOH (Az) 20 Kaavan (A) mukaisia steroidijohdannaisia, joissa R: on vety, ja kaavan (D) mukaisia steroidijohdannaisia voidaan yleisesti valmistaa kaavan (Ax) mukaisen sopivan 4-nor-A5-3-karboksyylihapon esterijohdannaisen hydrolyysin avulla suorittamalla sen jälkeen saadun steroidijohdan-a25 naisten seoksen erottaminen. Edullinen emäs tällaista hyd-rolyysiä varten on sellainen, kuten litiumhydroksidi, joka pyrkii säilyttämään 3-asemassa α-karboksyylihapon sterio-orientaation. Kaavan (A) mukaiset steroidijohdannaiset, joissa Ri on vety, ja kaavan (D) mukaiset steroidijohdan-30 naiset voidaan erottaa hyvin tunnettujen ja tällä alalla arvostettujen teknillisten ratkaisujen ja menetelmien avulla, kuten suuritehoisella nestekromatografialla (HPLC).

Seuraavat esimerkit esittävät tyypillisiä kaavion B 35 avulla esitettyjä synteesejä. On selvää, että nämä esimer- J· * f l.lli lii».

17 94418 kit ovat ainoastaan keksintöä valaisevia.

Esimerkki 3 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-5-eeni-3a-karboksyylihappo ja 17B-(N,N-di-isopropyy-5 likarboksiamidi)-A-nor-androst-3-eeni-3a-karboksyylihappo

Liuotetaan 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-5-eeni-3a-karboksyylihapon metyyliesteriä (100 mg, 0,233 mmol) etanoliin (4 ml) ja käsitellään li-tiumhydroksidin (42 mg, 10 mmol) ja veden (1 ml) kanssa.

10 Liuosta hämmennetään typpiatosfäärin alaisena siksi kunnes hydrolyysi on tapahtunut täydellisesti, liuotin haihdutetaan, jäännös hapotetaan laimealla kloorivetyhapolla ja uutetaan etyyliasetaattiin. Orgaaninen faasi erotetaan, vesifaasit uutetaan etyyliasetaatilla (2X) ja yhdistetyt 15 orgaaniset faasit pestään vedellä, sen jälkeen kylläste tyllä natriumkloridiliuoksella. Kuivataan (MgS04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja erottaminen suoritetaan HPLC:n avulla, jolloin saadaan otsikkoyhdisteitä.

Esimerkki 4 20 17B-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-5- eeni-3a-karboksyylihappo ja 17B-(N-t-butyylikarboksiami- di)-A-nor-androst-3-eeni-3-karboksyylihappo

Liuotetaan 17B-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor- androst-5-eeni-3a-karboksyylihapon isopropyyliesteriä .•25 (100 mg, 0,233 mmol) etanoliin (4 ml) ja käsitellään li- • « tiumhydroksidin (42 mg, 10 mmol) ja veden (1 ml) kanssa. Liuosta hämmennetään typpiatmosfäärin alaisena siksi kunnes hydrolyysi on tapahtunut täydellisesti, liuotin haihdutetaan, jäännös hapotetaan laimealla kloorivetyhapolla 30 ja uutetaan etyyliasetaattiin. Orgaaninen faasi erotetaan, • vesifaasit uutetaan etyyliasetaatilla (2X) ja yhdistetyt orgaaniset faasit pestään vedellä ja sen jälkeen kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella. Kuivataan (MgS04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja erottaminen suoritetaan HPLC:n 35 avulla, jolloin saadaan otsikkoyhdisteitä.

18 94418

Seuraavla yhdisteitä voidaan valmistaa menetelmillä, jotka ovat esimerkeissä 1-4 esitettyjen mukaisia: 20a- (hydroksimetyyli)-A-nor-pregn-5-eeni-3a-karbok-syylihappo; 5 20a-(hydroksimetyyli )-A-nor-pregn-5, ll-dieeni-3a- karboksyylihappo; A-nor-pregn-5-eeni-20-oni-3a-karboksyylihappo; A-nor-pregn- 5,11 -dieeni-20-oni-3a-karboksyylihappo; 178-(N-tertiäärinen butyylikarboksiamidi)-A-nor-10 androst-5-eeni-3a-karboksyy1ihappo; 178-(N-tertiäärinen butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-5,ll-dieeni-3a-karboksyylihappo; 178- (N, N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-5,11-dieeni-3a-karboksyy1ihappo; 15 20a-(hydroksimetyyli)-A-nor-pregn-3-eeni-3-karbok- syylihappo; 20a- (hydroksimetyyli)-A-nor-pregn-3,ll-dieeni-3-karboksyylihappo; A-nor-pregn-3-eeni-20-oni-3-karboksyylihappo; 20 A-nor-pregn-3,ll-dieeni-20-oni-3-karboksyylihappo; 178-( N, N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-3,ll-dieeni-3-karboksyylihappo; 178-(N-tertiäärinen butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-3-eeni-3-karboksyy1ihappo; .25 178-(N-tertiäärinen butyylikarboksiamidi)-A-nor- androst-3,ll-dieeni-3-karboksyy1ihappo.

Kaaviossa C esitetään yleinen synteesimenetelmä kaavan (B) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi. Kaaviossa C ovat kaikki substituentit sellaisia kuin edellä on 30 määritelty. Lisäksi termi "0Se" tarkoittaa fenyyliselenyy-liryhmää; termi "Z" tarkoittaa joko metallin vasta-ionia tai trimetyylisilyyliradikaalia; termi "X" tarkoittaa ha-logeeniradikaalia.

Il : lil:t Sri li I t -»·» · · | 19 94418

Kaavio C

JH3 *2 CH3 R2 emäs vaihe a COORj’ (Aj) (6)-Z=me talli 20 ORr <6')-Z=Si(CH3)3 10 jHJ *2 CH, R2 vaihe^ b vaihe c 15 *Se' COORi m · 1 {7) COORj· (B,)

Kaavan (B) mukaisia steroidijohdannaisia voidaan yleisesti valmistaa 3-vaiheisessa prosessissa kaavan (A1) 20 mukaisista steroidijohdannaisista.

Kaavion C vaiheessa a käsitellään kaavion A vaiheesta e saatua sopivaa A-nor-A5-steroidi-3-karboksyyliha-pon esterijohdannaista (A^ metallin muodostaman emäksen, kuten maa-alkalimetallin muodostaman emäksen kanssa vas-'25 taavan esterienolaatin (6) saamiseksi. Esterienolaatti (6) voidaan valinnaisesti muuttaa vastaavaksi silyyliketeeni-asetaaliksi (6') käsittelemällä trimetyylisilyylikloridin kanssa tavanomaisten menetelmien ja tekniikan mukaisesti.

Vaiheessa b muutetaan esterienolaatti (6) tai si-30 lyyliketeenlasetaali (6') vastaavaksi A-nor-A5-steroidi- 3-fenyyliselenidijohdannaiseksi (7) käsittelemällä fenyy-liselenyylihalogenidin, kuten fenyyliselenyylikloridin tai fenyyliselenyylibromidin kanssa. Fenyyliselenyylibromidia pidetään näistä parempana.

35 Vaiheessa c muutetaan vastaava A-nor-A5-steroidi- 3-fenyyliselenidijohdannainen (7) sen seleenioksidiksi ja on 94418 20 sen jälkeen hydrolysoidaan, jolloin saadaan vastaava A-nor-A2,A5-steroidi-3-karboksyylihapon esterijohdannainen (Bx) käsittelemällä hapetettavan aineen, kuten vetyperoksidin tai m-kloori-peroksibentsoehapon kanssa. Suosittu ha-5 petettävä reagentti on vetyperoksidi.

Kaavan (B1) mukaiset yhdisteet voidaan muuttaa niitä vastaaviksi vapaiksi hapoiksi hydrolysoimalla siten kuin kaaviossa A, vaiheessa f ja kaaviossa B on esitetty.

Seuraava esimerkki esittää tyypillistä kaaviossa C 10 kuvattua synteesiä. Tarkoituksena on, että nämä esimerkit ovat ainoastaan asiaa valaisevia, mutta eivät ole tarkoitetut rajoittamaan keksinnön piiriä millään tavoin.

Esimerkki 5 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-15 rost-2,5-dieeni-3-karboksyylihapon metyyliesteri

Vaihe a: 17B-(N,N-di-isopropyyli-karboksiamidl)-A-nor-androst-5-eeni-3-[litio(metyyliesterienolaatti)] Hämmennettyyn liuokseen, joka sisältää 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-5-eeni-3o-kar-20 boksyylihapon metyyliesteriä (430 mg, 1,0 mmol), joka on valmistettu vastaavasta haposta ja diatsometaanista, kuivassa THF:ssä (25 ml), lisätään argon-atmosfäärin alaisena -70 °C:ssa liuos, joka sisältää litiumdi-isopropyyliamidia (1,1 mmol) THF:ssa (11 ml), 15 minuutin kuluessa. Seosta 25 hämmennetään -70 °C:ssa otsikkoyhdisteen saamiseksi.

Vaihe b: 17B-(N,N-di-isopropyyli-karboksiamidi)-A-nor-androst-5-eeni-3-fenyyliselenidi-3-karboksyylihapon metyyliesteri

Sen jälkeen kun 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiami-30 di)-A-nor-androst-5-eeni-3-litio[(metyyliesterienolaat- tin)] reaktioseosta on hämmennetty -70 °C:ssa 15 minuut-tia, lisätään siihen yhdellä kertaa liuos, joka sisältää fenyyliselenyylibromidia (260 mg, 1,1 mmol) THF:ssa (5 ml). Seoksen annetaan lämmetä 25 °C:seen tunnin kulues-35 sa ja sen jälkeen seos kaadetaan IN HC1-liuokseen. Uutetaan dikloorimetaaniin ja orgaaninen kerros kuivataan ve- 21 94418 dettömän MgS04:n avulla. Suoritetaan väkevöinti tyhjössä ja flash-kromatografia käyttäen piihappogeelipylvästä ja eluoimalla 10 %:isella etyyliasetaatin heksaanlliuoksella otsikkoyhdisteen saamiseksi.

5 Vaihtoehtoinen vaihe b: 17B-(N,N-di-isopropyyli- karboksiamidi)-A-nor-androst-5-eeni-3-fenyyliselenidi-3-karboksyylihapon metyyliesteri

Sen jälkeen kun 17B-(N,N-di-isopropyyli-karboksi-amidi)-A-nor-androst-5-eeni-3-litio[(metyyliesterienolaa-10 tin)] reaktioseosta on hämmennetty -70 °C:ssa 15 minuuttia, lisätään siihen ruiskun kautta klooritrimetyylisilaa-nia (140 μΐ, 1,1 mmol). Seoksen annetaan lämmetä 25 °C:seen 30 minuutin kuluessa ja sen jälkeen se haihdutetaan tyhjössä. Jäännös otetaan kuivaan dikloorimetaaniin 15 (25 ml), jäähdytetään 0 °C:seen ja seosta käsitellään liuoksella, joka sisältää fenyyliselenyylibromidia (260 mg, 1,1 mmol) THF:ssa (5 ml). Seoksen annetaan lämmetä 25 °C:seen yhden tunnin kuluessa ja sen jälkeen seos kaadetaan IN HC1-liuokseen. Uutetaan dikloorimetaaniin ja 20 orgaaninen kerros kuivataan vedettömän MgS04:n avulla. Tämän jälkeen suoritetaan väkevöinti tyhjössä ja flash-kromatografia käyttäen piihappogeelipylvästä ja eluoimalla 10 %:isella etyyliasetaatin heksaanlliuoksella otsikkoyhdisteen saamiseksi.

$5 Vaihe c: 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A- nor-androst-2,5-dieeni-3-karboksyylihapon metyyliesteri 17B- (N, N-di-isopropyyli-karboksiamidi) -A-nor-and-rost-5-eeni-3-fenyyliselenidi-3-karboksyylihapon metyyli-esteri liuotetaan kuivaan THF:ln (20 ml) ja liuosta käsi-30 tellään vetyperoksidin kanssa lisäten tätä pienissä annoksissa siksi kunnes selenidejä ei ole enää lainkaan jäljellä TLC-analyysin mukaan. Liuosta lämmitetään samalla hämmentäen siksi kunnes selenidioksidia ei ole lainkaan jäljellä TLC-analyysin mukaan. Suoritetaan väkevöinti tyhjös-35 sä ja flash-kromatografia käyttäen piihappogeelipylvästä 22 94418 ja eluoimalla 10 %:isella etyyliasetaatin heksaaniliuok-sella otsikkoyhdisteen saamiseksi.

Esimerkki 6 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-5 rost-2,5-dieeni-3-karboksyylihappo

Menetelmä 1

Liuotetaan 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-2,5-dieeni-3-karboksyylihapon metyylieste-riä (100 mg, 0,233 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja 10 liuosta käsitellään trimetyylisiliyylijodidin (78 mg, 0,5 mmol) kanssa. Sen jälkeen kun reaktio on tapahtunut täydellisesti, kaadetaan reaktioseos puskuriliuokseen ja orgaaninen faasi erotetaan. Orgaaninen faasi pestään hyvin vedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyh-15 jössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan otsikkoyhdistettä.

Menetelmä 2

Liuotetaan 17B-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-2,5-dieeni-3-karboksyylihapon metyylieste-20 riä (100 mg, 0,223 mmol) etanoliin (4 ml) ja liuosta käsi tellään litiumhydroksidin (42 mg, 10 mmol) ja veden (1 ml) kanssa. Seosta hämmennetään typpiatmosfäärin alaisena siksi kunnes hydrolyysi on tapahtunut täydellisesti, liuotin haihdutetaan, jäännös hapetetaan laimealla kloorivetyha-25 polla ja uutetaan etyyliasetaattiin. Orgaaninen faasi ero tetaan, vesifaasit uutetaan etyyliasetaatilla (2X) ja yhdistetyt orgaaniset faasit pestään vedellä, sen jälkeen kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella. Kuivataan (MgS04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan pii-30 happogeelikromatografian avulla otsikkoyhdisteen saamisek si.

23 · 94418

Esimerkki 7 170- (N-t-butyylikarboksiamidi) -A-nor-androst-2,5-dieeni-3-karboksyy1ihapon isopropyyliesteri

Vaihe a: 170-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor-and-5 rost-5-eeni-3-[litio(isopropyyliesterienolaatti)] Hämmennettyyn liuokseen, joka sisältää 170-(N-t-butyylikarboksiamidi ) -A-nor-androst-5-eeni-3a-karboksyyli-hapon isopropyyliesteriä (esimerkki 2, vaihe e) (430 mg, 1,0 mmol) kuivassa THF:ssa (25 ml), liuoksen ollessa 10 argon-atmosfäärin alaisena -70 eC:ssa siihen lisätään 15 minuutin kuluessa liuos, joka sisältää litiumdi-isopro-pyyliamidia (1,1 mmol) THF:ssa (11 ml). Seosta hämmennetään -70 °C:ssa otsikkoyhdisteen saamiseksi.

Vaihe b: 170-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor-and-15 rost-5-eeni-3-fenyyliselenidi-3-karboksyylihapon isopro pyyliesteri

Sen jälkeen kun 170-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-5-eeni-3-[litio(isopropyyliesterienolaattia)] on hämmennetty -70 °C:ssa 15 minuuttia, lisätään siihen 20 yhdellä kertaa liuos, joka sisältää fenyyliselenyylibromi-dia (260 mg, 1,1 mmol) THF:ssa (5 ml). Seoksen annetaan lämmetä 25 °C:seen yhden tunnin kuluessa ja sen jälkeen seos kaadetaan IN HC1-liuokseen. Seos uutetaan dikloorime-tääniin ja orgaaninen kerros kuivataan vedettömän MgS04:n 25 avulla. Suoritetaan haihdutus tyhjössä ja flash-kromato- grafia käyttäen piihappogeelipylvästä ja eluoimalla 10 %:isella etyyliasetaatin heksaaniliuoksella otsikkoyhdisteen saamiseksi.

Vaihtoehtoinen vaihe b: 170-(N-t-butyylikarboksi-30 amidi) -A-nor-androst-5-eeni-3-fenyyliselenidi-3-karboksyy- 1ihapon isopropyyliesteri

Sen jälkeen kun 170-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-5-eeni-3-[litio(isopropyyliesterienolaattia)] on hämmennetty -70 °C:ssa 15 minuuttia, lisätään siihen 35 ruiskun kautta klooritrimetyylisilaania (140 μΐ, „ 54418 1,1 mmol). Seoksen annetaan lämmetä 25 °C:seen 30 minuutin kuluessa ja sen jälkeen se konsentroidaan tyhjössä. Jäännös otetaan kuivaan dikloorimetääniin (25 ml), jäähdytetään 0 °C:seen ja seosta käsitellään liuoksella, joka si-5 sältää fenyyliselenyylibromidia (260 mg, 1,1 mmol) THF:ssa (5 ml). Seoksen annetaan lämmetä 25 °C:seen yhden tunnin kuluessa ja sen jälkeen seos kaadetaan IN HC1-liuokseen.

Uuttaminen suoritetaan dikloorimetaaniin ja orgaaninen kerros kuivataan vedettömän MgS04:n avulla. Suoritetaan 10 konsentrointi tyhjössä ja flash-kromatografia käyttäen piihappogeelipylvästä ja eluoimalla 10 %:isella etyyliasetaatin heksaaniliuoksella otsikkoyhdisteen saamiseksi.

Vaihe c: 178-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-2,5-dieeni-3-karboksyylihapon isopropyyliesteri 15 Liuotetaan 178-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor- androst-5-eeni-3-fenyyliselenidi-3-karboksyylihapon iso-propyyliesteri kuivaan THF:in (20 ml) ja liuosta käsitellään pienin lisäyksin lisätyn vetyperoksidin kanssa siksi kunnes selenidejä ei ole lainkaan jäljellä TLC-analyysin 20 mukaan. Liuosta lämmitetään samalla hämmentäen siksi kunnes seleenioksidia ei ole enää lainkaan jäljellä TLC-analyysin mukaan. Suoritetaan konsentrointi tyhjössä ja flash-kromatografia käyttäen piihappogeelipylvästä ja eluoimalla 20 %:isella etyyliasetaatin heksaaniliuoksella «25 otsikkoyhdisteen saamiseksi.

Esimerkki 8 178- (N-t-butyylikarboksiamidi) -A-nor-androst-2,5-dieeni-3-karboksyy1ihappo

Menetelmä 1 30 Liuotetaan 17S-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor- androst-2, 5-dieeni-3-karboksyylihapon isopropyyliesteriä i (100 mg, 0,233 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja liuosta käsitellään trimetyylisiliyylijodidin (78 mg, 0,5 mmol) kanssa. Sen jälkeen kun reaktio on tapahtunut loppuun 35 asti, kaadetaan reaktioseos puskuriliuokseen ja orgaaninen 25 94418 faasi erotetaan. Orgaaninen faasi pestään hyvin vedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatograf iän avulla otsikkoyh-disteen saamiseksi.

5 Menetelmä 2

Liuotetaan 178-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor- androst-2,5-dieeni-3-karboksyylihapon isopropyyliesteriä (100 mg, 0,2 mmol) etanoliin (4 ml) ja liuosta käsitellään litiumhydroksidin (42 mg, 10 mmol) ja veden (1 mmol) kansio sa. Seosta hämmennetään typpiatmosfäärin alaisena siksi kunnes hydrolyysi on tapahtunut loppuun asti, liuotin haihdutetaan, jäännös hapotetaan laimealla kloorivetyha-polla ja uuttaminen suoritetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi erotetaan, vesifaasit uutetaan etyyliasetaa-15 tiliä (2X) ja yhdistetyt orgaaniset faasit pestään vedellä, sen jälkeen kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella. Kuivataan (MgS04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla otsikkoyh-disteen saamiseksi.

20 Seuraavia yhdisteitä voidaan valmistaa esimerkeissä 5-8 kuvattujen menetelmien mukaisesti: 20a-(hydroksimetyyli)-A-nor-pregn-2,5-dieeni-3a-karboksyylihappo; 20a- (hydroksimetyyli) -A-nor-pregn-2,5-11 -trieeni-25 3-karboksyylihappo; A-nor-pregn-2,5-dieeni-20-oni-3-karboksyylihappo; A-nor-pregn-2,5, ll-trieeni-20-oni-3-karboksyylihap- po; 178-(N-tertiäärinen butyylikarboksiamidi)-A-nor-30 androst-2,5,ll-trieeni-3-karboksyylihappo; . 178- (N, N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and- rost-2,5,ll-trieeni-3-karboksyylihappo.

Yleinen synteesimenetelmä kaavan (C) mukaisten steroidi johdannaisten valmistamiseksi esitetään kaaviossa D.

35 Kaaviossa D ovat kaikki substituentit sellaisia kuin edellä on määritelty.

26 9 4 4 1 8

Kaavio D

P ”2 CH3 R2 vaihe a ^ f / \\ COORi (Ai) COORi βΓ ®r (8) 10 vaihe b ^OOR, (c,) 15

Kaavan (C) mukaisia steroidijohdannaisia voidaan yleisesti valmistaa kaavan (Ax) mukaisesta steroidijohdannaisesta 2-vaiheisessa prosessissa.

Vaiheessa a voidaan kaavan (A1) mukaisen sopivan 20 A-nor-A5-steroidi-3-karboksyylihapon esterijohdannaisen olefiinifunktionaliteetti muuttaa rakenteen (8) mukaiseksi vastaavaksi dibromisteroidijohdannaiseksi. Esimerkiksi kaavan (Ax) mukainen A-nor-Δ5-steroidi-3-karboksyylihapon esterijohdannainen pyridiniumbromidiperbromidin avulla *25 sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten metyleeniklo- * ♦ ridissa.

Vaiheessa b muutetaan rakenteen (8) mukainen dibro-misteroidijohdannainen kaavan (C3) mukaiseksi vastaavaksi dieenisteroidijohdannaiseksi. Esimerkiksi rakenteen (8) 30 mukainen sopiva dibromi steroidi johdannainen voidaan dehyd-rohalogenoida sopivan ei-nukleofiilisen emäksen, kuten 1,8-diatsabisyklo[5.4.0]undekeeni-7:n (DBU) avulla.

Kaavan (C3) mukaiset yhdisteet voidaan luonnollisestikin muuttaa niitä vastaaviksi vapaiksi hapoiksi hydro-35 lyysin avulla, kuten on esitetty kaaviossa A, vaiheessa f, tai siten kuin on esitetty kaaviossa B.

27 94418

Seuraavat esimerkit kuvaavat tyypillisiä synteesejä siten kuin kaaviossa D on esitetty. On selvää, että nämä esimerkit ovat tarkoitetut ainoastaan keksintöä valaiseviksi .

5 Esimerkki 9 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-3,6-dieeni-3-karboksyylihapon metyyliesteri

Vaihe a ja vaihe b:

Liuotetaan 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-10 A-nor-androst-5-eeni-3a-karboksyylihapon metyyliesteriä (50 mg, 0,11 mmol) metyleenikloridiin (2 ml) ja liuosta käsitellään pyridiniumbromidiperbromidin (35 mg, 0,11 mmol) kanssa. Seosta hämmennetään huoneen lämpötilassa 1,2 tuntia. Lisätään DBU (0,5 ml) ja kuumennetaan 15 50 °C:ssa 2 tuntia. Seos jäähdytetään ja kaadetaan laimean kloorivetyhapon ja metyleenikloridin seokseen. Orgaaninen faasi erotetaan, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 35 mg otsikkoyhdistettä.

Esimerkki 10 20 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and- rost-3,6-dieeni-3-karboksyylihappo

Menetelmä 1

Liuotetaan 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)- A-nor-androst-3,6-dieeni-3-karboksyylihaponmetyyliesteriä 25 (100 mg, 0,223 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja käsitel- • · · **' lään trimetyylisiliyylijodidin (78 mg, 0,5 mmol) kanssa.

Sen jälkeen kun reaktio on päättynyt, kaadetaan reaktio-seos puskuriliuokseen ja orgaaninen faasi erotetaan. Orgaaninen faasi pestään hyvin vedellä, kuivataan (MgS04) ja 30 liuotin haihdutetaan tyhjössä. Aine puhdistetaan piihappo-geelikromatografian avulla otsikkoyhdisteen saamiseksi.

Menetelmä 2

Liuotetaan 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-3,6-dieeni-3-karboksyylihaponmetyyliesteriä 35 (35 mg) metanoliin (5 ml) ja liuosta käsitellään IN li- 28 - 9 4 4 1 8 tiumhydroksidin (0,5 ml) ja kiinteän litiumhydroksidin (50 mg) kanssa. Seosta hämmennetään typpiatmosfäärin alaisena 12 tuntia. Laimennetaan vedellä, suodatetaan Celite’n läpi ja hapotetaan etikkahapolla (0,5 ml). Suodatetaan, 5 emäliuokset hapotetaan laimealla kloorivetyhapolla ja uutetaan etyyliasetaattiin. Orgaaninen faasi erotetaan, vesifaasit uutetaan etyyliasetaatilla ja yhdistetyt orgaaniset faasit pestään vedellä, sen jälkeen kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella. Kuivataan (MgS04), liuotin haih-10 dutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeeli-kromatograflan avulla otsikkoyhdisteen saamiseksi.

NMR-miljoonasosia 6 (CDC13) 300MHz: 7,06 (dd, 1H, J1»10Hz, J2=3Hz), 6,07 (bd, Jd=10Hz); 4,21 (h, 1H, J«7Hz); 3,41 (h, 1H, J=7Hz); 1,43 (d, 3H, J=7Hz); 1,39 (d, 3H, 15 J-7Hz); 1,23 (d, 3H, J=7Hz); 1,16 (d, 3H, J-7Hz); 0,97 (s, 3H); 0,86 (s, 3H).

Esimerkki 11 17B- (N-t-butyylikarboksiamidi) -A-nor-androst-3,6-dieeni-3-karboksyylihapon isopropyyliesteri 20 Vaihe a ja vaihe b:

Liuotetaan 178-(N-t-butyyli-karboksiamidi)-A-nor-androst-3, 6-dieeni-3-karboksyylihapon isopropyyliesteriä (50 mg, 0,11 mmol) metyleenikloridiin (2 ml) ja liuosta käsitellään pyridiniumbromidiperbromidin (35 mg, 25 0,11 mmol) kanssa. Seosta hämmennetään huoneen lämpötilas sa 2 tuntia. Liuokseen lisätään DBU (2 ml) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jäännös kuumennetaan 50 °C:seen kahden tunnin ajaksi, kaadetaan laimeaan kloorivetyhappoon ja uutetaan metyleenikloridiin. Orgaaninen faasi erote-30 taan, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä.

Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 35 mg otsikkoyhdistettä.

NMR-miljoonasosia 6 (CDC13) 300MHz: 7,03 (dd, 1H, J^lOHz, J2«3Hz), 5,99 (bd, 1H, Jd-10Hz); 5,11 (bs, 1H); 35 5,08 (h, 1H, J=7Hz), 1,36 (s, 9H); 1,28 (d, 3H, J«7Hz); 1,26 (d, 3H, J=7Hz); 0,94 (s, 3H); 0,86 (s, 3H).

29 · 94418

Esimerkki 12 176- (N-t-butyylikarboksiamidi) -A-nor-androst-3,6-dieeni-3-karboksyylihappo

Menetelmä 1 5 Liuotetaan 176-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor- androst-3, 6-dieeni-3-karboksyylihapon isopropyyliesteriä (100 mg, 0,2 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja liuosta käsitellään trimetyylisilyylijodidin (78 mg, 0,5 mmol) kanssa. Sen jälkeen kun reaktio on päättynyt, kaadetaan 10 reaktioseos puskuriliuokseen ja orgaaninen faasi erotetaan. Orgaaninen faasi pestään hyvin vedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografiän avulla otsikkoyhdisteen saamiseksi.

15 Menetelmä 2

Liuotetaan 176-(N-t-butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-3, 6-dieeni-3a-karboksyylihapon isopropyyliesteriä (35 mg) metanoliin (5 ml) ja liuosta käsitellään IN li-tiumhydroksidin (0,5 ml) ja kiinteän litiumhydroksidin 20 (30 mg) kanssa. Seosta kuumennetaan palautusjäähdytysolo- suhteissa typpiatmosfäärin alaisena 4 tuntia, kaadetaan laimeaan kloorivetyhappoon ja uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi erotetaan, vesifaasit uutetaan etyyliasetaatilla ja yhdistetyt orgaaniset faasit pestään vedellä, £5 sen jälkeen kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella. Kuiva- «· · taan (MgS04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatograf iällä (25 %:inen etyyli-asetaatti/heksaani-seos) otsikkoyhdisteen saamiseksi.

NMR-miljoonasosia 6 (CDC13) 300MHz: 7,06 (dd, 1H, 30 Ji-lOHz, J2=3Hz), 6,05 (bd, 1H, Jd=10Hz); 5,11 (bs, 1H); 1,37 (s, 9H); 0,95 (s, 3H); 0,86 (s, 3H).

Seuraavia yhdisteitä voidaan valmistaa esimerkeissä 9-12 esitettyjen menetelmien mukaisesti: 20a- (hydroksimetyyli) -A-nor-pregn-3,6-dieeni-3-kar-35 boksyylihappo; 30 94418 20α-(hydroksimetyyli)-A-nor-pregn-3,6,11-trieeni- 3-karboksyylihappo; A-nor-pregn-3,6-dieeni-20-oni-3-karboksyylihappo; A-nor-pregn-3,6, ll-trieeni-20-oni-3-karboksyylihap- 5 po; 176-(N-tertiäärinen butyyllkarbokslamldl)-A-nor-androst-3,6,ll-trieeni-3-karboksyylihappo; 176-(N, N-di-lsopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-3,6-11-trleeni-3-karboksyyllhappo; 10 Esillä olevan keksinnön mukaisesti saatavia yhdis teitä voidaan käyttää potilaan hoitamiseen, jota vaivaa DHT:n välittämä sairaus tai sairaustila, jolloin mainitulle potilaalle annetaan tehokas 5-a-reduktaasia ehkäisevä määrä kaavan (A), (B), (C) tai (D) mukaista yhdistettä.

15 Tässä käytetty termi "potilas" tarkoittaa lämminve ristä eläintä kuten ihmistä, joka on DHT:n välittämän sairauden tai sairaustilan vaivaama. DHT:n välittämät sairaudet tai sairaustilat ovat sairauksia tai sairaustiloja, joihin liittyy suurentunut miespuolisen hormonin aktivi-20 teetti, joka johtuu DHT:n liiallisesta muodostumisesta.

DHT:n välittämiä sairauksia tai sairaustiloja ovat esimerkiksi märkänäppylä, acne vulgaris, hyvänlaatuinen eturauhasen liikakasvu, miespuolisen hormonin aiheuttama kalju-päisyys (tavallinen hiustenlähtö, jonka aiheuttaa miespuo-25 linen hormoni geneettisesti herkissä miehissä ja naisissa), talirauhasten liian vilkas toiminta ja liikakarvai-suus naisilla.

Steroidi-5-a-reduktaasin ehkäiseminen potilaassa, jota vaivaa DHT:n välittämä sairaus tai sairaustila, ai-30 kaansaa sairauden tai sairaustilan ilmenemismuotojen lie-. vityksen tai kontrollin pienentämällä DHT:n määrää kudok sessa, johon sairaus on kohdistunut. Tässä käytetty termi "sairauden tai sairaustilan ilmenemismuotojen lievitys tai kontrolli" tarkoittaa sairauden oireiden hidastumista, 35 keskeytymistä, ehkäistymistä tai loppumista mutta ei vält- 31 94418 tämättä osoita sairauden täydellistä eliminoitumista. Kudos , johon sairaus kohdistuu, on sellainen kudos, jossa DHT-määrät ovat kohonneet liiallisesti, niin että tuloksena on DHT:n välittämä sairaus tai sairaustila.

5 Esimerkiksi märkänäppylässä ovat ihokudoksen DHT- määrät kohonneet. Märkänäppylän oireita ovat ihottumat ja ihovauriot. Ihon 5-a-reduktaasln ehkäiseminen pienentää DHT:n määriä ja kontrolloi näitä märkänäppylän oireita. Hyvänlaatuisessa eturauhasen hypertro£iassa ovat DHT-mää-10 rät eturauhasessa suurentuneet. Eturauhasen hyvänlaatuisen hypertrofian ilmenemismuotoja ovat eturauhasen kasvu. Eturauhasen 5-a-reduktaasin ehkäiseminen pienentää DHT-määriä ja estää eturauhasen suurentumisen.

On luonnollisestikin ymmärrettävä, että potilaita 15 voidaan hoitaa näiden DHT:n välittämien sairauksien tai sairaustilojen osalta joko terapeuttisesti tai ennakolta ehkäisevästi. Taudin määritykseen perehtyneet henkilöt pystyvät helposti toteamaan ne potilaat, jotka ovat DHT:n välittämän sairauden tai sairaustilan vaivaamia.

20 Tehokas 5-a-reduktaasia ehkäisevä määrä kaavan (A), (B), (C) tai (D) mukaista yhdistettä tarkoittaa sitä yhdisteen määrää, joka on tehokas, potilaalle yhtenä tai useina annoksina annettuna, estämään 5-a-reduktaasia eli vähentämään DHT siinä kudoksessa, jossa on todettu DHT:n :.j25 välittämä sairaus tai sairaustila. Esimerkiksi kysymyksen ollessa märkänäppylästä, tehokas 5-a-reduktaasia ehkäisevä määrä kaavan (A), (B), (C) tai (D) mukaista yhdistettä tarkoittaa sellaista yhdisteen määrää, joka on tehokas ehkäisemään 5-a-reduktaasin aktiviteettia ihossa eli pie-30 nentämään DHT-määriä ihossa. Eturauhasen liikakasvussa tarkoittaa tehokas 5-a-reduktaasia ehkäisevä määrä kaavan (A), (B), (C) tai (D) mukaista yhdistettä sellaista yhdisteen määrää, joka on tehokas ehkäisemään 5-a-reduktaasin aktiviteettia eturauhasessa eli vähentämään DHT-määriä 3 5 eturauhasessa.

32 94418

Terapeuttisesti tehokkaan määrän kaavan (A), (B), (C) tai (D) mukaista yhdistettä arvellaan vaihtelevan noin 0,1 mgrsta kg kohti kehon painoa päivässä (mg/kg/päivä) arvoon noin 400 mg/kg/päivä. Edullisten määrien arvellaan 5 vaihtelevan välillä noin 0,1 - noin 200 mg/kg/päivä.

Edellä kuvatun sairaustilan vaivaaman potilaan tehokkaassa hoidossa voidaan antaa kaavan (A), (B), (C) tai (D) mukaista yhdistettä missä tahansa muodossa tai tavalla, joka aikaansaa sen, että yhdiste on elimistön käytet- 10 tävissä tehokkaissa määrissä, joita antotapoja ovat oraalinen ja parenteraalinen lääkkeenantotapa. Kaavan (A), (B), (C) tai (D) mukaisia yhdisteitä voidaan antaa esimerkiksi oraalisesti, subkutaanisesti, intramuskulaarisesti, intravenöösisesti, transdermaalisesti, intranasaalisesti, 15 rektaalisesti ja näiden kaltaisilla tavoilla. Oraalista ja transdermaalista lääkkeenantoa suositellaan yleensä. Valmisteiden valmistukseen perehtynyt henkilö voi helposti valita sopiva antomuodon ja -tavan riippuen valitun yhdisteen erityisistä ominaisuuksista, käsiteltävästä sairaus-20 tilasta, sairauden vaiheesta ja muista relevanteista seikoista.

Yhdisteitä voidaan antaa sellaisinaan tai farmaseuttisen koostumuksen muodossa yhdistelmänä farmaseuttisesti hyväksyttävien kantaja-aineiden tai eksipienttien ;25 kanssa, joiden määräsuhteen ja luonteen määräävät valitun « ♦ yhdisteen liukoisuus ja kemialliset ominaisuudet, lääkkeenantotapa ja farmaseuttinen standardikäytäntö. Vaikka keksinnön mukaisesti saatavat yhdisteet ovat sellaisinaan tehokkaita, voidaan ne formuloida ja antaa niiden farma-30 seuttisesti hyväksyttävien suolojen muodossa tarkoituksel-la vaikuttaa stabiliteettiin, kiteytymisen helppouteen, suurentuneeseen liukoisuuteen ja näiden kaltaisiin seikkoihin.

Keksinnön mukaisesti saatavista yhdisteistä voidaan 35 valmistaa koostumuksia, jotka sisältävät kaavan (A), (B), 33 94418 (C) tai (D) mukaista yhdistettä seoksena tai muulla tavoin liitettynä yhden tai useamman inertisen kantaja-aineen kanssa. Nämä koostumukset ovat käyttökelpoisia esimerkiksi koestandardeina, sopivina keinoina irtotavaratoimitusten 5 valmistamiseksi tai farmaseuttisina koostumuksina. Analysoitava määrä kaavan (A), (B), (C) tai (D) yhdistettä, on se määrä, joka on helposti mitattavissa standardikoemene-telmillä tai tekniikalla, kuten alan ammattimiehet ovat hyvin asiasta selvillä. Analysoitavat määrät kaavan (A), 10 (B), (C) tai (D) mukaista yhdistettä vaihtelevat yleensä välillä noin 0,001 paino-% - noin 75 paino-% koostumuksesta. Inertit kantaja-aineet voivat olla mitä tahansa ainetta, joka ei aiheuta degradoitumista tai muutoin kovalent-tisesti reagoi kaavan (A), (B), (C) tai (D) mukaisen yh-15 disteen kanssa. Esimerkkejä sopivista inerteistä kantaja-aineista ovat vesi; puskuriaineiden vesiliuokset, kuten sellaiset, jotka ovat yleisesti käyttökelpoisia suuritehoisessa nestekromatografia (HPLC) -analyysissä; orgaaniset liuottimet, kuten asetönitriili, etyyliasetaatti, hek-20 saani ja näiden kaltaiset; sekä farmaseuttisesti hyväksyttävät kantaja-aineet tai eksipientit.

Erityisiä farmaseuttisia koostumuksia ovat sellaiset koostumukset, jotka sisältävät terapeuttisesti tehokkaan määrän kaavan (A), (B), (C) tai (D) mukaista yhdis-; 25 tettä seoksena tai muutoin liitettynä yhden tai useamman, farmaseuttisesti hyväksyttävän kantaja-aineen tai eksi-pientin kanssa.

Farmaseuttisia koostumuksia valmistetaan farmasian alalla hyvin tunnettuun tapaan. Kantaja-aine tai apuaine 30 voi olla kiinteätä, puolikiinteätä tai nestemäistä ainetta, joka voi toimia kantaja-aineena tai väliaineena aktiiviselle aineosalle. Sopivat kantaja-aineet tai apuaineet ovat tällä alalla hyvin tunnettuja. Farmaseuttinen koostumus voidaan sovelluttaa oraaliseen tai parenteraali-35 seen käyttöön ja voidaan antaa potilaalle tablettien, kap- 34 94418 selien, paikallisesti käytettyjen kermojen tai geelien, suppositorioiden, liuoksen, suspensioiden tai näiden kaltaisten muodossa.

Keksinnön mukaisesti saatavia yhdisteitä voidaan 5 antaa oraalisesti, esimerkiksi inertin laimennusaineen tai syötävän kantaja-aineen kanssa. Ne voidaan kapseloida ge-latiinikapseleihin tai puristaa tableteiksi. Oraalista antamista varten voidaan yhdisteet sisällyttää apuaineisiin ja käyttää tablettien, lääkenappien, kapselien, 10 eliksiirien, suspensioiden, siirappien, öylättien, purukumien ja näiden kaltaisten muodossa. Näiden valmisteiden tulee sisältää vähintään noin 4 % keksinnön mukaisesti saatavaa yhdistettä aktiivisena aineosana, mutta määrä voi vaihdella riippuen kyseisestä muodosta ja se voi sopivasti 15 olla välillä 4 paino-% - 70 paino-% yksiköstä. Koostumuksissa olevan yhdisteen määrä on sellainen, että saadaan sopiva annostus. Edullisia koostumuksia ja valmisteita valmistetaan niin, että oraalinen annostusyksikkömuoto sisältää 0,1 - 300 mg keksinnön mukaisesti saatavaa yhdis-20 tettä.

Tabletit, pillerit, kapselit, lääkenapit ja näiden kaltaiset voivat sisältää myös yhtä tai useampaa muuta apuainetta: sideaineita, kuten mikrokiteistä selluloosaa, traganttikumia tai gelatiinia; apuaineita, kuten tärkke- 25 lystä tai laktoosia, hajottavia aineita, kuten algiini- ·' happoa, Primogel'iä, maissitärkkelystä ja näiden kaitai-. » siä; voiteluaineita, kuten magnesiumstearaattia tai Stero-tex’iä; liukuaineita, kuten kolloidista piidioksidia; ja makeutusaineita, kuten sakkaroosia tai sakkariinia voidaan 30 lisätä tai mausteita, kuten piparminttua, metyylisalisy-laattia tai applesiinimaustetta. Jos annostusyksikkömuoto *. on kapseli, se voi sisältää edellä mainitun tyyppisten aineiden lisäksi nestemäistä kantaja-ainetta, kuten poly-etyleeniglykolia tai rasvaöljyä. Muut annostusyksikkömuo-35 dot voivat sisältää muita erilaisia aineita, jotka muutta- 35 94418 vat annostusyksikön fysikaalista muotoa, esimerkiksi päällysteinä. Tällöin voidaan tabletit tai pillerit päällystää sokerilla, sellakalla tai muilla enteerisillä päällystys-aineilla. Siirappi saattaa sisältää kyseisten yhdisteiden 5 lisäksi sakkaroosia makeutusaineena ja määrättyjä säilöntäaineita, väriaineita ja väriä antavia aineita ja mausteita. Näiden erilaisten koostumusten valmistuksessa käytettyjen aineiden tulee olla farmaseuttisesti puhtaita ja ei-myrkyllisiä käytetyissä määrissä.

10 Lääkkeen parenteraalista antamista varten voidaan keksinnön mukaisesti saatavia yhdisteitä sisällyttää liuokseen tai suspensioon. Näiden valmisteiden tulee sisältää vähintään 0,1 paino-% keksinnön mukaisesti saatavaa yhdistettä, mutta määrä voi vaihdella välillä 0,1 - noin 15 50 paino-%. Tällaisissa koostumuksissa olevan keksinnön mukaisesti saatavan yhdisteen määrä on sellainen, että saadaan sopiva annostus. Edullisia koostumuksia ja valmisteita valmistetaan niin, että parenteraalinen annostusyk-sikkö sisältää 0,5 - 100 mg keksinnön mukaisesti saatavaa 20 yhdistettä.

Liuokset tai suspensiot voivat sisältää myös yhtä tai useampaa seuraavista apuaineista: steriilejä laimen-nusaineita, kuten vettä injektiota varten, ruokasuola-liuosta, rasvaöljyjä, polyetyleeniglykoleja, glyserolia, ?5 propyleeniglykolia tai muita synteettisiä liuottimia; an- »· i **' tibakteriaalisia aineita, kuten bentsyylialkoholia tai metyyliparabeenia; hapetuksenestoaineita, kuten askorbii-nihappoa tai natriumbisulfiittia; kelatoivia aineita, kuten etyleenidiamiinitetraetikkahappoa; puskuriaineita, 30 kuten asetaatteja, sitraatteja tai fosfaatteja sekä aineita tönisiteetin säätämiseksi, kuten natriumkloridia tai dekstroosia. Parenteraaliset valmisteet voidaan sulkea ampulleihin, kertakäyttöruiskuihin tai useita annoksia sisältäviin pulloihin, jotka on valmistettu lasista tai 35 muovista.

36 94418

Mitä tulee johonkin ryhmään rakenteellisesti näiden kaltaisia yhdisteitä, joilla on erityistä yleistä käyttöä, joitakin ryhmiä ja konfiguraatioita pidetään edullisina kaavan (A), (B), (C) tai (D) mukaisille yhdisteille niiden 5 lopullisessa käyttösovellutuksessa.

Edullisia keksinnön mukaisesti saatavia yhdisteitä ovat ne, joissa Rx on vety. Edullisia ovat myös ne keksinnön mukaisesti saatavat yhdisteet, joissa R2 on l-(hydrok-simetyyli)etyyli, N,N-di-isopropyylikarboksiamidi, N-tert- 10 butyylikarboksiamidi ja 1-oksoetyyli.

• < • »

Claims

37 94418
1. Menetelmä uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten A-nor-steroidi-3-karboksyylihappojohdannaisten valmis-5 tamiseksi, joilla on kaava (A), (B) (C) tai (D) ^ 3 CH3 R2 COOR, ' '7(A)
15 CH3 /R2 CHa R2 20 COORi ' C00H (D) jolloin katkoviiva merkitsee valinnaista kaksoissidosta; Rj on vety tai C1-C5-alkyyli; ja :,i25 R2 on Cx-C6-alkanoli; Cx-C6-alkanon±; CON(R3)(R4), a« jossa R3 ja R4 ovat kumpikin riippumattomasti vety, C1-C5-alkyyli tai -(CH2)Jt-Ar-(M)r, jossa x on 0, 1 tai 2, Ar on fenyyli, y on 0, 1 tai 2 ja M on C1-C6-alkoksi, halogeeni, Cj-Ce-alkyyli tai -S(0),R5, jossa Rg on Cj-Ce-alkyyli ja z on 20 0, 1 tai 2; tunnettu siitä, että A) yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava (A) 38 9 4 4 1 8 / (A) COORi jossa katkoviiva R2 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, 10 (a) saatetaan yhdiste, jolla on kaava (5) CH3 R2 jossa katkoviiva Ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, rea-20 goimaan reagenssin kanssa, jossa on hypervalenttista jodia, kun läsnä on sopivaa kaavan R1.-0H mukaista alkoholia, jossa Rj. on C^-Cg-alkyyli, ja (b) saatetaan näin saatu tuote mahdollisesti reagoimaan trimetyylisilyylijodidin kanssa aproottisessa ~25 liuottimessa karboksyylihappojohdannaisen saamiseksi, • · · B) yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava (B) CH3 R2
35 COORi (B) Il >»;» M6 |;M· ' > I 39 94418 jossa katkoviiva Rx ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, (a) saatetaan yhdiste, jolla on kaava (7) CH3 R2 jossa katkoviiva, R2 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, reagoimaan hapettavan aineen kanssa ja 15 (b) saatetaan näin saatu tuote mahdollisesti rea goimaan trimetyylisilyylijodidin kanssa aproottisessa liuottimessa karboksyylihappojohdannaisen saamiseksi, C) yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava (C) COORi jossa katkoviiva, R2 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, ja 30 (a) saatetaan yhdiste, jolla on kaava (8) CH3 COORi B'“r (8) 35 40 94418 jossa katkoviiva, R2 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, reagoimaan ei-nukleofiilisen emäksen kanssa, ja (b) saatetaan näin saatu tuote mahdollisesti reagoimaan trimetyylisilyylijodidin kanssa aproottisessa 5 liuottimessa karboksyylihappojohdannaisen saamiseksi tai D) yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava (D) CH3 R2 io ch3k COOH (D) 15 jossa katkoviiva ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, (a) saatetaan yhdiste, jolla on kaava (A2) 20 ·· / COOR, (Ai) jossa katkoviiva, R2 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, reagoimaan litiumhydroksidin kanssa ja 30 (b) erotetaan toivottu tuote. * 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n- • •t . n e t t u siitä, että valmistetaan 176-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-5-eeni-3a-karboksyylihappo, 35 176- (N, N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and- rost-3,6-dieeni-3-karboksyy1ihappo, 41 94418 17B- (N, N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-ros t-2,5-dieeni-3-karboksyy1ihappo, 176- (N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-A-nor-and-rost-3-eeni-3-karboksyy1ihappo, 5 176-(N-tert-butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-5- eeni-3a-karboksyylihappo, 176- (N-tert-butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst- 3,6-dieeni-3-karboksyylihappo, 176- (N-tert-butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-10 2,5-dieeni-3-karboksyylihappo tai 176-(N-tert-butyylikarboksiamidi)-A-nor-androst-3-eeni-3-karboksyylihappo. • · 94418 42