FI88039B - Foerfarande foer framstaellning av 2,3-dihydro-1-(8-metyl-1,2,4-triatsolo/4,3-b/pyridazin-6-yl)-4(1h)-pyridinon - Google Patents

Description

! "SC39

Menetelmä 2,3-dihydro-l- (8-metyyli-l, 2,4-triatsolo/_4,3-b/-pyridatsin-6-yyli)-4-(1H)-pyridinonin valmistamiseksi

Jakamalla erotettu patenttihakemuksesta 872461 -5 patentti 85481

Keksintö koskee menetelmää 2,3-dihydro-l-(8-metyyli-l , 2,4-triatsolo/4,3-b_7pyridatsin-6-yyli) -4 (1H) -pyridinonin valmistamiseksi olennaisesti puhtaassa muodossa.

10 8-metyyli-6-(1-piperidinyyli)-1,2,4-triatsolo- Z"4,3-b7pyridatsiini ja sen käyttö keuhkoputkien kouristuksia lieventävänä aineena on kuvattu US-patenttijulkaisuissa 3 915 968 ja 4 136 182. Tämä yhdiste on jopa kliinisesti tutkittu ja sen virtsaan erittyviä metaboliitteja 15 on pyritty määrittämään. Näiden metaboliittien rakenteen tutkimiseen käytettiin massaspektrometritekniikkaa, ja osa tästä tutkimuksesta on kuvattu julkaisuissa Bucknell lecture series (1.12.1982), the Thirtyfirst Annual Conference on Massa Spectrometry and Allied Topics (Boston, 1983); 20 the Thirty-third Annual Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics (San Diego, 1985); ja the Finningan MAT Seminar Series (Cincinnati, 1985). Nämä julkaisut kä-• eittävät useita mahdollisia metaboliitteja. Yksi ehdote tuista mahdollisista metaboliiteista oli 2,3-dihydro-l-25 (8-metyyli-l, 2,4-triatsolo/’4,3-b7pyridatsin-6-yyli)-4 (1H)- pyridinoni, jota kuitenkin oli läsnä vain vähäisiä määriä. Lisäksi tulisi huomata, että analyysi suoritettiin virtsanäytteistä, jotka sisälsivät metaboliittien seosta eikä puhtaista metaboliiteista. Vaikka siis 2,3-dihydro-l-(8-.. 30 metyyli-1,2,4-triatsolo^4,3-b/pyridatsin-6-yyli)-4(1H)- pyridinonia ehdotettiin metaboliitiksi, sitä ei eristetty puhtaassa muodossa. Lisäksi silloin ei ollut mahdollista riippumattomalla kemiallisella synteesillä varmistua siitä, että tämän ehdotetun metaboliitin rakenne oli oikea, koska 35 dihydropyridinoni-rakenteesta tällaista yhdistettä ei voitu 2 ί: r n 7 ο o o u ό y saada aikaisemmissa patenttijulkaisuissa kuvatuin synteesimenetelmin tai muilla ilmeisillä vaihtoehtoisilla menetelmillä.

Keksinnön kohteena on siten menetelmä 2,3-dihydro-5 1-(8-metyyli-1,2,4-triatsolo[4,3-b]pyridatsin-6-yyli)-4- (H)-pyridinonin valmistamiseksi olennaisesti puhtaassa muodossa. Menetelmälle on tunnusomaista, että a) 8-metyyli-6-(1,2,5,6-tetrahydropyridin-l-yyli)- 1,2,4-triatsolo[4,3-b]pyridatsiini, jonka kaava on 10 CH3 (II) 15 saatetaan reagoimaan fenyyliselenyyliasetaatin kanssa, jolloin saadaan 4-asetoksi-l-(8-metyyli-l,2,4-triatsolo-[4,3-b]pyridatsin-6-yyli)-3-(fenyyliselenyyli)piperidii-20 ni, jonka kaava on CH 3 'Λ

. ... J-^N

;; 25 f N . N (III) /λ' ΑοΟ'^'γ^

Se-fenyyli b) asetoksiesteriryhmä hydrolysoidaan emäksen • 30 avulla, jolloin saadaan vastaava 4-piperidinoli, jonka kaava on 35 1, 3 ::8039 CH3 r^VNs /<> ,Ν ^/N (IV) r^N n

5 HO I

Se- fenyyli c) piperidinoli saatetaan ensin reagoimaan N-kloo-risukkinimidin kanssa ja sitten 1,8-diatsabisyklo[5,4,0]- 10 undek-7-eenin kanssa, jolloin saadaan vastaava 1,4,5,6-tetrahydro-4-pyridinoli, jonka kaava on CH3 15 Jov N /,N (V) f ^

HO

ja 20 d) tetrahydropyridinoli hapetetaan mangaanidioksi dilla halutuksi tuotteeksi.

Keksinnön mukaista menetelmää voidaan kuvata seu-raavalla reaktiokaaviolla: 25 4 88039 ch3 /3

/- r; N

^ i-/--^ Ν Ν 5 Aco/^

Se-fenyyli 10 «3 „ ///-N V r^>-\ \ ' /Ν r Χ.Λ· —- ρΛ-1- ΙΜ^ »“'l 15 Se- l.cnyylj

V

CH3 ....:20

\; r^-N N

[f: 0^ :.: : 25 N-substituoitu tetrahydropyridiini-lähtöaine saatetaan reagoimaan fenyyliselenyyliasetaatin kanssa, ·’- jolloin saadaan vastaava 4-asetoksi-3-fenyyliselenyyli- piperidiini, joka sitten hydrolysoidaan emäksellä vas- . taavaksi 4-piperidinoliksi. Fenyyliselenyyli-yhdiste 30 saatetaan sitten reagoimaan N-kloorisukkinimidin kanssa ja sen jälkeen 1,8-diatsabisyklo/5,4,O/undek-7-eenin kanssa fenyyliselenyyliryhmän poistamiseksi ja 2,3-kak-soissidoksen muodostamiseksi piperidiinirenkaaseen. Saatu tyydyttymätön piperidinoli hapetetaan siten mangaanidi-35 oksidilla halutuksi tuotteeksi.

5 83C39

Edellä kuvattu 2,3-dihydro-1-(8-metyyli-1,2,4 -triätsolo/4,3-b7pyridatsin-6-yyli)-4(1 H)-pyridinoni-yhdiste on keuhkoputkia laajentava aine ja siten käyttökelpoinen keuhkoputkisairauksien, kuten keuhkoastman 5 hoitoon.

Keksinnön mukaisesti valmistettua 2,3-dihydro-1-(8-metyyli-1,2,4-triatsolo/4,3-b7pyridätsin-6-yyli)—4 —(1 H )— pyridinonia annetaan keuhkoputkia laajentava määrä sisäisesti nisäkkäälle, joka on sen tarpeessa, käyttäen lääk-10 keenantotapaa, joka tehokkaasti saattaa yhdisteen koske tuksiin nisäkkään keuhkoputki- ja henkitorvikudoksen kanssa. Lääkeanto voidaan suorittaa joko parenteraali-sesti, kuten suonensisäisenä, vatsakalvonsisä.isona, ihonalaisena tai lihaksensisäisenä injektiona tai annosta-15 maila ruuansulatuskanavaan suun tai peräsuolen kautta, jolloin yhdiste verivirran välityksellä saadaan kosketuksiin keuhkoputkien kanssa, tai annostamalla yhdistettä inhalaatioliuoksena suihkeen muodossa.

Tehokas, keuhkoputkia laajentava määrä yhdistettä, 20 so. määrä, joka riittää estämään keuhkoputkikouristuksen tai lieventämään sitä, riippuu useista tekijöistä, kuten käsiteltävän eläimen tyypistä ja iästä, käytetystä yhdisteestä tai sen farmakologisesti hyväksyttävästä : | · suolasta, annostustavasta ja antotiheydestä, kouristuk- : 25 sen vakavuudesta ja sen aiheuttajasta ja lääkeannostuk- : sen ajasta. Annostettava määrä voidaan useissa tapauksis sa määrittää tavanomaisin menetelmin, esimerkiksi tarkkai-: lemalla erilaisten annosten keuhkoputkia laajentavaa ak- -· tiivisuutta. Erityisesti 2,3-dihydro-1-(8-metyyli-1,2,4- 30 triatsolo/4,3-b7pyridatsin-6-yyli)-4(1 H)-pyridinonin annostus on noin 0,1 - 100 mg eläimen kehon kilogrammaa kohti, edullisen annostusalueen ollessa noin 0,25 - 50 mg/ kg tai 1-10 mg/kg. Yleensä on toivottua, että yksikölli-·· set annokset ovat alhaisempia määriä, joilla saadaan sopi- 35 vaa annostusohjelmaa käyttäen haluttu suoja keuhkoputkien r r o n -7 n 6 0 b U 0 9 kouristuksia vastaan. Yleisesti edullisia annosyksiköitä ovat suun kautta annosteltavat muodot, kuten tabletit, kapselit, pastillit, eliksiirit, siirapit ym.; aktiivinen yhdiste voidaan muodostaa tavanomaiseksi hitaasti 5 aktiiviaineesta vapauttavaksi kapseli- tai tablettival- misteeksi, vaikkakin injektiovalmisteet tai inhalaatioi-na käytettävät aerosolisuihkeet ovat edullisia annosmuo-toja, kun halutaan nopeata vaikutusta. Yksittäisen tab-lettiannosyksikön esimerkissä tabletti sisältää 100 mg 10 aktiivista aineosaa, ja tabletteja annetaan vuorokaudes sa 1 - 6 kertaa, edullisesti 2-4 kertaa.

Käytännössä aktiivinen aineosa sisällytetään koostumukseen, joka sisältää farmaseuttista kantaja-ainetta ja noin 5-90 paino-%, 2,3-dihydro-1-(8-metyyli-1,2,4-1 5 triatsolo/[4,3-b7pyridatsin-6-yyli ) - 4 (1 H) -pyridinoni- yhdistettä. Ilmaisulla "farmaseuttinen kantaja-aine" tarkoitetaan tunnettuja farmaseuttisia täyteaineita, joita käytetään farmaseuttisesti aktiivisten aineiden formuloinnissa sisäiseen lääkeantoon sopiviksi eläimille, ja ____: 20 jotka käyttöolosuhteissa ovat olennaisesti myrkyttömiä eivätkä aiheuta herkistymistä. Koostumuksia voidaan valmistaa tunnetuin menetelmin, joita käytetään tablettien, kapselien, pastillien, lääkenappien, peräpuikkojen, eliksiirien, siirappien, emulsioiden, dispersioiden, -· 25 kastuvien ja kuohuvien jauheiden, steriilien injektoita vien koostumusten ja suihkeliuosten valmistuksessa ja ne voivat sisältää kyseisen halutun koostumustyypin valmistuksen kannalta sopivia tunnettuja täyteaineita. Sopivia farmaseuttisia kantaja-aineita ja valmistusmenetelmiä on 30 esitetty standarditeoksissa, joista mainittakoon

Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania.

Keksinnön mukaisesti valmistetun yhdisteen keuhko-putkia laajentava aktiivisuus voidaan osoittaa urospuoli-35 sen marsun henkitorven eristetyillä jaokkeilla in vitro 7 88039 -kokeissa. Jaoke ripustettiin modifioituun Burn-liuokseen, johon johdettiin 95 % happea ja 5 % hiilidioksidia ja se saatettiin 8 g:n jännityksen alaiseksi. Kudokset esisupis-tettiin käyttäen yhtä tai useampaa supistavaa ainetta “ .5 5 /histamiini (1 x 10 M, 5-hydroksitryptamiini (2 x 10 M) tai kaliumkloridi (20 mM)/konsentraationa, joka aikaisemmin määritettyjen konsentraatio-supistus-käyrien mukaan aiheutti 70 - 80 %:isen supistumisen maksimiarvosta.

Sitten liuoksiin lisättiin kumulatiivisesti koeyhdistettä 10 kunnes rentoutumisaste oli saavuttanut maksimiarvon. Kun kin koeyhdistekonsentraation rentouttamisvaikutus ilmoitettiin prosentteina arvosta, joka saatiin isoproterenoli- -7 konsentraatiolla 3,2 x 10 , ja näitä prosenttilukuja käy tettiin koeyhdisteen ED^Q-arvon laskemiseen. Kaikki saa-15 dut arvot koostuivat vähintään viidellä eri kudoksella saadusta tuloksesta. Vertailuksi suoritettiin kokeita samanaikaisesti kahdella tunnetulla keuhkoputkia laajentavaa aktiivisuutta omaavalla yhdisteellä (aminofylliini ja 8-metyyli-(>- (1 -piperidinyyli ) 1 -2,4-triatsolo^4,3-b/pyridat-20 siini). Keksinnön mukaisesti valmistetun yhdisteen todet- tiin kumoavan supistusta aiheuttavan aineen supistavaa vaikutusta samankaltaisella voimakkuudella kuin piperi-·!· dinyyliyhdiste.

Lisäksi yhdisteen keuhkoputkia laajentavaa aktii-25 visuutta kokeiltiin apinoihin. Tässä menetelmässä ree- susapinat nukutettiin, halvattiin ja käyttäen tekohengitystä valmistettiin keuhkomekaniikan tutkimukseen. Keuhkojen vastusta lisättiin antamalla suonensisäisenä infuu-siona histamiinia, ja 2,3-dihydro-1-(8-metyyli-1,2,4-tri-30 atsolo/4,3-b7pyridatsin-6-yyli)-4(1 H)-pyridinonia annet tiin suonensisäisesti puolilogaritmisesti kasvavina annoksina. Saatuja keuhkojen vastuksen niaksiminuiutosarvoja ; käytettiin log-annos-vaste-käyrän laatimiseen. Tästä käy rästä määritettiin keksinnön mukaisesti valmistetun - 35 dihydropyridinonin ED^Q-arvoksi noin 0,18 mg/kg, jolloin 8 88039 e^50 t3rkoittaa annosta, jolla saadaan keinotekoisesti lisätyn keuhkojen vastuksen 50-%:inen muutos.

Seuraavat esimerkit valaisevat esillä olevaa keksintöä .

5 Esimerkki 1 6-kloori-8-metyyli-1,2,4-triätsolo/4,3-b/pyridatsiiriin (84,3 g), 1,2,5,6-tetrahydropyridiinin (62,4 g) ja tri-etyyliamiinin (101 g) liuosta etanolissa (1 000 ml) keitettiin palautusjäähdyttäen typpikehässä 21 tuntia. Pääosa 10 liuottimesta poistettiin kiertohaihduttimessa. Jäännöksenä saatu puolikiinteä aine liuotettiin 1 000 ml:aan dikloori-metaania, ja liuos pestiin kyllästetyllä natriumbikarbo-naattiliuoksella (500 ml). Vesikerros pestiin puhtaalla dikloorimetaanilla (2 x 200 ml) ja yhdistetyt orgaaniset 15 kerrokset kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Haih duttamalla liuotin saatiin vaaleanruskea öljy, joka muuttui hitaasti kiinteäksi. Se liuotettiin kuumaan etyyliasetaattiin (230 ml), ja liuos jäähdytettiin. Liuosta jäähdytettäessä hitaasti huoneen lämpötilaan ja sitten 5 °C:seen 20 liuoksesta erottui kermanvärisiä neulasia, jotka koottiin, pestiin etyylieetteri-etyyliasetaattiseoksella (2:1) ja sitten etyylieetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin . 8-metyyli-6-{1,2,5,6-tetrahydropyridin-1-yyli)-1,2,4- ::: trialsolo^4,3-b7pyridatsiini, sp. noin 103 - 106 °C.

25 Esimerkki 2 :*j‘; Vedettömän kaliumasetaatin (3,7 g) ja difenyyli- diselenidin (3,0 g) seosta jääetikassa (25 ml) sekoitet-· tiin huoneen lämpötilassa samalla kun siihen lisättiin no- pasti bromin (1,5 g) liuos jääetikassa (5 ml) . Reaktio-30 seos lämpeni jonkin verran. Syvän punaruskeata seosta se- koitettiin 10 minuuttia, sitten seokseen lisättiin 4,0 g 8-metyyli-6- (1,2,5,6-tetrahydropyridin-1 -yyli) -1 ,2,4-.*··_ tr: atsolo/4 , 3-b?pyridatsiinia , ja sekoittamista huoneen 9 88039 lämpötilassa jatkettiin. 10 minuutin kuluttua seoksen väri vaaleni huomattavasti, ja reaktion osoitettiin ohutkerros-kromatografiällä /Tsilikageeli, eluointi dikloorimetaanin ja 10 % väkevää ammoniumhydroksidia sisältävän etanolin 5 seoksella 95:5)_7 olevan täydellinen. Reaktioseos laimennettiin yhtä suurella tilavuudella dikloorimetaania, ja epäorgaaniset suolat suodatettiin pois. Suodos konsentroitiin viskoosiseksi öljyksi, joka puhdistettiin kromatogra-fisesti Waters Prep. 500 sys teemillä käyttäen silikageeli-10 patruunoja ja eluenttina samaa liuotinsysteemiä kuin edellä ohutkerroskromatografiässä. Puhtaista fraktioista saatiin viskoosisena öljynä 4-asetoksi-1-(8-metyyli-1,2,4-triätsolo/4,3-b/pyridatsin~6-yyli)-3-(fenyyliselenyyli)-piperidiiniä.

15 Esimerkki ,3 4-asetoksi-1-(8-metyyli-1,2,4-triätsolo/4,3-b7~ pyridatsin-6-yyli)-3-(fenyyliselenyyli)piperidiinin (3,6 g) liuosta etanolissa (25 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa samalla lisäten 10 ml 1-n natriumhydroksidiliuosta.

20 Sekoittamista huoneen lämpötilassa jatkettiin vielä 30 minuuttia, sitten reaktioseos jaettiin veteen ja dikloori-metaaniin liukeneviin osiin. Kerrokset erotettiin, vesi-faasi pestiin uudella erällä dikloorimetaania, ja yhdiste-tyt orgaaniset liuokset kuivattiin vedettömällä natrium-25 sulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin väritön lasi-.···. mainen jäännös. Kun sitä keitettiin 50 mltssa etyyliasetaat- tia, muodostui kiteinen aine. Seos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan, tuote koottiin ja kuivattiin, jolloin saatiin 1 -(8-metyyli-1,2,4-triatsolo74,3-b7pyridatsin-6-yyli)-3-30 (fenyyliselenyyli)-4-piperidinoli, sp. noin 157 - 160 °C.

Esimerkki 4 1-(8-metyyli-1,2,4-triatsolo^4,3-b7pyridatsin-6-;··' yyli)-3-(fenyyliselenyyli) -4-piperidinolin (387 mg liuosta dikloorimetanolissa käsiteltiin huoneen lämpötilassa N-35 kloorisukkinimidin (147 mg) liuoksella dikloorimetaanissa 10 88 039 (3 ml), ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa. Muodostui valkea sakka. 15 minuutin kuluttua lisättiin 305 mg 1,8-diatsabisyklo/5,4,o7undek-7-eeniä ja sekoittamista jatkettiin huoneen lämpötilassa 20 tuntia. Tällöin 5 saatiin erittäin tumma liuos. Reaktioseos haihdutettiin pienempään tilavuuteen kiertohaihduttimessa, ja liuos vietiin sitten suoraan silikageelille (20 g) flash-kromato-grafiakolonniin. Materiaali huuhdottiin kolonnissa di-kloorimetaanilla ja eluoitiin sitten dikloorimetaanin ja 10 10 % väkevää ammoniumhydroksidia sisältävän etanolin seok sella 95:5. Puhtaat fraktiot yhdistettiin, jolloin haihduttamalla liuotin saatiin nahanruskea viskoosinen öljy, joka hitaasti kiteytyi, saatiin 1 -(8-metyyli-1,2,4-tri-atsolo/4,3-b7pyridatsin-6-yyli)-1,4,5,6-tetrahydro-4-15 pyridinoli, sp. noin 171 - 173 °C.

Esimerkki 5 1 -(8-metyyli-1,2,4-triatsolo/4,3-b7pyridatsin-6-vyli)-1,4,5,6-tetrahydro-4-pyridinolin (116 mg) liuosta dikloorimetaanissa (15 ml) käsiteltiin mangaanidioksidilla 20 (500 mg), ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 64 tuntia. Kiinteät aineet suodatettiin (Celite) ja pestiin hyvin kuumalla dikloorimetaanilla. Haihduttamalla liuotin suodoksesta saatiin 2,3-dihydro-1 - (8-metyyli-1 ,2,4-triatsolo-: /4,3-b7pyridatsin-6-yyli) -4 (1 H) -pyridinoni, sp. noin 25 264 - 266 °C (hajoaa) . Kiteyttämällä osa tästä materiaalis- : ta metanolista saatiin puhdas tuote vaalenakeltaisina neulasina, sp. noin 270,5 - 271,5 °C (hajoaa).

Claims (6)

11 88039 Patenttivaatimus Menetelmä kaavan I mukaisen 2,3-dihydro-l-(8-me-tyyli-1,2,4-triatsolo[4,3-b]pyridatsin-6-yyli)-4(lH)-py-5 ridinonin valmistamiseksi olennaisesti puhtaassa muodossa, CH3

10. N (I) tunnettu siitä, että a) 8-metyyli-6-(1,2,5,6-tetrahydropyridin-l-yyli)-15 l,2,4-triatsolo[4,3-b]pyridatsiini, jonka kaava on CH3 ^ I /N 20 ^ (II) K> saatetaan reagoimaan fenyyliselenyyliasetaatin kanssa, jolloin saadaan 4-asetoksi-l-(8-metyyli-l,2,4-triatsolo-25 [4,3-b]pyridatsin-6-yyli)-3-(fenyyliselenyyli)piperidii- ni, j onka kaava on CH3 : 30 I I /N (111) AcO^^j^ Se-fenyyli . 35 12 «8039 b) asetoksiesteriryhmä hydrolysoidaan emäksen avulla, jolloin saadaan vastaava 4-piperidinoli, jonka kmivn on CH3 5 r^N <IVI V HO I

10 Se- fenyyli c) piperidinoli saatetaan ensin reagoimaan N-kloo-risukkinimidin kanssa ja sitten 1,8-diatsabisyklo[5,4,0]-undek-7-eenin kanssa, jolloin saadaan vastaava 1,4,5,6-tetrahydro-4-pyridinoli, jonka kaava on 15 ΛΒ3 ^ J&- fN N 20 (V) HO ja d) tetrahydropyridinoli hapetetaan mangaanidioksidilla halutuksi tuotteeksi. li i3 88039 Förfarande för framställning av 2,3-dihydro-l-(8-metyl-1,2,4-triazolo[4,3-b]pyridazin-6-yl)-4(lH)-pyridi-5 non med formeln I i väsentligen ren form, cn3 kännetecknat därav, att a) 8-metyl-6-(1,2,5,6-tetrahydropyridin-l-yl)- 15 l,2,4-triazolo[4,3-b]pyridazin med formeln CH3 f^VNN ^ A- N (II)

20 I omsätts med fenylselenylacetat, varvid erhälls 4-acetoxi-1-(8-metyl-l,2,4-triazolo[4,3-b]pyridazin-6-yl)-3-(fenyl-25 selenyl)piperidin med formeln CH3 ^ (III>

30. N AcO'^'Y^ Se-fenyyli b) acetoxiestergruppen hydrolyseras med en bas, 35 varvid erhälls motsvarande 4-piperidinol med formeln i4 83039 CH 3 \ M /N N (IV) N N

5 BOj^ Se- fenyyli c) piperidinolen omsätts först med N-klorsuccin-imid och därefter med 1,8-diazabicyklo[5,4,0]undek-7-en, 10 varvid erhälls motsvarande 1,4,5,6-tetrahydro-4-pyridinol med formeln J?3 “ ^ jQ2· JS och 20 d) tetrahydropyridinolen oxideras med mangandioxid tili den önskade produkten.