FI80048B

FI80048B - 11-desoxi-17 -hydroxikortikosteronde- rivat.

Info

Publication number: FI80048B
Application number: FI861325A
Authority: FI
Inventors: Kira Nikolaevna Kurdjumova; Elizaveta Nikolae Shkodinskaya; Ljudmila Pavlovna Sushinina; Valentina Petrov Yaguzhinskaya; Nina Dmitrievna Lagova; Zoya Petrovna Sofiina; Irina Mikhailovna Valueva; Petr Vyacheslavovich Lopatin; Margarita Andreevna Krasnova; Anatoly Borisovich Syrkin; Ljudmila Mikhailovn Mikhailova
Original assignee: V Onkologichesky Nauchny Ts Ak
Priority date: 1984-07-31
Filing date: 1986-03-26
Publication date: 1989-12-29
Also published as: GB2176189B; FI80048C; DE3490749C2; SE8601344L; CH666044A5; FI861325A; WO1986000908A1; SE8601344D0; GB2176189A; DE3490749T1; SE448166B; GB8606415D0; FI861325A0; JPH01500111A; JPH0124160B2; US4810701A

Description

1 80048

Menetelmä uusien hormonisytostaattien ll-desoksi-17oC -hyd-roksi-21-Zp-di(2-kloorietyyli)aminofenyyliasetaattij ja bu-tyraattikortikosteronien valmistamiseksi 5 Keksinnön ala Tämä keksintö koskee bio-orgaanista kemiaa, ja erityisesti uusien ll-desoksi-17 X. -hydroksikortikosteroni-johdannaisten (hormonisytostaattien) valmistusta, joilla on sekä kasvaimen vastainen että hormonivaikutus ja jotka ovat käyttökelpoisia lääkinnässä syövänhoitoaineita ja hylkimistä vastustavina aineina.

Keksinnön tausta

Alalla tunnettuja ovat kortikoidien esterit, niiden 15 biosynteesin välituotteiden ja rakenteeltaan erilaisten solumyrkkyhappojen esterit.

Esimerkkeinä niistä voidaan mainita pregnenolonin ja p-di-(2-kloorietyyli)aminofenyylietikkahapon fenasyyli-kloridi) esterit: 20 3 /3 -oksi-5-pregnen-20-oni-3 3* -p-di-(2-kloorietyy li) aminofenyyliasetaatti coch3

wjOU

(C1CH2CH2) 2NC6H4CH2C-o4 JL J

O

ja desoksikortikosteronin ja fenasyylikloridin esteri: 21-3Q hydroksi-4-pregneeni-3,20-dioni-21-/fp-di(2-kloorietyyli)-aminofenyliasetaatti*?: COCH2OCOCH2C6H4N(CH2CH2C1) 2 35 ' cr Näiden yhdisteiden kasvaimen vastaisia ominaisuuk- 2 80048 siä on tutkittu, mutta riittämättömästi. Niiden kasvaimien vastainen vaikutus on osoitettu Walker-sekasyöpää W-256, rottien kroonista verisyöpää ja eräitä kasvaimia vastaan, jotka ovat hormoniperäisiä - kudoksista riippuen -5 kohdunkaulasyöpää RSLM-5, maitorauhassyöpää R-13762 vastaan. Kuitenkaan näillä yhdisteillä ei ole osoittautunut olevan mitään vaikutusta imuverisyövän L 1210 suhteen (vrt Z.P. Sof'ina, N.D. Lagova, I.M. Valueva, Z.V. Kuz'mina, E.N. Shkodinskaya, A.M. Khaletsky, Proceedings of I All-Union 10 Conference on Chemioterapy of malignant Tumors, Riga, 1968, p. 441-443: M. Wall, G. Abernethy, F. Carrol, D. Taylor, J.Med.Chem., 1969, 12, nro 5, pp 810-818; N.D. Lagova, Experimental Oncology 1982, voi 4, nro 5, p 38-42).

15 Tunnettuja ovat kortikoidien esterit, erityisemmin hydrokortisonin ja f*1 -kloorietyylikarbamiinihapon esterit; 9o<iF, 11/5, 16 o(, , 17 , 26-tetraoksipregnaani-l, 4-dieeni- 3,2Q-dioni-21-/bis-(2-kloorietyyli)karbamaatti/-16,17-ase-tonidi yO Λ 0 20 / / CCH20C - H(CH2CH2C1)2 H0_^'CH3 25 F U \Cti ja triamkinoloni-asetonidin ja -kloorietyylikarbamiini-hapon esterit: 11/5 ,17, 21-trihydroksi-pregneeni-4-30 3,20-dioni-21/bis(2-kloorietyyli)karbamaatti7' 0 0

1 II II

H0_/\-.-CCHgOC-NiCHgCHg Cl) 2

35 οΛ/J

II

3 80048

Yhdisteet ovat biologisesti aktiivisia. Ne ehkäisevät hiiren sidekudosemosolu L-929-viljelmien kasvua ja reagoivat solureseptorien kanssa. Kuitenkin nämä biologiset vaikutukset ovat reversiibelejä (vrt A. Masry, V.

5 Braun, C. Nielsen, W. Pratt, J. Med. Chem., 1977, voi 20, nro 9, pp 1134-1139).

Alalla on tunnettu synteettisen kortikoidi-predni-solonin ja p-di-(2-kloorietyyli)aminofenyylivoihapon (cnlorambucyl) esteri: pregna-1,4-dieeni-3,20-dioni, 10 11/?-17,21-trihydroksi-21-/p-di(2-kloorietyyli)amino- fenyylibutyraatti7/ jonka kaava on CH20C0(CH2)3-C6H^ - N(CH2CH2C1)2 HO.

15 ''0H

jolle annettiin kauppanimi "Prednimustine" (D. Alfthan, 20 I.Rusk, Ann.Chir. Gynaecol. Fenn., 1969, voi 58, p 234; J. Kaufmann, G. Hunjura, A. Mittelmann, C. Arengsta, G. Murphy, Cancer. Treat. Rep. 1976, voi 60, nro 3, pp 277-279).

Valmiste "Prednimustine" on käyttökelpoinen kasvain-25 opillisen kliinisen tutkimuksen yhteydessä hoidettaessa systeemisiä verisairauksia, ja vähäisemmässä määrässä -rintasyövän yhteydessä. "Prednimustine":n sivuvaikutukset ovat yhteydessä pääasiallisesti hematotoksisuuden kanssa.

30 Keksinnön kuvaus Tämän keksinnön kohteena on uusien ll-desoksi-17oZ-oksikortikosteronijohdannaisten valmistus, joilla on laaja-alainen kasvaimen vastainen vaikutus ja hormoni-vaikutus .

35 ll-desoksi-17°6-oksikortikosteroni-johdannaiset ovat 4 80048 uusia ja tähän saakka kirjallisuudessa tuntemattomia yhdisteitä.

Tämän keksinnön kohde toteutetaan ll-desoksi-17,?^ -hydroksikorticosteroni-johdannaisten avulla, joihin sisäl-5 tyvät yhdisteet, joiden yleiskaava on:

CH«OR

X

/•''"''J C -=o

10 0H

jossa R on -CO(CH2)nCgH4N(CH2CH2C1)2; n = 1 tai 3.

Tämän keksinnön mukaisissa yhdisteissä steroidina 15 käytetään ll-desoksi-17 o( -oksikortikosteronia, joka on hormoni-mediaattori mineraali- ja glukokorticoidien biosynteesissä ja pystyy myös sen mukaisesti metaboloitumaan estrogeenityypiksi.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet käsittävät 11-20 desoksi-17 -hydroksikortikosteronin ja p-di-(2-kloori-etyyli)aminofenyylialkaanihappojen esterit: ll-desoksi-17 ^ -hydroksi-21-/p-di(2-kloorietyyli)-aminofenyyliasetaatti7kortikosteronin ja ll-desoksi-17 c\ -hydroksi-21-/p-di(2-kloorietyyli)aminofenyylibutyraattiy-25 kortikosteronin.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet ovat hienojakoisia kiteitä, väriltään valkoisia tai kellertäväänvivahta-van valkoisia, pääasiallisesti veteen liukenemattomia, liukenevat orgaanisiin liuottimiin (kloroformiin, bentsee-30 niin, etyyliasetaattiin) eivät ole hygroskooppisia, muuttuvat väriltään keltaisiksi pitkäaikaisen varastoinnin aikana valossa. Yhdisteet ovat stabiileja pitkän ajan varastoi- taessa pimeässä 5-0°C:n lämpötiloissa.

Suositeltavaa on käyttää ll-desoksi-17 oc-hydroksi- kortikosteronin johdannaista, jonka kaava on: s 80048 5 ch2ococh2c6h4n(ch2ch2gi)2

C=Q

'OH

10 U

Keksinnön paras suoritusmuoto Tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä on huomattava kasvaimen vastainen vaikutus, joka on osoitettu siir-15 retyn valkoveritaudin osalta. Kasvaimen vastainen vaikutus ilmoitetaan eläinten pidentyneenä elinaikana ja eräiden niiden toipumisena.

Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden etuna on niiden vähäisempi toksisuus verrattaessa rakenteeltaan nii-20 den kaltaisiin erittäin toksisiin alkylointiaineisiin, nimittäin kloorifenasyyliin ja chlorambucyl'iin. Täten ekvimolaarinen annos kloorifenasyyliä chlorambucyl’issä, joka on terapeuttisissa annoksissa tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä, ylittää 5-10-kertaisesti terapeuttisen 25 annoksen, joka tarvitaan niitä erikseen käyttämällä.

Tutkittaessa tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden kasvaimen vastaista vaikutusta käytettiin hyväksi siirrettyjä hemoblastooseja, siirrettyjä kiinteitä kasvaimia, hiirten ja rottien indusoituja ja spontaanisia kasvaimia. 30 Käytettiin seuraavia malleja: L 1210, P-388, hemosyto- blastosis La, MOPC-406, virusperäinen imusolusyöpä Mazu-renkoLM3-1, Ca-755, maitorauhassyöpä haarapesäkkeineen keuhkoissa KML, rauhasrakkulamaitorauhassyöpä RMK-1, ohutsuoli-raunassyöpä AKATON, suuri välirauhassyöpä AKATOL, Lewis-35 keuhkosyöpä LL, keuhkorauhassyöpä RL-67, maksakasvain 6 80048 G-22c, G-60, G-61, sarkoomat S-37 ja S-180, DMBA (dime-tyylibentsantraseeni)-indusoidut ja spontaaniset rinta-kasvaimet, ja DMN (dimetyylihydratsiini)-indusoidut paksusuolen kasvaimet.

5 Tutkimukset suoritettiin tavallisilla hiirillä ja niiden ensimmäisen polven risteytyksillä, samoin kuin sekarotuisilla hiirillä ja rotilla.

Yhdisteitä annettiin eläimille ihonalaisesti palmu-ydinoljyssä. Anto-olosuhteet on esitetty alla olevissa 10 taulukoissa. Vertailua varten käytettiin tunnettua hormoni-sytostaattista estrasyyttiä (estra-1,3,5-(10)treiini-3,17/3 -dioli-3N-^bis-(2-kloorietyyli)karbamaatti-17-natri-umfosfaatti7, jota annettiin ihonalaisesti 0,9-prosentti-sessa NaCl-liuoksessa; kloorifenasyyliä ja chlorambucyl'iä, 15 joita annettiin vatsaontelon sisäisesti 10-prosenttisessa etanoliliuoksessa, sarkolysiiniä (/3-/p-di(2-kloorietyyli)-ajuinof enyyli/- ^-alaniini-hydrokloridi) - vatsaontelon sisäisesti 0,9-prosenttisessa NaCl-liuoksessa, prednisolo-nia (pregnadieeni-1,4-trioli-lly?3 ,17oC / 21-dioni-3, 20) -20 suun kautta tärkkelysliisterissä.

Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden kasvaimen vastaisia kriteereitä ovat: eläinten elinajan piteneminen (ELÄ, %) ja kasvaimen kasvun estyminen (TGI, %).

C-T

25 ELÄ, % =----x 100, jossa

C

T - käsiteltyjen eläinten keskimääräinen elinaika, C - kontrollieläinten keskimääräinen elinaika.

K-0 30 TGI, % = - x 100, jossa

K

O - keskimääräinen kasvaimen tilavuus käsiteltyjen eläinten ryhmässä, K - keskimääräinen kasvaimen tilavuus kontrollieläinten 35 ryhmässä.

80048 7

Kun kyseessä ovat spontaaniset tai karsinogeeni-silla aineilla indusoidut kasvaimet, kasvaimen vastaisen vaikutuksen kriteereinä ovat: TGI, %, tai kasvaimen koon pieneneminen, %, verrattuna sen alkuperäiseen arvoon.

5 Spontaanisten ja indusoitujen kasvaimien käsittely aloitettiin näiden kasvaimien saavutettua tietyn koon, huomioimatta spontaanisen regression mahdollisuutta.

Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden valkoveritau-din vastaiset vaikutusarvot on esitetty taulukossa 1.

10 Taulukko 1

Nro Yhdiste Tehoava annosalue Eläinten (mg/kg), aikaväli elinajan (t) x antojen lu- pitenemi-kumäärä nen, %__ L 1210 j. käsittely- päiviä siirteen antamisen jälkeen 1-5 2-6 J.___2______________3_4 5 20 1. ll-desoksi-17o£-hydroksi-21- /£-di (2-kloorietyyli) -amino-fenyyliasetaattij-kortiko- steroni 10-25/24x5 31 2. ll-desoksi-17 «C-hydroksi-21-/p-di(2-kloorietyyli)-amino-fenyylibutyraatti/-kortiko- 25 steroni 15-35/24x5 20 3. Kloorifenasyyli 1,5-3/24x5 15 4. Chlorairbucyl 2,5-4/24x5 7 5. Il-desaksi-17r3(-hydraksi- kortikosteroni 7-15/24x5 6 6. ll-descksi-17f/-hydroksi- kortikosteroni + kloorifenasyyli 1,5/24x5 7. ll-desoksi-17 ^-hydroksi- kortikosteroni + chlorambucyl 2,5-4/24x5 19 8 80048

Taulukko 1 (jatkoa)

Nro Eläinten elinajan piteneminen, % P-388 MPPC-406 La Virusperäinen valkoveritauti Mazurenko LMC-1 5 Hoitopäiviä siirteen antamisesta 1-5 2-6 1-5 2-6 1-5 2-6 1 6 7 8 9 10 11 1. 81 76 105 344 (33 % toipuminen) 2. 82 70 18 10 3. 87 41 46 9 4. 49 35 5. -7 0 17 6. 46 7. 57 35 15

Taulukko 2 ll-desoksi-17 -hydroksi-21-/-p-di(2-kloorietyyli) -aminofenyyliasetaatti/-kortikosteronin kasvaimen vastainen vaikutus siirrettyihin kiinteisiin kas-20 vaimiin

Nro Yhdiste Tehoava annosalue Kasvaimen kas- (mgAg), aikaväli vun suurin es- (t) x antojen lu- tymä, %_ kuräärä Ca-755 S-37 hoitopäiviä 25 siirteen an tamisen jälkeen 2 2-6 2 2-6 1 _2___3_4 5 6 7 1. ll-desoksi-17^-hydroksi-21- 45x1 94 99 /p-di(2-kloorietyyli)-amino- 20 fenyyliasetaatti7~kortikos- teroni 10-25/24x5 99 99 2. Kloorifenasyyli 1,5-2/24x5 87 94 3. 11-desoksi-l 7 <t( -hydroksi- kortikosteroni 7-10/24x5 +105 29 4. Prednisoloni 4-10/24x5 70 44 35 5. Sarkolysiini 2-4/24x5 83 95 6. Estracyte 100/24x5 +6 85 tl 9 80048

Taulukko 2 (jatkoa)

Nro Kasvaimen kasvun suurin estymä, % S-180 Paksusuoli LL Maksakasvain Rauhasrakkulamaito- rauhassyöpä „ _ ,A _ rauhaussyöpä AKATOL 0-22 0-60 G_61 RMK-1 ^ Hoitopäiviä siirteen antamisen jälkeen 2-6 2-6 2 2-6 2-6 6-10 7-11 3-7 18 9 10 11 12 13 14 15 10 1. 93 50 92 98 81 80 99 89 59 2. 56 46 16 29 86 55 27 3. +41 28 3 38 37 +4· 4. 67 30 44 10 5-76 56 58 50 87 +86 6. +23 29

Huom. Merkki "+" tarkoittaa kasvaimen kasvun stimuloitu-20 mistä

Taulukosta 1 nähdään, että molemmilla tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä on valkoveritaudin vastaista vaikutusta, joka ilmenee eläinten elinajan pitenemisenä hemoblastoosien L 1210, P-388, MOPC-406, LA ja LMC-1 yh-teydessä.

Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden kasvaimen vastainen vaikutus on parempi kuin alkylointiaineiden, joita on liitetty niiden molekyyliin (kloorifenasyyli ja chlor-ambucyl). Se on myös parempi kuin kloorifenasyylin ja chlor-ambucyl'in yhteisvaikutus ll-desoksi-17e>(.-hydroksikorti-kosteronin kanssa.

Taulukko 2 esittää arvoja ll-desoksi-17oC-hydroksi- 21-,/p-di(2-kloorietyyli)-aminofenyyliasetaatti/-kortikoste-ronin kasvaimen vastaisesta vaikutuksesta kiinteiden kas- Λ - vaimien suhteen.

10 80048

Taulukosta 2 nähdään, että tämän keksinnön mukaisella yhdisteellä on huomattava kasvaimen vastainen aktiivisuus ja laajaspektrinen kasvaimen vastainen vaikutus. Se ehkäisee pääasiallisesti kaikkien kasvaimien 5 kasvua 80-99 %. Tämä yhdiste on aktiivinen eläinten suhteen, joissa on kasvaimia, jotka eivät ole herkkiä sen molekyylin muodostaville komponenteille, muille kortiko-deille ja hormonisytostaattiselle aineelle - estracyte' lie. ll-desoksi-170^-hydroksi-21-/p-di(2-kloorietyyli)-;lq aminofenyyliasetaatti/-kortikosteroni on huomattavasti parempi, huomioimalla sen aktiivisuus lukuisiin malleihin, kuin tunnettu alkylointivalmiste sarkolysiini.

ll-desoksi-17 T^-hydroksi-21-/p-di(2-kloorietyyli)-aminofenyyliasetaatti/’-kortikosteroni aiheuttaa pitkäai-^5 kaisen kasvaimen vastaisen vaikutuksen ja ehkäisee kasvaimien kasvua kuukauden ja sitä pitemmän ajan hoitosar-jan päätyttyä, minkä seurauksena eläinten elinaika pite-nee 27-73 % kontrolliin verrattuna (taulukko 3).

Taulukko 3 2Q ll-desoksi-17rx^-hydroksi-21-^p-di- (2-kloorietyyli) - aminofenyyliasetaatti7-kortikosteronin kasvaimen vastaisen vaikutuksen kesto

Nro Kasvainmallit Annos, (mg/kg) aika väli (t) x antojen lukumäärä 25 1 2 3 1. Keuhko-rauhassyöpä RL-67 45x1 2. Maitorauhassyöpä haarapesäk- keineen keuhkoissa KML sama 3. Sarkoma S-37 sama 3Q 4. Maksakasvain G-22c 15/24x5 5. Lewis epidermoidaalinen keuhkosyöpä LL sama 6. Maitorauhassyöpä Ca-755 sama 7. Ohutsuolirauhassyöpä AKATON sama n 80048

Taulukko 3 (jatkoa)

Nro Hoitopäiviä Kasvaimen kasvun esteinä, % Elinajan piteneminen siirteen koepäivinä % antamisen 15 22 29 jälkeen 5 1 4 5 6_7_8 1. 2 81 82 80 27 2. 10 80 53 61 57 5. 2 59 94 91 42(28% j^q toipuminen) 4. 6-10 80 68 57 65 5. 2-6 76 56 59 38 6. 2-6 92 73 82 73 7. 2-6 66 55 46 46 is _____:- ll-desoksi-lT^^ydroksi -21-^/p-di (2-kloorietyyli) -aminofenyyliasetaatti/-kortikosteroni saa aikaan indusoitujen ja spontaanisten rintakasvaimien pienenemisen rotil-2q la ja hiirillä verrattuna niiden kokoon ennen hoitokäsit-telyä, se osoittaa aktiivisuutta myös toistetuissa hoito-käsittelysarjoissa (taulukko 4), mikä viittaa terapeuttisen mukautumisen puuttumiseen tämän yhdisteen suhteen.

25 i2 80 0 48

Taulukko 4 11-desoksi-l7<s^ -hydroksi-21-/p-di (2-kloorietyyli) - aminofenyyliasetaatti7~kortikosteronin vaikutus spontaanisiin ja indusoituihin maitorauhaskasvai- 5 miin toistettujen hoitosarjojen aikana

Nro Kasvain Ryhmä Annos (mgAg) · Kasvaimen koon väliaika (t) pienenaninen tai x antojen sar- suureneminen (+) jaa kohden % alkuperäisestä 12 3 10 123 4 567 1. Spontaaniset Kontrolli +25 +42 +89 rraitorauhas- kasvaimet hii- 2. rillä ll-desoksi-17<^ - 15/24x5 hydroksi-21-/p- (2 sarjaa 15 di(2-kloorietyyli)- 3 viikon aminofenyyliase- välein) taatti/-kortiko- steroni 23 37 7 3. CMBA-indusoi- Kontrolli +86 +160 +215 dut naitorau- haskasvaimet 20 rotilla 4. ll-desdksi-17 o(- 15/24x5 hydroksi-21-/p- (2 sarjaa di(2-kloorietyyli)-5 viikon aminof enyyliase- välein) 33 32 11 taatti/-kortiko-steroni 25 i3 80048

Taulukko 4 (jatkoa)

Nro Kasvaimen koon suurenemisen vähentymi- Lisääntynyt , . . ... „ elinaika, % nen (+) suhteessa alkuperäiseen, %

Koeviikot 5 4 5 6 7 3 13 9 10 11 12 ' 13 1. +155 +230 +530 +505 +412 2. 64 20 50 25 16 11 5. +258 +269 +355 +400 +409 4. 24 +26 23 +3 13 18 15 ll-desoksi-17 o^-hydroksi-21-/p-di- (2-kloorietyyli) - aminof enyyliasetaattiT’-kortikosteronin hormooni vaikut us on sen vuoksi yhteydessä glukokortikoidaalisen aktiivisuuden esiintymisen kanssa. Spesifisissä anto-olosuhteissa yhdiste pidentää elinaikaa 25 päivän ikäisillä nuorilla 20 rotilla, joilta on poistettu lisämunuainen (biologinen koe glukokortikoidaalisen vaikutuksen toteamiseksi), samoin siihen sekoitettu ll-desoksi-17o{-hydrokortikosteroni (113 ja vastaavasti 115 %). Tämän keksinnön mukaisen yhdisteen hormonivaikutuksen erikoispiirre perustuu sen kykyyn ai-25 heuttaa lyhytaikaista kiimaisuutta eläimissä. Yhdisteen kor-tikoidaalinen aktiivisuus on paljastunut myös tutkittaessa 14 80048 sen kasvaimen vastainen vaikutuksen biokemiallista mekanismia. Yhdiste on vuorovaikutuksessa glukokortikoidien syto-plasmaattisten reseptorien kanssa ja ehkäisee £^H_7-deksamet-atsonin yhdistymisen sen kanssa. Yhdisteen suurta affini-5 teettia glukokortikoidien reseptoreihin osoittaa sen reseptori-kompleksin dissosiaatiovakion pieni arvo, joka vastaa arvoa 9,5 x 10 M.

11-desoksi-1 7<*-hydroksi-21 -/p-di (2-kloorietyyli) -ami-nofenyyliasetaatti7~kortikosteroni reagoi glukokortikoidien 10 reseptorien kanssa eläimissä, joissa on siirrettyjä kasvaimia, nimittäin kasvaimia: RL-67, G-60, G-61, G-22c, Ca-755, S-37, S-37, AKATOL, AKATON, joiden suhteen sillä esiintyy 2 huomattava kasvaimen vastainen vaikutus. Tällöin £ H7-deksa-metatsonin spesifisen sitoutumisen estyminen eläinten kasvai-15 missä on 70-100 %. 11-deoksi-17A-hydroksi-21-/p-di(2-kloorietyyli) aminofenyyliasetaatti7~kortikosteroni reagoi myös ihmisten kasvaimissa olevien glukokortikoidien styplasmaat- _2 tisten reseptorien kanssa. Spesifisen / H7~deksametatsonin sitoutumiseen estyminen ihmisen keuhkosyöpätapauksessa on 20 83 %, rintasyöpätapauksessa - 53 %, mahasyöpätapauksessa - 69 % ja munuaissyöpätapauksessa - 84 %.

11 -deoksi-1 7ot-hydroksi-21 -^p-di (2-kloorietyyli) -amino-fenyyliasetaattl.7“kortikosteroni tunkeutuu soluytimeen ja on vuorovaikutuksessa sekä kasvain- että normaalisolujen 25 (rottien munuaiskasvain PA, wistar-rotta, normaali munuainen) kromatiinin akseptorialueiden kanssa.

Alkylointiominaisuuksien osoittamisen osalta 11-des-oksi-1 7oi-hydroksi-21 -/p-di (2-kloorietyyli) aminofenyyli-asetaatti7-kortikosteroni eroaa siihen lisätystä kloori-30 fenasyylistä, erityisesti vaikutuksensa osalta kasvaimeen. Alkyloimisvoima arvioitiin ristiliittymisen ja lohkeamien ilmaantumisdynamiikan avulla sekä kasvain (sarkooma S-37)-että normaali (perna)-solujen desoksiribonukleiinihapon (DNA) molekyyleissä käyttämällä sedimentoitumismenetelmiä 15 80048 alkalisen sakkaroosin tiheysgradientin kohdalla. S-37-solujen DNA-molekyylien ristiliitoksien lukumäärän ja retention kestoajan suhteen ll-desoksi-17 o<_-hydroksi-21-/p-di (2-kloorietyyli) aminofenyyliasetaattiy-kortikosteroni 5 on parempi kuin siihen lisätty kloorifenasyyli. Normaali-kudoksessa DNA:n, jota ll-desoksi-17o(-hydroksi-21-/p-di-(2-kloorietyyli)aminofenyyliasetaatti/-kortikosteroni on vaurioittanut, regeneraatio alkaa aikaisemmin kuin kasvain-kudoksessa, mikä viittaa siihen että yhdisteellä ilmenee 10 selektiivistä vahingollista vaikutusta kasvainsolujen DNA:n suhteen.

Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden toksikologinen tutkimus on suoritettu hiirillä. On osoitettu, että toksisten ja siedettävien annosten välinen ero on riittävän suu-15 ri. ll-desoksi-17^-hydroksi-21-/p-di-(2-kloorietyyli)ami-nofenyyliasetaatti7-kortikosteronin toksisuus on 3 kertaa pienempi kuin siihen sekoitetun kloorifenasyylin toksisuus, yhdisteen MTD- ja LD^Q-arvot yhtenä antona ovat 44 ja vastaavasti 80 mg/kg, kun kloorifenasyylin osalta ne ovat 15 2Q ja vastaavasti 24 mg/kg. ll-desoksi-17o<-hydroksi-21-/p-di-(2-kloorietyyli)aminofenyylibutyraatti/-kortikosteronin toksisuus on vieläkin pienempi. Sen MTD yhden kerran annettaessa on 350 mg/kg, kun taas chlorambucyl'in osalta se on 25 mg/kg.

25 Toksikologinen tutkimus on osoittanut, että 11-des- oksi-17rx' -hydroksi-21-/p-di (2-kloorietyyli) aminofenyyliase-taatti/-kortikosteronin käyttöä voivat rajoittaa maha-suoli-ja hermotoksisuus (ripuli, oksentaminen, kouristukset) joiden aste riippuu annoksesta. Hematotoksisuus, joka tavalli-30 sesti rajoittaa alkylointiominaisuuksia omaavien valmisteiden ja "Prednimustine"-valmisteen antoa, ei rajoita 11-des-oksi-17o<'-hydroksi-21-/p-di- (2-kloorietyyli) aminofenyyli-asetaatti/-kortikosteronin antoa.

Tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä ilmenee hyl-35 kimistä vastustavaa vaikutusta. Nesteimmuunius-ominaisuudet i6 80 048 yhdisteiden antamisen jälkeen yhtenä suurimpana siedettävänä annoksena (MTD) ovat oleellisesti alhaisemmat verrattuna kontrolliin ja pysyvät alhaisena jopa 1,5 kuukauden ajan. Huomattakoon, että yhdisteiden hylkimistä vas-5 tustava vaikutus ilmenee T-suppressorien suhteen ja alhaisempina annoksina kuin yksi ainoa terapeuttinen annos.

Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistusmenetelmä on yksinkertainen ja voidaan suorittaa seuraa-valla tavalla.

10 Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden synteesi voi daan esittää seuraavan kaavan avulla:

CH.OH ^0 CH-OCOR

ci *'-<0 I 2 15 -j\ R-C^ _i=0 rrj^ s'°h ^ 'oh cr v 20 jossa R^· on -C^CH (CH^) 2 · R on -(CH_) C,H.N(CH„CH0C1)n = 1,3.

Z n b 4 z z z

Yhdisteitä valmistetaan seka-anhydridi-menetelmäl-lä, joka kuten kokeellisesti on osoitettu, antaa paremmat tulokset verrattuna anhydridi- ja kloridi-menetelmiin.

25 Seka-anhydridi-menetelmä perustuu steroidaalisen hydroksi-yhdisteen asylointiin fenyylialkaanihapon solutoksisen johdannaisen ja isovaleriaanahapon seka-anhydridillä.

Seka-anhydridin valmistus suoritetaan väliaineessa, jossa on aproottista liuotinta kuten bentseeniä lämpötilan 30 ollessa +5°C, jolloin läsnä on moolimäärä trietyyliamiinia. Seka-anhydridi lisätään ll-desoksi-17 <>C -hydrokortikoste-ronin sivuketjussa olevan hydroksiryhmän asylointireaktio-tuotteeseen.

Tämän keksinnön mukainen menetelmä voidaan panna 35 toimeen teknillisessä mittakaavassa, koska se on yksinker- 80048 täinen eikä edellytä suurta tehon kulutusta.

Kaikki menetelmässä käytettävät reagenssit ovat tunnettuja yhdisteitä ja helposti saatavissa.

Tämän keksinnön ymmärrettävyyden parantamiseksi 5 alla on esitetty muutamia spesifisiä esimerkkejä.

Esimerkki 1 ll-desoksi-17 ^-hydroksi-21-/p-di(2-kloorietyyli)- aminofenyyliasetaatti/-kortikosteronin (I) valmistus 15,9 g (0,057 g-moolia) kloorifenasyyliä liuotetaan 1Q kuivaan bentseeniin, lisätään 8,0 ml (5,83 g, 0,57 g- moolia) trietyyliamiinia ja 7,8 ml (7,71 g, 0,064 g-moolia) isovaleriaanahappokloridia +5°C:n lämpötilassa.

Reaktioseosta sekoitetaan tunnin ajan 5°C:n lämpötilassa, sitten lisätään 200 ml kuivaa asetonitriiliä ja 20,0 g 15 ll-desoksi-17o(.-hydroksikortikosteronia (0,057 g-moolia). Reaktiomassaa lämmitetään 4 tuntia 80°C:n lämpötilassa, lisätään 10Q ml bentseeniä, minkä jälkeen muodostunut orgaaninen kerros pestään peräkkäin vedellä, natriumvetykar-bonaattiliuoksella ja jälleen vedellä.

2Q Orgaaninen kerros erotetaan ja kuivataan vedettö mällä natriumsulfaatilla. Liuotin tislataan pois kuiviin vakuumissa lämpötilassa, joka ei ole korkeampi kuin 50°C. Saatu jäännös liuotetaan bentseeniin, pannaan silikageelillä täytettyyn kolonniin ja eluoidaan bentseeni/etyyliasetaat-25 ti-seoksella (6:1).

Kerätään ll-desoksi-17 o<^-hydroksi-21-/p-di (2-kloori-etyyli) aminofenyyliasetaattiy'-kortikosteronia sisältävät fraktiot, joiden Rf on noin 0,50 bentseeni/etyyliasetaatti-seoksessa (3:2) Silufol tR^^-levyillä.

3q Liuotin tislataan pois vakuumissa ja lopputuote (I) kiteytetään eetteristä, saanto 17,99 g (51,54 %) .

Laskettu, %: C 65,55, H 7,16, Cl 11,73 (C^H^C^NO^)

Saatu, %: C 65,44, H 7,12, Cl 11,56.

UV-spektri (etanolissa) : Ama^s : 256 nm 35 IR-spektri: "V c=q l/742cm^; 1,723 cm 1,653 cm is 80048

Vc=ci 744 cm ^ · 686 cm 655 cm

Esimerkki 2 ll-desoksi-17 °C-hydroksi-21-/p-di(2-kloorietyyli)- aminofenyylibutyraatti7-kortikosteroni (II) vaimis-5 tus

Yhdisteen II valmistus suoritetaan samalla tavalla kuin edellä esimerkissä 1 selostetun yhdisteen synteesi.

Asylointireaktiossa käytetään ll-desoksi-17Ά-hydr-oksikortikosteronia ja p-di(2-kloorietyyli)aminofenyylivoi-10 hapon ja isovaleriaanahapon seka-anhydridiä. Reaktioseosta sekoitetaan 8Q°C:n lämpötilassa 4 tuntia. Seuraavat toimenpiteet suoritetaan kuten edellä olevassa esimerkissä 1 on selostettu. Tuote kromatografioidaan kolonnissa silikagee-lillä, eluoimalla bentseenietyyliasetaattiseoksella (6:1).

15 Yhdisteen II saanto on 40 % lähtöhormoonista laskien.

Saatu, %: C 66,85, H 7,59, Cl 11,19 (C33H47C12N05)

Laskettu, %: C 66,43, H 7,48, Cl 11,22.

Teollinen sovellettavuus ll-desoksi-17o(,-hydroksikortikosteroni johdannaiset 20 ovat käyttökelpoisia lääkkeenä hoidettaessa syöpää ja elimien ja kudosten siirrossa.

Claims

25. Z C = O 1 35 jossa, R· on -CH2CH(CH3)2 ja R on -(CH2)nC6H4N(CH2CH2C1) , jossa n = 1 tai 3. 30 asyloidaan yhdisteellä, jonka kaava on O O H II r* - C- O- C- R 20 80048 Förfarande för framställning av nya hormoncytostater ll-desoxi-17 (Λ -hydroxi-21-Z.p-di (2-kloretyl) aminofenylace-5 tat- och -butyrat/kortikosteroner med formeln ch2ococh2c6h4n(ch2ch2cl)2 C = O pHk. . "oh 10 { eller ch2oco(ch2) 3c6h4n(ch2ch2cd 2 15 ! C = O '"OH 20 kännetecknat därav, att ll-desoxi-17 CX. -hydroxi-kortikosteron med formeln CH-OH I ^ C = O 25 N-s X 30 acyleras med en förening med formeln O O Il II R’ -C-O-C-R väri R1 är -CH2CH(CH3)2 och R är 35 - (CH2)nC6H4N(CH2CH2C1)2, väri n är 1 eller 3.