FI68057C - Foerfarande foer framstaellning av antracyklinderivat - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av antracyklinderivat Download PDFInfo
- Publication number
- FI68057C FI68057C FI800298A FI800298A FI68057C FI 68057 C FI68057 C FI 68057C FI 800298 A FI800298 A FI 800298A FI 800298 A FI800298 A FI 800298A FI 68057 C FI68057 C FI 68057C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- group
- chloroform
- adriamycin
- derivative
- formula
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
\u#ir*\ ΓΒ1 (11) kuulutusjulka.su 68057
®181ΗΡ l J ' υ UTLÄGGN,NGSSKR,FT
(45) .
(51) Kv.ik.4/int.ci.4 C 07 H 15/252, 17/04 SUOMI —FINLAND (21) Patenttihakemus — Patentansökning 800298 (22) Hakemispäivä — Ansökningsdag Qi m On ' ' (23) Alkupäivä — Giltighetsdag 01.02 80 (41) Tullut julkiseksi — Blivit offentlig g^ gg gg
Patentti- ja rekisterihallitus Nähtiyiksjpjno,, ja kuul.julkaisun pvm. —
Patent- och registerstyrelsen ' Ansökan uclagd och utl.skriften publicerad 29.03.85 (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus— Begärd prioritet 03.02.79 3i.O8.79 Japani-Japan(JP) Sho 54-11702,
Sho 54-110255 (71) Zaidanhojin Biseibutsu Kagaku Kenkyukai, 14-23 Kamiosaki 3~chome,
Shinagawa-ku, Tokyo, Japani-Japan(JP) (72) Hamao Umezawa, Tokyo, Tornio Takeuchi , Tokyo,
Hiroshi Naganawa, Tokyo, Kuniaki Tatsuta, Tokyo, Japani-Japan(JP) (74) Oy Borenius δ Co Ab (54) Menetelmä antrasykliinijohdannaiSten valmistamiseksi -Förfarande för framställning av antracyklinderivat
Keksinnön kohteena on menetelmä uusien antrasvkliinijohdannaisten tai niiden happoadditiosuolojen valmistamiseksi, joiden antrasyk-liinijohdannaisten yleinen kaava i' on 0 ,0H 2 1 JL X /V c-ch2r 0 OH o (17) 0CH3
R
jossa kaavassa Rl on vetvatomi, hydroksyvliryhmä, alkanoyylioksi" 2 ryhmä jossa on 2...7 hiiliatomia, tai fenyyliasetyylioksiryhmä, R on alkvylioksietyyli-, tetrahvdrofuranyyli-, 6-metoksitetrahydro-" pyranyyli-, 6-karbometoksitetrahydropyranyyli- tai f>-asetoks ime tvY" litetrahydropyranyyliryhmä.
2 68057
Etenkin keksinnön kohteena on menetelmä antrasykliinijohdannaisten tai niiden happoadditiosuolojen valmistamiseksi, joiden johdannaisten kaava on I', eetteröimällä kaavan VIII
0 OH 0
Il I tt 3
OCH. 0 OH
3 O (Vili) ΑΛ
Ho\_y NH2 antrasykliinijohdannaisen C-4'-hvdroksyyliryhmä, jossa kaavassa r3 on vetyatomi tai alkanoyylioksiryhmä, jossa on 2...7 hiiliatomia, tai Eenyyliasetyylioksirvhmä, antamalla sen reagoida dihydrofuraanin, sen johdannaisen, dihvdroovraanin, sen johdannaisen tai alkyylivinyylieetterin kanssa, joka sisältää reaktiokykyisen di-hydrofuranvylin, dihydropyranyylin tai sen alkyvlivinyylieetteri-ryhmän, joka on tarkoitus liittää ja joka pystyy reagoimaan hydrok-syylirvhmän kanssa, ja liittämällä yllä mainittu ryhmä kaavan VIII antrasykliinijohdannaisen C-4'-asemassa olevaan hvdroksyyliryhmään tai vaihtoehtoisesti edelleen erottamalla alkanovvli- tai fenyyli-asetyyliryhmä eetteröidyn johdannaisen C-14-asemassa hydrolyytti-sellä asyvliradikaalin lohkaisulla.
Daunomysiinillä (GB-patenttijulkaisu 1.003.383, US-patenttijulkaisu 3.616.242) ja adriamysiinillä (US-patenttijulkaisu 3.590.028, US-patentti julkaisu 3.803.124), jotka saadaan Streotomyces-viljelyistä, on laaja tuumoria estävä spektri erilaisia kokeellisia tuumoreita vastaan ja niitä on käytetty kliinisesti tehokkaina syövän kemo-terapeuttisinä aineina. Kuitenkin on tunnettua, että niillä on vakavia sivuvaikutuksia ja ne aiheuttavat esim. kaljuutta, leuko-peniaa, kardiotoksisuutta jne.
3 68057 FI-patenttijulkaisusta 63419 tunnetaan antrasykliiniglykosidien 4'-0-metyylijohdannaisia, joilla on kasvainten vastainen vaikutus. Nämä yhdisteet eroavat keksinnön mukaan valmistetuista uusista yhdisteistä rakenteensa puolesta siten, että niillä substituentti R^· voi olla ainoastaan vety tai metoksi ja R^ on metyyli. FI-patentti-julkaisusta 63420 tunnetaan antrasykliiniglykosidien tetrahydropyranvylieettereitä, joilla on myös todettu olevan kasvainten vastainen vaikutus. Kun näissä yhdisteissä substituentti R^- on vety tai hvdroksi, on substituentti R^ tetrahydropvranyyli. Keksinnön mukaan valmistetut yhdisteet sisältävät rakenteen läheisestä samankaltaisuudesta huolimatta yhdisteitä, joilla on korkeampi kasvainten vastainen vaikutus ja alhaisempi myrkyllisyys kuin tunnetuilla yhdisteillä.
Tämän keksinnön keksijät ovat tutkineet laajalti daunomysiinin ja adriamvsiinin kemiallisia muunnoksia hyödyllisempien johdannaisten valmistamiseksi, joilla on aktiivisempi syöpää estävä vaikutus ja alhainen toksisuus (sivuvaikutukset) kuin tunnetuilla yhdisteillä, ja he havaitsivat, että daunomysiinin ja adriamysiinin johdannaisilla, joiden reaktiokykyinen hydroksyyliryhmä C-4'-asemassa on substituoitu alkyylioksietyyli-, tetrahydrofuranvyli- tai 6-substituoidun tetrahvdropyranvyli-ryhmän kanssa, on voimakas syöpää estävä vaikutus samoin kuin alhainen toksisuus.
Keksinnön mukaisten johdannaisten joukossa adriamysiinin 14-0-asvylijohdannaiset ovat mvös käyttökelpoisia edullisina väliaineina keksinnön mukaisten johdannaisten valmistamiseksi ja ne sisältyvät kaavan I johdannaiseen keksinnön mukaisesti.
Keksinnön mukaisesti valmistetuista uusista johdannaisista, joiden yleinen kaava on I, farmaseuttisesti käyttökelpoisia ovat seuraavat johdannaiset.
Etenkin adriamysiinin uuden 14-0-asyloidun johdannaisen esimerkkeinä mainitaan seuraavat: 14-0-fenyyliasetvyli-4'-0-(6-metoksitetrahydropyranyyli)-adriamysiini a ja b 14-0-fenyyliasetyyli-4'-0-(6-karbometoksitetrahydropyranyyli)-adriamysiini a ja b 14-0-isobutyloyyli-4'-0-(6-asetoksitetrahydropyranyyli)-adriamysiini a ja b 14-0-asetyvli-4'-tetrahydrofuranyyli-adriamysiini a ja b 14-0-isobutyloyyli-4'-0-tetrahvdrofuranyyli-adriamysiini a ja h 14-0-fenyyliasetwli-4'-0-tetrahydrofuranvyli-adriamysiini a ja b 14-0-fenyyliasetyyli-4'-0-(l-etyylioksietyyli)-adriamysiini a ja b 14-0-asetyyli-4'-0-(l-butyylioksietvyli)-adriamysiini a ja b 14-0-asetyyli-4'-0-(l-isobutyylioksietwli)-adriamvsiini a ja b 14-0-isobutyloyyli-4'-(l-isobutyylioksietyyli)-adriamysiini a ja b 14-0-fenvyliasetyyli-4'-0-(l-isobutyylioksietvyli)-adriamysiini a ja b 14-0-asetyyli-4'-0-(l-(6-metyvliheptyylioksi)etyyli)-adriamysiini a ja h , 68057 1 4-0-asetyyli-4 ’-O-sykloheksyylioksietyyli-adriamysiini a ja b
Seuraavaksi esimerkkeinä adriamysiinin uusista M-1 -O-pyranyloiduista, -furanyloiduista ja -alkoksietyloiduista johdannaisista mainittakoon seuraavat: 4'-O-tetrahydrofuranyyli-adriamysiini 4'-O-tetrahydrofuranyyli-adriamysiini a ja b 4 1 -0-(1 -etyylioksietyyli)-adriamysiini a ja b 4'-0-(1-butyylioksietyyli)-adriaroysiini a ja b 4·-0-(1-isobutyylioksietyyli)-adriamysiini a ja b 4*-0-(1-(6-metyyliheptyylioksi)etyyli)-adriamysiini a ja b 4 ’-O-sykloheksyylioksietyyli-adriamysiini a ja b 4’-0-(6-metoks itetrahydropyranyyli)-adriamysiini a ja b 41-0-(6-karbometoksitetrahydropyranyyli)-adriamysiini a ja b u’-0-(6-asetoksitetrahydropyranyyli)-adriamysiini a ja b
Esimerkkeinä daunomysiinin uusista johdannaisista mainittakoon seuraavat: 41-O-tetrahydrofuranyyli-daunomysiini a ja b 4'—0—(1-etyylioksietyyli)-daunomysiini a ja b 4'-0-(1-butyylioksietyyli)-daunomysiini a ja b 4'-0-(1-isobutyylioksietyyli)-daunomysiini a ja b 4'-0-(1-(6-metyyliheptyylioksi)etyyli-daunomysiini a ja b 4’-O-sykloheksyylioksietyyli-daunomysiini a ja b 4'-0-C6-metoksitetrahydropyranyyli)-daunomysiini a ja b 4'-0-(6-karbometoksitetrahydropyranyyli)-daunomysiini a ja b 4’-0-(6-asetoksitetrahydropyranyyli)-daunomysiini a ja b
Menetelmä kaavan I mukaisten uusien antrasykliinijohdannaisten valmistamiseksi keksinnön mukaisesti voidaan jakaa kahteen tyyppiin, kuten seuraavasta selityksestä selviää.
Menetelmän ensimmäinen tyyppi yleisen kaavan I 14-0-asyyli-antra-sykliini-johdannaisten C-4'-eetteröityjen johdannaisten tai niiden happoadditiosuolojen valmistamiseksi on tunnettu siitä, että siinä liitetään alkyylioksietyyli- (kuten esim. 1-metoksietyyli-, 1-etyylioksietyyli, 1-butyylioksietyyli, 1-isobutyylioksietyyli, 1-(6-metyyliheptyylioksi )etyyli tai sykloheksyylioksietyyli), tetrahydrofuranyyli-, s 68057 tetrahydropyranyyli-, 6-metoksitetrahydropyranyyli-, 6-karbometoksi-tetrahydropyranyyli- tai 6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyliryhmä kaavan Il-a 0 OH 0 li I "3 c-ch2r°
j J! I ^OH
(II-a) 0CH3 0 oh 0 HO \-/ ”H2 mukaisen antrasykliinijohdannaisen tai sen happoadditiosuolan C-U’-
O
asemassa olevaan hydroksyyliryhmään, jossa kaavassa R on alkanoyyli-oksiryhmä, kuten esim. asetyylioksi tai isobutyloyylioksi, tai fenyyli-asetyylioksiryhmä, saattamalla yhdiste reagoimaan dihydrofuraanin, sen johdannaisen, dihydropyraanin, sen johdannaisen tai alkyyli-vinyylieetterin kanssa, mikä sisältää vastaavan liitettävän ryhmän ja pystyy reagoimaan hydroksyyliryhmän kanssa, inertissä orgaanisessa liuottimessa ja happokatalyytin läsnäollessa yleisen kaavan II
0 OH 014 c-ch2r3
I | ^OH
nh2 R2 6 68057 C-4'-eetteröidyn johdannaisen tai sen happoadditiosuolan valmistami- 3 · .
seksi, jossa kaavassa R on alkanoyylioksiryhmä, jossa on 2...7 hiiltä, tai fenyyliasetyylioksiryhmä, ja o R on alkyylioksietyyli-, tetrahydrofuranyyli-, tetrahydropyranyyli-, 6-metoksitetrahydropyranyyli-, 6-karbometoksitetrahydropyranyyli- tai 6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyliryhmä,
ja vaihtoehtoisesti edelleen tunnettu siitä, että erotetaan alkanoyyli-ryhmä tai fenyyliasetyyliryhmä yleisen kaavan II mainitun johdannaisen C-1U-asemassa hydrolyyttisellä asyyliradikaalin lohkaisulla kaavan III
0 OH
Il coch2oh 0H (III) 0CHo 0 3 0 9nh9 mukaisen antrasykliinijohdannaisen tai sen happoadditiosuolan valmistamiseksi, jossa kaavassa R2 merkitsee samaa kuin yllä.
Keksinnössä käytetään lähtöaineena yhdisteitä (samat yhdisteet kuin kaava Il-a), jotka on johdettu daunomysiinistä julkaisussa Compt. Rend. Acad, de Science t. 286, Serie D-443, 1978 esitetyllä menetelmällä ja joilla on yleinen kaava VI
7 68057 0 OH 4
X C0CH2°C0R
f'^ 1 ^1 ^OH
Ji I (VI)
OCH0 O
3 0 /~°\ \^ly
HO I
nh2 jossa kaavassa 4 R on alkyyliryhmä, jossa on 1...6 hiiltä, tai bentsyyliryhmä.
14-0-asyylijohdannaiset ja 14-0-fenyyliasetyyli-johdannaiset vastaavat yhdistettä, joka on saatu asyloimalla hydroksyyliryhmä adriamysiinin C-14-asemassa alkanoyylihapolla tai fenyylietikkahapolla, jonka kaava en R COOH. Uudet johdannaiset, joiden yleinen kaava VII (samat yhdisteet kuin kaava II) on:
0 OH
COCH2OCOr4
^OH
(VII)
0CH3 0 OH
0 A°\ nh2 R2 jossa kaavassa 4 R on sama ryhmä kuin yllä on mainittu, ja 8 68057 R2 on tetrahydropyranyyli-, 6-metoksitetrahydropyranyyli-, 6-karbo-metoksitetrahydropyranyyli-, 6-asetoksitetrahydropyranyyli-, tetra-hydrofuranyyli- tai alkyylioksietyyli-, kuten 1-metoksietyyli-, 1-etyylioks ietyyli-, 1-butyylioksietyyli-, 1-isobutyylioksietyyli-, 1-(6-metyyliheptyylioksi)etyyli~ tai sykloheksyylioksietyyliryhmä, voidaan valmistaa liittämällä vastaava ryhmä yhdisteen VI C-ä' -asemassa olevaan hydroksyyliryhmään saattamalla se reagoimaan dihydro-furaanin tai dihydropyraanin tai sen johdannaisten tai alkyylivinyyli-eetterijohdannaisten kanssa, joissa on 3...10 hiiltä, jotka sisältävät vastaavan reaktiokykyisen ryhmän.
Tässä tapauksessa, kun yhdisteen VI vapaa emäs tai sen happoadditio-suoiat kuten hydroklcridit on suspendoitu tai on liuotettu tämän jälkeen mainituissa orgaanisissa liuottimissa ja saatettu reaktioon dihydropyraanin, dihydropyraanin johdannaisten, dihydrofuraani-johdannaisten tai C3-C1O-alkyyli-vinyyli-eetteri-johdannaisten kanssa happokatalyytin läsnäollessa, reaktiokykyinen hydroksyyliryhmä yhdisteen VI C-U'-asemassa voidaan substituoida tetrahydrofuranyyli-, tetrahydropyranyyli-, 6-substituoidun tetrahydropyranyyli-, alkyylioksi-etyyliryhmän kanssa, kuten esim. 1-metoksietyyli-, 1-etoksietyyli-, 1-butyylioksietyyli-, 1-isobutyylioksietyyli- , 1-(6-metyyliheptyyli-oksi)etyyli- tai sykloheksyylioksietyyliryhmän kanssa.
Parhaiten voidaan käyttää keksinnössä dihydropyraanijohdannaisia, kuten 2-asetoksietyyli-3,4-dihydro-2H-pyraania, 2-metoksi-3,4-dihydro-2H-pyraania, 2-karbometoksi-3 ,ä-dihydro-2H-pyraania. Parhaiten voidaan käyttää dihydrofuraania itseään ja vinyyli-eetteri-johdannaisia, kuten metyyli-vinyyli-eetteriä, etyyli-vinyyli-eetteriä, butyyli-vinyyli-eetteriä, isobutyyli-vinyyli-eetteriä, 6-metyyliheptyyli-vinyyii-eetteriä tai sykloheksyyli-vinyyli-eetteriä.
Vedettömiä orgaanisia liuottimia, kuten bentseeniä, tolueenia, dircetyyliformamidia (seuraavassa lyhennettynä DMF), tetrahydrofuraania (seuraavassa lyhennettynä TKF), dimetyylisulfoksidia (seuraavassa lyhennettynä DMSO), dioksaania ja asetonitriiliä jne. voidaan parhaiten käyttää reaktioon erillisenä aineena tai näiden seoksena.
Happokatalyyttinä voidaan käyttää orgaanisia sulfonihappoja, etenkin aromaattisia sulfonihappoja, kuten p-tolueenisulfonihappoa, bentseeni-sulfonihappoa pidetään parhaimpina.
g 68057
Erään parhaimpana pidetyn esimerkin mukaan reaktio suoritettiin käyttäen vedetöntä DMF:ä liuottimena ja p-tolueenisulfonihappoa happokatalyytti-nä, reaktioajan ollessa 20 min....50 tuntia huoneenlämpötilassa. Vaihtoehtoisesti käyttämällä sellaista liuotinseosta, jossa on vedetöntä DMS0:ia ja vedetöntä THF:ia tai vedetöntä DMS0:ia ja vedetöntä dioksaania, ja p-tolueenisulfonihappoa happokatalyyttinä, reaktio voidaan suorittaa 20 min. ... 50 tunnin aikana huoneenlämpötilassa.
Asyyliryhmän tai fenyyliasyyliryhmän erottamiseksi yleisen kaavan VII (sama kuin kaava II) yhdisteen C-14-asemassa voidaan suorittaa hydro-lyysi tunnetulla menetelmällä yleisen kaavan III yhdisteen valmistami-seksi. Hydrolyysi R -CO-ryhmän poistamiseksi yhdisteen VII C-14-asemassa voidaan saada aikaan liuottamalla tai suspendoimalla yhdiste VII veteen sekoittuvissa orgaanisissa liuottimissa, esimerkiksi alhaisemmissa alkoholeissa, kuten metanolissa, etanolissa jne. ja vesipitoisessa asetonissa ja saattamalla reaktioon huoneenlämpötilassa tai hieman lämpimämmissä olosuhteissa alkalin, parhaiten kaliumkarbonaatin läsnäollessa sopivassa väkevyydessä, esim. n. 10% (W/V). Hydrolyysin loppuun saattaminen voidaan todeta ohutkerroskromatografiällä.
Keksinnön toinen tyyppi koskee menetelmää antrasykliini-glykosidin, ja sen happoadditiosuolojen valmistamiseksi, jonka glykosidin yleinen kaava V on
n OH
|V I coch3
II ^OH
jH |jj (v)
kV
I nh? R2 jossa kaavassa 10 68057
O
R on tetrahydrofuranyyli-, 6-metoksitetrahydropyranyyli-, 6-karboksi-metyylitetrahydropyranyyli-, 6-asetoksitetrahydropyranyyliryhmä, tai alkyylioksietyyliryhinä, kuten 1-etyylioksietyyli, 1 -butyylioksietyyli , 1-isobutyylioksietyyli, 1-(6-metyyliheptyylioksi)etyyli tai syklo-heksyyliryhmä, jossa menetelmässä liitetään tetrahydrofuranyyli-, 6-metoksitetrahydropyranyyli-, 6-karbometoksitetrahydropyranyyli-, 6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyliryhmä tai alkyylioksietyyli-, kuten 1-metoksietyyli-, 1-etyylioksietyyli-, 1-butyylioksietyyli-, 1- isobutyylioksietyyli-, 1-(6-metyyliheptyylioksi)etyyli- tai syklo-heksyylioksietyyliryhmä daunomysiinin. tai sen happoadditiosuolojen C-H'-asemassa olevaan hydroksyyliryhmään, jonka daunomysiinin kaava IV on:
0 OH
/V JL i ^ . C0CHo
x OH
0CH3 0 0H 0 (IV) fj HO \-/ nh2 saattamalla se reagoimaan dihydropyraanijohdannaisten kanssa, kuten 2- asetoksietyyli-3,4-dihydro-2H-pyraanin, 2-metoksi-3,4-dihydro-2H-pyraanin, 2-karbometoksi-3,4-dihydro-2H-pyraanin, dihydrofuraani-johdannaisten tai alkyyli-vinyyli-eetterin kanssa, jossa on 3...10 hiiltä, kuten metyyli-vinyyli-eetterin, etyyli-vinyyli-eetterin, butyyli-vinyyli-eetterin, isobutyyli-vinyyli-eetterin, 6-metyyli-heptyyli-vinyyli-eetterin tai sykloheksyyli-vinyyli-eetterin kanssa, joka pystyy reagoimaan hydroksyyliryhmän kanssa.
Menetelmässä lähtöaineena kaavan IV (daunomysiini) vapaa emäs tai sen happoa-ditiosuolat kuten hydrokloridi liuotetaan tai suspendoidaan orgaaniseen liuottimeen ja saatetaan reaktioon sopivien dihydropyraani-johdannaisten kanssa ( lukuunottamatta dihydropyraania itseään), 1 1 68057 dihydrofuraanijohdannaisten tai alkyyli-vinyyli-eetterien kanssa, joissa on 3...10 hiiltä, happokatalyytin läsnäollessa saman menetelmän mukaisesti kuin edellä mainittiin. Siten reaktiokykyinen hydroksyyliryhmä lähtöaineen C-4’-asemassa substituoidaan 6-substituoidun tetrahydro-pyranyyli-, tetrahydrofuranyyli-, alkyylioksietyyliryhmän kanssa yleisen kaavan V yllä mainittujen johdannaisten valmistamiseksi. Tässä tapauksessa orgaanisia liuottimia kuten bentseeniä, tolueenia, dimetyyliforma-midia (DMF), tetrahydrofuraania (THF), dioksaania tai asetonitriiliä jne. voidaan käyttää reaktioliuottimena yksittäisenä aineena tai näiden seoksena.
Orgaanisia sulfonihappoja voidaan käyttää happokatalyyttinä, etenkin aromaattisia sulfonihappo j a, kuten p-tolueenisulfonihappoa , bentseer.i-sulfonihappoa pidetään parhaimpana. Erään edullisen esimerkin mukaan reaktio suoritetaan liuottimena toimivassa vedettömässä DMF:ssa, happo-katalyyttinä toimivalla p-tolueeni-sulfonihapolla reaktioajan ollessa 20 min. ...50 tuntia huoneenlämpötilassa.
Vaihtoehtoisesti sellaista seosta, jossa on vedetöntä DMS0:a ja vedetöntä THF:ia tai vedetöntä DMS0:a ja vedetöntä dioksaania, voidaan käyttää parhaiten reaktion suorittamiseksi huoneenlämpötilassa 20 min...3 tunnin aikana, kuten edellä mainittiin.
Vaikka keksinnön mukainen menetelmä on esitetty ensimmäiseen ja toiseen tyyppiin jaetussa muodossa, jotta keksintö voitaisiin ymmärtää paremmin, nämä tyypit voidaan yhdistää seuraavasti:
Menetelmä yleisen kaavan 1' (yhdistämällä kaavat II ja III kaavan V kanssa) φ ^AX^/-ch2r1
I ^ | X0H
och3 o oh 0 I 9nk7
R
12 68057 antrasykliinijohdannaisen tai sen happoadditiosuolan valmistamiseksi, jossa kaavassa 1 .
R on vety-atomi, hydroksyyliryhmä, alkanoyyliokslryhmä, jossa on 2...7 hiiltä, tai fenyyliasetyylioksiryhmä, ja 2 R on alkyylioksietyyli-, tetrahydrofuranyyli-, tetrahydropyranyyli-, 6-metoksitetrahydropyranyyli-, 6-karbometoksitetrahydropyranyyli- tai 6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyliryhmä, lukuunottamatta tapausta, jossa R on vetyatomi ja samanaikaisesti R on tetrahydropyranyyli-ryhmä, jossa menetelmässä liitetään alkyylioksietyyli-, tetrahydrofuranyyli-, tetrahydropyranyyli-, 6-metoksitetrahydropyranyyli-, 6-karbometoksi-tetrahydropyranyyli- tai 6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyliryhmä kaavan VIII (yhdistämällä kaava Il-a kaavan IV kanssa) 0 OH 2
Il I C-CH2Rd
| X OH
0CH3 o OH 0 (VIII) 6/ HO j- NH2 antrasykliinijohdannaisen tai sen happoadditiosuolan C-U’-asemassa olevaan hydroksyyliryhmään, jossa kaavassa 3 R on vety-atomi tai alkanoyylioksiryhmä, jossa on 2...7 hiiltä, tai fenyyliasetyylioksiryhmä
saattamalla se reagoimaan dihydrofuraanin, sen johdannaisen, dihydro-pyraanin, sen johdannaisen tai alkyyli-vinyyli-eetterin johdannaisen kanssa, joka sisältää vastaavan ryhmän, joka halutaan liittää ja joka pystyy reagoimaan hydroksyyliryhmän kanssa, inertissä orgaanisessa liuottimessa ha happokatalyytin läsnäollessa yleisen kaavan IX
13 68057 (yhdistämällä kaava II kaavaan V) ? PH S n.
A/\/ C'CH2R
^ I ^ OH
och3 O oh o (IX) it'/cHg \ NH2 R2 antrasykliinijohdannaisen tai sen happoadditiosuolan valmistamiseksi, jossa kaavassa 3 R on vetyatomi tai alkanoyylioksiryhmä, jossa on 2...7 hiiltä, tai fenyyliasetyylioksiryhmä, ja 2 R on alkyylioksietyyli-, tetrahydrofuranyyli-, tetrahydropyranyyli-, 6-metoksitetrahydropyranyyli-, 6-karbometoksitetrahydropyranyyli- tai 6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyliryhmä, lukuunottamatta tapausta, jossa R on vetyatomi ja samanaikaisesti R on tetrahydropyranyyli-ryhmä, ja vaihtoehtoisesti siinä erotetaan edelleen alkanoyyliryhmä tai fenyyliasetyyliryhmä yleisen kaavan IX mainitun johdannaisen C-14-asemassa
hydrolyyttisellä asyyliradikaalin lohkaisulla yleisen kaavan III
68057 1 4
n ?H C0CH20H
^ I I ^ \θΗ T (III) och3 o oh o r° \ <y nh9 2 1 Rz mukaisen antrasykliinijohdannaisen tai sen happoadditiosuolan valmistamiseksi, jossa kaavassa 2 R merkitsee samaa kuin kaavassa IX.
Kuten yllä on esitetty, menetelmä keksinnön mukaisen antrasykliinijohdannaisen valmistamiseksi sisältää yhden tunnetun yhdisteen, 4-tetrahydropyranyyli-adriamysiinin valmistuksen, mikä kuitenkin on valmistettu uudella menetelmällä, joten menetelmä tämän valmistamiseksi on uusi keksintö.
Yllä saadut yhdisteet ovat olemassa diastereoisomeerien a ja b seoksena reaktioseoksessa. Jos on tarpeellista, diastereoisomeerit a ja b voidaan erottaa toisistaan tunnetuilla menetelmillä ja puhdistaa reaktioseoksesta tavanomaisilla menetelmillä, joita käytetään erilaisten antrasykliini-glykosidien puhdistuksessa. Esimerkiksi reaktio-seoksen kiinteiden aineiden poistamiseksi tapahtuvan suodattamisen jälkeen suodate voidaan haihduttaa kuivaksi ja sitten saatu raaka jauhe voidaan puhdistaa pylväs- tai ohutkerroskromatografoimalla käyttämällä alumiinioksidia, piihappogeeliä jne.
Yhdisteiden a ja b rakenteen välisen suhteen katsotaan olevan ero 4'-0-substituoitujen eetteriryhmien kiraalisen keskuksen absoluuttisessa konfiguraatiossa R ja S, koska molemmilla yhdisteillä on vastaavasti kiraalisen keskuksen metiiniprotonin erilaiset kemialliset asemat.
15 68057
Keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on huomattava tuumoria ehkäisevä vaikutus erilaisia kokeellisia eläintuumoreita vastaan, etenkin antrasykliinijohdannaisilla, joilla on yleinen kaava I, jossa Ί R on vetyatomi tai hydroksyyliryhmä, on voimakas tuumoria ehkäisevä vaikutus ja vähemmän toksisuutta kuin adriamysiinillä, ja niitä voidaan edullisesti käyttää tuumoria ehkäisevinä aineina. Edelleen antra- syklunijohdannaisia, joilla on yleinen kaava I, jossa R on alkanoyyli-oksiryhmä, jossa on 2...7 hiiltä, kuten asetyylioksi-, isobutyylioksi-tai fenyyliasetyylioksiryhmä, voidaan parhaiten käyttää sellaisten antrasykliinijohdannaisten välituotteina, joilla on hydroksyyliryhmä yhdisteen I kohdassa R . Näistä johdannaisista keksinnön mukaisesti farmaseuttisesti käyttökelpoisia yhdisteitä, joilla on yleinen kaava I, ovat seuraavat: 0 OH ° 1 11 >w-CH2R' ^00Η3 o oh o d ? I ' \ m2 R^ ie 68057
Taulukko 1
Yhdisteet_No__ 14-0-asetyyli-4'-0-tetra- 0 ^ n V °> hydropyranyyli ADM (a) 1-a -O-C-CH^ I | " (b) 1-b M·'-0-(tetrahydrofuranyyli) - 0
ADM 2 -OH
*4 ’ -0 - (tetrahydrofuranyyli) - ADM (a) 2-a " " " (b) 2-b 4'-Q-(6-asetoksimetyyli- 0 tetrahydropyranyyli)-ADM 3 " CH2-0-C-CH3 4'-0-(1-etoks ietyyli)- ADM (a) 4-a " -CH-0-CH2CH3 CH3 4’-0-(1-etoksietyyli)- ADM (b) 4-b -OH -CH-0-CH2CH3 ch3 4 ' - 0-(1-butyylioksietyyli)- ADM (a) 5-a " -CH-0-CHo(CH0)„CH-
, l 1 L O
ch3 " (b) 5-b CK3 4'-0-(1-isobutyylioksi- -?H-0-CH9CH C ru etyyli)-ADM (a) 6-a " ' 3 CH3 17 68057 CH-/ d
4'-0-(1-isobutyylioksi- -CH-0-CH„CH
I z CH
etyyli)-ADM (b) 6-b -OH 3 CH0 / 3 4'-0-(1 -(6-metyyliheptyyli- -CH-0-CH2(CH2)^CH χ .. 1 CH- oks i) etyyli-ADM (a) 7-a qjj 3 " (b) 7-b " " 41-0-(1-sykloheksyylioksi- /r \ etyyli)-ADM (a) 8-a " ^ \ / ch3 " (b) 8-b 4'-O-(tetrahydrofuranyyli)- 0
DAM 9 -H
4'-0-(6-metoksitetrahydro- / 0\_ pyranyyli)-DAM 10-a " " (b) 10-b " " 41-0-(6-asetoksimetyyli- q π tetrahydropyranyyli)-DAM 11 H ^ ^ 4*-0-( 6-karbometoksitetra- ^ hydropyranyyli)-DAM 12 " ^ ^^3 4’-0-(1-etoksietyyli)- -CH-0-CH2CH3
DAM (a) 13-a " CH
" (b) 13-b " ie 68057 4'-0-(1-butyylioksietyyli)- DAM (a) 14-a H -CH-0-CH2(CH2)2CH3 ch3 (b) 14-b " " 4'-0-(1-isobutyylioksi- CH^ etyyli)-DAM (a) 15-a " -CH-0-CHoCH^ ' 1 ^ CH3 ch3
Seuraavassa kuvataan keksinnön mukaisten yhdisteiden farmakologista käyttökelpoisuutta.
(1) Tuumoria ehkäisevä vaikutus erilaisiin kokeellisiin eläin-tuumoreihin CDF-j -hiiriin istutettiin mtrapentoneaalisesti (i.p.) 1 x 10 -solua/ hiiri L1210-soluja. 24 tunnin jälkeen hiirille annettiin keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä intraperitoneaalisesti kerran päivässä 10 päivän ajan ja seurattiin 45 päivää.
Tuumoria ehkäisevä vaikutus esitettiin selviytymispäivien (T/C, %) pidentyvyydellä. kontrollihiirien selviytymispäivien suhteen, joihin oli ruiskutettu fysiologista suolaliuosta. Taulukossa 1 numeroitujen yhdisteiden tulokset on esitetty taulukossa 2.
Vertailuyhdisteinä on käytetty daunomysiiniä, adriamysiiniä sekä FI-patenttijulkaisusta tunnettua 4’-O-tetrahydropyranyylidaunomysii-nin b-isomeeriä (4'-0-PD-b), joka kemiallisesti on läheisin Taulukossa 2 esitetylle parhaalle yhdisteelle 10-b (41-O-6-metPD-b).
Il 68057 19
Taulukko 2
Keksinnön mukaisten johdannaisten tuumoria ehkäisevä vaikutus _Annos (mg/kg/päivä)____
Yhdisteet N.ot_5_2,5 1 , 25 0,625 0,31 0,1 5 DAM (vertailu) Tox. 138* 191 1Π5 132 118 ADM (vertailu) 189* 351 272 239 147 130 4'-0-PD-b (vertailu) 320 256 122 115 103 90 1-a 225 239 228 195 203 1- b 241 218 220 184 145 2 314 360 179 136 111 105 2- a 212 288 189 135 115 115 2-b 256 230 154 141 128 122 3 141 118 118 106 88 100 H-a 108 277 145 127 101 96 4- b 211 151 157 127 108 108 5- a 163 138 125 119 100 100 5- b 288 138 119 106 100 100 6- a 257 151 125 112 105 105 6- b 303 158 118 105 118 99 7- a 125 125 118 99 92 105 7- b 118 105 112 112 105 105 8- a 184 125 118 105 99 105 8-b 145 125 105 105 105 105 9 346 160 111 111 105 99 10-a 232 125 106 100 100 100 10-b 463 131 113 106 100 94 12 131 106 100 100 100 100 13-a 217 157 102 104 96 96 13- b 247 133 112 108 96 90 14- a 144 116 116 110 103 110 14-b 188 151 110 110 96 103 20 68057 _Annos (mg/kg/päivä)_
Yhdisteet n:ot_5 2,5 1 ,25 0,625 0,31 0,15 1 5-a 1 56 1 1 9 1 00 1 00 1 00 1 00 1 5-b 1 88 11 3 1 06 1 00 1 00 1 00
Huom. DAM = daunomysiini, ADM = adriamysiini *: toksinen
Hiirten toksisen kuoleman ja painohäviön esittävien taulukoiden 2 ja 3 tuloksista nähdään, että keksinnön mukaisesti valmistetut johdannaiset ovat 1/2 - 1/3 alhaisempia toksisuudessa kuin adriamysiini ja daunomysiini ,jotka ovat alkuyhdisteenä ja lähtöaineena keksinnössä.
(2) Estävä vaikutus kasvuun ja nukleiinihappobiosynteesiin viljellyissä L1210-leukemia-soluissa L1210-soluja (5 x 10^ solua/ml) istutettiin RPMI 1640-väliaineeseen (Rosewell Park Memorial Institute 164-0), joka sisälsi 20% vasikan seerumia ja viljeltiin 37 °C:ssa keksinnön mukaisten yhdisteiden läsnäollessa, joita oli 0,1 ja 0,5 /ug/ml, CC^-viljelykaapissa.
Solujen määrä laskettiin ajoittain ja kontrollin 50% kasvun estopitoi-suus määritettiin. Tulokset on esitetty taulukossa 3.
Edelleen keksinnön mukaisten yhdisteiden 50%:n estopitoisuutta tutkittiin nukleiinihappobiosynteesiin seuraavasti: 1x10 solua/ml L1 21 0 soluja suspendoitiin RPMI-väliaineeseen, joka sisälsi 10% vasikan seerumia, esiviljeltiin 37 °C:ssa 1..2 tuntia C09-viljelykaapissa ja sitten keksinnön mukaiset yhdisteet lisättiin 1 .... . . . 14 väliaineeseen eri pitoisuuksissa. 15 min:n viljelyajan jälkeen ΟΙ 4 uridiinia (0,05 yuCi/ml) tai C-tymidiiniä (0,05 /uCi/ml) lisättiin j.a pidettiin viljelykaapissa 37 °C:ssa 60 min. 10%:ista trikloori-etikkahappoa (TCA) lisättiin idätysaineeseen reaktion pysäyttämiseksi ja happoon liukenemattomien aineiden saostamiseksi ja sitten sakka pestiin kolme kertaa 5...10%:isella TCA:11a, joka liukenee muurahaishappoon. Happoon liukenemattomien aineiden radioaktiivisuus mitattiin ja ilmaistiin lisäyksen 50%:n estopitoisuutena.
Tulokset nähdään taulukosta 3.
21 68057
Taulukko 3
Estävä vaikutus kasvuun ja nukleiinihapposynteesiin viljellyissä L1210-soluissa IDrn (g/ml) L1210-soluja vastaan
Yhdisteet n:ot -
Kasvu (2 päivän _kuluttua)_DNA_RNA_ DAM 0,036 0,3 1,7 ADM 0,018 1,25 0,49 2-a 0 ,01 5 0 , 5 0,1 9 2-b 0,01 5 0,54 0,1 9 3 0,04 0,56 0,29 4-a 0 ,01 5 0,36 0 ,1 3 4- b 0,01 0,43 0,18 5- a 0,04 1,9 0,52 5- b 0,05 1,5 0,37 6- a 0,025 0,85 0,32 6- b 0,03 0,5 0,15 7- a 0,38 >10,0 2,5 7- b 0,52 >10,0 2,8 8- a 0,04 1,3 0,43 8-b 0,06 1,3 0,32 9 0,01 7 0,41 0,1 7 1 Q-a 0,04 0,62 0 ,3 10-b 0,025 0,8 0,33 12 0,095 0,93 0,44 13-a 0,025 0,34 0,13 13- b 0,03 0,65 0,29 14- a 0,08 0,93 0,37 14- b 0,075 1 ,4 0,6 15- a 0,08 1,4 0,5 15-b 0,06 0,8 0,28
Huom: DAM = daunomysiini, ADM = adriamysiini 22 68057 (3) Estävä vaikutus erilaisten mikro-organismien kasvuun
Kaavan I yhdisteillä ja niiden ei-toksisilla happoadditiosuoloilla on merkittävä bakteerien lisääntymistä estävä vaikutus, mikä on samankaltainen kuin adriamysiinin vaikutus useita mikro-organismeja vastaan, kuten Staph, aureus, Bacillus subtilis, B. cereus, B. megaterium,
Sareina lutea, Micrococcus flavus, Corynebacterium bovis, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Mycobacterium smegmatis ja Candida albicans .
Terapeuttinen käyttö
Kuten yllä mainittiin, kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden ei-toksiset happoadditiosuolat ovat uusia antibiootteja, joita voidaan käyttää sekä ihmisiin että eläimiin, ja niissä on siis huomattava estävä vaikutus pahanlaatuisiin nisäkkäiden tuumoreihin, mukaanlukien sekä kiinteisiin että vetisiin tyyppeihin.
Keksinnön erään näkökannan mukaan saadaan aikaan menetelmä nisäkkään terapeuttista hoitoa varten, jossa nisäkkäässä on mikrobinen infektio (etenkin gramma-positiivinen bakteeri-infektio) tai pahanlaatuinen kasvaimen (s.o. kiinteä tai vetinen tuumorityyppi kuten L1210 leukemia), missä menetelmässä annetaan kaavan I yhdisteen tai sen ei-toksisen happo additiosuolan tai näiden seoksen vaikuttava antimikrobinen tai tuumoria estävä annos.
Erään toisen keksinnön mukaisen näkökannan mukaan saadaan aikaan farmaseuttinen koostumus, mikä sisältää kaavan I yhdisteiden tai niiden seoksen tai niiden ei-toksisen happoadditiosuolan terapeuttisesti vaikuttavan antimikrobisen tai tuumoria estävän määrän yhdistettynä farmaseuttiseen kantoaineeseen tai laimennusaineeseen. Tällaiset koostumukset voidaan tehdä missä tahansa farmaseuttisessa muodossa, jotka ovat sopivia parenteraaliseen annostukseen.
Parenteraalisen annostuksen valmisteet sisältävät steriilejä vesipitoisia tai vedettömiä liuoksia, suspensioita tai emulsioita. Ne voidaan valmistaa myös steriilien kiinteiden koostumusten muodossa, jotka voidaan liuottaa steriiliin veteen, fysiologiseen suolaveteen tai johonkin muuhun steriiliin, ruiskuna annettavaan aineeseen välittömästi ennen käyttöä.
23 68057
On selvää, että kulloinkin parhaimpana pidetyt käytettävät annos-määrät vaihtelevat käytettävän erityisen yhdisteen, muodostetun erityisen koostumuksen, käyttötavan ja hoidettavan erityisen paikan, eläimen tai ihmisen ja taudin mukaan. Yleensä yhdisteet ruiskutetaan intra-peritoneaalisesti, laskimon sisäisesti, ihonalaisesti tai paikallisesti nisäkkäisiin ja laskimon sisäisesti tai paikallisesti ihmiseen. Alan ammattihenkillöiden on otettava huomioon useita tekijöitä, jotka muuttavat lääkkeen vaikutusta, esim. ikä, ruumiinpaino, sukupuoli, dieetti, annosaika, annostie, erityisnopeus, potilaan tila, lääkeyhdistelmät, reaktioherkkyydet ja taudin vakavuus. Annostus voidaan antaa keskeytymättä tai jaksottain maksimaalisesti siedetyn annoksen puitteissa. Optimaaliset annostusmäärät olosuhteiden määrättyä yhdistelmää varten voivat alan ammattihenkilöt varmistaa käyttämällä tavanomaisia annostuksen määritystestejä yllä olevien suuntaviivojen puitteissa.
Ennen esimerkkien selitystä esitetään esimerkkinä 14-0-asyloidun adriamysiinin valmistamiseksi, jota käytetään lähtöaineena 14-0-asyyli-4'-0-eetteröidyn adriamysiinin valmistamiseksi, 14-0-asetyyli-adria-mysiinin valmistuksen kokeellinen suoritusmuoto. Muut keksinnön lähtöaineena käytettävät 14-0-asyloidut adriamysiinit voidaan valmistaa tämän suoritusmuodon mukaisesti.
Koe 1 (1) 14-bromodaunomysiini-dimetyyliketaali-dihydrokloridi 230 mg (0,41 mmoolia) daunomysiini-hydrokloridia liuotettiin 1C ml:aan absoluuttista metanolia ja lisättiin 20 ml dioksaania. Seoksen annettiin seistä 2...3 tuntia 22...23 °C:ssa, ja sen jälkeen lisättiin tipoittain 0,88 ml (0,55 mmoolia) 10%:ista kloroformia sisältävää bromi-vesipitoista liuosta sekoittamalla. Reaktioseos haihdutettiin 5 ml:aan alipaineessa ja tämän jälkeen lisättiin 15 ml kuivaa eetteriä, jolloin saatiin oranssinpunainen sakka suodatuksen avulla. Sakka pestiin kolme kertaa 3 ml:11a eetteriä ja kuivattiin. 227 mg 14-0-bromidaunc-mysiini-dimetyyli-ketaalin hydrokloridisuolaa, jonka sulamispiste oli 175...178 °C, saatiin 98%:n saannolla.
(2) 14-0-asetyyli-adriamysiinin p-tolueenisulfonaatti tai hydrokloridisuola 207 mg (0,3 mmoolia) 14-bromodaunomysiini-dimetyyliketaali-hydrokloridi- 2“ 68057 suola suspendoitiin 100 ml:aan kuivaa asetonia, tämän jälkeen lisättiin 0,4 g kuivaa natriumasetaattia ja paluutislattiin 1 tunti sekoittamalla. Reaktioseos suodatettiin epäpuhtauksien poistamiseksi ja suodate haihdutettiin alipaineessa. Tähde laitettiin seokseen, joka sisälsi 30 ml kloroformia ja 20 ml 0,05N hydrokloorihappoa. Näin saatu hapan vesipitoinen kerros neutraloitiin natriumvetykarbonaatilla ja sitten uutettiin uudestaan kloroformilla. Punertava kloroformikerros kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin n. 5 ml:aan alipaineessa ja suolamuodon oranssi sakka muodostettiin lisäämällä 40 mg p-tolueenisulfonihappoa tai ekvivalenttinen määrä hydrokloorihappoa vastaavan happoadditiosuolan suolanmuodostusmenetelmän mukaisesti. Muodostunut sakka suodatettiin ja pestiin eetterillä, jolloin saatiin 160 mg 14-0-asetyyli-adriamysiinin p-tolueenisulfonaattisuola, jonka sulamispiste oli 165...168 °C. Hydrokloorisuolan kohdalla voidaan saada suunnilleen sama määrä yhdistettä.
Seuraavat esimerkit on tarkoitettu vain havainnollistamista varten, eivätkä ne rajoita mitenkään keksinnön piiriä. Tässä esimerkissä liuottimen suhde seokseen on ilmoitettu tilavuuden suhteena tilavuuteen ja nesteen %-määrä nesteeseen on esitetty tilavuus/tilavuutena ja kiinteän aineen suhde nesteeseen on ilmaistu painotilavuutena, mikäli muuta ei ole esitetty.
Seuraavassa on esitetty NMR:n ominaisuuksien lukemisen ja paikallistamisen helpottamiseksi adriamysiinin konfiguraatio, jossa on esitetty hiiliatomien paikat.
1 j?12 °11 10 2 14 2 C'CH20H || | 9^0Η OCHg 0 OH 7
P
Adriamysiini io nh2 2 25 6 8 0 5 7
Esimerkki 1
Menetelmä 14-0-asetyyli-4'-O-tetrahydropyranyyli-adriamysiini a:n ja b:n valmistamiseksi 155 mg 14-0-asetyyli-adriamysiinin p-tolueeni-sulfonaattisuclaa tai ekvivalenttinen määrä hydrokloridisuolaa liuotettiin 2,0 ml:aan kuivattua dimetyyliformamidia ja lisättiin tämän jälkeen 2,0 ml 3,4-dihydro-2H-pyraania ja pieni määrä p-tolueenisulfonihappoa, ja annettiin seistä huoneen lämpötilassa yön yli. Tutkittaessa tuotetta ja jäljelle jäänyttä lähtöainetta piihappogeeli-ohutkerroskromatografiällä (liuotinjärjestelmä; kloroformi-metanoli = 7:1), voitiin havaita kahden uuden yhdisteen muodostuminen, joiden Rf-arvot olivat kohdissa 0,24 ja 0,36, lähtöaineen hävitessä, jonka Rf-arvo oli 0,04. Reaktioseos uutettiin 20 ml :11a kloroformia ja vettä. Vesipitoiseen kerrokseen lisättiin määrä natriumvetykarbonaattia vesipitoisen kerroksen pH-arvon asettamiseksi arvoksi 7...8 ja se uutettiin kloroformilla.
Sen jälkeen kun kloroformiuute oli kuivattu ja haihdutettu alipaineessa, muodostuva tähde levitettiin preparatiivisella piihappogeeli-ohutkerros-levylle ja kehitettiin kloroformi-metanoli-seoksella (7:1), jolloin saatiin 14-0-asetyyli-41-O-tetrahydropyranyyli-adriamysiini a ja b vastaavasti seuraavasti:
Yhdiste a (Rf: 0,24) saanto 24 mg
Molekyylipaino 669,68
Sulamispiste (°C) 185...195
Ominaiskierto (C = 0,2 kloroformissa) rajl7 °C + 183° UV- ja näkyvä absorptiospektri 22s(335), 234(515) metanolissa no3/360^’ 289^130^ 480(1 45) , 496(1 45)
Xmax (Ej% ) 532(90), 576(20) nm 1 cm PMR (CDC13, ppm): 1,28(6'-H), 1,50-1,85 (pyraani kohdassa 3-H - 5-H) 2,21(OAc), 4,05(4'-OMe), 4,42 (pyraani, anomeerinen) 5,18(14-H), 5,26(11-H), 5,54(7-H), 7,27-8,03 (1-H-3-H) 26
Yhdiste b (Rf: 0,36) saanto 34 mg 68057
Molekyylipaino: 669,68
Sulamispiste (°C) 180...190
Ominaiskierto (C = 0,2 kloroformissa): Γa.1 q2 °C + 1 54° UV- ja näkyvä absorptiospektri metanolissa 222s(335), 234(510) 10 253(350), 289(130)
Xmax (E' 0 ) 481(140), 495(140) m 532(85), 576(20)
PMR (CDC13, ppm) 1,37(6'-H), 1,40-2,0C
(pyraani), 2,21(OAc), 4,08(4-OMe), 4,75(pyraani, anomeerinen), 5,18(14-H), 5,25(1*-H), 5,53(7-H), 7,30-8,06(1-H-3-H)
Esimerkki 2
Menetelmä 14-0-isobutyloyyli-41-O-tetrahydropyranyyli-adriamysiini a:n ja b:n valmistamiseksi 104 mg (0,13 mmoolia) 14-0-isobutyloyyli-adriamysiinin p-tolueeni-sulfonaattia liuotettiin 2,0 ml:aan kuivattua dimetyyliformamidia, lisättiin 2,0 mg dihydropyraania ja p-tolueenisulfonihappoa katalyytiksi ja annettiin seistä 15 tuntia huoneenlämpötilassa. Tuotteet todettiin ohutkerroskromatografiällä (liuot injärjestelmä, kloroformi-metanoli = 9:1) Rf-arvoissa 0,38 ja 0,45. Reaktioseos kaadettiin 20 ml:aan vettä, neutraloitiin natriumvetykarbonaatilla ja uutettiin 3 0 ml :11a kloroformia. Kloroformikerros kuivattiin vedettömän natrium sulfaatin päällä ja haihdutettiin kuivaksi alipaineessa. Muodostunut tähde kehitettiin ja puhdistettiin ohutkerroskromatografiällä. Saatii: 22,5 mg yhdisteen a punaista jauhetta Rf-arvon 0,38 fraktiosta.
Saanto 24%, sulamispiste (°C) 155...161 PMR (CDC1-, ppm): 1,24(H-6'), 1,29(isobutyyli) 4,06(41-OMe), 4,40 (pyraani, anomeerinen), 5,10(H-14), 5,25(1'-H), 5,51(7-H), 7,30-8,07(1-H-3-H) ja 22,7 mg yhdisteen b punaista jauhetta saatiin Rf-arvon 0,45 fraktiosta .
27 6 8 0 5 7
Saanto 24%, sulamispiste (°C) 169... 174 PMR (CDC1q, ppm) 1,25(isobutyyli), 1,37(6'-H), 1,40-2,00(THP), 4,08(4-OMe), 4,75(pyraani, anomeerinen), 5,22(14-H) , 5,25(1 ’-K), 5,55 (7-H), 7,29-8,10(1-H - 3-H)
Esimerkki 3
Menetelmä 14-0-fenyyliasetyyli-4'-O-tetrahydropyranyyli-adriamysiini a:n ja b:n valmistamiseksi 80 mg (0,096 mmoolia) 14-0-fenyyliasetyyli-adriamysiinin p-tolueeni-sulfonaattia liuotettiin 2,5 ml:aan kuivattua dimetyyliformamidia, lisättiin 0,5 ml dihydropyraania ja pieni määrä p-tolueenisulfoni-happoa ja annettiin seistä huoneenlämpötilassa. Tuotteiden muodostus, joiden Rf-arvot olivat 0,39 ja 0,48, todettiin ohutkerroskromato-grafialla käyttämällä kloroformi-metanoli-liuotinjärjestelmää (9:1) ja lähtöaine hävisi selvästi 4 tunnin kuluttua. Reaktioseos kaadettiin 20 ml:aan 1%:ista natriumvetykarbonaatti-vesiliuosta ja uutettiin 3 0 ml :11a ja jälleen 10 ml:11a kloroformia. Kloroformikerrokset yhdistettiin, pestiin neljä kertaa vedellä, kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin kuivaksi. Syntynyt jähmä kehitettiin preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä käyttämällä silikageelilevyä (2 mm paksu, 20x20 cm) ja kloroformi-metanoli-liuotin-järjestelmää (9:1) puhdistamiseen. Rf-arvon 39 kaista raaputettiin pois ohutkerrokselta, uutettiin kloroformi-metanoli-secksella (1:1) ja haihdutettiin kuivaksi. Saatiin 27 mg yhdistettä a punaisena j auheena.
Saanto 37%, sulamispiste (°C) 156...163 PMR (CDCl,, ppm) 1 ,2 5(H-6 f), 1 ,40-2 , 00 (tetra- hydropyraani); 3,80 ja 7,36 (-CH,-® ), 4,02( 4-OMe) , 4,35(pyraani , anomeerinen), 5,21(H-14), 5,25(1’-H), 5,50(7-H), 7,30-8,02(1-H - 3-H) 20,2 mg yhdistettä b saatiin punaisena jauheena Rf-arvon 0,48 frak tiosta yhdisteen a menetelmän mukaisesti.
28 6 8 0 5 7
Saanto 28%, sulamispiste (°C) 159...165 PMR (CDClg, ppm) 1,37(6’-H), 1,45-2,00(pyraani), 3,80 ja 7,32 (-CHg-^Ö^ ) , 4,05(4-0Me), 4,73 (pyraani, anomeerinen), 5,25(14H, 1'-H), 5,50(7-H), 7,30-8,06(1-H - 3-H)
Esimerkki 4
Menetelmä 4'-O-tetrahydrofuranyyli-adriamysiinin valmistamiseksi (a) 190 mg (0,25 mmoolia) 14-0-asetyyli-adriamysiini-p-tolueeni-sulfonaattia liuotettiin 10 ml:aan kuivattua dimetyyliformamidia, lisättiin 0,4 ml dihydrofuraania ja p-tolueenisulfonihappoa katalyytiksi, ja annettiin seistä 3,5 tuntia huoneenlämpötilassa (4'-0~tetra-hydrofuranylointi). Reaktiotuotteen muodostusta, jonka Rf-arvo oli 0,24...0,27 ja lähtöaineen häviämistä tutkittiin silikageeli-ohut-kerroskromatografiällä käyttämällä kloroformi-metanoli-liuotinjärjes-telmää (9:1). Reaktioseos kaadettiin 100 ml:aan vettä, neutraloitiin natriumvetykarbonaatilla ja uutettiin 60 ml :11a kloroformia. Kloro-formikerros kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä, haihdutettiin kuivaksi alipaineessa ja kehitettiin preparatiivisella ohutkerros-kromatografiällä käyttämällä kahta silikageeli-levyä (20x20 cm, 2 mm paksuus) ja kloroformi-metanoli-liuotinjärjestelmää (9:1). Rf-arvon 0,24...0,27 kaista raaputettiin pois silikageeliohutkerrokselta, uutettiin kloroformi-metanoli-seoksella (1:1) ja haihdutettiin kuivaksi. Saatiin 66,8 mg 14-0-asetyyli-4’-O-tetrahydrofuranyyli-adriamy-siiniä punaisena jähmänä.
Saanto 40% PMR (CDClg, ppm) 1 ,23-1 ,34(6'-H), 1,70-2,12 (furaani), 2,20 (asetyyli), 4,06(4-OMe), 5,20(14-H), 5,36(furaarii, anomeer inen), 5,51(7-H) (b) 41,0 mg 14-0-asetyyli-4*-O-tetrahydrofuranyyli-adriamysiiniä liuotettiin 10 ml:aan metanolia ja 3 ml:ssa vettä sekoittamalla, lisättiin 10%:ista kaliumkarbonaattiliuosta liuoksen muuttamiseksi sinivioletiksi (pH 10...11) ja annettiin seistä 30 min. (hydrolyysi). Rf-arvon laskua tarkasteltiin silikageeliohutkerroskromatografiällä käyttämällä kloroformi-metanolin (1:1) liuotinjärjestelmää. Reaktio- 29 6 8 0 5 7
Reaktioseos neutraloitiin lisäämällä pieni palanen hiilihappojäätä ja uutettiin kloroformilla. Kloroformikerros pestiin vedellä, kuivattiin ja haihdutettiin kuivaksi. Syntynyt tähde puhdistettiin prepara-tiivisella ohutkerroskromatografiällä kohdan (a) menetelmän mukaisesti. Saatiin 16,3 mg 4’-O-tetrahydrofuranyyli-adriamysiiniä punaisena jauheena.
Saanto 43%, sulamispiste (°C) 189...194 (hajaantuminen) PMR (CDC13, ppm) 1 , 25-1 , 27( 6·-H), 1,67-2,30 furaani), 4,07-4,08(4-H), 5,17 ja 5,38(furaani, ano-meerinen), 5,30(1'-H), 5,51 (7-H), 7,30-8,07(1-H - 3-K)
Esimerkki 5
Menetelmä 4T-O-tetrahydrofuranyyli-adriamysiini a:n ja b:n valmistamiseksi 40 mg esimerkissä 4 saatua 4'-O-tetrahydrofuranyyli-adriamysiiniä kromatografoitiin preparatiivisesti käyttämällä uudelleen silikageeliä (Merck Co) ja kloroformi-metanolin liuotinjärjestelmää (15:1). Vähemmän kuin 1 mg levyä kohden levitettiin silikageelilevylle (0,25 mm paksu, 20x20 cm) ja kehitettiin kolme kertaa hyvän erotuksen aikaansaamiseksi. Kaista, joka vastasi arvoa 0,20, raaputettiin pois silika-geelilevyltä, eluoitiin kloroformi-metanolilla (1:1) ja haihdutettiin kuivaksi. Syntynyt yhdiste a painoi 11,0 mg ja siinä oli seuraavat ominaisuudet:
Sulamispiste (°C) 189...191, /"af _7β + 175° (CHClg, C = 0,2) PMR (CDClg, ppm) 1 , 2 5(6'-H), 1 , 67-2,37 (furaani) 4,07(4-H), 5,17(furaani- ano-meerinen), 5,30(1'-H), 5,51 (7-H), 7,30-8,06(1-H - 3-H)
Rf-arvon 0,22 fraktiot painoivat 12,1 mg yhdistettä b ja sen ominaisuudet olivat seuraavat:
Sulamispiste (°C) 190...192 /« 7. + 150° (CHC1„, U C= of 2) PMR (CDC13, ppm) 1 ,27(6'-H), 1 ,67-2 ,30(furaani), 4,0 8 ( 4-H), 5,30(1 ’-H), 5,38 (furaani, anomeerinen), 5,51 (7-H), 7,30-8,07(1-H - 3-H) 30 6 8 0 5 7
Esimerkki 6
Menetelmä 4'-0-(6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyli)-adriamysiinin valmistamiseksi (a) 150 mg (0,18 mmoolia) 14-0-fenyyliasetyyli-adriamysiinin p-tolueeni· sulfonaattia liuotettiin 2,0 ml:aan kuivaa dimetyyliformamidia, lisättiin 0,2 ml 2-asetoksimetyyli-3,4-dihydro-2H-pyraania ja 15 mg (0,C9 mmoolia) p-tolueenisulfonihappoa ja annettiin seistä 24 tuntia huoneenlämpötilassa / 4'-0-(6-asetoksimetyylitetrahydropyranylointi) 7. Lähtöaineen ja tuotteen täplät, joissa Rf-arvot oli 0,51, todettiin reaktio-seoksessa silikageeliohutkerroskromatografiällä käyttämällä kloroformi-metanolin liuotinjärjestelmää (9:1). Reaktioseos kaadettiin 20 ml:aan vettä, neutraloitiin natriumvetykarbonaatilla ja uutettiin kaksi kertaa 3 0 ml :11a kloroformia. Kloroformikerros kuivattiin vedettömän natrium-sulfaatin päällä ja kromatografoitiin 10 g:n silikageelipylväällä (Merck Co Kiesel gel 100), ja pylväs pestiin 100 ml:lla kloroformia. Tuote eluoitiin sitten kloroformi-metanoli-seoksella (10:1) ja todettiin ohutkerroskromatografiällä. Rf-arvon 0,51 fraktio koottiin, haihdutettiin kuivaksi ja saatiin 100,2 mg 14-0-fenyyliasetyyli-41-0-(6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyli)-adriamysiiniä punaisena jähmänä.
Saanto 68% PMR (CDC13, ppm) 1,24-1 ,34(6'-H), 2,08(asetyyli), 3,83, 7,40(fenyyliasetyyli) , 4,08(4'-H), 4,95(pyraani,ano-meerinen), 5,25(14-H), 5,54(7-H) 7,30-8,08(1-H - 3-H) (b) Sitten yllä mainitulla tavalla saatu substanssi liuotettiin 20 ml:aan asetonia sekoittamalla, lisättiin 10 ml vettä ja 0,5 ml 10%:ista kaliumkarbonaattia ja hydrolysoitiin 30 min. Rf-arvon 0,41 tuote tutkittiin ohutkerroskromatografiällä. Pala hiilihappojäätä lisättiin reaktioseokseen sen neutraloimiseksi ja se tislattiin asetonin poistamiseksi alipaineessa. Syntyvä vesipitoinen kerros uutettiin kolme kertaa 10 ml:11a kloroformia kulloinkin. KlorofDrmikerrokset yhdistettiin, pestiin vedellä, kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin kuivaksi, jolloin saatiin punainen jähmä.
Jähmä puhdistettiin edelleen preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä käyttämällä silikageeliä (Merck Co., 2 mm paksuus ja 20x20 cm, yksi levy) ja kloroformi-metanolin liuotinjärjestelmää (9:1) ja 31 68057 uutettiin uudestaan Rf-arvon 0,41 fraktiosta. Saatiin 26,9 mg 41-0-(6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyli)-adriamysiiniä punaisena jauheena .
Saanto 31%, sulamispiste (°C) 174...178 PMR (CDC13, ppm) 1 ,1 9-1 ,40(6 '-H), 2,06, 2,10 (OAc), 4,11(4-OMe) , 4,78(14-H), 5,55(7-H), 7-35-8,10(1-H - 3-H)
Esimerkki 7
Menetelmä 41-0-(1-etyylioksietyyli)-adriamysiini a:n ja b:n valmistamiseksi (a) 200 mg 14-0-fenyyliasetyyli-adriamysiinin p-tolueenisulfonaattia liuotettiin 4,0 ml:aan kuivaa dimetyyli-formamidia, lisättiin 0,2 ml etyyli-vinyyli-eetteriä ja p-tolueenisulfonihappoa katalyytiksi, ja annettiin seistä 1,5 tuntia huoneenlämpötilassa (41-O-etyylioksiety-lointi). Reaktioseoksen silikageeliohutkerroskromatografiällä (liuotin-järjestelmä; kloroformi-metanoli = 9:1) todettiin, että lähtöaine hävisi ja uudet tuotteet muodostuivat Rf-arvoissa 0,36 ja 0,39. Reaktioseos kaadettiin 20 ml:aan vettä, lisättiin natriumvetykarbonaattia pH-arvoa 8 varten ja uutettiin 60 ml:11a kloroformia. Kloroformikerros kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin punaista ainetta. Aine puhdistettiin preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä käyttämällä silikageeliä (2 mm paksuus, 20x20 cm, 2 levyä) ja kloroformi-metanolin (9:1) liuotinjärjestelmää, ja saatiin 134 mg 14-0-fenyyliasetyyli-41-0-(1-etyylioksietyyli)-adriamysiiniä Rf-arvon 0,36 - 0,39 kaistasta punaisena jauheena.
Saanto 76% PMR (CDClo, ppm) 1,21, 3,62(11-0-etyyli), 1,40 (2’-H), 3,81, 7,38(fenyyli-asetyyli), 4,02(4-0-metyyli), 5,64, 5,94(1’-H), 5,24(14-H), 5,50(7-H), 7,25-8,02(1-H - 3-H) (b) Sitten yllä olevan mukaisesti saatu yhdiste liuotettiin 40 ml:aan asetonia, lisättiin 20 ml vettä ja 150 mg vedetöntä kaliumkarbonaattia ja sekoitettiin hyvin (hydrolyysi). Silikageeli-ohutkerroskromatogra-fialla (liuotinjärjestelmä, kloroformi-metanoli = 9:1) todettiin, että Rf-arvojen 0,36 ja 0,39 substanssit hävisivät asteittain ja uudet 32 6 8 0 5 7 tuotteet muodostuivat Rf-arvoissa 0,28 ja 0,21. 20 min. reaktioajan jälkeen reaktioseos neutraloitiin palasella hiilihappojäätä ja tislattiin asetonin poistamiseksi. Syntyvä vesipitoinen kerros uutettiin kaksi kertaa 3 0 ml :11a kloroformilla kulloinkin ja kloroformikerros pestiin vedellä, kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin punainen tähde. Yllä mainitun menetelmän mukaisesti tähde puhdistettiin preparatiivisella silikageeli-ohutkerroskromatografiällä käyttäen kloroformi-metanoli-seosta (kerran suhteessa 15:1 ja kaksi kertaa suhteessa 9:1 hyvän erotuksen aikaansaamiseksi). Rf-arvon 0,21 kaista raaputettiin silikageeli-ohutkerrok-selta ja uutettiin kloroformi-metanoli-seoksella (1:1), ja uute haihdutettiin, jolloin saatiin 13,0 mg H'-0-(1-etyylioksietyyli)-adriamysiini a:ta punaisena jauheena.
Saanto 13%, sulamispiste (°C) 205...215 PMR (CDC1V ppm) 1,15, 3,58(1-OEt), 1,40(2'-H), 3,5 8(2’-H), 4,06(4-OMe) , 4,65(1 ’-H), 4,76(14-H), 5,25 (1’-H), 5,51(7-H), 7,25-8,07 (1-H - 3-H) 11,2 mg 4'-0-(1-etyylioksietyyli)-adriamysiini b:tä saatiin Rf-arvon 0,28 kaistasta.
Saanto 11%, sulamispiste (°C) 190...200 PMR (CDCIt, ppm) 1,22, 3,63(1'-OEt), 4,08(4-H), 4,76(14-H), 4,93(1'-H), 5,27 (1'-H), 5,50(7-H), 7,22-8,88 (1-H - 3-H)
Esimerkki 8
Menetelmä 41-0-(1-butyylioksietyyli)-adriamysiini a:n ja b:n valmistamiseksi (a) 145,6 mg 14-asetyyli-adriamysiinin p-tolueenisulfonaattia liuotet tiin seokseen, jossa oli 2 ml absoluuttista DMS0:a ja 4 ml absoluuttista dioksaania, lisättiin 1,6 ml n-butyyli-vinyyli-eetteriä ja edelleen lisättiin 0,396 ml 0,1N p-tolueenisulfonihappo-dioksaani-liuosta jääkylmissä olosuhteissa. 35 min:n sekoittamisen jälkeen huoneenlämpö-tilassa reaktioseos kaadettiin 50 ml:aan etyyliasetaattia ja pestiin kaksi kertaa 3 0 ml :11a 1%:ista natriumvetykarbonaattiliuosta kulloinkin ja kolme kertaa 30 ml :11a 5%:ista natriumkloridin vesipitoista liuosta kulloinkin. Vesipitoinen kerros uutettiin 50 ml:lla etyyliasetaattia, 33 6 8 0 5 7 ja liuotinuutteet yhdistettiin ja kuivattiin vedettömän natrium-sulfaatin päällä, ja haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin öljy-mäinen substanssi.
Öljymäinen substanssi kromatografoitiin silikageelipylväällä (Merck Art. 7734, 4 g, liuotin: (1) CHClg 60 ml, (2) CHClg : metanoli = 10:1 30 ml), jolloin saatiin 141 g kloroformi-metanoli-seoksen eluaatista. Tämä tuote puhdistettiin edelleen preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä (Merck Art. 5744, liuotinjärjestelmä: CHCl^ : metanoli = 10:1), jolloin saatiin 4'-G-(1-butyylioksietyyli)-adriamysiini a:ta ja b:tä.
Yhdiste a: 33,5 mg
Yhdiste b: 40,5 mg (b) Asyyli-radikaalin lohkaisu 40,5 mg 41 — 0 —(1-butyylioksietyyli)-adriamysiini b:tä liuotettiin 4 ml:aan metanolia ja 1 ml:ssa vettä ja lisättiin 0,23 ml 1N kalium-karbonaatin vesipitoista liuosta, jolloin liuoksen väri muuttui sini-violetiksi. 8 min. reaktioajan kuluttua reaktioseos neutraloitiin palasella hiilihappojäätä, lisättiin 60 ml vettä, uutettiin 30 ml :11a ja 20 ml:11a x 3 kloroformia, kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin alipaineessa. Preparatiivisella ohutkerroskromatograf iällä (Merck Art. 5744, liuotinjärjestelmä: CHCl^ : metanoli= 10:1) saatiin 14,2 mg 4·-0-(1-butyylioksietyyli)-adriamysiini b:tä ja 10,7 mg yhdistettä a.
Yhdiste a
Sulamispiste (°C): 168...175
Ominaiskierto (C=0,1 kloroformissa) /“a7p5 + 157° UV- ja näkyvä absorptiospektri 234(585), 251(405) metanolissa 288(155), 480(187) metanolissa 495(190), 530(116)
XmaxCEll) 575(19) nm 1 cm 34 68057 PMR (CDClg, ppm) 0,92 (t, 3H) -CH2CH3 1,31 (d, 3H) C51-CH3 1,38 (d, 3H) CU'-OCHCH3 2,91 (d, 1H)\ 3.21 (d, 1H);C10-CH2 4,03 (s, 3H) C4-0CH3 4.74 (s, 2H) C14-CH2 4,89 (q, 1 H) C4'-OCHCHg
5.22 (bs, 1 H) C7-H
5,48 (bs, 1 H) C1'-H
7,25-7,98 (m, 3H) aromaattinen protoni
Yhdiste b
Sulamispiste (°C) 155...160
Ominaiskierto (C=0,1 kloroformissa) CJ Q5 + 188° UV- ja näkyvä absorptiospektri 0,91 (t, 3H) -CH2CH3 metanolissa 1,27 (d, 3H) C5’-CH3 1 ,40 (d, 3H) C4’-OCHCHg 2,95 (d, 1H)' 3.26 (d, 1H)j C10_CH2 4,06 (s, 3H) C4-0CH3 4,61 (q, 1H) C4’-0CHCH3 4.74 (s, 2H) (C14-CH2
5.27 (bs, 1 H) C7-H
5,50 (bs, 1 H) C1 '-H
7,31-8,02 (m, 3H) aromaattinen protoni
Esimerkki 9
Menetelmä 41-0-(1-isobutyylioksi)-adriamysiini a:n ja b:n valmistamiseksi (a) 150 mg 14-0-asetyyli-adriamysiinin p-tolueenisulfonaattia liuotettiin 3 ml:aan vedetöntä dioksaania ja 1,5 ml:ssa dimetyyli-sulfoksidia, lisättiin 0,7 ml isobutyyli-vinyyli-eetteriä ja 0,3 ml 35 68057 0,1 N p-tolueenisulfonihappodioksaani-liuosta ja sekoitettiin 40 min huoneenlämpötilassa (23 °C). Reaktioseos laimennettiin 50 ml :11a etyyliasetaattia, pestiin tämän jälkeen 1%:isella natriumvetykarbo-naatin vesipitoisella liuoksella (30 ml x 2) ja vedellä (30 ml x 2), kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin alipaineessa. Syntyvä öljymäinen substanssi kromatografoitiin silikageeli-pylväällä (Merck Art. 7734, 4 g; CHCl^ —^ CHCl^: metanoli = 10:1), ja päätuotetta sisältävät fraktiot kerättiin ja haihdutettiin kuivaksi, jolloin saatiin 125,5 mg oranssia jauhetta. Jauhe alistettiin prepara-tiiviseen ohutkerroskromatografiaan (Merck Art. 5744, 12 levyä, CHC13 : metanoli = 10:1), erotusta ja puhdistusta varten ja saatiin 14-0-asetyy- li-4'-0-(1-isobutyylioksietyyli)-adriamysiini a:ta ja b:tä seuraavasti: yhdiste a: 40,4 mg yhdiste b: 51,7 mg (b) Asyyli-radikaalin lohkaisu C-14-asemassa 40,4 mg 14-asetyyli-4'—0-C1-isobutyylioksietyyli)-adriamysiini a:ta, joka saatiin kohdan (a) mukaisesti, liuotettiin 4 ml:aan metanolia, lisättiin 2 ml vettä ja 0,36 ml 1N kaliumkarbonaatin vesipitoista liuosta ja sekoitettiin 20 min. huoneenlämpötilassa. Reaktioseos neutraloitiin hiilihappojäällä, uutettiin 60 ml :11a kloroformia ja sitten pestiin 5%:11a natriumkloridin vesipitoisella liuoksella. Vesipitoinen kerros uutettiin edelleen kaksi kertaa 20 ml:11a kloroformia kulloinkin ja yhdistetyt kloroformiuutteet kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin kuivaksi. 35,3 mg syntynyttä tähdettä kromatografoitiin preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä (Merck Art. 5744, 4 levyä, CHC13:metanoli=10:1), jolloin saatiin 12,5 mg 4'-0-0-isobutyylioksietyyli)adriamysiini a:ta.
Sulamispiste (°C) 180...185 (hajaantuminen)
Ominaiskierto (C=0,1 kloroformissa) Γα7 p5 + 157° 36 6 8 05 7 PMR (CDCl3,.ppm) 0,93 (d, 6H) CH(CH3)2 1,32 (d, 3H) C5'-CH3 1,38 (d, 3H) C4'-OCHCH3 2,86 (d, 1H)s 3.16 (d, 1 H) } C1 0"ch2
3,66 (bs, 1H) C4'-H
4,02 (s, 3H) C4-OCH3 4.74 (s, 2H) C14-CH2 4,88 (q, 1H) C4'-0CHCH3
5.18 (bs, 1H) C7-H
5,48 (bs, 1 H) C1 ’-H
7,25-7,92 (m-3H) aromaattinen protoni 51,7 mg 14-0-asetyyli-4'-0-(1-butyylioksietyyli)-adriamysiini b:tä, joka saatiin kohdan (a) mukaisesti, liuotettiin 5 ml:aan metanolia, lisättiin 1,5 ml vettä ja 0,39 ml 1N kaliumkarbonaatin vesipitoista liuosta ja sekoitettiin 15 min huoneenlämpötilassa. Yhdisteen a menetelmän mukaisesti saatiin 18,1 mg 4'-0-(1-butyylioksietyyli)-adriamysiini b:tä.
Sulamispiste (°C) 175...180 (Hajaantuminen)
Ominaiskierto (C = 0,1 kloroformissa) /~a7^5 + 191° PMR (CDC13, ppm) 0,90 (d, 6H) CH(CH3)2 1 ,27 (d, 3H) C5'-CH3 1 ,40 (d, 3H) C4’-0CHCH3 2,84 (d, 1 H) 3.16 (d, 1 H) C10-CH2
3,26 (t, 2H) 0CH2CH
3,58 (bs, 1 H) C4'-H 4,01 (s, 3H) C4-0CH3) 4,6 0 (q, 1H) 4'-0CHCH3 4.74 (s, 2H) C14-CH2
5.18 (bs, 1H) C7-H
37 68057
5,48 (bs, 1 H) C1 '-H
7,25-7,90 (m, 3H) aromaattinen protoni
Esimerkki 1 0
Menetelmä 4'-0-(1-(6-metyyliheptyylioksi)etyyli)-adriamysiini a:n ja b:n valmistamiseksi (a) 150 mg 14-0-asetyyli-adriamysiinin p-tolueenisulfonaattia liuotettiin 2 ml:aan absoluuttista DMS0:a ja 4 ml:ssa absoluuttista dioksaa-nia, lisättiin 1, 6 ml 6-metyyliheptyyli-vinyyli-eetteriä ja 0,396 ml 0,1N p-tolueenisulfonihappo-dioksaaniliuosta jääkylmissä olosuhteissa ja sekoitettiin 45 min huoneenlämpötilassa. Esimerkin 8 kohdan (a) mukaisen menetelmän mukaisesti saatiin 14-0-asetyyli-4'-0-(6-metyyli-heptyylioksietyyli)-adriamysiini a:ta ja b:tä.
Yhdiste a: 32,7 mg yhdiste b: 57,4 mg (b) asyyli-radikaalin lohkaisu 44,2 mg 1 4-0-asetyyli-4'-0-(1 -(6-metyyliheptyylioksi)etyyli)-adriamysiini b:tä liuotettiin 5,8 ml:aan metanolia ja 1,3 ml:ssa vettä, lisättiin 0,39 ml 1N kaliumkarbonaattiliuosta, jolloin saatiin sini-violetti väri, ja annettiin seistä 6 min huoneenlämpötilassa. Esimerkissä 8 esitetyn kohdan (a) mukaisen menetelmän mukaisesti saatiin 20,1 mg 4'-0-(6-metyyliheptyylioksi)etyyli)-adriamysiini b:tä. 13 mg yhdistettä a saatiin samalla tavoin kuin yllä on mainittu.
Yhdiste a
Sulamispiste (°C) 143...147
Ominaiskierto (C=0,1 kloroformissa) /"a7p5 + 178° PMR (CDC13, ppm) 1,32 (d, 3H) C5'-CH3 1,38 (d, 3H) C4'-0CHCH3 2,96 (d, 1 H) 3,26 Cd, 1 H)j C10-CH2 4,06 (s, 3H) C4-0CH3
4,75 (s, 2H) C14-2H
4,90 (q, 1 H) C4'-0CHCH3 ΤΓ- - · 38 68057
5,28 (bs, 1 H) C7-H
5.51 (bs, 1 H) C1'-H
7,31-8,03 (m, 3H) aromaattinen protoni
Yhdiste b
Sulamispiste (°C) 145...150
Ominaiskierto (C= 0,1 kloroformissa) /- 725 + 1 83°
/ a/r - - D
PMR (CDClg, ppm) 1,27 (d, 3H) C5'-CH3 1,40 (d, 3H) C4'-OCHCHg 2,93 (d, 1 H) 3.25 (d, 1 H) C10-CH2 4,06 (s, 3H) C4-0CH3 4,61 (q, 1 H) C4'-0CHCH3 4,75 (s, 2H) C14-CH2
5.25 (bs, 1 H) C7-H
5.52 (bs, 1 H) C1'-H 7,30-8,00 (m, 3H) aromaattinen protoni
Esimerkki 11
Menetelmä 4'-0-(1-sykloheksyylioksietyyli)-adriamysiini a:n ja b:n valmistamiseksi (a) 210 mg 14-0-asetyyli-adriamysiinin p-tolueenisulfonaattia liuotettiin 4,2 ml:aan vedetöntä dioksaania ja 2,1 ml:ssa vedetöntä dimetyyli-sulfoksidia, lisättiin 0,84 mg sykloheksyyli-vinyyli-eetteriä ja 0,417 ml 0,1 N p-tolueenisulfonihappo-dioksaani-liuosta, ja annettiin seistä reaktiota varten sekoittamalla 20 min huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen reaktioseosta käsiteltiin samalla tavoin kuin esimerkin 8 kohdassa (a), jolloin saatiin 56,9 mg 14-0-asetyyli-4'-O-sykloheksyyli-oksietyyli-adriamysiini a:ta ja 60,7 mg 14-0-asetyyli-4’-0-sykloheksyyli-oksietyyli-adriamysiini btä* (b) asyyli-radikaalin poisto C-14-asemassa 56,9 mg 14-0-asetyyli-41-O-sykloheksyylioksietyyli-adriamysiini a:ta 39 68057 ja 60,7 mg 14-0-asetyyli-4'-sykloheksyylioksietyyli-adriamysiini b:tä, jotka oli saatu kohdassa (a), käsiteltiin samalla tavoin kuin mainittiin esimerkissä 8 (b), jolloin saatiin 20,7 mg oranssina jauheena 4 '-0-sykloheksyylioksietyyli-adriamysiini a:ta ja 24,2 mg oranssina jauheena 4'-O-sykloheksyylioksietyyli-adriamysiini btä vastaavasti.
Yhdiste a
Sulamispiste (°C) 175...182 (hajaantuminen)
Ominaiskierto (C = 0,1 kloroformissa) /"a7^5 + 178° PMR (CDClg, ppm) 1,32 (d, 3H) C5'-CH3 1,38 (d, 3H) C4'-0CHCH3 2,92 (d, 1Hn 3.23 (d, 1 H) J C1C_CH2 4,05 (s, 3H) 4-0CH3 4,76 (s, 2H) C14-CH2 4,97 (q, 1 H) C^'-OCHC^
5.23 (bs, 1 H) C7-H
5,49 (bs, 1 H) C1r-H
7,30-8,00 (m, 3H) aromaattinen protoni
Yhdiste b
Sulamispiste (°C) 177...181 (hajaantuminen)
Ominaiskierto (C=0,1 kloroformissa): /- 725
L 9f7D
PMR (CDC13, ppm) 1,26 (d, 3H) C5’-CH3 1,40 (d, 3H) C4'-0CHCH3 2,87 (d, 1 H) ) 3,18 (d, 1 H)j C1°-CH2 4,02 (s, 3H) 4-0CH3 4,68 (q, 1 H) 04’-00Η0Η3 40 68057 4,74 (s, 2H) C14-CH2
5,19 (bs, 1 H) C7-H
5,49 (bs, 1 H) C1'-H
7,26-7,94 (m, 3H) aromaattinen protoni
Esimerkki 12
Menetelmä 4’-0-(tetrahydrofuranyyli)-daunomysiinin valmistamiseksi 56 mg (0,1 mmoolia) daunomysiini-hydrokloridia liuotettiin kuivaan dimetyyliformamidiin, lisättiin 0,1 ml dihydrofuraania ja pieni määrä p-tolueenisulfonihappoa katalyytiksi, ja annettiin seistä 8 tuntia huoneenlämpötilassa (4’-O-tetrahydrofuranylointi). Reaktioseos kaadettiin 20 ml:aan vettä, lisättiin natriumvetykarbonaattia neutralointia varten, ja uutettiin kloroformilla. Kloroformikerros kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin kuivaksi, jolloin saatiin punaiset aineet. Tuotteen kaksi kaistaa, joiden Rf-arvot olivat 0,29 ja 0,31, todettiin preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä käyttämällä silikageeliä (Merck Co.) ja kloroformi-metanolin (9:1) liuotin-järjestelmää, mutta näitä kaistoja ei voitu täysin erottaa toisistaan.
Tuotetta vastaavat kaistat raaputettiin silikageelilevystä ja eluoitiin kloroformi-metanoli-seoksella (1:1) ja eluaatti haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin 12,4 mg 41-0-(tetrahydrofuranyyli)-daunomysii-niä punaisena jauheena.
Saanto 21%
Sulamispiste (°C) 201 ...204 (hajaantuminen) PMR (CDC13, ppm) 1,29(6'-H), 1,70-2,30(furaani- 3,4-H), 2,44(14-H), 4,11(4-H), 5,28(1'-H), 5,43(furaani, ano-meerinen), 5,54(7-H), 7,33-8,11 (1-H - 3-H)
Esimerkki 13
Menetelmä 41-0-(6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyli)-dauno-mysiinin valmistamiseksi 112 mg (0,2 mmoolia) daunomysiini-hydrokloridia liuotettiin 2,0 ml:aan kuivaa dimetyyliformamidia, lisättiin 15 mg p-tolueenisulfonihappoa ja 0,3 ml 2-asetoksimetyyli-3,4-dihydro-2H-pyraania ja annettiin seistä yön yli huoneenlämpötilassa (4’-0-(6-asetoksimetyylitetrahydropyrany- 41 68057 lointi). Reaktioseos kaadettiin 20 ml:aan 1%:ista natriumvetykarbo-naatin vesipitoista piuosta ja uutettiin 30 ml:ssa kloroformia.
Vesipitoinen kerros uutettiin kaksi kertaa 10 ml:lla kloroformia kulloinkin. Yhdistetty kloroformi-kerros pestiin neljä kertaa 10 ml: 11a vettä, kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin raaka tuote. Tuote kehitettiin preparatiivisella ohutkerroskromatogrammilla (2 mm paksuus, 20x20 cm, yksi levy) käyttämällä klorof ormi-inetanolin (9:1) liuotinj är j estelmää ja tuotetta vastaava kaista, jonka Rf-arvo oli 0,47, raaputettiin silikageeliohutkerrokselta ja uutettiin uudestaan kloroformi-metanoli-seoksella (1:1). Muodostunut punainen uute haihdutettiin kuivaksi ja saatiin 55,3 mg 4’-0-(6-asetoksimetyylitetrahydropyranyyli)-dauno-mysiiniä punaisena jauheena.
Saanto 40%
Sulamispiste (°C) 198...201 PMR (CDClg, ppm) 1 ,21 -1 ,42(6'-H), 2,07-2,11 (OAc), 2,43(14-H), 4,10(4-OMe), 5,53(7-H), 7,29-8,06(1H - 3-H)
Esimerkki 14
Menetelmä 41-0-(6-metoksitetrahydropyranyyli)-dauno-mysiini a:n ja b:n valmistamiseksi 112 mg (0,2 mmoolia) daunomysiini-hydrokloridia liuotettiin 3 ml:aan kuivaa dimetyyliformamidia, lisättiin 0,15 ml 2-metoksi-3,4-dihydro-2H-pyraania ja 10 mg p-tolueenisulfonihappoa ja annettiin seistä yön yli huoneenlämpötilassa (41-0-(6-metoksitetrahydropyranylointi). Reaktioseos kaadettiin 20 ml:aan vettä, asetettiin pH-arvoon 8 natrium-vetykarbonaatilla ja uutettiin neljä kertaa 10 ml:11a kloroformia kulloinkin. Kloroformiuutteet yhdistettiin, kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin päällä ja haihdutettiin kuivaksi, jolloin saatiin punainen tähde. Tähde puhdistettiin edelleen preparatiivisella ohut-kerroskromatografiällä käyttämällä silikageeliä (Merck Co. 2 mm paksuus, 20x20 cm, yksi levy) ja kloroformi-metanolin (9:1) liuotinjärjestelmää. Rf-arvon 0,38 kaista raaputettiin pois silikageelilevyltä ja uutettiin uudestaan kloroformi-metanoli-seoksella (1:1). Syntynyt punainen uute haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin 23,1 mg yhdistettä a punaisena jauheena.
Saanto 18%
Sulamispiste (°C) 189...191 68057 42 PMR (CDClg), ppm 1,29(6'-H), 2,40(3-H), 3,45(5'-OMe), 4,09(4-OMe), 4,83(1'-H), 5,30(1»-H), 5,58(7-H), 7,28-8,08(1-H - 3-H) 19,4 mg yhdistettä b saatiin punaisena jauheena saman menetelmän mukaisesti kuin yhdiste a.
Saanto 15%
Sulamispiste (°C) 198...191 PMR (CDClg, ppm) 1,39(6'-H), 2,44(14-H), 3,46 (pyraani-OMe), 4,11(4-H), 4,89 (pyraani,anomeerinen), 5,22(1'-H),5,53(7-H) , 7,28-8,14 (1-H - 3-H).
Esimerkki 15
Menetelmä 4'-0-(6-karbometoksitetrahydropyranyyli)-daunomysiinin valmistamiseksi 112 mg (0,2 mmoolia) daunomysiini-hydrokloridia liuotettiin 3,0 ml:aan dimetyyliformamidia, lisättiin 0,1 ml 2-karbometoksi-3,4-dihydro-2H-pyraania ja 34 mg (0,2 mmoolia) p-tolueenisulfonihappoa ja annettiin seistä 10 tuntia huoneenlämpötilassa pimeässä (4 1-0-6-karbometoksi-tetrahydropyranylointi). Reaktioseos kaadettiin 20 ml:aan vettä, saatettiin pH-arvoon 8 natriumvetykarbonaatilla ja uutettiin neljä kertaa 10 ml :11a kloroformia kulloinkin. Kloroformiuutteet yhdistettiin, pestiin kaksi kertaa vedellä ja kuivattiin vedettömän natrium-sulfaatin päällä. Kloroformiuute haihdutettiin alipaineessa, ja syntynyt tähde puhdistettiin preparatiivisella ohutkerroskromatogra-fialla käyttämällä silikageelilevyä (Merck Co) ja kloroformi-metanolin (9:1) liuotinjärjestelmää. Uudet tuotteet todettiin Rf-arvoissa 0,35 ja 0,37 ohutkerroskromatogrammilla 4 komponentin seoksena ja niitä ei voitu täysin erottaa. Vastaavat kaistat ohutkerroskromatogrammilla raaputettiin pois silikageelilevystä ja uutettiin kloroformi-metanoli-seoksella (1:1). Uute haihdutettiin kuivaksi, jolloin saatiin 25,9 mg punaista jauhetta.
Saanto 19%
Sulamispiste (°C) 190...193 43 68057 PMR (CDClg, ppm) 1 , 23-1 ,40( 6'-H), 2,43(14-H), 3,78(COOCHg), 4,09(4-OMe), 4,74, 5,07(pyraani,anomeerinen) 5,31(1'-H>, 5,54(7-H), 7,30-8,06(1-H - 3-H).
Esimerkki 16
Menetelmä 4 * -0-(1-etyylioksietyyli)-daunomysiini a:n ja b:n valmistamiseksi 112 mg (0,2 mmoolia) daunomysiini-hydrokloridia liuotettiin 3 ml:aan kuivaa dimetyyliformamidia, 0,1 ml:ssa etyyli-vinyyli-eetteriä ja 2 mg:ssa p-tolueenisulfonihappoa ja annettiin seistä 10 tuntia huoneenlämpötilassa (1-etyylioksietylointi). Tuotteen uudet täplät havaittiin Rf-arvoissa 0,31 ja 0,34 silikageeliohutkerroskromatogrammilla (liuotin-järjestelmä, kloroformi-metanoli = 9:1). Reaktioseos kaadettiin 20 ml:aan vettä, saatettiin pH-arvoon 8 natriumvetykarbonaatilla, ja uutettiin 30 ml:11a kloroformia. Kloroformikerros kuivattiin ja haihdutettiin alipaineessa. Syntynyt punainen tähde puhdistettiin preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä käyttämällä silikageeliä (Merck Co. paksuus 2 mm, 20x20 cm, yksi levy) ja kloroformi-metanolin (15:1) liuotinjärjestelmää. Rf-arvoa 0,31 vastaava kaista raaputettiin pois ja uutettiin kloroformi-metanoli-seoksella (1:1). Punainen uute haihdutettiin kuivaksi, jolloin saatiin 33,o mg punaista yhdistettä a. Saanto 27%
Sulamispiste (°C) 208...210 PMR (CDC13, ppm) 1 ,76 , 3,59(1f-OEt) , 1,39 (2'-H), 1 ,7 9(8-H), 2,41(14-H), 4,07(4-OMe), 4,64(1»-H), 5,25 (1'-H), 5,51(7-H), 7,25-8,07 (1-H - 3-H)
Rf-arvoa 0,34 vastaava kaista käsiteltiin myös saman menetelmän mukaisesti kuin yllä ja saatiin 31,8 mg yhdistettä b punaisena jauheena. Saanto 26%
Sulamispiste (°C) 200 ...204 PMR (CDClg, ppm) 1 ,20 , 3,64(1 '-OEt) , 1,40(2'-H) 2,41(14-H), 4,09(4-H), 4,94 (1 *-H) , 5,26(1’-H), 5,50(7-H), 7,26-8,08(1-H - 3-H) 44
Esimerkki 17 68057
Menetelmä 4'-0-(1-isobutyylioksietyyli)- daunomysiini a:n ja b:n valmistamiseksi 60 mg (0,106 mmoolia) daunomysiini-hydrokloridia liuotettiin 12 ml:aan absoluuttista THP:a ja 1,5 ml:ssa absoluuttista DMS0:a, lisättiin 1,2 ml 2-isobutyyli-vinyyli-eetteriä ja 0,21 ml 0,1N p-tolueenisulfoni-happo-THF-liuosta ja sekoitettiin kolme tuntia huoneenlämpötilassa. Reaktioseos liuotettiin 100 ml:ssa etyyliasetaattia, pestiin 100 ml:11a 5%:ista natriumkloridin vesipitoista liuosta, joka sisälsi 0,1 N natrium-vetykarbonaattia, ja pestiin edelleen 5%:isella natriumkloridin vesipitoisella liuoksella (100 ml x 2). Liuotinkerros kuivattiin vesipitoisen natriumsulfaatin päällä ja konsentroitiin alipaineessa.
Syntynyt öljymäinen aine käsiteltiin samalla tavoin kuin esimerkissä 16, jolloin saatiin 16,0 mg 4'-0-(1-isobutyylioksietyyli)-daunomysiini a:ta ja 19,1 mg 4'—O—(1-isobutyylioksietyyli)-daunomysiini b:tä.
Yhdiste a
Sulamispiste (°C) 143...148
Ominaiskierto (C= 0,1 kloroformissa) /"a7^5 + 190° PMR (CDC1-, ppm) 0,92 (d, 6H), CH(CH-)9 * ± 1 1 ,33 (d, 3H) C5'-CH3 1,37 (d, 3H) C4'-0CHCH3 2,41 (s, 3H) C13-CH3 2,90 (d, 1 H) ' 3,22 (d, 1H)j C10_CH2
3.27 (t, 2H) 0CH2CH
3,62 (bs, 1 H) C41-H
4,07 (s, 3H) C4-0CH3 4,89 (q, 1 H) C41-0CHCH3
5.28 (bs, 1 H) C7-H
5,52 (bs, 1 H) C1’-H
7,31-8,06 (m, 3H) aromaattinen protoni 45 68057
Yhdiste b
Sulamispiste (°C) 141...146
Ominaiskierto (C= 0,1 kloroformissa) /ä_7^5 + 185° PMR (CDC1,, ppm) 0,90 (d, 6H) CH(CH,)n o 3 2 1 ,25 (d, 3H) C5'-CH3 1 ,39 (d, 3H) C4'-0CHCH3 2,40 (s, 3H) C13-CH3 2,89 (d, 1 H)' 3,22 (d, 1H); C10-CH2
3.26 (t, 2H) 0CH2CH
3,54 (bs, 1H) C4’-H
4,06 (s, 3H) C4-0CH3 4,61 (q, 1 H) C4’-0CHCH3
5.27 (bs, 1 H) C7-H
5,52 (bs, 1 H) C1’-H
7,31-8,04 (m, 3H) aromaattinen protoni
Esimerkki 18
Menetelmä 41-0-(1-butyylioksietyyli)-daunomysiini a:n ja b:n valmistamiseksi 100 mg (0,177 mmoolia) daunomysiini-hydrokloridia liuotettiin seokseen, jossa oli 10 ml absoluuttista THF:a ja 2 ml absoluuttista DMS0:a, lisättiin 3 ml n-butyyli-vinyyli-eetteriä ja 0,88 ml (0,088 mmoolia) 0,1N p-tolueenisulfönihappo-THF-liuosta, sekoitettiin kaksi tuntia huoneenlämpötilassa. Esimerkin 17 mukaisen menetelmän mukaisesti erotettiin 27,1 mg 41-0-0-butyylioksietyyli)-daunomysiini a:ta ja 34,8 mg 4*-0-(1-butyylioksietyyli)-daunomysiini b:tä.
Yhdiste a
Sulamispiste (°C) 141...145
Ominaiskierto (C= 0,1 kloroformissa) /ä_7^5 + 167° i+6 6 8057 PMR (CDClg, ppm) 0,91 (t, 3H) -CH2CH3 1,32 (d, 3H) C5’-CH3 1 ,37 (d, 3H) C4'-OCHCH3 2,41 (s, 3H) C13-CH3 2,92 (d, 1H) 1 3.24 (d, 1H) ) C1°"CH2 3,54 (m. 3H) C4'-H, OCH2~ 4,07 (s, 3H) C4-OCH3 4,91 (q, 1H) C4'-OCHCH3
5,27 (bs, 1 H) C7-H
5.52 (bs, 1 H) C1 '-H
7,31-8,06 (m, 3H) aromaattinen protoni
Yhdiste b
Sulamispiste (°C) 138...142
Ominaiskierto (C=0,1 kloroformissa) /-.725 + 207° PMR (CDC13, ppm) 0,89 (t, 3H) -CH2CH3 1 ,27 (d, 3H) 05'-CH3 1.39 (d, 3H) C4’-OCHCH3 2.40 (s, 3H) C13-CH3 2,86 (d, 1H)) 3,20 (d, 1H)j C10-CH2 3.52 (m, 3H) C4'-H, OCH2- 4,06 (s, 3H) C4-0CH3 4,61 (q, 1H) C4'-OCHCH3 5.25 (bs, 1 H) C7-H 5,51 (bs, 1 H) C1 '-H 7,30-8,01 (m, 3H)
(I
Claims (5)
- 68057 47 Patenttivaatimus Menetelmä uuden farmaseuttisesti käyttökelpoisen antrasykliini-johdannaisen, jonka yleinen kaava I' on o PK c-ch/ mj7’ OCH, 0 OH o 3 d') Rz sekä sen happoadditiosuolan valmistamiseksi, jossa kaavassa R3· on vetyatomi, hydroksyyliryhmä, alkanoyylioksiryhmä jossa on 2...7 hiiliatomia, tai fenyyliasetyylioksiryhmä, R2 on alkyylioksietyyli-, tetrahydrofuranyvli-, 6-metoksitetrahydro-pvranyyli-, 6-karbometoksitetrahydropyranvyli- tai 6-asetoksimetvy-litetrahydropyranyylirvhmä, tunnettu siitä, että liitetään alkyylioksietyyli-, tetrahydrofuranyvli-, 6-metoksitetrahvdropyranyvli-, 6-karbometoksitetra-hydropyranyyli- tai 6-asetoksimetyvlitetrahydropyranyyliryhmä kaavan VIII
- 0 OH 0 Η i «* 3 A A ^ C-CHFj CXXXJ" OCHg 0 OH ό (VIII) (^) HO | nh2 mukaisen antrasykliinijohdannaisen , jossa kaavassa R3 on vetyatomi tai alkanoyvlioksirvhmä, jossa on 2...7 hiiliatomia, tai fenvvli-asetvylioksiryhmä, tai sen happoadditiosuolan C-4'-asemassa olevaan 48 6 8057 hydroksyyliryhmään saattamalla yhdiste reagoimaan dihydrofuraanin, sen johdannaisen, dihydrooyraanin, sen johdannaisen tai alkyyli-vinvyli-eetterin kanssa, joka sisältää mainitun liitettävän ryhmän ja pystyy reagoimaan hvdroksvyliryhmän kanssa, inertissä orgaanisessa liuottimessa ja happokatalyytin läsnäollessa yleisen kaavan IX
- 0 CH 0 H i « 1H 3 och3 0 I (IX) I NH2 k2 mukaisen antrasykli ini johdannaisen tai sen happoadd i t iosuolan valmistamiseksi, jossa kaavassa R^ on vetyatomi tai alkanoyylioksi-ryhmä, jossa on 2...7 hiiliatomia tai fenyyliasetyylioksiryhmä, R on alkyylioksietvvli-, tetrahvdrofuranvyli-, 6-metoksitetrahydro-pyranyyli-, 6-karbometoksitetrahydropyranvyli- tai 6-asetoksimetvy-1i tet rahydropyranvyliryhmä, ja jonka jälkeen haluttaessa menetelmässä erotetaan yleisen kaavan IX mainitun johdannaisen C-14-asemassa oleva alkanoyyli- tai fenyyliasetyylirvhmä hydrolyyttisellä asyyliradikaalin lohkaisull3 yleisen kaavan III COCHjOH OCH, 0 OH ' 3 o (III) 0 R2 antrasykliinijohdannaisen tai sen happoadditiosuolan valmistami" seksi, jossa kaavassa merkitsee samaa kuin kaavassa IX. Il 49 68057 Förfarande för framställning av ett nytt farmaceutiskt användbart antracyklinderivat med den allmänna formeln I' ΐ f /-C*!»1 Oem- OCH, 0 OH o (!') nh, R/ samt dess syraadditionssalt, i vilken formel Rl Mr en väteatom, hydroxylgrupp, alkanoyloxigrupp med 2...7 kolatomer eller en fenylacetyloxigrupp, r2 är en alkvloxietyl-, tetrahydrofuranvl-, 6-metoxitetrahydropyra-nyl-, 6-karbometoxitetrahydropyranyl- eller 6-acetoximetyltetra-hydropyranylgrupp, kännetecknat av, att man inför en alkyloxietyl-, tetrahydrofuranyl-, 6-metoxitetrahvdropyranyl-, 6-karbometoxitetrahydropyranyl- eller 6-acetoximetvltetrahydropyra-nvlqrupp i hvdroxylgrupoen i C-4'-ställninqen av ett antracvklin-derivat med formeln VIII
- 0 OH 0
- 1. C-CH R3 C \X X / OCHj 0 OH o (VIII) HO I NH2 eller dess syraadditionssalt, i vilken formel r3 är en väteatom, en alkanoyloxigrupo med 2...7 kolatomer eller en fenylacetyloxigrupp, genom reaktion med en dihydrofuran, ett derivat därav, dihydropyran.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP1170279A JPS55104299A (en) | 1979-02-03 | 1979-02-03 | Anthracycline compounds and their preparation |
JP1170279 | 1979-02-03 | ||
JP11025579 | 1979-08-31 | ||
JP11025579A JPS5634695A (en) | 1979-08-31 | 1979-08-31 | Novel anthracycline derivative and its preparation |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI800298A FI800298A (fi) | 1980-08-04 |
FI68057B FI68057B (fi) | 1985-03-29 |
FI68057C true FI68057C (fi) | 1985-07-10 |
Family
ID=26347196
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI800298A FI68057C (fi) | 1979-02-03 | 1980-02-01 | Foerfarande foer framstaellning av antracyklinderivat |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0014853B1 (fi) |
AR (1) | AR226694A1 (fi) |
AT (1) | AT369384B (fi) |
AU (1) | AU518278B2 (fi) |
CA (1) | CA1136618A (fi) |
DE (1) | DE3063557D1 (fi) |
DK (1) | DK160616C (fi) |
ES (1) | ES488209A0 (fi) |
FI (1) | FI68057C (fi) |
NZ (1) | NZ192758A (fi) |
PH (1) | PH18200A (fi) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS56156300A (en) * | 1980-04-26 | 1981-12-02 | Microbial Chem Res Found | Novel preparative method of anthracyclin derivative |
JPS6016998A (ja) * | 1983-07-07 | 1985-01-28 | Microbial Chem Res Found | アントラサイクリン誘導体の製造方法 |
GB2169286A (en) * | 1985-01-05 | 1986-07-09 | Erba Farmitalia | 4'-Deoxy-4'-halodoxorubicin-14-esters |
GB2169285A (en) * | 1985-01-05 | 1986-07-09 | Erba Farmitalia | 4'-Deoxydoxorubicin-14-esters |
GB2169284A (en) * | 1985-01-05 | 1986-07-09 | Erba Farmitalia | 4'-Epidoxorubicin-14-esters |
US4889926A (en) * | 1987-06-12 | 1989-12-26 | Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai | Method for the synthesis of (2"R)-4'-O-tetra-hydropyranyladriamycim using 14-chloro-daunomycin as an intermediate |
GB9026491D0 (en) * | 1990-12-05 | 1991-01-23 | Erba Carlo Spa | Anthracycline-conjugates |
US5776458A (en) * | 1990-12-05 | 1998-07-07 | Pharmacia & Upjohn S.P.A. | Anthracycline-conjugates |
IT1282379B1 (it) * | 1996-04-24 | 1998-03-20 | Mini Ricerca Scient Tecnolog | Disaccaridi di antracicline antitumorali. |
US8173621B2 (en) | 2008-06-11 | 2012-05-08 | Gilead Pharmasset Llc | Nucleoside cyclicphosphates |
US8551973B2 (en) | 2008-12-23 | 2013-10-08 | Gilead Pharmasset Llc | Nucleoside analogs |
US8716263B2 (en) | 2008-12-23 | 2014-05-06 | Gilead Pharmasset Llc | Synthesis of purine nucleosides |
EP3222628A1 (en) | 2008-12-23 | 2017-09-27 | Gilead Pharmasset LLC | Nucleoside phosphoramidates |
PT3290428T (pt) | 2010-03-31 | 2021-12-27 | Gilead Pharmasset Llc | Comprimido compreendendo 2-(((s)-(((2r,3r,4r,5r)-5-(2,4-dioxo-3,4-dihidropirimidin-1-(2h)-il)¿4¿fluoro¿3¿hidroxi¿4¿metiltetrahidrofuran¿2¿il)metoxi) (fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (s)- isopropil cristalino |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS52148064A (en) * | 1976-05-31 | 1977-12-08 | Microbial Chem Res Found | Antitumors |
GB1561507A (en) * | 1976-11-17 | 1980-02-20 | Farmaceutici Italia | Snthracycline disaccharides |
JPS5430146A (en) * | 1977-08-05 | 1979-03-06 | Microbial Chem Res Found | Novel anthracycline derivatives and their preparation |
-
1980
- 1980-01-10 DK DK11480A patent/DK160616C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-01-23 DE DE8080100352T patent/DE3063557D1/de not_active Expired
- 1980-01-23 EP EP19800100352 patent/EP0014853B1/en not_active Expired
- 1980-01-24 PH PH23547A patent/PH18200A/en unknown
- 1980-01-24 AU AU54895/80A patent/AU518278B2/en not_active Ceased
- 1980-01-30 NZ NZ19275880A patent/NZ192758A/xx unknown
- 1980-01-31 AR AR27981080A patent/AR226694A1/es active
- 1980-01-31 AT AT0051180A patent/AT369384B/de not_active IP Right Cessation
- 1980-02-01 ES ES488209A patent/ES488209A0/es active Granted
- 1980-02-01 FI FI800298A patent/FI68057C/fi not_active IP Right Cessation
- 1980-02-01 CA CA000344911A patent/CA1136618A/en not_active Expired
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ES8101622A1 (es) | 1980-12-16 |
ES488209A0 (es) | 1980-12-16 |
AU5489580A (en) | 1980-08-07 |
FI800298A (fi) | 1980-08-04 |
DK11480A (da) | 1980-08-04 |
EP0014853B1 (en) | 1983-06-01 |
DK160616C (da) | 1991-09-02 |
AT369384B (de) | 1982-12-27 |
FI68057B (fi) | 1985-03-29 |
CA1136618A (en) | 1982-11-30 |
EP0014853A1 (en) | 1980-09-03 |
ATA51180A (de) | 1982-05-15 |
AU518278B2 (en) | 1981-09-24 |
AR226694A1 (es) | 1982-08-13 |
PH18200A (en) | 1985-04-25 |
NZ192758A (en) | 1982-03-09 |
DK160616B (da) | 1991-04-02 |
DE3063557D1 (en) | 1983-07-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI68057C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av antracyklinderivat | |
JP4445136B2 (ja) | 半合成法及び新規の化合物 | |
US7214685B2 (en) | Prodrugs for a selective cancer therapy | |
US20090247533A1 (en) | Ecteinascidins | |
US5304687A (en) | Morpholinyl derivatives of doxorubicin and process for their preparation | |
NL8201703A (nl) | Nieuwe 4 ,-joodderivaten van antracyclineglycosiden. | |
Swersey et al. | Mamanuthaquinone: an antimicrobial and cytotoxic metabolite of Fasciospongia sp. | |
KISHI et al. | Structure-activity relationships of saframycins | |
JPS63145295A (ja) | アントラサイクリン誘導体 | |
FI63420C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt verksamma tetrahydropyranylderivat av antracyklinglykosider | |
Gachon et al. | ALBORIXIN, ANEW ANTIBIOTIC IONOPHORE: ISOLATION, STRUCTURE, PHYSICAL AND CHEMICAL PROPERTIES | |
US4216157A (en) | Substituted antitumor anthracyclines | |
EP0687673A1 (en) | Oxazole derivatives as antitumoral agents | |
JPH07233186A (ja) | 新規bbm−1675d抗腫瘍性抗生物質 | |
Tanaka et al. | Chemical modification of anthracycline antibiotics. I Demethoxycarbonylation, 10-epimerization and 4-O-methylation of aclacinomycin A | |
US5510469A (en) | 2-acyloxy-4-morpholinyl anthracyclines | |
US4870058A (en) | 14-Acyloxy-2'-halo-anthracycline anti-cancer antibiotics | |
KR840000679B1 (ko) | 안트라사이클린 유도체의 제조방법 | |
GB2120650A (en) | Rooperol derivatives | |
US4772688A (en) | 14-acyloxy-2'-halo-anthracycline anti-cancer antibiotics | |
US4731468A (en) | Aglycons | |
CASSINELLI et al. | New biosynthetic anthracyclines related to barminomycins incorporating barbiturates in their moiety | |
EP1070067B1 (en) | Cytotoxic alkaloid derivatives including asmarine a and b isolated from a sponge | |
US4604381A (en) | 4-demethoxy-13-dihydrodaunorubicin and use thereof | |
JPS5829960B2 (ja) | 新規アントラサイクリン誘導体及びその製造法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM | Patent lapsed | ||
MM | Patent lapsed |
Owner name: ZAIDANHOJIN BISEIBUTSU KAGAKU KENKYUKAI |