FI58071C - FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN STABIL EMULSION AV EN SYRE TRANSPORTERANDE PERFLUORKOLVAETE - Google Patents
FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN STABIL EMULSION AV EN SYRE TRANSPORTERANDE PERFLUORKOLVAETE Download PDFInfo
- Publication number
- FI58071C FI58071C FI770354A FI770354A FI58071C FI 58071 C FI58071 C FI 58071C FI 770354 A FI770354 A FI 770354A FI 770354 A FI770354 A FI 770354A FI 58071 C FI58071 C FI 58071C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- emulsion
- perfluoro
- particle size
- physiologically acceptable
- fluorocarbon
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
- A61K9/0026—Blood substitute; Oxygen transporting formulations; Plasma extender
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/08—Plasma substitutes; Perfusion solutions; Dialytics or haemodialytics; Drugs for electrolytic or acid-base disorders, e.g. hypovolemic shock
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Description
2 58071 Käytännön kannalta näitä emulsioita ei voida pitää tyydyttävinä farmaseuttisen stabiliteettinsa ja kehon turvallisuuden kannalta. Jotta fluorihiilivety-emulsiot olisivat käytännössä kelvollisia verenkorvikkeita on välttämätöntä kehittää valmiste, joka on riittävän pysyvä varastoitavaksi pitkähkön ajan ilman hiuk-kaskoon muutoksia.2 58071 In practice, these emulsions cannot be considered satisfactory in terms of their pharmaceutical stability and body safety. In order for fluorocarbon emulsions to be practically suitable blood substitutes, it is necessary to develop a preparation that is sufficiently stable to be stored for a relatively long time without changes in particle size.
Fluorihiilivetyemulsioiden hiukkaskoko näyttelee tärkeää osaa emulsion myrkyllisyydessä ja tehokkuudessa (K. Yokoyama, K. Yamanouchi, M. Watanabe, R. Murashima, T. Matsumoto, T. Hamano, H. Okamoto, T. Suyama, R. Watanabe ja R.The particle size of fluorocarbon emulsions plays an important role in the toxicity and effectiveness of the emulsion (K. Yokoyama, K. Yamanouchi, M. Watanabe, R. Murashima, T. Matsumoto, T. Hamano, H. Okamoto, T. Suyama, R. Watanabe, and R.
Naito, Preparation of perfluorodecalin emulsion, an approach to the red cells substitute, Federation Proceedings, 3^, 1^78-1^83 (toukokuu, 1975))· Suurempia hiukkasia sisältävä emulsio on myrkyllisempi ja hiukkasten retentioaika verenkiertojärjestelmässä on lyhyempi. Käytettäessä fluori hi i li vetyemulsiota synteettisenä verenkorvikkeena voimakkaasta verenvuodosta kärsivän potilaan hengen pelastamiseksi on keskimääräisen hiukkaskoon oltava halkaisijaltaan 0,3 pm tai pienempi, edullisesti 0,2 pm tai pienempi (US-patenttijulkaisu 3 958 01U).Naito, Preparation of perfluorodecalin emulsion, an approach to the red cells substitute, Federation Proceedings, 3 ^, 1 ^ 78-1 ^ 83 (May, 1975)) · An emulsion containing larger particles is more toxic and the retention time of particles in the circulatory system is shorter. When a fluorocarbon emulsion is used as a synthetic blood substitute to save the life of a patient with severe bleeding, the average particle size should be 0.3 μm or less in diameter, preferably 0.2 μm or less (U.S. Patent 3,958,01U).
Jotta fluorihiilivetyemulsiot olisivat käyttökelpoisia synteettisinä veren-korvikkeina on hiukkaskoon ohella välttämätöntä, että intravenoosisti ruiskutetun fluorihiili. vety-yhdisteen on verivirrasta poistuttuaan poistuttava kehosta mahdollisimman nopeasti. Eräät tämän keksinnön tekijät ovat aikaisemmin tutkineet useiden fluorihiilivetyemulsioiden poistumisnopeutta ja myrkyllisyyttä ja havainneet, että 9-11 hiiliatomia sisältävät perfluorihiilivedyt ovat keinotekoisen verenkorvikkeen käyttökelpoista ainesta. Paras on perfluoridekaliini (K. Yokoyama, K. Yamanouchi ja R. Murashima, Excretion of perfluor- chemicals after intravenous injection of their emulsion, Chemical Pharmaceutical Bulletin, 23, 1368-1373 (kesäkuu, 1975))-In order for fluorocarbon emulsions to be useful as synthetic blood substitutes, in addition to particle size, it is necessary that intravenously injected fluorocarbon. the hydrogen compound must leave the body as soon as possible after it has left the bloodstream. Some of the present inventors have previously studied the rate and toxicity of several fluorocarbon emulsions and found that perfluorocarbons containing 9 to 11 carbon atoms are useful in artificial blood substitutes. The best is perfluorodecalin (K. Yokoyama, K. Yamanouchi and R. Murashima, Excretion of perfluorochemicals after intravenous injection of their emulsion, Chemical Pharmaceutical Bulletin, 23, 1368-1373 (June, 1975)) -
Lisäksi edellä mainitut keksijät ovat myös havainneet, että hienojakoinen ja pysyvä fluorihiilivetyemulsio voidaan valmistaa näistä 9~11 hiiliatomia sisältävistä fluorihiilivety-yhdisteistä emulgoimalla mainittuja fluorihiilivetyjä, munanruskuaisfosfolipidien tai soijapapufosfolipidien seosta ja pientä määrää 8-22 hiiliatomia sisältäviä rasvahappoja tai niiden suoloja tai monoglyserideja (US-patenttijulkaisu 3 962 U39).In addition, the above inventors have also found that a finely divided and stable fluorocarbon emulsion can be prepared from these fluorocarbons having 9 to 11 carbon atoms by emulsifying said fluorocarbons, a mixture of egg yolk phospholipids or soybean phospholipids and a small amount of 8-22 carbon atoms 3,962 U39).
Verrattaessa suurimolekyylisellä polyoksietyleenipolyoksipropyleeni seka- polymeeriemulgaattorilla stabiloituun perfluoritributyyliamiiniemulsioon (R. P.When compared to a perfluorotributylamine emulsion stabilized with a high molecular weight polyoxyethylene polyoxypropylene copolymer emulsifier (R. P.
\\
Geyer, loc. cit.) on edellä mainittu sekä fosfolipideillä että rasvahapoilla stabiloitu emulsio parempi poistumisnopeuden suhteen, mutta sen stabiliteetti verenkierrossa intravenoosisen ruiskeen jälkeen on huonompi eli puoliintumisaika on noin kaksi kolmasosaa edellisestä.Geyer, loc. cit.) the above-mentioned emulsion stabilized with both phospholipids and fatty acids is better in terms of elimination rate, but its stability in the circulation after intravenous injection is worse, i.e. the half-life is about two thirds of the previous one.
3 580713,58071
Lisäksi fluorihiilivetyemulsiota, joka on valmistettu suuri molekyyli sen, ei.-ioni sen pinta-aktiivi sen aineen, esimerkiksi perfluori tri butyyli arai ini emulsion avulla, voidaan kaikissa suhteissa käyttää seoksena kaupallisten plasma-lisäaineiden, esimerkiksi dekstraanin tai hydroksietyyli tärkkelyksen tai modifioidun gelatiiniliuoksen kanssa, kun taas US-patenttijulkaisussa 3 962 1+ 39 kuvattua perfluoridekaliiniemulsiota ei voida käyttää mainittujen plasmalisä-aineiden kanssa, koska muodostuu saostuma. Näyttää siltä, että saostuminen johtuu emulgoitujen hiukkasten hajoamisesta, minkä syynä on emulsiossa suurena pitoisuutena esiintyvien fosfolipidien ja plasmalisäaineen, esimerkiksi dekstraanin tai suurimolekyylisen, kolloidaalisen hydroksietyyli tärkkelyksen välinen vuorovaikutus.In addition, a fluorocarbon emulsion prepared by emulsifying a large molecule, non-ionic surfactant thereof, for example perfluorotorbutyl arain, can be used in all proportions in admixture with commercial plasma additives, for example dextran or hydroxyethyl starch or modified gelatin solution. while the perfluorodecalin emulsion described in U.S. Patent 3,962 1+ 39 cannot be used with said plasma additives because a precipitate forms. The precipitation appears to be due to the decomposition of the emulsified particles due to the interaction between the high concentration of phospholipids in the emulsion and a plasma additive, for example dextran or high molecular weight, colloidal hydroxyethyl starch.
Aiottaessa käyttää fluorihiilivetyemulsiota infuusionesteenä tai synteettisenä verenkorvikkeena voimakkaasta verenvuodosta kärsivän potilaan hengen pelastamiseksi yhdessä plasmalisäaineen kanssa on isotonisuuden kannalta tärkeää, että molempien kolloidaalisten liuosten eli emulsion ja veren onkoottiset paineet tasataan. Fluorihiilivetyemulsio luovuttaa happea ja plasmalisäaine mahdollistaa kiertävän veren tilavuuden pitämisen vaadittavalla tasolla. On suositeltavaa käyttää suurimolekyylistä, ei-ionista pinta-aktiivista ainetta, joka on inertti plasmalisäaineen suhteen valmistettaessa keinotekoisena verenä käytettävää fluorihiilivetyemulsiota. Joskin nämä suuri molekyyli set, ei-ioni set pinta-aktiiviset aineet ovat tehokkaita emulgaattoreita eräiden fluorihiili vetyjen, esimerkiksi perfluoritributyyliamiinin ja muiden amiinityyppi Sten fluorihiili vetyjen suhteen, ne eivät sovi 9—11 hiiliatomia sisältäville fluorihiili vety-yhdisteille, esim. perfluoridekaliinilie, joiden erittymisnopeus on suuri.When fluorocarbon emulsion is to be used as an infusion fluid or synthetic blood substitute to save the life of a patient with severe bleeding in combination with a plasma additive, it is important for isotonicity that the oncotic pressures of both colloidal solutions, ie emulsion and blood, be equalized. The fluorocarbon emulsion releases oxygen and the plasma additive allows the volume of circulating blood to be maintained at the required level. It is recommended to use a high molecular weight nonionic surfactant that is inert to the plasma additive when preparing a fluorocarbon emulsion for use as an artificial blood. Although these high molecular weight, nonionic surfactants are effective emulsifiers for some fluorocarbons, e.g., perfluorotributylamine and other amine type Sten fluorocarbons, they are not suitable for fluorocarbon compounds having from 9 to 11 carbon atoms, e.g., perfluorodecalcin. is great.
Nämä seikat huomioonottaen on nyt suoritettu laajoja tutkimuksia emulsioiden valmistamiseksi 9“11 hiiliatomia sisältävistä fluori hiilivedyistä kuten perfluori dekali i ni sta, joilla on suuri erittymisnopeus. Nämä emulsiot ovat pysyviä verenkierrossa ja ne sekoittuvat plasmalisäaineeseen ilman, että emulgoituneet hiukkaset hajoavat.In view of these considerations, extensive studies have now been carried out to prepare emulsions of fluorocarbons containing 9 to 11 carbon atoms, such as perfluoro decalin, which have a high release rate. These emulsions are stable in the circulation and mix with the plasma additive without disintegrating the emulsified particles.
Keksinnön kohteena on menetelmä sellaisen happea kuljettavan perfluori-hi ili vedyn stabi ili n emulsi on valmi stami seksi fysi ologi sesti hyväksyttävään vesi -pitoiseen väliaineeseen, jonka hiukkaskoko on noin 0,05-0,3 Jim.The invention relates to a process for preparing a stable emulsion of an oxygen-carrying perfluorocarbon in a physiologically acceptable aqueous medium having a particle size of about 0.05 to 0.3.
Keksinnölle on tunnusomaista, että sekoitetaan homogeeniseksi seokseksi 10-50 % (paino/1ilavuus) (A + B):tä, jolloin A käsittää perfluoridekaliinin 11 58071 ja B käsittää vähintään yhden seuraavista perfluori-tert-amiineista: perfluori-Ν,Ν-dibutyyli-metyyliamiini, perfluoritripropyyliamiini; 2,0-5,0, edullisesti 3,0- 3,5 % (paino/tilavuus) suurmolekyylistä ionitonta pinta-aktiivista ainetta C, jonka molekyylipaino on noin 2000-20 000 ja joka on polyoksietyleeni-polyoksipropylee-nikopolymeeri; 0,1-1,0 % (paino/tilavuus) fosfolipidiä ja 0,004"0,1 % (paino/ti-lavuus) vähintään yhtä rasvahappoa E, joka on 8-22 hiiliatomia sisältävä rasvahappo tai sen fysiologisesti hyväksyttävä suola tai monoglyseridij jolloin perfluori-hiilivedyn A ja perfluori-tert-amiinin B välinen suhde on noin 1-9 paino-osaa A:ta 1 paino-osaa kohden B:tä, fysiologisesti hyväksyttävässä vesipitoisessa väliaineessa raakaemulsion saamiseksi, raakaemulsio emulgoidaan edelleen puristamalla se lämpötilassa enintään 55°C raon läpi paineessa noin 100-500 kp/cm^, jolloin se suuren nöpeusgradientin johdosta alistetaan leikkausvoiman ja sekoitusvaikutuksen alaiseksi, kunnes perfluorihiilivedyn hiukkaskoko saadussa emulsiossa saavuttaa arvon 0,05-0,3 pm.The invention is characterized in that 10-50% (w / v) of (A + B) is mixed into a homogeneous mixture, wherein A comprises perfluorodecalin 11 58071 and B comprises at least one of the following perfluoro-tert-amines: perfluoro-Ν, Ν-dibutyl -methylamine, perfluorotripropylamine; 2.0 to 5.0, preferably 3.0 to 3.5% (w / v) of a high molecular weight nonionic surfactant C having a molecular weight of about 2,000 to 20,000 and which is a polyoxyethylene-polyoxypropylene copolymer; 0.1-1.0% (w / v) phospholipid and 0.004 "0.1% (w / v) of at least one fatty acid E which is a fatty acid having 8 to 22 carbon atoms or a physiologically acceptable salt or monoglyceride thereof, wherein perfluoro the ratio of hydrocarbon A to perfluoro-tert-amine B is about 1 to 9 parts by weight of A per 1 part by weight of B, in a physiologically acceptable aqueous medium to obtain a crude emulsion, the crude emulsion is further emulsified by compressing it at a temperature not exceeding 55 ° C. through a pressure of about 100-500 kp / cm 2, subjected to a high shear gradient, subjected to shear and agitation until the particle size of the perfluorocarbon in the resulting emulsion reaches 0.05 to 0.3 μm.
Merkintä "(paino/tilavuus)" tarkoittaa aineen painomäärää (g) 100 ml:ssa muodostunutta emulsiota.The notation "(w / v)" means the amount by weight (g) of the substance in 100 ml of emulsion formed.
Keksinnössä emulgoimisapuaineina käytettävät fosfolipidit ovat alalla tunnettuja ja suositeltavia ovat ruskuaisfosfolipidi tai soijapapufosfolipidi. Määrä emulsiossa on noin 0,1-1,0, edullisesti noin 0,4-0,6 % (paino/tilavuus).The phospholipids used as emulsifying aids in the invention are known in the art and a brown phospholipid or soybean phospholipid are preferred. The amount in the emulsion is about 0.1-1.0, preferably about 0.4-0.6% (w / v).
Emulgointiapuaineena käytetty rasvahappoyhdiste on 8-22 hiilitomia sisältävä rasvahappo tai sen fysiologisesti hyväksyttävä suola, esimerkiksi natrium- tai kaliumsuola tai monoglyseridi. Esimerkkejä ovat kapryylihappo, kapriinihappo, lau-riinihappo, myristiinihappo, palmitiinihappo, steariinihappo, behenihappo, palmito-öljybappo linolihappo, arakidonihappo ja niiden natrium- tai kaliumsuola ja monoglyseridi. Näitä rasvahappoyhdisteitä voidaan käyttää yksinään tai kahden tai useamman seoksena määrän ollessa 0,004-0,1, edullisesti noin 0,02-0,04 % (paino/tilavuus). Suositeltavia ovat 14-20 hiiliatomia sisältävät rasvahappoyhdisteet ja niiden fysiologisesti hyväksyttävät suolat ja erityisen suositeltavia ovat kaliumpalmitaatti ja kaliumoleaatti hyvän liukoisuutensa ja emulsion valmistuksen helppouden ansiosta.The fatty acid compound used as an emulsifying aid is a fatty acid having 8 to 22 carbon atoms or a physiologically acceptable salt thereof, for example, a sodium or potassium salt or a monoglyceride. Examples are caprylic acid, capric acid, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, behenic acid, palmito-oleic acid linoleic acid, arachidonic acid and their sodium or potassium salt and monoglyceride. These fatty acid compounds may be used alone or as a mixture of two or more in an amount of 0.004 to 0.1, preferably about 0.02 to 0.04% (w / v). Fatty acid compounds having 14 to 20 carbon atoms and their physiologically acceptable salts are preferred, and potassium palmitate and potassium oleate are particularly preferred due to their good solubility and ease of emulsion preparation.
Tämän keksinnön mukainen fluorihiilivetyemulsio valmistetaan sekoittamalla edellämainitut komponentit valinnanvaraisessa järjestyksessä fysiologisesti hyväksyttävässä vesivällaineessa, esim. tislatussa vedessä tai isotonisessa liuoksessaThe fluorocarbon emulsion of the present invention is prepared by mixing the above components in an optional order in a physiologically acceptable aqueous vehicle, e.g., distilled water or an isotonic solution.
raakaemulsion saamiseksi, joka emulgoidaan puristamalla lämpötilassa enintään 55°Cto obtain a crude emulsion which is emulsified by compression at a temperature of not more than 55 ° C
2 ' raon läpi paineessa noin 100-500 kp/cm , jolloin siihen kohdistuu leikkausvoima ja sekoitusvaikutus voimakkaan nöpeusgradientin ansiosta. Ruiskutusta jatketaan kunnes edellä mainittu hiukkaskoko on saavutettu.2 'through the gap at a pressure of about 100-500 kp / cm, where it is subjected to a shear force and a mixing effect due to a strong gradient. Spraying is continued until the above-mentioned particle size is reached.
5 580715 58071
Ainesten homogenointi sekoitus suoritetaan tavanomaisessa sekoittimessa, esim. homogenoi ntisekoittimessa tai lapasekoittimessa.The homogenization of the ingredients is carried out in a conventional mixer, e.g. a homogenizer mixer or a paddle mixer.
Raakaemulsion emulgointi suoritetaan korkeapainehomogenaattorissa. Tämä on korkeapainepumppu, joka homogenoi, kahden sekoittumattoman nesteen seosta puristamalla sitä korkeassa paineessa ja hyvin suurella nopeudella raon läpi, jolloin nesteisiin kohdistuu leikkausvoima ja sekoitusvaikutus. Tyypiliinen kaupallinen homogenisaattori on Manton-Gaulintyyppi (myyjä Manton-Gaulin Manufacturing Co., Inc., USA). Siinä on kahteen tai useampaan hanaan yhdistetty monitievent-tiili, joiden jouset muodostavat raot.The emulsification of the crude emulsion is performed in a high pressure homogenizer. This is a high-pressure pump that homogenizes a mixture of two immiscible liquids by squeezing it through a gap at high pressure and very high speed, subjecting the fluids to shear and agitation. A typical commercial homogenizer is a Manton-Gaulin type (sold by Manton-Gaulin Manufacturing Co., Inc., USA). It has a multi-way valve connected to two or more taps, the springs of which form slits.
Tässä homogenisaattorityypissä seosta kierrätetään useita kertoja koko-naispaineessa noin 500 kg/cm keksinnön mukaisen pysyvän emulsion saamiseksi. Käyttölämpötila on enintään 55°C saakka ja edullisesti 25_1»0°C.In this type of homogenizer, the mixture is circulated several times at a total pressure of about 500 kg / cm to obtain a stable emulsion according to the invention. The operating temperature is up to 55 ° C and preferably 25-1 ° C.
Ko. emulsion dispergoidun faasin ultrahienojen hiukkasten halkaisija on pienempi kuin 0,2 pm ja enimmäkseen pienempi kuin 0,3 pm. Lisäksi se on pysyvä ja hiukkaskoko ei kasva kuumennettaessa eikä pitkällisen varastoinnin aikana.Ko. the ultrafine particles of the dispersed phase of the emulsion have a diameter of less than 0.2 μm and mostly less than 0.3 μm. In addition, it is permanent and the particle size does not increase during heating or during prolonged storage.
Siten käsiteltävänä oleva emulsio suojaa potilasta emulsiohiukkasten kokkaroi-tumi sen hai ttavaikutuksilta.Thus, the emulsion in question protects the patient from the adverse effects of clumping of the emulsion particles.
Lisäksi keksinnön mukaisen emulsion retentioaika verenkierrossa on pitkä, joten hapenkuljetuskyky säilyy pitkään.In addition, the retention time of the emulsion according to the invention in the circulation is long, so that the oxygen transport capacity is maintained for a long time.
Verrattaessa esimerkiksi fluorihiilivetyemulsioon, joka on valmistettu käyttäen emulgaattorina fosfolipidejä US-patentin 3 962 1+39 mukaan, käsiteltävänä olevan emulsion retentioaika potilaan verenkierrossa on paljon pidempi. Keksinnön mukaisen emulsion poistuminen kehosta on paljon nopeampaa kuin perfluoritritutyyliamiini emulsi on.Compared to, for example, a fluorocarbon emulsion prepared using phospholipids as an emulsifier according to U.S. Patent 3,962 1 + 39, the retention time of the present emulsion in the patient's bloodstream is much longer. The emulsion according to the invention is eliminated from the body much faster than the perfluorotritylamine emulsion.
Keksinnön mukaista emulsiota voidaan käyttää infuusionesteenä fysiologisesti isotoniseksi tekemisen jälkeen. Sitä voidaan myös käyttää seoksina kaupallisten plasmalisäaineiden, esimerkiksi dekstraanin, hydroksietyyli tärkkelyksen ja modifioidun gelatiinin kanssa. Lisäksi sitä voidaan käyttää imettäväisten verenkorvikkeena ja perfuusionesteenä säilytettäessä siirrettäviä sisäelimiä.The emulsion according to the invention can be used as an infusion liquid after physiologically isotonic treatment. It can also be used in admixture with commercial plasma additives such as dextran, hydroxyethyl starch and modified gelatin. In addition, it can be used as a blood substitute and perfusion fluid for mammals in the preservation of transplantable viscera.
Seuraavat esimerkit selventävät keksintöä.The following examples illustrate the invention.
Esimerkeissä hiukkaskoko mitattiin keskipakosedimentointimenetelmän avulla, jota ovat ehdottaneet K. Yokoyama, A. Suzuki , I. Utsumi ja R. Naito (Chem.In the examples, particle size was measured by the centrifugal sedimentation method proposed by K. Yokoyama, A. Suzuki, I. Utsumi and R. Naito (Chem.
Pharm. Bull., 22 (12), 2966-2971 (1971*)).Pharm. Bull., 22 (12), 2966-2971 (1971 *)).
Esimerkki 1Example 1
Liuotettiin 8 litraan tislattua vettä 300 g polyoksietyleenipolyoksipro-pyleenisekapolymeeriä (molekyylipaino 10 800). Liuokseen lisättiin Uo g soija-papufosfolipidejä, 2 g kaliumoleaattia ja seosta, jossa oli 3 kg perfluorideka- 58071 liinia ja 300 g perfluoritripropyyliamiinia. Muodostunutta seosta sekoitettiin sekoittimessa raakaemulsion saamiseksi. Muodostunut raakaemulsio panostettiin suihkuemulgaattorin nestesäiliöön (valmistaja Manton-Gaulin Co.) ja emulgoitiin 2 johtamalla kaksitoista kertaa venttiilin läpi paineessa 200-500 kp/cm ja lämpötilassa 35° - 5°C. Muodostunut emulsio sisälsi 30,5 % (paino/tilavuus) perfluori-dekallinia ja 2,9 % (paino/tilavuus) perfluoritripropyyliamiinia. Keskimääräinen hiukkaskoko oli 0,09~0,1 ;jm mitattuna keskipakosedimentointimenetelmän avulla.300 g of polyoxyethylene polyoxypropylene copolymer (molecular weight 10,800) were dissolved in 8 liters of distilled water. To the solution were added about 10 g of soybean phospholipids, 2 g of potassium oleate and a mixture of 3 kg of perfluorodecanamine and 300 g of perfluorotripropylamine. The resulting mixture was stirred in a mixer to obtain a crude emulsion. The resulting crude emulsion was charged to a liquid tank of a spray emulsifier (manufactured by Manton-Gaulin Co.) and emulsified 2 by passing twelve times through a valve at a pressure of 200-500 kp / cm and a temperature of 35 ° to 5 ° C. The resulting emulsion contained 30.5% (w / v) perfluorodecallin and 2.9% (w / v) perfluorotripropylamine. The average particle size was 0.09 ~ 0.1 μm as measured by the centrifugal sedimentation method.
Emulsion hiukkaskoko kasvoi tuskin lainkaan suljettaessa injektioampulliin ja lämpösteriloitaessa 12 minuuttia 115°C:ssa tätä varten suunnitellussa pyörivässä sterilaattorissa.The particle size of the emulsion hardly increased at all when sealed in an injection ampoule and heat sterilized for 12 minutes at 115 ° C in a rotary sterilizer designed for this purpose.
Taulukosta 1 käy ilmi, että varastoitaessa kuusi kuukautta l°C:ssa ei keksinnön mukainen emulsio kokkaroitunut ja sen keskimääräinen hiukkashalkaisija oli lähes muuttumaton.It can be seen from Table 1 that when stored for six months at 1 ° C, the emulsion according to the invention did not clump and its average particle diameter was almost unchanged.
Toistettiin yllä oleva menetelmä käyttäen perfluoridekaliinin asemesta perfluoripentyylitetrahydrofuraania ja saatiin samanlaisia tuloksia kuin yllä.The above procedure was repeated using perfluoropentyltetrahydrofuran instead of perfluorodecalin and similar results were obtained as above.
Esimerkki 2Example 2
Liuotettiin 2 litraan tislattua vettä 100 g polyoksietyleenipolyoksipropy-leeniä, jonka keskimääräinen molekyylipa!no oli 8 350. Muodostuneeseen liuokseen lisättiin 20 g ruskuaisfosfolipidejä ja 0,5 g öljyhappoa ja seosta sekoitettiin sekoittimessa dispersion valmistamiseksi. Dispersioon lisättiin seos, jossa oli 6U0 g perfluoridekaliinia ja 250 g perfluoridibutyylimonometyyliamiinia ja muodostunutta seosta sekoitettiin sekoittimessa raakaemulsion saamiseksi. Raakaemulsio emulgoitiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla ja kuumasteriloitiin 12 minuuttia 115°C:ssa pyörivässä sterilaattorissa. Emulsio sisälsi 25,3 % (paino/ tilavuus) perfluoridekaliinia ja 9,8 (paino/tilavuus) perfluoridibutyylimono-metyyliamiinia. Saadun emulsion keskimääräinen hiukkashalkaisija ja hiukkas-kokojakautuma ja perfluoridekaliinin avulla valmistetun emulsion vertailu-näytteen vastaavat arvot ilmenevät taulukosta 1. Taulukosta 1 ilmenee myös saadun emulsion keskimääräinen hiukkashalkaisija kuuden kuukauden varastoinnin jälkeen U°C:ssa.100 g of polyoxyethylene polyoxypropylene having an average molecular weight of 8,350 were dissolved in 2 liters of distilled water. To the resulting solution were added 20 g of brown phospholipids and 0.5 g of oleic acid, and the mixture was stirred in a mixer to prepare a dispersion. A mixture of 60 g of perfluorodecalin and 250 g of perfluorodibutyl monomethylamine was added to the dispersion, and the resulting mixture was stirred in a mixer to obtain a crude emulsion. The crude emulsion was emulsified as described in Example 1 and heat sterilized for 12 minutes at 115 ° C in a rotary sterilizer. The emulsion contained 25.3% (w / v) perfluorodecalin and 9.8 (w / v) perfluorodibutyl monomethylamine. The average particle diameter and particle size distribution of the resulting emulsion and the corresponding values of the reference sample of the perfluorodecalin emulsion are shown in Table 1. Table 1 also shows the average particle diameter of the resulting emulsion after six months of storage at U ° C.
Taulukko 1. Eri emulsioiden hiukkaskokojakautumaTable 1. Particle size distribution of different emulsions
Esimerkki (A) (B) n:o Fluorihiilivety-yhdiste Perfluori-tert.-amiini Emulgaattori ' % (paino/tilavuus) % (paino/tilavuus) % (paino/tilavuus) 30,5 Perfluoritripropyyli- 3,0 amiini 2,9 1 Perfluoride- ____ kaliini 30 - A* 3,0Example (A) (B) No. Hydrofluorocarbon compound Perfluoro-tert-amine Emulsifier '% (w / v)% (w / v)% (w / v) 30.5 Perfluorotripropyl-3.0 amine 2, 9 1 Perfluoride- ____ potassium 30 - A * 3.0
25,3 Perfluoridibutyyli- A^ Q25.3 Perfluorodibutyl-N-Q
monometyyli amiini 9,8 * 2 Perfluorideka- liini 25 - k* U’° j atkuu 7 58071monomethyl amine 9.8 * 2 Perfluorodecalin 25 - k * U '° j continues 7 58071
Taulukko 1 (jatkoa)Table 1 (continued)
Keskimääräinen hiuk- Hiukkaskokojakautuma kashalkaisija, jm steriloinnin jälkeenMean particle size distribution, diameter after sterilization
Esi- Eraulgoimisapuaine paino-%_ merkki t (paino/tilavuus) steri. Hiukkaa- loinnin toinnin halkaisija jälkeen jälkeen <0,1 ^um 0,1- 0,2- <0,3/^ ____(ä°C,6 kk)___0,2 Aim 0.3 rum__Pre- Erivatizing aid weight -% _ mark t (weight / volume) sterile. Particle diameter after operation after <0.1 μm 0.1-0.2- <0.3 / ^ ____ (° C, 6 months) ___ 0.2 Aim 0.3 rum__
Soijapapufosfo- lipideja 0,U o ,097 0,099 58,3 39,1 2,6 0 1 K-oleaatti 0,02Soybean phospholipids 0, 0 097 0,099 58,3 39,1 2,6 0 1 K-oleate 0,02
Soi j apapufos fo- lipideja 0,H 0,395 <0,4 3,9 11,7 2U,1 60,3 K-oleaatti 0,02Soap and auxiliary phosphides 0, H 0.395 <0.4 3.9 11.7 2U, 1 60.3 K-oleate 0.02
Mun an rusk uai s- fosfolipideja 0,8 ^ 0>09, 37>2 0y9 0 2 öljyhappo 0,02My brown sai phospholipids 0.8 ^ 0> 09, 37> 2 0y9 0 2 oleic acid 0.02
Munanruskuais- | fosfolipidejä 0,8 0>21(5 „>9 ,8>7 U6yk 23>0 \ Öljyhappo 0,02 i--—1-----Scrambled eggs phospholipids 0.8 0> 21 (5 „> 9, 8> 7 U6yk 23> 0 \ Oleic acid 0.02 i --— 1 -----
Huom. A: Polyoksietyleeni-polyoksipropyleenisekapolymeeri. Keskimääräinen molekyylipaino; = 10 800, A2 = 8 350, A^ = 15 800.Note. A: Polyoxyethylene-polyoxypropylene copolymer. Average molecular weight; = 10,800, A2 = 8,350, A2 = 15,800.
8 580718 58071
Koe-esimerkki 1Experimental Example 1
Sekoitus plasmalisäaineen kanssaMixing with a plasma additive
Kliinisessä käytössä infuusionesteenä keksinnön mukaista emulsiota käytetään mieluiten plasmalisäaineen kanssa onkoottisen paineen vajavuuden korjaamiseksi. Sekoitettaessa keksinnön mukainen emulsio ja plasmalisäaine ei havaittu kolloidiliuosten saostumista, mikä osoittaa, että eräs keksinnön mukaisen emulsion käyttöön infuusionesteenä mahdollisesti liitty- f vistä vaikeuksista on poistettu.In clinical use, as an infusion fluid, the emulsion according to the invention is preferably used with a plasma additive to remedy the oncotic pressure deficiency. When mixing the emulsion according to the invention and the plasma additive, no precipitation of colloidal solutions was observed, which indicates that one of the difficulties which may be associated with the use of the emulsion according to the invention as an infusion solution has been eliminated.
Kokeessa käytetyt emulsiot olivat perfluoridekaliini-perfluori-N,N-dibutyy-limetyyliaminoemulsioita (5:2) vaihtelevin konsentraatioin. Ne valmistettiin kuten esimerkissä 2 (3,1* % (paino/tilavuus) polyoksietyleenipolyoksipropyleeni-sekapolymeeriä, 0,6 % (paino/tilavuus) ruskuaisfosfolipidejä, 0,0U % (paino/tila-vuus) kaliumoleaattia ja vertailun vuoksi valmistettiin perfluoridekaliiniemulsioita vaihtelevin konsentraatioin US-patentin 3 962 U39 mukaan (U% (paino/tilavuus) ruskuaisfosfolipidiä, 0,02 % (paino/tilavuus) kaliumoleaattia). Emulsiot tehtiin isotonisiksi laktaattipitoisella Ringerin liuoksella, joka valmistettiin neutraloimalla 60 ml puhdistettua maitohappoa kyllästetyllä natriumhydroksidivesiliuoksella käyttämällä fenolipunaista indikaattorina, lisäämällä liuokseen 150 g NaCl, 10 g KC1, 5 g CaClg ja 5 g MgCl^, lisäämällä sitten vettä kokonaistilavuuteen 1 000 ml, keittämällä ja suodattamalla ja laimentamalla suodos 25 kertaiseen tilavuuteen ennen injektoi nti a, tai Krebs-Ringerin bikarbonaatti liuoksella. Sekoitettiin plasma lisäaineeseen siten, että jälkimmäisen lopullinen konsentraatio 011 1-6 % (paino/tilavuus) ja saostuman muodostusta tarkkailtiin visuaalisesti kuuden tunnin aikana huoneen lämpötilassa sekoittamisen jälkeen. Käytetyt plasma-lisäaineet olivat hydroksietyyli tärkkelys (HES), (keskimääräinen molekyyli paino 200 000) 20 % (paino/tilavuus) ruokasuolaliuoksessa (valmistaja Ajinomoto Co.,The emulsions used in the experiment were perfluorodecalin-perfluoro-N, N-dibutylmethylaminoemulsions (5: 2) with varying concentrations. They were prepared as in Example 2 (3.1 *% (w / v) polyoxyethylene polyoxypropylene copolymer, 0.6% (w / v) brown phospholipids, 0.0U% (w / v) potassium oleate and, for comparison, perfluorodecalin emulsions were prepared at varying concentrations). According to U.S. Patent 3,962 U39 (U% (w / v) brown phospholipid, 0.02% (w / v) potassium oleate). to a solution of 150 g NaCl, 10 g KCl, 5 g CaCl 2 and 5 g MgCl 2, then adding water to a total volume of 1000 ml, boiling and filtering and diluting the filtrate to 25 times the volume before injection, or Krebs-Ringer's bicarbonate solution. so that the final concentration of the latter is 011 1-6% (w / w and precipitation formation was monitored visually for 6 hours after stirring at room temperature. The plasma additives used were hydroxyethyl starch (HES), (average molecular weight 200,000) in 20% (w / v) saline (manufactured by Ajinomoto Co.,
Ltd.) ja Dextran U0 (keskimääräinen molekyylipaino Uo 000) 10 % (paino/tilavuus) ruokasuolavesiliuoksessa (valmistaja The Green Cross Corp.).Ltd.) and Dextran U0 (average molecular weight Uo 000) in 10% (w / v) saline (manufactured by The Green Cross Corp.).
Tulokset ilmenevät taulukoista 2 ja 3.The results are shown in Tables 2 and 3.
CC
9 580719 58071
Taulukko 2 \. Lopullinen fluori hiili- ” ~ vetypitoisuus % Keksinnön mukainen emulsio Emulsio %(paino/tilavuus) US-patenttiTable 2 \. Final fluorocarbon content Hydrogen emulsion according to the invention Emulsion% (w / v) U.S. patent
Lopullinen\ -—--liSMB- dekstraani äO-pitoisuus % \.Final \ -—-- liSMB-dextran äO content% \.
(pai.no/tilavuus) \_< 10 %_20 %_30 % 10 % 20 % 30 % 0,5 - 1,0 - - + 1.5 ___+ + + 2,0 - - - + + + 2.5 - + + ! + + + 3,0 + + + j + + +(weight / volume) \ _ <10% _20% _30% 10% 20% 30% 0.5 - 1.0 - - + 1.5 ___ + + + 2.0 - - - + + + 2.5 - + + ! + + + 3.0 + + + j + + +
Taulukko 3Table 3
Lopullinen fluorihiili- n. vetypitoisuus % Keksinnön mukainen emulsio US-patentti nXpai no /t i lavuus)__3 962 U39_Final fluorocarbon n.hydrogen content% Emulsion of the invention U.S. Patent nXpai no / t i volume) __ 3,962 U39_
MS-pitoi-^^v 10 % 20 % 30 % 10 ^ 20 % 30 5SMS-maintenance 10% 20% 30% 10% 20% 30S
SUUS % (pai no/t ilavuus) ___ 2 - + 3 - + + 1+ - + + + 5 - + + + + +MOUTH% (weight / t comfort) ___ 2 - + 3 - + + 1+ - + + + 5 - + + + + +
Huom.Note.
- = ei sakkaa + = sakanmuodostusta- = no precipitate + = precipitate formation
Yllä olevista tuloksista ilmenee selvästi, että plasmalisäaineena vaikuttaa paljon vähemmän keksinnön mukaisesti valmistettuun emulsioon verrattuna US-patentin 3 9β2 U39 mukaiseen emulsioon. Tämä osoittaa, että keksinnön mukaisesti valmistettu emulsio voidaan sekoittaa Dextran U0:n ja HES-valmisteen kanssa kaikissa suhteissa fysiologisesti kolloidaalisen isotonisuuden saavuttamiseksi, joka saavutetaan lisäämällä Dextran liO ja HES lopullisena konsentraationa 2 % (paino/tilavuus) ja 3 % (paino/tilavuus).It is clear from the above results that the emulsion prepared according to the invention has a much lower effect as a plasma additive compared to the emulsion according to U.S. Pat. 3,9β2 U39. This indicates that the emulsion prepared according to the invention can be mixed with Dextran U0 and HES in all proportions to achieve the physiologically colloidal isotonicity achieved by adding Dextran liO and HES to a final concentration of 2% (w / v) and 3% (w / v). .
Yllä mainittuja vastaavia tuloksia saavutettiin myös esimerkissä 1 valmistetulla emulsiolla.The above-mentioned similar results were also obtained with the emulsion prepared in Example 1.
'° 58071'° 58071
Koe-es5 merkki 2Test-es5 mark 2
Keksinnön mukaisesti valmistetun emulsion tehokkuuden selvittämiseksi suoritettiin transfuusio rotilla.To determine the efficacy of the emulsion prepared according to the invention, transfusion was performed in rats.
Tässä kokeessa käytettiin kahta fluorihiilivetyemulsiota. Ne olivat keksinnön mukaisesti valmistettu emulsio eli esimerkin 2 mukaan valmistettu perfluo-ridekaliinin ja perfluoridibutyylimonometyyliamiinin seos sekä ruskuaisfosfolipi-deillä stabiloitu perfluoridekaliiniemulsio US-patentin 3 962 1+39 mukaan.Two fluorocarbon emulsions were used in this experiment. They were an emulsion prepared according to the invention, i.e. a mixture of perfluoridecalin and perfluorodibutyl monomethylamine prepared according to Example 2, and a perfluoride decalin emulsion stabilized with brown phospholipids according to U.S. Patent 3,962 1 + 39.
Molempien emulsioiden komponentit ilmenevät taulukosta k. 'The components of both emulsions are shown in Table k. '
Emulsion tekemiseksi elektrolyyttipitoi seksi ja kolloidaalisesti isotoni-seksi lisättiin 1 tilavuusosa taulukon h elektrolyytti liuoksia 9 tilavuusosaan emulsiota ja sitten sekoitettiin ennen käyttöä 1 tilavuusosa muodostunutta elekt-rolyyttipitoista emulsiota ja 3 tilavuusosaa 6-%:ista hydroksietyylitärkkelystä (molekyylipaino Uo 000 - 50 000) Ringerin laktaattipitoisessa liuoksessa tai rotan plasmassa vertailun vuoksi.To emulsify the electrolyte and colloidally isotonic, 1 volume of the electrolyte solutions of Table h was added to 9 volumes of the emulsion and then mixed before use with 1 volume of the electrolyte-containing emulsion formed and 3 volumes of 6% hydroxyethyl starch in 50% hydroxyethyl starch solution or rat plasma for comparison.
Rottien (Wistar-kanta, paino 200-250 g) veri vaihdettiin elektrolyyttejä ja hydroksietyylitärkkelystä tai plasmaa sisältävään emulsioon vuodattamalla verta toistuvasti yhteisestä päänvaltimosta ja transfundoimalla häntälaskimoon verisolujen tilavuusarvoon 1 %, 1* % ja 7 % 100 )J:ssa happikehässä. Sitten määritettiin kuinka kauan tranfundoidut rotat vielä elivät.The blood of rats (Wistar strain, weight 200-250 g) was exchanged for an emulsion containing electrolytes and hydroxyethyl starch or plasma by repeatedly shedding blood from the common carotid artery and transfusing into the tail vein to 1%, 1% and 7% blood cell volume in J oxygen. It was then determined how long the transfused rats still lived.
Tulokset ilmenevät taulukosta 5· Kuten taulukosta 5 huomataan, keksinnön mukaisesti valmistettu emulsio oli paljon tehokkaampi pelastettaessa voimakkaasta verenvuodosta kärsivän eläimen henki verrattuna ruskuaisfosfolipideillä stabiloi tuun perfluori dekali i ni emulsioon.The results are shown in Table 5. As can be seen from Table 5, the emulsion prepared according to the invention was much more effective in rescuing the life of an animal with severe bleeding compared to the perfluorodecali-stabilized emulsion stabilized with brown phospholipids.
Taulukko 1+Table 1+
Komponentti Keksinnön mukainen Emulsio emulsio US-patentti _______3 962 1*39_Component Emulsion according to the invention emulsion U.S. patent _______3,962 1 * 39_
Fluori hiili- Perfluorideka- 25,3 % 2d %Fluorocarbon- Perfluoride- 25.3% 2d%
Fluorihiili- vety liini, perfluo- (paino/tilavuus) (paino/tilavuus) . . . ri di butyyli vetyemul s 1 o_______i___-_ (9 til. osaa)Fluorocarbon line, perfluoro (w / v) (w / v). . . ri di butyl hydrogen emul s 1 o _______ i ___-_ (9 vol. parts)
Pinta-aktii- Pluronic F68 x 3,1* vinen aine Ruskuaisfosfo- Λ c . .Surfactant- Pluronic F68 x 3.1 * vine Brownish phospho- Λ c. .
lipidi, Kalium- * ___oleaatti__0,00U_j_0,02_lipid, Potassium * ___ oleate__0.00U_j_0.02_
NaCl 6,00 6,00 1NaCl 6.00 6.00 1
NaHC03 2,1 KC1 0,336 0,336NaHCO 3 2.1 KCl 0.336 0.336
Elektrolyytti Na-laktaatti - ; 3,10 (1 til.-osa) MgCl2.6H20 0,1*27 | 0,1*27Electrolyte Na-lactate; 3.10 (1 vol) MgCl 2 .6H 2 O 0.1 * 27 | 0.1 * 27
CaCl2.2H20 0,356 j __D-glukoosi__1 ,802_|_1_i0_| _gH_8^0_j 6,0_j x Polyoksietyleeni-polyoksipropyleenisekapolymeeri (mp. 8350) 11 58071CaCl2.2H2O 0.356 and __D-glucose__1, 802_ | _1_i0_ | xgH_8 ^ 0_j 6.0_j x Polyoxyethylene-polyoxypropylene copolymer (mp. 8350) 11,58071
Taulukko 5Table 5
Verisolujen Plasman kera HES:n kera tilavuus % — . ..Volume of blood cells with Plasma with HES%. ..
______Eloonj aamJ sa3 ka_______Eloonj aamJ sa3 ka_
Ko. emulsio 7 yli 72 h yli 72 h 1* 50 h 00 min yli 72 h 1 29 h 02 min 61 h 00 min ' Emulsio, US-pat.Ko. emulsion 7 over 72 h over 72 h 1 * 50 h 00 min over 72 h 1 29 h 02 min 61 h 00 min Emulsion, U.S. Pat.
' 3 962 ^39 7 23 h 10 min 5 h 53 min k 11 h 5 mi n 5 h 2 mi n 1 8 h 10 min 2 h 56 min ^uom‘Arvot saatu viiden rotan ryhmillä.'3 962 ^ 39 7 23 h 10 min 5 h 53 min k 11 h 5 mi n 5 h 2 mi n 1 8 h 10 min 2 h 56 min ^ uom' Values obtained with groups of five rats.
Koe-esimerkki 3Experimental Example 3
Akuutti myrkyllisyys kokeiltiin esimerkissä 3 saadulla fluori hiili vety-emulsiolla ja US-patentin 3 962 1+39 mukaan saadulla emulsiolla.Acute toxicity was tested with the fluorocarbon-hydrogen emulsion obtained in Example 3 and the emulsion obtained according to U.S. Patent 3,962 1 + 39.
Näiden emulsioiden tekemiseksi isotonisiksi lisättiin ennen käyttöä 1 tila-vuusosa elektrolyyttejä 9 tilavuusosaan emulsiota. Näiden emulsioiden komponentit ilmenevät taulukosta H. Koe-eläiminä käytettiin Wistar-kannan koirasrottia, paino 100-120 g. Emulsio ruiskutettiin rottien laskimoon ja eloonjäämissuhdetta tarkkailtiin viikko ruiskeen jälkeen. Saadut tulokset ilmenevät taulukosta 6. Taulukosta 6 ilmenee, että molempien emulsioiden LD^ oli n. 130 ml/kg kehonpainoa eli niiden myrkyllisyys on varsin pieni.To make these emulsions isotonic, 1 volume of electrolytes was added to 9 volumes of emulsion before use. The components of these emulsions are shown in Table H. Male Wistar rats weighing 100-120 g were used as experimental animals. The emulsion was injected intravenously into rats and the survival ratio was monitored one week after injection. The results obtained are shown in Table 6. Table 6 shows that the LD50 of both emulsions was about 130 ml / kg body weight, i.e. their toxicity is quite low.
Taulukko 6. Fluorihiilivetyemulsion akuutti myrkyllisyysTable 6. Acute toxicity of fluorocarbon emulsion
Eloonjäämissuhde eloonjääneiden ! rottien määrä_ LD^Q (1 vi ikon ^nnos Koerottien määrä_ kuluttua) ! Näyte ml/kg Päivää ruiskeen jälkeen_ _;_ 1 2 3 5_7__ 87__10/10 10/10 10/10 10/10 10/10 100_ 10/10 10/10 9/10 9/10 9/10Survival rate of survivors! number of rats_ LD ^ Q (1 vi ikon ^ nnos Number of rats after_)! Sample ml / kg The day after the injection_ _; _ 1 2 3 5_7__ 87__10 / 10 10/10 10/10 10/10 10/10 10/10_10 10/10 9/10 9/10 9/10
Keksinnön emulsio ,,λ/.λλ/.λο/.λο/.« „ . . ! 115_ 10/10 9/10 8/10 8/10 7/10 135 ml/kg 132__9/10 8/10 6/10 6/10 6/10 ___152__6/10 >4/10 3/10 3/10 1/10__ 87__10/10 10/10 10/10 10/10 10/10 100__10/10 10/10 9/10 9/10 9/10 I Emulsio 115__10/10 9/10 9/10 7/10 7/10 131 ml/kg jUS-pat. 3 962 1+39 132__9/10 8/10 7/10 6/10 5/10 jEmulsion of the invention ,, λ / .λλ / .λο / .λο /. «„. . ! 115_ 10/10 9/10 8/10 8/10 7/10 135 ml / kg 132__9 / 10 8/10 6/10 6/10 6/10 ___ 152__6 / 10> 4/10 3/10 3/10 1 / 10/10 87__10 / 10 10/10 10/10 10/10 10/10 rating 100__10 / 10 10/10 9/10 9/10 9/10 I Emulsion 115__10 / 10 9/10 9/10 7/10 7/10 131 ml. / kg jUS-pat. 3,962 1 + 39 132__9 / 10 8/10 7/10 6/10 5/10 j
1_152_ 7/10 6/10 1+/10 3/10 1/10 _I1_152_ 7/10 6/10 1 + / 10 3/10 1/10 _I
12 5 80 7112 5 80 71
Koe-esimerkki HExperimental Example H
Fluori hiilivetyvalmisteiden punasoluja liuottavan vaikutuksen tutkimiseksi kehon ulkopuolisessa verenkiertojärjestelmässä suoritettiin in vitro-kokeita käyttäen kaniinin veren punasoluja.To investigate the erythrocyte dissolving effect of fluorocarbon preparations in the extracorporeal circulatory system, in vitro experiments were performed using rabbit erythrocytes.
Sekoitettiin kaksi koe-esimerkissä 2 käytettyä ja taulukossa k esitettyä emulsiovalmistetta ja laktaattipitoista Ringerin liuosta fysiologisesti lähes iso- , tonisiksi. Sekoitettiin muodostuneita isotonisia emulsiovalmisteita ja kaniininThe two emulsion preparations used in Experimental Example 2 and shown in Table k and the lactate-containing Ringer's solution were mixed to physiologically almost isotonic. The resulting isotonic emulsions and rabbit were mixed
WW
hepariinisoitua verta suhteessa 3:1, 1:1 ja 1:3 koenäyteliuosten valmistamiseksi. ·heparinized blood in a ratio of 3: 1, 1: 1 and 1: 3 to prepare test sample solutions. ·
Punasolujen liuotusvaikutus määritettiin mittaamalla vapaa hemoglobiinipitoisuus % 8 ml:ssa verta kuusi tunti sen 37°C:ssa seisottamisen jälkeen. Hemoglobiinin puna-soluliukoisuus määritettiin syanomethemoglobiinimenetelmällä (Kampen, E.J. ja Ziilstram, W.J., Clin. Chim. Acta, 6, 538, 1961).The red blood cell leaching effect was determined by measuring the free hemoglobin content in% 8 ml of blood six hours after standing at 37 ° C. Hemoglobin red cell solubility was determined by the cyanomethemoglobin method (Kampen, E.J. and Ziilstram, W.J., Clin. Chim. Acta, 6, 538, 1961).
Tulokset ilmenevät taulukosta 7·The results are shown in Table 7 ·
Taulukko 7 _Vapaa hemoglobiini mg_Table 7 _Free hemoglobin mg_
Fluorihiilivedyn ja veren suhde 1:3 1:1 3:1 Tämän keksinnön emulsio 36 81 180Fluorocarbon to blood ratio 1: 3 1: 1 3: 1 The emulsion of this invention is 36 81 180
Emulsio, US-pat. 3 962 1+39 298,5 yli 1+,000 3,380Emulsion, U.S. Pat. 3,962 1 + 39 298.5 over 1 +, 000 3,380
Laktaattipitoinen Ringerin liuos (vertailu) 36 128 1U1Lactate-containing Ringer's solution (comparison) 36 128 1U1
Kuten taulukosta ilmenee keksinnön mukaisesti valmistetnn emulsion punasoluja liuottava vaikutus on paljon pienempi kuin aikaisemmin ko. alalla ja eroaa vain vähän vertailuna käytetystä laktaattipitoisesta Ringerin liuoksesta.As can be seen from the table, the erythrocyte solubilizing effect of the emulsion prepared according to the invention is much lower than previously. in the field and differs only slightly from the lactated Ringer's solution used as a control.
Keksinnön mukaisesti valmistettua emulsiota verrattiin US-patenteista 3 911 138 ja 3 962 1+39 tunnettuihin emulsioihin. Tutkittavat emulsiot valmistettiin käyttämällä perfluoridekaliinia kuten edellä esimerkissä 1. Tutkittavien emulsioiden koostumus ja saadut tulokset on esitetty taulukossa 8. Emulsioiden stabiliteetti määritettiin hiukkasten halkaisijana mittaamalla painokeskimääräinen hiukkaskoko sentrifugaalisedimentointimenetelmällä, joka on kuvattu julkaisussa Yokoyama, K. & ai., Chem. Pharm. Bull., 22 (12), 2966-2971 (197M· l.The emulsion prepared according to the invention was compared with emulsions known from U.S. Patents 3,911,138 and 3,962 1 + 39. Test emulsions were prepared using perfluorodecalin as in Example 1 above. The composition of the test emulsions and the results obtained are shown in Table 8. The stability of the emulsions was determined as particle diameter by measuring the weight average particle size by the centrifugal sedimentation method described in Yokoyama, K. & ai. Chem. Pharm. Bull., 22 (12), 2966-2971 (197M · l.
'3 58071 ο β to co σ\ •rt :o β p oo on ta e <u +> · i- · -=r'3 58071 ο β to co σ \ • rt: o β p oo is ta e <u +> · i- · - = r
H e S to p -PH e S to p -P
P *r-l *ri ·Η cd «“ CO OJP * r-l * ri · Η cd «“ CO OJ
S m ei = a ft'- ftvo (¾ Ai M f! 0) I On I rnS m ei = a ft'- ftvo (¾ Ai M f! 0) I On I rn
Φ 2 d O CQ CQΦ 2 d O CQ CQ
Ai S > Ai Don r> on "ils ~l Ö · P " β Ai ai ti •O O β VO ^ ON λ a ia •rt -P O 3 ON ' Λ on to en a> «ρ o _=f· •rl Ιί Äl U P " *> - «·Ai S> Ai Don r> is "ils ~ l Ö · P" β Ai ai ti • OO β VO ^ ON λ a ia • rt -PO 3 ON 'Λ is to en a> «ρ o _ = f · • rl Ιί Äl UP "*> -« ·
3 β HO 3 O O O O3 β HO 3 O O O O
-id 3 :d -3- 3 ft > ·ι-3^ ,¾-id 3: d -3- 3 ft> · ι-3 ^, ¾
Λ 3 β ft CΛ 3 β ft C
0) ft -rt e 3 g β •n s 2 β • d 3 P -rt0) ft -rt e 3 g β • n s 2 β • d 3 P -rt
β -Ρ Φ O β t— IA IA IAβ -Ρ Φ O β t— IA IA IA
S3 β -P ft 0) ON ON LA OJS3 β -P ft 0) ON ON LA OJ
:nj (L) *rt -rt o o on on «- S S β β Λ " Λ " •r-ι 2 Ο <D ft O o o o: nj (L) * rt -rt o o on is «- S S β β Λ" Λ "• r-ι 2 Ο <D ft O o o o
Ai 2 P P tee tn w m tn ·<-: ω______Ai 2 P P tee tn w m tn · <-: ω ______
Ai----- •rt β β -Ρ Φ CD to en •P «g ΛAi ----- • rt β β -Ρ Φ CD to en • P «g Λ
M S P LA O O OM S P LA O O O
a5 :0 -P β On <- On Oa5: 0 -P β On <- On O
Ai -P tn Φ O T- o ·—Ai -P tn Φ O T- o · -
Ai -P -rt Φ " ·> - *·Ai -P -rt Φ "·> - * ·
2 -rt S Ai O O O O2 -rt S Ai O O O O
•rt ft ft I—f te :3 3 :3 !> > ·ο CO------ I *rt *rt O -rt -rt l ft -rt I Ό -rt ^ *rt• rt ft ft I — f te: 3 3: 3!>> · Ο CO ------ I * rt * rt O -rt -rt l ft -rt I Ό -rt ^ * rt
Aj-P-P 2 -rt ^ p p-rt^P PAj-P-P 2 -rt ^ p p-rt ^ P P
Atf β -P ftftpOJ ft ft p OJ PAtf β -P ftftpOJ ft ft p OJ P
2 -rt g aJ.rt-d-alo «J-rtftcöO I (0¾¾ ft O 3 ft ft " 3 Λ ft ft " 3 " 32 -rt g aJ.rt-d-alo «J-rtftcöO I (0¾¾ ft O 3 ft ft" 3 Λ ft ft "3" 3
PbOi> 3 o o φ o 3 o o φ o a> -s d ft P ft H ft ft ft *> ft P "-3 -rt to O -rt to o o oPbOi> 3 o o φ o 3 o o φ o a> -s d ft P ft H ft ft ft *> ft P "-3 -rt to O -rt to o o o
S 'P O O I O O I IS 'P O O I O O I I
Wee CQftW CQftW iej . ” : a> ωιι β 1) O !>) •n ft β ft - 3 >j ft o o -rt •rt -P *rt ft O I Ό P 010000¾¾¾¾ p.rt β "rt Ai Ai ft ft rt (OO-rtOO O LA Vi. — 0 AiSP'-'1 « »ftft to bD Oftai-rton=on = on 3003 ft !>> o φ f-t · •’-j ft ·* p P ft ft ft φ ft TL to n ? B o-rtSoS o o dWee CQftW CQftW iej. ”: A> ωιι β 1) O!>) • n ft β ft - 3> j ft oo -rt • rt -P * rt ft OI Ό P 010000¾¾¾¾ p.rt β" rt Ai Ai ft ft rt (OO- rtOO O LA Vi. - 0 AiSP '-' 1 «» ftft to bD Oftai-rton = on = on 3003 ft! >> o φ ft · • '-j ft · * p P ft ft ft φ ft TL to n ? B o-rtSoS ood
W ft β ft S·— cnftHW ft β ft S · - cnftH
•ri ---—*------------+j 1 *rt o •rt I Ö c M * n »ri «fi Ο β -rt tö 2 -P g ft ft !>» -rt 3 «— ft -P β -rt tÄ β <D O ft ·6® φ > P fn on i i i * ft *rt r-1 p> CÖ :3 ft ft ft cö to ·η β O ρ •n *rt φ β p w Ä ft ft .rt• ri ---— * ------------ + j 1 * rt o • rt I Ö c M * n »ri« fi Ο β -rt tö 2 -P g ft ft!> »-Rt 3« - ft -P β -rt tÄ β <DO ft · 6® φ> P fn on iii * ft * rt r-1 p> CÖ: 3 ft ft ft cö to · η β O ρ • n * rt φ β pw Ä ft ft .rt
, ______O, ______O
< I tl •rt p* *rt ‘rt p β -Ρ β β O <D O -rt<I tl • rt p * * rt ‘rt p β -Ρ β β O <D O -rt
P > 2-,-1¾¾ 15¾ IA IAP> 2 -, - 1¾¾ 15¾ IA IA
ft *rt ft ft z z z .ft * rt ft ft z z z.
ftft ft 3 o on m on s β *rt β on on on ono <D · il o ai p ft JS__ft ft_____S3 n 58071ftft ft 3 o on m is s β * rt β on is on ono <D · il o ai p ft JS__ft ft_____S3 n 58071
Tuloksista ilmenee, että US-patentista 3 911 138 tunnetun perfluorihiili -vetyemulsion lämpö- ja varastoi ntistabiliteetit ovat huomattavasti huonommat kuin keksinnön mukaisesti valmistetun emulsion vastaavat arvot. US-patentista 3 962 1*39 tunnettu perfluori hi i li vetyemulsi o on hieman huonompi kuin keksinnön mukai sesti valmi stettu emulsi o.The results show that the thermal and storage stability of the perfluorocarbon hydrogen emulsion known from U.S. Pat. No. 3,911,138 is considerably inferior to the corresponding values of the emulsion prepared according to the invention. The perfluorocarbon emulsion o known from U.S. Pat. No. 3,962 1 * 39 is slightly inferior to the emulsion o prepared according to the invention.
«I«I
VV
«, <i 1 l l«, <I 1 l l
Claims (1)
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US65496476A | 1976-02-03 | 1976-02-03 | |
US65496476 | 1976-02-03 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI770354A FI770354A (en) | 1977-08-04 |
FI58071B FI58071B (en) | 1980-08-29 |
FI58071C true FI58071C (en) | 1980-12-10 |
Family
ID=24626936
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI770354A FI58071C (en) | 1976-02-03 | 1977-02-01 | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN STABIL EMULSION AV EN SYRE TRANSPORTERANDE PERFLUORKOLVAETE |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS5835485B2 (en) |
AR (1) | AR218864A1 (en) |
AT (1) | AT355214B (en) |
BE (1) | BE850992A (en) |
CA (1) | CA1072446A (en) |
CH (1) | CH633674A5 (en) |
DD (1) | DD132231A5 (en) |
DE (1) | DE2630586C2 (en) |
DK (1) | DK152256C (en) |
ES (1) | ES449635A1 (en) |
FI (1) | FI58071C (en) |
FR (1) | FR2361867A1 (en) |
GB (1) | GB1549038A (en) |
IL (1) | IL51325A (en) |
LU (1) | LU76698A1 (en) |
MX (1) | MX4136E (en) |
NL (1) | NL171533C (en) |
NO (1) | NO145370C (en) |
NZ (1) | NZ183096A (en) |
SE (1) | SE442706B (en) |
SU (1) | SU797546A3 (en) |
ZA (1) | ZA77229B (en) |
Families Citing this family (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4186253A (en) * | 1978-10-10 | 1980-01-29 | The Green Cross Corporation | Perfusate for preserving organ to be transplanted and preserving method |
JPS55100312A (en) * | 1979-01-25 | 1980-07-31 | Toshiro Wada | Contrast medium for blood vessel |
DE3277769D1 (en) * | 1981-09-08 | 1988-01-14 | Green Cross Corp | Perfluorochemicals, process for preparing the same and their use as blood substitutes |
US4423077A (en) * | 1982-07-27 | 1983-12-27 | The University Of Pennsylvania | Perfluorochemical emulsion artificial blood |
JPS5946218A (en) * | 1982-09-09 | 1984-03-15 | Green Cross Corp:The | Fluorocarbon emulsion preparation |
JPS59175421A (en) * | 1983-03-24 | 1984-10-04 | Tetsuzou Agishi | Hemocathartic agent |
AU2441592A (en) * | 1991-08-08 | 1993-03-02 | Leigh D. Segel | Fluorocarbon blood substitute |
US5658962A (en) | 1994-05-20 | 1997-08-19 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Omega-hydrofluoroalkyl ethers, precursor carboxylic acids and derivatives thereof, and their preparation and application |
US5502094A (en) * | 1994-05-20 | 1996-03-26 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Physiologically acceptable emulsions containing perfluorocarbon ether hydrides and methods for use |
WO1997025978A1 (en) * | 1996-01-15 | 1997-07-24 | BELOYARTSEV, Arkady Felixovich | Method of obtaining perfluorocarbon emulsions for medical purposes |
CN1068778C (en) * | 1998-05-15 | 2001-07-25 | 赵超英 | Novel drug composition for treating and curing and its preparing method |
US7357937B2 (en) | 2002-09-24 | 2008-04-15 | Therox, Inc. | Perfluorocarbon emulsions with non-fluorinated surfactants |
RU2259819C1 (en) * | 2004-03-01 | 2005-09-10 | Кузнецова Ирина Николаевна | Emulsion of perfluoroorganic compounds of medicinal indication and method for its obtaining |
AP2008004645A0 (en) | 2006-03-14 | 2008-10-31 | Sergey Ivanovich Vorobyev | Perfluorocarbon gas transferring emulsion for medico-biological use, the composition and the production method thereof a medicinal agent |
US8063020B2 (en) * | 2007-12-22 | 2011-11-22 | Simpkins Cuthbert O | Resuscitation fluid |
GB2467353B (en) * | 2009-01-30 | 2011-07-20 | Steven Skill | Apparatus for treatment of fluid streams and method of conducting the same |
ES2541226B2 (en) * | 2014-01-15 | 2016-02-12 | MONDRAGÓN GOI ESKOLA POLITEKNIKOA J. Mª. ARIZMENDIARRIETA, S.C | Blood phantom |
RU2745290C2 (en) * | 2019-04-12 | 2021-03-23 | Ирина Николаевна Кузнецова | Emulsion of perfluorocarbon compounds for biomedical purposes and a method for its production |
WO2024046999A1 (en) * | 2022-08-31 | 2024-03-07 | Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt am Main | Lecithin-modified nanoscale oxygen carriers (lenox) |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CH604490A5 (en) * | 1970-09-05 | 1978-09-15 | Green Cross Corp | |
JPS5331209B2 (en) * | 1973-10-05 | 1978-09-01 |
-
1976
- 1976-07-01 JP JP51078127A patent/JPS5835485B2/en not_active Expired
- 1976-07-02 GB GB27739/76A patent/GB1549038A/en not_active Expired
- 1976-07-06 SE SE7607727A patent/SE442706B/en not_active IP Right Cessation
- 1976-07-07 ES ES449635A patent/ES449635A1/en not_active Expired
- 1976-07-07 CH CH869676A patent/CH633674A5/en not_active IP Right Cessation
- 1976-07-07 DE DE2630586A patent/DE2630586C2/en not_active Expired
- 1976-07-07 NL NLAANVRAGE7607514,A patent/NL171533C/en not_active IP Right Cessation
- 1976-07-07 AT AT496676A patent/AT355214B/en not_active IP Right Cessation
- 1976-07-07 DK DK307276A patent/DK152256C/en not_active IP Right Cessation
- 1976-07-08 FR FR7620907A patent/FR2361867A1/en active Granted
- 1976-07-08 CA CA256,571A patent/CA1072446A/en not_active Expired
-
1977
- 1977-01-17 NZ NZ183096A patent/NZ183096A/en unknown
- 1977-01-17 ZA ZA770229A patent/ZA77229B/en unknown
- 1977-01-21 MX MX775377U patent/MX4136E/en unknown
- 1977-01-25 IL IL51325A patent/IL51325A/en unknown
- 1977-01-31 AR AR266381A patent/AR218864A1/en active
- 1977-02-01 NO NO770324A patent/NO145370C/en unknown
- 1977-02-01 FI FI770354A patent/FI58071C/en not_active IP Right Cessation
- 1977-02-02 SU SU772447657A patent/SU797546A3/en active
- 1977-02-02 BE BE174577A patent/BE850992A/en not_active IP Right Cessation
- 1977-02-03 LU LU76698A patent/LU76698A1/xx unknown
- 1977-02-03 DD DD7700197227A patent/DD132231A5/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NO145370C (en) | 1982-03-10 |
NL171533B (en) | 1982-11-16 |
SU797546A3 (en) | 1981-01-15 |
FI770354A (en) | 1977-08-04 |
JPS5296722A (en) | 1977-08-13 |
ES449635A1 (en) | 1977-11-16 |
BE850992A (en) | 1977-05-31 |
DK152256C (en) | 1988-08-29 |
DD132231A5 (en) | 1978-09-13 |
IL51325A (en) | 1980-05-30 |
DK307276A (en) | 1977-08-04 |
ATA496676A (en) | 1979-07-15 |
DE2630586C2 (en) | 1984-06-07 |
NO145370B (en) | 1981-11-30 |
SE7607727L (en) | 1977-08-04 |
FR2361867B1 (en) | 1978-12-15 |
NO770324L (en) | 1977-08-04 |
AR218864A1 (en) | 1980-07-15 |
AU1550576A (en) | 1977-07-28 |
AT355214B (en) | 1980-02-25 |
FI58071B (en) | 1980-08-29 |
NL171533C (en) | 1983-04-18 |
LU76698A1 (en) | 1977-06-28 |
IL51325A0 (en) | 1977-03-31 |
DE2630586A1 (en) | 1977-08-11 |
NZ183096A (en) | 1979-04-26 |
CA1072446A (en) | 1980-02-26 |
MX4136E (en) | 1982-01-06 |
NL7607514A (en) | 1977-08-05 |
CH633674A5 (en) | 1982-12-31 |
SE442706B (en) | 1986-01-27 |
GB1549038A (en) | 1979-08-01 |
JPS5835485B2 (en) | 1983-08-03 |
ZA77229B (en) | 1977-11-30 |
FR2361867A1 (en) | 1978-03-17 |
DK152256B (en) | 1988-02-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI58071C (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN STABIL EMULSION AV EN SYRE TRANSPORTERANDE PERFLUORKOLVAETE | |
US4252827A (en) | Oxygen-transferable fluorocarbon emulsion | |
EP0231091B1 (en) | Stable emulsions of highly fluorinated organic compound | |
US5350571A (en) | Emulsions of highly fluorinated organic compounds | |
US3962439A (en) | Oxygen-transferable emulsion | |
US3993581A (en) | Process for preparing stable oxygen transferable emulsion | |
US3911138A (en) | Artificial blood and method for supporting oxygen transport in animals | |
EP0196776B1 (en) | Emulsions of perfluorocarbons in aqueous media | |
US3958014A (en) | Process for preparing injection-purpose fluorocarbon emulsion capable of carrying oxygen | |
Geycr | Perfluorochemicals as oxygen transport vehicles | |
US5536753A (en) | Stable perfluorocarbon and oil emulsions | |
KR810000695B1 (en) | Process for preparing flurocarbon emulsions capable of carrying oxygen | |
JPS59130813A (en) | Adminiculum for chemotherapy of cancer | |
RU2070033C1 (en) | Method of preparing perfluorocarbon emulsion for medicinal aims | |
US4814446A (en) | Fluorinated triethylenediamine as an oxygen transport agent | |
Geyer | The design of artificial blood substitutes | |
EP1111992A1 (en) | Improved artificial blood fluids | |
JPH0676315B2 (en) | W / O / W composite emulsion for injection and method for producing the same | |
WO1990008538A1 (en) | Fluorinated triethylenediamine as an oxygen transport agent | |
JPS61233615A (en) | Perfluorocarbon emulsion | |
FI65009C (en) | PERFUSIONSVAETSKA FOER KONSERVERING AV ETT ORGAN SOM SKALL TRANSPLANTERAS OCH KONSERVERINGSFOERFARAS | |
Purewal | The colloidal properties of fluorocarbon emulsions | |
Lapin et al. | The Technical and Physiological Aspects of Surgery and Anaesthesia Without Homologous Blood | |
JPS58225013A (en) | Emulsified pharmaceutical preparation of fluorocarbon | |
JPH02202816A (en) | Perfusate for heart |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM | Patent lapsed | ||
MM | Patent lapsed |
Owner name: THE GREEN CROSS CORP |