ES2914314T3 - Compositions and methods for the long-term release of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonists - Google Patents

Abstract

Una composición que comprende cetrorelix y un polímero, comprendiendo dicho polímero un poli(ácido láctico-co- glicólico) (PLGA) en una relación molar de lactida:glicolida entre 50:50 y 100:0, en la que cetrorelix está presente en una cantidad de 5% - 90% de la masa de dicha composición, y dicho polímero está presente en una cantidad de 10% - 50% de la masa de dicha composición, y en la que dicha composición es capaz de prolongar la liberación de cetrorelix en un sujeto durante un período que oscila entre 1 mes y 6 meses.A composition comprising cetrorelix and a polymer, said polymer comprising a poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) in a molar ratio of lactide:glycolide between 50:50 and 100:0, wherein cetrorelix is present in a amount of 5% - 90% of the mass of said composition, and said polymer is present in an amount of 10% - 50% of the mass of said composition, and wherein said composition is capable of prolonging the release of cetrorelix in a subject for a period ranging from 1 month to 6 months.

Description

DESCRIPCIÓNDESCRIPTION

Composiciones y métodos para la liberación a largo plazo de antagonistas de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH)Compositions and methods for the long-term release of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonists

CAMPO DE LA INVENCIÓNFIELD OF THE INVENTION

La invención se refiere a composiciones y métodos para la liberación a largo plazo de antagonistas de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH). Específicamente, la invención se refiere a composiciones basadas en polímeros para la liberación controlada de antagonistas de GnRH. A continuación, las referencias a métodos de tratamiento en los párrafos posteriores de esta descripción deben interpretarse como referencias a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos para uso en un método de tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia (o para diagnóstico).The invention relates to compositions and methods for the long-term release of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonists. Specifically, the invention relates to polymer-based compositions for the controlled release of GnRH antagonists. Hereinafter, references to methods of treatment in subsequent paragraphs of this description are to be construed as referring to compounds, pharmaceutical compositions, and medicaments for use in a method of treating the human (or animal) body by therapy (or for diagnosis).

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓNBACKGROUND OF THE INVENTION

La hormona hipotalámica, hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) (también conocida como hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH)), controla la secreción de gonadotropinas, hormona luteinizante (LH) y hormona estimulante del folículo (FSH) de la glándula pituitaria anterior. La GnRH es secretada por el hipotálamo y estimula la secreción de la hormona luteinizante (LH) y la hormona estimulante del folículo (FSH). Los análogos de GnRH se utilizan actualmente para tratar muchas afecciones médicas que requieren la manipulación de la producción de hormonas sexuales, testosterona y estrógeno. Schally et al. (Schally 1971) aislaron, identificaron la secuencia de aminoácidos y sintetizaron la hormona peptídica GnRH. La eliminación o reemplazo de diferentes aminoácidos del péptido GnRH ha dado como resultado el descubrimiento de análogos agonistas de GnRH que demuestran una mayor potencia para la secreción de LH y FSH. Se produce un efecto clínico paradójico cuando los análogos agonistas se usan de manera continua, de modo que después del período crónico y relativamente largo (2-3 semanas) de estimulación de la secreción de LH y FSH, en realidad hay una inhibición de la liberación de LH y FSH y la consiguiente supresión de la producción de esteroides sexuales. (Reissmann 2000). En ciertas condiciones médicas, sin embargo, se desea una supresión inmediata y dependiente de la dosis de LH y FSH. Hace más de 20 años, Schally y Revier sintetizaron la 1a generación de análogos de antagonistas de GnRH que eran demasiado lipófilos e inducían la liberación de histamina. (Schmidt 1984; Hahn 1985). Los análogos antagonistas de la GnRH de 2a generación se fabricaron mediante la incorporación de más sustituciones de aminoácidos (Bajusz 1988; Rivier 1993) que resultó en análogos de decapéptidos potencialmente más seguros y efectivos. Los ejemplos de análogos antagonistas de GnRH de nueva generación incluyen abarelix, degarelix, ganirelix, ozarelix, cetrorelix, taverelix, antarelix e iturelix.The hypothalamic hormone, gonadotropin-releasing hormone (GnRH) (also known as luteinizing hormone-releasing hormone (LHRH)), controls the secretion of gonadotropins, luteinizing hormone (LH) and follicle-stimulating hormone (FSH) from the anterior pituitary gland. GnRH is secreted by the hypothalamus and stimulates the secretion of luteinizing hormone (LH) and follicle-stimulating hormone (FSH). GnRH analogs are currently used to treat many medical conditions that require manipulation of the production of the sex hormones testosterone and estrogen. Schally et al. ( Schally 1971) isolated, identified the amino acid sequence, and synthesized the peptide hormone GnRH. The removal or replacement of different amino acids from the GnRH peptide has resulted in the discovery of agonist analogs of GnRH that demonstrate greater potency for LH and FSH secretion. A paradoxical clinical effect occurs when agonist analogs are used continuously, such that after the chronic and relatively long period (2-3 weeks) of stimulation of LH and FSH secretion, there is actually an inhibition of release. of LH and FSH and the consequent suppression of sex steroid production. ( Reissman 2000). In certain medical conditions, however, immediate and dose-dependent suppression of LH and FSH is desired. More than 20 years ago, Schally and Revier synthesized the 1st generation of GnRH antagonist analogs that were too lipophilic and induced histamine release. ( Schmidt 1984; Hahn 1985). 2nd generation GnRH antagonist analogues were made by incorporating more amino acid substitutions ( Bajusz 1988; Rivier 1993) resulting in potentially safer and more effective decapeptide analogues. Examples of new generation GnRH antagonist analogs include abarelix, degarelix, ganirelix, ozarelix, cetrorelix, taverelix, antarelix, and iturelix.

El desarrollo clínico y las aplicaciones médicas de estos análogos antagonistas de GnRH han tenido éxito o se han intentado para la estimulación ovárica controlada para técnicas de reproducción asistida, mioma uterino, cáncer de ovario, hiperplasia prostática benigna, y cáncer de próstata. En ciertas enfermedades y condiciones, la principal limitación para la aplicación exitosa del análogo antagonista de GnRH ha sido tener solo una formulación de acción corta en la que las formulaciones de depósito de acción más prolongada serían más ventajosas.Clinical development and medical applications of these GnRH antagonist analogs have been successful or attempted for controlled ovarian stimulation for assisted reproductive techniques, uterine myoma, ovarian cancer, benign prostatic hyperplasia, and prostate cancer. In certain diseases and conditions, the main limitation for the successful application of the GnRH antagonist analog has been to have only a short-acting formulation where longer-acting depot formulations would be more advantageous.

En consecuencia, existe la necesidad de formulaciones de liberación prolongada o controlada de acción muy prolongada de un antagonista de GnRH (también denominado antagonista de LHRH).Accordingly, there is a need for very long-acting controlled or sustained release formulations of a GnRH antagonist (also called an LHRH antagonist).

SUMARIO DE LA INVENCIÓNSUMMARY OF THE INVENTION

En un aspecto, la invención se refiere a una composición que comprende cetrorelix y un polímero, comprendiendo dicho polímero un ácido poliláctico-co-glicólico (PLGA) en una relación molar lactida:glicolida entre 50:50 y 100:0, en la que está presente cetrorelix en una cantidad de 5% - 90% de la masa de dicha composición, y dicho polímero está presente en una cantidad de 10% - 50% de la masa de dicha composición, y en la que dicha composición es capaz de prolongar la liberación de cetrorelix en un sujeto por un período que oscila de 1 mes a 6 meses.In one aspect, the invention relates to a composition comprising cetrorelix and a polymer, said polymer comprising a polylactic-co-glycolic acid (PLGA) in a lactide:glycolide molar ratio between 50:50 and 100:0, wherein cetrorelix is present in an amount of 5%-90% by mass of said composition, and said polymer is present in an amount of 10%-50% by mass of said composition, and wherein said composition is capable of prolonging the release of cetrorelix in a subject for a period ranging from 1 month to 6 months.

En una realización ejemplar, la composición es capaz de lograr un efecto terapéutico dentro de, por ejemplo, 24 horas, y mantiene el efecto terapéutico durante al menos 90 días para >95% por ciento de los pacientes tratados. En una realización particular, la composición se presenta en forma de hidrogel. En otra realización particular, la composición se presenta en forma de microesferas.In an exemplary embodiment, the composition is capable of achieving a therapeutic effect within, for example, 24 hours, and maintains a therapeutic effect for at least 90 days for >95% percent of treated patients. In a particular embodiment, the composition is presented in the form of a hydrogel. In another particular embodiment, the composition is in the form of microspheres.

La composición de la invención puede administrarse utilizando un método adecuado. En un aspecto, la composición de la invención es una composición inyectable, que se administra con una inyección o dos inyecciones administradas al mismo tiempo usando, por ejemplo, una aguja de calibre 2 1 o más pequeño, con un volumen de inyección total, por ejemplo, menor que 4 ml. Las inyecciones pueden ser subcutáneas o intramusculares.The composition of the invention can be administered using a suitable method. In one aspect, the composition of the invention is an injectable composition, which is administered with one injection or two injections administered at the same time using, for example, a 2 1 or smaller gauge needle, with a total injection volume, for example. example, less than 4 ml. Injections can be subcutaneous or intramuscular.

En otro aspecto, la invención se refiere a un método para prolongar la liberación de cetrorelix en un sujeto por un período que oscila entre 1 mes y 6 meses, comprendiendo el método administrar a dicho sujeto la composición reivindicada que comprende cetrorelix y un polímero, comprendiendo dicho polímero poli(ácido láctico-co-glicólico) (PLGA) en una relación molar de láctida:glicolida entre 50:50 y 100:0, en la que cetrorelix está presente en una cantidad de 5%-90% de la masa de dicha composición, y dicho polímero está presente en una cantidad de 10%-50% de la masa de dicha composición.In another aspect, the invention relates to a method for prolonging the release of cetrorelix in a subject for a period ranging between 1 month and 6 months, the method comprising administering to said subject the claimed composition comprising cetrorelix and a polymer, comprising said poly(lactic-co-glycolic acid) polymer (PLGA) in a lactide:glycolide molar ratio between 50:50 and 100:0, wherein cetrorelix is present in a amount of 5%-90% of the mass of said composition, and said polymer is present in an amount of 10%-50% of the mass of said composition.

En otro aspecto, la invención se refiere a un método para mantener un nivel terapéutico de cetrorelix en un sujeto durante un período que oscila entre 1 mes y 6 meses, comprendiendo el método administrar a dicho sujeto la composición reivindicada que comprende cetrorelix y un polímero, comprendiendo dicho polímero poli(ácido lácticoco-glicólico) (PLGA) en una relación molar lactida:glicolida entre 50:50 y 100:0, en la que cetrorelix está presente en una cantidad de 5%-90% de la masa de dicha composición, y dicho polímero está presente en una cantidad de 10%-50% de la masa de dicha composición.In another aspect, the invention relates to a method for maintaining a therapeutic level of cetrorelix in a subject for a period ranging from 1 month to 6 months, the method comprising administering to said subject the claimed composition comprising cetrorelix and a polymer, said polymer comprising poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) in a lactide:glycolide molar ratio between 50:50 and 100:0, wherein cetrorelix is present in an amount of 5%-90% of the mass of said composition , and said polymer is present in an amount of 10%-50% by mass of said composition.

En otro aspecto, la composición de la invención permite la liberación uniforme del principio activo del vehículo de administración del fármaco con una variación no mayor que 25%, más una eficacia de encapsulación mayor que 70%. En otro aspecto más, la composición de la invención permite liberar el agente activo del vehículo de administración del fármaco con >85% intacto durante toda la duración de la liberación.In another aspect, the composition of the invention allows the uniform release of the active ingredient from the drug administration vehicle with a variation not greater than 25%, plus an encapsulation efficiency greater than 70%. In yet another aspect, the composition of the invention allows the active agent to be released from the drug delivery vehicle with >85% intact for the entire duration of release.

Otras características y ventajas de la presente invención se harán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada, ejemplos y figuras.Other features and advantages of the present invention will become apparent from the following detailed description, examples and figures.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOSBRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

Figura 1 muestra in vitro la liberación de cetrorelix (CRX) de microesferas compuestas de diferentes polímeros y portadores.Figure 1 shows in vitro release of cetrorelix (CRX) from microspheres composed of different polymers and carriers.

Figura 2 muestra in vitro la liberación de cetrorelix a partir de microesferas compuestas por diferentes polímeros cargados con cetrorelix en 35% ácido acético/65% vehículo H2O.Figure 2 shows in vitro the release of cetrorelix from microspheres composed of different polymers loaded with cetrorelix in 35% acetic acid/65% H2O vehicle.

Figura 3 muestra los niveles diarios de liberación de cetrorelix de microesferas compuestas de diferentes polímeros.Figure 3 shows the daily release levels of cetrorelix from microspheres composed of different polymers.

Figura 4A muestra la morfología de perlas 10CP10C20-D23 recubiertas con cetrorelix (12,7% de cetrorelix en 65% de ácido acético (HAc): 25% de agua).Figure 4A shows the morphology of 10CP10C20-D23 beads coated with cetrorelix (12.7% cetrorelix in 65% acetic acid (HAc): 25% water).

Figura 4B muestra la morfología de perlas 20CP15C50-D23 recubiertas con cetrorelix que comprenden 13,4% de cetrorelix).Figure 4B shows the morphology of cetrorelix-coated 20CP15C50-D23 beads comprising 13.4% cetrorelix).

Figura 5 muestra la concentración plasmática de cetrorelix después de la administración a ratas de microesferas de PLGA cargadas con cetrorelix.Figure 5 shows the plasma concentration of cetrorelix after administration of cetrorelix-loaded PLGA microspheres to rats.

Figura 6A muestra la concentración plasmática de cetrorelix a largo plazo después de la administración a ratas de microesferas cargadas con formulaciones de cetrorelix y sal.Figure 6A shows the long-term plasma concentration of cetrorelix after administration to rats of microspheres loaded with cetrorelix and salt formulations.

Figura 6B muestra la concentración plasmática después de la administración de microesferas cargadas con formulaciones de cetrorelix y sal durante las primeras 24 horas posteriores a la administración (es decir, estallido).Figure 6B shows the plasma concentration after administration of microspheres loaded with cetrorelix and salt formulations during the first 24 hours post-administration (ie burst).

Figura 7A muestra concentraciones plasmáticas de cetrorelix comparativas para microesferas cargadas con cetrorelix con y sin sal.Figure 7A shows comparative cetrorelix plasma concentrations for microspheres loaded with cetrorelix with and without salt.

Figura 7B muestra concentraciones plasmáticas de cetrorelix comparativas para microesferas cargadas con cetrorelix con y sin sal durante las primeras 24 horas después de la administración.Figure 7B shows comparative cetrorelix plasma concentrations for microspheres loaded with cetrorelix with and without salt during the first 24 hours after administration.

Figura 8 muestra concentraciones plasmáticas comparativas de cetrorelix para microesferas cargadas con cetrorelix con y sin sal después de la normalización de la dosis.Figure 8 shows comparative cetrorelix plasma concentrations for cetrorelix-loaded microspheres with and without salt after dose normalization.

Figura 9A muestra los niveles de testosterona en suero de rata después de la administración de varias formulaciones de microesferas de cetrorelix.Figure 9A shows rat serum testosterone levels after administration of various cetrorelix microsphere formulations.

Figura 9B muestra los niveles de testosterona en suero de rata después de la administración de varias formulaciones de microesferas de cetrorelix durante las primeras 24 horas después de la administración (es decir, estallido).Figure 9B shows rat serum testosterone levels after administration of various cetrorelix microsphere formulations during the first 24 hours after administration (ie, burst).

Figura 10 muestra liberación acumulativa de cetrorelix in vitro de microesferas de PLGA.Figure 10 shows cumulative release of cetrorelix in vitro from PLGA microspheres.

Figura 11 muestra liberación acumulativa de cetrorelix in vitro de formulaciones de microesferas de sal RG502H/RG752H (30% PLGA). Figure 11 shows cumulative release of cetrorelix in vitro from RG502H/RG752H (30% PLGA) salt microsphere formulations.

Figura 12 muestra liberación acumulativa de cetrorelix in vitro de formulaciones de microesferas de sal RG752H (40% PLGA).Figure 12 shows cumulative release of cetrorelix in vitro from RG752H salt microsphere formulations (40% PLGA).

Figura 13 muestra liberación acumulativa de cetrorelix in vitro de formulaciones de microesferas de sal RG502H/RG752H (40% PLGA).Figure 13 shows cumulative release of cetrorelix in vitro from RG502H/RG752H (40% PLGA) salt microsphere formulations.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓNDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

La invención se refiere a una composición de liberación controlada que comprende un antagonista de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) en combinación con uno o más polímeros y/o sales.The invention relates to a controlled release composition comprising a gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonist in combination with one or more polymers and/or salts.

El antagonista de GnRH es cetrorelix.The GnRH antagonist is cetrorelix.

En un aspecto, se proporciona aquí una composición, comprendiendo dicha composición: una cantidad terapéuticamente eficaz de un antagonista de la GnRH (es decir, cetrorelix) en combinación con un polímero, en el que dicho polímero es poli(ácido láctico-co-glicólico) (PLGA), en la que dicha composición es capaz de liberar dicho antagonista de GnRH durante un largo plazo (p. ej., más de 90 días).In one aspect, a composition is provided herein, said composition comprising: a therapeutically effective amount of a GnRH antagonist (i.e., cetrorelix) in combination with a polymer, wherein said polymer is poly(lactic-co-glycolic acid ) (PLGA), wherein said composition is capable of releasing said GnRH antagonist over a long term (eg, greater than 90 days).

Los polímeros de PLGA en las composiciones de la presente invención tienen una relación en peso de lactida:glicolida que oscila entre 50:50 y 100:0. En realizaciones particulares, la proporción de lactida a glicolida es de alrededor de 55:45, 60:40, 65:35, 70:30, 75:25, 80:20, 85:15, 90:10 o 95:5.The PLGA polymers in the compositions of the present invention have a lactide:glycolide weight ratio ranging from 50:50 to 100:0. In particular embodiments, the ratio of lactide to glycolide is about 55:45, 60:40, 65:35, 70:30, 75:25, 80:20, 85:15, 90:10, or 95:5.

En otro aspecto, los polímeros de PLGA de las composiciones de la presente invención pueden comprender una mezcla de dos o más polímeros de PLGA, teniendo cada uno de los cuales fracciones de glicolida y lactida diferentes. Por ejemplo, la mezcla puede incluir un primer polímero de PLGA que tiene la misma cantidad de glicolida y lactida (RG502H) y un segundo polímero de PLGA que tiene un 25% de glicolida y un 75% de lactida (RG752H). Las proporciones del primer polímero PLGA y del segundo polímero PLGA pueden variar, por ejemplo, la proporción de RG502H a RG752h puede oscilar entre alrededor de 100:0 y alrededor de 0:100.In another aspect, the PLGA polymers of the compositions of the present invention may comprise a mixture of two or more PLGA polymers, each having different glycolide and lactide moieties. For example, the blend may include a first PLGA polymer having equal amounts of glycolide and lactide (RG502H) and a second PLGA polymer having 25% glycolide and 75% lactide (RG752H). The ratios of the first PLGA polymer and the second PLGA polymer can vary, for example, the ratio of RG502H to RG752h can range from about 100:0 to about 0:100.

En un aspecto, la composición es una composición fluida capaz de formar un implante in situ en un sujeto. En un ejemplo, la composición incluye un polímero termoplástico biodegradable (es decir, PLGA), un disolvente biocompatible, y un antagonista de GnRH (es decir, cetrorelix).In one aspect, the composition is a fluid composition capable of forming an implant in situ in a subject. In one example, the composition includes a biodegradable thermoplastic polymer (ie, PLGA), a biocompatible solvent, and a GnRH antagonist (ie, cetrorelix).

El polímero termoplástico biodegradable puede ser sustancialmente insoluble en un medio acuoso o fluido corporal. Los polímeros termoplásticos biodegradables son bien conocidos en la técnica y se describen completamente en los documentos de patentes U.S. 6,565,874; 5,324,519; 4,938,763; 5,702,716; 5,744,153; y 5,990,194The biodegradable thermoplastic polymer may be substantially insoluble in an aqueous medium or body fluid. Biodegradable thermoplastic polymers are well known in the art and are fully described in U.S. Pat. 6,565,874; 5,324,519; 4,938,763; 5,702,716; 5,744,153; and 5,990,194

El tipo, la cantidad y el peso molecular del polímero termoplástico biodegradable presente en la composición pueden depender de una o más propiedades deseadas del implante de liberación controlada.The type, amount and molecular weight of the biodegradable thermoplastic polymer present in the composition may depend on one or more desired properties of the controlled release implant.

Los ejemplos de tipos de poliésteres termoplásticos biodegradables son bien conocidos en la técnica y se describen completamente en el documento de patente U.S. 6,565,874. En una realización particular, el poliéster termoplástico biodegradable adecuado es 50:50 poli(DL-lactida-co-glicolida) que tiene un grupo carboxi terminal, o es 75:25 poli(DL-lactida-co-glicolida) con un grupo carboxi terminal que está protegido. También se pueden usar otros copolímeros adecuados, conocidos por los expertos en la técnica.Examples of types of biodegradable thermoplastic polyesters are well known in the art and are fully described in U.S. Pat. 6,565,874. In a particular embodiment, the suitable biodegradable thermoplastic polyester is 50:50 poly(DL-lactide-co-glycolide) having a terminal carboxy group, or is 75:25 poly(DL-lactide-co-glycolide) with a terminal carboxy group. terminal that is protected. Other suitable copolymers known to those of skill in the art may also be used.

La cantidad de polímero termoplástico biodegradable, en la composición, puede ser cualquier cantidad adecuada, conocida por un experto en la técnica. La cantidad, en la composición, puede oscilar entre alrededor de 30% en peso a 50% en peso; o de alrededor de 35% en peso a alrededor de 45% en peso. En una realización particular, la cantidad es 10, 20, 25, 30, 35, 40, 45 o 50% en peso.The amount of biodegradable thermoplastic polymer, in the composition, can be any suitable amount known to one of skill in the art. The amount, in the composition, can range from about 30% by weight to 50% by weight; or from about 35% by weight to about 45% by weight. In a particular embodiment, the amount is 10, 20, 25, 30, 35, 40, 45 or 50% by weight.

El peso molecular del polímero termoplástico biodegradable, en la composición, puede ser cualquier peso molecular adecuado, conocido por los expertos en la técnica. El peso molecular puede oscilar entre 10.000 y 50.000; de alrededor de 15.000 a alrededor de 45.000; de alrededor de 20.000 a alrededor de 40.000; o de alrededor de 20.000 a alrededor de 30.000. En una realización particular, el peso molecular es de alrededor de 10.000, 15.000, 20.000, 25.000, 30.000, 35.000, 40.000, 45.000 o 50.000.The molecular weight of the biodegradable thermoplastic polymer in the composition can be any suitable molecular weight known to those skilled in the art. The molecular weight can range from 10,000 to 50,000; from about 15,000 to about 45,000; from about 20,000 to about 40,000; or from about 20,000 to about 30,000. In a particular embodiment, the molecular weight is around 10,000, 15,000, 20,000, 25,000, 30,000, 35,000, 40,000, 45,000 or 50,000.

Preferiblemente, el poliéster termoplástico biodegradable tiene un peso molecular medio que oscila entre 23.000 y 45.000, o entre 15.000 y 24.000.Preferably, the biodegradable thermoplastic polyester has an average molecular weight ranging from 23,000 to 45,000, or from 15,000 to 24,000.

El disolvente biocompatible puede ser un disolvente aprótico polar biocompatible. En una realización, el disolvente es miscible o dispersable en medio acuoso o fluido corporal. Los disolventes apróticos polares adecuados son bien conocidos en la técnica, y se describen completamente, por ejemplo, en Aldrich Handbook of Fine Chemicals and Laboratory Equipment, Milwaukee, Wis. (2000) y en las patentes U.S. 6,565,875, 5,324,519; 4,938,763; 5,702,716; 5,744,153; y 5,990,194. The biocompatible solvent may be a biocompatible polar aprotic solvent. In one embodiment, the solvent is miscible or dispersible in aqueous medium or body fluid. Suitable polar aprotic solvents are well known in the art and are fully described, for example, in the Aldrich Handbook of Fine Chemicals and Laboratory Equipment, Milwaukee, Wis. (2000) and in US patents 6,565,875, 5,324,519; 4,938,763; 5,702,716; 5,744,153; and 5,990,194.

En un aspecto, el disolvente de la invención es capaz de difundirse en el fluido corporal de manera que la composición fluida se coagula o se solidifica. En otro aspecto, el disolvente de la invención es biodegradable. En aún otro aspecto, el disolvente de la invención no es tóxico. Como se establece en la patente U.S. 6,565,875, los ejemplos de disolventes apróticos polares adecuados incluyen disolventes apróticos polares que tienen un grupo amida, un grupo éster, un grupo carbonato, una cetona, un éter, un grupo sulfonilo, o una combinación de los mismos.In one aspect, the solvent of the invention is capable of diffusing into body fluid such that the fluid composition coagulates or solidifies. In another aspect, the solvent of the invention is biodegradable. In yet another aspect, the solvent of the invention is non-toxic. As set forth in U.S. Pat. 6,565,875, examples of suitable polar aprotic solvents include polar aprotic solvents having an amide group, an ester group, a carbonate group, a ketone, an ether, a sulfonyl group, or a combination thereof.

En una realización, el disolvente polar aprótico es N-metil-2-pirrolidona, 2-pirrolidona, N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, dimetilsulfóxido, carbonato de propileno, caprolactama, triacetina, o cualquier combinación de los mismos. En otra realización, el disolvente polar aprótico es N-metil-2-pirrolidona.In one embodiment, the aprotic polar solvent is N-methyl-2-pyrrolidone, 2-pyrrolidone, N,N-dimethylformamide, N,N-dimethylacetamide, dimethylsulfoxide, propylene carbonate, caprolactam, triacetin, or any combination thereof. In another embodiment, the aprotic polar solvent is N-methyl-2-pyrrolidone.

Como se establece en la patente U.S. 6,565,875, el disolvente aprótico polar puede estar presente en cualquier cantidad adecuada. El tipo y la cantidad de disolvente aprótico polar biocompatible presente en la composición pueden depender de las propiedades deseadas del implante de liberación controlada.As set forth in U.S. Pat. 6,565,875, the polar aprotic solvent may be present in any suitable amount. The type and amount of biocompatible polar aprotic solvent present in the composition may depend on the desired properties of the controlled release implant.

En una realización particular, el tipo y la cantidad de disolvente aprótico polar biocompatible pueden influir en el tiempo durante el cual se libera el antagonista de GnRH del implante de liberación controlada.In a particular embodiment, the type and amount of biocompatible polar aprotic solvent may influence the time over which the GnRH antagonist is released from the controlled release implant.

En un ejemplo, la composición fluida de la invención comprende un sistema de administración fluido, tal como sistema Atrigel®, que comprende un copolímero (es decir, PLGA), un disolvente orgánico soluble en agua, y un antagonista de GnRH (es decir, cetrorelix).In one example, the fluid composition of the invention comprises a fluid delivery system, such as the Atrigel® system, comprising a copolymer (i.e., PLGA), a water-soluble organic solvent, and a GnRH antagonist (i.e., cetrorelix).

En otro aspecto más, la invención se refiere a un método para tratar una enfermedad asociada con GnRH, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de la composición reivindicada de la invención.In yet another aspect, the invention relates to a method of treating a GnRH-associated disease, the method comprising administering a therapeutically effective amount of the claimed composition of the invention.

En otro aspecto, la invención se refiere a un método para prolongar la liberación de un agente farmacéutico (es decir, cetrorelix) en un sujeto, durante un período que oscila entre 1 mes y 6 meses, comprendiendo el método administrar a dicho sujeto la composición reivindicada de la invención (por ejemplo, microesferas). En otro aspecto, la invención se refiere a un método para extender la liberación de un agente farmacéutico (es decir, cetrorelix) en un sujeto, por un período de al menos 90 días, comprendiendo el método administrar a dicho sujeto la composición reivindicada de la invención (por ejemplo, microesferas).In another aspect, the invention relates to a method for prolonging the release of a pharmaceutical agent (ie cetrorelix) in a subject, for a period ranging from 1 month to 6 months, the method comprising administering to said subject the composition claimed invention (eg, microspheres). In another aspect, the invention relates to a method for extending the release of a pharmaceutical agent (ie cetrorelix) in a subject, for a period of at least 90 days, the method comprising administering to said subject the claimed composition of the invention (for example, microspheres).

En otro aspecto más, la invención se refiere a un método para mantener un nivel eficaz de un agente terapéutico (es decir, cetrorelix) en un sujeto, durante un período que oscila entre 1 mes y 6 meses, comprendiendo el método administrar a dicho sujeto la composición reivindicada de la invención (por ejemplo, microesferas). En otro aspecto, la invención se refiere a un método para mantener un nivel eficaz de un agente terapéutico (es decir, cetrorelix) en un sujeto, durante un período de al menos 90 días, comprendiendo el método administrar a dicho sujeto la composición reivindicada de la invención (por ejemplo, microesferas).In yet another aspect, the invention relates to a method of maintaining an effective level of a therapeutic agent (ie cetrorelix) in a subject, for a period ranging from 1 month to 6 months, the method comprising administering to said subject the claimed composition of the invention (eg, microspheres). In another aspect, the invention relates to a method of maintaining an effective level of a therapeutic agent (ie, cetrorelix) in a subject, for a period of at least 90 days, the method comprising administering to said subject the claimed composition of the invention (eg, microspheres).

La viscosidad intrínseca también puede variar dependiendo de una o más propiedades deseadas. En alguna realización, la viscosidad intrínseca es mayor que alrededor de 0,1 dl/g y menor que alrededor de 6 dl/g. En una realización, la viscosidad intrínseca se encuentra entre alrededor de 0,2 y 4 dl/g, más preferiblemente entre 0,4 y 2 dl/g.The intrinsic viscosity can also vary depending on one or more desired properties. In some embodiment, the intrinsic viscosity is greater than about 0.1 dl/g and less than about 6 dl/g. In one embodiment, the intrinsic viscosity is between about 0.2 and 4 dl/g, more preferably between 0.4 and 2 dl/g.

En una realización ejemplar, la composición es capaz de lograr un efecto terapéutico, por ejemplo, dentro de las 24 horas, y mantiene el efecto terapéutico durante al menos 90 días en, por ejemplo, >95% por ciento de los pacientes tratados. En una realización particular, la composición se presenta en forma de hidrogel. En otra realización particular, la composición se presenta en forma de microesferas.In an exemplary embodiment, the composition is capable of achieving a therapeutic effect, eg, within 24 hours, and maintains the therapeutic effect for at least 90 days in, eg, >95% percent of treated patients. In a particular embodiment, the composition is presented in the form of a hydrogel. In another particular embodiment, the composition is in the form of microspheres.

Las microesferas para la liberación sostenida de agentes terapéuticamente activos y los métodos para su preparación son bien conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, las patentes U.S. Nos. 6,458,387 y 9,381,159). Las microesferas comprenden normalmente una matriz formada por un polímero biodegradable. En algunas realizaciones, la matriz interna se difunde a través de la superficie externa en condiciones apropiadas. En algunas realizaciones, la superficie exterior no solo permite que los fluidos acuosos entren en la microesfera, sino que también permite que el fármaco y el polímero solubilizados salgan de la microesfera. Las microesferas pueden fabricarse para liberar el fármaco y el polímero desde el interior de la microesfera cuando se colocan en un medio acuoso apropiado, tales como fluidos corporales o un amortiguador fisiológicamente aceptable en condiciones fisiológicas durante un período de tiempo prolongado, proporcionando así una liberación sostenida de un fármaco. En una realización, las microesferas pueden fabricarse para liberar un fármaco sin un estallido inicial o una liberación rápida del fármaco.Microspheres for the sustained release of therapeutically active agents and methods for their preparation are well known in the art (see, for example, U.S. Patent Nos. 6,458,387 and 9,381,159). The microspheres typically comprise a matrix made up of a biodegradable polymer. In some embodiments, the internal matrix diffuses through the external surface under appropriate conditions. In some embodiments, the outer surface not only allows aqueous fluids to enter the microsphere, but also allows solubilized drug and polymer to exit the microsphere. The microspheres can be manufactured to release the drug and polymer from within the microsphere when placed in an appropriate aqueous medium, such as body fluids or a physiologically acceptable buffer under physiological conditions for an extended period of time, thus providing sustained release. of a drug. In one embodiment, the microspheres can be made to release a drug without an initial burst or rapid release of the drug.

Las microesferas tienen un tamaño y una forma generalmente uniformes (sustancialmente esféricos), teniendo cada preparación una distribución de tamaño estrecha. Las microesferas varían en tamaño desde alrededor de 0,5 micrómetros hasta alrededor de 100 micrómetros, dependiendo de las condiciones de fabricación. Las características de las microesferas se pueden alterar durante la preparación mediante la manipulación de la concentración de polímero soluble en agua, la temperatura de reacción, el pH, la concentración del agente terapéutico, el agente de reticulación, y/o el tiempo que la macromolécula está expuesta al agente de reticulación y/o a la fuente de energía. En un ejemplo, las microesferas son adecuadas para administración oral o parenteral; administración mucosal; administración oftálmica; inyección intravenosa, subcutánea, intraarticular o intramuscular; administración por inhalación; o administración tópica.The microspheres are generally uniform in size and shape (substantially spherical), with each preparation having a narrow size distribution. The microspheres vary in size from about 0.5 micrometers to about 100 micrometers, depending on the manufacturing conditions. The characteristics of the microspheres can be altered during preparation by manipulating the concentration of water-soluble polymer, the reaction temperature, the pH, the concentration of the therapeutic agent, the cross-linking agent, and/or the time that the macromolecule it is exposed to the crosslinking agent and/or the energy source. In one example, the microspheres are suitable for oral or parenteral administration; mucosal administration; ophthalmic administration; intravenous, subcutaneous, intra-articular or intramuscular injection; administration by inhalation; or topical administration.

La cantidad de matriz de polímero (es decir, PLGA), en la composición de microesferas, puede ser cualquier cantidad adecuada, conocida por los expertos en la técnica. La cantidad, en la composición de microesferas, puede oscilar entre 10% en peso a 50% en peso; de alrededor de 20% en peso a alrededor de 40% en peso; de alrededor de 25% en peso a alrededor de 35% en peso. En una realización particular, la cantidad es 10, 20, 25, 30, 35, 40, 45 o 50% en peso.The amount of matrix polymer (ie, PLGA), in the microsphere composition, can be any suitable amount known to those of skill in the art. The amount, in the microsphere composition, can range from 10% by weight to 50% by weight; from about 20% by weight to about 40% by weight; from about 25% by weight to about 35% by weight. In a particular embodiment, the amount is 10, 20, 25, 30, 35, 40, 45 or 50% by weight.

La cantidad de molécula terapéutica (es decir, cetrorelix) en la microesfera puede oscilar entre 5% en peso a alrededor de 20% en peso, de alrededor de 10% en peso a alrededor de 15% en peso. En una realización particular, la cantidad es 5, 7, 9, 1015, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80 o 90% en peso.The amount of therapeutic molecule (ie, cetrorelix) in the microsphere can range from 5 wt% to about 20 wt%, from about 10 wt% to about 15 wt%. In a particular embodiment, the amount is 5, 7, 9, 1015, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80 or 90% by weight.

La composición de la invención se puede administrar utilizando un método adecuado. En un aspecto, la composición de la invención es una composición inyectable, que se administra con una inyección o dos inyecciones administradas al mismo tiempo, usando, por ejemplo, una aguja de 21G o más pequeña, con un volumen de inyección total, por ejemplo, menor que 4 ml. Las inyecciones pueden ser subcutáneas o intramusculares.The composition of the invention can be administered using a suitable method. In one aspect, the composition of the invention is an injectable composition, administered as one injection or two injections administered at the same time, using, for example, a 21G or smaller needle, with a total injection volume, for example , less than 4 ml. Injections can be subcutaneous or intramuscular.

En otro aspecto, la composición de la invención permite la liberación uniforme del principio activo del vehículo de administración del fármaco con una variación no mayor que 25%, más una eficacia de encapsulación mayor que 70%. En otro aspecto más, la composición de la invención permite la liberación del agente activo del vehículo de administración del fármaco con >85% intacto durante toda la duración de la liberación.In another aspect, the composition of the invention allows the uniform release of the active ingredient from the drug administration vehicle with a variation not greater than 25%, plus an encapsulation efficiency greater than 70%. In yet another aspect, the composition of the invention allows the release of the active agent from the drug delivery vehicle with >85% intact for the entire duration of release.

Las dosis efectivas de las composiciones de la presente invención, para el tratamiento de afecciones o enfermedades como se describe aquí, varían dependiendo de muchos factores diferentes, incluyendo los medios de administración, el sitio objetivo, el estado fisiológico del paciente, si el paciente es humano o animal, otros medicamentos administrados, y si el tratamiento es profiláctico o terapéutico. Normalmente, el paciente es un ser humano, pero también pueden tratarse de mamíferos no humanos, incluyendo los mamíferos transgénicos. Las dosis de tratamiento pueden titularse usando métodos de rutina conocidos por los expertos en la técnica para optimizar la seguridad y la eficacia.Effective doses of the compositions of the present invention, for the treatment of conditions or diseases as described herein, vary depending on many different factors, including the means of administration, the target site, the physiological state of the patient, whether the patient is human or animal, other drugs administered, and whether the treatment is prophylactic or therapeutic. Typically, the patient is a human, but may also be a non-human mammal, including transgenic mammals. Treatment doses can be titrated using routine methods known to those of skill in the art to optimize safety and efficacy.

Las composiciones de la invención pueden incluir una "cantidad terapéuticamente eficaz". Una "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad eficaz en las dosis y durante los períodos de tiempo necesarios para lograr el resultado terapéutico deseado. Una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula puede variar según factores tales como el estado de la enfermedad, la edad, el sexo, y el peso del individuo, y la capacidad de la molécula para provocar una respuesta deseada en el individuo. Una cantidad terapéuticamente eficaz también es aquella en la que cualquier efecto tóxico o perjudicial de la molécula se ve compensado por los efectos terapéuticamente beneficiosos.Compositions of the invention may include a "therapeutically effective amount". A "therapeutically effective amount" refers to an amount effective at the dosages and for the periods of time necessary to achieve the desired therapeutic result. A therapeutically effective amount of a molecule may vary depending on such factors as the disease state, age, sex, and weight of the individual, and the ability of the molecule to elicit a desired response in the individual. A therapeutically effective amount is also one in which any toxic or detrimental effects of the molecule are outweighed by therapeutically beneficial effects.

La descripción proporciona además métodos para tratar una enfermedad o afección con un antagonista de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH), tratando así dicha enfermedad en dicho sujeto.The disclosure further provides methods of treating a disease or condition with a gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonist, thereby treating said disease in said subject.

Las composiciones de la invención descritas aquí pueden usarse para tratar cualquier enfermedad o afección asociada con GnRH que podría tratarse con antagonistas de GnRH. Ejemplos de tratamientos para enfermedades o condiciones tratadas por las composiciones de la invención incluyen, por ejemplo, pero sin limitarse a, la supresión de la producción de testosterona, FSH y LH para el tratamiento del cáncer de próstata y la hiperplasia prostática benigna, bloqueando directamente los receptores de GnRH en células prostáticas para el tratamiento del cáncer de próstata y la hiperplasia prostática benigna, estimulación ovárica controlada para técnicas de reproducción asistida, tratamiento del mioma uterino, supresión de la función ovárica durante la quimioterapia, tratamiento del cáncer de mama, tratamiento del cáncer de ovario, anticonceptivo masculino, y anticonceptivo femenino.The compositions of the invention described herein can be used to treat any GnRH-associated disease or condition that could be treated with GnRH antagonists. Examples of treatments for diseases or conditions treated by the compositions of the invention include, for example, but are not limited to, the suppression of testosterone, FSH and LH production for the treatment of prostate cancer and benign prostatic hyperplasia, by directly blocking GnRH receptors in prostate cells for the treatment of prostate cancer and benign prostatic hyperplasia, controlled ovarian stimulation for assisted reproductive techniques, treatment of uterine myoma, suppression of ovarian function during chemotherapy, treatment of breast cancer, treatment of ovarian cancer, male contraceptive, and female contraceptive.

Como se usan aquí, los términos "tratar" y "tratamiento" se refieren al tratamiento terapéutico, incluyendo las medidas profilácticas o preventivas, en el que el objetivo es prevenir o ralentizar (disminuir) un cambio fisiológico no deseado asociado con una enfermedad o afección. Los resultados clínicos beneficiosos o deseados incluyen, pero sin limitarse a, el alivio de los síntomas, la disminución de la extensión de una enfermedad o afección, la estabilización de una enfermedad o afección (es decir, cuando la enfermedad o afección no empeora), el retraso o la desaceleración de la progresión de una enfermedad o afección, la mejora o paliación de la enfermedad o afección, y la remisión (ya sea parcial o total) de la enfermedad o afección, ya sea detectable o no detectable. "Tratamiento" también puede significar prolongar la supervivencia en comparación con la supervivencia esperada si no se recibe tratamiento. Los que necesitan tratamiento incluyen aquellos que ya padecen la enfermedad o afección, así como aquellos que son propensos a tener la enfermedad o afección, o aquellos en los que se debe prevenir la enfermedad o afección. As used herein, the terms "treat" and "treatment" refer to therapeutic treatment, including prophylactic or preventative measures, in which the goal is to prevent or slow (lessen) an unwanted physiological change associated with a disease or condition. . Beneficial or desired clinical outcomes include, but are not limited to, relief of symptoms, lessening of the extent of a disease or condition, stabilization of a disease or condition (i.e., when the disease or condition is not worsening), delaying or slowing the progression of a disease or condition, improvement or palliation of the disease or condition, and remission (whether partial or complete) of the disease or condition, whether detectable or undetectable. "Treatment" can also mean prolonging survival compared to expected survival if no treatment is received. Those in need of treatment include those who already have the disease or condition, as well as those who are likely to have the disease or condition, or those in whom the disease or condition is to be prevented.

La "administración" a un sujeto no se limita a ningún sistema de administración en particular y puede incluir, sin que se limite a, parenteral (incluyendo inyección subcutánea, intravenosa, intramedular, intraarticular, intramuscular, o intraperitoneal). "Administration" to a subject is not limited to any particular delivery system and may include, but is not limited to, parenteral (including subcutaneous, intravenous, intramedullary, intraarticular, intramuscular, or intraperitoneal injection).

La composición de la invención se puede administrar por vía parenteral (por ejemplo, intravenosa, subcutánea, intraperitoneal, e intramuscular). Además, la composición de la invención se puede administrar por infusión o inyección intravenosa. La composición de la invención puede administrarse por inyección intramuscular o subcutánea. En algunas realizaciones, la composición de la invención puede administrarse quirúrgicamente. Como se usa aquí, una "composición" se refiere a cualquier composición que contiene una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más ingredientes activos (por ejemplo, un antagonista de la GnRH).The composition of the invention can be administered parenterally (for example, intravenous, subcutaneous, intraperitoneal, and intramuscular). Furthermore, the composition of the invention can be administered by intravenous infusion or injection. The composition of the invention can be administered by intramuscular or subcutaneous injection. In some embodiments, the composition of the invention can be administered surgically. As used herein, a "composition" refers to any composition that contains a pharmaceutically effective amount of one or more active ingredients (eg, a GnRH antagonist).

Los métodos de tratamiento descritos aquí se pueden usar para tratar a cualquier mamífero adecuado, incluyendo los primates, tales como monos y seres humanos, caballos, vacas, gatos, perros, conejos, alces, ciervos, y roedores, tales como ratas y ratones. En una realización, el mamífero a tratar es un ser humano.The treatment methods described herein can be used to treat any suitable mammal, including primates, such as monkeys and humans, horses, cattle, cats, dogs, rabbits, elk, deer, and rodents, such as rats and mice. In one embodiment, the mammal to be treated is a human.

EJEMPLOSEXAMPLES

Las composiciones que no contienen cetrorelix no están cubiertas por la invención reivindicada.Compositions that do not contain cetrorelix are not covered by the claimed invention.

EJEMPLO 1EXAMPLE 1

La poli(DL-lactida-co-glicolida) con una proporción de 50:50 de lactida a glicolida se puede disolver en un disolvente adecuado para preparar una disolución de polímero Atrigel®. Esta disolución se puede llenar en una jeringa con un accesorio luer lock hembra.Poly(DL-lactide-co-glycolide) with a 50:50 ratio of lactide to glycolide can be dissolved in a suitable solvent to prepare an Atrigel® polymer solution. This solution can be filled into a syringe with a female luer lock fitting.

Cada antagonista de la GnRH (ozarelix, degarelix, cetrorelix o ganirelex) puede disolverse en agua u otros disolventes, y llenarse en una jeringa con un conector luer-lock macho.Each GnRH antagonist (ozarelix, degarelix, cetrorelix, or ganirelex) can be dissolved in water or other solvents and filled into a syringe with a male luer-lock connector.

Antes de la administración, las dos jeringas se pueden acoplar, y el contenido se puede mezclar de un lado a otro entre las dos jeringas durante múltiples ciclos. Después de una mezcla completa, la formulación se puede volver a introducir en la jeringa con el acoplamiento macho.Prior to administration, the two syringes can be attached, and the contents can be mixed back and forth between the two syringes for multiple cycles. After complete mixing, the formulation can be returned to the syringe with the male coupling.

Después, las dos jeringas se pueden separar, y se puede conectar una aguja (una aguja de 21G o más pequeña). A continuación, el contenido de la jeringa se puede inyectar por vía subcutánea en los sujetos. Un volumen de inyección total puede ser menor que 4 ml.The two syringes can then be separated, and a needle (a 21G or smaller needle) can be attached. The contents of the syringe can then be injected subcutaneously into the subjects. A total injection volume may be less than 4 ml.

El suero se puede recolectar y analizar. La composición antagonista de GnRH puede lograr un efecto terapéutico en 24 horas y mantener el efecto terapéutico durante al menos 90 días en >95% por ciento de los pacientes tratados. La composición puede permitir la liberación consistente del agente activo desde el vehículo de administración del fármaco con una variación de no más de 25%, más una eficiencia de encapsulación de más de 70%. La composición puede liberar el agente activo del vehículo de administración del fármaco con >85% intacto durante toda la duración de la liberación.Serum can be collected and analyzed. The GnRH antagonist composition can achieve a therapeutic effect within 24 hours and maintain the therapeutic effect for at least 90 days in >95% percent of treated patients. The composition may allow for consistent release of the active agent from the drug delivery vehicle with no more than a 25% variance, plus an encapsulation efficiency of more than 70%. The composition is capable of releasing the active agent from the drug delivery vehicle with >85% intact for the entire duration of release.

EJEMPLO 2EXAMPLE 2

Se proporciona un copolímero de multibloques. Cada antagonista de GnRH (ozarelix, degarelix, cetrorelix o ganirelex) se puede cargar en el copolímero de multibloques. La formulación puede estar en forma de microesferas.A multiblock copolymer is provided. Each GnRH antagonist (ozarelix, degarelix, cetrorelix, or ganirelex) can be loaded onto the multiblock copolymer. The formulation may be in the form of microspheres.

Se puede usar una jeringa con una aguja de 21G o más pequeña para inyectar la formulación. La formulación se puede inyectar por vía subcutánea en sujetos. Un volumen de inyección total puede ser menor que 4 ml.A syringe with a 21G or smaller needle can be used to inject the formulation. The formulation can be injected subcutaneously into subjects. A total injection volume may be less than 4 ml.

El suero se puede recolectar y analizar. La composición antagonista de GnRH puede lograr un efecto terapéutico en 24 horas y mantener el efecto terapéutico durante al menos 90 días en >95% por ciento de los pacientes tratados. La composición puede permitir la liberación consistente del agente activo desde el vehículo de administración del fármaco con una variación de no más de 25%, más una eficiencia de encapsulación de más de 70%. La composición puede liberar el agente activo del vehículo de administración del fármaco con >85% intacto durante toda la duración de la liberación.Serum can be collected and analyzed. The GnRH antagonist composition can achieve a therapeutic effect within 24 hours and maintain the therapeutic effect for at least 90 days in >95% percent of treated patients. The composition may allow for consistent release of the active agent from the drug delivery vehicle with no more than a 25% variance, plus an encapsulation efficiency of more than 70%. The composition is capable of releasing the active agent from the drug delivery vehicle with >85% intact for the entire duration of release.

EJEMPLO 3EXAMPLE 3

Desarrollo de Formulaciones de Microesferas de CetrorelixDevelopment of Cetrorelix Microsphere Formulations

Se prepararon varias formulaciones de microesferas utilizando diferentes polímeros y composiciones de fase acuosa interna para ensayar la liberación de cetrorelix in vitro (IVR). Las formulaciones ensayadas se dan en la Tabla 1

Several microsphere formulations using different polymers and internal aqueous phase compositions were prepared to test cetrorelix in vitro release (IVR). The tested formulations are given in Table 1

La liberación in vitro de cetrorelix se evaluó incubando formulaciones de microesferas enumeradas en la Tabla 1 en amortiguador Tris 0,05 M con BSA al 5%, pH 7,4 a 37°C. Los resultados muestran que la liberación fue más lenta cuando se usó como fase acuosa interna 35% de ácido acético/65% de H2O premezclados (Figura 1). In vitro release of cetrorelix was assessed by incubating microsphere formulations listed in Table 1 in 0.05M Tris buffer with 5% BSA, pH 7.4 at 37°C. The results show that the release was slower when premixed 35% acetic acid/65% H2O was used as the internal aqueous phase (Figure 1).

Para realizar más ensayos de IVR de cetrorelix, se obtuvieron varias formulaciones de microesferas cargadas con cetrorelix utilizando diferentes polímeros y 35% de ácido acético/65% de H2O como fase de agua interna (Tabla 2). For further IVR testing of cetrorelix, several cetrorelix-loaded microsphere formulations were made using different polymers and 35% acetic acid/65% H2O as the internal water phase (Table 2).

Tabla 2 Formulaciones de cetrorelix fabricadas con optimización del procedimiento de emulsificación primaria (W1 = 36/65 Mezcla de ácido acético/agua)Table 2 Cetrorelix formulations manufactured with optimization of the primary emulsification procedure (W1 = 36/65 Acetic acid/water mixture)

Las liberaciones in vitro de cetrorelix se evaluaron mediante la incubación de la formulación de microesferas enumerada en la Tabla 2 en amortiguador Tris 0,05 M con BSA al 5%, pH 7,4 a 37°C. Los resultados muestran que la formulación RP17-014 que usa el polímero 20LP10C20-LL40 tuvo la tasa de liberación de cetrorelix más lenta, y además, mostró una cinética de liberación lineal (Figura 2), mientras que las formulaciones de microesferas RP17-012 (1 üCP10C20-D23) y RP17-012 (10CP10C20-D23) (representadas en micrografías electrónicas en la Figura 4A y en la Figura 4B respectivamente) proporcionaron la dosis diaria sostenida más alta de cetrorelix (Figura 3). In vitro releases of cetrorelix were assessed by incubating the microsphere formulation listed in Table 2 in 0.05M Tris buffer with 5% BSA, pH 7.4 at 37°C. The results show that the RP17-014 formulation using the 20LP10C20-LL40 polymer had the slowest cetrorelix release rate, and furthermore, showed linear release kinetics (Figure 2), while the RP17-012 microsphere formulations ( 1 üCP10C20-D23) and RP17-012 (10CP10C20-D23) (represented in electron micrographs in Figure 4A and Figure 4B respectively) provided the highest sustained daily dose of cetrorelix (Figure 3).

Estos resultados muestran que los polímeros basados en L-láctida de degradación lenta, con baja capacidad de hinchamiento, son adecuados para uso en microesferas cargadas con cetrorelix, y muestran una liberación lineal de cetrorelix. Además, el procedimiento de fabricación de microesferas logra una encapsulación de cetrorelix de hasta un 15%.These results show that slow-degrading L-lactide-based polymers with low swellability are suitable for use in cetrorelix-loaded microspheres, and show linear release of cetrorelix. In addition, the microsphere manufacturing process achieves cetrorelix encapsulation of up to 15%.

EJEMPLO 4EXAMPLE 4

Farmacocinética de microesferas cargadas con cetrorelix en ratasPharmacokinetics of cetrorelix-loaded microspheres in rats

Para el estudio farmacocinético se utilizaron varias formulaciones de microesferas cargadas de cetrorelix sin sal con diferentes contenidos de polímeros (Tabla 3). Las preparaciones (<1 ml) se implantaron por vía subcutánea en ratas en una dosis única de 20 mg/kg, y los niveles de cetrorelix en plasma se monitorizaron durante 6 semanas. Los resultados se dan en la Tabla 4 y en la Figura 5. Todas las formulaciones mostraron cetrorelix plasmático detectable > 42 días. Cmax/Cave, 42 días varió de 12,1 a 17,6, y el porcentaje de liberación del día 1 en relación con los 42 días varió de 12 a 17%. Es importante destacar que la cantidad de polímero en la preparación no pareció tener ningún efecto estadísticamente significativo sobre la liberación de cetrorelix.For the pharmacokinetic study, several formulations of salt-free cetrorelix-loaded microspheres with different polymer contents were used (Table 3). Preparations (<1 mL) were implanted subcutaneously in rats at a single dose of 20 mg/kg, and cetrorelix plasma levels were monitored for 6 weeks. Results are given in Table 4 and Figure 5. All formulations showed detectable plasma cetrorelix >42 days. Cmax/Cave, 42 days ranged from 12.1 to 17.6, and the percent release of day 1 relative to 42 days ranged from 12 to 17%. Importantly, the amount of polymer in the preparation did not appear to have any statistically significant effect on cetrorelix release.

Tabla 3 Formulaciones de microesferas cargadas de cetrorelix sin salTable 3 Formulations of cetrorelix loaded microspheres without salt

Tabla 4 Resultados farmacocinéticos de microesferas cargadas con cetrorelix sin sal en ratasTable 4 Pharmacokinetic results of microspheres loaded with cetrorelix without salt in rats

Además, se ensayó la farmacocinética de las formulaciones de microesferas de cetrorelix que contenían sal de Pamoato de Ca u Oleato de Na en ratas mediante el implante subcutáneo de una sola dosis de microesferas de 5 mg/kg en una disolución de vehículo (amortiguador K-Phos 20 mM, manitol al 2,5%, CMC al 3,5%, PS80 al 0,1%) y monitorizando los niveles de cetrorelix en plasma durante 6 semanas. Los resultados se dan en la Tabla 5 y en las Figuras 6A y 6B. Todas las formulaciones mostraron cetrorelix plasmático detectable > 42 días. Cmax/Cave, 42 días varió de 2,4 a 3,1, y el porcentaje de liberación del día 1 relacionado con los 42 días, fue alrededor del 11%.In addition, the pharmacokinetics of cetrorelix microsphere formulations containing Pamoate Ca salt or Na Oleate were tested in rats by subcutaneous implantation of a single dose of 5 mg/kg microspheres in a vehicle solution (K-buffer). 20 mM Phos, 2.5% mannitol, 3.5% CMC, 0.1% PS80) and monitoring plasma cetrorelix levels for 6 weeks. The results are given in Table 5 and in Figures 6A and 6B. All formulations showed detectable plasma cetrorelix > 42 days. Cmax/Cave, 42 days ranged from 2.4 to 3.1, and the percent release on day 1 related to 42 days was about 11%.

Tabla 5 Resultados farmacocinéticos de formulaciones de cetrorelix que contienen sal en ratas.Table 5 Pharmacokinetic results of cetrorelix formulations containing salt in rats.

No hubo una diferencia principal entre la farmacocinética de las formulaciones de microesferas de cetrorelix que contenían Pamoato de Ca y las que contenían Oleato de Na, ambas en la liberación inicial de 24 horas (Figura 6B) y a largo plazo (Figura 6A). Además, mientras que las microesferas de cetrorelix que contienen sal dieron como resultado una menor cantidad de cetrorelix en plasma en comparación con las formulaciones sin sal a largo plazo (Figura 7A), esta diferencia podría ser atribuible a la diferente dosis (Figura 8). Sin embargo, la diferencia de dosis no tuvo en cuenta la concentración máxima mucho mayor observada en la fase de liberación inicial cuando se usaron formulaciones sin sal. De hecho, la adición de sal casi eliminó el pico agudo observado en su ausencia (Figura 7b). There was no major difference between the pharmacokinetics of cetrorelix microsphere formulations containing Ca Pamoate and those containing Na Oleate, both at initial 24 hour release (Figure 6B) and long term (Figure 6A). Furthermore, while salt-containing cetrorelix microspheres resulted in lower plasma cetrorelix compared to salt-free formulations in the long term (Figure 7A), this difference could be attributable to the different dose (Figure 8). However, the dose difference did not take into account the much higher maximum concentration observed in the initial release phase when salt-free formulations were used. In fact, the addition of salt almost eliminated the sharp peak observed in its absence (Figure 7b).

Los efectos fisiológicos posteriores de la administración de microesferas de cetrorelix se evaluaron mediante el control de los niveles de testosterona en ratas. Todas las formulaciones causaron una caída notable en los niveles de testosterona sérica después de 24 horas (Figura 9B). Estos niveles bajos se mantuvieron durante todo el período de seguimiento de 6 semanas en todas las ratas, excepto en aquellas tratadas con microesferas que contenían oleato de sodio (Figura 9A). The subsequent physiological effects of administration of cetrorelix microspheres were evaluated by monitoring testosterone levels in rats. All formulations caused a marked drop in serum testosterone levels after 24 hours (FIG. 9B). These low levels were maintained throughout the 6-week follow-up period in all rats except those treated with microspheres containing sodium oleate (FIG. 9A).

La cantidad total de cetrorelix liberada se evaluó mediante el método de Schwahn et al., Drug Metabolism & Disposition, Vol. 28, No. 1, p10, suponiendo que el peso de la rata oscile entre 250 y 400 g, dosis de 10 mg/kg y AUC (ng/ml *h) = 618,1.The total amount of cetrorelix released was evaluated by the method of Schwahn et al., Drug Metabolism & Disposition, Vol. 28, No. 1, p10, assuming rat weight ranged from 250 to 400 g, 10 mg dose. /kg and AUC (ng/ml *h) = 618.1.

En base a estas suposiciones, el AUC para una dosis de 20 mg/kg (ng/ml*h) se supuso que era 123.620, y el AUC para la dosis de 5 mg/kg (ng/ml*h) se supuso que era 30.905. Los cálculos basados en las suposiciones anteriores dan como resultado un porcentaje estimado de cetrorelix liberado (hasta 42 días) que oscila entre 11 y 15% de la cantidad inicialmente presente en las microesferas. (véase la Tabla 6)Based on these assumptions, the AUC for a 20 mg/kg dose (ng/mL*h) was assumed to be 123,620, and the AUC for the 5 mg/kg dose (ng/mL*h) was assumed to be it was 30,905. Calculations based on the above assumptions result in an estimated percentage of cetrorelix released (up to 42 days) ranging from 11-15% of the amount initially present in the microspheres. (see Table 6)

Tabla 6 Resumen de datos farmacocinéticos para la formulación de microesferas de cetrorelixTable 6 Summary of pharmacokinetic data for cetrorelix microsphere formulation

EJEMPLO 5EXAMPLE 5

Estudios de liberación in vitro de cetrorelix de formulaciones de microesferas adicionales In vitro release studies of cetrorelix from additional microsphere formulations

Para complementar los datos farmacocinéticos in vivo, y optimizar aún más las composiciones de microesferas cargadas con cetrorelix in vitro, se llevaron a cabo estudios de liberación en los que se incubaron 45 mg de microesferas en 0,5 ml de Tris manitol, pH 7,4 a 37°C. Los resultados para la liberación in vitro para las formulaciones sin sal utilizadas en los estudios farmacocinéticos se resumen en la Figura 10. En contraste con los datos in vitro, el aumento del contenido de PLGA en la composición del 20% al 30% dio como resultado una marcada reducción de la tasa de liberación de cetrorelix y de la liberación acumulativa. Sorprendentemente, un mayor aumento del contenido de PLGA, de 30% a 40%, aunque resultó en una mayor disminución de la tasa de liberación, también produjo un cambio insignificante en los niveles de liberación acumulativos, especialmente a largo plazo. Además, en todas las formulaciones, la liberación acumulativa parece estabilizarse después de aproximadamente 60 días, lo que sugiere que se ha logrado la liberación acumulativa máxima.To supplement in vivo pharmacokinetic data, and further optimize cetrorelix-loaded microsphere compositions in vitro , release studies were performed in which 45 mg microspheres were incubated in 0.5 mL Tris mannitol, pH 7, 4 to 37°C. The results for in vitro release for the salt-free formulations used in the pharmacokinetic studies are summarized in Figure 10. In contrast to the in vitro data, increasing the PLGA content in the composition from 20% to 30% resulted in a marked reduction in the release rate of cetrorelix and in the cumulative release. Surprisingly, a further increase in PLGA content, from 30% to 40%, while resulting in a greater decrease in release rate, also produced negligible change in cumulative release levels, especially in the long term. Furthermore, in all formulations, the cumulative release appears to level off after approximately 60 days, suggesting that the maximum cumulative release has been achieved.

Con el fin de explorar más a fondo el efecto de la sal y del polímero en la liberación de cetrorelix, se ensayaron varias formulaciones de microesferas cargadas con cetrorelix 15% de RG502H (50:50 lactida:glicolida) y 15% de RG752H (75:25 lactida:glicolida) (30% de contenido total de PLGA) que contienen sal (Tabla 7), y se compararon con formulaciones sin sal. In order to further explore the effect of salt and polymer on cetrorelix release, several microsphere formulations loaded with cetrorelix 15% RG502H (50:50 lactide:glycolide) and 15% RG752H (75 :25 lactide:glycolide) (30% total PLGA content) containing salt (Table 7), and compared to formulations without salt.

Los resultados muestran que la presencia de sal disminuye notablemente los niveles acumulativos de liberación de cetrorelix. Si bien el oleato de sodio fue particularmente eficaz (Figura 11), todas las sales dieron como resultado una liberación acumulada más baja en comparación con la concentración libre de sal correspondiente. Además, la liberación acumulativa de cetrorelix pareció alcanzar una meseta después de 49 días. Al mismo tiempo, el oleato de Na y el citrato de Ca no parecieron tener ningún efecto sobre la tasa de liberación inicial, mientras que disminuyó ligeramente en presencia de pamoato de Ca.The results show that the presence of salt markedly decreases the cumulative release levels of cetrorelix. While sodium oleate was particularly effective (Figure 11), all salts resulted in a lower cumulative release compared to the corresponding free salt concentration. Furthermore, the cumulative release of cetrorelix appeared to plateau after 49 days. At the same time, Na oleate and Ca citrate did not seem to have any effect on the initial release rate, while it decreased slightly in the presence of Ca pamoate.

Sorprendentemente, cuando el contenido de polímero se incrementó hasta 40% y se reemplazó con RG752H (75:25 lactida:glicolida) (Tabla 8), la presencia de Pamoato de Ca redujo la tasa de liberación inicial pero aumentó drásticamente (casi 3 veces) la liberación acumulativa de cetrorelix, en comparación con la formulación sin sal. Por otro lado, de manera similar a los datos de RG502H/RG752H, el oleato de Na y el citrato de Ca no parecieron tener ningún efecto en la tasa de liberación inicial, aunque estas formulaciones mostraron un aumento modesto en los niveles de liberación acumulada (Figura 12). Surprisingly, when the polymer content was increased to 40% and replaced with RG752H (75:25 lactide:glycolide) (Table 8), the presence of Ca Pamoate reduced the initial release rate but dramatically increased (almost 3-fold) the cumulative release of cetrorelix, compared to the formulation without salt. On the other hand, similar to the RG502H/RG752H data, Na oleate and Ca citrate did not appear to have any effect on the initial release rate, although these formulations showed a modest increase in cumulative release levels ( Figure 12).

En un intento por investigar el efecto del polímero y la N-metil-2-pirrolidona (NMP) sobre la tasa de liberación de cetrorelix y la liberación acumulativa, se ensayaron formulaciones de microesferas usando 20% de RG502H y 20% de RG752H, o 40% de RG752H, con y sin NMP (Tabla 9).In an attempt to investigate the effect of polymer and N-methyl-2-pyrrolidone (NMP) on cetrorelix release rate and cumulative release, microsphere formulations using 20% RG502H and 20% RG752H, or 40% RG752H, with and without NMP (Table 9).

Tabla 9 Formulaciones de microesferas cargadas con cetrorelix RG502H/RG752H (40% PLGA) con y sin NMP.Table 9 Formulations of cetrorelix RG502H/RG752H (40% PLGA) loaded microspheres with and without NMP.

Los resultados se resumen en la Figura 13 y en la Tabla 10. Sorprendentemente, la omisión de NMP de 40% RG752H dio como resultado una disminución drástica tanto en la tasa de liberación de cetrorelix como en la liberación total. Curiosamente, las microesferas 20% RG502H/20% RG752H mostraron un perfil de liberación de cetrorelix multifásico independiente de NMP que consta de una fase de explosión inicial, seguida de una primera fase de meseta con aproximadamente 8% de liberación acumulada, lograda el día 42, seguida de la segunda fase de explosión los días 42-49, y seguida posteriormente por una segunda fase de meseta, con aproximadamente 17% de liberación acumulada, alcanzada el día 92.The results are summarized in Figure 13 and Table 10. Surprisingly, omitting NMP from 40% RG752H resulted in a dramatic decrease in both cetrorelix release rate and total release. Interestingly, the 20% RG502H/20% RG752H microspheres showed an NMP-independent multiphasic cetrorelix release profile consisting of an initial burst phase, followed by a first plateau phase with approximately 8% cumulative release, achieved on day 42. , followed by the second burst phase on days 42-49, and subsequently followed by a second plateau phase, with approximately 17% cumulative release, reached on day 92.

Tabla 10 Liberación de cetrorelix in vitro por formulaciones de microesferas 40% RG752H, con y sin NMPTable 10 Release of cetrorelix in vitro by 40% RG752H microsphere formulations, with and without NMP

Claims (15)

REIVINDICACIONES I .Una composición que comprende cetrorelix y un polímero, comprendiendo dicho polímero un poli(ácido láctico-coglicólico) (PLGA) en una relación molar de lactida:glicolida entre 50:50 y 100:0, en la que cetrorelix está presente en una cantidad de 5% - 90% de la masa de dicha composición, y dicho polímero está presente en una cantidad de 10% - 50% de la masa de dicha composición, y en la que dicha composición es capaz de prolongar la liberación de cetrorelix en un sujeto durante un período que oscila entre 1 mes y 6 meses.I. A composition comprising cetrorelix and a polymer, said polymer comprising a poly(lactic-coglycolic acid) (PLGA) in a molar ratio of lactide:glycolide between 50:50 and 100:0, wherein cetrorelix is present in a amount of 5% - 90% of the mass of said composition, and said polymer is present in an amount of 10% - 50% of the mass of said composition, and wherein said composition is capable of prolonging the release of cetrorelix in a subject for a period ranging from 1 month to 6 months. 2. La composición de la reivindicación 1, en la que dicha composición es capaz de liberar cetrorelix durante más de 90 días.2. The composition of claim 1, wherein said composition is capable of releasing cetrorelix for more than 90 days. 3. La composición de la reivindicación 1, en la que dicha composición está en forma de hidrogel.3. The composition of claim 1, wherein said composition is in the form of a hydrogel. 4. La composición de la reivindicación 1, en la que dicha composición es una composición fluida.4. The composition of claim 1, wherein said composition is a flowable composition. 5. La composición de la reivindicación 1, en la que dicha composición está en forma de implante.5. The composition of claim 1, wherein said composition is in the form of an implant. 6. La composición de la reivindicación 1, en la que la relación en peso de lactida:glicolida de dicho PLGA es 55:45, 60:40, 65:35, 70:30, 75:25, 80:20, 85:15, 90:10 o 95:5.6. The composition of claim 1, wherein the lactide:glycolide weight ratio of said PLGA is 55:45, 60:40, 65:35, 70:30, 75:25, 80:20, 85: 15, 90:10 or 95:5. 7. La composición de la reivindicación 1, que comprende además un disolvente.7. The composition of claim 1, further comprising a solvent. 8. La composición de la reivindicación 7, en la que dicho disolvente es un disolvente aprótico polar.8. The composition of claim 7, wherein said solvent is a polar aprotic solvent. 9. La composición de la reivindicación 8, en la que dicho disolvente es W-metil-2-pirrolidona.9. The composition of claim 8, wherein said solvent is W-methyl-2-pyrrolidone. 10. La composición de la reivindicación 7, en la que dicho disolvente está presente en una concentración que oscila entre 10% y 30% (p/p).10. The composition of claim 7, wherein said solvent is present in a concentration ranging from 10% to 30% (w/w). I I .La composición de la reivindicación 7, en la que dicho PLGA comprende partes iguales de lactida y glicolida. I I .The composition of claim 7, wherein said PLGA comprises equal parts of lactide and glycolide. 12. La composición de la reivindicación 7, en la que dicho PLGA comprende 75% de lactida y 25% de glicolida.12. The composition of claim 7, wherein said PLGA comprises 75% lactide and 25% glycolide. 13. La composición de la reivindicación 7, en la que dicho PLGA comprende partes iguales de una primera y una segunda composición polimérica, en la que dicha primera composición polimérica comprende partes iguales de lactida y glicolida, y dicha segunda composición polimérica comprende 75% de lactida y 25% de glicolida.13. The composition of claim 7, wherein said PLGA comprises equal parts of a first and a second polymer composition, wherein said first polymer composition comprises equal parts of lactide and glycolide, and said second polymer composition comprises 75% of lactide and 25% glycolide. 14. La composición de la reivindicación 13, en la que el polímero está presente en una concentración que oscila entre 20% y 40% (p/p).14. The composition of claim 13, wherein the polymer is present in a concentration ranging from 20% to 40% (w/w). 15. La composición de la reivindicación 7, que comprende además una sal; preferiblemente en la que dicha sal es pamoato de Ca, oleato de Na o citrato de Ca. 15. The composition of claim 7, further comprising a salt; preferably wherein said salt is Ca pamoate, Na oleate or Ca citrate.