ES2905413T3

ES2905413T3 - Compuestos tricíclicos de benzoxaborol y usos de los mismos

Info

Publication number: ES2905413T3
Application number: ES14834292T
Authority: ES
Inventors: M R K Alley (Dickon); Vincent S Hernandez; Jacob J Plattner; Xianfeng Li; David Barros-Aguirre; Ilaria Giordano
Original assignee: GlaxoSmithKline Intellectual Property No 2 Ltd; Anacor Pharmaceuticals Inc
Current assignee: GlaxoSmithKline Intellectual Property No 2 Ltd; Anacor Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2013-08-09
Filing date: 2014-08-08
Publication date: 2022-04-08
Anticipated expiration: 2034-08-08
Also published as: WO2015021396A3; LT3030519T; CR20160064A; NZ716350A; JP2019123727A; KR20160038901A; US20190241586A1; HRP20220384T1; CA2919888A1; BR112016002651B1; PE20160752A1; US10526352B2; WO2015021396A2; AP2016009046A0; PH12016500234B1; CN110003253B; RS62887B1; SG10201914073PA; MX2016001732A; CA2919888C

Abstract

Un compuesto que tiene una estructura como se muestra en la Fórmula II: **(Ver fórmula)** en donde X se selecciona entre cloro o bromo y R1 y R2 cada uno de se selecciona independientemente entre H y -CH3; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos tricíclicos de benzoxaborol y usos de los mismos

Prioridad

La presente solicitud reivindica prioridad de la Solicitud Provisional de EE.UU. N.° 61/864.496 presentada el 9 de agosto de 2013 y la Solicitud Provisional de EE.UU. 61/918.976 presentada el 20 de diciembre de 2013.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a compuestos, a composiciones que los contienen, a su uso en terapia, incluido su uso como antimicobacterianos, por ejemplo en el tratamiento de la tuberculosis y a métodos para la preparación de tales compuestos.

Antecedentes de la invención

Mycobacterium es un género en la clase de bacteria llamada Actinobacteria con su propia familia distinta conocida como Mycobacteriacae. Mycobacterium contiene varios patógenos obligados y oportunistas de animales, que también pueden transmitirse a los humanos y causar enfermedades en los humanos, exhibiendo así un considerable potencial zoonótico. Durante las últimas décadas, los miembros del complejo Mycobacterium avium intracelular (MAIC) surgieron como patógenos de enfermedades humanas, incluyendo linfadenitis en niños, enfermedad pulmonar similar a la tuberculosis e infecciones diseminadas (que ocurren predominantemente en personas inmunodeprimidas, particularmente pacientes con SIDA). De manera análoga, importantes enfermedades animales resultan de infecciones en un animal por miembros de este grupo, por ejemplo, tuberculosis aviar y paratuberculosis en rumiantes. MAIC incluye M. intracelular y 4 subespecies de M. avium, a saber, M. avium subsp. avium, M. avium subsp. hominissuis, M. avium subsp. silvaticum, y M. avium subsp. paratuberculosis. Mientras que los miembros de M. tuberculosis complejos se transmiten por contacto directo con el hospedador, las especies MAIC se adquieren predominantemente de fuentes ambientales, incluido el suelo, agua, polvo y alimento.

Mycobacterium tuberculosis (MTB) es un pequeño bacilo aeróbico no móvil de alto GC con una "membrana externa" que es inusualmente gruesa, "cerosa", hidrófoba, rica en ácidos micólicos, y extremadamente impermeable, que hace que las infecciones por micobacterias sean difíciles de tratar. Se cree que un tercio de la población mundial está infectada (incluida la MTB latente), pero este número aumenta a más del 80 % de la población en muchos países asiáticos y africanos. Si no se trata, la tasa de mortalidad por infecciones activas de MTB es superior al 50 %. Además, la combinación de VIH y MTB es mortal y un número creciente de cepas de MTB se están volviendo resistentes a los medicamentos de atención convencionales; se documentan aproximadamente 300.000 nuevos casos cada año de M. tuberculosis de resistencia a múltiples fármacos (MDR). M. tuberculosis resistente a múltiples fármacos (MDR) es resistente a la isoniazida y la rifampicina, y M. tuberculosis resistente a múltiples fármacos (x Dr ) también es resistente al menos a una quinolona y un aminoglucósido. Tal como puede observarse en la Figura 1, M. tuberculosis XDR ha sido reportado en gran parte del mundo.

Agregue a estos problemas la facilidad de transmisión, tal como se muestra en la Figura 2, la globalización de los viajes y la continua reubicación y emigración de muchos segmentos de la población mundial y es evidente que MTB se está convirtiendo en una crisis global.

Los fármacos sintéticos para el tratamiento de la tuberculosis (TB) han estado disponibles durante más de medio siglo, pero la incidencia de la enfermedad sigue aumentando en todo el mundo. Más de 2 mil millones de personas están actualmente infectadas con M tuberculosis, la mayoría son casos latentes, y se estima que ocurren más de 9 millones de casos nuevos cada año, a nivel mundial, resultando de 1,7 a casi 2 millones de muertes por año. Solo en 2004 se registraron aproximadamente 24.500 nuevos contagios y cerca de 5.500 muertes, cada día. Véase Zignol, Met al., M. Surveillance of anti-tuberculosis drug resistance in the world: an updated analysis, 2007-2010. Bull. World Health Organ 2012, 90 (2), 111-119D) la coinfección con el VIH está impulsando el aumento de la incidencia (Williams, B. G.; Dye, C. Science, 2003, 301, 1535) y la causa de muerte en el 31 % de los pacientes de SIDA en África puede atribuirse a la TB. Véase Corbett, E. Let al.,. Arch. Intl. Med., 2003, 163, 1009, Septkowitz, Aet al., Clin. Microbiol. Rev. 1995, 8, 180).

Las limitaciones del tratamiento y la prevención de la tuberculosis son bien conocidas. La vacuna disponible actualmente, BCG se introdujo en 1921 y no protege a la mayoría de las personas más allá de la infancia. Según un informe de 2006 - "International Standards for Tuberculosis Care", un documento desarrollado por la Tuberculosis Coalition for Technical Assistance (TBCTA), cuyos socios incluyen Centers for Disease Control, American Thoracic Society, Tuberculosis Foundation, KNCV, la Organización Mundial de la Salud y la Unión Internacional contra la Tuberculosis y las Enfermedades Pulmonares - los pacientes que se infectan con la enfermedad activa soportan actualmente dos meses de terapia combinada con medicamentos introducidos hace entre 50 y 60 años - isoniazida (1952), rifampicina (1963), pirazinamida (1954) y etambutol (1961), seguidos de otros 4 meses de isoniazida y rifampicina (también conocida como rifampicina). Como alternativa, la fase de continuación podría incluir isoniazida y etambutol durante seis meses cuando no se pueda evaluar la adherencia, pero según este informe, una fase de continuación más larga se asocia con una mayor tasa de fracaso y recaída, especialmente en pacientes con infección por VIH. Además, como se detalla en este informe, las dosis de los fármacos contra la tuberculosis utilizados deben ajustarse a la recomendación internacional y combinaciones de dosis fijas de dos (isoniazida y rifampicina), tres (isoniazida, rifampicina y pirazinamida) y cuatro (isoniazida, rifampicina, pirazinamida y etambutol) fármacos son muy recomendables, especialmente cuando no es posible monitorear al paciente para asegurar que el tratamiento sea ingerido.

Se requiere una dosificación diaria en estas fases del tratamiento y el cumplimiento deficiente promueve la aparición y propagación de cepas resistentes a múltiples fármacos, que son difíciles de tratar. Cursos más cortos de agentes más activos que se pueden tomar con menos frecuencia y que presentan una gran barrera para la aparición de resistencia, es decir, agentes que son eficaces contra cepas de TB multirresistentes (MDR-TB), se requieren con urgencia. Un informe de marzo de 2013 (http://www.aidsmap.com/Once-weekly-continuation-phase-TB-treatmentequals-standard-of-care/page/2589498/) sugiere que una combinación de dos fármacos de rifapentina (un derivado de acción prolongada de la rifampicina) con moxifloxacina (un antibiótico de fluoroquinolona que no se ha usado previamente en el tratamiento de la TB) puede permitir que el tratamiento de la tuberculosis (TB) se tome una vez a la semana durante la fase de continuación de cuatro meses y logra el mismo tratamiento habitual como tratamiento tradicional de continuación del tratamiento diario con isoniazida y rifampicina. Tal fase de tratamiento permitiría que la supervisión del tratamiento se extendiera a lo largo de la fase de continuación, aumentando la adherencia. Sin embargo, moxifloxacino aún no está aprobado para el tratamiento de la TB, y el protocolo de tratamiento de una vez por semana aún no está respaldado o aprobado como un tratamiento habitual alternativo: los paneles de directrices a nivel internacional y nacional deberán revisar la evidencia publicada para determinar si este tratamiento de continuación alternativo debe recomendarse y adoptarse un protocolo. Además, la rifapentina es costosa, y las interacciones entre la rifapentina y los medicamentos antirretrovíricos en las clases de inhibidores de la transcriptasa inversa no nucleósidos (NNRTI) e inhibidores de la proteasa pueden impedir su uso en pacientes con tuberculosis que también son VIH positivos y toman medicamentos antirretrovíricos. Por lo tanto, actualmente, el análisis de costos/beneficios de un tratamiento de continuación con rifapentina semanal frente a rifampicina diaria aún no se ha evaluado completamente.

El fármaco contra la tuberculosis Sirturo™ (bedaquilina) se aprobó en los Estados Unidos a fines de diciembre de 2012, y otro, delamanida, está intentando obtener la aprobación reglamentaria en la UE. Sin embargo, ambos están reservados para la tuberculosis resistente a los fármacos, que representa sólo el 5 % de los casos nuevos. Un Editorial y News Focus de 2007 en Nature Medicine analiza muchos aspectos de la TB, como la patogenia, la epidemiología, el descubrimiento de fármacos y el desarrollo de vacunas hasta la fecha (Nature Medicine, 2007, Focus on Tuberculosis, Vol 13(3), páginas 263-312), señalando que 125 años después del aniversario del descubrimiento de Mycobacterium tuberculosis, más de un tercio de las personas en el mundo están infectadas con M tuberculosis, y de estos, más de 1 de cada 10 desarrollará la enfermedad conocida como tuberculosis, anteriormente conocido como tisis, en su vida.

Cuando se combina con la aparición de cepas resistentes a múltiples fármacos de Mycobacterium tuberculosis (MDR-TB), la escala del problema se amplifica. El aumento global de bacterias y otros microorganismos resistentes a los antibióticos y antimicrobianos en general, representa una gran amenaza. El despliegue de cantidades masivas de agentes antimicrobianos en la ecosfera durante los últimos 60 años ha introducido una poderosa presión selectiva para la aparición y propagación de patógenos resistentes a los antimicrobianos. Por lo tanto, existe la necesidad de descubrir y desarrollar nuevas entidades químicas para tratar la TB (los avances recientes se revisan en: Grosset JH, Singer TG, Bishai WR. New Drugs for the Treatment of Tuberculosis: Hope and Reality. Int J Tuberc Lung Dis. Agosto de 2012;16(8):1005-14).

La presente invención se relaciona con compuestos tricíclicos de benzoxaborol que muestran una selectividad inesperada para inhibir la replicación de Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) frente a la inhibición (toxicidad) de las células humanas en comparación con otros compuestos de benzoxaborol, y presentan valores de CIM submicromolares frente a especies de micobacterias, particularmente Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium tuberculosis complejo (MTC), Mycobacterium avium y Mycobacterium avium complejo (MAC) y Mycobacterium avium intracellulare complejo (MAIC). En términos generales, un benzoxaborol tiene la siguiente estructura y sistema de numeración de sustituyentes:

Ciertos benzoxaboroles que están sustituidos en la posición 7 forman un compuesto de benzoxaborol tricíclico. Cuando el benzoxaborol tricíclico resultante se sustituye adicionalmente con un sustituyente halógeno en la posición 4 y un sustituyente aminometilo en la posición 3, tales compuestos son sorprendentemente selectivos y efectivos contra las micobacterias, incluidas M. tuberculosis. La selectividad observada se evalúa comparando los valores de MIC para tales compuestos en relación con la inhibición (toxicidad) de estos compuestos para las células humanas, en comparación con otros compuestos de benzoxaborol.

Las moléculas que contienen boro, como los benzoxaboroles, que son útiles como antimicrobianos, se han descrito anteriormente, véase, por ejemplo, "Benzoxaboroles - Old compounds with new applications" Adamczyk-Wozniak, A. et al., Journal of Organometallic Chemistry Volumen 694, Número 22, 15 de octubre de 2009, Páginas 3533-3541 y las Pub. de Pat. de EE.UU. US20060234981, US20070155699, US20090227541, WO2012033858 y US2013165411.

US20090227541 desvela una multitud de compuestos, incluyendo dos compuestos de benzoxaborol tricíclico con diferente actividad antibacteriana contra un panel de bacterias Gram negativas (véanse, por ejemplo, las Tablas 1 y 2), pero no desvela compuestos de benzoxaborol tricíclico con sustitución de halógeno en el anillo de benzoxaborol. El documento WO2012033858 desvela compuestos de benzoxaborol con actividad contra Mycobacterium tuberculosis, incluidos ciertos compuestos de benzoxaborol (véanse, por ejemplo, los ejemplos 1.A a 1.V), pero nuevamente, no se desvelan compuestos tricíclicos de benzoxaborol con sustitución de halógeno en el anillo de benzoxaborol. El documento US2013165411 desvela compuestos de benzoxaborol tricíclicos que muestran actividad contra Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae (véase la Tabla 1), pero señala específicamente que los compuestos tricíclicos sustituidos con halógeno investigados (Ejemplos 17, 18 y 19) carecen de actividad contra A. baumannii, con valores de MIC > 16 pg/pl de actividad antibacteriana (véase la Figura 1B).

Sumario de la invención

Los inventores han descubierto sorprendentemente que los compuestos de benzoxaborol tricíclicos como se describe en el presente documento muestran una selectividad inesperada para inhibir la replicación de Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) frente a la inhibición (toxicidad) de las células humanas en comparación con otros compuestos de benzoxaborol. Estos compuestos tricíclicos de benzoxaborol presentan valores MIC submicromolares contra M. tuberculosis, que es comparable o mejor que los valores MIC para las terapias actuales disponibles para inhibir M. tuberculosis. Además, en otras realizaciones, los compuestos de benzoxaborol tricíclicos como se describen en el presente documento están pensados para su uso en combinación con los compuestos antituberculosos actuales y están pensados para lograr una mayor eficacia en el tratamiento de animales, incluidos seres humanos, infectados con M. tuberculosis.

La resistencia sigue siendo un problema en el tratamiento de la tuberculosis (TB) y una estrategia clínica es centrarse en la combinación temprana con otros medicamentos para la TB y acelerar la evaluación temprana de la eficacia del compuesto en los pacientes. Los compuestos de Fórmula II o Fórmula Ila ofrecen una oportunidad única para abordar los problemas graves que surgen durante el tratamiento de la TB, tales como la resistencia a múltiples fármacos, amplia resistencia a los medicamentos, reactividad y/o interacción adversa entre agentes terapéuticos en una combinación de múltiples fármacos y duración del tratamiento, abordando así las posibles necesidades de los pacientes.

En ciertas realizaciones de la presente invención, se presentan combinaciones de agentes antituberculosos y ciertos benzoxaboroles tricíclicos, para su uso en el tratamiento de infecciones por Mycobacterium tuberculosis en animales, incluidos los seres humanos. En realizaciones particulares, se utilizan tales benzoxaboroles tricíclicos, en combinación con otros agentes antituberculosos conocidos, para el tratamiento de un sujeto animal con una infección por Mycobacterium tuberculosis, particularmente en un sujeto animal que además está infectado con un retrovirus humano, en particular un virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).

En un aspecto, la invención es un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se menciona en las reivindicaciones adjuntas

En el presente documento se desvela un benzoxaborol tricíclico que es un compuesto o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que tiene una estructura de acuerdo con la Fórmula II:

en donde X se selecciona entre cloro, flúor, bromo y yodo; R¹y R²se seleccionan cada uno independientemente entre H, -CH³, -CH²CH³, -CH²CH²CH³y -CH(CH³)².

También se desvela un compuesto de Fórmula II o una sal del mismo, en donde X es cloro o bromo; R¹y R²se seleccionan cada uno independientemente entre H, -CH³, -CH²CH³, -CH²CH²CH³y -CH(CH³)².

También se desvela un compuesto de Fórmula II o una sal del mismo, en donde X es flúor, R¹y R²son como se describen en el presente documento.

También se desvela un compuesto de Fórmula II o una sal del mismo, en donde X es cloro, R¹y R²son como se describen en el presente documento.

También se desvela un compuesto de Fórmula II o una sal del mismo, en donde X es bromo, R¹y R²son como se describen en el presente documento.

También se desvela un compuesto de Fórmula II o una sal del mismo, en donde X es yodo, R¹y R²son como se describen en el presente documento.

También se desvela un compuesto de Fórmula II o una sal del mismo, en donde X es cloro o bromo, R¹y R²se seleccionan cada uno independientemente entre H, -CH³y -CH²CH³.

En un primer aspecto de la invención se proporciona un compuesto de Fórmula II o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde X es cloro o bromo, R¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H y -CH³.

También se desvela un compuesto de Fórmula II o una sal del mismo, en donde X es flúor o yodo, R ¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H y -CH³.

En el presente documento se divulga un compuesto de Fórmula IIA

en donde X es flúor, cloro, bromo o yodo, y R¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H, -CH³, -CH²CH³, -CH²CH²CH³y -CH(CH³)²o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. También se desvela un compuesto de Fórmula Ila en donde X es flúor, cloro, bromo o yodo y R¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H, -CH³y -CH²CH³o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

También se desvela un compuesto de Fórmula Ila en donde X es flúor, cloro, bromo o yodo y R¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H y -CH³o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

También se desvela un compuesto de Fórmula Ila o una sal del mismo, en donde X es flúor y R¹y R²son como se describen en el presente documento.

En realizaciones particulares se proporciona un compuesto de Fórmula Ila o una sal del mismo, en donde X es cloro, y R¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H y -CH³.

En realizaciones particulares se proporciona un compuesto de Fórmula Ila o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde X es bromo, y R¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H y -CH³.

También se desvela un compuesto de Fórmula IIa o una sal del mismo, en donde X es yodo, y R¹y R²son como se describen en el presente documento.

También se desvela un compuesto de Fórmula IIa en donde X es cloro o bromo y R¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H, -CH³, -CH²CH³, -CH²CH²CH³y -CH(CH³)²o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

También se desvela un compuesto de Fórmula Ila en donde X es cloro o bromo, y R¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H, -CH³y -CH²CH³o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En un segundo aspecto de la invención se proporciona un compuesto de Fórmula IIa en donde X es cloro o bromo, y R¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H y -CH³o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

También se desvela un benzoxaborol tricíclico que es un compuesto de Fórmula II como se indica a continuación:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En realizaciones particulares, el benzoxaborol tricíclico es un compuesto de Fórmula II como se indica a continuación:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

También se desvela un benzoxaborol tricíclico que es un compuesto de Fórmula Ila como se indica a continuación:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En realizaciones particulares, el benzoxaborol tricíclico es un compuesto de Fórmula Ila como se indica a continuación:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otras realizaciones, el benzoxaborol tricíclico es un compuesto de Fórmula II como se indica a continuación:

en donde X es se selecciona entre cloro o bromo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otras realizaciones, el benzoxaborol tricíclico es un compuesto de Fórmula Ila como se indica a continuación:

en donde X es cloro o bromo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otras realizaciones más, el benzoxaborol tricíclico es un compuesto de Fórmula II como se indica a continuación:

y una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

En otras realizaciones más, el benzoxaborol tricíclico es un compuesto de Fórmula Ila como se indica a continuación:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra realización se proporciona un compuesto, (S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina, que tiene la fórmula:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otra realización proporciona una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto, (S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina, que tiene la fórmula:

Otra realización proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto, (S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina, que tiene la fórmula:

junto con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Todavía en otra realización se proporciona un compuesto, (S)-(3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina, que tiene la fórmula:

Además otra realización proporciona un compuesto, (S)-(3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina, que tiene la fórmula:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otra realización proporciona una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto, (S)-(3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina, que tiene la fórmula:

Otra realización proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto, (S)-(3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina, que tiene la fórmula:

junto con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Una realización proporciona un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que es:

(3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina;

(S)-(3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina;

(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina;

(S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina;

(3-cloro-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina;

(3-bromo-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina;

(3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina;

(iS)-(3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina;

(3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina; o

(S)-(3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina.

También se desvelan en el presente documento compuestos o una sal de los mismos, el cual es (3-fluoro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina; o (S)-(3-yodo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina.

En una realización relacionada, la sal farmacéuticamente aceptable se selecciona entre ácidos clorhídrico, bromhídrico, nítrico, carbónico, monohidrogenocarbónico, fosfórico, monohidrogenofosfórico, dihidrogenofosfórico, sulfúrico, monohidrogenosulfúrico, yodhídrico o fosforoso y similares. En otras realizaciones relacionadas, la sal farmacéuticamente aceptable se obtiene a partir de ácidos orgánicos que incluyen ácido acético, ácido propiónico, ácido isobutírico, ácido maleico, ácido malónico, ácido benzoico, ácido succínico, ácido subérico, ácido fumárico, ácido glucarónico, ácido galacturónico, ácido láctico, ácido mandélico, ácido ftálico, ácido bencenosulfónico, ácido ptolilsulfónico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido metanosulfónico y similares. Aún otras realizaciones relacionadas, la sal farmacéuticamente aceptable incluye sales de aminoácidos tales como arginato, lisinato y similares.

En aspectos particulares de la invención, el compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila es una mezcla de diastereómeros. En otros aspectos particulares de la invención, el compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila es un diastereoisómero. En otros aspectos particulares de la invención, el compuesto de Fórmula II es una mezcla racémica de enantiómeros. Aún en otros aspectos particulares de la invención, el compuesto de Fórmula II es un enantiómero específico. En aspectos particulares de la invención, cuando R¹y R²son ambos H o CH³, el compuesto de Fórmula Ii o Fórmula Ila tiene estereoquímica (S) en el centro quiral. Una realización proporciona una combinación que comprende: un primer agente terapéutico en el que el primer agente terapéutico es un compuesto como se describe en el presente documento, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables; opcionalmente un segundo agente terapéutico; opcionalmente un tercer agente terapéutico; opcionalmente un cuarto agente terapéutico; opcionalmente un quinto agente terapéutico; y opcionalmente un sexto agente terapéutico.

Una realización relacionada proporciona una combinación como se describe en la que el segundo, tercer, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico opcional se selecciona de forma independiente entre isoniazida, rifampina, pirazinamida, etambutol, moxifloxacino, rifapentina, clofazimina, bedaquilina (TMC207), nitroimidazo-oxazina PA-824, delamanid (OPC-67683), una oxazolidinona tal como linezolid, tedizolid, radezolid, sutezolid (PNU-100480) o posizolid (AZD-5847), análogo de EMB SQ109, una benzotiazinona, una dinitrobenzamida o un agente antivírico que incluye un agente antirretrovírico.

Una realización relacionada proporciona una combinación como se describe en la que los agentes antirretrovíricos son zidovudina, didanosina, lamivudina, zalcitabina, abacavir, estavudina, adefovir, adefovir dipivoxilo, fozivudina, todoxilo, emtricitabina, alovudina, amdoxovir, elvucitabina, nevirapina, delavirdina, efavirenz, lovirida, immunocal, oltipraz, capravirina, lersivirina, GSK2248761, TMC-278, TMC-125, etravirina, saquinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brecanavir, darunavir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinavir, enfuvirtida, T-20, T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, BMS-663068 y BMS-626529, 5-Helix, raltegravir, elvitegravir, GSK1349572, GSK1265744, vicriviroc (Sch-C), Sch-D, TAK779, maraviroc, TAK449, didanosina, tenofovir, lopinavir o darunavir.

Otra realización de la invención proporciona una combinación como se describe en la que el segundo, tercer, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico se selecciona de un agente terapéutico aprobado o recomendado para el tratamiento de la tuberculosis.

Una realización de la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende un primer agente terapéutico, siendo dicho primer agente terapéutico una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila según cualquiera de las realizaciones descritas en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Una realización relacionada proporciona una combinación como se describe en el presente documento y un excipiente farmacéuticamente aceptable, adyuvante o diluyente farmacéuticamente aceptable. En otra realización, la formulación farmacéutica puede comprender además un segundo agente terapéutico.

Otra realización proporciona un método para destruir micobacterias y/o inhibir la replicación de micobacterias que causan enfermedades en un animal, que comprende poner en contacto las micobacterias con una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa como se describe en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para destruir las micobacterias y/o prevenir la replicación de las micobacterias.

En el presente documento se desvela un método para tratar una infección por micobacterias en un animal que comprende: administrar al animal cualquiera de: (i) una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa como se describe en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; (ii) una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación que comprende un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa como se describe en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; o (iii) una cantidad terapéuticamente eficaz de una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa como se describe en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para tratar la infección por micobacterias en el animal.

En un aspecto adicional, la divulgación proporciona un método para destruir micobacterias y/o inhibir la replicación de micobacterias o un método para tratar una infección por micobacterias en un animal como ganado y mascotas, incluido el ganado ovino, cabras, perros y gatos, o un humano, incluyendo un ser humano inmunodeprimido, comprendiendo dicho método: poner en contacto las micobacterias con una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa como se describe en el presente documento, destruyendo así a las micobacterias y/o inhibiendo la replicación de las micobacterias, o comprendiendo dicho método administrar al animal con la infección micobacteriana una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula II o un compuesto de Fórmula IIa, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En una realización ilustrativa, el compuesto de Fórmula II o el compuesto de Fórmula IIa es parte de una formulación farmacéutica descrita en el presente documento. En otra realización ilustrativa, el contacto se produce en condiciones que permiten la entrada de la combinación en la micobacteria.

Otra realización de la divulgación proporciona un método para destruir micobacterias y/o inhibir la replicación de micobacterias como se describe en el presente documento, en donde la micobacteria se selecciona de Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium avium incluyendo subespecies (subsp.) Mycobacterium avium subsp. avium, Mycobacterium avium subsp. hominissuis, Mycobacterium avium subsp. silvaticum, y Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis; Mycobacterium kansasii, Mycobacterium malmoense, Mycobacterium simiae, Mycobacterium szulgai, Mycobacterium xenopi, Mycobacterium scrofulaceum, Mycobacterium abscessus, Mycobacterium chelonae, Mycobacterium haemophilum, Mycobacterium leprae, Mycobacterium marinum, Mycobacterium fortuitum, Mycobacterium parafortuitum, Mycobacterium gordonae, Mycobacterium vaccae, Mycobacterium bovis, Mycobacterium bovis BCG, Mycobacterium africanum, Mycobacterium canetti, Mycobacterium caprae, Mycobacterium microti, Mycobacterium pinnipedi, Mycobacterium leprae, Mycobacterium ulcerans, Mycobacterium intracellulare, Mycobacterium tuberculosis complejo. (MTC), Mycobacterium avium complejo (MAC), Mycobacterium avianintracellulare complejo (MAIC), clado de Mycobacterium gordonae; clado de Mycobacterium kansasii; clado de Mycobacterium chelonae; clado de Mycobacterium fortuitum; clado de Mycobacterium parafortuitum; y clado de Mycobacterium vaccae.

En el presente documento se desvela un método para tratar una infección por micobacterias en un animal que comprende: administrar al animal cualquiera de: (i) una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila como se describe en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; (ii) una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación que comprende un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila como se describe en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; o (iii) una cantidad terapéuticamente eficaz de una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila como se describe en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para tratar la infección por micobacterias en el animal, en donde la infección por micobacterias es una infección por M. tuberculosis.

Otra realización proporciona un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila como se describe en el presente documento o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, para su uso en el tratamiento de una enfermedad resultante de una infección micobacteriana en un animal, incluyendo un ser humano. Otra realización proporciona un compuesto tal como se describe en el presente documento, en donde la enfermedad se selecciona de tuberculosis, lepra, enfermedad de Johne, úlcera de Buruli o de Bairnsdale, enfermedad de Crohn, enfermedad pulmonar o infección pulmonar, neumonía, bursa, vainas sinovial, tendinosas, absceso localizado, linfoadenitis, infecciones de piel y tejidos blandos, síndrome de Lady Windermere, neumopatía por MAC, complejo de Mycobacterium avium diseminado (DMAC), complejo de Mycobacterium avium intracellulare diseminado (DMAIC), neumopatía de las saunas, mastitis por MAC, piomiositis MAC, paratuberculosis por Mycobacterium avum, o granuloma, enfermedad.

En el presente documento se desvela el uso de un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa como se describe en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la infección micobacteriana en un animal.

En el presente documento se desvela un método para tratar una enfermedad resultante de una infección micobacteriana en un animal, particularmente en un mamífero, más particularmente, en un ser humano, cuyo método comprende administrar al animal que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula II como se describe en el presente documento o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En el presente documento se desvela un método tal como se describe, en donde la enfermedad se selecciona de tuberculosis, lepra, enfermedad de Johne, úlcera de Buruli o de Bairnsdale, enfermedad de Crohn, enfermedad pulmonar o infección pulmonar, neumonía, bursa, vainas sinovial, tendinosas, absceso localizado, linfoadenitis, infecciones de piel y tejidos blandos, síndrome de Lady Windermere, neumopatía por MAC, complejo de Mycobacterium avium diseminado (DMAC), complejo de Mycobacterium avium intracellulare diseminado (DMAIC), neumopatía de las saunas, mastitis por MAC, piomiositis MAC, Mycobacterium avum paratuberculosis, o enfermedad del granuloma.

En el presente documento se desvela un método para tratar una infección micobacteriana en un animal, particularmente en un mamífero, cuyo método comprende administrar al animal que necesita dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En el presente documento se desvela un método para tratar una infección micobacteriana en un animal, particularmente un mamífero, en donde la infección por micobacterias es Mycobacterium tuberculosis.

En una realización, se proporciona una formulación farmacéutica que comprende un primer agente terapéutico, siendo dicho primer agente terapéutico una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto descrito en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmacéuticamente aceptable, adyuvante o diluyente farmacéuticamente aceptable.

Más particularmente, se proporciona una formulación farmacéutica que comprende un primer agente terapéutico que es un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila, siendo dicho primer agente terapéutico una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se describe en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en cualquier realización como se describe en el presente documento; un excipiente, adyuvante o diluyente farmacéuticamente aceptable; y un segundo agente terapéutico que no es un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila. En aspectos relacionados, la formulación farmacéutica comprende un primer agente terapéutico que es un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila como se describe en el presente documento, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, y opcionalmente comprende un segundo agente terapéutico que no es un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila, y opcionalmente comprende un tercer agente terapéutico, y opcionalmente comprende un cuarto agente terapéutico, y opcionalmente comprende un quinto agente terapéutico, y opcionalmente comprende un sexto agente terapéutico. En aspectos relacionados, el segundo, tercero, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico es un agente antimicobacteriano distinto de un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa. En aspectos relacionados, el segundo, tercero, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico se selecciona de isoniazida, rifampina, pirazinamida, etambutol, moxifloxacino, rifapentina, clofazimina, bedaquilina (TMC207), nitroimidazo-oxazina PA-824, delamanid (OPC-67683), oxazolidinona tal como linezolid, tedizolid, radezolid, sutezolid (PNU-100480), y posizolid (AZD-5847), análogo de EMB SQ109, una benzotiazinona, una dinitrobenzamida y un agente antivírico que incluye un agente antirretrovírico. En aspectos relacionados, el segundo, tercero, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico es un agente terapéutico aprobado y/o recomendado para el tratamiento de la tuberculosis.

Una realización relacionada proporciona una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa, o una de sus sales, y opcionalmente comprende un segundo, tercero, cuarto, quinto o sexto agente terapéutico, donde el primer, segundo, tercer, cuarto, quinto o sexto agente terapéutico opcional es un agente antirretrovírico seleccionado de zidovudina, didanosina, lamivudina, zalcitabina, abacavir, estavudina, adefovir, adefovir dipivoxilo, fozivudina, todoxilo, emtricitabina, alovudina, amdoxovir, elvucitabina, nevirapina, delavirdina, efavirenz, lovirida, immunocal, oltipraz, capravirina, lersivirina, GSK2248761, TMC-278, TMC-125, etravirina, saquinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brecanavir, darunavir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinavir, enfuvirtida, T-20, T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, BMS-663068 y BMS-626529, 5-Helix, raltegravir, elvitegravir, GSK1349572, GSK1265744, vicriviroc (Sch-C), Sch-D, TAK779, maraviroc, TAK449, didanosina, tenofovir, lopinavir o darunavir.

Tal como se describe en el presente documento, las realizaciones de la invención incluyen la coadministración, ya sea de manera simultánea, secuencial o en combinación, de un primer agente terapéutico que es un benzoxaborol sustituido o una sal del mismo como se describe en el presente documento, preferentemente un benzoxaborol sustituido de Fórmula II o Fórmula IIa como se describe en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, opcionalmente en combinación con un segundo agente terapéutico, opcionalmente en combinación con un tercer agente terapéutico, opcionalmente en combinación con un cuarto agente terapéutico, opcionalmente en combinación con un quinto y/o un sexto agente terapéutico, a un sujeto expuesto o infectado con una especie de micobacteria, incluyendo una especie de Mycobacterium tuberculosis. En determinadas realizaciones, el primer agente terapéutico es un compuesto de benzoxaborol tricíclico de Fórmula II o Fórmula IIa como se describe en el presente documento o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, y el segundo y/o tercero y/o cuarto agente terapéutico es un agente antituberculoso. En determinadas realizaciones, la especie mycobacterium es una variante resistente a los medicamentos; en determinadas realizaciones, la especie mycobacterium es una variante resistente a múltiples fármacos.

En el presente documento se desvela un método para destruir micobacterias que comprende poner en contacto las micobacterias o un animal, incluyendo un ser humano, expuesto o infectado con una micobacteria con un primer agente terapéutico que es un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa como se describe en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, opcionalmente, poner en contacto las células o el sujeto con un segundo agente terapéutico, opcionalmente, poner en contacto las células o el sujeto con un tercer agente terapéutico, opcionalmente poner en contacto las células o el sujeto con un cuarto agente terapéutico, opcionalmente poner en contacto las células o el sujeto con un quinto y/o un sexto agente terapéutico, tal que el contacto destruya las células de micobacterias. En realizaciones particulares, el primer agente terapéutico es un benzoxaborol sustituido que es un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa como se describe en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y el segundo, tercer, cuarto, quinto y/o sexto agente terapéutico opcional es un agente antituberculoso o una de sus sales. En otras realizaciones particulares, el sujeto estuvo expuesto o está infectado con Mycobacterium tuberculosis.

En el presente documento se desvela un método para inhibir la replicación de células micobacterianas, comprendiendo el método poner en contacto las células micobacterianas o un animal, incluyendo un ser humano expuesto o infectado con células micobacterianas con un primer agente terapéutico que es un compuesto como se describe en el presente documento o una de sus sales, opcionalmente, poner en contacto las células micobacterianas o el animal con un segundo agente terapéutico, opcionalmente, poner en contacto las células micobacterianas o el animal con un tercer agente terapéutico, opcionalmente, poner en contacto las células micobacterianas o el animal con un cuarto agente terapéutico, opcionalmente poner en contacto las células micobacterianas o el animal con un quinto y/o un sexto agente terapéutico, tal que el contacto inhibe la replicación de las células micobacterianas. En realizaciones particulares, el primer agente terapéutico es un benzoxaborol sustituido que es un compuesto como se describe en el presente documento o una sal del mismo y el segundo, tercero, cuarto, quinto y/o sexto agente terapéutico opcional es un agente antituberculoso o una sal del mismo. En otras divulgaciones particulares, el sujeto estuvo expuesto o está infectado con Mycobacterium tuberculosis.

Breves descripciones de los dibujos

La figura 1 es un mapamundi que indica dónde, geográficamente, se ha documentado TB-XDR.

La figura 2 muestra la transmisión de la tuberculosis.

La figura 3 es un gráfico de los valores de MIC (de las Tablas 1A y 1B) para el Ejemplo 4 G4-CI frente a aislados clínicos de M. tuberculosis.

La figura 4 es un gráfico de los valores de MIC (de las Tablas 2A, 2B, 2C y 2D) para el Ejemplo 2 y el Ejemplo 4 (G2-Br y G4-CI, respectivamente) frente a aislados clínicos de M. tuberculosis.

Las Tablas 1A y 1B proporcionan valores MIC para el Ejemplo 4 G4-CI probado contra 97 aislados clínicos de M. tuberculosis: Sensible (A) y Resistente (B). La Tabla 1A son los resultados de MIC para el Ejemplo 4 contra cepas de M. tuberculosis sensibles a agentes conocidos de TB y la Tabla 1B son los resultados de MIC para el Ejemplo 4 contra cepas de M. tuberculosis resistentes a uno o más agentes conocidos de TB. El patrón de resistencia de los aislados clínicos se indica mediante las siguientes abreviaturas H: Isoniazida, R: Rifampicina, T: Etionamida, S: Estreptomicina, E: Etambutol, Z: Pirazinamida, K: Kanamicina, A: Amikacina y CP: Capreomicina.

Las Tablas 2A y 2B proporcionan valores MIC para el Ejemplo 4 G4-CI probado contra 40 cepas de aislados clínicos de M. tuberculosis: Sensible (A) y Resistente (B). La Tabla 2A son los resultados de MIC para Ejemplo 4 contra METRO. tuberculosis cepas sensibles a (¿agentes estándar de atención de la TB?) y Tabla 2B son los resultados de MIC para Ejemplo 4 contra METRO. tuberculosis cepas resistentes a uno o más agentes conocidos de TB.

Las Tablas 2C y 2D proporcionan valores MIC para Ejemplo 2 G2-Br probado contra 40 cepas de aislados clínicos de M. tuberculosis: Sensible (A) y Resistente (B). La Tabla 2c son los resultados de MIC para Ejemplo 2 contra cepas de M. tuberculosis sensibles al agente conocido de la TB y la Tabla 2D son los resultados de MIC para Ejemplo 2 contra cepas de M. tuberculosis resistentes a uno o más agentes conocidos de TB. El patrón de resistencia de los aislados clínicos se indica mediante las siguientes abreviaturas H: Isoniazida, R: Rifampicina, T: Etionamida, S: Estreptomicina, E: Etambutol, Z: Pirazinamida, K: Kanamicina, A: Amikacina y CP: Capreomicina.

La Tabla 3 proporciona valores de MIC frente a cepas no micobacterianas para compuestos de fórmula II o fórmula Ila.

La Tabla 4A proporciona valores de CI50 de inhibición de LeuRS, valores de MIC frente a la cepa estándar de M. tuberculosis Mtb H37Rv, valores de toxicidad contra células HepG2 humanas y valores de selectividad para ciertos compuestos de benzoxaborol tricíclico de comparación.

La Tabla 4B proporciona las clasificaciones de datos listadas en la Tabla 4A para Compuestos de Fórmula II o Fórmula Ila.

Descripción detallada de realizaciones específicas

"Animal", como se usa en el presente documento, significa cualquiera de un reino (Animalia) de seres vivos, incluidos los organismos multicelulares, incluyendo ganado y mascotas, incluido el ganado, ovejas, cabras, perros y gatos, o un humano, incluyendo un ser humano inmunosuprimido.

"Combinación de la invención", como se usa en el presente documento, se refiere a las combinaciones de compuestos discutidos en el presente documento, sales (por ejemplo, sales farmacéuticamente aceptables), profármacos, solvatos e hidratos de estos compuestos.

"Diastereómero", como se usa en el preesente documento, se refiere a uno de un par de estereoisómeros que no son imágenes especulares del otro estereoisómero.

"Enantiómero", como se usa en el presente documento, se refiere a uno de un par de compuestos racémicos no superponibles (racematos) que es una imagen especular del otro enantiómero. Los enantiómeros tienen la propiedad de rotar el plano de la luz polarizada en una u otra dirección cuando están en forma pura pero como mezcla racémica, la mezcla no rota el plano de la luz polarizada.

Cantidad "eficaz" de un compuesto, combinación del mismo o formulación del mismo, significa una cantidad de un compuesto que es el agente activo, incluida una combinación de formulación del mismo, tal que la cantidad es suficiente para proporcionar el efecto local o sistémico deseado. Una cantidad "terapéuticamente eficaz" o "farmacéuticamente eficaz" se refiere a la cantidad de compuesto, incluida una combinación o formulación del mismo, suficiente para lograr un resultado terapéutico o farmacéutico deseado.

La expresión "sal farmacéuticamente aceptable" pretende incluir una sal de un compuesto descrito en el presente documento que se prepara con ácidos o bases relativamente no tóxicos, dependiendo de los sustituyentes particulares encontrados en los compuestos descritos en el presente documento. Cuando compuestos como los descritos en el presente documento contienen funcionalidades relativamente ácidas, se pueden obtener sales de adición de base poniendo en contacto la forma neutra de tales compuestos con una cantidad suficiente de la base deseada, ya sea pura o en un disolvente inerte adecuado. Los ejemplos de sales de adición de base farmacéuticamente aceptables incluyen sal de sodio, potasio, calcio, amonio, amino orgánico (como colina o dietilamina o aminoácidos como darginina, l-arginina, dlisina o l-lisina) o magnesio o una sal similar. Cuando compuestos como los descritos en el presente documento contienen funcionalidades relativamente básicas, se pueden obtener sales de adición de ácido poniendo en contacto la forma neutra de tales compuestos con una cantidad suficiente del ácido deseado, ya sea puroa o en un disolvente inerte adecuado. Los ejemplos de sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables incluyen las procedentes de ácidos inorgánicos como los ácidos clorhídrico, bromhídrico, nítrico, carbónico, monohidrogenocarbónico, fosfórico, monohidrogenofosfórico, dihidrogenofosfórico, sulfúrico, monohidrogenosulfúrico, yodhídrico o fosforoso, y similares, así como las sales procedentes de ácidos orgánicos relativamente no tóxicos como acético, propiónico, isobutírico, maleico, malónico, benzoico, succínico, subérico, fumárico, láctico, mandélico, ftálico, bencenosulfónico, p-tolilsulfónico, cítrico, tartárico, metanosulfónico y similares. También se incluyen sales de aminoácidos, tales como arginato y similares, y sales de ácidos orgánicos como ácidos glucurónico o galactunórico y similares (véase, por ejemplo, Berge et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977)). Determinados compuestos específicos, como se describe en el presente documento, contienen funcionalidades tanto básicas como ácidas que permiten que los compuestos se conviertan en sales de adición de bases o de ácidos.

Las formas neutras de los compuestos se generan preferentemente poniendo en contacto la sal con una base o un ácido y aislando los compuestos precursores de la manera convencional. La forma original del compuesto difiere de las diversas formas de sal en ciertas propiedades físicas, tales como la solubilidad en disolventes polares.

Además de las formas de sal, la invención proporciona compuestos que están en forma de profármaco. Los profármacos de los compuestos descritos en el presente documento experimentan fácilmente cambios químicos en condiciones fisiológicas para proporcionar los compuestos descritos en el presente documento. Adicionalmente, los profármacos se pueden convertir en los compuestos de la invención mediante métodos químicos o bioquímicos en un entorno ex vivo.

Determinados compuestos de Fórmula II y Fórmula IIa pueden formar sales de adición de ácido con uno o más equivalentes del ácido. La presente invención incluye dentro de su alcance todas las formas estequiométricas y no estequiométricas posibles.

Los compuestos de Fórmula II y Fórmula lia se pueden preparar en forma cristalina o no cristalina y, si son cristalinos, se pueden solvatar opcionalmente, por ejemplo el hidrato. Esta invención incluye dentro de su alcance solvatos estequiométricos (por ejemplo, hidratos), así como compuestos que contienen cantidades variables de disolvente (por ejemplo, agua). hecho de que uno o más átomos son reemplazados por un átomo que tiene una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o número de masa que se encuentra más comúnmente en la naturaleza. Ejemplos de isótopos que se pueden incorporar en compuestos como se describe en el presente documento incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, flúor, yodo y cloro, tales como 3H, 11C, 14C, 18F, 123l o 125l.

Los compuestos de la presente invención y las sales farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos que contienen los isótopos antes mencionados y/u otros isótopos de otros átomos están dentro del alcance de la presente invención. Los compuestos marcados con isótopos de la presente invención, por ejemplo aquellos en los que se han incorporado isótopos radiactivos tales como 3H o 14C, son útiles en ensayos de distribución de fármacos y/o sustratos en tejidos. Los isótopos tritio, es decir. 3H y carbono-14, es decir. 14C, se prefieren particularmente por su facilidad de preparación y detectabilidad. Los isótopos 11C y 18F son particularmente útiles en PET (tomografía por emisión de positrones).

Debido a que los compuestos de Fórmula II y Fórmula lia como se describen en el presente documento están destinados para su uso en composiciones farmacéuticas, se entenderá fácilmente que cada uno de ellos se proporciona preferiblemente en forma sustancialmente pura, por ejemplo, con una pureza de al menos el 60%, más adecuadamente con una pureza de al menos el 75% y preferentemente con una pureza de al menos el 85%, especialmente con una pureza de al menos el 98% (los % son en peso por peso). Las preparaciones impuras de los compuestos pueden usarse para preparar las formas más puras utilizadas en las composiciones farmacéuticas.

En el presente documento se desvela un compuesto de benzoxaborol tricíclico o una sal del mismo que tiene una estructura de acuerdo con la Fórmula II:

en donde X se selecciona entre cloro, flúor, bromo y yodo; R¹y R²son cada uno independientemente H, -CH³, -CH²CH³, -CH²CH²CH³y -CH(CH³)².

En el presente documento se desvela un compuesto de Fórmula II en donde X es cloro o bromo y R¹y R²se seleccionan independientemente entre H, -CH³, -CH²CH³, -CH²CH²CH³y -CH(CH³)².

Se desvela en el presente documento un compuesto de Fórmula II o una sal del mismo, en donde X es cloro o bromo; R¹y R²son independientemente H, -CH³o -CH²CH³.

Una realización proporciona un compuesto de Fórmula II o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde X es cloro o bromo; R¹y R²se seleccionan independientemente entre H y -CH³;

Se desvela en el presente documento un compuesto de Fórmula II o una sal del mismo, en donde X es flúor o yodo; R¹y R²se seleccionan independientemente entre H y -CH³.

En el presente documento se divulga un compuesto de Fórmula IIA

en donde X es flúor, cloro, bromo o yodo, y R¹y R²son independientemente H o -CH³o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En un aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula II, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, y uno o más vehículos, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables.

En el presente documento se desvela un método de tratamiento de una infección micobacteriana en un mamífero, particularmente en un ser humano, cuyo método comprende administrar a un mamífero que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un primer agente terapéutico que es un compuesto de Fórmula II o un compuesto de fórmula Ila, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables. Las divulgaciones relacionadas comprenden además administrar a un mamífero que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un primer agente terapéutico que es un compuesto de Fórmula II o un compuesto de Fórmula Ila, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, opcionalmente administrando en combinación con una cantidad efectiva de un segundo agente terapéutico, opcionalmente administrando en combinación con una cantidad efectiva de un tercer agente terapéutico, opcionalmente administrando en combinación con una cantidad efectiva de un cuarto agente terapéutico, opcionalmente administrando en combinación con una cantidad efectiva de un quinto agente terapéutico, opcionalmente administrando en combinación con una cantidad efectiva de un sexto agente.

En divulgaciones relacionadas, el segundo, tercer, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico opcional es un agente antimicobacteriano. En aspectos relacionados, la administración del primer agente terapéutico y la administración opcional del segundo, tercero, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico se produce al mismo tiempo, o la administración del primer agente terapéutico y la administración opcional del segundo, tercero, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico se produce de forma secuencial. En otras divulgaciones relacionadas, uno cualquiera de los agentes terapéuticos segundo, tercero, cuarto, quinto o sexto se selecciona entre un agente antimicrobiano, un agente antivírico, un agente antiinfeccioso, un analgésico, una vitamina, un suplemento nutricional, un agente antiinflamatorio, un analgésico y un esteroide.

La invención proporciona además un compuesto de Fórmula II, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, para su uso en el tratamiento de una infección micobacteriana en un mamífero, particularmente en un ser humano. En aspectos relacionados, el mamífero es un ser humano en el que la infección micobacteriana es una infección por Mycobacterium tuberculosis. En otros aspectos, el ser humano con una infección por Mycobacterium tuberculosis también está infectado con un retrovirus, incluyendo un virus de inmunodeficiencia humana.

En el presente documento se desvela el uso de un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, en la fabricación de un medicamento para usar en el tratamiento de una infección micobacteriana en un mamífero, particularmente en un ser humano.

La invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula II o Fórmula IIa, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, y uno o más vehículos, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables, para usar en el tratamiento de una infección micobacteriana en un mamífero, particularmente en un ser humano.

En otra realización particular, el benzoxaborol sustituido en la combinación tiene una estructura que es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. También se desvela en el presente documento un benzoxaborol sustituido en la combinación que tiene una estructura que es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En una realización particular, el compuesto es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En una realización particular, el compuesto es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En una realización particular, el compuesto es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En una realización particular, el compuesto es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Una realización de la invención proporciona un compuesto que es:

(3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina;

(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina;

(3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina; (S)-(3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina; (3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina; (S)-(3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

También se desvela en el presente documento un compuesto en la combinación que es

(3-fluoro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina; o

(S)-(3-yodo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra divulgación, el tratamiento de una infección o afección micobacteriana tiene lugar a través de la inhibición de un dominio de edición de una aminoacil ARNt sintetasa por medio de la unión al sitio activo de edición. En otra divulgación, el tratamiento de una infección o afección micobacteriana tiene lugar mediante el bloqueo de un dominio de edición de una aminoacil ARNt sintetasa.

En otra divulgación, la infección y/o enfermedad micobacteriana se trata mediante la administración oral de la combinación de la invención. En otra divulgación, la infección y/o enfermedad micobacteriana se trata mediante la administración intravenosa de la combinación de la invención.

Formulaciones farmacéuticas

En otro aspecto, la invención es una formulación farmacéutica que incluye: (a) un excipiente farmacéuticamente aceptable; (b) una combinación de la invención. En otro aspecto, la formulación farmacéutica incluye: (a) un excipiente farmacéuticamente aceptable; y (b) una combinación descrita en el presente documento. En otro aspecto, la formulación farmacéutica incluye: (a) un excipiente farmacéuticamente aceptable; y (b) una combinación descrita en el presente documento, o una sal, profármaco, hidrato o solvato del mismo. En otro aspecto, la formulación farmacéutica incluye: (a) un excipiente farmacéuticamente aceptable; y (b) una combinación descrita en el presente documento, o una sal, hidrato o solvato del mismo. En otro aspecto, la formulación farmacéutica incluye: (a) un excipiente farmacéuticamente aceptable; y (b) una combinación descrita en el presente documento, o una sal, hidrato o solvato del mismo. En otro aspecto, la formulación farmacéutica incluye: (a) un excipiente farmacéuticamente aceptable; y (b) una sal de una combinación descrita en el presente documento. En una realización ilustrativa, la sal es una sal farmacéuticamente aceptable. En otro aspecto, la formulación farmacéutica incluye: (a) un excipiente farmacéuticamente aceptable; y (b) un profármaco de una combinación descrita en el presente documento. En otro aspecto, la formulación farmacéutica incluye: (a) un excipiente farmacéuticamente aceptable; y (b) una combinación descrita en el presente documento. En una realización ilustrativa, la formulación farmacéutica está en una forma de dosificación unitaria. En una realización ilustrativa, la formulación farmacéutica es una forma de dosificación unitaria única.

En una realización ilustrativa, la formulación farmacéutica está en una forma de dosificación unitaria. En una realización ilustrativa, la formulación farmacéutica es una forma de dosificación unitaria única. En una realización ilustrativa, la formulación farmacéutica es una forma de dosificación de dos unidades. En una realización ilustrativa, la formulación farmacéutica es una forma de dosificación de tres unidades. En una realización ilustrativa, la formulación farmacéutica es una forma de dosificación de cuatro unidades. En una realización ilustrativa, la formulación farmacéutica es una forma de dosificación de cinco unidades. En una realización ilustrativa, la formulación farmacéutica es una forma de dosificación de seis unidades. En una realización ilustrativa, la formulación farmacéutica es una forma farmacéutica de una, dos, tres, cuatro, cinco, seis o siete unidades que comprende una primera forma farmacéutica unitaria y una segunda, tercera, cuarta, quinta y/o sexta forma farmacéutica unitaria, en donde la primera forma de dosificación unitaria incluye a) una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se describe en el presente documento y b) un primer excipiente farmacéuticamente aceptable; y la segunda, tercera, cuarta, quinta y/o sexta forma de dosificación unitaria incluye c) una cantidad terapéuticamente aceptable de un agente terapéutico adicional que es un agente antimicobacteriano y d) un segundo excipiente farmacéuticamente aceptable.

La información sobre los excipientes de uso en las formulaciones de la invención se puede encontrar en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21.a Ed., Pharmaceutical Press (2011).

Combinaciones

En una realización ilustrativa, la invención proporciona a) un primer agente terapéutico que es un compuesto de benzoxaborol tricíclico o una sal del mismo como se describe en el presente documento; b) una segunda actividad terapéutica. En determinadas realizaciones, el segundo agente terapéutico es un agente antibacteriano, más específicamente un agente antituberculoso, más específicamente un agente anti-M. tuberculosis.

En una realización ilustrativa, la combinación es parte de una formulación farmacéutica descrita en el presente documento. Tales afecciones son conocidas por los expertos en la técnica y las afecciones específicas se exponen en los Ejemplos adjuntos.

Formas de dosificación de la combinación

Los componentes individuales de las combinaciones de la invención, por ejemplo, una combinación descrita en el presente documento, se puede administrar de forma simultánea o secuencial en una forma de dosificación unitaria. La forma de dosificación unitaria puede ser una forma de dosificación unitaria única o múltiple. En una realización ilustrativa, la invención proporciona una combinación en una sola forma de dosificación unitaria. Un ejemplo de una forma de dosificación unitaria única es una cápsula en la que tanto el compuesto de benzoxaborol tricíclico como el agente terapéutico adicional están contenidos dentro de la misma cápsula. En una realización ilustrativa, la invención proporciona una combinación en una forma de dosificación unitaria. Un ejemplo de una forma de dosificación unitaria es una primera cápsula que contiene el compuesto de benzoxaborol tricíclico y una segunda cápsula que contiene el agente terapéutico adicional. Así, el término 'unidad única' o 'dos unidades' o 'unidad múltiple' se refiere al objeto que el paciente ingiere, no a los componentes interiores del objeto. Los expertos en la técnica apreciarán fácilmente las dosis apropiadas de compuesto de benzoxaborol tricíclico. Los expertos en la técnica apreciarán fácilmente las dosis apropiadas de un agente terapéutico adicional que no sea un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila. En una realización particular, el compuesto de benzoxaborol tricíclico está presente en la combinación en una cantidad terapéuticamente eficaz. En una realización particular, el agente terapéutico adicional que no es un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila está presente en la combinación en una cantidad suficiente para destruir o reducir la presencia, cantidad o tasa de crecimiento de micobacterias expuestas al benzoxaborol sustituido, incluyendo M. tuberculosis.

Agente(s) terapéutico(s) adicional(es) en la combinación

Las combinaciones de la invención, por ejemplo, una combinación descrita en el presente documento, también pueden incluir un agente terapéutico o agentes terapéuticos adicionales. Por tanto, la invención proporciona, en un aspecto adicional, una combinación que comprende un compuesto de benzoxaborol tricíclico descrito en el presente documento o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, y al menos un agente terapéutico adicional. Por tanto, la invención proporciona, en un aspecto adicional, una combinación que comprende un compuesto de benzoxaborol tricíclico descrito en el presente documento o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, y al menos un agente terapéutico adicional. En una realización ilustrativa, el agente terapéutico adicional es un agente antimicobacteriano. En un aspecto, la invención comprende: a) una combinación de la invención; y b) al menos un agente terapéutico adicional. En otra realización ilustrativa, la invención comprende: a) una combinación de la invención; b) un primer agente terapéutico adicional; y c) un segundo agente terapéutico adicional. En otra realización ilustrativa, la invención comprende: a) una combinación de la invención; b) un primer agente terapéutico adicional; c) un segundo agente terapéutico adicional; y d) un tercer agente terapéutico adicional. El primer agente terapéutico adicional o el segundo agente terapéutico adicional o el tercer agente terapéutico adicional pueden seleccionarse de los agentes terapéuticos adicionales descritos en el presente documento.

Convenientemente, las combinaciones pueden presentarse para su uso en forma de una formulación farmacéutica. En otro aspecto de la presente invención, se proporciona una combinación farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula II, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, junto con uno o más agentes terapéuticos adicionales y uno o más vehículos, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Los componentes individuales de dichas combinaciones pueden administrarse secuencialmente o simultáneamente en formulaciones farmacéuticas separadas o combinadas mediante cualquier vía conveniente.

Cuando se usa un agente terapéutico adicional con una combinación como se describe en el presente documento contra la misma patología, la dosis de cada compuesto puede diferir de la de cuando el compuesto se usa solo. Los expertos en la materia apreciarán fácilmente las dosis adecuadas. Se apreciará que la cantidad de un compuesto como se describe en el presente documento requerido para su uso en el tratamiento variará con la naturaleza de la afección que se está tratando y la edad y la condición del paciente y será en última instancia a discreción del médico o veterinario a cargo.

Preparación de compuestos que contienen boro

Los compuestos de uso en la invención se pueden preparar usando materiales de partida comercialmente disponibles, intermedios conocidos, o usando los métodos sintéticos descritos en este documento, o publicados en las referencias descritas, tales como US 7,816,344 y PCT Pat. Pubs. WO2010080558 y WO2011127143. Los procedimientos generales usados para sintetizar los compuestos de Fórmula II y Fórmula Ila se describen en los Esquemas de reacción 1-5 y se ilustran en los Ejemplos.

Determinados compuestos tricíclicos de benzoxaborol pueden prepararse mediante una reacción de Mitsunobu para convertir el sustituyente hidroxilo de 2-bromo-3-hidroxi-benzaldehído en tetrahidropiraniloxietoxi éter con tetrahidropiraniloxietanol en trifenilfosfina (PPhb), tetrahidrofurano (THF) y azodicarboxilato de diisopropilo (DIAD), seguido por borilación de Miyaura del sustituyente bromo usando bis(pinocolato)diboro diboro (B2pin2) con un catalizador de paladio (PdCL) y acetato de potasio (KOAc), y luego cierre del anillo reductor para formar el compuesto tricíclico usando borohidruro de sodio (NaBH4) en metanol anhidro (MeOH), como se indica en el Esquema 1.

Esquema I

Cierre de

anillo reductor

El bromuro de alquilo protegido con THP también se puede usar para unir un sustituyente al hidroxibenzaldehído a través de una reacción SN2 para preparar compuestos de benzoxaborol tricíclicos. Los ejemplos del uso de una reacción SN2 para preparar compuestos de benzoxaborol tricíclicos se pueden ver en los ejemplos que se describen a continuación., tales como en el Ejemplo 1, etapa (b) y Ejemplo 4, Método B, etapa (c).

Se pueden preparar otros compuestos de benzoxaborol tricíclico como se describe en este documento como se describe en los Esquemas 2 y 3, en donde se realiza una reacción de nitro-aldol en el sustituyente aldehído de, por ejemplo, 3-(2-benciloxi-etoxi)-2-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzaldehído usando nitrometano (MeNO²) con base (NaOH) para preparar el compuesto de benzoxaborol protegido con bencilo sustituido con nitro, seguido de cierre del anillo y reducción del sustituyente nitro a la amina con Pd(OH)²/C en ácido acético glacial para formar el compuesto de benzoxaborol tricíclico deseado.

Esquema 2

Se pueden preparar otros compuestos de benzoxaborol tricíclico como se describe en el presente documento como se describe en el Esquema 4.

Esquema 4

Se pueden preparar otros compuestos de benzoxaborol tricíclico como se describe en el presente documento como se describe en el Esquema 5.

Esquema 5

Como alternativa, determinados compuestos tricíclicos de benzoxaborol se pueden preparar como se indica en el Esquema 6. Una mezcla de ((7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-terc-butilo (13,25 kg) y NCS (8,75 kg) en dicloroetano (132,5 l) se calentó a 70 °C hasta que la reacción se consideró completa mediante HPLC. La mezcla se concentró a presión reducida, se enfrió a 25 °C y se añadió acetona (106 l). La suspensión se filtró, se lavó con acetona (26,5 l). La torta húmeda se suspendió en agua (13,25 l) y 1,4-dioxano (66,25 l), se calentó a 50 °C durante 20-30 minutos, se enfrió a 15 °C, se filtró y la torta se lavó con 1,4-dioxano (26,5 l). La torta húmeda se disolvió en metanol (68,9 l), se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. Se añadió metil butil terciario éter (66,25 l) al residuo y la mezcla se concentró a presión reducida. Se añadieron metil butil terciario éter (78,7 l), isopropanol (8,7 l) y ácido sulfúrico (4,6 l), la mezcla se calentó a 50 °C y se agitó hasta que el contenido de sulfato fue 24,32-29,72%. La mezcla se enfrió a 25 °C, se agitó durante 1 hora, se filtró, la torta se lavó con metil butil terciario éter (17,5 l) y se secó para dar el producto deseado (42%).

Esquema 6

Como se puede observar en el Esquema 6 , en esta ruta se reemplazan los pasos finales 10/11 y 12/13 por pasos finales alternativos, eliminando las etapas de protección/desprotección.

Composiciones y formulaciones

Los compuestos que se describen en el presente documento pueden formularse para su administración de cualquier manera conveniente para su uso en medicina humana o veterinaria, por analogía con la formulación de agentes antimicobacterianos, o la formulación de otros agentes antituberculosos.

Los compuestos descritos en el presente documento normalmente, aunque no necesariamente, se formularán en composiciones farmacéuticas antes de su administración a un paciente. En un aspecto, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula II o un compuesto de Fórmula IIa, o una sal farmacéuticamente aceptable. En otro aspecto, la invención se dirige a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula II o un compuesto de Fórmula IIa, o una sal farmacéuticamente aceptable, y uno o más vehículos, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables. El vehículo, excipiente o diluyente debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los demás ingredientes de la Formulación y no perjudicial para el receptor de la misma.

Las composiciones farmacéuticas descritas en el presente documento incluyen aquellas en una forma adaptada para uso oral o parenteral y pueden usarse para el tratamiento de una infección micobacteriana en un mamífero, incluido un ser humano.

Las composiciones farmacéuticas descritas en el presente documento incluyen aquellas en una forma adaptada para uso oral, tópico o parenteral y pueden usarse para el tratamiento de infecciones micobacterianas en un mamífero, incluido un ser humano.

La composición se puede formular para su administración por cualquier vía conveniente. Para el tratamiento de la tuberculosis, las composiciones pueden estar en forma de comprimidos, cápsulas, polvos, gránulos, pastillas para chupar, aerosoles o preparados líquidos, tales como soluciones o suspensiones orales o parenterales estériles.

Los comprimidos y cápsulas para administración oral pueden encontrarse en una forma de presentación de dosis unitaria y pueden contener excipientes convencionales, tales como agentes aglutinantes, por ejemplo, jarabe, goma arábiga, gelatina, sorbitol, tragacanto o polivinilpirrolidona; materiales de relleno, por ejemplo lactosa, azúcar, almidón de maíz, fosfato de calcio, sorbitol o glicina; lubricantes de formación de comprimidos, por ejemplo, estearato de magnesio, talco, polietilenglicol o sílice; disgregantes, por ejemplo almidón de patata; o agentes humectantes aceptables tales como laurilsulfato de sodio. Los comprimidos pueden recubrirse de acuerdo con métodos bien conocidos en la práctica farmacéutica normal. Las preparaciones líquidas orales pueden ser en forma de, por ejemplo, suspensiones acuosas u oleosas, soluciones, emulsiones, jarabes o elixires o pueden presentarse como un producto seco para su reconstitución con agua u otro vehículo adecuado antes de su uso. Estos preparados líquidos pueden contener aditivos convencionales, como agentes de suspensión, por ejemplo, sorbitol, metilcelulosa, jarabe de glucosa, gelatina, hidroxietil celulosa, carboximetilcelulosa, gel de estearato de aluminio o grasas comestibles hidrogenadas, agentes emulsionantes, por ejemplo, lecitina, monooleato de sorbitano o goma arábiga; vehículos no acuosos (que pueden incluir aceites comestibles), por ejemplo, aceite de almendra, ésteres oleosos, tales como glicerina, propilenglicol o alcohol etílico; conservantes, por ejemplo p-hidroxibenzoato de metilo o propilo o ácido sórbico, y, si se desea, aromatizantes o colorantes convencionales.

Los supositorios contendrán bases de supositorios convencionales, por ejemplo, manteca de cacao u otro glicérido.

Para la administración parenteral, las formas de dosificación unitarias fluidas se preparan utilizando el compuesto y un vehículo estéril, siendo preferible el agua. El compuesto, dependiendo del vehículo y de la concentración usada, puede suspenderse o disolverse en el vehículo. Al preparar soluciones, el compuesto puede disolverse en agua para inyección y esterilizarse por filtración antes de rellenarlo en un vial o ampolla adecuado y sellarla.

En un aspecto de la invención, agentes tales como un anestésico local, conservantes y agente tamponadores se disuelven en el vehículo. Para potenciar la estabilidad, puede congelarse la composición después de rellenarla en un vial y retirarse el agua al vacío. El polvo seco liofilizado luego se sella en el vial y se puede suministrar un vial de agua para inyección para reconstituir el líquido antes de su uso. Las suspensiones parenterales se preparan sustancialmente de la misma manera excepto que el compuesto se suspende en el vehículo en lugar de disolverse y la esterilización no se puede lograr por filtración. El compuesto se puede esterilizar por exposición a óxido de etileno antes de suspenderlo en el vehículo estéril. Ventajosamente, se incluye un tensioactivo o agente humectante en la composición para facilitar una distribución uniforme del compuesto.

Las composiciones pueden contener desde el 0,1 % en peso, preferentemente del 10-60 % en peso, del material activo, dependiendo del método de administración. Cuando las composiciones comprendan unidades de dosificación, cada unidad contendrá preferentemente 20-1000 mg del principio activo. La dosis empleada para el tratamiento de humanos adultos normalmente variará de 50 a 300 mg por día, por ejemplo 150 a 200 mg por día dependiendo de la vía y frecuencia de administración. Tal dosificación corresponde a 0,5 a 5 mg/kg por día. Preferentemente, la dosis es de 0,5 a 2 mg/kg por día y más preferentemente la dosis es inferior a 1 mg/kg por día.

El compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, puede ser el único agente terapéutico en las composiciones descritas en el presente documento, o puede estar presente en la Formulación en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales. Por tanto, la invención proporciona, en un aspecto adicional, una combinación que comprende un compuesto de Fórmula II, o una sal farmacéuticamente aceptable, solvato del mismo junto con uno o más agentes terapéuticos adicionales.

El uno o más agentes terapéutico adicional es, por ejemplo, un agente útil para el tratamiento de la tuberculosis en un mamífero. Los ejemplos de dichos agentes terapéuticos incluyen, rifampina, pirazinamida, etambutol, moxifloxacino, rifapentina, clofazimina, bedaquilina (TMC207), nitroimidazo-oxazina PA-824, delamanida (OPC-67683), oxazolidinona como linezolid, tedizolid, radezolid, sutezolid (PNU-100480), y posizolid (AZD-5847), análogo de EMB SQ109, una benzotiazinona, una dinitrobenzamida y un agente antivírico, incluido un agente antirretrovírico, o cualquier agente antituberculoso que se esté desarrollando para el tratamiento de la tuberculosis con una respuesta positiva en los ensayos EBA de fase IIa, o cualquier agente antituberculoso que esté desarrollando la Alianza Global contra la Tuberculosis.

Cuando un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, se usa en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales, la dosis del compuesto o agente puede diferir de la que se aplica cuando el compuesto o agente se usa solo. Los expertos en la materia apreciarán fácilmente las dosis adecuadas. Se apreciará que la cantidad de un compuesto descrito en el presente documento y uno o más agentes terapéuticos adicionales requeridos para su uso en el tratamiento variará con la naturaleza de la afección que se está tratando y la edad y la condición del paciente y será en última instancia en la discreción del médico tratante o veterinario.

Cuando la administración es secuencial, primero se puede administrar el compuesto de la presente invención o uno o más agentes terapéuticos adicionales. Cuando la administración es simultánea, la combinación se puede administrar en la misma composición farmacéutica o en una diferente. Cuando se combinan en la misma formulación, se apreciará que el compuesto y los agentes deben ser estables y compatibles entre sí y con los demás componentes de la formulación. Cuando se formulan por separado, se pueden proporcionar en cualquier formulación conveniente, convenientemente de la manera que se conoce para tales compuestos en la técnica.

Métodos para inhibir el crecimiento bacteriano o destruir bacterias

Se espera que las combinaciones de la invención muestren potencia contra las micobacterias y, por lo tanto, tengan el potencial de destruir las micobacterias y/o de inhibir la replicación de las micobacterias. Se espera que las combinaciones de la invención muestren potencia contra las micobacterias que poseen resistencia a los agentes antimicobacterianos estándar y, por lo tanto, tienen el potencial de destruir las micobacterias y/o inhibir la replicación de tales micobacterias "resistentes". En aspectos de la invención, los compuestos descritos en el presente documento poseen una actividad notable contra una selección de aislados de micobacterias sensibles a fármacos, incluyendo, aislados clínicos de MDR-TB (TB multirresistente) y XDR-TB (TB extremadamente resistente a los medicamentos), exhibiendo valores MIC de <0,32 pM y la mayoría tienen valores MIC entre 0,04 - 0,08 pM en 96 aislados investigados.

En un aspecto adicional, la invención proporciona un método para destruir micobacterias y/o inhibir la replicación de micobacterias o se describe un método para tratar una infección micobacteriana en un animal como el ganado y las mascotas, incluido el ganado ovino, cabras, perros y gatos, o un humano, incluyendo un ser humano inmunodeprimido, comprendiendo dicho método: poner en contacto las micobacterias con una cantidad eficaz de una combinación como se describe en el presente documento, destruyendo así a las micobacterias y/o inhibiendo la replicación de las micobacterias, o comprendiendo dicho método administrar al animal con la infección micobacteriana una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación de la invención, en donde la combinación comprende un compuesto de Fórmula II o un compuesto de Fórmula Ila, o una de sus sales farmacéuticamente aceptable. En una realización ilustrativa, la combinación es parte de una formulación farmacéutica descrita en el presente documento. En otra realización ilustrativa, el contacto se produce en condiciones que permiten la entrada de la combinación en la micobacteria.

En una realización ilustrativa, se destruye la micobacteria o se inhibe su replicación, o en una divulgación se trata la infección micobacteriana, a través de la administración oral de una combinación como se describe en el presente documento. En una realización ilustrativa, se destruye la micobacteria o se inhibe su replicación, o en una divulgación se trata la infección micobacteriana, a través de la administración intravenosa de una combinación como se describe en el presente documento. En una realización ilustrativa, se destruye la micobacteria o se inhibe su replicación, o en una divulgación se trata la infección micobacteriana, a través de la administración subcutánea de una combinación como se describe en el presente documento, en donde la combinación comprende un compuesto de Fórmula II o un compuesto de Fórmula IIa, o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

En realizaciones ilustrativas, la micobacteria se pone en contacto o la infección micobacteriana se trata con una combinación como se describe en el presente documento que comprende un primer agente terapéutico que es un compuesto de Fórmula II o un compuesto de Fórmula IIa, o una sal del mismo, y opcionalmente que comprende un segundo, tercer, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico en una población de micobacterias que comprende una micobacteria resistente con una mutación que confiere resistencia a uno o más del segundo, tercer, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico opcional. En realizaciones relacionadas, el segundo, tercer, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico opcional, o una de sus sales, es un agente antimicobacteriano, particularmente un conocido agente antimicobacteriano, más preferentemente un agente antimicobacteriano de tratamiento habitual.

En otra realización ilustrativa, se proporciona un método para destruir y/o inhibir la replicación de micobacterias que causan o están asociadas con una enfermedad en un animal, o se desvela un método para tratar una infección por micobacterias en un animal, comprendiendo el método poner en contacto las micobacterias con una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila o una de sus sales, para destruir y/o prevenir la replicación de la micobacteria, o administrar al animal una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila o una de sus sales. La micobacteria se selecciona de Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium avium incluyendo subespecies (subsp.) Mycobacterium avium subsp. avium, Mycobacterium avium subsp. hominissuis, Mycobacterium avium subsp. silvaticum, y Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis; Mycobacterium balnei, Mycobacterium sherrisii, Mycobacterium africanum, Mycobacterium microti, Mycobacterium silvaticum, Mycobacterium colombiense, Mycobacterium indicus pranii, Mycobacterium gastri, Mycobacterium gordonae, Mycobacterium hiberniae, Mycobacterium nonchromagenicum, Mycobacterium terrae, Mycobacterium trivial, Mycobacterium kansasii; Mycobacterium malmoense; Mycobacterium simiae; Mycobacterium triplex, Mycobacterium genavense, Mycobacterium florentinum, Mycobacterium lentiflavum, Mycobacterium palustre, Mycobacterium kubicae, Mycobacterium parascrofulaceum, Mycobacterium heidelbergense, Mycobacterium interjectum, Mycobacterium szulgai; Mycobacterium branderi, Mycobacterium cookie, Mycobacterium celatum, Mycobacterium bohemicum, Mycobacterium haemophilum, Mycobacterium lepraemurium, Mycobacterium lep-romatosis, Mycobacterium botniense, Mycobacterium chimaera, Mycobacterium conspicuum, Mycobacterium doricum, Mycobacterium forcinogenes, Mycobacterium heckeshornense, Mycobacterium lacus, Mycobacterium monacense, Mycobacterium montefiorense, Mycobacterium múrale, Mycobacterium nebraskense, Mycobacterium saskatchewanen-ese, Mycobacterium scrofulaceum, Mycobacterium shimoidel, Mycobacterium tusciae, Mycobacterium xenopi, Mycobacterium intermedium, Mycobacterium bolletii, Mycobacterium fortuitum, Mycobacterium foruitum subsp. acetamidolyticum, Mycobacterium boenickei, Mycobacterium perigrinum, Mycobacterium porcinum, Mycobacterium senegalense, Mycobacterium septicum, Mycobacterium neworleansense, Mycobacterium houstonense, Mycobacterium mucogenicum, Mycobacterium mageritense, Mycobacterium brisbanense, Mycobacterium cosmeticum, Mycobacterium parafortuitum, Mycobacterium austroafricanum, Mycobacterium diernhoferi, Mycobacterium hodieri, Mycobacterium neoaurum, Mycobacterium prederkisbergense, Mycobacterium aurum, Mycobacterium vaccae, Mycobacterium chitae, Mycobacterium fallax, Mycobacterium confluentis, Mycobacterium flavenscens, Mycobacterium madagascariense, Mycobacterium phlei, Mycobacterium smegmatis, Mycobacterium goodie, Mycobacterium colinskui, Mycobacterium thermoresistbile, Mycobacterium gadium, Mycobacterium kormossense, Mycobacterium obuense, Mycobacterium sphagni, Mycobacterium agri, Mycobacterium aichiense, Mycobacterium alvei, Mycobacterium arupense, Mycobacterium brumae, Mycobacterium canariasense, Mycobacterium chubuense, Mycobacterium conceptionense, Mycobacterium duvalii, Mycobacterium elephantis, Mycobacterium gilvum, Mycobacterium hassiacum, Mycobacterium holsaticum, Mycobacterium immunogenum, Mycobacterium massiliense, Mycobacterium moriokaense, Mycobacterium psychrotoleranse, Mycobacterium pyrenivorans, Mycobacterium vanbaalenii, Mycobacterium pulveris, Mycobacterium arosiense, Mycobacterium aubagnense, Mycobacterium caprae, Mycobacterium chlorophenolicum, Mycobacterium fluoroanthenivorans, Mycobacterium kumamotonense, Mycobacterium novocastrense, Mycobacterium parmense, Mycobacterium phocaicum, Mycobacterium poriferae, Mycobacterium rhodesiae, Mycobacterium seolense, Mycobacterium tokalense, Mycobacterium xenopi; Mycobacterium scrofulaceum; Mycobacterium abscessus; Mycobacterium chelonae; Mycobacterium haemophilum; Mycobacterium leprae; Mycobacterium marinum; Mycobacterium fortuitum; Mycobacterium bovis; Mycobacterium ulcerans; Mycobacterium pseudoshottsii, Mycobacterium shottsii, Mycobacterium intracellulare; Mycobacterium tuberculosis complejo (MTC); Mycobacterium aviarintracelular miembro complejo (MAIC) y Mycobacterium avium miembro complejo (MAC).

En aspectos relacionados, la micobacteria es Mycobacterium tuberculosis. En otros aspectos, la micobacteria es Mycobacterium avium, Mycobacterium kansasii, Mycobacterium malmoense, Mycobacterium simiae, Mycobacterium szulgai, Mycobacterium xenopi, Mycobacterium scrofulaceum, Mycobacterium abscessus, Mycobacterium chelonae, Mycobacterium haemophilum, Mycobacterium leprae, Mycobacterium marinum, M. fortuitum, Mycobacterium bovis, M. bovis BCG, M. africanum, M. canetti, M. caprae, M. microti, M. pinnipedi, M. leprae o Mycobacterium ulcerans. En realizaciones relacionadas, la micobacteria es una subespecie (subsp.) de Mycobacterium avium, incluyendo Mycobacterium avium subsp. avium, Mycobacterium avium subsp. hominissuis, Mycobacterium avium subsp. silvaticum, y Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis. En otra realización relacionada, la micobacteria es Mycobacterium intracellulare. En otras realizaciones relacionadas, la micobacteria es un miembro del complejo de Mycobacterium tuberculosis. (MTC) el complejo de Mycobacterium avium (MAC) o el complejo de Mycobacterium avian-intracellulare (MAIC). En realizaciones relacionadas, la micobacteria es un complejo o clado no tuberculoso, que incluye: Mycobacterium avium complejo; clado de Mycobacterium gordonae; clado de Mycobacterium kansasii; clado de Mycobacterium chelonae; clado de Mycobacterium fortuitum; clado de Mycobacterium parafortuitum; y clado de Mycobacterium vaccae.

En una realización ilustrativa, la micobacteria comprende una micobacteria resistente. En una realización ilustrativa, la micobacteria resistente es una mutación de una micobacteria descrita en el presente documento.

Métodos de tratamiento y/o prevención de enfermedades

Las combinaciones de la presente invención presentan potencia contra micobacterias y, por lo tanto, tienen el potencial de lograr eficacia terapéutica en animales, incluidos los seres humanos.

Se desvela en el presente documento un método para tratar y/o prevenir la enfermedad. El método incluye administrar al animal una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación de la invención, suficiente para tratar y/o prevenir la enfermedad. En una realización ilustrativa, la combinación de la invención se puede utilizar en terapia médica humana o veterinaria, particularmente en el tratamiento o profilaxis de enfermedades asociadas a micobacterias. En una realización ilustrativa, la combinación se describe en el presente documento.

En otra realización ilustrativa, el animal es tal como se define en el presente documento. En otra realización ilustrativa, la enfermedad es una enfermedad sistémica o una enfermedad cutánea. En otra realización ilustrativa, la enfermedad es una enfermedad respiratoria.

Abreviaturas

En la descripción de la invención, los elementos químicos se identifican de acuerdo con la Tabla Periódica de los Elementos. Las abreviaturas y símbolos utilizados en el presente documento están de acuerdo con el uso común de tales abreviaturas y símbolos por parte de los expertos en la materia química. En el presente documento se usan las siguientes abreviaturas:

AcOH ácido acético

AC²O anhídrido acético

AIBN 2-2'-Azoisobutironitrilo

BOC N-ferc-butoxicarbonilo

BOC anhídrido dicarbonato de di-ferc-butilo

B²pin²bis(pinacolato)diboro diboro, también conocido como 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano

Celite® una ayuda de filtración compuesta de sílice de diatomeas lavada con ácido, (una marca registrada de Manville Corp., Denver, Colorado)

CTAB bromuro de cetiltrimetilamonio

DCM diclorometano

DIAD azodicarboxilato de diisopropilo

DIBAL-H hidruro de diisobutilaluminio

DME dimetoxietano

DCE dicloroetano

DMF dimetilformamida

DMSO-d6 dimetilsulfóxido deuterado

DMSO dimetilsulfóxido

IEN Ionización por electronebulización

EM ES Espectrometría de masas por electropulverización

Et²O éter dietílico

EtOH etanol

EtOAc, AE acetato de etilo

h horas

HPLC cromatografía líquida de alto rendimiento

KOAc acetato potásico

CLEM Cromatografía líquida espectroscopía de masas

mCPBA ácido meta-cloro perbenzoico

MeNO²nitrometano

MeOH metanol

NBS N-bromosuccinimida

NCS N-clorosuccinimida

NIS N-yodosuccinimida

NXS N-halosuccinimida

NaBH(OAc)³triacetoxiborohidruro sódico

RMN Espectroscopía de resonancia magnética nuclear

EP éter de petróleo

PPh³trifenilfosfina

ta o t.a. temperatura ambiente

TR tiempo de retención

SFC cromatografía de fluidos supercríticos

t-BuOMe metil t-butil éter

TFA ácido trifluoroacético

THF tetrahidrofurano

uv ultravioleta

Ejemplos

Los siguientes ejemplos ilustran la invención. Estos ejemplos no pretenden limitar el alcance de la invención, sino proporcionar directrices al experto en la materia para preparar y usar los compuestos, composiciones y métodos de la invención. Aunque se describen realizaciones particulares de la invención, el experto en la materia apreciará que se pueden realizar varios cambios y modificaciones. Las referencias a preparaciones realizadas de una manera similar a, o por el método general de, otras preparaciones, pueden incluir variaciones en parámetros rutinarios tales como tiempo, temperatura, condiciones de trabajo, pequeños cambios en las cantidades de reactivo, etc.

Se registraron espectros de resonancia magnética nuclear de protones (1H RMN) y los desplazamientos químicos se informan en partes por millón (6) campo abajo del patrón interno tetrametilsilano (TMS). Las abreviaturas de los datos de RMN son las siguientes: s = singlete, d = doblete, t = triplete, c = cuadruplete, m = multiplete, dd = doblete de dobletes, dt = doblete de tripletes, ap. = aparente, a = ancho. Los espectros de masas se obtuvieron usando técnicas de ionización por electronebulización (ES). Todas las temperaturas se indican en grados Celsius.

Las reacciones que involucran hidruros metálicos, incluidos hidruro de litio, hidruro de litio y aluminio, hidruro de diisobutilaluminio, hidruro sódico, borohidruro sódico y triacetoxiborohidruro sódico, se llevan a cabo en argón a menos que se especifique lo contrario.

SÍNTESIS

Ejemplo 1 clorhidrato de 3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd|azulen-2-il)metanamina (G1-Br)

Una suspensión de 3-hidroxibenzaldehído (5 g, 40 mmol), polvo de hierro (172 mg, 3 mmol) y acetato sódico (6,72 g, 80 mmol) en ácido acético (40 ml) se calentó hasta que se obtuvo una solución transparente y después se enfrió a temperatura ambiente. A esta mezcla se le añadió gota a gota una solución de bromo (7,2 g, 45 mmol) en ácido acético glacial (10 ml) durante 15 min. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 2 h y después se vertió en agua enfriada con hielo. La mezcla resultante se extrajo con diclorometano (3x50 ml). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron. El residuo se volvió a cristalizar a partir de diclorometano para proporcionar el producto (2,3 g, 28%). RMN 1H (300 MHz, DMSO-cfe): ó 10,75 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 7,38-7,24 (m, 3H).

(b) 2-bromo-3-(2-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)etoxi)benzaldehído

Se añadió gota a gota dihidropirano (1,26 g, 15 mmol) a 0 °C a 2-bromoetanol (1,875 g, 15 mmol). La mezcla se agitó 30 min a 0 °C y después 2 h a ta. Se añadió 2-bromo-3-hidroxibenzaldehído (2 g, 10 mmol) a esta mezcla, seguido de carbonato potásico (1,518 g, 11 mmol), yoduro potásico (332 mg, 2 mmol) y DMF seca (20 ml). La reacción se agitó a 70 °C durante una noche. La solución se enfrió a ta y se diluyó con éter dietílico (100 ml). Las sales inorgánicas se retiraron por filtración y el filtrado se diluyó con hexanos (100 ml). La capa orgánica se lavó con agua (50 mlx3) y después se concentró a sequedad a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando acetato de etilo y éter de petróleo como eluyentes para dar el compuesto diana (3 g, 92%) en forma de un aceite de color amarillo. EM (IEN) m/z=351 [M+23]+, Fr=0,7 (PE:EA=3). RMN 1H (300 MHz, DMSO-cfe): ó 10,29 (s, 1H), 7,50-7,41 (m, 3H), 4,75 (s, 1H), 4,31-4,28 (m, 2H), 4,00-3,94 (m, 1H), 3,82-3,75 (m, 2H), 3,47-3,43 (m, 1H), 1,73-1,50 (m, 6H).

(c) 3-(2-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)etoxi)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzaldehído

Una solución de 2-bromo-3-(2-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)etoxi)benzaldehído (160 g, 0,49 mol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (249 g, 0,98 mol), Pd(dppf)Cl²(20 g, 24,5 mmol) y KOAc (144 g, 1,47 mol) en DMF (2,0 l) se agitó a 90 °C durante una noche. Después, la mezcla de reacción se trató con agua (4 l) y después se extrajo con EtOAc (3x1,5 l). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (250 ml), se secaron sobre Na²SO⁴anhidro y se concentraron a sequedad al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo =10:1 a 2:1) para dar el compuesto diana en forma de un aceite de color amarillo (88 g, rendimiento del 48%). EM (IEN) m/z=317 [M+H]⁺, Fr=0,4 (PE:EA=3). RMN ¹H (300 MHz, DMSO-cfe): ó 9,88 (s, 1H), 7,60-7,51 (m, 2H), 7,31-7,28 (d, 1H), 4,64-4,63 (m, 1H), 4,16-4,13 (m, 2H), 4,00-3,94 (m, 1H), 3,82-3,75 (m, 2H), 3,47-3,43 (m, 1H), 1,73-1,50 (m, 6H), 1,29 (m, 12H).

(d) 2-(nitrometil)-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azuleno

A una solución de NaOH (4,8 g, 0,12 mol) en agua (100 ml) se añadió le nitrometano (18,3 g, 0,3 mol) a 5-10 °C. Después de agitar durante 15 min a 5-10 °C, se añadió bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB) (2,2 g, 6 mmol) a la mezcla de reacción y seguido de la adición de 3-(2-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)etoxi)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzaldehído (45 g, 0,12 mol) a 5-10 °C. La mezcla de reacción se agitó a ta durante 5 h. La mezcla de reacción se acidificó a pH=1 usando ácido clorhídrico diluido y se agitó a ta durante una noche. La mezcla de reacción se filtró para dar el compuesto diana (14,5 g, 51%) en forma de un sólido de color blanco. RMN ¹H (300 MHz, DMSO-Ó⁶): ó 7,50-7,45 (t, 1H), 7,16-7,13 (d, 1H), 6,91-6,88 (d, 1H), 5,91-5,88 (m, 1H), 5,37-5,31 (m, 1H), 4,69-4,61 (m, 2H), 4,41-4,14 (m, 3H).

(e) clorhidrato de (7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd|azulen-2-il)metanamina

Una solución de 2-(nitrometil)-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azuleno (1,5 g, 6,4 mmol), Ni Raney (200 mg) y NH³2 M en EtOH (5 ml) en etanol (40 ml) se agitó en una atmósfera de H²durante 2 h a ta. La mezcla se filtró a través de un lecho de Celite y el filtrado se concentró al vacío. La amina en bruto se disolvió en EtOH (20 ml) y se añadió inmediatamente una solución saturada de HCI (gas) en Et²O (30 ml). Después de 1 h, la suspensión se filtró y el sólido resultante se lavó con acetonitrilo/hexanos (2:1, 2x20 ml) para dar el compuesto en forma de un sólido de color blanco (700 mg, 45%). EM (IEN) m/z=206/224 [M+H]⁺.

(f) ((7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de ferc-butilo

A una mezcla de clorhidrato de (7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (700 mg, 2,9 mmol) y trietilamina (878,7 mg, 8,7 mmol) en diclorometano (10 ml) a 0 °C, se le añadió dicarbonato de di-ferc-butilo (948 mg, 4,35 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con NaHCO³sat. (15 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3x20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴anhidro y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida en columna usando acetato de etilo y éter de petróleo como eluyentes para dar el producto deseado (500 mg, 56%). EM (IEN) m/z=250 [M-56]⁺.

(g) ((3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo

A una solución de ((7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo (0,5 mg, 1,64 mmol) y NBS (354 mg, 2,0 mmol) en acetonitrilo (15 ml) se le añadió AIBN (27 mg) y la mezcla se agitó durante 1 h a 90 °C. Después, la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa para dar el producto deseado (300 mg, 50%). EM (IEN) m/z=328/330 [M -56]+.

(h) Compuesto del título

Una mezcla de ((3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo (0,2 g, 0,522 mmol) en HCI saturado (gas) en Et2O (10 ml) se agitó a ta durante 1 h y se concentró a sequedad (temperatura del baño de agua < 30 °C). El residuo se trituró con acetonitrilo (2x5 ml) y el sólido de color blanco se secó a alto vacío para dar el producto (140 mg, 83%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 58,36 (s, 3H), 7,64-7,61 (d, 1H), 6,93-6,90 (d, 1H), 5,51-5,49 (d, 1H), 4,69 (m, 1H), 4,36-4,23 (m, 3H), 3,62 (m, 1H), 3,05-3,01 (m, 1H). EM (IEN) m/z=284/286 [M H]+.

Ejemplo 2 clorhidrato de (S)-(3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (G2-Br)

Método A

(a) Compuesto del título

El compuesto racémico, ((3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de terebutilo (Ejemplo 1, (g)) se separó a través de cromatografía de fluidos supercríticos (SFC) (columna quiral CHIRALCEL OJ-H, eluyendo con MeOH (15%) y CO²(85%) y se obtuvieron dos compuestos quirales, ((3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-terc-butilo (isómero que eluyó en segundo lugar, TR = 3,8 min) y (R)-isómero ((3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de terebutilo (isómero que eluyó en primer lugar, TR =3,3 min). Cada uno de los compuestos quirales (1,2 g, 3,13 mmol) en HCl saturado (gas) en Et²O (20 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y se concentró hasta sequedad (baño de agua < 30 °C). El residuo se lavó con acetonitrilo (2x5 ml) y el sólido de color blanco se secó a alto vacío para dar el producto (900 mg, 90 %) en forma de un sólido de color blanco. EM (IEN) m/z=284/286 [M H]⁺. clorhidrato de (s)-(3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina: Rm N ¹H (300 MHz, DMSO-d6): 58,40 (s, 3H), 7,63-7,61 (d, 1H), 6,92-6,89 (d, 1H), 5,50-5,48 (d, 1H), 4,68 (m, 1H), 4,35-4,22 (m, 3H), 3,60 (m, 1H), 3,00 (m, 1H). clorhidrato de (R)-(3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd] azulen-2-il)metanamina: RMN 1H (300 MHz, DMSO-da): 88,30 (s, 3H), 7,64-7,61 (d, 1H), 6,93-6,90 (d, 1H), 5,51-5,49 (d, 1H), 4,68 (m, 1H), 4,36-4,23 (m, 3H), 3,61 (m, 1H), 3,05-3,01 (m, 1H).

Método B

(a) ((3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-íerc-butilo

Una mezcla de ((7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-ferc-butilo (110,0 g, 360,50 mmol) (Ejemplo 4, Método B, (h)) y NBS (67,4 g, 378,53 mmol) en Dc E (1,1 l) se calentó a 50 °C durante 6 h. La solución se lavó con agua caliente (1 l) tres veces y la solución orgánica se concentró al vacío para obtener el producto deseado (132,0 g, en bruto) en forma de una goma de color amarillo (usado en la siguiente etapa sin purificación). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶): 7,57-7,55 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,85-6,83 (d, J = 8 Hz, 1H), 5,25 (m, 1H), 4,71-4,69 (m, 1H), 4,34-4,07 (m, 3H), 3,76-3,69 (m, 1H), 3,17-3,16 (m, 1H), 1,33 (s, 9H). CL-EM: [M-55] =327,8.

(b) Compuesto del título

Una solución de ((3-bromo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-rerc-butilo (130,0 g, en bruto) y HCl conc. (100 ml) en 1,4-dioxano (500 ml) se agitó a ta durante 8 h, tiempo durante el cual los sólidos incoloros se precipitaron y se filtraron y se lavaron con 2-propanol (200 ml). El sólido se secó al vacío a 50 °C durante 6 h para obtener la sal clorhidrato del producto deseado (60,0 g, rendimiento total del 51,9% en dos etapas) en forma de un sólido incoloro. RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶): 8,45 (s, 3H), 7,64-7,62 (d, J = 8, 1H), 6,92-6,90 (d, J = 8, 1H), 5,52 (m, 1H), 4,69 (m, 1H), 4,37-4,15 (m, 3H), 3,74-3,50 (m, 1H), 3,05-2,95 (m, 1H). RMN ¹³C (400 MHz, DMSO-d⁶): 161,80, 151,28, 137,57, 118,64, 107,18, 80,04, 73,86, 69,18, 41,88. CL-EM: [M+1]⁺=283,9.

Ejemplo 3 clorhidrato de 3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (G3-Cl)

(a) 3-cloro-2-(nitrometil)-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azuleno

A una solución de 2-(nitrometil)-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azuleno (29 g, 123,4 mmol) (Ejemplo 1, (d)) en DMF (250 ml) a 80 °C se le añadió una solución de NCS (16,5 g, 123,4 mmol) en DMF (100 ml). La mezcla se agitó durante 30 min a 80 °C. La mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo y se extrajo con EtOAc (200 ml*3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante la recristalización en éter de petróleo/acetato de etilo (10:1) para dar 24 g del producto en bruto. EM (IEN) m/z = 270 [M H]⁺. RMN ¹H (300 MHz, DMSO-Ó⁶): ó 7,52-7,49 (d, 1H), 6,99-6,96 (d, 1H), 5,96-5,93 (m, 1H), 5,42-5,30 (m, 1H), 4,80-4,61 (m, 2H), 4,43-4,17 (m, 3H).

(b) Compuesto del título

Una solución de 3-cloro-2-(nitrometil)-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azuleno (24 g, 89,22 mmol), Ni Raney (4,0 g) y NH³7 M en MeOH (20 ml) en metanol (300 ml) se agitó en una atmósfera de H²durante 2 h a ta. La mezcla se filtró a través de un lecho de Celite y el filtrado se concentró al vacío. La amina en bruto se disolvió en MeOH (20 ml) y se añadió HCl concentrado (5 ml). La mezcla resultante se agitó a ta durante 1 h y después se concentró a presión reducida. El sólido resultante se lavó con acetonitrilo/hexanos (2:1,2x200 ml) para dar el producto deseado (12 g, 50%) en forma de un sólido de color blanco. RMN ¹H (300 MHz, DMSO-cfe): ó 8,19 (s, 3H), 7,51-7,48 (d, 1H), 6,99-6,96 (d, 1H), 5,56-5,54 (d, 1H), 4,69 (m, 1H), 4,36-4,23 (m, 3H), 3,58 (m, 1H), 3,05-3,01 (m, 1H). EM (IEN) m/z=240 [M H]⁺.

Ejemplo 4-I clorhidrato de (S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (G4-CI)

Método A

(a) ((3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de ferc-butilo

A una mezcla de clorhidrato de (3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (8,0 g, 33,7 mmol) (Ejemplo 3,(b)) y trietilamina (10,2 g, 101,2 mmol) en diclorometano (250 ml) a 0 °C se le añadió dicarbonato de di-ferc-butilo (11 g, 50,6 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 h a ta. La reacción se interrumpió con NaHCO3 sat. (150 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (2x200 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por HPLC preparativa usando una columna Daisogel 10p C18 (250 * 50 mm) y eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%) para dar el producto deseado (4,6 g, 47%). EM (IEN) m/z = 284 [M-56] .

(b) Compuesto del título

El compuesto racémico, ((3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de terc-butilo se separó a través de SFC (columna quiral CHIRALCEL OJ-H) eluyendo con EtOH (15%) y CO2 (85%) y se obtuvieron los dos compuestos quirales, ((3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-terc-butilo (isómero que eluyó en segundo lugar, TR = 2,9 min) y ((3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd] azulen-2-il)metil)carbamato de (R)-terc-butilo (isómero que eluyó en segundo lugar, TR = 2,6 min). Cada uno de los compuestos quirales (4,6 g, 13,6 mmol) se agitó a ta en 80 ml de HCl saturado (gas) en Et2O durante 1 h y se concentró a sequedad (temperatura del baño de agua < 30 °C). El residuo se trituró con acetonitrilo (2x5 ml) y el sólido de color blanco se secó a alto vacío para dar los dos productos, clorhidrato de (S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (1,2 g) y clorhidrato de (R)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (2,3 g) respectivamente en forma de sólidos de color blanco. EM (IEN) m/z= 240 [M H]+. clorhidrato de (s)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina: RMN ¹H (300 MHz, DMSO-de): 6 8,30 (s, 3H), 7,51-7,48 (d, 1H), 6,99-6,96 (d, 1H), 5,59-5,57 (d, 1H), 4,68 (m, 1H), 4,36-4,23 (m, 3H), 3,58 (s, 1H), 3,03-2,99 (m, 1H). G4-Cl-(R) clorhidrato de (R)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina: RMN ¹H (300 Mh z , DMSO-d⁶): 6 8,28 (s, 3H), 7,51-7,48 (d, 1H), 6,99-6,96 (d, 1H), 5,58-5,56 (d, 1H), 4,69 (m, 1H), 4,36-4,23 (m, 3H), 3,59 (m, 1H), 3,05-3,01 (m, 1H).

Método B

(a) (Z)-1-(piridin-2-il)-N-((1R)-1,7,7-trimetilbiciclo[2.2.1]heptan-2-ilideno)metanamina

Una mezcla de (+)-alcanfor (371 g, 2,44 mol), piridin-2-ilmetanamina (277 g, 2,56 mol) y BF3.Et2O (17 g, 0,12 mol) en tolueno (3,7 l) se cargó en un matraz de fondo redondo de 5 l equipado con una trampa Dean Stark, condensador de reflujo, termómetro y entrada de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo con retirada azeotrópica de agua durante 20 h. La mezcla se enfrió a 15 °C y se inactivó con bicarbonato de sodio acuoso al 5% (2,5 l), la fase orgánica se separó y se lavó con agua (1,25 l x 2), después la mezcla se concentró hasta 2 l al vacío. El residuo se usó en la siguiente etapa sin purificación. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 8,47-8,48 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,77-8,74 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,43 7,41 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,25-7,22 (dd, J = 4,8 Hz, 1H), 4,49-4,38 (dd, J = 16,4 Hz, 2H), 2,46-2,42 (m, 1H), 1,97-1,93 (m, 2H), 1,84-1,79 (m, 1H), 1,71-1,64 (m, 1H), 1,33-1,22 (m, 2H), 0,93 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 0,73 (s, 3H). CLEM: [M+H]+ = 243.

(b) (1R)-1,7,7-trimetil-N-(piridin-2-ilmetil)biciclo[2.2.1]heptan-2-amina

Se cargó Pt al 5%/C (40 g) en un recipiente de presión de 5 l, seguido de una solución de (Z)-1-(piridin-2-il)-N-((1R)-1,7,7-trimetilbiciclo[2.2.1]heptan-2-ilideno)metanamina (2,44 mol) en tolueno (2 l). El recipiente se presurizó con 0,69 MPa (100 psi) de hidrógeno durante un periodo de 12 h. El sólido se filtró a través de Celite® y la torta se lavó con tolueno (1 l). El filtrado se concentró al vacío para obtener el producto deseado (435 g obtenidos, rendimiento total: 73%, en dos etapas) en forma de un aceite de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 8,49-8,48 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,75-7,71 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,40-7,38 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,24-7,21 (dd, J = 5,2 Hz, 1H), 3,79-3,64 (dd, J = 14,4 Hz, 2H), 2,53-2,49 (m, 1H), 1,99 (s, 1H), 1,68-1,42 (m, 5H), 1,05 (s, 3H), 0,87 (s, 3H), 0,78 (s, 3H), CLEM: [M+H]+ = 245.

(c) 3-(2-(benciloxi)etoxi)benzaldehído

A una solución de 3-hidroxibenzaldehído (2,90 kg, 23,75 mol) y ((2-bromoetox¡)met¡l)benceno (4,26 kg, 19,79 mol) en DMF (9,3 l) se le añadió K²CO³(3,83 kg, 27,70 mol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 24 h. Se añadieron agua (15 l) y ferc-butil metil éter (23 l) a la mezcla de reacción. La fase orgánica se separó y se lavó con NaOH 1 N (2x15 l) y agua (15 l) secuencialmente, y después se concentró hasta un mínimo. Se añadió etanol (23 l) y la solución se concentró al vacío para proporcionar el producto deseado (4,7 kg, 93%) en forma de un aceite incoloro. RMN ¹H (400 MHz, DMSO-de): 9,98 (s, 1H), 7,55-7,52 (m, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,36-7,34 (m, 4H), 7,32-7,26 (m, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,25-4,22 (t, J = 4,4 Hz, 2H), 3,80-3,78 (t, J = 4,4 Hz, 2H). CLEM: [M+Na]⁺= 279.

(d) (S)-1-(3-(2-(benciloxi)etoxi)fenil)-2-nitroetanol

Una mezcla de acetato de cobre (II) (167 g, 0,92 mol), (1R)-1,7,7-trimetil-N-(piridin-2-ilmetil)biciclo[2.2.1]hep-tan-2-amina (269 g, 1,10 mol) en etanol (19 l) se agitó a ta durante 1 h, después se añadió una solución de 3-(2-(benciloxi)etoxi)benzaldehído (4,70 kg, 18,34 mol) en etanol (5 l). La mezcla de reacción se enfrió a un intervalo de temperatura entre -30 °C y -40 °C, y después se añadió gota a gota nitrometano (9,9 l, 183,40 mol), manteniendo la temperatura por debajo de -30 °C, seguido de la adición de diisopropiletilamina (285 g, 2,20 mol). La reacción se agitó a -30 °C durante 24 h, y después se interrumpió con ácido trifluoroacético (314 g, 2,75 mol). Se añadieron HCl 1 N (24 l) y TBME (47 l) a la solución resultante. La fase orgánica separada se lavó con agua (24 l) y después se concentró al vacío. El residuo se añadió a una mezcla de éter de petróleo/acetato de etilo=5:1 (10 l). Después, el sólido de color amarillo precipitó y se recogió por filtración con un embudo Buchner y se secó al vacío a 40 °C durante 6 h para proporcionar el producto deseado (5,00 kg, 86%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 7,38-7,25 (m, 6 H), 7,03 (s, 1H), 7,01-6,99 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,90-6,87 (dd, J = 8,0 Hz, 1H), 6,09-6,08 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 5,26-5,22 (m, 1H), 4,86-4,82 (dd, J = 12,4 Hz, 1H), 4,57-4,51 (m, 3H), 4,15-4,13 (m, 2H), 3,78-3,76 (t, J = 4,8 Hz, 2H). CL-EM: [M+Na]+ = 340.

(e) clorhidrato de (S)-1-(3-(2-(benciloxi)etoxi)fenil)-2-(dibencilamino)etanol

Se cargaron Pd al 10%/C (800 g) y Pt al 10%/C (200 g) en un recipiente a presión, seguido de una solución de (S)-1-(3-(2-(benciloxi)etoxi)fenil)-2-nitroetanol (5,00 kg, 15,76 mol) en etanol (50 l). El recipiente se presurizó con 0,69 Mpa (100 psi) de hidrógeno durante 12 h a ta. El sólido se filtró a través de Celite® y la torta se lavó con etanol (5 l). Al filtrado, se le añadieron secuencialmente K²CO³(4,80 kg, 34,67 mol) y bromuro de bencilo (5,93 kg, 34,67 mol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 24 h. El sólido se filtró y se lavó con etanol (1 l). El filtrado se diluyó con agua (20 l) y después se calentó a 50 °C. La solución se agitó a 50 °C durante 30 min y después se añadió gota a gota HCl conc. (1,5 l) durante 1 h. La mezcla se enfrió a 0 °C y se mantuvo a 0 °C durante un adicional de 30 min. El producto se filtró y se lavó con etanol acuoso al 20% (1 l) para proporcionar la sal clorhídrica del producto deseado (5,00 kg, 63% en dos etapas) en forma de un sólido incoloro. r Mn 1H (400 MHz, DMSO-de): 10,67 (s, 1H), 7,72-7,68 (m, 4H), 7 ,47 -7 ,45 (m, 6 H), 7,38-7,26 (m, 5H), 7,25-7,21 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,86-6,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,77 (s, 1H), 6,77 6,75 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,36 (s, 1H), 5,04-5,02 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 4,58 (s, 2H), 4,51-4,38 (m, 4H), 4,09-4,07 (t, J = 4,0 Hz, 2H), 3,77-3,75 (t, J = 3,2 Hz, 2H), 3,13-2,96 (m, 2H). CL-EM: [M+H]+ = 468.

(f) (S)-7-(2-(benciloxi)etoxi)-3-((dibencilamino)metil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol

A una solución a -30 °C de clorhidrato de (S)-1-(3-(2-(benciloxi)etoxi)fenil)-2-(dibencilamino)etanol (3,85 kg, 7,64 mol) en tolueno seco (39 l) en atmósfera de N2 , se le añadió n-BuLi (15,3 l, 38,20 mol) gota a gota durante 6 h. Después de la adición, la mezcla se agitó a -30 °C durante otra hora y después se enfrió a -70 °C; se añadió gota a gota borato de trimetilo (3,97 kg, 38,20 mol) manteniendo la temperatura por debajo de -60 °C. Después de la adición, la mezcla de reacción se dejó calentar a ta y se agitó durante una noche. La reacción se interrumpió con NaHCO³acuoso al 5% (20 l) y se agitó vigorosamente durante 15 min, la suspensión resultante se filtró y el filtrado se separó. La capa orgánica se lavó con agua (20 l x 3) y se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatrografía sobre gel eluyendo con éter de petróleo/acetato de etilo=5:1 para proporcionar el producto deseado (1,80 kg, 48%) en forma de un sólido de color amarillo. RMN ¹H (400 MHz, DMSO-de): 8,81 (s, 1H), 7,39-7,22 (m, 16H), 6,82-6,80 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,72-6,70 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,34-5,31 (dd, J = 7,6 Hz, 1H), 4,60 (s, 2H), 4,22-4,19 (t, J = 4,4 Hz, 2H), 3,80-3,72 (m, 6 H), 2,88-2,84 (dd, J = 13,6 Hz, 1H), 2,47-2,45 (dd, J = 10 Hz, 1H). CL-EM: [M+H]+ = 494.

(g) clorhidrato de (S)-(7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina

Se cargó Pd al 10%/C (180 g) a un recipiente de presión, seguido de una solución de (S)-7-(2-(benciloxi)etoxi)-3-((dibencilamino)metil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol (1,80 kg, 3,65 mol) en metanol (18 l), tolueno (3,6 l) y HCl 1 N (4 l). El recipiente se presurizó con 0,69 MPa (100 psi) de hidrógeno durante un periodo de 12 h a 50 °C. El sólido se filtró a través de Celite y la torta se lavó con metanol (1 l). El filtrado se concentró al vacío y el residuo se trató con 2-propanol (3,6 l), se agitó a ta durante 30 min. El sólido resultante se recogió por filtración y se lavó con 2-propanol (500 ml), se secó al vacío a 50 °C durante 6 h para proporcionar el producto deseado (680 g, 77%) en forma de un polvo de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 8,38 (s, 3H), 7,52-7,48 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,17-7,15 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,92-6,90 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,55 (m, 1H), 4,71-4,68 (m, 1H), 4,38-4,22 (m, 3H), 3,53-3,50 (m, 1H), 2,91 2,86 (m, 1H). CL-EM: [M+H]+ = 206.

(h) ((7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-ferc-butilo

A una solución de clorhidrato de (S)-(7,8-dih¡dro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (390 g, 1,62 mol) y Et³N (163,4 g, 4,85 mol) en DCM (4,6 i) se le añadió (Boc)2Ü (353,0 g 1,62 mol) gota a gota durante 2 h a ta. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó a ta durante otras 3 h. La reacción se interrumpió con HCl 1 N (4 l) y la fase orgánica se separó y se lavó con agua (4 l), se concentró al vacío para obtener el producto deseado (460 g, 93%) en forma de un sólido de color amarillo pálido. RMN ¹H (400 MHz, DMSO-de): 7,46-7,42 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (s, 1H), 7,02-7,00 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,87-6,85 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,27 (m, 1H), 4,68-4,65 (m, 1H), 4,34-4,18 (m, 3H), 3,41 (s, 1H), 3,14-3,08 (m, 1H), 1,38 (s, 9H). CL-EM: [M-55] = 250.

(i) ((3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-íerc-butilo

Una mezcla de ((7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-rerc-butilo (315,0 g, 1,03 mol) y NCS (144,5 g, 1,08 mol) en dicloroetano (3,5 l) se calentó a 50 °C durante 24 h. La solución se lavó con agua caliente (50 °C, 4 l x 3) y la fase orgánica se concentró al vacío para obtener el producto deseado (400,0 g, en bruto) en forma de un sólido de color amarillo, el cual se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 7,44-7,42 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,91-6,89 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,33 (m, 1H), 4,72-4,69 (m, 1H), 4,35-4,19 (m, 3H), 3,73-3,71 (m, 1H), 3,17-3,15 (m, 1H), 1,33 (s, 9H). CL-EM: [M-55] = 284.

(j) Compuesto del título

Una solución de ((3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-rerc-butilo (400,0 g, en bruto) y HCl conc. (500 ml) en 1,4-dioxano (2 l) se agitó a ta durante 8 h, tiempo durante el cual los sólidos incoloros se precipitaron, se recogieron y se lavaron con 2-propanol (200 ml). El sólido se recristalizó en H2O y dioxano (400 ml/2000 ml) para obtener la sal clorhidrato del producto deseado (110,0 g, 39%, en dos etapas). Rm N ¹H (400 MHz, DMSO-de): 8,48-8,35 (a, 3H), 7,52-7,50 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,00-6,97 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,60 (m, 1H), 4,71 (m, 1H), 4,38-4,21 (m, 3H), 3,64-3,55 (m, 1H), 3,04-2,99 (m, 1H). RMN ¹³C (400 MHz, DMSO-d6 ): 161,22, 149,15, 134,61, 119,35, 118,31, 79,14, 73,92, 69,22, 41,88. CL-EM: [M+H]+ = 240.

Ejemplo 4-II dihidrogenosulfato de (S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina H2O (G4-Cl)

Una mezcla de ((7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-rerc-butilo (13,25 kg) y NCS (8,75 kg) en dicloroetano (132,5 l) se calentó a 70 °C hasta que la reacción se consideró completa mediante HPLC. La mezcla se concentró a presión reducida, se enfrió a 25 °C y se añadió acetona (106 l). La suspensión se filtró, lavándose con acetona (26,5 l). La torta húmeda se suspendió en agua (13,25 l) y 1,4-dioxano (66,25 l), se calentó a 50 °C durante 20-30 minutos, se enfrió a 15 °C, se filtró y la torta se lavó con 1,4-dioxano (26,5 l). La torta húmeda se disolvió en metanol (68,9 l), se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. Se añadió metil butil terciario éter (66,25 l) al residuo y la mezcla se concentró a presión reducida. Se añadieron metil butil terciario éter (78,7 l), isopropanol (8,7 l) y ácido sulfúrico (4,6 l), la mezcla se calentó a 50 °C y se agitó hasta que el contenido de sulfato fue 24,32-29,72%. La mezcla se enfrió a 25 °C, se agitó durante 1 hora, se filtró, la torta se lavó con metil butil terciario éter (17,5 l) y se secó para dar el producto deseado (42%).

Ejemplo comparativo 5 (clorhidrato de 3-fluoro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina) (G5-F)

(a) 1-(2-(benciloxi)etoxi)-2-bromo-4-fluorobenceno

Una solución de 2-bromo-4-fluorofenol (1,91 g, 10 mmol), ((2-bromoetoxi)metil)benceno (2,6 g, 12 mmol) y K²CO³(2,76 g, 20 mmol) en 40 ml de DMF se agitó a 25 °C durante 16 h. Después, la mezcla se vertió en 300 ml de agua, se extrajo con acetato de etilo (200 ml), se lavó con agua (200 ml) y salmuera (100 ml) y se secó sobre sulfato sódico anhidro. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1:5) para proporcionar el producto (3,1 g, 95%) en forma de un aceite incoloro. RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d⁶): ó 7,55 (dd, 1H), 7,36-7,15 (m, 7H), 4,60 (s, 2H), 4,22-4,19 (m, 2H), 3,80-3,77 (m, 2H).

(b) 3-(2-(benciloxi)etoxi)-2-bromo-6-fluorobenzaldehído

Una solución de 1-(2-(benciloxi)etoxi)-2-bromo-4-fluorobenceno (1,6 g, 4,9 mmol) en 30 ml de THF se enfrió a -70 °C y se añadió gota a gota LDA (2,0 M en THF, 3,5 ml, 7 mmol). La mezcla resultante se mantuvo en agitación durante 2 h a baja temperatura antes de añadir una solución de DMF (1,1 g, 15 mmol) en THF (3 ml). La mezcla se agitó durante 1 h y después se dejó calentar a 0 °C. Se inactivó mediante NH4Cl ac. saturado y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (100 ml). La capa orgánica se lavó con agua (50 ml) y salmuera (50 ml), y se secó sobre sulfato sódico anhidro. El disolvente se retiró a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1:3) para proporcionar el producto (1,2 g, 69%) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H (300 MHz, DMSO-de): ó 10,22 (s, 1H), 7,48-7,27 (m, 7H), 4,60 (s, 2H), 4,29-4,26 (m, 2H), 3,82-3,79 (m, 2H).

(c) ácido 6-(2-(benciloxi)etoxi)-3-fluoro-2-formilfenilborónico

Una solución de 3-(2-(benciloxi)etoxi)-2-bromo-6-fluorobenzaldehído (1 g, 2,8 mmol), Pin²B²(1 g, 4 mmol), KOAc (0,56 g, 6 mmol) y Pd(dppf)Cl²(0,05 g) en 30 ml de THF se desgasificó con N²seis veces. Después, la mezcla se calentó a 100 °C (irradiada con microondas) durante 4 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1:5). Las fracciones se combinaron y se concentraron a presión reducida. El residuo se disolvió en THF (20 ml) y HCl 6 N (4 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Después de esto, se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3), la capa orgánica combinada se concentró a presión reducida para proporcionar el producto en bruto (0,5 g, 56%). Se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional. CL-EM: 336,0 [M+H²O]⁺.

(d) 7-(2-(benciloxi)etoxi)-4-fluoro-3-(nitrometil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol

A una solución agitada de ácido 6-(2-(benciloxi)etoxi)-3-fluoro-2-formilfenilborónico (0,5 g, 1,6 mmol) y CH³NO²(0,2 g, 3,5 mmol) en 10 ml de THF se le añadió una solución de NaOH (0,028 g, 0,7 mmol) en 3 ml de agua a temperatura ambiente. Después, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h y se acidificó con HCl conc. a pH=1 a 0 °C. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (20 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml) después se secó sobre sulfato sódico anhidro. Después de retirar el disolvente a presión reducida, el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1 :10 ) para proporcionar el producto en bruto (0,5 g, 88%) en forma de un aceite incoloro. CL-EM: 379,0 [M+H²O]⁺.

(e) Compuesto del título

Una solución de 7-(2-(benciloxi)etoxi)-4-fluoro-3-(nitrometil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol (0,5 g, 1,4 mmol) y Pd/C (10%, 0,1 g) en 20 ml de metanol se hidrogenó en 1 atm de H2 a temperatura ambiente durante 48 h. Después, se filtró a través de un lecho de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativo usando una columna Daisogel 10|j C18 (250 x 50 mm) y eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%). La fracción recogida se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en éter (5 ml) y se añadió HCl 2N (0,2 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. El sólido se recogió por filtración y se lavó con éter (10 ml) para dar el compuesto del título (0,035 g, 10%) en forma de un sólido de color blanco. CL-EM: 223,9 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): ó 8,22 (s a, 3H), 7,33 (t, 1H), 6,97 (dd, 1H), 5,68 (d, 1H), 4,69 (s a, 1H), 4,37-4,23 (m, 3H), 3,43-3,40 (m, 1H), 3,03 (t, 1H).

Ejemplo comparativo 6 clorhidrato de (S)-(3-yodo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (G6-I)

(a) ((3-yodo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-íerc-butilo

Una solución de ((7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-terc-butilo (300 mg, 0,98 mmol) (Ejemplo 4, Método B, (h)) y NIS (265 mg, 1,18 mmol) en 6 ml de AcOH se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC preparativa usando una columna Daisogel 10p C18 (250 x 50 mm) y eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%) para proporcionar el producto (200 mg, 47%) en forma de un aceite de color amarillo claro. CL-EM: 432 [M+H]+.

(b) Compuesto del título

Una solución de ((3-yodo-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-terc-butilo (140 mg, 0,32 mmol) y TFA (0,5 ml) en 5 ml de DCM se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida. El residuo se disolvió en éter (5 ml) y se añadió HCl 2 N en agua (0,2 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. El sólido se recogió por filtración y se lavó con éter (10 ml) para dar el compuesto del título (90 mg, 75%) en forma de un sólido de color blanco. CL-EM: 332,0 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): ó 8,47 (s a, 3H), 7,80 (d, 1H), 6,78 (d, 1H), 5,37 (m, 1H), 4,72-4,53 (m, 1H), 449-4,08 (m, 3H), 3,78-3,51 (m, 1H), 3,06-2,78 (m, 1H).

Ejemplo 7 clorhidrato de (3-cloro-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (G7-Cl)

(a) 2-bromo-3-(2-hidroxipropoxi)benzaldehído

Una solución de 2-bromo-3-hidroxibenzaldehído (6,0 g, 29,85 mmol), 1 -cloropropan-2-ol (8,46 g, 89,55 mmol) y K²CO³(8,24, 59,7 mmol) en DMF (100 ml) se agitó a 100 °C durante una noche. Después, la mezcla de reacción se inactivó mediante la adición de agua (4 l) y después se extrajo con EtOAc (3*1,5 l). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (250 ml), se secaron sobre Na²SO⁴anhidro y se concentraron a sequedad al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo =5:1 a 2:1) para dar el compuesto en bruto diana (8,77 g). EM (IEN) m/z =259/261 [M H]⁺.

(b) 3-(2-hidroxipropoxi)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzaldehído

Una solución de 2-bromo-3-(2-rndroxipropoxi)benzaldemdo (8,77 g, 34 mmol) 4,4,4 ,4 ,5,5,5 ,5 -octametil-2,2 -bi(1,3,2-dioxaborolano) (17,27 g, 68 mmol), Pd(dppf)Cl²(2,49 g, 3,4 mmol) y KOAc (9,99 g, 102 mmol) en dioxano (200 ml) se agitó a 100 °C durante una noche. Después, la mezcla de reacción se inactivó mediante la adición de agua (200 ml) y después se extrajo con EtOAc (3x200 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (250 ml), se secaron sobre Na²SO⁴anhidro y se concentraron a sequedad al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo =5:1 a 1:1) para dar el compuesto en bruto diana (6 g). EM (IEN) m/z =307 [M H]⁺.

(c) 8-metil-2-(nitrometil)-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azuleno

A una solución de NaOH (261,4 mg, 6,54 mmol) en agua (8 ml) se le añadió nitrometano (1,2 g, 19,6 mmol) a 5-10 °C. Después de agitar durante 15 min a 5-10 °C, se añadió CTAB (0,19 g, 0,52 mmol) a la mezcla de reacción y seguido de la adición de 3-(2-hidroxipropoxi)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzaldehído (2,0 g, 6,54 mmol) a 5 10 °C. La mezcla de reacción se agitó a ta durante 5 h. La mezcla de reacción se acidificó a pH=1 usando ácido clorhídrico diluido y se agitó a ta durante una noche. La mezcla de reacción se filtró para dar el compuesto diana (541 mg, 33%).

(d) acetato de (8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina

Una solución de 8-metil-2-(nitrometil)-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azuleno (541 mg, 2,173 mmol) e hidróxido de paladio (300 mg) en ácido acético (10 ml) se agitó en una atmósfera de H²durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de un lecho de Celite y el filtrado se concentró al vacío para dar el compuesto en bruto (350 mg). EM (IEN) m/z = 220 [M H]⁺.

(e) ((8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo

A la mezcla del compuesto en bruto, acetato (8-metil-7,8-d¡h¡dro-2H-1,6,9-tr¡oxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (3,0 g, 10,75 mmol) y trietilamina (6,5 g, 64,5 mmol) en diclorometano (100 ml) a 0 °C se le añadió dicarbonato de di-terc-butilo (3,5 g, 16,13 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con NaHCÜ³sat. (15 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3x80 ml), las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴anhidro y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por HPLC preparativa usando una columna Daisogel 10p C18 (250 x 50 mm), eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%) para dar el producto (700 mg). EM (IEN) m/z = 264 [M-56]⁺. RMN ¹H (300 MHz, DMSO-de): ó 7,44-7,39 (m, 1H), 7,01 6,98 (m, 2H), 6,88-6,85 (m, 1H), 5,24 (m, 1H), 4,52-4,44 (m, 2H), 4,18-4,00 (m, 1H), 3,39-3,36 (m, 1H), 3,15-3,06 (m, 1H), 1,42-1,09 (m, 15H).

(f) ((3-cloro-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo

A una solución de ((8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de terc-butilo (300 mg, 0,94 mmol) y 1-clorop¡rrol¡d¡n-2,5-d¡ona (151,4 mg, 1,13 mmol) en CH3CN (20 ml) se le añadió 2,2'-azobis(2-metilpropionitrilo (15,4 mg, 0,094 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 h a 90 °C. Después, la mezcla de reacción se concentró a alto vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa usando una columna Gemini® 5p C18 (150 x 21,2 mm) y eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%) para dar el producto deseado (150 mg, 45%). EM (IEN) m/z= 298 [M -56]+ .

(g) Compuesto del título

Se agitó ((3-cloro-8-met¡l-7,8-d¡h¡dro-2H-1,6,9-tr¡oxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-¡l)met¡l)carbamato de terc-butilo (150 mg, 0,425 mmol) en Et2O/HCl y Et2O (10 ml) a temperatura ambiente durante 2 h y se concentró a sequedad (baño de agua < 30 °C). El residuo se lavó con acetonitrilo (2x5 ml) y el sólido de color blanco se secó a alto vacío para dar el producto (120 mg, 97%) en forma de un sólido de color blanco. RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d⁶): ó 8,28 (s, 3H), 7,51 7,48 (d, 1H), 7,02-6,99 (d, 1H), 5,58-5,56 (d, 1H), 4,57 (m, 2H), 4,33-4,17 (m, 1H), 3,72-3,56 (m, 1H), 3,05-3,01 (m, 1H), 1,30-1,23 (m, 3H). EM (IEN) m/z = 254 [M H]+ .

Ejemplo 8 clorhidrato de (3-bromo-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (G8-Br)

(a) ((3-bromo-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de ferc-butilo

A una solución de ((8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de ferc-butilo (180 mg, 0,564 mmol) (Ejemplo comparativo 5, (e)) y 1-bromopirrolidin-2,5-diona (120 mg, 0,677 mmol) en CH³CN (20 ml) se le añadió 2,2'-azobis(2-metilpropionitrilo (9,2 mg, 0,056 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 h a 90 °C. Después, la mezcla de reacción se concentró a alto vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa usando una columna Gemini® 5u C18 (150 x 21,2 mm) eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%) para dar el producto (60 mg). EM (IEN) m/z = 342/344 [M -56]⁺.

(b) Compuesto del título

Se agitó ((3-bromo-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de ferc-butilo (60 mg, 0,15 mmol) en HCl saturado (gas) en Et2O (10 ml) a ta durante 2 h y se concentró a sequedad (temperatura del baño de agua < 30 °C). El residuo se purificó mediante HPLC preparativa usando una columna Gemini® 5u C18 (150 x 21,2 mm) eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%) para dar el producto (20 mg) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): ó 8,12 (a, 3H), 7,65 (m, 1H), 6,96 (m, 1H), 5,45 (m, 1H), 4,58 (m, 2H), 4,29-4,16 (m, 1H), 3,77-3,59 (m, 1H), 3,04 (m, 1H), 1,29-1,21 (d, 3H). EM (IEN) m/z = 298/300 [M H]+.

Ejemplo 9 clorhidrato de (3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (G9-Br)

(a) 2-bromo-3-(2-hidroxi-2-metilpropoxi)benzaldehído

Una solución de 2-bromo-3-hidroxibenzaldehído (7,5 g, 37,3 mmol), 1-cloro-2-metilpropan-2-ol (9,4 g, 85,6 mmol) y Na2CO3 (6,7 g, 63,2 mmol) en 70 ml de DMSO se agitó a 140 °C durante 3 horas. Después, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en 300 ml de agua, se extrajo con acetato de etilo (600 ml), se lavó con agua (300 ml) y salmuera (50 ml), se secó sobre sulfato sódico anhidro. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de acetato de etilo y éter de petróleo (1:3) para dar el compuesto del título (9,2 g, 90,3%) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H (300 MHz, CDCb): ó 10,43 (s, 1H), 7,54 (dd, 1H, J1=3,0, J2=7,5), 7,40~7,34 (m, 1H), 7,54 (dd, 1H, J1=3, J2=7,5), 3,90 (s, 2H), 1,42 (s, 6 H).

(b) 3-(2-hidroxi-2-metilpropoxi)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzaldehído

Una solución de 2-bromo-3-(2-hidroxi-2-metilpropoxi)benzaldehído (9,2 g, 33,7 mmol), Pin²B²(17,1 g, 67,4 mmol), KOAc (9,9 g, 101,1 mmol) y Pd(dppf)Cl²(2,5 g) en 240 ml de 1,4-dioxano se desgasificó con N²seis veces. Después, la reacción se agitó a 99 °C en una atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. La reacción se enfrió, se filtró, después se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de acetato de etilo y éter de petróleo (1:5) para dar el compuesto del título (10 g, en bruto) incluyendo un subproducto de de-Br (usado directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional).

(c) 8,8-dimetil-2-(nitrometil)-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azuleno

A una solución agitada de 3-(2-hidroxi-2-metilpropoxi)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzaldehído (10 g, 31,3 mmol) y CH³NO²(5,7 g, 93,8 mmol) en 100 ml de Th F se le añadió una solución de NaOH (1,25 g, 31,3 mmol) en 60 ml de agua a temperatura ambiente. Después, la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Después, la reacción se acidificó mediante HCl conc. a pH=1 a 0 °C y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (100 ml), se lavó con agua (30 ml), después salmuera (30 ml), se secó sobre sulfato sódico anhidro. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo y éter de petróleo (1 :10 ) para dar el compuesto del título (3 g, 36,5%) en forma de un aceite incoloro.

(d) acetato de (8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina

Una solución de 8,8-dimetil-2-(nitrometil)-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azuleno (1 g, 3,8 mmol) y Pd(OH)²(10%, 0,2 g) en 20 ml de ácido acético se hidrogenó a 1 atm de H²a ta durante 16 horas. Después, la mezcla se filtró y el disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida para dar el compuesto del título (0,9 g, en bruto) en forma de un aceite (sal acetato). CL-EM: 234,1 [M+H]⁺.

(e) ((8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de ferc-butilo

A una solución agitada de acetato de (8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (0,7 g, 2,39 mmol) en 70 ml de CH2Cl2 enfriada a 0 °C se le añadió Et3N (0,61 g, 6,0 mmol). Después, se añadió Boc2O (0,98 g, 4,5 mmol) en una porción y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla se lavó con HCl 0,3 N (30 ml), agua (30 ml) y se secó sobre sulfato sódico anhidro. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo y éter de petróleo (1:4) para dar el compuesto del título (0,63 g, 79%) en forma de un aceite. CL-EM: 234,1 [M+H-100]+.

(f) ((3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de ferc-butilo

Una solución de((8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de ferc-butilo (232 g, 0,70 mmol), NBS (143 mg, 0,80 mmol) y AIBN (20 mg) en 30 ml de acetonitrilo se agitó a la temperatura de reflujo durante 1 hora. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo y éter de petróleo (1:4) para dar el compuesto del título (260 mg, 88 ,6 %) en forma de un sólido. CL-EM: 312,0/314,0 [M+H-100]+.

(g) Compuesto del título

Una solución de ((3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de ferc-butilo (260 mg, 0,63 mmol) en una solución saturada de HCl en 1,4-dioxano (20 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por HPLC preparativa usando una columna Gemini® 5u C18 (150 x 21,2 mm) eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%) tratándose con 0,1 ml de HCl concentrado para dar el producto deseado (20 mg, 9,1%) en forma de un sólido de color blanco. CL-EM: 311,9 [M+H]⁺. RMN ¹H (400 MHz, CD³OD): ó 7,63 (d, 1H, J = 8 ), 6,95 (d, 1H, J = 8 ), 5,52~5,45 (m, 1H), 4,41 (d, 1H, J = 12), 4,17 (d, 1H, J = 16), 4,09~3,85 (m, 1H), 3,13~2,98 (m, 1H), 1,37~1,30 (m, 6 H).

Ejemplo 10 clorhidrato de (S)-(3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (G10-Br):

(a) ((3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-terc- butilo

Una solución de ((8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de ferc-butilo (5,5 g, 16,5 mmol) (Ejemplo 9, (e)) y NBS (3,2 g, 18,2 mmol) en 100 ml de dicloroetano se agitó a 50 °C durante 18 horas. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo y éter de petróleo (1:10) para dar el compuesto del título (5,9 g, 86,5%) en forma de un aceite. El compuesto racémico se separó a través de SFC (columna quiral CHIRALPAK AD-H, eluyendo con EtOH (20%) y CO2 (80%)) para dar 2,2 g de (S)-isómero (isómero que eluyó en primer lugar, TR = 3,0 min) y 2,2 g de (R)-isómero (isómero que eluyó en segundo lugar, TR = 4,1 min). Cl -EM: 312,0/314,0 [M+H-100]+.

(b) Compuesto del título

Se burbujeó HCl seco a través de una solución de ((3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-ferc-butilo (2,2 g, 5,34 mmol) en éter dietílico (150 ml) a temperatura ambiente durante 3 horas y después se agitó durante 18 horas. El disolvente se filtró y la torta de filtro se secó al vacío para dar el (S)-isómero (1,4 g, 76%) en forma de un sólido de color blanco. CL-EM: 311,9 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): ó 8,23 (s a, 3H), 7,64 (d, 1H, J = 8 ), 6,96 (d, 1H, J = 8 ), 5,48~5,46 (m, 1H), 4,43~4,40 (m, 1H), 4,21~4,10 (m, 1H), 3,75~3,55 (m, 1H), 3,05~2,95 (m, 1H), 1,36~1,27 (ds, 6 H). De forma análoga, el tratamiento ácido de ((3-bromo-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (R)-ferc-butilo dio el (R)-isómero correspondiente en forma de un sólido de color blanco (1,4 g, 76%). CL-EM: 312,0 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): ó 8,29 (s a, 3H), 7,65 (d, 1H, J = 8 ), 6,96 (d, 1H, J = 8 ), 5,48~5,46 (m, 1H), 4,42~4,39 (m, 1H), 4,22~4,10 (m, 1H), 3,75~3,50 (m, 1H), 3,03~2,93 (m, 1H), 1,36~1,27 (ds, 6 H).

Ejemplo 11 clorhidrato de (3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (G11-CI)

(a) ((3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo

Una solución de ((8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de rere-butilo (519 mg, 1,56 mmol) (Ejemplo 9, (e)), NCS (250 mg, 1,87 mmol) y AIBN (30 mg) en 50 ml de acetonitrilo se agitó a la temperatura de reflujo durante 1 hora. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo y éter de petróleo (1:5) para proporcionar el producto deseado (300 mg, 52,4%, que contenía isómero 6 -Cl) en forma de un sólido. CL-e M: 268,1 [M+H-100 ]+.

(b) Compuesto del título

Una solución de ((3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de terebutilo (300 mg, 0,82 mmol) en una solución saturada de HCl en 1,4-dioxano (30 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por HPLC preparativa usando una columna Gemini® 5u C18 (150 x 21,2 mm) eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%) seguido de tratamiento con 0,1 ml de HCl conc. para dar el producto deseado (94 mg, 37,9%) en forma de un sólido de color blanco.LC-EM: 268,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 68,40 (s a, 3H), 7,52 (d, 1H, J = 8 ), 7,02 (d, 1H, J = 8 ), 5,60~5,58 (m, 1H), 4,42~4,38 (m, 1H), 4,23~4,07 (m, 1H), 3,67~3,57 (m, 1H), 3,02~2,92 (m, 1H), 1,36~1,27 (m, 6 H).

Ejemplo 12 clorhidrato de (S)-(3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina (G12-Cl)

(a) ((3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-terc- butilo

Una solución de ((8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo (4,1 g, 12,3 mmol) (Ejemplo 9, (e)) y NCS (1,73 g, 13 mmol) en 100 ml de dicloroetano se agitó a 50 °C durante 5 horas. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo y éter de petróleo (1:10) para dar el compuesto del título (2,6 g, 58 %) en forma de un aceite. El compuesto racémico se separó a través de SFC (columna quiral CHIRALPAK AD-H, eluyendo con EtOH (20%) y CO²(80%)) para dar 1,2 g de (S)-isómero (isómero que eluyó en primer lugar, TR = 2,6 min) y 1,2 g de (R)-isómero (isómero que eluyó en segundo lugar, TR = 3,5 min. CL-EM: 268,0 [M+H-100]⁺.

(b) Compuesto del título

Se burbujeo HCl seco a través de una solución de ((3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (S)-terc-butilo (1,2 g, 3,27 mmol) en éter dietílico (150 ml) a temperatura ambiente durante 3 horas y después se agitó durante 18 horas. El disolvente se filtró y la torta de filtro se secó al vacío para dar el (S)-isómero (0,8 g, 80 %) en forma de un sólido de color blanco. CL-EM: 268 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 6 8,34 (s a, 3H), 7,52 (d, 1H, J = 8 ), 7,02 (d, 1H, J = 8 ), 5,58~5,56 (m, 1H), 4,42~4,39 (m, 1H), 4,22~4,07 (m, 1H), 3,67~3,53 (m, 1H), 3,03~2,95 (m, 1H), 1,36~1,27 (ds, 6 H).

De forma análoga, el tratamiento ácido de ((3-cloro-8,8-dimetil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-boraben-zo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de (R)-terc-butilo dio el (R)-isómero correspondiente (G25-CI(R)) en forma de un sólido de color blanco (1,2 g, 80%). CL-EM: 268 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 6 8,33 (sa, 3H), 7,52 (d, 1H, J = 8 ), 7,02 (d, 1H, J = 8 ), 5,58 (m, 1H), 4,42~4,39 (m, 1H), 4,21~4,07 (m, 1H), 3,67~3,54 (m, 1H), 3,03~2,95 (m, 1H), 1,36~1,27 (ds, 6 H).

Ejemplo comparativo 13 clorhidrato de ((2S,8R)-2-(aminometil)-3-fluoro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cc(]azulen-8-il)metanol (C15-F)

(a) (S)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi)-2-fluorobenzaldehído

Una solución de 2-fluoro-5-hidroxibenzaldehído (1,9 g, 13,6 mmol), 4-metilbencenosulfonato de (R)-(2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metilo (4,3 g, 15 mmol) y K²CO³(2,37 g, 17,2 mmol) en 40 ml de DMSO se agitó a 70 °C durante 16 h. Después, la mezcla se vertió en 300 ml de agua, se extrajo con acetato de etilo (200 ml), se lavó con agua (200 ml) y salmuera (100 ml) y se secó sobre sulfato sódico anhidro. El disolvente se evaporó a 40 °C a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1:5) para proporcionar el producto (2,9 g, 84 %) en forma de un aceite incoloro. CL-EM: 255,1 [M+H]⁺. RMN ¹H (300 Mhz , CD³OD): 6 10,30 (s, 1H), 7,31-7,28 (m, 1H), 7,16-7,05 (m, 2H), 4,49-4,45 (m, 1H), 4,18-3,85 (m, 4H), 1,45-1,40 (d, 6 H).

(b) (S)-1-(5-(((S)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi)-2-fluorofenil)-2-nitroetanol

Una mezcla de acetato de cobre (II) (0,2 g, 1,1 mmol), (1R)-1,7,7-tr¡met¡l-N-(p¡r¡d¡n-2-¡lmet¡l)b¡c¡clo[2.2.1]heptan-2-amina (0,3 g, 1,23 mmol) (Ejemplo 4, Método B, (b)) en etanol (30 ml) se ag¡tó a ta durante 1 h, después se añad¡ó una soluc¡ón de (S)-5-((2,2-d¡met¡l-1,3-d¡oxolan-4-¡l)metox¡)-2-fluorobenzaldehído (2,9 g, 11,4 mmol) en etanol (50 ml). La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó de -35 °C a -40 °C, y después, se añad¡ó gota a gota n¡trometano (7 g, 115 mmol), manten¡endo la temperatura por debajo de -35 °C, segu¡do de la ad¡c¡ón de d¡¡soprop¡let¡lam¡na (0,32 g, 2,50 mmol). La reacc¡ón se agitó a -35 °C durante 24 h, y después se ¡nterrump¡ó con ác¡do tr¡fluoroacét¡co (0,29 g, 2,5 mmol). Se añad¡ó EtOAc (200 ml) a la soluc¡ón resultante. La fase orgán¡ca separada se lavó con agua (200 ml) y después se concentró al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce eluyendo con acetato de et¡lo y éter de petróleo (1:10) para proporc¡onar el producto (3,3 g, 92%) en forma de un ace¡te ¡ncoloro. CL-EM: 316,1 [M+H]+.

(c) (S)-2-amino-1-(5-(((S)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi)-2-fluorofenil)etanol

Una soluc¡ón de (S)-1-(5-(((S)-2,2-d¡met¡l-1,3-d¡oxolan-4-¡l)metox¡)-2-fluorofen¡l)-2-n¡troetanol (3,2 g, 10,2 mmol) y Pd/C (10%, 0,5 g) en 70 ml de metanol se h¡drogenó en 1 atm de H2 a temperatura amb¡ente durante 48 h. Después, se f¡ltró a través de un lecho de Cel¡te y el f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar el producto en bruto (2,9 g, 100%) en forma de un ace¡te ¡ncoloro. Se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. CL-EM: 286,2 [M+H]+.

(d) (S)-2-(dibencilamino)-1-(5-(((S)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi)-2-fluorofenil)etanol

A una soluc¡ón ag¡tada de (S)-2-am¡no-1-(5-(((S)-2,2-d¡met¡l-1,3-d¡oxolan-4-¡l)metox¡)-2-fluorofen¡l)etanol (2,9 g, 10,2 mmol) en 50 ml de EtOH se le añad¡eron K²CO³(2,8 g, 20,3 mmol) y BnBr (3,6 g, 21 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante la noche. El d¡solvente se retiró a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1 :10 ) para proporc¡onar el producto (3,8 g, 80%) en forma de un aceite incoloro. CL-EM: 466,2 [M+H]+

(e) (S)-3-((dibencilamino)metil)-7-(((S)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi)-4-fluorobenzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol

A una solución de (S)-2-(dibencilamino)-1-(5-(((S)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi)-2-fluorofenil)etanol (3,3 g, 7,1 mmol) en tolueno seco (40 ml) a -30 °C en atmósfera de N²se le añadió n-BuLi (2,5 M en hexano, 20 ml, 50 mmol), gota a gota durante 30 minutos. Después de la adición, la mezcla se agitó a 0 °C durante otras 2 h y después se enfrió a -70 °C; se añadió gota a gota borato de trimetilo (5,2 g, 50 mol) manteniendo la temperatura por debajo de - 50 °C. Después de la adición, la mezcla de reacción se dejó calentar a -40 °C durante 3 h y después se calentó a ta y se agitó durante una noche. La reacción se interrumpió con NaHCO³acuoso al 5% (20 ml) y se agitó vigorosamente durante 15 min, la suspensión resultante se filtró y el filtrado se separó. La capa orgánica se lavó con agua (20 ml x 3) y se concentró al vacío para proporcionar el producto en bruto (3 g, 86%) en forma de un aceite de color amarillo. CL-EM: 492,2 [M+1]⁺

(f) Compuesto del título

Una solución de (S)-3-((dibencilamino)metil)-7-(((S)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi)-4-fluorobenzo[c] [1,2]oxaborol-1(3H)-ol (3 g, 6,1 mmol) y Pd/C (10%, 0,7 g) en 50 ml de metanol con 2 ml de HCl conc. se hidrogenó en 1 atm de H²a temperatura ambiente durante 48 h. Después, se filtró a través de un lecho de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativo usando una columna Daisogel 10|j C18 (250 x 50 mm) y eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%). La fracción recogida se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en éter (30 ml) y HCl sat. (g) en éter (30 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. El sólido se recogió por filtración y se lavó con éter para dar el compuesto del título (0,4 g, 23%) en forma de un sólido de color blanco. CL-EM: 254,2 [M+H]⁺. RMN ¹H (400 MHz, D2O): 6 7,20-7,16 (m, 1H), 6,94-6,91 (m, 1H), 5,55-5,53 (m, 1H), 4,17-4,04 (m, 3H), 3,70-3,62 (m, 3H), 3,19-3,14 (m, 1 H).

Ejemplo comparativo 14 ((2S, 8R o 2R, 8S)-2-(aminometil)-3-cloro-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cd]azulen-8-il)metanol (C16-CI)

Ejemplo comparativo 15 ((2S, 8S o 2R, 8R)-2-(aminometil)-3-cloro-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cd]azulen-8-il)metanol (G17-CI)

(a) ((2-metilaliloxi)metil)benceno

Una solución de alcohol metalílico (80 g, 1,1 mol) en THF (100 ml) se añadió gota a gota a una suspensión de NaH (66 g, 1,65 mol) en THF (800 ml) a 25 °C en una atmósfera de argón. Después de 1 h, se añadió lentamente una solución de bromuro de bencilo (207 g, 1,2 mol) en THF (100 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. La mezcla de reacción se inactivó con una solución saturada de NH4Cl (200 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (100 ml) y salmuera (100 ml), se secó sobre Na2SO4. El disolvente se retiró a presión reducida. El residuo se destiló para proporcionar el producto deseado (134 g, 74%) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H (400 MHz, CDCb): ó 7,40-7,29 (m, 5H), 5,05 (s, 1H), 4,97 (s, 1H), 4,54 (s, 2H), 3,98 (s, 2H), 1,82 (s, 3H).

(2-(benc¡lox¡met¡l)-2-met¡lox¡rano

Se disolvió ((2-metilaliloxi)metil)benceno (41,5 g, 256 mmol) en DCM (1200 ml) y se enfrió a 0 °C. Se añadió m-CPBA (69,7 g, 384 mmol) y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente durante 12 h. Después de eso, el precipitado de color blanco se retiró por filtración, el filtrado se lavó con una solución saturada de Na2CO3 (200 ml), H2O (200 ml) y salmuera. Después de retirar el disolvente a presión reducida, el residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo ( 1 :20 ) para proporcionar el producto puro (20 g, 44%) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H (400 MHz, CDCb): ó 7,40-7,29 (m, 5H), 4,60 (c, J = 12,0 Hz, 2H), 3,61 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,48 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 2,78 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 2,66 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 1,43 (s, 3H).

3-(3-(benc¡lox¡)-2-h¡drox¡-2-metilpropox¡)-2-bromobenzaldehído

A una solución de (2-(benciloximetil)-2-metiloxirano (26 g, 145,9 mmol) en DMF (700 ml) se le añadió K²CO³(42 g, 304,3 mmol), seguido de 2-bromo-3-hidroxibenzaldehído (30 g, 149,3 mmol). La suspensión se agitó a 90 °C durante 6 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con salmuera y se extrajo con acetato de etilo (200 ml x 3). El disolvente orgánico se retiró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1:20) para proporcionar el producto puro (27 g, 49%) en forma de un aceite de color amarillo claro. RMN ¹H (400 MHz, DMSO-cfe): ó 10,29 (s, 1H), 7,512-7,41 (m, 3H), 7,31 - 7,23 (m, 5H), 4,91 (s, 1H), 4,53 (dd, Ji= 12,4 Hz, J2 = 17,2 Hz, 2H), 4,06 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 3,91 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 3,54 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 3,47 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 1,27 (s, 3H).

3-(3-(bencilox0-2-hidroxi-2-metilpropoxh-2-(4.4.5.5-tetrametil-1.3.2-dioxaborolan-2-il)benzaldehído

Una solución de 3-(3-(benciloxi)-2-hidroxi-2-metilpropoxi)-2-bromobenzaldehído (21,3 g, 56,2 mmol), Pin2B2 (28,6 g, 112,4 mmol), KOAc (6,1 g, 61,9 mmol), PdCh(dppf) DCM (1,23 g, 1,7 mmol) en Dm F (150 ml) se desgasificó durante 3 veces con nitrógeno. La mezcla se calentó a 90 °C durante 16 h. Después de la reacción se trató con acetato de etilo y salmuera, el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1:20) para proporcionar el producto deseado (15,3 g, 64%) en forma de un aceite de color amarillo claro. CL-EM: 367,1 [344+Na]+

(3-(benciloxi)-2-hidroxi-2-metilpropoxi)-3-(nitrometil)benzorc1H .21oxaborol-1(3H)-ol

A una solución enfriada con hielo de 3-(3-(benciloxi)-2-hidroxi-2-metilpropoxi)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzaldehído (18,8 g, 44,1 mmol) en THF se le añadió una solución de NaOH (1,76 g, 44,1 mmol) en agua (100 ml). Después de agitar durante 15 min, se añadió CH³NO²(3,3 g, 53 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 h. La solución de reacción se acidificó con AcOH a pH 3-5. La suspensión se extrajo con acetato de etilo (50 ml x 3). La capa orgánica combinada se evaporó al vacío, y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1:10) para proporcionar el producto puro (6,8 g, 40%) en forma de un aceite incoloro. CL-EM: 386,0 [M-1]-

acetato de (2-(am¡nomet¡l)-8-met¡l-7.8-d¡h¡dro-2H-1.6.9-trioxa-9a-borabenzorcd1azulen-8-¡l)metanol

Se añadió Pd(OH)²/C (200 mg) a una solución de 7-(3-(benciloxi)-2-hidroxi-2-metilpropoxi)-3-(nitrometil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol (1 g, en bruto) en AcOH (20 ml). La solución se desgasificó 3 veces con H²y se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto en bruto (1 g, en bruto) en forma de un sólido de color amarillo.

((8-(hidroximetih-8-metil-7.8-dihidro-2H-1.6.9-trioxa-9a-borabenzorcd1azulen-2-ihmetihcarbamato de terc- butilo

Se añadió NaHCO³(437 mg, 5,2 mmol) a una solución de acetato de (2-(aminometil)-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-8-il)metanol (650 mg, 2,1 mmol) en t-BuOH (10 ml) y H²O (10 ml) a temperatura ambiente. Después de agitar durante 15 min, se añadió (Boc)²O (854 mg, 3,9 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se acidificó con AcOH a pH 6-7 y se extrajo con DCM (30 ml x 3). Las capas orgánicas combinadas se evaporaron al vacío, y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1:3) para proporcionar el producto deseado (400 mg, 55%) en forma de un aceite incoloro. CL-EM: 294,1 [M-55]+

((3-cloro-8-(h¡drox¡met¡l)-8-met¡l-7.8-d¡h¡dro-2H-1.6.9-tr¡oxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-¡l)met¡l)carbamato de tere-butilo

A una solución de ((8-(hidroximetil)-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo (200 mg, 0,57 mol) en ACN (10 ml) se le añadió NCS (77 mg, 0,57 mmol), y la solución se agitó a 90 °C durante 16 h. La reacción se interrumpió con una solución de NH4Cl, se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se concentró al vacío. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1:3) para proporcionar el producto en bruto (240 mg, en bruto) en forma de un aceite de color amarillo. CL-EM: 284,1 [283+H]+

Compuestos del título

Se disolvió ((3-cloro-8-(hidroximetil)-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo (240 mg, en bruto) en una solución de TFA (1 ml) en DCM (10 ml). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y después se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativo usando una columna Daisogel 10p C18 (250 x 50 mm) y eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%). La fracción recogida se concentró a presión reducida para proporcionar los compuestos del título. ((2S, 8 R o 2R, 8S)-2-(aminometil)-3-cloro-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-8-il)metanol c L-EM: 284,0 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): ó 8,23 (s, 3H), 7,52 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,56 (dd, J = 8,5, 2,1 Hz, 1H), 4,55 (s, 1H), 4,15 (s, 1H), 3,59 (s, 1H), 3,45 (s, 2H), 3,04 (s, 1H), 1,21 (s, 3H). ((2S, 8S o 2R, 8R)-2-(aminometil)-3-cloro-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-8-il)metanol c L-EM: 284,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): ó 8,12 (s, 2H), 7,51 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 5,55 (s, 1H), 4,54 (s, 1H), 4,24 - 3,92 (m, 1H), 3,78 - 3,29 (m, 3H), 3,02 (s, 1H), 1,25 (s, 3H).

Ejemplo comparativo 16 ((2S, 8R o 2R. 8S)-2-(am¡nomet¡l)-3-bromo-8-met¡l-7.8-d¡h¡dro-2H-1.6.9-tr¡oxa-9aborabenzo[cd]azulen-8-¡l)metanol (C18-Br)

Ejemplo comparativo 17 ((2S, 8S, o 2R. 8R)-2-(am¡nomet¡l)-3-bromo-8-metil-7.8-d¡h¡dro-2H-1.6.9-tr¡oxa-9aborabenzo[cd]azulen-8-¡l)metanol

((3-bromo-8-(hidroximetil)-8-metil-7.8-dihidro-2H-1.6.9-trioxa-9a-borabenzorcd1azulen-2¡nmetil)carbamato de tere-butilo

A una solución de ((8-(hidroximetil)-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo (200 mg, 0,57 mmol) en ACN (10 ml) se le añadió NBS (102 mg, 0,57 mmol), y la solución se agitó a 90 °C durante 1 h. La reacción se interrumpió con una solución de NH4Cl, se extrajo con acetato de etilo (20 ml x 3). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se concentró al vacío. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo y éter de petróleo (1:3) para proporcionar el producto (230 mg, en bruto) en forma de un sólido de color pálido. CL-Em : 328,1 [M-Boc+H]+.

Compuestos del título

Se disolvió ((3-bromo-8-(hidroximetil)-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metil)carbamato de tere-butilo (230 mg, en bruto) en una solución de TFA (1 ml) en DCM (10 ml). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y después se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativo usando una columna Daisogel 10|j C18 (250 x 50 mm) y eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo (TFA al 0,05%). La fracción recogida se concentró a presión reducida para proporcionar los compuestos del título. ((2S, 8 R o 2R, 8S)-2-(aminometil)-3-bromo-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-8-il)metanol c L-EM: 328,0 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) ó 8,10 (s, 3H), 7,65 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,07 - 6,88 (m, 1H), 5,56 - 5,39 (m, 1H), 5,36 -5,17 (m, 1H), 4,61-4,52 (m, 1H), 4,19-4,07 (m, 1H), 3,62 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 3,51 - 3,39 (m, 2H), 3,04 (s, 1H), 1,18 (s, 3H). ((2S, 8S o 2R, 8R)-2-(aminometil)-3-bromo-8-metil-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-8-il)metanol CL-EM: 328,0 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): ó 8,13 (s, 2H), 7,65 (s, 1H), 6,98 (s, 1H), 5,47 (s, 1H), 5,26 - 5,06 (m, 1H), 4,53 (s, 1H), 4,19 - 3,97 (m, 1H), 3,83 - 3,56 (m, 1H), 3,51 - 3,26 (m, 2H), 3,01-2,93 (m, 1H), 1,25 (s, 3H).

Ensayos in vitro

Ejemplo 18

Determinación de MIC contra micobacterias

La medición de la Concentración Mínima Inhibitoria (MIC, por sus siglas en inglés) contra las cepas de M. tuberculosis para cada compuesto probado se realizó en placas de microtitulación de poliestireno de fondo plano de 96 pocillos en un volumen final de 100 ul. Se realizaron diez diluciones dobles del fármaco en DMSO puro a partir de 50 mM. Se añadieron soluciones de fármaco al medio Middlebrook 7H9 (Difco) y se utilizó isoniazida (INH) (Sigma Aldrich) como control positivo con diluciones de 2 veces de INH a partir de 160 ug/ml. El inóculo se estandarizó a aproximadamente 1x107 ufc/ml y se diluyó a razón de 1 en 100 en caldo 7H9 de Middlebrook (Difco). Este inóculo (100 ul) se añadió a toda la placa, pero los pocillos G-12 y H-12 se usaron como controles en blanco. Todas las placas se colocaron en una caja sellada para evitar la desecación de los pocillos periféricos y se incubaron a 37 °C sin agitación durante seis días. Se preparó una solución de resazurina disolviendo un comprimido de resazurina (comprimidos de resazurina para analizar leche; Ref. 330884Y' VWR International Ltd.) en 30 ml de PBS estéril (solución salina tamponada con fosfato). De esta solución, se añadieron 25ul a cada pocillo. Se midió la fluorescencia (Spectramax M5 Molecular Devices, Excitación a 530 nm, Emisión a 590 nm) después de 48 horas para determinar el valor de MIC.

Ejemplo 19

MIC contra cepas clínicas

Se utilizó el Sistema BACTEC MGIT 960 (Becton Dickinson) para realizar la determinación de MIC en aislados clínicos (Instituto Carlos III) siguiendo las instrucciones del fabricante. El patrón de resistencia de los aislados clínicos se indica mediante las siguientes abreviaturas H: Isoniazida, R: Rifampicina, T: Etionamida, S: Estreptomicina, E: Etambutol, Z: Pirazinamida, K: Kanamicina, A: Amikacina y CP: Capreomicina. Los resultados para el compuesto del EJEMPLO 4 G4-Cl se muestran en las Tablas 1A, 1B, 2A y 2B, y las Figuras 3 y 4. Los resultados para el EJEMPLO 2 G2-Br se muestran en las Tablas 2C y 2D, y en la Figura 4.

La Tabla 1 proporciona los valores de MIC para el EJEMPLO 4 G4-CI probado contra aislados clínicos de M.

tuberculosis sensible (A) y resistente (B)

A

B

La Figura 3 proporciona una representación gráfica de los datos de MIC en las Tablas 1A y 1B para el EJEMPLO 4 G4- Cl, representada como el número de cepas con un valor de MIC particular (y) frente al valor de MIC particular obtenido (x) en pM. Tal como puede observarse en la Figura 3, G4-Cl (Ejemplo 4) presentó un valor de MIC de menos de 1 pM para más de 85 cepas aisladas clínicas de 97 probadas (sensibles y resistentes), lo que indica la muy buena actividad de este compuesto contra un número significativo de cepas de aislados clínicos de M. tuberculosis. El desglose es un MIC medido de <0,2 pM para 1 cepa; un MIC medido de 0,04 pM para 8 cepas; un MIC medido de 0,08 pM para 76 cepas; un MIC medido de 0,16 pM para 8 cepas; y un MIC medido de 0,31 pM para 3 cepas.

Las tablas 2A y 2B proporcionan valores de MIC para el EJEMPLO 4 G4-CI probado contra aislados clínicos de M. tuberculosis sensibles (A) y resistentes (B)

A

B

Las tablas 2C y 2D proporcionan valores de MIC para el EJEMPLO 2 G2-Br probado contra los mismos aislados clínicos de M. tuberculosis sensibles (A) y resistentes (B) C

D

La Figura 4 proporciona una representación gráfica de los datos de MIC en las Tablas 2A a 2D para G2-Br (Ejemplo 2 -barra clara) y G4-Cl (Ejemplo 4 - barra oscura), representado como número de cepas con un valor MIC particular (y) frente al valor de MIC particular obtenido (x), en pM. Tal como puede observarse en la Figura 4, G4-Cl (Ejemplo 4) y G2-Br (Ejemplo 2) presentaron un valor de MIC de menos de 1 pM para todos menos 1 de las 40 cepas de aislados clínicos de M. tuberculosis probadas en este experimento. El desglose es un MIC medido de <0,2 pM para 1 cepa (EJEMPLO 4); un MIC medido de 0,04 pM para 1 cepa (EJEMPLO 2); un MIC medido de 0,08 pM para 40 cepas (EJEMPLO 2 y EJEMPLO 4); un MIC medido de 0,16 pM para 1 cepa (EJEMPLO 2 y EJEMPLO 4); y ningún MIC medido de 0,31 pM para el EJEMPLO 2 o el EJEMPLO 4 para ninguna cepa.

Ejemplo 20

Ensayo general de actividad antimicrobiana

La actividad antimicrobiana de células enteras se determinó mediante microdilución en caldo utilizando el procedimiento recomendado por el Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), documento M7-A7, "Methods for Dilution Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically".

La Tabla 3 proporciona los valores de MIC frente a las cepas bacterianas K12; E. coli K12 tolC/Tn10; A. baumannii ATCC 17978; y P. aeruginosa PA01 para los compuestos desvelados en los Ejemplos. Como puede verse, los compuestos del Ejemplo generalmente no poseen una actividad significativa a través de varias bacterias Gram negativas patógenas, así como una bomba de eflujo deficiente de E. coli. Pero como se muestra en la Tabla 4 siguiente, los compuestos desvelados en los Ejemplos poseen actividad significativa contra M. tuberculosis. Además, como puede verse, los benzoxaboroles tricíclicos de comparación que carecen de un 4-halógeno (por ejemplo, C2-H, C5-H y C12-H) tienen una mayor actividad contra estas cepas bacterianas, mientras que los compuestos de benzoxaborol tricíclico con el tercer anillo siendo un anillo de siete miembros entre las posiciones 1 y 7 del benzoxaborol, además, al tener 4-halo, la sustitución de 3-aminometilo con estereoquímica (S) en la posición 3 (por ejemplo, G2-Br y G4-CI) tienen muy poca actividad contra estas bacterias. Esto contrasta marcadamente con sus respectivas actividades contra M. tuberculosis, donde los compuestos de 4-halo generalmente muestran muy buena actividad pero los benzoxaboroles tricíclicos sin un 4-halógeno son más pobres (compárese con los valores de MIC de M. tuberculosis para el mismo conjunto de compuestos en las Tablas 4A y 4B).

La Tabla 3 proporciona valores de MIC frente a cepas no micobacterianas para compuestos de fórmula II o fórmula IIa

(continuación)

Nota: Los compuestos C1-H a C19-Br deben considerarse como ejemplos comparativos.

Ejemplo 21

Expresión y purificación de LeuRS

Para los análisis bioquímicos, se sobreexpresó un LeuRS N-terminal marcado con seis histidinas en Escherichia coli que eran E. coli con codones optimizados (GenScript, Piscataway NJ, EE.UU.), de mitocondrias y citoplasma humanos, y M. tuberculosis. Se sobreexpresaron seis proteínas LeuRS marcadas con histidina N-terminal y se purificaron de acuerdo con Novagen (Madison, WI, EE. UU.) utilizando una cepa de sobreexpresión de ARN polimerasa de E. coli BL21(DE3)T7.

Ejemplo 22

Ensayo de aminoacilación

Los experimentos se realizaron en placas de microtitulación de 96 pocillos, utilizando 80 pl de mezclas de reacción que contienen HEPES-KOH 50 mM (pH 8,0), MgCh 30 mM, KCl 30 mM, L-[¹⁴C]leucina 13 pM (306 mCi/mmol, Perkin-Elmer), ARNt de E. coli total 15 uM (Roche, Suiza), BSA al 0,02 % (p/v), DTT 1 mM, LeuRS 0,2 pM y ATP 4 mM a 30 °C. Las reacciones se iniciaron mediante la adición de ATP 4 mM. Después de 7 minutos, las reacciones se inactivaron y el ARNt se precipitó mediante la adición de 50 pl de TCA al 10 % (p/v) y se transfirió a placas de filtro de membrana de nitrocelulosa de 96 pocillos (Millipore Multiscreen HTS, MSHAN4B50). A continuación, cada pocillo se lavó tres veces con 100 pl de TCA al 5 %. Luego se secaron las placas de filtro bajo una lámpara de calor y el L-[¹⁴C]leucina ARNtLeu se cuantificó mediante recuento de centelleo líquido utilizando un contador de centelleo líquido Wallac MicroBeta Trilux modelo 1450 (PerkinElmer, Waltham, MA, Ee .UU.). La única diferencia fue con el LeuRS citoplasmático humano cuando los presentes inventores usaron ARNt aislado de levadura de cerveza (Roche Diagnostics GmbH).

Ejemplo 23

Determinación de la CI^sn

Para determinar la concentración de inhibidor, que reduce la actividad enzimática en un 50 % (CI⁵⁰), las concentraciones crecientes del compuesto (Anacor Pharmaceuticals Inc., Palo Alto, CA, EE.UU.) se incubaron con la enzima LeuRS, ARNt y L-leucina 20 minutos. Las reacciones se iniciaron mediante la adición de ATP 4 mM. Las reacciones se detuvieron después de 7 minutos, luego se precipitaron y contaron para cuantificar la radiactividad. Los valores de CI50 se determinaron usando el paquete informático Graphpad Prism (Graphpad Software Inc. (La Jolla, CA, EE.UU.).

Ejemplo 24

Ensayo de citotoxicidad HepG2

Las células HepG2 (HB-8065) se alimentaron con medio fresco (medio mínimo esencial de Eagle, EMEM, suplementado con suero bovino fetal al 5 % y L-glutamina 2 mM) el día antes de subcultivar las placas. El día de la siembra en placa, se preparó una suspensión celular de 100.000 células/ml en medio de cultivo. Se añadió suspensión celular (100 ul) en cada pocillo de una microplaca negra de 96 pocillos con fondo transparente, recubierta de colágeno, (Becton Dickinson) excepto en la columna 11, que se dispensó solo 100ul de medio de cultivo. Las placas se incubaron durante 24 h. Se compuso un rango de 10 dosis de sustancias de prueba preparando diluciones seriadas 1:2 a partir de la solución madre en DMSO al 100 % y se hizo una dilución de 1:200 de cada dosis en medio, para lograr una concentración final de 0,5 % de DMSO. Después de 24 h, se retiró el medio de cultivo de la placa y se añadieron 150 ul de diluciones del compuesto de ensayo en dos réplicas y 150 ul de DMSO al 0,5 % en medio de cultivo a las columnas 11 y 12 (control en blanco). Las placas se incubaron durante 48 y a 37 °C, CO2 al 5 %, 95 % de humedad relativa. A continuación, se retiró el medio y se añadieron 200 ul de medio de cultivo fresco y 50 ul de solución de resazurina a cada pocillo y se incubó durante 1 hora y media. Las placas se retiraron de la incubadora para permitir que la fluorescencia se estabilizara a temperatura ambiente protegidas de la luz durante 15 min. Para la lectura de la viabilidad de las células los presentes inventores usaron resazurina (BDH). La resazurina se utiliza como indicador de oxidación-reducción que produce un cambio colorimétrico y una señal fluorescente en respuesta a la actividad metabólica. A medida que la célula crece, la actividad metabólica da como resultado una reducción química de la resazurina indicada por un cambio de azul no fluorescente a la forma rosa fluorescente reducida. Por lo tanto, el grado de fluorescencia de la resazurina es, un indicador del número de células viables en el sistema de cultivo. La fluorescencia se midió a una longitud de onda de excitación de 515 nm y una longitud de onda de emisión de 590 nm en un contador Microplate reader1420 Multilabel HTS, Victor 2, (Wallac).

El valor de fluorescencia de cada pocillo se corrige restando el valor de fondo (promedio de la columna 11) del valor absoluto. Los porcentajes de inhibición se calculan con respecto a los pocillos de control de DMSO (promedio de la columna 12). Para cada compuesto, se calcula el valor medio de las muestras duplicadas y la curva se ajusta al ajuste de la curva de regresión no lineal (GraphPad) de dosis-respuesta sigmoidal (pendiente variable) para calcular la CI50 (Tox50).

Ejemplo 25

El efecto de los compuestos descritos en el presente documento contra Mycobacterium tuberculosis

Se ensayó la actividad antibacteriana de los compuestos de la presente invención contra una especie de Mycobacterium tuberculosis y también se probó la toxicidad de las células hepáticas humanas usando células HepG2. Los compuestos ilustrativos de la invención se compararon con los compuestos de comparación C1-H a C19-Br, tal como se muestra en las Tablas 4A y 4B.

La Tabla 4A proporciona valores de CI50 de inhibición de LeuRS, valores de MIC frente a la cepa estándar de M. tuberculosis Mtb H37Rv, valores de toxicidad contra células HepG2 humanas y valores de selectividad para ciertos com uestos de benzoxaborol tricíclico de com aración

(continuación)

(continuación)

(continuación)

La Tabla 4B proporciona valores de CI50 de inhibición de LeuRS, valores de MIC frente a la cepa estándar de M. tuberculosis Mtb H37Rv, valores de toxicidad frente a células HepG2 humanas y valores de selectividad para com uestos de fórmula II o fórmula IIa

continuación

Tal como se puede observar en la Tabla 4B, para los Ejemplos 2, 4, 10 y 12 (G2-Br, G4-CI, G10-Br y G12-CI) parece haber una mayor selectividad para inhibir el crecimiento de M. tuberculosis frente a la toxicidad para las células HepG2 humanas de un compuesto de benzoxaborol tricíclico en el que el tercer anillo es un anillo de siete miembros entre las posiciones 1 y 7 del benzoxaborol, además de tener 4-halo, la sustitución de 3-aminometilo con estereoquímica (S) en la posición 3.

Las tablas 4A y 4B muestran una comparación de ciertos compuestos de benzoxaborol tricíclico con y sin sustitución de halógeno, ciertos compuestos tricíclicos de benzoxaborol con y sin sustitución de halógeno en la posición 4 de la estructura del anillo de benzoxaborol, y ciertos compuestos bicíclicos. De los valores de MIC de H37Rv (B), y los valores T0X⁵⁰de la célula HepG2 a 48 h (A), es posible determinar la selectividad para la inhibición de M. tuberculosis frente a la inhibición (toxicidad) de células humanas para estos compuestos (véase la columna de la derecha de las Tablas 4A y 4B).

Se descubrió que los compuestos Ejemplo 2 G2-Br y Ejemplo 4 G4-Cl tienen índices de selectividad contra M. tuberculosis de 4177 y >12.500, respectivamente (véase la Tabla 4B). Además, tal como se ve en la Tabla 4B, se descubrió que los valores de CI⁵⁰de estos compuestos contra M. tuberculosis eran submicromolares, en 0,13 y 0,1, respectivamente. Como puede verse, el índice de selectividad (SI) de Ejemplo 2 G2-Br y Ejemplo 4 G4-Cl contra M. tuberculosis se mejora inesperadamente con respecto a otros compuestos de benzoxaborol. El Ejemplo 2 G2-Br y el Ejemplo 4 G4-CI, que son compuestos tricíclicos de benzoxaborol que tienen un sustituyente halógeno en la posición C-4 del anillo de benzoxaborol y un sustituyente aminometilo en la posición C3 del anillo de benzoxaborol que tienen estereoquímica relativa "(S)" en ese estereocentro, son sorprendentemente más selectivos para la actividad contra M. tuberculosis que otros compuestos de benzoxaborol que carecen de algunas de estas características frente a la inhibición (toxicidad) de las células humanas para estos compuestos. Además, los valores MIC contra M. tuberculosis cepa H37Rv para el Ejemplo. 2 G2-Br y el Ejemplo 4 G4-Cl son ambos <0,1 pM en contraste con otros compuestos de benzoxaborol en este estudio.

Por lo tanto, como se ve en la Tabla 4B, se descubrió que los compuestos Ejemplo 2 G2-Br y Ejemplo 4 Se G4-Cl tenían un SI contra M. tuberculosis de 4177 (Ejemplo 2 G2-Br) y >12.500 (Ejemplo 4 G4-CI), respectivamente. Estos valores SI son sorprendentemente mejores que cualquiera de los compuestos de comparación probados hasta la fecha.

La adición de un sustituyente cloro o bromo en C4 del anillo de benzoxaborol confiere un aumento inesperado en el índice de selectividad. C2-H (racémico; sin sustituyente halógeno en C4 del anillo de benzoxaborol) tiene un índice de selectividad de >26 mientras que el Ejemplo 1 G1-Br (racémico; sustituyente de bromo en C-4 del anillo de benzoxaborol) tiene un SI de >277. De manera análoga, el Ejemplo 3 G3-Cl (racémico; sustituyente cloro en C-4 del anillo de benzoxaborol) tiene un SI de >106 en comparación con C2-H con un SI de >26.

La formación de un tercer anillo que involucra las posiciones 1 y 7 del anillo de benzoxaborol confiere un aumento inesperado en el índice de selectividad. C4-Br, el enantiómero (S) de un compuesto de comparación de benzoxaborol no tricíclico con un Br en la posición C4 del anillo de benzoxaborol, tiene un SI de 320, mientras que el Ejemplo 2 G2-Br, el enantiómero (S) de un benzoxaborol tricíclico con un Br en la posición C-4, tiene un SI de 4177. De manera análoga, C6 -CI, el enantiómero (S) de un compuesto de comparación de benzoxaborol no tricíclico con un Cl en la posición C4 del anillo de benzoxaborol, tiene un SI de 363, mientras que el Ejemplo 4 G4-CI, el enantiómero (S) de un benzoxaborol tricíclico con un Cl en la posición C-4, tiene un SI de >12.500.

Si se compara el SI del Ejemplo 2 G2-Br y el Ejemplo 4 G4-Cl con el SI de C5-H, el enantiómero (S) de un compuesto de comparación de benzoxaborol no tricíclico con un H en la posición C4 del anillo de benzoxaborol, uno puede ver que el SI de tal compuesto sin un sustituyente halógeno en C4 es solo 3, lo que indica que dicho compuesto tiene muy poca selectividad para inhibir M. tuberculosis en comparación con destruir células humanas.

Ciertas sustituciones del anillo tricíclico de 7 miembros confieren un aumento inesperado en el índice de selectividad. La tabla 4B muestra el Ejemplo 9 G9-Br y el Ejemplo 11 G11-Cl con índices SI de >167 y >185, respectivamente, mientras que los compuestos de comparación C9-Cl (un benzoxaborol tricíclico con un sustituyente cloro en C4 y sustitución de -CH³en R3 y R4 del anillo de 7 miembros) y C10-H (un benzoxaborol tricíclico con un hidrógeno en c 4 y sustitución de -CH³en R3 y R4 del anillo de 7 miembros) tienen índices SI de 10. Podría decirse que esto indica que la sustitución en las posiciones R3 y R4 no está favorecida por la selectividad para M. tuberculosis frente a la inhibición (toxicidad) de células humanas para estos compuestos. También sugiere que la presencia de un halógeno en la posición C4 del anillo de benzoxaborol (ver C9-Cl) no es suficiente para superar el efecto negativo de la sustitución de metilo en ambos R3 y R4 del anillo tricíclico de 7 miembros en la posición R3/R4.

En otros aspectos el Ejemplo 2 G2-Br y el Ejemplo 4 G4-Cl también tiene valores de SI inesperadamente más altos que los benzoxaboroles de anillo abierto relacionados (benzoxaboroles sustituidos) que carecen de un sustituyente halógeno en la posición C4 del anillo de benzoxaborol. Compare el SI para C5-H (5) con los SI para Ejemplo 2 G2-Br y Ejemplo 4 G4-CI. Los benzoxaboroles que no son benzoxaboroles tricíclicos pero que tienen un halógeno en la posición C4 del anillo de benzoxaborol muestran SI mejorados en relación con la ausencia de halógeno, pero aún presentan valores de SI significativamente más bajos que los SI para Ejemplo 2 G2-Br y Ejemplo 4 G4-Cl (compare C5-H con C3-Br y C6 -Cl; pero luego compare los tres C5-H, C3-Br y C6 -Cl con los valores SI del Ejemplo 2 G2-Br y el Ejemplo 4 G4-CI).

Por lo tanto, los benzoxaboroles tricíclicos de la invención, particularmente el Ejemplo 2 G2-Br y el Ejemplo 4 G4-CI, muestran SI sorprendentemente más altos en relación con los SI de benzoxaboroles relacionados para M. tuberculosis frente a células humanas.

Debe entenderse que la invención cubre todas las combinaciones de aspectos con todos los demás aspectos adecuados y/o realizaciones ilustrativas descritas en el presente documento. Debe entenderse que la invención también cubre todas las combinaciones de realizaciones ilustrativas con todos los demás aspectos adecuados y/o realizaciones ilustrativas descritas en el presente documento.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto que tiene una estructura como se muestra en la Fórmula II:

en donde X se selecciona entre cloro o bromo y R1 y R2 cada uno de se selecciona independientemente entre H y -CH3; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene una estructura como se muestra en la Fórmula IIa:

en donde X es cloro o bromo y R¹y R²cada uno de se selecciona independientemente entre H y -CH3 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, el cual es (S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9aborabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina que tiene la fórmula:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4. Una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, la cual es (S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-il)metanamina, que tiene la fórmula:

5. Un compuesto de acuerdo con cualquier reivindicación precedente en donde la sal farmacéuticamente aceptable es una sal dihidrogenosulfato.

6. Un compuesto de acuerdo con cualquier reivindicación precedente en donde la sal farmacéuticamente aceptable es sal clorhidrato.

7. Una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, la cual es dihidrogenosulfato de ((S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-¡l)metanam¡na^H2O.

8. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, junto con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

9. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el compuesto es dihidrogenosulfato de ((S)-(3-cloro-7,8-dihidro-2H-1,6,9-trioxa-9a-borabenzo[cd]azulen-2-¡l)metanam¡na^H2O.

10. Una formulación farmacéutica que comprende un primer agente terapéutico, siendo dicho primer agente terapéutico una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula II o Fórmula Ila, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, y un excipiente, adyuvante o diluyente farmacéuticamente aceptable.

11. La formulación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 10, que comprende además un segundo agente terapéutico y opcionalmente un tercer, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico, en donde el tercer, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico opcional no es un compuesto según las reivindicaciones 1 a 6.

12. La formulación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 11, en donde el segundo y opcionalmente tercer, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico se selecciona de un agente terapéutico aprobado o recomendado para el tratamiento de la tuberculosis.

13. La formulación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 11, en donde el segundo agente terapéutico y opcionalmente el tercer, cuarto, quinto y sexto agente terapéutico se seleccionan de isoniazida, rifampina, pirazinamida, etambutol, moxifloxacino, rifapentina, clofazimina, bedaquilina (TMC207), nitroimidazo-oxazina PA-824, delamanida (OPC-67683), una oxazolidinona, análogo de EMB SQ109, una benzotiazinona, una dinitrobenzamida y un agente antivírico que incluye un agente antirretrovírico.

14. La formulación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 13, en donde la oxazolidinona es linezolid, tedizolid, radezolid, sutezolid (PNU-100480), o posizolid (AZD-5847).

15. La formulación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 13, en donde el agente antirretrovírico es zidovudina, didanosina, lamivudina, zalcitabina, abacavir, estavudina, adefovir, adefovir dipivoxilo, fozivudina, todoxilo, emtricitabina, alovudina, amdoxovir, elvucitabina, nevirapina, delavirdina, efavirenz, lovirida, immunocal, oltipraz, capravirina, lersivirina, GSK2248761, TMC-278, TMC-125, etravirina, saquinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brecanavir, darunavir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinavir, enfuvirtida, T-20, T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, BMS-663068 y BMS-626529, 5-Helix, raltegravir, elvitegravir, GSK1349572, GSK1265744, vicriviroc (Sch-C), Sch-D, TAK779, maraviroc, TAK449, didanosina, tenofovir, lopinavir o darunavir.

16. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para su uso en terapia.

17. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para su uso en el tratamiento de una infección por micobacterias, en donde la infección por micobacterias es una infección de una micobacteria seleccionada de Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium avium.

18. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para su uso en el tratamiento de la tuberculosis.