ES2786757T3 - Producto detergente o de limpieza líquido que contiene proteasa y celulasa, estable durante el almacenamiento - Google Patents

Abstract

Producto detergente o de limpieza líquido que comprende (a) una proteasa que se selecciona del grupo que consiste en a. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos según SEQ ID NO. 3; b. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos modificada en al menos una posición en comparación con SEQ ID NO. 3, en donde el cambio en la numeración según SEQ ID NO. 1 se selecciona del grupo que consiste en: i. Treonina en la posición 3 (3T), ii. Isoleucina en la posición 4 (4I), iii. Alanina, treonina o arginina en la posición 61 (61A, 61T o 61R), iv. Ácido aspártico o ácido glutámico en la posición 154 (154D o 154E), v. Prolina en la posición 188 (188P), vi. Metionina en la posición 193 (193M), vii. Isoleucina en la posición 199 (199I), viii. Ácido aspártico, ácido glutámico o glicina en la posición 211 (211D, 211E o 211G), ix. Combinaciones de los aminoácidos (i) a (viii); (b) una celulasa.

Description

DESCRIPCIÓN

Producto detergente o de limpieza líquido que contiene proteasa y celulasa, estable durante el almacenamiento

La invención pertenece al campo de los productos líquidos para lavado y limpieza. La invención se refiere principalmente a productos líquidos para lavado y limpieza que contienen enzimas, que comprenden proteasas definidas en combinación con una celulasa, y también propone procedimientos en los que se usan dichos productos. La invención se refiere además a usos de proteasas definidas en productos líquidos para lavado o limpieza que contienen una celulasa.

En los productos para lavado y limpieza se usan preferiblemente las proteasas del tipo subtilisina. Las proteasas utilizadas en los productos para lavado o limpieza conocidos en el estado de la técnica provienen originalmente de microorganismos, por ejemplo, de los géneros Bacillus, Streptomyces, Humicola o Pseudomonas, y/o se preparan mediante procedimientos biotecnológicos conocidos por medio de microorganismos adecuados, por ejemplo, por medio de anfitriones de expresión transgénicos del género Bacillus o por medio de hongos filamentosos.

Principalmente, los productos para lavado líquidos modernos contienen cada vez más otras enzimas, entre las cuales principalmente están las celulasas (endoglucanasas). Una celulasa es una enzima que cataliza la hidrólisis de enlaces 1,4-p-D-glucosídicos en la celulosa (celobiosa) y/o liquenina y/o p-D-glucanos. A menudo pueden hidrolizar los enlaces 1,4 incluso en p-D-glucanos, que además de los enlaces 1,4 también tienen enlaces 1,3. Dentro de la clasificación EC de enzimas, el sistema de clasificación numérica para enzimas, las celulasas tienen el número EC (en inglés "Enzyme Commission number" ["Número de comisión de enzimas"]) 3.2.1.4 y, por lo tanto, pertenecen a la tercera de las seis clases principales de enzimas, las hidrolasas (E.C.3.-.-.-), entre ellas a las glicosilasas (E.C.3.2.-.-) y nuevamente a las glicosidasas (E.C. 3.2.1.-), es decir enzimas que hidrolizan compuestos de O-y/o S-glicosilo. Las celulasas pueden descomponer la celulosa en ^-glucosa. En consecuencia, las celulasas actúan principalmente contra los residuos en la ropa que contienen celulosa o derivados de celulosa y catalizan su hidrólisis.

En la solicitud internacional de patente WO 95/23221 se divulgan proteasas o variantes de proteasa del tipo de subtilisina de Bacillus lentus DSM 5483 que son adecuadas para su uso en productos para lavado o limpieza. Entre estas proteasas también hay una que puede tener un intercambio de aminoácidos R99E, A, S o G. También se divulga que los productos para lavado pueden contener otras enzimas, entre estas también una celulasa. Los productos para lavado pueden ser sólidos o líquidos. Sin embargo, este documento no muestra de manera directa y clara un producto líquido para lavado que contiene una celulasa en combinación con una proteasa, que en la posición 99 tiene el aminoácido ácido glutámico (E) o ácido aspártico (D) o el aminoácido asparagina (N) o glutamina (Q) o el aminoácido alanina (A) o glicina (G) o serina (S). Lo correspondiente se aplica a la solicitud europea de patente EP 1921147.

El documento US6599730B1 divulga variantes de subtilisina 309.

El documento WO9510615A1 describe variantes de subtilisina de Bacillus amyloliquefaciens.

Una desventaja de los productos para lavado y limpieza líquidos que contienen proteasa y celulasa, que pertenecen al estado de la técnica, es que no son lo suficientemente estables en el almacenamiento y, en consecuencia, pierden una cantidad considerable de actividad celulolítica y/o proteolítica, principalmente celulolítica, después de solo un corto tiempo. A menudo, la presencia de proteasa conduce a la pérdida de actividad celulolítica porque la proteasa desactiva la celulasa. El producto para lavado o limpieza ya no muestra un rendimiento de limpieza óptimo.

El objetivo de la presente invención es superar la desventaja mencionada y proporcionar productos líquidos para lavado o limpieza que contengan proteasa y celulasa que sean suficientemente o mejor estables durante el almacenamiento, principalmente con respecto a su actividad celulolítica.

Por lo tanto, un objeto según la invención es un producto líquido para lavado o limpieza que comprende

(a) una proteasa seleccionada del grupo que consiste en

a. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos según SEQ ID NO. 3;

b. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos cambiada en al menos una posición en comparación con SEC ID No .3, en cuyo caso el cambio en el listado según SEQ ID NO. 1 se selecciona del grupo que consiste en:

i. Treonina en la posición 3 (3T)

ii. Isoleucina en la posición 4 (4I),

iii) Alanina, treonina o arginina en la posición 61 (61A, 61T o 61R),

iv. Ácido aspártico o ácido glutámico en la posición 154 (154D o 154E),

v. Prolina en la posición 188 (188P),

vi. Metionina en la posición 193 (193M),

vii. Isoleucina en la posición 199 (199I),

viii. Ácido aspártico, ácido glutámico o glicina en la posición 211 (211D, 211E o 211G),

ix. Combinaciones de los aminoácidos (i) a (viii);

(b) una celulasa.

Por lo tanto, aquí se divulga un producto líquido para lavado o limpieza que comprende

(a1) una proteasa que contiene una secuencia de aminoácidos que es idéntica en al menos 80% a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 1 y que en la posición 99 en el listado según SEQ ID NO. 1 tiene el aminoácido ácido glutámico (E) o ácido aspártico (D), o

(a2) una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que es idéntica en al menos 80% a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 1 y que en la posición 99 en el listado según SEQ ID NO. 1 tiene el aminoácido asparagina (N) o glutamina (Q), o

(a3) una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que es idéntica en al menos 80% a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 1 y que en la posición 99 en el listado según SEQ ID NO. 1 tiene el aminoácido alanina (A) o glicina (G) o serina (S), y

(b) una celulasa.

Sorprendentemente, se descubrió que un producto líquido para lavado o limpieza que contiene la combinación de dicha proteasa con una celulasa es ventajosamente estable durante el almacenamiento. Principalmente, tiene una mayor actividad celulolítica después del almacenamiento en comparación con un producto para lavado o limpieza que difiere de un producto según la invención solo en la proteasa presente en el producto respectivo, en cuyo caso la proteasa está presente en los productos a comparar al comienzo del almacenamiento en la misma concentración, con respecto a la enzima activa. Por lo tanto, una proteasa proporcionada en el contexto de la presente invención conduce a una desactivación reducida de la celulasa. Sin embargo, la desactivación reducida de la celulasa por la proteasa proporcionada en el contexto de la presente invención no se debe a una actividad proteasa insuficiente.

A este respecto, un producto según la invención tiene preferiblemente un rendimiento de limpieza bueno, principalmente ventajoso, sobre la suciedad sensible a la proteasa. Tal rendimiento de limpieza con respecto a al menos un ensuciamiento sensible a proteasa también se presenta principalmente a bajas temperaturas, por ejemplo, entre 10°C y 50°C, preferiblemente entre 10°C y 40°C o entre 20°C y 40°C. Tal producto, por lo tanto, permite la eliminación satisfactoria o mejorada de al menos una, preferiblemente varias, suciedades sensibles a la proteasa sobre textiles y/o superficies duras, por ejemplo, vajillas.

Con respecto a la solicitud internacional de patente WO 95/23221 mencionada al principio, la presente invención se refiere, por lo tanto, a una selección principalmente ventajosa que conduce a la obtención de un producto líquido para lavado que es eficiente y estable durante el almacenamiento, principalmente con respecto a la actividad proteolítica y/o celulolítica del producto para lavado y la actividad residual del producto después del almacenamiento.

En el contexto según la invención, por rendimiento de limpieza se entiende el rendimiento de aclaramiento de una o más manchas, principalmente las manchas de ropa. Ejemplos de tales manchas son sangre-leche/ tinta china sobre algodón, huevo entero/pigmento sobre algodón, chocolate-leche/tinta china sobre algodón, aceite de cacahuetepigmento/tinta china sobre poliéster/algodón, hierba sobre algodón o cacao sobre algodón, principalmente tales como se indica más adelante. En el contexto de la invención, tanto el producto para lavado o limpieza, que comprende la proteasa y la celulasa y la solución de lavado o de limpieza formada por este producto, como también la proteasa o la celulasa mismas, tienen un rendimiento de limpieza respectivo. El rendimiento de limpieza de las enzimas contribuye de esta manera al rendimiento de limpieza del producto o de la solución de lavado o de limpieza formada por el producto. El rendimiento de limpieza se determina preferiblemente como se indica más adelante.

Por solución de lavado o de limpieza se entiende aquella solución de trabajo que contiene el producto para lavado o limpieza que actúa sobre textiles o telas (solución de lavado) o superficies duras (solución de limpieza) y por lo tanto entra en contacto con las manchas presentes en textiles o telas o superficies duras. La solución de lavado o limpieza generalmente se forma cuando comienza la operación de lavado o limpieza y el producto para lavado o limpieza se diluye con agua, por ejemplo, en una lavadora u otro recipiente adecuado.

Estabilidad durante el almacenamiento en el sentido de la invención está presente si un producto para lavado o limpieza según la invención tiene una mayor actividad de celulasa después de un almacenamiento en comparación con una composición de control que difiere del producto para lavado o limpieza según la invención solo en la proteasa contenida en la composición de control. Después del almacenamiento, un producto para lavado o limpieza según la invención tiene, por lo tanto, una mayor actividad residual de la celulasa en comparación con el control. Por lo tanto, ambos productos por comparar tienen la misma cantidad o concentración de celulasa y/o actividad celulolítica inicial al comienzo del almacenamiento. Además, en ambos productos la proteasa está presente en la misma concentración al comienzo del almacenamiento, con respecto a la enzima activa, y ambos productos se tratan de la misma manera, principalmente en lo concerniente a las condiciones de almacenamiento y la determinación de la actividad enzimática. El almacenamiento se efectúa de modo cada vez más preferido durante al menos 24 horas, 48 horas, 72 horas, 5 días, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas u 8 semanas. El almacenamiento se efectúa más preferiblemente a una temperatura de 20°C, 25°C o 30°C, de modo particularmente preferible a 30°C.

A este respecto, la actividad enzimática se puede llevar a cabo de manera habitual, dependiendo del tipo de enzima particular. Los procedimientos para determinar la actividad son corrientes para la persona experta en el campo de la tecnología enzimática y son aplicados por ella de manera rutinaria. Los procedimientos para determinar la actividad de la proteasa se divulgan, por ejemplo, en Tenside, Volumen 7 (1970), pp. 125-132. La actividad proteolítica también se puede determinar mediante la liberación del cromóforo para-nitroanilina (pNA) del sustrato suc-L-Ala-L-Ala-L-Pro-L-Phe-p-nitroanilida (suc-AAPF-pNA). La proteasa escinde el sustrato y libera pNA. La liberación del pNA provoca un aumento de la absorbancia a 410 nm, cuyo curso temporal es una medida de la actividad enzimática (cf. Del Mar et al., 1979). La medición se lleva a cabo a una temperatura de 25°C, a un pH de 8,6 y una longitud de onda de 410 nm. El tiempo de medición es de 5 min. con un intervalo de medición de 20 s a 60 s. La actividad de proteasa se indica preferiblemente en PE (unidades de proteasa).

La actividad de celulasa se determina de manera habitual. La actividad de celulasa se determina preferiblemente como se indica a continuación. Las celulasas liberan glucosa de CMC (carboximetilcelulosa). En condiciones de reacción definidas (regulador de pH de fosfato de sodio de 100 mM, pH 7,5, 40°C, 15 min), las muestras por examinar se incuban con un sustrato (1,25% CMC). Estas reaccionan con la hidrazida del ácido p-hidroxibenzoico (PAHBAH) en presencia de bismuto para formar un colorante amarillo que puede determinarse fotométricamente a 410 nm. La condición es un pH alcalino durante la reacción de color. La cantidad correspondiente al color del azúcar liberado es una medida de la actividad enzimática (cf. Lever, Anal. Biochem., 1972, 47 y 1977, 81).

La presencia de estabilización de enzima en el sentido de la presente invención se determina de modo particularmente preferible, como se indicó anteriormente, usando un producto líquido para lavado o limpieza que contiene proteasa y celulasa que se almacena durante al menos cuatro y como máximo 8 semanas a una temperatura de 30°C, en cuyo caso la actividad proteolítica se determina mediante la liberación del cromóforo para-nitroanilina (pNA) del sustrato suc-AAPFpNA, y la actividad celulolítica se determina como se indicó anteriormente.

También se divulga aquí un producto para lavado o limpieza que contiene proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que es idéntica en al menos 80% a la secuencia de aminoácidos dada en SEQ ID NO. 1 y que en la posición 99 en el listado según SEQ ID NO. 1 presenta el ácido glutámico del aminoácido (E) o ácido aspártico (D) o el aminoácido asparagina (N) o glutamina (Q) o el aminoácido alanina (A) o glicina (G) o serina (S). De modo cada vez más preferido, la secuencia de aminoácidos es idéntica en al menos 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95 %, 96%, 97%, 98% y de modo muy particularmente preferible en 99% a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 1. SEQ ID NO. 1 es la secuencia de la proteasa alcalina madura de Bacillus lentus DSM 5483, que se divulga en la solicitud internacional de patente WO 92/21760 y a cuya descripción se hace referencia aquí expresamente.

Según la invención, se ha demostrado que adicionando tal proteasa a un producto líquido para lavado o limpieza que contiene una celulasa se obtiene un producto líquido para lavado particularmente estable durante el almacenamiento, principalmente con respecto a su actividad celulolítica restante después del almacenamiento, principalmente después de un período de almacenamiento cada vez más preferible de 24 horas, 48 Horas, 72 horas, 5 días, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas u 8 semanas.

Una proteasa contenida en un producto para lavado o limpieza según la invención tiene una actividad proteolítica; es decir que es capaz de hidrolizar enlaces peptídicos de un polipéptido o proteína. Por lo tanto, es una enzima que cataliza la hidrólisis de los enlaces peptídicos y, por lo tanto, es capaz de disociar péptidos o proteínas. Es principalmente una subtilasa y de modo particularmente preferible una subtilisina.

Una celulasa es una enzima como se describe al principio. Se pueden usar términos sinónimos para celulasas, principalmente endoglucanasa, endo-1,4-beta-glucanasa, carboximetilcelulasa, endo-1,4-beta-D-glucanasa, beta-1,4-glucanasa, beta-1,4-endoglucanohidrolasa, celuldextrinasa o avicelasa. El factor decisivo para determinar si una enzima es una celulasa en el sentido de la invención es su capacidad para hidrolizar enlaces 1,4-p-D-glucosídicos en celulosa.

Las celulasas (endoglucanasas, EG) que se pueden preparar según la invención incluyen, por ejemplo, la preparación de celulasa fúngica rica en endoglucanasas (EG) o sus desarrollos adicionales, que ofrece Novozymes con el nombre comercial Celluzyme®. Los productos Endolase® y Carezyme®, que también están disponibles en Novozymes, se basan en 50 kD-EG y 43 kDEG de Humicola insolens DSM 1800. Otros productos comerciales utilizables de esta compañía son Cellusoft®, Renozyme® y Celluclean®. También se pueden usar, por ejemplo, celulasas que están disponibles en AB Enzymes, Finlandia, bajo los nombres comerciales Ecostone® y Biotouch®, y que se basan al menos en parte en EG de 20 kD de Melanocarpus. Otras celulasas de AB Enzymes son Econase® y Ecopulp®. Otras celulasas adecuadas son CBS 670.93 y CBS 669.93 de Bacillus sp., donde CBS 670.93 de Bacillus sp. está disponible en Danisco/Genencor con el nombre comercial Puradax®. Otros productos comerciales utilizables de Danisco/Genencor son "Genencor detergent cellulase L" e Indi-Age®Neutra.

Según la invención también se pueden usar las variantes de estas enzimas obtenibles por mutaciones puntuales. Las celulasas principalmente preferidas son variantes de celulasa de Thielavia terrestris que se divulgan en la publicación internacional WO 98/12307, celulasas de Melanocarpus, principalmente Melanocarpus albomyces, que se divulgan en publicación internacional WO 97/14804, celulasas del tipo EGIII de Trichoderma reesei que se divulgan en la solicitud europea de patente EP 1305432 o variantes obtenibles a partir de la misma, principalmente las que se divulgan en las solicitudes europeas de patente EP 1240525 y EP 1305432, y las celulasas que se divulgan en las publicaciones de solicitudes internacionales de patente WO 1992006165, WO 96/29397 y w O 02/099091. Por lo tanto, se hace referencia expresa a sus respectivas divulgaciones, y su contenido de divulgación a este respecto se incluye expresamente en la presente solicitud de patente.

En otra realización de la invención, el producto para lavado o limpieza se caracteriza porque la proteasa también tiene al menos uno de los siguientes aminoácidos en el listado según SEQ ID NO. 1:

(a) treonina en la posición 3 (3T),

(b) isoleucina en la posición 4 (4I),

(c) alanina, treonina o arginina en la posición 61 (61A, 61T o 61R),

(d) ácido aspártico o ácido glutámico en la posición 154 (154D o 154E),

(e) prolina en la posición 188 (188P),

(f) metionina en la posición 193 (193M),

(g) isoleucina en la posición 199 (199I),

(h) ácido aspártico, ácido glutámico o glicina en la posición 211 (211 D, 211 E o 211 G),

(i) combinaciones de aminoácidos (a) a (h).

Además de uno de los aminoácidos mencionados en la posición 99, la proteasa tiene uno o más de los aminoácidos mencionados antes en las posiciones respectivas. Estos aminoácidos pueden causar otras propiedades ventajosas y/o reforzar las propiedades ya existentes. Principalmente, los aminoácidos mencionados anteriormente provocan un aumento en la actividad proteolítica y/o la estabilidad de la proteasa en un producto líquido para lavado o limpieza o en la solución de lavado formado por este producto para lavado o limpieza. Al agregar dicha proteasa a un producto líquido para lavado o limpieza que contiene una celulasa, igualmente se obtiene de este modo un producto líquido para lavado particularmente estable durante el almacenamiento, principalmente con respecto a su actividad celulolítica restante después del almacenamiento, pero preferiblemente también con respecto a su actividad proteolítica restante después del almacenamiento, principalmente después de un período de almacenamiento cada vez más preferido de 24 horas, 48 horas, 72 horas, 5 días, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas u 8 semanas. Tal producto también muestra un rendimiento de limpieza mejorado en manchas sensibles a proteasa y/o celulasa.

Las posiciones de aminoácidos se definen aquí mediante un alineamiento de la secuencia de aminoácidos de la proteasa por utilizar con la secuencia de aminoácidos de la proteasa de Bacillus lentus, como se indica en SEQ ID NO. 1. Dado que la proteasa de Bacillus lentus en el estado de la técnica representa una molécula de referencia importante para la descripción de las proteasas y los cambios de aminoácidos, es ventajoso hacer referencia al listado de la proteasa de Bacillus lentus (SEQ ID NO. 1) al asignar las posiciones de aminoácidos. Además, el listado depende de la proteína madura. Esta asignación también se debe aplicar principalmente si la secuencia de aminoácidos de la proteasa por emplear comprende un número mayor de residuos de aminoácidos que la proteasa de Bacillus lentus según SEQ ID NO. 1. Partiendo de las posiciones mencionadas en la secuencia de aminoácidos de la proteasa de Bacillus lentus, las posiciones de aminoácidos en una proteasa por emplearse según la invención son aquellas que se asignan precisamente a estas posiciones en una alineación.

Además de la posición 99, posiciones particularmente ventajosas que pueden asignarse son, por lo tanto, las posiciones 3, 4, 61, 154, 188, 193, 199 y 211 en una alineación con SEQ iD NO. 1 y, por lo tanto, en el listado según SEQ ID NO. 1. En las posiciones mencionadas, en la molécula de tipo silvestre de la proteasa de Bacillus lentus se encuentran los siguientes residuos de aminoácidos: S3, V4, G61, S154, A188, V193, V199 y L211. Los aminoácidos 3T, 4I, 61A, 154D, 154E, 211D, 211G y 211E son particularmente preferidos si las posiciones correspondientes en una proteasa por emplearse según la invención no están ocupadas por uno de estos aminoácidos preferidos. Los intercambios 3T y 4I conducen, por ejemplo, a una mejora en la estabilidad de almacenamiento y del rendimiento de limpieza de la proteasa a través de un efecto estabilizador en la molécula y, por lo tanto, a un rendimiento de limpieza mejorado de un producto líquido para lavado o limpieza que contiene la proteasa, según la invención.

Si se hacen realidad uno o más de los aminoácidos mencionados anteriormente en la posición respectiva, además de la posición 99 resultan más desviaciones de secuencia de SEQ ID NO. 1, ya que SEQ ID NO. 1 tiene un aminoácido diferente en la posición respectiva Dependiendo del número de desviaciones de secuencia de SEQ ID NO. 1 presentes, resultan, por lo tanto, diferentes valores de identidad máxima que una proteasa por ser utilizada según la invención puede tener para SEQ ID NO. 1, incluso si debe coincidir con SEQ ID NO. 1 en todos los demás aminoácidos. Este hecho debe tenerse en cuenta para cada combinación posible de los aminoácidos propuestos en el caso individual y también depende de la longitud de la secuencia de aminoácidos de la proteasa. Por ejemplo, la identidad máxima para uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho o nueve cambios de secuencia es de 99,63%, 99,26%, 98,88%, 98,51%, 98,14%, 97,77%, 97,40%, 97,03% o 96,65% para una secuencia de aminoácidos con una longitud de 269 aminoácidos, o bien de 99,64%, 99,27%, 98,91%, 98,55%, 98,18%, 97,82%, 97,45%, 97,09% o 96,73% para una secuencia de aminoácidos con una longitud de 275 aminoácidos.

La identidad de las secuencias de ácidos nucleicos o aminoácidos se determina mediante una comparación de secuencias. Dicha comparación se realiza asignando entre sí secuencias similares en las secuencias de nucleótidos o secuencias de aminoácidos. Esta comparación de secuencias se lleva a cabo preferiblemente sobre la base del algoritmo BLAST establecido y comúnmente utilizado en el estado de la técnica (véase, por ejemplo, Altschul, SF, Gish, W., Miller, W., Myers, eW & Lipman, DJ. (1990) "Basic local alignment search tool." ["Herramienta de búsqueda de alineación local básica."] J. Mol. Biol. 215: 403-410, y Altschul, Stephan F. Thomas L. Madden, Alejandro A. Schaffer, Jinghui Zhang, Hheng Zhang, Webb Miller y David J. Lipman (1997): "Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new generation of protein database search programs" ["Gapped BLAST y PSI-BLAST: una nueva generación de programas de búsqueda de bases de datos de proteínas"]; Nucleic Acids Res., 25, pp. 3389-3402) y, en principio, consiste en que secuencias similares de nucleótidos o aminoácidos se asignan entre sí en las secuencias de ácido nucleico o de aminoácidos. Una asignación tabular de las posiciones relevantes se llama alineación. Otro algoritmo disponible en el estado de la técnica es el algoritmo FASTA. Las comparaciones de secuencias (alineaciones), principalmente las comparaciones de secuencias múltiples, generalmente se crean utilizando programas informáticos. Por ejemplo, con frecuencia se usa la serie Clustal (véase, por ejemplo, Chenna et al. (2003): Multiple sequence alignment with the Clustal series of programs [Alineación de secuencia múltiple con la serie de programas Clustal]. Nucleic Acid Research 31, 3497-3500), T-Coffee (véase, por ejemplo, Notredame et al. (2000): T-Coffee: A novel method for multiple sequence alignments [Un procedimiento nuevo para alineaciones de secuencias múltiples.] J. Mol. Biol. 302, 205-217) o programas basados en estos programas o algoritmos. En el contexto de la presente invención las comparaciones de secuencias y alineaciones se realizan preferiblemente con el programa informático Vector NTI® Suite 10.3 (Invitrogen Corporation, 1600 Faraday Avenue, Carlsbad, California, EE. UU.) con los parámetros estándar (por omisión) predeterminados.

Tal comparación permite hacer una declaración sobre la similitud de las secuencias comparadas entre sí. Por lo general, se indica en porcentaje de identidad; es decir, en la fracción de nucleótidos o residuos de aminoácidos idénticos en las mismas posiciones o en posiciones correspondientes entre sí en una alineación. El concepto más amplio de homología incluye intercambios de aminoácidos conservados en secuencias de aminoácidos, es decir, aminoácidos con propiedades similares, ya que estos generalmente ejercen actividades o funciones similares dentro de la proteína. Por lo tanto, la similitud de las secuencias comparadas también se puede indicar como porcentaje de homología o porcentaje de similitud. Los datos de identidad y/u homología pueden alcanzarse sobre polipéptidos o genes completos o solo sobre áreas individuales. Por lo tanto, las regiones homólogas o idénticas de diferentes secuencias de ácido nucleico o de aminoácidos se definen mediante coincidencias en las secuencias. A menudo tienen las mismas funciones o funciones similares. Pueden ser pequeños y contener solo unos pocos nucleótidos o aminoácidos. Tales áreas pequeñas a menudo desempeñan funciones esenciales para la actividad total de la proteína. Por lo tanto, puede tener sentido relacionar coincidencias de secuencia solo con áreas individuales, posiblemente pequeñas. A menos que se indique lo contrario, no obstante, en la presente solicitud los datos de identidad u homología se refieren a la longitud total de la secuencia de ácido nucleico o de aminoácidos respectivamente indicada.

En otra forma de realización de este objeto de la invención, el producto para lavado o limpieza se caracteriza porque la proteasa comprende una secuencia de aminoácidos que es idéntica a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 1 como se indicó anteriormente y que se obtiene o se puede obtener a partir de una proteasa según SEQ ID NO. 1 por sustituciones conservadoras sencillas o múltiples de aminoácidos, en cuyo caso la proteasa en la posición 99 todavía tiene uno de los aminoácidos destinados a esta posición, como se describió anteriormente. El término "sustitución conservadora de aminoácidos" significa el intercambio (la sustitución) de un residuo de aminoácido por otro residuo de aminoácido y este intercambio no conduce a un cambio en la polaridad o carga en la posición del aminoácido reemplazado; por ejemplo, el intercambio de un residuo de aminoácido no polar por otro residuo de aminoácido no polar. Las sustituciones conservadoras de aminoácidos en el contexto de la invención comprenden, por ejemplo: G=A=S, I=V=L=M, D=E, N=Q, K=R, Y=F, S=T, G=A=I=V=L=M=Y=F=W=P=S=T.

En otra forma de realización de la invención, un producto para lavado o limpieza según la invención se caracteriza además porque su rendimiento de limpieza corresponde al menos al de un producto para lavado o limpieza que contiene una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que corresponde a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 3. Además, aquí se divulga un producto para lavado o limpieza, caracterizado además porque su rendimiento de limpieza corresponde al menos al de un producto para lavado o limpieza que contiene una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que corresponde a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 2 o SEQ ID NO. 4 o SEQ ID NO. 5 o SEQ ID NO. 6 o SEQ ID NO. 7 o SEQ ID NO. 8. El rendimiento de limpieza se determina en un sistema de lavado que contiene un producto para lavado que contiene celulasa en una dosis entre 2,0 y 9,0 gramos por litro de líquido de lavado y la proteasa, en cuyo caso las proteasas por comparar se usan con la misma concentración (con respecto a proteína activa) y el rendimiento de limpieza frente a una o más de las manchas de sangre-leche/tinta china sobre algodón, huevo entero/pigmento (huevo entero/hollín) sobre algodón, aceite de maní- pigmento/tinta china sobre poliéster/algodón y hierba sobre algodón, principalmente con respecto a una o más de las manchas

- Sangre-leche/tinta sobre algodón: Producto No. C-05 disponible en CFT (Center For Testmaterials) B.V. Vlaardingen, Países Bajos

- Huevo entero/pigmento (huevo entero/hollín) sobre algodón: Producto No. 10N disponible en la compañía wfk Testgewebe GmbH; Brüggen-Bracht, Alemania, o el producto C-S-37 disponible de CFT (Center For Testmaterials) B.V. Vlaardingen, Países Bajos

- Aceite de maní-pigmento/tinta china sobre poliéster/algodón: número de producto PC-10 disponible en CFT (Center For Testmaterials) B.V. Vlaardingen, Países Bajos

- Hierba sobre algodón: Producto No. 164 disponible en la compañía Eidgenossische Material- und Prüfanstalt (EMPA) Testmaterial AG, San Galo, Suiza,

se determina midiendo el grado de blancura de los textiles lavados; la operación de lavado se efectúa durante al menos 30 minutos, opcionalmente 60 minutos, a una temperatura de 20°C y el agua tiene una dureza del agua entre 15,5 y 16,5 ° (dureza alemana).

El producto para lavado para el sistema de lavado es un producto líquido para lavado que está compuesto tal como sigue(todos los datos en porcentaje en peso): 0,3-0,5% de xantano, 0,2-0,4% de producto antiespumante, 6-7% de glicerina, 0,3-0,5% de etanol, 4-7% de FAEOS (sulfato de éter de alcohol graso), 24-28% de tensioactivos no iónicos, 1% de ácido bórico, 1 -2% de citrato de sodio (dihidrato), 2-4% de sosa, 14-16% de ácidos grasos de coco, 0,5% de HEDP (ácido 1-hidroxietano-(1,1-di-fosfónico)), 0-0,4% de PVP (polivinilpirrolidona), 0-0,05% de abrillantador óptico, 0-0,001% de colorante, 0,0002-0,06% de celulasa (proteína activa), preferiblemente Ecostone N400® (preparación de celulasa de la compañía AB Enzymes), el resto del agua desmineralizada. La proteasa se usa en el producto para lavado en una concentración de 0,001-0,1%, preferiblemente de 0,01 a 0,06%, con respecto a la proteína activa. La dosificación del producto líquido para lavado está entre 2,0 y 9,0, preferiblemente entre 3,0 y 8,2, entre 4,0 y 7,5 y de modo particularmente preferible 4,7 gramos por litro de solución de lavado. El lavado se lleva a cabo en un intervalo de pH entre pH 8 y pH 10,5, preferiblemente entre pH 8 y pH 9. Ni la actividad de la proteasa ni la de la celulasa en la solución de lavado es igual al cero al comienzo del lavado.

El grado de blancura, es decir el aclaramiento de las manchas, como una medida del rendimiento de limpieza, se determina utilizando procedimientos ópticos de medición, preferiblemente fotométricos. Un dispositivo adecuado es, por ejemplo, el espectrómetro Minolta CM508d. Por lo general, los dispositivos utilizados para la medición se calibran de antemano con un estándar blanco, preferiblemente un estándar blanco suministrado.

En otra forma de realización de la invención, un producto para lavado o limpieza según la invención se caracteriza además porque su estabilidad durante almacenamiento corresponde al menos a la de un producto para lavado o limpieza que contiene una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que corresponde a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. Además, aquí se divulga un producto para lavado o limpieza, caracterizado además porque su estabilidad durante el almacenamiento corresponde al menos a la de un producto para lavado o limpieza que contiene una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que corresponde es a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 2 o SEQ ID NO. 4 o SEQ ID NO. 5 o SEQ ID NO. 6 o SEQ ID NO. 7 o SEQ ID NO. 8. Dicha estabilidad durante el almacenamiento se presenta si el producto para lavado o limpieza según la invención tiene la misma o mayor actividad de celulasa después del almacenamiento durante ocho semanas a 30°C que el producto para lavado o limpieza que ha de usarse para la comparación, en cuyo caso el producto según la invención difiere del producto para lavado o limpieza, que ha de usarse como comparación, solo en la proteasa contenida.

El producto por utilizar para la comparación es de modo particularmente preferible un producto líquido para lavado que se compone de la siguiente manera (todos los datos en porcentaje en peso): 0,3-0,5% de goma de xantano, 0,2-0,4% de producto antiespumante , 6-7% de glicerina, 0,3-0,5% de etanol, 4-7% de FAEOS (sulfato éter de alcohol graso), 24-28% de tensioactivos no iónicos, 1% de ácido bórico, 1 -2% de citrato de sodio (Dihidrato), 2-4% de sosa, 14-16% de ácidos grasos de coco, 0,5% de HEDP (ácido 1-hidroxietano-(1,1-difosfónico)), 0-0,4% de PVP (polivinilpirrolidona), 0-0,05% de abrillantador óptico, 0-0,001% de colorante, 0,0002-0,06% de celulasa (proteína activa), preferiblemente Ecostone N400® (preparación de celulasa de la compañía AB Enzymes), el resto de agua desmineralizada. La proteasa se usa en el producto para lavado en una concentración de 0,001-0,1%, preferiblemente de 0,01 a 0,06%, con respecto a la proteína activa.

Al comienzo del almacenamiento, ambos productos por comparar tienen la misma actividad celulolítica inicial, contienen la proteasa en la misma concentración con respecto a la enzima activa, y ambos productos se tratan de la misma manera. La actividad proteolítica en los productos se determina en cada caso mediante la liberación del cromóforo para-nitroanilina (pNA) del sustrato suc-AAPF-pNA, y su actividad celulolítica se determina en cada caso como se indicó anteriormente. Las actividades iniciales para la proteasa y la celulasa en el producto respectivo no son igual a cero.

Mediante el uso de celulasa respectivamente con la misma actividad y el uso de proteasas con la misma concentración, con respecto a la proteína activa, se asegura que incluso en el caso de cualquier discrepancia de la proporción de sustancia activa a proteína total (los valores de la actividad específica), se comparan las propiedades enzimáticas realmente presente.

A menos que se indique lo contrario, en el contexto de la presente invención, respectivamente se hace referencia al peso del producto líquido para lavado; es decir, los datos se refieren a su peso.

Numerosas proteasas y, principalmente, subtilisinas se forman como las llamadas preproteínas; es decir, junto con un propéptido y un péptido de señal, en cuyo caso la función del péptido de señal habitualmente consiste en garantizar que la proteasa se elimina de la célula que la produce en el periplasma o el medio que rodea la célula, y el propéptido es usualmente necesario para el correcto plegamiento de la proteasa. El péptido de señal y el propéptido son generalmente la parte N-terminal de la preproteína. El péptido de señal se disocia de la proteasa restante en condiciones naturales por medio de una peptidasa de señal. Luego ocurre el correcto plegado final de la proteasa soportado por el propéptido. La proteasa está entonces en su forma activa y disocia el propéptido mismo. Después de la disociación del propéptido, la proteasa madura, principalmente la subtilisina, ejerce su actividad catalítica sin los aminoácidos N-terminales originalmente presentes. Para aplicaciones técnicas en general y especialmente en el contexto de la invención, las proteasas maduras, es decir las enzimas tratadas después de su preparación, son preferibles frente a las preproteínas. Las proteasas también pueden ser modificadas por las células que las producen después de la preparación de la cadena polipeptídica, por ejemplo, mediante la unión de moléculas de azúcar, formilaciones, aminaciones, etc. Dichas modificaciones son modificaciones pos-traducción y pueden, aunque no necesariamente, influir en la función de la proteasa.

Además, la proteasa madura también puede acortarse en su extremo N-terminal y/o C-terminal, de modo que una proteasa acortada en comparación con SEQ ID NO. 1 o SEQ ID NO. 3, es decir un fragmento, está contenida en el producto para lavado o limpieza según la invención. Además, la proteasa madura también se puede acortar en su extremo N-terminal y/o C-terminal, de modo que en el producto para lavado o limpieza divulgado aquí está contenida una proteasa acortada en comparación con SeQ ID NO. 2 o SEQ ID NO. 4 o SEQ ID NO. 5 o Se Q ID NO. 6 o SEQ ID NO. 7 o SEQ ID NO. 8, es decir un fragmento. En este caso, todos los datos de identidad se refieren a aquella área en la que se asigna el fragmento respectivo en una alineación SEQ ID NO. 1. Sin embargo, en cada caso, el fragmento respectivo contiene aquella posición que se asigna a la posición 99 en una alineación con SEQ ID NO. 1 y en esta posición tiene un aminoácido correspondiente. Ventajosamente, también contiene una o más de las otras posiciones descritas anteriormente y tiene allí un aminoácido correspondiente. Tal fragmento también es proteolíticamente activo. Un fragmento que se prefiere más a este respecto comprende una secuencia de aminoácidos que coincide por una longitud de al menos 50 o al menos 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 265, 266, 267 o 268 posiciones de aminoácidos relacionadas con SEQ ID NO. 1 o SEQ ID NO. 2 o SEQ ID NO. 3 o SEQ ID NO. 4 o SEQ ID NO. 5 o SEQ ID NO. 6 o SEQ ID NO. 7 o SEQ ID NO.8, teniendo en cuenta los aminoácidos mencionados anteriormente para la posición 99 y opcionalmente también para las posiciones 3 y/o 4 y/o 61 y/o 154 y/o 188 y/o 193 y o 199 y/o 211. El rendimiento de limpieza y/o la estabilidad durante el almacenamiento de un producto líquido para lavado o limpieza según la invención con tal fragmento corresponde de modo particularmente preferido al menos al de un producto para lavado o limpieza que contiene una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que corresponde a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO 3, respectivamente determinado como se indicó anteriormente. Además, el rendimiento de limpieza y/o la estabilidad durante el almacenamiento de un producto líquido para lavado o limpieza divulgado aquí con dicho fragmento corresponde al menos al de un producto para lavado o limpieza que contiene una proteasa, que comprende una secuencia de aminoácidos que corresponde a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 2 o SEQ ID NO.

4 o SEQ ID NO. 5 o SEQ iD NO. 6 o SEQ ID NO. 7 o SEQ ID NO. 8, respectivamente determinado como se indicó anteriormente.

Otro objeto de la invención es un producto líquido de lavado o limpieza que comprende

(a) una proteasa seleccionada del grupo que consiste en

a. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos según SEQ ID NO. 3;

b. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos cambiada en al menos una posición en comparación con SEQ ID NO. 3, en cuyo caso el cambio en el listado según SEQ ID NO. 1 se selecciona del grupo que consiste en:

i. Treonina en la posición 3 (3T),

ii. Isoleucina en la posición 4 (4I),

iii. Alanina, treonina o arginina en la posición 61 (61A, 61T o 61R),

iv. Ácido aspártico o ácido glutámico en la posición 154 (154D o 154E),

v. Prolina en la posición 188 (188P),

vi. Metionina en la posición 193 (193M),

vii. Isoleucina en la posición 199 (199I),

viii. ácido aspártico, ácido glutámico o glicina en la posición 211 (211D, 211E o 211G),

ix. Combinaciones de los aminoácidos (i) a (viii);

(b) una celulasa.

También se divulga aquí un producto líquido de lavado o limpieza que comprende

(a) una proteasa seleccionada del grupo que consiste en

a. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos según SEQ ID NO. 2 o SEQ ID NO. 4 o SEQ ID NO.

5 o SEQ ID NO. 6 o SEQ ID NO. 7 o SEQ ID NO. 8;

b. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos modificada en comparación con SEQ ID NO. 2 o SEQ ID NO. 4 o SEQ ID NO. 5 o SEQ ID NO. 6 o SEQ ID NO. 7 o SEQ ID NO. 8 en al menos una posición, en cuyo caso el cambio en el listado según SEQ ID NO. 1 se selecciona del grupo que consiste en:

i. Treonina en la posición 3 (3T),

ii. Isoleucina en la posición 4 (4I),

iii. Alanina, treonina o arginina en la posición 61 (61A, 61T o 61R),

iv. Ácido aspártico o ácido glutámico en la posición 154 (154D o 154E),

v. Prolina en la posición 188 (188P),

vi. Metionina en la posición 193 (193M),

vii. Isoleucina en la posición 199 (199I),

viii. ácido aspártico, ácido glutámico o glicina en la posición 211 (211D, 211E o 211G),

ix. Combinaciones de los aminoácidos (i) a (viii);

(b) una celulasa.

Estas proteasas se usan de modo muy particularmente preferible en un producto líquido para lavado o limpieza según la invención. Se obtienen a partir de SEQ ID NO. 1 sustituyendo el aminoácido arginina en la posición 99 por el aminoácido ácido aspártico (D) en el listado según SEQ ID NO. 1. Esta secuencia de aminoácidos se indica en el protocolo de secuencias como SEQ ID NO. 3. Las proteasas descritas adicionalmente en este documento se obtienen a partir de SEQ ID NO. 1 sustituyendo el aminoácido arginina en la posición 99 por el aminoácido ácido glutámico (E) o el aminoácido asparagina (N) o glutamina (Q) o el aminoácido alanina (A) o glicina (G) o serina (S) en el listado según SEQ ID NO. 1. Estas secuencias de aminoácidos se indican en el protocolo de secuencias como SEQ ID NO.

2, SEQ ID NO. 4, SEQ ID NO. 5, SEQ ID NO. 6, SEQ ID NO. 7 y SEQ ID NO. 8. Además del aminoácido proporcionado para la posición 99, estas proteasas pueden tener uno o más de los aminoácidos explicados anteriormente en las posiciones 3, 4, 61, 154, 188, 193, 199 y 211, para ser asignados en una alineación con SEQ ID NO 1 y por lo tanto en el listado según SEQ ID NO. 1. Los aminoácidos mencionados para estas posiciones también causan propiedades ventajosas adicionales en estas proteasas y/o refuerzan las propiedades ya existentes. Principalmente, provocan un aumento en la actividad proteolítica y/o la estabilidad de la proteasa en un producto líquido para lavado o limpieza o en la solución de lavado formado por este producto para lavado o limpieza. Todas las declaraciones anteriores, siempre que sean aplicables, son válidas de manera correspondiente para estas proteasas particularmente preferidas.

Un producto según la invención contiene la proteasa cada vez más preferiblemente en una cantidad de 1 x 10-8- 5% en peso, 0,0001-1% en peso, 0,0005-0,5% en peso, de 0,001 a 0,1% en peso y de modo particularmente preferible de 0,001 a 0,06% en peso, con respecto a la proteína activa. Un producto según la invención contiene la celulasa cada vez más preferiblemente en una cantidad de 1 x 10-8 - 5% en peso, de 0,00001-1% en peso, de 0,00005-0,5% en peso, de 0,0001 a 0,1% en peso y de modo particularmente preferible de 0,0001 a 0,065% en peso, con respecto a la proteína activa. La concentración de proteínas se puede determinar utilizando procedimientos conocidos, por ejemplo, el procedimiento BCA (ácido bicincónico; ácido 2,2'-bicinolil-4,4'-dicarboxílico) o el procedimiento de Biuret (A.G. Gornall, C. S. Bardawill y M. M. David, J. Biol. Chem., 177 (1948), págs. 751-766). A este respecto, la concentración de proteína activa se determinó titulando los centros activos usando un inhibidor irreversible adecuado (para proteasas, por ejemplo, fluoruro de fenilmetilsulfonilo (PMSF)) y determinando la actividad residual (cf. M. Bender y col., J. Am. Chem Soc. 88, 24 (1966), páginas 5890-5913).

La proteasa y/o la celulasa también pueden adsorberse en materiales portadores y/o incrustarse en sustancias de envoltura para protegerlas contra la desactivación prematura. En la solución de lavado, es decir, en condiciones de uso, la enzima se libera y puede desplegar su efecto catalítico.

En otra forma de realización de la invención, el producto para lavado o limpieza se caracteriza porque comprende además un componente que se selecciona de

i. sustancia aniónica y/o polianiónica, y/o

ii. sustancia catiónica y/o policatiónica, y/o

iii) sustancia que contiene grupos hidroxilo y/o polihidroxilo.

Se ha encontrado que la adición de tales sustancias mejora aún más el rendimiento de limpieza de los productos para lavado y de limpieza, principalmente productos líquidos para lavado o limpieza que contienen proteasas y celulasas, principalmente las descritas anteriormente, principalmente a temperaturas comparativamente bajas, principalmente entre 10°C y 50°C, entre 10°C y 40°C, entre 10°C y 30°C y/o entre 20°C y 40°C. Principalmente, en combinación con una proteasa por usar según la invención, se presenta un efecto sinérgico, ante todo con respecto a la eliminación de al menos una mancha sensible a proteasa, principalmente de una como se indicó anteriormente.

Las sustancias especificadas en i. son sustancias aniónicas o polianiónicas; es decir, estas sustancias llevan al menos una y preferiblemente varias cargas negativas. Son preferiblemente un polímero con al menos un monómero cargado negativamente, preferiblemente con varios monómeros cargados negativamente. Según la invención, por lo tanto, este polímero es preferiblemente un polímero cargado negativamente. Por ejemplo, se prefieren polímeros de ácidos orgánicos o sus sales, principalmente poliacrilatos y/o ácidos de poli-azúcar y/o copolímeros de poliacrilato y/o copolímeros de poli-azúcar. A este respecto, los otros compuestos preferidos son sulfonatos de poliacrílico o policarboxilatos y sus sales, copolímeros o sales de los copolímeros.

Ejemplos de sustancias por utilizar con especial preferencia son Acusol 587D (sulfonato de poliacrílico; Rohm & Haas/Dow Chemical company), Acusol 445N (sal sódica de policarboxilato; Rohm & Haas/Dow Chemical), Acusol 590 (copolímero de poliacrilato; Rohm & Haas/Dow Chemical), Acusol 916 (sal sódica de poliacrilato; compañía Rohm & Haas/Dow Chemical), Sokalan CP42 (sal sódica de policarboxilato modificado; compañía BASF) , Sokalan PA 30CL (sal sódica de policarboxilato; compañía BASF), Dequest P 9000 (ácido polimaleico; compañía Thermphos), ácido algínico, ácido poli-2-acrilamido-2-metil-1-propano sulfónico, sal sódica de ácido poli-4-estireno-sulfónico- co-ácido maleico, sal sódica de poli-acrilamido-co- ácido acrílico, sal sódica de ácido poli-metacrílico, poli-metil-vinil-éter-ácido maleico o sal sódica de ácido polivinilsulfónico.

Las sustancias indicadas en ii. son sustancias catiónicas o policatiónicas; es decir, estas sustancias llevan al menos una y preferiblemente varias cargas positivas. Es preferiblemente un polímero con al menos un monómero cargado positivamente, preferiblemente con varios monómeros cargados positivamente. Según la invención, este polímero es, por lo tanto, preferiblemente un polímero cargado positivamente. Ejemplos de compuestos preferidos a este respecto son sales de poliaminas, polietileniminas o sus copolímeros, sales de polialilaminas, sales de compuestos de polidialildimetilamonio o compuestos de poli(acrilamidas-co-dialildimetilamonio).

Las sustancias indicadas en iii. son sustancias que tienen al menos un grupo hidroxilo y/o polihidroxilo y preferiblemente una pluralidad de grupos hidroxilo y/o polihidroxilo. A este respecto, se da preferencia, por ejemplo, a los polialcoholes vinílicos, por ejemplo, los que están disponibles con el nombre comercial Mowiol (Kremer Pigmente GmbH & Co. KG).

En este punto, se señala expresamente que una sustancia específica puede pertenecer a uno o más de los grupos i. a iii. mencionados anteriormente. Por ejemplo, puede ser un polímero aniónico que tiene uno o más grupos hidroxilo y/o polihidroxilo. Tal sustancia pertenece entonces a los grupos i. y iii. Del mismo modo, un polímero catiónico que tiene uno o más grupos hidroxilo y/o polihidroxilo pertenece a los grupos ii. y iii.

Los derivados de las sustancias mencionadas anteriormente como pertenecientes a i., ii. o Ni. también pueden usarse en el contexto de la presente invención. En el sentido de la presente solicitud, por un derivado se entiende una sustancia que está modificada químicamente a partir de una de las sustancias mencionadas anteriormente, por ejemplo, convirtiendo una cadena lateral o mediante enlace covalente de otro compuesto a la sustancia. Tal compuesto puede significar, por ejemplo, compuestos de bajo peso molecular tales como lípidos o mono, oligo- o polisacáridos o aminas o compuestos de amina. Además, la sustancia puede ser glicosilada, hidrolizada, oxidada, N-metilada, N-formilada, N-acetilada o contener metilo, formilo, etilo, acetilo, t-butilo, anisilo, bencilo, trifluroacetilo, N-hidroxisuccinimida, t-butiloxicarbonilo, benzoilo, 4 metilbencilo, tioanizilo, tiocresilo, benciloximetilo, 4-nitrofenilo, benciloxicarbonilo, 2-nitrobenzoilo, 2-nitrofenilsulfenilo, 4-toluenosulfonilo, pentafluorofenilo, difenilmetilo, 2-clorobenciloxicarbonilo, 2,4,5-triclorofenilo, 2-bromobenciloxicarbonilo, 9-fluorenilmetiloxicarbonilo, trifenilmetilo, 2,2,5,7,8-pentametilcroman-6-sulfonilo. Del mismo modo, por un derivado ha de entenderse el enlace covalente o no covalente de la sustancia a un soporte macromolecular, así como también la inclusión no covalente en estructuras de jaula macromoleculares adecuadas. También se pueden hacer acoplamientos con otros compuestos macromoleculares como, por ejemplo, el polietilenglicol. Otras modificaciones químicas preferidas son la modificación de uno o más de los grupos químicos -COOH, -OH, = NH, -NH2 -SH a -COOR, -OR, -NHR, -NR2, -NHR, -NR, -SR; donde:

R es -CH=CH-R2, -C=C-R2, -C(R2)=CH², - C(R2)=C(R3), -CH=NR2, -C(R2)=N-R3, un - sistema de anillo de 4-7 C con o sin sustitución, un heterociclo de 4-7 nitrógenos con o sin sustitución, o una cadena C2 a Ce con 1 a 5 enlaces dobles o triples con sustituciones seleccionadas de R1, R2 o R3, donde

-R1 es H, -R, - NO2, -CN, sustituyente de haluro, -N3, alquilo de Ci-e, - (CH²)nCO²R2, alquenilo de C2-8-CO2R2 , -O (CH²)nCO²R2, -C(O)NR2R3, -P(O)(OR2)², tetrazol-5-ilo sustituido con alquilo, -(CH2)nO(CH2)n arilo, -NR2R3, -(CH2)n OR2, -(CH2)n SR2, -N(R2)C(O)R3, -S(O²)NR2R3, -N(R2)S(O²)R3, -(CHR2)n NR2R3, -C(O)R3, (CH2)n N(R3)C(O)R3, -N(r2)CR2R3, cicloalquilo de (CH2)n sustituido o no sustituido, fenilo- o ciclo-(CH2)n sustituido o no sustituido, donde n es un número mayor que 1;

-R2 es H, sustituyente haluro, -alquilo, -haloalquilo, -(CH2)n-fenilo, -(CH²)1-3-bifenilo, -(CH²)1-4-Ph-N(SO²-C1-2-alquil)2, - CO(CHR1)n-OR1, heterociclo de (CHR1)n, -(CHRI)n-NH-CO— R1, -(CHR1)n-NH-SO²R1, -(CHR1)n-Ph-N(SO²-C1-2-alquilo)², -(CHR1)n-C(O)(CHR1)-NHR1, -(CHR1)n- C(S)(CHR1)-NHR1, -(CH2)nO(CH2)nCH³, -CF3, acilo de C2-C5, -(CHR1)nOH, -(CHR1)nCO²R1, -(CHRI)n-O-alquilo, -(CHR1)n— O(CH²)n-O-alquilo, -(CHR1)n-S-alquilo, -(CHR1)n-S(O)-alquilo, -(CHR1)n-S(O²)-alquilo, -(CHR1)n-S(O²)-NHR3, -(CHR3)n-N³, -(CHR3)nNHR4, una cadena de alqueno de C2 a Ce con 1 a 5 enlaces dobles, una cadena de alquino de C2 a Ce con 1 a 5 enlaces triples, heterociclo de (CHR3)n sustituido o no sustituido, cicloalquilo de (CHR3)n sustituido o no sustituido, saturado o insaturado; donde n es un número mayor que 1 es y R1 y R3 pueden ser iguales o diferentes;

-R3 es H, -OH, -CN, alquilo sustituido, alquenilo de C2 a Ce, cicloalquilo sustituido o no sustituido, -N(R1)R2, heterociclo o heterobiciclo de C5 a C7 saturado o insaturado de 4 a 7 átomos de C, -NR1, -NR2, -NR1R2 que consiste en un heterociclo o heterobiciclo saturado o insaturado de 4 a 7 átomos de C;

-R4 es H, -(CH2)nOH, - C(O)OR5, -C(O)SR5, -(CH2)n C(O)NR6R7, --O-- C(O)— O--R6, un aminoácido o un péptido; donde n es un número entre 0 y 4;

-R5 es H,

-R6 es -C(R7)-(CH²)n-O-C(O)-R8, -(CH²)n-C(R7)-O-C(O)R8, -(CH²)n-C(R7)-O-C(O)--O--R8, o -C(R7)-(CH²)n-O-C(O)- O-R8; donde n es un número entre 0 y 4; y

-R7 y R8 son cada uno H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, heterociclo, heterociclo sustituido, alquilarilo, alquilarilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido o CH2CO2 alquilo, donde R7 y R8 pueden ser iguales o diferentes.

Según la invención, también es posible usar todas las combinaciones posibles de las sustancias mencionadas anteriormente como pertenecientes a i., ii. o iii. y/o sus derivados.

Se puede usar un producto líquido para lavado o limpieza según la invención como tal o después de la dilución con agua para limpiar textiles y/o superficies duras. Dicha dilución se puede preparar fácilmente diluyendo una cantidad medida del producto en una cantidad adicional de agua en determinadas proporciones en peso de producto: agua y opcionalmente agitando esta dilución para asegurar una distribución uniforme del producto en el agua. Las posibles relaciones en peso o volumen de las diluciones son de 1:0 producto:agua a 1:10000 o 1:20000 producto:agua, preferiblemente de 1:10 a 1:2000 producto:agua.

Como producto líquido para lavado y limpieza se pueden usar aquí todas las formas de administración líquidas o fluidas. Aquí, "fluidos" en el sentido de la presente solicitud son productos que se pueden verter y pueden tener viscosidades de hasta 10.000 mPas. La viscosidad se puede medir utilizando procedimientos estándar habituales (por ejemplo, viscosímetro Brookfield LVT-II a 20 rpm y 20°C, husillo 3) y está preferiblemente en el intervalo de 5 a 10000 mPas. Los productos preferidos tienen viscosidades de 10 a 8000 mPas, y particularmente se prefieren valores entre 120 a 3000 mPas. Por lo tanto, un producto líquido para lavado o limpieza en el contexto de la presente invención también puede estar en forma de gel o de pasta, puede estar en forma de una solución o suspensión homogénea, y puede pulverizarse, por ejemplo, o puede envasarse en otras formas de administración habituales. Los productos para lavado para lavado incluyen todos los tipos imaginables de producto para lavado, principalmente productos para lavado de textiles, alfombras o fibras naturales. Se pueden proporcionar para aplicación manual y/o máquina. Los productos para lavado también incluyen productos auxiliares de lavado que se agregan al propio producto para lavado en el caso del lavado manual o mecánico de textiles para lograr un efecto adicional. Los productos para limpieza incluyen todos los productos para limpiar y/o desinfectar superficies duras, productos para lavado de vajillas a mano y en máquina, limpiadores de alfombras, limpiadores abrasivos, limpiadores de vidrio, detergentes para perfume de inodoros, etc., que se encuentran asimismo en todas las formas de administración mencionadas. Los productos de pretratamiento y postratamiento de textiles son finalmente, por un lado, aquellos productos con los que se pone en contacto la prenda de ropa antes del propio lavado, por ejemplo, para aflojar las manchas pertinaces; por otro lado, aquellos materiales que, en un paso siguiente al propio lavado de textiles, confieren otras propiedades deseables al lavado, como una sensación al tacto agradable, ausencia de arrugas o baja carga estática. Entre los últimos productos mencionados se cuenta, entre otros, el suavizante de telas. Los desinfectantes son, por ejemplo, desinfectantes de manos, desinfectantes de superficies y desinfectantes de instrumentos, que también pueden presentarse en las formas de administración mencionadas.

En otra forma preferida de realización de la invención, el producto para lavado o limpieza se caracteriza porque comprende al menos otro ingrediente, principalmente uno que se selecciona del grupo que consiste en fosfonato, tensioactivo, secuestrante (builder), disolvente no acuoso, ácido, sal soluble en agua, espesante y combinaciones de los mismos.

Los fosfonatos son sales y compuestos orgánicos, especialmente ésteres, de ácido fosfónico. Las sales existen como fosfonatos primarios (MH2PO3 o HP(O)(OH)(OM')) y secundarios (M 2HPO3 o HP(O)(OM')2), donde M' representa un metal monovalente. Estos fosfonatos inorgánicos también se designan como fosfitos primarios o secundarios. Los fosfonatos inorgánicos se forman, por ejemplo, haciendo reaccionar el ácido fosfónico HP(O)(OH)2, principalmente la forma tautomérica estable de ácido fosforoso con un equivalente (primaria) o dos equivalentes (secundaria) de base, por ejemplo, hidróxido de metal alcalino. En el contexto de la presente invención, se da preferencia a fosfonatos orgánicos P-sustituidos que tienen un enlace fósforo-carbono (compuestos orgánicos de fósforo). Su estructura general es R1P(O)(OR2)², con R1 y/o R2 = alquilo, arilo o H, en donde los residuos de alquilo o arilo pueden tener otras sustituciones o pueden llevar otros grupos químicos. Los fosfonatos orgánicos P-sustituidos se forman, por ejemplo, por la reacción de Michaelis-Arbusov. Muchos de estos fosfonatos son solubles en agua. Algunos fosfonatos técnicamente importantes también llevan grupos amino del tipo NR-(CH2)x-PO(OH)² (R = alquilo, arilo o H). Algunos de estos aminofosfonatos tienen similitudes estructurales con productos complejantes como EDTA, NTA o DTPA y tienen una función similar. Los fosfonatos principalmente preferidos en el contexto de la presente invención incluyen, principalmente, organofosfonatos tales como, por ejemplo, ácido 1-hidroxietano-1,1-difosfónico (HEDP), ácido aminotri(metilenfosfónico) (ATMP, también denominado ácido amino-tris(metilenfosfónico) o ácido nitrolotris(metilenfosfónico) (NTMP)), ácido dietilentriamina-penta(metilenofosfónico) (DTPMP o DETPMP o DTPNT), ácido etilendiaminotetra(metilenofosfónico) (EDTMP, también designado como ácido etilendiaminotetra(metilenfosfónico) y ácido 2-fosfonobutano-1,2,4-tricarboxílico (PBS-AM, también designado como ácido 2-fosfonobutano-1,2,4-tricarboxílico o ácido 3-carboxi-3-fosfonoadípico), que se utilizan principalmente en forma de sus sales de amonio o metales alcalinos. La sal sódica de ácido dietilentriamina-penta(metilenfosfónico) es particularmente preferida. Tal fosfonato está disponible, por ejemplo, bajo el nombre comercial Dequest® 2066 (Thermphos).

El fosfonato está contenido preferiblemente en una cantidad de 0,01 a 2,5% en peso y cada vez más preferiblemente de 0,02 a 2% en peso, de 0,03 a 1,5% en peso y principalmente de 0, 05 a 1% en peso en el producto para lavado o limpieza.

Como tensioactivo(s) se pueden usar tensioactivos aniónicos, no iónicos, zwitteriónicos y/o anfóteros. Desde el punto de vista de la aplicación industrial se prefieren mezclas de tensioactivos aniónicos y no iónicos. El contenido total del producto tensioactivo en el producto líquido para lavado o limpieza es preferiblemente inferior al 60% en peso y de modo particularmente preferible inferior al 45% en peso, con respecto al producto para lavado o limpieza líquido total.

Los tensioactivos no iónicos adecuados comprenden alcoholes grasos alcoxilados, ésteres alquílicos de ácidos grasos alcoxilados, amidas de ácidos grasos, amidas de ácidos grasos alcoxiladas, amidas de ácidos grasos polihidroxilados, éteres de alquilfenol y poliglicol, óxidos de amina, poliglucósidos de alquilo y mezclas de los mismos.

Como tensioactivos no iónicos preferiblemente se emplean alcoholes alcoxilados, ventajosamente etoxilados, principalmente alcoholes primarios que tienen preferiblemente de 8 a 18 átomos de carbono y un promedio de 1 a 12 moles de óxido de etileno (EO) por mol de alcohol, en los que el residuo de alcohol puede ser lineal o preferiblemente ramificado con metilo en la posición 2 o puede contener residuos lineales y ramificados con metilo en la mezcla, como habitualmente están presentes en los residuos de oxoalcohol. Sin embargo, se prefieren principalmente los etoxilatos de alcohol con residuos lineales de alcoholes de origen nativo con 12 a 18 átomos de carbono, por ejemplo, de coco, palma, grasa de sebo u alcohol oleílico, y un promedio de 2 a 8 EO por mol de alcohol. Los alcoholes etoxilados preferidos incluyen, por ejemplo, alcoholes de C12-14 con 3 EO, 4 EO o 7 EO, alcohol de C9.11 con 7 EO, alcoholes de C13-15 con 3 EO, 5 EO, 7 Eo u 8 EO, alcoholes de C12-18 con 3 EO, 5 EO o 7 EO y mezclas de los mismos, tales como mezclas de alcohol de C12-14 con 3 EO y alcohol de C12-18 con 7 EO. Los grados de etoxilación indicados representan promedios aleatorios, que pueden ser un número entero o una fracción para un producto específico. Los etoxilatos de alcohol preferidos tienen una distribución homóloga estrecha (narrow range ethoxylates, NRE). Además de estos tensioactivos no iónicos, también se pueden usar alcoholes grasos con más de 12 EO. Los ejemplos incluyen alcohol graso de sebo con 14 EO, 25 EO, 30 EO o 40 EO. Los tensioactivos no iónicos que contienen grupos EO y PO juntos en la molécula también se pueden usar según la invención. También es adecuada una mezcla de un alcohol graso etoxilado (muy) ramificado y un alcohol graso etoxilado no ramificado como, por ejemplo, una mezcla de un alcohol graso de C16-18 con 7 EO y 2-propilheptanol con 7 EO. El producto para lavado, limpieza, postratamiento o lavado auxiliar contiene de modo principalmente preferible un alcohol graso de C12-18 con 7 EO o un oxoalcohol de C13-15 con 7 EO como tensioactivo no iónico.

El contenido de tensioactivos no iónicos en el producto para lavado o limpieza es preferiblemente del 3 al 40% en peso, preferiblemente del 5 al 30% en peso y principalmente del 7 al 20% en peso, en cada caso con respecto a todo el producto para lavado o limpieza.

Además de los tensioactivos no iónicos, el producto para lavado o limpieza también puede contener tensioactivos aniónicos. Los sulfonatos, sulfatos, jabones, fosfatos de alquilo, tensioactivos de silicona aniónicos y mezclas de los mismos se usan preferiblemente como tensioactivos aniónicos.

Como tensioactivos del tipo sulfonato se consideran sulfonatos de alquilo de Cg-13-benceno, sulfonatos de olefina, es decir mezclas de sulfonatos y disulfonatos de alqueno e hidroxialcano, como los obtenidos, por ejemplo, de monoolefinas de C12-18 con un doble enlace terminal o interno por sulfonación con trióxido de azufre gaseoso y posterior hidrólisis alcalina o ácida de los productos de sulfonación. También son adecuados sulfonatos de alcano de C12-18 y los ésteres de ácidos a-sulfograsos (éster-sulfonatos), por ejemplo, los ésteres metílicos a-sulfonados de los ácidos grasos hidrogenados de coco, nuez de palma o sebo.

Como sulfatos de alqu(en)ilo se prefieren las sales de álcalis y, principalmente, de sodio de los hemiésteres de ácido sulfúrico de los alcoholes grasos de C12-C18, por ejemplo, de alcohol de grasa de coco, alcohol graso de sebo, alcohol laurílico, miristílico, cetílico o estearílico o los oxoalcoholes de C10-C20 y aquellos hemiésteres de alcoholes segundarios con estas longitudes de cadena. Desde el punto de vista de la tecnología de lavado se prefieren sulfatos de alquilo de C12-C16 y los sulfatos de alquilo de C12-C15 y los sulfatos de alquilo de C14-C15. Los sulfatos de 2,3-alquilo también son tensioactivos aniónicos adecuados.

Los monoésteres de ácido sulfúrico de los alcoholes de C7-21 de cadena lineal o ramificada, etoxilados con 1 a 6 moles de óxido de etileno también son adecuados, como los alcoholes de Cg.11 ramificados con 2-metilo, con un promedio de 3,5 moles de óxido de etileno (EO) o alcoholes grasos de C12-18 con 1 a 4 EO.

Los jabones también son tensioactivos aniónicos preferidos. Son adecuados los jabones de ácidos grasos saturados e insaturados, como las sales de ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido erúcico (hidrogenado) y ácido behénico, y principalmente mezclas de jabón derivadas de ácidos grasos naturales, por ejemplo, ácidos grasos de coco, de semilla de palma, de aceite de oliva o ácidos grasos de sebo.

Los tensioactivos aniónicos, incluidos los jabones, pueden estar en forma de sus sales de sodio, potasio o magnesio o de amonio. Los tensioactivos aniónicos están preferiblemente en forma de sus sales sódicas. Otros contraiones preferidos para los tensioactivos aniónicos también son las formas protonadas de colina, trietilamina o metiletilamina.

El contenido de tensioactivos aniónicos en un producto para lavado o limpieza puede ser del 1 al 40% en peso, preferiblemente del 5 al 30% en peso y de modo muy particularmente preferible del 10 al 25% en peso, cada caso con respecto a todo el producto para lavado o limpieza.

Como secuestrantes que pueden estar contenidos en el producto para lavado o limpieza, se mencionan principalmente silicatos, silicatos de aluminio (principalmente zeolitas), carbonatos, sales de ácidos di- y policarboxílicos orgánicos y mezclas de estas sustancias.

Los secuestrantes orgánicos que pueden estar presentes en el producto para lavado o limpieza son, por ejemplo, los ácidos policarboxílicos que se pueden usar en forma de sus sales sódicas, y por ácidos policarboxílicos se entienden aquellos ácidos carboxílicos que tienen más de una función de ácido. Por ejemplo, estos son ácido cítrico, ácido adípico, ácido succínico, ácido glutárico, ácido málico, ácido tartárico, ácido maleico, ácido fumárico, ácidos de azúcares, ácidos aminocarboxílicos, ácido nitrilotriacético (NTA), ácido metilglicinadiacético (MGDA) y sus derivados, y mezclas de estos. Las sales preferidas son las sales de ácidos policarboxílicos tales como ácido cítrico, ácido adípico, ácido succínico, ácido glutárico, ácido tartárico, ácidos de azúcar y mezclas de los mismos.

Los policarboxilatos poliméricos también son adecuados como secuestrantes. Estos son, por ejemplo, las sales de metales alcalinos de ácido poliacrílico o ácido polimetacrílico, por ejemplo, aquellas con un peso molecular relativo de 600 a 750000 g/mol.

Los polímeros adecuados son, principalmente, los poliacrilatos, que preferiblemente tienen un peso molecular de 1000 a 15000 g/mol. Debido a su solubilidad superior, de este grupo pueden preferirse a su vez los poliacrilatos de cadena corta con masas moleculares de 1000 a 10000 g/mol, y de modo particularmente preferible de 1000 a 5000 g/mol.

También son adecuados los policarboxilatos copoliméricos, principalmente los del ácido acrílico con ácido metacrílico y del ácido acrílico o ácido metacrílico con ácido maleico. Para mejorar la solubilidad en agua, como monómeros los polímeros también pueden contener ácidos alilosulfónicos, como el ácido aliloxibencenosulfónico y el ácido metalilosulfónico.

Sin embargo, en los productos líquidos para lavado o limpieza preferiblemente se emplean secuestrantes solubles como el ácido cítrico, o los polímeros acrílicos con una masa molecular de 1000 a 5000 g/mol.

En el sentido de este documento, las masas moleculares indicadas para policarboxilatos poliméricos son masas moleculares promedio en peso Mw de la respectiva forma de ácido, que se determinaron básicamente mediante cromatografía de permeación en gel (GPC), utilizando un detector de UV. La medición se realizó contra un estándar externo de ácido poliacrílico que, debido a su relación estructural con los polímeros investigados, proporciona valores de peso molecular realistas. Estos datos difieren significativamente de los datos de peso molecular en los cuales se usan ácidos poliestirenosulfónicos como estándar. Las masas moleculares medidas en comparación con los ácidos poliestirenosulfónicos son generalmente significativamente más altos que las masas moleculares indicadas en este documento.

Tales sustancias secuestrantes orgánicas pueden estar presentes, si se desean, en cantidades de hasta el 40% en peso, principalmente hasta el 25% en peso y preferiblemente del 1% en peso al 8% en peso. Las cantidades cercanas al límite superior mencionado se usan preferiblemente en productos en forma de pasta o líquidos, principalmente acuosos.

Los productos de lavado o limpieza según la invención son líquidos y preferiblemente contienen agua como disolvente principal. Además, al producto para lavado o limpieza se pueden agregar disolventes no acuosos. Los disolventes no acuosos adecuados comprenden alcoholes mono- o polihídricos, alcanolaminas o éteres de glicol, siempre que sean miscibles con agua en el intervalo de concentración indicado. Los disolventes se seleccionan preferiblemente de etanol, n-propanol, i-propanol, butanoles, glicol, propanodiol, butanodiol, glicerina, diglicol, propildiglicol, butildiglicol, hexilenglicol, éter metílico de etilenglicol, éter etílico de etilenglicol, éter propílico de etilenglicol, éter mono-n-butílico de etilenglicol, éter metílico de dietilenglicol, éter etílico de dietilenglicol, éter metílico de propilenglicol, éter etílico de propilenglicol, éter propílico de propilenglicol, éter monometílico de dipropilenglicol, éter monoetílico de dipropilenglicol, éter monometílico de di-isopropilenglicol, éter monoetílico de diisopropilenglicol, metoxitriglicol, etoxitriglicol, butoxitriglicol, 1-butoxietoxi-2-propanol, 3-metil-3-metoxibutanol, éter t-butílico de propilenglicol, éter di-n-octílico y mezclas de estos disolventes. Sin embargo, se prefiere que el producto para lavado o limpieza contenga un poliol como disolvente no acuoso. El poliol puede comprender principalmente glicerina, 1,2-propanodiol, 1,3-propanodiol, etilenglicol, dietilenglicol y/o dipropilenglicol. El producto para lavado o limpieza contiene de modo principalmente preferible una mezcla de un poliol y un alcohol monohídrico. Los disolventes no acuosos pueden usarse en el producto para lavado o limpieza en cantidades entre 0,5 y 15% en peso, pero preferiblemente por debajo del 12% en peso.

Para ajustar un valor de pH deseado que no resulte por sí mismo de la mezcla de los demás componentes, los productos pueden incluir ácidos sistémicos y ambientalmente compatibles, principalmente ácido cítrico, ácido acético, ácido tartárico, ácido málico, ácido láctico, ácido glicólico, ácido succínico, ácido glutárico y/o ácido adípico, pero también ácidos minerales, principalmente ácido sulfúrico, o bases, principalmente hidróxidos de amonio o de metales alcalinos. Dichos reguladores de pH están contenidos en los productos en cantidades preferiblemente de no más del 20% en peso, principalmente del 1,2% en peso al 17% en peso.

En el sentido de la invención, un producto puede contener, además, una o más sales solubles en agua que se usan, por ejemplo, para ajustar la viscosidad. Estas pueden ser sales inorgánicas y/u orgánicas. Las sales inorgánicas que pueden usarse se seleccionan preferiblemente del grupo que comprende haluros, sulfatos, sulfitos, carbonatos, carbonatos de hidrógeno, nitratos, nitritos, fosfatos y/u óxidos solubles en agua, incoloros, de los metales alcalinos, los metales alcalinotérreos, el aluminio y/o los metales de transición; también se pueden usar sales de amonio. Se prefieren principalmente los haluros y sulfatos de los metales alcalinos; por lo tanto, la sal inorgánica se selecciona preferiblemente del grupo que comprende cloruro de sodio, cloruro de potasio, sulfato de sodio, sulfato de potasio y mezclas de los mismos. Las sales orgánicas que se pueden usar son, por ejemplo, sales incoloras hidrosolubles de metales alcalinos, metales alcalinotérreos, amonio, aluminio y/o metales de transición de los ácidos carboxílicos. Las sales se seleccionan preferiblemente del grupo que comprende formiato, acetato, propionato, citrato, malato, tartrato, succinato, malonato, oxalato, lactato y sus mezclas.

Para el espesamiento, un producto según la invención puede contener uno o más productos espesantes. El espesante se selecciona preferiblemente del grupo que comprende xantano, guar, carragenano, agar-agar, gellan, pectina, goma de algarroba y mezclas de los mismos. Estos compuestos son espesantes efectivos incluso en presencia de sales inorgánicas. En una forma particularmente preferida de realización, el producto de lavado o limpieza contiene xantano como producto espesante, ya que el xantano espesa eficazmente incluso en presencia de altas concentraciones de sal e impide una separación macroscópica de la fase continua. Además, el espesante estabiliza la fase continua de poco tensioactivo e impide una separación de fases macroscópica.

De modo alternativo o complementario, los (co)polímeros de ácido(met)acrílico también pueden usarse como espesantes. Los (co)polímeros acrílicos y metacrílicos adecuados comprenden, por ejemplo, los homopolímeros de ácido acrílico de alto peso molecular, reticulados con un poliéter de polialquenilo, principalmente un éter alílico de sacarosa, pentaeritritol o propileno (denominación INCI según "International Dictionary of Cosmetic Ingredients" ["Diccionario internacional de ingredientes cosméticos"] de "The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association (CTFA)": Carbomer), que también se designan como polímeros de carboxivinilo. Dichos ácidos poliacrílicos están disponibles bajo los nombres comerciales Polygel® y Carbopol®, entre otros. Los siguientes copolímeros de ácido acrílico también son adecuados, por ejemplo: (i) Copolímeros de dos o más monómeros del grupo de ácido acrílico, ácido metacrílico y sus ésteres simples (INCI: copolímero de acrilatos), que se forman preferiblemente con alcanoles de C1-4 y se encuentran disponibles, por ejemplo, bajo los nombres comerciales Aculyn®, Acusol® o Tego®; (ii) Copolímeros de ácido acrílico reticulados de alto peso molecular, a los cuales pertenecen, por ejemplo, los copolímeros de acrilatos de alquilo de C10-30, reticulados con un éter alílico de sacarosa o de pentaeritritol con uno o más monómeros del grupo de ácido acrílico, ácido metacrílico y sus ésteres simples, formados preferiblemente con alcanoles de C1-4 (INCI: polímero reticulado de acrilatos/acrilato de alquilo de C10-30) y que están disponibles, por ejemplo, bajo el nombre comercial Carbopol®. Otros polímeros adecuados son los (co)polímeros de ácido (met)acrílico del tipo Sokalan®.

Se puede preferir que el producto para lavado o limpieza según la invención contenga un (co)polímero de ácido (met)acrílico en combinación con otro producto espesante, preferiblemente xantano. El producto para lavado o limpieza puede contener de 0,05 a 1,5% en peso y preferiblemente de 0,1 a 1% en peso, en cada caso con respecto a todo el producto de lavado o limpieza, de espesantes. La cantidad de espesante utilizada depende del tipo de espesante y del grado deseado de espesamiento.

Los productos líquidos o pastosos según la invención en forma de soluciones que contienen disolventes habituales generalmente se preparan mezclando simplemente los ingredientes, que se pueden agregar en sustancia o como una solución a un mezclador automático.

Los productos de lavado o limpieza según la invención pueden contener exclusivamente una proteasa y una celulasa, tal como se ha descrito. Alternativamente, también pueden contener otras enzimas hidrolíticas u otras enzimas en una concentración conveniente para la efectividad del producto. Por lo tanto, otro objeto de la invención son productos que comprenden, además, una o más enzimas adicionales, y en principio es posible utilizartodas las enzimas establecidas en el estado de la técnica para estos fines. Como enzimas adicionales preferiblemente se pueden usar todas las enzimas que pueden desplegar una actividad catalítica en el producto según la invención, principalmente una proteasa, amilasa, celulasa, hemicelulasa, mananasa, tanasa, xilanasa, xantanasa, xiloglucanasa, p-glucosidasa, pectinasa, carragenasa, perhidrolasa, oxidasa, oxidorreductasa o una lipasa, y sus mezclas. Otras enzimas están contenidas ventajosamente en el producto respectivamente en una cantidad total de 1 x 10^-8 a 5 por ciento en peso con respecto a la proteína activa. Cada enzima adicional está contenida de modo cada vez más preferido en una cantidad de 1 * 10^-7-3% en peso, de 0,00001 a 1% en peso, de 0,00005-0,5% en peso, de 0,0001 a 0,1% en peso, y de modo particularmente preferible de 0,0001 a 0,05% en peso en productos según la invención, con respecto a la proteína activa. De modo particularmente preferido, las enzimas muestran rendimientos de limpieza sinérgicos frente a determinadas suciedades o manchas; es decir, las enzimas contenidas en la composición del producto se apoyan mutuamente en su rendimiento de limpieza. De modo muy particularmente preferido, tal sinergia se presenta entre la proteasa contenida según la invención y otra enzima de un producto según la invención; principalmente entre la proteasa mencionada y la celulasa y/o una lipasa y/o una mananasa y/o una amilasa y/o una pectinasa. Los efectos sinérgicos pueden ocurrir no solo entre diferentes enzimas, sino también entre una o más enzimas y otros ingredientes del producto según la invención.

Otro objeto según la invención es el uso de un producto para lavado o limpieza según la invención para eliminar suciedad, principalmente suciedad sensible a proteasa y/o celulasa, en textiles o superficies duras, es decir, para limpiar textiles o superficies duras. Porque los productos según la invención, principalmente debido a la combinación contenida de proteasa y celulasa, pueden usarse ventajosamente para eliminar contaminantes correspondientes de textiles o superficies duras. Las formas de realización de este objeto de la invención representan, por ejemplo, el lavado de manos, la eliminación manual de manchas de textiles o superficies duras o el uso en conexión con un procedimiento mecánico. Todos los hechos, objetos y formas de realización que se describen para los productos para lavado o limpieza según la invención también se pueden aplicar a este objeto de la invención. Por lo tanto, en este punto se hace referencia expresa a la divulgación en el punto apropiado con la nota de que esta divulgación también es válida para el uso anterior según la invención.

Otro objeto de la invención es un procedimiento para limpiar textiles o superficies duras, en el cual se aplica un producto para lavado o limpieza según la invención en al menos una etapa del procedimiento.

Esto incluye procedimientos tanto manuales como mecánicos, y se prefieren los procedimientos mecánicos debido a su capacidad de control más precisa, por ejemplo, en términos de las cantidades utilizadas y los tiempos de acción. Los procedimientos para la limpieza de textiles generalmente se caracterizan por el hecho de que, en varios pasos del procedimiento, se aplican diversas sustancias activas de limpieza a los artículos por limpiar y se lavan después del tiempo de acción, o porque los artículos por limpiar se tratan de alguna otra manera con un producto para lavado o una solución o dilución de este producto. Lo correspondiente es válido para los procedimientos para limpiar todos los materiales que no sean textiles, especialmente las superficies duras. Todos los procedimientos de lavado o limpieza imaginables pueden enriquecerse en al menos uno de los pasos del procedimiento en el uso de un producto para lavado o limpieza según la invención y representan entonces formas de realización de la presente invención. Todos los hechos, objetos y formas de realización que se describen para los productos para lavado o limpieza según la invención también se pueden aplicar a este objeto según la invención. Por lo tanto, aquí se hace referencia expresa a la divulgación en el lugar apropiado, con la advertencia de que esta divulgación también es válida para el anterior procedimiento según la invención.

En una forma preferida de realización, el procedimiento se caracteriza porque la celulasa está presente en la solución de lavado en una concentración de 0,0000004 a 0,0006% en peso, preferiblemente de 0,0000008 a 0,00048% en peso, y/o porque la proteasa está presente en la solución de lavado en una concentración de 0,00009 a 0,0005% en peso, preferiblemente de 0,00015 a 0,00035% en peso, y los datos se refieren a la proteína activa en la solución de lavado. En otra forma preferida de realización, el procedimiento se caracteriza porque se lleva a cabo a una temperatura entre 10°C y 50°C, preferiblemente entre 10°C y 40°C y de modo particularmente preferible entre 20°C y 40°C.

Las proteasas usadas en los productos según la invención pueden usarse ventajosamente en los productos para lavado y limpieza, así como en procedimientos, principalmente los procedimientos de lavado y limpieza, de manera correspondiente a las anteriores formas de realización. Por lo tanto, pueden usarse ventajosamente para proporcionar actividad proteolítica en los productos correspondientes.

Aquí también se divulga el uso de una proteasa,

(a1) que comprende una secuencia de aminoácidos que es idéntica en al menos 80% a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 1 y que tiene el aminoácido ácido glutámico (E) o ácido aspártico (D) en la posición 99 en el listado según SEQ ID NO. 1, o

(a2) que comprende una secuencia de aminoácidos que es idéntica en al menos 80% a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 1 y que tiene el aminoácido asparagina (N) o glutamina (Q) en la posición 99 en el listado según SEQ ID NO. 1, o

(a3) que comprende una secuencia de aminoácidos que es idéntica en al menos 80% a la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID NO. 1 y que tiene el aminoácido alanina (A) o glicina (G) o serina (S) en la posición 99 en el listado según SEQ ID NO. 1 para proporcionar actividad proteolítica en un producto líquido de lavado o limpieza que comprende además una celulasa.

En otra forma de realización, este uso se caracteriza porque la proteasa también tiene al menos uno de los siguientes aminoácidos en el listado según SEQ ID NO. 1:

(a) treonina en la posición 3 (3T),

(b) isoleucina en la posición 4 (4I),

(c) alanina, treonina o arginina en la posición 61 (61A, 61T o 61R),

(d) ácido aspártico o ácido glutámico en la posición 154 (154D o 154E),

(e) prolina en la posición 188 (188P),

(f) metionina en la posición 193 (193M),

(g) isoleucina en la posición 199 (199I),

(h) ácido aspártico, ácido glutámico o glicina en la posición 211 (211 D, 211 E o 211 G),

(i) combinaciones de los aminoácidos (a) a (h).

Otro objeto de la invención es el uso de una proteasa que se selecciona del grupo que consiste en

a. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos como según SEQ ID NO. 3;

b. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos cambiada en al menos una posición en comparación con SEQ ID No .3, y el cambio en el listado según SEQ ID NO. 1 se selecciona del grupo que consiste en:

i. Treonina en la posición 3 (3T),

ii. Isoleucina en la posición 4 (4I),

iii. Alanina, treonina o arginina en la posición 61 (61A, 61T o 61R),

iv. Ácido aspártico o ácido glutámico en la posición 154 (154D o 154E),

v. Prolina en la posición 188 (188P),

vi. Metionina en la posición 193 (193M),

vii. Isoleucina en la posición 199 (199I),

viii. Ácido aspártico, ácido glutámico o glicina en la posición 211 (211 D, 211 E o 211 G),

ix. Combinaciones de los aminoácidos (i) a (viii);

para proporcionar una actividad proteolítica en un producto líquido para lavado o limpieza que comprende además una celulasa.

También se divulga aquí el uso de una proteasa seleccionada del grupo que consiste en

a. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos según SEQ ID NO. 2 o SEQ ID NO. 4 o SEQ ID NO. 5 o SEQ ID NO. 6 o SEQ ID NO. 7 o SEQ ID NO. 8;

b. Proteasa, que comprende una secuencia de aminoácidos cambiada en al menos una posición en comparación con SEQ ID NO. 2 o SEQ ID NO. 4 o SEQ ID NO. 5 o SEQ ID NO. 6 o SEQ ID NO. 7 o SEQ ID NO. 8, y el cambio en el listado según SEQ ID NO. 1 se selecciona del grupo que consiste en:

x. Treonina en la posición 3 (3T),

xi. Isoleucina en la posición 4 (4I),

xii. Alanina, treonina o arginina en la posición 61 (61A, 61T o 61R),

xiii. Ácido aspártico o ácido glutámico en la posición 154 (154D o 154E),

xiv. Prolina en la posición 188 (188P),

xv. Metionina en la posición 193 (193M),

xvi. Isoleucina en la posición 199 (199I),

xvii. Ácido aspártico, ácido glutámico o glicina en la posición 211 (211D, 211E o 211G),

xviii. Combinaciones de los aminoácidos (i) a (viii);

para proporcionar actividad proteolítica en un producto líquido para lavado o limpieza que comprende además una celulasa.

Todos los hechos, objetos y formas de realización que se describen para productos para lavado o limpieza según la invención también son aplicables a las aplicaciones mencionadas. Por lo tanto, en este punto se hace referencia expresa a la divulgación en el sitio correspondiente con la advertencia de que esta divulgación también es válida para los usos anteriores según la invención.

Ejemplo: determinación de la estabilidad durante el almacenamiento de producto líquido para lavado según la invención

Como formulaciones de base para el producto para lavado sirvieron

a) un primer producto líquido para lavado de la siguiente composición (todos los datos en porcentaje en peso): 0,3-0,5% de xantano, 0,2-0,4% de producto antiespumante, 6-7% de glicerina, 0,3-0,5% de etanol, 4-7% de fA e OS (sulfato de éter de alcohol graso), 24-28% de tensioactivos no iónicos, 1% de ácido bórico, 1-2% de citrato de sodio (dihidrato), 2-4% de sosa, 14-16% de ácidos grasos de coco, 0,5 % de HEDP (ácido 1-hidroxietano(1,1-difosfónico)), 0-0,4% de PVP (polivinilpirrolidona), 0-0,05% de abrillantador óptico, 0-0,001% de colorante, el resto de agua desmineralizada. Como celulasa estaba contenido 0,15% en peso de Ecostone N400® (preparación de celulasa de la compañía AB Enzymes).

b) un segundo producto líquido para lavado de la siguiente composición:

Claims (10)

REIVINDICACIONES

1. Producto detergente o de limpieza líquido que comprende

(a) una proteasa que se selecciona del grupo que consiste en

a. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos según SEQ ID NO. 3;

b. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos modificada en al menos una posición en comparación con SEQ ID No .3, en donde el cambio en la numeración según SEQ ID NO. 1 se selecciona del grupo que consiste en:

i. Treonina en la posición 3 (3T),

ii. Isoleucina en la posición 4 (4I),

iii. Alanina, treonina o arginina en la posición 61 (61A, 61T o 61R),

iv. Ácido aspártico o ácido glutámico en la posición 154 (154D o 154E),

v. Prolina en la posición 188 (188P),

vi. Metionina en la posición 193 (193M),

vii. Isoleucina en la posición 199 (199I),

viii. Ácido aspártico, ácido glutámico o glicina en la posición 211 (211D, 211E o 211G),

ix. Combinaciones de los aminoácidos (i) a (viii);

(b) una celulasa.

2. Producto detergente o de limpieza según la reivindicación 1, caracterizado porque la celulasa está contenida en una cantidad del 1 x 10-8 al 5 por ciento en peso, con respecto a la proteína activa y/o porque la proteasa está contenida en una cantidad del 1 x 10-8 al 5 por ciento en peso, con respecto a la proteína activa.

3. Producto detergente o de limpieza según una de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque comprende además un componente que se selecciona de

i. sustancia aniónica y/o polianiónica, y/o

ii. sustancia catiónica y/o policatiónica, y/o

iii. sustancia que presenta grupo(s) de hidroxilo y/o polihidroxilo.

4. Producto detergente o de limpieza según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque comprende al menos otro ingrediente, principalmente uno que se selecciona del grupo compuesto por fosfonato, tensioactivo, secuestrante (builder), disolvente no acuoso, ácido, sal hidrosoluble, espesante y combinaciones de los mismos.

5. Producto detergente o de limpieza según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque comprende al menos otra enzima, principalmente una proteasa, amilase, celulasa, hemicelulasa, mananasa, tanasa, xilanasa, xantanasa, xiloglucanasa, p-glucosidasa, pectinasa, carragenasa, perhidrolasa, oxidasa, oxidoreductasa o una lipasa, así como sus mezclas.

6. Uso de un producto detergente o de limpieza según una de las reivindicaciones 1 a 5 para eliminar suciedad sensible a proteasa sobre textiles o superficies duras.

7. Procedimiento para la limpieza de textiles o superficies duras, caracterizado porque en al menos un paso del procedimiento se aplica un producto detergente o de limpieza según una de las reivindicaciones 1 a 5.

8. Procedimiento según la reivindicación 7, caracterizado porque la celulasa se encuentra en la solución de lavado en una concentración del 0,0000004 al 0,0006 % en peso, y/o porque la proteasa se encuentra en la solución de lavado en una concentración del 0,00009 al 0,0005 % en peso.

9. Procedimiento según las reivindicaciones 7 o 8, caracterizado porque se realiza a una temperatura de entre 10 °C y 50 °C, preferiblemente de entre 10 °C y 40 °C y de modo particularmente preferible de entre 20 °C y 40 °C.

10. Uso de una proteasa que se selecciona del grupo compuesto por

a. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos según SEQ ID NO. 3;

b. Proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos modificada al menos en una posición en comparación con SEQ ID NO. 3, en donde el cambio en la numeración según SEQ ID NO. 1 se selecciona del grupo compuesto por:

i. Treonina en la posición 3 (3T),

ii. Isoleucina en la posición 4 (4I),

iii. Alanina, treonina o arginina en la posición 61 (61A, 61T o 61R),

iv. Ácido aspártico o ácido glutámico en la posición 154 (154D o 154E),

v. Prolina en la posición 188 (188P),

vi. Metionina en la posición 193 (193M),

vii. Isoleucina en la posición 199 (199I),

viii. Ácido aspártico, ácido glutámico o glicina en la posición 211 (211D, 211E o 211G),

ix. Combinaciones de los aminoácidos (i) a (viii);

para proporcionar una actividad proteolítica en un producto detergente o de limpieza líquido, el cual comprende una celulasa.