ES2708965T3 - Compuestos tricíclicos como ligandos del receptor de alfa-7 nicotínico de acetilcolina - Google Patents

Compuestos tricíclicos como ligandos del receptor de alfa-7 nicotínico de acetilcolina Download PDF

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Abstract

Un compuesto seleccionado del grupo que consiste en**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

DESCRIPCION
Compuestos triciclicos como ligandos del receptor de alfa-7 nicotinico de acetilcolina
Antecedentes de la invencion
La divulgacion generalmente se refiere a compuestos, incluidas sus sales, as! como a composiciones y al uso de los compuestos en procedimientos. Los compuestos son ligandos, agonistas y agonistas parciales para el receptor a7 nicotinico y pueden ser utiles para el tratamiento de diversos trastornos del sistema nervioso central, especialmente trastornos afectivos y neurodegenerativos.
La esquizofrenia es un trastorno mental grave, que afecta aproximadamente al 1 % de la poblacion. Su curso progresivo produce un deterioro importante del funcionamiento mental y social y, a menudo, conduce al desarrollo de otras patologlas. La susceptibilidad a menudo se da en familias, tanto con factores geneticos como ambientales que se consideran importantes. Los costes directos e indirectos de la enfermedad se estiman en decenas de billones de dolares anuales solamente en Estados Unidos.
Los pacientes con esquizofrenia tienen un riesgo elevado de suicidio (aproximadamente un 10 % de riesgo de por vida). Tienen un aumento de 2,5 veces en la mortalidad por todas las causas, lo que da como resultado una esperanza de vida un 20 % mas baja. La aparicion de la enfermedad puede dar lugar a una cascada de factores de estilo de vida no saludables y conductas que elevan el riesgo de diversas afecciones y, en consecuencia, el riesgo de muerte.
La aparicion de la esquizofrenia se produce con mayor frecuencia en la adolescencia tardla o en la adultez temprana, y los episodios se repiten a lo largo de toda la vida. La enfermedad se caracteriza por la expresion de tres dominios de slntomas distintos: positivos, negativos y cognitivos. Los slntomas psicoticos o positivos incluyen delirios, alucinaciones, trastorno del pensamiento y paranoia. Los slntomas negativos incluyen afecto negativo, aislamiento social y anhedonia. La disfuncion cognitiva incluye deficit en la atencion, la memoria de trabajo y la funcion ejecutiva. La fisiopatologla de la esquizofrenia no se entiende bien, sin embargo, la mayorla de los expertos creen que es un trastorno multifactorial en el que los factores biologicos, geneticos y ambientales desempenan un papel. La mayorla de las terapias actuales se dirigen al sistema dopaminergico y han dado como resultado la sugerencia de que un exceso de neurotransmision dopaminergica subyace al menos en algunos aspectos de la esquizofrenia. Esta teoria recibio mas apoyo de los hallazgos de que los farmacos que aumentan los niveles de dopamina causan psicosis similares a los sintomas positivos de la enfermedad. Asimismo, el analisis post-mortem de cerebros de pacientes esquizofrenicos indica un aumento en el numero de receptores de dopamina D2. Aunque en la ultima decada se han introducido agentes antipsicoticos mas nuevos, conocidos como antipsicoticos atipicos, que son activos en varios receptores de neurotransmisores adicionales, estos agentes todavia comparten la eficacia contra el receptor de dopamina D2. Todos los agentes actualmente utilizados tambien tienen limitaciones importantes. Aunque los sintomas positivos generalmente se reducen en la mayoria de los pacientes, estos farmacos hacen poco para aliviar los sintomas negativos y los deficit cognitivos que son comunes y, a menudo, mas debilitantes. Ademas, los agentes antipsicoticos tienen una serie de efectos secundarios no deseados y limitantes.
La nicotina es uno de los pocos agentes que tiene un efecto positivo sobre la funcion cognitiva. Muchos esquizofrenicos fuman; la tasa en los pacientes es de 2-4 veces mayor que la de la poblacion general, y hasta el 90 % de los esquizofrenicos que han sido institucionalizados fuma. Este habito de fumar se ha caracterizado como una forma de automedicacion.
Los receptores nicotinicos de acetilcolina (nAChR) son canales ionicos pentamericos regulados por ligando que se expresan ampliamente a traves del sistema nervioso central y periferico. Estos canales son canales de calcio de desensibilizacion rapida que, cuando estan abiertos, aumentan la concentracion intracelular del ion Ca++. Aunque hay 12 receptores individuales, los receptores nicotinicos mas abundantes en el cerebro son a4p2 y a7. El complejo a4p2 ha sido identificado como el sitio de nicotina de "alta afinidad". El receptor a-pentamerico a7 se une selectivamente al producto natural, a-bungarotoxina, que ha permitido su localizacion y medicion de forma relativamente facil. El receptor a7 se expresa principalmente en la corteza, el hipocampo y las regiones limbicas subcorticales y comunmente se produce de forma presinaptica. La localizacion de nAChR a7 en areas implicadas en el aprendizaje y la memoria ha conducido a estudios que utilizan tanto ratones desnudos como manipulation farmacologica. Esta involucrada en el control sensorial, la memoria y la plasticidad neuronal. Los agonistas de alfa-7 han demostrado que aumentan la liberation de neurotransmisores en roedores, incluyendo dopamina, serotonina, glutamato y GABA. Se ha demostrado que los compuestos que se unen selectivamente al receptor a7, tales como agonistas de a7 y agonistas parciales, mejoran las funciones de aprendizaje y memoria en animales normales y ancianos, los deficit de memoria inducidos por escopolamina inversa, deficit inversos en la cognition inducidos por antagonistas de NMDA, deficit inversos de regulation inducida farmacologicamente, por ejemplo, interruption de regulation inducida por anfetaminas, y poseen algunas propiedades ansioliticas. Se espera que los agonistas a7 de la presente invencion sean utiles en el tratamiento de la esquizofrenia y los trastornos cognitivos asociados a la esquizofrenia.
La enfermedad de Alzheimer es un trastorno neurodegenerativo progresivo, que da como resultado la perdida general de las funciones cognitivas. La incidencia aumenta con la edad, en la medida en que se estima que entre el 25 % y el 50 % de todas las personas mayores de 85 padecen algun grado de demencia. Un diagnostico de Alzheimer implica que la esperanza de vida restante se reduce a la mitad, en comparacion con los adultos normales.
Los signos cllnicos de la enfermedad de Alzheimer son deterioro cognitivo progresivo, capacidad reducida para realizar las actividades de la vida diaria y slntomas neuropsiquiatricos o cambios de comportamiento. En las etapas avanzadas de la enfermedad, el deterioro de la musculatura y la movilidad pueden llevar a la incapacidad de alimentarse y, finalmente, a que el paciente quede postrado en la cama. El lenguaje se vuelve gravemente desorganizado y despues se pierde del todo. Los pacientes no pueden realizar ni siquiera tareas simples de forma independiente y requieren una supervision constante. El coste de la atencion institucional representa casi el 70 % del coste de la enfermedad. Por lo tanto, son muy necesarias las terapias que aumentan la funcion cognitiva y retrasan la institucionalizacion.
Se ha demostrado en varios estudios que la enfermedad de Alzheimer va acompanada de una reduccion en los receptores nicotlnicos en la corteza y el hipocampo. Se ha informado que las inyecciones de nicotina o los parches cutaneos de nicotina mejoran significativamente la atencion, la memoria y el aprendizaje en pacientes con enfermedad de Alzheimer. Si bien hay una perdida progresiva de receptores nicotlnicos durante el curso de la enfermedad de Alzheimer, las neuronas a7 se salvan relativamente, en comparacion con los receptores a4 mas abundantes. Recientemente, se ha demostrado que la administracion de agonistas de a7 nicotlnicos selectivos aumenta el funcionamiento cognitivo en pacientes con Alzheimer cuando se administran hasta 8 semanas. Estos datos cllnicos son consistentes con los datos precllnicos que muestran que los agonistas de a7 y agonistas parciales mejoran las funciones de aprendizaje y memoria en animales normales y ancianos, y los deficit inversos de memoria inducidos por escopolamina. Por tanto, los compuestos de la presente invencion pueden ser utiles en el tratamiento y la prevencion de la enfermedad de Alzheimer. Se ha demostrado que el peptido amiloide Ap42 se une al receptor nicotlnico a7 (Wang et. al., J. Biol. Chem., 2000, 275:5626-5632; J. Neurochem. 2000 75:1155-1161). Esta asociacion puede facilitar la agregacion de Ap42, que se cree que es importante en los efectos toxicos de Ap42, y tambien puede causar la regulacion alterada de la senalizacion a traves de receptores nicotlnicos a7. La delecion del gen del receptor a7 mejora los deficit cognitivos y la patologla sinaptica en un modelo de raton de la enfermedad de Alzheimer (Dziewczapolski et al., J. Neuroscience, 2009, pag. 8805-8815). Los compuestos de la presente invencion pueden alterar la interaccion de los receptores Ap42 y a7. El tratamiento con agonistas de a7 y agonistas parciales puede representar un enfoque para la modificacion de la enfermedad de Alzheimer. Los receptores alfa-7 tambien pueden mediar procesos inflamatorios en afecciones neurodegenerativas, tal como la enfermedad de Alzheimer (Conejero-Goldberg et al., Neurosci. and Biobehav. Rev., 2008, 32, pag. 693-706). Los agonistas de a7 y agonistas parciales de la presente invencion pueden ser utiles para reducir la inflamacion en enfermedades y trastornos neurodegenerativos, tal como la enfermedad de Alzheimer.
Tambien se ha demostrado que el receptor a7 esta involucrado en la reduccion de la inflamacion a traves del nervio vago. Ademas, el receptor a7 se expresa en sinoviocitos de pacientes con AR y OA, y se ha demostrado que los agonistas de a7 inhiben la cascada proinflamatoria que se produce en la articulacion reumatoide (Waldberger et al., Arthritis y Rheumatism, vol. 58, pag. 3439-3449). Por tanto, los compuestos de la presente invencion pueden ser utiles en el tratamiento de afecciones inflamatorias, tales como artritis reumatoide y osteoartritis.
Los receptores nicotlnicos que contienen la subunidad a7 estan presentes en los mastocitos de la mucosa que se sabe que estan implicados en la hipersensibilidad gastrointestinal (Kageyama-Yahara et al., Biochem and Biophys. Research Commun., 2008, v. 377, pp321-325). El agonista de a7 GTS-21 inhibe la desgranulacion inducida por antlgeno de los mastocitos de la mucosa, lo que sugiere que los agonistas de a7 pueden ser utiles en el tratamiento de afecciones intestinales hipersensibles, tal como colitis ulcerosa.
En un informe reciente (Marrero et al., JPET Fast Forward, lunes, 28 de septiembre de 2009, DOI: 10,1124/jpet.109.154633), se demostro que un agonista de a7 disminuye el aumento de peso y la ingesta de alimentos y reduce los niveles plasmaticos elevados de trigliceridos, glucosa, hemoglobina glucosilada y TNFa en un modelo de raton de diabetes tipo II (ratones db/db que tienen deficit en los receptores de leptina). Los agonistas de a7 y los agonistas parciales de la presente invencion pueden ser utiles en el tratamiento de la diabetes.
El documento WO 2007/024814 describe diazatriciclalcanos sustituidos con heteroarilo y su uso como moduladores de los subtipos especlficos de receptores nicotlnicos, tales como a7.
Las siguientes referencias proporcionan revisiones generales del sistema del receptor nicotlnico y los receptores y ligandos a7: Picciotto y Zoli, J. Neurobio. (2002) 53:641-655; Brening, et al, Ann. Reports in Med. Chem. (2005) 40:3­ 16; Dani y Bertrand, Ann. Rev. Pharm. Tox. (2007) 47:699-729; Olincy y Stevens, Biochem. Pharmacol. (2007) 74:1192-1201; ancho, et al. Drugs Future (2007) 32 (2): 161-70; de Jonge y Ulloa, Brit. J. Pharmacol. (2007) 151:915-929; Romanelli, et al, ChemMedChem (2007) 2(6):746-767; Lightfoot et al., Progress en Medicinal Chemistry (2008), v 46, pag. 131-171; Concotta et al., Current Opinion en Investigational Drugs (2008), v 9, pp 47­ 56; Leiser et al., Pharmacol. and Therapeutics (2009), doi:10:1016/j.pharmthera.2009.03.009).
La invencion proporciona ventajas tecnicas, por ejemplo, los compuestos son novedosos y son ligandos para el receptor a7 nicotmico, y pueden ser utiles para el tratamiento de diversos trastornos del sistema nervioso central, especialmente trastornos afectivos y neurodegenerativos. Adicionalmente, los compuestos proporcionan ventajas para usos farmaceuticos, por ejemplo, con respecto a uno o mas de sus mecanismos de accion, union, eficacia de inhibicion, objetivo de selectividad, solubilidad, perfiles de seguridad o biodisponibilidad.
Descripcion de la invencion
La invencion abarca compuestos de la invencion, incluyendo sales farmaceuticamente aceptables, y composiciones y el uso de los compuestos en procedimientos de tratamiento. Los compuestos pueden ser utiles para el tratamiento de diversos trastornos del sistema nervioso central:
El alcance de la invencion se define en las reivindicaciones. Por tanto, la invencion reivindicada se refiere a un compuesto seleccionado de entre el grupo que consiste en
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o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realizacion preferida, la invencion reivindicada se refiere a un compuesto seleccionado de entre el grupo que consiste en
Figure imgf000005_0002
Figure imgf000006_0002
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. Tambien se desvela en el presente documento un compuesto de formula I, o un estereoisomero del mismo,
Figure imgf000006_0001
donde:
Ar1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, pirrolilo, furanilo, tienilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, imidazolilo, oxazolilo, tiazolilo, triazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, naftalenilo, indolilo, indazolilo, benzofuranilo, dihidrobenzofuranilo, benzodioxolanilo, benzotiofenilo, dihidrobenzotiofenilo, benzoisotiazolilo, benzotiazolilo, tienopirazinilo, pirrolopiridinilo, pirrolotriazinilo, benzoisoxazolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, quinoxalinilo, y naftiridinilo, y esta sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en ciano, halo, alquilo, haloalquilo, cicloalquilo, alcoxi, haloalcoxi, alquiltio, y Ar;
Ar2 es fenilo sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados de ciano, halo, alquilo, haloalquilo, alcoxi, y haloalcoxi; y
m es 2 y n es 1; o
m es 1 y n es 2; o
m es 0 y n es 3;
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Adicionalmente, se desvela un compuesto de formula I, donde:
Ar es fenilo, pirazolilo, indolilo, indazolilo, pirazolopiridinilo, benzofuranilo, tiofenilo, benzoisoxazolilo, benzotiofenilo, o quinolinilo, y esta sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados de entre el grupo que consiste en ciano, halo, alquilo, haloalquilo, cicloalquilo, alcoxi, haloalcoxi, alquiltio, y Ar2; y
Ar2 es fenilo sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados de ciano, halo, alquilo, haloalquilo, alcoxi, y haloalcoxi;
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Adicionalmente, se desvela un compuesto de formula I, donde Ar1 es fenilo, pirazolilo, indolilo, indazolilo, pirazolopiridinilo, benzofuranilo, tiofenilo, benzoisoxazolilo, benzoisotiazolilo, o isoquinolinilo, y esta sustituido con 0-1 sustituyentes seleccionados de entre halo, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, y Ar2; y Ar2 es fenilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Adicionalmente, se desvela un compuesto de formula I, donde m es 2 y n es 1.
Adicionalmente, se desvela un compuesto de formula I, donde m es 1 y n es 2.
Adicionalmente, se desvela un compuesto de formula I, donde m es 0 y n es 3.
Adicionalmente, se desvela un compuesto de la formula I donde Ar1 es indazolilo sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en ciano, halo, alquilo, haloalquilo, cicloalquilo, alcoxi, y haloalcoxi; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Para un compuesto de formula I, el alcance de cualquier caso de un sustituyente variable, incluyendo Ar1, Ar2, m y n, puede usarse independientemente con el alcance de cualquier otro caso de un sustituyente variable. Como tal, la invencion incluye combinaciones de los diferentes aspectos.
A menos que se especifique otra cosa, estos terminos tienen los siguientes significados. "Halo" incluye fluor, cloro, bromo y yodo. "Alquilo" significa un grupo alquilo lineal o ramificado compuesto de 1 a 6 carbonos. "Alquenilo" significa un grupo alquilo lineal o ramificado compuesto de 2 a 6 carbonos con al menos un doble enlace. "Alquinilo" significa un grupo alquilo lineal o ramificado compuesto por 2 a 6 carbonos con al menos un triple enlace. "Cicloalquilo" significa un sistema de anillo monoclclico compuesto de 3 a 7 carbonos. "Haloalquilo" y "haloalcoxi" incluyen todos los isomeros halogenados de monohalo a perhalo. Los terminos con un resto hidrocarburo (por ejemplo, alcoxi) incluyen isomeros lineales y ramificados para la porcion de hidrocarburo. "Arilo" significa grupos de hidrocarburo aromatico monoclclicos o biclclicos que tienen de 6 a 12 atomos de carbono, o un sistema de anillo condensado biclclico en el que uno o ambos anillos son un grupo fenilo. Los sistemas anulares condensados biclclicos consisten en un grupo fenilo fusionado a un anillo aromatico (por ejemplo, naftilo) o no aromatico (por ejemplo, indanilo, indenilo, tetrahidronaftilo) carboclclico de cuatro a seis miembros. "Heteroarilo" significa un sistema de anillo aromatico monoclclico de 5 a 7 miembros o biclclico de 8 a 11 miembros con 1-5 heteroatomos seleccionados independientemente entre nitrogeno, oxlgeno y azufre. Los terminos parentetico y multiparentetico estan destinados a aclarar las relaciones de enlace a los expertos en la materia. Por ejemplo, un termino tal como ((R)alquilo) significa un sustituyente alquilo adicionalmente sustituido con el sustituyente R.
La invencion incluye todas las formas de sal farmaceuticamente aceptables de los compuestos de la invencion. Las sales farmaceuticamente aceptables son aquellas en las que los contraiones no contribuyen significativamente a la actividad fisiologica o a la toxicidad de los compuestos y, como tales, funcionan como equivalentes farmacologicos. Estas sales se pueden preparar de acuerdo con tecnicas organicas comunes que emplean reactivos disponibles en el mercado. Algunas formas de sales anionicas incluyen acetato, acistrato, besilato, bromuro, cloruro, citrato, fumarato, glucuronato, bromhidrato, clorhidrato, yodhidrato, yoduro, lactato, maleato, mesilato, nitrato, pamoato, fosfato, succinato, sulfato, tartrato, tosilato y xinofoato. Algunas formas de sales cationicas incluyen amonio, aluminio, benzatina, bismuto, calcio, colina, dietilamina, dietanolamina, litio, magnesio, meglumina, 4-fenilciclohexilamina, piperazina, potasio, sodio, trometamina y cinc.
Algunos de los compuestos de la invencion existen en formas estereoisomericas. La invencion incluye todas las formas estereoisomericas de los compuestos de la invencion, incluyendo enantiomeros y diastereomeros. Los metodos para fabricar y separar estereoisomeros se conocen en la tecnica.
La invencion pretende incluir todos los isotopos de atomos que aparecen en los compuestos de la invencion. Los isotopos incluyen aquellos atomos que tienen el mismo numero atomico pero diferentes numeros masicos. A modo de ejemplo general y sin limitacion, los isotopos de hidrogeno incluyen deuterio y tritio. Los isotopos de carbono incluyen 13C y 14C. Los compuestos marcados isotopicamente de la invencion se pueden preparar generalmente por tecnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia o por procedimientos analogos a los descritos en el presente documento, usando un reactivo marcado isotopicamente apropiado en lugar del reactivo no marcado empleado de otro modo. Dichos compuestos pueden tener diversos usos potenciales, por ejemplo, como patrones y reactivos para determinar la actividad biologica. En el caso de los isotopos estables, dichos compuestos pueden tener el potencial de modificar favorablemente las propiedades biologicas, farmacologicas o farmacocineticas.
Metodos de slntesis
Los compuestos se pueden preparar mediante metodos conocidos en la tecnica, incluyendo los descritos a continuacion y que incluyen variaciones dentro de la experiencia de la tecnica. Algunos reactivos e intermedios son conocidos en la tecnica. Se pueden preparar otros reactivos e intermedios mediante metodos conocidos en la tecnica usando materiales comercializados. Las variables (por ejemplo, los sustituyentes "R" numerados) usados para describir la slntesis de los compuestos estan destinados solo a ilustrar como fabricar los compuestos y no deben confundirse con las variables usadas en las reivindicaciones o en otras secciones de la memoria descriptiva. Los siguientes metodos son para fines ilustrativos y no pretenden limitar el alcance de la invencion.
Algunos de los compuestos pueden prepararse usando las reacciones y tecnicas descritas en esta seccion. Las reacciones se realizan en disolventes apropiados para los reactivos y materiales empleados y son adecuados para las transformaciones que se realizan. Un experto en la tecnica de la slntesis organica entendera que la funcionalidad presente en diversas porciones de la molecula debe ser compatible con los reactivos y reacciones propuestos. Dichas restricciones a los sustituyentes que son compatibles con las condiciones de reaccion seran facilmente evidentes para un experto en la tecnica y deben usarse entonces metodos alternativos.
Las abreviaturas usadas en los esquemas generalmente siguen las convenciones usadas en la tecnica. Las abreviaturas qulmicas usadas en la memoria descriptiva y los ejemplos se definen del modo siguiente: "NaHMDS" para bis(trimetilsilil)amida sodica; "DMF" para N,N-dimetilformamida; "MeOH" para metanol; "NBS" para N-bromosuccinimida; "Ar" para arilo; "TFA" para acido trifluoroacetico; "LAH" para hidruro de litio y aluminio; "BOC" para t-butoxicarbonilo, "DMSO" para dimetilsulfoxido; "h" para horas; "ta" para temperatura ambiente; "tr" para tiempo de retencion; "min" para minutos; "EtOAc" para acetato de etilo; "THF" para tetrahidrofurano; "EDTA" para acido etilendiaminatetraacetico; "Et2O" para eter dietllico; "DMAP" para 4-dimetilaminopiridina; "DCE" para 1,2-dicloroetano; "ACN" para acetonitrilo; "DME" para 1,2-dimetoxietano; "HOBt" para hidrato de 1-hidroxibenzotriazol; "DIEA" para diisopropiletilamina, "Nf" para CF3(CF2)3SO2-; y "TMOF" para trimetilortoformiato.
Las abreviaturas como se usan en el presente documento, se definen de la siguiente manera: "1 x" para una vez, “2 x” para dos veces, "3 x" para tres veces, "°C" para grados Celsius, "equiv." para equivalente o equivalentes, "g" para gramo o gramos, "mg" para miligramo o miligramos, "l" para litro o litros, " ml" para mililitro o mililitros, "pl" para microlitro o microlitros, "N" para normal, "M" para molar, "mmol" para milimol o milimoles, "min" para minuto o minutos, "h" para hora u horas, "t.a." para temperatura ambiente, "TR" para tiempo de retencion, "atm" para atmosfera, "kpa, (psi)" para kilopascal (libras por pulgada cuadrada), "conc." para concentrado, "sat." para saturado, "PM" para peso molecular, "pf" para punto de fusion, "e.e." para exceso enantiomerico, "MS" o "Espec. de masas" para espectrometrla de masas, "ESI" para espectroscopia de masas con ionizacion por electronebulizacion, "HR" para alta resolucion, "HREM" para espectrometrla de masas de alta resolucion, "LCMS" para cromatografla llquida con espectrometrla de masas, "HPLC" para cromatografla llquida de alta presion, "HPLC FI" para HPLC de fase inversa, "TLC" o "tlc" para cromatografla en capa fina, "RMN" para espectroscopia de resonancia magnetica nuclear, "1H" para proton, "5" para delta, "s" para singlete, "d" para doblete, "t" para triplete, "c" para cuadruplete, "m" para multiplete, "a" para ancho, "Hz" para hercio y "a", “p”, “R”, “S”, "E" y "Z" son denominaciones estereoqulmicas familiares para un experto en la materia.
Esquema 1.
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Los compuestos de Formula I pueden prepararse como se ilustra en el Esquema de Reaccion 1. El aldehfdo de Formula A1 es conocido y puede prepararse por metodos conocidos por los expertos en la tecnica. La yodopiridina de Formula A1 se puede convertir en el azaindol de Formula A3 mediante reaccion con eter de bencilpropargilo en presencia de catalizadores de paladio y cobre, seguido de ciclacion con una base, tal como DBU, y reproteccion del indol con un grupo protector tal como un grupo Boc. Como alternativa, la yodopiridina A1 se puede convertir en el azaindol A3 directamente mediante la eleccion adecuada de las condiciones de reaccion tras el tratamiento con eter de bencilpropargilo en presencia de catalizadores de paladio y cobre. El azaindol A3 se puede convertir en piperidina A4 por hidrogenacion sobre catalizadores de paladio y/o platino. El compuesto de formula A4 puede convertirse en el compuesto de formula A5 mediante tratamiento con cloroformiato de bencilo. La conversion del grupo alcohol en el compuesto A5 en un grupo saliente bueno, por ejemplo, un tosilato, puede lograrse con una serie de condiciones conocidas por os expertos en la tecnica, por ejemplo, mediante tratamiento con cloruro de tosilo en piridina. El tosilato A6 se puede ciclar a triciclo A7 por hidrogenolisis sobre un catalizador, por ejemplo, paladio sobre carbono, seguido de tratamiento con base, por ejemplo carbonato potasico, y calentamiento.
La escision del grupo Boc que se encuentra en el triciclo A7, que proporciona la amina A8, puede realizarse por metodos conocidos por los expertos en la tecnica, por ejemplo, tratamiento con acido trifluoroacetico o cloruro de hidrogeno. La conversion de A8 en compuestos de Formula 1 se puede realizar mediante diversos metodos conocidos por los expertos en la tecnica, por ejemplo, mediante tratamiento con el acido carboxflico apropiado, un reactivo de acoplamiento de amida, tal como HATU o EDC, y una base de amina, tal como trietilamina o diisopropiletilamina.
Esquema 2.
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Los compuestos de Formula I pueden prepararse como se ilustra en el Esquema de Reaccion 1. El aldehfdo de Formula D1 es conocido y puede prepararse por metodos conocidos por los expertos en la tecnica. La yodopiridina de Formula B1 se puede convertir en el azaindol de Formula B2 mediante reaccion con e'ter de bencilpropargilo en presencia de catalizadores de paladio y cobre. El azaindol B2 se puede convertir en piperidina B3 por hidrogenacion sobre catalizadores de paladio o platino.
El compuesto de formula B3 puede convertirse en el compuesto de formula B4 mediante tratamiento con cloroformiato de bencilo. La conversion del grupo alcohol en el compuesto D4 en un grupo saliente bueno, por ejemplo, un tosilato, puede lograrse con una serie de condiciones conocidas por os expertos en la tecnica, por ejemplo, mediante tratamiento con cloruro de tosilo en piridina. El tosilato B5 se puede ciclar a triciclo D6 por hidrogenolisis sobre un catalizador, por ejemplo, paladio sobre carbono, seguido de tratamiento con base, por ejemplo carbonato potasico, y calentamiento.
La escision del grupo Boc que se encuentra en el triciclo B6, que proporciona la amina B7, puede realizarse por metodos conocidos por los expertos en la tecnica, por ejemplo, tratamiento con acido trifluoroacetico o cloruro de hidrogeno. La conversion de B7 en compuestos de Formula 1 se puede realizar mediante diversos metodos conocidos por los expertos en la tecnica, por ejemplo, mediante tratamiento con el acido carboxflico apropiado, un reactivo de acoplamiento de amida, tal como HATU o EDC, y una base de amina, tal como trietilamina o diisopropiletilamina.
Los compuestos homoquirales de las formulas 1a o 1b se pueden preparar mediante cromatograffa de fluidos supercrfticos en una columna quiral, bien en la etapa del compuesto final o en una etapa intermedia, tal como el compuesto B4 o B5.
Esquema 3.
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Los compuestos de Formula I pueden prepararse como se ilustra en el Esquema de Reaccion 1. La bromopiridina de Formula C1 es conocida y puede prepararse por metodos conocidos por los expertos en la tecnica. La bromopiridina de Formula C1 se puede convertir en el azaindol de Formula C2 mediante reaccion con e'ter de bencilpropargilo en presencia de catalizadores de paladio y cobre. El azaindol C2 se puede convertir en piperidina C3 por hidrogenacion sobre catalizadores de paladio y/o platino.
El compuesto de formula C3 puede convertirse en el compuesto de formula C4 mediante tratamiento con cloroformiato de bencilo. La conversion del grupo alcohol en el compuesto C4 en un grupo saliente bueno, por ejemplo, un tosilato, puede lograrse con una serie de condiciones conocidas por os expertos en la tecnica, por ejemplo, mediante tratamiento con cloruro de tosilo en piridina. El tosilato C5 se puede ciclar a triciclo C6 por hidrogenolisis sobre un catalizador, por ejemplo, paladio sobre carbono, seguido de tratamiento con base, por ejemplo carbonato potasico, y calentamiento.
La escision del grupo Boc que se encuentra en el triciclo C6, que proporciona la amina C7, puede realizarse por metodos conocidos por los expertos en la tecnica, por ejemplo, tratamiento con acido trifluoroacetico o cloruro de hidrogeno. La conversion de C7 en compuestos de Formula 1 se puede realizar mediante diversos metodos conocidos por los expertos en la tecnica, por ejemplo, mediante tratamiento con el acido carboxllico apropiado, un reactivo de acoplamiento de amida, tal como HATU o EDC, y una base de amina, tal como trietilamina o diisopropiletilamina.
Metodos biologicos
I) Union al receptor nicotfnico a7 de acetilcolina. Las membranas se prepararon para la union usando celulas HEK293 que expresaban de forma estable el receptor de acetilcolina nicotlnico a7 de rata (nAChR a7 de rata). Las celulas se homogeneizaron a 4 °C en tampon de lisis hipotonico que consistla en Tris 10 mM (pH 7,4), EDTA 5 mM e inhibidores de proteasa y se centrifugaron a 32.000 xg durante 20 minutos. El sedimento se lavo una vez en tampon de lavado de membrana que consistla en Tris 50 mM (pH 7,4), EDTA 1 mM e inhibidores de proteasa y se centrifugaron a 32.000 xg durante 20 minutos. A continuation, este sedimento se suspendio en tampon de ensayo que consistla en KH2PO450 mM (pH 7,4 a 25 °C), EDTA 1 mM, Triton-X 100 al 0,005 % y coctel inhibidor de proteasa de Sigma al 0,1 % (v/v). Despues, las allcuotas se congelaron en hielo seco/etanol y se mantuvieron a -80 °C hasta el dla del ensayo.
II) Un a-7 de ensayo basado en fluorescencia sensible a Ca2+ para la funcion del canal del receptor nicotfnico de acetilcolina en celulas de mamffero ("FLIPR"). Resumen: Los compuestos principales se evaluan para determinar la actividad agonista en los subtipos a-7, a3p4, a4ap2 y a1p151e de los canales ionicos del receptor nicotlnica de ACh expresados en celulas HEK 293 de mamlfero. Los valores de potencia y eficacia agonista se determinan a partir de mediciones de afluencia de Ca2+ de fluorescencia cinetica realizadas usando un FLIPR de 384 pocillos (lector de placas de imagen de fluorescencia). La utilidad de los indicadores fluorescentes para medir los cambios en las concentraciones de cationes divalentes intracelulares, particularmente Ca2+, para los esfuerzos de descubrimiento de farmacos esta bien documentada (Rudiger, R., et al., Nature Reviews. 2003, 4:579-586; Gonzalez J.E., et al., Receptors y Channels. 2002 8:283-295). En este ensayo, las llneas celulares HEK que expresan el canal sembradas en placas de ensayo de 384 pocillos se cargan con un colorante indicador de Ca2+ fluorescente permeable a la membrana, cuya senal de emision verde de 510 nm aumenta en respuesta a la elevacion de la concentration de Ca2+ intracelular. La fluorescencia basal de las celulas se controla en tiempo real, seguida de la adicion aguda de compuestos de ensayo. Si el compuesto es un agonista en cualquiera de los canales de cationes no selectivos, estos ultimos se abren y permiten el movimiento de los iones de Ca2+ extracelulares en el citoplasma celular, donde se unen al tinte indicador de Ca2+, y producen un aumento en la senal de salida de fluorescencia, que se detecta mediante una camara de imagenes CCD enfriada.
Materiales y metodos: Reactivos: El ester de acetometoxi (AM) del tinte indicador de Ca2+ Fluo-4 se obtuvo en InVitrogen, (Carlsbad, CA). La acetilcolina y todos los constituyentes del tampon se adquirieron en Sigma Chemical Company, St. Louis, MO. G418 y el medio mlnimo esencial se adquirieron en InVitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA. El suero fetal de ternera se adquirio en (InVitrogen, Carlsbad, CA).
Cultivo celular: Las celulas HEK-293 se cultivaron en medio esencial mlnimo que contenla suero fetal de ternera al 10 % (v/v) a 37 °C en una incubadora con 5 % de CO2. Las celulas HEK-293 que expresan de forma estable los canales ionicos se cultivaron en el mismo medio con la adicion de 500 pg/ ml de G418.
Ensayos de flujo de Ca2+ de los canales de Ca2+ expresados en celulas HEK-293: Las celulas HEK-293 que expresan los canales ionicos de interes se colocaron en placas revestidas de 384 pocillos, de pared negra, de fondo claro, revestidas con poli-D-lisina a una densidad de ~20,000 celulas/pocillo en 20 pl de medio esencial mlnimo que contenla suero fetal de ternera al 10 % (v/v) y se incubaron durante 2 dlas a 29 °C en una incubadora de CO2 al 5 %. Antes del ensayo, las celulas se cargaron con el ester Fluo-4 AM. La carga celular se realizo eliminando el medio de cultivo y reemplazandolo con 30 (pl/pocillo del ester de AM del tinte (5 pM) mezclado con solution salina equilibrada de Hanks (n.° 14175-095) que contenla HEPES 20 mM, probenecid 2,5 mM, CaCl20,5 mM, MgCl21 mM y atropina 10 pM. Se dejo que la carga de tinte continuara durante 90 minutos a temperatura ambiente, en cuyo momento se elimino la solucion de carga de tinte y se reemplazo con 40 pl/pocillo de tampon de Hanks. Las celulas cargadas con tinte se cargaron en un FLIPR384 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Se excito el tinte Fluo-4 usando la llnea de 488 nm de un laser de argon. La emision se filtro usando un filtro de paso de banda de 540 /- 30 nm. Para la evaluation de los efectos de los compuestos de ensayo usando el ensayo de flujo de Ca2+, los compuestos a ensayar se proporcionaron en placas preparadas para ensayo. Para las celulas que expresan el canal ionico receptor nicotlnico, el ensayo se inicio mediante la adicion de 20 pl/pocillo de tampon de Hanks que contenla los compuestos de ensayo. Para todos los ensayos, los datos se recogieron a 1 Hz durante 10 segundos (valor inicial), momento en el que se anaden los tampones de estlmulo que contienen el compuesto, y se recogen mediciones adicionales a 0,33 Hz durante 3 minutos.
Analisis de datos: la solidez estadlstica de los ensayos de flujo de Ca2+ del receptor nicotlnico se determina a partir de los blanco y los pocillos totales. Los pocillos totales definen la activation maxima del canal para cada placa de ensayo de compuesto (dosis maxima eficaz de acetilcolina), y los pocillos blancos que contienen solo DMSO emparejado, definen la activacion de canal cero. Los archivos de datos de las unidades de fluorescencia en bruto generados en el lector de placas FLIPR se exportan y procesan automaticamente mediante herramientas internas de analisis de datos. Los datos de porcentaje de activacion reducido para cada concentracion de compuesto de ensayo se ajustan usando el motor de ajuste MathIQ (ID Business Solutions Limited, Surrey, Reino Unido). Los datos se analizaron ajustando las amplitudes maximas de cambio en la fluorescencia, para el flujo de Ca2+ para una condition dada del compuesto de ensayo. Las potencias (valores de CE50) de los compuestos se calculan a partir del promedio de tres pocillos de ensayo de un CRC de veinte puntos. Los valores de eficacia de los compuestos de ensayo (valores Ymax) se expresan en relation con una respuesta maxima a la acetilcolina en los pocillos totales.
III) Ensayo de cuantificacion de Fos: Se tratan ratas Wistar macho con farmaco (1-10 mg/kg) o vehlculo (2 ml/kg, sc). Dos horas despues de los tratamientos, las ratas se decapitan rapidamente y las regiones discretas del cerebro de interes se alslan en hielo, se pesan y se congelan rapidamente con nitrogeno llquido y se almacenan a -80 grados C. El procesamiento adicional del tejido cerebral para extractos nucleares, as! como para la cuantificacion de Fos, son segun el protocolo prescrito por un kit de detection de quimioluminiscencia basado en ELISA disponible comercialmente (catalogo n.° 89860, EZ-detect c-Fos Trans kit, Pierce Biotechnology Inc., Rockford, IL).
IV) Ensayo de cambio de ajuste alterado por MK-801 en ratas: Este ensayo usa una modification del protocolo descrito por Stefani et al. (Behavioral Neuroscience. 2003, 117:728-737). Los compuestos de ensayo se evaluan en cuanto a su capacidad para revertir un deficit de rendimiento inducido por MK-801 (0,03 mg/kg, i.p., dosis unica) en este ensayo.
La actividad de los compuestos descritos y ensayados en el ensayo anterior (II) se proporciona en las Tablas 1-4.
Tabla 1.
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Tabla 2.
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Tabla 3.
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Tabla 4.
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Tabla 5.
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Composiciones farmaceuticas y metodos de tratamiento
Los compuestos de formula I se unen al receptor nicotinico alfa7 de acetilcolina y pueden ser utiles en el tratamiento de trastornos afectivos y trastornos neurodegenerativos. Por lo tanto, otro aspecto de la invencion es una composicion que comprende un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y un vehfculo farmaceuticamente aceptable.
Otro aspecto de la invencion es el uso de un compuesto de la invencion en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de trastornos afectivos o trastornos neurodegenerativos.
Otro aspecto de la invencion es el uso de un compuesto de la invencion en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de la esquizofrenia o enfermedad de Alzheimer.
Otro aspecto de la invencion es un compuesto de la invencion para su uso en un metodo para tratar trastornos afectivos o trastornos neurodegenerativos que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion.
Otro aspecto de la invencion es un compuesto de la invencion para su uso en un metodo para el tratamiento de la esquizofrenia o la enfermedad de Alzheimer que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion.
Otro aspecto de la invencion es un compuesto de la invencion para su uso en un metodo para el tratamiento de la esquizofrenia que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion.
Otro aspecto de la invencion es un compuesto de la invention para su uso en un metodo para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion.
Otro aspecto de la invencion es un compuesto de la invencion para su uso en un metodo para el tratamiento de la trastornos cognitivos que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion.
Otro aspecto de la invencion es un compuesto de la invencion para su uso en un metodo para el tratamiento de la artritis reumatoide que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion.
Otro aspecto de la invencion es un compuesto de la invencion para su uso en un metodo para el tratamiento de la artrosis que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion.
Otro aspecto de la invencion es un compuesto de la invencion para su uso en un metodo para el tratamiento de la colitis ulcerosa que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion.
Otro aspecto de la invencion es un compuesto de la invencion para su uso en un metodo para el tratamiento de la enfermedad de Crohn que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion.
Otro aspecto de la invencion es un compuesto de la invencion para su uso en un metodo para el tratamiento de la diabetes que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la invencion.
"Paciente" significa una persona adecuada para terapia tal como lo entienden los medicos en el campo de los trastornos afectivos y los trastornos neurodegenerativos.
"Tratamiento", "terapia", y terminos relacionados se usan tal como lo entienden los medicos en el campo de los trastornos afectivos y los trastornos neurodegenerativos.
Los compuestos de la presente invencion se administran generalmente como composiciones farmaceuticas que comprenden una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto o su sal farmaceuticamente aceptable y un vehlculo farmaceuticamente aceptable y pueden contener excipientes convencionales. Los vehlculos farmaceuticamente aceptables son aquellos vehlculos convencionalmente conocidos que tienen perfiles de seguridad aceptables. Las composiciones abarcan todas las formas solidas y llquidas comunes que incluyen, por ejemplo, capsulas, comprimidos, pastillas, y polvos, as! como suspensiones llquidas, jarabes, elixires y soluciones. Las composiciones se preparan usando tecnicas de formulation comunes, y los excipientes convencionales (tales como agentes aglutinantes y humectantes) y vehlculos (tales como agua y alcoholes) se usan generalmente para composiciones. Vease, por ejemplo, “Remington's Pharmaceutical Sciences”, Mack Publishing Company, Easton, PA, 17a edition, 1985.
Las composiciones solidas se formulan normalmente en unidades de dosificacion y se prefieren las composiciones que proporcionan de aproximadamente 1 a 1000 mg del principio activo por dosis. Algunos ejemplos de dosis son 1 mg, 10 mg, 100 mg, 250 mg, 500 mg, y 1000 mg. En general, otros agentes estaran presentes en un intervalo unitario similar a los agentes de esa clase usados cllnicamente. Normalmente, este es de 0,25-1000 mg/unidad. Las composiciones llquidas generalmente estan en intervalos unitarios de dosificacion. En general, la composition llquida estara en un intervalo de dosificacion unitaria de 1-100 mg/ ml. Algunos ejemplos de posologla son 1 mg/ ml, 10 mg/ml, 25 mg/ml, 50 mg/ml y 100 mg/ml.
En general, otros agentes estaran presentes en un intervalo unitario similar a los agentes de esa clase usados cllnicamente. Normalmente, este es de 1-100 mg/ ml.
La invencion abarca todos los modos de administration convencionales; se prefieren los metodos oral y parenteral. En general, la posologla sera similar a otros agentes usados cllnicamente. Normalmente, la dosis diaria sera de 1­ 100 mg/kg de peso corporal al dla. En general, se requiere mas compuesto por via oral y menos por via parenteral. El regimen de dosificacion especlfico, sin embargo, sera determinado por un medico usando un criterio medico solido.
DESCRIPCION DE REALIZACIONES ESPECIFICAS
Los espectros de 1H RMN se realizaron en un instrumento Bruker 600, 500 o 400 MHz y los desplazamientos qufmicos se informaron en ppm (5) con referencia a tetrametilsilano (5 = 0,0). Todas las evaporaciones se realizaron a presion reducida.
Metodos de analisis por LC/MS:
Metodo A de analisis por LC/MS: Columna Phenomenex-Luna 50 x 2,0 mm 3,0 um que emplea un caudal de 0,8 ml/min con Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Una elucion en gradiente [0-100 % en 4 min, con un tiempo de ejecucion de 5 min] Flujo: 0,8 ml/min y un detector UV ajustado a 220 nm.
Metodo B de analisis por LC/MS: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: agua con TFA al 0,05 %; Fase movil B: acetonitrilo con TFA al 0,05 %; [2-98 % en 1,5 min, con un tiempo de ejecucion de 2 min]; Flujo: 0,8 ml/min.
Metodo C de analisis por LC/MS: Columna Phenomenex-Luna 50 x 2,0 mm 3,0 pm empleando un caudal de 0,8 ml/min con disolvente A = 9:1 de Agua/metanol TFA al 0,1 % y disolvente B = 1:9 de Agua/metanol TFA al 0,1 %. Una elucion en gradiente [0-100 % en 4 min, con un tiempo de ejecucion de 5 min] y un detector de UV ajustado a 220 nm.
Metodo D de analisis por LC/MS: Columna Phenomenex-Luna 50 x 2,0 mm 3,0 pm empleando un caudal de 0,8 ml/min con disolvente A = 9:1 de Agua/acetonitrilo TFA al 0,1 % y disolvente B = 1:9 de Agua/acetonitrilo TFA al 0,1 %. Una elucion en gradiente [0-100 % en 4 min, con un tiempo de ejecucion de 5 min] y un detector de UV ajustado a 220 nm.
Ejemplo 1 (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(1H-indazol-3-il)metanona
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Etapa A: (4-(3-(benciloxi)prop-1-in-1-il)piridin-3-il)carbamato de terc-butilo
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Un tubo a presion resellable se cargo con 4-yodopiridin-3-il)carbamato de terc-butilo (1,54 g, 4,8 mmol), ((prop-2-in-1-iloxi)metil)benceno (0,84 g, 5,8 mmol), cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,17 g, 0,24 mmol), yoduro de cobre (I) (0,09 g, 0,48 mmol), trietilamina (15 ml, 108 mmol) y DMF (5 ml). La mezcla se desgasifico burbujeando nitrogeno gaseoso durante varios minutos, el matraz se cerro hermeticamente y la mezcla de reaccion se agito durante 7 h. La mezcla se diluyo con EtOAc y se lavo con cloruro de amonio saturado (2 x) y salmuera (1x). Los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y se evaporaron, y el material en bruto se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice, eluyendo con EtOAc al 12-100 % en hexanos, dando (4-(3-(benciloxi)prop-1-in-1-il)piridin-3-il)carbamato de terc-butilo (1,6 g, 98 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 59,44 (s, 1H), 8,28 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,45 - 7,33 (m, 5H), 7,26 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,14 - 6,93 (m, 1H), 4,71 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 1,56 (s, 9H).
Etapa B: 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina
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Un vaso a presion resellable se cargo con (4-(3-(benciloxi)prop-1-in-1 -il)piridin-3-il)carbamato de terc-butilo (1,6 g, 4,73 mmol), DBU (5 ml, 33,2 mmol), agua (10 ml) y MeOH (30 ml). El vaso se cerro hermeticamente y se calento en un bano de aceite a 50 °C durante una noche. Despues de reaccionar durante una noche, la mezcla se concentro en el evaporador rotatorio para retirar el metanol y despues se enfrio en un bano de hielo. Se anadio agua (20 ml) gira a gota mediante un embudo de adicion, momento en el que el producto salio de la mezcla, dando una mezcla de dos fases. La parte acuosa se extrajo de matraz mediante pipeteo y, durante este proceso, el aceite comenzo a solidificar. El aceite se raspo con una espatula para ayudar a la solidificacion y, a continuacion, las fracciones combinadas se filtraron para recoger los solidos, lavando con agua. Se recogio un solido de color pardo. La RMN H mostro que se habfa retenido una pequena cantidad de DBU en el producto, pero no fue importante y el material se llevo a cabo como tal: 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina (1,09 g, 4,57 mmol, rendimiento del 97 %). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 = 8,70 (s, 1H), 8,08 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,57 - 7,19 (m, 7H), 6,49 (s, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,65 - 4,50 (m, 2H).
Etapa C: 2-(benciloxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo
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Un matraz se cargo con 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina (1,09 g, 4,57 mmol), dicarbonato de di-terc-butilo (1,5 g, 6,9 mmol), TEA (1 ml, 7,2 mmol) y DCM (9 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora, el disolvente se evaporo y el residuo se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice (gradiente de EtOAc al 12-100 %/hexanos) para proporcionar 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo (0,95 g, rendimiento del 61 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 = 9,35 (s, 1H), 8,40 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,53 - 7,31 (m, 6H), 6,77 (s, 1H), 4,98 (d, J = 1,3 Hz, 2H), 4,74 (s, 2H), 1,71 (s, 9H).
Preparacion alternativa: Tambien se preparo 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1-carboxilato de terc-butilo en una preparacion alternativa directamente a partir de (4-yodopiridin-3-il)carbamato de terc-butilo: En un tubo cerrado hermeticamente se anadio ((prop-2-in-1-iloxi)metil)benceno (104 pl, 0,750 mmol) y (4-yodopiridin-3-il)carbamato de terc-butilo (200 mg, 0,625 mmol) en DMF (625 pl). A esto se anadio PdCl2(PPh3)2 (21,93 mg, 0,031 mmol), yoduro de cobre (I) (11,90 mg, 0,062 mmol) y TEA (1742 pl, 12,50 mmol). A continuacion, esta reaccion se desgasifico durante 15 minutos y despues se dejo agitar a 80 °C sellado. Despues de 4 horas, la reaccion se habfa completado. La mezcla de reaccion se vertio en acetato de etilo y cloruro de amonio saturado. La fase organica se recogio y se lavo varias veces con cloruro amonico. A continuacion, la fase organica se purifico en el biotage eluyendo en acetato de etilo al 10 % para 10 volumenes de columna y, despues, acetato de etilo al 10-40 % en hexanos sobre 10 volumenes de columna. El producto, 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo (179 mg, rendimiento del 85 %) se recogio en forma de un aceite de color amarillo oscuro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 69,58 - 9,20 (m, 1H), 8,70 - 8,42 (m, 1H), 7,54 - 7,34 (m, 6H), 6,78 (s, 1H), 4,98 (d, J = 1,3 Hz, 2H), 4,73 (s, 2H), 1,69 (s, 9H).
Etapa D: 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo
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A hidroxido de paladio al 20 % sobre carbono, 50 % de humedad (0,50 g) en una botella Parr de 500 ml se anadio 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1-carboxilato de terc-butilo (0,95 g, 2,8 mmol) en etanol (50 ml). La mezcla se hidrogeno a 50psi durante una noche. La TLC y la LC/MS solo muestran una conversion parcial en el primer producto de reaccion. Se anadio una porcion adicional de hidroxido de paladio al 20 % sobre carbono, 50 % de humedad (0,28 g) junto con acido acetico (10 ml). La botella se recargo con H2 a 55 psi y se hizo reaccionar durante 3 dfas. La mezcla se filtro para retirar el Pd(OH)2 y se anadio PtO2(~1 g). La hidrogenacion se continuo 2 dfas mas, momento en el que se observo una conversion completa. El catalizador se retiro por filtracion, y el filtrado se concentro en el evaporador rotatorio y se llevo en bruto a la siguiente etapa.
Etapa E: 2-(hidroximetil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de 6-bencil-1-terc-butilo
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Se disolvio 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo, AcOH (0,9 g, 2,8 mmol) en THF (14 ml) y se anadio 10 % de solucion de carbonato potasico acuoso (14 ml) y bencilcloroformiato (0,84 ml, 5,9 mmol). La mezcla bifasica se agito durante 30 minutos, se diluyo con cloroformo y se separaron las fases. La fraccion acuosa se extrajo dos veces de nuevo con cloroformo y las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico. La mezcla en bruto se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice con una mezcla de acetato de etilo/hexanos (20 %-100 %). Se obtuvo el compuesto del tftulo (0,85 g, 78 %) y se llevo a la etapa siguiente.
Etapa F: 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de 6-bencil 1-terc-butilo
Figure imgf000023_0002
Un matraz se cargo con 2-(hidroximetil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1,6(2H)-dicarboxilato de 6-bencil 1-tercbutilo (0,85 g, 2,177 mmol) en piridina (6 ml) y se enfrio en un bano de hielo. Se anadio Ts-Cl (0,498 g, 2,61 mmol), se retiro el hielo y la mezcla se dejo envejecer durante la noche. La mayor parte del disolvente se evaporo y el residuo se repartio entre EtOAc y HCl 1N y se extrajo 3 veces con EtOAc, se lavo con bicarbonato y salmuera, se seco sobre sulfato sodico, se filtro en tira. Se purifico mediante biotage EtOAc al 6-50 %/Hex. Se recogio 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1,6(2H)-dicarboxilato de 6-bencilo 1-terc-butilo (0,91 g, 1,671 mmol, rendimiento del 77 %). La LCMS muestra masa correcta, complejo RMN H debido a rotomeros, pero consistente. METODO A DE LCMS: tiempo de retencion = 3,66 min, M+H = 545,2.
Etapa G: hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-carboxilato de terc-butilo
Figure imgf000024_0001
Se cargo una botella Parr de 500 ml con 2-((triisopropilsilil)oxi)metilo)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de 6-bencilo 1 -terc-butilo (0,91 g, 1,67 mmol), paladio al 10 % sobre carbono (0,200 g, 0,1 mmol) y etanol (40 ml). La mezcla resultante se hidrogeno a 50 psi en un agitador Parr durante la noche. La LC/MS muestra escision completa de CBz. La mezcla se filtro para retirar el catalizador. Al filtrado, carbonato de potasio (~1 g). La mezcla se calento a reflujo 3 horas, momento en el que la TLC mostro la conversion completa en el producto ciclado. La mayor parte del se evaporo y se anadio agua. La mezcla se extrajo con cloroformo (3 x), se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo para proporcionar hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina-1(2H)-carboxilato de tercbutilo (0,28 g, rendimiento del 70 %) en forma de un aceite transparente. METODO A DE LCMS: tiempo de retention = 2,51 min (sin senal UV a 220 nm), M+H = 239,2. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 4,10 (s a, 2H), 3,40 (dd, J = 8,2; 13,9 Hz, 2H), 2,80 (d, J = 13,6 Hz, 4H), 2,65 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 2,16 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 1,83 - 1,62 (m, 3H), 1,54 - 1,40 (m 9H).
Etapa H: (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il) (1 H-indazol-3-il)metanona
Figure imgf000024_0002
Una solution de hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-carboxilato de terc-butilo (0,055 g, 0,23 mmol) en cloroformo (1 ml) se trato con TFA (1 ml) y se dejo madurar durante 30 minutos y despues se evaporo. El residuo se disolvio de nuevo en DMF (1 ml), se anadieron acido (1H)-piperidin-3-carboxllico (45 mg, 0,28 mmol), HATU (110 mg, 0,29 mmol) y DIPEA (0,2 ml, 1,15 mmol). La mezcla se dejo en agitation a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se retiro por evaporation en una corriente de nitrogeno, y el residuo se repartio entre cloroformo y bicarbonato sodico acuoso saturado. Las fases se separaron y la fraction acuosa se extrajo dos veces mas con cloroformo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y el disolvente se retiro por evaporacion en el evaporador rotatorio. El residuo resultante se purifico por cromatografla sobre gel de sllice, eluyendo con un gradiente del 5 % al 40 % (9:1 de MeOH/NH4OH) en cloroformo, para proporcionar el compuesto del tltulo (50 mg, 73 %). METODO A DE lCmS: tiempo de retencion = 2,40 min, M+H = 283,3. RMN 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 12,35 (s a, 1H), 8,30 (dd, J = 8,2, 10,7 Hz, 1H), 7,49 - 7,42 (m, 1H), 7,37 (t, J=7,3 Hz, 1H), 7,24 (t, J=7,6 Hz, 1H), 5,38 - 4,80 (m, 2H), 3,68 - 3,58 (m, 1H), 3,56 - 3,40 (m, 1H), 3,26 - 3,16 (m, 1H), 3,15 - 2,71 (m, 4H), 2,34 - 2,17 (m, 1H), 1,91 - 1,64 (m 3H).
Ejemplo 2 (5-cloro-1H-indazol-2-il) (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona
Figure imgf000024_0003
Etapa A: octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2TFA
Figure imgf000024_0004
Una solucion de hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-carboxilato de terc-butilo (0,18 g, 0,76 mmol) en cloroformo (9 ml) se trato con TFA (5 ml) y se dejo madurar durante 1 hora y despues se evaporo. El residuo se destilo azeotropicamente tres veces con cloroformo para retirar el TFA residual. Se asumio que el rendimiento era cuantitativo a los efectos del calculo de la estequiometrla para transformaciones posteriores, y el material bruto se uso sin purification adicional.
Etapa B: (5-cloro-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
Figure imgf000025_0001
El octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2TFA (0,75 mmol), del Ejemplo 1, Etapa H, se disolvio en DMF (7,5 ml). En un vial de centelleo, se introdujeron 7,0 ml de esta solucion madre junto con DIPEA (0,61 ml, 3,5 mmol). En otro vial de centelleo, se anadio HATU (0,532 g, 1,4 mmol) y DMF (7,0 ml) y la mezcla se sometio a ultrasonidos para facilitar la disolucion. A otro vial, que contenla acido 5-cloro-1H-indazol-3-carboxllico (20 mg, 0,10 mmol), se anadieron 0,5 ml de la solucion madre en HATU y el vial se agito durante 5 minutos, y, a continuation, se anadieron 0,5 ml de la solucion madre de amina/DIPEA y el vial se agito durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reaction se diluyo con DMF adicional para proporcionar el volumen total de 1,7 ml, y se purifico mediante HPLC preparativa.
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partlculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partlculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 35-65 % de B durante 30 minutos, despues, una retention de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenlan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporation por centrifugation. El rendimiento del producto fue de 29,7 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analltica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partlculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partlculas de 1.7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 3.07 min, M+H = 317,11. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 = 8,19 - 8,07 (m, 1H), 7,72 - 7,62 (m, 1H), 7,45 (dd, J = 1,8, 8,9 Hz, 1H), 5,40 - 4,50 (m, 2H), 3,12 - 2,64 (m, 8H), 2,25 - 2,00 (m, 1H), 1,91 - 1,51 (m, 3H) (integration complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
Ejemplo 3 (5-bromo-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona
Figure imgf000025_0002
La reaccion de acido 5-bromo-1H-indazol-3-carboxllico (24 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (5-bromo-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purification: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partlculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partlculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 0-100 % de B durante 20 minutos, despues, una retencion de 4 minutos a 100 % de B; Flujo: 25 ml/min. Las fracciones que contenlan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 13,5 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analltica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partlculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 1,72 min, M+H = 361,06. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partlculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 = 8,17 - 7,78 (m, 2H), 7,61 (dd, J = 0,9; 7,6 Hz, 1H), 7,55 - 7,45 (m, 1H), 4,39 - 4,17 (m, 1H), 3,95 - 3,51 (m, 2H), 3,18 (d, J = 11,3 Hz, 2H), 2,85 - 2,56 (m, 4H), 2,38 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 2,16 (s a, 1H), 1,80 - 1,64 (m, 2H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
EJEMPLO DE REFERENCIA 4 (7-clorobenzo[b] tiofen-2-il) (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
Figure imgf000026_0001
La reaccion de acido 7-clorobenzo[b] tiofeno-2-carboxflico (21 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (7-clorobenzo[b]tiofen-2-il)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 150 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 60-100 % de B durante 10 minutos, despues, una retencion de 3 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 6,8 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 3,58 min, M+H = 333,08. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 57,96 (dd, J = 0,9, 7,9 Hz, 2H), 7,61 (dd, J = 0,9; 7,9 Hz, 1H), 7,55 - 7,48 (m, 1H), 4,65 - 4,45 (m, 2H), 3,16 - 2,71 (m, 6H), 2,32 - 1,99 (m, 1H), 1,92 - 1,57 (m, 3H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
EJEMPLO DE REFERENCIA 5 Benzofuran-2-il(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona
Figure imgf000026_0002
La reaccion de acido benzofuran-2-carboxflico (16 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio benzofuran-2-il(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 30-60 % de B durante 30 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 13,1 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,98 min, M+H = 283,14. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 57,77 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,48 (ddd, J = 1,2, 7,2, 8,3 Hz, 1H), 7,36 (dt, J = 0,9; 7,6 Hz, 1H), 5,00 - 4,51 (m, 2H), 3,25 - 2,68 (m, 6H), 1,92 (s, 4H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
Ejemplo 6 Benzo[b]tiofen-2-il)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona
Figure imgf000027_0001
La reaccion de acido benzo[b]tiofeno-2-carbox[lico (18 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio benzo[b]tiofen-2-il)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 30-60 % de B durante 30 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 13,1 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 3,12 min, M+H = 299,11. Se adquirio la RMN de proton en dMsO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 8,08 - 8,01 (m, 1H), 7,99 - 7,93 (m, 1H), 7,86 (s a, 1H), 7,52 - 7,42 (m, 2H), 4,65 - 4,51 (m, 2h), 3,23 - 2,61 (m, 7h), 2,26 - 2,03 (m, 1H), 1,87 - 1,57 (m, 2H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
Ejemplo 7 (6-cloro-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona
Figure imgf000027_0002
La reaccion de acido 6-cloro-1H-indazol-3-carboxflico (20 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (6-cloro-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 150 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 50-100 % de B durante 10 minutos, despues, una retencion de 3 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 4,3 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 97 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 3,07 min, M+H = 317,11. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 8,20 - 8,06 (m, 1H), 7,71 (td, J = 0,9; 1,8 Hz, 1H), 7,33 - 7,17 (m, 1H), 5,32 - 5,02 (m, 1H), 4,72 - 4,46 (m, 1H), 3,27 - 2,67 (m, 9H), 2,24 - 1,98 (m, 1H), 1,80 - 1,53 (m, 2H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
EJEMPLO DE REFERENCIA 8 (Hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il) (1-metil-1H-indazol-3-il)metanona
Figure imgf000028_0001
La reaccion de acido 1-metil-1H-indazol-3-carboxflico (18 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio hexahidro-2,6-metanopirrolo [2,3 -c]piridin-1 (2H)-il)(1-metil-1 H-indazol-3 -il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 20-50 % de B durante 30 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El material se purifico adicionalmente mediante LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 20-50 % de B durante 30 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 8,2 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMs fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,76 min, M+H = 296,16. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 8,20 - 8,05 (m, 1H), 7,73 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,48 (dt, J = 0,9, 7,6 Hz, 1H), 7,26 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 5,30 - 5,06 (m, 1H), 4,67 - 4,50 (m, 1H), 4,16 - 4,06 (m, 3H), 3,14 - 2,69 (m, 6H), 2,25 - 2,04 (m, 1 H), 1,96 - 1,85 (m, 1H), 1,82 - 1,50 (m, 2H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
Ejemplo 9 (6-metoxi-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona
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La reaccion de acido 6-metoxi-1H-indazol-3-carboxflico (19 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (6-metoxi-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 30-60 % de B durante 30 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 13,1 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS 2,65 min, M+H = 313,16. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 13,36 - 13,18 (m, 1H), 8,06 - 7,88 (m, 1H), 7,03 - 6,92 (m, 1H), 6,85 (dd, J = 2,1; 8,9 Hz, 1H), 5,30 - 4,97 (m, 1H), 4,68 - 4,46 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,09 - 2,65 (m, 7H), 2,20 - 1,97 (m, 1H), 1,80 - 1,51 (m, 2H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
EJEMPLO DE REFERENCIA 10 (5-metoxi-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
Figure imgf000029_0001
La reaccion de acido 5-metoxi-1H-indazol-3-carboxflico (19 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (5-metoxi-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 150 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 10-100 % de B durante 15 minutos, despues, una retencion de 3 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 15,6 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 95 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS 1,21 min, M+H = 313,16. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 68,64 (s, 1H), 7,35 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,31 - 7,26 (m, 1H), 7,25 - 7,20 (m, 1H), 4,20 -4,09 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 2,75 (s, 3H), 2,17 - 2,07 (m, 1H), 1,88 - 1,54 (m, 3H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
Ejemplo 11 Benzo[d]isotiazol-3-il(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona
Figure imgf000029_0002
La reaccion de acido benzo[b]isotiazol-3-carboxflico (18 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio benzo[d]isotiazol-3-il)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 150 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 40-100 % de B durante 11 minutos, despues, una retencion de 3 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 8,4 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 99 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS 2,97 min, M+H = 300,11. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 8,47 - 8,36 (m, 1H), 8,33 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,73 - 7,67 (m, 1H), 7,64 - 7,55 (m, 1H), 4,97 - 4,65 (m, 2H), 3,70 - 3,49 (m, 1H), 3,19 - 2,64 (m, 2H), 1,92 (s, 5H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
EJEMPLO DE REFERENCIA 12 (4-clorobenzo[b] tiofen-2-il) (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
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La reaccion de acido 4-clorobenzo[b] tiofeno-2-carboxflico (21 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (4-clorobenzo[b]tiofen-2-il)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 150 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 60-100 % de B durante 10 minutos, despues, una retencion de 3 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 6,5 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS 3,54 min, M+H = 333,08. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 8,09 - 8,02 (m, 1H), 7,73 (s a, 1H), 7,56 (dd, J = 0,9; 7,6 Hz, 1H), 7,53 - 7,45 (m, 1H), 4,58 - 4,38 (m, 2H), 3,29 - 2,60 (m, 7H), 2,29 - 1,98 (m, 1H), 1,90 - 1,52 (m, 3H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
EJEMPLO DE REFERENCIA 13 (4-clorofenil)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona
Figure imgf000030_0002
La reaccion de acido 4-clorobenzoico(16 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B dio (4-clorofenil)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 150 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 40-100 % de B durante 11 minutos, despues, una retencion de 3 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion.
El material se purifico adicionalmente mediante LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 20-50 % de B durante 30 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 4,3 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS 1,52 min, M+H = 277,10. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 7,56 -7,49 (m, 4H), 4,56 - 4,45 (m, 1H), 3,97 - 3,82 (m, 1H), 3,25 - 2,61 (m, 7H), 2,23-2,00 (m, 1H), 1,88-1,58 (m, 3H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
EJEMPLO DE REFERENCIA 14 (Hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(1-metil-1H-indol-3-il)metanona
Figure imgf000031_0001
La reaccion de acido 1-metil-1H-indol-3-carboxllico (18 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio hexahidro-2,6-metanopirrolo [2,3-c]piridin-1-(2H)-il)(1-metil-1H-indol-3-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partlculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partlculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 20-50 % de B durante 30 minutos, despues, una retention de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenlan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporation por centrifugation. El material se purifico adicionalmente mediante LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Waters XBridge RP18, 19 x 200 mm, partlculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partlculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenlan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 6,2 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analltica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partlculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partlculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS 2,69 min, M+H = 296,17. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 = 7,82 - 7,73 (m, 2H), 7,49 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,23 (d, J =1,2 Hz, 1H), 7,15 (dt, J = 1,1, 7,6 Hz, 1H), 4,45 - 4,23 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,27 - 3,18 (m, 2H), 3,06 - 2,95 (m, 1H), 2,82 (s, 2H), 2,73 - 2,62 (m, 2H), 2,18 - 2,04 (m, 1H), 1,82 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 1,75 - 1,47 (m, 2H) (integration complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
EJEMPLO DE REFERENCIA 15 (4-metoxi-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
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La reaccion de acido 4-metoxi-1H-indazol-3-carboxllico (19 mg, 0,10 mmol) de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (4-metoxi-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 150 mm, partlculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partlculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 30-100 % de B durante 13 minutos, despues, una retencion de 3 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenlan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El material se purifico adicionalmente mediante LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partlculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partlculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 15-45 % de B durante 30 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenlan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El material se purifico adicionalmente mediante LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 150 mm, partlculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partlculas de 5 pm; Fase movil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 20 mM; Gradiente: 30-100 % de B durante 30 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenlan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 2,7 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMs fue del 99 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analltica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS 2,39 min, M+H = 313,16. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 5 = 13,27-13,15 (m, 1H), 7,36 - 7,25 (m, 1H), 7,11 (dd, J = 2,9; 8,1 Hz, 1H), 6,59 (dd, J = 1,4; 7,5 Hz, 1H), 4,58 - 4,40 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,57 - 3,48 (m, 1H), 3,23 (s a, 4H), 2,78 (s, 1H), 2,69 - 2,57 (m, 1H), 2,18 - 2,03 (m, 1H), 1,80 - 1,46 (m, 3H) (integracion complicada por un pico grande de agua que solapa con algunas senales).
Ejemplo 16 (6-cloro-1H-indazol-3-il) ((2R, 3aR, 6S, 7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
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Etapa A: 2-((benciloxi)metil)-2,3-dihidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1-carboxilato de (R)-terc-butilo, 2-((benciloxi)metil)-2,3-dihidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1-carboxilato de (S)-terc-butilo
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Se anadio 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1-carboxilato de terc-butilo (1,6 g, 4,73 mmol) en etanol (30 ml) a hidroxido de paladio al 20 % sobre carbono, 50 % de humedad (0,16 g) en una botella Parr de 500 ml Parr. La mezcla se hidrogeno a 50psi durante una noche. El catalizador se retiro por filtracion y el filtrado se concentro en el evaporador rotatorio y los enantiomeros se separaron mediante SFC preparativa quiral. Condiciones de cromatograffa: Chiralpak AD-H columna, 30 x 25 mm, 5 um, Fase movil: 15 % de MeOH con 0,1 % de DEA en CO2, temp.: 35 °C, Presion: 150 bar, caudal: 70 ml/min durante 10 min, UV controlada a 250 nm, inyeccion: ~1 ml de una solucion de 30 mg/ ml en MeOH. Se recogieron dos picos: Pico 1 (se crefa que era 2-((benciloxi)metil)-2,3-dihidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1-carboxilato de (R)-terc-butilo), 462 mg; pico 2 (se crefa que era 2-((benciloxi)metil)-2,3-dihidro-1 H-pirrolo[2,3-c]piridina-1 -carboxilato de (S)-terc-butilo), 501 mg. Pico 1: METODO A DE LCMS: tiempo de retencion = 3,86 min, M+H = 341,2.
1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 = 8,73 (s a, 1H), 8,17 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,38 - 7,25 (m, 5H), 7,23 - 7,18 (m, 2H), 4,48 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 3,68 - 3,56 (m, 2H), 3,37 (dd, J = 10,0; 17,6 Hz, 1H), 3,05 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 1,49 (s a, 9H).
Etapa B: 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo [2,3-c]piridin-1-carboxilato de (2R,3aR, 7aS)-terc-butilo, AcOH
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Se anadio 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo (0,46 g, 1,35 mmol) en etanol (20 ml) y acido acetico (2 ml) a hidroxido de paladio al 20 % sobre carbono, 50 % de humedad (0,05 g) en una botella Parr de 500 ml Parr. La mezcla se hidrogeno a 50psi durante una noche. El catalizador se retiro por filtracion, y el filtrado se concentro en el evaporador rotatorio y se llevo en bruto a la siguiente etapa.
Etapa C: 1-terc-butil 2-(hidroximetil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de (2R,3aR,7aS)-6-bencilo
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Un matraz se cargo con 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1-carboxilato de (2R,3aR,7aS)-terc-butilo, AcOH (337 mg, 1,315 mmol), THF (10 ml) y se anadio 10 % de carbonato potasico acuoso 10 ml, 7,24 mmol) y CBZ-Cl (0,188 ml, 1,315 mmol). La reaccion se dejo en agitacion durante la noche y despues se vertio en cloroformo y agua. La fase organica se recogio y se concentro para dar el residuo. Esto se purifico en biotage eluyendo en 10 %-100 % de acetato de etilo en hexanos. El producto se recogio y se llevo a la siguiente etapa.
Etapa D: 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de (2R,3aR, 7aS)-6-bencil 1-tercbutilo
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Se cargo un matraz con 2-(hidroximetil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c] piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de (2R,3aR,7aS)-6-bencilo 1 -terc-butilo (310 mg, 0,79 mmol) y TsCl (151 mg, 0,794 mmol) en piridina (2 ml). La mezcla de reaccion se dejo agitar durante la noche. Despues, la mezcla de reaccion se diluyo con tolueno y se concentro hasta obtener el residuo. El residuo se purifico despues en Biotage eluyendo en 10 %-100 % de acetato de etilo en hexanos. El producto se recogio y se uso en la siguiente etapa. METODO A DE LCMS: tiempo de retencion = 3,78 min, M+H = 545,3.
Etapa E: Hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-carboxilato de (2R, 3aR, 6S, 7aS)-terc-butilo
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En una botella Parr se anadio 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c] piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de (2R,3aR,7aS)-6-bencil 1 -terc-butilo (430 mg, 0 , 7 8 9 mmol) y paladio al 10 % en carbono (84 mg, 0,789 mmol) en etanol (10 ml). Esto se introdujo en un agitador de Parr a 55 psi durante 24 horas. La reaccion se retiro, se filtro a traves de celite y, a continuacion, los licores madre se trataron con carbonato potasico (109 mg, 0,789 mmol) y la reaccion se calento a 70 °C durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se concentro hasta obtener el residuo. El residuo se purifico en el sistema biotage eluyendo en 10 % - 40 %(10 % de NhUOH/metanol) en cloroformo, dando hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina-1(2H)-carboxilato de (2R,3aR,6S,7aS)-terc-butilo (0,186 g, rendimiento del 99 %) METODO A DE LCMS: tiempo de retencion = 1,47 min (sin senal UV a 220 nm), M+H = 239,3.
Etapa F: (6-cloro-1H-indazol-3-il)((2R,3aR,6S, 7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo [2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
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Un matraz se cargo con hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina-1(2H)-carboxilato de (2R,3aR,6S,7aS)-terc-butilo (50 mg, 0,210 mmol) y DCM (1 ml). Esto se trato con TFA (1 ml, 12,98 mmol) y la reaccion se agito durante 2 horas. Despues, la reaccion se concentro hasta obtener el residuo y se suspendio en DMF (1.000 ml) y se trato con HATU (80 mg, 0,210 mmol), DIPEA (0,147 ml, 0,839 mmol) y con acido 6-cloro-1H-indazol-3-carboxflico (41,2 mg, 0,210 mmol). La mezcla de reaccion se agito durante la noche y despues se vertio en cloroformo y agua. Se recogio la capa organica y la capa acuosa se volvio a extraer con cloroformo/metanol. Las fases organicas combinadas se purificaron en Biotage eluyendo con 10 %(10 % DE NH4OH/Metanol) en cloroformo, dando (6-cloro-1H-indazol-3-il)((2R,3aR,6S,7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona (20,1 mg, rendimiento del 29 %). METODO B DE LCMS: tiempo de retencion = 0,85 min, M+H = 317,05. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 8,24 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,25 (dd, J = 1,6, 8,7 Hz, 1H), 5,38 - 5,14 (m, 2H), 4,94 - 4,77 (m, 1H), 3,65 -3,45 (m, 2H), 3,24 - 2,79 (m, 5H), 2,40 - 2,19 (m, 1H), 1,89 (d, J = 12,8 Hz, 2H), 1,82 - 1,68 (m 1H).
Ejemplo 17 (6-cloro-1H-indazol-3-il) ((2S, 3aS, 6R, 7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
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El 2-((benciloxi)metil)-2,3-dihidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1-carboxilato de (S)-terc-butilo se sometio a las condiciones usada sen el ejemplo 16, etapas B-F, para proporcionar (6-cloro-1H-indazol-3-il)((2S,3aS,6R,7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo [2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona (26 mg) MEt OdO C DE LCMS: tiempo de retencion = 2,72, M+H = 317,13. RMN 1H (400 MHz, Cloroformo-d) 68,21 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,25 - 7,12 (m, 1H), 5,37 - 5,09 (m, 1H), 5,00 - 4,75 (m, 1H), 3,83 - 3,42 (m, 2H), 3,33 - 2,68 (m, 5H), 2,38 - 2,17 (m, 1H), 1,96 -1,68 (m, 3H), 0,90 (s a, 1H).
Ejemplo 18 ((2S, 3aS, 6R, 7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il) (1H-indazol-3-il)metanona
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Etapa A: 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de (2R,3aR,7aS)-6-bencil 1-tercbutilo y 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin6(2H)-dicarboxilato de (2S,3aS, 7aR)-6-bencil 1-terc-butilo
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La separacion SFC quiral se realizo en 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de 6-bencil 1 -terc-butilo (mezcla racemica de diastereomeros) (~1 g). Condiciones: Columna = Chiralpak AD-H 30 x 250 mm, 5um; Fase movil = 15 % de IPA en CO2; Temp. = 35 °C; Presion = 150 bar; caudal = 70 ml/min; UV controlada a 220 nm; inyeccion: ~1 ml de una solucion d ~50 mg/ ml en IPA. Se recogieron cuatro picos, dos mayoritarios (primeros dos en eluir) y dos minoritarios. Se crefa que los picos minoritarios eran indeseados y se desecharon. Se creyo que el primer pico en eluir era 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1,6(2H)-dicarboxilato de (2R,3aR,7aS)-6-bencil 1-terc-butil (301,4 mg, 30 % del total) y se creyo que el segundo pico era 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-1,6(2H)-dicarboxilato de (2S,3aS,7aR)-6-bencilo 1 -te rc-butilo (299,3 mg, 30 % del total).
Etapa B: (2S,3aS,6R, 7aR)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA
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En una botella Parr se anadio 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c] piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de (2S,3aS,7aR)-6-bencil 1 -terc-butilo (301 mg, 0,789 mmol) y paladio al 10 % en carbono (75 mg, 0,789 mmol) en etanol (15 ml). Esto se introdujo en un agitador de Parr a 55 psi durante 24 horas. La reaccion se retiro, se filtro a traves de celite ay, a continuacion, los licores madre se trataron con carbonato potasico (1 g) y la reaccion se calento a reflujo durante 3 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se concentro hasta obtener el residuo, para dar el intermedio protegido con Boc (85 mg, rendimiento del 65 %). El residuo se disolvio en 1 ml de cloroformo y se anadio TFA (1 ml). La mezcla se agito durante 1 hora y se evaporo a sequedad, y, a continuacion, se destilo azeotropicamente con cloroformo para retirar el TFA residual. El rendimiento cuantitativo en la etapa de desproteccion se asumio con el proposito de calcular la estequiometrfa para la siguiente etapa: (2S,3aS,6R,7aR)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA (0,13 g, 0,36 mmol, 65 % de rendimiento).
Etapa C: ((2S,3aS,6R,7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(1H-indazol-3-il)metanona
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La reaccion de (2S,3aS,6R,7aR)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 1H-indazol-3-carboxflico (16 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio ((2S,3aS,6R,7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(1H-indazol-3-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con hidroxido de amonio 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con hidroxido amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 28 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 11,1 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,46 min, M+H = 283,15. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 = 13,51 (s a, 1H), 8,21 - 8,01 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,42 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,23 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 5,30 -5,05 (m, 1H), 4,68 - 4,48 (m, 1H), 3,28 - 2,77 (m, 8H), 2,21 - 1,96 (m, 1H), 1,62 (s a, 2H).
EJEMPLO DE REFERENCIA 19 ((2S,3aS,6R, 7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(5-fenil-1H-pirazol-3-il)metanona
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La reaccion de (2S,3aS,6R,7aR)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 3-fenil-1 H-pirazol-5-carboxflico (19 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio ((2S,3aS,6R,7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(5-fenil-1H-pirazol-3-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con hidroxido amonico 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con hidroxido amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 28 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 11,1 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,83 min, M+H = 309,16. Se adquirio la RMN de proton en d MsO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 5 = 13,79 - 13,43 (m, 1H), 7,82 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 7,56 - 7,28 (m, 3H), 7,17 - 6,94 (m, 1H), 4,59 - 4,43 (m, 1H), 3,29 - 2,63 (m, 9H), 2,22 - 1,97 (m, 1H), 1,77 - 1,52 (m 2H).
Ejemplo 20 ((2S,3aS,6R, 7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(5-ciclopropil-1H-pirazol-3-il)metanona
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La reaccion de (2S,3aS,6R,7aR)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 3-ciclopropilo-1H-pirazol-5-carboxflico (15 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio ((2S,3aS,6R,7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(5-ciclopropil-1H-pirazol-3-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con hidroxido amonico 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con hidroxido amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 28 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 11,6 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 99 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,20 min, M+H = 273,29. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 12,89 (s a, 1H), 6,26 (s, 1H), 5,23 - 4,84 (m, 1H), 4,56 - 4,29 (m, 1H), 3,24 - 2,65 (m, 8H), 2,08 - 1,91 (m, 1H), 1,82 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 1,74 - 1,52 (m, 2H), 0,94 (s a, 2H), 0,79 - 0,62 (m 2H).
Ejemplo 21 (6-fluoro-1H-indazol-3-il) ((2S,3aS, 6R, 7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
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La reaccion de (2S,3aS,6R,7aR)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 6-fluor-1H-indazol-3-carboxflico (18 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (6-fluoro-1H-indazol-3-il)((2S,3aS,6R,7aR)-(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con hidroxido amonico 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con hidroxido amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 28 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 11,9 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 95 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters b Eh C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,67 min, M+H = 299,14. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 613,59 (s a, 1H), 8,13 (dt, J = 5,5; 8,7 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 7,21 - 7,04 (m, 1H), 5,34 - 5,01 (m, 1H), 4,64 - 4,48 (m, 1H), 3,29 - 2,79 (m, 8H), 2,26 - 2,04 (m, 1H), 1,80 - 1,54 (m 2H).
Ejemplo 22 (7-Cloro-1H-indazol-3-il)((2S,3aS,6R, 7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
Figure imgf000037_0002
La reaccion de (2S,3aS,6R,7aR)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 7-cloro-1H-indazol-3-carboxflico (20 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (7-cloro-1H-indazol-3-il)((2S,3aS,6R,7aR)-(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con hidroxido amonico 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con hidroxido amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 28 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 7,6 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 99 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,96 min, M+H = 317,11. Se adquirio la RMN de proton en d Ms O deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 14,34 - 13,62 (m, 1H), 8,16 - 7,92 (m, 1H), 7,53 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,23 (t, J=7,6 Hz, 1H), 5,23 - 5,02 (m, 1H), 4,73 - 4,53 (m, 1H), 3,29 - 2,73 (m, 8H), 2,26 - 1,99 (m, 1H), 1,83 - 1,56 (m 2H).
Ejemplo 23 (6-metil-1H-indazol-3-il) ((2S, 3aS, 6R, 7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
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La reaccion de (2S,3aS,6R,7aR)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 6-metil-1H-indazol-3-carboxflico (18 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (6-metil-1H-indazol-3-il)((2S,3aS,6R,7aR)-(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con hidroxido amonico 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con hidroxido amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 28 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 11,1 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 92 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters b Eh C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,83 min, M+H = 297,28. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 13,40 - 13,16 (m, 1H), 8,04 - 7,92 (m, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,27 - 4,98 (m, 1H), 4,65 - 4,47 (m, 1H), 3,26 - 2,70 (m, 8H), 2,46 (s, 3H), 2,21 - 1,98 (m, 1H), 1,61 (d, J = 2,7 Hz, 2H).
Ejemplo 24 ((2S, 3aS, 6R, 7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il) (1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metanona
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La reaccion de (2S,3aS,6R,7aR)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 1H-pirazolo[3,4-b] piridin-3-carboxflico (16 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio ((2S,3aS,6R,7aR)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(1H-pirazolo[3,4-b] piridin-3-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua con hidroxido amonico 20 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con hidroxido amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 28 minutos, despues, una retencion de 5 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 12,0 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 99 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,12 min, M+H = 282,26. Se adquirio la RMN de proton en Dm So deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 14,27 - 13,96 (m, 1H), 8,60 (dd, J = 1,7; 4,4 Hz, 1H), 8,53 - 8,47 (m, 1H), 7,32 (dd, J = 4,4; 8,1 Hz, 1H), 5,32 - 5,12 (m, 1H), 4,55 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 3,29 - 2,75 (m, 8H), 2,22 - 2,00 (m, 1H), 1,83-1,51 (m, 2H).
Ejemplo 25 ((2R, 3aR, 6S, 7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il) (isoquinolin-1-il)metanona
Figure imgf000039_0001
Etapa A: (2R,3aR,6S, 7aS)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA
Figure imgf000039_0002
2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-1,6(2H)-dicarboxilato de (2R,3aR,7aS)-6-bencil 1-terc-butilo (301 mg, 0,55 mmol) se hizo reaccionar de acuerdo con el metodo del Ejemplo 18, etapa B, para proporcionar (2R,3aR,6S,7aS)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA (110 mg, rendimiento del 84 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 = 11,08 - 10,26 (m, 1H), 9,52 - 9,14 (m, 2H), 4,32 - 4,20 (m, 2H), 3,80 - 3,64 (m, 2H), 3,59 -3,37 (m, 4H), 2,88 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 2,37 - 2,12 (m, 2H), 1,99 - 1,83 (m 2H).
Etapa B: ((2R,3aR,6S,7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(isoquinolin-1-il)metanona
Figure imgf000039_0003
La reaccion de (2R,3aR,6S,7aS)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido isoquinolina-1-carboxflico (17 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio ((2R,3aR,6S,7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(isoquinolina-1-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 4,5 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH c 18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 1,42 min, M+H = 294,15. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 5 = 8,62 - 8,49 (m, 1H), 8,17 (t, J = 9,5 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,87 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,84 - 7,70 (m, 1H), 5,04 - 4,91 (m, 1H), 4,02 (s a, 1H), 3,49 (d, J = 12,2 Hz, 4H), 3,27 - 3,11 (m, 2H), 2,98 (s a, 1H), 2,36 - 2,13 (m, 1H), 1,94 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 1,93 - 1,59 (m 1H).
Ejemplo 26 (6-fluoro-1H-indazol-3-il)((2R, 3aR, 6S, 7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
Figure imgf000039_0004
La reaccion de (2R,3aR,6S,7aS)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 6-fluor-1H-indazol-3-carboxflico (18 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (6-fluoro-1H-indazol-3-il)((2R,3aR,6S,7aS)-(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 16,3 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 98 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,65 min, M+H = 301,14. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,13 (dd, J = 5,5, 8,7 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 7,12 (t, J=9,3 Hz, 1H), 5,30 - 4,96 (m, 1H), 4,55 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 3,17 - 2,69 (m, 9H), 2,24 - 2,04 (m, 1H), 1,76 - 1,47 (m, 2H) (integracion complicada por un pico grande de agua que oculta algunas senales).
EJEMPLO DE REFERENCIA 27 ((2R, 3aR, 6S, 7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(5-ciclopropil-1 H-pirazol-3-il)metanona
Figure imgf000040_0001
La reaccion de (2R,3aR,6S,7aS)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 3-ciclopropilo-1H-pirazol-5-carboxflico (15 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio ((2R,3aR,6S,7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(5-ciclopropil-1H-pirazol-3-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 16,0 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 96 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,20 min, M+H = 271,16. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 513,18 - 12,61 (m, 1H), 6,26 (s, 1H), 5,29 - 4,79 (m, 1H), 4,65 - 4,32 (m, 1H), 3,08 - 2,67 (m, 6H), 2,08 (s a, 1H), 1,87 - 1,49 (m, 4H), 0,94 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 0,79 - 0,52 (m, 3H) (integracion complicada por un pico grande de agua que oculta algunas senales).
Ejemplo 28 (7-cloro-1H-indazol-3-il) ((2R, 3aR, 6S, 7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
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La reaccion de (2R,3aR,6S,7aS)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 7-cloro-1H-indazol-3-carboxflico (20 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (7-cloro-1H-indazol-3-il)((2R,3aR,6S,7aS)-(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que conteman el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 14,4 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 97 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,94 min, M+H = 317,11. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 68,08 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,24 (t, J=7,8 Hz, 1H), 5,23 - 4,95 (m, 1H), 4,69 - 4,51 (m, 1H), 3,12 -2,65 (m, 5H), 2,25 - 2,01 (m, 1H), 1,62 (d, J=4.3 Hz, 2H) (algunas senales ocultas por un pico grande de agua).
Ejemplo 29 benzo[d]isoxazol-3-il((2R,3aR,6S,7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
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La reaccion de (2R,3aR,6S,7aS)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido benzo[d]isoxazol-3-carboxflico (16 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio benzo[d]isoxazol-3-il)((2R,3aR,6S,7aS)-(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Fase A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que conteman el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 10,6 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 99 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,92 min, M+H = 317,11. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 6 = 8,08 - 7,96 (m, 1H), 7,88 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,75 (t, J=7,8 Hz, 1H), 7,50 (t, J=7,6 Hz, 1H), 4,60 (d, J = 10,7 Hz, 2H), 3,27 - 2,70 (m, 6H), 2,23 - 2,07 (m, 1H), 1,63 (s a, 2H) (algunas senales ocultas por un pico de agua grande).
Ejemplo 30 (6-metil-1H-indazol-3-il) ((2R,3aR, 6S, 7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1 (2H)-il)metanona
Figure imgf000041_0002
La reaccion de (2R,3aR,6S,7aS)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 6-metil-1H-indazol-3-carboxflico (18 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio (6-metil-1H-indazol-3-il)((2R,3aR,6S,7aS)-(hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que conteman el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 14,2 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 98 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2.81 min, M+H = 297,16. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 = 13.81 - 12,70 (m, 1H), 7,98 (t, J=8,4 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,34 - 5,02 (m, 1H), 4,73 - 4,51 (m, 1H), 3,10 - 2,62 (m, 6H), 2,21 - 2,01 (m, 1H), 1,86 - 1,53 (m, 2H) (algunas senales ocultas por un pico de agua grande).
Ejemplo 31 ((2R,3aR, 6S, 7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il) (1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metanona
Figure imgf000042_0001
La reaccion de (2R,3aR,6S,7aS)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 1H-pirazolo[3,4-b] piridin-3-carboxflico (16 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio ((2R,3aR,6S,7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(1H-pirazolo[3,4-b] piridin-3-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 16,4 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 97 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 2,13 min, M+H = 284,14. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 58,60 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,50 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 4,6, 7,9 Hz, 1H), 5,35 - 5,09 (m, 1H), 4,68 - 4,45 (m, 1H), 3,20 - 2,61 (m, 7H), 2,23 - 2,03 (m, 1H), 1,88 - 1,56 (m, 3H) (algunas senales ocultas por un pico de agua grande).
EJEMPLO DE REFERENCIA 32 ((2R,3aR,6S, 7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(5-fenil-1H-pirazol-3-il)metanona
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La reaccion de (2R,3aR,6S,7aS)-octahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina, 2 TFA y acido 3-fenil-1 H-pirazol-5-carboxflico (19 mg, 0,10 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 2, etapa B, dio ((2R,3aR,6S,7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il)(5-fenil-1H-pirazol-3-il)metanona. Condiciones de purificacion: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 30­ 95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El material se purifico adicionalmente mediante LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: acetonitrilo; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 20-95 % de B durante 20,5 minutos, despues, una retencion de 7,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 25 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 15,8 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 97 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analttica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion de LCMS = 1,53 min, M+H = 309,16. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 = 7,88 -7,78 (m, 2H), 7,52 - 7,43 (m, 2H), 7,38 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,10 - 7,03 (m, 1H), 4,58 - 4,41 (m, 1H), 3,08 - 2,62 (m, 7H), 2,20 - 1,96 (m, 2H), 1,75 - 1,52 (m, 2H) (algunas senales ocultas por un pico de agua grande).
Ejemplo 33 ((2R,3aR, 6S, 7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridin-1(2H)-il) (1H-indazol-3-il)metanona
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La reaccion de (2R,3aR,6S,7aS)-terc-butil hexahidro-2,6-metanopirrolo[2,3-c]piridina-1(2H)-carboxilato y acido 1H-indazol-3-carboxflico (34 mg, 0,21 mmol), de acuerdo con el metodo del ejemplo 16, etapa F, dio ((2R,3aR,6S,7aS)-hexahidro-2,6-metanopirrolo [2,3-c]piridin-1(2H)-il)(1H-indazol-3-il)metanona (52 mg, rendimiento del 83 %). Condiciones de purificacion: Columna en gel de sflice, 5-40 % (9:1 MeOH/NH4OH) en cloroformo. METODO C DE LCMS: tiempo de retencion = 2,36, M+H = 283,25. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 11,43 - 10,87 (m, 1H), 8,38 - 8,18 (m, 1H), 7,58 - 7,48 (m, 1H), 7,47 - 7,39 (m, 1H), 7,33 - 7,21 (m, 1H), 5,35 -5,13 (m, 1H), 4,98 - 4,79 (m, 1H), 3,68 - 3,57 (m, 1H), 3,31 - 2,78 (m, 5H), 2,42 -2,22 (m, 1H), 1,93 - 1,72 (m, 3H), 1,47 - 1,27 (m, 1H) (RMN H muestra algo de etanol residual (del cloroformo usado en la purificacion).
Ejemplo 34 ((2S*,3aR*,5R*,7aS*)-hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)(1H-indazol-3-il)metanona
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Etapa A: (3-(3-(benciloxi)prop-1-in-1-il)piridin-4-il)carbamato de terc-butilo
Figure imgf000043_0003
Se cargo un vaso de presion resellable con DMF (15,6 ml), (3-yodopiridin-4-il)carbamato de terc-butilo (5,0 g, 15,6 mmol), ((prop-2-in-1-iloxi)metil)benceno (3,04 g, 18,74 mmol), bis(trifenilfosfina)cloruro de paladio (II)(0,55 g, 0,78 mmol), yoduro de cobre (I) (0,297 g, 1,56 mmol) y trietilamina (43,5 ml, 312 mmol) y la mezcla se desgasifico burbujeando nitrogeno a traves de la mezcla durante varios minutos. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante la noche, se diluyo con acetato de etilo, se lavo dos veces con una solucion de cloruro de amonio saturado y una vez con salmuera. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y se evaporaron a sequedad. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 20-50 % en hexanos. Se recogio el pico principal, dando (3-(3-(benciloxi)prop-1-in-1-il)piridin-4-il)carbamato de terc-butilo (4,27 g, 81 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 8,56 (s, 1H), 8,49 - 8,34 (m, 1H), 8,14 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,51 - 7,32 (m, 6H), 4,71 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 1,56 (s, 9H).
Etapa B: 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridina
Figure imgf000044_0001
Un vaso a presion resellable se cargo con (3-(3-(benciloxi)prop-1-in-1 -il)piridin-4-il)carbamato de terc-butilo (4,27 g, 12,6 mmol), metanol (80 ml) y agua (20 ml) y se anadio DBU (13,3 ml, 88 mmol), el vaso se cerro hermeticamente, y la mezcla se calento a 60 °C y se mantuvo a dicha temperatura durante 2 horas. Despues, la mezcla se enfrio a temperatura ambiente, se retiro el metanol en el evaporador rotatorio y la mezcla resultante se enfrio en un bano de hielo hasta que comenzo a formarse el precipitado. Se anadio agua frfa (100 ml) en una corriente lenta para precipitar adicionalmente el producto, que despues se recogio mediante filtracion. A continuacion, los solidos se destilaron azeotropicamente con tolueno para retirar el agua residual, dando 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[3,2-cjpiridina (2,36 g, 78 %) en forma de un solido de color pardo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 = 12,10 - 11,21 (m, 1H), 8,79 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 8,31 - 7,98 (m, 1H), 7,77 - 7,06 (m, 6H), 6,56 (s, 1H), 4,69 (s, 2H), 4,56 (s, 2H).
Etapa C: 2-(benciloxi)metil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo
Figure imgf000044_0002
Un matraz de fondo redondo se cargo con 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridina (2,36 g, 9,9 mmol), diclorometano (20 ml), di-terc-butildicarbonato (3,24 ml, 14,9 mmol) y trietilamina (2,2 ml, 15,9 mmol) y se dejo agitar durante la noche. La mezcla de reaccion se evaporo para retirar la mayor parte del disolvente y, a continuacion, se purifico mediante cromatograffa sobre gel de sflice, eluyendo con EtOAc al 20-50 % en hexanos, dando 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo [3,2-c]piridina-1-carboxilato de terc-butilo (3,16 g, 94 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5= 8,87 (d, J=0,8 Hz, 1H), 8,46 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,51 - 7,31 (m, 5H), 6,83 (s, 1H), 4,93 (d, J = 1,3 Hz, 2H), 4,71 (s, 2H), 1,70 (s, 9H).
Tambien se preparo 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo [3,2-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo mediante el metodo alternativo siguiente: A una solucion agitada de (3-yodopiridin-4-il)carbamato de terc-butilo (230 g, 718 mmol) en DMF (2,3 l) se anadio ((prop-2-in-1-iloxi)metil)benceno (126 g, 862 mmol). La mezcla se purgo con nitrogeno durante 15 minutos, momento en el que se anadieron yoduro de cobre (I) (13,68 g, 71,8 mmol), trietilamina (2,003 l, 1,44E+04 mmol) y cloruro de bis(trifenilfosfina)de paladio (II) (25,2 g, 35,9 mmol) y la mezcla se purgo de nuevo con nitrogeno durante 15 minutos. La mezcla de reaccion se calento a 65 °C durante 24 horas, punto en el cual la TLC (EtOAc al 40 % en eter de petroleo) mostro algo de intermedio restante, de modo que la mezcla de reaccion se volvio a calentar a la misma temperatura durante 24 horas adicionales. A continuacion, la mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se concentro para retirar DMF. El residuo se diluyo con acetato de etilo (3,0 l) y se inactivo con una solucion de cloruro de amonio saturado. Las fases se separaron, las fases organicas se lavaron con salmuera y se evaporaron para dar el producto bruto, que se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice, eluyendo con 25-80 % de EtOAc en eter de petroleo. Las fracciones mixtas se volvieron a purificar en las mismas condiciones y las fracciones piras de ambas columnas se combinaron para proporcionar 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo [3,2-c]piridina-1-carboxilato de terc-butilo (200 g, 81 %). Metodo A de Lc /MS: Tiempo de retencion = 2,44 min, M+H= 339,0.
Etapa D: 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo
Figure imgf000044_0003
Se anadio 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo [3,2-c]piridin-1 -carboxilato de terc-butilo (3,16 g, 9,34 mmol) en EtOH (100 ml) y e hidroxido de paladio al 20 % sobre carbono, 50 % de humedad (1,6 g,1,139 mmol) en una botella Parr de 500 ml. La mezcla se hizo reaccionar durante la noche a 55 psi, punto en el cual se habla consumido la mayorla del material de partida. Se anadio acido acetico (10 ml) a la mezcla de reaccion t se devolvio al agitador Parr y se hidrogeno 2 dlas adicionales. La TLC indico nuevamente que la reaccion era incompleta (esto se determino por la presencia de actividad UV en la mezcla de reaccion), de modo que se anadio oxido de platino (750 mg) y la mezcla se hidrogeno de nuevo a 55 psi durante 2 dlas mas. De nuevo, la TLC indico que la reaccion estaba incompleta, de modo que el catalizador se retiro mediante filtracion a traves de Celite y el filtrado se concentro en el evaporador rotatorio, se convirtio en basico mediante la adicion de bicarbonato sodico saturado, se extrajo 3x con cloroformo y se seco sobre sulfato sodico. La mezcla se purifico mediante biotage al 5-40 % (9:1 de MeOH/NH4OH) en cloroformo. Se obtuvieron dos fracciones principales, el compuesto del tltulo completamente reducido (2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxilato de terc-butilo (1,06 g, 4,14 mmol, rendimiento del 44,3 %, mezcla de diastereomeros)) y el 2-(hidroximetil)-2,3-dihidro-1 H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxilato de terc-butilo parcialmente reducido (1,0 g, 4,00 mmol, rendimiento del 42,8 %).
El material parcialmente reducido, el 2-(hidroximetil)-2,3-dihidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxilato de terc-butilo (1,0 g, 4,00 mmol) se trato con oxido de platino (IV) (0,5 g, 2,202 mmol) en EtOH (100 ml) y acido acetico (20 ml) en una botella Parr de 500 ml y se hizo reaccionar durante la noche a 55 psi, momento en el que la reaccion se estimo completada mediante TLC. La mezcla se aclaro con nitrogeno, se filtro a traves de celite y se evaporo. El residuo resultante se repartio entre cloroformo y 10 % de Na2CO3 , y se extrajo 3 veces. Los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y se evaporaron para proporcionar 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo (0,69 g, 2,69 mmol, rendimiento del 67,4 %, mezcla de diastereomeros). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 4,24 - 3,48 (m, 4H), 3,18 - 2,85 (m, 2H), 2,63 - 1,56 (m, 7H), 1,55 - 1,20 (m 11H). (El producto RMN 1H se complica mediante la mezcla diaestereomerica y tambien rotomeros del grupo Boc).
Tambien se preparo 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo [3,2-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo mediante el metodo alternativo siguiente: En un autescindor (5l) se anadieron etanol (3,0 l) seguido de 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo (200 g, 591 mmol) con purga de nitrogeno. A la mezcla de reaccion se anadio paladio al 5 % sobre carbono (400 g, 1879 mmol) en una atmosfera de nitrogeno a TA. A la mezcla de reaccion se aplico 15 kg/cm2 de presion de hidrogeno y se calento a 60 °C, se agito durante 48 horas. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un lecho de celite y se lavo con metanol. El filtrado se concentro y la mezcla de reaccion se volvio a cargar. En un autescindor (5 l) se anadieron etanol (3,0 l) seguido de la mezcla de reaccion (150 g) con purga de nitrogeno. A la mezcla de reaccion se anadio paladio al 5 % sobre carbono (400 g, 1879 mmol) en una atmosfera de nitrogeno a temperatura ambiente. A la mezcla de reaccion se aplico 15 kg/cm2 de presion de hidrogeno y se calento a 60 °C, se agito durante 24 horas adicionales. La mezcla de reaccion se filtro de nuevo a traves de un lecho de celite y se lavo con metanol, y el filtrado se concentro y se tomo para la recarga.
En un autescindor (5 l) se anadieron etanol (3,0 l) seguido de la mezcla de reaccion (110 g) con purga de nitrogeno. A la mezcla de reaccion se anadio paladio al 5 % sobre carbono (400 g, 1879 mmol) en una atmosfera de nitrogeno a temperatura ambiente. A la mezcla de reaccion se aplico 15 kg/cm2 de presion de hidrogeno y se calento a 60 °C durante 48 horas mas. La mezcla de reaccion se filtro de nuevo a traves de un lecho de celite y se lavo con metanol, y el filtrado se concentro y se suspendio para recargar.
En un autescindor (5 l) se anadieron etanol (3,0 l) seguido de la mezcla de reaccion (90 g) con purga de nitrogeno. A la mezcla de reaccion se anadio paladio al 5 % sobre carbono (400 g, 1879 mmol) en una atmosfera de nitrogeno a TA. A la mezcla de reaccion se aplico 15 kg/cm2 de presion de hidrogeno y se calento a 60 °C durante 24 horas adicionales. En este punto, la monitorizacion por LCMS mostro que la reaccion se habla completado en un ~90 %, la mezcla de reaccion se filtro traves de un lecho de celite y se lavo con metanol. El filtrado se concentro para proporcionar el compuesto del tltulo como un aceite de color marron claro (86 g, 57 %), que se uso para la siguiente etapa sin purification adicional. Metodo A de LC/MS (sin senal UV): Tiempo de retention = 1,34 min, M+H= 257,2.
Etapa E: 2-(hidroximetil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1,5(6H)-dicarboxilato de 5-bencilo
Figure imgf000045_0001
Se disolvio 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1-carboxilato de terc-butilo (1,75 g, 5,53 mmol) en THF (25 ml) y 10 % de la solution de carbonato potasico acuoso (25 ml) y bencilcloroformiato (1,7 ml, 11 ,6 mmol). La mezcla bifasica se agito durante 30 minutos, se diluyo con cloroformo y se separaron las fases. La fraction acuosa se extrajo dos veces de nuevo con cloroformo y las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico. La mezcla en bruto se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice con una mezcla de acetato de etilo/hexanos (15 %-50 %, despues, una retencion al 50 %). El compuesto del tttulo se obtuvo como una mezcla de diastereomeros (2,13 g, 99 %) y se llevo a la siguiente etapa como tal. Metodo B de LC/MS: Tiempo de retencion = 3,80 min, M+H= 391,22.
Etapa F: 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1,5(6H)-dicarboxilato de (2S*3aR*7aS*)-5-bencil 1-tercbutilo
Figure imgf000046_0001
Se disolvio 2-(hidroximetil)hexahidro-1 H-pirrolo[3,2-c]piridin-1,5(6H)-dicarboxilato de 5-bencilo 1-terc-butilo (2,13 g, 5,45 mmol) en piridina (15 ml) y se anadio cloruro de tosilo (1,25 g, 6,56 mmol). La mezcla de reaccion amarilla se agito durante la noche. El grueso de la piridina se evaporo en el evaporador rotatorio y la mezcla se repartio entre HCl 0,1N y cloroformo. La fraccion acuosa se extrajo 3 veces, se lavo con bicarbonato sodico saturado y salmuera, y se seco sobre sulfato sodico. Despues de la filtracion y evaporacion del disolvente, la cromatograffa sobre gel de sflice con un gradiente de 20-100 % de EtOAc en hexanos dio dos diastereomeros, el segundo pico en eluir (1,8 g, 61 %), que fue el componente mayoritario, se llevo a la siguiente etapa. Metodo B de LC/MS: Tiempo de retencion = 4,26 min, M+H= 545,29.
Etapa G: hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-carboxilato de terc-butilo
Figure imgf000046_0002
En una botella Parr de 500 ml se cargaron 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-c] piridin-1,5(6H)-dicarboxilato de (2S*,3aR*, 7aS*)-5-bencil 1-terc-butilo (1,8 g, 3,30 mmol) y paladio sobre carbono (0,6 g, 0,564 mmol) y se anadio etanol (100 ml). La mezcla se aclaro con nitrogeno y, a continuacion, se hidrogeno a 60 psi durante 2 horas. La mezcla de reaccion se aclaro con nitrogeno y se filtro traves de celite para retirar el paladio, lavando con 150 ml mas de EtOH. A los filtrados combinados, se anadio K2CO3 (2 g) y la mezcla se calento en un bano de aceite a 75 °C durante 40 minutos. Despues de la evaporacion del disolvente, el residuo se suspendio en ~20 ml de agua, y se extrajo con cloroformo 3 veces, se seco sobre sulfato sodico, se filtro y el disolvente se evaporo para proporcionar el compuesto del tttulo (0,55 g) como un aceite transparente incoloro que solidifico tras reposo del pdt ciclado como mezcla de rotomeros, con EtOH presente, RMN 1H (400 MHz, CLOR0FORMO-d) Desplazamiento = 4,29 - 3,99 (m, 2 H), 3,33 (dd, J = 8,3, 13,6 Hz, 1 H), 3,03 (d, J = 13,8 Hz, 1 H), 2,95 - 2,67 (m, 4 H), 2,42 - 2,03 (m, 2 H), 1,88 (ddd, J = 2,7, 5,5, 10,8 Hz, 1 H), 1,75 - 1,55 (m, 2 H), 1,54 - 1,40 (m, 9 H). Metodo de B de LC/MS (sin actividad de UV): Tiempo de retencion = 2,33 min, M+H= 239,21.
Etapa H: (2S*,3aR*,5R*, 7aS*)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2TFA
Figure imgf000046_0003
Se disolvio hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c] piridin-1 (6H)-carboxilato de terc-butilo (0,05 g, 0,21 mmol) en cloroformo (1 ml) y se anadio acido trifluoroacetico (0,5 ml) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. El disolvente se evaporo y la mezcla se destilo azeotropicamente tres veces con cloroformo para retirar el exceso de TFA. El compuesto del tttulo se aislo en forma de un aceite viscoso y se uso directamente en la siguiente etapa sin purificacion adicional, RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 =10,74 (s a, 1H), 9,79 (s a, 1H), 9,46 (s a, 1H), 4,26 (s a, 1H), 4,19 (s a, 1H), 3,83 - 3,67 (m, 2H), 3,44 - 3,20 (m, 4H), 2,86 - 2,75 (m, 1H), 2,31 - 2,05 (m, 3H), 2,00 - 1,86 (m 1H).
Etapa I: (2S*,3aR*,5R*, 7aS*)- (hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)(1H-indazol-3-il)metanona
Figure imgf000047_0001
Un vial de centelleo se cargo con (2S*,3aR*,5R*, 7aS*)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2TFA (39 mg, 0,105 mmol), HATU (50 mg, 0,131 mmol), acido 1H-indazol-3-carboxllico (20 mg, 0,126 mmol) DIPEA (0,1 ml, 0,57 mmol) y DMF (1 ml). La mezcla se dejo en agitacion a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se retiro por evaporacion en una corriente de nitrogeno, y el residuo se repartio entre cloroformo y bicarbonato sodico acuoso saturado. Las fases se separaron y la fraccion acuosa se extrajo dos veces mas con cloroformo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y el disolvente se retiro por evaporacion en el evaporador rotatorio. El residuo resultante se purifico por cromatografla sobre gel de sllice, eluyendo con un gradiente del 5 % al 40 % (9:1 de MeOH/NH4OH) en cloroformo, dando el compuesto del tltulo (24,3 mg). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 11,12 - 10,28 (m, 1H), 8,46 - 8,24 (m, 1H), 7,65 - 7,38 (m, 2H), 7,31 (dd, J = 0,9; 8,2 Hz, 1H), 5,41 - 5,05 (m, 1H), 4,95 - 4,68 (m, 1H), 3,62 - 2,82 (m, 7H), 2,66 - 2,37 (m, 2H), 2,13 - 1,91 (m 2H).
Ejemplos 34a y 34b ((2S, 3aR, 5R, 7aS)-hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il) (1H-indazol-3-il)metanona y ((2R,3aS,5S,7aR)-hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il) (1H-indazol-3-il)metanona
Figure imgf000047_0002
La (.2S*3aR*,5R*,7aS*)-(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)(1H-indazol-3-il)metanona (75 mg) se separo en enantiomeros individuales mediante cromatografla de fluidos supercrlticos sobre una columna Chiralpak IC (30 x 250 mm, 5 uM), eluyendo con 40 % de MeOH que contenla 0,1 % de dietilamina en CO2 (temperatura= 35 °C, Presion = 150 bar, Caudal: 70 ml/min durante 25 min, inyeccion: 1 ml de ~5 mg/ ml de solucion en MeOH, UV controlada a 290 nm). El primer pico se recogio para proporcionar ((2 S, 3aR,5R, 7aS)-hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)(1H-indazol-3-il)metanona (31,6 mg, 80 %). El segundo pico se recogio para proporcionar ((2R, 3aS, 5S, 7aR)-hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)(1H-indazol-3-il)metanona (34,7 mg, 88 %).
Tambien se preparo ((2S,3aR,5R, 7aS)-hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)(1H-indazol-3-il)metanona mediante el siguiente metodo alternativo:
Etapa A: 2-(hidroximetil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1,5(6H)-dicarboxilato de (2S,3aR,7aS)-5-bencilo 1-tercbutilo
Figure imgf000047_0003
Se cargo 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo [3,2-c]piridin-1-carboxilato de terc-butilo (263 g, 1026 mmol) a un matraz de fondo redondo de tres bocas y 20 l.
A esto se anadio THF (4000 ml) seguido de una solucion al 10 % de carbonato potasico (464 g, 3355 mmol) (es decir, 464 g en 4640 ml de agua) y la mezcla se agito durante 5 minutos, despues se anadio CBZ-Cl (308 ml, 2155 mmol) gota a gota durante un periodo de 30 minutos. Una vez terminada la adicion, la mezcla de reaccion se agito durante otras 2 horas. Cuando se comprobo la TLC, la reaccion se habla completado. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 X 300 ml) y se lavo con agua (200 ml) y salmuera (200 ml) se seco y se concentro para obtener el compuesto en bruto como un llquido espeso, que se purifico a traves de una columna de sllice para retirar todas las impurezas y obtener amos diastereomeros juntos. Se obtuvieron 220 g de la mezcla de diaestereomeros de la columna tras la purification y la misma se sometio a purification con SFC.
Se obtuvieron 70 g del primer enantiomero obtenido de la SFC 2-(hidroximetil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridina-1,5(6H)-dicarboxilato) de ((2S,3aR,7aS)-5-bencil 1-terc-butilo. OR especlfico = 18,0°. Se recogio la mezcla del enantiomero opuesto y el diaestereomero indeseado por separado y se mantuvieron aparte. Metodo A de LC/MS: Tiempo de retention = 2,23 min, M+H= 391,0 (tambien habla presentes fragmentos del grupo Boc perdido).
Esta reaction y la separation se realizo multiples veces con variaciones menores. En una variation, la separation SFC se realizo en la mezcla de diaestereromeros en bruto, dando cuatro picos (columna Chirlapak AD-H, 20 % de EtOH en CO2). En este caso, el segundo pico de elucion se llevo a las siguientes transformaciones y se uso para la asignacion de la estereoqulmica absoluta.
Etapa B: 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1,5(6H)-dicarboxilato de (2S,3aR, 7aS)-5-bencil 1-tercbutilo
Figure imgf000048_0001
Se cargo 2-(hidroximetil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1,5(6H)-dicarboxilato de (2S,3aR,7aS)-5-bencil 1-tercbutilo (67 g, 172 mmol) en un matraz de fondo redondo de 2000 ml. En una atmosfera de nitrogeno, se anadio piridina (670 ml), seguido de tosil-Cl (72,0 g, 377 mmol) y la agitation continuo a temperatura ambiente durante la noche. Cuando se comprobo la TLC, el material de partida habla desaparecido. La mezcla de reaccion se concentro y se extrajo en acetato de etilo (3 X 250 ml), se lavo con HCl 1,5N (100 ml), se lavo con salmuera (100 ml) y se seco sobre Na2SO4 anhidro. La mezcla se concentro para obtener el compuesto en bruto, que se purifico por cromatografla sobre gel de sllice usando un gradiente de acetato de etilo y eter de petroleo como sistema de disolvente. Despues de la purificacion, se obtuvo 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1,5(6H)-dicarboxilato de (2S,3aR, 7aS)-5-bencilo 1-terc-butilo (73,8 g, 77 %). Metodo A de LC/Ms : Tiempo de retencion = 2,43 min, M+Na= 567,2 (tambien habla presentes fragmentos del grupo Boc perdido).
Etapa C: Hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-carboxilato de (2S, 3aR, 5R, 7aS)-terc-butilo
Figure imgf000048_0002
Se cargo 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1,5(6H)-dicarboxilato de (2S,3aR, 7aS)-5-bencilo 1-tercbutilo (150 g, 275 mmol) y EtOH seco (4500 ml) en una autoclave de 10 l y en una atmosfera de nitrogeno se cargo paladio sobre carbono (49,8 g, 46,8 mmol). Se aplico presion de 4 kg/cm2 y la agitacion se continuo durante 3 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro sobre celite y se lavo con etanol seco. Todos los licores madre se cargaron en un matraz de fondo redondo de 10000 ml bajo un flujo de nitrogeno, se anadio carbonato de potasio (190 g, 1377 mmol) y se dispuso un condensador de reflujo y se calento a 75 °C durante la noche.
La mezcla de reaccion se concentro y se diluyo con 500 ml de agua y se extrajo con cloroformo (3 X 500 ml) y se seco sobre Na2SO4 anhidro.
La retirada del disolvente dio hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina-1 (6H)-carboxilato de (2S,3aR,5R, 7aS)-tercbutilo (53 g, 80 %) del compuesto en bruto como un solido blanquecino, que era de suficiente pureza para usar como tal en las siguientes transformaciones.
Se cree que la estereoqulmica absoluta de este compuesto (y por analogla los compuestos anteriores y posteriores) es (2S,3aR, 7aS) basado en analisis de difraccion de rayos Xr realizado en una muestra de 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-1,5(6H)-dicarboxilato de (2S,3aR,5R, 7aS)-5-bencilo 1-terc-butilo que se convirtio en (2S,3aR,5R,7aS)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2TsOH tras tratamiento con 2 equivalentes de acido p-toluenosulfonico.
Etapa D: (2S,3aR,5R, 7aS)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2HCl
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A una solucion de cloruro de hidrogeno, 4 N en dioxano (287 ml, 1150 mmol) se anadio hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-carboxilato de (2S,3aR,5R,7aS)-terc-butilo finamente molido (27,4 g, 115 mmol) a ta durante 15 minutos. Despues de la adicion, la temperatura interna fue 36,7 °C. La mezcla se agito a temperatura ambiente. Despues de 19 horas, la LC/MS indico ausencia de SM (M H 239). El exceso de HCl 4 N se elimino mediante destilacion al vacfo domestico a 45-50 °C. El residuo restante se trato con EtOAc. El disolvente se evaporo, se seo al vacfo domestico para dar (2S, 3aR, 5R, 7aS) -octahidro-2,5-metanopirrolo [3,2-c] piridina, 2HCl (25,6 g, 105 %, cantidad pequena de agua probablemente presente por RMN H) La RMN indico ausencia de Boc. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 6 = 11,85 (s a, 1H), 10,70 - 9,86 (m, 2H), 4,34 - 3,93 (m, 4H), 3,78 - 3,48 (m, 3H), 3,41 -3,23 (m, 2H), 3,22 - 3,11 (m, 1H), 2,75 (c, J = 5,5 Hz, 1H), 2,36 - 2,19 (m, 1H), 2,18 - 2,03 (m, 2H), 2,03 - 1,88 (m 1H). La integracion suma 2 protones mas de lo esperado, posiblemente debido a una pequena cantidad (~ 1 equiv.) de agua.
Etapa E: ((2S, 3aR, 5R, 7aS)-hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)( 1 H-indazol-3-il)metanona
Figure imgf000049_0002
Una mezcla de acido 1H-indazol-3-carboxflico (4,05 g, 25,00 mmol), 1-hidroxipiridin-2(1H)-ona (2,78 g, 25,00 mmol) y clorhidrato de N1-((etilimino)metileno)-N3,N3-dimetilpropano-1,3-diamina (4,79 g, 25,00 mmol) en MeCN (180 ml) se agito a ta durante 2 horas 30 minutos. La mezcla se anadio despues mediante un embudo de adicion a una solucion de (2S,3aR,5R, 7aS)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2 HCl (5,28 g, 25,0 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (12,92 g, 100 mmol) en MeCN (90 ml) durante 40 minutos. Despues de la adicion, la temperatura interna fue -6 °C. La mezcla se agito con un bano de refrigeracion. Despues de 18 horas, el disolvente en la solucion de reaccion se evaporo hasta sequedad. El aceite viscoso restante se trato con CHCh (150 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (100 ml). Las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con CHCh (2 x 50 ml).
Los extractos combinados se lavaron con salmuera (2 x 75 ml), se secaron (MgSO4), se evaporaron para dar 8,4 g del material en bruto. Este lote se combino con lotes ligeramente mas pequenos (4,22 g de (2S, 3aR, 5R,7aS)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2 HCl) para la purificacion.
Los lotes combinados se purificaron mediante cromatograffa sobre gel de sflice en una columna de 75 g RediSep, caudal = 300 ml/min, volumen de equilibrio = 3,0 volumenes de columna. El disolvente A era cloroformo, el disolvente B era 20 % (amoniaco 2N en metanol) en cloroformo. La purificacion se realizo eluyendo primero con 1,0 VC del disolvente A, seguido por un gradiente de 0-62 % de B sobre 8 CV y manteniendo despues a 62 % de B durante 5,0 VC. La RMN 1H indico que contenfa aproximadamente 12,7 % de CHCl3.
Esta muestra se combino con el producto purificado de otra reaccion menor (4,25 g de (2S,3aR,5R, 7aS)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2 HCl) para la purificacion final y la retirada de cloroformo residual. Los lotes combinados (17,26 g e total) se disolvieron en EtOH (150 ml) con ultrasonidos. El disolvente se evaporo. El residuo restante se disolvio de nuevo en EtOH (150 ml) con ultrasonidos. El disolvente se evaporo.para dar 13,9 g. La muestra se seco adicionalmente en vacfo domestico. Se obtuvo ((2S,3aR,5R, 7aS)-hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)(1 H-indazol-3-il)metanona en forma de un solido de color blanco (13,8 g, rendimiento del 74 %), con una pureza Hp Lc del 99,8 %. Condiciones de LCMS: Waters BEH C18, 1,7um, 150 mm (L) x 2,1 mm (ID), 35 °C, Caudal = 0,35 ml/min, Disolvente A: TFA al 0,1 % en agua, Disolvente B: acetonitrilo. Gradiente: 0-15 min, gradiente 10-25 % de B, 15- 28 min, gradiente 25-95 % de B, 28-30 min, 95 % DE B. Volumen de inyeccion = 2 ul de una muestra de 1 mg/ml en metanol. Tiempo de retencion = 6,43 min, [M+H]+ a m/z = 283. Masa precisa: [M+H]+ a m/z = 283,1546. Rotacion optica: [a]D25 c= 142,9° (1,29 mg/ ml en MeOH). RMN 1H (600 MHz, DMSO-d6) 6 13,49 (s a, 1H), 8,12 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,41 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 4,98 (s a, 1H), 4,62 (s a, 1H), 3,21 (dd, J = 13,5, 8,3 Hz, 1H), 2,98 (m, 2H), 2,81 (m, 2H), 2,69 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 2,37 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 2,19 (m, 1H), 1,79 (m, 2H), 1,65 (m, 1H). RMN 13C (126 MHz, DMSO) 6 159,5, 140,3, 139,4, 126,5, 122,8, 121,9, 121,6, 110,4, 60,2, 56,5, 54,5, 50,4, 50,0, 37,9, 32,9, 21,2. Analisis elemental: (C,H,N) Calculado: (57,77 %, 5,45 %, 19,74 %), encontrado: (58,17 %, 6,50 %, 19,81 %).
Ejemplo 35 ((2S*,3aR*,5R*, 7aS*)-(7-cloro-benzo[b]tiofen-2-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona
Figure imgf000050_0001
La (2S*,3aR*,5R*, 7aS*)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2TFA (38,5 mg, 0,105 mmol), del Ejemplo 34, Etapa H, se hizo reaccionar con acido 7-clorobenzo[b]tiofeno-2-carboxflico (22 mg, 0,105 mmol) de acuerdo con el metodo del Ejemplo 1, Etapa G, dando el compuesto del tftulo, ((2S*,3aR*,5R*, 7aS*)-(7-cloro-benzo[b]tiofen-2-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)metanona (11 mg). RMN 1H (400 m Hz , CLOROFORMO-d) 6= 7,76 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,65 (s a, 1H), 7,51 - 7,34 (m, 2H), 4,94 - 4,77 (m, 1H), 4,64 - 4,38 (m, 1H), 3,57 - 3,38 (m, 1H), 3,37 - 2,82 (m, 5H), 2,62 - 2,29 (m, 2H), 2,13 - 1,82 (m 3H).
EJEMPLO DE REFERENCIA 36 ((2S*,3aR*, 5R*, 7aS*)-(4-clorofenil)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)metanona
Figure imgf000050_0002
La (2S*,3aR*, 5R*, 7aS*)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2TFA (0,75 mmol), del Ejemplo 34, Etapa H, se disolvio en DMF (7,5 ml). En un vial de centelleo, se introdujeron 7,0 ml de esta solucion madre junto con DIPEA (0,61 ml, 3,5 mmol). En otro vial de centelleo, se anadio Ha Tu (0,532 g, 1,4 mmol) y DMF (7,0 ml) y la mezcla se sometio a ultrasonidos para facilitar la disolucion. A otro vial, que contenfa acido 4-clorobenzoico (16 mg, 0,1 mmol), se anadieron 0,5 ml de la solucion madre en HATU y el vial se agito durante 5 minutos, y, a continuacion, se anadieron 0,5 ml de la solucion madre de amina/DIPEA y el vial se agito durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se diluyo con DMF adicional para proporcionar el volumen total de 1,7 ml, y se purifico mediante HPLC preparativa.
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 100 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 20-95 % de B durante 8,3 minutos, despues, una retencion de 6,7 minutos a 95 % de B; Flujo: 25 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 16,9 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion = 1,34 min, M+H= 277,16. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 7,64 - 7,43 (m, 4H), 4,56 -4,32 (m, 1H), 4,29 - 3,64 (m, 1H), 3,25 - 2,58 (m, 6H), 2,42 - 2,29 (m, 1H), 2,13 - 1,84 (m, 1H), 1,83 - 1,72 (m, 1H), 1,72- 1,56 (m, 2H).
EJEMPLO DE REFERENCIA 37 ((2S*,3aR*,5R*, 7aS*)-(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)(1-metil-1H-indazol-3-il)metanona
Figure imgf000050_0003
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 1-metil-1H-indazol-3-carboxflico (0,18 mg, 0,10 mmol).
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 20-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 11,6 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 98 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH c 18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion = 1,44 min, M+H= 297,22. Condiciones de Inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0­ 100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 8,21 - 8,03 (m, 1H), 7,80 -7,66 (m, 1H), 7,47 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,26 (t, J=7,6 Hz, 1H), 5,17 - 4,96 (m, 1H), 4,66 - 4,48 (m, 1H), 4,16 - 4,07 (m, 3H), 3,25 - 2,97 (m, 3H), 2,86 - 2,62 (m, 3H), 2,49 - 2,35 (m, 1H), 2,25 - 2,13 (m, 1H), 1,93 - 1,52 (m 3H).
EJEMPLO DE REFERENCIA 38 ((2S*,3aR*, 5R*, 7aS*)-(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)(3-fenil-1 H-pirazol-5-il)metanona
Figure imgf000051_0001
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 3-fenil-1 H-pirazol-5-carboxflico (0,19 mg, 0,10 mmol).
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 20-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 13,1 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion = 2,57 min, M+H= 309,20. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 13,69 - 13,55 (m, 1H), 7,82 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 7,47 (t, J=7,6 Hz, 2H), 7,42 - 7,33 (m, 1H), 7,20 - 7,02 (m, 1H), 5,14 - 4,66 (m, 1H), 4,58 - 4,42 (m, 1H), 3,24 - 3,11 (m, 1H), 3,09 - 2,90 (m, 2H), 2,84 - 2,63 (m, 3H), 2,47 - 2,30 (m, 1H), 2,19 - 2,06 (m, 1H), 1,92 - 1,73 (m, 2H), 1,68 - 1,57 (m 1H).
EJEMPLO DE REFERENCIA 39 ((2S*,3aR*,5R*, 7aS*)-(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)(1-metil-1 H-indol-3-il)metanona
Figure imgf000052_0001
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 1-metil-1H-indolo-3-carboxflico (0,18 mg, 0,10 mmol). El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 100 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: etanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 20-95 % de B durante 8,3 minutos, despues, una retencion de 6,7 minutos a 95 % de B; Flujo: 25 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 21,4 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters Be H C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion = 2,37 min, M+H= 296,21. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento 7,93 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,73 (s a, 1H), 7,49 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,28 - 7,19 (m, 1H), 7,17 - 7,07 (m, 1H), 4,68 - 4,59 (m, 1H), 4,39 - 4,27 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,25 - 3,09 (m, 2H), 3,08 - 2,61 (m, 5H), 2,42 - 2,29 (m, 1H), 1,87 - 1,52 (m 3H).
Ejemplo 40 ((2S*,3aR*,5R’,7aS*)-(5-cloro-1 H-indazol-3-il) (hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona
Figure imgf000052_0002
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 5-cloro-1H-indazol-3-carboxflico (0,18 mg, 0,10 mmol).
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 11,8 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 95 %. Se usaron dos inyecciones de Lc /MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH c 18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion = 2,80 min, M+H= 317,19. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 8,22 - 8,08 (m, 1H), 7,72 - 7,61 (m, 1H), 7,44 (dd, J = 2,1; 8,9 Hz, 1H), 5,21 - 4,97 (m, 1H), 4,66 - 4,49 (m, 1H), 3,17 - 2,63 (m, 5H), 2,43 - 2,33 (m, 1H), 2,25 - 2,14 (m, 1H), 1,95 - 1,55 (m, 4H) (el pico grande de agua oculta algunas senales y complica la integracion).
EJEMPLO DE REFERENCIA 41 ((2S*,3aR*,5R*,7aS*)-(5-metoxi-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo [3,2-c]piridin-1 (6H)-il)metanona
Figure imgf000053_0001
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 5-metoxi-1H-indazol-3-carboxflico (0,19 mg, 0,10 mmol).
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 10-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 27,3 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de Inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion = 1,72 min, M+H= 313,23. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 8,36 (s, 1H), 7,34 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,22 (dd, J = 2,9; 9,0 Hz, 1H), 4,36 - 4,27 (m, 1H), 4,20 - 4,10 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,20 - 3,11 (m, 1H), 2,98 - 2,71 (m, 4H), 2,68 - 2,60 (m, 1H), 2,42 - 2,32 (m, 1H), 2,26 - 2,13 (m, 1H), 1,86 - 1,69 (m, 2H), 1,63-1,51 (m, 1H).
Ejemplo 42 ((2S*,3aR*,5R*,7aS*)-(6-fluoro-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona
Figure imgf000053_0002
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 6-fluoro-1H-indazol-3-carboxflico (0,18 mg, 0,10 mmol).
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 100 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 20-95 % de B durante 8,3 minutos, despues, una retencion de 6,7 minutos a 95 % de B; Flujo: 25 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 17,5 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 98 %. Se usaron dos inyecciones de Lc /MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH c 18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion = 1,38 min, M+H= 301,13. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0­ 100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 8,21 - 8,09 (m, 1H), 7,41 (dd, J = 2,1; 9,5 Hz, 1H), 7,12 (dt, J = 2,1; 9,2 Hz, 1H), 5,17 - 4,94 (m, 1H), 4,65 - 4,51 (m, 1H), 3,24 - 2,64 (m, 6H), 2,43 - 2,33 (m, 1H), 2,23 - 2,12 (m, 1H), 1,91 (s, 3H).
Ejemplo 43 ((2S*,3aR*,5R*,7aS*)-(6-metoxi-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona
Figure imgf000054_0001
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 6-metoxi-1H-indazol-3-carboxflico (0,19 mg, 0,10 mmol). El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 10-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 14,2 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion = 1,35 min, M+H= 313,20. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 8,21 - 8,09 (m, 1H), 7,41 (dd, J = 2,1; 9,5 Hz, 1H), 7,12 (dt, J = 2,1; 9,2 Hz, 1H), 5,17 - 4,94 (m, 1H), 4,65 - 4,51 (m, 1H), 3,24 - 2,64 (m, 6H), 2,43 - 2,33 (m, 1H), 2,23 - 2,12 (m, 1H), 1,91 (s, 3H).
EJEMPLO DE REFERENCIA 44 ((2S*,3aR*,5R*,7aS*)-(5-bromo-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)metanona
Figure imgf000054_0002
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 5-bromo-1H-indazol-3-carboxflico (0,24 mg, 0,10 mmol).
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 10-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 13,3 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion = 1,63 min, M+H= 361,10. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 14,19 - 13,05 (m, 1H), 8,36 - 8,29 (m, 1H), 7,64 - 7,59 (m, 1H), 7,57 - 7,52 (m, 1H), 5,04 (s a, 1H), 4,67 - 4,49 (m, 1H), 3,25 - 2,63 (m, 6H), 2,42 -2,31 (m, 1H), 2,29 - 2,14 (m, 1H), 1,94 - 1,54 (m 3H).
EJEMPLO DE REFERENCIA 45 ((2S*,3aR*,5R*, 7aS*)-(7-cloro-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo [3,2-c]piridin-1 (6H)-il)metanona
Figure imgf000055_0001
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 7-cloro-1H-indazol-3-carboxflico (0,19 mg, 0,10 mmol).
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 10-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 15,8 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 100 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion = 1,49 min, M+H= 317,17. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 14,27 - 13,96 (m, 1H), 8,18 - 8,03 (m, 1H), 7,53 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,24 (t, J=7,8 Hz, 1H), 5,18 - 4,91 (m, 1H), 4,66 - 4,50 (m, 1H), 3,07 (s, 3H), 2,92 - 2,66 (m, 3H), 2,38 (s a, 1H), 2,24 - 2,08 (m, 1H), 1,98 - 1,57 (m 3H).
Ejemplo 46 ((.2S*,3aR *, 5 R*, 7aS*)-(6-cloro-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona
Figure imgf000055_0002
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 6-cloro-1H-indazol-3-carboxflico (0,19 mg, 0,10 mmol). El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 10-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El material se purifico adicionalmente mediante LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 30-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 14,4 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 98 %. Se usaron dos inyecciones de LC/MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion = 1,55 min, M+H= 317,13. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 14,06 - 12,96 (m, 1H), 8,13 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,26 (dd, J = 1,5; 8,5 Hz, 1H), 5,19 - 4,88 (m, 1H), 4,69 -4,48 (m, 1H), 3,22 - 2,62 (m, 10H), 2,45 - 2,31 (m, 1H), 2,24 - 2,10 (m, 1H), 1,65 (d, J = 14,0 Hz, 1H).
Ejemplo 47 ((2S*,3aR*,5R*,7aS*)-benzo[d]isoxazol-3-il(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)metanona
Figure imgf000056_0001
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido benzo[d]isoxazol-3-carboxflico (0,16 mg, 0,10 mmol).
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: hidroxido de amonio 20 mM; Gradiente: 10-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 14,4 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 99 %. Se usaron dos inyecciones de Lc /MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH c 18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Tiempo de retencion = 1,40 min, M+H= 284,18. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0­ 100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 8,07 - 7,98 (m, 1H), 7,91 -7,85 (m, 1H), 7,78 - 7,72 (m, 1H), 7,50 (t, J=7,3 Hz, 1H), 4,72 - 4,58 (m, 1H), 4,51 - 4,43 (m, 1H), 3,29 - 3,01 (m, 2H), 2,90 - 2,61 (m, 4H), 2,47 - 2,38 (m, 1H), 2,27 - 2,13 (m, 1H), 1,99 - 1,76 (m, 2H), 1,75 - 1,46 (m 1H).
Ejemplo 48 ((2S*,3aR*,5R*,7aS*)-(4-metoxi-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona
Figure imgf000056_0002
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 4-metoxi-1H-indazol-3-carboxflico (0,19 mg, 0,10 mmol).
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 10-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 17,4 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 98 %. Se usaron dos inyecciones de Lc /MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min. Tiempo de retencion = 2,07 min, M+H= 313,20. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 13,28 - 13,10 (m, 1H), 7,36 - 7,27 (m, 1H), 7,11 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,64 - 6,54 (m, 1H), 4,57 - 4,41 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 4,04 - 3,48 (m, 1H), 3,17 - 2,57 (m, 6H), 2,45 - 2,33 (m, 1H), 2,32 - 2,24 (m, 1H), 1,93 - 1,79 (m, 2H), 1,68 (s, 1H).
Ejemplo 49 ((2S*,3aR*,5R*,7aS*)-(6-metil-1 H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)metanona
Figure imgf000057_0001
El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 36, partiendo de acido 6-metil-1H-indazol-3-carboxflico (0,18 mg, 0,10 mmol).
El material en bruto se purifico a traves de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partfculas de 5 pm; Columna protectora: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partfculas de 5 pm; Fase movil A: agua; Fase movil B: metanol; Tampon: acetato amonico 20 mM; Gradiente: 10-95 % de B durante 19,5 minutos, despues, una retencion de 14,0 minutos a 95 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenfan el producto deseado se combinaron y se secaron a traves de evaporacion por centrifugacion. El rendimiento del producto fue de 12,9 mg y su pureza estimada mediante analisis LCMS fue del 98 %. Se usaron dos inyecciones de Lc /MS analftica para determinar la pureza final. Condiciones de inyeccion 1: Columna: Waters BEH c 18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: de acetonitrilo:agua 5:95 con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: de acetonitrilo:agua 95:5 con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 1 ml/min. Condiciones de inyeccion 2: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partfculas de 1,7 pm; Fase movil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Fase movil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amonico 10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: retencion de 0,5 min a 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, despues, una retencion de 0,5 minutos a 100 % de B; Flujo: 0,5 ml/min, Tiempo de retencion = 2,65 min, M+H= 297,21. Se adquirio la RMN de proton en DMSO deuterado. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) Desplazamiento = 13,43 - 13,24 (m, 1H), 7,99 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,42 - 7,31 (m, 1H), 7,06 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,21 - 4,95 (m, 1H), 4,67 - 4,48 (m, 1H), 3,24 - 2,60 (m, 9H), 2,46 (s, 3H), 2,41 - 2,31 (m, 1H), 2,26 - 2,09 (m, 1H), 1,79 (s, 3H).
Ejemplos 49a y 49b (2S,3aR, 5R, 7aS)-(6-metil-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1 (6H)-il)metanona and (2R,3aS,5S, 7aR)-(6-metil-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona
Figure imgf000057_0002
La (2S*,3aR*,5R*,7aS*)-(6-metil-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona (100 mg) se separo en enantiomeros individuales mediante cromatograffa de fluidos supercrfticos sobre una columna Chiralpak IC-H (30 x 250 mm, 5uM), eluyendo con 30 % de MeOH que contenfa 0,1 % de dietilamina en CO2 (temperatura= 35 °C, Presion = 150 bar, Caudal: 70 ml/min durante 25 min, inyeccion: 1 ml de solucion ~10 mg/ ml en CHCh:MeOH (4:1), UV controlada a 290 nm). El primer pico se recogio para proporcionar (2S,3aR,5R, 7aS)-(6-metil-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona (42 mg, 80 %). El segundo pico se recogio para dar (2R,3aS,5S, 7aR)-(6-metil-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona (48 mg, 91 %).
Tambien se preparo (2S,3aR,5R, 7aS)-(6-metil-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona mediante el siguiente metodo alternativo: En un matraz de 3000 ml de 4 bocas se cargo (2S,3aR,5R,7aS)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina (22,77 g, 108 mmol), acetonitrilo (450 ml) y DIPEA (75 ml, 431 mmol). Esto se agito en atmosfera de nitrogeno a temperatura ambiente.
Entretanto, en un segundo matraz de una boca de 2000 m se cargo acido 6-metil-1h-indazol-3-carboxllico (19,00 g, 108 mmol), 2-piridinol-1-oxido (11,98 g, 108 mmol), EDC (20,67 g, 108 mmol) y acetonitrilo (850 ml). Esta suspension se agito energicamente durante 1 hora.
La amina se enfrio a aproximadamente -5 °C en un bano de MeOH/CO2. Usando una pieza de tubo de teflon y un ligero vaclo, la suspension de ester activado se extendio lentamente hacia el recipiente de reaccion principal. El tiempo de adicion fue de aproximadamente 20 minutos, manteniendo la temperatura de la mezcla de reaccion por debajo de 0 °C. Cuando se completo la transferencia, el bano se reemplazo con hielo triturado y la reaccion se agito a 0 °C. Despues de 5 horas, la mezcla de reaccion se concentro para retirar los volatiles. El producto en bruto se combino con el material en bruto a partir de dos reacciones mas pequenas (2,68 y 0,55 g (2S,3aR,5R, 7aS)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina) para purificacion.
Los lotes combinados se dividieron por la mitad y cada mitad se purifico por cromatografla en gel de sllice en una columna RediSep de 1500 g, caudal = 1000 ml/min, volumen de equilibrio = 3,0 volumenes de columna. El disolvente A era cloroformo, el disolvente B era 20 % (amoniaco 2N en metanol) en cloroformo. La purificacion se realizo eluyendo primero con 1,0 VC del disolvente A, seguido de un gradiente de 0-50 % de B sobre 10 VC y manteniendo despues a 50 % de B durante 5,0 VC.
Las dos muestras obtenidas tras la cromatografla, ambas contenlan cloroformo residual. Para eliminar el cloroformo residual, se combinaron (34,36 g) y se disolvieron en EtOH (350 ml). La mezcla se calento a 35 °C para convertirse en una solucion amarillo claro transparente. Despues de 1 hora, la solucion se enfrio a ta. El disolvente en la solucion se evaporo a sequedad, se seco al vaclo durante la noche, dando 29,6 g.
La RMN indico que habla EDC urea (M+H 174) presente.
El disolvente de las fracciones purificadas con SFC (en total, aproximadamente 16 l) se evaporo. El solido blanquecino se disolvio en EtOH (250 ml) a 40 °C con agitacion. Los disolventes en la solucion se evaporaron. El solido se transfirio despues a una placa de cristal, se seco bajo un desecador a vaclo a temperatura ambiente. Despues de 2,5 horas, la RMN indico que habla presente aproximadamente un 1,3 % en peso de EtOH. La muestra se continuo hasta secar al vaclo durante la noche.
Despues de secar a ta durante 17 horas, la RMN indico que quedaba aproximadamente la misma cantidad de EtOH que la de 2,5 horas. La muestra en la placa de cristal se trituro y se transfirio a una botella ambar de 2 onzas, se seco en un desecador al vaclo durante 2 horas para dar 25,50 g. Se presento para su analisis GC. Los resultados indicaron aproximadamente un 1,8 % en peso de EtOH presente. La muestra se seco adicionalmente a ta.
La muestra se acerco al peso constante para dar (2S, 3aR, 5R, 7aS)-(6-metil-1H-indazol-3-il) (hexahidro-2,5-metanopirrolo [3,2-c] piridin-1 (6H ) -il) metanona (25,48 g) con una pureza por HPLC del 99,6 %. Condiciones de LCMS: Waters BEH C18, 1,7um, 150 mm (L) x 2,1 mm (ID), 35 °C, Caudal = 0,35 ml/min, Disolvente A: TFA al 0,1 % en agua, Disolvente B: TFA al 0,05 % en acetonitrilo. Gradiente: 0-15 min, gradiente 10-25 % de B, 15-28 min, gradiente 25-95 % de B, 28-30 min, 95 % DE B. Volumen de inyeccion = 2 ul de una muestra de 1 mg/ml en metanol. Tiempo de retencion = 9,46 min, [M+H]+ a m/z = 297. Masa precisa: [M+H]+ a m/z = 297,1702. Rotacion optica: [a]D25 c= 135,45° (0,1 mg/ ml en MeOH). RMN 1H (DMSO-d6) 5: 13,33 (s, 1H), 7,97-8,02 (m, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,03-7,07 (m, 1H), 4,99 (s a, 1H), 4,58-4,62 (m, 1H), 3,20 (dd, J = 13,4; 8,4 Hz, 1H), 2,97-3,12 (m, 2H), 2,74­ 2,84 (m, 2H), 2,65-2,72 (m, 1H), 2,45 (s, 4H), 2,32-2,40 (m, 1H), 2,15-2,22 (m, 1H), 1,74-1,89 (m, 2H), 1,54-1,68 (m, 1H). RMN 13C (DMSO-d6) 5: 160,1, 141,4, 139,8, 136,7, 124,4, 122,0, 121,6, 110,0, 60,7, 56,9, 55,0, 50,9, 50,5, 38,3, 33,4, 21,9, 21,7. Karl Fischer: 0,72 % de agua. Analisis elemental: (C,H,N) Calculado: (68,23 %, 6,89 %, 18,60 %), encontrado: (68,55 %, 7,22 %, 18,60 %).
Tambien se preparo (2R,3aS,5S, 7aR)-(6-metil-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona mediante el siguiente metodo alternativo:
(2R,3aS,5S, 7aR)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2 HCl se preparo de la misma manera que (2S,3aR,5R, 7aS)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2 HCl mediante el metodo del ejemplo 1a, ruta alternativa, desde el enantiomero opuesto de la separation por SFC del ejemplo 1a, etapa alternativa A.
A una mezcla de acido 6-metil-1H-indazol -3-carboxllico (11,08 g, 62,9 mmol), 1-hidroxipiridin-2(1H)-ona (6,99 g, 62,9 mmol) en MeCN (440 ml) se anadio clorhidrato de N1 -((etilimino)metileno)-N3,N3-dimetilpropano-1,3-diamina (12,06 g, 62,9 mmol) en porciones durante 5 minutos. Despues de completar la adicion, la mezcla se agito a ta (3:40 pm) durante 2 horas 30 minutos. La mezcla se transfirio a un embudo de adicion. Esta mezcla se anadio a una solucion de (2R,3aS,5S, 7aR)-octahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridina, 2 HCl (13,28 g, 62,9 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (32,5 g, 252 mmol) en MeCN (220 ml) durante 15 minutos, manteniendo la temperatura interna entre -30 to -25 °C con un bano de acetona/hielo seco. Despues de la adicion, la mezcla se agito con un bano de refrigeration y se calento lentamente a temperatura ambiente.
Despues de 16 horas, se realizo la LC/MS y parecio identica a la de 40 minutos, la reaccion se proceso. El solido se retiro por filtration. El disolvente en el filtrado se evaporo hasta sequedad. El aceite restante se disolvio en CHCb (400 ml), se lavo con NaHCO3 saturado (160 ml). Las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con CHCI3 (1 x 100 ml). Los extractos combinados se lavaron con NaHCO3 saturado (2 x 120 ml), se secaron (MgSO4), se evaporaron para dar el material en bruto.
El producto en bruto se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice en una columna de 750 g RediSep, caudal = 300 ml/min, volumen de equilibrio = 3,0 volumenes de columna.
El disolvente A era cloroformo, el disolvente B era 20 % (amoniaco 2N en metanol) en cloroformo. La purificacion se realizo eluyendo primero con 1,0 VC del disolvente A, seguido de un gradiente de 0-50 % de B sobre 10 VC y manteniendo despues a 50 % de B durante 5,0 VC, dando (2R,3aS,5S, 7aR)-(6-metil-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona (16,2 g).
La muestra se recristalizo en MeCN (600 ml) a 65 °C durante 3 horas y despues se enfrio lentamente a ta durante la noche. El solido de color blanco se recogio en u filtro, se lavo con MeCN, se seco en vacfo domestico bajo una corriente de nitrogeno. Para dar (2R,3aS,5S, 7aR)-(6-metil-1H-indazol-3-il)(hexahidro-2,5-metanopirrolo[3,2-c]piridin-1(6H)-il)metanona (12,1 g, 64,8 %) con una pureza en HPLC del 99,8 %. Condiciones de LCMS: Waters Be H C18, 1,7um, 150 mm (L) x 2,1 mm (ID), 35 °C, Caudal = 0,35 ml/min, Disolvente A: TFA al 0,1 % en agua, Disolvente B: TFA al 0,05 % en acetonitrilo. Gradiente: 0-15 min, gradiente 10-25 % de B, 15-28 min, gradiente 25-95 % de B, 28­ 30 min, 95 % DE B. Volumen de inyeccion = 2 ul de una muestra de 1 mg/ml en metanol. Tiempo de retencion = 9,21 min, [M+H]+ a m/z = 297. Masa precisa: [M+H]+ a m/z = 297,1698. Rotacion optica: [a]D25 c= -132,14° (1,66 mg/ ml en MeOH). Karl Fischer: 0,75 % de agua. Analisis elemental: (C,H,N) Calculado: (67,77 %, 6,45 %, 19,74 %), encontrado: (68,17 %, 6,51 %, 19,81 %).
Ejemplo 50 (1H-indazol-3-il)(octahidro-2,8-epiminoindolizin-9-il)metanona
Figure imgf000059_0001
Etapa A: 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo[3,2-b]piridin-1-carboxilato de terc-butilo
Figure imgf000059_0002
Un vaso de presion resellable se cargo con (2-bromopiridin-3-il)carbamato de terc-butilo (6,75 g, 24,7 mmol), ((prop-2-in-1-iloxi)metil)benceno (4,34 g, 29,7 mmol), cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,87 g, 1,24 mmol), yoduro de cobre (I) (0,47 g, 2,47 mmol), trietilamina (69 ml, 494 mmol) y DMF (25 ml). La mezcla se desgasifico burbujeando nitrogeno gaseoso durante varios minutos, el matraz se sello y la mezcla de reaccion se agito durante la noche. Tras ~18 horas, la CL-EM mostro una mezcla ~7:4 del producto intermedio y ciclada completamente.
Esta relacion se mantuvo esencialmente sin cambios despues de ~ 7 h adicionales, de modo que se anadio una porcion adicional de yoduro de cobre (I) (1 g, ~5 mmol) y la mezcla se agito a ta durante ~18 horas adicionales, momento en el cual, la conversion se habfa completado mediante LC/MS (Metodo A de LC/MS: tiempo de retencion = 3,41 min, M+H = 339,15). La mezcla se diluyo con EtOAc y se lavo con cloruro de amonio saturado (4x) y salmuera (1x). Los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y se evaporaron, y el material en bruto se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice, eluyendo con EtOAc al 20-50 % en hexanos, dando 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo [3,2-b]piridin-1 -carboxilato de terc-butilo (7,6 g, 91 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6= 8,52 (d, J=3,5 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,48 - 7,32 (m, 5H), 7,21 (dd, J = 4,6, 8,4 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 4,97 (d, J = 0,8 Hz, 2H), 4,72 (s, 2H), 1,69 (s, 9H).
Etapa B: 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo[3,2-b]piridin-1-carboxilato de terc-butilo
Figure imgf000060_0001
Se anadio 2-((benciloxi)metil)-1H-pirrolo [3,2-b]piridin-1 -carboxilato de terc-butilo (7,6 g, 22,46 mmol) en etanol (200 ml) a hidroxido de paladio al 20 % sobre carbono, 50 % de humedad (4 g,2,85 mmol) en una botella Parr de 500 ml. La mezcla se hidrogeno a 50psi durante una noche. La TLC y la LC/MS solo muestran una conversion parcial en el primer producto de reaccion. La botella se recargo con H2 a 55 psi y se hizo reaccionar durante la noche, momento en el cual todavfa quedaba material de partida. La mezcla se transfirio a una botella de 2 l mas grande, se diluyo con EtOH adicional (200 ml) y AcOH (40 ml) y la botella se devolvio al agitador Parr. Tras ~4 horas, la LC/MS mostro algo mas de conversion en material desbencilado. La mezcla se dejo reaccionar en un agitador Parr durante el fin de semana, momento en el cual la reduccion todavfa estaba incompleta. La mezcla se filtro para retirar el Pd(OH)2 y se anadio PtO2(~1 g). La hidrogenacion se continuo 2 dfas mas, momento en el que se observo una conversion completa. El catalizador se retiro por filtracion y el filtrado se concentro en el evaporador rotatorio, se convirtio en basico mediante la adicion de bicarbonato sodico saturado, se extrajo 3 veces con cloroformo, se seco sobre sulfato de sodio y se evaporo y se continuo en bruto hasta la siguiente etapa.
Etapa C: 2-(hidroximetil)hexahidro-1H-pirrolo [3,2-b]piridina-1,4 (2H)-dicarboxilato de 4-bencilo 1-terc-butilo
Figure imgf000060_0002
El 2-(hidroximetil)octahidro-1H-pirrolo [3,2-b]piridina-1-carboxilato de terc-butilo (2,9 g, 9,17 mmol) se disolvio en THF (40 ml) y 10 % de solucion de carbonato potasico acuoso (40 ml) y se anadio bencilcloroformiato (2,75 ml, 19,35 mmol). La mezcla bifasica se agito durante 30 minutos, se diluyo con cloroformo y se separaron las fases. La fraccion acuosa se extrajo dos veces de nuevo con cloroformo y las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico. La mezcla en bruto se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice con una mezcla de acetato de etilo/hexanos (20 %-100 %). El compuesto del tftulo se obtuvo como una mezcla de diastereomeros (3,32 g, 93 %) y se llevo a la siguiente etapa como tal. Metodo A de LC/MS: Tiempo de retencion = 3,92 min, M+H= 391,22.
Etapa D: 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-b]piridin-1,4(2H)-dicarboxilato de (2S*,3aS*,7aS*)-4-bencilo 1-terc-butilo
Figure imgf000060_0003
Se disolvio 2-(hidroximetil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2- b]piridina-1,4(2H)-dicarboxilato de 4-bencilo 1-terc-butilo (3,32 g, 8.50 mmol) en piridina (20 ml) y se anadio cloruro de tosilo (1,95 g, 10,2 mmol). La mezcla de reaccion amarilla se agito durante la noche. El grueso de la piridina se evaporo en el evaporador rotatorio y la mezcla se repartio entre HCl 0,1N y cloroformo. La fraccion acuosa se extrajo 3 veces, se lavo con bicarbonato sodico saturado y salmuera, y se seco sobre sulfato sodico. Despues de la filtracion y evaporacion del disolvente, la cromatograffa sobre gel de sflice con un gradiente de 20-100 % de EtOAc en hexanos dio dos diastereomeros, el primer pico en eluir (3 g, 64 %), que fue el componente mayoritario, se llevo a la siguiente etapa. RMN 1H se registro, pero no dio ninguna informacion debido a una mezcla completa de rotomeros de los grupos Boc y Cbz.
Etapa E: Octahidro-2,8-epiminoindolizin-9-carboxilato de terc-butilo Se cargo una botella Parr de 500 ml con 2-((tosiloxi)metil)hexahidro-1H-pirrolo[3,2-b] piridin-1,4(2H)-dicarboxilato de (2S*,3aS*, 7aS*)-4-bencil 1-terc-butilo (3 g, 5.51 mmol) y paladio en carbono (0,586 g, 5,51 mmol), paladio sobre carbono (0,586 g, 5,51 mmol) y etanol (100 ml).
Figure imgf000061_0001
La mezcla se hidrogeno a 55 psi en un agitador Parr durante 3 horas. La LC/MS muestra la escision completa de CBz. La mezcla se filtro para retirar el catalizador. Al filtrado, carbonato sodico (~1 g). La mezcla se calento a reflujo 1 hora, momento en el que la TLC mostro conversion completa en el producto ciclado. Se anadio agua y la mayorfa del etanol se evaporo. La mezcla se extrajo con cloroformo (3 x), se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo para proporcionar un aceite que se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice, eluyendo con 5-40 % (9:1 de MeOH/NI-LOH) en cloroformo, dando octahidro-2,8-epiminoindolizin-9-carboxilato de terc-butilo (0,87 g, 3,65 mmol, rendimiento del 66,3 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 4,65 - 4,21 (m, 1H), 3,65 (s a, 1H), 3,31 (s a, 1H), 3,13 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 3,02 - 2,67 (m, 3H), 2,59 - 2,27 (m, 1H), 1,91 - 1,59 (m, 3H), 1,55 - 1,39 (m, 10H), 1,32 - 1,08 (m 1H).
Etapa F: Octahidro-2,8-epiminoindolizine, 2TFA, el octahidro-2,8-epiminoindolizin-9-carboxilato de terc-butilo (0,29 g, 1,2 mmol) se disolvio en cloroformo (3 ml) y se anadio TFA (3 ml).
Figure imgf000061_0002
La mezcla se agito durante 30 minutos, los volatiles se evaporaron y el residuo se destilo azeotropicamente con cloroformo para proporcionar octahidro-2,8-epiminoindolizina, 2TFA. El rendimiento de la reaccion se asumio que era cuantitativo para su uso en la siguiente etapa sin purificacion. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 = 11,22 (s a, 1H), 9,86 (s a, 1H), 9,23 (s a, 1H), 4,46 (s, 1H), 4,31 (s, 2H), 3,96 (s a, 1H), 3,61 (dd, J = 2,0; 13,3 Hz, 1H), 3,50 - 3,36 (m, 2H), 3,35 - 3,14 (m, 1H), 2,26 - 1,71 (m 5H).
Etapa G: (1H-indazol-3-il)(octahidro-2,8-epiminoindolizin-9-il)metanona
Figure imgf000061_0003
Se cargo un vial de centelleo con octahidro-2,8-epiminoindolizina, 2 TFA (35 mg, 0,096 mmol), HATU (45 mg, 0,119 mmol), acido 1H-indazol-3-carboxflico (19 mg, 0,115 mmol) DIPEA (0,1 ml, 0,57 mmol) y DMF (1 ml). La mezcla se dejo en agitacion a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se retiro por evaporacion en una corriente de nitrogeno, y el residuo se repartio entre cloroformo y bicarbonato sodico acuoso saturado. Las fases se separaron y la fraccion acuosa se extrajo dos veces mas con cloroformo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y el disolvente se retiro por evaporacion en el evaporador rotatorio. El residuo resultante se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice, eluyendo con un gradiente del 5 % al 40 % (9:1 de MeOH/NH4OH) en cloroformo, para proporcionar el compuesto del tftulo (20 mg, 70 %). Metodo A de LC/MS: Tiempo de retencion = 1,99 min, M+H= 283,15. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 11,41 (s a, 1H), 8,41 -8,09 (m, 1H), 7,58 - 7,50 (m, 1H), 7,44 (ddd, J = 1,1, 7,0, 8,2 Hz, 1H), 7,34 - 7,24 (m, 1H), 5,32 (s, 1H), 4,68 - 4,23 (m, 1H), 3,62 - 2,76 (m, 6H), 2,09 - 1,58 (m, 4H), 1,38 - 1,24 (m 2H).
EJEMPLO DE REFERENCIA 51 (7-clorobenzo[b]tiofen-2-il)(octahidro-2,8-epiminoindolizin-9-il)metanona
Figure imgf000062_0001
Sometiendo acido clorobenzo[b]tiofeno-2-carboxllico (24 mg, 0,115 mmol) a las condiciones de reaccion para el Ejemplo 1, etapa G, se proporciono (7-clorobenzo[b]tiofen-2-il)(octahidro-2,8-epiminoindolizin-9-il)metanona (28 mg, 84 %). Metodo A de LC/MS: Tiempo de retencion = 2,97 min, M+H= 333,09. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5= 7,78 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,50 - 7,45 (m, 1H), 7,44 - 7,38 (m, 1H), 4,90 - 4,79 (m, 1H), 4,39 - 4,26 (m, 1H), 3,80 - 3,46 (m, 2H), 3,23 - 3,00 (m, 3H), 2,23 - 2,03 (m, 2H), 1,96 - 1,21 (m, 14H) (Los picos en la region de alquilo se han ensanchado, posiblemente debido a la presencia de rotomeros y se hallaron mas protones de lo esperado, probablemente debido a la presencia de algo de agua en la muestra).

Claims (6)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto seleccionado del grupo que consiste en
Figure imgf000063_0001
Figure imgf000064_0001
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
2. Un compuesto de la reivindicacion 1 seleccionado del grupo que consiste en
Figure imgf000064_0002
Figure imgf000065_0001
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
3. Una composicion farmaceutica que comprende una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicacion 1 o de la reivindicacion 2, o una sal del mismo farmaceuticamente aceptable y un vehfculo farmaceuticamente aceptable.
4. Un compuesto de las reivindicaciones 1 o 2 para su uso en un metodo para el tratamiento de esquizofrenia, enfermedad de Alzheimer, trastornos cognitivos, artritis reumatoide, artrosis, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn o diabetes.
5. El compuesto para el uso de la reivindicacion 4, dirigido a esquizofrenia.
6. El compuesto para el uso de la reivindicacion 4 dirigido a enfermedad de Alzheimer.
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