ES2582207T3 - Formulación de toxina peptídica - Google Patents
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Abstract
Una formulación peptídica que comprende: a) un péptido que se selecciona de entre cualquiera de las siguientes secuencias: SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 118, o SEQ ID NO: 119; b) un disolvente orgánico polar que se selecciona de entre acetona, metanol, etanol, propanol y todos sus isómeros, metiletilcetona, dietilcetona, acetonitrilo y etilacetoacetato; c) un disolvente aprótico polar que se selecciona de entre: dimetilsulfóxido (DMSO), dimetilformamida, dioxano y hexametilfosforotriamida; d) en donde dicho disolvente orgánico polar comprende de un 70 a un 99 por ciento (%) del volumen final de la formulación; e) en donde dichos disolvente aprótico polar o adyuvante comprenden de aproximadamente un 30 a aproximadamente un 1 por ciento (%) del volumen final de la suspensión; f) una fase acuosa opcional, en donde dicha fase acuosa comprende desde 0 (cero) a aproximadamente un 10 por ciento (%) del volumen final de la suspensión.
Description
El adyuvante puede ser cualquier aceite y/o tensioactivo emulsionante formulado para aplicaciones agrícolas de pesticidas y especialmente péptidos. Estas formulaciones comerciales normalmente tienen aceites y tensioactivos emulsionantes formulados para “llevar y diseminar” los principios activos. Ejemplos incluyen: “Aero Dyneamic” de Helena Chemical Co. que es un aceite vegetal metilado o etilado, un tensioactivo no iónico y un agente tamponante
5 o acidificante. Se describe adicionalmente como una “mezcla del propietario de ésteres de alquil fosfato etoxilado, polidimetilsiloxano modificado con polialquileno, emulsionantes no iónicos y aceites vegetales metilados. Para el uso aéreo solamente a 2,202-8,808 litros /378,57 litros (2-8 qt/100 gal) 30-70 por ciento. Proporciona una reducción del pH y tamponado, NIS y mezcla de aceites” Véase la etiqueta para las tasas. Otros ejemplos y fabricantes de adyuvantes se pueden encontrar en la Tabla 1.
10 Tabla 1 (a continuación): Tensioactivos Agroquímicos (Comienza en la página siguiente).
- Tensioactivo/Adyuvante
- Composición Descripción Breve Aplicación sugerida
- LI 700 (Productos Loveland)
- Fosfatidilcolina, ácido metilacético, y éter de alquil polioxietileno (80 %); Constituyentes ineficaces como adyuvantes de la pulverización (20 %) Penetrante no iónico, poco espumante; ayuda a proporcionar una cubierta de pulverización uniforme y a acidificar las soluciones de pulverización 0,2267-0,68038 kg/ 378,54 litros (8-24 oz/100 galones) (solución al 0,0625 %-0,1825 %)
- SILWET L-77 (Productos Loveland)
- Copolímeros de poliéter polisiloxano, poliéter (100 %) Tensioactivo de silicona no iónico, organofuncional que reduz a tensión superficial por debajo de los tensioactivos utilizados comúnmente, lo que da como resultado una humectación más eficaz y una cobertura más uniforme 0,0850-0,4536 kg/ 378,54 litros (3-16 oz/100 galones) (Solución al 0,02 %-0,125 %)
- MSO Concentrado w/LECI-TECH (Productos Loveland)
- Aceite vegetal metilado, alcohol etoxilato, fosfatidilcolina (100 %) Aumenta la actividad de tensioactivos no iónicos herbicidas post-aplicados y aceites de fumigación de cosechas basados en petróleo. 0,4732-9,09464 I por 4046,85 m2 (1-2 pintas por acre) (1,25-2,5 % basándose en 10 galones/acre)
- TACTIC (Productos Loveland)
- Látex sintético, 1,2propanodiol, Alcohol etoxilato, copolímero de silicona poliéter (63,4 %); Constituyentes ineficaces como adyuvantes de la pulverización (36,6 %) Aumenta la adherencia (polímero de látex) y la cobertura (organosilicona) 0,2267-0,9072 kg/ 378,54 litros (8-32 oz/100 gal.) (Solución al 0,0625 %-0,25 %)
Las concentraciones finales del disolvente aprótico polar y/o adyuvante se pueden determinar, para la formulación de un péptido tópico particular que se ha hecho especial, por los expertos en la técnica. Los inventores han 15 formulado satisfactoriamente péptidos tópicos especiales con disolventes apróticos polares a concentraciones finales del 10 % y tan bajas como de 0,01 %, con 0,5 % funcionan bien. El adyuvante Silwet L-77, por ejemplo, funciona bien a una concentración final tan baja como de un 0,01 %, y los expertos en la técnica deberían ser capaces de encontrar satisfactoriamente otros adyuvantes utilizando incluso valores mayores o menores que los intervalos descritos en el presente documento para formulaciones particulares de péptidos tópicos particulares que
20 se han hecho especiales.
El agua y las etapas de sonicación descritas anteriormente se pueden aplicar en cualquier orden. Los modos particulares de aplicación de insecticidas para formulaciones en particular de péptidos tópicos especiales los determinarán los expertos en la técnica.
25 Péptidos tóxicos tópicos y su preparación
Los ejemplos de péptidos tóxicos para insectos se conocen bien y se pueden encontrar en numerosas referencias. Se pueden identificar por su naturaleza peptídica y su actividad, habitualmente su actividad oral o por inyección. En
30 el presente documento los inventores proporcionan unos cuantos ejemplos para ilustrar y describir mejor la invención.
5 2,915 µg/insecto x 1 µmol/4050 µg x 106 pmol/1 µmol = 719,7 pmol/insecto x 1 insecto/0,016 g =
45.000 pmol/g
Se preparó también una formulación de control de seroalbúmina bovina (BSA) en acetona y DMSO. Debido a la concentración del BSA de reserva, la concentración de acetona era solamente de aproximadamente un 60 % en un 10 10 % de DMSO.
Tabla 3 (anterior). Tratamientos con Acetona-DMSO
- Dosis de ω-ACTX (pmol/g)
- Concentración DMSO ( %) ω-ACTX DMSO Acetona Volumen Final
- 90.000
- 10 % 17,5 µl ω-ACTX DE RESERVA (50 µg/µl en DMSO) 12,5 µl 270 µl 300 µl
- 45.000
- 10 % 50 µl (5 µg/µl en Acetona) 17,15 µl 104,3 µl 171,5 µl
- -ve
- 10 % - 30 µl 270 µl 300 µl
- +ve
- 10 % 87,5 µl 10 µg/µl BSA 30 µl 182,5 µl 300 µl
Administración y aplicación de la formulación
15 Se refrigeraron las moscas domésticas durante ~ 4 h y luego se anestesiaron con CO2. Se aplicó cada una de las formulaciones de tratamiento descritas anteriormente a un grupo de diez moscas anestesiadas. Los tratamientos consistían en una gota de 2 µl de la formulación respectiva, pipeteada en la superficie torácica dorsal del cuerpo de una mosca. Los grupos de diez moscas anestesiadas se utilizaron para ensayar cada régimen de tratamiento. La
20 solución de Acetona-DMSO se evaporaba rápidamente de la cutícula. Se dejó que se absorbieran las formulaciones de DMSO a través de la cutícula. Las moscas tratadas que revivían sobre la superficie dorsal tendían a pegarse al fondo del recipiente y luchaban después de la colocación con alimento y agua; se hizo una intervención para evitar esto golpeando suavemente el recipiente o manipulando las moscas pegadas volviéndolas a la orientación correcta con unas pincillas. También se reservó un grupo de moscas sin tratar para asegurar que la mortalidad no era
25 afectada por la exposición al CO2. En todos los tratamientos se dieron alimentos y agua y se observaron durante 24 horas.
Resultados (n = 10 para todos los grupos de tratamiento, el número de moscas muertas por grupo se muestran en la segunda columna): 30 Tabla 4 (anterior). Resultados de tratamientos con Acetona-DMSO
- Tratamiento (Hora de aplicación)
- Muertas (Tiempo tras Tratamiento) Notas
- -ve 20 % DMSO/Tween (3:54 PM 1/7/08)
- 0 (~ 8 h) Todas las moscas saludables/activas
- 90.000 pmol/g ω-ACTX 20 % DMSO/Tween (4:09 PM 1/7/08)
- 1 (~ 8 h) 1 muerta en el alimento, las otras saludables
- Tratamiento (Hora de aplicación)
- Muertas (Tiempo tras Tratamiento) Notas
- 9.000 pmol/g ω-ACTX 20 % DMSO/Tween (4:22 PM 1/7/08)
- 1 (~ 7,5 h) 1 pegada al fondo (?) muertas (?)
- 900 pmol/g ω-ACTX 20 % DMSO/Tween (4:32 PM 1/7/08)
- 0 (~ 7,5 h)
- -ve 10 % DMSO/Tween (5:39 PM 1/7/08)
- 0 (~ 6,5 h) 1 pegada al fondo y desplazada
- 90.000 pmol/g ω-ACTX 10 % DMSO/Tween (4:52 PM 1/7/08)
- 0 (~ 7 h)
- -ve 90 % Acetona/10 %DMSO (5:25 PM 1/7/08)
- 1 (∼7,5 h)
- +ve Proteína BSA (5:01 PM 1/7/08)
- 1 (?) (~ 7 h) 1 inconsciente al lado del plato de alimento
- 90.0000 pmol/g ω-ACTX (DMSO de reserva) 90 % Acetona/10 % DMSO (5:11 PM 1/7/08)
- 0 (~ 7 h) 1 pegada sobre la espalda y desplazada
- 45.0000 pmol/g ω-ACTX (Acetona de reserva) 90 % Acetona/10 % DMSO (5:19 PM 1/7/08)
- 1 (~ 6,5 h) 1 muerta en el plato de alimento
- -ve sin tratar (5:40 PM 1/7/08)
- 0 (~ 6,5 h)
- Tratamiento (Hora de aplicación)
- Muertas (Tiempo tras Tratamiento) Notas
- -ve 20 % DMSO/Tween (3:54 PM 1/7/08)
- 0 (∼19 h) Todas las moscas saludables/activas
- 90.000 pmol/g ω-ACTX 20 % DMSO/Tween (4:09 PM 1/7/08)
- 1 (~ 19 h) 1 con espasmos
- 9.000 pmol/g ω-ACTX 20 % DMSO/Tween (4:22 PM 1/7/08)
- 1 (~ 18,5 h) Muerta por pegarse al fondo
- 900 pmol/g ω-ACTX 20 % DMSO/Tween (4:32 PM 1/7/08)
- 0 (∼18,5 h) Todas las moscas saludables/activas
- -ve 10 % DMSO/Tween (5:39 PM 1/7/08)
- 1 (~ 17,5 h) Muerta en la comida
- 90.000 pmol/g ω-ACTX 10 % DMSO/Tween (4:52 PM 1/7/08)
- 1 (8 h) 2 con espasmos
- -ve 90 % Acetona/10 %DMSO (5:25 PM 1/7/08)
- 1 (~ 17,5 h)
- +ve Proteína BSA (5:01 PM 1/7/08)
- 1 (~ 18 h)
- 90.0000 pmol/g ω-ACTX (DMSO de reserva) 90 % Acetona/10 % DMSO (5:11 PM 1/7/08)
- 1 (~ 18 h) 1 con espasmos
- 45.0000 pmol/g ω-ACTX (Acetona de reserva) 90 % Acetona/10 % DMSO (5:19 PM 1/7/08)
- 5 (~ 17,5 h) 2 con espasmos
- -ve sin tratar (5:40 PM 1/7/08)
- 0 (~ 17,5 h) Todas las moscas saludables/activas
- Tratamiento
- Muertas (Tiempo tras Tratamiento) Notas
- -ve 20 % DMSO/Tween (3:54 PM 1/7/08)
- 0 (~ 27,5 h)
- 90.000 pmol/g ω-ACTX 20 % DMSO/Tween (4:09 PM 1/7/08)
- 3 (~ 27,5 h) 1 con espasmos
- 9.000 pmol/g ω-ACTX 20 % DMSO/Tween (4:22 PM 1/7/08)
- 1 (~ 27 h)
- Tratamiento (Hora de aplicación)
- Muertas (Tiempo tras Tratamiento) Notas
- 900 pmol/g ω-ACTX 20 % DMSO/Tween (4:32 PM 1/7/08)
- 0 (~ 27 h)
- -ve 10 % DMSO/Tween (5:39 PM 1/7/08)
- 1 (~ 26 h)
Tabla 5 (anterior). Preparaciones de tratamiento
- Tratamiento
- ω-ACTX DMSO Disolvente Total Volumen
- 90.000 pmol/g
- 82 µl 5 mg/ml ω-ACTX de reserva en Acetona 15 µl 53 µl Acetona 150 µl
- -ve
- - 15 µl 135 µl Acetona 150 µl
- 90.000 pmol/g
- 82 µl 5 mg/ml ω-ACTX de reserva en Metanol 15 µl 53 µl Metanol 150 µl
- -ve
- - 15 µl 135 µl Metanol 150 µl
Las preparaciones de tratamiento de la Tabla 5 son formulaciones de acetona/metanol/DMSO; el orden de adición cuando se preparaba cada formulación era disolvente, ω-ACTX de reserva (cuando era necesario), y finalmente el 5 DMSO.
Administración y aplicación de la formulación.
Cada formulación de tratamiento descrito anteriormente se aplicó a un grupo de diez moscas domésticas
10 anestesiadas con CO2. La aplicación del tratamiento consistía en una gota de 2 µl de la formulación respectiva, pipeteada en la superficie torácica dorsal del cuerpo de una mosca. Cada mezcla se removió inmediatamente antes de cada aplicación para asegurar la suspensión de las partículas precipitadas. A continuación del tratamiento, los insectos se colocaron en recipientes con alimento recién puesto y agua, se permitió que se recuperaran, y se observaron durante 24 h.
15 Cada formulación de tratamiento descrito anteriormente también se aplicó a un grupo de diez de la 2ª fase larvaria de T. ni. La aplicación del tratamiento consistía en una gota de 2 µl de la formulación respectiva, pipeteada en la superficie dorsal anterior del cuerpo. Cada mezcla se removió inmediatamente antes de cada aplicación para asegurar la suspensión de las partículas precipitadas. A continuación del tratamiento, los insectos se colocaron en
20 un medio reciente y se observaron durante 24 h.
Tabla 6a – Mosca doméstica (posteriormente)
- Tratamiento
- Muertes (18 h) Muertes (24 h)
- 90.000 pmol/g Acetona + DMSO
- 4 4
- -ve Acetona + DMSO
- 0 0
- 90.000 pmol/g Metanol + DMSO
- 10 10
- -ve Metanol + DMSO
- 0 0
- Sin tratar
- 0 0
Tabla 6b-Gusano falso medidor (posteriormente)
- Tratamiento
- Muertes (18 h) Muertes (24 h)
- 45,000 pmol/g Acetona + DMSO
- 0 0
- -ve Acetona + DMSO
- 0 0
- 45.000 pmol/g Metanol + DMSO
- 0 0
- -ve Metanol + DMSO
- 0 0
25 Tabla 6a y Tabla 6b (anterior). Resultados de la administración de formulaciones de acetona/metanol/DMSO en Mosca doméstica y gusano falso medidor. El tratamiento tópico de moscas domésticas con una alta dosis de ω-ACTX en metanol con DMSO era insecticida con el 100 % de mortalidad a las 18 horas post-tratamiento en comparación con solo el 40 % de mortalidad de
30 moscas domésticas tratadas con ω-ACTX en acetona. No había mortalidad en los controles en cualquier tratamiento. No había diferencia entre los tratamientos con ω-ACTX y control en el gusano falso medidor en términos de muerte del insecto, alimentación o comportamiento. El metanol potenciaba la actividad tópica de ω-ACTX más que la acetona en este experimento.
Ensayo tópico con metanol y etanol utilizando moscas domésticas
La toxina es ω-ACTX-Hv1a
Etanol + DMSO – Se prepararon las soluciones de ω-ACTX en etanol de acuerdo con la Tabla 9 a partir de una preparación de reserva de 0,8 mg de ω-ACTX liofilizada disuelta en 160 µl de etanol para producir una solución de 5 mg/ml. La solución de 84.375 pmol/g se preparó diluyendo la solución de reserva en etanol (88,3 µl) antes de añadir el DMSO (25 µl) a una concentración final de DMSO del 10 %. Se preparó entonces una solución de DMSO al 10 %/etanol y se hicieron alícuotas como se describe posteriormente para las series de dilución seriada.
Tabla 9 (anterior).
- Tratamiento
- ω-ACTX DMSO : Etanol Volumen Total
- 84.375 pmol/g
- 136,68 µl de ω-ACTX 5 mg/ml en Etanol 25 µl (100 %) 88,3 µl 250 µl
- 16.875 pmol/g
- solución de 50 µl 84.375 pmol/g - 200 µl (10 % DMSO) 250 µl
- 3.375 pmol/g
- solución de 50 µl 16.875 pmol/g - 200 µl (10 % DMSO) 250 µl
- 675 pmol/g
- solución de 50 µl 3.375 pmol/g - 200 µl (10 % DMSO) 250 µl
- 135 pmol/g
- solución de 50 µl 675 pmol/g - 200 µl (10 % DMSO) 250 µl
- -ve
- - - 250 µl (10 % DMSO) 250 µl
Formulaciones de solución de etanol; el orden de adición cuando se prepara la formulación de 84.375 pmol/g era
10 etanol, ω-ACTX de reserva y finalmente DMSO. Se preparó una solución de DMSO al 10 % / etanol y se hicieron alícuotas en tubos marcados, y se llevó a cabo una dilución seriada de 5 x del tratamiento de 84.375 pmol/g.
Administración y aplicación de la formulación
15 Cada formulación de tratamiento que se ha descrito anteriormente se aplicó a un grupo de diez moscas domésticas anestesiadas con CO2. La aplicación del tratamiento consistía en una gota de 2 µl de la formulación respectiva, pipeteada en la superficie torácica dorsal del cuerpo de una mosca. Cada mezcla se removió inmediatamente antes de cada aplicación para asegurar la suspensión de las partículas precipitadas. Después del tratamiento, los insectos se colocaron en recipientes con comida recién preparada y agua, se permitió que se recuperaran, y se observaron
20 durante 60 horas.
Resultados de los tratamientos con metanol o etanol y DMSO
Tabla 10 (anterior). Resultados del tratamiento con metanol o etanol y DMSO
- Tratamiento
- Muertes (6 h) Muertes (19.5 h) Muertes (24 h) Muertes (50 h) Muertes (60 h)
- -ve control Metanol + DMSO
- 0 0 0 0 0
- 135 pmol/g Metanol+ DMSO
- 0 0 0 0 0
- 675 pmol/g Metanol + DMSO
- 0 0 0 0 0
- 3.375 pmol/g Metanol + DMSO
- 0 0 0 0 0 (1 con espasmos)
- 16.875 pmol/g Metanol + DMSO
- 0 0 0 (1 con espasmos) 0 (1 con espasmos) 0 (1 con espasmos)
- 84.375 pmol/g Metanol + DMSO
- 0 3 (3 con espasmos) 3 (3 con espasmos) 7 7 (1 con espasmos)
- -ve control Metanol
- 0 0 0 0 0
- 135 pmol/g Metanol
- 0 0 0 0 0
- 675 pmol/g Metanol
- 0 0 0 0 0
- 3.375 pmol/g Metanol
- 0 0 0 0 0
- 16.875 pmol/g Metanol
- 0 0 0 1 (1 con espasmos) 1
- 84.375 pmol/g Metanol
- 0 0 0 1 1 (5 con espasmos)
acetona y sonicada durante 10-15 segundos con subida poco a poco desde el ajuste “0” hasta el ajuste “5” en el sonicador para crear partículas finas. Reserva 3: rU-ACTX-Hvla+2: una alícuota de 1,5 mg de toxina secada por congelación suspendida en 900 µl metanol y sonicada durante 10-15 segundos con subida poco a poco desde el ajuste “0” hasta el ajuste “5” en el
5 sonicador para crear partículas finas. Reserva 4: rKappa-Hv1c+2: una alícuota de 1,5 mg de toxina secada por congelación suspendida en 900 µl acetona y sonicada durante 10-15 segundos con subida poco a poco desde el ajuste “0” hasta el ajuste “5” en el sonicador para crear partículas finas. Reserva 5: rKappa-Hv1c+2: una alícuota de 1,5 mg de toxina secada por congelación suspendida en 900 µl
10 metanol y sonicada durante 10-15 segundos con subida poco a poco desde el ajuste “0” hasta el ajuste “5” en el sonicador para crear partículas finas.
La preparación final de mezclas para las aplicaciones tópicas se hizo mezclando reservas con otros reactivos como se enumera a continuación:
15 Control 1 -Etanol + 0,05 % LI-700 -475 µl Etanol. 25 µl 1 % LI-700 en Etanol Control 2 -Etanol + 0,01 % LI-700 -495 µl Etanol. 5 µl 1 % LI-700 en Etanol Control 3 -Etanol +0,1 % MSO® -450 µl Etanol. 50 µl 1 % MSO® en Etanol Control 4 -Etanol + 0,02 % MSO® -490 µl Etanol. 10 µl 1 % MSO® en Etanol
20 Tratamiento 1 -ω-ACTX-Hv1a+2 Precipitada Etanol + 10 % DMSO + 0.05 % Silwet -425 µl de reserva 1 25 µl 1 % Silwet en Etanol. 50 µl DMSO Control 5 -Etanol + 10 %DMSO + 0.05 % Silwet -425 µl Etanol 25 µl 1 % Silwet en Etanol. 50 µl DMSO Tratamiento 2 -rU-ACTX-Hv1a+2 precipitada en Acetona + 10 % DMSO -450 µl de reserva 2. 50 µl DMSO
25 Tratamiento 3 -rU-ACTX-Hvla+2 precipitada en metanol + 10 % DMSO -450 µl de reserva 3. 50 µl DMSO Tratamiento 4 -rKappa-ACTX-Hv1c precipitada en Acetona + 10 % DMSO -450 µl de reserva 4. 50 µl DMSO Tratamiento 5 -rKappa-ACTX-Hv1c precipitada en metanol + 10 % DMSO -450 µl de reserva 5. 50 µl DMSO Control 6 -Acetona + 10 % DMSO-450 µl Acetona. 50 µl DMSO Control 7 -Metanol + 10 % DMSO -450 µl metanol. 50 µl DMSO
30 Control 8 -Etanol + 10 % DMSO -450 µl Etanol. 50 µl DMSO
Administración y aplicación de la formulación.
Aplicación tópica de gotas de 2 µl en el abdomen ventral de moscas domésticas de entre 12-18 mg con micropipetas 35 P10, como se describe en los ejemplos anteriores. Tras la aplicación, a las moscas se les proporcionó alimento y agua ad libitum y se observó su mortalidad.
Resultados de las mezclas de tratamientos tópicos. Tabla 13 (a continuación).
- Tratamiento
- 6 h. 24 h. 42 h.
- LI-700 (n = 10)
- Muertas con espasmos/ Morib Muertas con espasmos/ Morib Muertas con espasmos/ Morib
- Control 1 -etanol + 0,05 % LI-700
- 0 4/0 0 3/1 1 1/1
- Control 2 -etanol + 0,01 % LI-700
- 0 6/0 1 4/1 1 4/2
- MSO (n = 10)
- Control 3 -etanol + 0,1 % MSO®
- 2 4/1 2 4/0 3 2/1
- Control 4 -etanol + 0,02 % MSO®
- 0 7/0 1 5/0 4 1/1
- Silwet (n = 10, ∼45.000 pmol/g)
- Tratamiento 1 -ω-ACTX-Hv1a+2 precipitada + ~10 % DMSO + 0,05 % Silwet
- 2 3/0 7 1/2 10 0/0
- Control 5 -etanol + ∼10 % DMSO + 0,05 % Silwet
- 1 0/0 1 0/0 2 0/0
- Precipitación en acetona/metanol (n = 10, ∼45.000 pmol/g)
- Tratamiento 2 -rU-ACTX-Hv1a+2 precipitada en acetona + 10 % DMSO
- 0 0/0 1 2/0 5 2/0
- Tratamiento 3 -rU-ACTX-Hv1a+2 precipitada en metanol + 10 % DMSO
- 0 0/0 2 1/0 5 2/0
- Tratamiento 4 -rKappa-ACTXHv1c+2 precipitada en acetona* + 10 % DMSO
- 0 1/0 0 1/0 5 3/0
- Tratamiento 5 -rKappa-ACTX-Hv1c +2 precipitada en metanol* + 10 % DMSO
- 0 1/0 1 1/0 4 0/0
- Control 6 -Acetona + 10 % DMSO
- 0 0/0 1 0/0 2 0/0
- Control 7 -metanol + 10 % DMSO
- 0 0/0 0 0/0 1 0/0
- Control 8 -etanol + 10 % DMSO
- 0 0/0 0 0/0 0 0/0
Las concentraciones de LI-700 por debajo de 0,01 % daban como resultado una alteración considerable del comportamiento de las moscas tratadas, y posiblemente algo de mortalidad también. Las concentraciones de MSO® por debajo de 0,02 % daban como resultado una alteración considerable del comportamiento de las moscas tratadas
5 y también una considerable mortalidad(es decir, del 30-40 %). El Silwet, 0,05 %, podía potenciar ligeramente la actividad insecticida tópica de las suspensiones de toxina omega/etanol/DMSO en este paradigma experimental. Basándose en los resultados que se presentan aquí y otros estudios no desvelados, la potenciación estaría en el intervalo del 15-20 %.
10 Las formulaciones que se aplicaban tópicamente del híbrido y la atracotoxina kappa-1s eran insecticidas cuando el 90 % de acetona o el 90 % de metanol se sustituían por un 90 % de etanol. Las formulaciones con acetona y metanol de la toxina híbrida podían ser ligeramente menos insecticidas que la formulación de etanol ensayada anteriormente. Los inventores creen que las formulaciones de acetona y metanol dan como resultado niveles equivalentes o mayores de actividad insecticida cuando se comparan con las formulaciones de kappa toxina y
15 etanol.
La toxina para aplicación tópica es ω-ACTX-Hv1a:
20 SPTCIPSGQPCPYNENCCSQSCTFKENENGNTVKRCD (SEQ ID. NO. 60) que tiene un peso molecular: 4050. DL50 en la mosca doméstica: 90,2 pmol/g. Se prepararon alícuotas secadas por congelación de 1,5 mg de toxina preparada a partir de reservas congeladas.
25 Administración y aplicación de la formulación
Aplicación tópica: grupos de diez moscas domésticas (Musca domestica) de investigaciones Benzon, que pesaban entre 12-20 mg (peso medio 16 mg), cada una recibió una aplicación con micropipeta de 2 µl de precipitado de toxina suspendido en Etanol-DMSO en la superficie torácica dorsal del cuerpo.
30 Preparación de las soluciones de reserva para el tratamiento tópico:
Reserva 1 (preparación de etanol removida y sonicada): se añadieron 0,9 ml de etanol a ~ 1500 µg de ω-ACTX liofilizada, y la mezcla resultante se removió vigorosamente, y luego se sonicó ~10-15 seg, se aumentó poco a poco
35 el ajuste de intensidad “0” al ajuste “5” durante este periodo. Se añadieron entonces 0,1 ml de DMSO a la suspensión de toxina, la mezcla resultante se removió, y se retiró una alícuota de 100 µl de la suspensión alcoholDMSO-péptido para los ensayos de aplicación tópica y se mantuvo en hielo durante ~ 2 h.
Reserva 2 (preparación de 1-propanol removida y sonicada): se añadieron 0,9 ml de 1-propanol a ~ 1500 µg de ω
40 ACTX liofilizada, y la mezcla resultante se removió vigorosamente, y luego se sonicó ~10-15 seg, se aumentó poco a poco el ajuste de intensidad “0” al ajuste “5” durante este periodo. Se añadieron entonces 0,1 ml de DMSO a la suspensión de toxina, la mezcla resultante se removió, y se retiró una alícuota de 100 µl de la suspensión alcoholDMSO-péptido para los ensayos de aplicación tópica y se mantuvo en hielo durante ~ 2 h.
45 Reserva 3 (preparación de 2-propanol removida y sonicada): se añadieron 0,9 ml de 2-propanol a ~1500 µg de ω-ACTX liofilizada, y la mezcla resultante se removió vigorosamente, y luego se sonicó durante ~ 10-15 seg, se aumentó poco a poco el ajuste de intensidad “0” al ajuste “5” durante este periodo. Se añadieron entonces 0,1 ml de
DMSO a la suspensión de toxina, la mezcla resultante se removió, y se retiró una alícuota de 100 µl de la suspensión alcohol-DMSO-péptido para los ensayos de aplicación tópica y se mantuvo en hielo durante ~ 2 h.
Reserva 4 (preparación de 2-butanol removida y sonicada): se añadieron 0,9 ml de 2-butanol a ~ 1500 µg de ω
5 ACTX liofilizada, y la mezcla resultante se removió vigorosamente, y luego se sonicó durante 10-15 seg, se aumentó poco a poco del ajuste de intensidad “0” al ajuste “5” durante este periodo. Se añadieron entonces 0,1 ml de DMSO a la suspensión de toxina, la mezcla resultante se removió, y se retiró una alícuota de 100 µl de la suspensión alcohol-DMSO-péptido para los ensayos de aplicación tópica y se mantuvo en hielo durante ~ 2 h.
10 Se señala que cada reserva se hizo a una concentración tal que la aplicación de 2 µl de la reserva en la superficie corporal de una mosca doméstica de ~ 16 mg resultara en una dosis de toxina de ~ 45.000 pmol/g. Por lo tanto, en algunos casos que se describen posteriormente, se aplicaba tópicamente una de las cuatros reservas descritas anteriormente de potencia completa en las moscas domésticas, pero en otros casos se llevaban a cabo diluciones en serie de cinco veces (utilizando las reservas y la solución del 90 % de alcohol-10 % de DMSO correspondiente)
15 con el fin de obtener una solución que se podía utilizar para suministrar una dosis de toxina menor en un volumen de 2 µl. Los procedimientos de control negativo (que se indican como “-ve” en la tabla posterior) comprende las moscas domésticas tratadas con aplicaciones de 2 µl torácicas dorsales de soluciones del alcohol en cuestión (diluido hasta el 90 % v/v con DMSO).
20 Aplicación tópica de las soluciones de toxina y los resultados de la misma: Las soluciones de reserva de ω-ACTX en varios alcoholes se prepararon como se ha descrito anteriormente. La Tabla 14 a continuación indica las formulaciones de reserva y la dosificación utilizada para la aplicación tópica a las moscas domésticas y la mortalidad observada para los correspondientes grupos de moscas:
- Tratamiento
- Nº de moscas tratadas Muertas (∼16 h) Muertas (24 h) Muertas (52 h) Muertas (64 h)
- 1-Propanol -ve
- 10 0 0 0 0
- 1-Propanol 9.00 pmol/g
- 10 0 0 1 1
- 1-Propanol 45.000 pmol/g
- 10 1 (1 con espasmos) 2 (1 con espasmos) 2 (1 con espasmos) 2 (1 con espasmos)
- 2-Propanol-ve
- 10 1 (2 con espasmos) 2 (1 con espasmos) 3 3
- 2-Propanol 9.000 pmol/g
- 10 3 (2 con espasmos) 4 (1 con espasmos) 4 4
- 2-Propanol 45.000 pmol/g
- 10 5 (3 con espasmos) 5 (3 con espasmos) 8 8
- 2-Butanol -ve
- 10 5 7 7 7
- 2-Butanol 9.000 pmol/g
- 10 6 6 (1 con espasmos) 6 (1 con espasmos) 7 (2 con espasmos)
- Etanol-ve
- 7 0 0 0 0
- Etanol 1.800 pmol/g
- 10 0 1 1 1
- Etanol 9.000 pmol/g
- 10 2 2 2 2 (2 con espasmos)
- 1-Octanol -ve
- 10 10 10 10 10
25 Tabla 14 (anterior). Resultados de la aplicación tópica de soluciones de toxina. Cuando se normalizó con la mortalidad observada en los grupos de control negativo (dosificados con la correspondiente solución de alcohol-DMSO), los precipitados de toxina omega parecen tener una actividad insecticida tan grande o mayor que otros precipitados de toxina en alcohol ensayados en estas series de experimentos.
30 El 90 % octanol -10 % de DMSO, 90 % 2-butanol -10 % DMSO, y 90 % 2-propanol -10 % DMSO parece que producen niveles inaceptables de mortalidad de fondo, el último podría presumiblemente enmascarar la mortalidad debido al sitio de acción diana de la toxina omega en las moscas domésticas tratadas. El 90 % de 1-propanol -10 % de DMSO no parece causar niveles inaceptables de mortalidad de fondo, pero también parece que no potencia el
35 sitio de actividad diana de la toxina aplicada así como el 90 % de etanol -10 % de DMSO.
acción de la toxina) se resumen en la Tabla 15, a continuación. Tabla 15 (anterior).
- Tratamiento
- N Muertas (4 h) Muertas (14 h) Muertas (22 h) Muertas (38 h) Muertas (48 h)
- -ve 90EtOH/ 10DMSO
- 10 0 0 0 0 0
- 45.000 pmol/g 90EtOH/10DMSO
- 10 1 2 3 5 5 (1 con espasmos)
- 45.000 pmol/g 80EtOH/10H2O/ 10DMSO
- 10 0 1 2 (1 con espasmos) 4 4 (1 con espasmos)
- 45.0000 pmol/g 70EtOH/20H2O/ 10DMSO
- 10 0 0 0 0 0
- 45.0000 pmol/g 60EtOH/30H2O/ 10DMSO
- 10 0 0 0 0 0
- 45.0000 pmol/g 50EtOH/40H2O/ 10DMSO
- 10 0 0 0 1 1
- 45.000 pmol/g 90H20/10DMS O
- 10 0 1 0 1 1 (3 con espasmos)
- -ve 5 % MSO®
- 10 0 0 0 0 1
- -ve 1,25 % MSO®
- 10 0 0 (1 morib) 1 1 (1 morib) 1
- 45.000 pmol/g 5 % MSO®
- 10 2 (1 con espasmos) 4 (1 morib) 4 4 (1 morib) 5 (1 con espasmos)
- 45.000 pmol/g 2,5 % MSO®
- 10 0 3 4 4 (1 con espasmos) 5 (1 con espasmos)
- 45.000 pmol/g 1,25 % MSO®
- 10 1 1 1 5 (1 con espasmos) 6 (1 con espasmos)
- 45.000 pmol/g 90EtOH/10DMSO ABDOMEN
- 10 0 1 (3 con espasmos) 5 (1 con espasmos) 5 (1 con espasmos) 7
5 Resultados de los ensayos tópicos de preparaciones con DMSO, etanol y MSO® de ω-ACTX-Hv1a+2, administrada tópicamente. Los números anteriores se describen a continuación.
Número 1 – la adición de un 10 % de agua a los precipitados de toxina omega en las soluciones de etanol/DMSO parece reducir la actividad insecticida tópica del precipitado en las condiciones ensayadas anteriormente.
10 Número 2 – la adición de un 20 %, 30 %, y 40 % de agua a los precipitados de toxina omega en las soluciones de etanol/DMSO parece que elimina completamente la actividad insecticida tópica del precipitado en las condiciones ensayadas anteriormente. Número 3 – la disolución/dilución de la toxina en un 90 % de agua/un 10 % de DMSO da como resultado una solución sin actividad insecticida en las condiciones ensayadas anteriormente.
15 Número 4 – la sustitución del 10 % de DMSO con un 1,25 % de MSO®, o un 5 % de MSO® da como resultado aparentemente mezclas con actividad insecticida significativa en las condiciones ensayadas anteriormente. Número 5 – en las condiciones experimentales utilizadas anteriormente, la aplicación abdominal del precipitado (de toxina omega en un 90 % de etanol /un 10 % de DMSO) parece que induce la mortalidad del insecto con una velocidad y eficacia similar a, si no mayor que, la inducción de la mortalidad por la aplicación torácica dorsal de la
20 misma mezcla de precipitado. Como la aplicación abdominal ventral puede ejecutarse aproximadamente dos veces más rápidamente que la aplicación torácica dorsal, esto apunta una mejoría técnica significativa para bioensayos futuros de aplicación tópica.
Ejemplos adicionales de péptidos tóxicos y el listado de secuencias
25 Los péptidos tóxicos para insectos se refieren a péptidos que no son de insectos tóxicos, sino que son tóxicos para insectos. Su fuente no es necesariamente de insectos. En el listado de secuencias de esta solicitud se proporcionan una gran cantidad de péptidos tóxicos para insectos. Esta pequeña selección de aproximadamente 174 péptidos incluye los péptidos representativos de arañas, escorpiones y plantas. Las secuencias 1-140 son de arañas tela de
30 embudo, las secuencias 141 a 171 son de escorpiones y las secuencias 172 a 174 son de plantas. El listado de
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-
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Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2451915A1 (fr) | 1979-03-23 | 1980-10-17 | Clin Midy | Nouveau procede de preparation de la somatostatine |
US4530784A (en) | 1983-08-19 | 1985-07-23 | New York University | Large scale extraction process for contact inhibitory factor |
US5187091A (en) * | 1990-03-20 | 1993-02-16 | Ecogen Inc. | Bacillus thuringiensis cryiiic gene encoding toxic to coleopteran insects |
JPH0565296A (ja) * | 1991-01-24 | 1993-03-19 | Sumitomo Chem Co Ltd | 新規ペプチド |
US5591443A (en) * | 1991-02-08 | 1997-01-07 | Biotechnology Resources, Inc. | Synergistic insecticide composition |
EP0589894A4 (en) * | 1991-03-01 | 1996-09-25 | Fmc Corp | Insecticidally effective peptides |
US5763568A (en) | 1992-01-31 | 1998-06-09 | Zeneca Limited | Insecticidal toxins derived from funnel web (atrax or hadronyche) spiders |
CA2128421C (en) | 1992-01-31 | 2003-12-30 | Ronald K. Atkinson | Insecticidal toxins derived from funnel web (atrax or hadronyche) spiders |
GB9306295D0 (en) * | 1993-03-26 | 1993-05-19 | Zeneca Ltd | Biological control agents |
WO1996018302A1 (en) * | 1994-12-13 | 1996-06-20 | Abbott Laboratories | Potentiation of bacillus thuringiensis delta-endotoxins with surfactant additives |
US5688764A (en) * | 1995-02-17 | 1997-11-18 | Nps Pharmaceuticals, Inc. | Insecticidal peptides from spider venom |
US5840838A (en) | 1996-02-29 | 1998-11-24 | University Of Kentucky Research Foundation | Process for enhancing the activity of amyloid β peptides |
US7279547B2 (en) | 2000-02-10 | 2007-10-09 | University Of Connecticut | Insecticidal compounds and methods for selection thereof |
US6583264B2 (en) | 2000-02-10 | 2003-06-24 | University Of Connecticut | Insecticidal compounds and methods for selection thereof |
DE602005010295D1 (de) * | 2004-11-04 | 2008-11-20 | Univ Connecticut | Insektizide polypeptide und deren verwendung |
EP1924599A2 (en) * | 2005-09-16 | 2008-05-28 | University of Connecticut | Acaricidal compositions and methods of use thereof |
HUE029755T2 (en) | 2008-10-01 | 2017-04-28 | Vestaron Corp | Peptide toxin preparation |
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