JPH0565296A - 新規ペプチド - Google Patents
新規ペプチドInfo
- Publication number
- JPH0565296A JPH0565296A JP4034096A JP3409692A JPH0565296A JP H0565296 A JPH0565296 A JP H0565296A JP 4034096 A JP4034096 A JP 4034096A JP 3409692 A JP3409692 A JP 3409692A JP H0565296 A JPH0565296 A JP H0565296A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- larva
- activity
- armyworm
- insect
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
規ペプチドを提供する。 【構成】 一般式 化1 【化1】 〔式中、Rはアミノ基または水酸基を表す。〕で示され
る新規ペプチド。
Description
ち、昆虫成長調節活性または殺虫活性を有するペプチド
に関するものである。
は、これまで種々のものが知られている。すなわち、P
TTH(長澤ら、プロシーディングス オブ ザナショ
ナルアカデミー オブ サイエンシーズ オブ ザ ユ
ナイテッド ステイツ オブ アメリカ(Proceedings
of the National Academy of Sciences of the Un-ited
States of America) 第83巻, 第5840〜5843頁 (1986
年)〕, EH〔トルーマンら、ネイチャー(Nature) 第
291巻, 第70〜71頁 (1981年) 〕およびAKHI〔スト
ーンら、ネイチャー(Nature) 第 263巻, 第 207〜211
頁 (1976年) 〕等が同定され、機能等が明らかにされて
いる。
体に処理して昆虫の成長を抑制したり、死に至らしめる
ペプチドは未だ知られていない。
量を昆虫自体に処理することにより、昆虫の生育を著し
く阻害または死に至らしめる新規ペプチドを見出し、本
発明に至った。
わち、昆虫成長調節活性または殺虫活性を有する一般式
化2
るペプチド(以下、本発明ペプチドと称する)に関する
ものである。
マユバチ(Apanteles kariyai)に寄
生されたアワヨトウ(Pseudaletia sep
arate)終令幼虫の体液より得られるJHエステラ
ーゼ抑制活性を有する式 化3
称する)が、優れた昆虫成長調節活性を有することを見
出した。
似の式 化4
称する)が、優れた殺虫活性を有することを見出し、本
発明を完成した。
マユバチに寄生されたアワヨトウ終令幼虫の体液を、2
5%エタノールで抽出し、抽出成分をゲルろ過クロマト
グラフィーおよび逆相高速液体クロマトグラフィーに付
すことによって、精製取得することができ、その詳細は
下記のとおりである。
カリヤコマユバチ卵を産卵させ、人工飼料にて、飼育4
〜6日後に体液を回収し、それに、終濃度が25%とな
るように、−20℃のエタノールを加え凍結乾燥させ
る。
精製した画分を濃縮した後、JHエステラーゼ抑制活性
を指標として、ゲルろ過高速液体クロマトグラフィーお
よび逆相高速液体クロマトグラフィーに付すことによっ
て、ペプチドAを精製取得することができる。
ドBは、ペプチド化学の一般的に知られている方法(た
とえば Houben-Weylの Methoden der Organischen Chem
ie (Methods of Organic Chemistry) 、Volume 15/2 を
参照されたい)によって、好適には、たとえば B. Merr
ifield (J. Am. Chem.,Soc. 85、2149 (1963)〕または
R.C. Sheppard (Int. J. Peptide Protein Res. 21、11
8 (1983)〕に記載されているような固相合成によってま
たは同等な既知方法によって製造される。
3級ブチルオキシカルボニル(Boc)またはフルオレ
ニルメトキシカルボニル (Fmoc) 保護基が、α−ア
ミノ保護基として使用される。
に対して必要である場合は、アミノ酸の側鎖の官能基
は、さらに適当な保護基(たとえば T.W. Greene : Pro
tecti-ve Groups in Organic Synthesisを参照された
い) によって保護される。
、Arg(Mts)、 Arg(Mtr) 、Arg(PMC)、Asp(OBzl) 、Asp
(OBut) 、Cys(4-MeBzl)、Cys(Acm)、Cys(SBut) 、Clu(O
Bzl)、Glu(OBut) 、Lys(Cl-z) 、Lys(Boc)、Met(O)、Se
r(Bzl)、Ser(But)、Thr(Bzl)、Thr(But)、Tyr(Br-z) 、
Tyr(Bzl)または Tyr(But) が使用される。
たアミノ酸のカップリングを使用して、ペプチドのC−
末端においてはじまる。この型の出発物質は、クロロメ
チル、ヒドロキシメチル、ベンズヒドリルアミノ(BH
A)またはメチルベンズヒドリルアミノ(MBHA) 基
で変性されたポリスチレンまたはポリアクリルアミド樹
脂に対してエステルまたはアミド結合により保護された
アミノ酸を結合させることによって得ることができる。
に得ることができる。もし合成されるペプチドがC−末
端において遊離アミド基を有することを企図する場合
は、普通BHAおよびMBHA樹脂を使用する。
によって実施される。
は、塩化メチレン中のトリフルオロ酢酸、またはFmo
c保護基の場合においては、ジメチルホルムアミド中の
ピペリジンの20%濃度の溶液、のような適当な試薬を
使用して、樹脂にカップリングしたアミノ酸のアミノ保
護基を脱離した後、次に保護されたアミノ酸を順次に所
望する順序でカップリングさせる。中間的に得られたN
−末端保護されたペプチド樹脂は、次のアミノ酸誘導体
との結合の前に、前述した試薬によって脱閉鎖する。
活性化試薬、特に、たとえば、N,N’−ジシクロヘキ
シルカルボジイミド、N,N’−ジイソプロピルカルボ
ジイミドまたはN−エチル−N’−(3−ジメチルアミ
ノプロピル)−カルボジイミドのようなカルボジイミド
を、カップリング試薬として使用することができる〔た
とえば、 Houben-Weylの Methoden der Organischen Ch
emie (Methods of OrganicChemistry) Volume 15/2を参
照されたい〕。
ミノ酸誘導体および活性化試薬ならびにもし必要な場合
は、たとえば、1−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール
(HOBt) 〔W.Konig, R. Geiger : Chem. Ber. 103.
708 (1970) 〕または3−ヒドロキシ−4−オキソ−
3,4−ジヒドロベンゾ−トリアジン(Hoobt)
〔W.Konig, R. Geiger : Chem. Ber.103. 2054 (197
0)〕のようなラセミ化−抑制添加剤を樹脂に添加するこ
とによって直接実施することができるが、対称な無水物
またはHOBtもしくはHOObtエステルとしてのア
ミノ酸誘導体の予備活性化を別個に実施し、そして適当
な溶剤中の活性化物質の溶液をカップリングできるペプ
チド樹脂に加えることもできる。
誘導体のカップリングまたは活性化は、ジメチルホルム
アミド、N−メチルピロリドンもしくは塩化メチレンま
たはこれらの溶剤の混合物中で実施することができる。
1.5〜4倍の過剰で使用される。不完全なカップリン
グが行われる場合においては、カップリング反応は、次
のアミノ酸のカップリングに対して必要なペプチド樹脂
のα−アミノ基の脱閉鎖を予め実施することなしに反復
する。
プチドは、たとえば、液状弗化水素(好適にはBoc法
によって製造されたペプチドの場合において)またはト
リフルオロ酢酸 (好適にはFmoc法によって合成され
たペプチドの場合において)のような試薬を使用して樹
脂から脱離することができる。これらの試薬は、樹脂か
らペプチドを開裂するばかりでなく、アミノ酸誘導体の
他の側鎖保護基をも開裂する。
よびMBHA樹脂を使用してペプチドが遊離酸の形態で
得られる。BHAまたはMBHA樹脂を使用した場合
に、脱離を、弗化水素またはトリフルオロメタンスルホ
ン酸を使用して実施する場合は、ペプチドは酸アミドと
して得られる。
とえば、特開昭63-267748 号公報に記載されている。
通、ペプチド合成に使用される中程度の強度の酸(たと
えばトリフルオロ酢酸)で処理することによって実施さ
れる。
ル、チオクレゾール、アニソール、チオアニソール、エ
タンジチオール、硫化ジメチル、硫化メチルエチルまた
は同様の陽イオンエントレイナーのような陽イオンエン
トレイナー物質(entrainersubstances) が、個々にま
たは2またはそれ以上のこれらの補助剤の混合物として
加えられる。
は、たとえば、塩化メチレンのような適当な溶剤によっ
て希釈使用することができる。
用して2つの一般的な保護基を使用する方法(tactics)
によって合成される。
てBocまたはFmoc保護基を使用して、アプライド
バイオシステムスからの自動ペプチドシンセサイザーモ
デル430Aを使用して実施される。
造業者によって予めプログラムされた合成サイクルを合
成に対して使用する。
ペプチドの合成は、アプライドバイオシステムスからの
相当するBocアミノ酸で官能化された(ヒドロキシメ
チル)フェニルアセトアミドメチルスチレン樹脂(R.B.
Merrifield : J. Org. Chem. 43,2845 (1978) 〕上で
実施される。
アミドの製造に対して使用される。N,N’−ジシクロ
ヘキシルカルボジイミドまたはN,N’−ジイソプロピ
ルカルボジイミドが活性化試薬として使用される。
物またはNMP中において対称な無水物、HOBtエス
テルまたはHOObtエステルとして実施される。
プリングに対して使用される。カップリングが不完全に
行われた場合においては、反応を反復する。
c保護基を使用する場合は、アプライドバイオシステム
スからの自動ペプチドシンセサイザーモデル 430Aを使
用して、本発明者ら自身の合成プログラムを合成に対し
て使用する。
の方法によってエステル化された(E. Atherton 等 :
J. C. S. Chem. Comm. 1981,336 〕バヘム(Bachem)か
らのp−ベンジルオキシベンジルアルコール樹脂(S. W
ang : J. Am. Chem. Soc. 95,1328 (1973)〕上で実施
される。
のアミノ酸誘導体の活性化は、DMF中のジイソプロピ
ルカルボジイミドの溶液を、予め計量したアミノ酸誘導
体およびHOBtまたはHOObtの混合物に添加する
ことによって、装置製造業者によって提供されたアミノ
酸カートリッジ中で直接実施される。
は、同様に、特開昭62-286978 号公報に記載されている
ようにして使用することができる。
DMF中のピペリジンの20%濃度溶液を使用して実施
される。
は、 1.5〜2.5 当量である。もしカップリングが完全で
ない場合は、Boc法におけるように反応を反復する。
m.138, 9 (1984) に記載されているようなペプチド化学
において慣習的な3−文字コードに相当する。さらに使
用される略号は以下に示すとおりである。
ェニルスルホニル Mts メシチレン−2−スルホニル NMP N−メチルピロリジン
ルクロマン−6−スルホニル TFA トリフルオロ酢酸 Tic 1,2,3,4 −テトラヒドロイソキノリン
−3−イルカルボニル Trt トリチル
本発明ペプチドが卓効を発揮する害虫としては、鱗翅目
昆虫があげられ、たとえば、ニカメイガ(Chilo
suppressalis)、コブノメイガ(Cnap
halocrocis medinalis)、ノシメ
マダラメイガ(Plodia interpuncte
lla)等のメイガ科〔Pyralidmoths(P
yralidae)〕;ハスモンヨトウ(Spodop
tera litura)、アワヨトウ(Pseuda
letia separata)、ヨトウガ(Mames
tra brassicae)、タマナギンウワバ(A
utographa nigrisigna)、カブラ
ヤガ(Agrotissegetum)、タマナヤガ
(Agrotis ipsilon)、ヘリオティス属
(Heliothis spp.)等のヤガ科(Noc
tuidae);モンシロチョウ(Pieris ra
pae crucivora)等のシロチョウ科(Pi
eridae);Adoxophyes spp.、G
rapholita spp.等のハマキガ科(Tor
tricidae);シンクイガ科(Carposin
idae);ハモグリガ科(Lyonetiida
e);ホソガ科(Gracillariidae);キ
バガ科(Gelechiidae);ドクガ科(Lym
antriidae);コナガ(Plutella x
ylostella);イガ(Tinea trans
lucens)、コイガ(Tineola bisse
llaiella)等のヒロズコガ科(Tineida
e);等の昆虫があげられ、特に幼虫に適用した場合に
卓効を発揮する。
トウ終令幼虫に適用した場合、JHエステラーゼ抑制活
性を示し、蛹化の遅延を引き起こす効果、すなわち成長
調節効果を示す。また、処理された終令幼虫は、摂食量
が低下し、正常に発育できない。
効的であるが、殺虫剤としての効果も期待できる。
モンヨトウの終令幼虫に対して、きわめて強い致死効果
を示し、低薬量で有効な殺虫剤として期待できる。
して用いる場合は、通常、固定担体、液体担体、餌と混
合するか、必要あれば、界面活性剤、その他の製剤用補
助剤を添加して、乳剤、水和剤、水中懸濁剤・水中乳濁
剤等のフロアブル剤、粒剤、粉剤、ULV剤、毒餌等に
製剤して使用する。
ペプチドに対応する遺伝子を核多角体病ウィルス等の昆
虫病原性ウィルスまたは植物に付着する微生物を宿主と
する適当なベクターに組み込み、適当な製剤にして上記
の害虫防除に用いることもできる。
とえば、粘土類(カオリンクレー、珪藻土、合成含水酸
化珪素、ベントナイト、フバサミクレー、酸性白土
等)、タルク類、セラミック、その他の無機鉱物(セリ
サイト、石英、硫黄、活性炭、炭酸カルシウム、水和シ
リカ等)、化学肥料(硫安、燐安、硝安、尿素、塩安
等)等の微粉末あるいは粒状物等があげられ、液体担体
としては、たとえば、水、アルコール類(メタノール、
エタノール等)、ケトン類(アセトン、メチルエチルケ
トン等)、芳香族炭化水素類(ベンゼン、トルエン、キ
シレン、エチルベンゼン、メチルナタレン等)、脂肪族
炭化水素類(ヘキサン、シクロヘキサン、灯油、軽油
等)、エステル類(酢酸エチル、酢酸ブチル等)、ニト
リル類(アセトニトリル、イソブチロニトリル等)、エ
ーテル類(イソプロピルエーテル、ジオキサン等)、酸
アミド類、(N,N−ジメチルホルムアミド、N,N−
ジメチルアセトアミド等)、ハロゲン化炭化水素類(ジ
クロロメタン、トリクロロエタン、等)、ジメチルスル
ホキシド、大豆油、綿実油等の植物油等があげられる。
硫酸エステル類、アルキルスルホン酸塩、アルキルアリ
ールスルホン酸塩、アルキルアリールエーテル類および
そのポリオキシエチレン化物、ポリエチレングリコール
エーテル類、多価アルコールエーテル類、糖アルコール
誘導体等があげられる。
は、たとえば、カゼイン、ゼラチン、多糖類(デンプ
ン、アラビアガム、セルロース誘導体、アルギン酸
糖)、リグニン誘導体、ベントナイト、糖類、合成水溶
性高分子(ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリド
ン、ポリアクリル酸類等)があげられ、安定剤として
は、たとえば、PAP(酸性リン酸イソプロピル)、B
HT(2−tert−ブチル−4−メチルフェノー
ル)、BHA(2−tert−ブチル−4−メトキシフ
ェノールと3−tert−ブチル−4−メトキシフェノ
ールの混合物)、植物油、鉱物油、界面活性剤、脂肪酸
またはそのエステル等があげられる。
植物精油、糖、結晶セルロース等の餌成分、ジブチルヒ
ドロキシトルエン、ノルジヒドロアセレチック酸等の酸
化防止剤、デヒドロ酢酸等の保存料、トウガラシ末等の
誤食防止剤、チーズ香料、タマネギ香料等の誘引性香料
等があげられる。
剤)の製剤は、一般に1〜75%の化合物を0.5〜1
5%の分散剤、0.1〜10%の懸濁助剤(たとえば、
保護コロイドやチクソトロピー性を付与する化合物)、
0〜10%の適当な補助剤(たとえば、消泡剤、防錆
剤、安定化剤、展着剤、浸透助剤、凍結防止剤、防菌
剤、防黴剤等)を含む水中で微小に分散させることによ
って得られる。水の代わりに化合物がほとんど溶解しな
い油を用いて油中懸濁剤とすることも可能である。
ン、カゼイン、ガム類、セルロースエーテル、ポリビニ
ルアルコール等が用いられる。チクソトロピー性を付与
する化合物としては、たとえば、ベントナイト、アルミ
ニウムマグネシウムシリケート、キザンタンガム、ポリ
アクリル酸等があげられる。
であるいは水等で希釈して用いる。また、他の殺虫剤、
殺ダニ剤、殺線虫剤、土壌害虫防除剤、殺菌剤、除草
剤、植物生長調節剤、共力剤、肥料、土壌改良剤と混合
して、または混合せずに同時に用いることもできる。
効成分として用いる場合、その施用量は、通常、10ア
ールあたり0.01〜100gであり、水和剤、フロア
ブル剤等を水で希釈して用いる場合は、その施用濃度
は、0.5〜500ppmであり、粒剤、粉剤等は何ら
希釈することなく、製剤のまま施用する。
効成分として用いる場合、通常、水和剤、フロアブル剤
等は水で0.5〜500ppmに希釈して施用し、UL
V剤、毒餌等についてはそのまま施用する。
剤の種類、施用時期、施用場所、施用方法、害虫の種
類、被害程度等の状況によって異なり、上記の範囲にか
かわることなく増加させたり、減少させたりすることが
できる。
説明するが、本発明がこれらに限定されるものでないこ
とはいうまでもない。
表わす。
リウム4部、リグニンスルホン酸カルシウム2部、合成
含水酸化珪素微粉末20部および珪藻土54部を混合し
た中に加え、ジュースミキサーで攪拌混合してそれぞれ
の20%水和剤を得る。
粉末5部、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム5
部、ベントナイト30部およびクレー55部を加え、充
分攪拌混合する。次いで、これらの混合物に適当量の水
を加え、さらに、攪拌し、造粒機で製粒し、通風乾燥し
てそれぞれの5%粒剤を得る。
溶解し、これに合成含水酸化珪素微粉末5部、PAP
0.3部およびクレー93.7部を加え、ジュースミキ
サーで攪拌混合し、アセトンを蒸発除去してそれぞれの
1%粉末を得る。
レエート1.5部とを、ポリビニルアルコール2部を含
む水溶液28.5部と混合し、サンドラインダーで微粉
砕(粒径3μm以下)した後、この中にキザンタンガム
0.05部およびアルミニウムマグネシウムシリケート
0.1部を加えて攪拌混合してそれぞれの20%フロア
ブル剤を得る。
させ、その後人工飼料で飼育した。
よび 10mM EDTAを含む pH 6.0の 0.1Mリン酸緩衝
液約0.1mlを注入し、フラッシングアウト法により、体
液を、0.05%フェニルチオウレアを含む 0.2Mリン酸緩
衝液 500μl の入った氷冷ポリプロピレン製試験管に集
め、迅速に4℃下で 500 × g、5分間遠心し、上清
を分取した。
なるように加え、混和し、4℃下で20,000 × g15分
間遠心し、上清を分取した後、凍結乾燥法により濃縮し
てから、6mlの蒸留水で平衝化した3mlのC18 extract
ion columm (J.T.Baker Che-mical Co.)にチャージし
た。
アセトニトリル 2.5mlで溶出した。溶出画分は窒素気流
下で濃縮し、12.5mMリン酸緩衝液 pH6.6で平衝化した S
upe-rose 6 HR 10/30 カラム (Pharmacia LKB Biotechn
ology Inc.) にてゲルろ過した。
トグラフィー用カラムである reve-rsed phase C8 HPLC
columm (4.6mm×250mm,山村化学研究所製) にチャージ
し、0.1 %CH3 COOH/H2 O中のアセトニトリル
濃度を18%〜40%まで上昇させて分画した。
ラフィー用カラムである cyanopro-pyl- derived silic
a HPLC column(4.6mm ×250mm,山村化学研究所製) にチ
ャージし、0.1 %CH3 COOH/H2 O中のアセトニ
トリル濃度を15%〜25%まで上昇させて分画した (図
1)。
ラムにチャージし、0.05%CF3 CF2 CF2 COOH
/H2 O中のアセトニトリル濃度を18〜25%まで上昇さ
せて分画した(図2)。
カラムにチャージし、0.075%CF3 CF2 CF2 CO
OH/H2 O中のアセトニトリル濃度を20〜25%まで上
昇させて分画した(図3)。
ある。
た。
ジメチルアミノピリジン)(0.2mmol)を用い、ジメチル
ホルムアミド (DMF)中、EP-A 322,348に示された構
造式 化5
にエステル結合により導入した。
化学製)の側鎖の保護は、Asp(OBut) 、Glu(OBut) , Th
r(But), Ser(But), Tyr(But), Lys(Boc), Arg(Boc), Cy
s(Acm)でペプチド鎖伸長時の各縮合反応はすべてPfp
(ペンタフルオロフェニル)活性エステル体(2.5eq.)
を用い、触媒としてHOBT(1−ハイドロキシベンゾ
トリアゾール)0.2mmol の存在下、DMF中で行った。
ペリジンのDMF溶液を用いた。さらにそれぞれのカッ
プリング反応は、ニンヒドリンでモニターした。
に残ったFmoc基を20%ピペリジン/DMFにより
除去し、N末端アミノ基をフリーとし、その後、すべて
の他の保護基の除去と樹脂からペプチドを切り出すため
に、m−クレゾール存在下、TFA−チオアニソールで
室温3時間処理し、グラスフィルターでろ過し、樹脂を
除き、ろ液を濃縮し、これにエーテルを加え粉末とし
た。
理、引きつづいて0℃冷却下、 0.5Mチオ硫酸ナトリウ
ム水溶液を加え、反応液を室温で濃縮した。
6) に溶解し、Sephadex G-25(ファルマシア社製) にか
け、 0.5N酢酸で溶出させ、脱塩、精製を行った。ゲル
ろ過後のペプチドは、さらにHPLCで精製した。
中、アセトニトリル10−60%の濃縮勾配で Nucleosil 1
00-5c18 (4.0×150mm)カラム(M.ナーゲル社製)を流
速1ml/分で流し、210, 260nmにおける紫外吸収でモニ
ターした。
ジメチルアミノピリジン)(0.2mmol)を用い、ジメチル
ホルムアミド(DMF)中、p −アルコキシベンジルア
ルコール樹脂(0.2mmol)(0.35meq. OH/g 、ポリスチレ
ン−1%ジビニルベンゼンコポリマー(国産化学製)上
にエステル結合により導入した。
化学製)の側鎖の保護は、Asp(OBut) 、Glu(OBut) , Th
r(But), Ser(But), Tyr(But), Lys(Boc), Arg(Boc), Cy
s(A-cm) でペプチド鎖伸長時の各縮合反応はすべてPf
p(ペンタフルオロフェニル)活性エステル体(2.5e
q.) を用い、触媒としてHOBT(1−ハイドロキシベ
ンゾトリアゾール)0.2mmol の存在下、DMF中で行っ
た。それぞれのFmoc基の除去は、20%ピペリジン
のDMF溶液を用いた。さらにそれぞれのカップリング
反応は、ニンヒドリンでモニターした。
に残ったFmoc基を20%ピペリジン/DMFにより
除去し、N末端アミノ基をフリーとし、その後、すべて
の他の保護基の除去と樹脂からペプチドを切り出すため
に、m−クレゾール存在下、TFA−チオアニソールで
室温3時間処理し、グラスフィルターでろ過し、樹脂を
除き、ろ液を室温で濃縮し、これにエーテルを加え粉末
を得た。
理、引きつづいて0℃冷却下、 0.5Mチオ硫酸ナトリウ
ム水溶液を加え、反応液を室温で濃縮した。それを集
め、 0.1Mリン酸緩衝液(pH 8.6) に溶解し、Sephadex
G-25(ファルマシア社製) にかけ、 0.5N酢酸で溶出さ
せ、脱塩、精製を行った。ゲルろ過後のペプチドは、さ
らにHPLCで精製した。
中、アセトニトリル10−60%の濃度勾配で Nucleosil 1
00-5c18 (4.0×150mm)カラム(M.ナーゲル社製)を流
速1ml/分で流し、210, 260nmにおける紫外吸収でモニ
ターした。目的とするペプチドBは、保持時間12.9分で
溶出した。得られたペプチドのアミノ酸分析の結果は下
記のとおりであり、理論値と一致する結果を得た。
u(2)1.99, Pro(2)2.01, Gly(4)4.01, Ala(1)1.01, 1/2C
ystine(2)1.81, Val(1)0.95, Met(1)0.98, Tyr(2)1.95,
Phe(2)2.01, Lys(1)1.00, Arg(2)2.02, NH3(3)3.23.
(カッコ内の数字は理論値)
調べるため、ペプチドAをアワヨトウ幼虫終令0日目、
1日目および2日目に7pmole 注射し、人工飼料にて飼
育を続け、3日目までの体重変化を調べた。その結果、
図4に示すように、対照では0日目から3日目までほぼ
直線的に体重が増加し、 2.5倍以上になるのに対し、ペ
プチドAを注射した幼虫はわずかしか体重増加を示さな
かった。
抑制活性 精製したペプチドAをリンゲル液に溶解し、非寄生のア
ワヨトウ終令幼虫の1日目と2日目とに、所定量注射
し、さらに人工飼料で飼育し、終令3日目に体液を採取
し、4℃の温度条件下、 500 × g5分間遠心し、上
清をJHエステラーゼ活性測定画分とした。活性測定の
基質としては、(10- 3 H)JHIを用い、JHエス
テラーゼによって生じた生成物のJH酸の比率からJH
の代謝活性を推定した。
は、濃度依存的にJHエステラーゼ活性を抑制した。
ワヨトウ終令幼虫の1日目と2日目とに7pmol注射し、
24時間ごとに幼虫、前蛹、蛹、死亡に分けて観察し、そ
れぞれの個体数を記録した。なお、対照にはリンゲル液
を注射した。その結果、表2に示したように、ペプチド
A処理幼虫は、対照に比し、前蛹化は2日、蛹化はそれ
以上遅れることが示された。
べるため、リンゲル液に溶解したペプチドBをアワヨト
ウ幼虫終令0日目に4pmol注射したところ、表3に示す
ように100%の致死率を示した。
を調べるため、リンゲル液に溶解したペプチドBをハス
モンヨトウ幼虫終令0日目に36pmol注射したところ、
表4に示すように75%の苦悶率を示した。
昆虫成長調節効果または殺虫効果を有するすぐれたペプ
チドである。
lica HPLC columnにて、逆相クロマトグラフィーに付し
て得た時間像グラフである。
ed silica HPLC columnにて、再度クロマトグラフィー
に付して得た時間像グラフである。
ed silica HPLC columnにて、再度クロマトグラフィー
に付して得た時間像グラフである。太線画分が精製ペプ
チドAを示す。
の幼虫の体重変化を表すグラフである。白丸印は、ペプ
チドAを終令0日目、1日目および2日目に7pmol注射
したときの幼虫体重の値を、また黒丸印は、リンゲル液
を終令0日目、1日目および2日目に注射したときの幼
虫体重の値をそれぞれ示す。
日目と2日目とに注射し、終令3日目に、体液中のJH
エステラーゼ活性を測定した結果をグラフにしたもので
ある。
Claims (1)
- 【請求項1】一般式 化1 【化1】 (式中、Rはアミノ基または水酸基を表す。)で示され
るペプチド。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP4034096A JPH0565296A (ja) | 1991-01-24 | 1992-01-23 | 新規ペプチド |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP3-25374 | 1991-01-24 | ||
JP2537491 | 1991-01-24 | ||
JP4034096A JPH0565296A (ja) | 1991-01-24 | 1992-01-23 | 新規ペプチド |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH0565296A true JPH0565296A (ja) | 1993-03-19 |
Family
ID=26362971
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP4034096A Pending JPH0565296A (ja) | 1991-01-24 | 1992-01-23 | 新規ペプチド |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0565296A (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012504623A (ja) * | 2008-10-01 | 2012-02-23 | ベスタロン コーポレイション | ペプチド毒素調合物 |
WO2018101358A1 (ja) * | 2016-11-29 | 2018-06-07 | Spiber株式会社 | タンパク質組成物、その製造方法及び熱安定性向上方法 |
-
1992
- 1992-01-23 JP JP4034096A patent/JPH0565296A/ja active Pending
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012504623A (ja) * | 2008-10-01 | 2012-02-23 | ベスタロン コーポレイション | ペプチド毒素調合物 |
WO2018101358A1 (ja) * | 2016-11-29 | 2018-06-07 | Spiber株式会社 | タンパク質組成物、その製造方法及び熱安定性向上方法 |
US11142553B2 (en) | 2016-11-29 | 2021-10-12 | Spiber Inc. | Protein composition, method for producing same and method for improving heat stability |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9060513B2 (en) | Antibiotic peptides | |
EP2391636B1 (de) | Antibiotische peptide | |
KR20190085514A (ko) | 절단성 펩타이드 및 이를 포함하는 살충 및 살선충 단백질 | |
MX2014010739A (es) | Produccion de peptidos toxicos, expresion de peptido en plantas y combinaciones de peptidos ricos en cisteina. | |
US20240008485A1 (en) | Fusion proteins, recombinant bacteria, and exosporium fragments for pest control and plant health | |
DE60117781T2 (de) | Peptidderivate des apolipoproteins-a1/aii | |
AU8988998A (en) | Linear peptides derived from antibiotic peptides, preparation and use for vectoring active substances | |
DE69736904T2 (de) | Antimikrobielle proteine | |
JP2008518624A (ja) | 殺虫ポリペプチドおよびその使用方法 | |
BR112021004807A2 (pt) | polipeptídeos inseticidas mutantes av3 e métodos para produzir e usar os mesmos | |
JP2023543829A (ja) | 害虫制御のためのミュー-ジゲトキシン-Dc1aバリアントポリペプチド | |
EP2721054B1 (de) | Modifizierte antibiotische peptide mit variabler systemischer freisetzung | |
WO2003014150A9 (en) | Fusion proteins for insect control | |
US6413530B1 (en) | Pesticidal peptides | |
JPH0565296A (ja) | 新規ペプチド | |
DE69032876T2 (de) | Insekt-Neuropeptide | |
EP0498222A1 (en) | Novel peptides | |
JPH07507765A (ja) | ファンネルウエブ(アトラックス又はハドロニチエ)くもから誘導された殺虫性毒素 | |
US6265376B1 (en) | Insecticidal plectoxins from plectreurys tristis | |
DE68912248T2 (de) | Diuretischer Faktor. | |
US11952584B2 (en) | Functional peptides having antimicrobial activity against phytopathogenic microorganisms | |
JPH04208300A (ja) | 新規ペプチド | |
Duve et al. | Insect neuropeptides | |
MXPA97008495A (en) | Insect control with multip toxins |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 5 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080829 |
|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080829 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 6 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090829 |
|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090829 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 7 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100829 |
|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100829 Year of fee payment: 7 |
|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110829 Year of fee payment: 8 |
|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110829 Year of fee payment: 8 |
|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 9 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120829 |
|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 9 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120829 |
|
FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130829 Year of fee payment: 10 |