ES2568680T3

ES2568680T3 - Boratos como inhibidores de arginasa

Info

Publication number: ES2568680T3
Application number: ES11779904.9T
Authority: ES
Inventors: Michael Van Zandt; Jr. Gunnar Erik Jagdmann
Original assignee: Mars Inc
Current assignee: Mars Inc
Priority date: 2010-10-26
Filing date: 2011-10-19
Publication date: 2016-05-03
Anticipated expiration: 2031-10-19
Also published as: CN106008569B; MX2013004491A; BR112013010099A2; WO2012058065A1; CN103249737B; MX336381B; HUE027317T2; US20150191492A1; PL2632927T3; JP2013542223A; HK1223104A1; DK2632927T3; EP3034509A1; US10098902B2; BR112013010099B1; EP2632927B1; US9233985B2; US11389464B2; US10603330B2; IL225926A0

Abstract

Un compuesto de acuerdo con la Fórmula I,**Fórmula** en donde R1 se selecciona del grupo que consiste en -OH, ORa, y NRbRc; Ra se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C1-C6) de cadena lineal o ramificada, cicloalquilo (C3- C8), arilo (C3-C14), heterocicloalquilo (C3-C14)-alquileno (C1-C6)-, heteroarilo (C3-C14)-alquileno (C1-C6)-, y arilo (C3- C14) alquileno (C1-C6)-; Rb y Rc son cada uno independientemente seleccionados del grupo que consiste en H, -OH, alquilo (C1-C6) lineal o ramificado, -SO2-alquilo (C1-C6), arilo (C3-C14)-SO2-, heterocicloalquilo (C3-C14)-alquileno (C1-C6)-, y heteroarilo (C3-C14)-alquileno (C1-C6)-; R2 se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo (C1-C6) lineal o ramificado, y alquilo (C1-C6)-C(O)-; W, X, Y, y Z son cada uno independientemente seleccionados del grupo que consiste en un enlace, -C(R')(R''')-, - C(R''')2-, -CR"'-, -NR"'-, -N-, -O-, -C(O)-, y -S-, en donde no más de tres de W, X, Y, y Z simultáneamente representan un enlace; y ninguno de dos miembros adyacentes W, X, Y, y Z son simultáneamente -O-, -S-, -N-, o -NR'''-; l, m, n y p independientemente son números enteros entre 0 y 2 inclusive, en donde al menos uno de l, m, n, o p no es 0; opcionalmente representa uno o más enlaces dobles; R3 y R4 son cada uno independientemente seleccionados de hidrógeno, alquilo (C1-C6) lineal o ramificado, y C(O)-R', o R3 y R4 juntos con el átomo de boro al cual se unen forman un anillo de 5- o 6-miembros que es totalmente saturado, o parcialmente saturado; D se selecciona del grupo que consiste en alquileno (C3-C5) lineal o ramificado, alquenileno (C2-C8) lineal o ramificado, alquinileno (C2-C8) lineal o ramificado, arileno (C3-C14), y cicloalquileno (C3-C14), en donde uno o más grupos -CH2- en D son opcional e independientemente reemplazados con una unidad estructural seleccionada del grupo que consiste en O, NR', S, SO, SO2, y CR'R"; o en donde cualquiera de los dos grupos -CH2- adyacentes opcionalmente representan dos miembros de un grupo cicloalquilenilo (C3-C14); y en donde ninguno de los dos grupos -CH2- adyacentes simultáneamente representan O, NR', S, SO, o SO2; R', R" y R"' son cada uno independientemente seleccionados del grupo que consiste en H, OH, S(O)Rd, S(O)2Rd, alquilo (C1-C8), arilo (C3-C6), -NH2, -NH alquilo (C1-C6), -N[alquilo (C1-C6)]2, -C(O)NRdRe, -C(O)alquilo (C1-C6), -C(O)arilo (C3-C14), -C(O)Oalquilo (C1-C6), -C(O)O-arilo (C3-C14), cicloalquilo (C3-C6), heterocicloalquilo (C3-C14), - C(O)heterocicloalquilo (C3-C14), heteroarilo (C3-C14), arilo (C3-C14)-alquileno (C1-C6)-, -C(O) arilo (C3-C14)-alquileno (C1-C6)-, -C(O)arilo (C3-C14), cicloalquilo (C3-C6)-alquileno (C1-C6)-, heteroarilo (C3-C14)-alquileno (C1-C6)-, heterociclo (C3-C14)-alquileno (C1-C6)-; y en donde cualquier alquilo, alquileno, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, o heterocicloalquilo es opcionalmente sustituido con uno o más miembros seleccionados del grupo que consiste en halógeno, oxo, -COOH, -CN, -NO2, -OH, -NRdRe, - NRgS(O)2Rh, alcoxi (C1-C6), arilo (C3-C14), haloalquilo (C1-C6) y ariloxi (C3-C14); en donde Rd, Re, Rg, y Rh son cada uno independientemente seleccionados del grupo que consiste en H, alquilo (C1-C6) lineal o ramificado, arilo (C3-C14)alquileno (C1-C6)- opcionalmente sustituido, arilo (C3-C14) opcionalmente sustituido, hidroxialquilo (C1-C6), aminoalquilo (C1-C6), H2Nalquileno (C1-C6)-, cicloalquilo (C3-C6) opcionalmente sustituido, heterocicloalquilo (C3-C14) opcionalmente sustituido, heteroarilo (C3-C14) opcionalmente sustituido, arilo (C3-C14)- alquileno (C1-C6)- opcionalmente sustituido, NR'R"C(O)-, y arilo (C3-C6)-cicloalquileno (C3-C14)-, o una sal, estereoisómero o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo; con la condición de que el compuesto de acuerdo con la Fórmula I no sea ácido 1-amina-2-(3- boronopropil)ciclohexano carboxílico.

Description

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5

imagen6

imagen7

imagen8

imagen9

5

10

15

20

25

30

son cada uno grupos –CH2 para proporcionar los compuestos de Fórmula I que son análogos del ácido 1– aminociclohexano carboxílico.

También se contemplan los compuestos de Fórmula I, en la cual R1 es –ORa o NRbRc, R2 se selecciona del grupo que consiste en un grupo alquilo (C1–C6) lineal o ramificado, cicloalquilo (C3–C6)–C(O)–, cicloalquilo (C3–C6) y alquilo (C1– C6)–C(O)–, y cada uno de R3 y R4 independientemente se selecciona de alquilo (C1–C6) lineal o ramificado, o C(O)–R’, o R3 y R4 juntos con el átomo de boro al cual se unen forman un anillo de 5– o 6–miembros que es completamente saturado, o parcialmente saturado, donde los sustituyentes Ra, Rb y Rc son como se definen.

Por lo tanto, para ciertos compuestos de Fórmula I, el sustituyente Ra se puede seleccionar del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C1–C6) de cadena lineal o ramificada, cicloalquilo (C3–C8), arilo (C3–C14), heterocicloalquilo (C3–C14)– alquileno (C1–C6)–, heteroarilo (C3–C14)–alquileno (C1–C6)–, y arilo (C3–C14)–alquileno (C1–C6)–, y cada uno de Rb y Rc independientemente se seleccionan del grupo que consiste en H, –OH, alquilo (C1–C6) lineal o ramificado, –SO2–alquilo (C1–C6), arilo (C3–C14)–SO2–, heterocicloalquilo (C3–C14)–alquileno (C1–C6)–, y heteroarilo (C3–C14)–alquileno (C1–C6)–.

En una realización, W, X, Y y Z junto con los átomos de carbono a los que están unidos para formar un anillo. El anillo puede contener uno o más enlaces dobles que están representados por una línea punteada

imagen10

Los sustituyentes R’ , R "y R''' para los compuestos de Fórmula I se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en H, OH, –S(O) Rd, –S(O)2 Rd, alquilo (C1–C8), arilo (C3–C6), –NH2,–NHalquilo (C1–C6), –N[alquilo (C1–C6)]2, –C(O)alquilo (C1–C6), –C(O)arilo (C3–C14), –C(O)Oalquilo (C1–C6), –C(O)Oarilo (C3–C14), cicloalquilo (C3–C6), heterocicloalquilo (C3–C14), heteroarilo (C3–C14), arilo (C3–C14)–alquileno (C1–C6)–, cicloalquilo (C3–C6)–alquileno (C1– C6)–, heteroarilo (C3–C14)–alquileno (C1–C6)–, y heterociclo (C3–C14)–alquileno (C1–C6)–.

Por otra parte, para los compuestos que se ajustan a la Fórmula I, cualquier alquilo, alquileno, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, o heterocicloalquilo están opcionalmente sustituidos con uno o más miembros seleccionados del grupo que consiste en halógeno, oxo, –COOH, –CN, –NO2, –OH, –NRdRe, –NRgS(O)2Rh, alcoxi (C1–C6), y ariloxi (C3–C14), siendo cada uno de Rd, Re, Rg, y Rh independientemente seleccionado del grupo que consiste en –H, alquilo (C1–C6) lineal o ramificado, arilo (C3–C14)–alquileno (C1–C6)–, arilo (C3–C14), hidroxialquilo (C1–C6), aminoalquilo (C1–C6), H2Nalquileno (C1–C6)–, cicloalquilo (C3–C6), heterocicloalquilo (C3–C14), heteroarilo (C3–C14), arilo (C3–C14)–alquileno (C1–C6)–, NR’R"C(O)–, y arilo (C3–C6)– cicloalquileno(C3–C14)–.

Se debe entender que, a pesar de las disposiciones anteriores, la Fórmula I no incluye ácido 1–amino–2–(3– boronopropil)ciclohexano carboxílico, tal como ácido (1S, 2S)–1–amino–2–(3–boronopropil)ciclohexano carboxílico y ácido (1S, 2R)–1–amino–2–(3–boronopropil)ciclohexano carboxílico.

Los compuestos de Fórmula I de ejemplo incluyen, sin limitación, los que se muestran a continuación en la Tabla 1.

Tabla 1

Ej. #: Estructura* Nombre

1: imagen11 ácido (1S,2S)–1–amino–2–(3–boronopropil)ciclopentanocarboxílico

2: ácido (1S,2R)–1–amino–2–(3–boronopropil)ciclopentanocarboxílico

3: ácido (2R,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrofuran–3–carboxílico

11

Ej. #: Estructura* Nombre

4: ácido (2S,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrofuran–3–carboxílico

5: ácido 3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrotiofeno–3–carboxílico

6: ácido (3R,4S)–4–amino–3–(3–boronopropil)piperidina–4–carboxílico

7: ácido (3S,4S)–4–amino–3–(3–boronopropil)piperidina–4–carboxílico

8: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico

9: ácido (3R,4R)–3–amino–4–(3–boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico

10: ácido (2R,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico

11: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–isobutilpirrolidina–3– carboxílico

12: ácido (3R,4S)–3–amino–1–bencil–4–(3–boronopropil)pirrolidina–3– carboxílico

13: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piridin–3– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico

12

Ej. #: Estructura* Nombre

14: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–aminociclopentil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico

15: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piperidin–4– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico

16: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(3–(4– carboxifenil)propil)pirrolidina–3–carboxílico

17: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(3–(dimetilamino)–2,2– dimetilpropil)pirrolidina–3–carboxílico

18: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piperidin–3– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico

19: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(quinolin–4– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico

20: ácido (3R,4S)–1–((1H–imidazol–4–il)metil)–3–amino–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico

21: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piperidin–2– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico

22: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(3–(4– clorofenil)propil)pirrolidina–3–carboxílico

23: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(7H–purin–6– il)pirrolidina–3– carboxílico

13

Ej. #: Estructura* Nombre

24: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–aminoetil)–4–(3–boronopropil)pirrolidina–3– carboxílico

25: ácido 5–((3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–3–carboxipirrolidin–1– il)nicotínico

26: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piperidin–4–il)pirrolidina– 3– carboxílico

27: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1,3’–bipirrolidina–3– carboxílico

28: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piperidin–3–il)pirrolidina– 3– carboxílico

29: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piridin–2– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico

30: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– carboxiciclohexil) pirrolidina–3–carboxílico

31: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((1–metil–1H–imidazol–2– il)metil)pirrolidina–3–carboxílico

14

Ej. #: Estructura* Nombre

32: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4–metilpiridin–3– il)pirrolidina–3–carboxílico

33: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(2–(piperidin–1– il)etil)pirrolidina –3–carboxílico

34: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)– 1–(2– (dietilamino)etil)pirrolidina–3–carboxílico

35: ácido (3R,4S)–4–(3–boronopropil)–3–(metilamino)pirrolidina–3– carboxílico

36: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((1–metilpiperidin–2– il)metil) pirrolidina –3–carboxílico

37: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(pirrolidin–2– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico

38: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(2–(pirrolidin–1– il)etil)pirrolidina –3–carboxílico

39: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(((S)–1,2,3,4– tetrahidroisoqunolin –3–il) metil)pirrolidina–3–carboxílico

40: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–(bencilamino)etil)–4–(3– boronopropil) pirrolidina–3–carboxílico

15

Ej. #: Estructura* Nombre

41: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(2–(3,4– diclorobencilamino) etil)pirrolidina–3–carboxílico

42: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– clorofenilcarbamoil) pirrolidina–3–carboxílico

43: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((S)–pirrolidina–2– carbonil) pirrolidina –3–carboxílico

44: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–aminociclohexil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico

45: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(2–(4– clorofenil)acetil) pirrolidina–3–carboxílico

46: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– fluorobenzoil)pirrolidina– 3–carboxílico

47: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– metoxibenzoil)pirrolidina–3–carboxílico

48: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– fluorofenilcarbamoil) pirrolidina–3–carboxílico

49: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((7–cloro–1,2,3,4– tetrahidroisoqunolin–3–il) metil)pirrolidina–3–carboxílico

16

Ej. #: Estructura* Nombre

50: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–aminofenilsulfonil)–4–(3– boronopropil) pirrolidina–3–carboxílico

51: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((6–cloro–1,2,3,4– tetrahidroisoqunolin–3–il)metil) pirrolidina–3–carboxílico

52: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–(bifenil–4–ilamino)etil)–4–(3– boronopropil) pirrolidina–3–carboxílico

53: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(1,2,3,4– tetrahidroisoquinolina–3–carbonil)pirrolidina–3–carboxílico

54: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–amino– 3–(4–(trifluorometil)fenil)propanoil)– 4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico

55: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((7–(trifluorometil)– 1,2,3,4– tetrahidroisoquinolin–3–il)metil)pirrolidina–3–carboxílico

56: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(7–cloro–1,2,3,4– tetrahidroisoqunoline–3–carbonil)pirrolidina–3–carboxílico

57: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–amino–3–fenilpropil)–4–(3– boronopropil) pirrolidina–3–carboxílico

58: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(2–(metilamino)–3– fenilpropanoil) pirrolidina–3–carboxílico

59: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((5,7–dicloro–1,2,3,4– tetrahidroisoquinolin–3–il)metil)pirrolidina–3–carboxílico

17

Ej. #: Estructura* Nombre

60: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–(bencilamino)acetil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico

61: ácido (1S,2S,4S)–1,4–diamino–2–(3–boronopropil)ciclopentanocarboxílico

62: ácido (1S,2S,4S)–1–amino–4–(bencilamino)–2–(3– boronopropil) ciclopentanocarboxílico

63: ácido (1S,2S,4S)–1–amino–2–(3–boronopropil)– 4–(dimetilamino) ciclopentanocarboxílico

64: ácido (1S,2S,4R)–1–amino–4–(aminometil)–2–(3–boronopropil) ciclopentanocarboxílico

65: ácido (1S,2S,4S)–1–amino–4–(aminometil)–2–(3– boronopropil) ciclopentanocarboxílico

66: ácido (1S,2S,4R)–1–amino–4–(2–aminoetil)–2–(3– boronopropil) ciclopentanocarboxílico

Composiciones farmacéuticas y dosificaciones

Los compuestos de Fórmula I se administran a un paciente o sujeto en necesidad de tratamiento ya sea solos o en combinación con otros compuestos que tienen actividades biológicas similares o diferentes. Por ejemplo, los 5 compuestos y composiciones de la invención pueden ser administrados en una terapia de combinación, es decir, ya sea simultáneamente en formas de dosificación individuales o separadas o en formas de dosificación separadas dentro de horas o días de diferencia. Ejemplos de tales terapias de combinación incluyen la administración de las composiciones y los compuestos de fórmula I con otros agentes utilizados para tratar la disfunción eréctil, hipertensión pulmonar, hipertensión, asma, inflamación, isquemia de reperfusión, infarto de miocardio, aterosclerosis, respuesta inmune,

10 psoriasis y cicatrización de heridas. Los compuestos apropiados para su uso en la terapia de combinación incluyen, pero no se limitan a:

Disfunción eréctil: sildenafil, vardenafil, tadalafil y alprostadil.

Hipertensión pulmonar/Hipertensión: epoprostenol, iloprost, bosentan, amlodipina, diltiazem, nifedipina, ambrisentan y warfarina.

18

imagen12

imagen13

imagen14

aminoácido resultante. En algunas realizaciones, la enantioselectividad se logra mediante el uso de una amina o ácido carboxílico ópticamente activo.

Como una alternativa a la reacción de Ugi, el aminoácido cíclico –sustituido A–6 se sintetiza a partir de la correspondiente cetona A–3 utilizando la reacción de Strecker. Muchos ejemplos de la reacción de Strecker y la

5 reacción de Strecker modificada están disponibles en la literatura (Ma, D., Tian, H., Zou, G., J. Org. Chem. 1999, 64, 120–125; Murata, Y., Statake, K., Synthetic Communications, 2008, 38, 1485–1490). El producto final que contiene un grupo de ácido borónico se obtiene haciendo reaccionar el aminoácido protegido A–6 con una fuente de borano tal como borano pinacol, en presencia de iridio o rodio como catalizador. El intermedio borano resultante A–7 se hidroliza utilizando ácido acuoso para dar los compuestos diana A–8.

10 Otro método conveniente para preparar el intermedio cetona de alilo se basa en la reacción del ácido carboxílico B–1 con cloruro de oxalilo y (N–isocianimino) trifenilfosforano (CNNPh3), seguido por enfriamiento rápido de la mezcla de reacción para dar la correspondiente clorohidrozona B– 2 como se ilustra en el Esquema B.

imagen15

El tratamiento del intermedio B–2 con ZnBr3 y una base (por ejemplo, diisopropilamina), da como resultado la formación

15 de una diazocetona B–3, que se somete a ciclación utilizando Cu(AcAc) para dar el intermedio deseado cetona de alilo B–4.

A continuación, el intermedio B–4 se convierte en el compuesto diana utilizando una reacción de Ugi seguido de hidroboración y desprotección como se describe en el Esquema A. Véase Padwa, A.; Weingarten, D. Chem. Rev. 1996, 96, 223–269 para una revisión general de reacciones de ciclación mediada por carabina.

20 Alternativamente, se obtiene el intermedio cetona de alilo utilizando la condensación de Dieckmann, como se muestra en el Esquema C a continuación. De acuerdo con este método, diéster alilo C–1 se cicla con una base tal como hidruro de sodio o LDA para formar la deseada cetona de alilo C–2, que se convierte en el compuesto diana de ácido borónico utilizando las metodologías ilustradas en el Esquema A. Cuando el dialilester C–1 inicial, no está disponible comercialmente, se prepara fácilmente a partir del diácido correspondiente utilizando métodos conocidos.

22

imagen16

5

10

15

20

25

30

Después de la incorporación enantioselectiva de la cadena lateral, la hidrazona D–4 se trató con ozono seguido por reducción del ozónido con trifenilfosfina o sulfuro de dimetilo para dar la cetona D–5 ópticamente activa. La cetona D–5 se convierte en el correspondiente aminoácido cíclico utilizando la reacción de Ugi o Strecker como se describe anteriormente. La desprotección del aminoácido cíclico que contiene boro D–6 con un ácido mineral acuoso proporciona un compuesto de Fórmula I D–7.

Para algunos ejemplos, los intermedios de hidrazona D–3 o D–4 se utilizan para introducir un sustituyente en el anillo donde Z es CRR’ y R y/o R' se introducen a través de una segunda y posiblemente tercera alquilación. La metodología de síntesis se ilustra en el Esquema D, también permite la introducción enantioselectiva de grupos sustituyentes R y R’ en la posición Z.

En una realización, los compuestos de fórmula I que tienen grupos sustituyentes en Z se obtienen mediante el uso de la cetona D–1 apropiadamente sustituida. Basándose en el método general ilustrado en el Esquema D, es evidente para los expertos en el arte de la química, que la metodología de síntesis ilustrativa se puede practicar fácilmente mediante la variación de los materiales de partida y condiciones de reacción para llegar a compuestos abarcados por la presente invención. En algunos casos, puede ser necesaria la protección de ciertas funcionalidades reactivas para lograr algunas de las transformaciones anteriores. En general, la necesidad de tales grupos protectores, así como las condiciones necesarias para unir y eliminar tales grupos serán evidentes para los expertos en el arte de la síntesis orgánica.

Otro enfoque útil para preparar los compuestos de la invención utiliza la síntesis de aminoácidos Corey–Link. Véase Corey et al., J. Am. Chem. Soc., 114, (1992), pp1906–1908. En este enfoque se forma el aminioácido a partir de una cetona utilizando un equivalente de ácido carboxílico como cloroformo y una fuente de amina tal como azida de sodio. Cuando se utiliza una fuente de amina ópticamente pura como metil bencilamina, los diastereómeros se forman en la reacción y los productos finales como a menudo se pueden obtener enantiómeros individuales. Como se ilustra en el Esquema E, el intermedio cetona de alilo E–1 se trató con el anión de cloroformo generado utilizando una base como LiHMDS en THF para formar el correspondiente carbinol E–2. El tratamiento posterior con hidróxido de sodio produce el dicloroepoxido que se abre con una fuente de amina como azida de sodio para dar el aminoácido derivado E–3. El ácido carboxílico se puede proteger como un éster (E–4) o amida antes de la hidroboración del enlace doble para dar el intermedio E–5. La reducción del grupo azido e hidrólisis dan los compuestos diana E–6. Dependiendo de la funcionalidad requerida, etapas adicionales o procedimientos alternativos pueden ser necesarios o preferidos.

imagen17

La preparación de compuestos de la presente invención se ilustra adicionalmente mediante los siguientes ejemplos.

Ejemplos

En general, los intermedios y compuestos diana que contienen centros quirales se designan de forma estereoespecífica. Esta designación se utiliza principalmente para distinguir la estereoquímica relativa y no indica la pureza óptica. Será obvio para los expertos en la síntesis orgánica que los compuestos son ópticamente puros mediante los métodos

24

imagen18

5

10

15

20

25

30

35

ambiente, durante 4 días, después de lo cual la mezcla se disolvió en una cantidad mínima de diclorometano y se purificó por cromatografía en columna instantánea (sílica gel, 60% de acetato de etilo en heptano) para producir el anti– isómero de (1S,2S)– 1–acetamido–2–alil–N–tert–butilciclopentanocarboxamida (0.771g, 36%) como un sólido de color blanco. El isómero syn que migra después se obtiene como un sólido de color blanco (0.851g, 40%), aumentando la concentración del solvente polar acetato de etilo a 80%. Anti–isómero: 1H RMN (CDCl3, 300 MHz)  7.26 (br s, NH, 1 H),

6.82 (br s, NH, 1 H), 5.88 – 5.72 (m, 1 H), 5.07 (br d, J = 17 Hz, 1 H), 5.00 (br d, J = 12 Hz, 1H), 2.56 – 2.41 (m, 1 H),

2.36 – 2.17 (m, 3 H), 2.01 (s, 3 H), 1.97 – 1.81 (m, 2 H), 1.72 – 1.60 (m, 2 H), 1.32 (s, 9 H); MS (+CI): m/z para C15H26N2O2: esperado 266.2; encontrado 266.2 (M+H)+

Etapa 4: (1S,2R)–1–acetamido–N–tert–butil–2–(3–(4,4,5,5–tetrametil–1,3,2–dioxaborolan–2– il)propil)ciclopentanocarboxamida (anti–isómero, racémico)

imagen19

Una solución agitada de (1S,2R)–1–acetamido–2–alil–N–tert–butilciclopentanocarboxamida (0.599 g, 2.25 mmol) en cloruro de metileno anhidro (9 mL) en atmósfera de nitrógeno se trató con Ir2Cl2(COD)2 (45 mg, 0.07 mmol) y DiPhos (54 mg, 0.136 mmol) y se agitó a temperatura ambiente, durante 30 min. Se adicionó gota a gota 4,4,5,5–tetrametil– [1,3,2]dioxaborolano (0.65 mL, 4.48 mmol) y la solución se agitó a temperatura ambiente, durante 20 h. La mezcla de reacción se vertió en agua (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (40 mL, luego 2 x 15mL), y la solución orgánica combinada se lavó con cloruro de sodio saturado acuoso (30 mL), se secó sobre MgSO4, y se concentró. El residuo se disolvió en diclorometano mínimo y se purificó por cromatografía en columna instantánea (sílica gel, 40–50% de acetato de etilo en heptano) para producir (1S,2S)–1–acetamido–N–tert–butil–2–(3–(4,4,5,5–tetrametil–1,3,2–dioxaborolan–2– il)propil) ciclopentanocarboxamida (0.695g, 78%) como un sólido de color blanco. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz)  6.72 (br s, NH, 1 H), 5.68 (br s, NH, 1 H), 2.46 – 2.29 (m, 2 H), 2.10 – 2.19 (m, 1 H), 2.02 (s, 3 H), 2.00 – 1.88 (m, 1H), 1.75 –

1.60 (m, 3 H), 1.52 – 1.38 (4 H), 1.32 (s, 9 H), 1.31 (s, 12 H), 0.81 – 0.70 (m, 2 H) ; MS (+CI): m/z para C21H39BN2O4: esperado 394.3; encontrado 395.2 (M+H)+.

Etapa 5: ácido (1S,2R)–1–amino–2–(3–boronopropil)ciclopentanocarboxílico (anti–isómero, racémico)

imagen20

Una mezcla agitada de (1S,2R)–1–acetamido–N–tert–butil–2–(3–(4,4,5,5–tetrametil–1,3,2–dioxaborolan–2–il)propil) ciclopentanocarboxamida (0.627 g, 1.59 mmol) en HCl 6 N (15 mL) se calentó a 90 °C, durante 20 h, se enfrió a temperatura ambiente, y se diluyó con agua (15 mL). La mezcla se extrajo con diclorometano (2 x 15 mL) y se concentró. A continuación, se adicionó agua (20 mL) a la mezcla en bruto concentrada y la solución acuosa se volvió a concentrar a vacío (2 x) para eliminar el exceso de HCl. El residuo resultante se disolvió en metanol (5 mL) y se diluyó a un volumen de 40 mL con éter y se agitó, durante 1 hora, para eliminar clorhidrato de tertbutilamina sólido por filtración. El filtrado resultante, después de la concentración se trató con una solución de hidróxido de amonio concentrada (15 mL), seguido de la eliminación del exceso de hidróxido de amonio con vacío (3 x). El residuo de color blanco sólido resultante se trituró utilizando acetonitrilo y se secó para producir el compuesto diana ácido (1S,2R)–1–amino–2–(3– boronopropil) ciclopentanocarboxílico (0.397g, 93%) como un polvo de color blanco que existe como una mezcla 1:1 de las formas ciclada y no ciclada. 1H RMN (DMSO, 300 MHz)  6.38 (br d, J= 11.4 Hz, NH, 0.5 H), 5.97 (br d, J = 12 Hz, NH, 0.5 H), 2.22–2.05 (m, 1 H), 1.98 – 1.42 (m, 6 H), 1.43 – 1.00 (m, 3 H), 0.95 – 0.88 (m, 1 H), 0.60 – 0.42 (m, 1 H),

0.38 – 0.20 (m, 1 H) ; MS (+CI): m/z para C9H18BNO4: esperado 215.1; encontrado 215.3 (M+H)+.

Ejemplo 2. Preparación del ácido (1S,2S)–1–amino–2–(3–boronopropil) ciclopentanocarboxílico (isómero syn, racémico)

26

imagen21

imagen22

5

10

15

20

25

30

35

Una solución de 4–(aliloxi)–1–diazobutan–2–ona (1.505g, 9.76mmol) en cloruro de metileno anhidro (150 mL) se adicionó gota a gota a una solución a reflujo de acetilacetonato de cobre(II) (0.13 g, 0.50 mmol) en cloruro de metileno anhidro (150 mL). Después de someter a reflujo la mezcla resultante, durante 2 horas, la solución se concentró y se purificó utilizando cromatografía en columna instantánea (sílica gel, diclorometano) para producir 2–alildihidrofuran– 3(2H)–ona (1.147 g, 93%) como un aceite incoloro. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz)  5.90 – 5.75 (m, 1 H), 5.20–5.05 (m, 2 H), 4.33 – 4.29 (m, 1 H), 4.07 (q, J = 9 Hz, 1 H), 3.79 (dd, J1 =7.5 Hz, J2 = 4.5 Hz, 1 H), 2.60–2.45 (m, 3 H), 2.34 (q, J =

7.5 Hz, 1H) ; MS (+CI): m/z para C7H10O2: esperado 126.1; encontrado 127.2 (M+H)+, 149.1 (M + Na).

Etapa 4: (2R,3S)–3–acetamido–2–alil–N–tert–butiltetrahidrofuran–3–carboxamida (racémico)

imagen23

Una solución de 2–alildihidrofuran–3(2H)–ona (1.2 g, 9.5 mmol) y acetato de amonio (4.39 g, 57.0 mmol) en 2,2,2– trifluoroetanol (5 mL) se trató con tert–butil isocianuro (2.37 g, 3.23 mL, 28.5 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente, durante 5 días, la mezcla de reacción se diluyó con agua (50 mL) y se extrajo utilizando acetato de etilo (2 x 50 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio saturado acuoso, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. La purificación por cromatografía en columna instantánea (sílica gel, 50 % de acetato de etilo en cloruro de metileno) dio (2R 3S)–3–acetamido–2–alil–N–tert–butiltetrahidrofuran–3–carboxamida como un aceite incoloro (930 mg, 36 %) y (2S, 3S)– 3–acetilamido–2–alil–N–tert–butiltetrahidrofuran–3–carboxamida como un aceite incoloro (650 mg, 26 %). Los datos analíticos para (2R, 3S)–3–acetilamido–2–alil–N–tert–butiltetrahidrofuran–3– carboxamida: 1H RMN (CDCl3, 300 MHz)  6.65 (s, NH, 1 H), 6.06 (s, NH, 1 H), 5.86 (m, 1 H), 5.16 (m, 2 H), 4.20 (dd, J1 = 9 Hz, J2 = 4 Hz, 1 H), 3.82 (m, 2 H), 2.54 (m, 2 H), 2.20 – 2.40 (m, 2 H), 2.03 (s, 3 H), 1.32 (s, 9 H) ; MS (+CI): m/z para C14H24N2O3: esperado 268.2; encontrado 269.2 (M+H)+.

Etapa 5: (2R,3S)–3–acetamido–N–tert–butil–2–(3–(4,4,5,5–tetrametil–1,3,2–dioxaborolan–2–il)propil)tetrahidrofuran–3– carboxamida

imagen24

Una solución de (2R,3S)–3–acetamido–2–alil–N–tert–butiltetrahidrofuran–3–carboxamida (930 mg, 3.47 mmol) en diclorometano (20 mL), se trató con dímero cloro–1,5–ciclooctadieno iridio(I) (70 mg, 3 mol%) y 1,2–bis(difenilfosfino)– etano (83 mg, 6 mol%). La solución se agitó a temperatura ambiente, durante 30 minutos y luego se adicionó gota a gota, 4,4,5,5– tetrametil–[1,3,2]dioxaborolano (1.01 mL, 6.94 mmol) y la reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. El siguiente día, la mezcla de reacción se vertió en agua y la solución acuosa se extrajo utilizando acetato de etilo (3 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio saturado acuoso, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró. La purificación por cromatografía en columna instantánea (sílica gel, 50 – 80% de acetato de etilo en diclorometano) dio (2R,3S)–3–acetamido–N–tert–butil–2–(3– (4,4,5,5–tetrametil–1,3,2–dioxaborolan– 2–il)propil)tetrahidrofuran–3–carboxamida como un aceite incoloro (864 mg, 63 %). 1H RMN (CDCl3, 300 MHz)  7.01 (s, NH, 1 H), 6.10 (s, NH, 1 H), 4.38 (m, 1 H), 4.12 (m, 1 H), 4.00 (m, 1 H), 2.96 (m, 1 H), 2.02–2.18 (m, 2 H), 1.99 (s, 3 H), 1.42 – 1.62 (m, 3 H), 1.36 (s, 9 H), 1.22 (s, 12 H), 0.76 (m, 2 H); MS (+CI): m/z para C20H37BN2O5: esperado 396.3; encontrado 397.4 (M+H)+.

Etapa 6: ácido (2R,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrofuran–3–carboxílico

imagen25

29

5

10

15

20

25

30

Una solución de (2R,3S)–3–acetamido–N–tert–butil–2–(3–(4,4,5,5–tetrametil–1,3,2–dioxaborolan–2– il)propil)tetrahidrofuran– 3–carboxamida (860 mg) en HCl 6 N (15 mL) se agitó a 90 °C, durante 1 día. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo de separación, se diluyó con agua desionizada (10 mL) y se lavó con diclorometano (3 x). La solución acuosa se concentró. La purificación por RP– HPLC (10–100% de acetonitrilo en agua) dio ácido (2R,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrofuran–3–carboxílico, como un sólido de color blanco (269 mg). 1H RMN (D2O, 300 MHz)  3.97 (m, 2 H), 3.82 (m, 1 H), 2.66 (ddd, J1 = 15 Hz, J2 = 9.5 Hz, J3 = 5.5 Hz, 1 H), 2.14 (ddd, J1 = 15 Hz, J2 = 9 Hz, J3 = 6.5 Hz, 1 H), 1.22–1.49 (m, 4 H), 0.67 (m, 2 H); MS (+CI): m/z para C8H16BlNO5: esperado 217.1; encontrado 435.3 (2M+H)+, 417.2 (2M+H–H2O)+, 217.7 (M+H)+,

200.0 (M+H–2H2O)+.

Ejemplo 4: Preparación del ácido (2S,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrofuran–3–carboxílico

Etapa 1: (2S,3S)–3–acetamido–2–alil–N–tert–butiltetrahidrofuran–3–carboxamida

imagen26

(2S,3S)–3–acetamido–2–alil–N–tert–butiltetrahidrofuran–3–carboxamida se obtuvo junto con su isómero en la etapa 4 del ejemplo 3. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz)  6.99 (s, NH, 1 H), 6.09 (s, NH, 1 H), 5.78 (m, 1 H), 5.08 (m, 2 H), 4.49 (dd, J1 = 9 Hz, J2 = 5 Hz, 1 H), 4.17 (q, J= 9 Hz, 1 H), 4.04 (td, J1 = 9 Hz, J2 = 3.5 Hz, 1 H), 2.97 (ddd, J1 = 12.5 Hz, J2 = 9 Hz, J3 = 3.5 Hz, 1 H), 2.04 – 2.36 (m, 3 H), 1.99 (s, 3 H), 1.38 (s, 9 H); MS (+CI): m/z para C14H24N2O3: esperado 268.2; encontrado 269.2 (M+H)+.

imagen27

Etapa 2: (2S,3S)–3–acetamido–N–tert–butil–2–(3–(4,4,5,5–tetrametil–1,3,2–dioxaborolan–2–il)propil)tetrahidrofuran–3– carboxamida

La (2S,3S)–3–acetamido–N–tert–butil–2–(3–(4,4,5,5–tetrametil–1,3,2–dioxaborolan–2–il)propil) tetrahidrofuran –3– carboxamida se preparó utilizando el método descrito en la etapa 5 del ejemplo 3. El compuesto base se aisló en forma de un aceite incoloro (496 mg), 1H RMN (CDCl3, 300 MHz)  6.57 (s, NH, 1 H), 5.83 (s, NH, 1 H), 4.04 (m, 1 H), 3.88 (m, 2 H), 2.62 (m, 1 H), 2.48 (m, 1 H), 2.05 (s, 3 H), 1.40–1.58 (m, 4 H), 1.33 (s, 9 H), 1.24 (s, 12 H), 0.83 (t, J = 6.5 Hz, 2 H); MS (+CI): m/z para C20H37BN2O5: esperado 396.3; encontrado 397.3 (M+H)+.

imagen28

Etapa 3: ácido (2S,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrofuran–3–carboxílico

El ácido (2S,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrofuran–3–carboxílico se preparó utilizando el método descrito en la etapa 6 del ejemplo 3. El compuesto base se aisló en forma de un sólido de color blanco (91 mg); 1H RMN (D2O, 300 MHz)  4.00 (m, 1 H), 3.80 (m, 1 H), 3.73 (m, 1 H), 2.58 (m, 1 H), 2.04 (ddd, J1 = 13.5 Hz, J2 = 8 Hz, J3 = 4 Hz, 1 H), 1.34–1.49 (m, 3 H), 1.28 (m, 1 H), 0.66 (m, 2 H); MS (+CI): m/z para C8H16BlNO5: esperado 217.1; encontrado 417.1 (2M+H–H2O)+, 399.3 (2M+H–2H2O)+, 217.7 (M+H)+, 200.0 (M+H–2H2O)+.

Ejemplo 5: Preparación del ácido 3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrotiofeno–3–carboxílico

30

imagen29

El ácido 3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrotiofeno–3–carboxílico se preparó de una manera análoga a la expuesta en el ejemplo 3, excepto que se utilizó el ácido 3–(aliltio)propanoico en lugar del ácido 3–(propen–3–iloxi)propionico en la etapa 1 del ejemplo 3. El compuesto base se aisló en forma de un sólido de color blanco como una mezcla (∼1:1) inseparable de diastereoisómeros (51 mg); 1H RMN (D2O, 300 MHz)  3.91 (m, 0.5 H), 3.70 (m, 0.5 H), 3.05 (m, 1 H),

2.80 (m, 1 H), 2.50 (m, 1 H), 2.38 (m, 1 H), 1.52 (m, 1 H), 1.16 – 1.42 (m, 3 H), 0.64 (m, 2 H); MS (+CI): m/z para C8H16BlNO4S: esperado 233.1; encontrado 234.0 (M+H)+, 216.1 (M+H–H2O)+.

Ejemplo 6: Preparación del ácido (3R,4S)–4–amino–3–(3–boronopropil)piperidina–4–carboxílico

imagen30

10 El ácido (3R,4S)–4–amino–3–(3–boronopropil)piperidina–4–carboxílico se preparó de una manera análoga a la expuesta en el ejemplo 1, excepto que se utilizó 1–tert–butil 3–metil 4–oxopiperidina–1,3–dicarboxilato en lugar de metil 2– oxociclopentanocarboxilato en la etapa 1 del ejemplo 1. El análisis de la mezcla de reacción indica que la presencia de tres productos isoméricos. 1H RMN (DMSO, 300 MHz)  3.40 – 3.17 (m, 3 H), 3.04 (t, J = 12.9 Hz, 1 H), 2.22 – 2.18 (m, 1 H), 2.01 – 1.68 (m, 2 H), 1.45 – 0.83 (m, 4 H), 0.75 – 0.40 (m, 2 H); MS (+CI): m/z para C9H19BN2O4: esperado

15 230.1; encontrado 231.0 (M+H)+.

Ejemplo 7: Preparación del ácido (3S,4S)–4–amino–3–(3–boronopropil)piperidina–4–carboxílico

imagen31

El ácido (3S,4S)–4–amino–3–(3–boronopropil)piperidina–4–carboxílico se preparó de una manera análoga a la expuesta en el ejemplo 1, excepto que se utilizó 1–tert–butil 3–metil 4–oxopiperidina–1,3–dicarboxilato en lugar de metil 2– 20 oxociclopentanocarboxilato en la etapa 1 del ejemplo 1. El análisis de la mezcla de reacción indica que la presencia de tres productos isoméricos. 1H RMN (DMSO, 300 MHz)  3.40 – 3.20 (m, 2 H), 2.90 – 2.61 (m, 2 H), 2.28 – 2.19 (m, 2 H),

2.01 – 1.91 (m, 1 H), 1.27 – 0.95 (m, 4 H), 0.75 – 0.40 (m, 2 H); MS (+CI): m/z para C9H19BN2O4: esperado 230.1; encontrado 231.0 (M+H)+.

Ejemplo 8: Preparación del ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico

imagen32

Etapa 1, Método A: tert–butil 3–alil–4–oxopirrolidina–1–carboxilato

31

5

10

15

20

25

30

35

40

45

Una solución enfriada con hielo (3 ºC) agitada de N–boc–glicina, éster de alilo (6.46 g, 30 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (60 mL) en atmósfera de nitrógeno se trató con litio bis(trimetilsililamida) 1N /tetrahidrofurano (33 mL, 33 mmol) a una velocidad para mantener la temperatura del recipiente por debajo de 10 °C, luego se agitó a 3 °C, durante 15 min y se enfrió (–40 °C). Se adicionó gota a gota, una solución de acrilato de alilo (4.45 mL, 35 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (25 mL), y la mezcla se dejó alcanzar la temperatura ambiente, se agitó 1 h, y se sometió a reflujo durante 2 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se inactivó con ácido acético glacial (2.5 mL), y se concentró. El aceite residual se disolvió en cloruro de metileno (300 mL) y la solución se lavó con agua y bicarbonato de sodio saturado (150 mL cada uno), se secó (Na2SO4), y se concentró. El residuo se disolvió en cloruro de metileno mínimo y se cargó sobre una columna de sílica gel (volumen de 350 mL) y se eluyó con heptano/cloruro de metileno/acetato de etilo 55:30:15 para producir 3–alil 1–tert–butil 4–oxopirrolidina–1,3–dicarboxilato (5.07g, 63%) como un aceite incoloro. RMN (CDCl3):  5.85 – 6.00 (m, 1 H), 5.20 – 5.40 (m, 2 H), 4.60 – 4.75 (m, 2 H), 4.20 (m, 1 H), 3.95 – 4.10 (m, 1 H), 3.87 (dJ = 6.5 Hz, 1 H), 3.62 (t, J = 8 Hz, 1 H), 1.48 (s, 9 H). MS (m + 1): 270.4; MS (m – bu + 1): 214.2.

Este compuesto (4.12 g, 15.3 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano anhidro (25 mL) y se adicionó a una solución agitada de Pd(PPh3)4 (0.36 g, 0.31 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (40 mL) en atmósfera de nitrógeno, se agitó, durante 4 h, y se concentró. El residuo se disolvió en cloruro de metileno mínimo y se cargó sobre una columna de sílica gel (volumen de 350 mL) y se eluyó con 60:35:5 heptano/cloruro de metileno/acetato de etilo para producir tert–butil 3–alil– 4–oxopirrolidina– 1–carboxilato (4.16 g, 60%) como un aceite de color amarillo muy pálido. RMN (CDCl3):  5.65 – 5.80 (m, 1 H), 5.05 – 5.15 (m, 2 H), 4.02 (m, 1 H), 3.89 (br d, J = 20 Hz, 1 H), 3.67 (br d, J= 20 Hz, 1 H), 3.31 (dd, J1 = 11 Hz, J2 = 8.5 Hz, 1 H), 2.60 – 2.70 (m, 1 H), 2.50 – 2.60 (m, 1 H), 2.10 – 2.30 (m, 1 H), 1.48 (s, 9 H). MS (m+1): 226.1; MS (m–bu+1): 170.1.

Etapa 1, Método B: tert–butil 3–alil–4–oxopirrolidina–1–carboxilato

Una solución de 1–tert–butil 3–metil 4–oxopirrolidina–1,3–dicarboxilato (48.65 g, 0.20 mol), alcohol de alilo (300 mL), y óxido de dibutilestaño (5.0 g, 20 mmol) en tolueno anhidro (800 mL) se sometió a reflujo, durante 20 h bajo una trampa Dean–Stark con eliminación de porciones de solvente (total de 200 mL) durante las primeras 6 horas, seguido por adición de más alcohol de alilo (75 mL) en el final de las primeras 6 horas. La mezcla de reacción se concentró, se disolvió en cloruro de metileno mínimo, y se cargó sobre una columna de sílica gel (volumen de 700 mL) y se eluyó con cloruro de metileno, 10%, luego 15%, luego 20% de acetato de etilo/cloruro de metileno para producir 3–alil 1–tert–butil 4–oxopirrolidina–1,3–dicarboxilato (48.6 g, 90%) como un aceite de color rosa pálido (RMN y MS como anteriormente). Este compuesto (48.47g, 0.18 mol) se disolvió en tetrahidrofurano anhidro (200 mL) y se adicionó a una solución agitada de Pd(PPh3)4 (4.16 g, 3.6 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (400 mL) en atmósfera de nitrógeno, se agitó, durante 4 h, y se concentró. El residuo se disolvió en heptano y se cargó sobre una columna de sílica gel (1000 mL volumen) y se eluyó con 60:35:5 heptano/cloruro de metileno/acetato de etilo para producir tert–butil 3–alil–4–oxopirrolidina–1– carboxilato (27.93, 69%) como un aceite de color amarillo pálido (RMN y MS como anteriormente).

imagen33

Etapa 2: (3R,4S)–tert–butil 3–acetamido–4–alil–3–(tert–butilcarbamoil)pirrolidina–1–carboxilato

Una mezcla agitada de tert–butil 3–alil–4–oxopirrolidina–1–carboxilato (13.23 g, 58.7 mmol) y acetato de amonio (11.95 g, 155 mmol) en 2,2,2–trifluoroetanol (25 mL) en atmósfera de nitrógeno se trató con t–butilisonitrilo (12.25 mL, 106 mmol), luego se agitó a temperatura ambiente, durante 4 días y se concentró. El residuo se sometió a partición entre agua (100 mL) y cloruro de metileno (200 mL), y la capa acuosa se extrajo con cloruro de metileno (2 x 75 mL). La solución orgánica combinada se lavó con agua y cloruro de sodio saturado acuoso (100 mL cada uno), se secó (Na2SO4), y se concentró para un sólido de color blanco crema. Este se recristalizó dos veces con acetato de etilo (150 mL cada una) para producir una porción del producto base (8.36 g) como un sólido de color blanco. Los licores madre combinados se concentraron, se disolvieron en cloruro de metileno mínimo, y se cargó sobre una columna de sílica gel (650 mL volumen). Este se eluyó con 60%, luego 70%, luego 90% de acetato de etilo/heptano para producir producto adicional (3.84 g). El rendimiento total de (3R,4S)–tert–butil 3–acetamido– 4–alil–3–(tert–butilcarbamoil)pirrolidina–1– carboxilato fue 12.22 g (57%) como un sólido de color blanco. RMN (CDCl3)  6.30 – 6.70 (m, 2 H), 5.60 –5.75 (m, 1 H),

4.95 – 5.10 (m, 2 H), 3.94 (d, J=11.5 Hz, 1 H), 3.75 (d, J=11.5 Hz, 1 H), 3.60 (m, 1 H), 3.00 – 3.20 (m, 2 H), 2.20 – 2.30 (m, 1 H), 2.00 (s, 3 H), 1.80 – 1.90 (m, 1 H), 1.44 (s, 9 H), 1.33 (s, 9 H). MS (m + 1): 368.3; MS (m – bu +1): 312.1; MS (m – boc + 1): 268.3.

32

imagen34

imagen35

imagen36

imagen37

imagen38

imagen39

imagen40

imagen41

imagen42

imagen43

imagen44

imagen45

imagen46

imagen47

imagen48

imagen49

imagen50

imagen51

imagen52

imagen53

imagen54

imagen55

imagen56

imagen57

imagen58

imagen59

imagen60

imagen61

5

10

15

20

25

30

imagen62

Etapa 2: ácido 2–(tert–Butoxicarbonil)–5,7–dicloro–1,2,3,4–tetrahidroisoquinolina–3–carboxílico

Una mezcla de metil 2,4–dicloro–N–(etoxicarbonil)fenilalaninato (100 mg, 0.312 mmol) y paraformaldehido (10.3 mg,

0.344 mmol) en ácido acético (0.90 mL) en un tubo de microondas se trató con ácido sulfúrico conc. (0.30 mL) (ligera exotermia en mezcla). La mezcla se calentó a 80 °C en el microondas, durante un total de 8 h, durante los cuales las alícuotas se controlaron por HPLC. La mezcla de reacción a continuación, se adicionó a agua (8 mL), y esta fase acuosa se lavó con cloruro de metileno (2 x 20 mL) y se concentró para dar una mezcla ∼4:1 del producto del ácido 5,7– dicloro–1,2,3,4–tetrahidroisoquinolina– 3–carboxílico deseado y el subproducto 2,4–diclorofenilalanina en ácido sulfúrico residual.

Una lechada del ácido 5,7–dicloro–1,2,3,4–tetrahidroisoquinolina–3–carboxílico en bruto en agua (15 mL) se enfrió en un baño con hielo, se ajustó a pH ~ 8.5 con NaOH acuoso al 50%, se diluyó con 1,4–dioxano (10 mL) y se trató con una solución de di–tert–butildicarbonato (530 mg, 2.43 mmol) en 1,4–dioxano (8 mL) gota a gota rápidamente. La mezcla heterogénea se agitó a 0 °C, durante 10 min y luego a temperatura ambiente durante la noche, dando una mezcla de color blanco. HPLC indicó material de partida remanente, por lo que la reacción se trató con NaOH acuoso 2N (0.48 mL,

0.96 mmol) y di–tert–butildicarbonato adicional (204 mg, 0.935 mmol). Después de agitar, durante 4 h, la mezcla se diluyó con agua (25 mL) y se lavó con Et2O (2 x 25 mL). La fase acuosa se ajustó a pH ~ 3 con ácido cítrico acuoso 1 M y se extrajo con acetato de etilo (2 x 40 mL). La fase orgánica combinada (Et2O/ acetato de etilo) se lavó con cloruro de sodio saturado acuoso (10 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentró. La purificación por cromatografía en sílica gel (40 g columna, 15–45% de acetato de etilo en hexanos) dio ácido 2–(tert–butoxicarbonil)–5,7–dicloro–1,2,3,4– tetrahidroisoquinolina–3–carboxílico (265 mg, 41%) como un sólido parcialmente cristalino de color blanco. 1H RMN (DMSO–d6, 400 MHz)  12.9 (s, 1 H), 7.51 (m, 1 H), 7.41 (m, 1 H), 4.98 (m, –0.5 H), 4.80 (m, –0.5 H), 4.50 (m, 2 H), 3.29 (m, 1 H), 2.98 (m, 1 H), 1.46 (s, –4.5 H), 1.41 (s, –4.5 H) (mezcla de rotámeros). LC–MS da ESI– MS encontrado para C15H17Cl2NO4 m/z 344.1 (M – H).

imagen63

Etapa 3: ácido (3R,4S)–3–Amino–1–[(5,7–dicloro–1,2,3,4–tetrahidroisoquinolin–3–il)metil]–4–[3– (dihidroxiboril)propil]pirrolidina– 3–carboxílico triclorhidrato (mezcla de dos diastereoisómeros; cada uno un racemato)

El ácido (3R,4S)–3–amino–1–[(5,7–dicloro–1,2,3,4–tetrahidroisoquinolin–3–il)metil]–4–[3–(dihidroxiboril)propil] pirrolidina– 3–carboxílico triclorhidrato (mezcla de dos diastereoisómeros, cada uno un racemato) se prepara de una manera análoga a la expuesta en el ejemplo 49, etapas. 1H RMN (DCl 0.1M en D2O, 400 MHz)  7.43 (m, 1 H), 7.17 (m, 1 H), 4.41 (s, 2 H), 4.00 (m, 3 H), 3.85 (m, 2 H), 3.75 (m, 1 H), 3.41 (m, 2 H), 2.86 (m, 1 H), 2.69 (m, 1 H), 1.60 (m, 1 H),

1.27 (m, 3 H), 0.67 (m, 2 H). ESI+ MS encontrado para C18H26BCl2N3O4 m/z 412.2 (M –18 + H), 394.2 (M – 36 + H); ESI– MS m/z 410.3 (M – 18 –H).

Ejemplo 60: Preparación del ácido (3aR,4S,5S,6aR)–5–amino–4–(3–boronopropil)octahidrociclopenta[c]pirrol–5– carboxílico

61

imagen64

imagen65

5

10

15

20

25

30

35

columna de sílica gel (~600 cc) y se eluyó con heptano/diclorometano 2:1, luego con heptano/diclorometano 1:1 para producir 2–alil–5–(fenilselanil) ciclopentanona (19.7 g, 71%) como un aceite de color amarillo pálido. RMN (CDCl3): 

7.40 – 7.50 (m, 2 H), 7.05 – 7.25 (m, 3 H), 5.50 – 5.70 (m, 1 H), 4.80 – 4.95 (m, 2 H), 3.45 – 3.75 (m, 1 H), 2.30 – 2.50 (m, 1 H), 1.80 – 2.25 (m, 5 H), 1.50 – 1.75 (m, 1 H). MS (M + 1): 279.1/280.9 (para 2 isótopos principales de Se).

imagen66

Etapa 3: 5–alilciclopent–2–enona

Una solución agitada, enfriada con hielo (3 ºC) de 2–alil–5–(fenilselanil)ciclopentanona, mezcla de isómeros (12.0 g, 43 mmol) en diclorometano (200 mL) en un matraz de fondo redondo de 1L equipado para hervir con contención se trató con cloruro de amonio saturado acuoso (45 mL), luego gota a gota con peróxido de hidrógeno acuoso al 30% (22 mL), y se calentó lentamente con cuidado a temperatura ambiente. A aproximadamente 20 °C se inicia una reacción exotérmica vigorosa, y el baño con hielo se vuelve a aplicar. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se agitó, durante 1 h, luego la solución se lavó con agua (100 mL), se agitó con tiosulfato de sodio pentahidrato acuoso al 10% (75 mL) durante 10 min, y se separó. La solución orgánica se lavó con bicarbonato de sodio saturado acuoso y cloruro de sodio saturado acuoso (75 mL cada uno), se secó (Na2SO4), y se concentró hasta 30 mL de volumen. La solución se adicionó a una columna de sílica gel (∼400 cc) y se eluyó con diclorometano para producir (después de la concentración muy suave de las fracciones apropiadas) 5–alilciclopent–2– enona (3.95 g, 75%) como un aceite de color amarillo muy pálido. RMN (CDCl3):  7.61 (m, 1 H), 6.12 (m, 1 H), 5.60 – 5.75 (m, 1 H), 4.90 – 5.05 (m, 2 H), 2.70 – 2.80 (m, 1H), 2.45 –2.55 (m, 1 H), 2.30 – 2.40 (m, 2 H), 2.05 – 2.15 (m, 1 H).

imagen67

Etapa 4: tert–butil 3–alil–4–oxociclopentilcarbamato

Una solución agitada de 5–alilciclopent–2–enona (2.20 g, 18 mmol), carbonato de t–butilo (4.70 g, 40 mmol), y tetran– butilamonio bromuro (6.45 g, 20 mmol) en diclorometano anhidro (40 mL) en atmósfera de nitrógeno se enfrió en un baño con hielo (3 °C) y se trató gota a gota con eterato de trifluoruro de boro (2.22 mL, 18 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó, durante 18 h. Se adicionó bicarbonato de sodio saturado acuoso (40 mL) y luego la mezcla se agitó, durante 15 min y se separó. La solución acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 20 mL) y la solución orgánica combinada se lavó con agua y cloruro de sodio saturado acuoso (20 mL cada uno), se secó (Na2SO4), y se concentró a vacío. El residuo se disolvió en diclorometano mínimo y se adicionó a una columna de sílica gel (∼300 cc) y se eluyó primero con 85:15 heptano/acetato de etilo para producir material de partida recuperado (0.3 5 g), luego con heptano/acetato de etilo 4:1 para producir una mezcla de carbonato de t–butilo y compuesto en cuestión. Esta mezcla se calentó en heptano y se filtró para eliminar la mayor parte del carbonato de t–butilo, luego el filtrado se adicionó a una columna de sílica gel (∼300 cc) y se eluyó con heptano/diclorometano/acetato de etilo 6:3:1para producir tert–butil 3–alil–4–oxociclopentilcarbamato 1.17g (27%) como un sólido de color ámbar pálido. RMN (CDCl3):  5.60 –

5.75 (m, 1 H), 4.90 – 5.05 (m, 2 H), 4.50 (br s, 1 H), 4.00 – 4.25 (m, 1 H), 2.30 – 2.80 (m, 3 H), 2.20 – 2.30 (m, 1 H), 1.85

– 2.15 (m, 3 H), 1.38 (s, 9 H). MS (M + 1): 240.1.

imagen68

Etapa 5: tert–butil (1S,3S,4S)–3–acetamido–4–alil–3–(tert–butilcarbamoil) ciclopentilcarbamato

64

imagen69

imagen70

imagen71

imagen72

imagen73

Etapa 2: (1S,2S)–1–acetamido–2–alil–N–tert–butil–4–(nitrometil) ciclopentanocarboxamida, isómeros A y B

Una solución agitada de 2–alil–4–(nitrometil)ciclopentanona, mezcla de isómeros (0.366 g, 2.0 mmol) en 2,2,2– trifluoroetanol (1.5 mL) en atmósfera de nitrógeno se trató con acetato de amonio (0.617 g, 8 mmol) y t–butilisonitrilo 5 (0.68 mL, 6.0 mmol) y se agitó a temperatura ambiente, durante 2 días. La mezcla se diluyó con diclorometano (20 mL) y se adicionó directamente a una columna de sílica gel (∼250 cc) y se eluyó con 7:3 diclorometano/acetato de etilo para producir primero los dos isómeros con sustituyentes acetamino y alilo en geometría syn relativa, luego isómero A (122 mg, 19%) como un sólido de color blanco, luego isómero B (195 mg, 30%) como un sólido de color blanco. Para el isómero A: RMN (CDCl3):  6.12 (br s, 2 H), 5.65 – 5.80 (m, 1 H), 5.00 – 5.15 (m, 2 H), 4.53 (d, J = 7 Hz, 1 H), 4.35 –

10 4.50 (m, 1 H), 2.80 – 3.00 (m, 1 H), 2.45 – 2.60 (m, 1 H), 2.25 – 2.35 (m, 2 H), 1.90 – 2.20 (m, 2 H), 2.00 (s, 3 H), 1.20 –

1.60 (m, 2 H), 1.34 (s, 9 H). MS (M + 1): 326.0. Para isómero B: RMN (CDCl3  6.05 – 6.15 (m, 2 H), 5.65 – 5.80 (m, 1 H), 5.00 –5.15 (m, 2 H), 4.43 (d, J= 6.5Hz, 2 H), 2.90 – 3.10 (m, 2 H), 2.40 – 2.50 (m, 1 H), 2.20 – 2.30 (m, 1H), 2.00 (s, 3 H), 1.70 – 2.00 (m, 4 H), 1.35 (s, 9 H). MS (M + 1): 326.0.

imagen74

15 Etapa 3: (1S,2S,4R)–1–acetamido–N–tert–butil–4–(nitrometil)–2–(3–(4,4,5,5–tetrametil–1,3,2–dioxaborolan–2–il)propil) ciclopentanocarboxamida (racémico)

Si bien en atmósfera de nitrógeno, una solución agitada de (1S,2S)–1–acetamido–2–alil–N–tert–butil–4–(nitrometil)

ciclopentanocarboxamida, isómero A (0.180 g, 0.553 mmol) en diclorometano anhidro (5 mL) se trató con dímero cloro–

1,5– ciclooctadieno iridio (12 mg, 0.018 mmol) y Diphos® (14 mg, 0.035 mmol) y se enfrió (–25°C). Después de agitar, 20 durante 30 min, pinacolborano (0.123 mL, 0.85 mmol) se adicionó gota a gota con una jeringa, y la temperatura del

recipiente se dejó calentar a temperatura del baño con hielo y se calentó gradualmente a temperatura ambiente durante

la noche (18 h). Se adicionó agua (3 mL), la mezcla se agitó 20 min, y luego se extrajo con acetato de etilo (25 mL,

luego 10mL). La solución orgánica combinada se lavó con agua y cloruro de sodio saturado acuoso (20mL cada uno),

se secó (MgSO4) y se concentró a vacío. La recristalización a partir de acetonitrilo (2 cosechas) proporcionó 0.170 g 25 (68%) del compuesto en cuestión como un sólido de color blanco. RMN (CDCl3):  6.08 (br s, 1 H), 5.92 (br s, 1 H), 4.46

(d, J = 5 Hz, 2 H), 2.75 – 2.90 (m, 1 H), 2.49 (dd, J1 = 11 Hz, J2 = 6 Hz, 1H), 2.00 – 2.15 (m, 3 H), 1.95 (s, 3 H), 1.20 –

1.50 (m, 5 H), 1.25 (s, 9 H), 1.17 (s, 12 H), 0.65 – 0.85 (m, 2 H). MS (M + 1): 454.5.

69

imagen75

imagen76

imagen77

imagen78

imagen79

Hipertensión

Xu et al. (FASEB 2004, 14, 1746–8), propuso un papel fundamental de la arginasa II en la regulación de la presión arterial. En este contexto, los altos niveles de arginasa vascular se correlacionan con la reducción concomitante de óxido nítrico (NO) vascular en los animales hipertensos. Por ejemplo, favorecer la expresión de la actividad de la arginasa precede el aumento de la presión sanguínea en ratas que fueron genéticamente predispuestas a la hipertensión (esto es, ratas espontáneamente hipertensas), pero la administración del agente antihipertensivo hidralazina disminuyó la presión arterial con una disminución en los niveles de expresión de arginasa vascular, lo que indica una fuerte correlación entre la actividad de arginasa y la presión arterial (Berthelot et al. Life Sciences, 80:1128– 34, (2008). La administración similar del conocido inhibidor de la arginasa N–hidroxi–nor–L–arginina. (nor–NOHA) disminuyó la presión arterial y mejoró la respuesta vascular de los vasos de resistencia al flujo de sangre y la presión en los animales espontáneamente hipertensos, destacando de este modo los inhibidores de la arginasa como agentes terapéuticos candidatos para el tratamiento de la hipertensión (Demougeot et al., (J. Hypertension, 26:1110–18, (2008).

La arginase también juega un papel en la hipertensión cutánea reflejo mediante la reducción de los niveles celulares de óxido nítrico (NO). El óxido nítrico provoca vasodilatación y los niveles de óxido nítrico (NO) normalmente se elevan o bajan para mantener la presión arterial en niveles fisiológicamente aceptables. Kenny et al., (J. of Physiology 581 (2007) 863–872), hicieron la hipótesis de que la vasodilatación refleja en sujetos hipertensos puede atenuar la inhibición de la arginasa, implicando de esta manera un papel para los inhibidores de la arginasa para el tratamiento de la hipertensión.

Asma

La actividad de arginasa también se asocia con hiperreactividad de vías aéreas en el asma. Por ejemplo, la arginasa I favorece la expresión en asmáticos humanos y en ratones que sufren de asma aguda y crónica, mientras que los niveles de isoformas de NOS y arginasa II permanecen sin cambios (Scott et al., (Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 296:911–920 (2009)). Además, la capacidad de respuesta inducida por la metacolina de las vías aéreas centrales en el modelo murino crónico atenuado sobre la administración del inhibidor de la arginasa S– (2–boronoetil)–L–cisteína. La similitud entre los perfiles de expresión de ARG I en los seres humanos y en ratones que tienen asma crónica indica que los compuestos capaces de inhibir la actividad de la arginasa son agentes terapéuticos candidatos para el tratamiento de asma.

Otras líneas de evidencia revelan otras correlaciones entre el aumento de la actividad de la arginasa en el tejido pulmonar asmático y progresión de la enfermedad, tales como la expresión inducida de los genes relacionados con el metabolismo de los aminoácidos catiónicos, incluyendo arginasa I y II en los ratones que tienen asma (Rothenberg et al., (J. Clin. Invest., 111:1863–74 (2003), y Meurs et. al., (Expert Opin. Investig Drugs, 14(10:12211231, (2005)).

Además, los niveles de todos los aminoácidos son más bajos en el plasma de asmáticos, pero los niveles de arginina son más bajos en el plasma significativamente en comparación con los de un sujeto normal (Morris et al., (Am. J. Respir. Crit Care Med., 170:148–154, (2004)). Por lo tanto, la actividad de la arginasa se incrementa significativamente en el plasma de un asmático, en el que niveles elevados de actividad de la arginasa pueden contribuir a la biodisponibilidad inferior de arginina plasma que crea una deficiencia de óxido nítrico (NO), que se encarga de promover vías respiratorias hiperreactivas en los asmáticos.

Inflamación

La actividad de arginasa también se asocia con la inflamación autoinmune (Chen et al., Immunology, 110:141–148, (2003)), los autores identifican la expresión inducida en los niveles de expresión del gen de ARG I en las células de la médula de murinos a partir de animales que padecen encefalomielitis autoinmune experimental (EAE). La administración del inhibidor de la arginasa ácido amino–6–boronohexanoico (ABH), sin embargo, dio lugar a los animales que desarrollan una forma mucho más leve de EAE que en los animales de control. Estos resultados implican inhibidores de la arginasa en una función terapéutica para el tratamiento de la encefalomielitis autoinmune.

Por otra parte, Horowitz et al., (American J. Physiol Gastrointestinal Liver Physiol., 292:G1323–36, (2007)), sugieren un papel para las enzimas de arginasa en fisiopatología vascular. Por ejemplo, estos autores indican una pérdida de la producción de óxido nítrico (NO) en los vasos sanguíneos del intestino crónicamente inflamados en pacientes que sufren de la enfermedad del intestino irritable (IBD), enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa. La pérdida en la producción de óxido nítrico (NO) correlacionada con una expresión inducida de la expresión y la actividad de arginasa que redujo los niveles de arginina que impiden la óxido nítrico sintasa (NOS), a partir de la síntesis de óxido nítrico (NO). Los inhibidores de la actividad de la arginasa, por lo tanto, pueden ser candidatos terapéuticos para el tratamiento de la fisiopatología vascular.

Isquemia por reperfusión

75

imagen80

imagen81

imagen82

imagen83

imagen84

Tabla 2: Inhibidores de Arginasa de ejemplo

Ej. #: Estructura* Nombre Arg I IC50 Arg II IC50

1: ácido (1S,2S)–1–amino–2–(3– boronopropil)ciclopentanocarboxílico 2 2

2: ácido (1S,2R)–1–amino–2–(3– boronopropil)ciclopentanocarboxílico 5 5

3: ácido (2R,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrofuran– 3– carboxílico 3 4

4: ácido (2S,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrofuran– 3– carboxílico 1 1

5: imagen85 ácido 3–amino–2–(3–boronopropil)tetrahidrotiofeno–3– carboxílico 3 4

6: ácido (3R,4S)–4–amino–3–(3–boronopropil)piperidina–4– carboxílico 2 4

7: imagen86 ácido (3S,4S)–4–amino–3–(3–boronopropil)piperidina–4– carboxílico 2 2

8: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)pirrolidina–3– carboxílico 2 2

9: ácido (3R,4R)–3–amino–4–(3–boronopropil)pirrolidina–3– carboxílico 3 3

10: ácido (2R,3S)–3–amino–2–(3–boronopropil)pirrolidina–3– carboxílico 5 5

11: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1– isobutilpirrolidina–3–carboxílico 2 3

81

Ej. #: Estructura* Nombre Arg I IC50 Arg II IC50

12: ácido (3R,4S)–3–amino–1–bencil–4–(3– boronopropil)pirrolidina– 3–carboxílico 2 3

13: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piridin–3– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico 2 3

14: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–aminociclopentil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

15: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piperidin–4– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico 2 3

16: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(3–(4– carboxifenil)propil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

17: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)– 1–(3– (dimetilamino)–2,2–dimetilpropil)pirrolidina–3– carboxílico 4 n.d.

18: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piperidin–3– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico 1 2

19: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(qunolin–4– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico 2 2

20: ácido (3R,4S)–1–((1H–imidazol–4–il)metil)–3–amino–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico 1 2

21: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piperidin–2– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

82

Ej. #: Estructura* Nombre Arg I IC50 Arg II IC50

22: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(3–(4– clorofenil)propil)pirrolidina–3–carboxílico 2 2

23: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(7H–purin–6– il)pirrolidina–3–carboxílico 2 3

24: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–aminoetil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

25: ácido 5–((3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–3– carboxipirrolidin–1–il)nicotínico 2 2

26: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piperidin–4– il)pirrolidina–3–carboxílico 2 2

27: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1,3’– bipirrolidina–3– carboxílico 1 1

28: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piperidin–3– il)pirrolidina–3–carboxílico 1 2

29: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(piridin–2– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico 3 3

30: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– carboxiciclohexil)pirrolidina–3–carboxílico 2 3

83

Ej. #: Estructura* Nombre Arg I IC50 Arg II IC50

31: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((1–metil– 1Himidazol– 2–il)metil)pirrolidina–3–carboxílico 1 2

32: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– metilpiridin– 3–il)pirrolidina–3–carboxílico 3 3

33: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(2–(piperidin– 1–il)etil)pirrolidina–3–carboxílico 1 2

34: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)– 1–(2– (dietilamino)etil)pirrolidina–3–carboxílico 1 2

35: ácido (3R,4S)–4–(3–boronopropil)–3–(metilamino)pirrolidina– 3–carboxílico 2 2

36: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((1– metilpiperidin–2–il)metil)pirrolidina–3–carboxílico 1 2

37: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(pirrolidin–2– ilmetil)pirrolidina–3–carboxílico 1 2

38: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(2–(pirrolidin– 1–il)etil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

39: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(((S)–1,2,3,4– tetrahidroisoqunolin–3–il)metil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

84

Ej. #: Estructura* Nombre Arg I IC50 Arg II IC50

40: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–(bencilamino)etil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

41: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(2–(3,4– diclorobencilamino)etil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

42: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– clorofenilcarbamoil)pirrolidina–3–carboxílico 2 2

43: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((S)– pirrolidina–2– carbonil)pirrolidina–3–carboxílico 1 2

44: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–aminociclohexil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

45: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(2–(4– clorofenil)acetil)pirrolidina–3–carboxílico 2 2

46: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– fluorobenzoil)pirrolidina–3–carboxílico 2 2

47: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– metoxibenzoil)pirrolidina–3–carboxílico 2 2

48: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(4– fluorofenilcarbamoil)pirrolidina–3–carboxílico 2 2

85

Ej. #: Estructura* Nombre Arg I IC50 Arg II IC50

49: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((7–cloro– 1,2,3,4–tetrahidroisoquinolin–3–il)metil)pirrolidina–3– carboxílico 1 1

50: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–aminofenilsulfonil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico 2 3

51: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((6–cloro– 1,2,3,4–tetrahidroisoquinolin–3–il)metil)pirrolidina–3– carboxílico 1 1

52: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–(bifenil–4–ilamino)etil)–4–(3– boronopropil) pirrolidina–3–carboxílico 1 1

53: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(1,2,3,4– tetrahidroisoquinolina–3–carbonil)pirrolidina–3– carboxílico 1 2

54: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–amino– 3–(4– (trifluorometil)fenil)propanoil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina– 3–carboxílico 2 3

55: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)– 1–((7– (trifluorometil)–1,2,3,4–tetrahidroisoquinolin–3– il)metil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

56: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(7–cloro– 1,2,3,4– tetrahidroisoquinolina–3–carbonil)pirrolidina–3– carboxílico 1 1

57: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–amino–3–fenilpropil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico 1 1

58: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–(2– (metilamino)– 3–fenilpropanoil)pirrolidina–3–carboxílico 3 3

86

Ej. #: Estructura* Nombre Arg I IC50 Arg II IC50

59: ácido (3R,4S)–3–amino–4–(3–boronopropil)–1–((5,7–dicloro– 1,2,3,4–tetrahidroisoquinolin–3–il)metil)pirrolidina–3– carboxílico 1 1

60: ácido (3R,4S)–3–amino–1–(2–(bencilamino)acetil)–4–(3– boronopropil)pirrolidina–3–carboxílico 2 3

61: ácido (1S,2S,4S)–1,4–diamino–2–(3– boronopropil) ciclopentanocarboxílico 2 2

62: ácido (1S,2S,4S)–1–amino–4–(bencilamino)–2–(3– boronopropil) ciclopentanocarboxílico 1 1

63: ácido (1S,2S,4S)–1–amino–2–(3–boronopropil)– 4– (dimetilamino) ciclopentanocarboxílico 1 1

64: ácido (1S,2S,4R)–1–amino–4–(aminometil)–2–(3– boronopropil) ciclopentanocarboxílico 1 1

65: ácido (1S,2S,4S)–1–amino–4–(aminometil)–2–(3– boronopropil) ciclopentanocarboxílico 2 3

66: ácido (1S,2S,4R)–1–amino–4–(2–aminoetil)–2–(3– boronopropil) ciclopentanocarboxílico 1 1

aOrden de Potencia (más alto – más bajo): 1 = 0.1 nM 250 nM; 2 = 251 nM 1000 nM; 3 = 1001 nM 2000 nM; 4 = 2001 nM 5000 nM; 5 = 5001 nM mayor y n.d. = no determinado.

Relajación de anillo arterial

El propósito de este ejemplo es demostrar que los compuestos inhibidores de arginasa de acuerdo con la invención muestran una eficacia de tratamiento de hipertensión pulmonar en un modelo ex vivo de la enfermedad. Por lo tanto, los inhibidores de arginasa de acuerdo con la presente invención son evaluados por su eficacia en la mejora de la relajación inducida por acetilcolina de tejido arterial pre–contraído obtenido de ratones.

87

imagen87

Claims

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5

imagen6