ES2318795T3 - Compuestos anilinohexafluoroisopropanol. - Google Patents

Compuestos anilinohexafluoroisopropanol. Download PDF

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Esther Chao
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Abstract

Un compuesto de fórmula (I) ** ver fórmula** o una de sus sales o solvatos R1 es alquilo C1-C4 Y R 2 es fenilo, o piridinilo, en el que dicho fenilo está sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes, cada uno seleccionado independientemente de hidroxilo, alcoxi, halógeno, haloalcoxi, y -O(CH2)2OH.

Description

Compuestos anilinohexafluoroisopropanol.
Campo de la invención
Esta invención se refiere a compuestos que son moduladores de los receptores X hepáticos (LXR), y también a los métodos para la preparación y uso de tales compuestos.
Antecedentes de la invención
Los receptores X hepáticos (LXR), LXR\alpha y LXR\beta, son factores de transcripción activados por unión a ligandos de la superfamilia de los receptores hormonales nucleares (Peet, DJ et al., Curr. Opin. Genet. Dev., 1998, 8(5)571-575). La identificación de los metabolitos del colesterol como los ligandos naturales para los LXR sugirió que el papel biológico de los receptores es regular la homeostasis del colesterol. Estudios en ratones que carecían de LXR\alpha, pero no de LXR\beta, demostraron que los ratones LXR\alpha (-/-) fueron incapaces de convertir de manera eficaz el colesterol en ácido bílico. Los ratones LXR\alpha (-/-) mostraron también acumulación de colesterol en el hígado, así como concentraciones elevadas de lipoproteínas de baja densidad en el suero sanguíneo, cuando se compararon con animales de tipo salvaje. Estos y otros datos apoyan firmemente la hipótesis que los LXR juegan un papel significativo en la regulación del metabolismo del colesterol en mamíferos. Véase, por ejemplo, Peet, DJ et al., Cell, 1998, 93(5):693-704.
La identificación de agonistas de LXR\alpha/\beta duales potentes y selectivos ha proporcionado herramientas químicas no esteroideas para descifrar más a fondo la biología de los LXR. Véanse, por ejemplo, Schultz, JR et al., Gene Dev., 2000, 14(22):2831-2838 y Collins, JL et al., J. Med. Chem., 2002, 45(10):1963-1966. Datos acumulativos de estudios extensos in vivo e in vitro sugieren que los agonistas de LXR son candidatos para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares. Véase, por ejemplo, Tontonoz, P. et al., Mol. Endocrinol., 2003, 17(6):985-993. Progresos más recientes sugieren que los ligandos para LXR pueden proporcionar también oportunidades terapéuticas para el tratamiento de inflamación, diabetes, y enfermedades neurodegenerativas. Véanse, por ejemplo, Joseph, SB et al., Nat. Med., 2003, 9(2):213-219; Stulnig, TM et al., Mol. Pharmacol., 2002, 62(6):1299-1305; y Wang, L et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2002, 99(21):13878-13883. Sin embargo, ya que los LXR regulan la expresión de muchos genes implicados en la homeostasis del colesterol, así como las respuestas inmunitarias innatas de macrófagos, el metabolismo de la glucosa, y el metabolismo de ácidos grasos, y los LXR se expresan en muchos tejidos diferentes, se cree que los moduladores de LXR pueden proporcionar las mejores oportunidades terapéuticas para la mayor parte de enfermedades o trastornos.
Sumario de la invención
Brevemente, en un aspecto, la presente invención proporciona compuestos de fórmula (I)
\vskip1.000000\baselineskip
1
o una de sus sales o solvatos, en la que
R^{1} es alquilo C_{1}-C_{4}; y
R^{2} es fenilo, o piridinilo, en el que dicho fenilo está sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes, cada uno seleccionado independientemente de hidroxilo, alcoxi, halógeno, haloalcoxi, y -O(CH_{2})_{2}OH.
Otro aspecto de la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención.
Otro aspecto de la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención para uso como una sustancia terapéutica activa.
Otro aspecto de la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención para uso en el tratamiento de estados o trastornos que respondan a la actividad de moduladores de LXR.
Otro aspecto de la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención para uso en el tratamiento de diabetes mellitus de tipo 2, enfermedades cardiovasculares, dislipidemia, arteroesclerosis, vasculopatía periférica, inflamación, cáncer, y enfermedades del sistema nervioso central.
Otro aspecto de la presente invención proporciona el uso de un compuesto de la presente invención en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de estados o trastornos que respondan a la actividad de moduladores de LXR.
Otro aspecto de la presente invención proporciona el uso de un compuesto de la presente invención en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de diabetes mellitus de tipo 2, enfermedades cardiovasculares, dislipidemia, arteroesclerosis, vasculopatía periférica, inflamación, cáncer, y enfermedades del sistema nervioso central.
Descripción detallada de la realización preferida
Las expresiones se usan dentro de sus significados aceptados. Las siguientes definiciones pretenden aclarar, pero no limitar, las expresiones definidas.
En una realización, la presente invención proporciona compuestos de fórmula I, o una de sus sales o solvatos, en la que R^{1} es metilo o butilo, y R^{2} es fenilo, o piridinilo, en el que dicho fenilo está sustituido opcionalmente con de uno a tres sustituyentes, cada uno seleccionado independientemente de hidroxilo, metoxi, Cl, F, -OCF_{3}, y -O(CH_{2})_{2}OH.
Otra realización de la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I o una de sus sales o solvatos, en la que R^{1} es butilo, y R^{2} es fenilo sustituido con tres sustituyentes, cada uno seleccionado independientemente de hidroxilo, metoxi, y Cl.
En otra realización, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:
\vskip1.000000\baselineskip
2
3
o una de sus sales o solvatos.
\vskip1.000000\baselineskip
En otra realización, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I-A):
4
o una de sus sales o solvatos, en la que
R^{a} es Cl o metoxi;
R^{b} es hidroxilo o metoxi; y
R^{c} es Cl o metoxi.
\vskip1.000000\baselineskip
Otra realización de la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I-A, en la que R^{a} es Cl, R^{b} es hidroxilo, y R^{c} es metoxi.
Otra realización de la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I-A, en la que R^{a} es Cl, R^{b} es hidroxilo, y R^{c} es Cl.
Otra realización de la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I-A, en la que R^{a} es metoxi, R^{b} es metoxi, y R^{c} es Cl.
Una realización adicional de la presente invención proporciona un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:
5 
\vskip1.000000\baselineskip
6
o una de sus sales o solvatos.
\vskip1.000000\baselineskip
Aunque las realizaciones o grupos preferidos para cada variable se han mencionado anteriormente de manera general para cada variable de manera separada, los compuestos de esta invención incluyen aquellos en los que varias de cada variable en la fórmula (I) se seleccionan de las realizaciones o grupos preferidos para cada variable. Por lo tanto, esta invención pretende incluir todas las combinaciones de realizaciones y grupos preferidos.
Los compuestos de la presente invención modulan la función de uno o más receptor(es) nuclear(es). Particularmente, los compuestos de la presente invención modulan los receptores X hepáticos ("LXR"). La presente invención incluye compuestos que son agonistas parciales, agonistas selectivos, antagonistas, o antagonistas parciales de LXR\alpha y LXR\beta. Los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de enfermedades y estados asociados con LXR. Por ejemplo, una enfermedad o estado que se previene, alivia, o cura por medio de la modulación de la función o actividad de LXR. Tal modulación puede aislarse dentro de ciertos tejidos o extenderse por todas partes del cuerpo del sujeto que se está tratando.
Como se usa en la presente invención, la expresión "tratamiento" hace referencia a aliviar el estado especificado, eliminar o reducir los síntomas del estado, retardar o eliminar la progresión del estado, y prevenir o demorar la aparición inicial del estado en un sujeto, o la reaparición del estado en un sujeto previamente aquejado.
Una realización de la presente invención es el uso de los compuestos de la presente invención para la preparación de un medicamento para el tratamiento de diversos trastornos que incluyen, pero no están limitados a, enfermedades cardiovasculares, ateroesclerosis, dislipidemia, vasculopatía periférica, diabetes de tipo 2, inflamación, enfermedad de Castleman, asma, artritis reumatoide, artritis idiopática juvenil, enfermedad intestinal inflamatoria, colitis ulcerosa, colestasis, soriasis, lupus erimatoso diseminado, tumores malignos tales como mieloma, y caquexia, y enfermedades del sistema nervioso central, tales como enfermedad de Alzheimer y trastorno bipolar.
Los compuestos de la presente invención pueden cristalizar en más de una forma, una característica que se conoce como polimorfismo, y tales formas polimórficas ("polimorfos") están dentro del alcance de la presente invención. El polimorfismo puede producirse generalmente como una respuesta a cambios de temperatura, presión, o ambos. El polimorfismo puede resultar también de variaciones en el procedimiento de cristalización. Los polimorfos se pueden distinguir por varias características físicas conocidas en la técnica, tales como modelos de difracción de rayos X, solubilidad y punto de fusión.
Ciertos de los compuestos descritos en la presente invención contienen uno o más centros quirales, o pueden existir de otra manera como estereoisómeros múltiples. El alcance de la presente invención incluye mezclas de estereoisómeros, así como enantiómeros purificados o mezclas enriquecidas enantioméricamente/diastereoméricamente. También están incluidos dentro del alcance de la invención los isómeros individuales de los compuestos representados por la fórmula (I), así como cualquiera de sus mezclas completa o parcialmente equilibrada. La presente invención también incluye los isómeros individuales de los compuestos representados por las fórmulas anteriores, como mezclas con sus isómeros en los que uno o más centros quirales están invertidos.
Típicamente, las sales de la presente invención son sales farmacéuticamente aceptables. Las sales incluidas dentro de la expresión "sales farmacéuticamente aceptables" se refieren a sales atóxicas de los compuestos de esta invención. Las sales de los compuestos de la presente invención pueden comprender sales de adición de ácidos que se derivan de un nitrógeno sobre un sustituyente, en un compuesto de la presente invención. Las sales representativas incluyen las siguientes sales: acetato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, edetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, clavulanato, citrato, dihidrocloruro, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glucolilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, hidrobromuro, hidrocloruro, hidroxinaftoato, yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metilbromuro, metilnitrato, metilsulfato, maleato de monopotasio, mucato, napsilato, nitrato, N-metilglucamina, oxalato, pamoato (embonato), palmitato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, potasio, salicilato, sodio, estearato, subacetato, succinato, tanato, tartrato, teoclato, tosilato, trietioduro, trimetilamonio y valerato. Otras sales, que no son farmacéuticamente aceptables, pueden ser útiles en la preparación de compuestos de esta invención, y éstas forman un aspecto adicional de la invención.
Como se usa en la presente invención, la expresión "solvato" se refiere a un complejo de estequiometría variable, formado por un soluto (en esta invención, un compuesto de la presente invención) y un disolvente. Tales disolventes, para los fines de la invención, no deben interferir con la actividad biológica del soluto. Los ejemplos no limitantes de disolventes adecuados incluyen, pero no están limitados a, agua, metanol, etanol, y ácido acético. Preferiblemente, el disolvente usado es un disolvente farmacéuticamente aceptable. Los ejemplos no limitantes de disolventes farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen agua, etanol, y ácido acético. Lo más preferiblemente, el disolvente usado es agua.
Como se usa en la presente invención, la expresión "derivado fisiológicamente funcional" se refiere a cualquier derivado farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la presente invención que, tras la administración a un mamífero, es capaz de proporcionar (directa o indirectamente) un compuesto de la presente invención o uno de sus metabolitos activos. Tales derivados, por ejemplo, ésteres y amidas, estarán claros para los expertos en la técnica, sin una excesiva experimentación. Se puede hacer referencia a la enseñanza de Burger's Medicinal Chemistry And Drug Discovery, 5ª edición, Vol. 1: Principles and Practice hasta el grado que enseña derivados fisiológicamente funcionales.
Como se usa en la presente invención, la expresión "cantidad eficaz" significa aquella cantidad de un fármaco o agente farmacéutico que provocará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o ser humano que pretende, por ejemplo, un investigador o médico. La respuesta biológica o médica puede considerarse una respuesta profiláctica o una respuesta a un tratamiento. La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" significa cualquier cantidad que, comparada con un sujeto correspondiente que no ha recibido tal cantidad, da como resultado un tratamiento mejorado, curación, prevención o mejora de una enfermedad, trastorno, o efecto secundario, o una disminución de la velocidad de avance de una enfermedad o trastorno. La expresión también incluye dentro de su alcance cantidades eficaces para mejorar la función fisiológica normal. Para usar en una terapia, las cantidades terapéuticamente aceptables de un compuesto de la presente invención pueden administrarse como el producto químico puro. Además, el ingrediente activo se puede presentar como una composición farmacéutica.
Por consiguiente, la invención proporciona además composiciones farmacéuticas que incluyen cantidades eficaces de compuestos de la presente invención y uno o más vehículos, diluyentes, o excipientes farmacéuticamente aceptables. Los compuestos de la presente invención son como se describen en este documento. El/los vehículo(s), diluyente(s) o excipiente(s) debe(n) ser aceptable(s) en el sentido de ser compatible(s) con los otros ingredientes de la formulación, y no ser nocivo(s) para el receptor de la composición farmacéutica.
De acuerdo con otro aspecto de la invención, también se proporciona un procedimiento para la preparación de una formulación farmacéutica, que incluye mezclar un compuesto de la presente invención con uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.
Una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención dependerá de varios factores. Por ejemplo, la especie, edad, y peso del receptor, el estado exacto que necesita tratamiento y su gravedad, la naturaleza de la formulación, y la vía de administración, son todos factores que han de considerarse. La cantidad terapéuticamente eficaz debe fijarse en última instancia según el criterio del médico o veterinario que aplica el tratamiento. Por lo general, la cantidad eficaz debe estar en el intervalo de 0,1 a 10 mg/kg de peso corporal por día. De este modo, para un mamífero adulto de 70 kg, la cantidad exacta por día sería por lo general desde 7 hasta 700 mg. Esta cantidad se puede administrar en una dosis única por día o en varias subdosis (tales como dos, tres, cuatro, cinco, o más) por día, de modo que la dosis diaria total sea la misma. La cantidad eficaz de una de sus sales o solvatos, puede determinarse como una proporción de la cantidad eficaz del compuesto de la presente invención per se. Dosificaciones similares deben ser apropiadas para el tratamiento de los otros estados a los que se hace referencia en la presente invención.
Las formulaciones farmacéuticas se pueden presentar en formas de dosificación unitaria que contienen una cantidad predeterminada de ingrediente activo por dosis unitaria. Tal unidad puede contener, como ejemplo no limitante, de 0,5 mg a 1 g de un compuesto de la presente invención, dependiendo del estado que se esté tratando, la vía de administración, y la edad, peso, y estado del paciente. Las formulaciones de dosis unitarias preferidas son las que contienen una dosis o subdosis diaria, como se ha citado anteriormente en la presente invención, o una fracción apropiada de ella, de un ingrediente activo. Tales formulaciones farmacéuticas pueden prepararse por cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica farmacéutica.
Las formulaciones farmacéuticas se pueden adaptar para la administración por cualquier vía apropiada, por ejemplo por vía oral (que incluye bucal o sublingual), rectal, nasal, tópica (que incluye bucal, sublingual o transdérmica), vaginal o parenteral (que incluye subcutánea, intramuscular, intravenosa o intradérmica). Tales formulaciones se pueden preparar por cualquier método conocido en la técnica farmacéutica, por ejemplo, combinando el ingrediente activo con el/los vehículo(s) o excipiente(s).
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración por vía oral se pueden presentar como unidades discretas tales como cápsulas o comprimidos; polvos o gránulos; disoluciones o suspensiones, cada una con líquidos acuosos o no acuosos; espumas o batidos comestibles; o emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones líquidas de agua en aceite. Por ejemplo, para administración por vía oral en forma de comprimido o cápsula, el componente farmacológico activo puede combinarse con un vehículo inerte oral, atóxico, farmacéuticamente aceptable, tal como etanol, glicerol, agua, y similares. En general, se preparan polvos desmenuzando el compuesto hasta un tamaño fino adecuado, y mezclando con un vehículo farmacéutico apropiado tal como un carbohidrato comestible, como, por ejemplo, almidón o manitol. También pueden estar presentes aromas, conservantes, agentes dispersantes, y agentes colorantes.
Pueden fabricarse cápsulas preparando una mezcla en polvo, líquida, o en suspensión, y encapsulando con gelatina o algún otro material apropiado para la cubierta. Pueden añadirse a la mezcla agentes deslizantes y lubricantes tales como sílice coloidal, talco, estearato magnésico, estearato cálcico, o polietilenglicol sólido antes del encapsulado. También puede añadirse un agente disgregante o solubilizante, tal como agar-agar, carbonato cálcico o carbonato sódico, para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando la cápsula se ingiere. Además, cuando se desea o es necesario, también pueden incorporarse a la mezcla aglutinantes, lubricantes, agentes disgregantes, y agentes colorantes adecuados. Los ejemplos de aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, hidratos de carbono naturales tales como glucosa o \beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como goma arábiga, tragacanto, o alginato sódico, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras, y similares. Los lubricantes útiles en estas formas de dosificación incluyen, por ejemplo, oleato sódico, estearato sódico, estearato magnésico, benzoato sódico, acetato sódico, cloruro sódico, y similares. Los disgregantes incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma de xantano, y similares.
Los comprimidos pueden formularse, por ejemplo, preparando una mezcla en polvo, granulando o precomprimiendo, añadiendo un lubricante y un disgregante, y comprimiendo para obtener comprimidos. Se puede preparar una mezcla en polvo mezclando el compuesto, triturado de forma adecuada, con un diluyente o una base como se ha descrito anteriormente. Los ingredientes opcionales incluyen aglutinantes tales como carboximetilcelulosa, alginatos, gelatinas, o polivinilpirrolidona, retardantes de disolución tales como parafina, aceleradores de la absorción tales como una sal cuaternaria, y/o agentes de absorción tales como bentonita, caolín, o fosfato dicálcico. La mezcla en polvo puede granularse por vía húmeda con un aglutinante tal como un jarabe, pasta de almidón, mucílago de acacia, o disoluciones de materiales celulósicos o poliméricos, y forzando su paso a través de una criba. Como alternativa a la granulación, la mezcla en polvo puede introducirse a través de la máquina de comprimir, siendo el resultado bloques formados de manera imperfecta, que se rompen formando gránulos. Los gránulos pueden lubricarse para impedir la adherencia a las matrices que forman los comprimidos, por medio de la adición de ácido esteárico, una sal de estearato, talco o aceite mineral. La mezcla lubricada se comprime luego en comprimidos. Los compuestos de la presente invención pueden combinarse también con un vehículo inerte que fluye fácilmente, y comprimirse en comprimidos directamente sin pasar a través de las etapas de granulación o precompresión. Puede proporcionarse un revestimiento protector transparente u opaco, que consiste en un revestimiento para selladura de goma laca (shellac), un revestimiento de azúcar o material polimérico, y un revestimiento para lustre de cera. Pueden añadirse colorantes a estos revestimientos para distinguir diferentes unidades de dosificación.
Pueden prepararse fluidos orales tales como disoluciones, jarabes y elixires en forma de dosificación unitaria, de modo que una cantidad dada contiene una cantidad predeterminada del compuesto. Se pueden preparar jarabes, por ejemplo, disolviendo el compuesto en una disolución acuosa adecuadamente aromatizada, mientras que los elixires se pueden preparar por medio del uso de un vehículo alcohólico atóxico. Las suspensiones pueden formularse, en general, dispersando el compuesto en un vehículo atóxico. También se pueden añadir solubilizantes y emulsionantes tales como alcoholes isoestearílicos etoxilados y polioxietilen-sorbitol-éteres, conservantes; aditivos aromatizantes tales como aceite de menta, o edulcorantes naturales, sacarina, u otros edulcorantes artificiales; y similares.
Cuando sea apropiado, se pueden microencapsular las formulaciones de dosificación unitaria para administración por vía oral. La formulación puede prepararse también para prolongar o mantener la liberación, como por ejemplo, revistiendo el material en forma de partículas en polímeros, cera, o similares, o incluyéndolo en los mismos.
Los compuestos de la presente invención pueden administrarse también en forma de sistemas de liberación de liposomas, tales como vesículas monolaminares pequeñas, vesículas monolaminares grandes, y vesículas multilaminares. Los liposomas pueden formarse a partir de diversos fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina, o fosfatidilcolinas.
Los compuestos de la presente invención pueden distribuirse también mediante el uso de anticuerpos monoclonales como vehículos individuales a los que se acoplan las moléculas del compuesto.
Los compuestos se pueden acoplar también con polímeros solubles como vehículos de fármacos seleccionados. Tales polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona (PVP), copolímeros de pirano, poli(hidroxipropilmetacrilamida-fenol), poli(hidroxietilaspartamida-fenol), o poli(óxido de etileno)-polilisina sustituido con restos de palmitoílo. Además, los compuestos se pueden acoplar a una clase de polímeros biodegradables útiles para conseguir la liberación controlada de un fármaco; por ejemplo, poli(ácido láctico), poli(\varepsilon-caprolactona), poli(ácido hidroxibutírico), poliortoésteres, poliacetales, polidihidropiranos, policianoacrilatos, y copolímeros en bloque reticulados o anfipáticos de hidrogeles.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración transdérmica se pueden presentar como parches discretos destinados a permanecer en contacto íntimo con la epidermis del receptor durante un período de tiempo prolongado. Por ejemplo, el ingrediente activo se puede administrar desde el parche mediante iontoforesis, como se describe en general en Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986), incorporado en la presente invención como referencia con respecto a tales sistemas de administración.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica se pueden formular como pomadas, cremas, suspensiones, lociones, polvos, disoluciones, pastas, geles, pulverizaciones, aerosoles, o aceites.
Para los tratamientos oculares o de otros tejidos externos, por ejemplo boca y piel, las formulaciones se pueden aplicar como una pomada o crema tópica. Cuando se formula como una pomada, el ingrediente activo puede emplearse con una base para pomadas parafínica o miscible con agua. De manera alternativa, se puede formular el ingrediente activo en una crema con una base para cremas de aceite en agua o con una base de agua en aceite.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para las administraciones tópicas en el ojo incluyen los colirios en los que el ingrediente activo se disuelve o se suspende en un vehículo adecuado, especialmente en un disolvente acuoso.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración tópica en la boca incluyen tabletas, pastillas y colutorios.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración nasal, en las que el vehículo es un sólido, incluyen un polvo grueso que tiene un tamaño de partícula, por ejemplo, en el intervalo de 20 a 500 micrómetros. El polvo se administra de la manera en la que se toma rapé, es decir, mediante inhalación rápida a través de la fosa nasal desde un recipiente, del polvo mantenido cerca de la nariz. Las formulaciones adecuadas en las que el vehículo es un líquido, para administración como pulverizaciones nasales o gotas nasales, incluyen disoluciones acuosas u oleosas del ingrediente activo.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración mediante inhalación incluyen polvos de partículas finas o vahos, que se pueden generar por medio de diversos tipos de aerosoles, nebulizadores o insufladores presurizados con dosis medidas.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración rectal se pueden presentar como supositorios o como enemas.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración vaginal se pueden presentar como formulaciones de óvulos vaginales, tampones, cremas, geles, pastas, espumas, o aerosoles.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración parenteral incluyen disoluciones para inyección estéril, acuosas y no acuosas, que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostáticos, y solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del receptor deseado; y suspensiones estériles, acuosas y no acuosas, que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Las formulaciones se pueden presentar en recipientes de dosis unitarias o de dosis múltiples, por ejemplo ampollas y viales sellados, y se pueden almacenar en un estado liofilizado que requiere solamente la adición del vehículo líquido estéril, por ejemplo agua para inyección, inmediatamente antes del uso. Las disoluciones y suspensiones para inyecciones improvisadas se pueden preparar a partir de polvos, gránulos y comprimidos estériles.
Además de los ingredientes mencionados en particular anteriormente, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica, teniendo en cuenta el tipo de formulación en cuestión. Por ejemplo, las formulaciones adecuadas para la administración por vía oral pueden incluir agentes aromatizantes o colorantes.
Los compuestos de la presente invención y sus sales o solvatos, pueden emplearse solos o en combinación con otros agentes terapéuticos para el tratamiento de los estados mencionados anteriormente. El/los compuesto(s) de la presente invención y el/los otro(s) agente(s) farmacéuticamente activo(s) se pueden administrar juntos o por separado y, cuando se administran por separado, la administración se puede producir de manera simultánea o secuencial, en cualquier orden. Las cantidades del o de los compuesto(s) de la presente invención y del o de los otros agente(s) farmacéuticamente activo(s), y los tiempos relativos de administración se seleccionarán para lograr el efecto terapéutico combinado deseado. La administración en combinación de un compuesto de la presente invención con otros agentes de tratamiento, puede ser en combinación mediante administración de manera simultánea en: (1) una composición farmacéutica unitaria que incluye ambos compuestos; o (2) composiciones farmacéuticas distintas que incluye cada una uno de los compuestos. De manera alternativa, la combinación se puede administrar por separado de una manera secuencial, en la que se administra en primer lugar un agente de tratamiento, y el otro en segundo lugar, o viceversa. Tal administración secuencial puede ser cercana o lejana en el tiempo.
Los compuestos de la presente invención se pueden usar en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de diversos trastornos y estados y, como tales, los compuestos de la presente invención pueden usarse en combinación con otros diversos agentes terapéuticos adecuados útiles para el tratamiento de esos trastornos o estados. Los ejemplos no limitantes incluyen las combinaciones de la presente invención con agentes antidiabéticos, agentes antiobesidad, agentes antiinflamatorios, agentes ansiolíticos, antidepresivos, agentes antihipertensores, antiagregantes plaquetarios, agentes antitrombóticos y agentes trombolíticos, glucósidos cardiacos, agentes hipocolesterolemiantes, inhibidores de fosfodiesterasa, inhibidores de cinasas, miméticos de hormonas tiroideas, terapias víricas, terapias de trastornos cognitivos, terapias de trastornos del sueño, agentes citotóxicos, radioterapia, agentes antiproliferativos, y agentes antineoplásicos. Adicionalmente, los compuestos de la presente invención se pueden combinar con complementos nutricionales tales como aminoácidos, triglicéridos, vitaminas, minerales, creatina, ácido lipoico, carnitina, o coenzima Q10.
En particular, se cree que los compuestos de la presente invención son útiles, solos o en combinación con otros agentes, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, ateroesclerosis, dislipidemia, vasculopatía periférica, diabetes de tipo 2, inflamación, enfermedad de Castleman, asma, artritis reumatoide, artritis idiopática juvenil, enfermedad intestinal inflamatoria, colitis ulcerosa, colestasis, soriasis, lupus erimatoso diseminado, tumores malignos tales como mieloma, y caquexia, y enfermedades del sistema nervioso central, tales como enfermedad de Alzheimer y trastorno bipolar.
Los compuestos de esta invención pueden prepararse por diversos métodos, que incluyen los métodos sintéticos habituales bien conocidos. Los métodos sintéticos generales ilustrativos se muestran a continuación, y luego se preparan compuestos específicos de la invención en los ejemplos de trabajo.
En todos los esquemas descritos a continuación, se emplean grupos protectores para los grupos sensibles o reactivos cuando es necesario, de acuerdo con los principios generales de al química sintética. Los grupos protectores se manipulan conforme a métodos habituales de sintesís orgánica (T. W. Green y P. G. M. Wuts (1991) Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, por lo que se refiere a grupos protectores). Estos grupos se retiran en una etapa conveniente de la síntesis del compuesto, usando métodos que son evidentes para los expertos en la técnica. La selección de procedimientos, así como las condiciones de reacción y el orden de su ejecución, serán coherentes con la preparación de los compuestos de la presente invención.
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Los expertos en la técnica reconocerán la existencia de un estereocentro en los compuestos de la presente invención. Por lo tanto, la presente invención incluye todos los estereoisómeros posibles, e incluye no solamente los compuestos racémicos, sino también los enantiómeros individuales. Cuando se desea un compuesto como un único enantiómero, éste puede obtenerse mediante una síntesis estereoespecífica, o mediante resolución del compuesto final o de cualquier producto intermedio oportuno. La resolución del producto final, un producto intermedio o un material de partida, puede realizarse mediante cualquier método adecuado conocido en la técnica. Véase, por ejemplo, Stereochemistry of Organic Compounds, de E. L. Eliel, S. H. Wilen, y L. N. Mander (Wiley-Interscience, 1994), por lo que se refiere a estereoquímica.
Los moduladores de LXR representativos conforme a la presente invención incluyen:
1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-{4-[metil(fenilmetil)amino]fenil}-2-propanol;
2-{4-[Butil(piridin-2-ilmetil)amino]fenil}-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol;
2-{4-[Bencil(butil)amino]fenil}-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol;
2-(4-{Butil[3-(2-hidroxietoxi)bencil]amino}fenil)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol;
2-{4-[Butil(piridin-4-ilmetil)amino]fenil}-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol;
3-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)metil]fenol;
2-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)metil]fenol;
4-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)metil]fenol;
2-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)metil]-6-fluorofenol;
2-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)metil]-4-(trifluorometoxi)fenol;
2-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)metil]-4,6-diclorofenol;
2-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)metil]-4-clorofenol;
4-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)metil]-2-clorofenol;
4-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)metil]-2-cloro-6-metoxifenol;
4-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)metil]-2,6-diclorofenol;
2-[4-(butil{[3-cloro-4,5-bis(metiloxi)fenil]metil}amino)fenil]-1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol;
2-{4-[Butil(3,5-diclorobencil)amino]fenil}-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol;
2-{4-[Butil(3,5-dicloro-4-metoxibencil)amino]fenil}-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol, o una de sus sales o solvatos.
Abreviaturas
Como se usan en la presente invención, los símbolos y convenios usados en estos procedimientos, esquemas y ejemplos son coherentes con los usados en la bibliografía científica contemporánea, por ejemplo, el Journal of the American Chemical Society o el Journal of Biological Chemistry. Específicamente, en los ejemplos, y a lo largo de toda la memoria descriptiva, se pueden usar las siguientes abreviaturas:
7
8 
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A menos que se indique de otra manera, todas las temperaturas se expresan en ºC (grados centígrados). Todas las reacciones se llevan a cabo en una atmósfera inerte a temperatura ambiente a menos que se indique de otra manera. Los reactivos empleados sin detalles sintéticos están disponibles comercialmente, o preparados conforme a procedimientos de la bibliografía.
Los espectros de ^{1}H-RMN se registraron en un espectrómetro de RMN Varian Gemini de 400 MHz. Los espectros de ^{1}H-RMN se presentan como desplazamiento químico \delta, número de protones, multiplicidad (s, singlete; d, doblete; t, triplete; m, multiplete; sa, singlete ancho) y constante de acoplamiento (J) en hercios. La electropulverización (EP) o ionización química (IQ) se registró en un espectrómetro de masas Hewlett Packard 5989A.
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Esquemas
Esquema I
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Esquema II
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Ejemplos
Producto Intermedio 1
2-[4-(butilamino)fenil]-1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol 
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A una disolución de 10 g (0,04 moles) de 2-(4-aminofenil)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol en 170 ml de DCM se añadieron 12 ml (0,07 moles) de anhídrido butírico y 14 ml (0,09 moles) de trietilamina, en presencia de una cantidad catalítica de DMAP. La mezcla se calentó a 40ºC durante 18 horas. Después de este tiempo, la mezcla de reacción se evaporó a sequedad. El residuo de disolvió en acetato de etilo, y se añadió una disolución de carbonato potásico al 10%. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. En este tiempo precipitó un sólido. El sólido se recogió por filtración, como el producto amida/éster butírico en bruto. Este producto amida/éster se trató con 95 ml de LAH 1 M en éter dietílico, a temperatura ambiente durante 4 h. En este momento se añadieron lentamente 20 ml de agua a 0ºC, seguido de adición de 50 ml de hidróxido sódico acuoso al 15%. La mezcla resultante se filtró a través de Celite. Las aguas de filtrado se extrajeron con acetato de etilo, se secaron sobre sulfato magnésico anhidro, y se evaporaron a sequedad, para proporcionar 9,5 g del Producto Intermedio 1. ^{1}H-RMN (CDCl_{3}) \delta 0,98 (t, 3H), 1,45 (m, 2H), 1,63 (m, 2H), 3,15 (t, 2H), 6,63 (dd, J = 1,9, 9,0 Hz, 2H), 7,45 (d, J = 8,7 Hz, 2H).
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Ejemplo 1
1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-{4-[metil(fenilmetil)amino]fenil}-2-propanol 
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Una disolución de 101 mg (0,39 mmoles) de 2-(4-aminofenil)-1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol en 800 \mul de MeOH/ortoformiato de trimetilo (1:1) a temperatura ambiente, se trató con 40 \mul (0,39 mmoles) de benzaldehído. Después de agitar durante la noche, la mezcla de reacción se trató con borohidruro sódico sólido en pequeñas porciones, hasta que la TLC indicó que el producto intermedio de imina se había consumido. La reacción se filtró a través de un relleno de gel de sílice, usando AcOEt como fase móvil, y las aguas de filtrado se concentraron a vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (4:1/hexano:AcOEt) proporcionó 85 mg (63%) de un producto intermedio de amina secundaria. Una disolución de 60 mg (0,17 mmoles) de este producto intermedio en 600 \mul de ácido acético glacial se trató con paraformaldehído en exceso, seguido de 53 mg (0,85 \mumoles) de NaCNBH_{3}. Después de agitar a temperatura ambiente durante 15 h, la mezcla de reacción se filtró a través de gel de sílice, usando AcOEt como fase móvil, y las aguas de filtrado se concentraron a vacío. La purificación mediante TLC preparativa (gel de sílice, 1000 \mum), usando una mezcla 4:1/hexano:AcOEt, proporcionó 30 mg (50%) del compuesto del título: ^{1}H-RMN (CDCl_{3}) \delta 3,07 (s, 3H), 4,56 (s, 2H), 6,76 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,18-7,29 (m, 3H), 7,33 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 7,49 (d, J = 8,8 Hz, 2H). Espectro de masas (EP) m/e = 364 (M+1).
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Ejemplo 2 2-{4-[Butil(piridin-2-ilmetil)amino]fenil}-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol 
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A una disolución de 0,06 g (0,32 mmoles) de 2-(bromometil)piridina en 0,2 ml de DMF, se añadieron 0,05 g (0,16 mmoles) de 2-[4-(butilamino)fenil]-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (Producto Intermedio 1) y 0,06 g (0,48 mmoles) de carbonato potásico. La mezcla de reacción se calentó con microondas a 140ºC durante 15 minutos. Después de este tiempo, la mezcla de reacción se evaporó a sequedad. El residuo se purificó en un sistema Agilent de HPLC preparativo con una columna Phenomenex Luna 5 \mu micro C18 (150x21 mm), y se eluyó con acetonitrilo de 30% a 100% en agua, en presencia de ácido trifluoroacético al 0,1%, durante 10 minutos, para proporcionar el compuesto del título: ^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 1,01 (t, 3H), 1,45 (m, 2H), 1,71 (m, 2H), 3,61 (t, 2H), 4,98 (s, 2H), 6,79 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 7,54 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,86 (t, 2H), 8,42 (t, 1H), 8,72 (d, J = 5,5 Hz, 1H). Espectro de masas por ionización química a presión atmosférica (APCI) m/e = 407 (M+1).
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Ejemplo 3 2-{4-[Bencil(butil)amino]fenil}-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol 
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14 
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A una disolución de 1,7 g (15,85 mmoles) de benzaldehído en 30 ml de DCE, se añadieron 1 ml de ácido acético glacial, 1 g (3,2 mmoles) de 2-[4-(butilamino)fenil]-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (Producto Intermedio 1), y 3,4 g (16 mmoles) de triacetoxiborohidruro sódico. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Después de este tiempo, la mezcla de reacción se evaporó a sequedad. El residuo se purificó en un sistema Agilent de HPLC preparativo con una columna Phenomenex Luna 5 \mu C18 (150x21 mm), y se eluyó con acetonitrilo de 30% a 100% en agua, en presencia de ácido trifluoroacético al 0,1%, durante 10 minutos, para proporcionar el compuesto del título: ^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,97 (t, 3H), 1,41 (m, 2H), 1,65 (m, 2H), 3,49 (t, 2H), 4,62 (s, 2H), 6,76 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,21-7,33 (m, 5H), 7,48 (d, J = 8,8 Hz, 2H). Espectro de masas (APCI) m/e = 406 (M+1).
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Los siguientes compuestos se prepararon de una manera similar:
Ejemplo 4 2-(4-{Butil[3-(2-hidroxietoxi)bencil]amino}fenil)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol 
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^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,98 (t, 3H), 1,42 (m, 2H), 1,66 (m, 2H), 3,48 (t, 2H), 3,84 (t, 2H), 3,98 (t, 3H), 4,58 (s, 2H), 6,72 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 6,81 (s, 1H), 6,82 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 7,23 (t, 1H), 7,45 (d, J = 8,7 Hz, 2H). Espectro de masas (APCI) m/e = 466 (M+1).
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Ejemplo 5 2-{4-(Butil(piridin-4-ilmetil)amino]fenil}-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol 
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16 
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^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 1,01 (t, 3H), 1,46 (m, 2H), 1,70 (m, 2H), 3,59 (t, 2H), 4,94 (s, 2H), 6,72 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,90 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 8,74 (sa, 2H), Espectro de masas (APCI) m/e = 407 (M+1).
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Ejemplo 6 3-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)-metil]fenol 
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17 
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^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,98 (t, 3H), 1,41 (m, 2H), 1,67 (m, 2H), 3,45 (t, 2H), 4,54 (s, 2H), 6,65-6,73 (m, 5H), 7,14 (m, 1H), 7,45 (d, J = 8,9 Hz, 2H). Espectro de masas (APCI) m/e = 422 (M+1).
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Ejemplo 7 2-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)-metil]fenol 
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18 
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^{1}H-RMN (CDCl_{3}) \delta 0,91 (t, 3H), 1,32 (m, 2H), 1,56 (m, 2H), 3,31 (t, 2H), 4,47 (s, 2H), 6,87 (m, 2H), 7,03 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,18 (m, 2H), 7,59 (d, J = 8,7 Hz, 2H). Espectro de masas (APCI) m/e = 422 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 8 4-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)-metil]fenol 
\vskip1.000000\baselineskip
19 
\vskip1.000000\baselineskip
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,89 (t, 3H), 1,25 (m, 2H), 1,51 (m, 2H), 3,08 (t, 2H), 3,88 (s, 2H), 6,73 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,84 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,43 (s, 1H), 7,52 (d, J = 8,6 Hz, 1H). Espectro de masas (EP) m/e = 422 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 9 2-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)-metil]-6-fluorofenol 
\vskip1.000000\baselineskip
20 
\vskip1.000000\baselineskip
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,98 (t, 3H), 1,43 (m, 2H), 1,67 (m, 2H), 3,50 (t, 2H), 4,61 (s, 2H), 6,78 (m, 4H), 6,96 (m, 1H), 7,48 (d, J = 8,8 Hz, 2H). Espectro de masas (APCI) m/e = 440 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 10 2-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)-metil]-4-(trifluorometoxi)fenol
21
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,98 (t, 3H), 1,42 (m, 2H), 1,67 (m, 2H), 3,50 (t, 2H), 4,57 (s, 2H), 6,74-6,88 (m, 4H), 6,98 (dd, J = 2,2, 8,6 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 8,7 Hz, 2H). Espectro de masas (EP) m/ e = 506 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 11 2-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)-metil]-4,6-diclorofenol
22
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,90 (t, 3H), 1,41 (m, 2H), 1,68 (m, 2H), 3,48 (t, 2H), 4,57 (s, 2H), 6,70 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 6,86 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 8,7 Hz, 2H). Espectro de masas (APCI) m/e = 490 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 12 2-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)-metil]-4-clorofenol
23
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,99 (t, 3H), 1,43 (m, 2H), 1,66 (m, 2H), 3,52 (t, 2H), 4,56 (s, 2H), 6,77-6,90 (m, 4H), 7,06 (dd, J = 2,6, 8,6 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,9 Hz, 2H). Espectro de masas (EP) m/e = 456 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 13 4-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)-metil]-2-clorofenol 
\vskip1.000000\baselineskip
24 
\vskip1.000000\baselineskip
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,96 (t, 3H), 1,39 (m, 2H), 1,61 (m, 2H), 3,50 (t, 2H), 4,53 (s, 2H), 6,83-6,99 (m, 4H), 7,13(d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,7 Hz, 2H). Espectro de masas (EP) m/e = 456 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 14 4-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)-metil]-2-cloro-6-metoxifenol 
\vskip1.000000\baselineskip
25 
\vskip1.000000\baselineskip
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,96 (t, 3H), 1,41 (m, 2H), 1,61 (m, 2H), 3,51 (t, 2H), 3,77 (s, 3H), 4,53 (s, 2H), 6,69 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 8,7 Hz, 2H). Espectro de masas (EP) m/e = 486 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 15 4-[(Butil{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}amino)-metil]-2,6-diclorofenol 
\vskip1.000000\baselineskip
26 
\vskip1.000000\baselineskip
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,98 (t, 3H), 1,41 (m, 2H), 1,64 (m, 2H), 3,46 (t, 2H), 4,50 (s, 2H), 6,75 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 7,12 (s, 2H), 7,50 (d, J = 8,9 Hz, 2H). Espectro de masas (APCI) m/e = 490 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 16 2-[4-(Butil{[3-cloro-4,5-bis(metiloxi)fenil]metil}amino)fenil]-1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol 
\vskip1.000000\baselineskip
27 
\vskip1.000000\baselineskip
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,98 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,30-1,50 (m, 2H), 1,55-1,75 (m, 2H), 3,50 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 4,56 (s, 2H), 6,82 (dd, J = 6,3, 1,7 Hz, 4H), 7,54 (d, J = 8,8 Hz, 2H); Espectro de masas (EP) m/e = 500 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 17 2-{4-[Butil(3,5-diclorobencil)amino]fenil}-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol 
\vskip1.000000\baselineskip
28 
\vskip1.000000\baselineskip
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,98 (t, 3H), 1,42 (m, 2H), 1,66 (m, 2H), 2,51 (s, 3H), 3,48 (t, 2H), 4,55 (s, 2H), 6,71 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 7,17 (d, J = 1,5 Hz, 2H), 7,30 (s, 1H), 7,49 (d, J = 8,9 Hz, 2H). Espectro de masas (APCI) m/e = 474 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 18 2-{4-[Butil(3,5-dicloro-4-metoxibencil)amino]fenil}-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol 
\vskip1.000000\baselineskip
29 
\vskip1.000000\baselineskip
^{1}H-RMN (CD_{3}OD) \delta 0,98 (t, 3H), 1,41 (m, 2H), 1,64 (m, 2H), 3,48 (t, 2H), 3,85 (s, 3H), 4,55 (s, 2H), 6,74 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 7,21 (s, 2H), 7,52 (d, J = 8,8 Hz, 2H). Espectro de masas (EP) m/e = 504 (M+1).
\newpage
Sección biológica
Los compuestos de la presente invención son moduladores de LXR\beta. Adicionalmente, los compuestos de la presente invención pueden resultar además útiles como moduladores de LXR\alpha. La actividad en la que los LXR actúan como mediadores se determinó usando los siguientes análisis.
Análisis de unión a LXR\alpha y \beta LXR beta
El dominio de unión al ligando de LXR\beta humano (LXR\beta LBD) se expresó en una cepa de E. coli BL21(DE3), como una proteína de fusión con una cola de polihistidina amino-terminal. La expresión estuvo controlada por un promotor del T7 inducible por IPTG. El ADN que codifica esta proteína recombinada y una cola de polihistidina modificada fue subclonado en el vector de expresión pRSETa (Invitrogen). La secuencia de la cola de polihistidina modificada (MKKGHHHHHHG) se fusionó manteniendo el marco de lectura con los restos 185-461 de LXR\beta. La secuencia de codificación de LXR\beta LBD humano procedió del número de acceso de GenBank U 07132 (BioResources # 5464). La secuencia codificada completa resultante es como sigue: MKKGHHHHHHGPVGPQGSSSSASGP
GASPGGSEAGSQGSGEGEGVQLTAAQELMIQQLVAAQLQCNKRSFSDQPKVTPWPLGADPQSRDARQQRFA
HFTELAIISVQEIVDFAKQVPGFLQLGREDQIALLKASTIEIMLLETARRYNHETECITFLKDFTYSKDDFHRAG
LQVEFINPIFEFSRAMRRLGLDDAEYALLIAINIFSADRPNVQEPGRVEALQQPYVEALLSYTRIKRPQDQLRF
PRMLMKLVSLRTLSSVHSEQVFALRLQDKKLPPLLSEIWDVHE.
Se cultivaron lotes de fermentación de diez litros en medios Rich PO_{4} con 0,1 mg/ml de ampicilina, a 25ºC durante 12 horas, se enfrió a 9ºC, y se mantuvo a esa temperatura durante 36 horas hasta una densidad de DO_{600} = 14. A esta densidad celular, se añadió IPTG 0,25 mM, y la inducción continuó durante 24 horas a 9ºC, hasta una densidad final de DO_{600} = 16. Las células se recogieron por centrifugación (20 minutos, 3500 g, 4ºC), y las suspensiones celulares concentradas se almacenaron en PBS a -80ºC.
Purificación del dominio de unión al ligando de LXR\beta: 30-40 g de pasta celular (equivalentes a 2-3 litros del lote de fermentación) se resuspendieron en 300-400 ml de TBS, pH 8,5 (trometamol (Tris) 25 mM, NaCl 150 mM). Las células se lisaron pasándolas 3 veces a través de un homogeneizador (Rannie), y los residuos celulares se retiraron por centrifugación (30 minutos, 20.000 g, 4ºC). El sobrenadante clarificado se filtró a través de prefiltros gruesos, y se añadió TBS, de pH 8,5, que contenía imidazol 500 mM, para obtener una concentración final de imidazol de 50 mM. Este lisado se cargó en una columna (6 x 8 cm) rellena con resina para quelación de Sepharose [cargada con Ni++] (Pharmacia), y se preequilibró con TBS de pH 8,5/imidazol 50 mM. Después de lavar para obtener un valor de referencia de absorbancia con tampón de equilibrio, la columna se desarrolló con un gradiente lineal de imidazol de 50 a 275 mM en TBS, de pH 8,5. Las fracciones de la columna se agruparon y se dializaron con TBS, de pH 8,5, que contenía 1,2-propanodiol al 5%, DTT 5 mM y EDTA 0,5 mM. La muestra de proteína se concentró usando Centriprep 10K (Amicon), y se sometió a exclusión por tamaño, usando una columna (3 x 90 cm) rellena con resina de Sepharose S-75 (Pharmacia) preequilibrada con TBS, de pH 8,5, que contenía 1,2-propanodiol al 5%, DTT 5 mM y EDTA 0,5 mM.
Biotinilación de LXR\beta: LXR\beta LBD purificado se sometió a eliminación de sales/intercambio de tampón, usando columnas de filtración en gel PD-10 en PBS [fosfato sódico 100 mM, pH 7,2, NaCl 150 mM]. El LXR\beta LBD se diluyó hasta una concentración aproximadamente de 10 mM en PBS, y se añadió un exceso molar de cinco veces de NHS-LC-Biotin (Pierce) en un volumen mínimo de PBS. Esta disolución se incubó con un mezclamiento suave durante 30 minutos a temperatura ambiente. La reacción de modificación de biotinilación se detuvo con la adición de un exceso molar de 2000 veces de Tris-HCl, de pH 8. El LXR\beta LBD modificado se dializó con 4 cambios de tampón, cada uno de al menos 50 volúmenes, PBS que contenía DTT 5 mM, EDTA 2 mM y sacarosa al 2%. El LXR\beta LBD biotinilado se sometió a un análisis espectrométrico de masas, para revelar el grado de modificación por el reactivo de biotinilación. En general, aproximadamente 95% de la proteína tenía al menos un único sitio de biotinilación, y el grado total de biotinilación siguió una distribución normal de múltiples sitios, que variaba desde uno hasta nueve.
Tampón de ensayo para el análisis de centelleo por proximidad (SPA) de LXR\beta: MOPS 50 mM, de pH 7,5, NaF 50 mM, CHAPS 0,05 mM. Seroalbúmina bovina (BSA) sin ácidos grasos, 0,1 mg/ml de fracción 5. Añádase DTT sólido al tampón de ensayo inmediatamente antes del uso del tampón de ensayo (concentración final = 10 mM).
Preparación de una disolución de microesferas para SPA/LXR\beta/^{3}H-radioligando: A un tampón que contiene una concentración 10 mM de DTT sólido recién añadido, añádase una cantidad apropiada de disolución de 5 mg/ml de microesferas para SPA, hasta una concentración final de 0,25 mg/ml. Añádase una cantidad apropiada de LXR\beta LBD, para obtener una concentración final de 25 nM, e inviértase suavemente para mezclar. Incúbese 30 minutos a temperatura ambiente, háganse girar las microesferas a 2500 rpm durante 10 minutos, y retírese con cuidado el sobrenadante sin alterar el sedimento de microesferas. Dilúyase hasta el volumen original con tampón de ensayo que contiene una concentración 10 mM de DTT recién añadido. Añádase ligando radiomarcado (N-^{3}H_{3}-metil-N-{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}bencenosulfonamida) a la disolución de microesferas hasta una concentración final de 10 nM. Usando un dispensador (Multidrop), añádanse 100 \mul a cada pocillo de una placa de 96 pocillos que contiene los compuestos de ensayo, incúbese durante 30 minutos a temperatura ambiente, y léase en un contador Microbeta 1450 Trilux.
Los datos se normalizan como sigue. (1-(desconocido - no específico medio)/(100% medio - no específico
medio)) * 100 = % de inhibición
LXR alfa
El dominio de unión al ligando de LXR\alpha humano (LXR\alpha LBD) se expresó en una cepa de E. coli BL21(DE3), como una proteína de fusión con una cola de polihistidina amino-terminal. La expresión estuvo controlada por un promotor del T7 inducible por IPTG. El ADN que codifica esta proteína recombinada fue subclonado en el vector de expresión pRSETa (Invitrogen). La secuencia que codifica los aminoácidos 183-447 de LXR\alpha humano se fusionó manteniendo el marco de lectura con la cola de polihistidina derivada del vector (MRGSHHHHHHGMAS), o con una cola de histidina modificada (MKKGHHHHHHG). La secuencia de codificación de LXR\alpha LBD humano procedió del número de acceso de GenBank U22662 (BioResources # 18711 y # 13635). La secuencia codificada completa resultante es como sigue: MKKGHHHHHHGEEEQAHATSLPPRASSPPQILPQLSPEQLGMIEKLVAAQQQCNRRSFS
DRLRVTPWPMAPDPHSREARQQRFAHFTELAIVSVQEIVDFAKQLPGFLQLSREDQIALLKTSAIEVMLLETS
RRYNPGSESITFLKDFSYNREDFAKAGLQVEFINPIFEFSRAMNELQLNDAEFALLIAISIFSADRPNVQDQLQV
ERLQHTYVEALHAYVSIHHPHDRLMFPRMLMKLVSLRTLSSVHSEQVFALRLQDKKLPPLLSEIWDVHE.
Se cultivaron lotes de fermentación de diez litros en medios Rich PO^{4} con 0,1 mg/ml de ampicilina, a 25ºC durante 12 horas, se enfrió a 9ºC, y se mantuvo a esa temperatura durante 36 horas hasta una densidad de DO_{600} = 14. A esta densidad celular, se añadió IPTG 0,25 mM, y la inducción continuó durante 24 horas a 9ºC, hasta una densidad óptica final de DO_{600} = 16. Las células se recogieron por centrifugación (20 minutos, 3500 g, 4ºC), y las suspensiones celulares concentradas se almacenaron en PBS a -80ºC.
Purificación del dominio de unión al ligando de LXR\alpha: Típicamente, 50-100 g de pasta celular se resuspenden en 250-750 ml de TBS, de pH 8,5 (trometamol (Tris) 25 mM, NaCl 150 mM). Las células se lisan pasándolas 3 veces a través de un homogeneizador APV Rannie MINI-Lab, y los residuos celulares se retiran por centrifugación (30 minutos, 20.000 g, 4ºC). El sobrenadante clarificado se filtra a través de prefiltros gruesos, y se añade TBS, de pH 8,5, que contiene imidazol 500 mM, para obtener una concentración final de imidazol de 50 mM. Este lisado se carga en una columna (XK-26, 10 cm) rellena con resina para quelación de Sepharose [cargada con Ni++] (Pharmacia), y se preequilibra con TBS de pH 8,5/imidazol 50 mM. Después de lavar para obtener un valor de referencia de absorbancia con tampón de equilibrio, la columna se lava con aproximadamente un volumen de la columna de TBS de pH 8,5, que contiene imidazol 90 mM. El LXR\alpha LBD (183-447) se eluye con un gradiente de imidazol de 50 a 500 mM. Las fracciones de los picos de la columna se agrupan inmediatamente, y se diluyen 4-5 veces con trometamol (Tris) 25 mM de pH 8,5, que contiene 1,2-propanodiol al 5%, EDTA 0,5 mM y DTT 5 mM. La muestra de proteína diluida se carga luego en una columna (XK-16, 10 cm) rellena con resina Poros HQ (intercambio aniónico). Después de lavar para obtener un valor de referencia de absorbancia con el tampón de dilución, la proteína se eluye con un gradiente de NaCl de 30-500 mM. Las fracciones de los picos se agrupan y se concentran usando Centriprep 10K (Amicon), y se someten a exclusión por tamaño, usando una columna (XK-26, 90 cm) rellena con resina de Superdex S-75 (Pharmacia) preequilibrada con TBS, de pH 8,5, que contiene 1,2-propanodiol al 5%, EDTA 0,5 mM y DTT 5 mM.
Biotinilación de LXR\alpha: LXR\alpha LBD purificado se sometió a eliminación de sales/intercambio de tampón, usando columnas de filtración en gel PD-10 en PBS [fosfato sódico 100 mM, pH 8,5, NaCl 150 mM]. El LXR\alpha LBD se diluyó hasta una concentración aproximadamente de 10 mM en PBS, y se añadió un exceso molar de cinco veces de NHS-LC-Biotin (Pierce) en un volumen mínimo de PBS. Esta disolución se incubó con un mezclamiento suave durante de 30 a 60 minutos a temperatura ambiente. La reacción de modificación de biotinilación se detuvo con la adición de un exceso molar de 2000 veces de Tris-HCl, de pH 8. El LXR\alpha LBD modificado se dializó con 4 cambios de tampón, cada uno de al menos 50 volúmenes, de trometamol (Tris) 25 mM de pH 8,5 que contenía NaCl 150 mM, DTT 5 mM, EDTA 2 mM y sacarosa al 2%. El LXR\alpha LBD biotinilado se sometió a un análisis espectrométrico de masas, para revelar el grado de modificación por el reactivo de biotinilación. En general, aproximadamente 95% de la proteína tenía al menos un único sitio de biotinilación, y el grado total de biotinilación siguió una distribución normal de múltiples sitios, que variaba desde uno hasta seis.
Tampón de ensayo para el análisis de centelleo por proximidad (SPA) de LXR\alpha: MOPS 50 mM, de pH 7,5, NaF 50 mM, CHAPS 0,05 mM. Seroalbúmina bovina (BSA) sin ácidos grasos, 0,1 mg/ml de fracción 5. Añádase DTT sólido al tampón de ensayo inmediatamente antes del uso del tampón de ensayo (concentración final = 10 mM).
Preparación de una disolución de trabajo de microesferas para SPA/LXR\alpha/^{3}H-radioligando: A un tampón que contiene una concentración 10 mM de DTT sólido recién añadido, añádase una cantidad apropiada de disolución de 5 mg/ml de microesferas para SPA, hasta una concentración final de 0,25 mg/ml. Añádase una cantidad apropiada de LXR\alpha LBD, para obtener una concentración final de 25 nM, e inviértase suavemente para mezclar. Incúbese 30 minutos a temperatura ambiente. Háganse girar las microesferas a 2500 rpm durante 10 minutos. Retírese con cuidado el sobrenadante sin alterar el sedimento de microesferas. Dilúyase hasta el volumen original con tampón de ensayo que contiene una concentración 10 mM de DTT recién añadido. Añádase radioligando (N-^{3}H_{3}-metil-N-{4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]fenil}bencenosulfonamida) a la disolución de microesferas hasta una concentración final de 10 nM. Usando un dispensador (Multidrop), añádanse 100 \mul a cada pocillo de una placa de 96 pocillos que contiene los compuestos de ensayo, incúbese durante 30 minutos a temperatura ambiente, y léase en un contador Microbeta 1450 Trilux.
Los datos se normalizan como sigue. (1-(desconocido - no específico medio)/(100% medio - no específico
medio)) * 100 = % de inhibición
30
ELISA para análisis de IL-6: La estirpe celular monocito/macrófago humana, THP-1 (ATCC, Manassas, VA.), se diferenció con 40 ng/ml de 1\alpha,25-dihidroxi-vitamina D_{3}-(EMD Biosciences, Inc., San Diego, CA) en medios de cultivo celular habituales de 10x10^{6} células/50 ml, durante 72 horas. Se sembraron células THP-1 diferenciadas en placas de 96 pocillos (1 x 10^{5}/ml, 200 \mul/pocillo) en medios completos. Se añadieron compuestos en disolución de DMSO (DMSO al 0,2% final) a pocillos por duplicado, con concentraciones finales que variaban de 2,3 nM a 5,0 \muM (37ºC/estufa de incubación humidificada con CO_{2} al 5%). Después de un pretratamiento de 6 horas con compuestos o vehículo, se añadieron lipopolisacáridos (Sigma, St. Louis, MO) a cada pocillo, hasta una concentración final de 100 ng/ml. Luego, las placas se incubaron durante 18 horas más (37ºC/estufa de incubación humidificada con CO_{2} al 5%). Las placas se centrifugaron a 1200 rpm en una centrifugadora de mesa, durante 5 minutos, para sedimentar todas las células. Los medios se retiraron, y se transfirieron a otra placa de 96 pocillos, y se almacenaron a 4ºC hasta su análisis. Se analizó la IL-6 humana en los medios, usando un kit IL-6 ELISA (R&D Systems, Minneapolis, MN). El tratamiento de células THP-1 con compuestos de la presente invención reduce la cantidad de IL-6 hallada en los medios, como se determina en el análisis descrito anteriormente, cuando se compara con células tratadas con vehículo. Son preferidos compuestos con un valor de CI_{50} inferior a 100 nM.
Análisis de acumulación de triglicéridos: Se sembraron células HepG2 en placas de 96 pocillos (1 x 10^{5}/ml, 200 \mul/pocillo) en medios completos. Veinticuatro horas más tarde, se añadieron compuestos en una disolución de DMSO a pocillos por triplicado, con concentraciones finales que variaban desde 2,3 nM hasta 5 \muM. Después de 4 d a 37ºC en una estufa de incubación humidificada con CO_{2} al 5%, las células se lisaron en 50 \mul de NP-40 al 0,1% por pocillo. Los triglicéridos celulares se determinaron usando un equipo de reactivo de triglicéridos (GPO) (ThermoDMA, Arlington, TX), según el protocolo del fabricante. Son preferidos los compuestos que muestran poca o ninguna acumulación de triglicéridos, cuando se compara con las células tratadas con vehículo.
<110> SMITHKLINE BEECHAM CORPORATION
\hskip1cm
Collins, Jon Loren 
\hskip1cm
Stewart, Eugene Lee 
\hskip1cm
Zuercher, William 
\hskip1cm
Chao, Esther 
\hskip1cm
Wiethe, Robert 
\hskip1cm
Caravella, Justin 
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\vskip0.400000\baselineskip
<120> Compuestos químicos
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\vskip0.400000\baselineskip
<130> PR61599
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\vskip0.400000\baselineskip
<140> PCT/US2006/032926
\vskip0.400000\baselineskip
<141> 23-08-2006
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<150> US 60/711.267
\vskip0.400000\baselineskip
<151> 25-08-2005
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\vskip0.400000\baselineskip
<160> 4
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\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatentIn versión 3.5
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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<220>
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<223> Polihistidina Tag
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<400> 1
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31 
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<210> 2
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<211> 288
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<212> PRT
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<213> Homo sapiens 
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<400> 2
32
33 
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<210> 3
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<211> 14
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<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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<220>
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<223> Polihistidina Tag
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<400> 3
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34 
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<210> 4
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<211> 276
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<212> PRT
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<213> Homo sapiens 
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<400> 4
35 
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LISTADO DE SECUENCIAS 
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<110> SmithKline Beecham Corporation
\hskip1cm
COLLINS, Jon Loren 
\hskip1cm
STEWART, Eugene Lee 
\hskip1cm
ZUERCHER, William 
\hskip1cm
CHAO, Esther 
\hskip1cm
WIETHE, Robert 
\hskip1cm
CARAVELLA, Justin 
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<120> Compuestos químicos
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<130> PR61599
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<140> PCT/US2006/032926
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<141>
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<150> 60/711.267
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<151> 25-08-2005
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<160> 2
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<170> FastSEQ para Windows versión 4.0
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<210> 1
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<211> 288
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<212> PRT
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<213> desconocido
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37 
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<210> 2
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<212> PRT
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<213> desconocido
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<400> 2
38

Claims (15)

1. Un compuesto de fórmula (I):
39
o una de sus sales o solvatos, en la que
R^{1} es alquilo C_{1}-C_{4}; y
R^{2} es fenilo, o piridinilo, en el que dicho fenilo está sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes, cada uno seleccionado independientemente de hidroxilo, alcoxi, halógeno, haloalcoxi, y -O(CH_{2})_{2}OH.
2. Un compuesto conforme a la reivindicación 1, en el que R^{1} es metilo o butilo, y R^{2} es fenilo o piridinilo, en el que dicho fenilo está sustituido opcionalmente con de uno a tres sustituyentes, cada uno seleccionado independientemente de hidroxilo, metoxi, Cl, F, -OCF_{3}, y -O(CH_{2})_{2}OH.
3. Un compuesto conforme a la reivindicación 1, en el que R^{1} es butilo, y R^{2} es fenilo sustituido con tres sustituyentes, cada uno seleccionado independientemente de hidroxilo, metoxi, y Cl.
4. Un compuesto conforme a la reivindicación 1, seleccionado del grupo que consiste en:
40
41
410
42
o una de sus sales o solvatos.
5. Un compuesto conforme a la reivindicación 1, de fórmula I-A:
43
o una de sus sales o solvatos, en la que
R^{a} es Cl o metoxi;
R^{b} es hidroxilo o metoxi; y
R^{c} es Cl o metoxi.
6. Un compuesto conforme a la reivindicación 5, en el que R^{a} es Cl, R^{b} es hidroxilo, y R^{c} es metoxi.
7. Un compuesto conforme a la reivindicación 5, en el que R^{a} es Cl, R^{b} es hidroxilo, y R^{c} es Cl.
8. Un compuesto conforme a la reivindicación 5, en el que R^{a} es metoxi, R^{b} es metoxi, y R^{c} es Cl.
9. Un compuesto conforme a la reivindicación 5, seleccionado del grupo que consiste en:
44
o una de sus sales o solvatos.
10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto conforme a las reivindicaciones 1 a 9.
11. Un compuesto conforme a las reivindicaciones 1 a 9, para uso como una sustancia terapéutica activa.
12. Un compuesto conforme a las reivindicaciones 1 a 9, para uso en el tratamiento de estados o trastornos que respondan a la actividad de moduladores de LXR.
13. Un compuesto conforme a las reivindicaciones 1 a 9, para uso en el tratamiento de diabetes mellitus, enfermedades cardiovasculares, dislipidemia, arteroesclerosis, vasculopatía periférica, inflamación, cáncer, y enfermedades del sistema nervioso central.
14. El uso de un compuesto conforme a las reivindicaciones 1 a 9 en la fabricación de un medicamento, para uso en el tratamiento de estados o trastornos que respondan a la actividad de moduladores de LXR.
15. El uso de un compuesto conforme a una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 en la fabricación de un medicamento, para uso en el tratamiento de diabetes mellitus, enfermedades cardiovasculares, dislipidemia, arteroesclerosis, vasculopatía periférica, inflamación, cáncer, y enfermedades del sistema nervioso central.
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