ES2273676T3 - SOLUBLE CONCENTRATES OF NATURAL AND NUTRACEIC COLORS ANTIOMICROBIALS BASED ON PLANTS. - Google Patents
SOLUBLE CONCENTRATES OF NATURAL AND NUTRACEIC COLORS ANTIOMICROBIALS BASED ON PLANTS. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2273676T3 ES2273676T3 ES00916123T ES00916123T ES2273676T3 ES 2273676 T3 ES2273676 T3 ES 2273676T3 ES 00916123 T ES00916123 T ES 00916123T ES 00916123 T ES00916123 T ES 00916123T ES 2273676 T3 ES2273676 T3 ES 2273676T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- soluble
- factors
- water
- germicidal
- juice
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
- A23L3/34—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
- A23L3/3454—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
- A23L3/3463—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
- A23L3/3472—Compounds of undetermined constitution obtained from animals or plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
- A23L5/40—Colouring or decolouring of foods
- A23L5/42—Addition of dyes or pigments, e.g. in combination with optical brighteners
- A23L5/43—Addition of dyes or pigments, e.g. in combination with optical brighteners using naturally occurring organic dyes or pigments, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/45—Ericaceae or Vacciniaceae (Heath or Blueberry family), e.g. blueberry, cranberry or bilberry
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/87—Vitaceae or Ampelidaceae (Vine or Grape family), e.g. wine grapes, muscadine or peppervine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
Concentrados solubles de colores naturales y nutracéuticos antimicrobianos a base de plantas.Soluble concentrates of natural colors and Herbal antimicrobial nutraceuticals.
La presente invención está relacionada con el campo de los productos y alimentos naturales y más específicamente de colores y composiciones antimicrobianas solubles preparadas a partir de zumo de arándanos rojos y de zumos de frutas similares.The present invention is related to the field of natural products and foods and more specifically of colors and soluble antimicrobial compositions prepared to from cranberry juice and fruit juices Similar.
Se calcula que los alimentos saludables representan actualmente un mercado anual en los Estados Unidos de al menos diez billones de dólares (\textdollar10.000.000.000,00). Por "alimentos saludables" se quiere indicar vitaminas, minerales y productos herbáceos que se cree que de manera general que son eficaces para mejorar la salud humana sin el coste y los efectos colaterales de los productos farmacéuticos "artificiales" habituales. Como reconocimiento a la popularidad y a la importancia de estos productos se ha acuñado el término "nutracéuticos" o "alimentos funcionales" y la categoría de estos productos ha recibido un tratamiento regulatorio especial por el gobierno.It is estimated that healthy foods currently represent an annual market in the United States of at least ten billion dollars (\ textdollar10,000,000,000.00). By "healthy foods" you want to indicate vitamins, minerals and herbaceous products that are generally believed to be that are effective in improving human health without the cost and side effects of pharmaceutical products "artificial" habitual. In recognition of the popularity and the importance of these products has been coined the term "nutraceuticals" or "functional foods" and the category of these products has received regulatory treatment Special for the government.
No puede negarse que las vitaminas y los minerales son esenciales para la salud humana normal. La cuestión de si dosis "excesivas" de algunas vitaminas, por ejemplo Vitamina C, proporcionan beneficios especiales es más controvertida. Son más controvertidos todavía los muchos productos herbáceos de popularidad reciente tales como la palma enana americana, Echinacea y Ginkgo biloba. Debe recordarse que muchos productos farmacéuticos importantes están basados en productos vegetales naturales. Por ejemplo, el tanaceto, un remedio popular antiguo para los dolores de cabeza, es utilizado actualmente en muchos países como un remedio legítimo para la migraña.It cannot be denied that vitamins and minerals are essential for normal human health. The question of whether "excessive" doses of some vitamins, for example Vitamin C, provide special benefits is more controversial. The many recently popular herbaceous products such as saw palmetto, Echinacea and Ginkgo biloba are even more controversial. It should be remembered that many important pharmaceutical products are based on natural plant products. For example, tansy, an ancient folk remedy for headaches, is currently used in many countries as a legitimate remedy for migraine.
Un "remedio natural" incluso mucho más conocido es la utilización de zumos de fruta, especialmente el zumo de arándanos rojos, para el tratamiento y la prevención de infecciones del tracto urinario. Aunque el "remedio zumo de arándanos rojos" es prescrito muy frecuentemente, no se conoce la base precisa de su eficacia. Una hipótesis temprana fue que los ácidos de las frutas naturales, tales como el ácido benzoico, acidificaban la orina e inhibían de este modo la proliferación bacteriana. Aunque la acidificación puede ser parte del puzzle, no parece suficiente para explicar la ventaja que parece tener el zumo de arándanos rojos sobre otros zumos de frutas ácidas. Más recientemente ha habido varios informes sobre el hecho de que las frutas de arándano rojo y especies relacionadas del género Vaccinium contienen potentes factores que inhiben la adhesión bacteriana. Como las bacterias deben ser capaces de adherirse al endotelio urinario para producir una infección, el factor antiadhesión puede explicar el efecto del arándano rojo. Algunos estudios recientes han identificado el factor "antiadhesión" con los constituyentes polifenólicos de los zumos - más particularmente con antocianinas y sus precursores.An even better known "natural remedy" is the use of fruit juices, especially red cranberry juice, for the treatment and prevention of urinary tract infections. Although the "cranberry juice remedy" is prescribed very frequently, the precise basis of its effectiveness is not known. An early hypothesis was that acids from natural fruits, such as benzoic acid, acidified the urine and thus inhibited bacterial proliferation. Although acidification may be part of the puzzle, it does not seem sufficient to explain the advantage that cranberry juice seems to have over other acidic fruit juices. More recently there have been several reports on the fact that cranberry fruits and related species of the Vaccinium genus contain potent factors that inhibit bacterial adhesion. Since bacteria must be able to adhere to the urinary endothelium to produce an infection, the anti-adhesion factor can explain the effect of cranberry. Some recent studies have identified the "anti-adhesion" factor with the polyphenolic constituents of juices - more particularly with anthocyanins and their precursors.
De hecho, al menos un grupo de investigación ha realizado grandes esfuerzos para purificar el factor antiadhesión a partir de arándanos rojos y frutos relacionados. La atención del lector es dirigida hacia una serie de patentes de EE.UU. para Walker y col. (E.B. Walker, R.A. Mikelsen, J.N. Mikelsen y B.L. Roth) (incluyendo las Patentes de EE.UU. Números 5.474.774, 5.525.341 y 5.646.178). Estas patentes describen los complejos procesos de extracción y fraccionamiento mediante los cuales se extraen los frutos de arándano rojo y producen una fracción enriquecida en el factor antiadhesión anteriormente mencionado. Estas patentes proporcionan una identificación tentativa del factor antiadhesión. Sin embargo, el proceso de Walker y col. es complejo y tedioso. Además, no está claro que todos los beneficios del arándano rojo y de los frutos relacionados sean debidos al factor antiadhesión.In fact, at least one research group has made great efforts to purify the anti-adhesion factor to from cranberries and related fruits. The attention of Reader is directed towards a series of US patents. for Walker et al. (E.B. Walker, R.A. Mikelsen, J.N. Mikelsen and B.L. Roth) (including U.S. Patent Nos. 5,474,774, 5,525,341 and 5,646,178). These patents describe the complexes extraction and fractionation processes through which extract the cranberry fruits and produce a fraction enriched in the aforementioned anti-adhesion factor. These patents provide a tentative identification of the factor non-adhesion However, the Walker et al. it's complex and tedious. In addition, it is not clear that all the benefits of Cranberry and related fruits are due to the factor non-adhesion
Además, ha habido una considerable investigación reciente pregonando los beneficios de "antioxidantes" polifenólicos tales como los flavonoides o las antocianinas que son responsables del color y supuestamente de los beneficios que tiene sobre la salud el vino tinto. Los antioxidantes o flavonoides están presentes en un gran número de plantas pero parece que no existe un medio sencillo o aceptado para purificar estos componentes con el fin de que puedan ser añadidos fácilmente a los alimentos o a otros productos.In addition, there has been considerable research recent proclaiming the benefits of "antioxidants" polyphenolics such as flavonoids or anthocyanins that are responsible for the color and supposedly the benefits it has About red wine health. The antioxidants or flavonoids are present in a large number of plants but it seems that there is no simple or accepted means to purify these components with the so that they can be easily added to food or others products.
Por tanto, existe todavía la necesidad de un método sencillo para concentrar los materiales eficaces procedentes del arándano rojo y de otras fuentes vegetales (por ejemplo, flores, frutos, hojas, tallos y raíces) para uso nutracéutico y para otros usos. Además de sus propiedades curativas, los frutos y otros materiales vegetales están frecuentemente muy pigmentados. Como gran parte de nuestros alimentos es de origen vegetal, la gente se ha acostumbrado a tener alimentos con colores brillantes y atrayentes. Los alimentos "artificiales" muy procesados son generalmente incoloros o tienen colores apagados y poco atrayentes. Se gastan cada año muchos millones de dólares para poner "colores artificiales" y "aromas artificiales" en los productos alimentarios procesados. Aunque tales aditivos pueden hacer que los productos alimentarios procesados sean más atractivos, en realidad hacen que los productos sean incluso menos adecuados para el consumo humano. Los peores colorantes de alquitrán mineral carcinogénicos han sido retirados del mercado, pero una duda persistente rodea a muchos de los "colores certificados para alimentos" restantes. Por tanto, existe una necesidad significativa de métodos para capturar los colores y aromas naturales de las frutas y hortalizas.Therefore, there is still a need for a simple method to concentrate the effective materials coming of cranberry and other plant sources (for example, flowers, fruits, leaves, stems and roots) for nutraceutical use and for others applications. In addition to its healing properties, fruits and others Plant materials are often very pigmented. How much of our food is of plant origin, people are has become accustomed to having brightly colored foods and attractants Highly processed "artificial" foods are usually colorless or have dull and unattractive colors. Many millions of dollars are spent every year to put "colors artificial "and" artificial aromas "in the products processed foods. Although such additives may cause the Processed food products are more attractive, actually they make products even less suitable for consumption human. The worst carcinogenic mineral tar dyes they have been recalled, but a persistent doubt surrounds many of the "certified food colors" remaining. Therefore, there is a significant need for methods to capture the natural colors and aromas of fruits and vegetables.
Puede prepararse un concentrado bioactivo soluble a partir del zumo (u homogenado acuoso) del arándano rojo y de otras frutas o verduras mediante el tratamiento del zumo con un material aglutinante apropiado. El material actualmente preferido es polivinilpirrolidona soluble. El material aglutinante soluble puede ser precipitado de la solución mediante varias manipulaciones tales como la disminución de la actividad del agua (por ejemplo, la adición de solventes o solutos hidrofílicos). El material precipitado es soluble en agua en ausencia de los solventes o solutos adicionales y presenta propiedades antioxidantes, antibacterianas y antivirales significativas. Puede ser fácilmente consumido como un nutracéutico, puede ser utilizado tópicamente o puede ser utilizado como colorante alimentario seguro. De manera significativa, el material aglutinante soluble utilizado en la purificación estabiliza significativamente los materiales coloreados. Mientras que el calor destruye o daña a menudo los pigmentos naturales de las plantas, las preparaciones de la presente invención son estables al autoclavado y a calentamientos significativos similares. Además, el material solubles es inyectable en humanos o animales de tal manera que puede ser utilizado directamente como un fármaco inyectable o como un conservante para productos farmacéuticos inyectables. El material es también útil como conservante en alimentos, cosméticos y fármacos o productos biológicos. El mismo método es adaptado para concentrar colores y aromas a partir de una variedad de frutas y hortalizas.A bioactive concentrate can be prepared soluble from the juice (or aqueous homogenate) of the cranberry and of other fruits or vegetables by treating the juice with a appropriate binder material. The currently preferred material It is soluble polyvinylpyrrolidone. The soluble binder material can be precipitated from the solution by several manipulations such as decreased water activity (for example, the addition of solvents or hydrophilic solutes). The material precipitate is soluble in water in the absence of solvents or additional solutes and has antioxidant properties, significant antibacterial and antiviral. Can easily be consumed as a nutraceutical, it can be used topically or It can be used as safe food coloring. By way of significant, the soluble binder material used in the purification significantly stabilizes the materials colored. While heat often destroys or damages Natural plant pigments, the present preparations invention are stable to autoclaving and heating significant similar. In addition, the soluble material is injectable. in humans or animals in such a way that it can be used directly as an injectable drug or as a preservative for injectable pharmaceutical products. The material is also useful as a preservative in food, cosmetics and drugs or products Biological The same method is adapted to concentrate colors and aromas from a variety of fruits and vegetables.
La siguiente descripción se proporciona para permitir que cualquier persona experta en la técnica realice y utilice la invención y describe los mejores modos contemplados por el inventor para llevar a cabo esta invención. Sin embargo, diferentes modificaciones serán fácilmente obvias para los expertos en la técnica, ya que los principios generales de la presente invención han sido definidos en la presente específicamente con el fin de proporcionar un método para concentrar colores, fracciones biológicamente activas y aromas de frutas y hortalizas (incluyendo flores, hojas, tallos, raíces e "infusiones") y particularmente extractos antimicrobianos y antivirales procedentes de zumos de arándano rojo, arándano, baya de Aronia, uvas y otros zumos de fruta, método que tiene como resultado un producto sustancialmente soluble en agua.The following description is provided for allow any person skilled in the art to perform and use the invention and describe the best modes contemplated by the inventor to carry out this invention. But nevertheless, different modifications will be easily obvious to experts in the art, since the general principles of the present invention have been defined herein specifically with the in order to provide a method to concentrate colors, fractions biologically active and aromas of fruits and vegetables (including flowers, leaves, stems, roots and "infusions") and particularly antimicrobial and antiviral extracts from juices of Cranberry, cranberry, Aronia berry, grapes and other juices fruit, a method that results in a product substantially soluble in water.
El presente inventor tiene un largo registro de invenciones dentro del campo médico, particularmente en procesos para desinfectar la sangre y los productos sanguíneos. Era natural que cambiara sus energías inventivas hacia la industria alimentaria en la que existen problemas similares de patógenos peligrosos. Mientras perfeccionada los métodos de purificación de desinfectantes a partir de zumos de fruta, el presente inventor observó que los agentes que extraían el yodo extraían a menudo parte del color del zumo de frutas junto con el yodo. Esto dio lugar a la cuestión de si estos métodos de extracción podrían ser útiles para concentrar el color o el aroma de la fruta o cualquier otro componente del zumo. Siguieron a continuación experimentos con un número considerable de diferentes zumos y diferentes agentes aglutinantes. Los materiales concentrados resultantes son potencialmente útiles como aditivos colorantes o aromatizantes para productos alimentarios. Además, se ha descubierto que algunos de los concentrados tienen propiedades antibacterianas inesperadas.The present inventor has a long record of inventions within the medical field, particularly in processes to disinfect blood and blood products. It was natural that will change your inventive energies towards the food industry in which there are similar problems of dangerous pathogens. While perfected the purification methods of disinfectants from fruit juices, the present inventor noted that the agents that extracted iodine often extracted part of the color of fruit juice along with iodine. This gave rise to the question of whether these extraction methods could be useful for concentrating the color or aroma of fruit or any Another component of the juice. Experiments followed with a considerable number of different juices and different agents binders The resulting concentrated materials are potentially useful as coloring or flavoring additives for food products. In addition, it has been discovered that some of The concentrates have unexpected antibacterial properties.
En solicitudes de patente anteriores, US 09/263.046 y US 08/931.315, el presente inventor demostró que varios materiales aglutinantes insolubles, en particular polivinilpirrolidona (PVP) y colestiramina, son capaces de extraer una fracción polifenólica coloreada de zumos de frutas y de otros materiales vegetales. De forma significativa, el material extraído de los frutos de plantas del género Vaccinium y del género Vitis presenta potentes propiedades antioxidantes así como propiedades antimicrobianas y antivirales inesperadas. Según se describió anteriormente, los materiales tienen una multitud de usos. El zumo de fruta y los agentes aglutinantes utilizados son considerados seguros para consumo humano o para el contacto con la piel y las mucosas humanas. Los antimicrobianos son especialmente útiles en cualquier tratamiento en el que el crecimiento bacteriano esté controlado de manera ventajosa. Tales utilizaciones están en el tratamiento de heridas, donde el material de la presente invención puede ser insertado en vendajes para prevenir el crecimiento bacteriano. Puede ser también aplicado directamente a las heridas como parte de un proceso de limpieza. Estos nuevos antibacterianos son también útiles para tratar la enfermedad periodontal, en la que pueden ser utilizados en lugar de los antibióticos o desinfectantes tradicionales tales como el peróxido. Pueden ser también utilizados en compresas y tampones para prevenir el crecimiento peligroso de Staphylococcus, que puede tener como resultado el Síndrome del Choque Tóxico.In previous patent applications, US 09 / 263,046 and US 08 / 931,315, the present inventor demonstrated that various insoluble binder materials, in particular polyvinylpyrrolidone (PVP) and cholestyramine, are capable of extracting a colored polyphenolic fraction from fruit juices and others plant materials Significantly, the material extracted from the fruits of plants of the genus Vaccinium and the genus Vitis has potent antioxidant properties as well as unexpected antimicrobial and antiviral properties. As described above, the materials have a multitude of uses. The fruit juice and the binding agents used are considered safe for human consumption or for contact with the skin and human mucous membranes. Antimicrobials are especially useful in any treatment in which bacterial growth is advantageously controlled. Such uses are in the treatment of wounds, where the material of the present invention can be inserted into bandages to prevent bacterial growth. It can also be applied directly to wounds as part of a cleaning process. These new antibacterials are also useful for treating periodontal disease, in which they can be used instead of traditional antibiotics or disinfectants such as peroxide. They can also be used in pads and tampons to prevent the dangerous growth of Staphylococcus , which can result in Toxic Shock Syndrome.
Como los componentes aglutinantes insolubles son todos de grado alimentario y seguros para el consumo humano, los factores insolubles del zumo son ideales como agentes coloreantes alimentarios, conservantes alimentarios o como productos nutracéuticos. Los componentes pueden ser también unidos a una matriz de unión adecuada tal como PVP mediante un proceso de extracción discontinuo o de una sola etapa. Es posible también aplicar una segunda matriz de unión al sobrenadante procedente de la primera unión con el fin de llevar a cabo una "segunda captura" de componentes adicionales. Los componentes coloreantes pueden ser liberados (eluidos) de la PVP o de otra matriz de unión por cambios del pH o de la fuerza iónica (por ejemplo, tampones y soluciones de sales). Sin embargo, los materiales eluidos o liberados son todavía difíciles de utilizar. Lo que se necesita una forma de concentrar estos materiales en una forma sólida que pueda ser disuelta posteriormente en una solución acuosa. Esto simplificaría la utilización del concentrado como colorante o como material desinfectante.How insoluble binder components are All food grade and safe for human consumption, Insoluble juice factors are ideal as coloring agents food, food preservatives or as products nutraceuticals The components can also be attached to a suitable binding matrix such as PVP through a process of discontinuous or single stage extraction. It is possible too apply a second binding matrix to the supernatant from the first union in order to carry out a "second capture "of additional components. The coloring components they can be released (eluted) from the PVP or from another binding matrix by changes in pH or ionic strength (for example, buffers and salt solutions). However, eluted materials or Released are still difficult to use. What it takes a way to concentrate these materials in a solid form that can be subsequently dissolved in an aqueous solution. This would simplify the use of the concentrate as a dye or as disinfectant material
El presente inventor ha perfeccionado ahora un método para producir tal concentrado. Zumos u otros líquidos derivados de plantas son tratados con PVP soluble en agua [o con alcohol polivinílico soluble en agua (PVA)] que tiene afinidad por los componentes activos. Posteriormente, la PVP o el PVA soluble en agua es sometido a "desplazamiento salino" de la solución mediante la adición de extracto de planta adicional, de PVP adicional o de PVA adicional. Generalmente, la PVP soluble, que ha sido utilizada desde hace tiempo para producir plasma sanguíneo "artificial", permanece soluble incluso a concentraciones muy elevadas. La adición de más PVP a una simple solución acuosa tiene como resultado solamente una solución más viscosa. Sin embargo, cuando están presentes los factores polifenólicos de las plantas, el comportamiento de la PVP cambia. Se cree que los factores polifenólicos entrecruzan las moléculas de PVP formando estructuras más grandes, más hidrofóbicas. Si se añaden posteriormente factores polifenólicos adicionales, estas estructuras resultan insolubles. La adición de PVP soluble en presencia de factores polifenólicos puede tener también como resultado una precipitación. Cualquier acción que reduzca la actividad del agua o "deshidrate" la solución, producirá también la precipitación del complejo factor fenólico-PVP. Además, la eliminación real de la actividad del agua puede ser alterada mediante la adición de solventes o solutos hidrofílicos. Por ejemplo, varios alcoholes, glicoles (polietilén glicol, surfactantes Plurónicos, etc.), sales (por ejemplo, cloruro de sodio, cloruro de potasio, cloruro de calcio u otras sales solubles en agua tales como nitratos, sulfatos, etc.) y solutos hidrofílicos (por ejemplo aminoácidos, urea y azúcares) producirán la precipitación del complejo PVP-factor polifenólico. Se cree que la adición de cualquiera de estas sustancias hidrofílicas "retira" el agua del complejo PVP-polifenólico de tal manera que predominan las interacciones hidrofóbicas y el complejo precipita. Pueden utilizarse también otros medios de deshidratación, por ejemplo ultrafiltración y evaporación.The present inventor has now perfected a method to produce such concentrate. Juices or other liquids plant derivatives are treated with water soluble PVP [or with water soluble polyvinyl alcohol (PVA)] which has an affinity for The active components. Subsequently, the PVP or the soluble PVA in water is subjected to "saline displacement" of the solution by adding additional plant extract, from PVP additional or additional PVA. Generally, soluble PVP, which has has long been used to produce blood plasma "artificial", remains soluble even at very high concentrations high. The addition of more PVP to a simple aqueous solution has as a result only a more viscous solution. But nevertheless, when plant polyphenolic factors are present, PVP behavior changes. It is believed that the factors polyphenolics cross PVP molecules forming structures bigger, more hydrophobic. If factors are added later Additional polyphenolics, these structures are insoluble. The addition of soluble PVP in the presence of polyphenolic factors can also result in precipitation. Any action that reduces water activity or "dehydrate" the solution, it will also produce the precipitation of the complex factor Phenolic-PVP. In addition, the actual elimination of the Water activity can be altered by adding hydrophilic solvents or solutes. For example, several alcohols, glycols (polyethylene glycol, pluronic surfactants, etc.), salts (for example, sodium chloride, potassium chloride, calcium or other water soluble salts such as nitrates, sulfates, etc.) and hydrophilic solutes (for example amino acids, urea and sugars) will produce precipitation of the complex PVP-polyphenolic factor. It is believed that the addition of any of these hydrophilic substances "removes" the water of the PVP-polyphenolic complex such that Hydrophobic interactions predominate and the complex precipitates. Other means of dehydration can also be used, by example ultrafiltration and evaporation.
En un experimento, se añadieron 40 ml de zumo de arándano rojo concentrado a 5,0 g de PVP soluble (PM = 30.000) y la mezcla fue agitada hasta que se disolvió la PVP. En este punto, se añadieron alícuotas de 2 ml del concentrado de zumo de arándano rojo con agitación entre cada adición. Una vez que se hubieron añadido 20 ml de concentrado, se observó la formación de un precipitado. El material se dejó reposar durante una noche a temperatura ambiente. La solución fue centrifugada posteriormente para concentrar el precipitado. Se recogieron 2 ml aproximadamente de un precipitado de color rojo oscuro. El sobrenadante restante era visiblemente más claro de color que el concentrado de arándano rojo de partida. Una observación interesante es que el precipitado, o una solución producida disolviendo el material PVP-polifenólico en agua, es mucho más estable que el material de arándano rojo solo. Normalmente, el material coloreado se fotodecolorará fácilmente o perderá color por la oxidación. El complejo de PVP soluble es mucho más estable a la luz y resistente a la degradación oxidativa. Además, el complejo de PVP es estable a un autoclavado prolongado o a un tratamiento con calor similar.In one experiment, 40 ml of juice was added concentrated cranberry to 5.0 g of soluble PVP (PM = 30,000) and the The mixture was stirred until the PVP dissolved. At this point, it added 2 ml aliquots of the cranberry juice concentrate red with stirring between each addition. Once they had 20 ml of concentrate was added, the formation of a precipitate. The material was allowed to stand overnight room temperature. The solution was subsequently centrifuged. to concentrate the precipitate. Approximately 2 ml were collected of a dark red precipitate. The remaining supernatant was visibly lighter in color than cranberry concentrate of departure. An interesting observation is that the precipitate, or a solution produced by dissolving the material PVP-polyphenolic in water, is much more stable than the cranberry material alone. Normally the material colored will easily fade or lose color by oxidation. The soluble PVP complex is much more stable to light and resistant to oxidative degradation. In addition, the PVP complex it is stable to prolonged autoclaving or heat treatment Similary.
Esta técnica parece producir el producto de PVP más fuertemente coloreado. El extracto puede ser también precipitado mediante la adición a la mezcla de alícuotas de una solución de PVP saturada o mediante la adición de alícuotas de una solución saturada de "sal". La solución de "sal" puede ser de la sal de mesa propiamente dicha (NaCl) o cloruro de potasio o de amonio. Otros solutos hidrofílicos tales como la urea precipitan también el complejo de PVP coloreado. En el caso preferido de la adición de extracto vegetal adicional (por ejemplo, zumo), la precipitación es debida probablemente a entrecruzamiento entre moléculas de PVP adyacentes que esencialmente convierten la PVP soluble en PVP insoluble (por ejemplo, entrecruzada). El punto importante es que el complejo de PVP precipitado continúa siendo soluble en agua y puede ser disuelto fácilmente en agua o en un tampón apropiado.This technique seems to produce the PVP product more strongly colored. The extract can also be precipitated by adding to the aliquot mixture a PVP solution saturated or by adding aliquots of a solution saturated with "salt". The "salt" solution can be from the actual table salt (NaCl) or potassium chloride or ammonium. Other hydrophilic solutes such as urea precipitate also the complex of colored PVP. In the preferred case of the addition of additional vegetable extract (for example, juice), the precipitation is probably due to crosslinking between adjacent PVP molecules that essentially convert PVP soluble in insoluble PVP (for example, crosslinked). Point important is that the precipitated PVP complex continues to be soluble in water and can be easily dissolved in water or in a appropriate buffer.
Con el fin de demostrar la eficacia, el precipitado y el sobrenadante que permanecía después de la precipitación fueron comparados con un ensayo de zonas de inhibición. En este experimento, el precipitado mostró una zona de inhibición dos veces y media mayor que la del sobrenadante. Además, como en el sobrenadante están presentes los ácidos de la fruta (pero no en el precipitado), es probable que mucha de la actividad del sobrenadante sea debida a la acidez.In order to demonstrate effectiveness, the precipitate and the supernatant that remained after the precipitation were compared with a trial of areas of inhibition. In this experiment, the precipitate showed an area of twice and a half inhibition greater than that of the supernatant. Further, as in the supernatant the acids of the fruit are present (but not in the precipitate), it is likely that much of the activity of the supernatant due to acidity.
Experimento 1Experiment one
En este experimento se determinó la actividad antiviral de PVP soluble preparada a partir de zumo de arándano rojo y de Aronia (fruto de la planta Amelanchier). La actividad fue comparada con un control o con un peso igual del extracto de PVP entrecruzada de los mismos zumos. Para este experimento, se añadió a cada una de cuatro muestras de 50 ml de sangre completa uno de cuatro virus diferentes: VSV (virus de la estomatitis vesicular), EMC (virus de la miocarditis equina), BVD (diarrea vírica bovina) y PPV (parvovirus porcino). Cada muestra con el virus añadido fue dividida en cinco alícuotas. A cada alícuota se añadió una de las muestras siguientes (0,25 ml de PVP soluble al 10%-arándano rojo, 0,25 g de PVP entrecruzada-arándano rojo, 0,25 ml de PVP soluble al 10%-Aronia y 0,25 g de PVP entrecruzada-Aronia). Los tubos fueron mezclados y se dejaron incubar posteriormente durante 30 minutos a temperatura ambiente. En ese punto las muestras fueron sembradas sobre un VEPA (ensayo vírico de punto final) según se explicó previamente. Se emplearon los tipos celulares apropiados para cada tipo de virus. Los ensayos VEPA fueron leídos y están mostrados en las tablas siguientes.In this experiment the antiviral activity of soluble PVP prepared from cranberry juice and Aronia (fruit of the Amelanchier plant) was determined. The activity was compared with a control or with an equal weight of the crosslinked PVP extract of the same juices. For this experiment, one of four different viruses was added to each of four 50 ml samples of whole blood: VSV (vesicular stomatitis virus), EMC (equine myocarditis virus), BVD (bovine viral diarrhea) and PPV (porcine parvovirus). Each sample with the virus added was divided into five aliquots. To each aliquot one of the following samples was added (0.25 ml of 10% soluble PVP -cranberry, 0.25 g of cross-linked PVP-cranberry, 0.25 ml of 10% soluble PVP -Aronia and 0 , 25 g of crosslinked PVP-Aronia). The tubes were mixed and allowed to incubate subsequently for 30 minutes at room temperature. At that point the samples were seeded on a VEPA (viral endpoint assay) as previously explained. Appropriate cell types were used for each type of virus. VEPA trials were read and are shown in the following tables.
Las muestras de PVP soluble al 10% fueron preparadas precipitando la PVP soluble según se detalló anteriormente. Posteriormente se preparó una solución acuosa al 10% del precipitado de PVP coloreado. En los experimentos se utilizaron pesos aproximadamente iguales (0,25 ml de solución acuosa frente a 0,25 g de PVP insoluble). Por supuesto, la correspondencia entre la PVP insoluble y la PVP soluble es más difícil de determinar. Parece probable que la muestra de PVP al 10% esté considerablemente "más diluida" que la muestra de PVP entrecruzada. Si existe una correspondencia aproximada entre el peso de la PVP y el peso del extracto vegetal activo unido, debería considerarse que la PVP soluble es solamente un 10% aproximadamente de la PVP (cierta proporción de ese peso es realmente extracto de la planta) mientras que el producto insoluble es esencialmente un 100% de PVP (menos de cualquiera que sea la proporción del material es extracto de la planta). Por tanto, es probable que el material insoluble esté concentrado diez veces más. Sin embargo, la disolución completa del material soluble puede incrementar su actividad medible.The samples of 10% soluble PVP were prepared by precipitating the soluble PVP as detailed previously. Subsequently a 10% aqueous solution was prepared of the colored PVP precipitate. In the experiments they were used approximately equal weights (0.25 ml of aqueous solution versus 0.25 g of insoluble PVP). Of course, the correspondence between the Insoluble PVP and soluble PVP is more difficult to determine. It seems the 10% PVP sample is likely to be considerably "more diluted "than the crosslinked PVP sample. If there is a approximate correspondence between the weight of the PVP and the weight of the attached active plant extract, PVP should be considered soluble is only about 10% of the PVP (certain proportion of that weight is really plant extract) while that the insoluble product is essentially 100% PVP (less than whatever the proportion of the material is extract from the plant). Therefore, insoluble material is likely to be concentrated ten times more. However, the complete dissolution of the Soluble material can increase its measurable activity.
\vskip1.000000\baselineskip\ vskip1.000000 \ baselineskip
Estos resultados confirmaban que el VSV es muy sensible a los extractos de arándano rojo y de Aronia. El control representa PVP sin extracto de la planta. Son necesarios experimentos adicionales de titulación para comparar la potencia de la PVP soluble respecto a la entrecruzada (XL).These results confirmed that VSV is very Sensitive to cranberry and Aronia extracts. The control represents PVP without plant extract. They are needed additional titration experiments to compare the potency of the soluble PVP with respect to the crosslinked (XL).
\vskip1.000000\baselineskip\ vskip1.000000 \ baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip\ vskip1.000000 \ baselineskip
Estos resultados indican que el virus EMC es también muy susceptible a los extractos de arándano rojo y de Aronia.These results indicate that the EMC virus is also very susceptible to cranberry extracts and Aronia
\vskip1.000000\baselineskip\ vskip1.000000 \ baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip\ vskip1.000000 \ baselineskip
Estos resultados indican que los extractos de arándano rojo y de Aronia no tienen efecto sobre el BVD, al menos a las concentraciones utilizadas en la presente.These results indicate that extracts from Cranberry and Aronia have no effect on BVD, at least at the concentrations used herein.
Estos resultados muestran que las concentraciones de extracto de arándano rojo y de Aronia utilizadas actualmente son ineficaces contra el PPV, aunque pueden ser eficaces a concentraciones más elevadas o con exposiciones más largas.These results show that concentrations of cranberry extract and Aronia used they are currently ineffective against the PPV, although they may be effective at higher concentrations or with more exposures long
En estos experimentos debe tenerse en cuenta que aunque la concentración de agente eficaz administrada en el caso del material entrecruzado es esencial como máximo, es bastante posible aumentar significativamente la concentración de la PVP soluble (ya que sólo se ha utilizado actualmente una dilución al 10%). Estos resultados tienden a confirmar la hipótesis de que el material PVP soluble pura es alrededor de diez veces más potente que el producto entrecruzado.In these experiments it should be borne in mind that although the concentration of effective agent administered in the case of the crosslinked material is essential at most, it is quite possible to significantly increase the concentration of PVP soluble (since only one dilution has been currently used 10%) These results tend to confirm the hypothesis that the pure soluble PVP material is about ten times more powerful than the crosslinked product.
Experimento 2Experiment 2
Además, con algunos materiales vegetales las versiones solubles parecen dar resultados enormemente superiores en comparación con el material entrecruzado insoluble. Éste parece ser especialmente cierto con el extracto de PVP soluble concentrado a partir de los frutos de Vitis (uva), ya sea V. vinifera (uva de vino) o de V. labrusca (uva Concord). Experimentos iniciales con extractos de PVP entrecruzada mostraron una actividad antimicrobiana relativamente pequeña. Esto es debido, al menos en parte, al hecho de que el zumo de uva Concord comercial fue la fuente de los extractos de ensayo. En la preparación de tal zumo se utiliza una etapa de calor para liberar el color de las pieles de la fruta. Aparentemente, este calentamiento disminuye las propiedades favorables. Cuando los extractos son preparados sin calentamiento, la PVP de uva soluble muestra una actividad antibacteriana significativa frente a ciertas bacterias bastante "difíciles". En menor grado esto es cierto también con extractos de PVP soluble preparados a partir del fruto de Rubus (arándano). Una vez más, la ausencia de tratamiento con calor antes de la formación del complejo de PVP puede ser importante.In addition, with some plant materials soluble versions seem to give vastly superior results compared to insoluble crosslinked material. This seems to be especially true with the soluble PVP extract concentrated from the fruits of Vitis (grape), either V. vinifera (wine grape) or V. labrusca (Concord grape). Initial experiments with cross-linked PVP extracts showed a relatively small antimicrobial activity. This is due, at least in part, to the fact that commercial Concord grape juice was the source of the test extracts. In the preparation of such juice a heat stage is used to release the color of the fruit skins. Apparently, this heating decreases the favorable properties. When the extracts are prepared without heating, the soluble grape PVP shows a significant antibacterial activity against certain quite "difficult" bacteria. To a lesser extent this is also true with soluble PVP extracts prepared from the fruit of Rubus (cranberry). Again, the absence of heat treatment before the formation of the PVP complex may be important.
Se prepararon PVP soluble-uva y PVP soluble-arándano según se describió anteriormente para el PVP-arándano rojo. Además, los materiales fueron ensayados a pH 5,0 o a pH 7,0. Para estos ensayos, alícuotas de los extractos de PVP de ensayo fueron ajustadas al pH deseado y esterilizadas posteriormente por filtración utilizando un filtro de 0,2 \mum. Se prepararon diluciones seriadas de dos veces utilizando caldo de tripticasa-soja estéril. Cada dilución fue inoculada con 1x10^{4} organismos de ensayo por ml, y las soluciones fueron incubadas durante una noche a 35ºC y posteriormente extendidas sobre placas de crecimiento de agar. Las lecturas de la Tabla 5 siguiente indican la dilución seriada más elevada en la que no creció ningún organismo (por ejemplo, la dilución a la cual el extracto de PVP destruía o inhibía completamente las bacterias.Soluble grape-grape PVP and Cranberry-soluble PVP as described formerly for PVP-cranberry. Further, the materials were tested at pH 5.0 or at pH 7.0. For this trials, aliquots of the test PVP extracts were adjusted to the desired pH and subsequently sterilized by filtration using a 0.2 µm filter. They prepared serial dilutions twice using broth sterile tripticasa-soy. Each dilution was inoculated with 1x10 4 test organisms per ml, and the solutions were incubated overnight at 35 ° C and subsequently extended on agar growth plates. The readings in Table 5 below indicate serial dilution plus elevated in which no organism grew (for example, the dilution at which the PVP extract destroyed or inhibited completely bacteria.
Debe apreciarse que los extractos de PVP están destruyendo o inhibiendo irreversiblemente las bacterias en presencia de condiciones de crecimiento óptimas. En presencia de un medio menos rico, los extractos son incluso más eficaces. Además, si las bacterias son expuestas a los extractos durante periodos de tiempo mayores (varios días) diluciones mucho más elevadas (menores concentraciones del extracto de PVP) son capaces de inhibir completamente las bacterias. Esto sugiere que los extractos de PVP tienen de alguna manera un efecto acumulativo sobre las bacterias. Como existe cierta evidencia de que las bacterias tienen una función en la enfermedad arterial, esto puede explicar cómo una dieta rica en productos polifenólicos vegetales presenta un efecto preventivo sobre tal enfermedad.It should be noted that the extracts of PVP are destroying or irreversibly inhibiting bacteria in presence of optimal growth conditions. In the presence of a less rich medium, the extracts are even more effective. Further, if bacteria are exposed to extracts during periods of higher time (several days) much higher dilutions (lower PVP extract concentrations) are able to inhibit completely bacteria. This suggests that PVP extracts They have somehow a cumulative effect on bacteria. As there is some evidence that bacteria have a function In arterial disease, this may explain how a rich diet in plant polyphenolic products has a preventive effect About such a disease.
Experimento 3Experiment 3
Este experimento fue llevado a cabo para analizar la hipótesis de que virus resistentes como el BVD serían susceptibles a concentraciones más elevadas del extracto activo y para realizar comparaciones de titulación entre el material PVP soluble y el material PVP entrecruzada. A un tubo conteniendo 120 ml de sangre humana fresca se añadió BVD y posteriormente se dividió en una pluralidad de alícuotas de 10 ml. Se añadió a cada tubo una muestra de PVP soluble al 10%-arándano rojo (preparada igual que anteriormente) o de PVP entrecruzada-arándano rojo. El tubo fue mezclado e incubado durante 30 minutos y colocado posteriormente sobre un VEPA igual que anteriormente. Igual que en los experimentos anteriores, se utilizaron pesos equivalentes de la PVP entrecruzada y soluble, según se muestra en la Tabla 6.This experiment was carried out to analyze the hypothesis that resistant viruses such as BVD would be susceptible to higher concentrations of the active extract and to make titration comparisons between the PVP material soluble and crosslinked PVP material. To a tube containing 120 ml of fresh human blood BVD was added and subsequently divided in a plurality of 10 ml aliquots. A tube was added to each tube. 10% soluble PVP sample - cranberry (prepared just like above) or cross-linked cranberry-cranberry PVP. The tube was mixed and incubated for 30 minutes and placed later on a VEPA as before. Same as in the previous experiments, equivalent weights of the Crosslinked and soluble PVP, as shown in Table 6.
\vskip1.000000\baselineskip\ vskip1.000000 \ baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip\ vskip1.000000 \ baselineskip
Estos resultados confirman la hipótesis de que concentraciones mayores del agente activo son capaces de destruir un virus resistente tal como BVD. Parecería que hay un efecto de la concentración bastante marcado entre las muestras b y c o entre las muestras g y h. Esto sugiere que hay cierto tipo de efecto de "llenado de sitios". Esto es, la cantidad de ingrediente activo en 500 \mul de extracto de PVP soluble no es adecuada para mostrar mucho efecto, pero el doble de esta concentración es totalmente eficaz. Presumiblemente, los primeros 500 \mul se unen al virus o son gastados de alguna manera ineficaz. Una vez que se han llenado esos primeros sitios, el ingrediente activo interacciona con, y destruye, el virus. Como resultado, la utilización de material más que suficiente para saturar los primeros sitios tiene como resultado un incremento significativo de la destrucción. Estos resultados sugieren también que el material entrecruzado es ligeramente más eficaz sobre una base de pesos "iguales". Por tanto, el material soluble no es exactamente diez veces más potente que el material insoluble (si fuera al menos diez veces más eficaz, el material entrecruzado no parecería ser ligeramente más eficaz). Lo que es muy significativo es que las concentraciones de PVP soluble (por ejemplo la muestra c) que eran eficaces para destruir el virus no producían un incremento aparente de la hemolisis. Agentes desinfectantes (por ejemplo el yodo) o detergentes potentes que son capaces de destruir virus resistentes como el BVD, dañan también generalmente las membranas celulares. Este daño se hace patente como una hemolisis incrementada. Esto sugiere que el PVP soluble-arándano rojo podría ser un agente antiviral seguro para uso directo en la corriente sanguínea o para inactivar el virus en sangre utilizada para transfusión, fraccionamiento o ensayos de laboratorio.These results confirm the hypothesis that higher concentrations of the active agent are capable of destroying a resistant virus such as BVD. It seems that there is an effect of fairly marked concentration between samples b and c or between samples g and h. This suggests that there is a certain type of effect of "site filling". That is, the amount of ingredient active in 500 µL of soluble PVP extract is not suitable for show a lot of effect, but double this concentration is totally effective Presumably, the first 500 µl join to the virus or are spent in some inefficient way. Once I know have filled those first sites, the active ingredient interacts with, and destroys, the virus. As a result, the use of more than enough material to saturate the first sites results in a significant increase of the destruction. These results also suggest that the material crosslinked is slightly more effective on a weight basis "same." Therefore, the soluble material is not exactly ten times more powerful than insoluble material (if at least ten times more effective, the crosslinked material would not appear to be slightly more effective). What is very significant is that the soluble PVP concentrations (for example sample c) that were effective to destroy the virus did not produce an apparent increase of hemolysis. Disinfectant agents (for example iodine) or powerful detergents that are capable of destroying resistant viruses like BVD, they also usually damage cell membranes. This damage becomes apparent as an increased hemolysis. This suggests that soluble cranberry-red PVP could be a safe antiviral agent for direct use in the stream blood or to inactivate the virus in blood used to transfusion, fractionation or laboratory tests.
Experimento 4Experiment 4
Se llevaron a cabo experimentos adicionales para determinar si los extractos activos de arándano rojo eran realmente inocuos para las células a concentraciones que tienen como resultado una buena destrucción de virus. Varios experimentos anteriores han demostrado que dos parámetros de la sangre medidos de manera relativamente fácil son indicativos de daño a las células sanguíneas. Cuando las membranas de los glóbulos rojos están dañadas, se reduce su capacidad para retener potasio (K^{+}). Esto se refleja en un incremento del potasio medido en plasma. De manera similar, el enzima LDH (lactato deshidrogenasa) se escapa de las células dañadas, por lo que niveles más elevados de LDH reflejan un daño. Una vez más, tubos de 10 ml de sangre completa humana fresca fueron tratados cada uno con uno de los aditivos mostrados en la Tabla 8. Después de 30 minutos de incubación a temperatura ambiente, las muestras fueron observadas para detectar hemolisis (Tabla 9) y se realizaron posteriormente medidas de LDH y de potasio (Tabla 10).Additional experiments were carried out to determine if the active cranberry extracts were really harmless to cells at concentrations that result in A good virus destruction. Several previous experiments have shown that two blood parameters measured so relatively easy are indicative of cell damage blood. When the red blood cell membranes are damaged, its ability to retain potassium (K +) is reduced. This is reflected in an increase in potassium measured in plasma. From similarly, the enzyme LDH (lactate dehydrogenase) escapes from damaged cells, so higher levels of LDH They reflect damage. Again, 10 ml tubes of whole blood Fresh human were each treated with one of the additives shown in Table 8. After 30 minutes of incubation at room temperature, samples were observed to detect hemolysis (Table 9) and LDH measurements were subsequently performed and of potassium (Table 10).
\vskip1.000000\baselineskip\ vskip1.000000 \ baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip\ vskip1.000000 \ baselineskip
Estos resultados indican una estrecha relación entre la hemolisis y los demás indicios de daño celular. Y lo que es más significativo, niveles de extracto (por ejemplo, 1000 \mul de extracto de PVP soluble) que son eficaces para destruir virus causan únicamente un ligero daño celular. Es probable que una incubación más larga con concentraciones ligeramente menores del extracto activo tuviera como resultado una destrucción total del virus sin un daño apreciable a las células. Debe tenerse en cuenta que la PVP soluble ha sido utilizada desde hace mucho tiempo en líquidos inyectables y se considera segura para inyección. El hecho de que el complejo PVP-productos polifenólicos produzca poco daño celular indica que puede ser utilizado como material inyectable. Puede ser añadido a otros fármacos inyectables para conservarlos y destruir cualquier bacteria o virus (una gran mejora sobre los conservantes tóxicos que contienen mercurio tales como el timerisol), o bien el material puede ser inyectado directamente como fármaco antibacteriano o antiviral.These results indicate a close relationship between hemolysis and other signs of cell damage. And what more significantly, extract levels (for example, 1000 µl of soluble PVP extract) which are effective in destroying viruses cause only slight cell damage. It is likely that a longer incubation with slightly lower concentrations of active extract would result in a total destruction of the virus without appreciable damage to cells. It must be considered that soluble PVP has long been used in injectable liquids and is considered safe for injection. The fact that the PVP-polyphenolic products complex produce little cell damage indicates that it can be used as injectable material It can be added to other injectable drugs to conserve them and destroy any bacteria or viruses (a large improvement over toxic preservatives containing mercury such such as thimerisol), or else the material can be injected directly as an antibacterial or antiviral drug.
Experimento 5Experiment 5
Debe mencionarse una excitante propiedad adicional del complejo PVP soluble-producto polifenólico. No sólo es inherentemente antimicrobiano, sino que presenta un efecto sinérgico con al menos algún otro agente antimicrobiano. El presente inventor acaba de comenzar a explorar este efecto pero debe darse un ejemplo. Últimamente se ha razonado que muchos casos de úlceras de estómago son en realidad el resultado de una infección bacteriana (Helicobacter pylori). Esta bacteria es algo difícil de destruir, pero una combinación de fármacos antibióticos tradicionales y bismuto (por ejemplo subsalicilato de bismuto como en el medicamento común PEPTO-BISMOL®) ha demostrado ser eficaz. El problema es que el largo periodo de tratamiento con antibióticos necesario tiene a menudo como resultado una grave alteración de la flora bacteriana intestinal del paciente.An additional exciting property of the soluble PVP-polyphenolic product complex should be mentioned. Not only is it inherently antimicrobial, but it has a synergistic effect with at least some other antimicrobial agent. The present inventor has just begun to explore this effect but an example must be given. Lately it has been reasoned that many cases of stomach ulcers are actually the result of a bacterial infection ( Helicobacter pylori ). This bacterium is somewhat difficult to destroy, but a combination of traditional antibiotic drugs and bismuth (for example bismuth subsalicylate as in the common medicine PEPTO-BISMOL®) has proven effective. The problem is that the long period of antibiotic treatment necessary often results in a severe alteration of the intestinal bacterial flora of the patient.
Para este experimento, el complejo PVP al 10%-producto polifenólico fue diluido de manera seriada en diluciones de dos veces (por ejemplo, 1:1, 1:2, 1:4, 1:8, etc.). Se añadieron bacterias al material procedente de cada dilución y después de 30 minutos de incubación se sembró en agar nutritivo para comprobar el crecimiento bacteriano. El título del complejo del producto polifenólico se calculó como la dilución más extrema que impedía todavía el crecimiento de bacterias en las placas. El complejo analizado mostraba generalmente que este punto era una dilución de 1:512. Sin embargo, si se añaden 0,0005 g de subsalicilato de bismuto a cada dilución, el título mejora hasta 1:1024 o incluso mejor. Sin embargo, esta cantidad de bismuto tiene poco efecto, si es que lo tiene, sobre las bacterias por sí misma. Por tanto, el complejo de los productos polifenólicos muestra un efecto antibacteriano sinérgico con el bismuto. Es probable que esta combinación demuestre ser útil para combatir H. pylori. Experimentos adicionales demostraron que el efecto sinérgico funciona con la PVP soluble o con la versión insoluble del factor antimicrobiano.For this experiment, the 10% PVP complex - polyphenolic product was serially diluted in twice dilutions (for example, 1: 1, 1: 2, 1: 4, 1: 8, etc.). Bacteria were added to the material from each dilution and after 30 minutes of incubation it was seeded in nutrient agar to check bacterial growth. The title of the polyphenolic product complex was calculated as the most extreme dilution that still prevented the growth of bacteria on the plates. The complex analyzed generally showed that this point was a dilution of 1: 512. However, if 0.0005 g of bismuth subsalicylate is added to each dilution, the titer improves to 1: 1024 or even better. However, this amount of bismuth has little effect, if any, on bacteria by itself. Therefore, the complex of polyphenolic products shows a synergistic antibacterial effect with bismuth. This combination is likely to prove useful in combating H. pylori . Additional experiments demonstrated that the synergistic effect works with soluble PVP or with the insoluble version of the antimicrobial factor.
El carácter de solubilidad en agua de la composición colorante antimicrobiana de la presente invención permite que la misma sea utilizada en una variedad de productos farmacéuticos dispensados sin receta. Los materiales son particularmente muy idóneos como antimicrobianos eficaces para colutorios o para ser utilizados en pastillas para la limpieza de la boca y otras funciones. Para tales fines los materiales pueden ser formulados como jarabes, elixires, "licores" o composiciones hidroalcohólicas similares. Las fórmulas pueden ser mejoradas y edulcoradas con glicirricinas o compuestos relacionados, que pueden presentar también propiedades antimicrobianas sinérgicas con los PVP-factores polifenólicos.The water solubility character of the antimicrobial dye composition of the present invention allows it to be used in a variety of products Pharmacists dispensed without a prescription. Materials are particularly very suitable as effective antimicrobials for mouthwashes or to be used in tablets for cleaning The mouth and other functions. For such purposes the materials can be formulated as syrups, elixirs, "liquors" or similar hydroalcoholic compositions. The formulas can be enhanced and sweetened with glycyrrhizins or compounds related, which may also have properties synergistic antimicrobials with PVP-factors polyphenolics
Debe apreciarse que el presente descubrimiento de la utilización de PVP soluble para precipitar y concentrar compuestos polifenólicos y otros compuestos biológicamente activos de origen vegetal, es también útil con el método previamente descrito de captura de tales materiales con PVP entrecruzada, colestiramina, almidón entrecruzado y otros materiales aglutinantes insolubles. Por ejemplo, el complejo arándano rojo-PVP entrecruzada puede ser suspendido y agitado en una solución concentrada de PVP soluble. A lo largo de un periodo de unas pocas horas la gran mayoría del material de arándano rojo unido se transfiere a la solución de PVP, particularmente si el líquido es calentado a 40-50ºC. Después de la transferencia, la centrifugación o la filtración extrae la PVP entrecruzada. La adición de más extracto de arándano rojo a la PVP soluble tiene como resultado la precipitación del complejo PVP soluble-arándano rojo según se describió anteriormente. Alternativamente, el desplazamiento salino de la PVP soluble con otros solutos puede producir la precitación. Aunque la PVP soluble es el agente acomplejante preferido para ser utilizado en la presente invención, es probable que puedan utilizarse también otros polímeros orgánicos solubles similares. Por ejemplo, se han obtenido también buenos resultados sustituyendo la PVP por alcohol polivinílico soluble.It should be appreciated that the present discovery of the use of soluble PVP to precipitate and concentrate polyphenolic compounds and other biologically active compounds of plant origin, it is also useful with the method previously described capture of such materials with crosslinked PVP, cholestyramine, crosslinked starch and other binding materials insoluble For example, the blueberry complex Red-crosslinked PVP can be suspended and stirred in a concentrated solution of soluble PVP. Along a period of a few hours the vast majority of the material of attached cranberry is transferred to the PVP solution, particularly if the liquid is heated to 40-50 ° C. After the transfer, the centrifugation or filtration extracts crosslinked PVP. The adding more cranberry extract to the soluble PVP has as result of precipitation of the PVP complex soluble cranberry as described previously. Alternatively, the saline displacement of the PVP Soluble with other solutes can produce the precitation. Although the Soluble PVP is the preferred complexing agent to be used In the present invention, it is likely that they can also be used other similar soluble organic polymers. For example, they have also obtained good results replacing the PVP with alcohol soluble polyvinyl.
Está claro que la presente invención de factores solubles extraídos de zumos de fruta o de otros productos vegetales tiene un amplio rango de aplicaciones. Su naturaleza soluble permite que sean utilizados para la conservación y desinfección de sangre, de productos sanguíneos, de productos farmacéuticos y de alimentos. Pueden ser también utilizables como fármacos inyectables ya que causan poco o ningún daño celular. Estos materiales pueden ser también utilizados en la mayoría de las aplicaciones en las que son útiles los materiales de extractos de plantas insolubles. Además, son especialmente útiles para colorear alimentos y otros productos debido a su naturaleza soluble.It is clear that the present invention of factors soluble extracted from fruit juices or other vegetable products It has a wide range of applications. Its soluble nature allows that are used for the preservation and disinfection of blood, of blood products, pharmaceuticals and food. They can also be used as injectable drugs since They cause little or no cell damage. These materials can be also used in most applications where they are Useful insoluble plant extract materials. Further, They are especially useful for coloring food and other products Due to its soluble nature.
Claims (10)
- (a)(to)
- la puesta en contacto de zumo de fruta o de un homogenado acuoso de material vegetal con polivinilpirrolidona soluble en agua o con alcohol polivinílico soluble en agua;the contacting fruit juice or an aqueous homogenate of plant material with water-soluble polyvinylpyrrolidone or with water soluble polyvinyl alcohol;
- (b)(b)
- la precipitación de los factores germicidas mediante la adición de zumo de fruta adicional o de homogenado de material vegetal adicional; ythe precipitation of germicidal factors by adding juice of additional fruit or homogenate of additional plant material; Y
- (c)(C)
- la recogida del factor germicida precipitado, donde los factores precipitados pueden ser fácilmente redisueltos en agua.the collection of the precipitated germicidal factor, where the factors precipitates can be easily redissolved in water.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US26304699A | 1999-03-05 | 1999-03-05 | |
| US263046 | 1999-03-05 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2273676T3 true ES2273676T3 (en) | 2007-05-16 |
Family
ID=23000149
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES00916123T Expired - Lifetime ES2273676T3 (en) | 1999-03-05 | 2000-03-06 | SOLUBLE CONCENTRATES OF NATURAL AND NUTRACEIC COLORS ANTIOMICROBIALS BASED ON PLANTS. |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1189521B1 (en) |
| AT (1) | ATE343333T1 (en) |
| AU (1) | AU763516B2 (en) |
| CA (1) | CA2379040C (en) |
| DE (1) | DE60031532T2 (en) |
| ES (1) | ES2273676T3 (en) |
| WO (1) | WO2000051445A2 (en) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6899700B2 (en) | 2001-08-29 | 2005-05-31 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Therapeutic agent delivery tampon |
| US6888043B2 (en) * | 2001-12-21 | 2005-05-03 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Feminine care products for the delivery of therapeutic substances |
| US20090117057A1 (en) * | 2007-11-06 | 2009-05-07 | Shanbrom Technologies, Llc | Grape Polyphenolics for Platelet and Bacterial Control |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3431208A (en) * | 1965-11-17 | 1969-03-04 | Schering Corp | Denture spray |
| PH11243A (en) * | 1974-03-06 | 1977-10-28 | Procter & Gamble | A flavoring composition or therapeutic agent to the teeth and the oral cavity |
| IE782318L (en) * | 1978-11-23 | 1980-05-23 | Michael Payne | Foodstuff preservative. |
| US4588589A (en) * | 1983-10-13 | 1986-05-13 | Richardson-Vicks Inc. | Antidiarrheal compositions and use thereof |
| US5108763A (en) * | 1991-04-03 | 1992-04-28 | Warner-Lambert Company | Microencapsulated high intensity sweetening agents having prolonged sweetness release and methods for preparing same |
| IL104364A (en) * | 1992-01-17 | 1997-09-30 | Applied Microbiology | Pharmaceutical compositions containing bacteriocins |
| RU2005465C1 (en) * | 1992-12-28 | 1994-01-15 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Фиталон" | Compound for prophylaxis of oral cavity diseases |
| AU7796894A (en) * | 1993-09-15 | 1995-04-03 | Wm. Wrigley Jr. Company | Chewing gum with stable natural blue color |
| US5474774A (en) * | 1994-03-25 | 1995-12-12 | Jlb, Inc. | Adhesion inhibiting composition |
| RU2075965C1 (en) * | 1994-09-29 | 1997-03-27 | Гарник Алексанович Чухаджян | Agent for mouth cavity illness treatment |
| AU4596796A (en) * | 1995-02-07 | 1996-08-27 | Narayan Krishnarao Athanikar | Concomitant treatment with bismuth and antibacterials |
| CA2245810A1 (en) * | 1996-02-14 | 1997-08-21 | The Procter & Gamble Company | Urogenital and intestinal compositions |
| US6093401A (en) * | 1997-09-16 | 2000-07-25 | Shanbrom Technologies Llc | Natural color concentrates and antimicrobial nutraceutial from plants |
| US5989560A (en) * | 1997-12-03 | 1999-11-23 | Renew Life, Inc. | Herbal intestinal tract cleanser |
-
2000
- 2000-03-06 AT AT00916123T patent/ATE343333T1/en not_active IP Right Cessation
- 2000-03-06 DE DE60031532T patent/DE60031532T2/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-06 CA CA2379040A patent/CA2379040C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-03-06 EP EP00916123A patent/EP1189521B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-06 AU AU37278/00A patent/AU763516B2/en not_active Ceased
- 2000-03-06 WO PCT/US2000/005874 patent/WO2000051445A2/en active IP Right Grant
- 2000-03-06 ES ES00916123T patent/ES2273676T3/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE60031532D1 (en) | 2006-12-07 |
| AU763516B2 (en) | 2003-07-24 |
| WO2000051445A2 (en) | 2000-09-08 |
| ATE343333T1 (en) | 2006-11-15 |
| WO2000051445A3 (en) | 2000-12-21 |
| AU3727800A (en) | 2000-09-21 |
| DE60031532T2 (en) | 2007-02-15 |
| CA2379040A1 (en) | 2000-09-08 |
| CA2379040C (en) | 2010-01-26 |
| EP1189521B1 (en) | 2006-10-25 |
| EP1189521A2 (en) | 2002-03-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20030161897A1 (en) | Soluble plant derived natural color concentrates and antimicrobial nutraceuticals | |
| Chu et al. | Bilberry (vaccinium myrtillus L.) | |
| Saranraj et al. | Pharmacology of honey: A review | |
| Uthurry et al. | Role of honey polyphenols in health | |
| Adkar et al. | Trapa bispinosa Roxb.: a review on nutritional and pharmacological aspects | |
| US7329421B2 (en) | Process of manufacturing clear juice from the leaves of the Aloe vera plant | |
| CN106794210A (en) | Comprising mangosteen extract or α, γ mangostin as the periodontosis prevention of active ingredient or improvement composition | |
| US6093401A (en) | Natural color concentrates and antimicrobial nutraceutial from plants | |
| Gurning et al. | Determination of total tannins and antibacterial activities ethanol extraction seri (Muntingia calabura L.) leaves | |
| ES2219400T3 (en) | ANTIBACTERIAL POSES. | |
| Bhat et al. | Pharmacognostic and physiochemical studies of Artocarpus heterophyllus seeds | |
| Lutgen | Tannins in Artemisia: The hidden treasure of prophylaxis | |
| Igwenyi et al. | Phytochemical analysis and determination of vitamin contents of Geranium robertianum | |
| ES2273676T3 (en) | SOLUBLE CONCENTRATES OF NATURAL AND NUTRACEIC COLORS ANTIOMICROBIALS BASED ON PLANTS. | |
| Shariatifar et al. | Antibacterial activity of aqueous and ethanolic extracts of Echium amoenum on food-borne pathogens | |
| Enitan et al. | Antibacterial activity of methanolic leaf extract of Plukenetia conophora Mull. arg. against selected bacteria isolated from urinary tract infection | |
| CN107913234A (en) | A kind of savatier monochasma herb toothpaste and preparation method thereof | |
| Thomas et al. | Banana peel: pharmacological activities: a Review | |
| ES2349951T3 (en) | FERMENTATION OF SOLUTIONS WITH CONTENTS IN GRANADA JUICE BY MEANS OF SACCHAROMYCES BOULARDII AND LACTOBACILOS TO OBTAIN FERMENTED PRODUCTS AND THE USE OF THEM. | |
| Madhusudhan et al. | Store in nature-A medium for avulsed tooth. | |
| Al-Jbouri et al. | Evaluation of antimicrobial activity of the aquatic extract against bacterial isolates from periodontitis in Babylon Province, Iraq | |
| CN111557889A (en) | Rose anthocyanin mouthwash and preparation method thereof | |
| Ahmed et al. | Pharmacology, nutrition value and therapeutic potential of honey: A review | |
| Iqbal et al. | Natural Approach Used for urinary tract infections | |
| Iwuji et al. | Antimicrobial activities of sweet orange (Citrus sinensis) juice on isolated Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas spp. and Klebsiella spp |