ES2268137T3 - Disposicion optica y microscopio de barrido. - Google Patents
Disposicion optica y microscopio de barrido. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2268137T3 ES2268137T3 ES02791475T ES02791475T ES2268137T3 ES 2268137 T3 ES2268137 T3 ES 2268137T3 ES 02791475 T ES02791475 T ES 02791475T ES 02791475 T ES02791475 T ES 02791475T ES 2268137 T3 ES2268137 T3 ES 2268137T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- acoustic
- optical
- optical component
- light beam
- compensation element
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/0004—Microscopes specially adapted for specific applications
- G02B21/002—Scanning microscopes
- G02B21/0024—Confocal scanning microscopes (CSOMs) or confocal "macroscopes"; Accessories which are not restricted to use with CSOMs, e.g. sample holders
- G02B21/0032—Optical details of illumination, e.g. light-sources, pinholes, beam splitters, slits, fibers
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/0004—Microscopes specially adapted for specific applications
- G02B21/002—Scanning microscopes
- G02B21/0024—Confocal scanning microscopes (CSOMs) or confocal "macroscopes"; Accessories which are not restricted to use with CSOMs, e.g. sample holders
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/0004—Microscopes specially adapted for specific applications
- G02B21/002—Scanning microscopes
- G02B21/0024—Confocal scanning microscopes (CSOMs) or confocal "macroscopes"; Accessories which are not restricted to use with CSOMs, e.g. sample holders
- G02B21/008—Details of detection or image processing, including general computer control
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Computer Vision & Pattern Recognition (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
- Optical Modulation, Optical Deflection, Nonlinear Optics, Optical Demodulation, Optical Logic Elements (AREA)
Abstract
Disposición óptica para la separación espacial de un rayo de luz de iluminación (11) y de un rayo de luz de detección (29), que discurre en dirección opuesta, con un componente acústico-óptico (13) y con un elemento de compensación (31), que compensa una división, provocada por el componente acústico-óptico (13) mediante birrefringencia, del rayo de luz de detección (29) al pasar una vez, y en que el componente acústico-óptico (13) y el elemento de compensación (31) están dispuestos de tal modo que el rayo de luz de iluminación (11) sólo recorre el componente acústico-óptico (13), caracterizada porque el elemento de compensación (31) y el componente acústico-óptico (13) tienen la misma forma exterior, están hechos del mismo material y tienen la misma estructura de cristal, porque el elemento de compensación (31) es otro componente acústico-óptico (33), y porque el elemento de compensación (31) y el componente acústico- óptico (13) están orientados de forma girada en 180 grados entre sí en lo que respecta a la dirección de propagación del rayo de luz de detección (29) que incide sobre el componente acústico-óptico.
Description
Disposición óptica y microscopio de barrido.
La invención se refiere a una disposición óptica
para la separación espacial de un rayo de luz de iluminación y de
un rayo de luz de detección con un componente acústico-óptico y con
un elemento de compensación, que compensa una división, provocada
por el componente acústico-óptico mediante birrefringencia, del rayo
de luz de detección al pasar una vez.
En el microscopio de barrido, una muestra es
iluminada con un rayo de luz, para observar la luz de detección
emitida por la muestra, como luz de reflexión o luz fluorescente. El
foco de un rayo de luz de iluminación es movido con ayuda de una
disposición de desviación de rayos controlable, en general mediante
inclinación de dos espejos, en un plano de muestra, en que los ejes
de desviación están situados la mayoría de las veces
perpendicularmente uno respecto a otro, de forma que un espejo
desvía en la dirección x y el otro en la dirección y.
La inclinación de los espejos se lleva a cabo por ejemplo con ayuda
de elementos de ajuste por galvanómetro. La potencia de la luz de
detección procedente del objeto es medida en función de la posición
del rayo de exploración. Habitualmente, los elementos de ajuste son
equipados con sensores para la determinación de la posición actual
del espejo. La luz de iluminación es introducida por acoplamiento a
través de un divisor de rayos. La luz fluorescente o de reflexión
procedente del objeto atraviesa el divisor de rayos y llega
finalmente a los detectores.
Especialmente en la microscopía de barrido
confocal, un objeto es explorado en tres dimensiones con el foco de
un rayo de luz.
Un microscopio de barrido confocal comprende en
general una fuente de luz, un sistema óptico de enfoque, con el que
la luz de la fuente es enfocada sobre un diafragma de agujero - el
denominado diafragma de excitación -, un divisor de rayos, una
disposición de desviación de rayos para el control de rayos, un
sistema óptico de microscopio, un diafragma de detección y los
detectores para la identificación de la luz de detección o
respectivamente fluorescente. La luz de iluminación es introducida
por acoplamiento a través de un divisor de rayos. La luz de
reflexión o fluorescente procedente del objeto llega a través de la
disposición de desviación de rayos de vuelta al divisor de rayos,
atraviesa éste, para ser enfocada a continuación sobre el diafragma
de detección, tras el cual se encuentran los detectores. Esta
disposición de detección se denomina disposición para descomponer
el barrido (del inglés "descan"). La luz de detección, que no
procede directamente de la región del foco, adopta otro camino de
luz y no atraviesa el diafragma de detección, de forma que se
obtiene una información puntual, que mediante una exploración
secuencial del objeto con el foco del rayo de luz de iluminación
conduce a una imagen tridimensional. La mayoría de las veces se
consigue una imagen tridimensional mediante recogida de datos de
imagen por capas.
A partir del documento de publicación DE 199 06
757 A1 de Leica es conocida una disposición óptica en la trayectoria
de rayos de una fuente de luz apropiada para la excitación de
fluorescencia, preferentemente en la trayectoria de rayos de un
microscopio de barrido láser confocal, con al menos un elemento
espectralmente selectivo para la introducción por acoplamiento de
la luz de excitación de al menos una fuente de luz en el microscopio
y para extraer la luz de excitación dispersada y reflejada en el
objeto o respectivamente la longitud de onda de excitación a partir
de la luz procedente del objeto a través de la trayectoria de rayos
de detección. La disposición, para una estructuración variable con
la construcción más sencilla, está caracterizada por el hecho de
que mediante el elemento espectralmente selectivo puede extraerse
luz de excitación de diferente longitud de onda. Alternativamente,
una disposición óptica así está caracterizada porque el elemento
espectralmente selectivo puede ajustarse a la longitud de onda de
excitación a extraer. Además, en el citado documento se declara que
el elemento espectralmente selectivo puede estar realizado como
filtro acústico-óptico sintonizable (AOTF, del inglés
"Acousto-Optical-Tunable-Filter")
o como deflector acústico-óptico (AOD, del inglés
"Acousto-Optical-Deflector").
En el citado documento de publicación se describe que el elemento
espectralmente selectivo puede provocar un desdoblamiento
espacialmente espectral, que puede compensarse por ejemplo con otros
tres componentes ópticos.
A partir del documento de publicación DE 198 59
314 A1 se conoce una disposición de un elemento difractor de luz
para la separación de luz de excitación y de emisión en una
trayectoria de rayos de microscopio, preferentemente en un
microscopio confocal, y en particular en un microscopio de barrido
láser, en que el elemento difractor de luz es recorrido tanto por
la luz de excitación como por la luz de emisión y afecta mediante
difracción al menos a una longitud de onda de la excitación,
mientras que otras longitudes de onda emitidas por la muestra
recorren el elemento sin ser afectadas y son separadas con ello
espacialmente de la luz de excitación. La disposición contiene un
filtro AOTF.
A partir del documento de publicación DE 199 44
355 A1 es conocida una disposición óptica en la trayectoria de
rayos de un microscopio de barrido láser, con al menos un elemento
espectralmente selectivo ajustable a la longitud de onda de la luz
de excitación de una fuente de luz, cuyo elemento introduce por
acoplamiento en el microscopio luz de excitación de la fuente de
luz, extrae de la trayectoria de rayos de detección la luz de
excitación dispersada y reflejada en un objeto y no extrae la luz de
detección procedente del objeto. La disposición óptica, para la
simplificación constructiva de la disposición conocida así como para
una ampliación de las variantes de detección posibles hasta ahora,
está caracterizada porque tras el elemento está dispuesto otro
componente óptico, tras cuyo recorrido son detectables las
propiedades de dispersión y/o de birrefringencia de la luz de
detección y en una estructuración preferida están unificadas
coaxialmente.
Los microscopios de barrido citados tienen,
frente a microscopios de barrido en los que la división de la luz
de iluminación y la luz de detección está realizada con un divisor
de rayos, la ventaja de la flexibilidad espectral, ya que el
componente acústico-óptico puede ajustarse mediante control con
ondas de sonido de diferente frecuencia a cada longitud de onda
óptica arbitraria para la iluminación o respectivamente la luz de
detección. Además de ello, la división espectral en estos
microscopios de barrido es mejor en mucho que en los microscopios
de barrido con divisores de rayos.
Una desventaja de las disposiciones ópticas con
un componente acústico-óptico para la separación de luz de
iluminación y de detección, y de microscopios de barrido con un
componente acústico-óptico para la separación de luz de iluminación
y de detección, consiste en que el componente acústico-óptico es
birrefringente, lo que lleva a una división perturbadora del rayo
de luz de detección. Además, el componente acústico-óptico tiene un
efecto de prisma, lo que provoca una división espectral del rayo de
luz de detección. Las disposiciones conocidas compensan estos
efectos sólo insuficientemente y asumiendo elevadas pérdidas en
potencia de luz de detección. En particular las disposiciones que
necesitan otros tres componentes ópticos para la compensación son
caras y costosas en la regulación.
La invención tiene por ello como base la tarea
de proporcionar una disposición óptica que haga posible una
separación de un rayo de luz de iluminación y de un rayo de luz de
detección con pocas pérdidas y ampliamente sin divisiones
perturbadoras.
La tarea se resuelve mediante una disposición
óptica conforme a la reivindicación 1.
La invención tiene la ventaja de poder
aprovechar ampliamente sin restricciones la universalidad y
flexibilidad de los componentes acústico-ópticos en la separación
de un rayo de luz de iluminación y de un rayo de luz de
detección.
En una estructuración preferida del microscopio
de barrido o respectivamente de la disposición óptica, el
componente acústico-óptico está estructurado como filtro AOTF
(filtro acústico-óptico sintonizable). También es realizable una
forma de estructuración con un deflector AOD (deflector
acústico-óptico) o con un modulador AOM (modulador acústico-óptico,
del inglés
"Acousto-Optical-Modulator").
El elemento acústico-óptico es recorrido por una onda acústica, que
interacciona en función de su frecuencia sólo con luz de una
longitud de onda. La luz de otras longitudes de onda permanece
inalterada por la onda acústica. La onda acústica es generada
preferentemente por un generador de sonido piezoeléctrico controlado
eléctricamente, que está controlado por una fuente de alta
frecuencia. La frecuencia de la alta frecuencia se escoge de tal
modo que sólo llegan a la muestra las partes con la longitud de
onda escogida del rayo de luz de iluminación. Las restantes partes,
no afectadas por la excitación acústica, del rayo de luz de
iluminación son conducidas a una trampa para rayos. Mediante
variación de la amplitud de las ondas acústicas puede seleccionarse
la potencia del rayo desacoplado del rayo de luz de iluminación.
Cuando el rayo de luz de detección contiene fluorescencia, que según
las leyes naturales está desplazada en longitud de onda respecto al
rayo de luz de iluminación, el rayo de luz de detección atraviesa
el componente acústico-óptico sin ser afectado por la onda
sonora.
En una estructuración preferida, el elemento de
compensación compensa al menos ampliamente una división, provocada
mediante dispersión por el componente acústico-óptico, del rayo de
luz de detección. En una realización particularmente sencilla, las
superficies limitadoras del elemento de compensación están
dispuestas de tal modo que el rayo de luz de detección,
espectralmente dividido y que diverge en abanico, discurre al menos
paralelamente tras recorrer el elemento de compensación. La
separación del componente acústico-óptico y del elemento de
compensación se escoge en esta realización lo más pequeña posible,
para evitar una división espacial demasiado grande del rayo de luz
de detección entre el componente acústico-óptico y el elemento de
compensación. Son aceptables divisiones espaciales en el orden de
magnitud de medio diámetro de rayo.
En una realización muy particularmente
preferida, el elemento de compensación y el componente
acústico-óptico tienen la misma forma exterior. El elemento de
compensación y el componente acústico-óptico están orientados de
forma girada en 180 grados entre sí en lo que respecta a la
dirección de propagación del rayo de luz de detección que incide
sobre el componente acústico-óptico. Por regla general, el elemento
de compensación así orientado está desplazado lateralmente respecto
al eje definido por la dirección de propagación del rayo de luz de
detección que incide sobre el componente acústico-óptico, para que
el rayo de luz de detección incida sobre el elemento de
compensación. Preferentemente, el elemento de compensación está
hecho del mismo material que el componente acústico-óptico y tiene
la misma estructura de cristal. Se elimina la división, provocada
por las propiedades birrefringentes del componente acústico-óptico,
del rayo de luz de detección en rayos parciales de diferente
polarización.
En una estructuración preferida, el componente
acústico-óptico no sólo está controlado con la primera alta
frecuencia correspondiente a la longitud de onda deseada del rayo de
luz de iluminación, ya que esto sólo extrae completamente las
partes con la longitud de onda del rayo de luz de iluminación con
una dirección de polarización. Las partes con la otra dirección de
polarización son extraídas ampliamente sin restos mediante control
del componente acústico-óptico con otra alta frecuencia, que se
diferencia de la primera alta frecuencia.
En otra forma de realización, el elemento de
compensación es otro componente acústico-óptico. Es muy
particularmente ventajoso controlar el elemento de compensación
también con una alta frecuencia, para extraer partes, restantes en
el rayo de luz de detección, con la longitud de onda del rayo de luz
de iluminación.
En otra forma de realización está prevista una
estabilización de temperatura del componente acústico-óptico o
respectivamente del elemento de compensación. En otra variante de
realización, para evitar las desventajas por oscilaciones de
temperatura o por oscilaciones de la longitud de onda del rayo de
luz de iluminación está previsto controlar o regular la alta
frecuencia en función de la temperatura. Otra variante prevé para la
consecución de este objetivo controlar o regular la longitud de
onda del rayo de luz de iluminación en función de la
temperatura.
En una estructuración preferida, tras el
componente acústico-óptico y el elemento de compensación está
dispuesto un dispositivo para la generación de un desplazamiento de
rayo. A través de ello se consigue que el eje del rayo de luz de
detección, al entrar en la disposición óptica, sea coaxial o al
menos paralelo al eje de rayos al salir. Esto simplifica la
capacidad de regulación de la disposición óptica o respectivamente
del microscopio de barrido; además de ello, la disposición en un
microscopio de barrido en esta estructuración es más fácilmente
sustituible por un divisor de rayos convencional.
En una realización particularmente preferida, el
componente acústico-óptico está ligado al elemento de compensación.
En otra realización está previsto un elemento intermedio que está
ligado al componente acústico-óptico y al elemento de compensación.
Las realizaciones ligadas tienen la ventaja de que pueden evitarse
ampliamente pérdidas de potencia luminosa por reflexiones en las
superficies limitadoras orientadas una hacia otra del componente
acústico-óptico y del elemento de compensación. En el elemento
intermedio está prevista preferentemente una ventana de entrada
para un rayo de luz de
iluminación.
iluminación.
En el dibujo, el objeto de la invención está
representado esquemáticamente y es descrito a continuación con
ayuda de las figuras, en que elementos con igual efecto están
dotados del mismo número de referencia. Aquí muestran:
la figura 1 un microscopio de barrido conforme
a la invención,
la figura 2 una disposición óptica conforme a
la invención,
la figura 3 otra disposición óptica,
la figura 4 otra disposición óptica y
la figura 5 otra disposición óptica.
La figura 1 muestra un microscopio de barrido
conforme a la invención, que está realizado como microscopio de
barrido confocal, con dos láseres 1, 3, cuyos rayos de luz de
emisión 5, 7, que tienen longitudes de onda diferentes, son
unificados en un rayo de luz de iluminación 11 con el unificador de
rayos dicroico 9. El microscopio de barrido tiene un componente
acústico-óptico 13 que está realizado como filtro AOTF 15. El rayo
de luz de iluminación 11 es reflejado por un espejo de redirección
12 hacia el componente acústico-óptico 13. Desde el componente
acústico-óptico 13, el rayo de luz de iluminación 11 llega a una
disposición de desviación de rayos 17, que contiene un espejo de
barrido 19 con suspensión de cardán, y que guía el rayo de luz de
iluminación 11 a través del sistema óptico de barrido 21, el
sistema óptico localizador 23 y el objetivo 25 sobre o a través de
la muestra 27. El rayo de luz de detección 29 procedente de la
muestra recorre en la dirección inversa el sistema óptico de
barrido 21, el sistema óptico localizador 23 y el objetivo 25 y
llega por el espejo de barrido 19 al componente acústico-óptico 13,
que conduce el rayo de luz de detección 29 a un elemento de
compensación 31, que está realizado como otro componente
acústico-óptico 33. Tras recorrer el elemento de compensación 31,
el rayo de luz de detección 29 incide sobre una pareja de espejos
compuesta por un primer espejo 35 y un segundo espejo 37. La pareja
de espejos sirve para llevar el rayo de luz de detección 29 al eje
de rayos deseado, a saber el eje de rayos que define el rayo de luz
de detección 29 al salir de la disposición de desviación de rayos
17. La pareja de espejos conduce el rayo de luz de detección 29 al
detector 39, que está realizado como detector de múltiples bandas.
El rayo de luz de iluminación 11 está representado en el dibujo como
línea continua y el rayo de luz de detección 29 como línea
discontinua. El estenopo (del inglés "pinhole") de iluminación
41 previsto habitualmente en un microscopio de barrido confocal y el
estenopo de detección 43 están dibujados esquemáticamente por
motivos de completitud. No se han incluido para una mejor
visibilidad por el contrario algunos elementos ópticos para guiar y
conformar los rayos de luz. Éstos son conocidos suficientemente para
un experto activo en este campo. El componente acústico-óptico 13,
que sirve para seleccionar las partes del rayo de luz de
iluminación con las longitudes de onda escogidas, está estructurado
como filtro AOTF 15, que está recorrido por una onda acústica. La
onda acústica es generada por un generador de sonido piezoeléctrico
45 controlado eléctricamente. El control se produce desde una fuente
de alta frecuencia 47, que genera una onda electromagnética de alta
frecuencia, que tiene varios valores de alta frecuencia ajustables.
La transmisión de la onda electromagnética de alta frecuencia se
produce a través de un cable coaxial 48. Los valores de alta
frecuencia se escogen de tal modo que sólo llegan a la disposición
de desviación de rayos 17 las partes con las longitudes de onda
deseadas del rayo de luz de iluminación 11. Las restantes partes, no
afectadas por la excitación acústica, del rayo de luz de
iluminación 11 son conducidas a una trampa para rayos 49. Mediante
variación de la amplitud de la onda acústica puede escogerse la
potencia de la luz con las longitudes de onda deseadas del rayo de
luz de iluminación 11. El corte de cristal y la orientación del
componente acústico-óptico 13 se escogen aquí de tal modo que para
una misma dirección de introducción por acoplamiento son desviadas
varias longitudes de onda en la misma dirección. El otro componente
acústico-óptico 33 está realizado igualmente como filtro AOTF y es
controlado por otra fuente de alta frecuencia 51 con otra onda
electromagnética de alta frecuencia. El valor de alta frecuencia de
la otra onda electromagnética de alta frecuencia se escoge de tal
modo que las partes del rayo de luz de detección 29, que tienen la
longitud de onda del rayo de luz de iluminación 11, son extraídas.
Para escoger los valores de alta frecuencia está previsto un
ordenador 53. El ordenador 53 controla correspondientemente a la
indicación del usuario la fuente de alta frecuencia 47 y la otra
fuente de alta frecuencia 51. El usuario lleva a cabo ajustes con
ayuda del ratón 55 del ordenador. Sobre el monitor 57 se representa
un cursor 59, 61, 63 para cada valor de alta frecuencia
seleccionado, cuyo cursor sirve para el ajuste de la
amplitud.
amplitud.
La figura 2 muestra una disposición óptica
conforme a la invención. El rayo de luz de iluminación 11 polarizado
linealmente, que tiene una dirección de polarización sagital, es
reflejado por un espejo de redirección 12 hacia un componente
acústico-óptico 13, que está realizado como filtro AOTF 15. El
componente acústico-óptico 13, que sirve para seleccionar las
partes del rayo de luz de iluminación con las longitudes de onda
seleccionadas, está estructurado como filtro AOTF 15, que es
recorrido por una onda acústica. La onda acústica es generada por
un generador de sonido piezoeléctrico 45 controlado eléctricamente.
El control se produce desde una fuente de alta frecuencia 47, que
genera una onda electromagnética de alta frecuencia, que tiene
varios valores de alta frecuencia ajustables. La transmisión de la
onda electromagnética de alta frecuencia se produce a través de un
cable coaxial 48. El rayo de luz de iluminación 11 abandona el
elemento acústico-óptico 13 con una dirección de polarización
girada en 90 grados, es decir con una dirección de polarización
tangencial. De forma coaxial con el rayo de luz de iluminación 11
saliente entra un rayo de luz de detección 29 en el componente
acústico-óptico. El rayo de luz de detección tiene tanto partes con
dirección de polarización sagital como partes con dirección de
polarización tangencial. El rayo de luz de detección recorre el
filtro AOTF 15, en que las partes que tienen la longitud de onda
del rayo de luz de iluminación son ampliamente extraídas. La
extracción es sin embargo sólo completa para las partes con
dirección de polarización tangencial. Tras recorrer el filtro AOTF
15, el rayo de luz de detección 29 incide sobre un elemento de
compensación 31, que está realizado como otro componente
acústico-óptico 33. El otro componente acústico-óptico 33 está
realizado igualmente como filtro AOTF y es controlado por otra
fuente de alta frecuencia 51 con otra onda electromagnética de alta
frecuencia. El valor de alta frecuencia de la onda electromagnética
de alta frecuencia está escogido de tal modo que las partes del
rayo de luz de detección 29 que tienen la longitud de onda del rayo
de luz de iluminación 11 y una dirección de polarización sagital
son extraídas. La generación de la onda sonora se produce en el
elemento de compensación 31 igualmente con un generador de sonido
piezoeléctrico 65 controlado eléctricamente. El elemento de
compensación 31 y el componente acústico-óptico 13 tienen la misma
forma exterior y la misma estructura de cristal. El elemento de
compensación 31 y el componente acústico-óptico 13 están orientados
de forma girada en 180 grados entre sí en lo que respecta a la
dirección de propagación del rayo de luz de detección 29 que incide
sobre el componente acústico-óptico. Por regla general, el elemento
de compensación así orientado está desplazado lateralmente respecto
al eje definido por la dirección de propagación del rayo de luz de
detección que incide sobre el componente acústico-óptico, para que
el rayo de luz de detección incida sobre el elemento de
compensación.
La figura 3 muestra otra disposición óptica, que
corresponde esencialmente a la disposición descrita en la figura 2.
Adicionalmente está previsto como dispositivo para la generación de
un desplazamiento de rayo una pareja de espejos 67. Tras recorrer
el elemento de compensación 31, el rayo de luz de detección 29
incide sobre la pareja de espejos 67 compuesta por un primer espejo
35 y un segundo espejo 37. La pareja de espejos sirve para llevar
el rayo de luz de detección 29 al eje 69 deseado.
La figura 4 muestra otra disposición óptica. En
esta disposición está previsto un elemento intermedio 71, que está
ligado al componente acústico-óptico 13 y al elemento de
compensación 31. En esta disposición no se llega a reflexiones
perturbadoras en las superficies limitadoras, orientadas una hacia
otra, del elemento de compensación 31 y del componente
acústico-óptico 13. El índice de refracción del elemento intermedio
71 y el del aglutinante están adaptados al índice de refracción del
elemento de compensación 31 y del componente acústico-óptico 13.
Tras el elemento de compensación 31 está dispuesto como dispositivo
para la generación de un desplazamiento de rayo un bloque de vidrio
73 con el índice de refracción más elevado posible, que por un lado
refracta el rayo de luz de detección 29 hacia el eje deseado y por
otro lado compensa una división espectral provocada por el
componente acústico-óptico 13 o por el elemento de
compensación
31.
31.
La figura 5 muestra otra disposición óptica. El
componente acústico-óptico está conformado en esta disposición de
tal modo que el rayo de luz de iluminación que entra en el
componente acústico-óptico y el rayo de luz de detección que sale
del componente tienen respectivamente una ventana de entrada o
respectivamente de salida propia. Esta disposición óptica tiene la
ventaja de que el rayo de luz de detección sufre ciertamente un
desdoblamiento espectral, pero el rayo de luz de detección
desdoblado discurre sin embargo prácticamente de forma paralela
entre el componente acústico-óptico y el componente de compensación,
lo que mejora la compensación mediante el elemento de
compensa-
ción.
ción.
La invención ha sido descrita con referencia a
una forma de realización particular. Es sin embargo evidente que
pueden realizarse variaciones y modificaciones sin abandonar con
ello el campo de protección de las reivindicaciones siguientes.
- 1
- Láser
- 3
- Láser
- 5
- Rayo de luz de emisión
- 7
- Rayo de luz de emisión
- 9
- Unificador de rayos
- 11
- Rayo de luz de iluminación
- 12
- Espejo de redirección
- 13
- Componente acústico-óptico
- 15
- Filtro AOTF
- 17
- Disposición de desviación de rayos
- 19
- Espejo de barrido
- 21
- Sistema óptico de barrido
- 23
- Sistema óptico localizador
- 25
- Objetivo
- 27
- Muestra
- 29
- Rayo de luz de detección
- 31
- Elemento de compensación
- 33
- Otro componente acústico-óptico
- 35
- Primer espejo
- 37
- Segundo espejo
- 39
- Detector
- 41
- Estenopo de iluminación
- 43
- Estenopo de detección
- 45
- Generador de sonido piezoeléctrico
- 47
- Fuente de alta frecuencia
- 48
- Cable coaxial
- 49
- Trampa para rayos
- 51
- Otra fuente de alta frecuencia
- 53
- Ordenador
- 55
- Ratón del ordenador
- 57
- Monitor
- 59
- Cursor
- 61
- Cursor
- 63
- Cursor
- 65
- Generador de sonido piezoeléctrico
- 67
- Pareja de espejos
- 69
- Eje
- 71
- Elemento intermedio
- 73
- Bloque de vidrio
Claims (8)
1. Disposición óptica para la separación
espacial de un rayo de luz de iluminación (11) y de un rayo de luz
de detección (29), que discurre en dirección opuesta, con un
componente acústico-óptico (13) y con un elemento de compensación
(31), que compensa una división, provocada por el componente
acústico-óptico (13) mediante birrefringencia, del rayo de luz de
detección (29) al pasar una vez, y en que el componente
acústico-óptico (13) y el elemento de compensación (31) están
dispuestos de tal modo que el rayo de luz de iluminación (11) sólo
recorre el componente acústico-óptico (13), caracterizada
porque el elemento de compensación (31) y el componente
acústico-óptico (13) tienen la misma forma exterior, están hechos
del mismo material y tienen la misma estructura de cristal, porque
el elemento de compensación (31) es otro componente acústico-óptico
(33), y porque el elemento de compensación (31) y el componente
acústico-óptico (13) están orientados de forma girada en 180 grados
entre sí en lo que respecta a la dirección de propagación del rayo
de luz de detección (29) que incide sobre el componente
acústico-
óptico.
óptico.
2. Disposición óptica según la reivindicación 1,
caracterizada porque el componente acústico-óptico (13) es
un filtro acústico-óptico sintonizable (AOTF, del inglés
"Acousto-Optical-Tunable-Filter")
o un deflector acústico-óptico (AOD, del inglés
"Acousto-Optical-Deflector") o
un modulador acústico-óptico (AOM, del inglés
"Acousto-Optical-Modulator").
3. Disposición óptica según la reivindicación 1,
caracterizada porque el elemento de compensación (31)
compensa una división, provocada mediante dispersión por el
componente acústico-óptico (13), del rayo de luz de detección
(29).
4. Disposición óptica según la reivindicación 1,
caracterizada porque tras el componente acústico-óptico (13)
y el elemento de compensación (31) está dispuesto un dispositivo
para la generación de un desplazamiento de rayo.
5. Disposición óptica según una de las
reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizada porque el
componente acústico-óptico (13) y el elemento de compensación (31)
están ligados entre sí.
6. Disposición óptica según una de las
reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizada porque entre el
componente acústico-óptico (13) y el elemento de compensación (31)
está previsto un elemento intermedio, que está ligado al componente
acústico-óptico (13) y al elemento de compensación (31).
7. Disposición óptica según una de las
reivindicaciones 1 hasta 6, caracterizada porque el elemento
de compensación puede ser controlado con una alta frecuencia, para
extraer partes restantes en el rayo de luz de detección con la
longitud de onda del rayo de luz de iluminación.
8. Microscopio de barrido con una disposición
óptica según una de las reivindicaciones 1 hasta 7.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE10137155 | 2001-07-30 | ||
DE10137155A DE10137155B4 (de) | 2001-07-30 | 2001-07-30 | Optische Anordnung und Scanmikroskop |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2268137T3 true ES2268137T3 (es) | 2007-03-16 |
Family
ID=7693636
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES02791475T Expired - Lifetime ES2268137T3 (es) | 2001-07-30 | 2002-07-26 | Disposicion optica y microscopio de barrido. |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6967764B2 (es) |
EP (1) | EP1421427B1 (es) |
JP (1) | JP4573528B2 (es) |
DE (2) | DE10137155B4 (es) |
ES (1) | ES2268137T3 (es) |
WO (1) | WO2003012516A1 (es) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB0308072D0 (en) * | 2003-04-08 | 2003-05-14 | Visitech Internat Ltd | Fast multi-line laser confocal scanning microscope |
DE10324331A1 (de) * | 2003-05-27 | 2004-12-30 | Leica Microsystems Heidelberg Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zur Regelung der Lichtleistung in einem Mikroskop, insbesondere in einem konfokalen Laserscanmikroskop |
US7045772B2 (en) | 2003-05-27 | 2006-05-16 | Leica Microsystems Heidelberg Gmbh | Device and method for controlling the optical power in a microscope |
DE10334145A1 (de) * | 2003-07-26 | 2005-02-24 | Leica Microsystems Heidelberg Gmbh | Rastermikroskop |
DE102004030208B3 (de) * | 2004-06-22 | 2005-12-15 | Leica Microsystems Heidelberg Gmbh | Auflichtmikroskop |
JP4987225B2 (ja) * | 2004-12-07 | 2012-07-25 | オリンパス株式会社 | 顕微鏡装置 |
DE102005020545A1 (de) * | 2005-05-03 | 2006-11-09 | Carl Zeiss Jena Gmbh | Vorrichtung zur Steuerung von Lichtstrahlung |
DE102005020543A1 (de) | 2005-05-03 | 2006-11-09 | Carl Zeiss Jena Gmbh | Verfahren und Vorrichtung zur einstellbaren Veränderung von Licht |
JP2007183111A (ja) * | 2006-01-04 | 2007-07-19 | Nikon Corp | 光強度検出装置とこれを有する光学装置、顕微鏡 |
JP4885685B2 (ja) * | 2006-11-06 | 2012-02-29 | オリンパス株式会社 | 光学装置および顕微鏡 |
DE102007028337B4 (de) * | 2007-06-15 | 2019-08-29 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Strahlvereiniger und eine Lichtquelle mit einem derartigen Strahlvereiniger |
DE102007053199A1 (de) | 2007-11-06 | 2009-05-14 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zur Ansteuerung eines akustooptischen Bauteils |
DE102009008251B4 (de) * | 2009-02-02 | 2013-05-02 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Flexibel verschiebbare Kopplungseinrichtung für die akustisch angeregte Rasterkraftmikroskopie mit akustischer Anregung der Probe |
US9229294B2 (en) | 2010-05-06 | 2016-01-05 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Apparatus and method for operating an acousto-optical component |
US8610996B2 (en) | 2010-05-06 | 2013-12-17 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Tunable multiple laser pulse scanning microscope and method of operating the same |
KR101246867B1 (ko) * | 2011-07-05 | 2013-03-25 | 서강대학교산학협력단 | 음향광학장치를 이용한 국부기울기 주사 간섭 현미경 |
DE102013227103B4 (de) * | 2013-09-03 | 2018-05-30 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Mikroskop mit einer akustooptischen Vorrichtung |
DE102013227105A1 (de) * | 2013-09-03 | 2015-03-05 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Mikroskop und akustooptischer Strahlvereiniger für ein Mikroskop |
DE102013227104B4 (de) | 2013-09-03 | 2018-05-30 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Scanmikroskop und akustooptischer Hauptstrahlteiler für ein Scanmikroskop |
DE102013227107A1 (de) * | 2013-09-03 | 2015-03-05 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Mikroskop mit einem Element zum Verändern der Form des Beleuchtungslichtfokus |
CN103592803B (zh) * | 2013-11-13 | 2016-08-24 | 华中科技大学 | 基于声光偏转器的多色激光束动态补偿同步扫描方法 |
CN110187487B (zh) * | 2019-06-13 | 2021-07-27 | 福建师范大学 | 单波长双光子sted与双波长单光子sted耦合成像装置及方法 |
JP2023537415A (ja) | 2020-08-11 | 2023-08-31 | ライカ マイクロシステムズ シーエムエス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | ビームスプリッティングデバイス |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4332441A (en) * | 1980-05-15 | 1982-06-01 | Nasa | Coherently pulsed laser source |
US4541694A (en) * | 1982-03-27 | 1985-09-17 | Rediffusion Simulation Limited | Acousto-optic scanners |
US5251058A (en) | 1989-10-13 | 1993-10-05 | Xerox Corporation | Multiple beam exposure control |
BE1007876A4 (nl) * | 1993-12-17 | 1995-11-07 | Philips Electronics Nv | Stralingsbron-eenheid voor het opwekken van een bundel met twee polarisatierichtingen en twee frequenties. |
US5796512A (en) * | 1996-02-16 | 1998-08-18 | Carnegie Mellon University | Subicron imaging system having an acousto-optic tunable filter |
DE19906757B4 (de) * | 1998-02-19 | 2004-07-15 | Leica Microsystems Heidelberg Gmbh | Mikroskop |
EP1055144B1 (de) * | 1998-02-19 | 2015-01-14 | Leica Microsystems CMS GmbH | Optische anordnung mit spektral selektivem element |
DE19859314A1 (de) | 1998-12-22 | 2000-06-29 | Zeiss Carl Jena Gmbh | Anordnung zur Separierung von Anregungs- und Emissionslicht in einem Mikroskop |
US6512588B1 (en) * | 1999-05-05 | 2003-01-28 | Zygo Corporation | Method and system for correcting an interferometric angle measurement for the effects of dispersion |
US6157660A (en) * | 1999-06-04 | 2000-12-05 | Zygo Corporation | Apparatus for generating linearly-orthogonally polarized light beams |
DE19944355B4 (de) * | 1999-09-16 | 2004-11-18 | Leica Microsystems Heidelberg Gmbh | Optische Anordnung |
-
2001
- 2001-07-30 DE DE10137155A patent/DE10137155B4/de not_active Expired - Fee Related
-
2002
- 2002-07-26 WO PCT/EP2002/008380 patent/WO2003012516A1/de active IP Right Grant
- 2002-07-26 JP JP2003517649A patent/JP4573528B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2002-07-26 DE DE50207447T patent/DE50207447D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-07-26 EP EP02791475A patent/EP1421427B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-07-26 US US10/485,426 patent/US6967764B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-07-26 ES ES02791475T patent/ES2268137T3/es not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE10137155A1 (de) | 2003-02-27 |
EP1421427B1 (de) | 2006-07-05 |
DE10137155B4 (de) | 2006-11-30 |
US20040174585A1 (en) | 2004-09-09 |
WO2003012516A1 (de) | 2003-02-13 |
JP2004537747A (ja) | 2004-12-16 |
US6967764B2 (en) | 2005-11-22 |
DE50207447D1 (de) | 2006-08-17 |
EP1421427A1 (de) | 2004-05-26 |
JP4573528B2 (ja) | 2010-11-04 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2268137T3 (es) | Disposicion optica y microscopio de barrido. | |
JP7002407B2 (ja) | 波長同調発信源装置 | |
US8047985B2 (en) | Compact confocal endoscope and endomicroscope method and apparatus | |
ES2766273T3 (es) | Concentrador de haz y una fuente de luz con un concentrador de haz | |
ES2672633T3 (es) | Elemento filtrante acusto-óptico sintonizable | |
US6369928B1 (en) | Fiber-coupled, angled-dual-illumination-axis confocal scanning microscopes for performing reflective and two-photon fluorescence imaging | |
AU2018229081B2 (en) | Optical Scanner and Scanned Lens Optical Probe | |
JP4854878B2 (ja) | レーザー顕微鏡 | |
US6898367B2 (en) | Method and instrument for microscopy | |
US6351325B1 (en) | Fiber-coupled, angled-dual-axis confocal scanning microscopes for imaging in a scattering medium | |
JP2007504499A (ja) | 複数の微細構造光学要素を有する光源 | |
JPH0748091B2 (ja) | 立体顕微鏡用プリズム系及び立体顕微鏡 | |
JP2008033264A (ja) | 走査型レーザ顕微鏡 | |
CA2861716A1 (en) | Compensator system and method for compensating angular dispersion | |
US7385693B2 (en) | Microscope apparatus | |
JPH11119106A (ja) | レーザ走査型顕微鏡 | |
JP2016532904A (ja) | 顕微鏡及び顕微鏡用の音響光学ビームコンバイナ | |
US7016101B2 (en) | Scanning microscope and optical element | |
ES2732423T3 (es) | Método para escanear a lo largo de una trayectoria de escaneo continuo con un sistema de escáner | |
CN113325563B (zh) | 一种具有大视场的多色三维超分辨膨胀显微镜*** | |
US11448551B2 (en) | Optical arrangement for a spectroscopic imaging method and spectroscopic imaging method | |
US6836359B2 (en) | Microscope and segmenting device for a microscope | |
JP4406108B2 (ja) | 多光子励起レーザ顕微鏡 | |
JP4106139B2 (ja) | 高解像マクロスコープ | |
US10473905B2 (en) | Microscope having an optical coherence tomography device |