ES2257756T3 - Nuevos profarmacos para la terapia de tumores y enfermedades inflamatorias. - Google Patents

Nuevos profarmacos para la terapia de tumores y enfermedades inflamatorias.

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ES2257756T3
ES2257756T3 ES97103162T ES97103162T ES2257756T3 ES 2257756 T3 ES2257756 T3 ES 2257756T3 ES 97103162 T ES97103162 T ES 97103162T ES 97103162 T ES97103162 T ES 97103162T ES 2257756 T3 ES2257756 T3 ES 2257756T3
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Manfred Dr. Gerken
Rainer Dr. Straub
Claude Dr. Monneret
Jean-Claude Dr. Florent
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Abstract

SE DESCRIBEN COMPUESTOS CON LA FORMULA I GLICOSIL - Y [ C(=Y) - X - ]{SUB,P} - W (R){SUB,N} - Z - C (=Y) - PRINCIPIO ACTIVO (I) APLICABLES AL TRATAMIENTO DE CANCER, ENFERMEDADES AUTOINMUNES Y ENFERMEDADES INFLAMATORIAS CRONICAS COMO LA ARTRITIS REUMATOIDE.

Description

Nuevos profármacos para la terapia de tumores y enfermedades inflamatorias.
El efecto de los fármacos (en el ámbito anglosajón, drugs) consiste con mucha frecuencia en que, en el caso de determinadas enfermedades, se inhiben enzimas, citoquinas u otros factores, que se han sobreexpresado patológicamente, en cuanto a su actividad fomentadora de la enfermedad. No obstante, el efecto inhibidor de los fármacos se extiende no solamente a las estructuras diana farmacológicas (enzimas, citoquinas, factores) en el tejido enfermo, sino que se inhiben también las actividades que se presentan en tejidos sanos. De ello resultan los efectos colaterales o secundarios indeseados, que se han observado en el caso de muchos fármacos. Con el fin de mitigar los efectos colaterales de los fármacos, se desarrollaron sistemas experimentales, que permiten una liberación más selectiva de los fármacos en el tejido enfermo. A continuación, se describen brevemente tales sistemas.
El sistema ADEPT (del inglés Antibody Directed Enzyme Prodrug Therapy = terapia con un profármaco y una enzima dirigida a anticuerpos, Bagshawe 1987, Br. J. Cancer. 56: 531-532) es un sistema de dos etapas, en el cual, en la primera etapa, se inyecta por vía intravenosa (i. v.) un conjugado de un anticuerpo y una enzima (CAE). El CAE es retenido en el tumor por causa de su selectividad para dicho tumor, pero en el transcurso de 2-7 días es separado desde los tejidos sanos. El profármaco inyectado i. v. en la segunda etapa (un precursor atóxico del fármaco) es activado en el tumor por la actividad enzimática del CAE para formar el fármaco tóxico. Como consecuencia de esta activación del profármaco, específica para el tumor, se observan concentraciones aumentadas (en 5-50 veces) del fármaco en el tumor y concentraciones más bajas del fármaco en el tejido sano, en comparación con la terapia clásica. Esto tiene como consecuencia una mejor compatibilidad así como efectos terapéuticos superiores en modelos de xenoinjertos en tumores humanos (Sharma, S. K. et al. 1991, Disease Markers 9: 225-231).
De modo similar al sistema ADEPT trabaja el concepto FMPA (del inglés Fusión protein Mediated Prodrug Activation = activación por un profármaco, mediada por una proteína de fusión), en el cual, en lugar del CAE, que es xenógeno y como consecuencia de ello inmunógeno, se emplea una proteína de fusión humana no inmunógena para la activación de un profármaco, selectiva para un tumor (Bosslet et al. 1994, Cancer Res. 54: 2151-2159).
También en el sistema VDEPT (del inglés Vector Dependent Enzyme Prodrug Therapy = terapia con un profármaco y una enzima, dependiente de un vector, Trinh et al., Cancer Res. 55: 4808-4812), que es un enfoque terapéutico génico de dos etapas, se activan profármacos de un modo selectivo para un tumor después de inyección de un vector y expresión de un gen estructural, que codifica una enzima.
Una activación endógena de profármacos (glucuronil-espaciador-antraciclina, Jacquessy et al., 1991, documento de patente PCT WO 92/19639) en tumores necróticos y procesos inflamatorios, vinculada con intensos efectos farmacológicos antitumorales y antiinflamatorios, fue descrita por Bosslet et al., 1994, Cancer Res. 54: 2151-2159 y 1995, Tumor Targeting 1. 45-50, por primera vez como PMT (del inglés Prodrug MonoTheraphie = monoterapia con profármaco). En la elaboración farmacológica del sistema de PMT se puso de manifiesto que tanto la química del espaciador que se elimina espontáneamente como también la hidrofilia y la citotoxicidad molar del componente fármaco en el profármaco tienen importancia decisiva para la eficiencia in vivo.
Un aumento adicional de la eficiencia de la PMT se observó en combinación con sustancias, que inducen necrosis (documento de patente europea EP 0696456 A2). Sobre todo la utilización de conjugados con anticuerpos, que tienen especificidad para el complejo de VEGF y del receptor de VEGF, unido covalentemente con proteínas coagulatorias, tales como por ejemplo el factor tisular acortado, muestra una actividad especialmente buena en modelos in vivo farmacológicos, combinados con profármacos apropiados.
En la solicitud de patente europea con el número de publicación 0 642 799 A1 se describen profármacos disociables por vía enzimática con una constasnte de Michaelis-Menten reducida. En la solicitud de patente canadiense, número 2.081.281, se describen conjugados que contienen un anticuerpo monoclonal, el cual puede unirse a la superficie de células cancerígenas, y una enzima \beta-glucuronidasa. Estos conjugados pueden activar profármacos de glucurónidos sobre la superficie de células cancerígenas.
Sorprendentemente, se nos ha hecho posible a los autores del presente invento sintetizar profármacos, que in vivo, después de una correspondiente activación enzimática endógena, son todavía esencialmente más eficaces que los profármacos descritos en los documentos EP 0511917 A1 y EP 0595133 A2. Esta superior actividad está condicionada, por una parte, por la nueva y ventajosa química del espaciador, pero, por otra parte, también por la alta citotoxicidad molar del componente fármaco utilizado. La nueva química ventajosa del espaciador se distingue porque, especialmente en el caso de sustancias activas, que están unidas al espaciador a través de un grupo hidroxilo, se efectúa una puesta en libertad de la sustancia activa después de una disociación enzimática del radical glicosilo por ciclización y separación del espaciador. Con ello se consigue una estabilidad mejorada de los profármacos, simultáneamente con una buena disociabilidad enzimática. Los profármacos conformes al invento son, además, más estables en condiciones fisiológicas que los profármacos conocidos, puesto que no ponen en libertad con tanta rapidez la sustancia activa.
El invento concierne a profármacos de la fórmula I
(I)Glicosil-Y[-C(=Y)-X-]_{p}-W(R)_{n}-Z-C(=Y)-sustancia \ activa
y/o sales fisiológicamente compatibles del compuesto de la fórmula I, en la que
Glicosil representa
un poli-, oligo- o mono-sacárido disociable enzimáticamente,
W representa
1) \hskip0,5cm un radical aromático de 5 a 14 miembros,
\quad
2) \hskip0,5cm naftilo,
\quad
3) \hskip0,5cm indenilo,
\quad
4) \hskip0,5cm antrilo,
\quad
5) \hskip0,5cm fenantrilo,
\quad
6) \hskip0,5cm un radical heterocíclico de 5 a 14 miembros con 1, 2, 3 ó 4 heteroátomos tomados del {}\hskip0,9cm grupo formado por oxígeno, nitrógeno y azufre,
\quad
7) \hskip0,5cm alquilo (C_{1}-C_{6}),
\quad
8) \hskip0,5cm alquenilo (C_{2}-C_{6}),
\quad
9) \hskip0,5cm cicloalquilo (C_{3}-C_{6}) o
\quad
10) \hskip0,3cm fenilo,
R representa
1) \hskip0,5cm un átomo de hidrógeno,
\quad
2) \hskip0,5cm alquilo (C_{1}-C_{4}),
\quad
3) \hskip0,5cm fenilo,
\quad
4) \hskip0,5cm metoxi,
\quad
5) \hskip0,5cm carboxi,
\quad
6) \hskip0,5cm metiloxicarbonilo,
\quad
7) \hskip0,5cm -CN,
\quad
8) \hskip0,5cm -OH,
\quad
9) \hskip0,5cm -NO_{2},
\quad
10) \hskip0,3cm halógeno, tal como fluoro, cloro o bromo,
\quad
11) \hskip0,3cm sulfonilo,
\quad
12) \hskip0,3cm sulfonamido o
\quad
13) \hskip0,3cm sulfon-alquil (C_{1}-C_{4})-amido,
p representa
cero ó 1,
n representa
cero, 1, 2 ó 3,
X representa
1) \hskip0,5cm un átomo de oxígeno,
\quad
2) \hskip0,5cm -NH-,
\quad
3) \hskip0,5cm metilenoxi,
\quad
4) \hskip0,5cm metilenamino,
\quad
5) \hskip0,5cm metilen-alquil (C_{1}-C_{4})-amino,
\quad
6) \hskip0,5cm alquil (C_{1}-C_{4})-amino o
\quad
7) \hskip0,5cm cicloalquil (C_{3}-C_{6})-amino,
Y representa
un átomo de oxígeno o -NH-,
Z representa
1) \hskip0,5cm alquil (C_{1}-C_{4})-amino,
\quad
2) \hskip0,5cm -N(CH_{3})-,
\quad
3) \hskip0,5cm -C(CH_{3})_{2}-NH-,
\quad
4) \hskip0,5cm -CH(CH_{3})-NH-,
\quad
5) \hskip0,5cm -C(CH_{3})_{2}-N(R^{2})-, en la que R^{2} significa alquilo (C_{1}-C_{4}), o
\quad
6) \hskip0,5cm -NH-, cuando W representa alquilo (C_{1}-C_{6}), y
sustancia activa
representa un compuesto con efecto biológico, que está unido a través de un radical con oxígeno, un radical amino primario o secundario o un radical imino.
Cuando n representa el número entero 2 ó 3, entonces los radicales R, independientemente unos de otros, representan los significados mencionados en R1) hasta R13). Por el concepto alquilo o alquenilo se entienden los radicales cuya cadena de carbonos puede ser lineal, ramificada o cíclica; los dobles enlaces pueden presentarse múltiples veces. Los radicales alquilo cíclicos son por ejemplo monociclos de 3 a 6 miembros, tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciclohexilo. Al concepto "radical heterocíclico de 5 a 14 miembros con 1, 2, 3 ó 4 heteroátomos, tomados del grupo formado por oxígeno, nitrógeno y azufre" pertenecen p. ej. radicales que se derivan de pirrol, azepina, pirrolina, piridina, imidazol, pirimidina, triazina, furano, 1,2-diazepina, oxazol, pirazina, isoxazol, isoxazolina, tiazol, isotiazol, isotiazolidina, indol, quinolina, isoquinolina, bencimidazol, indazol, purina, pteridina, tiopirano o tiofeno. Apropiadas sales fisiológicamente compatibles del compuesto de la fórmula I son, por ejemplo, sales de metales alcalinos, alcalino-térreos y amonio, inclusive las de bases orgánicas de amonio.
Por el concepto monosacárido se entienden radicales tales como D-glucuronilo, L-iduronilo, D-glucopiranosilo, D-galactopiranosilo, N-acetil-D-glucosaminilo, N-acetil-D-galactosaminilo, D-manopiranosilo o L-fucopiranosilo. Los oligo- o poli-sacáridos constan de 2 a 20 de los monosacáridos antes mencionados, los cuales están unidos entre sí por enlaces alfa- o beta-O-glicosídicos. El enlace entre el monosacárido y el radical Y es alfa- o beta-glicosídico. Apropiadas enzimas, que producen la disociación del radical glicosilo con respecto del radical Y, son iduronidasa, glucosidasa, galactosidasa, N-acetil-D-glucosaminidasa, N-acetil-D-galactosaminidasa, manosidasa, fucosidasa o glucuronidasa, preferiblemente \beta-glucuronidasa.
Como sustancia activa son apropiados compuestos tales como antraciclina, preferiblemente doxorrubicina, 4'-epi-doxorrubicina, 4- ó 4'-desoxi-doxorrubicina o un compuesto seleccionado preferiblemente del grupo de los etoposidos, N-bis(2-cloro-etil)-4-hidroxi-anilina, 4-hidroxi-ciclofosfamida, vindesina, vinblastina, vincristina, terfenadina, terbutalina, fenoterol, salbutamol, muscarina, oxifenbutazona, ácido salicílico, ácido p-amino-salicílico, 5-fluoro-uracilo, 5-fluoro-citidina, 5-fluoro-uridina, metotrexato, diclofenaco, ácido flufenamínico, 4-metilamino-fenazona, teofilina, nifedipina, mitomicina C, mitoxantrona, camptotecina, m-AMSA, taxol, nocodazol, colquicina, ciclofosfamida, raquelmicina, cisplatino, melfalan, belomicina, nitrógeno-gas mostaza, fosforamido-gas mostaza, quercetina, genisteína, erbstatina, tirfostina, un derivado de rohituquina ((-)-cis-5,7-dihidroxi-2-(2-cloro-fenil)-8-[4-(3-hidroxi-1-metil)-piperidinil]-4H-1-benzopiran-4-ona; documento EP 0.366.061), ácido retinólico, ácido butírico, ésteres de forbol, aclacinomicina, progesterona, buserelina, tamoxifeno, mifepristón, onapristón, N-(4-amino-butil)-5-cloro-2-naftaleno-sulfonamida, piridinil-oxazol-2-ona, quinolil-oxazolon-2-ona, isoquinolil-oxazolon-2-ona, estaurosporina, verapamil, forskolina, 1,9-didesoxi-forskolina, quinina, quinidina, reserpina, 18-O-(3,5-dimetoxi-4-hidroxi-benzoil)-reserpato, lonidamina, butionin-sulfoximina, un dietilditiocarbamato, ciclosporina A, azatioprina, clorambucil, N-(4-trifluorometil)-fenil-amida de ácido 2-ciano-3-hidroxi-crotónico (documento de patente PCT WO 91/17748), 15-desoxi-espergualina, FK 506, ibuprofeno, indometacina, aspirina, sulfasalazina, penicilamina, cloroquina, dexametasona, prednisolona, lidocaína, propafenona, procaína, ácido mefenamínico, paracetamol, 4-amino-fenazona, muskosina, orciprenalina, isoprenalina, amilorida, guanidinobenzoato de p-nitro-fenilo o sus derivados sustituidos adicionalmente con uno o varios grupos hidroxi, amino o imino.
Se prefieren los profármacos, en los que la sustancia activa es un agente citostático, o es un antimetabolito, en los que la sustancia activa es 5-fluoro-uracilo, 5-fluoro-citidina, 5-fluoro-uridina, citosina-arabinosido o metotrexato, en los que la sustancia activa es una sustancia que se intercala en el ADN, en los que la sustancia activa es doxorrubicina, daunomicina, idarrubicina, epirrubicina o mitoxantrona, en los que la sustancia activa inhibe a las topoisomerasas I y II, en los que la sustancia activa es camptotecina, un etoposido o m-AMSA, en los que la sustancia activa es un inhibidor de tubulina, en los que la sustancia activa es vincristina, vinblastina, vindesina, taxol, nocodazol o colquicina, en los que la sustancia activa es un agente alquilante, en los que la sustancia activa es ciclofosfamida, mitomicina C, raquelmicina, cisplatino, fosforamido-gas mostaza, melfalan, bleomicina, nitrógeno-gas mostaza o N-bis(2-cloro-etil)-4-hidroxi-anilina, en los que la sustancia activa es neocarcinostatina, caliqueamicina, dinemicina, o esperarmicina A, en los que la sustancia activa es un compuesto que inactiva a los ribosomas, en los que la sustancia activa es verrucarina A, en los que la sustancia activa es un inhibidor de tirosina-fosfoquinasa, en los que la sustancia activa es quercetina, genisteína, erbstatina, tirfostina o una rohituquina, en los que la sustancia activa es un inductor de la diferenciación, en los que la sustancia activa es ácido retinólico, ácido butírico, un éster de forbol o aclacinomicina, en los que la sustancia activa es una hormona, un agonista de una hormona o un antagonista de una hormona, en los que la sustancia activa es progesterona, buserelina, tamoxifeno, mifepristrón u onapristón, en los que la sustancia activa es una sustancia que modifica la resistencia pleyótropa frente a agentes citostáticos, en los que la sustancia activa es un inhibidor de calmodulina, en los que la sustancia activa es un inhibidor de proteína-quinasa C, en los que la sustancia activa es un inhibidor de P-glicoproteínas, en los que la sustancia es un modulador de la hexoquinasa unida a mitocondrias, en los que la sustancia activa es un inhibidor de la \gamma-glutamil-cisteína-sintetasa o la glutation-S-transferasa, en los que la sustancia activa es un inhibidor de la superóxido-dismutasa, en los que la sustancia activa es un inhibidor de la proteína asociada con proliferación, definida por el anticuerpo monoclonal MAC Ki67, en el núcleo celular de una célula que se divide, en los que la sustancia activa es una sustancia que ejerce efectos inmunosupresores, en los que la sustancia activa es un agente inmunosupresor clásico, en los que la sustancia activa es un macrólido, en los que la sustancia activa es ciclosporina A, rapamicina, FK 506, en los que la sustancia activa es azatioprin, metotrexato, ciclofosfamida o clorambucil, en los que la sustancia activa es una sustancia que tiene un efecto antiinflamatorio, en los que la sustancia activa es una sustancia antiinflamatoria de tipo no esteroide, en los que la sustancia activa es un fármaco antirreumático de acción lenta, en los que la sustancia activa constituye un esteroide, en los que la sustancia activa es una sustancia que tiene un efecto antiflogístico, analgésico o antipirético, en los que la sustancia activa es un derivado de un ácido orgánico, en los que la sustancia activa constituye un agente analgésico/antiflogístico de carácter no ácido, en los que la sustancia activa es oxifenbutazona, en los que la sustancia activa es un anestésico local, en los que la sustancia activa es un agente antiarrítmico, en los que la sustancia activa es un antagonista de Ca^{++}, en los que la sustancia activa es un agente antihistamínico, en los que la sustancia activa es un agente simpatomimético, o en los que la sustancia activa es una sustancia con efecto inhibidor sobre la uroquinasa humana; y derivados de las sustancias activas antes mencionadas, estando unida la sustancia activa a través de un radical con oxígeno, un radical -NH- o un radical imino, al radical Y del compuesto de la fórmula I.
La sustancia activa es también preferiblemente el compuesto de nitrógeno-gas mostaza mencionado en los ejemplos, quinina o dipiridamol.
Son preferidos los profármacos en los que
Glicosil representa
un ácido glucurónico
\quad
separable por vía enzimática,
W \hskip0,5cm representa
fenilo,
R \hskip0,5cm representa
un átomo de hidrógeno, CN, nitro, fluoro, cloro o bromo,
p \hskip0,5cm es
cero,
n \hskip0,5cm representa
un número entero, cero 1 ó 2,
Y \hskip0,5cm representa
un átomo de oxígeno,
Z \hskip0,5cm representa
-N(CH_{3})-, -C(CH_{3})_{2}-NH, -CH(CH_{3})-NH-,
\quad
-C(CH_{3})_{2}-N-(alquilo C_{1}-C_{4}),
\quad
-CH(CH_{3})-N-(alquilo C_{1}-C_{4}) y
sustancia activa
es un compuesto con efecto biológico unido a través de un grupo hidroxi, amino o imino.
Son especialmente preferidos los compuestos
ácido 2-[N-metil-N-[(4-(N,N'-bis-(2-cloro-etil)amino)-feniloxicarbonil]amino]-4-nitro-fenil-\beta-D-glucurónico,
ácido 2-[N-metil-N-[(4-(N,N'-bis-(2-yodo-etil)amino)-feniloxicarbonil]amino]-4-nitro-fenil-\beta-D-glucurónico
1
2
El invento concierne también a un procedimiento para la preparación del profármaco de la fórmula I, el cual está caracterizado porque se hace reaccionar un compuesto de la fórmula II,
(II),Glicosil-Y[-C(=Y)-X-]_{p}-W(R)_{n}-Z
en la que los radicales Glicosil, Y, X, p, W, R, n y Z tienen los significados mencionados en la fórmula I, con una sustancia activa, que tiene un radical carboxilo, amonio o imino activado,
efectuándose la reacción en presencia de un disolvente tomado del grupo formado por acetonitrilo, dioxano, tetrahidrofurano, diclorometano, dimetilformamida y acetona, y a continuación se separan por hidrólisis los grupos protectores.
La activación de la sustancia activa se efectúa por ejemplo según H.J. Marley, Chem. Soc. Chem. Communication (1987) páginas 112-113 o según H. Hagemann Angew. Chem. 93 (1981) páginas 813-814. La separación de los grupos protectores se efectúa, por ejemplo, con un hidróxido de metal alcalino, un carbonato de metal alcalino, un cianuro de metal alcalino, óxido de bario, piperidina o morfolina, en presencia de metanol, etanol o agua.
El invento concierne también a medicamentos, los cuales están caracterizados por un contenido eficaz de por lo menos un compuesto de la fórmula I y/o de una sal fisiológicamente compatible del compuesto de la fórmula I, estando los radicales Glicosil, Y, X, p, W, R, n, Z y sustancia activa definidos como anteriormente, en común con un material de vehículo farmacéuticamente apropiado y fisiológicamente compatible, una sustancia aditiva y/u otras sustancias activas y coadyuvantes.
En virtud de las propiedades farmacológicas, los compuestos conformes al invento se adecuan sobresalientemente para la profilaxis y la terapia de todas aquellas enfermedades o trastornos en cuyo transcurso se pueden sobreexpresar y/o poner en libertad o hacerse accesibles por destrucción celular las enzimas intracelulares, que pueden disociar el radical glicosilo. Éstas son, sobre todo, enfermedades tales como cáncer, enfermedades autoinmunes o artritis y artropatías agudas y crónicas, condicionadas por causas inflamatorias, inmunológicas o metabólicas, especialmente enfermedades tumorales y artritis reumatoidea.
El invento concierne además a la utilización del compuesto de la fórmula I para la preparación de medicamentos destinados a la profilaxis y a la terapia de enfermedades cancerosas, enfermedades autoinmunes y enfermedades inflamatorias crónicas, tales como artritis reumatoidea.
El invento concierne también a un procedimiento para la preparación de un medicamento, el cual está caracterizado porque se lleva a una forma de presentación apropiada por lo menos un compuesto de la fórmula I con un vehículo farmacológicamente apropiado y fisiológicamente compatible, y eventualmente otras sustancias activas, aditivas o coadyuvantes apropiadas.
Las formas de preparación apropiadas son por ejemplo soluciones inyectables, en cuya preparación encuentran utilización los agentes coadyuvantes usuales, tales como materiales de vehículo, agentes aglutinantes, de hinchamiento o lubricantes y solubilizantes. Como sustancias coadyuvantes frecuentemente utilizadas se mencionarán carbonato de magnesio, dióxido de titanio, lactosa, manita y otros azúcares, talco, albúmina láctea, gelatina, almidón, celulosa y sus derivados, aceites animales y vegetales tales como aceite de hígado de bacalao, aceite de girasol, cacahuete o sésamo, poli(etilenglicol) y disolventes tales como, por ejemplo, agua estéril y alcoholes uni- o pluri-valentes tales como glicerol. Se pueden utilizar como vehículos también liposomas o proteínas humanas.
Preferiblemente, los preparados farmacéuticos se producen y administran dentro de unidades de dosificación, conteniendo cada unidad como constituyente activo una determinada dosis del compuesto de la fórmula I conforme al invento. En el caso de soluciones inyectables, esta dosis puede ser hasta de aproximadamente 10 g, pero preferiblemente de alrededor de 3 g hasta 5 g para un paciente adulto que tiene un peso de aproximadamente 70 kg. En ciertas circunstancias pueden ser oportunas también dosis diarias mayores o menores. La administración de la dosis diaria, puede efectuarse tanto por una única toma en forma de una única unidad de dosificación o también de varias unidades de dosificación menores, así como también por toma múltiple de dosis subdivididas a intervalos determinados.
Los profármacos conformes al invento se pueden emplear también en todas las enfermedades no oncológicas en las cuales se presentan macrófagos, granulocitos y trombocitos, especialmente en estado activado. En estado activado, las células antes mencionadas segregan predominantemente enzimas intracelulares, lo cual posibilita una activación específica de un sitio de los profármacos conformes al invento.
En el caso de la indicación oncológica, la activación de los profármacos conformes al invento se efectúa mediante enzimas intracelulares puestas en libertad a partir de células tumorales moribundas. Este fenómeno aparece sobre todo en el caso de tumores de mayor tamaño (diámetro mayor que 0,3 cm), pero también después de un perjuicio para el tumor por tratamiento con inmunotoxinas, agentes citostáticos, irradiación, proteínas de fusión o conjugados de anticuerpos y enzimas.
Puesto que la porción de glicosilo de los profármacos conformes al invento se ha escogido de manera tal que sea separable sólo por enzimas puestas en libertad localmente en condiciones patofisiológicas, el fármaco lipófilo se puede poner en libertad igualmente sólo junto al tejido diana y puede desarrollar allí su efecto citotóxico.
El superior efecto de un profármaco conforme al invento con un componente fármaco citotóxico se puede aumentar combinándolo con profármacos conformes al invento que tienen otro componente fármaco citotóxico. En este caso, son ventajosas las combinaciones de profármacos, en las cuales se utilizan componentes citotóxicos con diferentes mecanismos de actividad, correspondiendo a la poli-quimioterapia. Se manifiesta como especialmente apropiado el empleo de sustancias activas que provocan muy eficientemente roturas de cadenas únicas y de cadenas dobles en el ADN, tales como caliqueamicina. No obstante, son especialmente ventajosas las combinaciones de profármacos conformes al invento, en las cuales uno de los fármacos tiene un potencial citotóxico y el otro bloquea sin embargo la resistencia a múltiples fármacos.
Además, el invento concierne a composiciones farmacéuticas, que contienen un compuesto de la fórmula I y conjugados de un anticuerpo y una enzima. Como conjugados de un anticuerpo y una enzima se entienden compuestos que se fijan a través de la parte de anticuerpo específicamente al tejido tumoral o al tejido inflamado, y que tienen una parte de enzima que puede disociar el radical glicosilo del compuesto de la fórmula I. Ejemplos de tales compuestos son descritos en los documentos EP 0.501.215, EP 0.390.530 ó EP 0.623.352.
Ejemplo 1 Profármaco de un derivado de nitrógeno-gas mostaza (F 373; Compuesto 11)
3
fue sintetizado de la siguiente manera:
El material de partida para la síntesis era 2-amino-4-nitro-fenol (Compuesto 1). El Compuesto 1 fue monometilado primeramente con ayuda de yoduro de metilo (Compuesto 2) y la función amino fue protegida como derivado de BOC (Compuesto 3). El ácido glucurónico protegido fue introducido mediante acoplamiento con óxido de plata del Compuesto 3 y del bromuro (Compuesto 4) obteniéndose el Compuesto 5. Después de haberse separado el grupo protector BOC con HCl, se obtuvo la amina (Compuesto 6). El Compuesto 7 se hizo reaccionar para formar el cloroformiato (Compuesto 8) y se condensó con el Compuesto 6 para formar el Compuesto 9. Después de disociación o desdoblamiento del éster de la parte de ácido glucurónico del Compuesto 3 en dos etapas (MeONa/MeOH, luego NaOH acuoso) se obtuvo a través del Compuesto 10 el profármaco (Compuesto 11).
4 
\newpage
Compuesto 2
2-(N-metilamino)-4-nitro-fenol (2)
A una solución de 2-amino-4-nitro-fenol (1) (1,54 g, 10 mmol) y yoduro de metilo (1 ml, 16 mmol) en metanol (10 ml) se le añadió trietilamina (2 ml, 14,4 mmol). Después de 1 hora a 40ºC se añadieron cantidades adicionales de yoduro de metilo (1 ml) y trietilamina (1 ml) y se agitaron a 40ºC durante otras 2 horas. La mezcla de reacción fue concentrada hasta sequedad en vacío, añadida a una solución acuosa 2 N de acetato de sodio y extraída con acetato de etilo. La fase orgánica se secó con sulfato de sodio y se cromatografió sobre gel de sílice (agente eluyente diclorometano/metanol 95/5). Rendimiento: 880 mg (52%).
C_{7}H_{8}N_{2}O_{3}
Calculado C: 50,02 H: 4,76 N: 16,73
Encontrado C: 50,00 H: 4,80 N: 16,66
Punto de fusión: 148ºC (tolueno)
^{1}H RMN (250 MHz, DMSO):
\delta 7,44 (dd, J_{orto} = 9 Hz, J_{meta} = 3,0 Hz, 1H),
7,13 (d, J = 3 Hz, 1H),
6,77 (d, J = 9 Hz, 1H), 2,76 (s, 3H).
IR (KBr): v(cm^{-1}) 3363(OH), 1538, 1338(NO_{2}).
EM (DCl, NH_{3}): m/z [M+H]^{+}: 169
Compuesto 3
2-(N-Boc,N-metilamino)-4-nitro-fenol (3)
A una solución de 2-N-metilamino-4-nitro-fenol (2) (4,18 g, 24,9 mmol) en tetrahidrofurano (50 ml) se le añadieron dicarbonato de di-terc.-butilo (14 g, 64,15 mmol), carbonato de potasio (17 g, 123 mmol) y agua (50 ml) y se agitaron a la temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción fue acidificada con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, extraída con acetato de etilo, secada con sulfato de sodio y concentrada en vacío. El producto bruto fue agitado durante dos horas en metanol (100 ml) con carbonato de potasio (17 g, 123 mmol), acidificado con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, extraído con acetato de etilo, secado con sulfato de sodio y concentrado en vacío. El producto fue cromatografiado sobre gel de sílice (agente eluyente: diclorometano/metanol 97,5/2,5).
Rendimiento: 6,2 g (93%).
C_{12}H_{16}N_{2}O_{5}:
Calculado C: 53,72 H: 6,01 N: 10,44
Encontrado C: 53,64 H: 6,20 N: 10,36
Punto de fusión: 197ºC (tolueno/éter de petróleo)
^{1}H RMN (250 MHz, DMSO):
\delta 8,10-8,00 (2H),
7,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H),
3,04 (s, 3H),
1,40-1,30 (9H).
IR (KBr): v(cm^{-1}) 3129(OH), 1672 (CO), 1529, 1339 (NO_{2}).
EM(DCl, NH_{3}): m/z [M+H]^{+}: 269,
[M+H-C_{4}H_{8}]^{+}: 213,
[M+H-C_{4}H_{8}OCO]^{+}: 169. 
\newpage
Compuesto 5
Éster metílico de ácido 2-(N-BOC,N-metilamino)-4-nitro-fenil-2,3,4-tri-O-acetil-\beta-D-glucurónico (5)
A una solución de bromuro de éster metílico de ácido 2,3,4-tri-O-acetil-\alpha-D-glucurónico (4) (126 mg, 0,317 mmol) en acetonitrilo (5 ml) se le añadieron óxido de plata (0,23 g, 0,92 mmol) y 2-(N-BOC, N-metilamino)-4-nitro-fenol (3). La mezcla de reacción fue agitada durante 1 hora a la temperatura ambiente, filtrada sobre Celite y concentrada en vacío. El producto se cromatografió sobre gel de sílice (agente eluyente diclorometano/metanol 97,5/2,5).
Rendimiento 165 mg (89%).
C_{25}H_{32}N_{2}O_{14}:
Calculado C: 51,37 H: 5,52 N: 4,79
Encontrado C: 51,79 H: 5,72 N: 4,66
Punto de fusión 80ºC (tolueno/éter de petróleo)
[\alpha]_{D}^{20} = -39º (c=1,02 en CHCl_{3})
^{1}H RMN (250 MHz, CDCl_{3}):
\delta 8,14 (dd, J_{orto} = 9 Hz, J_{meta} = 2,5 Hz, 1H),
8,15-8,05 (1H),
7,30-7,20 (1H),
5,45-5,30 (4H),
4,25 (d, J = 9 Hz, 1H),
3,73 (s, 3H),
3,13 (s, 3H),
2,15-2,05 (9H),
1,65-1,40 (9H).
IR (CDCl_{3}): v(cm^{-1}) 1760 (CO, éster), 1699 (CO) carbamato), 1529, 1349 (NO_{2}).
EM(DCl, NH_{3}): m/z [M+NH_{4}]^{+}: 602.
\vskip1.000000\baselineskip
Compuesto 6
Ester metílico de ácido (N-metilamino)-4-nitro-fenil-2,3,4-tri-O-acetil-\beta-D-glucurónico (6)
Una solución de éster metílico de ácido 2-(N-BOC,N-metilamino)-4-nitro-fenil-2,3,4-tri-O-acetil-\beta-D-glucurónico (5) (3 g, 5,13 mmol) en ácido clorhídrico 2,12 M en acetato de etilo (60 ml) se agitó durante 1 hora a la temperatura ambiente. La solución se vertió en una solución acuosa saturada, en exceso, de bicarbonato de sodio, y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó con sulfato de sodio y se concentró. El producto se cromatografió sobre gel de sílice (agente eluyente: diclorometano/metanol 97,5/2,5). Rendimiento 2,14 g (86%) material sólido de color amarillo.
C_{20}H_{24}N_{2}O_{12}:
Calculado C: 49,59 H: 4,99 N: 5,78
Encontrado C: 49,81 H: 5,12 N: 4,80
Punto de fusión: 120ºC (en tolueno)
[\alpha]_{D}^{20} = -58º (c = 1,04 en CHCl_{3}).
\newpage
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}):
\delta 7,53 (dd, J_{orto} = 8,5 Hz, J_{meta} = 2,5 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 2,5 Hz, 1H),
6,91 (d, J = 8,5 Hz, 1H),
5,45-5,30 (1H),
5,16 (d, J = 7 Hz, b, 1H),
4,50 (d, J = 5 Hz, 1H),
4,24 (d, J = 9 Hz, 1H),
3,75 (s, 3H),
2,90 (d, J = 5 Hz, 1H),
2,10-2,05 (9H).
IR (CDCl_{3}): v(cm^{-1}) 3443 (NH), 1758 (CO), 1553, 1346 (NO_{2}).
EM(DCl, NH_{3}): m/z [M+H]^{+}: 485.
Compuesto 8
Cloroformiato de 4-[N,N-bis-(2-cloro-etil)amino]fenilo (8)
Se añadió fosgeno en tolueno (1,93 M) (8 ml, 15,4 mmol) a una suspensión de hidrocloruro de 4-[N,N-bis(2-cloro-etil)amino]fenol(7) (1,85 mmol) en tetrahidrofurano (30 ml) y se agitó durante 30 minutos a 0ºC. Después de haber añadido trietilamina (1 ml, 7,17 mmol) se agitó a 0ºC durante otra hora. A continuación, la suspensión se filtró y concentró en vacío a la temperatura ambiente. La cromatografía de resolución rápida en gel de sílice con diclorometano como agente eluyente proporcionó el producto como un líquido incoloro, que se empleó inmediatamente en la siguiente reacción. Rendimiento 70%.
^{1}H RMN (250 MHz, CDCl_{3}):
\delta 7,10 (d, J = 9 Hz, 2H),
6,66 (d, J = 9 Hz, 2H),
3,73 (t, J = 6,5 Hz, 4H),
3,63 (t, J = 6,5 Hz, 4H).
IR (CDCl_{3}): v(cm^{-1}) 1779 (CO), 1514 (aromático).
EM (DCl, NH_{3}): m/z [M+H]^{+}: 296,
[M+2+H]^{+}: 298.
Compuesto 9
Éster metílico de ácido 2-[N-metil-N-[4-(N,N'-bis-(2-cloro-etil)amino]feniloxicarbonil]amino]-4-nitro-fenil-2,3,4-tri-O-acetil-\beta-D-glucurónico (9)
A una solución de cloroformiato de 4-[N,N-bis(2-cloro-etil)amino)fenilo (8) (0,31 g, 1,04 mmol) en tetrahidrofurano (15 ml), diisopropil-etilamina (0,25 ml, 1,44 mmol) se le añadió éster metílico de ácido 2 (N-metilamino)-4-nitro-fenil-2,3,4-tri-O-acetil-\beta-D-glucurónico (6) (0,50 g, 1,03 mmol) y se hirvió a reflujo durante 2 horas. Después de enfriar a la temperatura ambiente, se concentró. El producto se cromatografió sobre gel de sílice (agente eluyente diclorometano/metanol 97,5/2,5).
Rendimiento: 487 mg (64%)
C_{31}H_{35}N_{3}O_{14}Cl_{2}
Calculado C: 50,00 H: 4,74 N: 5,64 Cl: 9,52
Encontrado C: 49,90 H: 4,82 N: 5,62 Cl: 9,78
Punto de fusión: 101ºC (metanol)
[\alpha]_{D}^{20} = -47º (c = 1,10 en CHCl_{3})
\newpage
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}):
\delta 8,25-8,15 (2H),
7,45-7,35 (1H),
7,25-7,05 (1H),
6,95-6,85 (1H),
6,70-6,55 (2H),
5,45-5,25 (4H),
4,28 (d, J = 9 Hz, 1H),
3,80-3,55 (11H),
3,38(s) 2 carbamatos diastereoisómeros (40/60) 3H, 3,27 (s),
2,20-2,00 (9H).
IR (CDCl_{3}): v(cm^{-1}) 1760 (CO, éster), 1722 (CO, carbamato), 1530, 1350 (NO_{2}).
EM(DCl, NH_{3}): m/z [M+H]^{+}: 744;
[M+2+H]^{+}: 746,
[M+Na]^{+}: 766;
[M+2+Na]^{+}: 768. 
\vskip1.000000\baselineskip
Compuesto 10
Éster metílico de ácido 2-[N-metil-N-[(4-(N,N'-bis-(2-cloro-etil)amino)feniloxicarbonil]amino]-4-nitro-fenil-\beta-D-glucurónico (10)
A una suspensión de éster metílico de ácido 2-[N-metil-N-[4-(N,N'-bis-(2-cloro-etil)amino)feniloxi]amino]-4-nitro-fenil-2,3,4-tri-O-acetil-\beta-D-glucurónico (9) (68 mg, 0,0915 mmol) en metanol (5 ml) se le añadió a -15ºC metilato de sodio (2 mg, 0,037 mmol) y se agitó durante 6 horas a -15ºC. Después de neutralización con un intercambiador de iones (Amberlite IRC-50 S) y de filtración se concentró la solución y se cromatografió sobre gel de sílice con acetato de etilo como agente eluyente. Rendimiento 50 mg (89%).
C_{25}H_{29}N_{2}O_{11}Cl_{2}
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}):
\delta 8,22 (sl, 1H),
8,16 (d, J = 8,5 Hz, 1H),
7,25 (d, 1H),
7,15-6,90 (2H),
6,80-6,45 (2H),
5,06 (1H),
4,09 (1H),
4,20-3,15 (17H).
IR (CDCl_{3}): v(cm^{-1}) 3601, 3448 (OH), 1714 (CO), 1528, 1349 (NO_{2}).
EM(ES): m/z [M+Na]^{+}: 640;
[M+2+Na]^{+}: 642. 
\vskip1.000000\baselineskip
Compuesto 11
Ácido 2-[N-metil-N-[(4-(N,N'-bis-(2-cloro-etil)amino)-feniloxicarbonil]amino]-4-nitro-fenil-\beta-D-glucurónico (11)
A una solución del Compuesto 10 (50 mg, 0,0809 mmol) en acetona (4 ml) se le añadieron a -15ºC 0,3 ml de una solución acuosa 1 N de hidróxido de sodio. La mezcla se agitó durante 2 horas a -15ºC, se neutralizó con ácido clorhídrico acuoso 1 N y se concentró en vacío (T < 40ºC). El producto se cromatografió sobre gel de sílice con una mezcla de acetonitrilo y agua (9/1). El rendimiento fue de 45 mg (89%).
C_{24}H_{27}N_{3}O_{11}Cl_{2}
\newpage
^{1}H RMN (250 MHz, CD_{3}OD):
\delta 8,30 (sl, 1H),
8,24 (dd, J_{orto} = 9 Hz, J_{meta} = 2,5 Hz, 1H),
7,52 (d, J = 9Hz, 1H),
6,99 (d, J = 9 Hz, 2H),
6,69 (d, J = 9Hz, 2H),
5,23 (1H),
3,89 (d, J = 9Hz, 1H),
3,80-3,33 (1H).
IR (KR): v(cm^{-1}) 3418 (OH), 1705 (CO), 1516, 1349 (NO_{2}).
EM(ES): m/z [M+H]^{+}: 603;
[M+2-H]^{+}: 605 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 2 Ácido 2-[N-metil-N-[(4-(N,N'-bis-(2-yodo-etil)amino)feniloxicarbonil]amino]-4-nitro-fenil-\beta-D-glucurónico (12)
Compuesto 12
5
La síntesis se efectuó análogamente al Ejemplo 1.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 3
Compuesto 13
Profármaco de quinina (F 391)
6
La síntesis se efectuó análogamente al Ejemplo 1.
\newpage
Ejemplo 4
Compuesto 14
Profármaco de dipiridamol (F 392) 
\vskip1.000000\baselineskip
7 
\vskip1.000000\baselineskip
La síntesis se efectuó análogamente al Ejemplo 1.
Ejemplo 5 Disociación enzimática de F 373
El profármaco F373 (Compuesto 11), al incubar con \beta-glucuronidasa, es disociado enzimáticamente para formar un derivado de nitrógeno-gas mostaza aromático (4-[N,N-bis-(2-cloro-etil)-amino]fenol) (Compuesto 7), ácido glucurónico y el espaciador.
\vskip1.000000\baselineskip
8 
\vskip1.000000\baselineskip
El profármaco F 373 es estable en solución en DMSO anhidro. Para la investigación de la disociabilidad se mezclaron 10 \mul de una solución de F 373 (5 mg/ml en DMSO) con 180 \mul de tampón fosfato 0,02 M de pH 7,2 y 10 \mul de \beta-glucuronidasa de E. coli (Sigma) (330 \mug/ml) y se incubaron a 37ºC. Una tanda de 25 \mul se diluyó con 225 \mul de una mezcla de un tampón fosfato 0,1 M de pH 3,0 (85%) y acetonitrilo (15%) y se analizó inmediatamente con ayuda del siguiente sistema de HPLC.
Sistema de HPLC
El sistema utilizado de HPLC (cromatografía de líquido de alta presión) constaba de una bomba de gradientes (Gynkotek, modelo 480), un automuestreador (Abimed, modelo 231/401) un detector de UV (Beckman, modelo 166, longitud de onda de detección 212 nm) y una unidad de evaluación (Beckman, sistema Gold). Las separaciones se efectuaron en una columna de RP (Zorbax SB-C 18,5 \mum, 125 * 4,6 mm). La fase móvil estaba formada a base de dos componentes según el siguiente esquema:
\newpage
A - acetonitrilo
B - tampón fosfato 0,02 M de pH 3,0.
0 min: 15% de A, 85% de B,
15 min: 75% de A, 25% de B,
25 min: 75% de A, 25% de B,
27 min: 15% de A, 85% de B,
35 min: 15% de A, 85% de B.
Se encontraron las siguientes superficies de pico:
Tiempo F 373 Compuesto 7 Espaciador Compuesto 15
min RT=12,6 RT=10,7 RT=14,1
0 19,41 0 0
1 10,46 3,32 1,92
5 0,35 7,43 4,75
7 0 7,33 5,37
10 0 6,79 5,43
15 0 5,58 5,43
25 0 4,00 5,70
60 0 0,88 6,53
Ejemplo 6 Citotoxicidad de F 373, 391 y 392 sobre células tumorales en presencia y en ausencia de \beta-glucuronidasa
En una placa de microtitulación de 96 pocillos se sembraron 2 x 10^{3} células LoVo por pocillo en 100 \mul de MEM + 10% de FKS. Después de 24 h las sustancias en ensayo se añadieron a 100 \mul de medio en la concentración deseada y eventualmente de modo adicional \beta-glucuronidasa (concentración final 50 \mug/ml; Sigma G 7896). Cada grupo constaba de 4 pocillos, el testigo fue incubado solamente con el medio. Después de 65 h se añadieron a ello 50 \mul de MTT (2,5 mg/ml en PBS) y después de 3 h se eliminó el material sobrenadante. El colorante formado por las células vivas fue disuelto por adición de 100 \mul de DMSO/pocillo. La extinción fue medida para cada pocillo con ayuda de un fotómetro Multiscan 340 CC (entidad Flow) a 492 nm. Los valores de los 4 pocillos por grupo fueron promediados y a partir de ellos se calcularon la curva de dosis y efecto así como la concentración inhibitoria de 50%, Cl_{50,} con el Software GraFit 3.0.
Sustancia sin \beta-Gluc. con \beta-Gluc.
(profármaco) Cl_{50} en \mumol Cl_{50} en \mumol
F 373 > 500 6,3
F 391 > 400 113
F 392 > 400 49,5
El compuesto tóxico en el profármaco F 373 es el Compuesto 7 (Ejemplo 1, página 14) y tiene, ensayado a solas, una Cl_{50} de 5 \mumol. El compuesto tóxico presente en el profármaco F 391 es quinina y tiene ensayado a solas una Cl_{50} de 103 \mumol. El compuesto tóxico en el profármaco F 393 es dipiridamol y tiene, ensayado a solas, una Cl_{50} de 43 \mumol.

Claims (8)

1. Compuesto de la fórmula I
(I)Glicosil-Y[-C(=Y)-X-]_{p}-W(R)_{n}-Z-C(=Y)-sustancia \ activa
y/o sales fisiológicamente compatibles del compuesto de la fórmula I, en la que
Glicosil representa
un poli-, oligo- o mono-sacárido disociable enzimáticamente,
W representa
1) \hskip0,5cm un radical aromático de 5 a 14 miembros,
\quad
2) \hskip0,5cm naftilo,
\quad
3) \hskip0,5cm indenilo,
\quad
4) \hskip0,5cm antrilo,
\quad
5) \hskip0,5cm fenantrilo,
\quad
6) \hskip0,5cm un radical heterocíclico de 5 a 14 miembros con 1, 2, 3 ó 4 heteroátomos tomados del {}\hskip0,9cm grupo formado por oxígeno, nitrógeno y azufre,
\quad
7) \hskip0,5cm alquilo (C_{1}-C_{6}),
\quad
8) \hskip0,5cm alquenilo (C_{2}-C_{6}),
\quad
9) \hskip0,5cm cicloalquilo (C_{3}-C_{6}) o
\quad
10) \hskip0,3cm fenilo,
R representa
1) \hskip0,5cm un átomo de hidrógeno,
\quad
2) \hskip0,5cm alquilo (C_{1}-C_{4}),
\quad
3) \hskip0,5cm fenilo,
\quad
4) \hskip0,5cm metoxi,
\quad
5) \hskip0,5cm carboxi,
\quad
6) \hskip0,5cm metiloxicarbonilo,
\quad
7) \hskip0,5cm -CN,
\quad
8) \hskip0,5cm -OH,
\quad
9) \hskip0,5cm -NO_{2},
\quad
10) \hskip0,3cm halógeno, tal como fluoro, cloro o bromo,
\quad
11) \hskip0,3cm sulfonilo,
\quad
12) \hskip0,3cm sulfonamido o
\quad
13) \hskip0,3cm sulfon-alquil (C_{1}-C_{4})-amido,
p representa
cero ó 1,
n representa
cero, 1, 2 ó 3,
X representa
1) \hskip0,5cm un átomo de oxígeno,
\quad
2) \hskip0,5cm -NH-,
\quad
3) \hskip0,5cm metilenoxi,
\quad
4) \hskip0,5cm metilenamino,
\quad
5) \hskip0,5cm metilen-alquil (C_{1}-C_{4})-amino,
\quad
6) \hskip0,5cm alquil (C_{1}-C_{4})-amino o
\quad
7) \hskip0,5cm cicloalquil (C_{3}-C_{6})-amino,
Y representa
un átomo de oxígeno o -NH-,
Z representa
1) \hskip0,5cm alquil (C_{1}-C_{4})-amino,
\quad
2) \hskip0,5cm -N(CH_{3})-,
\quad
3) \hskip0,5cm -C(CH_{3})_{2}-NH-,
\quad
4) \hskip0,5cm -CH(CH_{3})-NH-,
\quad
5) \hskip0,5cm -C(CH_{3})_{2}-N(R^{2})-, en la que R^{2} significa alquilo (C_{1}-C_{4}), o
\quad
6) \hskip0,5cm -NH-, cuando W representa alquilo (C_{1}-C_{6}), y
sustancia activa
representa un compuesto con efecto biológico, que está unido a través de un radical con oxígeno, un radical amino primario o secundario o un radical imino.
2. Compuesto de la fórmula I según la reivindicación 1, en la que
Glicosil representa
un ácido glucurónico separable por vía enzimática,
W \hskip0,5cm representa
fenilo,
R \hskip0,5cm representa
un átomo de hidrógeno, CN, nitro, fluoro, cloro o bromo,
p \hskip0,5cm es
cero,
n \hskip0,5cm representa
un número entero, cero 1 ó 2,
Y \hskip0,5cm representa
un átomo de oxígeno,
Z \hskip0,5cm representa
-N(CH_{3})-, -C(CH_{3})_{2}-NH, -CH(CH_{3})-NH-,
\quad
-C(CH_{3})_{2}-N-(alquilo C_{1}-C_{4}),
\quad
-CH(CH_{3})-N-(alquilo C_{1}-C_{4}).
3. Compuesto de la fórmula I según la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque el compuesto de la fórmula I es
ácido 2-[N-metil-N-[(4-(N,N'-bis-(2-cloro-etil)amino)-feniloxicarbonil]amino]-4-nitro-fenil-\beta-D-glucurónico o
ácido 2-[N-metil-N-[(4-(N,N'-bis-(2-yodo-etil)amino)-feniloxicarbonil]amino]-4-nitro-fenil-\beta-D-glucurónico,
9
10
4. Procedimiento la preparación de un compuesto de la fórmula I, caracterizado porque se hace reaccionar un compuesto de la fórmula II,
(II),Glicosil-Y[-C(=Y)-X-]_{p}-W(R)_{n}-Z
en la que los radicales Glicosil, Y, X, p, W, R, n y Z tienen los significados mencionados en la fórmula I según la reivindicación 1,
con una sustancia activa, que tiene un radical carboxilo, amonio o imino activado,
efectuándose la reacción en presencia de un disolvente tomado del grupo formado por acetonitrilo, dioxano, tetrahidrofurano, diclorometano, dimetilformamida y acetona,
y a continuación se separan por hidrólisis los grupos protectores.
5. Medicamentos, caracterizados por un contenido activo de por lo menos un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 3, y/o de una sal fisiológicamente compatible del compuesto de la fórmula I, estando definidos los radicales Glicosil, Y, X, p, W, R, n, Z y sustancia activa tal como en la fórmula I según la reivindicación 1, en común con un material de vehículo farmacéuticamente apropiado y fisiológicamente compatible, un material aditivo y/u otras sustancias activas y coadyuvantes.
6. Uso del compuesto de la fórmula I según la reivindicación 1, para la preparación de medicamentos destinados a la profilaxis y a la terapia de enfermedades cancerosas, enfermedades autoinmunes y enfermedades inflamatorias crónicas tales como artritis reumatoidea.
7. Procedimiento para la preparación de un medicamento, caracterizado porque se lleva a una forma apropiada de presentación por lo menos un compuesto de la fórmula I según la reivindicación 1, junto con un vehículo farmacéuticamente apropiado y fisiológicamente compatible y eventualmente con otras sustancias activas, aditivas o coadyuvantes apropiadas.
8. Preparado farmacéutico, que contiene un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 3, y un conjugado de un anticuerpo y una enzima, que puede disociar enzimáticamente el radical glicosilo en la fórmula I.
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