EA043937B1 - ИММУНОЦИТОКИН, ВКЛЮЧАЮЩИЙ ГЕТЕРОДИМЕРНЫЙ БЕЛКОВЫЙ КОМПЛЕКС НА ОСНОВЕ IL-15 И IL-15Rα, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ - Google Patents
ИММУНОЦИТОКИН, ВКЛЮЧАЮЩИЙ ГЕТЕРОДИМЕРНЫЙ БЕЛКОВЫЙ КОМПЛЕКС НА ОСНОВЕ IL-15 И IL-15Rα, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ Download PDFInfo
- Publication number
- EA043937B1 EA043937B1 EA202290936 EA043937B1 EA 043937 B1 EA043937 B1 EA 043937B1 EA 202290936 EA202290936 EA 202290936 EA 043937 B1 EA043937 B1 EA 043937B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- immunocytokine
- antibody
- seq
- heavy chain
- amino acid
- Prior art date
Links
- 229940127130 immunocytokine Drugs 0.000 title claims description 328
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 title claims description 212
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 title claims description 211
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 119
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 75
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 186
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 184
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 76
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 67
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 63
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 63
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 49
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 46
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 46
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 46
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 46
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 claims description 45
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 claims description 45
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 45
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 41
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 40
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 40
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 39
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 39
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 39
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 39
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 38
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 37
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 35
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 claims description 35
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 claims description 33
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims description 31
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 30
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 28
- 230000002483 superagonistic effect Effects 0.000 claims description 28
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 claims description 25
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 claims description 25
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 claims description 23
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 23
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 23
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 21
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 21
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 21
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 18
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 17
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 claims description 17
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 17
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 claims description 17
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 16
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 claims description 16
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 16
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 16
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 claims description 16
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 claims description 16
- 208000022679 triple-negative breast carcinoma Diseases 0.000 claims description 16
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 16
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 15
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 15
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 claims description 15
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 14
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 14
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 claims description 14
- 108010057840 ALT-803 Proteins 0.000 claims description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims description 13
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 13
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims description 13
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 11
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 11
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 11
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 10
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims description 9
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 9
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims description 9
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 9
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 claims description 8
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 8
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 8
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims description 8
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 claims description 8
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 8
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 claims description 8
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 8
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 8
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 8
- 208000025324 B-cell acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 claims description 7
- 208000028564 B-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 claims description 7
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 claims description 7
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 claims description 7
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 claims description 7
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 claims description 7
- 208000032818 Microsatellite Instability Diseases 0.000 claims description 7
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 claims description 7
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 claims description 7
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 7
- 208000029052 T-cell acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 claims description 7
- 201000011176 T-cell adult acute lymphocytic leukemia Diseases 0.000 claims description 7
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 claims description 7
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 claims description 7
- 230000005888 antibody-dependent cellular phagocytosis Effects 0.000 claims description 6
- 208000036170 B-Cell Marginal Zone Lymphoma Diseases 0.000 claims description 5
- 108010085220 Multiprotein Complexes Proteins 0.000 claims description 5
- 102000007474 Multiprotein Complexes Human genes 0.000 claims description 5
- 201000007924 marginal zone B-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 5
- 208000021937 marginal zone lymphoma Diseases 0.000 claims description 5
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims description 2
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000902 placebo Substances 0.000 claims description 2
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 claims 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 62
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 46
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 46
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 35
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 31
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 26
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 25
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 23
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 23
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 21
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 18
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 16
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 16
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 16
- -1 lyophilisates Substances 0.000 description 16
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 16
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 16
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 15
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 14
- 101001117317 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 description 14
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 14
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 13
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 13
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 description 13
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 13
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 11
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 11
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 11
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 11
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 10
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 10
- 230000004044 response Effects 0.000 description 10
- 101000611936 Homo sapiens Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 9
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 9
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 9
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 9
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 9
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 9
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 9
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 9
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 9
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 9
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 9
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 9
- 229940121482 prolgolimab Drugs 0.000 description 9
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 8
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 8
- 150000001944 cysteine derivatives Chemical class 0.000 description 8
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 8
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 8
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 7
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 7
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 6
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 6
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 6
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 6
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 6
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 6
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 6
- 108091033319 polynucleotide Chemical group 0.000 description 6
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 6
- 239000002157 polynucleotide Chemical group 0.000 description 6
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 6
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 6
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 6
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108091034117 Oligonucleotide Chemical group 0.000 description 5
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 5
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 5
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 5
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 5
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 5
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 5
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 5
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 5
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 5
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 5
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 4
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 4
- 102100026879 Interleukin-2 receptor subunit beta Human genes 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 4
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 4
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 4
- 239000003886 aromatase inhibitor Substances 0.000 description 4
- 229940046844 aromatase inhibitors Drugs 0.000 description 4
- 239000001045 blue dye Substances 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 4
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 6S-folinic acid Natural products C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000036487 Arthropathies Diseases 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 3
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 3
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 3
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 3
- 241000829100 Macaca mulatta polyomavirus 1 Species 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 3
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 3
- FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N Thiotepa Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=S)N1CC1 FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 229960003852 atezolizumab Drugs 0.000 description 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 description 3
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 3
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 3
- 235000008191 folinic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011672 folinic acid Substances 0.000 description 3
- VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N folinic acid Chemical compound C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N 0.000 description 3
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 108040002039 interleukin-15 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000008616 interleukin-15 receptor activity proteins Human genes 0.000 description 3
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 description 3
- 229960001691 leucovorin Drugs 0.000 description 3
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 3
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 3
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 3
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 3
- GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N raloxifene Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(C(=O)C=2C=CC(OCCN3CCCCC3)=CC=2)C2=CC=C(O)C=C2S1 GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 3
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 3
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- XRASPMIURGNCCH-UHFFFAOYSA-N zoledronic acid Chemical compound OP(=O)(O)C(P(O)(O)=O)(O)CN1C=CN=C1 XRASPMIURGNCCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OGSPWJRAVKPPFI-UHFFFAOYSA-N Alendronic Acid Chemical compound NCCCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O OGSPWJRAVKPPFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 2
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 2
- 244000303258 Annona diversifolia Species 0.000 description 2
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 description 2
- BFYIZQONLCFLEV-DAELLWKTSA-N Aromasine Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC(=C)C2=C1 BFYIZQONLCFLEV-DAELLWKTSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 2
- MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N BAY-43-9006 Chemical compound C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=CC(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N Capecitabine Chemical compound C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 2
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 2
- VWUXBMIQPBEWFH-WCCTWKNTSA-N Fulvestrant Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3[C@H](CCCCCCCCCS(=O)CCCC(F)(F)C(F)(F)F)CC2=C1 VWUXBMIQPBEWFH-WCCTWKNTSA-N 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 2
- 101001055157 Homo sapiens Interleukin-15 Proteins 0.000 description 2
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 101710154942 Interleukin-2 receptor subunit beta Proteins 0.000 description 2
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 2
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 2
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 2
- 101100519207 Mus musculus Pdcd1 gene Proteins 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 2
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 2
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 2
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 2
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 2
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 2
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 2
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 2
- 108020005067 RNA Splice Sites Proteins 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 206010038546 Renal vasculitis Diseases 0.000 description 2
- IIDJRNMFWXDHID-UHFFFAOYSA-N Risedronic acid Chemical compound OP(=O)(O)C(P(O)(O)=O)(O)CC1=CC=CN=C1 IIDJRNMFWXDHID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N THC Natural products C1=C(C)CCC2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3C21 CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NAVMQTYZDKMPEU-UHFFFAOYSA-N Targretin Chemical compound CC1=CC(C(CCC2(C)C)(C)C)=C2C=C1C(=C)C1=CC=C(C(O)=O)C=C1 NAVMQTYZDKMPEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 2
- DKJJVAGXPKPDRL-UHFFFAOYSA-N Tiludronic acid Chemical compound OP(O)(=O)C(P(O)(O)=O)SC1=CC=C(Cl)C=C1 DKJJVAGXPKPDRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 2
- IHGLINDYFMDHJG-UHFFFAOYSA-N [2-(4-methoxyphenyl)-3,4-dihydronaphthalen-1-yl]-[4-(2-pyrrolidin-1-ylethoxy)phenyl]methanone Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(CCC1=CC=CC=C11)=C1C(=O)C(C=C1)=CC=C1OCCN1CCCC1 IHGLINDYFMDHJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IBXPAFBDJCXCDW-MHFPCNPESA-A [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].Cc1cn([C@H]2C[C@H](O)[C@@H](COP([S-])(=O)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3CO)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].Cc1cn([C@H]2C[C@H](O)[C@@H](COP([S-])(=O)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3COP([O-])(=S)O[C@H]3C[C@@H](O[C@@H]3CO)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O IBXPAFBDJCXCDW-MHFPCNPESA-A 0.000 description 2
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 2
- 229960003437 aminoglutethimide Drugs 0.000 description 2
- ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N aminoglutethimide Chemical compound C=1C=C(N)C=CC=1C1(CC)CCC(=O)NC1=O ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YBBLVLTVTVSKRW-UHFFFAOYSA-N anastrozole Chemical compound N#CC(C)(C)C1=CC(C(C)(C#N)C)=CC(CN2N=CN=C2)=C1 YBBLVLTVTVSKRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 229940046836 anti-estrogen Drugs 0.000 description 2
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 2
- 239000013059 antihormonal agent Substances 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- QZPQTZZNNJUOLS-UHFFFAOYSA-N beta-lapachone Chemical compound C12=CC=CC=C2C(=O)C(=O)C2=C1OC(C)(C)CC2 QZPQTZZNNJUOLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 2
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 2
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 101150076615 ck gene Proteins 0.000 description 2
- ACSIXWWBWUQEHA-UHFFFAOYSA-N clodronic acid Chemical compound OP(O)(=O)C(Cl)(Cl)P(O)(O)=O ACSIXWWBWUQEHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- CHPZKNULDCNCBW-UHFFFAOYSA-N gallium nitrate Chemical compound [Ga+3].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O CHPZKNULDCNCBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011194 good manufacturing practice Methods 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000056003 human IL15 Human genes 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 description 2
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 238000012933 kinetic analysis Methods 0.000 description 2
- HPJKCIUCZWXJDR-UHFFFAOYSA-N letrozole Chemical compound C1=CC(C#N)=CC=C1C(N1N=CN=C1)C1=CC=C(C#N)C=C1 HPJKCIUCZWXJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N leuprolide Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N 0.000 description 2
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 2
- 229960004296 megestrol acetate Drugs 0.000 description 2
- RQZAXGRLVPAYTJ-GQFGMJRRSA-N megestrol acetate Chemical compound C1=C(C)C2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(C)=O)(OC(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RQZAXGRLVPAYTJ-GQFGMJRRSA-N 0.000 description 2
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 2
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 2
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 2
- QZGIWPZCWHMVQL-UIYAJPBUSA-N neocarzinostatin chromophore Chemical compound O1[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](NC)[C@H]1O[C@@H]1C/2=C/C#C[C@H]3O[C@@]3([C@@H]3OC(=O)OC3)C#CC\2=C[C@H]1OC(=O)C1=C(O)C=CC2=C(C)C=C(OC)C=C12 QZGIWPZCWHMVQL-UIYAJPBUSA-N 0.000 description 2
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 2
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 2
- 229960001756 oxaliplatin Drugs 0.000 description 2
- DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L oxaliplatin Chemical compound O1C(=O)C(=O)O[Pt]11N[C@@H]2CCCC[C@H]2N1 DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L 0.000 description 2
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 2
- WRUUGTRCQOWXEG-UHFFFAOYSA-N pamidronate Chemical compound NCCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O WRUUGTRCQOWXEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 238000010814 radioimmunoprecipitation assay Methods 0.000 description 2
- 229960004622 raloxifene Drugs 0.000 description 2
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 229940095743 selective estrogen receptor modulator Drugs 0.000 description 2
- 239000000333 selective estrogen receptor modulator Substances 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- PVYJZLYGTZKPJE-UHFFFAOYSA-N streptonigrin Chemical compound C=1C=C2C(=O)C(OC)=C(N)C(=O)C2=NC=1C(C=1N)=NC(C(O)=O)=C(C)C=1C1=CC=C(OC)C(OC)=C1O PVYJZLYGTZKPJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 2
- 229960001196 thiotepa Drugs 0.000 description 2
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 2
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 2
- UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N topotecan Chemical class C1=C(O)C(CN(C)C)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 2
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 2
- 229950000212 trioxifene Drugs 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- JXLYSJRDGCGARV-CFWMRBGOSA-N vinblastine Chemical compound C([C@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-CFWMRBGOSA-N 0.000 description 2
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 description 2
- UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N vindesine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1N=C1[C]2C=CC=C1 UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 2
- 229950009268 zinostatin Drugs 0.000 description 2
- 229960004276 zoledronic acid Drugs 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N (+)-estrone Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNJPGOLRFBJNIW-HNNXBMFYSA-N (-)-demecolcine Chemical compound C1=C(OC)C(=O)C=C2[C@@H](NC)CCC3=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C3C2=C1 NNJPGOLRFBJNIW-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- RIWLPSIAFBLILR-WVNGMBSFSA-N (2s)-1-[(2s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-[[(2s,3r)-2-[[(2r,3s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[2-[acetyl(methyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]pentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-5-(diaminomethy Chemical compound CC(=O)N(C)CC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC RIWLPSIAFBLILR-WVNGMBSFSA-N 0.000 description 1
- YXTKHLHCVFUPPT-YYFJYKOTSA-N (2s)-2-[[4-[(2-amino-5-formyl-4-oxo-1,6,7,8-tetrahydropteridin-6-yl)methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid;(1r,2r)-1,2-dimethanidylcyclohexane;5-fluoro-1h-pyrimidine-2,4-dione;oxalic acid;platinum(2+) Chemical compound [Pt+2].OC(=O)C(O)=O.[CH2-][C@@H]1CCCC[C@H]1[CH2-].FC1=CNC(=O)NC1=O.C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 YXTKHLHCVFUPPT-YYFJYKOTSA-N 0.000 description 1
- FLWWDYNPWOSLEO-HQVZTVAUSA-N (2s)-2-[[4-[1-(2-amino-4-oxo-1h-pteridin-6-yl)ethyl-methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1C(C)N(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FLWWDYNPWOSLEO-HQVZTVAUSA-N 0.000 description 1
- CGMTUJFWROPELF-YPAAEMCBSA-N (3E,5S)-5-[(2S)-butan-2-yl]-3-(1-hydroxyethylidene)pyrrolidine-2,4-dione Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]1NC(=O)\C(=C(/C)O)C1=O CGMTUJFWROPELF-YPAAEMCBSA-N 0.000 description 1
- TVIRNGFXQVMMGB-OFWIHYRESA-N (3s,6r,10r,13e,16s)-16-[(2r,3r,4s)-4-chloro-3-hydroxy-4-phenylbutan-2-yl]-10-[(3-chloro-4-methoxyphenyl)methyl]-6-methyl-3-(2-methylpropyl)-1,4-dioxa-8,11-diazacyclohexadec-13-ene-2,5,9,12-tetrone Chemical compound C1=C(Cl)C(OC)=CC=C1C[C@@H]1C(=O)NC[C@@H](C)C(=O)O[C@@H](CC(C)C)C(=O)O[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](Cl)C=2C=CC=CC=2)C/C=C/C(=O)N1 TVIRNGFXQVMMGB-OFWIHYRESA-N 0.000 description 1
- XRBSKUSTLXISAB-XVVDYKMHSA-N (5r,6r,7r,8r)-8-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-5-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydrobenzo[f][1,3]benzodioxole-6-carboxylic acid Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@H](O)[C@@H](CO)[C@@H]2C(O)=O)=C1 XRBSKUSTLXISAB-XVVDYKMHSA-N 0.000 description 1
- AESVUZLWRXEGEX-DKCAWCKPSA-N (7S,9R)-7-[(2S,4R,5R,6R)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7H-tetracene-5,12-dione iron(3+) Chemical compound [Fe+3].COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4C[C@@](O)(C[C@H](O[C@@H]5C[C@@H](N)[C@@H](O)[C@@H](C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO AESVUZLWRXEGEX-DKCAWCKPSA-N 0.000 description 1
- INAUWOVKEZHHDM-PEDBPRJASA-N (7s,9s)-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-7-[(2r,4s,5s,6s)-5-hydroxy-6-methyl-4-morpholin-4-yloxan-2-yl]oxy-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione;hydrochloride Chemical compound Cl.N1([C@H]2C[C@@H](O[C@@H](C)[C@H]2O)O[C@H]2C[C@@](O)(CC=3C(O)=C4C(=O)C=5C=CC=C(C=5C(=O)C4=C(O)C=32)OC)C(=O)CO)CCOCC1 INAUWOVKEZHHDM-PEDBPRJASA-N 0.000 description 1
- RCFNNLSZHVHCEK-IMHLAKCZSA-N (7s,9s)-7-(4-amino-6-methyloxan-2-yl)oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione;hydrochloride Chemical compound [Cl-].O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)C1CC([NH3+])CC(C)O1 RCFNNLSZHVHCEK-IMHLAKCZSA-N 0.000 description 1
- NOPNWHSMQOXAEI-PUCKCBAPSA-N (7s,9s)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-(2,3-dihydropyrrol-1-yl)-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione Chemical compound N1([C@H]2C[C@@H](O[C@@H](C)[C@H]2O)O[C@H]2C[C@@](O)(CC=3C(O)=C4C(=O)C=5C=CC=C(C=5C(=O)C4=C(O)C=32)OC)C(=O)CO)CCC=C1 NOPNWHSMQOXAEI-PUCKCBAPSA-N 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N (8S)-3-(2-deoxy-beta-D-erythro-pentofuranosyl)-3,6,7,8-tetrahydroimidazo[4,5-d][1,3]diazepin-8-ol Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NCC2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IEXUMDBQLIVNHZ-YOUGDJEHSA-N (8s,11r,13r,14s,17s)-11-[4-(dimethylamino)phenyl]-17-hydroxy-17-(3-hydroxypropyl)-13-methyl-1,2,6,7,8,11,12,14,15,16-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-one Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1[C@@H]1C2=C3CCC(=O)C=C3CC[C@H]2[C@H](CC[C@]2(O)CCCO)[C@@]2(C)C1 IEXUMDBQLIVNHZ-YOUGDJEHSA-N 0.000 description 1
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 1
- LKJPYSCBVHEWIU-KRWDZBQOSA-N (R)-bicalutamide Chemical compound C([C@@](O)(C)C(=O)NC=1C=C(C(C#N)=CC=1)C(F)(F)F)S(=O)(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LKJPYSCBVHEWIU-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- AGNGYMCLFWQVGX-AGFFZDDWSA-N (e)-1-[(2s)-2-amino-2-carboxyethoxy]-2-diazonioethenolate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CO\C([O-])=C\[N+]#N AGNGYMCLFWQVGX-AGFFZDDWSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- FONKWHRXTPJODV-DNQXCXABSA-N 1,3-bis[2-[(8s)-8-(chloromethyl)-4-hydroxy-1-methyl-7,8-dihydro-3h-pyrrolo[3,2-e]indole-6-carbonyl]-1h-indol-5-yl]urea Chemical compound C1([C@H](CCl)CN2C(=O)C=3NC4=CC=C(C=C4C=3)NC(=O)NC=3C=C4C=C(NC4=CC=3)C(=O)N3C4=CC(O)=C5NC=C(C5=C4[C@H](CCl)C3)C)=C2C=C(O)C2=C1C(C)=CN2 FONKWHRXTPJODV-DNQXCXABSA-N 0.000 description 1
- WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 1,3-dioxolane Chemical compound C1COCO1 WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTOTXLJHDSNXMW-POYBYMJQSA-N 2,3-dideoxyuridine Chemical compound O1[C@H](CO)CC[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 BTOTXLJHDSNXMW-POYBYMJQSA-N 0.000 description 1
- BOMZMNZEXMAQQW-UHFFFAOYSA-N 2,5,11-trimethyl-6h-pyrido[4,3-b]carbazol-2-ium-9-ol;acetate Chemical compound CC([O-])=O.C[N+]1=CC=C2C(C)=C(NC=3C4=CC(O)=CC=3)C4=C(C)C2=C1 BOMZMNZEXMAQQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCXJFISCRQIYID-IAEPZHFASA-N 2-amino-1-n-[(3s,6s,7r,10s,16s)-3-[(2s)-butan-2-yl]-7,11,14-trimethyl-2,5,9,12,15-pentaoxo-10-propan-2-yl-8-oxa-1,4,11,14-tetrazabicyclo[14.3.0]nonadecan-6-yl]-4,6-dimethyl-3-oxo-9-n-[(3s,6s,7r,10s,16s)-7,11,14-trimethyl-2,5,9,12,15-pentaoxo-3,10-di(propa Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N=C2C(C(=O)N[C@@H]3C(=O)N[C@H](C(N4CCC[C@H]4C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]3C)=O)[C@@H](C)CC)=C(N)C(=O)C(C)=C2O2)C2=C(C)C=C1 QCXJFISCRQIYID-IAEPZHFASA-N 0.000 description 1
- LGEXGKUJMFHVSY-UHFFFAOYSA-N 2-n,4-n,6-n-trimethyl-1,3,5-triazine-2,4,6-triamine Chemical compound CNC1=NC(NC)=NC(NC)=N1 LGEXGKUJMFHVSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTRPRMNBTVRDFH-UHFFFAOYSA-N 2-n-methyl-1,3,5-triazine-2,4,6-triamine Chemical class CNC1=NC(N)=NC(N)=N1 CTRPRMNBTVRDFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YIMDLWDNDGKDTJ-QLKYHASDSA-N 3'-deamino-3'-(3-cyanomorpholin-4-yl)doxorubicin Chemical compound N1([C@H]2C[C@@H](O[C@@H](C)[C@H]2O)O[C@H]2C[C@@](O)(CC=3C(O)=C4C(=O)C=5C=CC=C(C=5C(=O)C4=C(O)C=32)OC)C(=O)CO)CCOCC1C#N YIMDLWDNDGKDTJ-QLKYHASDSA-N 0.000 description 1
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWMYMKOUNYTVQN-UHFFFAOYSA-N 3-(8,8-diethyl-2-aza-8-germaspiro[4.5]decan-2-yl)-n,n-dimethylpropan-1-amine Chemical compound C1C[Ge](CC)(CC)CCC11CN(CCCN(C)C)CC1 PWMYMKOUNYTVQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 3-Epi-Betulin-Saeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-20(29)-Lupen-3,27-oic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C(O)=O)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 description 1
- CLPFFLWZZBQMAO-UHFFFAOYSA-N 4-(5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,5-a]pyridin-5-yl)benzonitrile Chemical compound C1=CC(C#N)=CC=C1C1N2C=NC=C2CCC1 CLPFFLWZZBQMAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AKJHMTWEGVYYSE-AIRMAKDCSA-N 4-HPR Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1NC(=O)/C=C(\C)/C=C/C=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C AKJHMTWEGVYYSE-AIRMAKDCSA-N 0.000 description 1
- DODQJNMQWMSYGS-QPLCGJKRSA-N 4-[(z)-1-[4-[2-(dimethylamino)ethoxy]phenyl]-1-phenylbut-1-en-2-yl]phenol Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 DODQJNMQWMSYGS-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- IDPUKCWIGUEADI-UHFFFAOYSA-N 5-[bis(2-chloroethyl)amino]uracil Chemical compound ClCCN(CCCl)C1=CNC(=O)NC1=O IDPUKCWIGUEADI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 5-azacytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 6-azauridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=N1 WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 0.000 description 1
- YCWQAMGASJSUIP-YFKPBYRVSA-N 6-diazo-5-oxo-L-norleucine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)C=[N+]=[N-] YCWQAMGASJSUIP-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 229960005538 6-diazo-5-oxo-L-norleucine Drugs 0.000 description 1
- ZGXJTSGNIOSYLO-UHFFFAOYSA-N 88755TAZ87 Chemical compound NCC(=O)CCC(O)=O ZGXJTSGNIOSYLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUXVKZWTXQUGMW-FQEVSTJZSA-N 9-Aminocamptothecin Chemical compound C1=CC(N)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 FUXVKZWTXQUGMW-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- HDZZVAMISRMYHH-UHFFFAOYSA-N 9beta-Ribofuranosyl-7-deazaadenin Natural products C1=CC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(O)C1O HDZZVAMISRMYHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 1
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 description 1
- WQVFQXXBNHHPLX-ZKWXMUAHSA-N Ala-Ala-His Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O WQVFQXXBNHHPLX-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N Ala-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- CEIZFXOZIQNICU-UHFFFAOYSA-N Alternaria alternata Crofton-weed toxin Natural products CCC(C)C1NC(=O)C(C(C)=O)=C1O CEIZFXOZIQNICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001889 Alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010061424 Anal cancer Diseases 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 1
- OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000002109 Argyria Diseases 0.000 description 1
- 206010053555 Arthritis bacterial Diseases 0.000 description 1
- 206010003267 Arthritis reactive Diseases 0.000 description 1
- KHCNTVRVAYCPQE-CIUDSAMLSA-N Asn-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KHCNTVRVAYCPQE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JHFNSBBHKSZXKB-VKHMYHEASA-N Asp-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O JHFNSBBHKSZXKB-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000000659 Autoimmune lymphoproliferative syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010064539 Autoimmune myocarditis Diseases 0.000 description 1
- 206010055128 Autoimmune neutropenia Diseases 0.000 description 1
- 206010050245 Autoimmune thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000003844 B-cell-activation Effects 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 239000012664 BCL-2-inhibitor Substances 0.000 description 1
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 1
- 229940123711 Bcl2 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- VGGGPCQERPFHOB-MCIONIFRSA-N Bestatin Chemical compound CC(C)C[C@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 VGGGPCQERPFHOB-MCIONIFRSA-N 0.000 description 1
- DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N Betulinic acid Natural products CC(=C)[C@@H]1C[C@H]([C@H]2CC[C@]3(C)[C@H](CC[C@@H]4[C@@]5(C)CC[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]5CC[C@@]34C)[C@@H]12)C(=O)O DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N 0.000 description 1
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- MBABCNBNDNGODA-LTGLSHGVSA-N Bullatacin Natural products O=C1C(C[C@H](O)CCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@@H]2O[C@@H]([C@@H]3O[C@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC3)CC2)=C[C@H](C)O1 MBABCNBNDNGODA-LTGLSHGVSA-N 0.000 description 1
- KGGVWMAPBXIMEM-ZRTAFWODSA-N Bullatacinone Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC[C@@H]1[C@@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCC[C@H]2OC(=O)[C@H](CC(C)=O)C2)CC1 KGGVWMAPBXIMEM-ZRTAFWODSA-N 0.000 description 1
- KGGVWMAPBXIMEM-JQFCFGFHSA-N Bullatacinone Natural products O=C(C[C@H]1C(=O)O[C@H](CCCCCCCCCC[C@H](O)[C@@H]2O[C@@H]([C@@H]3O[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC3)CC2)C1)C KGGVWMAPBXIMEM-JQFCFGFHSA-N 0.000 description 1
- 108010037003 Buserelin Proteins 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 1
- KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N Camptothecin Natural products CCC1(O)C(=O)OCC2=C1C=C3C4Nc5ccccc5C=C4CN3C2=O KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N Capecitabine Natural products C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1C1C(O)C(O)C(C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010667 Carcinoma of liver and intrahepatic biliary tract Diseases 0.000 description 1
- AOCCBINRVIKJHY-UHFFFAOYSA-N Carmofur Chemical compound CCCCCCNC(=O)N1C=C(F)C(=O)NC1=O AOCCBINRVIKJHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N Chloditan Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C(C(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 206010008609 Cholangitis sclerosing Diseases 0.000 description 1
- 206010008874 Chronic Fatigue Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 206010010941 Coombs positive haemolytic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 229930188224 Cryptophycin Natural products 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 101150074155 DHFR gene Proteins 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 1
- WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N Daunomycin Natural products CCC1(O)CC(OC2CC(N)C(O)C(C)O2)c3cc4C(=O)c5c(OC)cccc5C(=O)c4c(O)c3C1 WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 description 1
- XXGMIHXASFDFSM-UHFFFAOYSA-N Delta9-tetrahydrocannabinol Natural products CCCCCc1cc2OC(C)(C)C3CCC(=CC3c2c(O)c1O)C XXGMIHXASFDFSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNJPGOLRFBJNIW-UHFFFAOYSA-N Demecolcine Natural products C1=C(OC)C(=O)C=C2C(NC)CCC3=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C3C2=C1 NNJPGOLRFBJNIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 208000020401 Depressive disease Diseases 0.000 description 1
- 108010002156 Depsipeptides Proteins 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- AUGQEEXBDZWUJY-ZLJUKNTDSA-N Diacetoxyscirpenol Chemical compound C([C@]12[C@]3(C)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1C=C(C)CC[C@@]13COC(=O)C)O2 AUGQEEXBDZWUJY-ZLJUKNTDSA-N 0.000 description 1
- AUGQEEXBDZWUJY-UHFFFAOYSA-N Diacetoxyscirpenol Natural products CC(=O)OCC12CCC(C)=CC1OC1C(O)C(OC(C)=O)C2(C)C11CO1 AUGQEEXBDZWUJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- ZQZFYGIXNQKOAV-OCEACIFDSA-N Droloxifene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=C(O)C=CC=1)\C1=CC=C(OCCN(C)C)C=C1 ZQZFYGIXNQKOAV-OCEACIFDSA-N 0.000 description 1
- CYQFCXCEBYINGO-DLBZAZTESA-N Dronabinol Natural products C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@H]21 CYQFCXCEBYINGO-DLBZAZTESA-N 0.000 description 1
- 101150059079 EBNA1 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N Epirubicin Natural products COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4CC(O)(CC(OC5CC(N)C(=O)C(C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010008655 Epstein-Barr Virus Nuclear Antigens Proteins 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBVJJBKOTRCVKF-UHFFFAOYSA-N Etidronic acid Chemical compound OP(=O)(O)C(O)(C)P(O)(O)=O DBVJJBKOTRCVKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- MPJKWIXIYCLVCU-UHFFFAOYSA-N Folinic acid Natural products NC1=NC2=C(N(C=O)C(CNc3ccc(cc3)C(=O)NC(CCC(=O)O)CC(=O)O)CN2)C(=O)N1 MPJKWIXIYCLVCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- PABVKUJVLNMOJP-WHFBIAKZSA-N Glu-Cys Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PABVKUJVLNMOJP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 208000024869 Goodpasture syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010069236 Goserelin Proteins 0.000 description 1
- BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N Goserelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](COC(C)(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NNC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N 0.000 description 1
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 1
- 206010018634 Gouty Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010072579 Granulomatosis with polyangiitis Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 description 1
- 206010073069 Hepatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- 229920000209 Hexadimethrine bromide Polymers 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 1
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101001003140 Homo sapiens Interleukin-15 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001109508 Homo sapiens NKG2-A/NKG2-B type II integral membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 101001109501 Homo sapiens NKG2-D type II integral membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 1
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 description 1
- VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N Hydroxyurea Chemical compound NC(=O)NO VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020850 Hyperthyroidism Diseases 0.000 description 1
- MPBVHIBUJCELCL-UHFFFAOYSA-N Ibandronate Chemical compound CCCCCN(C)CCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O MPBVHIBUJCELCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000016300 Idiopathic chronic eosinophilic pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- JJKOTMDDZAJTGQ-DQSJHHFOSA-N Idoxifene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN2CCCC2)=CC=1)/C1=CC=C(I)C=C1 JJKOTMDDZAJTGQ-DQSJHHFOSA-N 0.000 description 1
- 208000004575 Infectious Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 108010053727 Interleukin-15 Receptor alpha Subunit Proteins 0.000 description 1
- 108010017535 Interleukin-15 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000004556 Interleukin-15 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 206010022941 Iridocyclitis Diseases 0.000 description 1
- 208000032382 Ischaemic stroke Diseases 0.000 description 1
- 102100023012 Kallistatin Human genes 0.000 description 1
- 208000011200 Kawasaki disease Diseases 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000005511 L01XE05 - Sorafenib Substances 0.000 description 1
- 244000207740 Lemna minor Species 0.000 description 1
- 235000006439 Lemna minor Nutrition 0.000 description 1
- 229920001491 Lentinan Polymers 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 208000012309 Linear IgA disease Diseases 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- MEPSBMMZQBMKHM-UHFFFAOYSA-N Lomatiol Natural products CC(=C/CC1=C(O)C(=O)c2ccccc2C1=O)CO MEPSBMMZQBMKHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- VJRAUFKOOPNFIQ-UHFFFAOYSA-N Marcellomycin Natural products C12=C(O)C=3C(=O)C4=C(O)C=CC(O)=C4C(=O)C=3C=C2C(C(=O)OC)C(CC)(O)CC1OC(OC1C)CC(N(C)C)C1OC(OC1C)CC(O)C1OC1CC(O)C(O)C(C)O1 VJRAUFKOOPNFIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 1
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N Mitobronitol Chemical compound BrC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010072915 NAc-Sar-Gly-Val-(d-allo-Ile)-Thr-Nva-Ile-Arg-ProNEt Proteins 0.000 description 1
- 241001045988 Neogene Species 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 description 1
- SYNHCENRCUAUNM-UHFFFAOYSA-N Nitrogen mustard N-oxide hydrochloride Chemical compound Cl.ClCC[N+]([O-])(C)CCCl SYNHCENRCUAUNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KGTDRFCXGRULNK-UHFFFAOYSA-N Nogalamycin Natural products COC1C(OC)(C)C(OC)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=C(O)C=C4C5(C)OC(C(C(C5O)N(C)C)O)OC4=C3C3=O)=C3C=C2C(C(=O)OC)C(C)(O)C1 KGTDRFCXGRULNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930187135 Olivomycin Natural products 0.000 description 1
- 208000003435 Optic Neuritis Diseases 0.000 description 1
- 102000016979 Other receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 229940124060 PD-1 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- VREZDOWOLGNDPW-ALTGWBOUSA-N Pancratistatin Chemical compound C1=C2[C@H]3[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3NC(=O)C2=C(O)C2=C1OCO2 VREZDOWOLGNDPW-ALTGWBOUSA-N 0.000 description 1
- VREZDOWOLGNDPW-MYVCAWNPSA-N Pancratistatin Natural products O=C1N[C@H]2[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]2c2c1c(O)c1OCOc1c2 VREZDOWOLGNDPW-MYVCAWNPSA-N 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 206010034277 Pemphigoid Diseases 0.000 description 1
- 108010057150 Peplomycin Proteins 0.000 description 1
- KIQUCMUULDXTAZ-HJOGWXRNSA-N Phe-Tyr-Tyr Chemical compound N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(O)=O KIQUCMUULDXTAZ-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- KMSKQZKKOZQFFG-HSUXVGOQSA-N Pirarubicin Chemical compound O([C@H]1[C@@H](N)C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1CCCCO1 KMSKQZKKOZQFFG-HSUXVGOQSA-N 0.000 description 1
- 206010036030 Polyarthritis Diseases 0.000 description 1
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 description 1
- 235000001855 Portulaca oleracea Nutrition 0.000 description 1
- HFVNWDWLWUCIHC-GUPDPFMOSA-N Prednimustine Chemical compound O=C([C@@]1(O)CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)[C@@H](O)C[C@@]21C)COC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 HFVNWDWLWUCIHC-GUPDPFMOSA-N 0.000 description 1
- 208000002500 Primary Ovarian Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079156 Proteasome inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100024924 Protein kinase C alpha type Human genes 0.000 description 1
- 101710109947 Protein kinase C alpha type Proteins 0.000 description 1
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 1
- AHHFEZNOXOZZQA-ZEBDFXRSSA-N Ranimustine Chemical compound CO[C@H]1O[C@H](CNC(=O)N(CCCl)N=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AHHFEZNOXOZZQA-ZEBDFXRSSA-N 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 1
- OWPCHSCAPHNHAV-UHFFFAOYSA-N Rhizoxin Natural products C1C(O)C2(C)OC2C=CC(C)C(OC(=O)C2)CC2CC2OC2C(=O)OC1C(C)C(OC)C(C)=CC=CC(C)=CC1=COC(C)=N1 OWPCHSCAPHNHAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NSFWWJIQIKBZMJ-YKNYLIOZSA-N Roridin A Chemical compound C([C@]12[C@]3(C)[C@H]4C[C@H]1O[C@@H]1C=C(C)CC[C@@]13COC(=O)[C@@H](O)[C@H](C)CCO[C@H](\C=C\C=C/C(=O)O4)[C@H](O)C)O2 NSFWWJIQIKBZMJ-YKNYLIOZSA-N 0.000 description 1
- CIEYTVIYYGTCCI-UHFFFAOYSA-N SJ000286565 Natural products C1=CC=C2C(=O)C(CC=C(C)C)=C(O)C(=O)C2=C1 CIEYTVIYYGTCCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061934 Salivary gland cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N Ser-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- 208000032384 Severe immune-mediated enteropathy Diseases 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 208000006045 Spondylarthropathies Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical class OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010042742 Sympathetic ophthalmia Diseases 0.000 description 1
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N T-2 toxin Chemical compound C([C@@]12[C@]3(C)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@]3(COC(C)=O)C[C@@H](C(=C1)C)OC(=O)CC(C)C)O2 BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 208000001106 Takayasu Arteritis Diseases 0.000 description 1
- WFWLQNSHRPWKFK-UHFFFAOYSA-N Tegafur Chemical compound O=C1NC(=O)C(F)=CN1C1OCCC1 WFWLQNSHRPWKFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CBPNZQVSJQDFBE-FUXHJELOSA-N Temsirolimus Chemical compound C1C[C@@H](OC(=O)C(C)(CO)CO)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 CBPNZQVSJQDFBE-FUXHJELOSA-N 0.000 description 1
- CGMTUJFWROPELF-UHFFFAOYSA-N Tenuazonic acid Natural products CCC(C)C1NC(=O)C(=C(C)/O)C1=O CGMTUJFWROPELF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COYHRQWNJDJCNA-NUJDXYNKSA-N Thr-Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O COYHRQWNJDJCNA-NUJDXYNKSA-N 0.000 description 1
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 1
- 101710183280 Topoisomerase Proteins 0.000 description 1
- IWEQQRMGNVVKQW-OQKDUQJOSA-N Toremifene citrate Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C(\C=1C=CC=CC=1)=C(\CCCl)C1=CC=CC=C1 IWEQQRMGNVVKQW-OQKDUQJOSA-N 0.000 description 1
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- UMILHIMHKXVDGH-UHFFFAOYSA-N Triethylene glycol diglycidyl ether Chemical compound C1OC1COCCOCCOCCOCC1CO1 UMILHIMHKXVDGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- FYAMXEPQQLNQDM-UHFFFAOYSA-N Tris(1-aziridinyl)phosphine oxide Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=O)N1CC1 FYAMXEPQQLNQDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 102100033733 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Human genes 0.000 description 1
- 101710187830 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Proteins 0.000 description 1
- KHPLUFDSWGDRHD-SLFFLAALSA-N Tyr-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N)C(=O)O KHPLUFDSWGDRHD-SLFFLAALSA-N 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 description 1
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- QIKVYJOCQXXRSJ-PKDLRSQSSA-N [(1s)-2-[[(1e)-1-[(1s,2r,3r)-3-acetyloxy-2-hydroxy-5-azabicyclo[3.1.0]hexan-4-ylidene]-2-[[(z)-1-hydroxy-3-oxobut-1-en-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-1-[(2s)-2-methyloxiran-2-yl]-2-oxoethyl] 3-methoxy-5-methylnaphthalene-1-carboxylate Chemical compound C[C@@]1([C@@H](C(=O)N\C(C(=O)N\C(=C/O)C(C)=O)=C/2N3C[C@H]3[C@@H](O)[C@@H]\2OC(C)=O)OC(=O)C=2C=C(C=C3C(C)=CC=CC3=2)OC)CO1 QIKVYJOCQXXRSJ-PKDLRSQSSA-N 0.000 description 1
- ZYVSOIYQKUDENJ-ASUJBHBQSA-N [(2R,3R,4R,6R)-6-[[(6S,7S)-6-[(2S,4R,5R,6R)-4-[(2R,4R,5R,6R)-4-[(2S,4S,5S,6S)-5-acetyloxy-4-hydroxy-4,6-dimethyloxan-2-yl]oxy-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-7-[(3S,4R)-3,4-dihydroxy-1-methoxy-2-oxopentyl]-4,10-dihydroxy-3-methyl-5-oxo-7,8-dihydro-6H-anthracen-2-yl]oxy]-4-[(2R,4R,5R,6R)-4-hydroxy-5-methoxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-2-methyloxan-3-yl] acetate Chemical class COC([C@@H]1Cc2cc3cc(O[C@@H]4C[C@@H](O[C@@H]5C[C@@H](O)[C@@H](OC)[C@@H](C)O5)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](C)O4)c(C)c(O)c3c(O)c2C(=O)[C@H]1O[C@H]1C[C@@H](O[C@@H]2C[C@@H](O[C@H]3C[C@](C)(O)[C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)O3)[C@H](O)[C@@H](C)O2)[C@H](O)[C@@H](C)O1)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O ZYVSOIYQKUDENJ-ASUJBHBQSA-N 0.000 description 1
- SPJCRMJCFSJKDE-ZWBUGVOYSA-N [(3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] 2-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]acetate Chemical compound O([C@@H]1CC2=CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)C(=O)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SPJCRMJCFSJKDE-ZWBUGVOYSA-N 0.000 description 1
- IFJUINDAXYAPTO-UUBSBJJBSA-N [(8r,9s,13s,14s,17s)-17-[2-[4-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]butanoyloxy]acetyl]oxy-13-methyl-6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-yl] benzoate Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](C2=CC=3)CC[C@]4([C@H]1CC[C@@H]4OC(=O)COC(=O)CCCC=1C=CC(=CC=1)N(CCCl)CCCl)C)CC2=CC=3OC(=O)C1=CC=CC=C1 IFJUINDAXYAPTO-UUBSBJJBSA-N 0.000 description 1
- XZSRRNFBEIOBDA-CFNBKWCHSA-N [2-[(2s,4s)-4-[(2r,4s,5s,6s)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-2,5,12-trihydroxy-7-methoxy-6,11-dioxo-3,4-dihydro-1h-tetracen-2-yl]-2-oxoethyl] 2,2-diethoxyacetate Chemical compound O([C@H]1C[C@](CC2=C(O)C=3C(=O)C4=CC=CC(OC)=C4C(=O)C=3C(O)=C21)(O)C(=O)COC(=O)C(OCC)OCC)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 XZSRRNFBEIOBDA-CFNBKWCHSA-N 0.000 description 1
- 108010023617 abarelix Proteins 0.000 description 1
- AIWRTTMUVOZGPW-HSPKUQOVSA-N abarelix Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)N(C)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AIWRTTMUVOZGPW-HSPKUQOVSA-N 0.000 description 1
- 229960002184 abarelix Drugs 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- ZOZKYEHVNDEUCO-XUTVFYLZSA-N aceglatone Chemical compound O1C(=O)[C@H](OC(C)=O)[C@@H]2OC(=O)[C@@H](OC(=O)C)[C@@H]21 ZOZKYEHVNDEUCO-XUTVFYLZSA-N 0.000 description 1
- 229950002684 aceglatone Drugs 0.000 description 1
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229930183665 actinomycin Natural products 0.000 description 1
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 229940037127 actonel Drugs 0.000 description 1
- 208000018254 acute transverse myelitis Diseases 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 229950004955 adozelesin Drugs 0.000 description 1
- BYRVKDUQDLJUBX-JJCDCTGGSA-N adozelesin Chemical compound C1=CC=C2OC(C(=O)NC=3C=C4C=C(NC4=CC=3)C(=O)N3C[C@H]4C[C@]44C5=C(C(C=C43)=O)NC=C5C)=CC2=C1 BYRVKDUQDLJUBX-JJCDCTGGSA-N 0.000 description 1
- 230000001919 adrenal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 229940062527 alendronate Drugs 0.000 description 1
- 229940045714 alkyl sulfonate alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 150000008052 alkyl sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 208000002029 allergic contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 229960000473 altretamine Drugs 0.000 description 1
- 229960002749 aminolevulinic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 229960001220 amsacrine Drugs 0.000 description 1
- XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N amsacrine Chemical compound COC1=CC(NS(C)(=O)=O)=CC=C1NC1=C(C=CC=C2)C2=NC2=CC=CC=C12 XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 201000007538 anal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960002932 anastrozole Drugs 0.000 description 1
- BBDAGFIXKZCXAH-CCXZUQQUSA-N ancitabine Chemical compound N=C1C=CN2[C@@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]3OC2=N1 BBDAGFIXKZCXAH-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- 229950000242 ancitabine Drugs 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 201000004612 anterior uveitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 229940030495 antiandrogen sex hormone and modulator of the genital system Drugs 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 229940045686 antimetabolites antineoplastic purine analogs Drugs 0.000 description 1
- 229940045687 antimetabolites folic acid analogs Drugs 0.000 description 1
- 229940045719 antineoplastic alkylating agent nitrosoureas Drugs 0.000 description 1
- 229940045713 antineoplastic alkylating drug ethylene imines Drugs 0.000 description 1
- 229940045688 antineoplastic antimetabolites pyrimidine analogues Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 150000008209 arabinosides Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 1
- 229940078010 arimidex Drugs 0.000 description 1
- 229940087620 aromasin Drugs 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000001974 autoimmune enteropathy Diseases 0.000 description 1
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 229960002756 azacitidine Drugs 0.000 description 1
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001541 aziridines Chemical class 0.000 description 1
- QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N betulinic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 229960002938 bexarotene Drugs 0.000 description 1
- 229960000997 bicalutamide Drugs 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229950008548 bisantrene Drugs 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 229950006844 bizelesin Drugs 0.000 description 1
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical class N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 208000010217 blepharitis Diseases 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 description 1
- 229960005520 bryostatin Drugs 0.000 description 1
- MJQUEDHRCUIRLF-TVIXENOKSA-N bryostatin 1 Chemical compound C([C@@H]1CC(/[C@@H]([C@@](C(C)(C)/C=C/2)(O)O1)OC(=O)/C=C/C=C/CCC)=C\C(=O)OC)[C@H]([C@@H](C)O)OC(=O)C[C@H](O)C[C@@H](O1)C[C@H](OC(C)=O)C(C)(C)[C@]1(O)C[C@@H]1C\C(=C\C(=O)OC)C[C@H]\2O1 MJQUEDHRCUIRLF-TVIXENOKSA-N 0.000 description 1
- MUIWQCKLQMOUAT-AKUNNTHJSA-N bryostatin 20 Natural products COC(=O)C=C1C[C@@]2(C)C[C@]3(O)O[C@](C)(C[C@@H](O)CC(=O)O[C@](C)(C[C@@]4(C)O[C@](O)(CC5=CC(=O)O[C@]45C)C(C)(C)C=C[C@@](C)(C1)O2)[C@@H](C)O)C[C@H](OC(=O)C(C)(C)C)C3(C)C MUIWQCKLQMOUAT-AKUNNTHJSA-N 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- MBABCNBNDNGODA-LUVUIASKSA-N bullatacin Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC[C@@H]1[C@@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCC[C@@H](O)CC=2C(O[C@@H](C)C=2)=O)CC1 MBABCNBNDNGODA-LUVUIASKSA-N 0.000 description 1
- CUWODFFVMXJOKD-UVLQAERKSA-N buserelin Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](COC(C)(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 CUWODFFVMXJOKD-UVLQAERKSA-N 0.000 description 1
- 229960002719 buserelin Drugs 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 108700002839 cactinomycin Proteins 0.000 description 1
- 229950009908 cactinomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229940088954 camptosar Drugs 0.000 description 1
- 229940127093 camptothecin Drugs 0.000 description 1
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical compound C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 229960004117 capecitabine Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- XREUEWVEMYWFFA-CSKJXFQVSA-N carminomycin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=C(O)C=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XREUEWVEMYWFFA-CSKJXFQVSA-N 0.000 description 1
- 229930188550 carminomycin Natural products 0.000 description 1
- XREUEWVEMYWFFA-UHFFFAOYSA-N carminomycin I Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=C(O)C=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XREUEWVEMYWFFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003261 carmofur Drugs 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 229950001725 carubicin Drugs 0.000 description 1
- 229950007509 carzelesin Drugs 0.000 description 1
- BBZDXMBRAFTCAA-AREMUKBSSA-N carzelesin Chemical compound C1=2NC=C(C)C=2C([C@H](CCl)CN2C(=O)C=3NC4=CC=C(C=C4C=3)NC(=O)C3=CC4=CC=C(C=C4O3)N(CC)CC)=C2C=C1OC(=O)NC1=CC=CC=C1 BBZDXMBRAFTCAA-AREMUKBSSA-N 0.000 description 1
- 108010047060 carzinophilin Proteins 0.000 description 1
- 229960000590 celecoxib Drugs 0.000 description 1
- RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N celecoxib Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=CC(C(F)(F)F)=NN1C1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000010267 cellular communication Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000002975 chemoattractant Substances 0.000 description 1
- 239000012829 chemotherapy agent Substances 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 208000019069 chronic childhood arthritis Diseases 0.000 description 1
- 201000009323 chronic eosinophilic pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 229960002286 clodronic acid Drugs 0.000 description 1
- HJKBJIYDJLVSAO-UHFFFAOYSA-L clodronic acid disodium salt Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])(=O)C(Cl)(Cl)P(O)([O-])=O HJKBJIYDJLVSAO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 208000018631 connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 229940111134 coxibs Drugs 0.000 description 1
- COFJBSXICYYSKG-OAUVCNBTSA-N cph2u7dndy Chemical compound OS(O)(=O)=O.C([C@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 COFJBSXICYYSKG-OAUVCNBTSA-N 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 108010089438 cryptophycin 1 Proteins 0.000 description 1
- PSNOPSMXOBPNNV-VVCTWANISA-N cryptophycin 1 Chemical compound C1=C(Cl)C(OC)=CC=C1C[C@@H]1C(=O)NC[C@@H](C)C(=O)O[C@@H](CC(C)C)C(=O)O[C@H]([C@H](C)[C@@H]2[C@H](O2)C=2C=CC=CC=2)C/C=C/C(=O)N1 PSNOPSMXOBPNNV-VVCTWANISA-N 0.000 description 1
- 108010090203 cryptophycin 8 Proteins 0.000 description 1
- PSNOPSMXOBPNNV-UHFFFAOYSA-N cryptophycin-327 Natural products C1=C(Cl)C(OC)=CC=C1CC1C(=O)NCC(C)C(=O)OC(CC(C)C)C(=O)OC(C(C)C2C(O2)C=2C=CC=CC=2)CC=CC(=O)N1 PSNOPSMXOBPNNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004921 cutaneous lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 239000003255 cyclooxygenase 2 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical class NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 229960005052 demecolcine Drugs 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 229950003913 detorubicin Drugs 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- RGLYKWWBQGJZGM-ISLYRVAYSA-N diethylstilbestrol Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(/CC)=C(\CC)C1=CC=C(O)C=C1 RGLYKWWBQGJZGM-ISLYRVAYSA-N 0.000 description 1
- 229960000452 diethylstilbestrol Drugs 0.000 description 1
- PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N dihydrobetulinic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(C)C)C5C4CCC3C21C PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N dl-camptothecin Natural products C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)C5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 1
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical compound CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930188854 dolastatin Natural products 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- ZWAOHEXOSAUJHY-ZIYNGMLESA-N doxifluridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ZWAOHEXOSAUJHY-ZIYNGMLESA-N 0.000 description 1
- 229950005454 doxifluridine Drugs 0.000 description 1
- NKZRZOVSJNSBFR-FEMMEMONSA-N doxorubicinol Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)[C@@H](O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 NKZRZOVSJNSBFR-FEMMEMONSA-N 0.000 description 1
- 229950004203 droloxifene Drugs 0.000 description 1
- 229960004242 dronabinol Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 229960005501 duocarmycin Drugs 0.000 description 1
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N duocarmycin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 description 1
- 229930184221 duocarmycin Natural products 0.000 description 1
- FSIRXIHZBIXHKT-MHTVFEQDSA-N edatrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CC(CC)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FSIRXIHZBIXHKT-MHTVFEQDSA-N 0.000 description 1
- 229950006700 edatrexate Drugs 0.000 description 1
- VLCYCQAOQCDTCN-UHFFFAOYSA-N eflornithine Chemical compound NCCCC(N)(C(F)F)C(O)=O VLCYCQAOQCDTCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940121647 egfr inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- XOPYFXBZMVTEJF-UHFFFAOYSA-N eleutherobin Natural products C1=CC2(OC)OC1(C)C(OC(=O)C=CC=1N=CN(C)C=1)CC(C(=CCC1C(C)C)C)C1C=C2COC1OCC(O)C(O)C1OC(C)=O XOPYFXBZMVTEJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XOPYFXBZMVTEJF-PDACKIITSA-N eleutherobin Chemical compound C(/[C@H]1[C@H](C(=CC[C@@H]1C(C)C)C)C[C@@H]([C@@]1(C)O[C@@]2(C=C1)OC)OC(=O)\C=C\C=1N=CN(C)C=1)=C2\CO[C@@H]1OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1OC(C)=O XOPYFXBZMVTEJF-PDACKIITSA-N 0.000 description 1
- 229950000549 elliptinium acetate Drugs 0.000 description 1
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 201000003914 endometrial carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 1
- JOZGNYDSEBIJDH-UHFFFAOYSA-N eniluracil Chemical compound O=C1NC=C(C#C)C(=O)N1 JOZGNYDSEBIJDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950010213 eniluracil Drugs 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- YJGVMLPVUAXIQN-UHFFFAOYSA-N epipodophyllotoxin Natural products COC1=C(OC)C(OC)=CC(C2C3=CC=4OCOC=4C=C3C(O)C3C2C(OC3)=O)=C1 YJGVMLPVUAXIQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 description 1
- 229930013356 epothilone Natural products 0.000 description 1
- 150000003883 epothilone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960001842 estramustine Drugs 0.000 description 1
- FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N estramustine Chemical compound ClCCN(CCCl)C(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- JKKFKPJIXZFSSB-CBZIJGRNSA-N estrone 3-sulfate Chemical compound OS(=O)(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JKKFKPJIXZFSSB-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229940009626 etidronate Drugs 0.000 description 1
- 229960005237 etoglucid Drugs 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960004945 etoricoxib Drugs 0.000 description 1
- MNJVRJDLRVPLFE-UHFFFAOYSA-N etoricoxib Chemical compound C1=NC(C)=CC=C1C1=NC=C(Cl)C=C1C1=CC=C(S(C)(=O)=O)C=C1 MNJVRJDLRVPLFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940085363 evista Drugs 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 229960000255 exemestane Drugs 0.000 description 1
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 229950011548 fadrozole Drugs 0.000 description 1
- 229940043168 fareston Drugs 0.000 description 1
- 229940087861 faslodex Drugs 0.000 description 1
- 210000001752 female genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 229940087476 femara Drugs 0.000 description 1
- 229950003662 fenretinide Drugs 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 229960000961 floxuridine Drugs 0.000 description 1
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 229960000390 fludarabine Drugs 0.000 description 1
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 description 1
- YLRFCQOZQXIBAB-RBZZARIASA-N fluoxymesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1CC[C@](C)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O YLRFCQOZQXIBAB-RBZZARIASA-N 0.000 description 1
- 229960001751 fluoxymesterone Drugs 0.000 description 1
- 229960002074 flutamide Drugs 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002224 folic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960004421 formestane Drugs 0.000 description 1
- OSVMTWJCGUFAOD-KZQROQTASA-N formestane Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1O OSVMTWJCGUFAOD-KZQROQTASA-N 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 229940001490 fosamax Drugs 0.000 description 1
- 229960004783 fotemustine Drugs 0.000 description 1
- YAKWPXVTIGTRJH-UHFFFAOYSA-N fotemustine Chemical compound CCOP(=O)(OCC)C(C)NC(=O)N(CCCl)N=O YAKWPXVTIGTRJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 229960002258 fulvestrant Drugs 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 229940044658 gallium nitrate Drugs 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 229940020967 gemzar Drugs 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 102000005396 glutamine synthetase Human genes 0.000 description 1
- 108020002326 glutamine synthetase Proteins 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 229960002913 goserelin Drugs 0.000 description 1
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000010370 hearing loss Effects 0.000 description 1
- 231100000888 hearing loss Toxicity 0.000 description 1
- 208000016354 hearing loss disease Diseases 0.000 description 1
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 1
- UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N hexamethylmelamine Chemical compound CN(C)C1=NC(N(C)C)=NC(N(C)C)=N1 UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000057310 human KLRC1 Human genes 0.000 description 1
- 102000044042 human KLRK1 Human genes 0.000 description 1
- 102000048362 human PDCD1 Human genes 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 229940088013 hycamtin Drugs 0.000 description 1
- 229960001330 hydroxycarbamide Drugs 0.000 description 1
- KNOSIOWNDGUGFJ-UHFFFAOYSA-N hydroxysesamone Natural products C1=CC(O)=C2C(=O)C(CC=C(C)C)=C(O)C(=O)C2=C1O KNOSIOWNDGUGFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022098 hypersensitivity pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 208000003532 hypothyroidism Diseases 0.000 description 1
- 230000002989 hypothyroidism Effects 0.000 description 1
- 229940015872 ibandronate Drugs 0.000 description 1
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 1
- 229950002248 idoxifene Drugs 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 1
- 208000015446 immunoglobulin a vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- DBIGHPPNXATHOF-UHFFFAOYSA-N improsulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCNCCCOS(C)(=O)=O DBIGHPPNXATHOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008097 improsulfan Drugs 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000010189 intracellular transport Effects 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007915 intraurethral administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 1
- 108010050180 kallistatin Proteins 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- SIUGQQMOYSVTAT-UHFFFAOYSA-N lapachol Natural products CC(=CCC1C(O)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SIUGQQMOYSVTAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWPGNVFCJOPXFB-UHFFFAOYSA-N lapachol Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(=O)C(CC=C(C)C)=C(O)C2=C1 CWPGNVFCJOPXFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940115286 lentinan Drugs 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 229960003881 letrozole Drugs 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N leuprolide acetate Chemical compound CC(O)=O.CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000002250 liver carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- YROQEQPFUCPDCP-UHFFFAOYSA-N losoxantrone Chemical compound OCCNCCN1N=C2C3=CC=CC(O)=C3C(=O)C3=C2C1=CC=C3NCCNCCO YROQEQPFUCPDCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008745 losoxantrone Drugs 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005243 lung squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010078259 luprolide acetate gel depot Proteins 0.000 description 1
- 229940087857 lupron Drugs 0.000 description 1
- RVFGKBWWUQOIOU-NDEPHWFRSA-N lurtotecan Chemical compound O=C([C@]1(O)CC)OCC(C(N2CC3=4)=O)=C1C=C2C3=NC1=CC=2OCCOC=2C=C1C=4CN1CCN(C)CC1 RVFGKBWWUQOIOU-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 1
- 229950002654 lurtotecan Drugs 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000019420 lymphoid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- MQXVYODZCMMZEM-ZYUZMQFOSA-N mannomustine Chemical compound ClCCNC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CNCCCl MQXVYODZCMMZEM-ZYUZMQFOSA-N 0.000 description 1
- 229950008612 mannomustine Drugs 0.000 description 1
- 229940099262 marinol Drugs 0.000 description 1
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 1
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 1
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical compound ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229960002985 medroxyprogesterone acetate Drugs 0.000 description 1
- PSGAAPLEWMOORI-PEINSRQWSA-N medroxyprogesterone acetate Chemical compound C([C@@]12C)CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@](OC(C)=O)(C(C)=O)CC[C@H]21 PSGAAPLEWMOORI-PEINSRQWSA-N 0.000 description 1
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- VJRAUFKOOPNFIQ-TVEKBUMESA-N methyl (1r,2r,4s)-4-[(2r,4s,5s,6s)-5-[(2s,4s,5s,6s)-5-[(2s,4s,5s,6s)-4,5-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-(dimethylamino)-6-methyloxan-2-yl]oxy-2-ethyl-2,5,7,10-tetrahydroxy-6,11-dioxo-3,4-dihydro-1h-tetracene-1-carboxylat Chemical compound O([C@H]1[C@@H](O)C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1[C@H](C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1C[C@]([C@@H](C2=CC=3C(=O)C4=C(O)C=CC(O)=C4C(=O)C=3C(O)=C21)C(=O)OC)(O)CC)N(C)C)[C@H]1C[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O1 VJRAUFKOOPNFIQ-TVEKBUMESA-N 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 1
- 229960005485 mitobronitol Drugs 0.000 description 1
- 229960003539 mitoguazone Drugs 0.000 description 1
- MXWHMTNPTTVWDM-NXOFHUPFSA-N mitoguazone Chemical compound NC(N)=N\N=C(/C)\C=N\N=C(N)N MXWHMTNPTTVWDM-NXOFHUPFSA-N 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-GUCUJZIJSA-N mitolactol Chemical compound BrC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- 229950010913 mitolactol Drugs 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 229960000350 mitotane Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000002864 mononuclear phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N monothioglycerol Chemical compound OCC(O)CS PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001725 mucocutaneous lymph node syndrome Diseases 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 208000029766 myalgic encephalomeyelitis/chronic fatigue syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 1
- NJSMWLQOCQIOPE-OCHFTUDZSA-N n-[(e)-[10-[(e)-(4,5-dihydro-1h-imidazol-2-ylhydrazinylidene)methyl]anthracen-9-yl]methylideneamino]-4,5-dihydro-1h-imidazol-2-amine Chemical compound N1CCN=C1N\N=C\C(C1=CC=CC=C11)=C(C=CC=C2)C2=C1\C=N\NC1=NCCN1 NJSMWLQOCQIOPE-OCHFTUDZSA-N 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 description 1
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 229940086322 navelbine Drugs 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 101150091879 neo gene Proteins 0.000 description 1
- MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N nepehinol Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 229960002653 nilutamide Drugs 0.000 description 1
- XWXYUMMDTVBTOU-UHFFFAOYSA-N nilutamide Chemical compound O=C1C(C)(C)NC(=O)N1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 XWXYUMMDTVBTOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001420 nimustine Drugs 0.000 description 1
- VFEDRRNHLBGPNN-UHFFFAOYSA-N nimustine Chemical compound CC1=NC=C(CNC(=O)N(CCCl)N=O)C(N)=N1 VFEDRRNHLBGPNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 description 1
- KGTDRFCXGRULNK-JYOBTZKQSA-N nogalamycin Chemical compound CO[C@@H]1[C@@](OC)(C)[C@@H](OC)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=C(O)C=C4[C@@]5(C)O[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]5O)N(C)C)O)OC4=C3C3=O)=C3C=C2[C@@H](C(=O)OC)[C@@](C)(O)C1 KGTDRFCXGRULNK-JYOBTZKQSA-N 0.000 description 1
- 229950009266 nogalamycin Drugs 0.000 description 1
- 229940085033 nolvadex Drugs 0.000 description 1
- 210000004967 non-hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 229940127073 nucleoside analogue Drugs 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229960000435 oblimersen Drugs 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- CZDBNBLGZNWKMC-MWQNXGTOSA-N olivomycin Chemical class O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1)O[C@H]1O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@H](O)[C@H](OC)[C@H](C)O1 CZDBNBLGZNWKMC-MWQNXGTOSA-N 0.000 description 1
- 229950011093 onapristone Drugs 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000000671 osmolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002357 osmotic agent Substances 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 229940046231 pamidronate Drugs 0.000 description 1
- VREZDOWOLGNDPW-UHFFFAOYSA-N pancratistatine Natural products C1=C2C3C(O)C(O)C(O)C(O)C3NC(=O)C2=C(O)C2=C1OCO2 VREZDOWOLGNDPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 229940046159 pegylated liposomal doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 description 1
- 208000030940 penile carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000008174 penis carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960002340 pentostatin Drugs 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N pentostatin Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC[C@H]2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N 0.000 description 1
- QIMGFXOHTOXMQP-GFAGFCTOSA-N peplomycin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCCN[C@@H](C)C=1C=CC=CC=1)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1NC=NC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C QIMGFXOHTOXMQP-GFAGFCTOSA-N 0.000 description 1
- 229950003180 peplomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 229950010632 perifosine Drugs 0.000 description 1
- SZFPYBIJACMNJV-UHFFFAOYSA-N perifosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCOP([O-])(=O)OC1CC[N+](C)(C)CC1 SZFPYBIJACMNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 201000002628 peritoneum cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- DDBREPKUVSBGFI-UHFFFAOYSA-N phenobarbital Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O DDBREPKUVSBGFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- NUKCGLDCWQXYOQ-UHFFFAOYSA-N piposulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCC(=O)N1CCN(C(=O)CCOS(C)(=O)=O)CC1 NUKCGLDCWQXYOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001100 piposulfan Drugs 0.000 description 1
- 229960001221 pirarubicin Drugs 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001237 podophyllotoxin Drugs 0.000 description 1
- YJGVMLPVUAXIQN-XVVDYKMHSA-N podophyllotoxin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@H](O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 YJGVMLPVUAXIQN-XVVDYKMHSA-N 0.000 description 1
- YVCVYCSAAZQOJI-UHFFFAOYSA-N podophyllotoxin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2C3=CC=4OCOC=4C=C3C(O)C3C2C(OC3)=O)=C1 YVCVYCSAAZQOJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 208000030428 polyarticular arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 229960004694 prednimustine Drugs 0.000 description 1
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 1
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 1
- 229940063238 premarin Drugs 0.000 description 1
- 206010036601 premature menopause Diseases 0.000 description 1
- 208000017942 premature ovarian failure 1 Diseases 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 201000000742 primary sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 1
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000583 progesterone congener Substances 0.000 description 1
- 230000003623 progesteronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003207 proteasome inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 1
- WOLQREOUPKZMEX-UHFFFAOYSA-N pteroyltriglutamic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(=O)NC(CCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)C=C1 WOLQREOUPKZMEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 230000000541 pulsatile effect Effects 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 229960002185 ranimustine Drugs 0.000 description 1
- BMKDZUISNHGIBY-UHFFFAOYSA-N razoxane Chemical compound C1C(=O)NC(=O)CN1C(C)CN1CC(=O)NC(=O)C1 BMKDZUISNHGIBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000460 razoxane Drugs 0.000 description 1
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- OWPCHSCAPHNHAV-LMONGJCWSA-N rhizoxin Chemical compound C/C([C@H](OC)[C@@H](C)[C@@H]1C[C@H](O)[C@]2(C)O[C@@H]2/C=C/[C@@H](C)[C@]2([H])OC(=O)C[C@@](C2)(C[C@@H]2O[C@H]2C(=O)O1)[H])=C\C=C\C(\C)=C\C1=COC(C)=N1 OWPCHSCAPHNHAV-LMONGJCWSA-N 0.000 description 1
- MBABCNBNDNGODA-WPZDJQSSSA-N rolliniastatin 1 Natural products O1[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC[C@H]1[C@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCC[C@@H](O)CC=2C(O[C@@H](C)C=2)=O)CC1 MBABCNBNDNGODA-WPZDJQSSSA-N 0.000 description 1
- IMUQLZLGWJSVMV-UOBFQKKOSA-N roridin A Natural products CC(O)C1OCCC(C)C(O)C(=O)OCC2CC(=CC3OC4CC(OC(=O)C=C/C=C/1)C(C)(C23)C45CO5)C IMUQLZLGWJSVMV-UOBFQKKOSA-N 0.000 description 1
- VHXNKPBCCMUMSW-FQEVSTJZSA-N rubitecan Chemical compound C1=CC([N+]([O-])=O)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VHXNKPBCCMUMSW-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 1
- 201000003804 salivary gland carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007480 sanger sequencing Methods 0.000 description 1
- 229930182947 sarcodictyin Natural products 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 1
- 208000010157 sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 208000037812 secondary pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 201000001223 septic arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 108091006024 signal transducing proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000034285 signal transducing proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 229940112726 skelid Drugs 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- VPZRWNZGLKXFOE-UHFFFAOYSA-M sodium phenylbutyrate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)CCCC1=CC=CC=C1 VPZRWNZGLKXFOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 229960003787 sorafenib Drugs 0.000 description 1
- 230000005328 spin glass Effects 0.000 description 1
- 229950006315 spirogermanium Drugs 0.000 description 1
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 1
- ICXJVZHDZFXYQC-UHFFFAOYSA-N spongistatin 1 Natural products OC1C(O2)(O)CC(O)C(C)C2CCCC=CC(O2)CC(O)CC2(O2)CC(OC)CC2CC(=O)C(C)C(OC(C)=O)C(C)C(=C)CC(O2)CC(C)(O)CC2(O2)CC(OC(C)=O)CC2CC(=O)OC2C(O)C(CC(=C)CC(O)C=CC(Cl)=C)OC1C2C ICXJVZHDZFXYQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 229940099419 targretin Drugs 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N taxol® Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(CC(C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3(C21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N 0.000 description 1
- 229940063683 taxotere Drugs 0.000 description 1
- 229960001674 tegafur Drugs 0.000 description 1
- WFWLQNSHRPWKFK-ZCFIWIBFSA-N tegafur Chemical compound O=C1NC(=O)C(F)=CN1[C@@H]1OCCC1 WFWLQNSHRPWKFK-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- 229960000235 temsirolimus Drugs 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- 229960005353 testolactone Drugs 0.000 description 1
- BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N testolactone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(OC(=O)CC4)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N 0.000 description 1
- 230000008646 thermal stress Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- YFTWHEBLORWGNI-UHFFFAOYSA-N tiamiprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC(N)=NC2=C1NC=N2 YFTWHEBLORWGNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940019375 tiludronate Drugs 0.000 description 1
- PLHJCIYEEKOWNM-HHHXNRCGSA-N tipifarnib Chemical compound CN1C=NC=C1[C@](N)(C=1C=C2C(C=3C=C(Cl)C=CC=3)=CC(=O)N(C)C2=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 PLHJCIYEEKOWNM-HHHXNRCGSA-N 0.000 description 1
- 229950009158 tipifarnib Drugs 0.000 description 1
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229960005026 toremifene Drugs 0.000 description 1
- XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N toremifene Chemical compound C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C(\C=1C=CC=CC=1)=C(\CCCl)C1=CC=CC=C1 XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000014723 transformation of host cell by virus Effects 0.000 description 1
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 208000009174 transverse myelitis Diseases 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- IUCJMVBFZDHPDX-UHFFFAOYSA-N tretamine Chemical compound C1CN1C1=NC(N2CC2)=NC(N2CC2)=N1 IUCJMVBFZDHPDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001353 tretamine Drugs 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- 229960004560 triaziquone Drugs 0.000 description 1
- PXSOHRWMIRDKMP-UHFFFAOYSA-N triaziquone Chemical compound O=C1C(N2CC2)=C(N2CC2)C(=O)C=C1N1CC1 PXSOHRWMIRDKMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229930013292 trichothecene Natural products 0.000 description 1
- 150000003327 trichothecene derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960001670 trilostane Drugs 0.000 description 1
- KVJXBPDAXMEYOA-CXANFOAXSA-N trilostane Chemical compound OC1=C(C#N)C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@@]32O[C@@H]31 KVJXBPDAXMEYOA-CXANFOAXSA-N 0.000 description 1
- NOYPYLRCIDNJJB-UHFFFAOYSA-N trimetrexate Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(NCC=2C(=C3C(N)=NC(N)=NC3=CC=2)C)=C1 NOYPYLRCIDNJJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001099 trimetrexate Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000875 trofosfamide Drugs 0.000 description 1
- UMKFEPPTGMDVMI-UHFFFAOYSA-N trofosfamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)OCCCN1CCCl UMKFEPPTGMDVMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950010147 troxacitabine Drugs 0.000 description 1
- RXRGZNYSEHTMHC-BQBZGAKWSA-N troxacitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1O[C@@H](CO)OC1 RXRGZNYSEHTMHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- HDZZVAMISRMYHH-LITAXDCLSA-N tubercidin Chemical compound C1=CC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@H]1O HDZZVAMISRMYHH-LITAXDCLSA-N 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229950009811 ubenimex Drugs 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 229960001055 uracil mustard Drugs 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000012991 uterine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229940099039 velcade Drugs 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- GBABOYUKABKIAF-IELIFDKJSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-IELIFDKJSA-N 0.000 description 1
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 1
- CILBMBUYJCWATM-PYGJLNRPSA-N vinorelbine ditartrate Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC CILBMBUYJCWATM-PYGJLNRPSA-N 0.000 description 1
- 229960001771 vorozole Drugs 0.000 description 1
- XLMPPFTZALNBFS-INIZCTEOSA-N vorozole Chemical compound C1([C@@H](C2=CC=C3N=NN(C3=C2)C)N2N=CN=C2)=CC=C(Cl)C=C1 XLMPPFTZALNBFS-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- 229940053867 xeloda Drugs 0.000 description 1
- 229940002005 zometa Drugs 0.000 description 1
- 229960000641 zorubicin Drugs 0.000 description 1
- FBTUMDXHSRTGRV-ALTNURHMSA-N zorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(\C)=N\NC(=O)C=1C=CC=CC=1)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 FBTUMDXHSRTGRV-ALTNURHMSA-N 0.000 description 1
Description
Область техники
Изобретение относится к иммуноцитокину, включающему гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15/IL-15Ra, и к его применению в качестве терапевтического средства, в частности в качестве средства для терапии рака и аутоиммунного заболевания. Настоящее изобретение также относится к иммуноцитокину, включающему гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15/IL-15Ra и иммуномодулирующее антитело, и к его применению в качестве терапевтического средства, в частности в качестве средства для терапии рака и аутоиммунного заболевания.
Предшествующий уровень техники
Цитокины относятся к категории сигнальных белков и гликопротеинов, которые как гормоны и нейротрансмиттеры, активно используются в клеточной коммуникации. Если гормоны секретируются в кровь определенными органами, а нейротрансмиттеры имеют отношение к нейрональной активности, то цитокины представляют собой более разнообразный класс соединений в отношении происхождения и назначения. Их продуцирует широкий круг гемопоэтических и негемопоэтических клеток, и они могут оказывать влияние как на близлежащие клетки, так и на весь организм, иногда проявляя сильную зависимость от присутствия других химических соединений. Семейство цитокинов состоит в основном из небольших водорастворимых белков и гликопротеинов массой от 8 до 30 кДа. Цитокины играют ключевую роль в реализации врожденного и приобретенного иммунных ответов. Их часто секретируют клетки иммунной системы, которые встретили патоген, для активации и мобилизации большего количества клеток иммунной системы и усиления ответа иммунной системы на патоген.
Среди цитокинов интерлейкин 15 (IL-15) является цитокином, обладающим структурным сходством с IL-2, секретирующимся мононуклеарными фагоцитами (и некоторыми другими клетками) в ответ на инфицирование вирусом(ами) или непрямую стимуляцию клетками, которые распознаются как не свои или ослабленные. Этот цитокин индуцирует пролиферацию естественных киллерных клеток; клеток, обеспечивающих врожденный иммунитет, основная роль которых заключается в уничтожении клеток, инфицированных вирусом. Белок, кодируемый этим геном, представляет собой цитокин, регулирующий активацию и пролиферацию Т клеток и естественных киллерных клеток.
Интерлейкин 15 (IL-15), является гликопротеином массой 14-15 кДа, одновременно относящимся к двум группам как фактор активации Т-клеток (Grabstein K.H. et al., Science 1994, 264, 965; Burton J.D. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1994, 91, 4935). мРНК IL-15 широко экспрессируется в различных клетках и тканях, однако обнаружить белок в этих клетках или в клеточном супернатанте затруднительно вследствие сильного посттранскрипционного контроля его экспрессии на уровне трансляции и внутриклеточного транспорта (Bamford RN. et al., J. Immunol. 1998, 160: 4418-4426; Kurys G. et al., J. Biol. Chem. 2000, 275: 30653-30659). Кроме того, показано, что IL-15 может существовать в активной форме в виде мембранного белка (Musso et al., Blood 1999, Vol. 93, No 10 (May 15),: pp 3531-3539), и недавно было замечено, что он может функционировать либо как лиганд, либо как рецептор (Budalgian et al., JBC 2004, vol 279, No 40: pp 42192-42201), индуцируя через этот путь секрецию провоспалительных цитокинов. Высокий уровень экспрессии растворимого белка был связан с патогенезом аутоиммунных и воспалительных заболеваний. IL-15 был обнаружен при некоторых заболеваниях, включая болезнь Крона (Kirman L., 1996, Am. J. Gastroenterol. 91, 1789), псориаз (Ruckert R. 2000, 165: 2240-2250), лейкемию (Yamada Y. 1999, Leukemia and Lymphoma, 35(1-2): 37-45) и ревматоидный артрит (PA), (Mclnnes I.B. 1998, Immunology Today, 19, 75-79). Связывание лиганда с Т-клеточным рецептором вызывает экспрессию IL-15Ra и экспрессию некоторых антигенов активации, таких как CD69, CD25 и TNFRII. Кроме того, IL-15 является хемоаттрактантом для Т лимфоцитов человеческой крови (Wilkinson 1995, J. Exp. Med. 181, 12551259). Все эти данные указывают на то, что IL-15, экспрессируемый антигенпредставляющими клетками, может играть важную роль в ранней активации Т-клеток на участке воспаления.
IL-15 представляет собой член небольшого семейства цитокинов, имеющих структуру пучка из четырех a-спиралей. Биологические эффекты IL-15 опосредуются через его связывание с рецептором клеточной мембраны, состоящим из трех субъединиц α, β, и γ. IL-15Ra является субъединицей, специфичной для этого цитокина, с которым она связывается с очень высокой аффинностью Kd 10-11, и может обнаруживаться в виде мембранного рецептора, или в растворимой форме (Budagian V. et al., JBC 2004, 279, 39: 40368-40375; Mortier et al., The Journal of Immunology, 2004, 173: 1681-1688). IL-15Ra содержит домен Sushi, который способен к связыванию с IL-15 и является существенным для биологических функций IL-15 после связывания.
IL-15 имеет недостатки, обусловленные небольшой молекулярной массой, коротким периодом полувыведения in vivo, слабо контролируемым повторным дозированием, и, вероятно, вызывает системный иммунный побочный эффект. Существует неотложная необходимость в нахождении подхода, который мог бы увеличить период полувыведения in vivo и стимулировать или усилить биологическую активность IL-15 in vivo.
Недавно обнаружено, что комплекс, образуемый IL-15 и его рецептором IL-15Ra, может значительно усиливать биологическую активность IL-15. Исследования показали, что комплекс, образуемый IL-15 и растворимым рецептором IL-15Ra, значительно превосходит отдельный IL-15 в стимуляции про- 1 043937 лиферации Т лимфоцитов памяти CD8+ и клеток NT/NKT. Комплекс IL-15/IL-15Ra более чем в 10 раз сильнее, чем отдельный IL-15, стимулирует пролиферацию Т лимфоцитов памяти CD8+ и поддерживает их выживание, при этом механизм этого действия может быть обусловлен цис-презентированием.
Международные заявки WO 2007046006, WO 2016095642 описывают слитый белок, предназначенный для стимуляции пути передачи сигнала через IL-15Rбета/гамма, с целью индуцировать и/или стимулировать активацию и/или пролиферацию IL-15Rбета/гамма-положительных клеток, таких как NKи/или Т-клетки, характеризующееся тем, что оно содержит IL-15, опосредованно связанный ковалентной связью с полипептидом, содержащим домен sushi внеклеточной области субъединицы альфа IL-15R, и к его применение при лечении рака. При этом экспериментальные данные и характеристики суперагониста в заявке WO 2007046006 представлены только для соединенного линкерным пептидом через N- и Стерминальные аминокислоты IL-15 с альфа IL-15R. Тогда как экспериментальные данные и характеристики суперагониста в заявке WO 2016095642 представлены только для соединенных химерной S-S связью, образуемой мутациями Cys в самих IL-15 лиганде и альфа IL-15R. Оба варианта не приводят доказательств активности и физикохимических характеристик вариантов IL15 суперагонистов, содержащих fusion белковые домены, соединенных S-S связью/ями или без S-S мостиков.
Данные объекты имеют недостатки, обусловленные небольшой молекулярной массой, коротким периодом полувыведения in vivo. Они обладают ограниченной активностью интерлейкина 15, а их продукция очень затруднена, в частности, в клетках яичников китайского хомячка (от англ. Chinese hamster ovary cells), и сопровождается низким выходом.
Международные заявки WO 2015103928, WO 2018071919 описывают варианты решения вышеуказанных проблем, а именно гетеродимерный белок-агонист IL-15, состоящий из белка (I) и белка (II), где указанный белок (I) образован IL-15, слитым с первым вариантом Fc, причем первый вариант Fc связан с С-концом IL-15, а указанный белок (II) представляет собой второй вариант Fc или образован IL-15Ra или его вариантом, слитым со вторым вариантом Fc, причем второй вариант Fc связан с С-концом IL15Ra. Белок (I) и белок (II) образуют стабильный гетеродимерный белок посредством взаимодействия с образованием структуры выступ (Knob) во впадину (Hole) между первым вариантом Fc и вторым вариантом Fc.
Создание иммуноцитокинов на основе IL-15 представляет особый интерес для сочетания полезных свойств опухолеспецифических антител, мишенями которых являются опухоли, с иммуномодулирующим действием интерлейкина 15.
Международные заявки WO 2015018528, WO2018071918 описывают иммуноцитокин, содержащий конъюгат и иммуномодулирующее антитело или его фрагмент, напрямую или опосредовано связанные ковалентной связью с указанным конъюгатом, где указанный конъюгат содержит полипептид, содержащий аминокислотную последовательность интерлейкина-15 или его производных, и полипептид, содержащий аминокислотную последовательность домена sushi IL-15Ra или его производных.
Международная заявка WO 2012175222 описывает иммуноцитокин для лечения рака, который содержит конъюгат и антитело или его фрагмент, который выбран из группы, состоящей из Fab фрагмента, Fab' фрагмента, F(ab')2 фрагмента, Facb, Fd, и scFv, где указанный конъюгат включает полипептид, содержащий аминокислотную последовательность интерлейкина 15, и полипептид, содержащий аминокислотную последовательность домена sushi IL-15Ra. Конъюгат и антитело или его фрагмент ковалентно связаны при помощи бифункциональных сшивающих агентов, обеспечивающих присоединение белков.
Международная заявка WO 2019006472 описывает бифункциональный гетеродимерный белок, содержащий слитый белок IL-15/IL-15Ra, который включает белок IL-15Ra, белок IL-15 и первый домен Fc; и мономер антигенсвязывающего домена, который связывает антиген, выбранный из группы, состоящей из CD8 человека, NKG2A человека и NKG2D человека, содержащий тяжелую цепь, включающую мономер VH-СН1-шарнир-СН2-CH3, где VH представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи, а СН2-СНЗ представляет собой второй домен Fc, и легкая цепь содержит вариабельную легкую цепь (VL) и легкий константный домен (CL), где указанные первый и указанный вторые домены Fc имеют набор аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из
S267K/L368D/K370S:S267K/S364K/E357Q;
S364K/E357Q:L368D/K370S;
L368D/K370S:S364K;
L368E/K370S:S364K;
Т411T/K360E/Q362E:D401K;
L368D/K370S:S364K/E357L и
K370S:S364K/E357Q.
Несмотря на вышеуказанные в уровне техники решения для комплекса, образованного IL-15 и его рецептором IL-15Ra, все еще существует потребность в молекуле на основе IL15, которая будет иметь высокую стабильность, пролонгированный период полувыведения in vivo, повышенную биологическую
- 2 043937 активность in vivo и повышенную продуктивность в клетках млекопитающих.
Разработанный авторами данного изобретения новый формат иммуноцитокина, который включает гетеродимерные молекулы на основе IL-15 и IL-15Ra, проявляют более высокую стабильность, повышенную продуктивность в клетках млекопитающих, пролонгированный период полувыведения in vivo и повышенную биологическую активность in vivo. Кроме того, они представляют из себя универсальный формат для биспецифического иммуноцитокина, обладающего свойством IL15 активности. Разработанный авторами данного изобретения новый формат иммуноцитокина обладает пониженной токсичностью по результатам доклинических исследований.
Краткое описание изобретения
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к иммуноцитокину для стимулирования активации и/или пролиферации IL-15Rбета/гамма-положительных клеток, который включает гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra, содержащий:
1) IL-15Ra, который связан с:
а) константным доменом легкой цепи антитела; или
б) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи;
2) IL-15, который связан с:
а) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, или
б) константным доменом легкой цепи антитела;
при этом первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса имеют или не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик и, где, если IL-15 или IL-15Ra связан с константным доменом легкой цепи антитела, то другая часть гетеродимерного белкового комплекса, выбранная из IL-15Ra или IL-15, связана с константными доменами тяжелой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает константный домен легкой цепи антитела, который выбирают из CK или CL.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra с аминокислотной последовательностью, которая представлена SEQ ID NO: 9 или любой известный вариант IL-15Ra, содержащий мутации, с аналогичной биологической активностью.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 10 или любой известный вариант IL-15, содержащий мутации, с аналогичной биологической активностью.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, который связан с константным доменом легкой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 19.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который связан с константным доменом легкой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 21.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, которые соединены через шарнир.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15 или IL-15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, идущими в следующем порядке СН1-шарнир-СН2-CH3.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ
- 3 043937
ID NO: 4 или SEQ ID NO: 22.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 20.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает
IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 19, а
IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 20.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 22, а
IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 21.
В некоторых вариантах иммуноцитокин имеет мутации в мономере Fc-фрагмента, приводящие к отсутствию ADCC, CDC и/или ADCP свойств у указанного иммуноцитокина.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает Fc-фрагмент, который относится к IgG.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает Fc-фрагмент, который выбирают из группы: IgG1, IgG2, или IgG4 человека.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает два вышеуказанных гетеродимерных белковых комплекса на основе IL-15 и IL-15Ra.
В некоторых вариантах иммуноцитокин применяют в качестве терапевтического средства для терапии рака или аутоиммунного заболевания.
В некоторых вариантах иммуноцитокин применяют в качестве терапевтического средства для терапии рака.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к иммуноцитокину для стимулирования активации и/или пролиферации IL-15Rбета/гамма-положительных клеток, который включает гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra и иммуномодулирующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически ингибируют PD-1 путь, где гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra содержит:
1) IL-15Ra, который связан с:
а) константным доменом легкой цепи антитела; или
б) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи;
2) IL-15, который связан с:
а) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, или
б) константным доменом легкой цепи антитела, при этом первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса имеют или не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик и, где, если IL-15 или IL-15Ra связан с константным доменом легкой цепи антитела, то другая часть гетеродимерного белкового комплекса, выбранная из IL-15Ra или IL-15, связана с константными доменами тяжелой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает константный домен легкой цепи антитела, который выбирают из CK или CL.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, который имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 9 или любой известный вариант IL-15Ra, содержащий мутации, с аналогичной биологической активностью.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 10 или любой известный вариант IL-15, содержащий му- 4 043937 тации, с аналогичной биологической активностью.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, который связан с константным доменом легкой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 19.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который связан с константным доменом легкой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 21.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, которые соединены через шарнир.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15 или IL-15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, идущими в следующем порядке СН1-шарнир-СН2-CH3.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 6 или SEQ ID NO: 24.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 23.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически ингибируют PD-1 путь, и представляет собой антитело, которое специфически связывается с PD-1.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело, которое включает:
а) легкую цепь, содержащую вариабельный домен легкой цепи и константный домен легкой цепи;
б) тяжелую цепь, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи и константные домены тяжелой цепи антитела, включающие первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает вариабельный домен легкой цепи, который включает LCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые, соответственно, представлены аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15 и SEQ ID NO: 16.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает вариабельный домен легкой цепи, который включает аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 18.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает вариабельный домен тяжелой цепи, который включает HCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые, соответственно, представлены аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12 и SEQ ID NO: 13.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает вариабельный домен тяжелой цепи, который включает аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 17.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
1) вариабельный домен легкой цепи, который включает LCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые, соответственно, представлены аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15 и SEQ ID NO: 16;
2) вариабельный домен тяжелой цепи, который включает HCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые, соответственно, представлены аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12 и SEQ ID NO: 13.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
1) вариабельный домен легкой цепи, который включает аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 18;
2) вариабельный домен тяжелой цепи, который включает аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 17.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело, которое включает легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 8.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело, которое включает тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID
- 5 043937
NO: 7.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело, которое включает тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 7;
легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 8.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически ингибируют PD-1 путь, которое представляет собой антитело, которое специфически связывается с PD-L1.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
а) гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra, который содержит
IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 19, а
IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 23;
б) иммуномодулирующее антитело, которое включает тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 7;
легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 8.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
а) IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 6 или SEQ ID NO: 24, а IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 21;
б) иммуномодулирующее антитело, которое включает тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 7;
легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 8.
В некоторых вариантах иммуноцитокин имеет мутации в константных доменах антитела, обуславливающие гетеродимеризацию двух разных частей, одна из которых включает ковалентно или нековаленотно ассоциированные IL-15Ra, связанный с константными доменами антитела, и IL-15, связанный с константным доменом антитела, а другая включает ковалентно или нековаленотно ассоциированные легкую и тяжелую цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый мономер Fc и второй мономер Fc, которые выбраны из группы: первый мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Knob, а второй мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Hole, или когда второй мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Knob, а первый мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Hole.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый мономер Fc, который имеет аминокислотные замены S354C/T366W, и второй мономер Fc, который имеет аминокислотные замены Y349C/T366S/L368A/Y407V.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый мономер Fc, который имеет аминокислотные замены Y349C/T366S/L368A/Y407, и второй мономер Fc, который имеет аминокислотные замены S354C/T366W.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает Fc-фрагмент, который относится к IgG.
В некоторых вариантах иммуноцитокин, где изотип Fc-фрагмента выбирают из группы: IgG1, IgG2, или IgG4 человека.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает мутации в мономере Fc-фрагмента, приводящие к отсутствию ADCC, CDC и/или ADCP свойств у указанного иммуноцитокина.
В некоторых вариантах иммуноцитокин применяют для лечения онкологического или аутоиммунного заболевания.
В некоторых вариантах иммуноцитокин применяют для лечения онкологического заболевания.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к выделенной нуклеиновой кислоте, которая кодирует любой из вышеуказанных иммуноцитокинов.
В некоторых вариантах нуклеиновая кислота представляет собой ДНК.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к экспрессионному вектору, который содержит вышеуказанную нуклеиновую кислоту.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу получения клетки-хозяина для получения вышеуказанного иммуноцитокина, который включает трансформирование клетки вышеуказанным вектором.
- 6 043937
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к клетке-хозяину для получения вышеуказанного иммуноцитокина, которая содержит вышеуказанную нуклеиновую кислоту.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу получения препарата, содержащего вышеуказанный иммуноцитокин, который заключается в культивировании вышеуказанной клеткихозяина в культуральной среде в условиях, достаточных для получения указанного иммуноцитокина, при необходимости, с последующим выделением и очисткой полученного иммуноцитокина.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для стимулирования активации и/или пролиферации IL-15Rбета/гамма-положительных клеток, которая содержит вышеуказанный иммуноцитокин в терапевтически эффективном количестве, в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами.
В некоторых вариантах фармацевтическая композиция применяется для лечения онкологического или аутоиммунного заболевания.
В некоторых вариантах фармацевтическая композиция применяется для лечения онкологического заболевания.
В некоторых вариантах фармацевтическая композиция применяется для лечения онкологического заболевания, которое выбирают из группы: ПРГШ (плоскоклеточный рак головы и шеи), рак шейки матки, рак без выявленного первоисточника, глиобластома, рак пищевода, рак мочевого пузыря, ТНРМЖ (трижды негативный рак молочной железы), КРР (колоректальный рак), гепатоцеллюлярная карцинома, меланома, НМРЛ (Немелкоклеточный рак легкого), рак почки, рак яичника, MSI КРР (колоректальный рак с высокой микросателлитной нестабильностью), лейкоз (острый или миелобластный), лимфома, множественная миелома, меланома, рак молочной железы, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, саркома, гепатоцеллюлярная карцинома, глиобластома, лимфома Ходжкина, Т- и В-клеточном острый лимфобластный лейкоз, мелкоклеточный рак лёгкого, острый миелобластный лейкоз, рефрактерная В-клеточная неходжкинская лимфома, фолликулярная лимфома, В-клеточная лимфома маргинальной зоны, крупноклеточная В-клеточной диффузная лимфома, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак поджелудочной железы, рак яичника, острый миелобластный лейкоз и миелодиспластический синдром высокого риска.
В одном из аспектов изобретение относится к способу лечения онкологического заболевания, который включает введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, вышеуказанного иммуноцитокина или вышеуказанной фармацевтической композиции в терапевтически эффективном количестве.
В некоторых вариантах способа лечения, онкологическое заболевание выбрано из группы: ПРГШ (плоскоклеточный рак головы и шеи), рак шейки матки, рак без выявленного первоисточника, глиобластома, рак пищевода, рак мочевого пузыря, ТНРМЖ (трижды негативный рак молочной железы), КРР (колоректальный рак), гепатоцеллюлярная карцинома, меланома, НМРЛ (Немелкоклеточный рак легкого), рак почки, рак яичника, MSI КРР (колоректальный рак с высокой микросателлитной нестабильностью), лейкоз (острый или миелобластный), лимфома, множественная миелома, меланома, рак молочной железы, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, саркома, гепатоцеллюлярная карцинома, глиобластома, лимфома Ходжкина, Т- и В-клеточном острый лимфобластный лейкоз, мелкоклеточный рак лёгкого, острый миелобластный лейкоз, рефрактерная В-клеточная неходжкинская лимфома, фолликулярная лимфома, В-клеточная лимфома маргинальной зоны, крупноклеточная Вклеточной диффузная лимфома, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак поджелудочной железы, рак яичника, острый миелобластный лейкоз и миелодиспластический синдром высокого риска.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу активации биологической активности Т клеточной популяции или NK клеточной популяции у субъекта, нуждающегося в такой активации, который включает введение субъекту эффективного количества вышеуказанного иммуноцитокина или вышеуказанной фармацевтической композиции.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к применению вышеуказанного иммуноцитокина или вышеуказанной фармацевтической композиции для лечения у субъекта, нуждающегося в таком лечении, онкологического заболевания.
В некоторых вариантах применения онкологическое заболевание выбрано из группы: ПРГШ (плоскоклеточный рак головы и шеи), рак шейки матки, рак без выявленного первоисточника, глиобластома, рак пищевода, рак мочевого пузыря, ТНРМЖ (трижды негативный рак молочной железы), КРР (колоректальный рак), гепатоцеллюлярная карцинома, меланома, НМРЛ (немелкоклеточный рак легкого), рак почки, рак яичника, MSI КРР (колоректальный рак с высокой микросателлитной нестабильностью), лейкоз (острый или миелобластный), лимфома, множественная миелома, меланома, рак молочной железы, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, саркома, гепатоцеллюлярная карцинома, глиобластома, лимфома Ходжкина, Т- и В-клеточном острый лимфобластный лейкоз, мелкоклеточный рак лёгкого, острый миелобластный лейкоз, рефрактерная В-клеточная неходжкинская лимфома, фолликулярная лимфома, В-клеточная лимфома маргинальной зоны, крупноклеточная Вклеточной диффузная лимфома, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак поджелудочной железы, рак яичника, острый миелобластный лейкоз и миелодиспластический синдром высокого риска.
- 7 043937
Краткое описание фигур
Фиг. 1. Формат иммуноцитокина, включающего гетеродимерный белковый комплекс на основе IL15 и IL-15Ra (CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA).
Фиг. 2. Формат иммуноцитокина, включающего гетеродимерный белковый комплекс на основе IL15 и IL-15Ra (CK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcLALA).
Фиг. 3. Формат иммуноцитокина, включающего гетеродимерный белковый комплекс на основе IL15 и IL-15Ra и иммуномодулирующее антитело, которое специфически ингибирует PD-1 путь (FabCK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcknobLALA). Под knob подразумеваются мутации с образованием структуры выступ (Knob) во впадину (Hole) между первым вариантом Fc и вторым вариантом Fc в CH3 домене.
Фиг. 4. Формат иммуноцитокина, включающего гетеродимерный белковый комплекс на основе IL15 и IL-15Ra и иммуномодулирующее антитело, которое специфически ингибирует PD-1 путь (FabCK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcknobLALA). Под knob подразумеваются мутации с образованием структуры выступ (Knob) во впадину (Hole) между первым вариантом Fc и вторым вариантом Fc в CH3 домене.
Фиг. 5. Вектор pEE-IL15Ra-CK.
AmpR - ген бета-лактамазы, обеспечивающий устойчивость к ампициллину, pUC origin- pUC ориджин репликации в бактериях,
CMV-Promoter - промотор ранних генов цитомегаловируса, leader-лидерная последовательность,
IL15Ra - ген, кодирующий субъединицу а рецептора интерлейкина 15,
CK - ген, кодирующий константный домен легкой цепи,
Poly A - последовательность сигнала полиаденилирования, для повышения стабильности мРНК,
OriP- ориджин репликации в бактериях или высококопийный ColE1/pMB1/pBR322/pUC ориджин репликации в бактериальных клетках.
Фиг. 6. Вектор pEE-IL15-CH1-Fc-LALA.
AmpR - ген бета-лактамазы, обеспечивающий устойчивость к ампициллину, pUC origin - pUC ориджин репликации в бактериях,
CMV-Promoter - промотор ранних генов цитомегаловируса, leader-лидерная последовательность,
IL15 - ген, кодирующий интерлейкин 15,
СН1 - ген, кодирующий первый константный домен тяжелой цепи,
Fc-LALA - ген, кодирующий Fc-фрагмент с мутациями LALA (мутации L234A и L235A в константном домене СН2 Fc-фрагмента),
Poly A - последовательность сигнала полиаденилирования, для повышения стабильности мРНК,
OriP- ориджин репликации в бактериях или высококопийный ColE1/pMB1/pBR322/pUC ориджин репликации в бактериальных клетках.
Фиг. 7. Вектор pEE-BCD100-02-VL-CK.
AmpR - ген бета-лактамазы, обеспечивающий устойчивость к ампициллину, pUC origin - pUC ориджин репликации в бактериях,
CMV-Promoter - промотор ранних генов цитомегаловируса, leader-лидерная последовательность, aPD1-VL - ген, кодирующий легкую цепь антитела, которое специфически связывается с PD1,
CK - ген, кодирующий константный домен легкой цепи,
Poly A - последовательность сигнала полиаденилирования, для повышения стабильности мРНК,
OriP- ориджин репликации в бактериях или высококопийный ColE1/pMB1/pBR322/pUC ориджин репликации в бактериальных клетках.
Фиг. 8. Вектор pEE-BCD100-02-VH-CH1-Fc-hole-LALA.
AmpR - ген бета-лактамазы, обеспечивающий устойчивость к ампициллину, pUC origin - pUC ориджин репликации в бактериях, promoter - промотор ранних генов цитомегаловируса, leader - лидерная последовательность, aPD1-VH - ген, кодирующий вариабельный домен тяжелой цепи антитела, которое специфически связывается с PD1,
СН1 - ген, кодирующий первый константный домен тяжелой цепи,
Fc-hole-LALA - ген, кодирующий Fc-фрагмент с мутациями для образования hole и LALA (мутации L234A и L235A в константном домене СН2 Fc-фрагмента),
STOP - стоп-кодон,
OriP - ориджин репликации в бактериях или высококопийный ColE1/pMB1/pBR322/pUC ориджин репликации в бактериальных клетках.
Фиг. 9. Вектор pEE-IL15-CH1-Fc-knob-LALA.
AmpR - ген бета-лактамазы, обеспечивающий устойчивость к ампициллину, pUC origin - pUC ориджин репликации в бактериях,
- 8 043937
CMV-Promoter - промотор ранних генов цитомегаловируса,
Leader - лидерная последовательность,
IL15 - ген, кодирующий интерлейкин 15,
СН1 - ген, кодирующий первый константный домен тяжелой цепи,
Fc-knob-LALA - ген, кодирующий Fc-фрагмент с мутациями для образования knob и LALA (мутации L234A и L235A в константном домене СН2 Fc-фрагмента),
STOP - стоп-кодон,
OriP - ориджин репликации в бактериях или высококопийный ColE1/pMB1/pBR322/pUC ориджин репликации в бактериальных клетках.
Фиг. 10А. SDS-гель-электрофорез с бета-меркаптоэтанолом.
1. Контрольное антитело 5 мкл.
2. Fermentas unstained marker.
3. -
4. Среда роста с CKIL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA до очистки 10 мкл.
5. Среда роста с CKIL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA после очистки 10 мкл.
6. Очищенный CKIL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA 10 мкл.
7. -
8. Среда роста с CK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcLALA до очистки 10 мкл.
9. Среда роста с CK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcLALA после очистки 10 мкл.
10. Очищенный CK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcLALA 10 мкл.
Фиг. 10Б. SDS-гель-электрофорез без бета-меркаптоэтанола.
1. Очищенный CKIL15Ra_Hc_IL 15CH1FcLALA 10 мкл.
2. Очищенный CK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcLALA 10 мкл.
3. Fermentas unstained marker
4. Контрольное антитело 5 мкл.
Фиг. 11. Тест на определение пролиферационной активности. Для теста использовали клеточную линию NK-92. Тест проводили в культуральном 96-луночном планшете. Суспензия содержала клетки NK-92, исследуемое антитело в указанной на графике концентрации. Все компоненты суспензии готовили в среде RPMI-1640, содержащей эмбриональную бычью сыворотку и глутамин. После добавления всех компонентов планшеты инкубировали при 37°С, 5% СО2. Далее в лунки вносили краситель Alamar Blue. После инкубации измеряли интенсивность флуоресценции в лунках.
Фиг. 12. Тест на определение пролиферационной активности. Для теста использовали выделенные натуральные киллеры, выделенные из РВМС здоровых доноров, методом негативной селекции. Тест проводили в культуральном 96-луночном планшете. Суспензия содержала клетки натуральных киллеров, исследуемое антитело в указанной на графике концентрации. Все компоненты суспензии готовили в среде культивирования, содержащей аутологичную плазму человека. После добавления всех компонентов планшеты инкубировали при 37°С, 5% СО2. Далее в лунки вносили краситель Alamar Blue. После инкубации измеряли интенсивность флуоресценции в лунках.
Фиг. 13. Тест на определение aPD1 спец. активности. Для теста использовали клеточную линию Jurkat NFAT-FLuc PD-1, созданную на основе клеточной линии Jurkat, стабильно экспрессирующую на поверхности PD-1 и содержащую ген, кодирующий люциферазу светляка, под контролем NFATпромотора; а также клеточную линию Raji PDL1, созданную на основе клеточной линии Raji, стабильно экспрессирующую на поверхности PDL1. Тест проводили в культуральном 96-луночном планшете. Суспензия в каждой лунке содержала клетки Jurkat NFAT-FLuc PD-1, клетки Raji PDL1, aCD3/aTAA1 в концентрации 1 нг/мл, исследуемое антитело в указанной на графике концентрации. После добавления всех компонентов планшеты инкубировали при 37°С, 5% СО2 и далее, с помощью набора для оценки люминесценции, измеряли интенсивность люциферы в лунках.
Фиг. 14. Анализ специфической активности анти-PDL1/IL15SA антител на репортерной клеточной линии.
Фиг. 15. Тест на определение влияния на ADCC натуральных киллеров. Для теста использовали натуральные киллеры, выделенные из РВМС здоровых доноров, методом негативной селекции. Тест проводили в культуральном 96-луночном планшете. Суспензия содержала клетки натуральных киллеров и клетки Raji, эффекторное антитело Ритуксимаб и исследуемое антитело в указанной на графике концентрации. Все компоненты суспензии готовили в среде культивирования, содержащей эмбриональную бычью сыворотку и глутамин. После добавления всех компонентов планшеты инкубировали при 37°С, 5% СО2. Далее собирали культуральную жидкость и исследовали содержание лактатдегидрогеназы с использованием набора для определения ЛДГ.
Фиг. 16. Результаты проверки специфической активности иммуноцитокинов в отношении усиления ADCC способности rituximab против ТАА-репортерной линии.
Фиг. 17. Исследование цитотоксичности для вариантов иммуноцитокина, включающего гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra (IL15SA), на NK-клетках. Результаты свидетель- 9 043937 ствуют об отсутствии значимого цитотоксического эффекта кандидатов, то есть не более 10% уменьшения количества иммунореактивных клеток в сравнении с негативным контролем АВ (отсутствие какихлибо экзогенных антител).
Фиг. 18. Исследование цитотоксичности для IL15SA вариантов на В-клетках. Результаты свидетельствуют об отсутствии значимого цитотоксического эффекта кандидатов, то есть не более 10% уменьшения количества иммунореактивных клеток в сравнении с негативным контролем АВ (отсутствие каких-либо экзогенных антител).
Фиг. 19. Исследование цитотоксичности для IL15SA вариантов на CD3+ -клетках. Результаты свидетельствуют об отсутствии значимого цитотоксического эффекта кандидатов, то есть не более 10% уменьшения количества иммунореактивных клеток в сравнении с негативным контролем АВ (отсутствие каких-либо экзогенных антител).
Фиг. 20. Исследование цитотоксичности для IL15SA вариантов на CD4+ -клетках. Результаты свидетельствуют об отсутствии значимого цитотоксического эффекта кандидатов, то есть не более 10% уменьшения количества иммунореактивных клеток в сравнении с негативным контролем АВ (отсутствие каких-либо экзогенных антител).
Фиг. 21. Исследование цитотоксичности для IL15SA вариантов на CD8+ -клетках. Результаты свидетельствуют об отсутствии значимого цитотоксического эффекта кандидатов, то есть не более 10% уменьшения количества иммунореактивных клеток в сравнении с негативным контролем АВ (отсутствие каких-либо экзогенных антител).
Фиг. 22. Хроматограмма. Данная хромограмма демонстрирует высокую гомогенность (содержание агрегатов в растворе составила не более 5%) иммуноцитокина, включающего гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra (IL15 суперагониста).
Фиг. 23. Схема эксперимента по определению противоопухолевой активности препаратов иммуноцитокина, включающего гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra (BCD-225) в in vivo мышиной модели опухоли.
Фиг. 24. Результаты эксперимента по определению противоопухолевой активности вариантов препарата иммуноцитокина, включающего гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra (BCD-225) (график) в in vivo мышиной модели опухоли.
Фиг. 25. Результаты эксперимента по определению противоопухолевой активности вариантов препарата иммуноцитокина, включающего гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra (BCD-225) (диаграмма) в in vivo мышиной модели опухоли.
Описание изобретения
Общие определения и общие методы.
Если иное не определено в настоящем документе, научные и технические термины, используемые в связи с настоящим изобретением, будут иметь значения, которые обычно понятны специалистам в данной области.
Кроме того, если по контексту не требуется иное, термины в единственном числе включают в себя термины во множественном числе, и термины во множественном числе включают в себя термины в единственном числе. Как правило, используемая классификация и методы культивирования клеток, молекулярной биологии, иммунологии, микробиологии, генетики, аналитической химии, химии органического синтеза, медицинской и фармацевтической химии, а также гибридизации и химии белка и нуклеиновых кислот, описанные в настоящем документе, хорошо известны специалистам и широко применяются в данной области. Ферментативные реакции и способы очистки осуществляют в соответствии с инструкциями производителя, как это обычно осуществляется в данной области, или как описано в настоящем документе.
Если специально не указано иначе, выражения биологически активный, и биологическая активность, и биологические характеристики, по отношению к полипептиду по данному изобретению, означают обладание способностью связываться с биологической молекулой.
Термин рекомбинантное белок означает белок (полипептид), который экспрессируется в клетке или клеточной линии, содержащей нуклеотидную последовательность (нуклеотидные последовательности), которая кодирует данный белок, при этом указанная нуклеотидная последовательность (нуклеотидные последовательности) не ассоциирована с клеткой в природе.
Термин биспецифическое антитело означает антитело, содержащее антигенсвязывающий домен или антигенсвязывающие домены, которые способны к специфическому связыванию с двумя различными эпитопами на одной биологической молекуле или способны к специфическому связыванию с эпитопами на двух различных биологических молекулах. Биспецифичное антитело также упоминается в настоящем документе, как обладающее двойной специфичностью или как являющееся антителом с двойной специфичностью.
Термин моноклональное антитело или mAb относится к антителу, которое синтезировано и выделено отдельной клональной популяцией клеток. Клональная популяция может быть клональной популяцией иммортализованных клеток. В некоторых вариантах осуществления изобретения иммортализо- 10 043937 ванные клетки в клональной популяции являются гибридными клетками, гибридомами, которые обычно получают путем слияния отдельных В-лимфоцитов от иммунизированных животных с отдельными клетками лимфоцитарной опухоли. Гибридомы представляют собой тип сконструированных клеток и не встречаются в природе.
Термин Ka, как использовано в данном описании, относится к скорости ассоциации конкретного взаимодействия антитело-антиген.
Термин Kd, как использовано в данном описании, относится к скорости диссоциации конкретного взаимодействия антитело-антиген.
Аффинность связывания обычно относится к силе совокупных нековалентных взаимодействий между единичным сайтом связывания молекулы (например, антитела) и ее партнером по связыванию (например, антигеном). Если не указано иначе, аффинность связывания относится к внутренней (характерной, истинной) аффинности связывания, которая отражает 1: 1 взаимодействие между членами пары связывания (например, антителом и антигеном). Аффинность молекулы X к своему партнеру Y обычно можно представить константной диссоциации (Kd). Желательно, чтобы величина Kd составляла, примерно, 200, 150, 100, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 8, 6, 4, 2, 1 нМ или менее. Аффинность можно измерять обычными методами, известными в уровне техники, включая методы по данному описанию. В уровне техники известны различные методы измерения аффинности связывания, любой из этих методов можно использовать для целей настоящего изобретения.
Термин пептидный линкер в настоящем документе означает любой пептид с возможностью соединения доменов с длиной в зависимости от доменов, которые он связывает между собой, содержащий любую аминокислотную последовательность. Предпочтительно пептидный линкер имеет длину более 5 аминокислот и состоит из любого набора аминокислот, выбранного из G, A, S, P, E, T, D, K.
Термин in vitro относится к биологическому объекту, биологическому процессу или биологической реакции вне организма, смоделированному в искусственных условиях. Например, рост клеток in vitro должен пониматься как рост клеток в среде вне организма, например, в пробирке, культуральном флаконе или микропланшете.
В настоящем описании и в последующей формуле изобретения, если контекстом не предусмотрено иное, слова иметь, включать и содержать или их вариации, такие как имеет, имеющий, включает, включающий, содержит или содержащий, следует понимать как включение указанного целого или группы целых, но не исключение любого другого целого или группы целых.
Подробное описание изобретения
Иммуноцитокин.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к иммуноцитокину для стимулирования активации и/или пролиферации IL-15Rбета/гамма-положительных клеток, который включает гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra, содержащий:
1) IL-15Ra, который связан с:
а) константным доменом легкой цепи антитела; или
б) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи;
2) IL-15, который связан с:
а) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи; или
б) константным доменом легкой цепи антитела, при этом первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса имеют или не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик и, где, если IL-15 или IL-15Ra связан с константным доменом легкой цепи антитела, то другая часть гетеродимерного белкового комплекса, выбранная из IL-15Ra или IL-15, связана с константными доменами тяжелой цепи антитела.
Формат вышеуказанного иммуноцитокина представлен на фиг. 1 и 2.
Термин иммуноцитокин обозначает молекулу, содержащую антитело или его фрагменты, напрямую или опосредованно связанные при помощи ковалентной связи с цитокином или его производными. Указанное антитело и указанный цитокин могут быть связаны при помощи линкерного пептида.
Под иммуноцитокином по изобретению подразумевается выделенный иммуноцитокин.
Определение выделенный (изолированный), применяемое для описания различных иммуноцитокинов по данному описанию, означает иммуноцитокин, идентифицированный и выделенный и/или регенерированное из клетки или клеточной культуры, в которой он экспрессируется. Примеси (загрязняющие компоненты) из природной среды представляют собой материалы, которые, как правило, мешают диагностическому или терапевтическому применению полипептида и могут включать ферменты,
- 11 043937 гормоны и другие белковые или небелковые растворенные вещества. В предпочтительных вариантах изобретения иммуноцитокин очищают (1) до степени, достаточной для получения по меньшей мере 15 остатков N-концевой или внутренней аминокислотной последовательности, при использовании секвенатора с вращающейся стеклянной чашечкой (секвенатора Эдмана), или (2) до гомогенности методом SDSPAGE в невосстанавливающих или восстанавливающих условиях с применением окрашивания Кумасси бриллиантовым голубым или, предпочтительно, серебром. Выделенный иммуноцитокин включает иммуноцитокин in situ внутри рекомбинантных клеток, так как по меньшей мере один компонент природной среды полипептида отсутствует. Обычно выделенный полипептид получают в результате по меньшей мере одной стадии очистки.
При использовании в настоящем документе гетеродимерный белковый комплекс относится к белку, образованному комбинацией IL-15 и IL-15Ra.
При использовании в настоящем документе IL-15, пептид IL-15 или интерлейкин-15 может представлять собой любой IL-15 (интерлейкин-15) или его мутантную форму, такой как IL-15 человека или млекопитающего, отличающегося от человека, или IL-15 не млекопитающего. Иллюстративные млекопитающие, отличающиеся от человека, включают таких млекопитающих, как свиньи, кролики, обезьяны, шимпанзе, мыши и тому подобные; не млекопитающие включают таких, как куры и тому подобные. Предпочтительно зрелую молекулу интерлейкина-15 человека находят в базе данных UniProtKB, номер доступа Р40933, 49-162аа. Термин вариант IL-15 относится к варианту молекулы, обладающему повышенной или пониженной аффинностью к ее рецептору или повышенной или пониженной активностью при стимуляции Т клеток или NK клеток в результате одного или более из замен, дополнений или делеций аминокислот.
IL-15Ra означает субъединицу α рецептора интерлейкина 15 и, согласно настоящему изобретению, может представлять собой любое соединение IL-15Ra или его функциональный фрагмент, такой как IL-15Ra человека или IL-15Ra млекопитающего, отличающегося от человека, или IL-15Ra не млекопитающего. Иллюстративные млекопитающие, отличающиеся от человека, включают таких млекопитающих, как свиньи, кролики, обезьяны, шимпанзе, мыши и тому подобные; не млекопитающие включают таких, как куры и тому подобные. Предпочтительная молекула IL-15Ra находят в базе данных UniProt, номер доступа Q13261 (https://www.uniprot.org/uniprot/Q13261).
Кристаллизующийся фрагмент иммуноглобулина (англ. fragment crystallizable region, Fc region, Fc) это концевая часть молекулы иммуноглобулина, которая взаимодействует с Fc-рецептором на поверхности клетки и с некоторыми белками системы комплемента. Данное свойство позволяет антителам активировать иммунную систему. Fc-участок IgG, IgA и IgD изотипов состоит из двух одинаковых белковых фрагментов, соответственно, второго и третьего константных доменов двух тяжелых цепей; в случае изотипов IgM и IgE Fc содержит три константных домена тяжелых цепей (домены СН2, CH3 и СН4) в каждой полипептидной цепочке.
Под мономером Fc-фрагмента подразумевается Fc-участок из второго и третьего константных доменов любой одной из двух тяжелых цепей (для IgG, IgA и IgD изотипов); в случае изотипов IgM и IgE мономер Fc содержит три константных домена одной из двух тяжелых цепей (домены СН2, CH3 и СН4).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает константный домен легкой цепи антитела, который выбирают из CK или CL.
У млекопитающих известно только два типа легких цепей, которые обозначают как лямбда (λ) и каппа (к). Константной домен лямбда легкой цепи обозначается как CL, а каппа легкой цепи обозначается как CK.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra с аминокислотной последовательностью, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP
SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASS (SEQ IDNO:9) или любой известный вариант IL-15Ra, содержащий мутации, с аналогичной биологической активностью.
Под IL-15Ra, который содержит мутации, с аналогичной биологической активностью IL-15Ra, подразумевается любой известный из уровня техники IL-15Ra, который содержит мутации и имеет аналогичную биологическую активностью IL-15Ra дикого типа.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который имеет аминокислотную последовательность, которая представлена
- 12 043937
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI
HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS (SEQ ID
NO: 10) или любой известный вариант IL-15, содержащий мутации, с аналогичной биологической активностью.
Под IL-15, который содержит мутации, с аналогичной биологической активностью IL-15, подразумевается любой известный из уровня техники IL-15, который содержит мутации и имеет аналогичную биологическую активностью IL-15 дикого типа.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, который связан с константным доменом легкой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPAL VHQRPAPPST VTTAGVTPQPESLSP SGKEPAAS SGAEGGGRTVAAP S VFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:1).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPAL VHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEA (SEQ ID NO: 19).
Аминокислотная последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 19, отличается от аминокислотной последовательности, которая представлена SEQ ID NO: 1, одной аминокислотной заменой Цистеина (С) на Аланин (А) в 216 положении. Данная замена позволяет получить иммуноцитокин, который включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который связан с константным доменом легкой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQE SVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:3).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQE SVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEA (SEQ ID NO:21).
Аминокислотная последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 21, отличается от аминокислотной последовательности, которая представлена SEQ ID NO: 3, одной аминокислотной заменой Цистеина (С) на Аланин (А) в 233 положении. Данная замена позволяет получить иммуноцитокин, который включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, которые соединены через шарнир.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15 или IL-15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, идущими в следующем порядке СН1-шарнир-СН2-CH3.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
- 13 043937
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGASTKGPSVFPL APSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:4).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGASTKGPSVFPL APS SKSTSGGT AALGCLVKD YFPEPVTVSWNSGALT SGVHTFP AVLQS SGL YSLS S VVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:22).
Аминокислотная последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 22, отличается от аминокислотной последовательности, которая представлена SEQ ID NO: 4, одной аминокислотной заменой Цистеина (С) на Аланин (А) в 212 положении. Данная замена позволяет получить иммуноцитокин, который включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDT VENLIIL AND SL S SNGNVTES GCKECEELEEKNIKEFLQ SF VHIVQMFINT S AGGKPG GSAGGASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPA PEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:2).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSADKTHTCPPCPA PEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:20).
Аминокислотная последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 20, отличается от аминокислотной последовательности, которая представлена SEQ ID NO: 2, одной аминокислотной заменой Цистеина (С) на Аланин (А) в 229 положении. Данная замена позволяет получить иммуноцитокин, который включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает
IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:1) или DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGRTVAAPSVFIF
- 14 043937
PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS
TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEA (SEQ ID NO: 19), a IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPA PEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:2) или DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSADKTHTCPPCPA PEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:20).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает
IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ Ш NO:1), a IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPA PEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ Ш NO:2).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает
IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEA (SEQ ID NO: 19), a IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSADKTHTCPPCPA PEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:20).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает
IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
- 15 043937
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGASTKGPSVFPL APSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:4) или
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGASTKGPSVFPL APSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:22), a IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQE SVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:3) или
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQE SVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEA (SEQ ID NO:21). В некоторых вариантах иммуноцитокин включает: IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGASTKGPSVFPL APSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:4), а IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQE SVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:3).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает
IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGASTKGPSVFPL APSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:22), а IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
- 16 043937
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI
HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG
GSAGGRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQE
SVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEA (SEQ ID
NO:21).
В некоторых вариантах иммуноцитокин имеет мутации в мономере Fc-фрагмента, приводящие к отсутствию ADCC, CDC и/или ADCP свойств у указанного иммуноцитокина.
Под мутациями в Fc-фрагменте предлагается модификация(и) аминокислотных последовательностей антител, описанных в настоящей заявке. Варианты аминокислотной последовательности антитела получают введением соответствующих изменений нуклеотидов в нуклеиновую кислоту антитела или пептидным синтезом. Такие модификации включают, например, делеции, и/или инсерции, и/или замены остатков в аминокислотных последовательностях антитела. Осуществляют любое сочетание делеции, инсерции и замены, чтобы получить конечную конструкцию, при условии, что конечная конструкция обладает требуемыми характеристиками.
Вариант модификации аминокислотных последовательностей антител с помощью аминокислотных замен представляет собой замену, по меньшей мере, одного аминокислотного остатка в молекуле антитела на другой остаток.
Консервативные замены показаны в таблице А под заголовком предпочтительные замены.
Таблица. А | ||
Исходный остаток | Примеры замены | Предпочтительные замены |
Ala (А) | Vai; Leu.; He | Vai |
Arg(R) | Lys; Gin.; Asn | Lys |
Asn(N) | Gin.; His; Asp, Lys; Arg | Gin |
Asp (D) | Glu.; Asn. | Glu |
Cys (C) | Ser; Ala | Ser |
Gln(Q) | Asn.; Glu. | Asn. |
Glu. (E) | Asp; Gin. | Asp |
Gly(G) | Ala | Ala |
His (H) | Asn.; Gin.; Lys; Arg | Arg |
He (I) | Leu.; Vai; Met; Ala; Phe; Норлейщлн | Leu |
Leu. (L) | Норлейщлн; He; Vai; Met; Ala; Phe | lie |
Lys (K) | Arg; Gin.; Asn. | Arg |
Met (M) | Leu.; Phe; lie | Leu |
Phe(F) | Trp; Leu.; Vai; lie; Ala; Tyr | Tyr |
Pro (P) | Ala | Ala |
Ser(S) | Thr | Thr |
Thr (t) | Vai; Ser | Ser |
Trp (W) | Tyr; Phe | Tyr |
Tyr(Y) | Trp; Phe; Thr; Ser | Phe |
Vai (V) | lie; Leu; Met; Phe; Ala; Норлейцин | Leu |
Понятие эффекторная функция антитела относится к видам биологической активности, связанным с Fc-областью (нативной последовательностью Fc-области или с вариантами аминокислотной последовательности Fc-области) антитела, и варьируют в зависимости от изотипа антитела. Примерами эффекторных функций антитела являются: Clq- связывание; комплементзависимая цитотоксичность; связывание Fc-рецептора; антитело-зависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность (ADCC); фагоцитоз; понижающая регуляция рецепторов клеточной поверхности (например, В-клеточного рецептора, BCR) и В-клеточная активация.
Антитело-зависимая клеточная цитотоксичность или ADCC относится к опосредованному клетками ответу, при котором неспецифичные цитотоксические клетки, которые экспрессируют рецепторы Fc (FcR) (например, природные клетки-киллеры (NK), нейтрофилы и макрофаги), узнают связанное антитело на клетке-мишени и затем вызывают лизис или фагоцитоз клетки-мишени. Первичные клетки для опосредования ADCC, NK-клетки, экспрессируют только FcyRIII, тогда как моноциты экспрессируют FcyRI, FcyRII и FcyRIII. Экспрессия FcR на гематопоэтических клетках суммирована в таблице 3 на странице 464 в публикации Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-92 (1991). Чтобы оценить активность в ADCC представляющей интерес молекулы можно осуществить анализы ADCC in vitro, такие как
- 17 043937 анализы, описанные в патентах США № 5500362 или 5821337. Применимые эффекторные клетки для таких анализов включают мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) и природные клеткикиллеры (NK). Альтернативно или дополнительно ADCC-активность представляющей интерес молекулы можно оценить in vivo, например, в животной модели, такой как модель, описанная в Clynes et al. PNAS (USA) 95: 652-656(1998).
Эффекторными клетками человека являются лейкоциты, которые экспрессируют один или несколько FcR и осуществляют эффекторные функции. Предпочтительно клетки экспрессируют, по меньшей мере, FcyRIII и осуществляют ADCC-эффекторную функцию. Примеры лейкоцитов человека, которые опосредуют ADCC, включают мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС), природные клетки-киллеры (NK), моноциты, цитотоксические Т-клетки и нейтрофилы; при этом предпочтительны РВМС и NK-клетки. Эффекторные клетки могут быть выделены из их природного источника, например из крови или РВМС, как описано в настоящей публикации.
Комплемент-зависимая цитотоксичность и CDC относятся к способности молекулы лизировать мишень в присутствии комплемента. Путь активации комплемента инициируется связыванием первого компонента системы комплемента (Clq) с молекулой (например, антителом) в комплексе со своим антигеном. Чтобы оценить активацию комплемента можно осуществить анализ CDC, например, как описано в Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202: 163 (1996).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает Fc-фрагмент, который относится к IgG.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает Fc-фрагмент, который выбирают из группы: IgG1, IgG2 или IgG4 человека.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает два вышеуказанных гетеродимерных белковых комплекса на основе IL-15 и IL-15Ra.
Под IL15 суперагонистом (другое название BCD225 или IL15SA или (IL15SA)2-Fc) по данному изобретению подразумевается CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA и CKIL15_Hc_IL15RaCH1FcLALA.
Обозначения CK, IL15Ra, IL15, CH1FcLALA имеют расшифровку по тексту заявки.
CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA - это вышеуказанный иммуноцитокин, включающий два гетеродимерных белковых комплекса на основе IL-15 и IL-15Ra, которые включают IL15Ra, который связан с константным доменом легкой цепи антитела CK и IL15, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fcфрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, где Fc содержит мутации LALA.
CK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcLALA - это вышеуказанный иммуноцитокин, включающий два гетеродимерных белковых комплекса на основе IL-15 и IL-15Ra, которые включают IL15, который связан с константным доменом легкой цепи антитела СК, и IL15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fcфрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, где Fc содержит мутации LALA.
Вышеуказанные иммуноцитокины могут быть выполнены как в формате, где первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик, так и в формате, где первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик, в частном случае для этого оба цестеина заменяют на аланин.
При экспериментальных исследованиях вышеуказанных иммуноцитокинов как формате, где первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик, так и в формате, где первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик, не было выявлено какой-либо значительной разницы в активности вышеуказанных иммуноцитокинов.
Формат вышеуказанного иммуноцитокина представлен на фиг. 1 и 2.
В некоторых вариантах иммуноцитокин применяют в качестве терапевтического средства для терапии рака или аутоиммунного заболевания.
В некоторых вариантах иммуноцитокин применяют в качестве терапевтического средства для терапии рака.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к иммуноцитокину для стимулирования активации и/или пролиферации IL-15Rбета/гамма-положительных клеток, который включает гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra и иммуномодулирующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически ингибируют PD-1 путь, где гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra содержит:
1) IL-15Ra, который связан с:
а) константным доменом легкой цепи антитела; или
- 18 043937
б) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи;
2) IL-15, который связан с:
а) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи; или
б) константным доменом легкой цепи антитела, при этом первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса имеют или не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик и, где, если IL-15 или IL-15Ra связан с константным доменом легкой цепи антитела, то другая часть гетеродимерного белкового комплекса, выбранная из IL-15Ra или IL-15, связана с константными доменами тяжелой цепи антитела.
Термин антитело или иммуноглобулин (Ig), как использовано в данном описании, включает целые антитела и любой антигенсвязывающий фрагмент (т.е. антигенсвязывающую часть) или его отдельные цепи. Термин антитело относится к гликопротеину, содержащему по меньшей мере две тяжелые (Н) цепи и две легкие (L) цепи, взаимосвязанные дисульфидными связями, или его антигенсвязывающей части. Каждая тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи (сокращенно называемую в данном описании как VH) и константную область тяжелой цепи. Известно пять типов тяжелых цепей антител млекопитающих, которые обозначают греческими буквами: α, δ, ε, γ и μ. Присутствующий тип тяжелой цепи определяет класс антитела; указанные цепи обнаружены в антителах типа IgA, IgD, IgE, IgG и IgM соответственно. Различные тяжелые цепи отличаются по размеру и составу; α и γ содержат примерно 450 аминокислот, а μ и ε состоят примерно из 550 аминокислот. Каждая тяжелая цепь содержит две области, т.е. константную область и вариабельную область. Константная область является идентичной во всех антителах одного и того же изотипа, но отличается в антителах различного изотипа. Тяжелые цепи γ, α и δ содержат константную область, которая состоит из трех константных доменов CH1, CH2 и CH3 (выстроены в ряд) и шарнирной области, которая придает гибкость (Woof J., Burton D., Nat. Rev. Immunol. 4, 2004, cc.89-99); тяжелые цепи μ и ε содержат константную область, которая состоит из четырех константных доменов СН1, СН2, CH3 и СН4. У млекопитающих известно только два типа легких цепей, которые обозначают как лямбда (λ) и каппа (к). Каждая легкая цепь состоит из вариабельной области легкой цепи (сокращенно называемой в данном описании как VL) и константной области легкой цепи. Примерная длина легкой цепи составляет 211-217 аминокислот.
Предпочтительно легкая цепь представляет собой легкую каппа (к)-цепь, а константный домен CL предпочтительно представляет собой С-каппа (к).
Антитело согласно изобретению может представлять собой антитело любого класса (например, IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, предпочтительно IgG) или подкласса (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2, предпочтительно IgG1).
Области VH и VL могут быть дополнительно подразделены на области гипервариабельности, называемые определяющими комплементарность областями (CDR), разбросанные между областями, которые являются более консервативными, называемыми каркасными областями (FR). Каждая VH и VL состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных от амино-конца к карбокси-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Вариабельные области тяжелой и легкой цепей содержат домен связывания, который взаимодействует с антигеном. Константные области антител могут опосредовать связывание иммуноглобулина с тканями хозяина или факторами, включая различные клетки иммунной системы (например, эффекторными клетками), и первый компонент (Clq) классической системы комплемента.
Термин антигенсвязывающая часть антитела или антигенсвязывающий фрагмент (или просто часть антитела или фрагмент антитела), как использовано в данном описании, относится к одному или нескольким фрагментам антитела, которые сохраняют способность специфически связываться с антигеном. Было показано, что антигенсвязывающая функция антитела может выполняться фрагментами полноразмерного антитела. Примеры связывающих фрагментов, включенных в термин антигенсвязывающая часть антитела включают (i) Fab-фрагмент, одновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и СН1; (ii) F(ab')2-фрагмент, двухвалентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) Fd-фрагмент, состоящий из доменов VH и СН1; (iv) Fv-фрагмент, состоящий из доменов VL и VH в едином плече антитела, (v) dAb-фрагмент (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546), который состоит из домена VH/VHH; и (vi) выделенная определяющая комплементарность область (CDR). Кроме того, две области Fv-фрагмента, VL и VH, кодируются разными генами, они могут быть соединены при помощи рекомбинантных способов с использованием синтетического линкера, который дает возможность получать их в виде единой белковой цепи, в которой области VL и VH спариваются с образованием одновалентных молекул (известных как одноцепочечный
- 19 043937
Fv (scFv); см., например, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci.
USA 85:5879-5883). Предполагается, что такие одноцепочечные молекулы также включены в термин антигенсвязывающая часть антитела. Такие фрагменты антител получают с использованием общепринятых способов, известных специалистам в данной области, и эти фрагменты подвергают скринингу таким же образом, как и интактные антитела.
Предпочтительно CDR антигенсвязывающего участка или весь антигенсвязывающий участок антител по изобретению имеет происхождение из мыши, ламы или донорской человеческой библиотеки или по существу человеческое происхождение с определенными аминокислотными остатками, измененными, например, замещенными разными аминокислотными остатками с тем, чтобы оптимизировать конкретные свойства антитела, например KD, koff, IC50, ЕС50, ED50. Предпочтительно каркасные участки антитела по изобретению имеют человеческое происхождение или по существу человеческое происхождение (по крайней мере на 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% человеческое происхождение).
В других вариантах осуществления антигенсвязывающий участок антитела по изобретению может происходить из других нечеловеческих видов, включая мыши, ламы, кролика, крысу или хомяка, но не ограничиваясь ими. Альтернативно, антигенсвязывающий участок может происходить из человеческих видов.
Термин вариабельный относится к тому факту, что определенные сегменты вариабельных доменов широко отличаются в последовательности среди антител. Домен V опосредует связывание антигена и определяет специфичность конкретного антитела к его конкретному антигену. Однако вариабельность неравномерно распределяется на участке вариабельных доменов из 110 аминокислот. Напротив, V области состоят из инвариантных фрагментов, называемых каркасными областями (FR) из 15-30 аминокислот, разделенных более короткими участками чрезвычайной вариабельности, называемых гипервариабельными областями или CDR. Каждый вариабельный домен нативных тяжелых и легких цепей содержит четыре FR, в основном принимающих конфигурацию бета-листов, связанных тремя гипервариабельными областями, которые образуют петли, связывающие, и в некоторых случаях являющиеся частью бета-складчатой структуры. Гипервариабельные области в каждой цепи удерживаются вместе в тесной близости с помощью FR и с гипервариабельными областями другой цепи вносят вклад в образование антигенсвязывающего сайта антител. Константные домены не принимают непосредственного участия в связывании антитела с антигеном, но проявляют различные эффекторные функции, такие как участие антитела в антителозависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦ, ADCC).
Термин гипервариабельная область по данному описанию относится к аминокислотным остаткам антитела, которые отвечают за связывание антигена. Обычно гипервариабельная область содержит аминокислотные остатки из области, определяющей комплементарность или CDR, и/или такие остатки из гипервариабельной петли.
В некоторых случаях может также быть предпочтительным изменение одного или более остатков аминокислот CDR-участков с целью повышения аффинности связывания с целевым эпитопом. Это известно, как созревание аффиности и в некоторых случаях может выполняться в связи с гуманизацией, например, в ситуациях, когда гуманизация антитела приводит к снижению специфичности или аффинности связывания, и не представляется возможным в достаточной степени улучшить специфичность или аффинность связывания с помощью только обратных мутаций. Различные методы созревания аффинности известны в данной области техники, например, способ in vitro сканирующего насыщающего мутагенеза, описанный Burks et al., Proc Natl Acad Sci USA, 94:412-417 (1997), и способ пошагового in vitro созревания аффинности, предложенный Wu et al., Proc Natl Acad Sci USA 95:6037 6042 (1998).
Каркасные области (FR) представляют собой остатки вариабельного домена, отличные от CDR остатков. Обычно каждый вариабельный домен имеет четыре FR, определяемые как FR1, FR2, FR3 и FR4. Если CDR определяются согласно Kabat, FR остатки легкой цепи локализуются, приблизительно, в области остатков 1-23 (LCFR1), 35-49 (LCFR2), 57-88 (LCFR3) и 98-107 (LCFR4), а остатки FR тяжелой цепи локализуются, приблизительно, в области остатков 1-30 (HCFR1), 36-49 (HCFR2), 66-94 (HCFR3) и 103-113 (HCFR4) в тяжелой цепи. Если участки CDR содержат аминокислотные остатки из гипервариабельных петель, FR остатки легкой цепи локализуются, приблизительно, в остатках 1-25 (LCFR1), 33-49 (LCFR2), 53-90 (LCFR3) и 97-107 (LCFR4) в легкой цепи, а FR остатки тяжелой цепи локализуются, примерно, в остатках 1-25 (HCFRI), 33-52 (HCFR2), 56-95 (HCFR3) и 102-113 (HCFR4) в остатках тяжелой цепи. В некоторых примерах, когда CDR содержит аминокислоты как из CDR по Kabat, так и аминокислоты из гипервариабельной петли, FR соответствующим образом корректируются. Например, когда CDRH1 включает аминокислоты Н26-Н35, остатки FR1 тяжелой цепи находятся в положениях 1-25, а остатки FR2 находятся в положениях 36-49.
Антитело по данному изобретению, которое связывает целевой антиген, представляет собой антитело, которое связывает антиген с достаточной аффинностью так, что антитело можно применять в качестве диагностического и/или терапевтического агента при нацеливании на белок или клетку, или ткань, экспрессирующую антиген, и в незначительной степени перекрестно реагирует с другими белками. По данным аналитических методов: сортинга флуоресцентно-активированных клеток (FACS), радиоиммунопреципитации (RIA) или ИФА (ELISA), в таких вариантах изобретения степень связывания антитела с
- 20 043937 белком, не являющимся мишенью (с нецелевым белком), составляет менее 10% от связывания антитела с конкретным белком-мишенью. По отношению к связыванию антитела с молекулой-мишенью термин специфическое связывание или выражения специфически связывается с или специфический к конкретному полипептиду или эпитопу на конкретном полипептиде-мишени означает связывание, которое заметно (измеримо) отличается от неспецифического взаимодействия.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает константный домен легкой цепи антитела, который выбирают из CK или CL.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, который имеет аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASS (SEQ IDNO:9) или любой известный вариант IL-15Ra, содержащий мутации, с аналогичной биологической активностью.
Под IL-15Ra, который содержит мутации, с аналогичной биологической активностью IL-15Ra, подразумевается любой известный из уровня техники IL-15Ra, который содержит мутации и имеет аналогичную биологическую активностью IL-15Ra дикого типа.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который имеет аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS (SEQ ID NO:10) или любой известный вариант IL-15, содержащий мутации, с аналогичной биологической активно стью.
Под IL-15, который содержит мутации, с аналогичной биологической активностью IL-15, подразумевается любой известный из уровня техники IL-15, который содержит мутации и имеет аналогичную биологическую активностью IL-15 дикого типа.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, который связан с константным доменом легкой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:1).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEA (SEQ ID NO: 19).
Аминокислотная последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 19, отличается от аминокислотной последовательности, которая представлена SEQ ID NO: 1, одной аминокислотной заменой Цистеина (С) на Аланин (А) в 216 положении. Данная замена позволяет получить иммуноцитокин, который включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который связан с константным доменом легкой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQE SVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:3).
- 21 043937
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQE SVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEA (SEQ ID NO:21).
Аминокислотная последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 21, отличается от аминокислотной последовательности, которая представлена SEQ ID NO: 3, одной аминокислотной заменой Цистеина (С) на Аланин (А) в 233 положении. Данная замена позволяет получить иммуноцитокин, который включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, которые соединены через шарнир.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15 или IL-15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, идущими в следующем порядке СН1-шарнир-СН2-CH3.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGASTKGPSVFPL APSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQV SLWCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:6).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGASTKGPSVFPL APSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQV SLWCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:24).
Аминокислотная последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 24, отличается от аминокислотной последовательности, которая представлена SEQ ID NO: 6, одной аминокислотной заменой Цистеина (С) на Аланин (А) в 212 положении. Данная замена позволяет получить иммуноцитокин, который включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPA PEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPCRDELTKNQVSLWCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFL YSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:5).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
- 22 043937
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSADKTHTCPPCPA PEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFL YSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ IDNO:23).
Аминокислотная последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 23, отличается от аминокислотной последовательности, которая представлена SEQ ID NO: 5, одной аминокислотной заменой Цистеина (С) на Аланин (А) в 229 положении. Данная замена позволяет получить иммуноцитокин, который включает первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса, которые не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически ингибируют PD-1 путь, и представляет собой антитело, которое специфически связывается с PD-1.
Специфическое связывание можно определять количественно, например, определяя связывание молекулы по сравнению со связыванием контрольной молекулы. Например, специфическое связывание можно определять конкурентной реакцией с другой молекулой, аналогичной мишени, например, с избытком немеченой мишени. В этом случае специфическое связывание указывается, если связывание меченой мишени с зондом конкурентно ингибируется избытком немеченой мишени. В данном описании термин специфическое связывание или выражения специфически связывается с или специфический к конкретному полипептиду или эпитопу на конкретном полипептиде-мишени можно характеризовать на примере молекулы, имеющей Kd к мишени по меньшей мере около 200 нМ, или же по меньшей мере около 150 нМ, или же по меньшей мере около 100 нМ, или же по меньшей мере около 60 нМ, или же по меньшей мере около 50 нМ, или же по меньшей мере около 40 нМ, или же по меньшей мере около 30 нМ, или же по меньшей мере около 20 нМ, или же по меньшей мере около 10 нМ, или же по меньшей мере около 8 нМ, или же по меньшей мере около 6 нМ, или же по меньшей мере около 4 нМ, или же по меньшей мере около 2 нМ, или же по меньшей мере около 1 нМ или выше. В одном варианте изобретения термин специфическое связывание относится к связыванию, при котором молекула связывается с конкретным полипептидом или эпитопом на конкретном полипептиде, практически не связываясь с каким-либо другим полипептидом или эпитопом на полипептиде.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело, которое включает:
а) легкую цепь, содержащую вариабельный домен легкой цепи и константный домен легкой цепи;
б) тяжелую цепь, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи и константные домены тяжелой цепи антитела, включающие первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (СНЗ) константные домены тяжелой цепи.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает вариабельный домен легкой цепи, который включает LCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые, соответственно представлены аминокислотными последовательностями
GGNNIGSKNVH (SEQ ID NO: 14), RDSNRPS (SEQ ID NO: 15) и CQVWDSSTAV (SEQ ID NO: 16).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает вариабельный домен легкой цепи, который включает аминокислотную последовательность, которая представлена
QPVLTQPLSVSVALGQTARITCGGNNIGSKNVHWYQQKPGQAPVLVIYRDSNRPSGIPE RFSGSNSGNTATLTISRAQAGDEADYYCQVWDSSTAVFGTGTKLTVLQ (SEQ ID NO: 18).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает вариабельный домен тяжелой цепи, который включает HCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые, соответственно представлены аминокислотными последовательностями
FTFSSYWMY (SEQ Ш NO: И), AIDTGGGRTYYADSVKG (SEQ ID NO: 12) и CARDEGGGTGWGVLKDWPYGLDA (SEQ ID NO: 13).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает вариабельный домен тяжелой цепи, который включает аминокислотную последовательность, которая представлена
QVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMYWVRQVPGKGLEWVSAIDTGGGR TYYADSVKGRFAISRVNAKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCARDEGGGTGWGVLKDWP YGLDAWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 17).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
1) вариабельный домен легкой цепи, который включает LCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки
-23 043937
1, 2 и 3), которые, соответственно представлены аминокислотными последовательностями
GGNNIGSKNVH (SEQ ID NO: 14), RDSNRPS (SEQ ID NO: 15) и CQVWDSSTAV (SEQ ID NO: 16);
2) вариабельный домен тяжелой цепи, который включает HCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые, соответственно представлены аминокислотными последовательностями
FTFSSYWMY (SEQ ID NO: И), AIDTGGGRTYYADSVKG (SEQ ID NO: 12) и CARDEGGGTGWGVLKDWPYGLDA (SEQ ID NO: 13).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
1) вариабельный домен легкой цепи, который включает аминокислотную последовательность, которая представлена
QPVLTQPLSVSVALGQTARITCGGNNIGSKNVHWYQQKPGQAPVLVIYRDSNRPSGIPE RFSGSNSGNTATLTISRAQAGDEADYYCQVWDSSTAVFGTGTKLTVLQ (SEQ ID NO: 18);
2) вариабельный домен тяжелой цепи, который включает аминокислотную последовательность, которая представлена
QVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMYWVRQVPGKGLEWVSAIDTGGGR TYYADSVKGRFAISRVNAKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCARDEGGGTGWGVLKDWP YGLDAWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 17).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело, которое включает легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена
QPVLTQPLSVSVALGQTARITCGGNNIGSKNVHWYQQKPGQAPVLVIYRDSNRPSGIPE RFSGSNSGNTATLTISRAQAGDEADYYCQVWDSSTAVFGTGTKLTVLQRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO 8).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело, которое включает тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена
QVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMYWVRQVPGKGLEWVSAIDTGGGR TYYADSVKGRFAISRVNAKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCARDEGGGTGWGVLKDWP YGLDAWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNS GALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSC DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPP VLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO 7).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело, которое включает:
тя желую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена QVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMYWVRQVPGKGLEWVSAIDTGGGR TYYADSVKGRFAISRVNAKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCARDEGGGTGWGVLKDWP YGLDAWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNS GALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSC DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPP VLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO Ό;
легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена QPVLTQPLSVSVALGQTARITCGGNNIGSKNVHWYQQKPGQAPVLVIYRDSNRPSGIPE RFSGSNSGNTATLTISRAQAGDEADYYCQVWDSSTAVFGTGTKLTVLQRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ Ш NO 8).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело пролголимаб (BCD100, WO 2018013017).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает иммуномодулирующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически ингибируют PD-1 путь, которое представляет собой антитело, которое специфически связывается с PD-L1.
В некоторых вариантах антитело, которое специфически связывается с PD-L1 представляет собой BCD135, которое описано в патенте RU 2665790 (WO 2018194496).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
а) гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Roc, который содержит:
-24043937
IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ Ш NO:1), а IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPA PEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFL YSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:5);
б) иммуномодулирующее антитело, которое включает:
тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена QVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMYWVRQVPGKGLEWVSAIDTGGGR TYYADSVKGRFAISRVNAKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCARDEGGGTGWGVLKDWP YGLDAWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNS GALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSC DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPP VLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO Ό;
легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена QPVLTQPLSVSVALGQTARITCGGNNIGSKNVHWYQQKPGQAPVLVIYRDSNRPSGIPE RFSGSNSGNTATLTISRAQAGDEADYYCQVWDSSTAVFGTGTKLTVLQRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ Ш NO 8).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
а) гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra, который содержит:
IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEA (SEQ ID NO: 19), а IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSADKTHTCPPCPA PEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKT KPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFL YSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:23);
б) иммуномодулирующее антитело, которое включает:
тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена QVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMYWVRQVPGKGLEWVSAIDTGGGR TYYADSVKGRFAISRVNAKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCARDEGGGTGWGVLKDWP YGLDAWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNS GALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSC DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPP VLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO 7);
легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена
- 25 043937
QPVLTQPLSVSVALGQTARITCGGNNIGSKNVHWYQQKPGQAPVLVIYRDSNRPSGIPE
RFSGSNSGNTATLTISRAQAGDEADYYCQVWDSSTAVFGTGTKLTVLQRTVAAPSVFIF
PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS
TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ Ш NO 8).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
а) IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGASTKGPSVFPL APSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQV SLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:6), а IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQE SVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:3);
б) иммуномодулирующее антитело, которое включает:
тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена QVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMYWVRQVPGKGLEWVSAIDTGGGR TYYADSVKGRFAISRVNAKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCARDEGGGTGWGVLKDWP YGLDAWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNS GALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSC DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPP VLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO
Ό;
легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена QPVLTQPLSVSVALGQTARITCGGNNIGSKNVHWYQQKPGQAPVLVIYRDSNRPSGIPE RFSGSNSGNTATLTISRAQAGDEADYYCQVWDSSTAVFGTGTKLTVLQRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ Ш NO 8).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает:
a) IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DTCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTP SLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSGAEGGGASTKGPSVFPL APSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKP KDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQV SLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO:24), а IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, которые имеют аминокислотную последовательность, которая представлена
DNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASI HDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSAGGKPG GSAGGRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQE SVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEA (SEQ ID NO:21);
б) иммуномодулирующее антитело, которое включает:
тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена
- 26 043937
QVQLVQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMYWVRQVPGKGLEWVSAIDTGGGR TYYADSVKGRFAISRVNAKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCARDEGGGTGWGVLKDWP YGLDAWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNS GALTSGVHTFP AVLQS SGL YSLS S VVT VPS S SLGTQTYICNVNHKP SNTKVDKRVEPKSC DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPP VLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена QPVLTQPLSVSVALGQTARITCGGNNIGSKNVHWYQQKPGQAPVLVIYRDSNRPSGIPE RFSGSNSGNTATLTISRAQAGDEADYYCQVWDSSTAVFGTGTKLTVLQRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO 8).
В некоторых вариантах иммуноцитокин имеет мутации в константных доменах антитела, обуславливающие гетеродимеризацию двух разных частей, одна из которых включает ковалентно или нековаленотно ассоциированные IL-15Ra, связанный с константными доменами антитела, и IL-15, связанный с константным доменом антитела, а другая включает ковалентно или нековаленотно ассоциированные легкую и тяжелую цепи антитела.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает: первый мономер Fc и второй мономер Fc, которые выбраны из группы: первый мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Knob, а второй мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Hole, или когда второй мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Knob, а первый мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Hole.
knobs-into-holes (взаимодействие по типу выступ-впадина) это подход, с помощью которого можно обойти проблему, связанную с имеющими ошибочные спаривания побочными продуктами. Данный подход направлен на усиление спаривания двух различных тяжелых цепей антитела путем интродукции мутаций в CH3-домены для модификации поверхности раздела в области контакта. На одной цепи имеющие большие размеры аминокислоты заменяли на аминокислоты с короткими боковыми цепями для создания впадины. И, наоборот, аминокислоты с более крупными боковыми цепями интродуцировали в другой CH3-домен, создавая выступ. Путем совместной экспрессии этих двух тяжелых цепей получали высокий выход гетеродимерной формации (выступ-впадина) относительно гомодимерной формации (впадина-впадина или выступ-выступ) (Ridgway J.B., Presta L.G., Carter P. и WO 1996/027011). Процентное содержание гетеродимера можно дополнительно повышать путем ремоделирования поверхностей раздела двух CH3-доменов с помощью технологии фагового дисплея и интродукции дисульфидного мостика для стабилизации гетеродимеров (Merchant A.M. и др., Nature Biotech 16, 1998, сс.677-681; Atwell S., Ridgway J.B., Wells J.A., Carter P., J. Mol. Biol. 270, 1997, cc.26-35).
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый мономер Fc, который имеет аминокислотные замены S354C/T366W, и второй мономер Fc, который имеет аминокислотные замены Y349C/T366S/L368A/Y407V.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает первый мономер Fc, который имеет аминокислотные замены Y349C/T366S/L368A/Y407, и второй мономер Fc, который имеет аминокислотные замены S354C/T366W.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает Fc-фрагмент, который относится к IgG.
В некоторых вариантах иммуноцитокин, где изотип Fc-фрагмента выбирают из группы: IgG1, IgG2, или IgG4 человека.
В некоторых вариантах иммуноцитокин включает мутации в мономере Fc-фрагмента, приводящие к отсутствию ADCC, CDC и/или ADCP свойств у указанного иммуноцитокина.
Под биспецифическим IL15 суперагонистом или биспецифическим IL15 иммуноцитокином или иммуноцитокином anti-PD1/IL15SA (биспецифическое моноклональное антитело, содержащее IL-15SA и Fab фрагмент к PD-1) также подразумевается
Anti-PD-1 Fab-CK_IL15Ra_Hc IL 15 CHlFcknobLALA, Anti-PD-1 Fab- CK_IL15_Hc_IL15RaCHlFcknobLALA.
Под иммуноцитокином anti-PD-Ll/IL15SA также подразумевается
Anti-PD-Ll Fab-CK_IL15Ra_Hc IL 15 CHlFcknobLALA, Anti-PD-Ll Fab- CK_IL15_Hc_IL15RaCHlFcknobLALA.
Обозначения Anti-PD-1 Fab, Anti-PD-Ll Fab, CK, IL15Ra, IL15, CHlFcknobLALA имеют расшифровку по тексту заявки.
Anti-PD-1 Fab-CK_IL15Ra_Hc IL 15CHlFcknobLALA - это вышеуказанный иммуноцитокин, включающий антигенсвязывающий фрагмент Fab антитела к PD1, IL15Ra, который связан с константным доменом легкой цепи антитела CK и IL15, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содер- 27 043937 жащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, где Fc содержит мутации для образования гетеродимеризации (например, knob) и LALA.
Anti-PD-1 Fab- CK IL15 He IL15RaCHlFcknobLALA это вышеуказанный иммуноцитокин, включающий антигенсвязывающий фрагмент Fab антитела к PD1, IL15, который связан с константным доменом легкой цепи антитела CK и IL15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, где Fc содержит мутации для образования гетеродимеризации (например, knob) и LALA.
Anti-PD-Ll Fab-СК IL15Ra Нс IL15CHlFcknobLALA это вышеуказанный иммуноцитокин, включающий антигенсвязывающий фрагмент Fab антитела к PD-L1, IL15Ra, который связан с константным доменом легкой цепи антитела CK и IL15, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, где Fc содержит мутации для образования гетеродимеризации (например, knob) и LALA.
Anti-PD—LI Fab- CK IL15 He IL15RaCHlFcknobLALA это вышеуказанный иммуноцитокин, включающий антигенсвязывающий фрагмент Fab антитела к PD-L1, IL15, который связан с константным доменом легкой цепи антитела CK и IL15Ra, который связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, где Fc содержит мутации для образования гетеродимеризации (например, knob) и LALA.
Вышеуказанные иммуноцитокины могут быть выполнены как в формате, где первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик, так и в формате, где первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик, в частном случае для этого оба цестеина заменяют на аланин.
При экспериментальных исследованиях вышеуказанных иммуноцитокинов как формате, где первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик, так и в формате, где первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик, не было выявлено какой-либо значительной разницы в активности вышеуказанных цитокинов.
Под knob, который указан выше, подразумеваются мутации с образованием структуры выступ (Knob) во впадину (Hole) между первым вариантом Fc и вторым вариантом Fc в CH3 домене.
Формат вышеуказанного иммуноцитокина представлен на фиг. 3 и 4.
В некоторых вариантах иммуноцитокин применяют для лечения онкологического или аутоиммунного заболевания.
В некоторых вариантах иммуноцитокин применяют для лечения онкологического заболевания.
Нуклеиновая кислота.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к выделенной нуклеиновой кислоте, которая кодирует любой из вышеуказанных иммуноцитокинов.
Термины нуклеиновая кислота, нуклеиновая последовательность или нуклеиновокислотная последовательность, полинуклеотид, олигонуклеотид, полинуклеотидная последовательность и нуклеотидная последовательность, которые используются равнозначно в данном описании, обозначают четкую последовательность нуклеотидов, модифицированных или не модифицированных, определяющую фрагмент или участок нуклеиновой кислоты, содержащую или не содержащую неприродные нуклеотиды и являющуюся либо двухцепочечной ДНК или РНК, либо одноцепочечной ДНК или РНК, либо продуктами транскрипции указанных ДНК.
Здесь также следует упомянуть, что данное изобретение не относится к нуклеотидным последовательностям в их природной хромосомной среде, т.е. в природном состоянии. Последовательности данного изобретения были выделены и/или очищены, т.е. были взяты прямо или косвенно, например, путем копирования, при этом их среда была, по меньшей мере, частично модифицирована. Таким образом, также здесь следует подразумевать изолированные нуклеиновые кислоты, полученные путем генетической рекомбинации, например, с помощью принимающих клеток (клеток-хозяев), или полученные путем химического синтеза.
Выделенная молекула нуклеиновой кислоты представляет собой молекулу нуклеиновой кислоты, которая идентифицирована и отделена от по меньшей мере одной молекулы нуклеиновой кислотыпримеси, с которой она обычно связана в естественном источнике. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты отличается от той формы или набора, в которых она находится в естественных условиях. Таким образом, выделенная молекула нуклеиновой кислоты отличается от молекулы нуклеиновой кислоты, существующей в клетках в естественных условиях. Однако выделенная молекула нуклеиновой кислоты
- 28 043937 включает молекулу нуклеиновой кислоты, находящуюся в клетках, в которых в норме происходит экспрессия иммуноцитокина, например, в случае, если молекула нуклеиновой кислоты имеет локализацию в хромосоме, отличную от ее локализации в клетках в естественных условиях.
В некоторых вариантах нуклеиновая кислота представляет собой ДНК.
В одном из вариантов настоящее изобретение относится к молекуле нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, которая кодирует аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 или 24. Молекула нуклеиновой кислоты может также содержать любую комбинацию указанных выше нуклеотидных последовательностей.
Специалисту в данной области будет очевидно, что пептид с аминокислотной последовательностью, выбранной из SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 , 18, 19, 20, 21, 22, 23 или 24, может быть кодирован широким рядом различных ДНК-последовательностей с учетом вырожденности генетического кода. Специалистам в данной области хорошо известно получение таких альтернативных ДНК-последовательностей, кодирующих одни и те же аминокислотные последовательности. Такие вариантные ДНК-последовательности находятся в объеме настоящего изобретения.
Экспрессионной вектор.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к экспрессионному вектору, который содержит вышеуказанную нуклеиновую кислоту.
Термин вектор при использовании в настоящем документе означает молекулу нуклеиновой кислоты, способную транспортировать другую нуклеиновую кислоту, с которой она соединена. В некоторых вариантах осуществления изобретения вектор представляет собой плазмиду, т.е. кольцевую двухцепочечную часть ДНК, в которую могут быть лигированы дополнительные сегменты ДНК. В некоторых вариантах осуществления изобретения вектор представляет собой вирусный вектор, в котором дополнительные сегменты ДНК могут быть лигированы в вирусный геном. В некоторых вариантах осуществления изобретения векторы способны к автономной репликации в клетке-хозяине, в которую они введены (например, бактериальные векторы, имеющие бактериальный сайт инициации репликации и эписомные векторы млекопитающих). В других вариантах осуществления изобретения векторы (например, неэписомальные векторы млекопитающих) могут быть интегрированы в геном клетки-хозяина при введении в клетку-хозяина, и таким образом реплицируются вместе с геном хозяина. Более того, некоторые векторы способны направлять экспрессию генов, с которыми они функционально соединены. Такие векторы упоминаются в данном документе как рекомбинантные экспрессирующие векторы (или просто экспрессирующие векторы).
Настоящее изобретение относится к векторам, содержащим вышеуказанные молекулы нуклеиновых кислот, которые кодируют любую из аминокислотных последовательностей вышеуказанного иммуноцитокина или его конструктивных частей как описано в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, иммуноцитокин по данному изобретению экспрессируются путем вставки ДНК, кодирующей частично или полностью последовательность первого и второго домена иммуноцитокина (например, домена, включающего IL15 или IL15Ra, связанного с константным(ыми) доменом(ами) антитела и/ или легкую и тяжелую цепь антитела), полученный, как описано выше, в экспрессионных векторах таким образом, что гены функционально соединены с необходимыми последовательностями, контролирующими экспрессию, такими как транскрипционные и трансляционные контрольные последовательности. Экспрессионные векторы включают плазмиды, ретровирусы, аденовирусы, аденоассоциированные вирусы (AAV), вирусы растений, такие как вирус мозаики цветной капусты, вирусы табачной мозаики, космиды, YAC, EBV полученные эписомы и тому подобное. Молекулы ДНК могут быть лигированы в вектор таким образом, что последовательности, контролирующие транскрипцию и трансляцию в векторе, выполняют предусмотренную функцию регуляции транскрипции и трансляции ДНК. Экспрессионный вектор и последовательности контроля экспрессии могут быть выбраны таким образом, чтобы быть совместимыми с используемой экспрессирующей клеткой-хозяином. Молекулы ДНК, кодирующие частично или по всей длине последовательности первого и второго связывающих доменов (например, последовательности тяжелой и легкой цепи, где связывающий домен содержит последовательность тяжелой и легкой цепи) могут быть введены в отдельные векторы. В одном варианте осуществления изобретения любая комбинация указанных выше молекул ДНК вводится в тот же экспрессионный вектор. Молекулы ДНК могут быть введены в экспрессионный вектор стандартными способами (например, лигированием комплементарных сайтов рестрикции на фрагменте гена антитела и вектора или лигированием тупых концов, если сайты рестрикции отсутствуют).
Подходящим вектором является тот, который кодирует функционально законченные последовательности СН или CL/CK человеческого иммуноглобулина с конструированием соответствующего места рестрикции так, что любая последовательность VH или VL или IL15 или IL15Ra, может быть легко включена и экспрессирована, как описано выше. НС- и LC-кодирование генов в таких векторах может содержать интронные последовательности, что приводит к общему увеличению белковых продуктов антитела путем стабилизации соответствующей мРНК. Интронные последовательности находятся в окру- 29 043937 жении сплайс-донора и сплайс-акцептора сайтов, которые определяют, где будет происходить сплайсинг РНК. Расположение интронных последовательностей может быть либо в вариабельных или константных участках цепей антитела, или как в вариабельных, так и константных участках, когда используются несколько интронов. Прекращение полиаденилирования и транскрипции может произойти вниз по ходу сайта нативной хромосомы кодируемых участков. Рекомбинантный экспрессионный вектор также может кодировать сигнальный пептид, который облегчает выработку цепочки антитела клеткой-хозяином. Ген цепочки антитела или ген цепочки, включающий IL15 или IL15Ra, может быть клонирован в вектор таким образом, что сигнальный пептид соединен с рамкой считывания аминоконца цепи иммуноглобулина. Сигнальным пептидом может быть сигнальный пептид иммуноглобулина или гетерологичный сигнальный пептид (т.е. сигнальный пептид белка не иммуноглобулиновой природы).
Помимо цепочки генов антител или гена цепочки, включающей IL15 или IL15Ra, рекомбинантная экспрессия векторов по данному изобретению может нести регулирующие последовательности, которые контролируют экспрессию генов в клетке-хозяине. Специалистам в этой области будет понятно, что дизайн экспрессионного вектора, включая выбор регулирующих последовательностей, может зависеть от таких факторов, как селекция клетки-хозяина для трансформации, уровень экспрессии желаемого белка, и т.д. Предпочтительные регулирующие последовательности для экспрессирующей клетки-хозяина млекопитающих включают вирусные элементы, обеспечивающие высокий уровень экспрессии белков в клетках млекопитающих, таких как промоторы и/или энхансеры, полученные из ретровирусной LTR, цитомегаловируса (CMV) (например, CMV промотора/энхансера), обезьяньего вируса 40 (SV40) (например, SV40 промотора/энхансера), аденовируса, (например, большого позднего промотора аденовируса (AdMLP)), вирус полиомы, а также сильных промоторов млекопитающих, таких как промотор нативных иммуноглобулинов или промотор актина. Для дальнейшего описания вирусных регулирующих элементов и их последовательностей см., например, патенты США 5168062, 4510245 и 4968615. Методы экспрессии полипептидов в бактериальных клетках или клетках грибов, например дрожжевых клетках, также хорошо известны в данной области техники.
В дополнение к вышеуказанным генам и регулирующим последовательностям рекомбинантные векторы экспрессии изобретения могут нести дополнительные последовательности, такие как последовательности, которые регулируют репликацию вектора в клетках-хозяевах (например, точки начала репликации) и гены селектируемого маркера. Ген селектируемого маркера облегчает селекцию клеток-хозяев, в которые был введен вектор (см., например, патенты США 4399216, 4634665 и 5179017). Например, обычно ген селектируемого маркера придает устойчивость к лекарственным средствам, таким как G418, гигромицин или метотрексат, клетке-хозяину, в которую вектор введен. Например, гены селектируемого маркера включают ген дигидрофолат редуктазы (DHFR) (для использования в dhfr-клетках-хозяевах при селекции/амплификации метотрексата), ген нео (для селекции G418) и ген синтетазы глутамата.
Термин последовательность контроля экспрессии, используемый в данном описании, означает полинуклеотидные последовательности, которые необходимы для воздействия на экспрессию и процессинг кодирующих последовательностей, к которым они лигированы. Контролирующие экспрессию последовательности включают соответствующие последовательности инициации транскрипции, терминации, промотора и энхансера; эффективные сигналы процессинга РНК, такие как сплайсинг и сигналы полиаденилирования; последовательности, которые стабилизируют цитоплазматическую мРНК; последовательности, которые повышают эффективность трансляции (т.е. консенсусная последовательность Козака); последовательности, которые повышают стабильность белка; и, при желании, последовательности, которые усиливают секрецию белка. Характер таких контролирующих последовательностей различается в зависимости от организма-хозяина; в прокариотах такие контролирующие последовательности, как правило, включают промотор, сайт связывания рибосомы, а также последовательности терминации транскрипции; в эукариотах, как правило, такие контролирующие последовательности включают промоторы и последовательности терминации транскрипции. Термин контролирующие последовательности включает как минимум все компоненты, наличие которых имеет важное значение для экспрессии и процессинга, и может также включать дополнительные компоненты, чье присутствие является полезным, например, лидирующие последовательности и последовательности слившихся клеток.
Выражение контролирующие последовательности относится к последовательностям ДНК, необходимым для экспрессии функционально связанной кодирующей последовательности в определенном организме-хозяине. Пригодные для прокариот контролирующие последовательности представляют собой, например, промотор, необязательно оператор и сайт связывания рибосомы. Как известно, в эукариотических клетках присутствуют промоторы, сигналы полиаденилирования и энхансеры.
Нуклеиновая кислота функционально связана, если она находится в функциональной связи с другой нуклеотидной последовательностью. Например, ДНК предпоследовательности или секреторной лидерной последовательности функционально связывают с ДНК полипептида, если он экспрессируется в виде предпротеина, который принимает участие в секреции полипептида; промотор или энхансер функционально связывают с кодирующей последовательностью, если он оказывает воздействие на транскрипцию последовательности; сайт связывания рибосомы функционально связывают с кодирующей по- 30 043937 следовательностью, если он расположен так, что может облегчать трансляцию. Как правило, функционально связан обозначает, что связанные последовательности ДНК являются смежными, а в случае секреторной лидерной последовательности являются смежными и находятся в фазе считывания. Однако энхансеры не обязательно должны быть смежными.
Клетки-хозяева и способ их получения.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу получения клетки-хозяина для получения вышеуказанного иммуноцитокина, который включает трансформирование клетки вышеуказанным вектором.
Молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие иммуноцитокины по изобретению и векторы, содержащие эти молекулы нуклеиновой кислоты, могут быть использованы для трансфекции подходящего млекопитающего или его клетки, растения или его клетки, бактериальной или дрожжевой клеткихозяина. Преобразование может происходить любым известным способом для введения полинуклеотидов в клетку-хозяина. Способы введения гетерологичных полинуклеотидов в клетки млекопитающих хорошо известны в данной области и включают декстран-опосредованную трансфекцию, трансфекцию комплексом нуклеиновой кислоты и позитивно заряженного полимера, трансфекцию преципитатом нуклеиновой кислоты и фосфата кальция, полибрен-опосредованную трансфекцию, слияние протопластов, трансфекцию инкапсулированными в липосомы полинуклеотидами и прямую микроинъекцию ДНК в ядра. В дополнение, молекулы нуклеиновых кислот могут быть введены в клетки млекопитающих вирусными векторами. Способы трансфекции клеток хорошо известны в данной области техники. См., например, патенты США, 4399216, 4912040, 4740461 и 4959455. Способы трансформации клеток растений хорошо известны в данной области, включая, например, Agrobacterium-опосредованную трансформацию, биолистическую трансформацию, прямую инъекцию, электропорацию и вирусную трансформацию. Методы трансформации клеток бактерий и дрожжей также хорошо известны в данной области.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к клетке-хозяину для получения вышеуказанного иммуноцитокина, которая содержит вышеуказанную нуклеиновую кислоту.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу получения препарата, содержащего вышеуказанный иммуноцитокин, который заключается в культивировании вышеуказанной клеткихозяина в культуральной среде в условиях, достаточных для получения указанного иммуноцитокина, при необходимости, с последующим выделением и очисткой полученного иммуноцитокина.
Термин рекомбинантная клетка-хозяин (или просто клетка-хозяин) при использовании в данном документе означает клетку, в которую введен рекомбинантный экспрессионный вектор. Настоящее изобретение относится к клеткам-хозяевам, которые могут включать, например, вектор в соответствии с настоящим изобретением, описанным выше. Настоящее изобретение относится также к клеткамхозяевам, которые включают, например, нуклеотидную последовательность, кодирующую иммуноцитокин или его вышеуказанные части по данному изобретению. Следует понимать, что рекомбинантная клетка-хозяин и клетка-хозяин означают не только конкретную заявленную клетку, но также и потомство такой клетки. Поскольку модификации могут проходить в последующих поколениях вследствие мутации или воздействий окружающей среды, такое потомство не может, на самом деле, быть идентичным родительской клетке, но такие клетки по-прежнему включены в объем термина клетка-хозяин при использовании в настоящем документе.
Клеточные линии млекопитающих, используемые в качестве хозяев для трансформации, хорошо известны в данной области и включают множество иммортализованных доступных клеточных линий. К ним относятся, например, клетки яичников китайского хомячка (СНО), NS0 клетки, клетки SP2, HEK293Т клетки, 293 Фристайл клетки (Invitrogen), NIH-3T3 клетки, клетки HeLa, клетки почек хомячка (ВНК), клетки почек африканских зеленых мартышек (COS), клетки гепатоцеллюлярной карциномы человека (например, Hep G2), А549 клетки и ряд других клеточных линий. Клеточные линии выбираются путем определения, какие клеточные линии имеют высокие уровни экспрессии и обеспечивают необходимые характеристики продуцируемого белка. Другими клеточными линиями, которые могут быть использованы, являются клеточные линии насекомых, такие как Sf9 или Sf21 клетки. Когда векторы рекомбинантной экспрессии, кодирующие иммуноцитокин по изобретению или его часть, вводятся в клетки-хозяева млекопитающих, иммуноцитокины продуцируются путем культивирования клеток-хозяев в течение времени, достаточного для экспрессии иммуноцитокина или его части по изобретению в клетках-хозяевах или, предпочтительнее, выделения иммуноцитокина в питательную среду, в которой выращиваются клетки-хозяева. Иммуноцитокины могут быть выделены из питательной среды с использованием стандартных методов очистки белка. Клетки-хозяева растений, например, включают Nicotiana, Arabidopsis, ряску, кукурузу, пшеницу, картофель и т.д. Клетки бактерий хозяина включают виды Escherichia и Streptomyces. Дрожжевые клетки-хозяева включают Schizosaccharomyces pombe, Saccharomyces cerevisiae и Pichia pastoris.
Кроме того, уровень продукции иммуноцитокина по данному изобретению из продуцирующей клеточной линии можно усилить с помощью ряда известных методов. Например, система экспрессии гена глутамин синтетазы (система GS) является достаточно распространенной для усиления экспрессии при определенных условиях. Система GS обсуждается в целом или частично в связи с патентами ЕР 0216846,
- 31 043937
0256055,0323997 и 0338841.
Вполне вероятно, что иммуноцитокин или его часть по изобретению в различных клеточных линиях или клетках-хозяевах будут отличаться друг от друга профилем гликозилирования. Однако иммуноцитокин, описанный в данном документе, или его часть (домен), содержащая аминокислотные последовательности, приведенные в настоящем документе, являются частью данного изобретения, независимо от состояния гликозилирования связывающих молекул и в целом, независимо от наличия или отсутствия пост-трансляционных модификаций.
Фармацевтическая композиция.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для стимулирования активации и/или пролиферации IL-15Rбета/гамма-положительных клеток, которая содержит вышеуказанный иммуноцитокин в терапевтически эффективном количестве, в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами.
Фармацевтическая композиция обозначает композицию, включающую в себя иммуноцитокин, согласно изобретению и по крайней мере один из компонентов, выбранных из группы, состоящей из фармацевтически приемлемых и фармакологически совместимых экципиентов, таких как наполнители, растворители, разбавители, носители, вспомогательные, распределяющие, средства доставки, консерванты, стабилизаторы, эмульгаторы, суспендирующие агенты, загустители, регуляторы пролонгированной доставки, выбор и соотношение которых зависит от природы и способа назначения и дозировки. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению и способы их изготовления будут бесспорно очевидными для специалистов в этой области. Производство фармацевтических композиций предпочтительно должно соответствовать требованиям GMP (надлежащей производственной практики). Композиция может включать буферную композицию, тонические агенты, стабилизаторы и солюбилизаторы. Пролонгированное действие композиции может быть обеспечено с помощью агентов, замедляющих абсорбцию активного фармацевтического ингредиента, например, моностеарат алюминия и желатин. Примерами подходящих носителей, растворителей, разбавителей и средств доставки являются вода, этанол, полиспирты, а также их смеси, масла и инъекционные органические сложные эфиры.
Терапевтически эффективным количеством считается количество вводимого в процессе лечения терапевтического агента, которое избавит в определенной степени от одного или нескольких симптомов заболевания, по поводу которого проводится лечение.
Лекарственное средство (препарат) - вещество или смесь веществ в виде фармацевтической композиции в виде таблеток, капсул, порошков, лиофилизатов, инъекций, инфузий, мазей и др. готовых форм, предназначенное для восстановления, исправления или изменения физиологических функций у человека и животных, а также для лечения и профилактики болезней, диагностики, анестезии, контрацепции, косметологии и прочего. Любой способ введения пептидов, белков или антител, принятый в данной области, может соответствующим образом использоваться для иммуноцитокина по данному изобретению.
Термин фармацевтически приемлемый означает один или несколько совместимых жидких или твердых компонентов, которые подходят для введения млекопитающему, предпочтительно человеку.
Термин эксципиент или вспомогательное вещество используется в данном документе для описания любого компонента, отличающегося от ранее описанных по данному изобретению. Это вещества неорганического или органического происхождения, используемые в процессе производства, изготовления лекарственных препаратов для придания им необходимых физико-химических свойств.
Под термином буфер, буферная композиция, буферный агент понимается раствор, способный сохранять значение рН, благодаря взаимодействию кислотных и щелочных компонентов, входящих в его состав, который дает возможность препарату иммуноцитокина по изрбретению проявлять устойчивость к изменениям рН. В общем случае, преимущественными являются значения рН фармацевтической композиции от 4,0 до 8,0. В качестве буферных агентов могут быть использованы, например, ацетатный, фосфатный, цитратный, гистидиновый, сукцинатный и т.п. буферные растворы, но, не ограничиваясь ими.
Термины тонический агент, осмолитик или осмотический агент в том виде, как они здесь использованы, относятся к эксципиенту, который может подводить осмотическое давление жидкого препарата антитела. Изотоничный препарат представляет собой препарат, который имеет осмотическое давление, эквивалентное давлению человеческой крови. Изотоничные препараты обычно имеют осмотическое давление от примерно 250 до 350 мОсм/кг. В качестве изотоноческих агентов могут быть использованы полиолы, моно- и дисахара, аминокислоты, соли металлов, например, хлорид натрия, и т.п., но не ограничиваясь ими.
Под стабилизатором понимается вспомогательное вещество или смесь двух и более вспомогательных веществ, которые обеспечивают физическую и/или химическую стабильность активного агента. В качестве стабилизаторов могут быть использованы аминокислоты, например аргинин, гистидин, глицин, лизин, глутамин, пролин, но, не ограничиваясь ими; поверхностно-активные вещества, например, полисорбат 20 (торговое наименование Tween 20), полисорбат 80 (торговое наименование Tween 80), полиэтилен-полипропилен гликоль и его кополимеры (торговые наименования Полоксамер (Poloxaner),
- 32 043937
Плуроник (Pluronic)), натрия додецилсульфат (SDS), но, не ограничиваясь ими; антиоксиданты, например, метионин, ацетилцистеин, аскорбиновая кислота, монотиоглицерол, соли серистых кислот, и т.п., но не ограничиваясь ими; хелатирующие агенты, например этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА), диэтилентриаминпентауксусная кислота (ДТПА), цитрат натрия и т.п., но не ограничиваясь ими.
Фармацевтическая композиция является стабильной, если активный агент сохраняет свою физическую стабильность и/или химическую стабильность и/или биологическую активность в течение заявленного срока годности при температуре хранения, например, при 2-8°С. Предпочтительно, чтобы активный агент сохранял и физическую, и химическую стабильность, а также биологическую активность. Период хранения выбирается на основании результатов исследования стабильности при ускоренном и естественном хранении.
Фармацевтическая композиция по данному изобретению может изготавливаться, упаковываться или широко продаваться в виде единичной стандартной дозы или множества единичных стандартных доз в виде готовой лекарственной формы. Используемый в данном документе термин единичная стандартная доза означает дискретное количество фармацевтической композиции, содержащей заранее определенное количество активного ингредиента. Количество активного ингредиента обычно равно дозировке активного ингредиента, который будет вводиться субъекту, или удобной части такой дозировки, например, половине или трети такой дозировки.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению, как правило, пригодны для парентерального введения в виде стерильных лекарственных средств, предназначенных для введения в организм человека с нарушением целостности кожных покровов или слизистых оболочек, минуя желудочнокишечный тракт путем инъекций, инфузий или имплантации. Например, предполагается, что парентеральное введение включает, помимо прочего, подкожную, внутрибрюшинную, внутримышечную, внутривенную, внутриартериальную, интратекальную, внутрижелудочковую, интрауретральную, внутричерепную, внутрисуставнную, трансдермальную инъекцию или инфузий; и почечные диализные инфузионные методики. Внутриопухолевая доставка, например, внутриопухолевая инъекция, также может быть применима. Также предусмотрена региональная перфузия. Предпочтительные варианты осуществления изобретения включают внутривенный и подкожный пути. Любой способ введения пептидов или белков, принятый в данной области, может соответствующим образом использоваться для иммуноцитокина по данному изобретению.
Инъекционные лекарственные средства могут быть изготовлены, упакованы или проданы в стандартной лекарственной форме, например в ампулах, флаконах, полимерных контейнерах, преднаполненных шприцах, устройствах для автоинжекции, но, не ограничиваясь ими. Лекарственные средства для парентерального введения включают, помимо прочего, суспензии, растворы, эмульсии в масляных или водных основах, пасты и тому подобное.
Еще одним вариантом осуществления изобретения является лекарственное средство для парентерального введения, где фармацевтическая композиция предоставлена в сухой форме, т.е. порошка или гранул для растворения в подходящем растворителе (например, стерильной апирогенной воде) перед введением. Такое лекарственное средство может быть получено, например, с помощью лиофилизации, т.е. процесса, известного в данной области техники как сушка из замороженного состояния, включающая в себя замораживание препарата и последующее удаление растворителя из замороженного содержимого.
Иммуноцитокин по данному изобретению может также вводиться интраназально или ингаляционно, самостоятельно, в виде смеси с подходящим фармацевтически приемлемым наполнителем из ингалятора, такого как аэрозольный контейнер под давлением, помпа, спрей, распылитель) или небулайзер, в котором используется или не используется подходящий пропеллент, или в виде назальных капель или спрея.
Лекарственное средство для парентерального введения может быть немедленного или модифицированного высвобождения. Лекарственные средства с модифицированным высвобождением включают отсроченное, замедленное, пульсирующее, контролируемое, нацеленное и программируемое высвобождение.
В некоторых вариантах фармацевтическая композиция применяется для лечения онкологического или аутоиммунного заболевания.
В некоторых вариантах фармацевтическая композиция применяется для лечения аутоиммунного заболевания.
Термин аутоиммунное заболевание в контексте настоящего описания обозначает не злокачественное заболевание или нарушение, возникающее и направленное против собственных (ауто) антигенов и/или тканей индивидуума.
Определение аутоиммунного заболевания охватывает, но без ограничения, ревматоидный артрит, артроз, ювенильный хронический артрит, септический артрит, артроз Лайма, псориатический артрит, реактивный артрит, спондилоартропатия, системная красная волчанка, болезнь Крона, язвенный колит, воспалительные заболевания кишечника, сахарный диабет, тиреоидит, астма, аллергические заболевания, псориаз, атопический дерматит, склеродермия, реакция трансплантат против хозяина, отторжение трансплантата, острые или хронические иммунные заболевания, связанные с трансплантацией, саркои- 33 043937 доз, болезнь Кавасаки, болезнь Грейвса, нефротический синдром, синдром хронической усталости, гранулематоз Вегенера, пурпура Геноха-Шенлейна, микроскопический почечный васкулит, хронический активный гепатит, uvenita, септический шок, синдром токсического шока, септический синдром, кахексия, синдром приобретенного иммунодефицита, острый поперечный миелит, хорея Гентингтона, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, инсульт, первичный билиарный цирроз, гемолитическая анемия, взрослых (острый) респираторный дистресс-синдром, алопеция, очаговая алопеция, серонегативная артропатия, артропатии, болезнь Рейтера, псориатическая артропатия, связанная с язвенным колитом артропатия, атопические аллергии, аутоиммунные Буллезные заболевания, пузырчатка vulgaris, листовидная пузырчатка, болезнь пемфигоида, линейные IgA, аутоиммунная гемолитическая анемия, Кумбс позитивная гемолитическая анемия, злокачественная анемия, ювенильная злокачественная анемия, артрит, первичный склерозирующий геппатит А, криптогенный аутоиммунный геппатит, фиброзирующие заболевания легких, криптогенный фиброзный альвеолит, поствоспалительные интерстициальные заболевания легких, интерстициальный пневмонит, хроническая эозинофильная пневмония chronic, постинфекционные интерстициальные заболевания легких, подагрический артрит, аутоиммунный геппатит, аутоиммунный геппатит I типа (классический аутоиммунный геппатит или липоид), аутоиммунный геппатит II типа, остеоартрит, первичный склерозирующий холангит, псориаз I типа, псориаз II типа, идеопатическая лейкопения, аутоиммунная нейтропения, ренальные NOS заболевания [renal NOS-disease], гломерулонефрит, микроскопический ренальный васкулит, дискоидный волчаночный эритематоз, идеопатическая или мужская NOS фертильность, [autoimmunity to sperm], все подтипы множественного склероза, симпатическая офтальмия, вторичная легочная гипертензия при заболеваниях соединительной ткани, синдром Гудпасчура, легочная манифистация узлового полиартрита, острая ревматическая лихорадка, ревматоидный спондилит, анкилозирующий спондилит, болезнь Стилла, системный склероз, синдром Шенгрена, синдром Такаясу, аутоиммунная тромбоцитопения, идиопатическая тромбоцитопения, аутоимунный тиреоидит, гипертироидизм, болезнь Хошимото, аутоиммунный атрофический гипотироидизм, первичная мексидема, факогенный увеит, первичный васкулит, витилиго, острые заболевания печени, хронические заболевания печени, аллергии, астма, психические заболевания (включая депрессию и шизофрению), заболевания опосредованные Th2 типом и Th1 типом, коньюктивиты, аллергические контактные дерматиты, аллергические риниты, деффицит альфа-1-антитрипсина, амиотрофический латеральный склероз, анемия, цистический фиброз, заболевания ассоциированные с цитокиновой терапией, демиелизирующие заболевания, дерматиты, иридоциклит/увеит/оптический неврит, повреждение ишемической реперфузии, ишемический инсульт, ювенильный ревматоидный артрит, аутоиммунная энтеропатия, аутоимунная потеря слуха, аутоиммунный лимфопролиферативный синдром, аутоиммунный миокардит, аутоиммунная преждевременная недостаточность яичника и блефарит.
В некоторых вариантах фармацевтическая композиция применяется для лечения онкологического заболевания.
Термины онкологическое заболевание, рак или раковый относятся к физиологическому состоянию или описывают физиологическое состояние у млекопитающих, которое, как правило, характеризуется нерегулируемым(ой) ростом/пролиферацией клеток. Примеры онкологических заболеваний включают, но без ограничения, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз. Более конкретные примеры таких раковых заболеваний включают плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, аденокарциному легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак брюшины, печеночноклеточный рак, рак желудка, включая рак ЖКТ, рак поджелудочной железы, глиобластому, глиому, цервикальный рак, рак яичника, рак печени, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак толстой кишки, колоректальный рак, карциному эндометрия и матки, карциному слюнных желез, рак почки (почечноклеточную карциному), рак предстательной железы (рак простаты), рак наружных женских половых органов, рак щитовидной железы, печеночную карциному, карциному анального канала, карциному пениса, меланому и различные типы рака головы и шеи.
В некоторых вариантах фармацевтическая композиция применяется для лечения онкологического заболевания, которое выбирают из группы: ПРГШ (плоскоклеточный рак головы и шеи), рак шейки матки, рак без выявленного первоисточника, глиобластома, рак пищевода, рак мочевого пузыря, ТНРМЖ (трижды негативный рак молочной железы), КРР (колоректальный рак), гепатоцеллюлярная карцинома, меланома, НМРЛ (немелкоклеточный рак легкого), рак почки, рак яичника, MSI КРР (колоректальный рак с высокой микросателлитной нестабильностью), лейкоз (острый или миелобластный), лимфома, множественная миелома, меланома, рак молочной железы, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, саркома, гепатоцеллюлярная карцинома, глиобластома, лимфома Ходжкина, Т- и В-клеточном острый лимфобластный лейкоз, мелкоклеточный рак лёгкого, острый миелобластный лейкоз, рефрактерная В-клеточная неходжкинская лимфома, фолликулярная лимфома, В-клеточная лимфома маргинальной зоны, крупноклеточная В-клеточной диффузная лимфома, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак поджелудочной железы, рак яичника, острый миелобластный лейкоз и миелодиспластический синдром высокого риска.
Термин антипролиферативное действие подразумевает остановку или ингибирование роста пролиферирующих клеток, таких как раковые клетки.
- 34 043937
Термин IC50 (50% ингибирующая концентрация) относится к концентрациям препарата, при которых измеряемая активность или отклик, например, рост или пролиферация клеток, таких как опухолевые клетки, ингибируется на 50%. Значение IC50 может оцениваться с помощью соответствующих кривых зависимости ответа от логарифма дозы, с использованием специальных статистических программ для обработки кривых.
Термин GI50 (50% ингибирование роста) относится к концентрациям препарата, при которых пролиферация клеток, таких как опухолевые клетки, ингибируется на 50%.
Термин ED50 (ЕС50) (50% эффективная доза/концентрация) относится к концентрациям препарата, при которых измеряемый биологический эффект достигается на 50% (может включать цитотоксичность).
Способ лечения/Применение для лечения.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу лечения онкологического заболевания, который включает введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, вышеуказанного иммуноцитокина или вышеуказанной фармацевтической композиции в терапевтически эффективном количестве.
Лечить, лечение и терапия относятся к методу смягчения или устранения биологического расстройства и/или по меньшей мере одного из сопутствующих ему симптомов. Используемый в данном документе, термин облегчить болезнь, заболевание или состояние, означает уменьшение тяжести и/или частоты возникновения симптомов заболевания, расстройства или состояния. Кроме того, содержащиеся в данном документе ссылки на лечение включает ссылки на лечебную, паллиативную и профилактическую терапию.
В одном аспекте субъект лечения или пациент является млекопитающим, предпочтительно человеческим субъектом. Вышеупомянутый субъект может быть мужского или женского пола любого возраста.
Термин заболевание означает любое состояние, которое можно улучшить в результате лечения по настоящему изобретению. В определение данного термина входят хронические и острые нарушения или заболевания.
В некоторых вариантах способа лечения, онкологическое заболевание выбрано из группы: ПРГШ (плоскоклеточный рак головы и шеи), рак шейки матки, рак без выявленного первоисточника, глиобластома, рак пищевода, рак мочевого пузыря, ТНРМЖ (трижды негативный рак молочной железы), КРР (колоректальный рак), гепатоцеллюлярная карцинома, меланома, НМРЛ (немелкоклеточный рак легкого), рак почки, рак яичника, MSI КРР (колоректальный рак с высокой микросателлитной нестабильностью), лейкоз (острый или миелобластный), лимфома, множественная миелома, меланома, рак молочной железы, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, саркома, гепатоцеллюлярная карцинома, глиобластома, лимфома Ходжкина, Т- и В-клеточном острый лимфобластный лейкоз, мелкоклеточный рак лёгкого, острый миелобластный лейкоз, рефрактерная В-клеточная неходжкинская лимфома, фолликулярная лимфома, В-клеточная лимфома маргинальной зоны, крупноклеточная Вклеточной диффузная лимфома, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак поджелудочной железы, рак яичника, острый миелобластный лейкоз и миелодиспластический синдром высокого риска.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу активации биологической активности Т клеточной популяции или NK клеточной популяции у субъекта, нуждающегося в такой активации, который включает введение субъекту эффективного количества вышеуказанного иммуноцитокина или вышеуказанной фармацевтической композиции.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к применению вышеуказанного иммуноцитокина или вышеуказанной фармацевтической композиции для лечения у субъекта, нуждающегося в таком лечении, онкологического заболевания.
В некоторых вариантах применения онкологическое заболевание выбрано из группы: ПРГШ (плоскоклеточный рак головы и шеи), рак шейки матки, рак без выявленного первоисточника, глиобластома, рак пищевода, рак мочевого пузыря, ТНРМЖ (трижды негативный рак молочной железы), КРР (колоректальный рак), гепатоцеллюлярная карцинома, меланома, НМРЛ (немелкоклеточный рак легкого), рак почки, рак яичника, MSI КРР (колоректальный рак с высокой микросателлитной нестабильностью), лейкоз (острый или миелобластный), лимфома, множественная миелома, меланома, рак молочной железы, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, саркома, гепатоцеллюлярная карцинома, глиобластома, лимфома Ходжкина, Т- и В-клеточном острый лимфобластный лейкоз, мелкоклеточный рак лёгкого, острый миелобластный лейкоз, рефрактерная В-клеточная неходжкинская лимфома, фолликулярная лимфома, В-клеточная лимфома маргинальной зоны, крупноклеточная Вклеточной диффузная лимфома, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак поджелудочной железы, рак яичника, острый миелобластный лейкоз и миелодиспластический синдром высокого риска.
В случае опухоли (например, раковой опухоли) терапевтически эффективное количество иммуноцитокина по изобретению, может уменьшать число раковых клеток; уменьшать начальный размер опухоли; ингибировать (т.е. до некоторой степени замедлять и, предпочтительно, прекращать) инфильтрацию раковыми клетками периферических органов; ингибировать (т.е. до некоторой степени замедлять и, предпочтительно, прекращать) метастазирование опухоли; ингибировать, до некоторой степени, рост опухоли; и/или облегчать, до некоторой степени, один или более симптомов, обусловленных расстрой- 35 043937 ством. Иммуноцитокин по изобретению может, до некоторой степени, предупреждать рост и/или убивать имеющиеся раковые клетки, оно может вызывать цитостатический и/или цитотоксический эффект. При терапии рака эффективность in vivo можно определять, например, оценивая продолжительность жизни, время до прогрессирования заболевания (ТТР), частоту ответа опухоли на лечение (RR), продолжительность ответа и/или качество жизни.
Иммуноцитокины по данному изобретению могут назначаться без дополнительного терапевтического лечения, т.е. в качестве самостоятельной терапии. Кроме того, лечение иммуноцитокином по данному изобретению может включать по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое лечение (комбинированная терапия). В некоторых вариантах осуществления изобретения, иммуноцитокин может вводиться совместно или быть сформулирована с другим медикаментом/препаратом для лечения рака.
Используемые в данном документе термины совместное назначение, совместно назначенный и в сочетании с относятся к иммуноцитокину по изобретению, с одним или более другими терапевтическими агентами, как предполагается, означают, сслылаются или включают:
1) одновременное введение такой комбинации иммуноцитокина по данному изобретению и терапевтического агента пациенту, который нуждается в лечении, когда такие компоненты сформулированы вместе в одной лекарственной форме, из которой указанные компоненты высвобождаются практически одновременно указанному пациенту;
2) одновременное введение такой комбинации иммуноцитокина по данному изобретению и терапевтического агента пациенту, который нуждается в лечении, когда такие компоненты сформулированы отдельно в разных лекарственных формах, введение которых происходит практически в одно и то же время указанному пациенту, после чего указанные компоненты высвобождаются практически одновременно указанному пациенту;
3) последовательное введение такой комбинации иммуноцитокина по данному изобретению и терапевтического агента пациенту, который нуждается в лечении, когда такие компоненты сформулированы отдельно друг от друга в отдельных лекарственных формах, которые принимаются в последовательно по времени указанным пациентом со значимым временным интервалом между каждым введением, после чего указанные компоненты высвобождаются в практически разное время указанному пациенту; а также
4) последовательное введение такой комбинации иммуноцитокина по данному изобретению и терапевтического агента пациенту, который нуждается в лечении, когда такие компоненты сформулированы вместе в единый лекарственной форме, из которой высвобождение указанных компонентов происходит контролируемым образом, после чего они одновременно, последовательно или совместно высвобождаются в одно и то же время и/или разное время указанному пациенту, где каждая часть может быть введена одним или разными путями.
Иммуноцитокин по данному изобретению могут комбинировать с терапевтическим агентом, который выбирают из группы, включающей цитотоксическое средство, химиотерапевтическое средство, противогормональное средство или другое терапевтическое антитело.
Термин цитотоксическое средство в используемом в настоящем описании смысле относится к веществу, которое ингибирует или предотвращает функционирование клеток и/или вызывает разрушение клеток. Подразумевается, что термин включает радиоактивные изотопы (например, At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32 и радиоактивные изотопы Lu), химиотерапевтические средства и токсины, такие как низкомолекулярные токсины или ферментативно активные токсины, имеющие происхождение из бактерий, грибов, растений или животных, включая их фрагменты и/или варианты.
Химиотерапевтическим средством является химическое соединение, применимое для лечения злокачественной опухоли. Примеры химиотерапевтических средств включают алкилирующие агенты, такие как тиотепа и циклофосфамид (CYTOXAN®); алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбохинон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метилмеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилмеламин; ацетогенины (например, буллатацин и буллатацинон); дельта-9-тетрагидроканнабинол (дронабинол, MARINOL®); бета-лапахон; лапахол; колхицины; бетулиновую кислоту; камптотецин (включая синтетический аналог топотекан (HYCAMTIN®), СРТ-11 (иринотекан, CAMPTOSAR®), ацетилкамптотецин, скополектин и 9-аминокамптотецин); бриостатин; каллистатин; СС-1065 (включая его синтетические аналоги адозелезин, карзелезин и бизелезин); подофиллотоксин; подофиллиновую кислоту; тенипозид; криптофицины (например, криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги KW-2189 и СВ1-ТМ1); элеутеробин; панкратистатин; саркодиктиин; спонгистатин; азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, гидрохлорид оксида мехлорэтамина, мелфалан, новембихин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урамустин; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин и ранимнустин; антибиотики, такие как энедииновые антибиотики (например, калихеамицин,например, калихеамицин гамма II и калихеамицин омега II (см., например, Agnew, Chem. Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994)); динемицин, включая динемицин А; эсперамицин; а также хромофор неокарциностатина и родственные хромофоры хромопротеинов - энедииновые антибио- 36 043937 тики, аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, карминомицин, карзинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5оксо-L-норлейцин, доксорубицин (включая ADRIAMICIN®, морфолинодоксорубицин, цианоморфолинодоксорубицин, 2-пирролинодоксорубицин, доксорубициноНС1 в инъецируемых липосомах (DOXOL®), липосомный доксорубицин TLC D-99 (MYOCET®), пегилированный липосомный доксорубицин (CAELYX®) и дезоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин С, микофеноловую кислоту, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, потфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат, гемцитабин (GEMZAR®), тегафур (UFTORAL®), капецитабин (XELODA®), эпотилон и 5-фторурацил (5-FU); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пурина, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; средства, подавляющие функции надпочечников, такие как аминоглютетимид, митотан, трилостан; компенсатор фолиевой кислоты, такой как фолиновая кислота; ацеглатон; гликозид альдофосфамида; аминолевулиновую кислоту; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазихон; элфорнитин; ацетат эллиптиния; этоглуцид; нитрат галлия; гидроксимочевину; лентинан; лонидаинин; майтанзиноиды, такие как майтанзин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопиданмол; нитраэрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; 2-этилгидразид; прокарбазин; полисахаридный комплекс PSK® (JHS Natural Products, Eugene, OR); разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманий; тенуазоновую кислоту; триазиквон; 2,2',2-трихлортриэтиламин; трихотецены (например, токсин Т-2, верракурин А, роридин А и ангуидин); уретан; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид (ara-С); тиотепа; таксоид, например паклитаксел (TAXOL®), препарат паклитаксела на основе сконструированных связанных с альбумином наночастиц (ABRAXANETM) и доцетаксел (TAXOTERE®); хлорамбуцил; 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; средства на основе платины, такие как цисплатин, оксалиплатин и карбоплатин; алкалоиды барвинка, которые предотвращают полимеризацию тубулина из образующихся микротрубочек, включая винбластин (VELBAN®), винкристин (ONCOVIN®), виндезин (ELDISINE®, FILDESIN®) и винорелбин (NAVELBINE®); этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; лейковорин; новантрон; эдатрексат; дауномицин; аминоптерин; ибандронат; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как ретиноевая кислота, включая бексаротен (TARGRETIN®); бифосфонаты, такие как клодронат (например, BONEFOS® или OSTAC®), этидронат (DIDROCAL®), NE-58095, золедроновую кислоту/золедронат (ZOMETA®), алендронат (FOSAMAX®), памидронат (AREDIA®), тилудронат (SKELID®) или ризендронат (ACTONEL®); троксацитабин (1,3-диоксолановый нуклеозидный аналог цитозина); антисмысловые олигонуклеотиды, например олигонуклеотиды, которые ингибируют экспрессию генов в путях передачи сигналов, вовлеченных в пролиферацию аберрантных клеток, таких как, например, PKC-альфа, Raf, H-Ras и рецептора эпидермального фактора роста (EGF-R); вакцины, такие как вакцина THERATOPE® и вакцины для генной терапии, например вакцина ALLOVECTIN®, вакцина LEUVECTIN® и вакцина VAXID®; ингибитор топоизомеразы 1 (например, LURTOTECAN®); rmRH (например, ABARELIX®); BAY439006 (сорафениб; Bayer); SU-11248 (Pfizer); перифосин, ингибитор ЦОГ-2 (например, целекоксиб или эторикоксиб), ингибитор протеосом (например, PS341); бортезомиб (VELCADE®); CCI-779; типифарниб (811577); орафениб, АВТ510; ингибитор Bcl-2, такой как облимерсен натрия (GENASENSE®); пиксантрон; ингибиторы EGFR (см. определение ниже); ингибиторы тирозинкиназ (см. определение ниже); и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше средств; а также сочетания двух или более указанных выше средств, такие как CHOP, сокращенное название комбинированной терапии циклофосфамидом, доксорубицином, винкристином и преднизолоном, и FOLFOX, сокращенное название схемы лечения оксалиплатином (ELOXATINTM) в сочетании с 5-FU и лейковорином.
Также в указанное определение включены противогормональные средства, которые действуют, регулируя или ингибируя действие гормонов на опухоли, такие как антиэстрогены со смешанным профилем агонист/антагонист, включая тамоксифен (NOLVADEX®), 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, торемифен (FARESTON®); идоксифен, дролоксифен, ралоксифен (EVISTA®), триоксифен, кеоксифен и избирательные модуляторы рецепторов эстрогена (SERM), такие как SERM3; чистые антиэстрогены без агонистических свойств, такие как фулвестрант (FASLODEX®) и ЕМ800 (такие средства могут блокировать димеризацию рецепторов эстрогена (ER), ингибировать связывание ДНК, усиливать метаболизм ER и/или снижать уровни ER); ингибиторы ароматазы, включая стероидные ингибиторы ароматазы, такие как форместан и эксеместан (AROMASIN®), и нестероидные ингибиторы ароматазы, такие как анастразол (ARIMIDEX®), летрозол (FEMARA®) и аминоглутетимид и другие ингибиторы ароматазы, включая ворозол (RIVISOR®), ацетат мегестрола (MEGASE®), фадрозол, имидазол; агонисты рилизинг-гормона лютеинизирующего гормона, включая лейпролид (LUPRON® и ELIGARD®), гозерелин, бузерелин и
- 37 043937 триптерелин; половые стероиды, включая прогестины, такие как ацетат мегестрола и ацетат медроксипрогестерона, эстрогены, такие как диэтилстилбестрол и премарин и андрогены/ретиноиды, такие как флуоксиместерон, полностью трансретиноевая кислота и фенретинид; онапристон; антипрогестероны; понижающие регуляторы рецепторов эстрогенов (ERD); антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид и бикалутамид; тестолактон; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше средств; а также сочетания двух или более указанных выше средств.
Другим терапевтическим средством, которое может применяться в комбинации с иммуноцитокином по данному изобретению, может быть терапевтическое антитело, которое выбирают из группы: антитела к PD1 (например, пролголимаб, пембролизумаб или ниволумаб), антитела к PD-L1, антитела к CTLA4, антитела к анти 4-1ВВ, антитела к ОХ40, антитела к GITR, антитела к CD20 (например, ритуксимаб), антитела к HER2 (например, трастузумаб или пертузумаб), антитела к VEGF (например, бевацизумаб) или их комбинации.
Другим терапевтическим средством, которое может применяться в комбинации с иммуноцитокином по данному изобретению, может быть терапевтически активное противоопухолевое соединение, которое выбирают из группы активаторов врожденного или приобретенного иммунитета.
Подразумевается, что иммуноцитокин по данному изобретению может использоваться в способах лечения, как описано выше, может использоваться в лечении, как описано выше, и/или может использоваться в производстве медикаментов для лечения, как описано выше.
Дозы и пути введения.
Иммуноцитокин по данному изобретению будет вводиться в количестве, эффективном для лечения состояния, о котором идет речь, т.е. в дозах и в течение периодов времени, необходимых для достижения желаемого результата. Терапевтически эффективное количество может изменяться в зависимости от таких факторов, как конкретное состояние, по поводу которого проводится лечение, возраста, пола и веса пациента, а также является ли введение иммуноцитокина самостоятельным лечением или оно проводится в комбинации с одним или более дополнительных препаратов или методов лечения.
Схемы приема лекарственных средств можно регулировать, чтобы обеспечить оптимальный желаемый ответ. Например, может быть введен один болюс, несколько разделенных доз могут быть введены в течение некоторого времени, или доза могут быть пропорционально уменьшена или увеличена в зависимости от остроты терапевтической ситуации. Особенно полезным является изготовление парентеральных композиций в стандартной лекарственной форме для простоты введения и однородности дозирования.
Стандартная лекарственная форма при использовании в данном документе относится к физически дискретным единицам, пригодным в качестве единичных доз для пациентов/субъектов, подлежащих лечению; каждая единица содержит заданное количество активного соединения, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта в сочетании с требуемым фармацевтическим носителем. Спецификация для стандартных лекарственных форм по настоящему изобретению, как правило, диктуется и непосредственно зависит от (а) уникальных характеристик химиотерапевтического агента и конкретного терапевтического или профилактического эффекта, которые должны быть достигнуты, и (b) ограничений, присущих в технике компаундирования такого активного соединения для лечения чувствительности у субъектов.
Таким образом, квалифицированным специалистам понятно, исходя из раскрытия, представленного в данном документе, что дозы и режим дозирования корректируются в соответствии со способами, хорошо известными в терапевтической области. Это означает, что может быть легко установлена максимально переносимая доза и может быть также определено эффективное количество, обеспечивающее обнаруживаемый терапевтический эффект для пациента, так же как и требования к времени введения каждого агента для достижения видимого терапевтического эффекта для пациента. Таким образом, хотя некоторые дозы и схемы режима введения приведены в качестве примеров в данном документе, эти примеры никоим образом не ограничивают дозы и режимы введения, которые могут понадобиться для пациента в практике применения настоящего изобретения.
Следует отметить, что значения дозировки могут изменяться в зависимости от типа и тяжести состояния, которое следует облегчить, и может включать одну или более доз. Кроме того, необходимо понимать, что для любого конкретного пациента, конкретные схемы введения должны быть скорректированы через некоторое время согласно индивидуальной потребности и на усмотрение медицинского работника, который осуществляет введение или контролирует введение композиций, и что диапазоны концентрации, приведенные в данном описании, приведены только в качестве примера и не предназначены для ограничения объема или практики заявленных композиций. Кроме того, режим дозирования с композициями по данному изобретению может быть основан на различных факторах, включая тип заболевания, возраст, вес, пол, состояния здоровья пациента, тяжесть состояния, путь введения и конкретный иммуноцитокин по изобретению. Таким образом, режим дозирования может широко варьироваться, но может определяться регулярно с помощью стандартных методов. Например, дозы могут быть скорректированы на основе фармакокинетических и фармакодинамических параметров, которые могут включать клинические эффекты, такие как токсические эффекты или лабораторные значения. Таким образом, настоящее изобретение охватывает индивидуальное повышение дозы, которое определяется квалифициро- 38 043937 ванным специалистом. Определение необходимой дозы и режимы хорошо известны в соответствующей области техники и будут понятны специалисту в данной области после ознакомления с идеями, раскрытыми в данном документе.
Примеры подходящих способов введения предусмотрены выше.
Предполагается, что подходящая доза иммуноцитокина по данному изобретению будет в диапазоне от 0,1-200 мг/кг, предпочтительно 0,1-100 мг/кг, в том числе около 0,5-50 мг/кг, например около 1-20 мг/кг. Иммуноцитокин может быть введен, например, в дозе по меньшей мере 0,25 мг/кг, например по меньшей мере 0,5 мг/кг, в том числе не менее 1 мг/кг, например по меньшей мере 1,5 мг/кг, например также как не менее 2 мг/кг, например по меньшей мере 3 мг/кг, в том числе по меньшей мере 4 мг/кг, например по меньшей мере 5 мг/кг; и, например, вплоть до максимально 50 мг/кг, в том числе вплоть до максимально 30 мг/кг, например вплоть до максимально 20 мг/кг, в том числе вплоть до максимально 15 мг/кг. Введение будет повторяться обычно в подходящие промежутки времени, например раз в неделю, раз в две недели, один раз каждые три недели или один раз каждые четыре недели, и так долго, как будет сочтено целесообразным ответственным врачом, который может в некоторых случаях увеличить или уменьшить дозу при необходимости.
Примеры
Для наилучшего понимания изобретения приводятся следующие примеры. Эти примеры приведены только в иллюстративных целях и не должны толковаться как ограничивающие сферу применения изобретения в любой форме.
Все публикации, патенты и патентные заявки, указанные в этой спецификации, включены в данный документ путем отсылки. Хотя вышеупомянутое изобретение было довольно подробно описано путем иллюстрации и примера в целях исключения двусмысленного толкования, специалистам в данной области на основе идей, раскрытых в данном изобретении, будет вполне понятно, что могут быть внесены определенные изменения и модификации без отклонения от сущности и объема прилагаемых вариантов осуществления изобретения.
Материалы и общие методы.
Методы рекомбинантной ДНК.
Для манипуляций с ДНК использовали стандартные методы, описанные у Sambrook J. и др., Molecular cloning: A laboratory manual; Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 1989. Реагенты для молекулярной биологии использовали согласно инструкциям производителей.
Синтез генов.
Требуемые сегменты генов получали из олигонуклеотидов, созданных путем химического синтеза. Генные сегменты длиной от 300 до 4000 п.н., которые фланкированы уникальными сайтами рестрикции, собирали путем отжига и лигирования олигонуклеотидов, включая ПЦР-амплификацию и последующее клонирование через указанные сайты рестрикции. Последовательности ДНК субклонированных генных фрагментов подтверждали путем секвенирования ДНК.
Определение последовательностей ДНК.
Последовательности ДНК определяли путем секвенирования по Сенгеру.
Анализ последовательностей ДНК и белков и обработка данных о последовательностях.
Применяли пакет программ Infomax's Vector NTI Advance suite, версия 8.0 и SnapGene Viewer для создания, картирования, анализа, аннотирования и иллюстрации последовательностей.
Пример 1.
Продукция рекомбинантных белков в суспензионной культуре клеток млекопитающих.
Для приготовления рекомбинантных белков на основе IL15 суперагониста, схематично представленных на фиг. 1-4, были синтезированы конструкции, содержащие фрагменты последовательности IL15 лиганда (https://www.uniprot.org/uniprot/P40933) и IL15Ra (https://www.uniprot.org/uniprot/Q13261) человека. Последовательности обоих генов были синтезированы из олигонуклеотидов посредством ПЦР.
Для получения вариантов IL15 суперагониста, как представлено CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA на фиг. 1 и CK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcLALA на фиг. 2 (далее упоминаются как IL15SA или BCD225), указанные гены были клонированы в плазмиды в виде N-terminus фьюжн (слитый белок) с первым константным доменом каппа легкой цепи антитела в вектор pEE-IL15Ra-CK (или pEE-IL15-CK) по сайтам рестрикции SalI/BsiWI (фиг. 5) и с первым константным доменом тяжелой цепи антитела в вектор рЕЕIL15-CH1-Fc-LALA (или pEE-IL15Ra-CH1-Fc-LALA) IgG1 no сайтам рестрикции SalI/NheI (фиг. 6) и оба вектора скомбинированы на стадии трансфекции.
Для получения вариантов биспецифического IL15 суперагониста, как представлено FabCK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcknobLALA (далее упоминается как IL15SA/PD1 или anti-PD1/IL15SA или IL15SA/PDL1 или anti-PDL1/IL15SA) на фиг. 4 и Fab-CK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcknobLALA на фиг. 3, гены IL15 лиганда и рецептора были клонированы в плазмиды в виде N-terminus фьюжн с первым константным доменом каппа легкой цепи антитела в вектор pEE-IL15Ra-CK (или pEE-IL15-CK) по сайтам рестрикции SalI/BsiWI (фиг. 5) и с первым константным доменом тяжелой цепи антитела в вектор рЕЕIL15-CH1-Fc-knob-LALA (или pEE-IL15Ra-CH1-Fc-knob-LALA) IgG1 по сайтам рестрикции SalI/NheI
- 39 043937 (фиг. 9). Кроме того, для образования Fab части асимметричного антитела, как представлено на фиг. 3 и фиг. 4, гены вариабельных доменов антител anti-PD1 (prolgolimab) (далее как IL15SA/PD1 или antiPD1/IL15SA) или anti-PDL1 (BCD-135) (далее как IL15SA/PDL1 или anti-PDL1/IL15SA) были клонированы в плазмиды в виде N-terminus фьюжн с первым константным доменом каппа легкой цепи антитела в вектор pEE-BCD100-02-VL-CK по сайтам рестрикции SalI/BsiWI (фиг. 7) и с первым константным доменом тяжелой цепи антитела в вектор pEE-BCD100-02-VH-CH1-Fc-hole-LALA IgG1 по сайтам рестрикции SalI/NheI (фиг. 8). В результате четыре описываемых вектора были скомбинированы на стадии трансфекции для синтеза 4 отдельных полипептидов в одной клетке и образования биспецифического иммуноцитокина.
Все указанные выше плазмиды нарабатывали в необходимых количествах в клетках E.Coli и очищали при помощи набора Maxiprep Qiagen.
Рекомбинантные белки, содержащие IL15SA, транзиентно нарабатывали в клетках клеточной линии клеток яичника китайского хомячка (линия Сно-Κι), полученной согласно опубликованным протоколам [Biotechnol Bioeng. 2005 Sep 20; 91(6):670-677, Liao Metal., 2004; Biotechnol Lett. 2006 Jun;28(11):843-848; Biotechnol Bioeng. 2003 Nov 5;84(3):332-342]. Использовали клетки, конститутивно экспрессирующие ген белка EBNA1 (Epstein-Barrvirus nuclear antigen 1). Суспензионное культивирование осуществляли в колбах на орбитальном шейкере, с использованием бессывороточных сред производства компании Life Technologies Corporation и согласно инструкциям производителя. Для транзиентной экспрессии клетки в концентрации 2х106/мл трансфецировали с помощью линейного полиэтиленимина (ПЭИ МАХ, компания Polysciences). Соотношение ДНК/ПЭИ составляло 1:3/1:10. Через 5-7 дней после трансфекции культуральную среду центрифугировали при 2000 g в течение 20 мин и фильтровали через фильтр с размером пор 0,22 мкм. Целевые белки выделяли из культуральной жидкости с помощью аффинной хроматографии.
Рекомбинантные белки выделяли и очищали из культуральной жидкости, используя колонку для аффинной хроматографии протеин А. Осветленную культуральную жидкость пропускали через колонку HiTrap rProtein A Sepharose FF объемом 5 мл (GE Healthcare), уравновешенную фосфатно-солевым буфером (ФСБ, рН 7,4). Затем колонку промывали 5 колоночными объемами ФСБ, чтобы вымыть неспецифически связывающиеся компоненты. Связанный антиген элюировали, используя 0,1 М глициновый буфер рН 3. Главный протеиновый пик элюции собирали и доводили его рН до нейтральности с помощью 1 М буфера Tris (рН 8). Все стадии проводили при скорости потока 110 см/ч. Далее белок переводили в ФСБ (рН 7,4) с помощью диализа, используя технологию SnakeSkin Dialysis Tubing, фильтровали (0,22 мкм), переносили в пробирки и хранили при -70°С.
Чистоту полученного раствора белка оценивали с помощью SDS-гель-электрофореза (пример фиг. 10).
Пример 2.
Кинетический анализ взаимодействия (IL15SA)2-Fc с IL2eY рецептором человека.
Константы аффинности связывания (IL15SA)2-Fc (далее так будут называться CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA на фиг. 1 и CK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcLALA на фиг. 2) с ^2βγ человека были получены с помощью прибора OctetRed 96 согласно инструкциям компании ForteBio. Биосенсоры AR2G заранее были регидратированы в течение часа в mQ. После активации биосенсеров препараты (IL15SA)2-Fc в концентрации 25 мкг/мл в ацетатном буфере рН4 были неспецифически (по NH2 группам) иммобилизованы на поверхности биосенсора. Затем сенсоры погружались в лунки с растворами Human CD122/IL-2RB Protein (Fc Tag) (1 и 0,5 мкг/мл) при 30°С в буфере PBS, содержащим 0,1% Твин-20 и 0,1% БСА. В этом растворе происходила ассоциация комплекса IL15SA и ^2βγ. После этого сенсоры погружались в буферный раствор для последующей стадии диссоциации. Анализ был произведен при 30°С с использованием PBS, содержащим 0,1% Твин-20 и 0,1% БСА в качестве рабочего буфера.
Полученные сенсограммы представленью в табл. 1 для CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA и для CK_IL15_Hc_IL15RaCH1FcLALA, которые были проанализированы с вычетом базового сигнала с помощью программы Octet Data Analysis (версия 8.0) согласно стандартной процедуре с использованием модели взаимодействия 1:1. Полученные константы аффинности приведены в табл. 1. Оба исследованных варианта проявили высокую аффинность и специфичность к ^2βγ человека.
Таблица 1. Константы аффинности (IL15SA)2-Fc иммуноцитокина при взаимодействии с IL2eY-Fc человека
Loading Sample ID | Cone. (nM) | Response | KD (M) | kon(l/Ms) | kdis{1/s) |
CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLA LA | 19.4 | 0.3774 | 2.47E-10 | 3.69E+05 | 9.11E-05 |
CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLA LA | 9. €9 | 0.3301 | 3.80E-10 | 3.02E+05 | 1.15E-04 |
CK_IL15_Hc_IL15 RaCH1FcLA LA | 19.4 | 0.325 | 2.13E-10 | 3.58E+O5 | 7.63E-O5 |
CK_IL15_Hc_IL15 RaCH1FcLA LA | 9.69 | 0.2832 | 2.12E-10 | 3.57E+O5 | 7.55E-O5 |
- 40 043937
Пример 3.
Кинетический анализ взаимодействия биспецифических IL15 суперагонистов с II ,2βγ рецептором человека и другим клеточным рецептором иммуных клеток.
Константы аффинности связывания IL15SA биспецифических иммуноцитокинов (далее так будут называться anti-PD1-Fab-CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcknobLALA и anti-PD-Ll-FabCK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcknobLALA) с IL2py и рецепторами PD-1 и PD-L1 человека были получены с помощью прибора OctetRed 96 согласно инструкциям компании ForteBio. Биосенсоры AR2G заранее были регидратированы в течение часа в mQ. После активации биосенсеров биспецифические в концентрации 25 мкг\мл в ацетатном буфере рН4 были неспецифически (по NH2-группам) иммобилизованы на поверхности биосенсора. Затем сенсоры погружались в лунки с растворами Human CD122/IL-2RB Protein (Fc Tag) или рецептора PD-1-Fc или PD-L1-Fc (1 и 0,5 мкг/мл) в буфере PBS, содержащим 0,1% Твин-20 и 0,1% БСА для ассоциации биспецифического суперагониста и исследуемого рецептора. После этого сенсоры погружались в буферный раствор для последующей стадии диссоциации.
Инструментальные данные проанализированы с вычетом базового сигнала с помощью программы Octet Data Analysis (версия 8.0) согласно стандартной процедуре с использованием модели взаимодействия 1:1.
Полученные константы аффинности приведены в табл. 2. Оба исследованных варианта проявили высокую аффинность и специфичность как к Π-2βγ человека, так и к парным рецепторам и проявляют отсутствие неспецифической активности к другому рецептору.
Таблица 2. Константы аффинности биспецифических IL15 суперагонистов антител при взаимодействии с IL2eY-Fc человека и второму рецептору
Loading Sample ID | PD1 | IL2Rb | PDL1 | |||
Response | KD (M) | Response | KD (M) | Respons e | KD (M) | |
Anti-PD-1 Fab- CK_IL15Ra_Hc _IL15CHIFcknobLAL A | 0.7606 | 3.713E-10 | 0.4504 | 1.25E-10 | 0 | 0 |
Anti-PD-Ll Fab - CK_IL15Ra_Hc _IL15CHIFcknobLAL A | 0 | 0 | 0.3251 | 2.39E-11 | 0.3034 | 2.33E-11 |
Anti-PD-1 piolgolimab | 0.9316 | 1.36E-10 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Anti-PDL-1 ECD-135 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.3133 | <1.OE-12 |
Пример 4.
Клеточный тест на определение пролиферационной активности IL15 суперагонистов на линии NK92.
Для теста использовали клеточную линию NK-92. Тест проводили в культуральном 96-луночном планшете. Суспензия содержала клетоки NK-92, исследуемое антитело в указанной на графике концентрации. Все компоненты суспензии готовили в среде RPMI-1640, содержащей эмбриональную бычью сыворотку и глутамин. После добавления всех компонентов планшеты инкубировали при 37°С, 5% CO2. Далее в лунки вносили краситель Alamar Blue. После инкубации измеряли интенсивность флуоресценции в лунках. Сравнительно исследовались препараты IL15SA (CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA), IL15SA/PD1 (Anti-PD-1 Fab-CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA) HIL15SA/PDL1 (Anti-PDL-1 FabCK_IL15Ra_Hc _IL15CH1FcLALA).
Результаты проверки специфической активности указанных выше иммуноцитокинов выявили высокую пролиферативную активность в отношении NK92 линии. Расчетные ЕС50 для всех кандидатов оказались идентичными, и уровень активации определяемый верхним плато также полностью совпал (фиг. 11). Нужно отметить, что валентность IL15SA части, и соответсвенно различная авидность, не оказала существенного влияния на данную активность.
Пример 5.
Клеточный тест на определение пролиферационной активности IL15 суперагонистов на линии природных киллеров.
Для теста использовали выделенные натуральные киллеры, выделенные из РВМС здоровых доноров, методом негативной селекции. Тест проводили в культуральном 96-луночном планшете. Суспензия содержала клетки натуральных киллеров, исследуемое антитело в указанной на графике концентрации. Все компоненты суспензии готовили в среде культивирования, содержащей аутологичную плазму человека. После добавления всех компонентов планшеты инкубировали при 37°С, 5% CO2. Далее в лунки вносили краситель Alamar Blue. После инкубации измеряли интенсивность флуоресценции в лунках. Сравнительно исследовалось влияние препаратов IL15SA (CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA), IL15SA/PD1 (Anti-PD-1 Fab-CK_IL15Ra_Hc _IL15CH1FcknobLALA) и интерлейкин-2 (IL2) (Ронлейкин НПО Биотех) человека на пролиферативную способность природных киллерных клеток.
- 41 043937
Результаты проверки специфической активности указанных выше иммуноцитокинов выявили высокую пролиферативную активность в отношении природных киллерных клеток (фиг. 12). Расчетные ЕС50 для всех кандидатов оказались идентичными в приделах погрешности и чуть слабее, чем IL2 цитокин. Кроме того, уровень активации, определяемый верхним плато, также полностью совпал. Нужно отметить, что валентность IL15SA части и соответственно различная авидность не оказала существенного влияния на данную активность.
Пример 6.
Клеточный тест на определение anti-PD1 антагонистической активности IL15 суперагонистов на репортерной линии.
Для теста использовали клеточную линию Jurkat NFAT-FLuc PD-1, созданную на основе клеточной линии Jurkat, стабильно экспрессирующую на поверхности PD-1 и содержащую ген, кодирующий люциферазу светляка, под контролем NFAT-промотора; а также клеточную линию Raji PDL1, созданную на основе клеточной линии Raji, стабильно экспрессирующую на поверхности PDL1. Сравнительно исследовалось влияние препаратов IL15SA (CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA), anti-PD1/IL15SA (Anti-PD-1 Fab-CK_IL15Ra_Hc _IL15CH1FcknobLALA) и anti-PD1 антагонист (prolgolimab) на активационную способность в репортерной клеточной системе.
Тест проводили в культуральном 96-луночном планшете. Суспензия в каждой лунке содержала клетки Jurkat NFAT-FLuc PD-1, клетки Raji PDL1, aCD3/aTAA1 в концентрации 1 нг/мл, исследуемое антитело в указанной на графике концентрации. После добавления всех компонентов планшеты инкубировали при 37°С, 5% СО2 и далее, с помощью набора для оценки люминесценции, измеряли интенсивность люциферы в лунках.
Результаты проверки специфической активности указанных выше иммуноцитокинов выявили на порядок более слабую величину ЕС50 спецактивности для anti-PD1/IL15SA в сравнении с терапевтически эффективным моноклональным anti-PD1 антителом prolgolimab (фиг. 13). Кроме того, уровень максимальной активности (верхнее плато) также на 30% снижен. Меньшая спецактивность anti-PD1/IL15SA, чем prolgolimab, может объясняться только моновалентным Fab связывающим PD1 в составе молекулы anti-PD1/IL15SA, чем классического антитела. Это же подтверждается и почти порядковой разностью в аффиности к PD-1 рецептору по данным в примере 3 (табл. 2) и указанной для prolgolimab значением. Нужно отметить, что антагонистическая активность IL15SA проявилась как фон, то есть практически отсутствовала.
Пример 7.
Клеточный тест на определение anti-PDL1 антагонистической активности IL15 суперагонистов на репортерной линии.
Для теста использовали клеточную линию Jurkat NFAT-FLuc PD-1, созданную на основе клеточной линии Jurkat, стабильно экспрессирующую на поверхности PD-1 и содержащую ген, кодирующий люциферазу светляка, под контролем NFAT-промотора; а также клеточную линию Raji PDL1, созданную на основе клеточной линии Raji, стабильно экспрессирующую на поверхности PDL1. Сравнительно исследовалось влияние препаратов IL15SA (CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA), anti-PDL1/IL15SA (Anti-PDL1 Fab-CK_IL15Ra_Hc _IL15CH1FcknobLALA) и anti-PDL1 антагонист (atezolizumab) на активационную способность в репортерной клеточной системе.
Тест проводили в культуральном 96-луночном планшете. Суспензия в каждой лунке содержала клетки Jurkat NFAT-FLuc PD-1, клетки Raji PDL1, aCD3/aTAAl в концентрации 1 нг/мл, исследуемое антитело в указанной на графике концентрации. После добавления всех компонентов планшеты инкубировали при 37°С, 5% СО2 и далее, с помощью набора для оценки люминесценции, измеряли интенсивность люциферы в лунках.
Результаты проверки специфической активности указанных выше иммуноцитокинов выявили в 30х более слабую величину ЕС50 спецактивности для anti-PD-L1/IL15SA в сравнении с терапевтически эффективным моноклональным anti-PD-L1 антителом atezolizumab (фиг. 14). Однако уровень максимальной активности (верхнее плато) был снижен лишь на 10%. Меньшая спецактивность anti-PD-L1/IL15SA, чем atezolizumab, может объясняться только моновалентным Fab связывающим PD-L1 в составе молекулы anti-PD-L1/IL15SA, чем классического антитела. При этом антагонистическая активность IL15SA не была значимо зафиксирована.
Пример 8.
Клеточный тест на определение влияния IL15 суперагонистов в присутствии антитела, специфичного против опухоль-ассоциированного антигена (ТАА), на антитело-зависимую клеточную цитотоксичность (ADCC) натуральных киллеров против ТАА-репортерной линии.
Для теста использовали натуральные киллеры, выделенные из РВМС здоровых доноров, методом негативной селекции. Тест проводили в культуральном 96-луночном планшете. Суспензия содержала клетки натуральных киллеров и клетки Raji, эффекторное антитело Ритуксимаб и исследуемое антитело в указанной на графике концентрации. Все компоненты суспензии готовили в среде культивирования, содержащей эмбриональную бычью сыворотку и глутамин. После добавления всех компонентов план- 42 043937 шеты инкубировали при 37°С, 5% CO2. Далее собирали культуральную жидкость и исследовали содержание лактатдегидрогеназы с использованием набора для определения ЛДГ. Сравнительно исследовалось влияние препаратов IL15SA (CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA), anti-PD1/IL15SA (Anti-PD-1 FabCK_IL15Ra_Hc _IL15CH1FcknobLALA) на ADCC способность rituximab в репортерной клеточной системе.
Результаты проверки специфической активности указанных выше иммуноцитокинов выявили высокую активность в отношении усиления ADCC способности rituximab против ТАА-репортерной линии (фиг. 15 и фиг. 16). Эффективность rituximab-зависимого ADCC, определяемая процентом лизированных клеток Raji, имеющих оверэкспрессированный CD20 рецептор на поверхности, выросла на 30% в присутствии каждого исследованного кандидата в сравнении с только наличием rituximab. По-видимому, данный эффект объясняется пролиферацией активных природных киллеров под действием IL15SA и antiPD1/IL15SA в тесте, согласно приведенным результатам в примерах 4 и 5. Расчетные ЕС50 для всех кандидатов оказались идентичными в приделах погрешности. Нужно отметить, что валентность IL15SA части, и соответственно различная авидность, не оказала существенного влияния на данную активность, что также подтверждается примерами 4 и 5.
Пример 9.
Клеточный тест на определение цитотоксичности IL15 суперагонистов на клетках PBMCs из цельной крови здоровых доноров.
Клетки PBMCs были изолированы из цельной крови здоровых доноров путём центрифугирования в градиенте плотности фиколла.
Тест проводили в культуральном 96-луночном планшете. Суспензия в каждой лунке содержала свежие выделенные PBMCs и указанное на графике антитело в концентрации 0,1 мкг/мл. После смешивание PBMCs и антител планшет инкубировали в течение 16 ч при 37°С, 5% СО2. Далее оценивали в суспензиях долю CD56+, CD19+, CD3+, CD4+ и CD8+ субпопуляций PBMCs с помощью прямого окрашивания суспензий флуоресцентно-меченными антителами против соответствующих CD и последующего анализа клеток на проточном цитофлуориметре. Для CD56+, CD 19+, CD3+ клеток на графиках приведена доля от всех клеток анализируемой суспензии, для CD4+, CD8+ - доля от CD3+ клеток. Сравнительно исследовалось цитотоксическое влияние препаратов IL15SA (CK_IL15Ra_Hc_IL15CH1FcLALA), antiPD1/IL15SA (Anti-PD-1 Fab-CK_IL15Ra_Hc _IL15CH1FcknobLALA), anti-PD1 (prolgolimab), смеси antiPD1 (prolgolimab) + IL15SA, anti-CD20 GA101 антитело на клетки PBMCs человека.
Результаты, представленные на фиг. 17-21, свидетельствуют об отсутствии значимого цитотоксического эффекта кандидатов, то есть не более 10% уменьшения количества иммунореактивных клеток в сравнении с негативным контролем АВ (те отсутствием каких-либо экзогенных антител). При этом контрольное антитело anti-CD20 показало закономерно полную деплецию популяции CD20+ В клеток. Таким образом, все рассматриваемые кандидаты не обладают значимой неспецифической цитотоксичностью in vitro на клетках крови человека.
Пример 10.
Определение агрегационной стабильности IL15 суперагониста в условиях термостресса.
Препарат IL15 суперагонист с концентрацией 9 мг/мл в ФСБ буфере прогревался в течение 12 ч при температуре 50°С. Определение агрегации после термостресса проводили методом гель-фильтрационной высокоэффективной хроматографии. Хроматографию проводили на системе ВЭЖХ (Agilent) 1100 на колонке Tosoh TSK-Gel G3000SWXL, 7.8 ммх30 см, кат. № 08541 с предколонкой Tosoh TSKgel Guard SWXL, 6.0 ммх4.0 см, с диаметром частиц 7 мкм, кат. № 08543. Элюирование проводилось в изократическом режиме подвижной фазой: 50 мМ NаФб, 0,3 М NaCl, pH 7.0 на скорости потока 0,5 мл/мин. Детектирование проводилось на длинах волн 214 и 280 нм. Образцы антител были разведены буфером ФСБ, рН 7.5, до концентрации ~1 мг/мл. Объем вводимой пробы - 10 мкл. Предварительно была хроматографирована калибровочная смесь Gel filtration standard (от Bio-Rad), кат. № 151-1901. На фиг. 22 представлена хроматограмма, на которой IL15 суперагонист демонстрирует высокую гомогенность (содержание агрегатов в растворе составила не более 5%).
Пример 11.
Оценка противоопухолевой активности препаратов IL15 суперагонистов на сингенной модели меланомы B16F10.
Для оценки эффективности использовали иммунокомпетентных мышей линии C57BL/6, которым прививали опухолевую линию B16F10. Каждому животному в группе вводили подкожно в правый бок 1,5x105 опухолевых клеток. На 7 день после инокуляции клеток (1 сутки эксперимента) животных распределяли по группам, как представлено в табл. 3. Оценку эффективности проводили с использованием одной дозы препаратов BCD-225, IL15SA/a-mPD-1- биспецифического моноклонального антитела, содержащего IL-15SA и Fab фрагмент к мышиному PD-1, производное мышиного антитела RMP1-14. Последовательность вариабельных доменов антитела RMP1-14 была любезно предоставлена Hideo Yagita, PhD, Juntendo University School of Medicine. Гены и препараты антител RMP1-14 вариабельные домены были синтезированы согласно примеру 1. Кроме того, был синтезирован препарат сравнения ALT-803
- 43 043937
[Han KP et al., Cytokine. 2011 Dec;56(3):804-10.] (положительный контроль) и плацебо (отрицательный контроль). Также была оценена противоопухолевая активность препаратов в комбинации с антителом к мышиному PD-1 (a-mPD-1).
Таблица 3. Распределение животных по группам в эксперименте по определению противоопухолевой активности препаратов IL15 суперагонистов
Группа | Количество животных | Доза |
BCD-325 (IL15SA) | 9 | 0,2 мг/кг |
IL15ЗА/a-mPD-1 | 9 | 0,2 мг/кг |
ALT-803 | 9 | 0,2 мг/кг |
anti-mPD-1 | 10 | 10 мг/кг |
BCD-225 (IL15SA) + antimPD-1 | 9 | 0,2 мг/кг + 10 мт/кг |
IL15SA/a-mPD-1 + antimPD-1 | 9 | 0,2 мг/кг + 10 мт/кг |
ALT-8 03 4- anti-mPD-1 | 9 | 0,2 мг/кг + 10 мт/кг |
Отрицательный контроль | 10 | - |
Препараты BCD-225 (IL15SA), IL15SA/a-mPD-1 и ALT-803 вводили внутрибрюшинно в объеме 0,2 мл на 1, 4, 8 и 11 сутки эксперимента. Препарат anti-mPD-1 вводили внутрибрюшинно в объеме 0,2 мл на 2, 5, 9 и 12 сутки эксперимента. Группе отрицательного контроля вводили натрий-ацетатный буфер на 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11 и 12 сутки эксперимента в объеме 0,2 мл (фиг. 23).
В течение эксперимента измеряли массу тела мышей и линейные размеры опухоли. Для вычисления объема опухоли использовали формулу
V=LxWxWxn/6.
В качестве критерия эффективности исследуемого препарата использовали показатель торможения роста опухоли (ТРО), который рассчитывается с учетом медианного значения объема опухоли в группе отрицательного контроля (Vc) и группе препарата (Vt) по формуле
Z Л К ТРО (%) = * 100
Результаты эксперимента показаны на фиг. 24 и 25. Приводятся данные за 11 сутки эксперимента в связи с гибелью животных от опухолевой нагрузки практически во всех экспериментальных группах и невозможностью достоверно оценить противоопухолевую активность препаратов на 15 сутки.
По результатам исследования препарат BCD-225 и препарат сравнения ALT-803 показали сопоставимую противоопухолевую активность: ТРО в группе BCD-225 составил 52%, в группе препарата ALT803 - 53%. Наблюдалась тенденция к увеличению значения показателя ТРО в группе биспецифического антитела IL15SA/anti-mPD-1 по сравнению со значениями ТРО в группах BCD-225 и ALT-803. ТРО в группе IL15SA/anti-mPD-1 составило 58% на 11 сутки эксперимента.
Показатели ТРО в группах комбинации препаратов BCD-225 + anti-mPD-1 и ALT-803 + anti-mPD-1 были равны 72% на 11 сутки эксперимента, в группе комбинации IL15SA/a-mPD-1H anti-mPD-1 - 69%. Полученные значения ТРО свидетельствуют о более выраженной противоопухолевой активности комбинации исследуемых препаратов с анти-mPD-1 по сравнению с активностью данных препаратов в монотерапии.
Пример 12.
Оценка и анализ сравнительной смертности мышей препаратов IL15 суперагонистов и ALT803 на сингенной модели меланомы B16F10.
Для сравнительной оценки смертности мышей в результате применения препаратов IL15 суперагонистов использовали модель и серию животных, описанных в примере 11. Оценка выживаемости проводилась путем подсчета павших или эвтаназированных в агонизирующем состоянии животных.
Результаты представлены в табл. 4. Как следует из полученных данных, показатели смертности в группах препаратов IL15SA/a-mPD-1 и IL15SA/a-mPD-1 + anti-mPD-1 в среднем меньше по количеству мышей и времени выживаемости, чем для IL15SA (BCD225), IL15SA + anti-mPD-1, ALT-803, ALT-803 + anti-mPD-1. Полученные значения смертности свидетельствуют о вероятно менее выраженной токсичности IL15SA/a-mPD-1 биспецифического иммуноцитокина в сравнении с моноспецифическими бивалентными IL15SA и ALT-803. Наличие или отсутствие антитела anti-PD1 не оказывало статистически значимый эффект на смертность. Кроме того, анализ органов погибшей мыши из серии IL15SA и ALT-803, выявил наличие в печени гидропической дистрофии с некрозом гепатоцитов, и сдавленность синусоидов. Лимфогистиоцитарные инфильтраты в перинхиме и скопление лимфоцитов в синусоидах. Эти показатели согласуются с ранее описанными в литературе данными, что суперагонисты на основе IL15 способны вызывать повреждение печени у мышей.
-
Claims (66)
1) вариабельный домен легкой цепи включает аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 18;
1) вариабельный домен легкой цепи включает LCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые соответственно представлены аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15 и SEQ ID NO: 16;
1) IL-15Ra, который связан с:
а) константным доменом легкой цепи антитела; или
б) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи,
1) IL-15Ra, который связан с:
а) константным доменом легкой цепи антитела; или
б) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи,
1. Иммуноцитокин для стимулирования активации и/или пролиферации IL-15Rбета/гаммаположительных клеток, включающий гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra, содержащий:
1
IL15SA (BCD-225)
2
2
10
14
4
2) вариабельный домен тяжелой цепи включает аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 17.
2) вариабельный домен тяжелой цепи включает HCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые соответственно представлены аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12 и SEQ ID NO: 13.
2) IL-15, который связан с:
а) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи; или
б) константным доменом легкой цепи антитела, при этом первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса имеют или не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик и, где, если IL-15 или IL-15Ra связан с константным доменом легкой цепи антитела, то другая часть гетеродимерного белкового комплекса, выбранная из IL-15Ra или IL-15, связана с константными доменами тяжелой цепи антитела.
2. Иммуноцитокин по п.1, где константный домен легкой цепи антитела выбирают из CK (константный домен каппа легкой цепи) или CL (константный домен лямбда легкой цепи).
2) IL-15, который связан с:
а) константными доменами тяжелой цепи антитела, включающими первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи; или
б) константным доменом легкой цепи антитела, при этом первый константный домен тяжелой цепи антитела и константный домен легкой цепи антитела в составе гетеродимерного комплекса имеют или не имеют ковалентную ассоциацию через природный S-S мостик, и где, если IL-15 или IL-15Ra связан с константным доменом легкой цепи антитела, то другая часть гетеродимерного белкового комплекса, выбранная из IL-15Ra или IL-15, связана с константными доменами тяжелой цепи антитела.
2
IL15SA/a-mPD-1
2
15
2
3. Иммуноцитокин по п.1, где IL-15Ra имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 9, или любой известный вариант IL-15Ra, содержащий мутации, с аналогичной биологической активностью.
3
ALT-303
2
7
2
4. Иммуноцитокин по п.1, где IL-15 имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 10, или любой известный вариант IL-15, содержащий мутации, с аналогичной биологической активностью.
4
anti-mPD-1
3
14
3
5. Иммуноцитокин по п.1, где IL-15Ra связан с константным доменом легкой цепи антитела.
5
IL15SA (BCD-225) + anti-mPD-1
1
14
1
6. Иммуноцитокин по п.5, где IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 19.
6
TLlbSA/a-mPD-1 + anti-mPD-1
1
1
11
14
2
7. Иммуноцитокин по п.1, где IL-15 связан с константным доменом легкой цепи антитела.
7
ALT-3 03 4- antimPD-1
3
7
3
Θ
Плацебо
1
14
1
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
8. Иммуноцитокин по п.7, где IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 21.
9. Иммуноцитокин по п.1, где первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fcфрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, соединены через шарнир.
10. Иммуноцитокин по п.1, где IL-15 или IL-15Ra связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, идущими в следующем порядке СН1-шарнир-СН2-CH3.
11. Иммуноцитокин по п.10, где IL-15Ra связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
12. Иммуноцитокин по п.11, где IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 22.
13. Иммуноцитокин по п.10, где IL-15 связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
14. Иммуноцитокин по п.13, где IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 20.
15. Иммуноцитокин по п.1, где
IL- 15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 19, а
IL- 15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 20.
16. Иммуноцитокин по п.1, где
IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 22, а
IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 21.
17. Иммуноцитокин по п.1, имеющий мутации в мономере Fc-фрагмента, приводящие к отсутствию ADCC, CDC и/или ADCP свойств у указанного иммуноцитокина.
18. Иммуноцитокин по п.1, где Fc-фрагмент относится к IgG.
19. Иммуноцитокин по п.18, где изотип Fc-фрагмента выбирают из группы: IgG1, IgG2 или IgG4 человека.
20. Иммуноцитокин по любому из вышеуказанных пп.1-19, включающий два вышеуказанных гетеродимерных белковых комплекса на основе IL-15 и IL-15Ra.
21. Иммуноцитокин для стимулирования активации и/или пролиферации IL-15Rбета/гаммаположительных клеток, включающий гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra и иммуномодулирующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически ингибируют PD-1 путь, где гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra содержит:
22. Иммуноцитокин по п.21, где константный домен легкой цепи антитела выбирают из CK (константный домен каппа легкой цепи) или CL (константный домен лямбда легкой цепи).
23. Иммуноцитокин по п.21, где IL-15Ra имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 9, или любой известный вариант IL-15Ra, содержащий мутации, с аналогичной биологической активностью.
24. Иммуноцитокин по п.21, где IL-15 имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 10, или любой известный вариант IL-15, содержащий мутации, с аналогичной биологической активностью.
25. Иммуноцитокин по п.21, где IL-15Ra связан с константным доменом легкой цепи антитела.
26. Иммуноцитокин по п.25, где IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 19.
27. Иммуноцитокин по п.21, где IL-15 связан с константным доменом легкой цепи антитела.
28. Иммуноцитокин по п.27, где IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 21.
29. Иммуноцитокин по п.21, где первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fcфрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи, соединены через шарнир.
30. Иммуноцитокин по п.21, где IL-15 или IL-15Ra связан с константными доменами тяжелой цепи антитела, идущими в следующем порядке СН1-шарнир-СН2-CH3.
31. Иммуноцитокин по п.30, где IL-15Ra связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
32. Иммуноцитокин по п.31, где IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 6 или SEQ ID NO: 24.
33. Иммуноцитокин по п.30, где IL-15 связан с константными доменами тяжелой цепи антитела.
34. Иммуноцитокин по п.33, где IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 23.
35. Иммуноцитокин по п.21, где иммуномодулирующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически ингибируют PD-1 путь, представляет собой антитело, которые специфически связываются с PD-1.
36. Иммуноцитокин по п.35, где иммуномодулирующее антитело включает:
а) легкую цепь, содержащую вариабельный домен легкой цепи и константный домен легкой цепи;
б) тяжелую цепь, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи и константные домены тяжелой цепи антитела, включающие первый (СН1) константный домен тяжелой цепи и мономер Fc-фрагмента, содержащий второй (СН2) и третий (CH3) константные домены тяжелой цепи.
37. Иммуноцитокин по п.36, где вариабельный домен легкой цепи включает LCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые соответственно представлены аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15 и SEQ ID NO: 16.
38. Иммуноцитокин по п.37, где вариабельный домен легкой цепи включает аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 18.
39. Иммуноцитокин по п.36, где вариабельный домен тяжелой цепи включает HCDR 1, 2 и 3 (гипервариабельные участки 1, 2 и 3), которые соответственно представлены аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12 и SEQ ID NO: 13.
40. Иммуноцитокин по п.39, где вариабельный домен тяжелой цепи включает аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 17.
41. Иммуноцитокин по п.36, где:
42. Иммуноцитокин по п.41, где:
43. Иммуноцитокин по п.36, где иммуномодулирующее антитело включает легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 8.
44. Иммуноцитокин по п.36, где иммуномодулирующее антитело включает тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 7.
45. Иммуноцитокин по п.36, где иммуномодулирующее антитело включает тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 7;
легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 8.
- 45 043937
46. Иммуноцитокин по п.21, где иммуномодулирующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически ингибируют PD-1 путь, представляет собой антитело, которое специфически связывается с PD-L1.
- 46 043937
- 47 043937
б) иммуномодулирующее антитело включает тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID
NO: 7;
легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 8.
47. Иммуноцитокин по п.21, где:
а) гетеродимерный белковый комплекс на основе IL-15 и IL-15Ra содержит
IL-15Ra, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 19, а
IL-15, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 23;
б) иммуномодулирующее антитело включает тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 7;
легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 8.
48. Иммуноцитокин по п.21, где:
а) IL-15Ra, связанный с константными доменами тяжелой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 6 или SEQ ID NO: 24, а
IL-15, связанный с константным доменом легкой цепи антитела, имеет аминокислотную последовательность, которая представлена SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 21;
49. Иммуноцитокин по любому из пп.21 или 36, имеющий мутации в константных доменах антитела, обуславливающие гетеродимеризацию двух разных частей, одна из которых включает ковалентно или нековаленотно ассоциированные IL-15Ra, связанный с константными доменами антитела, и IL-15, связанный с константным доменом антитела, а другая включает ковалентно или нековаленотно ассоциированные легкую и тяжелую цепи антитела.
50. Иммуноцитокин по любому из пп.21 или 36, где первый мономер Fc и второй мономер Fc выбраны из группы: первый мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Knob, а второй мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Hole, или когда второй мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Knob, а первый мономер Fc представляет собой Fc, модифицированный с образованием Hole.
51. Иммуноцитокин по п.50, где:
а) первый мономер Fc имеет аминокислотные замены S354C/T366W, а второй мономер Fc имеет аминокислотные замены Y349C/T366S/L368A/Y407V; или
б) первый мономер Fc имеет аминокислотные замены Y349C/T366S/L368A/Y407, а второй мономер Fc имеет аминокислотные замены S354C/T366W.
52. Иммуноцитокин по любому из пп.21 или 36, где Fc-фрагмент относится к IgG.
53. Иммуноцитокин по п.52, где изотип Fc-фрагмента выбирают из группы: IgG1, IgG2 или IgG4 человека.
54. Иммуноцитокин по любому из пп.21 или 36, имеющий мутации в мономере Fc-фрагмента, приводящие к отсутствию ADCC, CDC и/или ADCP свойств у указанного иммуноцитокина.
55. Иммуноцитокин по любому из пп.21-54 для лечения онкологического или аутоиммунного заболевания.
56. Выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует иммуноцитокин по любому из пп.1-54.
57. Нуклеиновая кислота по п.56, где нуклеиновая кислота представляет собой ДНК.
58. Экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по любому из пп.56, 57.
59. Способ получения клетки-хозяина для получения иммуноцитокина по любому из пп.1-54, включающий трансформирование клетки вектором по п.58.
60. Клетка-хозяин для получения иммуноцитокина по любому из пп.1-54, содержащая нуклеиновую кислоту по любому из пп.56, 57.
61. Способ получения препарата, содержащего иммуноцитокин по любому из пп.1-54, заключающийся в культивировании клетки-хозяина по п.60 в культуральной среде в условиях, достаточных для получения указанного иммуноцитокина, при необходимости, с последующим выделением и очисткой полученного иммуноцитокина.
62. Фармацевтическая композиция для стимулирования активации и/или пролиферации IL15Rбета/гамма-положительных клеток, содержащая иммуноцитокин по любому из пп.1-54 в терапевтически эффективном количестве, в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами.
63. Фармацевтическая композиция по п.62 для лечения онкологического или аутоиммунного заболевания.
64. Фармацевтическая композиция по п.63, где онкологическое заболевание выбирают из группы: ПРГШ (плоскоклеточный рак головы и шеи), рак шейки матки, рак без выявленного первоисточника, глиобластома, рак пищевода, рак мочевого пузыря, ТНРМЖ (трижды негативный рак молочной железы), КРР (колоректальный рак), гепатоцеллюлярная карцинома, меланома, НМРЛ (немелкоклеточный рак легкого), рак почки, рак яичника, MSI КРР (колоректальный рак с высокой микросателлитной нестабильностью), лейкоз (острый или миелобластный), лимфома, множественная миелома, меланома, рак молочной железы, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, саркома, гепатоцеллюлярная карцинома, глиобластома, лимфома Ходжкина, Т- и В-клеточном острый лимфобластный лейкоз, мелкоклеточный рак лёгкого, острый миелобластный лейкоз, рефрактерная В-клеточная неходжкинская лимфома, фолликулярная лимфома, В-клеточная лимфома маргинальной зоны, крупноклеточная В-клеточной диффузная лимфома, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак поджелудочной железы, рак яичника, острый миелобластный лейкоз и миелодиспластический синдром высокого риска.
65. Способ лечения онкологического заболевания, включающий введение субъекту иммуно цитокина по любому из пп.1-54 или фармацевтической композиции по п.62, нуждающемуся в таком лечении, в терапевтически эффективном количестве.
66. Способ лечения по п.65, где онкологическое заболевание выбрано из группы: ПРГШ (плоскоклеточный рак головы и шеи), рак шейки матки, рак без выявленного первоисточника, глиобластома, рак пищевода, рак мочевого пузыря, ТНРМЖ (трижды негативный рак молочной железы), КРР (колоректальный рак), гепатоцеллюлярная карцинома, меланома, НМРЛ (немелкоклеточный рак легкого), рак
-
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019129569 | 2019-09-19 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA043937B1 true EA043937B1 (ru) | 2023-07-07 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11840567B2 (en) | Bispecific antibodies with specific binding to CD47 and PD-L1 | |
EP3325512B1 (en) | Multivalent and multispecific gitr-binding fusion proteins | |
RU2753282C2 (ru) | ИММУНОЦИТОКИН, ВКЛЮЧАЮЩИЙ ГЕТЕРОДИМЕРНЫЙ БЕЛКОВЫЙ КОМПЛЕКС НА ОСНОВЕ IL-15/IL-15Rα, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ | |
JP2019513817A (ja) | Tigitに対する抗体 | |
US11236167B2 (en) | Monoclonal antibody to PD-L1 | |
US20220049007A1 (en) | Antibody molecules that bind pd-l1 and cd137 | |
RU2734432C1 (ru) | Моноклональное антитело, которое специфически связывается с GITR | |
CN113939536A (zh) | Tigit和pd-1/tigit-结合分子 | |
CN110072553B (zh) | 在抗pd-l1/pd1治疗失败之后抗csf-1r抗体与抗pd-l1抗体组合对肿瘤的治疗 | |
KR20230171465A (ko) | 항cldn4-항cd137 이중특이성 항체 | |
EA043937B1 (ru) | ИММУНОЦИТОКИН, ВКЛЮЧАЮЩИЙ ГЕТЕРОДИМЕРНЫЙ БЕЛКОВЫЙ КОМПЛЕКС НА ОСНОВЕ IL-15 И IL-15Rα, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ | |
RU2779652C2 (ru) | АНТИТЕЛА, СПЕЦИФИЧНЫЕ К CD47 и PD-L1 | |
RU2751249C1 (ru) | Моноклональное антитело, которое специфически связывается с csf-1r | |
KR102679554B1 (ko) | Pd-l1에 대한 단일클론 항체 | |
CA3201656A1 (en) | Immunocytokine for activating human il-10ra receptor and use thereof | |
WO2022271053A1 (en) | Isolated bispecific antibody that specifically binds to cd47 and pd-l1 | |
EA044786B1 (ru) | Моноклональное антитело, которое специфически связывается с gitr | |
EA041915B1 (ru) | Моноклональное антитело к pd-l1 |