EA037513B1 - Cyclic dinucleotide compounds and methods of use thereof - Google Patents

Abstract

Disclosed are cyclic dinucleotide cGAMP analogs of formula Ic, methods of preparing the compounds, pharmaceutical compositions comprising the compounds, and the use of the compounds and the compositions in medical therapy.

Description

Перекрестная ссылка на родственные заявкиCross-reference to related claims

Заявка на данное изобретение является продолжением международной заявки № PCT/US17/023093, поданной 17 марта 2017 г, которая испрашивает приоритет предварительной заявки США № 62/310364, поданной 18 марта 2016 г., предварительной заявки США № 62/355382, поданной 28 июня 2016 г., и предварительной заявки США № 62/396140, поданной 17 сентября 2016 г., полное содержание каждой из которых включено в настоящее изобретение с помощью ссылки.The application for this invention is a continuation of International Application No. PCT / US17 / 023093, filed March 17, 2017, which claims the priority of US Provisional Application No. 62/310364, filed March 18, 2016, US Provisional Application No. 62/355382, filed June 28 2016, and US Provisional Application No. 62/396140, filed September 17, 2016, the entire contents of each of which are incorporated herein by reference.

Область техникиTechnology area

Настоящее изобретение относится к новым циклическим динуклеотидным цГАМФ аналогам, их фармацевтическим композициям, способам их получения и их применению в медицинской терапии. В частности, соединения настоящего изобретения усиливают иммунную реакцию тела активацией STING (стимулятор генов интерферонов) и являются пригодными для иммунотерапии рака, инфекционных заболеваний и иммунных расстройств. Соединения являются также пригодными в качестве вспомогательных лекарственных веществ для разработки вакцин против рака и инфекционных заболеваний.The present invention relates to new cyclic dinucleotide cGAMP analogs, their pharmaceutical compositions, methods for their preparation and their use in medical therapy. In particular, the compounds of the present invention enhance the body's immune response by STING (interferon gene stimulant) activation and are useful in immunotherapy for cancer, infectious diseases and immune disorders. The compounds are also useful as drug auxiliaries for the development of vaccines against cancer and infectious diseases.

Уровень техникиState of the art

Цитозольная ДНК активирует интерфероны I типа и другие цитокины, которые являются важными для иммунной защиты от микробной инфекции и злокачественных клеток, но которые могут приводить в результате к аутоиммунной реакции. Данный ДНК сигнальный путь требует адаптерного белка STING (стимулятор генов интерферонов) и фактора транскрипции IRF3, но механизм обнаружения ДНК оставался до последнего времени неясным. WO 2014/099824 университета Техаса описывает, что цитозольные экстракты млекопитающих синтезировали циклический ГМФ-АМФ (цГ АМФ) in vitro из АТФ и ГТФ в присутствии ДНК, но не РНК. Трансфекция ДНК или заражение вирусной ДНК клеток млекопитающего также запускает синтез цГАМФ. цГАМФ, связанный с STING, приводит к активации IRF3 и активации интерферонов I типа, включая интерферон-β (IFN-β). Таким образом, цГАМФ представляет собой первый циклический динуклеотид у животных, и он функционирует как эндогенный вторичный мессенджер, который запускает синтез интерферонов в ответ на цитозольную ДНК.Cytosolic DNA activates type I interferons and other cytokines that are important for immune defense against microbial infection and malignant cells, but which can result in an autoimmune response. This DNA signaling pathway requires the adapter protein STING (stimulator of interferon genes) and the transcription factor IRF3, but the mechanism of DNA detection has remained unclear until recently. University of Texas WO 2014/099824 describes that mammalian cytosolic extracts synthesized cyclic GMP-AMP (cG AMP) in vitro from ATP and GTP in the presence of DNA but not RNA. DNA transfection or viral DNA infection of mammalian cells also triggers the synthesis of cGAMP. cGAMP associated with STING leads to the activation of IRF3 and the activation of type I interferons, including interferon-β (IFN-β). Thus, cGAMP is the first cyclic dinucleotide in animals, and it functions as an endogenous secondary messenger that triggers the synthesis of interferons in response to cytosolic DNA.

Посредством биохимического фракционирования и количественной масс-спектрометрии, изобретатели WO 2014/099824 также обнаружили цГАМФ синтазу (цГАС), которая принадлежит к семейству нуклеотидилтрансфераз. Сверхэкспрессия цГАС активировала транскрипционный фактор IRF3 и активировала IFN зависимым от STING способом. Нокаут цГАС ингибировал активацию IRF3 и стимулирование IFN трансфекцией ДНК или заражением вирусной ДНК. цГАС связывалась с ДНК в цитоплазме и катализировали синтез цГАМФ. Данные результаты показывают, что цГАС представляет собой цитозольный ДНК сенсор, который активирует интерфероны синтезом вторичного мессенджера цГАМФ. Изобретатели WO 2014/099824 также определили, что вторичный мессенджер цГАМФ, который они выделили и получили, содержит две фосфодиэфирных связи, одна между 2'-ОН ГМФ и 5'-фосфатом АМФ и вторая между 3'-ОН АМФ и 5'-фосфатом ГМФ; данную молекулу называют 2'3'-цГАМФ.Through biochemical fractionation and quantitative mass spectrometry, the inventors of WO 2014/099824 also discovered cGAMP synthase (cGAS), which belongs to the family of nucleotidyl transferases. Overexpression of cGAS activated the transcription factor IRF3 and activated IFN in a STING-dependent manner. CGAS knockout inhibited IRF3 activation and IFN stimulation by DNA transfection or viral DNA infection. cGAS bound to DNA in the cytoplasm and catalyzed the synthesis of cGAMP. These results indicate that cGAS is a cytosolic DNA sensor that activates interferons by synthesizing the secondary messenger cGAMP. The inventors of WO 2014/099824 also determined that the cGAMP secondary messenger they isolated and obtained contains two phosphodiester bonds, one between 2'-OH GMP and 5'-phosphate AMP and the other between 3'-OH AMP and 5'-phosphate GMF; this molecule is called 2'3'-cGAMP.

С тех пор в данной области было опубликовано несколько дополнительных патентных заявок:Since then, several additional patent applications have been published in the field:

US 20140205653 и US 20140341976 Aduro Biotech описывают циклические динуклеотидные (ЦДН) соединения, которые активируют и ингибируют STING соответственно. В частности, ЦДН настоящего изобретения обеспечивают в виде композиции, содержащей один или более циклических пуриновых динуклеотидов, которые активируют или ингибируют STING-зависимую активацию TBK1 и возникающий в результате синтез интерферона I типа.US 20140205653 and US 20140341976 Aduro Biotech describe cyclic dinucleotide (CDN) compounds that activate and inhibit STING, respectively. In particular, the CDN of the present invention is provided as a composition comprising one or more cyclic purine dinucleotides that activate or inhibit STING-dependent activation of TBK1 and the resulting synthesis of Type I interferon.

WO 2015/077354 А1 университета Техаса описывает способы и композиции для лечения рака внутриопухолевым введением агониста стимулятора генов интерферонов (STING). В некоторых вариантах осуществления обеспечивают композиции и способы, относящиеся к способам лечения рака у субъекта, включающим введение субъекту эффективного количества агониста стимулятора генов интерферонов (STING), где агонист STING вводят внутриопухолево.WO 2015/077354 A1 of the University of Texas describes methods and compositions for the treatment of cancer by intratumoral administration of an interferon gene stimulator agonist (STING). In some embodiments, compositions and methods related to methods of treating cancer in a subject are provided, comprising administering to the subject an effective amount of an interferon gene stimulator (STING) agonist, wherein the STING agonist is administered intratumorally.

WO 2015/161762 Фуданьского университета описывают применение циклического динуклеотида цГАМФ для получения противоопухолевых лекарственных средств, где опухоль представляет собой рак желудка, рак легкого, рак толстой кишки, рак печени, рак простаты или рак поджелудочной железы. Было показано, что цГАМФ ингибирует рост линий опухолевых клеток человека у мышей с нарушенным иммунитетом.WO 2015/161762 of Fudan University describes the use of cyclic dinucleotide cGAMP for the preparation of anticancer drugs, where the tumor is stomach cancer, lung cancer, colon cancer, liver cancer, prostate cancer or pancreatic cancer. It has been shown that cGAMP inhibits the growth of human tumor cell lines in immunocompromised mice.

WO 2015/185565 GlaxoSmithKline описывает класс циклических динуклеотидных соединений или их фармацевтически приемлемую соль и таутомеры, композиции, комбинации и лекарственные средства, содержащие указанные соединения, и способы их получения. Настоящее изобретение также относится к применению указанных соединений, комбинаций, композиций и лекарственных средств в лечении заболеваний и расстройств, при которых модулирование STING является полезным, например воспалении, аллергических и аутоиммунных заболеваниях, инфекционных заболеваниях, раке и в качестве вспомогательных веществ вакцин.WO 2015/185565 GlaxoSmithKline describes a class of cyclic dinucleotide compounds or their pharmaceutically acceptable salt and tautomers, compositions, combinations and medicaments containing said compounds, and methods for their preparation. The present invention also relates to the use of said compounds, combinations, compositions and medicaments in the treatment of diseases and disorders in which STING modulation is beneficial, for example inflammation, allergic and autoimmune diseases, infectious diseases, cancer and as adjuvants in vaccines.

WO 2014/179335 мемориального онкологического центра им. Слоуна-Кеттеринга описывает композиции, способы, наборы и анализы, относящиеся к применению и/или эксплуатации изомеров цГАМФ, а также структуре фермента цГАС.WO 2014/179335 Memorial Cancer Center. Sloan-Kettering describes compositions, methods, kits and assays related to the use and / or exploitation of cGAMP isomers and the structure of the cGAS enzyme.

Все еще существует необходимость в обнаружении и разработке новых циклических динуклеотид- 1 037513 ных цГАМФ аналогов для применения в медицинской терапии. В частности, все еще необходимы цГАМФ аналоги с большей активностью, стабильностью и специфичностью, чем эндогенный цГАМФ.There is still a need to discover and develop new cyclic dinucleotide-1 037513 cGAMP analogs for use in medical therapy. In particular, cGAMP analogs with greater activity, stability and specificity than endogenous cGAMP are still needed.

цГАМФ аналоги с превосходной безопасностью и эффективностью в животных моделях человеческих заболеваний, включая рак и инфекционные заболевания, еще предстоит разработать.cGAMP analogs with superior safety and efficacy in animal models of human diseases, including cancer and infectious diseases, have yet to be developed.

Сущность настоящего изобретенияThe essence of the present invention

Формула I включает формулу Ic.Formula I includes Formula Ic.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы IcIn one aspect, the present invention relates to a compound of formula Ic

где Z¹² и Z¹⁵ представляют собой N;where Z ¹² and Z ¹⁵ represent N;

Z¹³ и Z¹⁶ представляют собой СН;Z ¹³ and Z ¹⁶ are CH;

Z¹⁴ и Z¹⁷ независимо представляют собой СН или N;Z ¹⁴ and Z ¹⁷ independently represent CH or N;

R³ представляет собой н-пропил или 2,2,2-триФторэтил-О-;R ³ is n-propyl or 2,2,2-triFluoroethyl-O-;

R⁴ представляет собой гидроксил;R ⁴ is hydroxyl;

R⁹ и R¹⁰ независимо представляют собой гидроксил, тиол или борано (-ВН₃ ^-), или его фармацевтически приемлемой соли.R ⁹ and R ¹⁰ independently represent hydroxyl, thiol or borano (-BH ₃ ^- ), or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

В другом варианте осуществления соединение представляет собой:In another embodiment, the connection is:

В другом варианте осуществления соединение представляет собой:In another embodiment, the connection is:

В другом варианте осуществления соединение представляет собой:In another embodiment, the connection is:

- 2 037513- 2 037513

В другом варианте осуществления соединение представляет собой:In another embodiment, the connection is:

В другом варианте осуществления соединение представляет собой:In another embodiment, the connection is:

В другом варианте осуществления соединение представляет собой:In another embodiment, the connection is:

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы IcIn one embodiment, the present invention relates to a compound of formula Ic

где Z¹² и Z¹⁵ представляют собой N;where Z ¹² and Z ¹⁵ represent N;

Z¹³ и Z¹⁶ представляют собой СН;Z ¹³ and Z ¹⁶ are CH;

Z¹⁴ и Z¹⁷ независимо представляют собой СН или N;Z ¹⁴ and Z ¹⁷ independently represent CH or N;

R³ представляет собой С₂алкил, функционализированный одной тиольной, амино, С_1-6алкиламино, ди(С_1-6алкил)амино или гидроксильной группой;R ³ is C ₂ alkyl functionalized with one thiol, amino, C _1-6 alkylamino, di (C _1-6 alkyl) amino or hydroxyl group;

R⁴ представляет собой гидроксил;R ⁴ is hydroxyl;

R⁹ и R¹⁰ независимо представляют собой гидроксил или тиол;R ⁹ and R ^{10 are} independently hydroxyl or thiol;

или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

- 3 037513- 3 037513

В другом варианте осуществления соединение представляет собой:In another embodiment, the connection is:

В другом варианте осуществления соединение представляет собой:In another embodiment, the connection is:

В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы Ic или его фармацевтически приемлемую соль и одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.In another aspect, the present invention relates to a pharmaceutical composition comprising a compound of Formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and one or more pharmaceutically acceptable excipients.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы Ic или его фармацевтически приемлемую соль, и по меньшей мере один дополнительный терапевтический агент, и одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.In another aspect, the present invention relates to a pharmaceutical composition comprising a compound of Formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and at least one additional therapeutic agent, and one or more pharmaceutically acceptable excipients.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы Ic для получения лекарственного средства для стимулирования или активации иммунного ответа у пациента, нуждающегося в этом.In another aspect, the present invention relates to the use of a compound of formula Ic for the manufacture of a medicament for stimulating or activating an immune response in a patient in need thereof.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы Ic для получения лекарственного средства для лечения рака у пациента, нуждающегося в этом.In another aspect, the present invention relates to the use of a compound of formula Ic for the manufacture of a medicament for the treatment of cancer in a patient in need thereof.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы Ic в комбинации с ингибитором иммунных контрольных точек для получения лекарственного средства для лечения рака у пациента, нуждающегося в этом.In another aspect, the present invention relates to the use of a compound of formula Ic in combination with an immune checkpoint inhibitor for the manufacture of a medicament for the treatment of cancer in a patient in need thereof.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы Ic для получения лекарственного средства для лечения инфекционного заболевания у пациента, нуждающегося в этом.In another aspect, the present invention relates to the use of a compound of formula Ic for the manufacture of a medicament for the treatment of an infectious disease in a patient in need thereof.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы Ic для получения лекарственного средства для лечения иммунного расстройства у пациента, нуждающегося в этом.In another aspect, the present invention relates to the use of a compound of formula Ic for the manufacture of a medicament for the treatment of an immune disorder in a patient in need thereof.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к иммуногенной композиции, содержащей антиген или антигенную композицию и соединение формулы Ic или его фармацевтически приемлемую соль.In another aspect, the present invention relates to an immunogenic composition comprising an antigen or antigenic composition and a compound of Formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению иммуногенной композиции для получения лекарственного средства для лечения заболевания у пациента, нуждающегося в этом.In another aspect, the present invention relates to the use of an immunogenic composition for the manufacture of a medicament for the treatment of a disease in a patient in need thereof.

Подробное описаниеDetailed description

Настоящее изобретение относится к новым аналогам цГАМФ, их фармацевтическим композициям и их применению в терапии. 2'3'-цГАМФ представляет собой эндогенный вторичный мессенджер, продуцируемый клетками млекопитающих. Он представляет собой лиганд с высоким сродством к STING, вызывая в нем конформационные изменения, и эффективный индуктор интерферонов I типа. цГАС и цГАС-цГАМФ путь являются важными для запуска воспалительных реакций на свою и чужеродную ДНК. Как таковой, цГАС является важной для иммунной защиты против микробных патогенов, которые содержат ДНК и требуют ДНК в их жизненных циклах. Данные патогены включают ДНК вирусы, ретровирусы, включая ВИЧ, бактерии, включая микобактерию туберкулеза, грибы и паразиты. цГАС может также обнаруживать опухолевую ДНК и является важной для врожденного иммунитета тела против раковых клеток. Активация цГАС-цГАМФ-STING пути является важной для иммунотерапии рака.The present invention relates to new analogs of cGAMP, their pharmaceutical compositions and their use in therapy. 2'3'-cGAMP is an endogenous secondary messenger produced by mammalian cells. It is a ligand with a high affinity for STING, causing conformational changes in it, and an effective inducer of type I interferons. The cGAS and cGAS-cGAMP pathways are important for triggering inflammatory responses to self and foreign DNA. As such, cGAS is essential for immune defense against microbial pathogens that contain DNA and require DNA in their life cycles. These pathogens include DNA viruses, retroviruses including HIV, bacteria including Mycobacterium tuberculosis, fungi and parasites. cGAS can also detect tumor DNA and is important for the body's innate immunity against cancer cells. Activation of the cGAS-cGAMP-STING pathway is important for cancer immunotherapy.

- 4 037513- 4 037513

В качестве эффективного индуктора интерферонов I типа цГАМФ (и, следовательно, цГАМФ аналоги настоящего изобретения) обеспечивают рациональный иммуномодулятор. Как таковое, соединение формулы Ic или его фармацевтически приемлемую соль можно применять в качестве вспомогательного вещества вакцины, в частности с мукозальными вакцинами, и его можно формулировать с иммуногенами и доставлять в виде циклического ди-ГМФ и циклического ди-АМФ в качестве вспомогательных веществ вакцин (см., например, Pedersen, et al. PLoS ONE, Nov 2011, 6, 11, e26973; Ebensen et al., Vaccine 29, 2011, 5210-5220; Chen et al., Vaccine 28, 2010, 3080-3085). Действительно, данные вспомогательные вещества являются часто более эффективными, поскольку цГАМФ (и цГАМФ аналоги настоящего изобретения) являются более эффективными, чем циклический ди-ГМФ при стимулировании интерферонов.As an effective inducer of Type I interferons, cGAMP (and therefore the cGAMP analogs of the present invention) provide a rational immunomodulator. As such, a compound of formula Ic or a pharmaceutically acceptable salt thereof can be used as a vaccine adjuvant, in particular with mucosal vaccines, and can be formulated with immunogens and delivered as cyclic di-HMP and cyclic di-AMP as vaccine adjuvants ( see, for example, Pedersen, et al. PLoS ONE, Nov 2011, 6, 11, e26973; Ebensen et al., Vaccine 29, 2011, 5210-5220; Chen et al., Vaccine 28, 2010, 3080-3085) ... Indeed, these adjuvants are often more effective because cGAMP (and cGAMP analogs of the present invention) are more effective than cyclic di-HMP in stimulating interferons.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы Ic или его фармацевтически приемлемую соль для применения в лечении рака. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой соединение формулы Ic. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой соединение формулы Ic в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным терапевтическим агентом, который включает, но не ограничивается, ингибиторы иммунных контрольных точек, такие как антитела к PD-1, PD-L1 или CTLA-4. Терапевтический агент, применяемый в комбинации с соединением формулы Ic, также включает облучение опухолей или химиотерапевтический агент, мишенью которого являются опухолевые клетки.In one aspect, the present invention provides a pharmaceutical composition comprising a compound of Formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, for use in the treatment of cancer. In one embodiment, the pharmaceutical composition is a compound of Formula Ic. In another embodiment, the pharmaceutical composition is a compound of Formula Ic in combination with at least one additional therapeutic agent that includes, but is not limited to, immune checkpoint inhibitors such as anti-PD-1, PD-L1, or CTLA-4 antibodies. A therapeutic agent used in combination with a compound of formula Ic also includes irradiation of tumors or a chemotherapeutic agent that targets tumor cells.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы Ic или его фармацевтически приемлемую соль, в качестве вспомогательного вещества и иммуногена для целевого патогена.In another aspect, the present invention relates to a pharmaceutical composition comprising a compound of Formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, as an excipient and an immunogen for a target pathogen.

Как применяют в настоящем изобретении:As used in the present invention:

Термин Ci-балкил, отдельно или в комбинации с другими группами, относится к моновалентным алкильным группам с линейной или разветвленной цепью, содержащим 1-6 атомов углерода. Примеры C_1-6алкильных групп включают, но не ограничиваются, метильную, этильную, н-пропильную, изопропильную, н-бутильную, втор-бутильную и трет-бутильную группы. Предпочтительными являются C_1-4алкилы.The term Ci-balkyl, alone or in combination with other groups, refers to straight or branched chain monovalent alkyl groups containing 1-6 carbon atoms. Examples of C _1-6 alkyl groups include, but are not limited to, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sec-butyl, and t-butyl groups. _{C 1-4} alkyls are preferred.

Термин соединение настоящего изобретения или соединение формулы Ic включает все полиморфы, радиомеченые производные, таутомеры, стереоизомеры и оптические изомеры соединений формулы Ic и их солей, если не указано иначе.The term compound of the present invention or compound of formula Ic includes all polymorphs, radiolabeled derivatives, tautomers, stereoisomers and optical isomers of compounds of formula Ic and their salts, unless otherwise indicated.

Термин эффективное количество обозначает количество лекарственного средства или фармацевтического агента, который будет вызывать биологический или медицинский ответ ткани, системы, животного или человека, которого добивается, например, исследователь или врач-клиницист.The term effective amount refers to the amount of a drug or pharmaceutical agent that will elicit a biological or medical response from a tissue, system, animal, or human that is sought by, for example, a researcher or clinician.

Термин терапевтически эффективное количество обозначает любое количество, которое по сравнению с соответствующим субъектом, который не получает данное количество, приводит в результате к улучшенному лечению, выздоровлению, предотвращению или облегчению заболевания, расстройства или побочного эффекта, или снижению скорости развития заболевания или расстройства. Термин также включает в свой объем количества, эффективные для улучшения нормальной физиологической функции.The term therapeutically effective amount means any amount that, when compared to a corresponding subject who does not receive a given amount, results in improved treatment, cure, prevention or amelioration of a disease, disorder or side effect, or a decrease in the rate of progression of a disease or disorder. The term also includes within its scope amounts effective to improve normal physiological function.

Термин профилактика включает предотвращение и относится к мере или способу, который предполагается для предотвращения, а не вылечивания и лечения заболевания. Предотвращение относится к снижению риска приобретения или развития заболевания, вызывающего по меньшей мере один клинический симптом заболевания, не развивающегося у субъекта, который может подвергаться воздействию агента, вызывающего заболевание, или субъекта, предрасположенного к заболеванию, перед возникновением заболевания.The term prevention includes prevention and refers to a measure or method that is intended to prevent, rather than cure or treat, a disease. Prevention refers to reducing the risk of acquiring or developing a disease causing at least one clinical symptom of a disease that does not develop in a subject who may be exposed to a disease-causing agent or subject predisposed to a disease before the disease occurs.

Термин фармацевтически приемлемый относится к соединениям, материалам, композициям и лекарственным формам, которые с медицинской точки зрения являются пригодными для применения в контакте с тканями человека и животного без избыточной токсичности, раздражения или другой проблемы или осложнения, в соответствии с приемлемым соотношением риск/польза.The term pharmaceutically acceptable refers to compounds, materials, compositions and dosage forms that are medically suitable for use in contact with human and animal tissues without excessive toxicity, irritation or other problem or complication, in accordance with an acceptable risk / benefit ratio.

Термин фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества включают все разбавители, носители, связующие, регуляторы сыпучести и другие компоненты фармацевтических составов, с которыми вводят соединение настоящего изобретения.The term pharmaceutically acceptable excipients includes all diluents, carriers, binders, flow regulators and other components of pharmaceutical formulations with which the compound of the present invention is administered.

Соединения настоящего изобретения могут быть в твердой или жидкой форме. В твердой форме соединение настоящего изобретения может быть в виде большого количества твердых состояний от полностью аморфных до полностью кристаллических.The compounds of the present invention can be in solid or liquid form. In solid form, the compound of the present invention can be in a wide variety of solid states from fully amorphous to fully crystalline.

Термин аморфный относится к состоянию, в котором у материала отсутствует дальний порядок на молекулярном уровне и, в зависимости от температуры, и он может проявлять физические свойства твердого вещества или жидкости. Обычно, данные материалы не дают характерные рентгеновские дифракционные картины и, проявляя свойства твердого вещества, более формально описываются как жидкости. При нагревании возникает изменение свойств твердого вещества на свойства жидкости, которое характеризуется изменением состояния, обычно второго порядка (фазовый переход второго рода).The term amorphous refers to a state in which a material lacks long-range order at the molecular level and, depending on temperature, can exhibit the physical properties of a solid or liquid. Usually, these materials do not give characteristic X-ray diffraction patterns and, exhibiting the properties of a solid, are more formally described as liquids. When heated, a change occurs from the properties of a solid to the properties of a liquid, which is characterized by a change in state, usually of the second order (phase transition of the second order).

Термин кристаллический относится к твердой фазе, в которой материал имеет регулярную упорядоченную внутреннюю структуру на молекулярном уровне и дает характерную рентгеновскую дифрак- 5 037513 ционную картину с определенными пиками. Данные материалы при достаточном нагревании будут также проявлять свойств жидкости, но изменение из твердого состояния до жидкого характеризуется фазовым изменением, обычно первого порядка (температура плавления).The term crystalline refers to a solid phase in which the material has a regular ordered internal structure at the molecular level and gives a characteristic X-ray diffraction pattern with distinct peaks. These materials will also exhibit liquid properties when heated sufficiently, but the change from solid to liquid is characterized by a phase change, usually of the first order (melting point).

Соединения настоящего изобретения могут обладать способностью кристаллизоваться в виде более чем одной формы, характеристика, которая известна как полиморфизм, и ясно, что данные полиморфные формы (полиморфы) включены в объем настоящего изобретения. Полиморфизм обычно может возникать как ответ на изменения температуры или давления или обоих и может также быть результатом изменения способа кристаллизации. Полиморфы можно отличать по различным физическим характеристикам, известным в данной области техники, таким как дифракционные рентгенограммы, растворимость и температура плавления.The compounds of the present invention may have the ability to crystallize in more than one form, a characteristic that is known as polymorphism, and it is clear that these polymorphic forms (polymorphs) are included within the scope of the present invention. Polymorphism can usually arise as a response to changes in temperature or pressure, or both, and can also result from a change in the crystallization method. Polymorphs can be distinguished by various physical characteristics known in the art, such as X-ray diffraction patterns, solubility and melting point.

Также следует отметить, что некоторые соединения могут образовывать таутомеры. Таутомеры относятся к соединениям, которые представляют собой взаимопревращающиеся формы структуры конкретного соединения и которые отличаются перестановкой атомов водорода и электронов. Таким образом, две структуры могут быть в равновесии в результате перемещения электронов и атома (обычно Н). Например, енолы и кетоны представляют собой таутомеры, поскольку они легко взаимопревращаются обработкой их кислотой или основанием. Ясно, что все таутомеры и смеси таутомеров соединений настоящего изобретения включены в объем соединений настоящего изобретения.It should also be noted that some compounds can form tautomers. Tautomers refer to compounds that are interconverting forms of the structure of a particular compound and that differ in the rearrangement of hydrogen atoms and electrons. Thus, the two structures can be in equilibrium as a result of the movement of electrons and an atom (usually H). For example, enols and ketones are tautomers because they are readily interconverted by treatment with an acid or base. It is clear that all tautomers and mixtures of tautomers of the compounds of the present invention are included within the scope of the compounds of the present invention.

Соединения формулы Ic могут быть в форме соли. Обычно соли настоящего изобретения представляют собой фармацевтически приемлемые соли. Соли, включенные в термин фармацевтически приемлемые соли, относятся к нетоксичным солям соединений настоящего изобретения. Для обзора подходящих солей, смотри, например, Berge et al, J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19. Подходящие фармацевтически приемлемые соли могут включать соли присоединения кислоты. Фармацевтически приемлемую соль присоединения кислоты можно получить реакцией соединений формулы Ic с подходящей неорганической или органической кислотой (такой как бромистоводородная, хлористоводородная, серная, азотная, фосфорная, п-толуолсульфо, бензолсульфо, метансульфо, этансульфо, нафтилинсульфо, такой как 2-нафталинсульфо), необязательно в подходящем растворителе, таком как органический растворитель, получая соль, которую обычно выделяют, например, кристаллизацией и фильтрованием. Фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты соединения формулы Ic может представлять собой, например, гидробромидную, гидрохлоридную, сульфатную, нитратную, фосфатную, п-толуолсульфонатную, бензолсульфонатную, метансульфонатную, этансульфонатную или нафталинсульфонатную (например, 2-нафталинсульфонатную) соль. Можно применять другие фармацевтически неприемлемые соли, например трифторацетаты, например, при выделении соединений настоящего изобретения, и они включены в объем настоящего изобретения.Compounds of formula Ic may be in salt form. Typically, the salts of the present invention are pharmaceutically acceptable salts. Salts included in the term pharmaceutically acceptable salts refer to non-toxic salts of the compounds of the present invention. For a review of suitable salts, see, for example, Berge et al, J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19. Suitable pharmaceutically acceptable salts may include acid addition salts. A pharmaceutically acceptable acid addition salt can be prepared by reacting compounds of formula Ic with a suitable inorganic or organic acid (such as hydrobromic, hydrochloric, sulfuric, nitric, phosphoric, p-toluenesulfo, benzenesulfo, methanesulfo, ethanesulfo, naphthylsulfo, optionally, such as 2-naphthalenes) in a suitable solvent such as an organic solvent to form a salt which is usually isolated, for example, by crystallization and filtration. A pharmaceutically acceptable acid addition salt of a compound of formula Ic may be, for example, a hydrobromide, hydrochloride, sulfate, nitrate, phosphate, p-toluenesulfonate, benzenesulfonate, methanesulfonate, ethanesulfonate or naphthalenesulfonate (eg, 2-naphthalene sulfonate) salt. Other pharmaceutically unacceptable salts such as trifluoroacetates may be used, for example, in isolating the compounds of the present invention, and are included within the scope of the present invention.

Настоящее изобретение включает в свой объем все возможные стехиометрические и нестехиометрические формы соединений формулы Ic.The present invention includes within its scope all possible stoichiometric and non-stoichiometric forms of the compounds of formula Ic.

Хотя и возможно для применения в терапии вводить соединение настоящего изобретения в виде неочищенного вещества, можно предоставлять соединение настоящего изобретения в виде активного ингредиента в фармацевтической композиции. Данные композиции можно получить способом, хорошо известным в фармацевтической области техники, и они содержат по меньшей мере одно активное соединение. Соответственно, настоящее изобретение, кроме того, относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединение настоящего изобретения и один или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. Вспомогательное вещество (вещества) должны быть совместимыми, в смысле быть совместимыми с другими ингредиентами композиции и невредными для их реципиента. Согласно другому аспекту настоящего изобретения также обеспечивают способ получения фармацевтической композиции, содержащей агент или его фармацевтически приемлемые соли, одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. Фармацевтическая композиция может быть для применения в лечении и/или профилактике любого из заболеваний, описанных в настоящем изобретении.While it is possible for use in therapy to administer the compound of the present invention as a crude material, it is possible to provide the compound of the present invention as an active ingredient in a pharmaceutical composition. These compositions can be prepared in a manner well known in the pharmaceutical art and contain at least one active compound. Accordingly, the present invention further relates to pharmaceutical compositions comprising a compound of the present invention and one or more pharmaceutically acceptable excipients. The excipient (s) must be compatible, in the sense of being compatible with the other ingredients of the composition and harmless to their recipient. According to another aspect of the present invention, there is also provided a method for preparing a pharmaceutical composition comprising an agent or pharmaceutically acceptable salts thereof, one or more pharmaceutically acceptable excipients. The pharmaceutical composition can be for use in the treatment and / or prevention of any of the diseases described in the present invention.

Обычно соединение настоящего изобретения вводят в фармацевтически эффективном количестве. Фактически вводимое количество соединения будет обычно определять лечащий врач, в свете соответствующих обстоятельств, включая заболевание, которое лечат, выбранный путь введения, конкретное вводимое соединение, возраст, вес и реакцию конкретного пациента, тяжесть симптомов у пациента и подобные. Фармацевтические композиции могут присутствовать в виде единичных лекарственных форм, содержащих заранее определенное количество активного ингредиента на единичную дозу. Термин единичные лекарственные формы относится к физически дискретным единицам, пригодным в качестве единичных доз для людей и других млекопитающих, причем каждая единичная доза содержит заранее определенное количество активного материала, рассчитанное для того, чтобы вызывать требуемый терапевтический эффект, в сочетании с фармацевтическим вспомогательным веществом, средой или носителем. Стандартные единичные лекарственные формы включают заранее заполненные, предварительно измеренные ампулы или шприцы жидких композиций или пилюли, таблетки, капсулы или подобные, в случае твердых композиций.Typically, the compound of the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount. The actual amount of compound administered will usually be determined by the attending physician in light of the relevant circumstances, including the disease being treated, the route of administration chosen, the particular compound administered, the age, weight and response of the particular patient, the severity of the patient's symptoms, and the like. The pharmaceutical compositions may be present in unit dosage forms containing a predetermined amount of the active ingredient per unit dose. The term dosage unit form refers to physically discrete units suitable as unit doses for humans and other mammals, each unit dose containing a predetermined amount of active material calculated to produce the desired therapeutic effect, in combination with a pharmaceutical excipient, a medium or by a carrier. Unit dosage forms include pre-filled, pre-measured ampoules or syringes of liquid compositions, or pills, tablets, capsules, or the like, in the case of solid compositions.

Предпочтительные композиции единичных доз представляют собой композиции, содержащие дневную дозу или поддозу, или походящую ее часть, активного ингредиента. Данные единичные дозы,Preferred unit dose compositions are compositions containing a daily dose or sub-dose, or an appropriate portion thereof, of the active ingredient. These are single doses,

- 6 037513 следовательно, можно вводить один раз или более одного раза в день. Данные фармацевтические композиции можно получить любым из способов, хорошо известных в области фармацевтики.- 6 037513 can therefore be administered once or more than once a day. These pharmaceutical compositions can be prepared by any of the methods well known in the pharmaceutical art.

Фармацевтические композиции можно приспосабливать для введения любым подходящим путем, например пероральным (включая буккальный или сублингвальный), ректальным, ингаляцией, интраназальным, местным (включая буккальный, сублингвальный или трансдермальный), вагинальным или парентеральным (включая подкожный, внутримышечный, внутривенный или внутрикожный) путем. Данные композиции можно получить любым способом, известным в области фармацевтики, например, смешением активного ингредиента с носителем (носителями) или вспомогательным веществом (веществами).The pharmaceutical compositions can be adapted for administration by any suitable route, for example, oral (including buccal or sublingual), rectal, inhalation, intranasal, topical (including buccal, sublingual or transdermal), vaginal or parenteral (including subcutaneous, intramuscular, intravenous or intradermal) route. These compositions can be prepared by any method known in the pharmaceutical art, for example by mixing the active ingredient with the carrier (s) or excipient (s).

Фармацевтические композиции, приспособленные для перорального введения, можно предоставлять в виде дискретных единиц, таких как капсулы или таблетки; порошки или гранулы; растворы или суспензии в водных или неводных жидкостях; пищевые пены или крема или жидкие эмульсии масло-вводе или жидкие эмульсии вода-в-масле.Pharmaceutical compositions adapted for oral administration can be provided as discrete units such as capsules or tablets; powders or granules; solutions or suspensions in aqueous or non-aqueous liquids; edible foams or creams or oil-in-oil liquid emulsions or water-in-oil liquid emulsions.

Например, для перорального введения в виде таблетки или капсулы активный лекарственный компонент можно комбинировать с пероральным, нетоксичным фармацевтически приемлемым инертным вспомогательным веществом, таким как этанол, глицерин, вода и подобные. Порошки получают измельчением соединения до подходящего мелкого размера и смешением с полученным аналогично фармацевтическим вспомогательным веществом, таким как пищевой углевод, такой как, например, крахмал или маннитол. Могут также присутствовать ароматизаторы, консерванты, диспергаторы и красители.For example, for oral administration in the form of a tablet or capsule, the active drug component can be combined with an oral, non-toxic pharmaceutically acceptable inert excipient such as ethanol, glycerol, water, and the like. Powders are prepared by grinding the compound to a suitable fine size and mixing with a similarly prepared pharmaceutical excipient such as an edible carbohydrate such as, for example, starch or mannitol. Flavors, preservatives, dispersants and colorants may also be present.

Капсулы получают приготовлением порошковой смеси, как описано выше, и заполнением формованных желатиновых оболочек.Capsules are prepared by preparing a powder mixture as described above and filling molded gelatinous shells.

Вспомогательные вещества, включая регуляторы сыпучести и смазывающие агенты, такие как коллоидный оксид кремния, тальк, стеарат магния, стеарат кальция или твердый полиэтиленгликоль, можно добавлять к порошковой смеси перед операцией заполнения. Разрыхлитель или агент, увеличивающий растворимость, такой как агар-агар, карбонат кальция или карбонат натрия, можно добавлять, увеличивая доступность лекарственного средства при проглатывании капсулы.Adjuvants, including flow control agents and lubricants such as colloidal silicon oxide, talc, magnesium stearate, calcium stearate, or solid polyethylene glycol, can be added to the powder mixture prior to the filling operation. A disintegrant or solubility enhancing agent such as agar agar, calcium carbonate, or sodium carbonate can be added to increase the availability of the drug when the capsule is swallowed.

Более того, при желании или необходимости, вспомогательные вещества, включая подходящие связующие, регуляторы сыпучести, смазывающие агенты, подсластители, ароматизаторы, разрыхлители и красители, можно также вводить в данную смесь. Подходящие связующие включают крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, сахаристые вещества из кукурузы, натуральные и синтетические камеди, такие как аравийская камедь, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, воски и подобные. Смазывающие агенты, применяемые в данных лекарственных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и подобные. Разрыхлители включают, без ограничения, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и подобные. Таблетки формулируют, например, получением порошковой смеси, гранулированием или комкованием, добавлением смазывающего вещества и разрыхлителя и прессованием таблеток. Порошковую смесь получают смешением соединения, подходящим образом измельченного, с разбавителем или основой, как описано выше, и, необязательно, со связующим, таким как карбоксиметилцеллюлоза, альгинат, желатин или поливинилпирролидон, агентом, замедляющим растворение, таким как парафин, ускорителем поглощения, таким как четвертичная соль, и/или абсорбирующим агентом, таким как бентонит, каолин или фосфат дикальция. Порошковую смесь можно гранулировать смачиванием связующим, таким как патока, крахмальная паста, экстракт слизи Акейдия или растворы целлюлозных или полимерных материалов, и продавливанием через сита. В качестве альтернативы гранулированию порошковую смесь можно прогонять через таблетировочную машину, и полученные в результате неидеальные куски разбивать до гранул. Гранулы можно смазывать для предотвращения слипания с формовочной головкой таблетирующей машины посредством добавления стеариновой кислоты, стеаратной соли, талька или минерального масла. Затем смазанную смесь прессуют до таблеток. Соединения настоящего изобретения можно также смешивать с сыпучим инертным носителем и прессовать до таблеток непосредственно без осуществления стадий гранулирования или комкования. Можно добавлять прозрачное или непрозрачное защитное покрытие, состоящее из герметизирующего слоя шеллака, покрытия из сахара или полимерного материала и полировочного покрытия из воска. Красящие вещества можно добавлять к данным покрытиям для того, чтобы различать различные единичные дозы.Moreover, if desired or necessary, auxiliary substances, including suitable binders, flow regulators, lubricants, sweeteners, flavors, disintegrants and colors, can also be added to the mixture. Suitable binders include starch, gelatin, natural sugars such as glucose or beta-lactose, corn sugars, natural and synthetic gums such as gum arabic, tragacanth or sodium alginate, carboxymethyl cellulose, polyethylene glycol, waxes, and the like. Lubricants used in these dosage forms include sodium oleate, sodium stearate, magnesium stearate, sodium benzoate, sodium acetate, sodium chloride, and the like. Disintegrants include, but are not limited to, starch, methylcellulose, agar, bentonite, xanthan gum, and the like. Tablets are formulated, for example, by preparing a powder blend, granulating or squeezing, adding a lubricant and disintegrant, and compressing the tablets. A powder mixture is prepared by mixing a compound, suitably milled, with a diluent or base as described above, and optionally with a binder such as carboxymethyl cellulose, alginate, gelatin, or polyvinyl pyrrolidone, a dissolution retarding agent such as paraffin, an absorption accelerator such as a quaternary salt, and / or an absorbing agent such as bentonite, kaolin or dicalcium phosphate. The powder mixture can be granulated by wetting with a binder such as molasses, starch paste, Aceidia mucus extract or solutions of cellulosic or polymeric materials, and pressing through sieves. As an alternative to granulation, the powder mixture can be run through a tabletting machine and the resulting imperfect lumps can be broken into granules. The granules can be lubricated to prevent sticking to the forming head of the tableting machine by adding stearic acid, stearate salt, talc or mineral oil. The lubricated mixture is then compressed to tablets. The compounds of the present invention can also be mixed with a free flowing inert carrier and compressed to tablets directly without performing the granulating or slugging steps. You can add a transparent or opaque protective coating consisting of a shellac liner, a sugar or polymer coating, and a wax polish. Colorants can be added to these coatings in order to differentiate between different dosage units.

Пероральные жидкости, такие как раствор, суспензии, сиропы и эликсиры, можно получить в виде единичной лекарственной формы так, чтобы указанное количество содержало предварительно определенное количество соединения. Сиропы можно получить растворением соединения в подходящим образом ароматизированном водном растворе, тогда как эликсиры получают применением нетоксичной спиртовой среды. Суспензии можно формулировать диспергированием соединения в нетоксичной среде. Можно также добавлять солюбилизаторы и эмульгаторы, такие как этоксилированные изостеариловые спирты и полиоксиэтиленсорбитольные эфиры, консерванты, ароматизирующую добавку, такую как масло мяты перечной, или натуральные подсластители или сахарин, или другие искусственные красители, и подобные.Oral fluids such as solution, suspensions, syrups, and elixirs can be prepared in unit dosage form such that the specified amount contains a predetermined amount of the compound. Syrups can be prepared by dissolving the compound in a suitably flavored aqueous solution, while elixirs are prepared using a non-toxic alcoholic medium. Suspensions can be formulated by dispersing the compound in a non-toxic environment. Solubilizers and emulsifiers such as ethoxylated isostearyl alcohols and polyoxyethylene sorbitol ethers, preservatives, a flavoring agent such as peppermint oil, or natural sweeteners or saccharin or other artificial colors, and the like can also be added.

Если потребуется, композиции единичных доз для перорального введения можно микроинкапсули- 7 037513 ровать. Композицию можно также получить для пролонгированного или задержанного высвобождения, например, нанесением покрытия или включением материала в виде частиц в полимер, воск или подобные.If desired, unit dose compositions for oral administration may be microencapsulated. The composition can also be formulated for sustained or delayed release, for example, by coating or incorporating particulate material into a polymer, wax, or the like.

Соединения настоящего изобретения можно также вводить в виде липосомных систем доставки, таких как небольшие моноламеллярные везикулы, большие моноламеллярные везикулы и многослойный везикулы. Липосомы можно получить из ряда фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины. Фармацевтические композиции, приспособленные для трансдермального введения, можно предоставлять в виде дискретных пластырей, предназначенных для нахождения в тесном контакте с эпидермисом реципиента в течение длительного периода времени.The compounds of the present invention may also be administered as liposomal delivery systems such as small monolamellar vesicles, large monolamellar vesicles, and multilamellar vesicles. Liposomes can be obtained from a number of phospholipids such as cholesterol, stearylamine, or phosphatidylcholines. Pharmaceutical compositions adapted for transdermal administration can be provided as discrete patches designed to be in close contact with the epidermis of the recipient for an extended period of time.

Фармацевтические композиции, приспособленные для местного введения, можно формулировать в виде мазей, кремов, суспензий, лосьонов, порошков, растворов, паст, гелей, спреев, аэрозолей или масел.Pharmaceutical compositions adapted for topical administration can be formulated as ointments, creams, suspensions, lotions, powders, solutions, pastes, gels, sprays, aerosols, or oils.

Для обработки глаз или других внешних тканей, например рта и кожи, композиции предпочтительно наносят в виде местной мази или крема. При формулировании в виде мази активный ингредиент можно применять или с парафиновой или смешиваемой с водой основой для мази. Альтернативно, активный ингредиент можно формулировать в виде крема с основой для крема масло-в-воде или основой вода-вмесле.For treating the eyes or other external tissues, such as the mouth and skin, the compositions are preferably applied as a topical ointment or cream. When formulated as an ointment, the active ingredient can be used with either a paraffinic or water-miscible ointment base. Alternatively, the active ingredient can be formulated as a cream with an oil-in-water cream base or a water-in-mixture base.

Фармацевтические композиции, приспособленные для местных введений на глаз, включают глазные капли, где активный ингредиент растворяют или суспендируют в подходящем носителе, особенно водном растворе.Pharmaceutical compositions adapted for topical administration to the eye include eye drops wherein the active ingredient is dissolved or suspended in a suitable carrier, especially aqueous solution.

Фармацевтические композиции, приспособленные для местного введения в рот, включают таблетки для рассасывания, пастилки и средства для полоскания рта.Pharmaceutical compositions adapted for topical administration to the mouth include lozenges, troches, and mouthwashes.

Фармацевтические композиции, приспособленные для ректального введения, можно предоставлять в виде суппозиториев или в виде клизм.Pharmaceutical compositions adapted for rectal administration can be provided as suppositories or enemas.

Лекарственные формы для назального или ингаляционного введения можно удобно формулировать в виде аэрозолей, растворов, суспензии, капель, гелей или сухих порошков.Dosage forms for nasal or inhalation administration can conveniently be formulated as aerosols, solutions, suspensions, drops, gels, or dry powders.

Композиции для интраназального введения включают водные композиции, вводимые в нос в виде капель, или насос под давлением. Подходящие композиции содержат воду в качестве разбавителя или носителя для данной цели. Композиции для введения в легкое или нос могут содержать один или более вспомогательных веществ, например один или более суспендирующих агентов, один или более консервантов, один или более поверхностно-активных веществ, один или более агентов, регулирующих тоничность, один или более сорастворителей, и могут содержать компоненты для контролирования рН композиции, например буферную систему. Кроме того, композиции могут содержать другие вспомогательные вещества, такие как антиоксиданты, например метабисульфит натрия, и агенты, исправляющие вкус лекарственного средства. Композиции можно также вводить в нос или другие области дыхательных путей распылением. Интраназальные композиции могут обеспечивать доставку соединения (соединений) формулы Ic или (а) его фармацевтически приемлемой соли (солей) во все области носовой полости (целевая ткань) и, кроме того, могут обеспечивать сохранение контакта соединения (соединений) формулы Ic или (а) его фармацевтически приемлемой соли (солей) с целевой тканью в течение более длительного периода времени. Подходящий режим дозирования для интраназальных композиций заключается в медленном вдыхании пациентом через нос после очистки носовой полости. В процессе вдыхания композицию можно вводить в одну ноздрю при сдавливании рукой другой ноздри. Затем данный способ можно повторить для другой ноздри. Обычно, одну или две струи в одну ноздрю можно вводить способом выше один, два или три раза в день, идеально один раз в день. Особенный интерес представляют интраназальные композиции, пригодные для введения один раз в день.Compositions for intranasal administration include aqueous compositions administered as nasal drops or pump under pressure. Suitable compositions contain water as a diluent or carrier for this purpose. Compositions for administration to the lung or nasal may contain one or more adjuvants, for example, one or more suspending agents, one or more preservatives, one or more surfactants, one or more tonicity agents, one or more cosolvents, and may contain components for controlling the pH of the composition, such as a buffer system. In addition, the compositions may contain other adjuvants such as antioxidants, for example sodium metabisulfite, and taste-correcting agents. The compositions can also be administered to the nose or other areas of the respiratory tract by nebulization. Intranasal compositions can deliver the compound (s) of Formula Ic or (a) a pharmaceutically acceptable salt (s) thereof to all regions of the nasal cavity (target tissue) and, in addition, can maintain contact of the compound (s) of Formula Ic or (a) its pharmaceutically acceptable salt (s) with the target tissue for a longer period of time. A suitable dosing regimen for intranasal compositions is to inhale slowly by the patient through the nose after cleansing the nasal cavity. During inhalation, the composition can be administered into one nostril by squeezing the other nostril with a hand. Then this method can be repeated for the other nostril. Typically, one or two jets into one nostril can be injected in the above manner one, two or three times a day, ideally once a day. Of particular interest are intranasal compositions suitable for once daily administration.

Суспендирующий агент (агенты), если он включен, будет обычно присутствовать в количестве 0,15% (вес./вес.), таком как 1,5-2,4% (вес./вес.), относительно суммарного веса композиции. Примеры фармацевтически приемлемых суспендирующих агентов включают, но не ограничиваются, авицеф (микрокристаллическую целлюлозу и карбоксиметилцеллюлозу натрия), карбоксиметилцеллюлозу натрия, вигум, трагакант, бентонит, метилцеллюлозу, ксантановую камедь, карбопол и полиэтиленгликоли.The suspending agent (s), if included, will usually be present in an amount of 0.15% (w / w), such as 1.5-2.4% (w / w), based on the total weight of the composition. Examples of pharmaceutically acceptable suspending agents include, but are not limited to, avicef (microcrystalline cellulose and sodium carboxymethyl cellulose), sodium carboxymethyl cellulose, vegum, tragacanth, bentonite, methyl cellulose, xanthan gum, carbopol, and polyethylene glycols.

Композиции для введения в легкое или нос могут содержать один или более вспомогательных веществ, и их можно защищать от микробного или грибкового инфицирования и роста включением одного или более консервантов. Примеры фармацевтически приемлемых антимикробных агентов или консервантов включают, но не ограничиваются, четвертичные аммониевые соединения (например, хлорид бензалкония, хлорид бензетония, цетримид, хлорид цетилпиридиния, хлорид лауралкония и хлорид миристилпиколиния), ртутные агенты (например, нитрат фенилртути, ацетат фенилртути и тимеросал), спиртовые агенты (например, хлорбутанол, фенилэтиловый спирт и бензиловый спирт), антибактериальные эфиры (например, эфиры парагидроксибензойной кислоты), хелатирующие агенты, такие как эдетат динатрия (EDTA) и другие антимикробные агенты, такие как хлоргексидин, хлоркрезол, сорбиновая кислота и ее соли (такие как сорбат калия) и полимиксин. Примеры фармацевтически приемлемых противогрибковых агентов или консервантов включают, но не ограничиваются, бензоат натрия, сорбиновую кислоту, пропионат натрия, метилпарабен, этилпарабен, пропилпарабен и бутилпарабен. Консервант (консерванты), если он включен, может присутствовать в количестве 0,001-1% (вес./вес.), таком как 0,015- 8 037513Compositions for administration to the lung or nose may contain one or more adjuvants and may be protected from microbial or fungal infection and growth by the inclusion of one or more preservatives. Examples of pharmaceutically acceptable antimicrobial agents or preservatives include, but are not limited to, quaternary ammonium compounds (for example, benzalkonium chloride, benzethonium chloride, cetrimide, cetylpyridinium chloride, lauralconium chloride and myristylpicolinium chloride), mercury agents (for example, phenylmerthymerthymalcetate nitrate) , alcoholic agents (eg chlorobutanol, phenylethyl alcohol and benzyl alcohol), antibacterial esters (eg parahydroxybenzoic acid esters), chelating agents such as disodium edetate (EDTA) and other antimicrobial agents such as chlorohexidine and its sorbin salts (such as potassium sorbate) and polymyxin. Examples of pharmaceutically acceptable antifungal agents or preservatives include, but are not limited to, sodium benzoate, sorbic acid, sodium propionate, methylparaben, ethylparaben, propylparaben, and butylparaben. Preservative (s), if included, may be present in an amount of 0.001-1% (w / w) such as 0.015-8 037513

0,5% (вес./вес.) относительно суммарного веса композиции. Композиции (например, когда по меньшей мере одно соединение находится в суспензии) могут содержать один или более поверхностно-активных веществ, которые действуют, облегчая растворение частиц лекарственного средства в водной фазе композиции. Например, количество применяемого поверхностно-активного вещества представляет собой количество, которое не будет вызывать пенообразования при смешении. Примеры фармацевтически приемлемых поверхностно-активных веществ включают жирные спирты, сложные эфиры и эфиры, такие как монолеат полиоксиэтилен (20) сорбитана (полисорбат 80), эфиры макрогола и полоксамеры. Поверхностно-активное вещество может присутствовать в количестве приблизительно 0,01-10% (вес./вес.), таком как 0,01-0,75% (вес./вес.), например, приблизительно 0,5% (вес./вес.) относительно суммарного веса композиции.0.5% (w / w) based on the total weight of the composition. Compositions (eg, when at least one compound is in suspension) may contain one or more surfactants that act to facilitate dissolution of drug particles in the aqueous phase of the composition. For example, the amount of surfactant used is an amount that will not cause foaming when mixed. Examples of pharmaceutically acceptable surfactants include fatty alcohols, esters and ethers such as polyoxyethylene (20) sorbitan monoleate (polysorbate 80), macrogol ethers and poloxamers. The surfactant may be present in an amount of about 0.01-10% (w / w), such as 0.01-0.75% (w / w), for example, about 0.5% (w / w) ./weight) relative to the total weight of the composition.

Один или более агентов, регулирующих тоничность, можно включать для достижения тоничности с жидкостями тела, например, жидкостями полости носа, приводя в результате к сниженной степени раздражения. Примеры фармацевтически приемлемых агентов, регулирующих тоничность, включают, но не ограничиваются, хлорид натрия, декстрозу, ксилитол, хлорид кальция, глюкозу, глицерин и сорбитол. Агент, регулирующий тоничность, если он присутствует, можно включать в количестве 0,1-10% (вес./вес.), таким как 4,5-5,5% (вес./вес.), например, приблизительно 5,0% (вес./вес.) относительно суммарного веса композиции.One or more tonicity agents can be included to achieve tonicity with body fluids, eg, nasal fluids, resulting in a reduced degree of irritation. Examples of pharmaceutically acceptable tonicity control agents include, but are not limited to, sodium chloride, dextrose, xylitol, calcium chloride, glucose, glycerol, and sorbitol. The tonicity agent, if present, can be included in an amount of 0.1-10% (w / w), such as 4.5-5.5% (w / w), for example about 5, 0% (w / w) based on the total weight of the composition.

Композиции настоящего изобретения можно забуферить добавлением буферных агентов, таких как цитрат натрия, лимонная кислота, трометамол, фосфаты, такие как фосфат динатрия (например, додекагидратная, гептагидратная, дигидратная и безводная форма), или фосфат натрия и их смеси.The compositions of the present invention can be buffered by the addition of buffering agents such as sodium citrate, citric acid, trometamol, phosphates such as disodium phosphate (eg, dodecahydrate, heptahydrate, dihydrate and anhydrous forms), or sodium phosphate and mixtures thereof.

Буферный агент, если он присутствует, можно включать в количестве 0,1-5% (вес./вес.), например, 1-3% (вес./вес.) относительно суммарного веса композиции.The buffering agent, if present, can be included in an amount of 0.1-5% (w / w), for example 1-3% (w / w), based on the total weight of the composition.

Примеры веществ, исправляющих вкус лекарственного средства, включают сукралозу, сахарозу, сахарин или его соль, фруктозу, декстрозу, глицерин, кукурузный сироп, аспартам, ацесульфам-К, ксилитол, сорбитол, эритритол, глицирризинат аммония, тауматин, неотам, маннитол, ментол, эвкалиптовое масло, камфору, натуральный ароматизирующий агент, искусственный ароматизирующий агент и их комбинации.Examples of drug taste improving substances include sucralose, sucrose, saccharin or a salt thereof, fructose, dextrose, glycerin, corn syrup, aspartame, acesulfame-K, xylitol, sorbitol, erythritol, ammonium glycyrrhizinate, thaumatin, neotame, mannitol eucalyptus oil, camphor, natural flavoring agent, artificial flavoring agent, and combinations thereof.

Один или более сорастворителей можно включать для облегчения растворимости лекарственного соединения (соединений) и/или других вспомогательных веществ. Примеры фармацевтически приемлемых сорастворителей включают, но не ограничиваются, пропиленгликоль, дипропиленгликоль, этиленгликоль, глицерин, этанол, полиэтиленгликоли (например, PEG300 или PEG400) и метанол. В одном варианте осуществления, сорастворитель представляет собой пропиленгликоль.One or more cosolvents can be included to facilitate the solubility of the drug compound (s) and / or other excipients. Examples of pharmaceutically acceptable co-solvents include, but are not limited to, propylene glycol, dipropylene glycol, ethylene glycol, glycerin, ethanol, polyethylene glycols (eg, PEG300 or PEG400), and methanol. In one embodiment, the cosolvent is propylene glycol.

Сорастворитель (сорастворители), если они присутствуют, можно включать в количестве 0,05-30% (вес./вес.), таком как 1-25% (вес./вес.), например, 1-10% (вес./вес.) относительно суммарного веса композиции.Co-solvent (s), if present, can be included in an amount of 0.05-30% (w / w), such as 1-25% (w / w), for example 1-10% (w / w) / weight) relative to the total weight of the composition.

Композиции для введения ингаляцией включают водные, органические или водные/органические смеси, сухой порошок или кристаллические композиции, вводимые в дыхательные пути насосом под давлением или ингалятором, например, резервуарным ингалятором сухого порошка, однодозовым ингалятором сухого порошка, многодозовым ингалятором сухого порошка с отмеренными дозами, назальными ингаляторами или аэрозольными ингаляторами под давлением, небулайзерами или инсуффляторами. Подходящие композиции содержат воду в качестве разбавителя или носителя для данной цели, и их можно обеспечивать с общепринятыми вспомогательными веществами, такими как буферные агенты, регуляторы тоничности и подобные. Водные композиции можно также вводить в нос и другие области дыхательных путей распылением. Данные композиции могут представлять собой водные растворы или суспензии или аэрозоли, доставляемые из упаковок под давлением, таких как ингалятор отмеренных доз, с применением подходящего сжиженного пропеллента.Compositions for administration by inhalation include aqueous, organic or aqueous / organic mixtures, dry powder, or crystalline compositions administered to the respiratory tract by a pressure pump or inhaler, for example, a dry powder reservoir inhaler, a single-dose dry powder inhaler, a multi-dose metered dose dry powder inhaler, nasal or pressurized aerosol inhalers, nebulizers or insufflators. Suitable compositions contain water as a diluent or carrier for this purpose and can be provided with conventional adjuvants such as buffering agents, tonicity regulators, and the like. The aqueous compositions can also be administered to the nose and other areas of the respiratory tract by nebulization. These compositions can be aqueous solutions or suspensions or aerosols delivered from pressurized containers such as a metered dose inhaler using a suitable liquefied propellant.

Композиции для введения местно в нос (например, для лечения ринита) или в легкое включают аэрозольные композиции под давлением и водные композиции, доставляемые в полость носа насосом под давлением. Композиции, которые не находятся под давлением и являются пригодными для введения местно в полость носа, являются особенно интересными. Подходящие композиции содержат воду в качестве разбавителя или носитель для данной цели. Водные композиции для введения в легкое или нос можно обеспечивать с общепринятыми вспомогательными веществами, такими как буферные агенты, регуляторами тоничности и подобными. Водные композиции можно также вводить в нос распылением.Compositions for topical administration to the nose (eg, to treat rhinitis) or to the lung include pressurized aerosol formulations and aqueous formulations delivered to the nasal cavity by a pressurized pump. Compositions that are not pressurized and suitable for topical administration to the nasal cavity are of particular interest. Suitable compositions contain water as a diluent or carrier for this purpose. Aqueous compositions for administration to the lung or nose can be provided with conventional adjuvants such as buffering agents, tonicity regulators, and the like. The aqueous compositions can also be administered by spraying into the nose.

Распылитель жидкости можно обычно применять для доставки жидкой композиции в полости носа. Жидкая композиция может быть водной или неводной, но обычно является водной. Данный распылитель жидкости может иметь дозирующее сопло или дозирующее отверстие, через которое распределяют отмеренную дозу жидкой композиции после приложения пользователем силы на насосный механизм распылителя жидкости. Данные распылители жидкости обычно обеспечивают с резервуаром с несколькими отмеренными дозами жидкой композиции, причем дозы можно наносить последовательным нажатием на насос. Дозирующее сопло или отверстие можно конфигурировать для вставки в ноздри пользователя для дозирования спрея жидкой композиции в полость носа.A liquid nebulizer can generally be used to deliver a liquid composition to the nasal cavity. The liquid composition can be aqueous or non-aqueous, but is usually aqueous. This liquid nebulizer may have a dispensing nozzle or dispensing orifice through which a metered dose of the liquid composition is dispensed after a user applies force to the pumping mechanism of the liquid nebulizer. These liquid nebulizers are typically provided with a reservoir of several metered doses of the liquid composition, the doses being dispensed by successive pump depressions. The dispensing nozzle or opening can be configured to be inserted into the nostrils of a user to dispense a spray of the liquid composition into the nasal cavity.

Порошковые композиции для местной доставки в легкое ингаляцией можно, например, предоставPowder compositions for local pulmonary delivery by inhalation can, for example, be provided

- 9 037513 лять в виде капсул и картриджей, например, из желатина или блистерной упаковки, например из слоистой алюминиевой фольги, для применения в ингаляторе или инсуффляторе. Композиции в виде порошковых смесей обычно содержат порошковую смесь для ингаляции соединения формулы Ic или его фармацевтически приемлемой соли и подходящей порошковой основы (носителя/разбавителя/вспомогательного вещества), такой как моно-, ди- или полисахариды (например, лактоза или крахмал). Композиции в виде сухого порошка могут также содержать, в добавление к лекарственному средству и носителю, дополнительное вспомогательное вещество (например, трехкомпонентный агент, такой как эфир сахара, например, октаацетат целлобиозы, стеарат кальция или стеарат магния.- 9 037513 taken in the form of capsules and cartridges, for example, from gelatin or a blister pack, for example from laminated aluminum foil, for use in an inhaler or insufflator. Powder blend compositions typically contain a powder blend for inhalation of a compound of formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a suitable powder base (carrier / diluent / excipient) such as mono-, di- or polysaccharides (eg lactose or starch). Dry powder compositions may also contain, in addition to the drug and carrier, an additional excipient (eg, a ternary agent such as a sugar ester, eg cellobiose octaacetate, calcium stearate or magnesium stearate.

Фармацевтические композиции, приспособленные для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные растворы для инъекции, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические агенты и растворенные вещества, которые делают композицию изотоничной крови предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспендирующие агенты и загустители. Композиции могут присутствовать в однодозовых или многодозовых контейнерах, например герметичных ампулах и пробирках, и их можно хранить в лиофилизированном состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например, воды для инъекций, непосредственно перед применением. Экстемпоральные инъекционные растворы и суспензии можно получить из стерильных порошков, гранул и таблеток.Pharmaceutical compositions adapted for parenteral administration include aqueous and non-aqueous sterile injectable solutions, which may contain antioxidants, buffers, bacteriostatic agents, and solutes that render the composition isotonic with the blood of the intended recipient; and aqueous and non-aqueous sterile suspensions, which may contain suspending agents and thickening agents. The compositions can be present in single-dose or multi-dose containers, such as sealed ampoules and vials, and can be stored in a lyophilized state requiring only the addition of a sterile liquid carrier, such as water for injection, immediately prior to use. Extemporal injection solutions and suspensions can be prepared from sterile powders, granules and tablets.

Ясно, что в добавление к ингредиентам, приведенным, в частности, выше, композиции могут содержать другие агенты, общепринятые в данной области техники, учитывая тип рассматриваемого состава, например агенты, пригодные для перорального введения могут содержать ароматизаторы.It is clear that in addition to the ingredients cited in particular above, the compositions may contain other agents conventional in the art, given the type of formulation in question, for example, agents suitable for oral administration may contain flavorings.

Соединения формулы Ic и его фармацевтически приемлемые соли можно также формулировать с другими адъювантами, регулируя их активность. Данные композиции могут содержать антитело (антитела) или фрагмент (фрагменты) антител или антигенный компонент, включая, но не ограничиваясь, белок, ДНК, живые или мертвые бактерии и/или вирусы или вирусоподобные частицы, вместе с одним или более компонентами с адъювантной активностью, включая, но не ограничиваясь, соли алюминия, масляные и водные эмульсии, белки теплового шока, препараты и производные липида А, гликолипиды, другие TLR агонисты, такие как CpG ДНК или аналогичные агенты, цитокины, такие как GM-CSF или IL-12, или аналогичные агенты.Compounds of formula Ic and pharmaceutically acceptable salts thereof can also be formulated with other adjuvants to regulate their activity. These compositions may contain antibody (s) or antibody fragment (s) or antigenic component, including but not limited to protein, DNA, live or dead bacteria and / or viruses or virus-like particles, together with one or more components with adjuvant activity, including, but not limited to, aluminum salts, oil and water emulsions, heat shock proteins, lipid A preparations and derivatives, glycolipids, other TLR agonists such as CpG DNA or similar agents, cytokines such as GM-CSF or IL-12, or similar agents.

Терапевтически эффективное количество агента будет зависеть от ряда факторов, включая, например, возраст и вес субъекта, точное заболевание, требующее лечения, и его тяжесть, свойства состава и путь введения, и оно будет, в конце концов, на усмотрение лечащего врача или ветеринара. В частности, субъект, которого лечат, представляет собой млекопитающее, в частности человека.A therapeutically effective amount of an agent will depend on a number of factors, including, for example, the age and weight of the subject, the exact disease requiring treatment and its severity, formulation properties, and route of administration, and will ultimately be at the discretion of the treating physician or veterinarian. In particular, the subject being treated is a mammal, in particular a human.

Агент можно вводить в виде дневной дозы. Данное количество можно вводить в виде единичной дозы в день или более обычно в виде ряда (такого как две, три, четыре, пять или шесть) поддоз в день так, чтобы суммарная дневная доза была аналогичной.The agent can be administered in a daily dose. This amount can be administered in a single dose per day or more, usually in a series (such as two, three, four, five, or six) sub doses per day so that the total daily dose is similar.

Соответственно, количество соединения настоящего изобретения, вводимое согласно настоящему изобретению, будет представлять собой количество, выбранное из от приблизительно 0,01 мг до приблизительно 1 г в день (рассчитанное в виде свободного соединения или соединения, высвобожденного из солевой формы).Accordingly, the amount of the compound of the present invention administered according to the present invention will be an amount selected from about 0.01 mg to about 1 g per day (calculated as free compound or compound released from salt form).

Соединения формулы Ic и их фармацевтически приемлемые соли можно применять отдельно или в комбинации с другими терапевтическими агентами. Соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли и другой фармацевтически активный агент (агенты) можно вводить вместе или отдельно и при введении отдельно введение можно осуществлять одновременно или последовательно, в любом порядке, общепринятым путем в отдельных или комбинированных фармацевтических композициях. Количество соединения (соединений) формулы Ic или их фармацевтически приемлемой соли (солей) и другого фармацевтически активного агента (агентов) и относительный график введения будут выбирать так, чтобы достигать требуемого комбинированного терапевтического эффекта. Соединение (соединение) формулы Ic или его фармацевтически приемлемую соль (соли) и дополнительный терапевтический агент (агенты) можно водить в комбинации одновременным введением в одной фармацевтической композиции, содержащей оба соединения. Альтернативно, комбинацию можно вводить отдельно в различных фармацевтических композициях, причем каждая содержит одно из соединений последовательным способом, где, например, соединение настоящего изобретения вводят первым и другое соединение вводят вторым, и наоборот. Данное последовательное введение может быть близким по времени (например, одновременно) или разделенным во времени. Кроме того, не имеет значения, вводят ли соединения в одной лекарственной форме, например одно соединение можно вводить местно и другое соединение можно вводить перорально. Удобно, чтобы оба соединения вводились перорально.Compounds of formula Ic and pharmaceutically acceptable salts thereof can be used alone or in combination with other therapeutic agents. The compounds of Formula I and their pharmaceutically acceptable salts and other pharmaceutically active agent (s) can be administered together or separately, and when administered separately, administration can be carried out simultaneously or sequentially, in any order, in a conventional manner in separate or combined pharmaceutical compositions. The amount of the compound (s) of formula Ic, or their pharmaceutically acceptable salt (s) and other pharmaceutically active agent (s) and the relative schedule of administration will be selected so as to achieve the desired combined therapeutic effect. A compound (compound) of formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt (s) thereof, and additional therapeutic agent (s) can be administered in combination by simultaneous administration in a single pharmaceutical composition containing both compounds. Alternatively, the combination can be administered separately in different pharmaceutical compositions, each containing one of the compounds in a sequential manner, where, for example, the compound of the present invention is administered first and the other compound is administered second, and vice versa. This sequential introduction can be close in time (eg, simultaneously) or separated in time. In addition, it does not matter if the compounds are administered in a single dosage form, for example, one compound can be administered topically and the other compound can be administered orally. Conveniently, both compounds are administered orally.

Комбинации можно предоставлять в виде комбинационного набора. Под термином комбинационный набор или набор частей, как применяют в настоящем изобретении, подразумевают фармацевтическую композицию или композиции, которые применяют для введения комбинации согласно настоящему изобретению. Когда оба соединения вводят одновременно, комбинационный набор может содержать оба соединения в одной фармацевтической композиции, такой как таблетка, или в отдельных фармацевтических композициях. Когда соединения не вводят одновременно, комбинационный набор будетCombinations can be provided as a combination set. By the term combination kit or kit of parts as used in the present invention is meant a pharmaceutical composition or compositions that are used to administer a combination according to the present invention. When both compounds are administered simultaneously, the combination kit may contain both compounds in one pharmaceutical composition, such as a tablet, or in separate pharmaceutical compositions. When compounds are not administered at the same time, combination dialing will

- 10 037513 содержать каждое соединение в отдельных фармацевтических композициях или в одной упаковке или в раздельных фармацевтических композициях в отдельных упаковках. Комбинационный набор можно также снабжать инструкцией, такой как инструкции о дозировании и введении. Данные инструкции о дозировании и введении могут быть типа, который обеспечивает доктор, например этикетка лекарственного продукта, или они могут быть типа, который обеспечивает доктор, такого как инструкции для пациента.- 10 037513 contain each compound in separate pharmaceutical compositions or in one package or in separate pharmaceutical compositions in separate packages. The combination kit can also be provided with instructions such as instructions for dosing and administration. The dosage and administration instructions can be of the type provided by the doctor, such as a drug product label, or they can be of the type provided by the doctor, such as instructions for the patient.

Когда комбинацию вводят отдельно последовательным способом, где первое вводят первым, и второе вторым или наоборот, данное последовательное введение может быть близким во времени или разделенным во времени. Например, включено введение другого агента через от нескольких минут до нескольких дюжин минут после введения первого агента, и введение другого агента через от нескольких часов до нескольких дней после введения первого агента, где промежуток времени не ограничен. Например, один агент можно вводить один раз в день, и другой агент можно вводить 2 или 3 раза в день или один агент можно вводить один раз в неделю, и другой агент можно вводить один раз в день и подобными. Специалисту в данной области техники ясно, что, если потребуется, другой терапевтический ингредиент (ингредиенты) можно применять в виде солей, например в виде солей щелочных металлов или аминов, или в виде солей присоединения кислоты, или пролекарств, или в виде эфиров, например низших алкильных эфиров, или в виде сольватов, например гидратов, оптимизируя активность и/или растворимость и/или физические характеристики, такие как растворимость, терапевтического ингредиента. Также ясно, что, если потребуется, терапевтические ингредиенты можно применять в оптически чистой форме.When the combination is administered separately in a sequential manner, where the first is administered first and the second is the second, or vice versa, the given sequential administration may be close in time or separated in time. For example, it includes administering another agent several minutes to several dozen minutes after the first agent is administered, and administering the other agent several hours to several days after the first agent is administered, where the time span is not limited. For example, one agent can be administered once a day and the other agent can be administered 2 or 3 times a day, or one agent can be administered once a week and another agent can be administered once a day and the like. The person skilled in the art will understand that, if required, other therapeutic ingredient (s) can be used in the form of salts, for example, in the form of alkali metal or amine salts, or in the form of acid addition salts or prodrugs, or in the form of esters, for example lower alkyl ethers, or in the form of solvates, for example hydrates, optimizing the activity and / or solubility and / or physical characteristics, such as solubility, of the therapeutic ingredient. It is also clear that, if desired, the therapeutic ingredients can be used in optically pure form.

При комбинировании в одной композиции ясно, что два соединения должны быть стабильными и совместимыми друг с другом и другими компонентами композиции и их можно формулировать для введения. При формулировании отдельно их можно предоставлять в любой удобной композиции, в целях удобства, таким способом, который является известным для данных соединений в данной области техники.When combined in one composition, it is clear that the two compounds must be stable and compatible with each other and with the other components of the composition and can be formulated for administration. When formulated separately, they can be provided in any convenient composition, for convenience's sake, in a manner that is known for these compounds in the art.

Когда соединение формулы Ic применяют в комбинации со вторым терапевтическим агентом, активным относительно того же заболевания, состояния или расстройства, доза каждого соединения может отличаться от дозы, когда применяют одно соединение. Специалисту в данной области техники нетрудно определить подходящие дозы.When a compound of formula Ic is used in combination with a second therapeutic agent active against the same disease, condition or disorder, the dose of each compound may differ from the dose when a single compound is used. The person skilled in the art will readily determine suitable dosages.

В одном варианте осуществления пациент в способах и применениях настоящего изобретения представляет собой млекопитающее. В другом варианте осуществления пациент представляет собой человека. Соединения настоящего изобретения являются пригодными в лечении заболеваний и состояний, при которых является полезным модулирование STING, включая рак. В качестве модуляторов иммунного ответа соединения формулы Ic и их фармацевтически приемлемые соли могут быть также пригодными, отдельно, в комбинации или в качестве адъювантов, в лечении заболеваний и расстройств, при которых является полезным модулирование STING.In one embodiment, the patient in the methods and uses of the present invention is a mammal. In another embodiment, the patient is a human. The compounds of the present invention are useful in the treatment of diseases and conditions in which STING modulation is beneficial, including cancer. As modulators of the immune response, the compounds of formula Ic and their pharmaceutically acceptable salts may also be useful, alone, in combination or as adjuvants, in the treatment of diseases and disorders in which modulation of STING is beneficial.

В одном аспекте заболевание или состояние, которое лечат, представляет собой рак. Примеры раковых заболеваний и состояний, при которых соединение формулы Ic или его фармацевтически приемлемые соли могут обладать потенциально полезными противоопухолевыми эффектами, включают рак легкого, костной ткани, поджелудочной железы, кожи, головы, шеи, матки, яичников, желудка, толстой кишки, молочной железы, пищевода, тонкой кишки, кишечника, эндокринной системы, щитовидной железы, паращитовидной железы, надпочечной железы, уретры, простаты, полового члена, яичек, мочеточника, мочевого пузыря, почек или печени; рак прямой кишки; рак анальной области; рак фаллопиевых труб, эндометрия, шейки матки, влагалища, вульвы, почечных лоханок, почечных клеток; саркому мягких тканей; миксому; рабдомиому; фиброму; липому; тератому; холангиокарциному; гепатобластому; ангиосаркому; гемагиому; гепатому; фибросаркому; хондросаркому; миелому; хронический или острый лейкоз; лимфоцитарную лимфому; первичную лимфому ЦНС; неоплазмы ЦНС; опухоли спинной оси; плоскоклеточный рак; синовиальную саркому; злокачественную мезотелиому плевры; глиому ствола головного мозга; аденому гипофиза; аденому бронхов; хондроматозную гамартому; мезотелиому; болезнь Ходжкина; или комбинацию одного или более из вышеупомянутых типов рака.In one aspect, the disease or condition being treated is cancer. Examples of cancers and conditions in which a compound of Formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, may have potentially beneficial anti-tumor effects include cancer of the lung, bone, pancreas, skin, head, neck, uterus, ovary, stomach, colon, breast. , esophagus, small intestine, intestine, endocrine system, thyroid, parathyroid, adrenal, urethra, prostate, penis, testicles, ureter, bladder, kidney, or liver; rectal cancer; anal cancer; cancer of the fallopian tubes, endometrium, cervix, vagina, vulva, renal pelvis, renal cells; sarcoma of soft tissues; myxome; rhabdomyoma; fibroma; lipoma; teratoma; cholangiocarcinoma; hepatoblastoma; angiosarcoma; hemagioma; hepatoma; fibrosarcoma; chondrosarcoma; myeloma; chronic or acute leukemia; lymphocytic lymphoma; primary CNS lymphoma; neoplasms of the central nervous system; dorsal axis tumors; squamous cell carcinoma; synovial sarcoma; malignant pleural mesothelioma; brainstem glioma; pituitary adenoma; bronchial adenoma; chondromatous hamartoma; mesothelioma; Hodgkin's disease; or a combination of one or more of the above types of cancer.

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы Ic или его фармацевтически приемлемой соли, для применения в лечении рака.In a further aspect, the present invention relates to a compound of formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, for use in the treatment of cancer.

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы Ic или его фармацевтически приемлемой соли в получении лекарственного средства для лечения рака.In a further aspect, the present invention relates to the use of a compound of formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, in the manufacture of a medicament for the treatment of cancer.

Соединение настоящего изобретения можно применять с другими терапевтическими способами лечения рака, например в противоопухолевой терапии, комбинационной терапии с ингибиторами иммунных контрольных точек, другими химиотерапевтическими, гормональными агентами, агентами на основе антител, а также хирургическим и/или радиационным лечением.The compound of the present invention can be used with other therapeutic methods for treating cancer, for example, anticancer therapy, combination therapy with immune checkpoint inhibitors, other chemotherapeutic, hormonal, antibody-based agents, and surgical and / or radiation treatments.

Недавно было показано, что ингибиторы иммунных контрольных точек, такие как гуманизированные антитела к PD-1, PD-L1 и CTLA4, являются крайне успешными в лечении нескольких типов метастатических раков, включая меланому, немелкоклеточный рак легких, рак почек и рак мочевого пузыря (Sharma and Allison, 2015, Science, 348, 56). Однако еще только небольшой процент пациентов с ракомRecently, immune checkpoint inhibitors such as humanized antibodies to PD-1, PD-L1 and CTLA4 have been shown to be extremely successful in the treatment of several types of metastatic cancers, including melanoma, non-small cell lung cancer, kidney cancer, and bladder cancer (Sharma and Allison, 2015, Science, 348, 56). However, there is still only a small percentage of patients with cancer

- 11 037513 получают пользу от терапии с применением ингибиторов контрольной точки, отчасти, поскольку недостаточное количество противоопухолевых иммунных клеток, таких как CD8 Т-клетки, генерируется и/или проникает в опухоли. Активация цГ АС-STING пути активирует противоопухолевый иммунитет, включая продукцию и инфильтрацию опухолеспецифических CD8 Т-клеток. Следовательно, предполагается, что цГ АМФ аналоги будут функционировать синергически с ингибиторами иммунных контрольных точек и комбинационные терапии, вероятно, будут давать терапевтическую пользу большему проценту пациентов с раком.- 11,037513 benefit from checkpoint inhibitor therapy, in part because insufficient numbers of anti-tumor immune cells, such as CD8 T cells, are generated and / or invaded into tumors. Activation of the cG AC-STING pathway activates antitumor immunity, including the production and infiltration of tumor-specific CD8 T cells. Therefore, it is expected that cG AMP analogs will function synergistically with immune checkpoint inhibitors and that combination therapies are likely to provide therapeutic benefits to a larger percentage of cancer patients.

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы Ic или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один ингибитор иммунных контрольных точек, в получении лекарственного средства для лечения рака.In a further aspect, the present invention relates to the use of a pharmaceutical composition comprising a compound of Formula Ic, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and at least one immune checkpoint inhibitor, in the manufacture of a medicament for the treatment of cancer.

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы Ic или его фармацевтически приемлемую соль, по меньшей мере один ингибитор иммунных контрольных точек и один или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей и вспомогательных веществ.In a further aspect, the present invention relates to a pharmaceutical composition comprising a compound of formula Ic or a pharmaceutically acceptable salt thereof, at least one immune checkpoint inhibitor and one or more pharmaceutically acceptable carriers, diluents and excipients.

Облучение опухолей, особенно высокодозированное облучение, такое как стереотаксическая терапия (SBRT), уничтожает опухолевые клетки с высокой степенью точности. Мертвые опухолевые клетки не только обеспечивают опухолевые антигены, генерируя специфические для опухоли цитотоксические Т-клетки, но также высвобождает опухолевую ДНК в антигенпрезентирующие клетки, активируя цГАС-STING путь (Deng et al., 2014, Immunity, 41, 843). Следовательно, предполагают, что цГАМФ аналоги будут функционировать синергически с радиационными терапиями, принося пользу большему проценту пациентов с раком.Irradiation of tumors, especially high-dose radiation such as stereotactic therapy (SBRT), destroys tumor cells with a high degree of accuracy. Dead tumor cells not only provide tumor antigens by generating tumor-specific cytotoxic T cells, but also release tumor DNA into antigen-presenting cells, activating the cGAS-STING pathway (Deng et al., 2014, Immunity, 41, 843). Therefore, the cGAMP analogs are expected to function synergistically with radiation therapies, benefiting a larger percentage of cancer patients.

Соединения формулы Ic можно получить способами, известными в области органического синтеза, как показано на схемах ниже и/или в конкретных примерах, описанных ниже. Во всех из данных способов ясно, что защитные группы для чувствительных или реакционноспособных групп можно применять, при необходимости, согласно общим принципам химии. С защитными группами манипулируют согласно стандартным способам органического синтеза (T.W. Green and P.G.M. Wuts (1999), Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd edition, John Wiley & Sons). Данные группы удаляют на подходящей стадии получения соединений, применяя способы, которые являются известными специалисту в данной области техники. Выбор способов, а также условий реакций и порядка их выполнения, должны соответствовать получению соединений формулы Ic.Compounds of formula Ic can be prepared by methods known in the art of organic synthesis as shown in the Schemes below and / or in the specific examples described below. In all of these methods, it is clear that protecting groups for sensitive or reactive groups can be used, if necessary, according to general principles of chemistry. Since protective groups are manipulated according to standard methods of organic synthesis (TW Green and PGM Wuts (1999), Protective Groups in Organic Synthesis, 3 ^{rd edition, John Wiley & Sons)} . These groups are removed at a suitable stage in the preparation of the compounds using methods that are known to the person skilled in the art. The choice of methods, as well as the reaction conditions and the order of their implementation, should correspond to the preparation of compounds of formula Ic.

Ясно, что примеры и варианты осуществления, описанные в настоящем изобретении, приведены только для иллюстративных целей и что различные модификации или изменения в их свете будут приходить в голову специалиста в данной области техники, и их следует включить в сущность и сферу действия данной заявки и объем прилагаемой формулы изобретения.It is clear that the examples and embodiments described in the present invention are given for illustrative purposes only and that various modifications or changes in their light will occur to the person skilled in the art and should be included within the spirit and scope of this application and the scope. of the attached claims.

Следующий список обеспечивает определения определенных сокращений, как применяют в настоящем изобретении. Ясно, что список не является исчерпывающим, но значение данных сокращений, не определенных ниже в настоящем изобретении, будут очевидны специалисту в данной области техники:The following list provides definitions of certain abbreviations as used in the present invention. It is clear that the list is not exhaustive, but the meaning of these abbreviations, not defined below in the present invention, will be obvious to a person skilled in the art:

Ас представляет собой ацетил;Ac is acetyl;

АсОН представляет собой уксусную кислоту;AcOH is acetic acid;

Ac₂O представляет собой уксусный ангидрид;Ac ₂ O is acetic anhydride;

AIBN представляет собой 2,2'-азо-бис-изобутиронитрил;AIBN is 2,2'-azo-bis-isobutyronitrile;

Bn представляет собой бензил;Bn is benzyl;

BSA представляет собой N,O-бис-(mриметилсилил)ацетамид;BSA is N, O-bis- (mrimethylsilyl) acetamide;

BSTFA представляет собой N,О-бис-(триметилсилил)трифторацетамид;BSTFA is N, O-bis (trimethylsilyl) trifluoroacetamide;

Bu представляет собой бутил;Bu is butyl;

Bz представляет собой бензоил;Bz is benzoyl;

CAN представляет собой нитрат церия аммония;CAN is cerium ammonium nitrate;

СЕ представляет собой 2-цианоэтил;CE is 2-cyanoethyl;

DCA представляет собой дихлоруксусную кислоту;DCA is dichloroacetic acid;

DCM представляет собой дихлорметан;DCM is dichloromethane;

DDTT представляет собой 1,2,4-дитиазол-5-тион;DDTT is 1,2,4-dithiazole-5-thione;

DEAD представляет собой диэтилазодикарбоксилат;DEAD is diethyl azodicarboxylate;

DIAD представляет собой диизопропилазодикарбоксилат;DIAD is diisopropyl azodicarboxylate;

DIPEA представляет собой N,N-диизопропилэтиламин;DIPEA is N, N-diisopropylethylamine;

DMAP представляет собой 4-(диметиламино)пиридин;DMAP is 4- (dimethylamino) pyridine;

DMF представляет собой N,N-диметилформамид;DMF is N, N-dimethylformamide;

DMOCP представляет собой 2-хлор-5,5-диметил-1,3,2-диоксафосфоринана 2-оксид;DMOCP is 2-chloro-5,5-dimethyl-1,3,2-dioxaphosphorinane 2-oxide;

ДМСО представляет собой диметилсульфоксид;DMSO is dimethyl sulfoxide;

DMTr представляет собой 4,4'-диметокситритил;DMTr is 4,4'-dimethoxytrityl;

EtOAc представляет собой этилацетат;EtOAc is ethyl acetate;

- 12 037513- 12 037513

EtOH представляет собой этанол;EtOH is ethanol;

НМРТ представляет собой триамид гексаметилфосфора;HMRT is hexamethylphosphorus triamide;

HPLC представляет собой высокоэффективную жидкостную хроматографию;HPLC is high performance liquid chromatography;

ibu представляет собой изобутирил;ibu is isobutyryl;

IBX представляет собой 2-йодоксибензойную кислоту;IBX is 2-iodoxybenzoic acid;

Imid представляет собой имидазол;Imid is imidazole;

ⁱPr представляет собой изопропил; ⁱ Pr is isopropyl;

KOH представляет собой гидроксид калия;KOH is potassium hydroxide;

Me представляет собой метил;Me is methyl;

MeCN представляет собой ацетонитрил;MeCN is acetonitrile;

МеОН представляет собой метанол;MeOH is methanol;

МТВЕ представляет собой метил трет-бутиловый эфир;MTBE is methyl tert-butyl ether;

Ms представляет собой метансульфонил;Ms is methanesulfonyl;

Pd/C представляет собой палладий на активированном угле;Pd / C is palladium on activated carbon;

NIS представляет собой N-йодсукцинимид;NIS is N-iodosuccinimide;

NPE представляет собой 2-(4-нитрофенил)этил;NPE is 2- (4-nitrophenyl) ethyl;

РЕ представляет собой петролейный эфир;PE is petroleum ether;

Ph представляет собой фенил;Ph is phenyl;

РМВ представляет собой п-метоксибензил;PMB is p-methoxybenzyl;

PPh₃ представляет собой трифенилфосфин;PPh ₃ is triphenylphosphine;

Ру представляет собой пиридин;Ru is pyridine;

TBAF представляет собой фторид тетра-н-бутиламмония;TBAF is tetra-n-butylammonium fluoride;

TBAI представляет собой йодид тетрабутиламмония;TBAI is tetrabutylammonium iodide;

TBDPS представляет собой трет-бутилдифенилсилил;TBDPS is tert-butyldiphenylsilyl;

ТВНР представляет собой трет-бутилгидропероксид;TBHP is tert-butyl hydroperoxide;

TBS представляет собой трет-бутилдиметилсилил;TBS is tert-butyldimethylsilyl;

TCDI представляет собой 1,1'-тиокарбонилдимидазол;TCDI is 1,1'-thiocarbonyldimidazole;

TDA-1 представляет собой трис-[2-(2-метоксиэтокси)этил]амин;TDA-1 is tris- [2- (2-methoxyethoxy) ethyl] amine;

TEA представляет собой триэтиламин;TEA is triethylamine;

Tf представляет собой трифторметансульфонил;Tf is trifluoromethanesulfonyl;

TFA представляет собой трифторуксусную кислоту;TFA is trifluoroacetic acid;

TFE представляет собой 2,2,2-трифторэтил;TFE is 2,2,2-trifluoroethyl;

THF представляет собой тетрагидрофуран;THF is tetrahydrofuran;

TIPS представляет собой триизопропилсилил;TIPS is triisopropylsilyl;

TLC представляет собой тонкослойную хроматографию;TLC is thin layer chromatography;

TMS представляет собой триметилсилил;TMS is trimethylsilyl;

TMSOTf представляет собой триметилсилилтрифторметансульфонат;TMSOTf is trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate;

Tol представляет собой п-толуоил;Tol is p-toluoyl;

Tr представляет собой тритил.Tr is trityl.

Получение промежуточных веществGetting intermediate substances

Получение В1:Getting B1:

CICI

нn

- 13 037513- 13 037513

Стадия 1. Ацетонид 2Stage 1. Acetonide 2

К суспензии D-рибозы (1) (160 г, 1,07 моль) в ацетоне (2,0 л) добавляли концентрированную серную кислоту (10,7 г, 107 ммоль, 5,8 мл) при 27°С по каплям. После перемешивания в течение 12 ч добавляли твердый бикарбонат натрия (100 г). Затем смесь фильтровали и фильтрат концентрировали, получая неочищенный 2 (215,0 г).To a suspension of D-ribose (1) (160 g, 1.07 mol) in acetone (2.0 L) was added concentrated sulfuric acid (10.7 g, 107 mmol, 5.8 ml) at 27 ° C dropwise. After stirring for 12 hours, solid sodium bicarbonate (100 g) was added. The mixture was then filtered and the filtrate was concentrated to give crude 2 (215.0 g).

Стадия 2. Силиловый эфир 3Stage 2. Silyl ether 3

К раствору неочищенного 2 (215 г, 1,13 моль) в DCM (1,5 л) добавляли TBSCl (170 г, 1,13 моль) и TEA (172 г, 1,69 моль) при 0°С. После перемешивания при 27°С в течение 12 ч смесь фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/100-1/50), получая 3 в виде бесцветного масла (285 г, 83% выход).To a solution of crude 2 (215 g, 1.13 mol) in DCM (1.5 L) was added TBSCl (170 g, 1.13 mol) and TEA (172 g, 1.69 mol) at 0 ° C. After stirring at 27 ° C for 12 h, the mixture was filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 100-1 / 50) to give 3 as a colorless oil (285 g, 83% yield).

Стадия 3. Деазапурин 4Stage 3. Deazapurin 4

К раствору 3 (60,0 г, 197,08 ммоль) и тетрахлорида углерода (67,3 г, 438 ммоль, 42 мл) в THF (1,2 л) добавляли НМРТ (63,0 г, 386 ммоль, 7 0 мл) по каплям при -78°С и перемешивали при 27°С в течение 2 ч. К другому раствору 6-хлор-7-деазапурина (24,2 г, 158 ммоль) и KOH (16,6 г, 296 ммоль) в MeCN (1,2 л) добавляли TDA-1 (6,37 г, 19,7 ммоль) при 27°С с последующим добавлением THF раствора, полученного выше. После перемешивания при 27°С в течение 12 ч реакционную смесь фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/50-1/10), получая 4 в виде желтого масла (15,3 г, 18% выход).To a solution of 3 (60.0 g, 197.08 mmol) and carbon tetrachloride (67.3 g, 438 mmol, 42 ml) in THF (1.2 L) was added HMPT (63.0 g, 386 mmol, 70 ml) dropwise at -78 ° C and stirred at 27 ° C for 2 h. To another solution of 6-chloro-7-deazapurine (24.2 g, 158 mmol) and KOH (16.6 g, 296 mmol) in MeCN (1.2 L) was added TDA-1 (6.37 g, 19.7 mmol) at 27 ° C followed by the addition of the THF solution obtained above. After stirring at 27 ° C for 12 h, the reaction mixture was filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 50-1 / 10) to give 4 as a yellow oil (15.3 g, 18% yield ).

Стадия 4. Аденин 5Stage 4. Adenine 5

Раствор 4 (28,6 г, 64,9 ммоль) в диоксане (150 мл) и водный раствор гидроксида аммония (500 мл) перемешивали при 120°С в течение 30 ч в герметичном автоклаве. Затем летучие компоненты удаляли, и водный раствор экстрагировали ЕА (3x300 мл). Объединенные органические слои промывали соляным раствором (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и частично очищали колоночной хроматографией на силикагеле (EA/DCM = 1/1), получая желтую пену (9,65 г). Затем данный остаток растворяли в THF (50 мл) и обрабатывали тригидратом TBAF (10,9 г, 34,4 ммоль) при 27°С. После перемешивания в течение 2 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (EA/DCM = 1/1-7/1), получая 5 (5,56 г, 79% выход) в виде желтого твердого остатка.A solution of 4 (28.6 g, 64.9 mmol) in dioxane (150 ml) and an aqueous solution of ammonium hydroxide (500 ml) were stirred at 120 ° C for 30 hours in a sealed autoclave. Then the volatiles were removed and the aqueous solution was extracted with EA (3x300 ml). The combined organic layers were washed with brine (100 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and partially purified by silica gel column chromatography (EA / DCM = 1/1) to give a yellow foam (9.65 g). This residue was then dissolved in THF (50 ml) and treated with TBAF trihydrate (10.9 g, 34.4 mmol) at 27 ° C. After stirring for 2 hours, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / DCM = 1 / 1-7 / 1) to give 5 (5.56 g, 79% yield) as a yellow solid.

Стадия 5. Бензоат 6Stage 5. Benzoate 6

К раствору 5 (7,26 г, 23,7 ммоль) в DCM (60 мл) добавляли Imid (4,84 г, 71,1 ммоль) и TBSCl (5,36 г, 35,6 ммоль) при 27°С. После перемешивания при 27°С в течение 1,5 ч добавляли воду (100 мл) и смесь экстрагировали DCM (200 мл). Органический слой промывали соляным раствором (100 мл), сушили надTo a solution of 5 (7.26 g, 23.7 mmol) in DCM (60 ml) were added Imid (4.84 g, 71.1 mmol) and TBSCl (5.36 g, 35.6 mmol) at 27 ° C. ... After stirring at 27 ° C for 1.5 h, water (100 ml) was added and the mixture was extracted with DCM (200 ml). The organic layer was washed with brine (100 ml), dried over

- 14 037513 безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали, получая неочищенный TBS-5. К раствору неочищенного TBS-5, полученного выше в DCM (100 мл), добавляли бензоилхлорид (5,14 г, 36,6 ммоль) при 27°С. После перемешивания в течение 12 ч добавляли воду (200 мл) и смесь экстрагировали DCM (500 мл). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/50-1/10), получая 6 в виде желтой пены (8,12 г, 64% выход).- 14 037513 with anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated to give crude TBS-5. To a solution of the crude TBS-5 obtained above in DCM (100 ml) was added benzoyl chloride (5.14 g, 36.6 mmol) at 27 ° C. After stirring for 12 h, water (200 ml) was added and the mixture was extracted with DCM (500 ml). The organic layer was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 50-1 / 10) to give 6 as a yellow foam (8.12 g, 64% yield).

Стадия 6. В1Stage 6. B1

Раствор 6 (15,2 г, 28,9 ммоль) в TFA (90 мл) и DCM (20 мл) перемешивали при 27°С в течение 12 ч.A solution of 6 (15.2 g, 28.9 mmol) in TFA (90 ml) and DCM (20 ml) was stirred at 27 ° C for 12 h.

на силикагелеon silica gel

Затем летучие компоненты удаляли, и остаток очищали колоночной хроматографией (MeOH/DCM = 1/100-1/10) до В1 в виде желтого твердого остатка (10,16 г, 95% выход).The volatiles were then removed and the residue was purified by column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 100-1 / 10) to B1 as a yellow solid (10.16 g, 95% yield).

Получение В2:Obtaining B2:

Стадия 1. Анилин 8Stage 1. Aniline 8

К раствору 5-амино-4,6-дихлорпиримидина (63,0 г, 384 ммоль) в n-BuOH (300,0 мл) добавляли п-метоксибензиламин (58,0 г, 423 ммоль, 55 мл) и DIPEA (99,3 г, 768 ммоль, 134 мл). После перемешивания при 100-110°С в течение 15 ч летучие компоненты удаляли перед добавлением МТВЕ (100 мл). Твердый остаток собирали фильтрованием и промывали ЕА, получая 8 в виде грязно-белого твердого остатка (55,0 г, 54% выход). (MS: [M+H]+ 265,0).To a solution of 5-amino-4,6-dichloropyrimidine (63.0 g, 384 mmol) in n-BuOH (300.0 ml) were added p-methoxybenzylamine (58.0 g, 423 mmol, 55 ml) and DIPEA (99 , 3 g, 768 mmol, 134 ml). After stirring at 100-110 ° C for 15 hours, the volatiles were removed before MTBE (100 ml) was added. The solid was collected by filtration and washed with EA to give 8 as an off-white solid (55.0 g, 54% yield). (MS: [M + H] + 265.0).

Стадия 2. Азапурин 9Stage 2. Azapurin 9

К раствору 8 (10,0 г, 37,8 ммоль) в смеси DCM (200 мл), АсОН (100 мл) и воды (100 мл) добавляли нитрит натрия (2,87 г, 41,6 ммоль, 2,3 мл) при 0°С. После перемешивания при 0-25°С в течение 1 ч добавляли DCM (30 мл) и насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл). Затем слои разделяли, и водную фазу экстрагировали DCM (3x150 мл). Объединенные органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/3), получая 9 в виде светло-желтого твердого остатка (6,0 г, 88% выход). (MS: [M+H]+ 276,0).To a solution of 8 (10.0 g, 37.8 mmol) in a mixture of DCM (200 ml), AcOH (100 ml) and water (100 ml) was added sodium nitrite (2.87 g, 41.6 mmol, 2.3 ml) at 0 ° C. After stirring at 0-25 ° C for 1 h, DCM (30 ml) and saturated aqueous sodium bicarbonate solution (30 ml) were added. Then the layers were separated and the aqueous phase was extracted with DCM (3x150 ml). The combined organic phases were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1/3) to give 9 as a light yellow solid (6.0 g, 88% yield). (MS: [M + H] + 276.0).

Стадия 3. Азааденин 10Stage 3. Azaadenine 10

К раствору 9 (6,0 г, 21,8 ммоль) в 1,4-диоксане (30 мл) добавляли водный раствор гидроксида аммония (30 мл). После перемешивания при 30-40°С в течение 5 ч твердый остаток собирали фильтрованием,To a solution of 9 (6.0 g, 21.8 mmol) in 1,4-dioxane (30 ml) was added an aqueous ammonium hydroxide solution (30 ml). After stirring at 30-40 ° C for 5 hours, the solid residue was collected by filtration,

- 15 037513 получая 10 в виде белого твердого остатка (4,0 г, 70% выход). (MS: [M+H]+ 257,1). Стадия 4. Азааденин 1115 037513 to give 10 as a white solid (4.0 g, 70% yield). (MS: [M + H] + 257.1). Stage 4. Azaadenine 11

К раствору 10 (17,0 г, 66,3 ммоль) в Ру (100 мл) добавляли DMAP (8,92 г, 73,0 ммоль), Imid (13,6 г, 199 ммоль) и бензоилхлорид (14,0 г, 99,5 ммоль, 11,6 мл). После перемешивания при 110-120°С в течение 18 ч летучие компоненты удаляли и добавляли DCM (300 мл) и воду (300 мл). Слои разделяли, и органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1:1), получая 11 в виде грязно-белого твердого остатка (17,0 г, 68% выход). (MS: [M+H]+ 361,2).DMAP (8.92 g, 73.0 mmol), Imid (13.6 g, 199 mmol) and benzoyl chloride (14.0 d, 99.5 mmol, 11.6 ml). After stirring at 110-120 ° C for 18 hours, the volatiles were removed and DCM (300 ml) and water (300 ml) were added. The layers were separated and the organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1: 1) to give 11 as an off-white solid (17.0 g, 68% yield) ... (MS: [M + H] + 361.2).

Стадия 5. Азааденин 12Stage 5. Azaadenine 12

К суспензии 11 (6,40 г, 17,8 ммоль) в MeCN (60 мл) добавляли раствор CAN (29,2 г, 53,3 ммоль) и бикарбоната натрия (1,49 г, 17,76 ммоль) в воде (60 мл) при 0°С. После перемешивания при 0-25°С в течение 12 ч смесь нейтрализовали бикарбонатом натрия до ~рН 7. Твердый остаток собирали фильтрованием, получая 12 (2,6 г, 57% выход). (MS: [M+H]+ 241,1).To a suspension of 11 (6.40 g, 17.8 mmol) in MeCN (60 ml) was added a solution of CAN (29.2 g, 53.3 mmol) and sodium bicarbonate (1.49 g, 17.76 mmol) in water (60 ml) at 0 ° C. After stirring at 0-25 ° C for 12 hours, the mixture was neutralized with sodium bicarbonate to ~ pH 7. The solid residue was collected by filtration to give 12 (2.6 g, 57% yield). (MS: [M + H] + 241.1).

Стадия 6. Азааденозин 14Stage 6. Azaadenosine 14

К раствору 12 (9,30 г, 38,7 ммоль) и 13 (20,5 г, 40,7 ммоль) в MeCN (350 мл) добавляли хлорид олова(IV) (30,3 г, 116 ммоль, 13,6 мл) при 0°С. После перемешивания при 0-25°С в течение 24 ч реакционную смесь выливали в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (300 мл). Твердый остаток отфильтровывали и промывали водой (100 мл). Фильтрат экстрагировали DCM (4x150 мл) иобъединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (EA/DCM = 1/10), получая 14 в виде грязно-белой смолы (6,10 г, 21% выход). (MS: [M+H]⁺ 684,9).To a solution of 12 (9.30 g, 38.7 mmol) and 13 (20.5 g, 40.7 mmol) in MeCN (350 ml) was added tin (IV) chloride (30.3 g, 116 mmol, 13, 6 ml) at 0 ° C. After stirring at 0-25 ° C for 24 h, the reaction mixture was poured into saturated aqueous sodium bicarbonate solution (300 ml). The solid residue was filtered off and washed with water (100 ml). The filtrate was extracted with DCM (4x150 ml) and the combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / DCM = 1/10) to give 14 as an off-white gum (6.10 g, 21 % output). (MS: [M + H] ⁺ 684.9).

Стадия 7. В2Stage 7. B2

К раствору 14 (6,1 г, 8,9 ммоль) в смеси THF (35 мл) и МеОН (28 мл) добавляли водный раствор гидроксида лития (1 М, 16,0 мл) при 0°С. После перемешивания при 0-25°С в течение 3 ч смесь нейтрализовали водным раствором уксусной кислоты (1 М) до ~рН 7 и затем концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20), получая В2 в виде грязно-белого твердого остатка (2,9 г, 87% выход). (MS: [M+H]⁺ 373,1).To a solution of 14 (6.1 g, 8.9 mmol) in a mixture of THF (35 ml) and MeOH (28 ml) was added an aqueous solution of lithium hydroxide (1 M, 16.0 ml) at 0 ° C. After stirring at 0-25 ° C for 3 h, the mixture was neutralized with aqueous acetic acid (1 M) to ~ pH 7 and then concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1/20) to give B2 as dirty -white solid residue (2.9 g, 87% yield). (MS: [M + H] ⁺ 373.1).

Получение DMTr-ВЗ:Obtaining DMTr-OT:

- 16 037513- 16 037513

Стадия 1. Диол 16Stage 1. Diol 16

К раствору 15 (880 мг, 2,5 ммоль) в Ру (10 мл) добавляли раствор DMTrCl (940 мг, 2,6 ммоль) в Ру (5 мл). После перемешивания в течение 3 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20-1/10), получая 16 в виде белой пены (1,23 г, 75% выход). (MS: [M+H]+ 656,2).To a solution of 15 (880 mg, 2.5 mmol) in Py (10 ml) was added a solution of DMTrCl (940 mg, 2.6 mmol) in Py (5 ml). After stirring for 3 h, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 20-1 / 10) to give 16 as a white foam (1.23 g, 75% yield). (MS: [M + H] + 656.2).

Стадия 2. Спирт 17Stage 2. Alcohol 17

К раствору 16 (900 мг, 1,4 ммоль) и Imid (280 мг, 4,15 ммоль) в Ру (15 мл) добавляли TBSCl (310 мг, 2,05 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч летучие компоненты удаляли и остаток растворяли в DCM (50 мл), промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и соляным раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/толуол = 1/3-2/3), получая 17 в виде белого твердого остатка (480 мг, 45% выход). (MS: [M+H]+ 770,2).To a solution of 16 (900 mg, 1.4 mmol) and Imid (280 mg, 4.15 mmol) in Py (15 ml) was added TBSCl (310 mg, 2.05 mmol). After stirring for 4 h, the volatiles were removed and the residue was dissolved in DCM (50 ml), washed with saturated aqueous sodium bicarbonate solution and brine, dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / toluene = 1/3 -2/3) to give 17 as a white solid (480 mg, 45% yield). (MS: [M + H] + 770.2).

Стадия 3. Тиокарбамат 18Stage 3. Thiocarbamate 18

К раствору 17 (500 мг, 0,65 ммоль) в DMF (6 мл) добавляли TCDI (350 мг, 1,94 ммоль). После перемешивания в течение 2 дней добавляли ЕА (40 мл) и воду (25 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом 3 (2x5 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), соляным раствором (2x20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали, получая неочищенный 18. (MS: [M+H]+ 880,2).To a solution of 17 (500 mg, 0.65 mmol) in DMF (6 ml) was added TCDI (350 mg, 1.94 mmol). After stirring for 2 days, EA (40 ml) and water (25 ml) were added and the layers were separated. The aqueous layer was extracted with ethyl acetate 3 (2x5 ml). The combined organic layers were washed with water (20 ml), brine (2x20 ml), dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to give crude 18. (MS: [M + H] + 880.2).

Стадия 4. Силиловый эфир 19Stage 4. Silyl ether 19

К дегазированному раствору неочищенного 18 в толуоле (10 мл) при 110°С добавляли дегазированный раствор AIBN (57 мг, 0,34 ммоль), гидрид трибутилолова (0,51 мл, 1,94 ммоль) в толуоле (3 мл) в течение 30 мин. После перемешивания при 110°С в течение 6 ч смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан = 1/5-2/1), получая 19 в виде желтого масла (195 мг, 40% выход на две стадии). (MS: [M+H]+ 754,2).To a degassed solution of crude 18 in toluene (10 ml) at 110 ° C was added a degassed solution of AIBN (57 mg, 0.34 mmol), tributyltin hydride (0.51 ml, 1.94 mmol) in toluene (3 ml) over 30 minutes. After stirring at 110 ° C for 6 h, the mixture was cooled to room temperature, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / hexane = 1 / 5-2 / 1) to give 19 as a yellow oil (195 mg, 40% yield in two stages). (MS: [M + H] + 754.2).

Стадия 5. DMTr-B3Stage 5. DMTr-B3

К раствору 19 (190 мг, 0,252 ммоль) в THF (5 мл) добавляли TBAF (1 M в THF, 0,50 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч добавляли воду (5 мл) и смесь экстрагировалиTo a solution of 19 (190 mg, 0.252 mmol) in THF (5 ml) was added TBAF (1 M in THF, 0.50 ml). After stirring at room temperature for 2 h, water (5 ml) was added and the mixture was extracted

- 17 037513- 17 037513

ЕА (3x8 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20), получая DMTr-В3 в виде белого твердого остатка (132 мг,EA (3x8 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1/20) to give DMTr-B3 as a white solid (132 mg,

82% выход). (MS: [M+H]+ 640,2).82% yield). (MS: [M + H] + 640.2).

Получение В4:Getting B4:

Стадия 1. Спирт 21Stage 1. Alcohol 21

К раствору 20 (12,8 г, 67,0 ммоль) в Ру (300 мл) добавляли TBDPSCl (21,0 мл, 80,4 ммоль). После перемешивания в течение 3 ч добавляли МеОН (25 мл) и смесь концентрировали. Остаток растворяли в диэтиловом эфире (200 мл), промывали водным раствором бикарбоната натрия (10%, 100 мл) и водой (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (диэтиловый эфир/РЕ = 1/2), получая 21 в виде белого твердого остатка (27,2 г, 95% выход). (MS: [M+Na]+ 451,2).To a solution of 20 (12.8 g, 67.0 mmol) in Py (300 ml) was added TBDPSCl (21.0 ml, 80.4 mmol). After stirring for 3 h, MeOH (25 ml) was added and the mixture was concentrated. The residue was dissolved in diethyl ether (200 ml), washed with aqueous sodium bicarbonate solution (10%, 100 ml) and water (100 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (diethyl ether / PE = 1/2) to give 21 as a white solid (27.2 g, 95% yield). (MS: [M + Na] + 451.2).

Стадия 2. Спирт 22Stage 2. Alcohol 22

Раствор 21 (27,2 г, 63,7 ммоль) в ДМСО (200 мл) и Ас₂О (50 мл) перемешивали в течение 16 ч перед выливанием на ледяную воду (200 мл). Смесь экстрагировали диэтиловым эфиром (3x100 мл) и объединенные органические слои промывали водным раствором бикарбоната натрия (10%, 100 мл) и водой (100 мл) и концентрировали. Затем остаток растворяли в МеОН (250 мл) и DCM (250 мл) при 0°С с последующим добавлением боргидрида натрия (12,0 г) 10 порциями. После перемешивания в течение 5 мин добавляли воду (100 мл) и слои разделяли. Затем органический слой концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (диэтиловый эфир/РЕ = 1/2), получая 22 в виде белого твердого остатка (20,4 г, 75% выход на две стадии). (MS: [M+Na]+ 451,2).A solution of 21 (27.2 g, 63.7 mmol) in DMSO (200 ml) and Ac ₂ O (50 ml) was stirred for 16 h before being poured onto ice water (200 ml). The mixture was extracted with diethyl ether (3x100 ml) and the combined organic layers were washed with aqueous sodium bicarbonate solution (10%, 100 ml) and water (100 ml) and concentrated. The residue was then dissolved in MeOH (250 ml) and DCM (250 ml) at 0 ° C. followed by the addition of sodium borohydride (12.0 g) in 10 portions. After stirring for 5 min, water (100 ml) was added and the layers were separated. The organic layer was then concentrated and purified by silica gel column chromatography (diethyl ether / PE = 1/2) to give 22 as a white solid (20.4 g, 75% two-step yield). (MS: [M + Na] + 451.2).

Стадия 3. метиловый эфир 23Stage 3.methyl ether 23

К раствору 22 (4,0 г, 9,33 ммоль) в DMF (45 мл) добавляли гидрид натрия (484 мг, 12,1 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 30 мин перед медленным добавлением метилйодида (0,64 мл, 10,3 ммоль). После перемешивания в течение 3 ч добавляли воду (3 мл) и летучие компоненты удаляли и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/10), получая 23 в виде белого твердого остатка (3,8 г, 92% выход). (MS: [M+Na]+ 465,2).To a solution of 22 (4.0 g, 9.33 mmol) in DMF (45 ml) was added sodium hydride (484 mg, 12.1 mmol) at 0 ° C and stirred for 30 min before slowly adding methyl iodide (0.64 ml, 10.3 mmol). After stirring for 3 h, water (3 ml) was added and the volatiles were removed and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1/10) to give 23 as a white solid (3.8 g, 92% yield). (MS: [M + Na] + 465.2).

Стадия 4. Бензоат 24Stage 4. Benzoate 24

К раствору 23 (3,1 г, 7,0 ммоль) в THF (50 мл) добавляли TBAF (8,4 мл, 8,4 ммоль) при 0°С. После перемешивания в течение 4 ч при комнатной температуре добавляли воду (5 мл) и ЕА. Слои разделяли и органический слой промывали водой и соляным раствором, концентрировали и полученный в результате остаток растворяли в DCM с последующим добавлением TEA (4,9 мл, 35 ммоль) и бензоилхлорида (0,98 мл, 8,4 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч добавляли воду (3 мл) и летучие компоненты удаляли. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5), получая 24 в виде белого твердого остатка (1,9 г, 88% выход). (MS: [M+ Na]⁺ 331,0).To a solution of 23 (3.1 g, 7.0 mmol) in THF (50 ml) was added TBAF (8.4 ml, 8.4 mmol) at 0 ° C. After stirring for 4 h at room temperature, water (5 ml) and EA were added. The layers were separated and the organic layer was washed with water and brine, concentrated and the resulting residue was dissolved in DCM followed by the addition of TEA (4.9 ml, 35 mmol) and benzoyl chloride (0.98 ml, 8.4 mmol). After stirring for 1 h, water (3 ml) was added and the volatiles were removed. The residue was purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1/5) to give 24 as a white solid (1.9 g, 88% yield). (MS: [M + Na] ⁺ 331.0).

- 18 037513- 18 037513

Стадия 5. Ацетат 25Stage 5. Acetate 25

Раствор 24 (0,71 г, 2,3 ммоль) в НОАс (14 мл) и воде (6 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры смесь упаривали с толуолом (4x10 мл) и полученный в результате остаток растворяли в Ру/Ас₂О (10/1 об./об., 10 мл) с последующим добавлением DMAP (50 мг, 0,46 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/3), получая 25 в виде белого твердого остатка (0,75 г, 92% выход). (MS: [M+Na]+ 375,0).A solution of 24 (0.71 g, 2.3 mmol) in HOAc (14 ml) and water (6 ml) was refluxed for 30 min. After cooling to room temperature, the mixture was evaporated with toluene (4x10 ml) and the resulting residue was dissolved in Py / Ac ₂ O (10/1 v / v, 10 ml) followed by the addition of DMAP (50 mg, 0.46 mmol ). After stirring for 4 h, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1/3) to give 25 as a white solid (0.75 g, 92% yield). (MS: [M + Na] + 375.0).

Стадия 6. Гуанозин 27Stage 6. Guanosine 27

ОABOUT

К суспензии 25 (500 мг, 1,42 ммоль) и N²-изобутирилгуанина (500 мг, 2,13 ммоль) в DCM (20 мл) при 80°С добавляли BSA (1,8 мл, 7,4 ммоль) и перемешивали в течение 1 ч перед добавлением TMSOTf (0,77 мл, 4,26 ммоль). После перемешивания при 80°С в течение 3 ч смесь охлаждали до комнатной температуры перед добавлением водного раствора бикарбоната натрия (50 мл). Затем смесь экстрагировали DCM (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20-1/10), получая 26 в виде белого порошка (624 мг, 85% выход). (MS: [M+H]+ 514,2).BSA (1.8 ml, 7.4 mmol) was added to a suspension of 25 (500 mg, 1.42 mmol) and N ² -isobutyrylguanine (500 mg, 2.13 mmol) in DCM (20 ml) at 80 ° C and stirred for 1 h before adding TMSOTf (0.77 mL, 4.26 mmol). After stirring at 80 ° C for 3 hours, the mixture was cooled to room temperature before adding aqueous sodium bicarbonate solution (50 ml). The mixture was then extracted with DCM (3x50 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 20-1 / 10) to give 26 as a white powder (624 mg, 85% yield). (MS: [M + H] + 514.2).

Стадия 7. В 4Stage 7.B 4

К раствору 27 (0,49 г, 0,96 ммоль) в MeOH/THF/вода (4/5/1 об./об./об., 20 мл) добавляли водный раствор гидроксида натрия (10 М, 0,25 мл, 2,5 ммоль) при 0°С. После перемешивания в течение 30 мин добавляли НОАс и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/10-1/5), получая В4 в виде масла (322 мг, 92% выход). (MS: [M+H]+ 368,2).To a solution of 27 (0.49 g, 0.96 mmol) in MeOH / THF / water (4/5/1 v / v / v, 20 ml) was added an aqueous solution of sodium hydroxide (10 M, 0.25 ml, 2.5 mmol) at 0 ° C. After stirring for 30 min, HOAc was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 10-1 / 5) to give B4 as an oil (322 mg, 92% yield). (MS: [M + H] + 368.2).

Получение В5:Getting B5:

Стадия 1. Ацетат 28Stage 1. Acetate 28

К раствору 15 (7,0 г, 20 ммоль) в MeCN (100 мл) добавляли DMAP (1,2 г, 10 ммоль) и Ас₂О (7,5 мл, 80 ммоль) при 0°С. После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи, смесь концентрировали и очищали флэш-хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20-1/10), получая 27 в виде белого твердого остатка (8,77 г, 92% выход). (MS: [M+H]+ 480,0).To a solution of 15 (7.0 g, 20 mmol) in MeCN (100 ml) were added DMAP (1.2 g, 10 mmol) and Ac ₂ O (7.5 ml, 80 mmol) at 0 ° C. After stirring at room temperature overnight, the mixture was concentrated and purified by flash chromatography on silica gel (MeOH / DCM = 1 / 20-1 / 10) to give 27 as a white solid (8.77 g, 92% yield). (MS: [M + H] + 480.0).

- 19 037513- 19 037513

Стадия 2. Пропаргиловый эфир 29Stage 2. Propargyl ether 29

К раствору 27 (480 мг, 1,0 ммоль) в 1,4-диоксане (1 мл) добавляли PPh₃ (656 мг, 2,5 ммоль), пропаргилбромид (0,15 мл, 2 ммоль) и раствор DEAD (0,49 мл, 2,5 ммоль) в диоксане (1 мл) при 0°С. После перемешивания в течение 2 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/50-1/20), получая 28 (MS: [M+H]+ 518,2).To a solution of 27 (480 mg, 1.0 mmol) in 1,4-dioxane (1 ml) were added PPh ₃ (656 mg, 2.5 mmol), propargyl bromide (0.15 ml, 2 mmol) and a DEAD solution (0 , 49 ml, 2.5 mmol) in dioxane (1 ml) at 0 ° С. After stirring for 2 hours, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 50-1 / 20) to give 28 (MS: [M + H] + 518.2).

Стадия 3. В5 виде белого твердого остатка (440 мг, 47% выход).Step 3. B5 as a white solid (440 mg, 47% yield).

К раствору 28 (150 мг, 0,17 ммоль) в THF (4,5 мл) и МеОН (0,5 мл) добавляли водный раствор гидроксида натрия (1 М, 0,5 мл) при 0°С. После перемешивания в течение 1 ч добавляли НОАс (0,1 мл) и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20-1/10), получая В5 в виде белого твердого остатка (40 мг, 64% выход). (MS: [M+H]+ 392,0).To a solution of 28 (150 mg, 0.17 mmol) in THF (4.5 ml) and MeOH (0.5 ml) was added an aqueous solution of sodium hydroxide (1 M, 0.5 ml) at 0 ° C. After stirring for 1 h, HOAc (0.1 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 20-1 / 10) to give B5 as a white solid (40 mg, 64% output). (MS: [M + H] + 392.0).

Получение В6:Getting B6:

inn id онinn id he

TBSOTBSO

TBSCI TBSOTBSCI TBSO

1. НМРТ, соц1. NMRT, social

2. КОН, TDA-12. KOH, TDA-1

NH/buNH / bu

Стадия 1. Деазапурин 29Stage 1. Deazapurin 29

К раствору 3 (40,0 г, 131 ммоль) и тетрахлорида углерода (33,6 г, 218 ммоль, 21 мл) в THF (500 мл) при -78°С добавляли НМРТ (22,5 г, 138 ммоль, 25 мл) в течение 15 мин. После перемешивания в течение 2 ч с короткими периодами небольшого нагревания для предотвращения образования геля смесь концентрировали до приблизительно 70 мл. К суспензии KOH (25,8 г, 460 ммоль) в MeCN (600 мл) добавляли TDA-1 (4,25 г, 13,14 ммоль, 4,2 мл). После перемешивания при 25°С в течение 10 мин добавляли 2-амино-6-хлор-7-деазапурин (22,2 г, 131 ммоль). Смесь перемешивали в течение следующих 10 мин перед добавлением THF раствора, полученного выше. После перемешивания в течение 2 ч смесь фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 3/17), получая 29 (9,20 г, 15% выход). (MS: [M+H]+ 455,3).To a solution of 3 (40.0 g, 131 mmol) and carbon tetrachloride (33.6 g, 218 mmol, 21 ml) in THF (500 ml) at -78 ° C was added HMPT (22.5 g, 138 mmol, 25 ml) within 15 minutes. After stirring for 2 hours with short periods of gentle heating to prevent gel formation, the mixture was concentrated to approximately 70 ml. To a suspension of KOH (25.8 g, 460 mmol) in MeCN (600 ml) was added TDA-1 (4.25 g, 13.14 mmol, 4.2 ml). After stirring at 25 ° C for 10 min, 2-amino-6-chloro-7-deazapurine (22.2 g, 131 mmol) was added. The mixture was stirred for another 10 minutes before adding the THF solution obtained above. After stirring for 2 hours, the mixture was filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 3/17) to give 29 (9.20 g, 15% yield). (MS: [M + H] + 455.3).

- 20 037513- 20 037513

Стадия 2. Спирт 30Stage 2. Alcohol 30

К смеси 29 (13,7 г, 30,1 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли раствор гидроксида натрия (11,7 г, 291 ммоль) в воде (100 мл) при 25°С. После перемешивания при 80°С в течение 64 ч смесь охлаждали доTo a mixture of 29 (13.7 g, 30.1 mmol) in dioxane (10 ml) was added a solution of sodium hydroxide (11.7 g, 291 mmol) in water (100 ml) at 25 ° C. After stirring at 80 ° C for 64 h, the mixture was cooled to

0°С, нейтрализовали АсОН до ~рН 7 и экстрагировали EtOAc (3x100 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали, получая неочищенный 30. (MS: [M+1]+ 323,1).0 ° C, neutralized with AcOH to ~ pH 7 and extracted with EtOAc (3x100 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated to give crude 30. (MS: [M + 1] + 323.1).

Стадия 3. Силиловый эфир 31Stage 3. Silyl ether 31

К раствору неочищенного 30 (9,7 г, 30,1 ммоль) и Imid (4,1 г, 60,3 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли TBSCl (9,08 г, 60,3 ммоль) при 25°С. После перемешивания в течение 16 ч смесь разбавляли DCM (100 мл), промывали соляным раствором (80 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/4-1/1, затем MeOH/DCM = 1/50), получая 31 (9,0 г, 68% выход) в виде твердого остатка. (MS: [M+H]+ 437,2).To a solution of crude 30 (9.7 g, 30.1 mmol) and Imid (4.1 g, 60.3 mmol) in DCM (10 ml) was added TBSCl (9.08 g, 60.3 mmol) at 25 ° FROM. After stirring for 16 h, the mixture was diluted with DCM (100 ml), washed with brine (80 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 4-1 / 1, then MeOH / DCM = 1/50) to give 31 (9.0 g, 68% yield) as a solid. (MS: [M + H] + 437.2).

Стадия 4. Изобутират 32Stage 4. Isobutyrate 32

К раствору 31 (9,0 г, 20,6 ммоль) и TEA (4,2 г, 41,2 ммоль) в DCM (80 мл) добавляли изобутирилхлорид (3,29 г, 30,9 ммоль) при 0°С. После перемешивания при 25°С в течение 16 ч смесь разбавлялиTo a solution of 31 (9.0 g, 20.6 mmol) and TEA (4.2 g, 41.2 mmol) in DCM (80 ml) was added isobutyryl chloride (3.29 g, 30.9 mmol) at 0 ° C ... After stirring at 25 ° C for 16 h, the mixture was diluted

DCM (100 мл), промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2x50 мл) и соляным раствором (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5-1/2), получая 32 в виде белого твердого остатка (4,2 г, 40% выход). (MS: [M+H]+ 507,2).DCM (100 ml), washed with saturated aqueous sodium bicarbonate solution (2x50 ml) and brine (50 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 5-1 / 2) to give 32 as a white solid (4.2 g, 40% yield). (MS: [M + H] + 507.2).

Стадия 5. В 6 оStage 5. В 6 о

Г ^{но N N H/bu} G ^{but NNH / bu}

ОН ОН ВбOH OH Wb

Раствор 32 (4,2 г, 8,29 ммоль) в DCM (6 мл) и TFA (24 мл) перемешивали при 25°С в течение 1 ч перед концентрированием. Затем остаток обрабатывали хлористоводородной кислотой (4 М в МеОН, 10 мл) при 0°С. После перемешивания при 25°С в течение 10 мин смесь концентрировали, получая неочищенный В6 в виде белого твердого остатка (2,92 г, 99% выход). (MS: [M+H]+ 353,0).A solution of 32 (4.2 g, 8.29 mmol) in DCM (6 ml) and TFA (24 ml) was stirred at 25 ° C for 1 h before concentration. Then the residue was treated with hydrochloric acid (4 M in MeOH, 10 ml) at 0 ° C. After stirring at 25 ° C for 10 min, the mixture was concentrated to give crude B6 as a white solid (2.92 g, 99% yield). (MS: [M + H] + 353.0).

Получение ВА1:Getting BA1:

- 21 037513- 21 037513

Стадия 1. Пропаргиловый эфир 34Stage 1. Propargyl ether 34

К раствору аденозина (33) (5,0 г, 18,7 ммоль) в DMF (200 мл) при 0°С добавляли гидрид натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 1,0 г, 25 ммоль), с последующим добавлением TBAI (1,5 г, 4,06 ммоль) и пропаргилбромида (2,12 мл, 20,9 ммоль). После перемешивания при 55°С в течение 2 дней смесь очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 7/93) с последующей перекристаллизацией из этанола, получая 34 в виде бледно-желтого твердого остатка (2,56 г, 45%).To a solution of adenosine (33) (5.0 g, 18.7 mmol) in DMF (200 ml) at 0 ° C was added sodium hydride (60% dispersion in mineral oil, 1.0 g, 25 mmol), followed by the addition of TBAI (1.5 g, 4.06 mmol) and propargyl bromide (2.12 mL, 20.9 mmol). After stirring at 55 ° C for 2 days, the mixture was purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 7/93) followed by recrystallization from ethanol to give 34 as a pale yellow solid (2.56 g, 45%).

Стадия 2. ВА1Stage 2. BA1

К раствору 34 (1,4 г, 4,59 ммоль, упаренному дважды с Ру) в Ру (20 мл) добавляли TMSC1 (2,4 мл, 18,9 ммоль). После перемешивания в течение 30 мин добавляли бензоилхлорид (0,7 мл, 6,0 ммоль) и смесь перемешивали в течение 3 ч перед добавлением воды (10 мл) и водного раствора гидроксида аммония (15 мл) при 0°С. После перемешивания в течение 20 мин при комнатной температуре смесь экстрагировали DCM (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 5:95), получая ВА1 в виде белой пены (1,73 г, 92%). (MS: [M+H]+ 410,2).To a solution of 34 (1.4 g, 4.59 mmol, stripped off twice with Py) in Py (20 ml) was added TMSCl (2.4 ml, 18.9 mmol). After stirring for 30 min, benzoyl chloride (0.7 ml, 6.0 mmol) was added and the mixture was stirred for 3 h before adding water (10 ml) and aqueous ammonium hydroxide solution (15 ml) at 0 ° C. After stirring for 20 min at room temperature, the mixture was extracted with DCM (3x25 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 5:95) to give BA1 as a white foam (1.73 g, 92%). (MS: [M + H] + 410.2).

Получение ВА2:Getting BA2:

Стадия 1. Пиразолопиримидин 36Stage 1. Pyrazolopyrimidine 36

К раствору 35 (10,0 г, 56,5 ммоль) в THF (80 мл) добавляли DIPEA (7,3 г, 56,5 ммоль, 9,9 мл). После перемешивания при 0°С в течение 10 мин добавляли раствор гидразина (1,81 г, 56,5 ммоль, 2,0 мл) в THF (20 мл). Затем смесь перемешивали при 20°С в течение 2 ч перед концентрированием. После добавления к остатку DCM (100 мл) и Н₂О (100 мл), слои разделяли, и водный слой экстрагировали DCM (3x100 мл). Объединенные органические слои промывали соляным раствором (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/15-1/8), получая 36 в виде желтого твердого остатка (3,10 г, 35% выход). (MS: [M+H]+ 155,1).To a solution of 35 (10.0 g, 56.5 mmol) in THF (80 ml) was added DIPEA (7.3 g, 56.5 mmol, 9.9 ml). After stirring at 0 ° C for 10 min, a solution of hydrazine (1.81 g, 56.5 mmol, 2.0 ml) in THF (20 ml) was added. The mixture was then stirred at 20 ° C for 2 hours before being concentrated. After adding DCM (100 ml) and H ₂ O (100 ml) to the residue, the layers were separated and the aqueous layer was extracted with DCM (3x100 ml). The combined organic layers were washed with brine (100 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 15-1 / 8) to give 36 as a yellow solid (3, 10 g, 35% yield). (MS: [M + H] + 155.1).

- 22 037513- 22 037513

Стадия 2. Пиразолопиримидин 37Stage 2. Pyrazolopyrimidine 37

К раствору 36 (200 мг, 1,29 ммоль) в THF (2,0 мл) добавляли гидроксид аммония (2,0 мл). После перемешивания при 20-30°С в течение 2 ч смесь концентрировали, растирали с MeCN (0,5 мл) и собирали фильтрованием, получая 37 в виде красного твердого остатка (100 мг, 57% выход).To a solution of 36 (200 mg, 1.29 mmol) in THF (2.0 ml) was added ammonium hydroxide (2.0 ml). After stirring at 20-30 ° C for 2 hours, the mixture was concentrated, triturated with MeCN (0.5 ml) and collected by filtration to give 37 as a red solid (100 mg, 57% yield).

Стадия 3. Трибензоат 38Stage 3. Tribenzoate 38

К суспензии 37 (20,0 г, 148 ммоль) и 13 (101 г, 200 ммоль) в MeCN (1,2 л) добавляли диэтилэфират трифторида бора (30,5 г, 215 ммоль, 26,5 мл). После перемешивания при 75-85°С в течение 2 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5-2/1), получая 38 в виде желтого твердого остатка (35,0 г, 40% выход). (MS: [M+H]+ 580,3).To a suspension of 37 (20.0 g, 148 mmol) and 13 (101 g, 200 mmol) in MeCN (1.2 L) was added boron trifluoride diethyl etherate (30.5 g, 215 mmol, 26.5 mL). After stirring at 75-85 ° C for 2 h, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 5-2 / 1) to give 38 as a yellow solid residue (35.0 g, 40% yield ). (MS: [M + H] + 580.3).

Стадия 4. Бензамид 39Stage 4. Benzamide 39

NHBz ^N'Jj ^Β^°η^ο J ^N NHBz ^N 'Jj ^Β ^ ° η ^ ο J ^N

OBz OBz 39OBz OBz 39

К раствору 38 (10,0 г, 17,3 ммоль) в DCM (100 мл) добавляли DMAP (421 мг, 3,45 ммоль) и TEA (5,24 г, 51,8 ммоль, 7,2 мл) с последующим добавлением по каплям бензоилхлорида (2,91 г, 20,7 ммоль, 2,4 мл). После перемешивания при 20-25°С в течение 8 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5-11/), получая 39 в виде белого твердого остатка (9,0 г, 76% выход). (MS: [M+H]⁺ 684,1).To a solution of 38 (10.0 g, 17.3 mmol) in DCM (100 ml) were added DMAP (421 mg, 3.45 mmol) and TEA (5.24 g, 51.8 mmol, 7.2 ml) with followed by the dropwise addition of benzoyl chloride (2.91 g, 20.7 mmol, 2.4 mL). After stirring at 20-25 ° C for 8 h, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 5-11 /) to give 39 as a white solid (9.0 g, 76% yield) ... (MS: [M + H] ⁺ 684.1).

Стадия 5. ВА2Stage 5. BA2

NHBz ^NU J ^N NHBz ^N UJ ^N

ОН ОН BA2OH OH BA2

К раствору 39 (1,0 г, 1,46 ммоль) в THF (1,5 мл), МеОН (1,2 мл) и Н₂О (0,3 мл) добавляли водный раствор гидроксида лития (5 М, 0,53 мл). После перемешивания при 0-25°С в течение 2 ч смесь нейтрализовали лимонной кислотой (1 М) до ~рН 7 перед удалением летучих компонентов. Затем твердый остаток в водном растворе собирали фильтрованием, получая ВА2 в виде грязно-белого твердого остатка (300 мг, 54% выход). (MS: [M+H]⁺ 372,2).To a solution of 39 (1.0 g, 1.46 mmol) in THF (1.5 ml), MeOH (1.2 ml) and H ₂ O (0.3 ml) was added an aqueous solution of lithium hydroxide (5 M, 0 , 53 ml). After stirring at 0-25 ° C for 2 h, the mixture was neutralized with citric acid (1 M) to ~ pH 7 before volatile components were removed. Then, the solid residue in the aqueous solution was collected by filtration to give BA2 as an off-white solid (300 mg, 54% yield). (MS: [M + H] ⁺ 372.2).

Получение ВА3:Getting BA3:

- 23 037513- 23 037513

Стадия 1. Трифторэтиловый эфир 40Stage 1. Trifluoroethyl ether 40

К раствору 22 (0,4 г, 0,93 ммоль) в DMF (8 мл) добавляли гидрид натрия (48 мг, 1,12 ммоль) при 0°С и смесь перемешивали в течение 30 мин перед медленным добавлением 2,2,2-трифторэтилтрифторметансульфоната (0,165 мл, 1,12 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 3 ч добавляли воду (3 мл) смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан = 1/10), получая 40 в виде белого твердого остатка (218 мг, 46% выход).To a solution of 22 (0.4 g, 0.93 mmol) in DMF (8 ml) was added sodium hydride (48 mg, 1.12 mmol) at 0 ° C and the mixture was stirred for 30 min before slowly adding 2.2, 2-trifluoroethyl trifluoromethanesulfonate (0.165 ml, 1.12 mmol). After stirring at 0 ° C for 3 h, water (3 ml) was added, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / hexane = 1/10) to give 40 as a white solid (218 mg, 46% yield).

Стадия 2. Бензоат 41Stage 2. Benzoate 41

К раствору 40 (1,4 г, 2,74 ммоль) в THF (25 мл) добавляли TBAF (3,3 мл, 3,3 ммоль) при 0°С. После перемешивания при комнатной температуре в течение 4 ч добавляли воду (2 мл) и смесь экстрагировали ЕА. Органический слой промывали водой и соляным раствором, и концентрировали. Затем остаток растворяли в DCM с последующим добавлением TEA (1,92 мл, 13,8 ммоль) и бензоилхлорида (0,42 мл, 3,6 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч добавляли воду (1 мл) и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5), получая 41 в виде белого твердого остатка (0,795 г, 77% выход).To a solution of 40 (1.4 g, 2.74 mmol) in THF (25 ml) was added TBAF (3.3 ml, 3.3 mmol) at 0 ° C. After stirring at room temperature for 4 h, water (2 ml) was added and the mixture was extracted with EA. The organic layer was washed with water and brine and concentrated. The residue was then dissolved in DCM followed by the addition of TEA (1.92 ml, 13.8 mmol) and benzoyl chloride (0.42 ml, 3.6 mmol). After stirring for 1 h, water (1 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1/5) to give 41 as a white solid (0.795 g, 77% yield).

Стадия 3. Ацетат 42Stage 3. Acetate 42

Раствор 41 (0,79 г, 2,1 ммоль) в НОАс (17,5 мл) и воде (7,5 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 30 мин перед охлаждением до комнатной температуры и упариванием с толуолом (4x10 мл). Затем остаток растворяли в Ру (12 мл) с последующим добавлением Ас₂О (0,8 мл, 8,4 ммоль). После перемешивания в течение 6 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/4), получая 42 в виде белого твердого остатка (0,82 г, 91% выход). Стадия 4. Гуанозин 43A solution of 41 (0.79 g, 2.1 mmol) in HOAc (17.5 ml) and water (7.5 ml) was stirred at reflux for 30 min before cooling to room temperature and evaporation with toluene (4x10 ml). The residue was then dissolved in Py (12 ml) followed by the addition of Ac ₂ O (0.8 ml, 8.4 mmol). After stirring for 6 h, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1/4) to give 42 as a white solid (0.82 g, 91% yield). Stage 4. Guanosine 43

К суспензии 42 (800 мг, 1,9 ммоль) и N²-изобутирилгуанина (633 мг, 2,86 ммоль) в дихлорэтане (25 мл) при 80°С добавляли BSA (2,74 мл, 10,1 ммоль) и перемешивали в течение 1 ч перед добавлением TMSOTf (1,03 мл, 5,7 ммоль). После перемешивания в течение 3 ч при 100°С смесь выливали в водный раствор бикарбоната натрия (60 мл) и экстрагировали DCM (3x60 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20-1/10), получая 43 в виде белого твердого остатка (938 мг, 85% выход).To a suspension of 42 (800 mg, 1.9 mmol) and N ² -isobutyrylguanine (633 mg, 2.86 mmol) in dichloroethane (25 ml) at 80 ° C was added BSA (2.74 ml, 10.1 mmol) and stirred for 1 h before adding TMSOTf (1.03 mL, 5.7 mmol). After stirring for 3 h at 100 ° C, the mixture was poured into aqueous sodium bicarbonate solution (60 ml) and extracted with DCM (3x60 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 20-1 / 10) to give 43 as a white solid (938 mg, 85% yield).

Стадия 5. ВА3Stage 5. BA3

К раствору 43 (0,5 г, 0,86 ммоль) в МеОН (8 мл), THF (10 мл) и воде (2 мл) добавляли водный раствор гидроксида натрия (10 М, 0,34 мл) при 0°С. После перемешивания в течение 30 мин добавляли НОАс и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/10-1/5), получая ВА3 в виде масла (348 мг, 93% выход).To a solution of 43 (0.5 g, 0.86 mmol) in MeOH (8 ml), THF (10 ml) and water (2 ml) was added an aqueous solution of sodium hydroxide (10 M, 0.34 ml) at 0 ° С ... After stirring for 30 min, HOAc was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 10-1 / 5) to give BA3 as an oil (348 mg, 93% yield).

- 24 037513- 24 037513

Получение ВВ 1 оObtaining explosive 1 o

ноbut

3. TBSCl, imid3. TBSCl, imid

1. Mel, NaOH1. Mel, NaOH

2. NaOH2. NaOH

NH/buNH / bu

Стадия 1. Пиразол 44Stage 1. Pyrazole 44

К раствору 2 (75 г, 395 ммоль) в МеОН (600 мл) добавляли гидразингидрат (120 мл) при 25°С. После перемешивания в течение 2 ч смесь концентрировали и остаток растворяли в EtOH (600 мл) перед добавлением (этоксиметилен)малонитрила (110 г, 901 ммоль). После перемешивания при 78°С в течение 30 мин смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/201/15), получая 44 в виде бледно-желтого твердого остатка (42 г, 38% выход).To a solution of 2 (75 g, 395 mmol) in MeOH (600 ml) was added hydrazine hydrate (120 ml) at 25 ° C. After stirring for 2 h, the mixture was concentrated and the residue was dissolved in EtOH (600 mL) before adding (ethoxymethylene) malonitrile (110 g, 901 mmol). After stirring at 78 ° C for 30 min, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1/201/15) to give 44 as a pale yellow solid (42 g, 38% yield).

Стадия 2. Тиомочевина 45Stage 2. Thiourea 45

К раствору 44 (16,0 г, 57 ммоль) в МеОН (75 мл) и воде (25 мл) добавляли гидроксид аммония (280 мл) и пероксид водорода (150 мл). После перемешивания при 25°С в течение 16 ч смесь выливали в водный раствор сульфита натрия (2 л) и затем экстрагировали ЕА (3x700 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Затем остаток растворяли в ацетоне (90 мл) перед добавлением бензоилизотиоцианата (6,96 г, 42,7 ммоль, 5,75 мл) при 25°С. После перемешивания при 60°С в течение 4 ч смесь концентрировали, получая неочищенный 45 в виде желтого твердого остатка.To a solution of 44 (16.0 g, 57 mmol) in MeOH (75 ml) and water (25 ml) were added ammonium hydroxide (280 ml) and hydrogen peroxide (150 ml). After stirring at 25 ° C for 16 h, the mixture was poured into aqueous sodium sulfite solution (2 L) and then extracted with EA (3x700 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue was then dissolved in acetone (90 ml) before adding benzoyl isothiocyanate (6.96 g, 42.7 mmol, 5.75 ml) at 25 ° C. After stirring at 60 ° C for 4 hours, the mixture was concentrated to give crude 45 as a yellow solid.

Стадия 3. Пиразолопиримидинон 46Stage 3. Pyrazolopyrimidinone 46

К раствору неочищенного 45, полученного выше, в МеОН (150 мл) добавляли водный раствор гидроксида натрия (0,7 М, 80 мл) с последующим добавлением метилйодида (6,8 г, 47,9 ммоль, 3,0 мл). После перемешивания при 20°С в течение 2 ч смесь нейтрализовали НОАс до ~рН 6 с последующим добавлением воды (80 мл) и экстрагировали ЕА (3x100 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Затем остаток растворяли в МеОН (30 мл) и добавляли водный раствор гидроксида натрия (1,4 М, 250 мл). После перемешивания при 100°С в течение 2 ч смесь концентрировали и остаток упаривали с толуолом (3x200 мл) и растворяли в DCM (500 мл). Затем добавляли Imid (18,5 г, 271 ммоль), DMAP (1,66 г, 13,6 ммоль) и TBSCl (40,9 г,To a solution of the crude 45 obtained above in MeOH (150 ml) was added an aqueous sodium hydroxide solution (0.7 M, 80 ml) followed by methyl iodide (6.8 g, 47.9 mmol, 3.0 ml). After stirring at 20 ° C for 2 h, the mixture was neutralized with HOAc to ~ pH 6, followed by the addition of water (80 ml) and extracted with EA (3x100 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated. Then the residue was dissolved in MeOH (30 ml) and an aqueous sodium hydroxide solution (1.4 M, 250 ml) was added. After stirring at 100 ° C for 2 h, the mixture was concentrated and the residue was evaporated with toluene (3x200 ml) and dissolved in DCM (500 ml). Then Imid (18.5 g, 271 mmol), DMAP (1.66 g, 13.6 mmol) and TBSCl (40.9 g,

- 25 037513- 25 037513

271 ммоль). После перемешивания при 25°С в течение 18 ч добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (1 л) и смесь экстрагировали ЕА (3x500 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/60-1/30), получая 46 в виде белого твердого остатка (8,50 г, 34% выход на пять стадий).271 mmol). After stirring at 25 ° C for 18 h, saturated aqueous sodium bicarbonate solution (1 L) was added and the mixture was extracted with EA (3x500 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 60-1 / 30) to give 46 as a white solid (8.50 g, 34% yield on five stages).

Стадия 4. Изобутират 47Stage 4. Isobutyrate 47

К раствору 46 (23,4 г, 53,5 ммоль) в Ру (120 мл) добавляли изобутирилхлорид (11,4 г, 107 ммоль, 11,2 мл) при 25°С. После перемешивания при 25°С в течение 16 ч добавляли гидроксид аммония (0,5 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин перед концентрированием. Затем остаток растворяли в EtOAc (1,5 л), промывали насыщенным водным раствором гидроксида аммония (3x500 мл) и соляным раствором (500 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/10-1/3), получая 47 в виде светло-желтого твердого остатка (24,0 г, 88% выход). (MS: [M+Na]+ 530,1).To a solution of 46 (23.4 g, 53.5 mmol) in Py (120 ml) was added isobutyryl chloride (11.4 g, 107 mmol, 11.2 ml) at 25 ° C. After stirring at 25 ° C for 16 h, ammonium hydroxide (0.5 ml) was added and the mixture was stirred for 30 min before concentration. The residue was then dissolved in EtOAc (1.5 L), washed with saturated aqueous ammonium hydroxide solution (3x500 ml) and brine (500 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 10-1 / 3) to give 47 as a light yellow solid (24.0 g, 88% yield). (MS: [M + Na] + 530.1).

Стадия 5. ВВ1Stage 5. BB1

Раствор 47 (10,0 г, 19,7 ммоль) в НОАс (6 мл) и воде (3 мл) перемешивали при 65°С в течение 5 ч. Затем реакционную смесь концентрировали и растирали с DCM (15 мл). Твердый остаток собирали фильтрованием, получая неочищенный ВВ1 в виде белого твердого остатка (4,0 г). (MS: [M+H]⁺ 354,0).A solution of 47 (10.0 g, 19.7 mmol) in HOAc (6 ml) and water (3 ml) was stirred at 65 ° C for 5 hours. The reaction mixture was then concentrated and triturated with DCM (15 ml). The solid residue was collected by filtration to give crude BB1 as a white solid (4.0 g). (MS: [M + H] ⁺ 354.0).

Получение ВС1:Receiving BC1:

Стадия 1. Ацетонид 49Stage 1. Acetonide 49

К раствору 48 (50 г, 135 ммоль) в ацетоне (500 мл) добавляли 2,2-диметоксипропан (85 г,To a solution of 48 (50 g, 135 mmol) in acetone (500 ml) was added 2,2-dimethoxypropane (85 g,

816 ммоль, 100 мл) и концентрированную серную кислоту (1,32 г, 13,5 ммоль, 0,72 мл). После перемешивания при 25°С в течение 30 мин добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл). Раствор фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/200-1/50), получая 49 в виде белого твердого остатка (35 г, 63% выход). (MS: [M+H]⁺ 412,1).816 mmol, 100 ml) and concentrated sulfuric acid (1.32 g, 13.5 mmol, 0.72 ml). After stirring at 25 ° C. for 30 min, saturated aqueous sodium bicarbonate solution (30 ml) was added. The solution was filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 200-1 / 50) to give 49 as a white solid (35 g, 63% yield). (MS: [M + H] ⁺ 412.1).

Стадия 2. Азид 50Stage 2. Azide 50

- 26 037513- 26 037513

К раствору 49 (5,0 г, 12,2 ммоль) в Ру (50 мл) добавляли метансульфонилхлорид (2,1 г, 18 ммоль, 1,4 мл) при 0°С. После перемешивания при 25°С в течение 1 ч добавляли DCM (200 мл) и раствор промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия с последующей промывкой соляного раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали. Затем остаток растворяли в DMF (50 мл) с последующим добавлением азида натрия (3,4 г, 52,3 ммоль). После перемешивания при 50°С в течение 16 ч добавляли DCM (400 мл). Смесь промывали водой (300 мл), соляным раствором, сушили над сульфатом натрия, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/1), получая 50 в виде светло-желтого твердого остатка (4,0 г). (MS: [М+Н]+ 437,1).To a solution of 49 (5.0 g, 12.2 mmol) in Py (50 ml) was added methanesulfonyl chloride (2.1 g, 18 mmol, 1.4 ml) at 0 ° C. After stirring at 25 ° C for 1 h, DCM (200 ml) was added and the solution was washed with saturated aqueous sodium bicarbonate solution followed by brine, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was then dissolved in DMF (50 ml) followed by the addition of sodium azide (3.4 g, 52.3 mmol). After stirring at 50 ° C for 16 h, DCM (400 ml) was added. The mixture was washed with water (300 ml), brine, dried over sodium sulfate, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1/1) to give 50 as a light yellow solid (4.0 g). (MS: [M + H] + 437.1).

Стадия 3. ВС1Stage 3. BC1

Раствор 50 (50 г, 115 ммоль) в TFA (125 мл) и воде (125 мл) перемешивали при 25°С в течение 5 ч перед концентрированием, дважды упаривали с толуолом и растворяли в МеОН (50 мл). Затем смесь нейтрализовали водным раствором бикарбоната натрия (1%) и растирали с МТВЕ. Твердый остаток собирали, промывали МТВЕ, сушили и растворяли в DMF (400 мл). Затем добавляли Pd/C (10% вес./вес., 10 г) и смесь перемешивали в атмосфере водорода (15 пси) при 25°С в течение 6 ч перед фильтрованием и концентрированием, получая неочищенный ВС1 в виде желтого масла (39 г). (MS: [M+H]+ 371, 1).A solution of 50 (50 g, 115 mmol) in TFA (125 ml) and water (125 ml) was stirred at 25 ° C for 5 h before concentration, evaporated twice with toluene and dissolved in MeOH (50 ml). The mixture was then neutralized with aqueous sodium bicarbonate solution (1%) and triturated with MTBE. The solid residue was collected, washed with MTBE, dried and dissolved in DMF (400 ml). Then Pd / C (10% w / w, 10 g) was added and the mixture was stirred under a hydrogen atmosphere (15 psi) at 25 ° C for 6 h before filtering and concentration to give crude BC1 as a yellow oil (39 g ). (MS: [M + H] + 371,1).

Получение ВС2:Receiving BC2:

К раствору индола (305 мг, 2,6 ммоль) в MeCN (10 мл) добавляли гидрид натрия (160 мг, 4,0 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 30 мин перед добавлением 51 (1,0 г, 2,6 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (5 мл) и смесь экстрагировали ЕА (3x20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и соляным раствором, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан = 1/4), получая 52 в виде желтого масла (886 мг, 71% выход). (MS: [M+H]+ 470,2).To a solution of indole (305 mg, 2.6 mmol) in MeCN (10 ml) was added sodium hydride (160 mg, 4.0 mmol) at 0 ° C and stirred for 30 min before adding 51 (1.0 g, 2 , 6 mmol). After stirring for 1 h, saturated aqueous sodium bicarbonate solution (5 ml) was added and the mixture was extracted with EA (3x20 ml). The combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate and brine, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / hexane = 1/4) to give 52 as a yellow oil (886 mg, 71% yield). (MS: [M + H] + 470.2).

Стадия 2. ВС2Stage 2. BC2

К раствору 52 (610 мг, 1,3 ммоль) в МеОН (9 мл) добавляли метоксид натрия (5,4 М в метаноле, 0,54 мл). После перемешивания в течение 1 ч добавляли хлористоводородную кислоту (5 М, 0,5 мл) при 0°С, и раствор перемешивали в течение 10 мин перед концентрированием и очисткой колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/9), получая требуемый продукт в виде белого твердого остатка (197 мг, 92% выход). (MS: [M+H]+ 234,1).To a solution of 52 (610 mg, 1.3 mmol) in MeOH (9 ml) was added sodium methoxide (5.4 M in methanol, 0.54 ml). After stirring for 1 h, hydrochloric acid (5 M, 0.5 ml) was added at 0 ° C and the solution was stirred for 10 min before being concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1/9) to give the desired product as a white solid (197 mg, 92% yield). (MS: [M + H] + 234.1).

Получение ВС3:Receiving BC3:

- 27 037513- 27 037513

Стадия 1. Пирен 54Stage 1. Pyrene 54

OTolOTol

К раствору 53 (560 мг, 2 ммоль) в THF добавляли магний (54 мг, 2,3 ммоль), с последующим добавлением небольшого количества йода. После перемешивания при 55°С в течение 3 ч добавляли йодид меди(1) (213 мг, 1,1 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 45 мин перед добавлением 51 (367 мг, 0,98 ммоль) при 40°С. После перемешивания в течение 2 ч добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (2 мл) и DCM (20 мл). Слои разделяли и органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и соляным раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан = 1/10-1/5), получая 54 в виде белого твердого остатка (52 мг, 10%).Magnesium (54 mg, 2.3 mmol) was added to a solution of 53 (560 mg, 2 mmol) in THF, followed by a small amount of iodine. After stirring at 55 ° C for 3 h, copper (1) iodide (213 mg, 1.1 mmol) was added at 0 ° C. The mixture was stirred at room temperature for 45 min before adding 51 (367 mg, 0.98 mmol) at 40 ° C. After stirring for 2 h, saturated aqueous ammonium chloride solution (2 ml) and DCM (20 ml) were added. The layers were separated, and the organic layer was washed with saturated aqueous sodium bicarbonate and brine, dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / hexane = 1 / 10-1 / 5) to give 54 as a white solid residue ( 52 mg, 10%).

Стадия 2. ВС3Stage 2. BC3

К раствору 54 (230 мг, 0,4 ммоль) в МеОН (5 мл) добавляли метоксид натрия (30% в МеОН, 0,23 мл, 1,2 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 1 ч добавляли насыщенный хлорид аммония (5 мл) и смесь экстрагировали ЕА (3x10 мл). Органические слои промывали соляным раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали, получая неочищенный ВС3 в виде белого твердого остатка (150 мг).To a solution of 54 (230 mg, 0.4 mmol) in MeOH (5 ml) was added sodium methoxide (30% in MeOH, 0.23 ml, 1.2 mmol) at room temperature. After stirring for 1 h, saturated ammonium chloride (5 ml) was added and the mixture was extracted with EA (3x10 ml). The organic layers were washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to give crude BC3 as a white solid (150 mg).

Получение ВС4:Receiving BC4:

1. NaH1. NaH

О ООLTD

Стадия 1. Спирт 56Stage 1. Alcohol 56

К раствору 55 (91,4 г, 481 ммоль) в Ру (600 мл) добавляли тритилхлорид (160,7 г, 577 ммоль). После перемешивания при 60°С в течение 16 ч смесь концентрировали и упаривали с толуолом три раза. Остаток распределяли между DCM (400 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (750 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали DCM (2x400 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/10-1/5), получая 56 в виде белого твердого остатка (180,5 г, 87% выTo a solution of 55 (91.4 g, 481 mmol) in Py (600 ml) was added trityl chloride (160.7 g, 577 mmol). After stirring at 60 ° C for 16 h, the mixture was concentrated and evaporated with toluene three times. The residue was partitioned between DCM (400 ml) and saturated aqueous sodium bicarbonate solution (750 ml). The layers were separated and the aqueous phase was extracted with DCM (2x400 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 10-1 / 5) to give 56 as a white solid (180.5 g, 87% pure).

- 28 037513 ход). (MS: [M+Na]+ 455,0).- 28 037513 stroke). (MS: [M + Na] + 455.0).

Стадия 2. кетон 57Stage 2.ketone 57

К раствору 56 (176 г, 407 ммоль) в MeCN (1,0 л) добавляли IBX (228 г, 814 ммоль). После перемешивания при 90°С в течение 6 ч смесь фильтровали и концентрировали, получая неочищенный 57 в виде светло-желтого масла (175 г). (MS: [M+Na]+ 453,0).To a solution of 56 (176 g, 407 mmol) in MeCN (1.0 L) was added IBX (228 g, 814 mmol). After stirring at 90 ° C for 6 h, the mixture was filtered and concentrated to give crude 57 as a light yellow oil (175 g). (MS: [M + Na] + 453.0).

Стадия 3. Эфир 58Stage 3. Ether 58

К раствору гидрида натрия (20,1 г, 502 ммоль) в THF (1,0 л) добавляли метил 2-диметоксифосфорилацетат (96,3 г, 529 ммоль, 76,5 мл) при 0°С по каплям в течение 15 мин. После перемешивания в течение 60 мин добавляли неочищенный 57 (175 г), полученный выше, в THF (500 мл) по каплям при 0°С. После перемешивания при 25°С в течение 16 ч добавляли воду (50 мл) при 0°С и летучие компоненты удаляли и добавляли соляной раствор (500 мл). Затем смесь экстрагировали DCM (3x500 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Затем остаток (198 г из 216 г, полученных выше) растворяли в ЕА (500 мл) и добавляли Pd/C (10% вес./вес., 10 г). После перемешивания в атмосфере водорода (20 пси) при 25°С в течение 16 ч смесь фильтровали и фильтрат концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/15-1/10), получая 58 в виде белого твердого остатка (120 г, 66% выход) (MS: [M+Na]+ 511,1).To a solution of sodium hydride (20.1 g, 502 mmol) in THF (1.0 L) was added methyl 2-dimethoxyphosphoryl acetate (96.3 g, 529 mmol, 76.5 mL) at 0 ° C dropwise over 15 min. ... After stirring for 60 min, the crude 57 (175 g) obtained above in THF (500 ml) was added dropwise at 0 ° C. After stirring at 25 ° C for 16 h, water (50 ml) was added at 0 ° C and the volatiles were removed and brine (500 ml) was added. The mixture was then extracted with DCM (3x500 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue (198 g of the 216 g obtained above) was then dissolved in EA (500 ml) and Pd / C (10% w / w, 10 g) was added. After stirring under a hydrogen atmosphere (20 psi) at 25 ° C for 16 h, the mixture was filtered and the filtrate was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 15-1 / 10) to give 58 as a white solid ( 120 g, 66% yield) (MS: [M + Na] + 511.1).

Стадия 4. Спирт 59Stage 4. Alcohol 59

-о .-about .

] [О] [ABOUT

J o-J_J o-J_

НО 59HD 59

К раствору литийалюмогидрида (6,21 г, 164 ммоль) в THF (200 мл) добавляли 58 (20,0 г, 40,9 ммоль) в THF (50 мл) медленно при 0°С. После перемешивания при 25°С в течение 16 ч реакцию прекращали последовательным добавлением воды (6,2 мл), водного раствора гидроксида натрия (15%, 6,2 мл) и воды (18,6 мл). Затем смесь сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/10-1/4), получая 59 в виде белого твердого остатка. (MS: [M+Na]+ 483,2).To a solution of lithium aluminum hydride (6.21 g, 164 mmol) in THF (200 ml) was added 58 (20.0 g, 40.9 mmol) in THF (50 ml) slowly at 0 ° C. After stirring at 25 ° C for 16 hours, the reaction was stopped by sequential addition of water (6.2 ml), aqueous sodium hydroxide solution (15%, 6.2 ml) and water (18.6 ml). The mixture was then dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 10-1 / 4) to give 59 as a white solid. (MS: [M + Na] + 483.2).

Стадия 5. Спирт 60 ] [О J О'-iStage 5. Alcohol 60] [O J O'-i

ВпО 60VPO 60

К раствору гидрида натрия (60% вес./вес., 6,95 г, 174 ммоль) в THF (200 мл) добавляли 59 (20,0 г, 43,4 ммоль) в THF (80 мл) при -20°С по каплям в течение 5 мин. После перемешивания при 25°С в течение 2 ч добавляли по каплям бензилбромид (22,3 г, 130 ммоль, 15,5 мл) и смесь перемешивали при 80°С в течение 16 ч перед добавлением воды (2 мл) при 0°С. Смесь разбавляли водой (200 мл) и экстрагирова ли DCM (3x200 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Затем остаток растворяли в DCM (200 мл) и добавляли DCA (5,48 г, 42,5 ммоль, 12,0 мл). После перемешивания при 25°С в течение 3 ч добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия при 0°С. Затем смесь экстрагировали DCM (3x150 мл). Объединенный органический растворитель сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5-1/2), получая 60 в виде желтого масла(12,1 г, 90% выход).To a solution of sodium hydride (60% w / w, 6.95 g, 174 mmol) in THF (200 ml) was added 59 (20.0 g, 43.4 mmol) in THF (80 ml) at -20 ° C dropwise over 5 min. After stirring at 25 ° C for 2 h, benzyl bromide (22.3 g, 130 mmol, 15.5 ml) was added dropwise and the mixture was stirred at 80 ° C for 16 h before adding water (2 ml) at 0 ° C. ... The mixture was diluted with water (200 ml) and extracted with DCM (3x200 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue was then dissolved in DCM (200 ml) and DCA (5.48 g, 42.5 mmol, 12.0 ml) was added. After stirring at 25 ° C for 3 h, saturated aqueous sodium bicarbonate solution was added at 0 ° C. The mixture was then extracted with DCM (3x150 ml). The combined organic solvent was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 5-1 / 2) to give 60 as a yellow oil (12.1 g, 90% yield).

Стадия 6. Бензоат 61Stage 6. Benzoate 61

- 29 037513- 29 037513

К раствору 60 (24,0 г, 78 ммоль) в DCM (500 мл) добавляли бензоилхлорид (16,4 г, 116,7 ммоль,To a solution of 60 (24.0 g, 78 mmol) in DCM (500 ml) was added benzoyl chloride (16.4 g, 116.7 mmol,

13,6 мл) и TEA (23,6 г, 233,5 ммоль, 32,4 мл). После перемешивания при 25°С в течение 16 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/15-1/10), получая 61 в виде светло-желтого масла (30,0 г, 93% выход). (MS: [M+Na]+ 435,1).13.6 ml) and TEA (23.6 g, 233.5 mmol, 32.4 ml). After stirring at 25 ° C for 16 h, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 15-1 / 10) to give 61 as a light yellow oil (30.0 g, 93% yield) ... (MS: [M + Na] + 435.1).

Стадия 7. Ацетат 62Stage 7. Acetate 62

BzO—1 ₀ °Ас ) ОАсBzO — 1 ₀ ° Ac) OAc

ВпО ⁶² VPO ⁶²

Смесь 61 (29,0 г, 70,3 ммоль) и воды (3,0 мл) в НОАс (220 мл) перемешивали при 70°С в течение 16 ч перед добавлением насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Затем смесь экстрагировали DCM (3x400 мл). Объединенные органические слои концентрировали и остаток растворяли в Ру (30 мл), с последующим добавлением Ас₂О (28,5 г, 280 ммоль, 26 мл). После перемешивания при 20°С в течение 16 ч добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и затем смесь экстрагировали DCM (3x500 мл). Объединенные органические слои концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/10-1/5), получая 62 в виде белого твердого остатка (31,1 г, 97% выход). (MS: [M+Na]⁺ 479,1).A mixture of 61 (29.0 g, 70.3 mmol) and water (3.0 ml) in HOAc (220 ml) was stirred at 70 ° C for 16 h before adding saturated aqueous sodium bicarbonate solution. The mixture was then extracted with DCM (3x400 ml). The combined organic layers were concentrated and the residue was dissolved in Py (30 ml), followed by the addition of Ac ₂ O (28.5 g, 280 mmol, 26 ml). After stirring at 20 ° C for 16 h, saturated aqueous sodium bicarbonate solution was added and then the mixture was extracted with DCM (3x500 ml). The combined organic layers were concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 10-1 / 5) to give 62 as a white solid (31.1 g, 97% yield). (MS: [M + Na] ⁺ 479.1).

Стадия 8. Пурин 63Stage 8. Pudding 63

OC(O)NPh_{2 Bz0 о} « V ) QKzOC (O) NPh _{2 Bz0 о} «V) QKz

ВпО 63VPO 63

К суспензии O⁶-дифенилкарбамоил-N²-изобутирилгуанина (5,47 г, 13,1 ммоль) в MeCN (150 мл) добавляли BSA (11,6 г, 57,0 ммоль, 14,1 мл) при 20°С. После перемешивания при 63°С в течение 30 мин летучие компоненты удаляли и остаток растворяли в MeCN (200 мл) перед добавлением 62 (5,00 г, 11,0 ммоль) в MeCN (50 мл) и TMSOTf (3,65 г, 16,4 ммоль, 3,0 мл) при -15°С. После перемешивания при 63°С в течение 50 мин смесь охлаждали до 0°С, выливали в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и экстрагировали ЕА (3x150 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и очищали флэш-хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/3-1/1), получая 63 в виде белого твердого остатка. (MS: [M+H]⁺ 813,1).To a suspension of O ⁶ -Diphenylcarbamoyl-N ² -isobutyrylguanine (5.47 g, 13.1 mmol) in MeCN (150 ml) was added BSA (11.6 g, 57.0 mmol, 14.1 ml) at 20 ° C. ... After stirring at 63 ° C for 30 min, the volatiles were removed and the residue was dissolved in MeCN (200 ml) before adding 62 (5.00 g, 11.0 mmol) in MeCN (50 ml) and TMSOTf (3.65 g, 16.4 mmol, 3.0 ml) at -15 ° C. After stirring at 63 ° C for 50 min, the mixture was cooled to 0 ° C, poured into saturated aqueous sodium bicarbonate solution and extracted with EA (3x150 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated and purified by flash silica gel chromatography (EA / PE = 1 / 3-1 / 1) to give 63 as a white solid. (MS: [M + H] ⁺ 813.1).

Стадия 9. Гуанозин 64Stage 9. Guanosine 64

Раствор 63 (16,2 г, 19,9 ммоль) в 90% водном растворе TFA (60 мл) перемешивали при 20°С в течение 30 мин перед выливанием в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия при 0°С и экстрагированием ЕА (3x100 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и очищали флэш-хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/1-1/0), получая 64 в виде белого твердого остатка (11,4 г, 93% выход). (MS: [M+H]⁺ 618,1).A solution of 63 (16.2 g, 19.9 mmol) in 90% aqueous TFA solution (60 ml) was stirred at 20 ° C for 30 min before pouring into saturated aqueous sodium bicarbonate solution at 0 ° C and extracting with EA (3x100 ml ). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated and purified by flash silica gel chromatography (EA / PE = 1 / 1-1 / 0) to give 64 as a white solid (11.4 g, 93% yield). (MS: [M + H] ⁺ 618.1).

Стадия 10. Силиловый эфир 65Stage 10. Silyl ether 65

К раствору 64 (15,0 г, 24,3 ммоль) в EtOH (500 мл) добавляли Pd/C (10% вес./вес., 2,0 г) и концен- 30 037513 трированную хлористоводородную кислоту (10 капель). После перемешивания при 50°С в атмосфере водорода (44 пси) в течение 15 ч смесь фильтровали и твердый остаток промывали EtOH (3x100 мл). Фильтрат концентрировали и одну треть остатка растворяли в DMF (60 мл) с последующим добавлением Imid (1,57 г, 23,0 ммоль), DMAP (46,9 мг, 0,38 ммоль) и триизопропилсилилхлорида (2,22 г, 11,5 ммоль, 2,5 мл). После перемешивания при 20°С в течение 16 ч добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл) и воду (100 мл). Затем смесь экстрагировали ЕА (2x100 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5-2/1), получая 65 в виде белого твердого остатка (4,52 г, 8 6% выход). (MS: [М+Н]⁺ 684,4).To a solution of 64 (15.0 g, 24.3 mmol) in EtOH (500 ml) were added Pd / C (10% w / w, 2.0 g) and concentrated hydrochloric acid (10 drops) ... After stirring at 50 ° C under a hydrogen atmosphere (44 psi) for 15 h, the mixture was filtered and the solid was washed with EtOH (3x100 ml). The filtrate was concentrated and one third of the residue was dissolved in DMF (60 ml) followed by the addition of Imid (1.57 g, 23.0 mmol), DMAP (46.9 mg, 0.38 mmol) and triisopropylsilyl chloride (2.22 g, 11 , 5 mmol, 2.5 ml). After stirring at 20 ° C. for 16 h, saturated aqueous sodium bicarbonate solution (20 ml) and water (100 ml) were added. The mixture was then extracted with EA (2x100 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 5-2 / 1) to give 65 as a white solid (4.52 g, 8-6% yield) ... (MS: [M + H] ⁺ 684.4).

Стадия 11: ВС4Stage 11: BC4

К раствору 65 (3,0 г, 4,4 ммоль) в EtOH (30 мл) добавляли водный раствор гидроксида натрия (2 М, 31 мл) при 0°С. После перемешивания при 0°С в течение 30 мин смесь нейтрализовали добавлением раствора хлористоводородной кислоты (1N) и НОАс при 0°С. Затем добавляли толуол (30 мл) и смесь концентрировали, получая неочищенный ВС4 в виде белого твердого остатка (3,0 г). (MS: [M+H]⁺ 538,2).To a solution of 65 (3.0 g, 4.4 mmol) in EtOH (30 ml) was added an aqueous solution of sodium hydroxide (2 M, 31 ml) at 0 ° C. After stirring at 0 ° C for 30 min, the mixture was neutralized by adding a solution of hydrochloric acid (1N) and HOAc at 0 ° C. Then toluene (30 ml) was added and the mixture was concentrated to give crude BC4 as a white solid (3.0 g). (MS: [M + H] ⁺ 538.2).

Получение ВС5:Receiving BC5:

Стадия 1. Спирт 66Stage 1. Alcohol 66

К раствору 15 (2,0 г, 5,66 ммоль) в Ру (56 мл) при 0°С медленно добавляли 1,3-дихлор-1,1,3,3тетраизопропилдисилоксан (1,79 г, 5, 66 ммоль, 1,8 мл). После перемешивания при 0°С в течение 30 мин и 25°С в течение 12 ч раствор концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20), получая 66 (1,6 г, 47% выход). (MS: [М+Н]+ 596,3).To a solution of 15 (2.0 g, 5.66 mmol) in Py (56 ml) at 0 ° C was slowly added 1,3-dichloro-1,1,3,3 tetraisopropyldisiloxane (1.79 g, 5.66 mmol, 1.8 ml). After stirring at 0 ° C for 30 min and 25 ° C for 12 h, the solution was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1/20) to give 66 (1.6 g, 47% yield). (MS: [M + H] + 596.3).

Стадия 2. Пурин 67Stage 2. Pudding 67

К раствору 66 (8,0 г, 13,5 ммоль) и 2-(4-нитрофенил)этанола (3,37 г, 20,2 ммоль) в THF (100 мл) медленно добавляли DIAD (6,81 г, 33,7 ммоль, 6,6 мл) и PPh₃ (8,83 г, 33,7 ммоль) при 25°С. После пере- 31 037513 мешивания при 25°С в течение 12 ч добавляли воду (5 мл) и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20), получая 67 в виде бледно-желтого твердого остатка (4,5 г, 44% выход). (MS: [M+H]+ 745,3).To a solution of 66 (8.0 g, 13.5 mmol) and 2- (4-nitrophenyl) ethanol (3.37 g, 20.2 mmol) in THF (100 mL) was slowly added DIAD (6.81 g, 33 , 7 mmol, 6.6 ml) and PPh ₃ (8.83 g, 33.7 mmol) at 25 ° C. After overstirring at 25 ° C for 12 h, water (5 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1/20) to give 67 as a pale yellow solid residue (4 , 5 g, 44% yield). (MS: [M + H] + 745.3).

Стадия 3. Спирт 68Stage 3. Alcohol 68

К раствору 67 (4,20 г, 5,64 ммоль) в MeCN (40 мл) при 25°С добавляли IBX (3,16 г, 11,3 ммоль). После перемешивания при 80°С в течение 12 ч смесь фильтровали и концентрировали и растворяли в THF (50 мл). Затем медленно добавляли триацетоксиборгидрид натрия (5,7 г, 27,0 ммоль) при 0°С. После перемешивания при 25°С в течение 6 ч добавляли воду (5 мл) и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20), получая 68 в виде бледно-желтого масла (1,0 г, 33% выход). (MS: [M+H]+ 745,3).To a solution of 67 (4.20 g, 5.64 mmol) in MeCN (40 ml) at 25 ° C was added IBX (3.16 g, 11.3 mmol). After stirring at 80 ° C for 12 h, the mixture was filtered and concentrated and dissolved in THF (50 ml). Then sodium triacetoxyborohydride (5.7 g, 27.0 mmol) was added slowly at 0 ° C. After stirring at 25 ° C for 6 h, water (5 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1/20) to give 68 as a pale yellow oil (1.0 g, 33 % output). (MS: [M + H] + 745.3).

Стадия 4. Азид 69Stage 4. Azide 69

К раствору 68 (2,2 г, 2,95 ммоль) и DMAP (1,44 г, 11,8 ммоль) в DCM (140 мл) и Ру (10 мл) медленно добавляли ангидрид трифторметансульфокислоты (1,33 г, 4,72 ммоль, 0,78 мл) при 0°С. После перемешивания при 0°С в течение 1,5 ч смесь концентрировали. Затем остаток растворяли в DMF (10 мл) и добавляли азид натрия (0,49 г, 7,53 ммоль). После перемешивания при 60°С в течение 6 ч раствор концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ (МеОН/вода с 0,1% НСООН: 40-100%), получая 69 в виде бледно-желтого твердого остатка (1,50 г, 79% выход). (MS: [М+Н]+ 770,4).To a solution of 68 (2.2 g, 2.95 mmol) and DMAP (1.44 g, 11.8 mmol) in DCM (140 ml) and Py (10 ml) was slowly added trifluoromethanesulfonic anhydride (1.33 g, 4 , 72 mmol, 0.78 ml) at 0 ° C. After stirring at 0 ° C for 1.5 h, the mixture was concentrated. The residue was then dissolved in DMF (10 ml) and sodium azide (0.49 g, 7.53 mmol) was added. After stirring at 60 ° C for 6 h, the solution was concentrated and purified by preparative HPLC (MeOH / water with 0.1% HCOOH: 40-100%) to give 69 as a pale yellow solid (1.50 g, 79% output). (MS: [M + H] + 770.4).

Стадия 5. ВС5Stage 5. BC5

К раствору 69 (2,50 г, 3,25 ммоль) в THF (12 мл) медленно добавляли TBAF (13,1 г, 50,1 ммоль) и НОАс (1,50 г, 25,0 ммоль, 1,43 мл) при 15°С. После перемешивания при 15°С в течение 12 ч смесь концентрировали. Затем остаток растворяли в DCM (20 мл), промывали водой (2x5 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/20), получая ВС5 в виде бледно-желтого твердого остатка (900 мг, 53% выход). (MS: [M+H]+ 528,2).To a solution of 69 (2.50 g, 3.25 mmol) in THF (12 ml), TBAF (13.1 g, 50.1 mmol) and HOAc (1.50 g, 25.0 mmol, 1.43 ml) at 15 ° C. After stirring at 15 ° C for 12 hours, the mixture was concentrated. The residue was then dissolved in DCM (20 ml), washed with water (2x5 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1/20) to give BC5 as a pale yellow solid ( 900 mg, 53% yield). (MS: [M + H] + 528.2).

Следующие соединения получали, по существу способом промежуточных соединений ВС3 и ВС4 выше.The following compounds were prepared essentially by the method of intermediates BC3 and BC4 above.

ИсходноеThe original

Ссылка для соединение полученияLink for connection receiving

Таблица 1Table 1

Промежуточные соединения ВС6 и ВС7Intermediate connections BC6 and BC7

- 32 037513- 32 037513

Получение А1 и А2:Getting A1 and A2:

Стадия 1. Бензоат 70Stage 1. Benzoate 70

К раствору 33 (120 г, 449 ммоль) в Ру (1,0 л) добавляли TMSCl (390 г, 3,59 моль, 454 мл). После перемешивания при 0°С в течение 2 ч добавляли по каплям бензоилхлорид (316 г, 2,25 моль, 261 мл) и смесь перемешивали при 25°С в течение 14 ч перед охлаждением до 0°С. Затем добавляли воду (240 мл) и смесь перемешивали при 25°С в течение 30 мин перед добавлением гидроксида аммония (460 мл) при 0°С. После перемешивания в течение 2 ч смесь концентрировали, получая 70 в виде белого твердого остатка (150 г, 90% выход).To a solution of 33 (120 g, 449 mmol) in Py (1.0 L) was added TMSCl (390 g, 3.59 mol, 454 mL). After stirring at 0 ° C for 2 h, benzoyl chloride (316 g, 2.25 mol, 261 mL) was added dropwise and the mixture was stirred at 25 ° C for 14 h before cooling to 0 ° C. Then added water (240 ml) and the mixture was stirred at 25 ° C for 30 min before adding ammonium hydroxide (460 ml) at 0 ° C. After stirring for 2 hours, the mixture was concentrated to give 70 as a white solid (150 g, 90% yield).

Стадия 2. Диол 71Stage 2. Diol 71

К раствору 70 (150 г, 404 ммоль) в Ру (500 мл) добавляли DMTrCl (274 г, 808 ммоль), TEA (81,8 г, 808 ммоль, 112 мл) и DMAP (4,93 г, 40,4 ммоль) при 0°С. После перемешивания при 25°С в течение 16 ч добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (1 л) и смесь экстрагировали EtOAc (600 млх3). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ 1/4-1/2, затем MeOH/DCM 1/100-1/20), получая 71 в виде белого твердого остатка (65,0 г, 24% выход).DMTrCl (274 g, 808 mmol), TEA (81.8 g, 808 mmol, 112 ml) and DMAP (4.93 g, 40.4 mmol) at 0 ° C. After stirring at 25 ° C for 16 h, saturated aqueous sodium bicarbonate solution (1 L) was added and the mixture was extracted with EtOAc (600 ml × 3). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE 1 / 4-1 / 2 then MeOH / DCM 1 / 100-1 / 20) to give 71 as a white solid. (65.0 g, 24% yield).

Стадия 3. Силиловый эфир 72Stage 3. Silyl ether 72

К раствору 71 (65,0 г, 96,5 ммоль) в Ру (500 мл) добавляли нитрат серебра (32,8 г, 193 ммоль) иTo a solution of 71 (65.0 g, 96.5 mmol) in Py (500 ml) was added silver nitrate (32.8 g, 193 mmol) and

- 33 037513- 33 037513

TBSCl (29,1 г, 193 ммоль) при 25°С. После перемешивания при 25°С в течение 1 ч добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (1 л) и смесь экстрагировали EtOAc (3x600 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/4-1/1), получая 72 в виде белого твердого остатка (20,0 г, 26% выход).TBSCl (29.1 g, 193 mmol) at 25 ° C. After stirring at 25 ° C for 1 h, saturated aqueous sodium bicarbonate solution (1 L) was added and the mixture was extracted with EtOAc (3x600 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 4-1 / 1) to give 72 as a white solid (20.0 g, 26% yield).

Стадия 4. А2Stage 4. A2

К раствору 72 (12,0 г, 15,2 ммоль) в DIPEA (15 мл) и DCM (30 мл) добавляли DMAP (744 мг, 6,09 ммоль) и 2-цианоэтил N,N- диизопропилхлорфосфорамидит (5,41 г, 22,9 ммоль) при 25°С. После перемешивания в течение 2 ч смесь непосредственно очищали колоночной хроматографией на основном силикагеле (ЕА/РЕ = 1/4-1/1), получая А2 в виде белого твердого остатка (13,0 г, 86% выход).To a solution of 72 (12.0 g, 15.2 mmol) in DIPEA (15 ml) and DCM (30 ml) were added DMAP (744 mg, 6.09 mmol) and 2-cyanoethyl N, N-diisopropylchlorophosphoramidite (5.41 d, 22.9 mmol) at 25 ° C. After stirring for 2 hours, the mixture was directly purified by basic silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 4-1 / 1) to give A2 as a white solid (13.0 g, 86% yield).

Стадия 5. А1Stage 5. A1

К раствору А2 (3,8 г, 3,9 ммоль) в MeCN (20 мл) добавляли воду (0,1 мл) и трифторацетат пиридиния (1,1 г, 5,8 ммоль) при 25°С и перемешивали в течение 5 мин перед добавлением трет-бутиламина (14,0 г, 0,19 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин, летучие компоненты удаляли и остаток растворяли в DCM (20 мл). Затем добавляли раствор DCA (1,9 г, 14,6 ммоль) в DCM (20 мл). После перемешивания в течение 30 мин добавляли TEA (3 мл) и смесь концентрировали и очищали обращенофазовой колоночной хроматографией на силикагеле (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-100%), получая Al-ТЕА соль в виде белого твердого остатка (1,5 г, 71% выход). (MS: [M+H]+ 549,2).To a solution of A2 (3.8 g, 3.9 mmol) in MeCN (20 ml) were added water (0.1 ml) and pyridinium trifluoroacetate (1.1 g, 5.8 mmol) at 25 ° C and stirred for 5 min before adding tert-butylamine (14.0 g, 0.19 mmol). After stirring for 15 min, the volatiles were removed and the residue was dissolved in DCM (20 ml). Then a solution of DCA (1.9 g, 14.6 mmol) in DCM (20 ml) was added. After stirring for 30 min, TEA (3 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by reverse phase silica gel column chromatography (MeCN with 0.1% TEA / water = 0-100%) to give the Al-TEA salt as a white solid ( 1.5 g, 71% yield). (MS: [M + H] + 549.2).

Получение АВ 1:Getting AB 1:

ммоль), трифенилфосфина (197 мг, 0,75 ммоль) иmmol), triphenylphosphine (197 mg, 0.75 mmol) and

К раствору А2 (494 мг, 0,5To solution A2 (494 mg, 0.5

2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этанола (132 мг, 0,75 ммоль) в THF (5 мл) добавляли DIAD (0,15 мл, 0,75 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 5 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан = 1/9-1/4), получая АВ1 в виде белого твердого остатка (230 мг, 40% выход).2- (tert-butyldimethylsilyloxy) ethanol (132 mg, 0.75 mmol) in THF (5 ml) was added DIAD (0.15 ml, 0.75 mmol). After stirring at room temperature for 5 hours, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / hexane = 1 / 9-1 / 4) to give AB1 as a white solid (230 mg, 40% yield).

Получение АС 1:Receiving AC 1:

- 34 037513- 34 037513

Стадия 1. Диол 73Stage 1. Diol 73

К раствору неочищенного ВС1 (39 г) в Ру (40 мл) добавляли DMTrCl (35,9 г, 106 ммоль) при 0°С. После перемешивания при 25°С в течение 16 ч добавляли МеОН (50 мл) и смесь концентрировали. Затем остаток растворяли в DCM (600 мл), промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и соляным раствором, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/100-1/50), получая 73 в виде бледно-желтого твердого остатка (34,0 г, 48% выход на две стадии). (MS: [M+H]⁺ 673,2).To a solution of crude BC1 (39 g) in Py (40 ml) was added DMTrCl (35.9 g, 106 mmol) at 0 ° C. After stirring at 25 ° C for 16 h, MeOH (50 ml) was added and the mixture was concentrated. The residue was then dissolved in DCM (600 ml), washed with saturated aqueous sodium bicarbonate and brine, concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 100-1 / 50) to give 73 as a pale yellow solid (34.0 g, 48% yield over two stages). (MS: [M + H] ⁺ 673.2).

Стадия 2. Силиловый эфир 74Stage 2. Silyl ether 74

К раствору 73 (1,0 г, 1,49 ммоль) в Ру (10 мл) добавляли нитрат серебра (380 мг, 2,24 ммоль, 0,38 мл) при 0°С. После перемешивания в течение 15 мин добавляли TBSCl (270 мг, 1,79 ммоль) и смесь перемешивали при 25°С в течение 2 ч перед добавлением насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Затем смесь экстрагировали ЕА (10 мл) и органический слой промывали соляным раствором, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5), получая 74 в виде бледно-желтого твердого остатка (400 мг, 34% выход). (MS: [М+Н]+ 787,3).To a solution of 73 (1.0 g, 1.49 mmol) in Py (10 ml) was added silver nitrate (380 mg, 2.24 mmol, 0.38 ml) at 0 ° C. After stirring for 15 minutes, TBSCl (270 mg, 1.79 mmol) was added and the mixture was stirred at 25 ° C. for 2 hours before the addition of saturated aqueous sodium bicarbonate solution. The mixture was then extracted with EA (10 ml) and the organic layer was washed with brine, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1/5) to give 74 as a pale yellow solid (400 mg, 34% yield). (MS: [M + H] + 787.3).

Стадия 3. АС1Stage 3. AC1

К раствору 74 (1,0 г, 1,27 ммоль) в Ру (10 мл) добавляли дифенилфосфит (80%, 744 мг, 2,54 ммоль, 0,61 мл). После перемешивания при 20°С в течение 1 ч добавляли ЕА (2 мл) и насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (2 мл) и смесь перемешивали в течение 1 ч. Слои разделяли и органический слой концентрировали. Затем остаток растворяли в DCM (1,0 мл) и добавляли DCA (164 мг, 1,27 ммоль, 0,1 мл). После перемешивания при 25°С в течение 30 мин добавляли TEA (1 мл) и раствор концентрировали и очищали обращено-фазовой колоночной хроматографией на силикагеле (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-100%), получая АС1 в виде белого твердого остатка (500 мг, 72% выход). (MS: [M+H]⁺ 549,2).To a solution of 74 (1.0 g, 1.27 mmol) in Py (10 ml) was added diphenylphosphite (80%, 744 mg, 2.54 mmol, 0.61 ml). After stirring at 20 ° C for 1 h, EA (2 ml) and saturated aqueous sodium bicarbonate solution (2 ml) were added and the mixture was stirred for 1 h. The layers were separated and the organic layer was concentrated. The residue was then dissolved in DCM (1.0 ml) and DCA (164 mg, 1.27 mmol, 0.1 ml) was added. After stirring at 25 ° C for 30 min, TEA (1 ml) was added and the solution was concentrated and purified by reverse phase silica gel column chromatography (MeCN with 0.1% TEA / water = 0-100%) to give AC1 as a white solid residue (500 mg, 72% yield). (MS: [M + H] ⁺ 549.2).

Получение АС2Receiving AC2

К раствору ВС2 (348 мг, 1,49 ммоль) в Ру (15 мл) добавляли DMAP (18 мг, 0,15 ммоль) и DMTrClDMAP (18 mg, 0.15 mmol) and DMTrCl were added to a solution of BC2 (348 mg, 1.49 mmol) in Py (15 mL)

- 35 037513 (0,66 г, 1,94 ммоль). После перемешивания в течение ночи добавляли МеОН (3 мл) и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан = 1/4), получая 75 (662 мг, 83% выход). (MS: [М+Н]⁺ 536,2).- 35 037513 (0.66 g, 1.94 mmol). After stirring overnight, MeOH (3 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / hexane = 1/4) to give 75 (662 mg, 83% yield). (MS: [M + H] ⁺ 536.2).

Стадия 2. АС2Stage 2. AC2

К раствору 75 (0,2 г, 0,37 ммоль) в DCM (4 мл) добавляли DIEPA (0,15 г, 1,2 ммоль, 0,2 мл) и 2-цианоэтил N,N-диизопропилхлорфосфорамидит (0,14 г, 0,56 ммоль, 0,13 мл). После перемешивания в течение 4 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан с 1% ТЕА = 1/4), получая АС2 (232 мг, 85% выход). (MS: [M-NiPr₂+H₂O]+ 653,2).To a solution of 75 (0.2 g, 0.37 mmol) in DCM (4 ml) were added DIEPA (0.15 g, 1.2 mmol, 0.2 ml) and 2-cyanoethyl N, N-diisopropylchlorophosphoramidite (0, 14 g, 0.56 mmol, 0.13 ml). After stirring for 4 h, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / hexane with 1% TEA = 1/4) to give AC2 (232 mg, 85% yield). (MS: [M-NiPr ₂ + H ₂ O] + 653.2).

Получение G1 и G2:Getting G1 and G2:

о оoh oh

DMTrO (^fPr₂N)P(OCE)CIDMTrO ( ^f Pr ₂ N) P (OCE) CI

DMAP, DIPEADMAP, DIPEA

1, Ру-TFA1, Ru-TFA

2. ^fBuNH₂ 2. ^f BuNH ₂

3. DCA3. DCA

NH/buNH / bu

Стадия 1. Силиловый эфир 76Stage 1. Silyl ether 76

К раствору 16 (11,0 г, 16,8 ммоль) в DCM (80 мл) добавляли TBSC1 (7,59 г, 50,3 ммоль) и Imid (3,43 г, 50,3 ммоль). После перемешивания при 25°С в течение 16 ч добавляли водный раствор бикарбоната натрия (5%, 30 мл) и смесь экстрагировали DCM (60 млх3). Объединенные органические слои промывали соляным раствором (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на основном силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5-1/1) до 76 в виде белого твердого остатка (2,1 г, 16% выход).To a solution of 16 (11.0 g, 16.8 mmol) in DCM (80 ml) were added TBSC1 (7.59 g, 50.3 mmol) and Imid (3.43 g, 50.3 mmol). After stirring at 25 ° C for 16 h, an aqueous sodium bicarbonate solution (5%, 30 ml) was added and the mixture was extracted with DCM (60 ml × 3). The combined organic layers were washed with brine (100 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by basic silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 5-1 / 1) to 76 as a white solid residue (2, 1 g, 16% yield).

Стадия 2. G2Stage 2. G2

К раствору 76 (900 мг, 1,17 ммоль) в THF (4,0 мл) и DIEPA (4,0 мл) добавляли DMAP (14,3 мг, 0,12 ммоль), с последующим добавлением 2-цианоэтил N,N-диизопропилхлорфосфорамидита (415 мг, 1,76 ммоль) по каплям при 0°С. После перемешивания при 20-25°С в течение 2 ч добавляли водный раствор бикарбоната натрия (5%, 15 мл) при 0°С. Затем смесь разбавляли водой (15 мл) и экстрагировалиTo a solution of 76 (900 mg, 1.17 mmol) in THF (4.0 ml) and DIEPA (4.0 ml) was added DMAP (14.3 mg, 0.12 mmol), followed by the addition of 2-cyanoethyl N, N-diisopropyl chlorophosphoramidite (415 mg, 1.76 mmol) dropwise at 0 ° C. After stirring at 20-25 ° C for 2 h, an aqueous sodium bicarbonate solution (5%, 15 ml) was added at 0 ° C. The mixture was then diluted with water (15 ml) and extracted

- 36 037513- 36 037513

ЕА (3x15 мл). Объединенные органические слои промывали соляным раствором (10 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ацетон/РЕ=1/10-1/3), получая G2 в виде белого твердого остатка (600 мг, 53% выход).EA (3x15 ml). The combined organic layers were washed with brine (10 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (acetone / PE = 1 / 10-1 / 3) to give G2 as a white solid (600 mg , 53% yield).

Стадия 3. G1Stage 3. G1

К раствору G1 (7,0 г, 7,22 ммоль) в MeCN (30 мл) добавляли воду (0,11 мл) и трифторацетат пиридиния (4,18 г, 21,7 ммоль) при 25°С. После перемешивания при 25°С в течение 15 мин добавляли третбутиламин (37 мл) и смесь перемешивали при 25°С в течение 45 мин перед концентрированием. Затем остаток растворяли в DCM (30 мл), и добавляли по каплям раствор DCA в DCM (6% об./об., 30 мл). После перемешивания при 20-25°С в течение 30 мин добавляли DCM (30 мл) и TEA (4 мл). Затем смесь концентрировали, растворяли в смеси MeCN (5 мл) и воды (5 мл), и очищали С18 обращено-фазовой жидкостной хроматографией среднего давления (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-60%), получая G1-TEA соль в виде желтого твердого остатка (2,30 г, 56% выход). (MS: [M+H]+ 532,3).To a solution of G1 (7.0 g, 7.22 mmol) in MeCN (30 ml) were added water (0.11 ml) and pyridinium trifluoroacetate (4.18 g, 21.7 mmol) at 25 ° C. After stirring at 25 ° C for 15 min, tert-butylamine (37 ml) was added and the mixture was stirred at 25 ° C for 45 min before concentration. The residue was then dissolved in DCM (30 ml) and a solution of DCA in DCM (6% v / v, 30 ml) was added dropwise. After stirring at 20-25 ° C for 30 min, DCM (30 ml) and TEA (4 ml) were added. The mixture was then concentrated, dissolved in a mixture of MeCN (5 ml) and water (5 ml), and purified by C18 medium pressure reversed phase liquid chromatography (MeCN with 0.1% TEA / water = 0-60%) to give G1-TEA salt as a yellow solid (2.30 g, 56% yield). (MS: [M + H] + 532.3).

оabout

НОBUT

Получение GB1 и GB2: оGetting GB1 and GB2: about

NH/buNH / bu

2. teuNH2.teuNH

DMTrODMTrO

Стадия 1. Диол 77Stage 1. Diol 77

К раствору двух партий неочищенного ВВ1 (8,0 г), полученного выше, в Ру (50 мл) добавляли ('Pr₂N)P(OCE)CITo a solution of two batches of crude BB1 (8.0 g) obtained above in Py (50 ml) was added ('Pr ₂ N) P (OCE) CI

DMAP, DIPEADMAP, DIPEA

DMTrCl (9,2 г, 27,2 ммоль). После перемешивания при 20-30°С в течение 1 ч добавляли МеОН (10 мл) и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5MeOH/DCM = 1/20), получая 77 в виде желтого твердого остатка (11,0 г, 30% выход на две стадии). (MS: [M+Na]⁺ 678,2).DMTrCl (9.2 g, 27.2 mmol). After stirring at 20-30 ° C for 1 h, MeOH (10 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 5MeOH / DCM = 1/20) to give 77 as a yellow solid residue (11.0 g, 30% yield over two stages). (MS: [M + Na] ⁺ 678.2).

Стадия 2. Силиловый эфир 78Stage 2. Silyl ether 78

К раствору 77 (9,0 г, 14,0 ммоль) в Ру (50 мл) добавляли TBSCl (2,48 г, 16,5 ммоль) и нитрат серебра (5,83 г, 34,3 ммоль). После перемешивания при 25-30°С в течение 30 мин добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Затем смесь экстрагировали DCM (2x200 мл) и объединенные органи- 37 037513 ческие слои промывали водой (50 мл), соляным раствором (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ =To a solution of 77 (9.0 g, 14.0 mmol) in Py (50 ml) were added TBSCl (2.48 g, 16.5 mmol) and silver nitrate (5.83 g, 34.3 mmol). After stirring at 25-30 ° C. for 30 min, saturated aqueous sodium bicarbonate solution was added. The mixture was then extracted with DCM (2x200 ml) and the combined organic layers were washed with water (50 ml), brine (50 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE =

1/10-1/5-1/3), получая 78 в виде белой пены (1,50 г, 14% выход). (MS: [M+Na]+ 792,2).1 / 10-1 / 5-1 / 3) to give 78 as a white foam (1.50 g, 14% yield). (MS: [M + Na] + 792.2).

Стадия 3. GB1Stage 3. GB1

К раствору 78 (2,50 г, 3,3 ммоль) в DIEPA (5 мл) и DCM (5 мл) добавляли DMAP (200 мг, 1,62 ммоль) и 2-цианоэтил N,N-диизопропилхлорфосфорамидит (1,0 г, 4,22 ммоль). После перемешивания при 20-25°С в течение 2 ч смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ = 1/10-1/4), получая GB1 в виде белой пены (2,30 г, 73% выход).To a solution of 78 (2.50 g, 3.3 mmol) in DIEPA (5 ml) and DCM (5 ml) were added DMAP (200 mg, 1.62 mmol) and 2-cyanoethyl N, N-diisopropylchlorophosphoramidite (1.0 d, 4.22 mmol). After stirring at 20-25 ° C for 2 h, the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE = 1 / 10-1 / 4) to give GB1 as a white foam (2.30 g, 73% yield) ...

Стадия 4. GB2Stage 4. GB2

К раствору GB1 (2,30 г, 2,4 ммоль) в MeCN (2,0 мл) добавляли воду (0,11 мл, 6,1 ммоль) и трифторацетат пиридиния (687 мг, 3,56 ммоль) при 25°С. После перемешивания при 25-30°С в течение 30 мин смесь концентрировали и остаток растворяли в MeCN (20 мл) перед добавлением трет-бутиламина (10,5 г, 144 ммоль, 15,0 мл). После перемешивания при 25-30°С в течение 30 мин смесь концентрировали и добавляли DCM (20 мл), с последующим добавлением раствора DCA в DCM (6% об./об., 18,2 мл). Смесь перемешивали при 25-30°С в течение 30 мин перед нейтрализацией TEA до ~рН 7, концентрировали и очищали С18 обращено-фазовой колоночной хроматографией на силикагеле (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-40%), получая GB2 в виде белого твердого остатка (800 мг, 63% выход). (MS: [M+H]⁺ 532,0).To a solution of GB1 (2.30 g, 2.4 mmol) in MeCN (2.0 ml) were added water (0.11 ml, 6.1 mmol) and pyridinium trifluoroacetate (687 mg, 3.56 mmol) at 25 ° FROM. After stirring at 25-30 ° C for 30 min, the mixture was concentrated and the residue was dissolved in MeCN (20 ml) before the addition of tert-butylamine (10.5 g, 144 mmol, 15.0 ml). After stirring at 25-30 ° C for 30 min, the mixture was concentrated and DCM (20 ml) was added, followed by the addition of a DCA solution in DCM (6% v / v, 18.2 ml). The mixture was stirred at 25-30 ° C for 30 min before neutralizing with TEA to ~ pH 7, concentrated and purified by C18 reverse phase silica gel column chromatography (MeCN with 0.1% TEA / water = 0-40%) to give GB2 as a white solid (800 mg, 63% yield). (MS: [M + H] ⁺ 532.0).

Получение GC1Getting GC1

Стадия 1. Спирт 79Stage 1. Alcohol 79

К раствору ВС4 (1,97 г, 2,4 ммоль) в Ру (20 мл) добавляли DMTrCl (984 мг, 2,90 ммоль) при 25°С. После перемешивания в течение 3 ч добавляли МеОН (30 мл) и смесь концентрировали и очищали флэшхроматографией на основном силикагеле (ЕА/РЕ = 1/5-4/1), получая 79 в виде светло-желтого порошка (1,65 г, 82% выход). (MS: [M+H]⁺ 840,2).To a solution of BC4 (1.97 g, 2.4 mmol) in Py (20 ml) was added DMTrCl (984 mg, 2.90 mmol) at 25 ° C. After stirring for 3 h, MeOH (30 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by flash chromatography on basic silica gel (EA / PE = 1 / 5-4 / 1) to give 79 as a light yellow powder (1.65 g, 82 % output). (MS: [M + H] ⁺ 840.2).

- 38 037513- 38 037513

Стадия 2. GC1Stage 2. GC1

К раствору 79 (2,0 г, 2,38 ммоль) в Ру (15 мл) добавляли дифенилфосфит (1,7 г, 7,1 ммоль, 1,4 мл). После перемешивания при 20°С в течение 30 мин добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл) и смесь перемешивали в течение 1 ч. Затем смесь экстрагировали ЕА (3x30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (20 мл) и соляным раствором (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали. Затем остаток растворяли в DCM (40 мл) с последующим добавлением воды (0,4 мл) и DCA (6% об./об. в DCM, 40 мл). После перемешивания при 20°С в течение 15 мин смесь нейтрализовали до рН ~7 TEA, концентрировали и очищали обращено-фазовой колоночной хроматографией на силикагеле (MeCN/вода=25-90%), получая GC1 в виде белого твердого остатка (1,3 г, 90% выход). (MS: [M+H]+ 602,1).To a solution of 79 (2.0 g, 2.38 mmol) in Py (15 ml) was added diphenylphosphite (1.7 g, 7.1 mmol, 1.4 ml). After stirring at 20 ° C for 30 min, saturated aqueous sodium bicarbonate solution (30 ml) was added and the mixture was stirred for 1 h. The mixture was then extracted with EA (3x30 ml). The combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate solution (20 ml) and brine (20 ml), dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was then dissolved in DCM (40 ml) followed by the addition of water (0.4 ml) and DCA (6% v / v in DCM, 40 ml). After stirring at 20 ° C for 15 min, the mixture was neutralized to pH ~ 7 with TEA, concentrated and purified by reverse phase silica gel column chromatography (MeCN / water = 25-90%) to give GC1 as a white solid (1.3 d, 90% yield). (MS: [M + H] + 602.1).

Получение GC2:Getting GC2:

Стадия 1. Спирт 80Stage 1. Alcohol 80

К раствору ВС5 (900 мг, 1,71 ммоль) в Ру (10 мл) добавляли DMTrCl (809 мг, 2,39 ммоль) при 15°С. После перемешивания при 15°С в течение 12 ч добавляли МеОН (0,5 мл) и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/50), получая 80 в виде желтого масла (1,0 г, 71% выход). (MS: [M+H]+ 528,2).To a solution of BC5 (900 mg, 1.71 mmol) in Py (10 ml) was added DMTrCl (809 mg, 2.39 mmol) at 15 ° C. After stirring at 15 ° C for 12 h, MeOH (0.5 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1/50) to give 80 as a yellow oil (1.0 g, 71 % output). (MS: [M + H] + 528.2).

Стадия 2. GC2Stage 2. GC2

К раствору 80 (2,05 г, 2,47 ммоль) в DMF (5,0 мл) добавляли Imid (673 мг, 9,88 ммоль) и TBSCl (745 мг, 4,94 ммоль, 0,61 мл) при 15°С. После перемешивания при 15°С в течение 12 ч смесь концентрировали, и остаток растирали с водой (10 мл). Затем твердый остаток собирали и промывали водой (2x10 мл), РЕ (2x10 мл), сушили и растворяли в THF (18 мл) перед добавлением PPh₃ (1,11 г, 4,24 ммоль) при 15°С. После перемешивания при 15°С в течение 2,5 ч, добавляли воду (0,16 мл) и смесь перемешивали при 50°С в течение 12 ч. Затем раствор концентрировали и очищали обращено-фазовой препаративной ВЭЖХ (МеОН с 0,1% ТЕА/вода = 20-80%), получая GC2 в виде белого твердого остатка (900 мг, 58% выход). (MS: [M+H]+ 918,1).Imid (673 mg, 9.88 mmol) and TBSCl (745 mg, 4.94 mmol, 0.61 ml) were added to a solution of 80 (2.05 g, 2.47 mmol) in DMF (5.0 ml) at 15 ° C. After stirring at 15 ° C for 12 h, the mixture was concentrated and the residue was triturated with water (10 ml). Then the solid residue was collected and washed with water (2x10 ml), PE (2x10 ml), dried and dissolved in THF (18 ml) before adding PPh ₃ (1.11 g, 4.24 mmol) at 15 ° C. After stirring at 15 ° C for 2.5 h, water (0.16 ml) was added and the mixture was stirred at 50 ° C for 12 h. The solution was then concentrated and purified by reverse phase preparative HPLC (MeOH with 0.1% TEA / water = 20-80%) to give GC2 as a white solid (900 mg, 58% yield). (MS: [M + H] + 918.1).

Следующие соединения получали по существу способом для промежуточных соединений А1, А2, АС1, АС2, G1, G2, GC1 и GC2 выше.The following compounds were prepared essentially by the method for intermediates A1, A2, AC1, AC2, G1, G2, GC1 and GC2 above.

- 39 037513- 39 037513

Промежуточные соединения А1-А5, АА1, АА2, АВ1, АС1-АС6, G1-G7, GA1, GB1-GB3 и GC1-GC5Intermediates A1-A5, AA1, AA2, AB1, AC1-AC6, G1-G7, GA1, GB1-GB3 and GC1-GC5

Таблица 2table 2

Исходное соединение Initial connection Продукт Product Ссылка для получения Link to get nh₂ (Ϊ J но—^⁰Г| ^N он он ³³ 33nh ₂ (Ϊ J but - ^ ⁰ Г | ^N he he ³³ 33 NHBz N-^х^м m ΗΟ^^_Ο^^{Ν Ν} Η_χ 0 OTBS ЛИ 0 OH A1 NHBz PMTrO^^_o^^{N N} 'Pr₂N_x /0 OTBS P OOE ^A2 NHBz N- ^ x ^ m m ΗΟ ^^ _Ο ^ ^{Ν Ν} Η _χ 0 OTBS LI 0 OH A1 NHBz PMTrO ^^ _o ^ ^NN 'Pr ₂ N _x / 0 OTBS P OOE ^A2 Al A2 Al A2 NHBz CiS HO^^Q^j^{1 N} ОН ОН В1NHBz CiS HO ^^ Q ^ j ^{1 N} OH OH B1 NHBz OfS НОд^_о^ ^N H_{x X}O OTBS P //\ A, 0 OH A3NHBz OfS Hod ^ _o ^ ^N H _{x X} O OTBS P // \ A, 0 OH A3 Al Al В1 IN 1 NHBz C0 PMTrO^^_o^^{N N} 'Pr₂N^ /0 OTBS P OCE ^A4 NHBz C0 PMTrO ^^ _o ^ ^NN 'Pr ₂ N ^ / 0 OTBS P OCE ^A4 A2 A2 NHBz ΗΟ^Ο,^ Ν ОН ОН В2 NHBz НОД^_О^ ^Ν ОН ВА1NHBz ΗΟ ^ Ο, ^ Ν OH OH B2 NHBz GCD ^ _O ^ ^Ν OH VA1 NHBz ^N' Λ J DMTrO—|^₀^^{Ν N} 'Pr₂N_Xp^O OTBS OOE ^A5 NHBz PMTrO^^_Q^^{N N} 'Pr₂N^ ^0 0. OCE ^AA1 NHBz ^N 'Λ J DMTrO— | ^ ₀ ^ ^{Ν N} ' Pr ₂ N _Xp ^ O OTBS OOE ^A5 NHBz PMTrO ^^ _Q ^ ^NN 'Pr ₂ N ^ ^ 0 0. OCE ^AA1 A2 A2 A2 A2

- 40 037513- 40 037513

NHBz /?Μν MJ НОд^_о^| ^N ОН ОН BA2NHBz /? Μν MJ Hod ^ _o ^ | ^N OH OH BA2 NHBz \ J J PMTrO^^_o^^{N N} 'Pr₂N^_pXO OTBS OCE ^AA2 NHBz \ JJ PMTrO ^^ _o ^ ^NN 'Pr ₂ N ^ _pX O OTBS OCE ^AA2 A2 A2 A2 A2 ^TBS°^NBz PMTrO^^Q^J ^N 'Pr₂N_x ^0 OTBS P OCE ^{AB1 TBS} ° ^ NBz PMTrO ^^ Q ^ J ^N 'Pr ₂ N _x ^ 0 OTBS P OCE ^AB1 ABI ABI

Bl Bl NHBz €0 HO^^_O^^{N N} TBSO 0. ,H P o'он AC3NHBz € 0 HO ^^ _O ^ ^NN TBSO 0., HP o'on AC3 G1 G1 33 33 NHBz НОд^_о^ ^N TBSO 0^ ^H P 0^//X0H AC4NHBz Hod ^ _o ^ ^N TBSO 0 ^ ^ HP 0 ^{// X} 0H AC4 G1 G1

- 41 037513- 41 037513

- 42 037513- 42 037513

- 43 037513- 43 037513

- 44 037513- 44 037513

Получение С1:Receiving C1:

NHBzNHBz

К раствору неочищенного G1 (полученного из 187 мг G2-TEA соли, 0,2 ммоль, содержащей Py-DCA соль) в MeCN (0,5 мл) добавляли раствор А2 (0,26 г, 0,26 ммоль) в MeCN (0,2 мл). После перемешивания в течение 30 мин добавляли DDTT (46 мг, 0,22 ммоль) и смесь перемешивали в течение 1 ч перед концентрированием. Остаток растворяли в DCM (4,8 мл) и добавляли воду (0,036 мл) и DCA (6% в DCM, 4,8 мл). После перемешивания в течение 10 мин добавляли Ру (1 мл) и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/10-1/5), получая Cl-Py соль в виде белого твердого остатка (86 мг, 35% выход). (MS: [M+H]+ 1148,0).To a solution of crude G1 (prepared from 187 mg of G2-TEA salt, 0.2 mmol containing Py-DCA salt) in MeCN (0.5 ml) was added a solution of A2 (0.26 g, 0.26 mmol) in MeCN ( 0.2 ml). After stirring for 30 min, DDTT (46 mg, 0.22 mmol) was added and the mixture was stirred for 1 h before being concentrated. The residue was dissolved in DCM (4.8 ml) and water (0.036 ml) and DCA (6% in DCM, 4.8 ml) were added. After stirring for 10 min, Py (1 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 10-1 / 5) to give the Cl-Py salt as a white solid (86 mg, 35 % output). (MS: [M + H] + 1148.0).

Получение С2Obtaining C2

оabout

К смеси А1 (1,0 г, 1,82 ммоль, упаренного с MeCN 20 млх3) и G2 (2,3 г, 2,37 ммоль, упаренного сTo a mixture of A1 (1.0 g, 1.82 mmol, one stripped off with MeCN 20 mlx3) and G2 (2.3 g, 2.37 mmol, one stripped off with

MeCN 20 млх3) добавляли тетразол (0,45 М в MeCN, 10 мл) при 25°С и перемешивали в течение 1 ч перед добавлением элементарной серы (1,75 г, 6,84 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч добавляли MeCN (20 мл) и смесь фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в DCM (100 мл) и добавляли DCA (1,96 г, 15,2 ммоль, 1,25 мл). После перемешивания при 25°С в течение 2 ч добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (100 мл). Слои разделяли, и водный слой экстрагировали ЕА (3х100 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали обращено-фазовой колоночной хроматографией на силикагеле (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-100%), получая С2-ТЕА соль в виде белого твердого остатка (100 мг, 5% выход). (MS: {[M+2H]2+}/2 574,6).MeCN 20 mlx3) tetrazole (0.45 M in MeCN, 10 ml) was added at 25 ° C and stirred for 1 h before adding elemental sulfur (1.75 g, 6.84 mmol). After stirring for 1 h, MeCN (20 ml) was added and the mixture was filtered and concentrated. The residue was dissolved in DCM (100 ml) and DCA (1.96 g, 15.2 mmol, 1.25 ml) was added. After stirring at 25 ° C. for 2 h, saturated aqueous sodium bicarbonate solution (100 ml) was added. The layers were separated and the aqueous layer was extracted with EA (3x100 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by reverse phase silica gel column chromatography (MeCN with 0.1% TEA / water = 0-100%) to give the C2-TEA salt as a white solid (100 mg, 5% yield). (MS: {[M + 2H] 2 +} / 2,574.6).

Получение С3:Obtaining C3:

NHBzNHBz

К раствору А2 (510 мг, 0,52 ммоль, упаренному с MeCN 3х5 мл) в MeCN (1 мл), обработанном 3 А MS (100 мг) в течение 30 мин добавляли смесь G1 (250 мг, 0,47 ммоль, упаренного с MeCN 3х5 мл) и трифторацетата пиридиния (109 мг, 0,56 ммоль, упаренного с MeCN 3х5 мл) в MeCN (1,5 мл), обработанном 3 А MS (50 мг) в течение 30 мин. После перемешивания в течение 4 ч добавляли ТВНР (5,5 М в декане, 0,26 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин перед добавлением водного раствора бисульфита натрия (33%, 0,24 мл) при 0°С. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин перед фильтрованием и концентрированием. Остаток растворяли в DCM (6,2 мл), с последующим добавлением воды (0,09 мл) и DCA (0,37 мл) в DCM (6,2 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 мин добавляли Ру (0,73 мл, 9,05 ммоль) и DCM (35 мл). Смесь промывали водой (2х 10 мл), и объединенные водные слои экстрагировали дихлорметаном (2х10 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/CH₂Cl₂/Py = 10:89,5:0,5 - 25:74,5:0,5), получая С3 в виде белого твердого остатка (250 мг, 47%). (MS: [M+H]+ 1132,2).To a solution of A2 (510 mg, 0.52 mmol, stripped off with MeCN 3x5 ml) in MeCN (1 ml), treated with 3 А MS (100 mg), mixture G1 (250 mg, 0.47 mmol, stripped off with MeCN 3x5 ml) and pyridinium trifluoroacetate (109 mg, 0.56 mmol, stripped off with MeCN 3x5 ml) in MeCN (1.5 ml) treated with 3 A MS (50 mg) for 30 min. After stirring for 4 h, TBHP (5.5 M in decane, 0.26 ml) was added and the mixture was stirred for 30 min before adding aqueous sodium bisulfite solution (33%, 0.24 ml) at 0 ° C. The mixture was then stirred at room temperature for 10 minutes before being filtered and concentrated. The residue was dissolved in DCM (6.2 ml), followed by the addition of water (0.09 ml) and DCA (0.37 ml) in DCM (6.2 ml). After stirring at room temperature for 10 min, Py (0.73 ml, 9.05 mmol) and DCM (35 ml) were added. The mixture was washed with water (2 x 10 ml) and the combined aqueous layers were extracted with dichloromethane (2 x 10 ml). The combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / CH ₂ Cl ₂ / Py = 10: 89.5: 0.5 - 25: 74.5: 0.5) to give C3 in as a white solid (250 mg, 47%). (MS: [M + H] + 1132.2).

- 45 037513- 45 037513

Получение СА1:Getting CA1:

К раствору G1 (500 мг, 0,94 ммоль, упаренному с MeCN 3x10 мл) и трифторацетата пиридиния (218 мг, 1,13 ммоль, упаренного с MeCN 3x10 мл) в MeCN (3 мл), обработанном 3 A MS (100 мг) в течение 30 мин добавляли раствор А2 (976 мг, 0,99 ммоль, упаренного с MeCN 3x10 мл) в MeCN (2 мл), обработанном 3 A MS (200 мг) в течение 30 мин. После перемешивания при комнатной температуре в течение 2,5 ч смесь концентрировали и упаривали с MeCN (2x10 мл). Затем остаток растворяли в DCM (20 мл), с последующим добавлением по каплям комплекса борана и диметилсульфида (2 M в THF, 0,94 мл, 1,88 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч добавляли МеОН (0,17 мл) при 0°С и перемешивали в течение 20 мин перед концентрированием, получая неочищенный СА1.To a solution of G1 (500 mg, 0.94 mmol, stripped off with MeCN 3x10 ml) and pyridinium trifluoroacetate (218 mg, 1.13 mmol, stripped off with MeCN 3x10 ml) in MeCN (3 ml) treated with 3 A MS (100 mg ) over 30 min, a solution of A2 (976 mg, 0.99 mmol, stripped off with MeCN 3x10 ml) in MeCN (2 ml) treated with 3 A MS (200 mg) was added over 30 min. After stirring at room temperature for 2.5 h, the mixture was concentrated and evaporated with MeCN (2x10 ml). The residue was then dissolved in DCM (20 ml), followed by the dropwise addition of a borane-dimethyl sulfide complex (2 M in THF, 0.94 ml, 1.88 mmol). After stirring at room temperature for 1 hour, MeOH (0.17 ml) was added at 0 ° C. and stirred for 20 minutes before concentrating to give crude CA1.

Получение СС1Getting CC1

Стадия 1. Скварамид 81Stage 1. Squaramide 81

К раствору GC2 (802 мг, 0,87 ммоль) в DMF (5 мл) медленно добавляли 3,4-диметокси-3циклобутен-1,2-дион (186 мг, 1,31 ммоль) при 15°С. После перемешивания при 15°С в течение 2 ч смесь концентрировали и очищали обращено-фазовой препаративной ВЭЖХ (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0100%), получая смесь требуемого продукта и неустановленного побочного продукта (0,7 г, чистота приблизительно 84%). (MS: [M+H]⁺ 1028,4).To a solution of GC2 (802 mg, 0.87 mmol) in DMF (5 ml) was slowly added 3,4-dimethoxy-3cyclobutene-1,2-dione (186 mg, 1.31 mmol) at 15 ° C. After stirring at 15 ° C for 2 h, the mixture was concentrated and purified by reverse phase preparative HPLC (MeCN with 0.1% TEA / water = 0 100%) to give a mixture of the desired product and unidentified by-product (0.7 g, approx. 84%). (MS: [M + H] ⁺ 1028.4).

Стадия 2. СС1Stage 2. CC1

К раствору 81 (чистота приблизительно 84%, 0,6 г), полученному выше, и АС1 (0,64 г, 1,17 ммоль) в DMF (5,0 мл) добавляли TEA (177 мг, 1,75 ммоль, 0,24 мл) при 15°С. После перемешивания при 15°С в течение 12 ч смесь концентрировали, и остаток растворяли в DCM (5,0 мл) перед добавлением DCA (470 мг, 3,65 ммоль, 0,3 мл). Затем смесь перемешивали при 15°С в течение15 мин перед концентрированием. Остаток очищали обращено-фазовой препаративной ВЭЖХ (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-100%), получая СС1 в виде белого твердого остатка (0,54 г, 40% выход на две стадии). (MS: [M+H]+ 1242,3).To a solution of 81 (approximately 84% purity, 0.6 g) obtained above and AC1 (0.64 g, 1.17 mmol) in DMF (5.0 mL) was added TEA (177 mg, 1.75 mmol, 0.24 ml) at 15 ° C. After stirring at 15 ° C for 12 h, the mixture was concentrated and the residue was dissolved in DCM (5.0 ml) before the addition of DCA (470 mg, 3.65 mmol, 0.3 ml). The mixture was then stirred at 15 ° C for 15 minutes before being concentrated. The residue was purified by reverse phase preparative HPLC (MeCN with 0.1% TEA / water = 0-100%) to give CC1 as a white solid (0.54 g, 40% yield over two steps). (MS: [M + H] + 1242.3).

- 46 037513- 46 037513

Получение СС2Getting CC2

Стадия 1. Сульфамат 82Stage 1. Sulfamate 82

К раствору 4-нитрофенилхлорсульфата (0,31 г, 1,31 ммоль) в DCM (1,0 мл) добавляли раствор GC2 (0,40 г, 0,44 ммоль), 4-нитрофенол (0,61 г, 4,4 ммоль) и TEA (0,73 мл, 5,23 ммоль) в DCM (5 мл) при -78°С. После перемешивания в течение 30 мин смесь нагревали до комнатной температуры, разбавляли DCM (20 мл) и промывали водой (3x20 мл). Объединенные водные слои экстрагировали DCM (2x20 мл) и объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/РЕ с 1% ТЕА = 1/5-1/2), получая 82 (0,30 г, 59% выход) в виде белого твердого остатка. (MS: [M+H]⁺ 1118,9).To a solution of 4-nitrophenyl chlorosulfate (0.31 g, 1.31 mmol) in DCM (1.0 ml) was added a solution of GC2 (0.40 g, 0.44 mmol), 4-nitrophenol (0.61 g, 4, 4 mmol) and TEA (0.73 ml, 5.23 mmol) in DCM (5 ml) at -78 ° C. After stirring for 30 min, the mixture was warmed to room temperature, diluted with DCM (20 ml) and washed with water (3x20 ml). The combined aqueous layers were extracted with DCM (2x20 ml) and the combined organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (EA / PE with 1% TEA = 1 / 5-1 / 2) to give 82 (0 , 30 g, 59% yield) as a white solid. (MS: [M + H] ⁺ 1118.9).

Стадия 2. СС2Stage 2. CC2

К раствору 82 (0,2 г, 0,18 ммоль) в THF (1,0 мл), 4 A MS (0,05 г) и TEA (0,12 мл, 0,89 ммоль) добавляли АС1 (0,12 г, 0,21 ммоль). После перемешивания в течение 12 ч смесь разбавляли THF (2 мл), фильтровали и концентрировали. Затем остаток растворяли в DCM (5,0 мл) перед добавлением воды (0,1 мл) и раствора DCA (0,46 мл) в DCM (5,0 мл). После перемешивания в течение 15 мин смесь нейтрализовали TEA до рН ~7 перед концентрированием и очищали обращено-фазовой Колоночной хроматографией на С18 силикагеле (MeCN с 0,5% ТЕА/вода = 0-40%), получая СС2 (0,11 г, 44% выход) в виде белого твердого остатка. (MS: [M+H]+ 1226,0).To a solution of 82 (0.2 g, 0.18 mmol) in THF (1.0 ml), 4 A MS (0.05 g) and TEA (0.12 ml, 0.89 mmol) was added AC1 (0, 12 g, 0.21 mmol). After stirring for 12 h, the mixture was diluted with THF (2 ml), filtered and concentrated. The residue was then dissolved in DCM (5.0 ml) before adding water (0.1 ml) and a solution of DCA (0.46 ml) in DCM (5.0 ml). After stirring for 15 min, the mixture was neutralized with TEA to pH ~ 7 before concentration and purified by C18 reverse phase silica gel column chromatography (MeCN with 0.5% TEA / water = 0-40%) to give CC2 (0.11 g, 44% yield) as a white solid. (MS: [M + H] + 1226.0).

- 47 037513- 47 037513

Примеры оExamples about

оabout

DMOCP,DMOCP,

Пример А. получение Е5Example A. Preparation of E5

NHBzNHBz

Py*DCA, ТВНРPy * DCA, TBHP

TFA, Et₃SiHTFA, Et ₃ SiH

Стадия 1. С4Stage 1.C4

К раствору А4 (1,0 г, 1,01 ммоль) и G1 (1,07 г, 2,02 ммоль) в MeCN (10 мл) добавляли Py-DCA (420 мг, 2,02 ммоль). После перемешивания при 20°С в течение 2 ч добавляли ТВНР (70% в воде, 0,65 мл, 5,05 ммоль) и смесь перемешивали в течение 1 ч перед добавлением водного раствора бикарбоната натрия (50 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (100 мл), и органический слой промывали соляным раствором (30 мл), сушили с безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Затем остаток растворяли в смеси DCM (20 мл), TFA (1,0 мл) и триэтилсилана (5,0 мл). После перемешивания в течение 2 ч смесь нейтрализовали твердым бикарбонатом натрия до рН ~7. Затем смесь фильтровали, и твердый остаток промывали ЕА (3x50 мл). Фильтрат концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-30%), получая С4-ТЕА в виде белого твердого остатка (620 мг, 49% выход). (MS: [M+H]⁺ 1131,1).Py-DCA (420 mg, 2.02 mmol) was added to a solution of A4 (1.0 g, 1.01 mmol) and G1 (1.07 g, 2.02 mmol) in MeCN (10 ml). After stirring at 20 ° C for 2 h, TBHP (70% in water, 0.65 ml, 5.05 mmol) was added and the mixture was stirred for 1 h before adding aqueous sodium bicarbonate solution (50 ml). The mixture was extracted with ethyl acetate (100 ml) and the organic layer was washed with brine (30 ml), dried with anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue was then dissolved in a mixture of DCM (20 ml), TFA (1.0 ml) and triethylsilane (5.0 ml). After stirring for 2 h, the mixture was neutralized with solid sodium bicarbonate to pH ~ 7. The mixture was then filtered and the solid was washed with EA (3x50 ml). The filtrate was concentrated and purified by preparative HPLC (MeCN with 0.1% TEA / water = 0-30%) to give C4-TEA as a white solid (620 mg, 49% yield). (MS: [M + H] ⁺ 1131.1).

Стадия 2. Фосфодиэфир 83Stage 2. Phosphodiester 83

К раствору 4 (583 мг, 0,515 ммоль) в Ру (10 мл) добавляли DMOCP (583 мг, 3,16 ммоль) при 20°С. После перемешивания в течение 2 ч добавляли йод (654 мг, 2,58 ммоль) и смесь перемешивали в течение 1 ч перед добавлением насыщенного водного раствора сульфата натрия (30 мл) и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (30 мл). Затем смесь экстрагировали ЕА (100 мл), промывали соляным раствором (60 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали обращено-фазовой колоночной хроматографией на силикагеле (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 20-40%), получая 83-ТЕА в виде белого твердого остатка (172,0 мг, 31% выход). (MS: [M+H]+ 1076,1).To a solution of 4 (583 mg, 0.515 mmol) in Py (10 ml) was added DMOCP (583 mg, 3.16 mmol) at 20 ° C. After stirring for 2 h, iodine (654 mg, 2.58 mmol) was added and the mixture was stirred for 1 h before the addition of saturated aqueous sodium sulfate solution (30 ml) and saturated aqueous sodium bicarbonate solution (30 ml). The mixture was then extracted with EA (100 ml), washed with brine (60 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by reverse phase silica gel column chromatography (MeCN with 0.1% TEA / water = 20-40% ) to give 83-TEA as a white solid (172.0 mg, 31% yield). (MS: [M + H] + 1076.1).

- 48 037513- 48 037513

Стадия 3. бис-Фосфодиэфир 84Stage 3.bis-Phosphodiester 84

Раствор 83 (100 мг, 0,093 ммоль) в МеОН (1,0 мл) и гидроксид аммония (1,0 мл) перемешивали при 50°С в течение 12 ч. Затем смесь концентрировали и очищали обращено-фазовой колоночной хроматографией на силикагеле (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 20-40%), получая 84 в виде желтого твердого остатка (27,0 мг, 32% выход). (MS: [M+H]+ 902,5).A solution of 83 (100 mg, 0.093 mmol) in MeOH (1.0 ml) and ammonium hydroxide (1.0 ml) was stirred at 50 ° C for 12 h. The mixture was then concentrated and purified by reverse phase silica gel column chromatography (MeCN with 0.1% TEA / water = 20-40%) to give 84 as a yellow solid (27.0 mg, 32% yield). (MS: [M + H] + 902.5).

Стадия 4. Е5Stage 4. E5

Раствор 84 (27 мг, 0,030 ммоль) в TEA-3HF (10 мл) перемешивали при 50°С в течение 3 ч. Затем смесь нейтрализовали холодным бикарбонатом триэтиламмония до рН ~7, концентрировали и очищали С18 обращено-фазовой колоночной хроматографией на силикагеле (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-20%), получая Е5-ТЕА в виде белого твердого остатка (5,2 мг, 26% выход). (MS: [M+H]⁺ 673,7).A solution of 84 (27 mg, 0.030 mmol) in TEA-3HF (10 ml) was stirred at 50 ° C for 3 hours.The mixture was then neutralized with cold triethylammonium bicarbonate to pH ~ 7, concentrated and purified by C18 reverse phase silica gel column chromatography ( MeCN with 0.1% TEA / water = 0-20%) to give E5-TEA as a white solid (5.2 mg, 26% yield). (MS: [M + H] ⁺ 673.7).

Пример В. Получение Е15-Е18Example B. Obtaining E15-E18

Стадия 1. С5Stage 1.C5

К смеси А4 (500 мг, 0,50 ммоль, упаренному с MeCN 1x5 мл и толуолом 2x10 мл) и G1 (322 мг,To a mixture of A4 (500 mg, 0.50 mmol, stripped off with MeCN 1x5 ml and toluene 2x10 ml) and G1 (322 mg,

- 49 037513- 49 037513

0,61 ммоль, упаренному с MeCN 1x5 мл и толуолом 2x10 мл) добавляли тетразол (0,45 М в MeCN, 4,0 мл). После перемешивания при 25°С в течение 2 ч добавляли DDTT (240 мг, 1,2 ммоль) и смесь перемешивали в течение 16 ч перед фильтрованием и концентрированием. Затем остаток растворяли в DCM (10 мл) с последующим добавлением воды (0,1 мл) и DCA (0,21 мл). После перемешивания в течение 10 мин добавляли TEA (1 мл) и смесь концентрировали и очищали обращено-фазовой колоночной хроматографией на силикагеле (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-100%), получая С5-ТЕА в виде белого твердого остатка (250 мг, 35% выход). (MS: ([M+2H]2+)/2 574,6).Tetrazole (0.45 M in MeCN, 4.0 ml) was added to 0.61 mmol, stripped off with MeCN 1x5 ml and toluene 2x10 ml). After stirring at 25 ° C for 2 h, DDTT (240 mg, 1.2 mmol) was added and the mixture was stirred for 16 h before filtering and concentrating. The residue was then dissolved in DCM (10 ml) followed by the addition of water (0.1 ml) and DCA (0.21 ml). After stirring for 10 min, TEA (1 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by reverse phase silica gel column chromatography (MeCN with 0.1% TEA / water = 0-100%) to give C5-TEA as a white solid. (250 mg, 35% yield). (MS: ([M + 2H] 2 +) / 2,574.6).

Стадия 2. Фосфоротиоат 85Stage 2. Phosphorothioate 85

К раствору С5 (600 мг, 0,423 ммоль, упаренному с Ру 2x3 мл) в Ру (5,0 мл) добавляли DMOCP (313 мг, 1,69 ммоль) при 25°С. После перемешивания в течение 2 ч добавляли 3Н-1,2-бензодитиол-3-он (142 мг, 0,85 ммоль) и смесь перемешивали в течение 2 ч перед добавлением водного раствора бикарбоната натрия (5%, 10 мл). Затем смесь экстрагировали ЕА (3x10 мл). Объединенные органические слои сушили с безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и очищали обращено-фазовой ВЭЖХ (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-100%), получая четыре диастереомера 85-TEA в виде белых твердых остатков:To a solution of C5 (600 mg, 0.423 mmol, stripped off with Py 2x3 ml) in Py (5.0 ml) was added DMOCP (313 mg, 1.69 mmol) at 25 ° C. After stirring for 2 h, 3H-1,2-benzodithiol-3-one (142 mg, 0.85 mmol) was added and the mixture was stirred for 2 h before adding aqueous sodium bicarbonate solution (5%, 10 ml). The mixture was then extracted with EA (3x10 ml). The combined organic layers were dried with anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated and purified by reverse phase HPLC (MeCN with 0.1% TEA / water = 0-100%) to give the four diastereomers of 85-TEA as white solid residues:

изомер 1 (28 мг) (MS: [М+Н]+ 1160,9); изомер 2 (25 мг) (MS: [M+H]+ 1160,9); изомер 3 (50 мг) (MS: [М+Н]+ 1160,9); изомер 4 (52 мг) (MS: [M+1]+ 1160,9). Стадия 3. Е15-Е18isomer 1 (28 mg) (MS: [M + H] + 1160.9); isomer 2 (25 mg) (MS: [M + H] + 1160.9); isomer 3 (50 mg) (MS: [M + H] + 1160.9); isomer 4 (52 mg) (MS: [M + 1] + 1160.9). Stage 3. E15-E18

Каждый из изомеров 85-ТЕА (25 мг, 0,022 ммоль) в гидроксиде аммония (5,6 мл) и МеОН (4,0 мл) перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Затем смесь продували азотом при комнатной температуре в течение 5 мин перед концентрированием. Остаток растворяли в TEA (0,5 мл) и Ру (0,2 мл) и добавляли TEA-3HF (0,7 мл). После перемешивания при 50°С в течение 24 ч добавляли водный раствор бикарбонат триэтиламмония (1 М, 5 мл) и смесь очищали обращено-фазовой колоночной хроматографией на силикагеле (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 0-30%), получая Е15-Е18 в виде белых твердых остатков.Each of the 85-TEA isomers (25 mg, 0.022 mmol) in ammonium hydroxide (5.6 ml) and MeOH (4.0 ml) was stirred at 50 ° C for 16 hours. The mixture was then purged with nitrogen at room temperature for 5 min before concentration. The residue was dissolved in TEA (0.5 ml) and Py (0.2 ml) and TEA-3HF (0.7 ml) was added. After stirring at 50 ° C for 24 h, an aqueous solution of triethylammonium bicarbonate (1 M, 5 ml) was added and the mixture was purified by reverse phase silica gel column chromatography (MeCN with 0.1% TEA / water = 0-30%) to give E15-E18 in the form of white solid residues.

Пример С. Получение Е24Example C. Preparation of E24

- 50 037513- 50 037513

Стадия 1. Фосфорамидат 44Stage 1. Phosphoramidate 44

К раствору С3 (16 мг, 0,014 ммоль, упаренному с Ру 3x1 мл) в Ру (0,5 мл) добавляли DMOCP (10,4 мг, 0,056 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин добавляли NIS (4,1 мг, 0,0183 ммоль) и морфолин (0,012 мл, 0,141 ммоль) и смесь перемешивали в течение 1 ч перед добавлением водного раствора бисульфита натрия (0,14%, 1 мл) и бикарбоната натрия (80 мг). Затем смесь экстрагировали DCM (3x5 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали. Затем остаток перемешивали в MeCN (0,5 мл) и трет-бутиламине (0,5 мл) при комнатной температуре в течение 15 мин перед концентрированием. Затем полученный в результате остаток упаривали с MeCN (3x1 мл) и очищали ВЭЖХ, получая 86 в виде белого твердого остатка (2,4 мг, 15%). (MS: [М+Н]+ 1146,2).To a solution of C3 (16 mg, 0.014 mmol, stripped off with Py 3x1 ml) in Py (0.5 ml) was added DMOCP (10.4 mg, 0.056 mmol). After stirring for 15 min, NIS (4.1 mg, 0.0183 mmol) and morpholine (0.012 ml, 0.141 mmol) were added and the mixture was stirred for 1 h before the addition of aqueous sodium bisulfite solution (0.14%, 1 ml) and sodium bicarbonate (80 mg). The mixture was then extracted with DCM (3x5 ml), dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was then stirred in MeCN (0.5 ml) and tert-butylamine (0.5 ml) at room temperature for 15 min before concentration. The resulting residue was then evaporated with MeCN (3x1 ml) and purified by HPLC to give 86 as a white solid (2.4 mg, 15%). (MS: [M + H] + 1146.2).

Стадия 2. Е24 оStage 2. E24 o

К 86 (2,4 мг, 0,0021 ммоль) добавляли метиламин (33% в EtOH, 0,3 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч смесь концентрировали, и остаток перемешивали в смеси TEA и TEA-3HF в THF (0,036 мл/0,018 мл/0,3 мл) при 35°С в течение 18 ч. Затем добавляли MeCN (1,0 мл), и твердый остаток собирали центрифугированием, промывали MeCN (2x1 мл), получая Е24 в виде белого твердого остатка (0,6 мг, 38% выход). (MS: [M+H]+ 744,0).Methylamine (33% in EtOH, 0.3 ml) was added to 86 (2.4 mg, 0.0021 mmol). After stirring at room temperature for 16 hours, the mixture was concentrated and the residue was stirred in a mixture of TEA and TEA-3HF in THF (0.036 ml / 0.018 ml / 0.3 ml) at 35 ° C for 18 hours. Then MeCN (1 , 0 ml), and the solid residue was collected by centrifugation, washed with MeCN (2x1 ml) to give E24 as a white solid (0.6 mg, 38% yield). (MS: [M + H] + 744.0).

Пример D. Получение Е25 о ОExample D. Obtaining E25 o O

Стадия 1. Боранофосфат 87 оStage 1. Boranophosphate 87 about

NHBzNHBz

К раствору С3 (100 мг, 0,088 ммоль, упаренному с Ру 3x4 мл) в Ру (3 мл) добавляли DMOCP (57 мг, 0,337 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин добавляли по каплям BSTFA (0,10 мл, 0,371 ммоль) и смесь перемешивали в течение 20 мин перед добавлением комплекса борана и N,N-диизопропилэтиламина (0,092 мл, 0,530 ммоль). Затем смесь перемешивали в течение 3 ч перед конTo a solution of C3 (100 mg, 0.088 mmol, stripped off with Py 3x4 ml) in Py (3 ml) was added DMOCP (57 mg, 0.337 mmol). After stirring for 15 min, BSTFA (0.10 ml, 0.371 mmol) was added dropwise and the mixture was stirred for 20 min before the addition of the borane-N, N-diisopropylethylamine complex (0.092 ml, 0.530 mmol). Then the mixture was stirred for 3 hours before finishing

- 51 037513 центрированием и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/19-1/9), получая получистый СЕ-защищенный 87 в виде желтого твердого остатка. Получистый СЕ-защищенный 87, полученный выше, перемешивали в смеси MeCN (1 мл) и трет-бутиламина (0,5 мл) в течение 10 мин перед концентрированием. Затем остаток упаривали с MeCN (3x4 мл) и очищали обращено-фазовой ВЭЖХ (MeCN с 0,1% ТЕА/вода = 40-90%), получая 87 в виде белого твердого остатка (11 мг, 12% на две стадии). (MS: [М]^- 1073,2).51 037513 by centration and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 19-1 / 9) to give the resulting CE-protected 87 as a yellow solid. The resulting CE-protected 87, obtained above, was stirred in a mixture of MeCN (1 ml) and t-butylamine (0.5 ml) for 10 minutes before concentration. The residue was then evaporated with MeCN (3x4 ml) and purified by reverse phase HPLC (MeCN with 0.1% TEA / water = 40-90%) to give 87 as a white solid (11 mg, 12% over two steps). (MS: [M] ^- 1073.2).

Стадия 2. Е25 оStage 2. E25 o

nh₂ nh ₂

К 87 (5,7 мг, 0,0053 ммоль) добавляли метиламин (33% в EtOH, 1 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 18 ч смесь концентрировали, и остаток перемешивали в смеси TEA (0,08 мл) и TEA-3HF (0,04 мл) в THF (0,5 мл) при 35°С в течение 18 ч. Затем добавляли MeCN (1,2 мл) и твердый остаток собирали центрифугированием, очищали обращено-фазовой ВЭЖХ (MeCN с 0,1% TFA/вода = 0-20%), получая Е25 в виде белого твердого остатка (2,5 мг, 61% выход) (MS: [M]^- 671,2).Methylamine (33% in EtOH, 1 ml) was added to 87 (5.7 mg, 0.0053 mmol). After stirring at room temperature for 18 h, the mixture was concentrated and the residue was stirred in a mixture of TEA (0.08 ml) and TEA-3HF (0.04 ml) in THF (0.5 ml) at 35 ° C for 18 h MeCN (1.2 ml) was then added and the solid residue was collected by centrifugation, purified by reverse phase HPLC (MeCN with 0.1% TFA / water = 0-20%) to give E25 as a white solid (2.5 mg , 61% yield) (MS: [M] ^- 671.2).

Пример Е. Получение ЕВ1 и ЕВ2Example E. Preparation of EB1 and EB2

NHBzNHBz

Стадия 1. СВ1 оStage 1. CB1 o

NHBzNHBz

К раствору GB3 (160 мг, 0,25 ммоль, упаренному с MeCN 3x1 мл) и трифторацетата пиридиния (35 мг, 0,39 ммоль, упаренному с MeCN 3x1 мл) в MeCN (1 мл), обработанном 3 A MS (500 мг) в течение 30 мин добавляли раствор А4 (355 мг, 0,36 ммоль, упаренного с MeCN 3x1 мл) в MeCN (1 мл), обработанном 3 A MS (700 мг) в течение 30 мин. После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч добавляли ТВНР (5,5 М в декане, 0,164 мл, 0,9 ммоль) и смесь перемешивали в течение 30 мин перед добавлением водного раствора бисульфита натрия (33%, 0,15 мл) при 0°С. Затем смесь концентрировали и остаток растворяли в DCM (4,8 мл) с последующим добавлением воды (0,054 мл) и дихлоруксусной кислоты (6% в хлористом метилене, 4,8 мл). После перемешивания в течение 10 мин добавляли Ру (1,5 мл) и смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (MeOH/DCM = 1/10-1/4 с 1% Ру), получая СВ1-Ру в виде белого твердого остатка (213 мг, 66% выход).To a solution of GB3 (160 mg, 0.25 mmol, stripped off with MeCN 3x1 ml) and pyridinium trifluoroacetate (35 mg, 0.39 mmol, stripped off with MeCN 3x1 ml) in MeCN (1 ml) treated with 3 A MS (500 mg ) over 30 min was added a solution of A4 (355 mg, 0.36 mmol, stripped off with MeCN 3x1 ml) in MeCN (1 ml) treated with 3 A MS (700 mg) over 30 min. After stirring at room temperature for 2 h, TBHP (5.5 M in decane, 0.164 ml, 0.9 mmol) was added and the mixture was stirred for 30 min before adding aqueous sodium bisulfite solution (33%, 0.15 ml) at 0 ° C. The mixture was then concentrated and the residue was dissolved in DCM (4.8 ml) followed by the addition of water (0.054 ml) and dichloroacetic acid (6% in methylene chloride, 4.8 ml). After stirring for 10 min, Py (1.5 ml) was added and the mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (MeOH / DCM = 1 / 10-1 / 4 with 1% Py) to give CB1-Py as a white solid. (213 mg, 66% yield).

- 52 037513- 52 037513

Стадия 2. Фосфоротиоат 88Stage 2. Phosphorothioate 88

К раствору СВ1 (60 мг, 53 мкмоль) в Ру (1 мл) добавляли DMOCP (30 мг, 162,5 мкмоль). После перемешивания в течение 10 мин добавляли воду (0,027 мл) и 3Н-1,2-бензодитиол-3-он (13 мг, 0,077 ммоль). Смесь перемешивали в течение 5 мин перед выливанием в раствор бикарбоната натрия (210 мг) в воде (7,5 мл). После перемешивания в течение 5 мин смесь экстрагировали ЕА/диэтиловым эфиром (1:1, 3x10 мл). Объединенные органические слои концентрировали, получая желтый твердый остаток (100 мг). К раствору желтого твердого остатка, полученному выше, в MeCN (0,5 мл) добавляли трет-бутиламин (0,5 мл). После перемешивания в течение 10 мин смесь концентрировали и очищали ВЭЖХ (MeCN/вода с 0,1% TFA: 50-100%), получая два диастереомера 88:To a solution of CB1 (60 mg, 53 μmol) in Py (1 ml) was added DMOCP (30 mg, 162.5 μmol). After stirring for 10 min, water (0.027 ml) and 3H-1,2-benzodithiol-3-one (13 mg, 0.077 mmol) were added. The mixture was stirred for 5 minutes before being poured into a solution of sodium bicarbonate (210 mg) in water (7.5 ml). After stirring for 5 min, the mixture was extracted with EA / diethyl ether (1: 1, 3x10 ml). The combined organic layers were concentrated to give a yellow solid (100 mg). To a solution of the yellow solid obtained above in MeCN (0.5 ml) was added tert-butylamine (0.5 ml). After stirring for 10 min, the mixture was concentrated and purified by HPLC (MeCN / water with 0.1% TFA: 50-100%) to give two diastereomers 88:

изомер 1 (7 мг) ([М+Н]+ 977,0);isomer 1 (7 mg) ([M + H] + 977.0);

изомер 2 (16 мг) (MS: [M+H]+ 977,0).isomer 2 (16 mg) (MS: [M + H] + 977.0).

Стадия 3. ЕВ1 и ЕВ2Stage 3. EB1 and EB2

К изомеру 1 88 (7 мг) добавляли метиламин (33% в этанол, 1 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение12 ч смесь концентрировали, и остаток растворяли в водном растворе TFA (3% об./об., 1 мл). После перемешивания в течение 2 ч смесь концентрировали и очищали ВЭЖХ (MeCN/вода с 0,1% TFA, 0-45%), получая ЕВ1 в виде белого твердого остатка (2,5 мг, 57% выход). (MS: [M+H]+ 689,0).Methylamine (33% in ethanol, 1 ml) was added to isomer 1 88 (7 mg). After stirring at room temperature for 12 hours, the mixture was concentrated and the residue was dissolved in an aqueous TFA solution (3% v / v, 1 ml). After stirring for 2 h, the mixture was concentrated and purified by HPLC (MeCN / water with 0.1% TFA, 0-45%) to give EB1 as a white solid (2.5 mg, 57% yield). (MS: [M + H] + 689.0).

К изомеру 2 63 (16 мг) добавляли метиламин (33% в этаноле, 2 мл) при 0°С. После перемешивания при комнатной температуре в течение 12 ч смесь концентрировали, и остаток упаривали со смесьюMethylamine (33% in ethanol, 2 ml) was added to isomer 2 63 (16 mg) at 0 ° C. After stirring at room temperature for 12 hours, the mixture was concentrated and the residue was evaporated with the mixture

Ру/ТЕА (5 мл/2 млх3) перед растворением в Ру (0,04 мл). Затем добавляли TEA (0,25 мл) и TEA-3HF (0,15 мл). После перемешивания при 55°С в течение 3 ч добавляли ацетон (2 мл). Твердый остаток собирали (10 мг) фильтрованием и очищали ВЭЖХ (MeCN/вода с 0,1% TFA, 0-30%), получая ЕВ2 в виде белого твердого остатка (5 мг, 45% выход). (MS: [M+H]+ 689,0, [М-Н]^-687,0).Py / TEA (5 ml / 2 mlx3) before dissolving in Py (0.04 ml). Then TEA (0.25 ml) and TEA-3HF (0.15 ml) were added. After stirring at 55 ° C for 3 h, acetone (2 ml) was added. The solid residue was collected (10 mg) by filtration and purified by HPLC (MeCN / water with 0.1% TFA, 0-30%) to give EB2 as a white solid (5 mg, 45% yield). (MS: [M + H] + 689.0, [M-H] ^- 687.0).

Пример F. Получение ЕС25Example F. Obtaining EC25

- 53 037513- 53 037513

К раствору Е1-ТЕА соли (10 мг, 0,0114 ммоль) в воде (0,3 мл) добавляли 2-хлорацетальдегид (0,015 мл, 0,118 ммоль) и водный раствор гидроксида натрия (1 М, 0,012 мл, 0,012 ммоль). После перемешивания при 37°С в течение 18 ч смесь концентрировали и очищали обращено-фазовой ВЭЖХ (MeCN/вода с 0,1% TFA=0-30%), получая ЕС26 в виде белого твердого остатка. (MS: [M]^- 697,1).To a solution of E1-TEA salt (10 mg, 0.0114 mmol) in water (0.3 ml) were added 2-chloroacetaldehyde (0.015 ml, 0.118 mmol) and an aqueous solution of sodium hydroxide (1 M, 0.012 ml, 0.012 mmol). After stirring at 37 ° C for 18 h, the mixture was concentrated and purified by reverse phase HPLC (MeCN / water with 0.1% TFA = 0-30%) to give EC26 as a white solid. (MS: [M] ^- 697.1).

Следующие соединения получали по существу способами выше.The following compounds were prepared essentially by the methods above.

Таблица 3Table 3

Примеры Е1-Е25, ЕА1-ЕА11, ЕВ1-ЕВ7 и ЕС1-ЕС24Examples E1-E25, EA1-EA11, EB1-EB7 and EC1-EC24

Пример Example Промежуточное соединение 1 Intermediate connection one Промежуточное соединение 2 Intermediate connection 2 Структура Structure Ссылка на получение Receive link Е1 E1 О ayV _но_N '^NH/bu TBSO CL но+ -О ayV _but _N '^ NH / bu TBSO CL but + - NHBz axS DMTrO^^_o^^{N N} 'Pr₂N. .0 OTBS p·^ Ace ^A2 NHBz axS DMTrO ^^ _o ^ ^NN 'Pr ₂ N. .0 OTBS p ^ Ace ^A2 о АХа ^{N МНг} но о к 7 Z \ он А Г/> ° ^NyW nh₂ o АХа ^{N МНг} but о к 7 Z \ he А Г /> ° ^N yW nh ₂ Пример А Example A Е2 E2 о <Ха но—^N О. Η Р /А G3 но оo <Ha no - ^N O. Η P / A G3 but o A2 A2 о о АХа ηο-ρ^ но о \ 7 7 \ о г ιΓ/> ° “γΜ νη₂ o o AXa ηο-ρ ^ but o \ 7 7 \ o r ιΓ /> ° “γΜ νη ₂ Пример А Example A ЕЗ EZ о aVy НО N NH/bu МеО О. .Η но+ o aVy HO N NH / bu MeO O. but + A2 A2 о αΛ ο Ϊ^-^νη₂ ho—ρ+ L-⁰^ НО О X У кмеА о Χ'Ό'Ύ—Ο^Ρ—ОН \ |Г/> ° νη₂ o αΛ ο Ϊ ^ - ^ νη ₂ ho — ρ + L- ⁰ ^ HO O X Y kmeA o Χ'Ό'Ύ — Ο ^ Ρ - OH \ | Γ /> ° νη ₂ Пример А Example A Е4 E4 ахЬ ΟΜΤΓθ^^θ^^{Ν N NH}'^bu TBSO O. N^;Pr₂ P ² 1 G5 OCEaxb ΟΜΤΓθ ^^ θ ^ ^{Ν N NH} ' ^bu TBSO O. N ^; Pr ₂ P ² 1 G5 OCE NHBz ахЬ HO—^N H ,O OTBS p //\ ли О ОН А1NHBz aхh HO— ^N H, O OTBS p // \ whether О ОН А1 АХл °Ч°-| η ? Ν^ΝΗ₂ но-ρχ но о х 7 /χ Ч ио /О zakM-™ Т/> ° nh₂ AHl ° H ° - | η? Ν ^ ΝΗ ₂ no-ρχ no about x 7 / χ H io / O zakM- ™ T /> ° nh ₂ Пример А Example A

- 54 037513- 54 037513

о—P-SH изомер 1 о—Р—SH изомер 2o — P-SH isomer 1 o — P — SH isomer 2

- 56 037513- 56 037513

E17 E18 E17 E18 G1 G1 G1 G1 A4 A4 A4 A4 О ο 'i HS—P<f HO 0 X ./ Z \ ОН О Γ^θ'^Ί_₀—p-sh ^^N\^N II Г II \ ° ΝγΧΑ , γ^ изомер 3 nh₂ о о <Xa hsV-^oJ ^{N МНг} НО о у У X \ он о Γ^ο-^Ί__Ο—P-SH /N. _N II К Г \ ° ν AU# . γ^ изомер 4 nh₂ О ο 'i HS - P <f HO 0 X ./ Z \ ОН О Γ ^ θ' ^ Ί_ ₀ -p-sh ^ ^N \ ^ N II Г II \ ° ΝγΧΑ, γ ^ isomer 3 nh ₂ о о < Xa hsV- ^ oJ ^{N MHr} HO o y Y X \ he o Γ ^ ο- ^ Ί_ _{Ο -} P-SH / N. _N II K G \ ° ν AU #. γ ^ isomer 4 nh ₂ Пример В Пример В Example B Example B E19 E19 G1 G1 NHBz /A DMTrO^^Q^j ^N 'Pr₂N_Xp^O OTBS OCE ^A5 NHBz / A DMTrO ^^ Q ^ j ^N 'Pr ₂ N _Xp ^ O OTBS OCE ^A5 о O-, _n hs—p< L·-⁰-# но о у___У Z \ он о r^O^J__o^P-SH ^H^^N II г Г ,'N ^{0 Ν}γΜ nh₂ o O-, _n hs - p <L + - ⁰ - # but o y ___ Y Z \ he o r ^ O ^ J_ _o ^ P-SH ^ H ^^ N II г Г, 'N ^{0 Ν} γΜ nh ₂ Пример В Example B E20 E20 О AlT PMTrO^^_o^^{N N NH,bu} TBSO ^N'Pr, P ² 1 G7 OCEО AlT PMTrO ^^ _o ^ ^{NN NH, bu} TBSO ^ N'Pr, P ² 1 G7 OCE NHBz rA HO—|^_O^^{N N} H. n OTBS P О^'он A3NHBz rA HO— | ^ _O ^ ^NN H. n OTBS P О ^ 'he A3 о Oi г θ^ο-, _n An^nh₂ HS—Ρζ но о у Z / X он о .. r^'O'^Ln—P—SH X>^N-^N ^υ II г II \ о ΝγΑ<7 ] изомер 1 nh₂ o Oi r θ ^ o-, _n An ^ nh ₂ HS - Ρζ but o y Z / X it o .. r ^ 'O' ^ Ln — P — SH X> ^N - ^ N ^υ II r II \ o ΝγΑ <7] isomer 1 nh ₂ Пример В Example B E21 E22 E21 E22 G7 G7 G7 G7 A3 A3 A3 A3 о AlJ Ϊ^Η ° _o n-^X_n^_Nh₂ hs—p< L^^O-^J НО о у У \ OH 0 .. ^0-^1—_o_pZ_SH ^>^Ν\^Ν ^υ II r ιΓ \ ° у/ изомер 2 nh₂ о Ан г ° /О-. n^_n^_Nh₂ hs ρζ НО о у У / \ он о Г И \ ⁰ N^ JA/ изомер 3 νη₂ o AlJ Ϊ ^Η ° _o n- ^ X _n ^ _N h ₂ hs-p <L ^ ^O - ^ J HO o y Y \ OH 0 .. ^ 0- ^ 1 - _o _pZ _SH ^> ^Ν \ ^ Ν ^υ II r ιΓ \ ° y / isomer 2 nh ₂ o An r ° / O-. n ^ _n ^ _N h ₂ hs ρζ HO o y Y / \ he o Γ H \ ⁰ N ^ JA / isomer 3 νη ₂ Пример В Пример В Example B Example B

- 57 037513- 57 037513

- 58 037513- 58 037513

- 59 037513- 59 037513

EA1O EA1O О Θ H₃B₄ OCE ¢- Jj p TBSO O^Q^O—I n 7 ^{N NH/bU} _N J, к TBSO O₄ H f V\ ^0H z^py ' 11// НО О CA1 ^N<Y^N NHBzО Θ H ₃ B ₄ OCE ¢ - Jj p TBSO O ^ Q ^ O — I n 7 ^{N NH / bU} _N J, к TBSO O ₄ H f V \ ^0H z ^p y '11 // HO О CA1 ^N <Y ^ N NHBz О < Vr o° ο-, „ V N^NH, h₃b—pA I^-o^i но o у У Z A OH 0 Qc? nh₂ 0 <Vr o ° o-, „VN ^ NH, h ₃ b-pA I ^ -o ^ i but o y Y ZA OH 0 Qc? nh ₂ Пример А Example A EA11 EA11 CAI CAI о /VS Q ₀ n^nh₂ H₃B—P< Y°Y НО о у У Ζ А он ο Yo-^Lq^p^O Υ\^·ν I Г Η λ θ^ΒΗ ₃ ^Νγ4^ζ νη₂ o / VS Q ₀ n ^ nh ₂ H ₃ B — P <Y ° Y HO o y Y Ζ A he ο Yo- ^ Lq ^ p ^ O Υ \ ^ ν I Г Η λ θ ^ΒΗ ₃ ^Ν γ4 ^ζ νη ₂ Пример D Example D EBI EBI 0 г HO^ Ν·^\_Ν·^_ΝΗώυ ' __ TBSO O. HO^AO ^GB3 0 г HO ^ Ν ^ \ _Ν ^ _ΝΗώυ '__ TBSO O. HO ^A O ^GB3 A4 A4 ϋ Ϊ^Η θ/Ο-, _η ν-Α_ν<Α_ΝΗ2 НО-P./ но о у У Z А он о Т/> ° изомер 1 νη₂ ϋ Ϊ ^Η θ / Ο-, _η ν-Α _ν <Α _ΝΗ2 HO-P. / but o at Y Z A he o T /> ° isomer 1 νη ₂ Пример Е Example E EB2 EB2 GB3 GB3 A4 A4 О Г θ^Ο-] _п Ν^Ν^ΝΗ, Ηο-ρζ' ^но о у У Ζ А он о Т/> ° изомер 2 νη₂ Г θ ^-] _n Ν ^ Ν ^, ο-ρζ ' ^but o y Y Ζ A he o T /> ° isomer 2 νη ₂ Пример Е Example E

ЕВЗ EVZ GB3 GB3 А2 A2 О сА^н О ν^_ν^_Νη₂ НО-Р^ НО О у У Z А он о Γ^ο·^Π__ο^ρ-3Η ^^Ν\^Ν II СХ⁷> ⁰ изомер 1 nh₂ O cA ⁿ O ν ^ _ν ^ _Ν η ₂ HO-P ^ HO O y Y Z A he o Γ ^ ο ^ Π_ _ο ^ ρ-3Η ^ ^Ν \ ^ Ν II CX ⁷ > ⁰ isomer 1 nh ₂ Пример Е Example E ЕВ4 EB4 GB3 GB3 А2 A2 о Xi г Vo-, _n ΗΟ-Ρζ' L·--⁰·^ но о у У / А он о оэ ° ^Ν изомер 2 νη₂ o Xi r Vo-, _n ΗΟ-ζ 'L · - ⁰ · ^ but o y V / A he o oe ° ^Ν isomer 2 νη ₂ Пример Е Example E

- 60 037513- 60 037513

EB5 EB5 GB3 GB3 TBSO. ΝΒζ DMTrO—^Ν 'Pr₂N_VpX,O OTBS ОСЕ ^AB1 TBSO. ΝΒζ DMTrO— ^Ν 'Pr ₂ N _VpX , O OTBS OCE ^AB1 Пример Е Example E EB6 EB6 О < J A НОд^_о^ Ν NH/bu TBSO C< Η ρ но^ло ^SB2 About <JA Nod ^ _o ^ Ν NH / bu TBSO C < Η ρ but ^l about ^SB2 Α2 Α2 0 pgf'NH УД д Vo N^N^NH₂ HS—P< L-⁰^ но о v z Z X он о V'O'^Lq—P-SH ^v II r о ° ''y ^N изомер 1 NH₂ 0 pgf'NH UD q Vo N ^ N ^ NH ₂ HS — P <L- ⁰ ^ but o vz ZX he o V'O '^ Lq — P-SH ^v II r o °''y ^N isomer 1 NH ₂ Пример Е Example E EB7 EB7 GB2 GB2 Α2 Α2 о /pgf'NH < J Д Vo-, У n nh₂ HS-рД ν-°\| HO 0 X___Z Ζ X он о f T/> ° γ ^N изомер 2 nh₂ o / pgf'NH <J D Vo-, Y n nh ₂ HS-rD ν- ° \ | HO 0 X___Z Ζ X he o f T /> ° γ ^N isomer 2 nh ₂ Пример Е Example E ECI ECI Ο HO—, N-^^x'N^^xNH/bL| Ρ-Ο^^ Ο Ο_χ Η Γ F₃C ^{0 0Η} GC3Ο HO—, N- ^ ^x 'N ^ ^x NH / bL | Ρ-Ο ^^ Ο Ο _χ Η Γ F ₃ C ^{0 0Η} GC3 Α4 Α4 0 НО О V z / X о о ^F=^c o ^N<- i изомер 1 nh₂ 0 HO O V z / X o o ^F = ^c o ^N <- i isomer 1 nh ₂ Пример Е Example E EC2 EC2 GC3 GC3 Α4 Α4 о °^o-> _n n^_n^_Nh₂ но-рД НО О К Z Z X р о [^О'^4о--р-3_{Н F(}p II (Т/> ³ ° | изомер 2 nh₂ o ° ^ o-> _n n ^ _n ^ _N h ₂ no-pD HO O K Z ZX p o [^ O '^ 4o - p-3 _{H F (} p II (T /> ³ ° | isomer 2 nh ₂ Пример Е Example E ЕСЗ ESZ GC3 GC3 Α4 Α4 о ^{N МНз} НО О \. Z Z А о о [^o'^4Z_o_^p-_OH г Г/> ° nh₂ o ^{N mnz} BUT O \. Z Z A o o [^ o '^ 4Z _o _ ^ p- _OH g Γ /> ° nh ₂ Пример А Example A

- 61 037513- 61 037513

EC4 EC4 GB3 GB3 0 OlT DMTrO—1 ο Ϊ ^{N NH}'^bU Ύ Г—7 \ _XO OTBS °'^^'CN GC40 OlT DMTrO — 1 ο Ϊ ^{N NH} ' ^bU Ύ Г — 7 \ _X O OTBS °' ^^ 'CN GC4 О XS ^{N NH2} но о х 7 / он о H₂N_N_r°'V-O-P^/-SH г Т/ ⁰ HN τγ изомер 1 ОО XS ^{N NH2} no о х 7 / he о H ₂ N_N_r ° 'VOP ^/ -SH g Т / ⁰ HN τγ isomer 1 О Пример Ε Example Ε EC5 EC5 GB3 GB3 GC4 GC4 о ° О N^_N^_NH2 но-Р^ НО О X___S Z \ он о им м ⁰ 1—о—P-SH h₂n n _N ^и II HN.JO Т] изомер 2 оo ° O N ^ _N ^ _NH2 but-P ^ HO O X___S Z \ he o im m ⁰ 1-o-P-SH h ₂ nn _N ^and II HN.JO T] isomer 2 o Пример Ε Example Ε EC6 EC6 NHBz НОд^_о^ ^N TBSO CH Η P O^ ОН AC3NHBz Hod ^ _o ^ ^N TBSO CH Η P O ^ OH AC3 A4 A4 nh₂ сЛ ho^^oJ ^N НО Ο X 7 С S ^{ОН 0} г Т/> ° изомер 1 νη₂ nh ₂ cL ho ^^ oJ ^N HO Ο X 7 C S ^{OH 0} g T /> ° isomer 1 νη ₂ Пример Ε Example Ε EC7 EC7 AC3 AC3 A4 A4 νη₂ С0 °^О—I _п Ч ^Ν НО—РА L·-'⁰'но о х 7 / \ ОН 0 м Г^° L_O^P-SH ^ⁿ^-n ^и II L II \ ° LX? изомер 2 nh₂ νη ₂ C0 ° ^ O — I _n H ^Ν HO — PA L · - ' ⁰ ' but o x 7 / \ OH 0 m T ^ ° L _O ^ P-SH ^ ⁿ ^ -n ^and II L II \ ° LX ? isomer 2 nh ₂ Пример Ε Example Ε EC8 EC8 AC3 AC3 GC4 GC4 nh₂ С0 Д°-1^оЛ ^N HQ О X 7 С Si ^он ° г н \ ° ^hL JL? >< изомер 1 Оnh ₂ C0 D ° -1 ^ oL ^N HQ O X 7 C Si ^he ° g n \ ° ^h L JL? ><isomer 1 O Пример Ε Example Ε EC9 EC9 AC3 AC3 GC4 GC4 nh₂ С0 но о х 7 л \ он 0 нм м I^O^Lq^-P-SH l· Η 5 ° ΗΝ изомер 2 οnh ₂ C0 but about x 7 l \ he 0 nm m I ^ O ^ Lq ^ -P-SH l · Η 5 ° ΗΝ isomer 2 ο Пример Ε Example Ε

- 62 037513- 62 037513

ЕСЮ ESU GC3 GC3 NHBz ^N \ _ZN_X .0 OMe p·^ | i AC8 (имеющийся в продаже)NHBz ^N \ _Z N _X .0 OMe p · ^ | i AC8 (commercially available) О cVy °„ο-, ο ААнц ho-pA МеО О X 7 Z А о о γ IT \ N^Y? nh₂ About cVy ° „ο-, ο ААнц ho-pA МеО О X 7 Z А о о γ IT \ N ^ Y? nh ₂ Пример Α Example Α EC11 EC11 G1 G1 NHBz DMTrO—|^_O^^{N N} \ .O P | I °'^^XxCN AC9 (имеющийся в продаже)NHBz DMTrO— | ^ _O ^ ^NN \ .O P | I ° '^ ^Xx CN AC9 (commercially available) о о /Ха ho-pA о X 7 Ζ А он о Υ^οΆ__ο—р-он Г ¥/> ^{0 Ν}γΆ νη₂ o o / Xa ho-pA o X 7 Ζ A he o Υ ^ οΆ_ _ο —r-he G ¥ /> ^{0 Ν} γΆ νη ₂ Пример Α Example Α EC12 EC13 EC12 EC13 0 /VA ^ΗΟη^-°Υ ^{N NH,b} Λν OTIPS О OH _GC1 GAI0 / VA ^ΗΟ η ^ - ° Υ ^{N NH, b} Λν OTIPS О OH _GC1 GAI A2 NHBz <yS НОд^_о^ ^N TBSO .Η A ° ^OH AC4A2 NHBz <yS HOd ^ _o ^ ^N TBSO .Η A ° ^OH AC4 о _ΗΟγ°Γ,_ογ ^{Ν ΝΗ}* но о X 7 _N ААХ/он i* Г/ ^{но а} γΎ nh₂ о ° <Ха НО-Р-о--1 _о ν NH₂ О НО jz |^”\° ? АД ° ГА^ОН Г н λ ^CF3 ° ⁿAA^-N νη₂ о _ΗΟ γ ° Γ, _ο γ ^{Ν ΝΗ} * but о X 7 _N ААХ / he i * Г / ^{but а} γΎ nh ₂ о ° <Xa HO-P-o - 1 _о ν NH ₂ О HO jz | ^ " \ °? AD ° GA ^ON G n λ ^CF3 ° ⁿ AA ^ -N νη ₂ Пример Α Пример Α Example Α Example Α EC14 EC14 G7 G7 AC4 AC4 о о <Л^н но-р-о—, оЛ ^{N NH2 0 но} > [7 / А он о γ·^Ν °^°-r^SH OQ> ^{0 Ν} изомер 1 νη₂ o o <L ⁿ no-p-o—, oL ^{N NH2 0 but} > [7 / A he o γ · ^ Ν ° ^ ° -r ^SH OQ> ^{0 Ν} isomer 1 νη ₂ Пример Ε Example Ε EC15 EC15 G7 G7 AC4 AC4 0 ο Υ(%^Η НО-Р-О--1 _ο f Ν NH₂ о но хС X/ Ζ А он ο ΟΧ> ⁰ Ν изомер 2 ΝΗ₂ 0 ο Υ (% ^Η HO-P-O - 1 _ο f Ν NH ₂ o but xC X / Ζ A he ο ΟΧ> ⁰ Ν isomer 2 ΝΗ ₂ Пример Ε Example Ε

EC16 EC16 GAI GAI о DMTrO— 'Pr₂N^ _XO _лм ^z p^ AC2 1 OCEo DMTrO— 'Pr ₂ N ^ _X O _lm ^z p ^ AC2 1 OCE О ° ^0-1 _ HO—P< Ο°χ] о \. У 1 о И_о—р-он FC II Оэ °0 ° ^ 0-1 _ HO — P <° χ] o \. U 1 o I _o -r-on FC II Oe ° Пример А Example A EC17 EC17 G1 G1 AC2 AC2 о ° г, НО-Р< 0-0-0 о х У Z \ он о О0^Ч_₀—P-SH II р || \ 0 00^0 изомер 1o ° r, HO-P <0-0-0 o x Y Z \ he o O0 ^ H_ ₀ —P-SH II p || \ 0 00 ^ 0 isomer 1 Пример Е Example E EC18 EC18 G1 G1 AC2 AC2 Пример Е Example E EC19 EC19 GC3 GC3 00 DMTrO—I _o J 'Pr₂N^_p/O OCE ^AC5 00 DMTrO — I _o J 'Pr ₂ N ^ _p / O OCE ^AC5 о °^0-, _n Ν^- ΝΗ₂ ΗΟ-ρΝ Ο'θΌ о х У Ζ \ о о Ρ'ο'ΊΖο-ρ-οη С0 ⁸ o ° ^ 0-, _n Ν ^ - ΝΗ ₂ ΗΟ-ρΝ Ο'θΌ o x Y Ζ \ o o Ρ'ο'ΊΖο-ρ-οη C0 ⁸ Пример А Example A EC20 EC20 G1 G1 xOO 0-0 DMTrO—। _o [ 'Pr₂N^ /О icE ^AC6 xOO 0-0 DMTrO—। _o ['Pr ₂ N ^ / O icE ^AC6 о о N'^N^-NHj НО-Р< о к У Z А он о Ρ^θ Lq^P-SH /к II ХО °, г у изомер 1 about o N '^ N ^ -NHj NO-R <o to u Z And he about Ρ ^ θ Lq ^ P-SH / to II ХО °, g y isomer 1 Пример Е Example E EC21 EC21 GC3 GC3 AC 6 AC 6 О <^;0г °^°-ι η Ν 'ιΓ 'ΝΗ- НО-Р< L-⁰^ О X___У / А он о 0ό·^Ί__ο—p-sh Со ° rfCOy изомер 2O <^; 0r ° ^ ° -ι η Ν 'ιΓ' ΝΗ- HO-P <L- ⁰ ^ O X ___ Y / A he o 0ό · ^ Ί_ _ο -p-sh Co ° rfCOy isomer 2 Пример Е Example E

- 64 037513- 64 037513

Выборочные физические данные примерных соединений приведены ниже.Selected physical data of exemplary compounds are shown below.

Таблица 4Table 4

Физические данные циклического динуклеотида и аналоговPhysical data of cyclic dinucleotide and analogs

Пример Example Структура Structure характеристика ¹Н ЯМР данные δ (ppm) *characteristic ¹ H NMR data δ (ppm) * ³¹Р ЯМР данные δ (ppm) * ³¹ Р NMR data δ (ppm) * МС данные m/z MS data m / z Е1 E1 О ^{N NH}> но о к У У \ ОН /О 7 ¥/> ⁰ νη₂ О ^{N NH} > but О к У У \ ОН / О 7 ¥ /> ⁰ νη ₂ 8,58 (с, 1Н) 8,56 (с, 1Н) 8,16 (с, 1Н) 6,45 (с, 1Н) 6,22 (д, J=8,5 Гц, 1Н) 5,89 (м, 1Н) 5,31 (м, 1Н) 50°С 8.58 (s, 1H) 8.56 (s, 1H) 8.16 (s, 1H) 6.45 (s, 1H) 6.22 (d, J = 8.5 Hz, 1H) 5.89 (m, 1H) 5.31 (m, 1H) 50 ° C 0, 1 -0, 9 50°С 0, 1 -0.9 50 ° C [М+Н] ⁺ 675, 1[M + H] ⁺ 675, 1 Е2 E2 О ^{Ν ΝΗ}> но о к 7 ^{/0 1} ЦТ '> ° ΝΗ,On ^{Ν ΝΗ>} but of a ^{7/1 0} DH '> ° ΝΗ, [М+Н] ⁺ 659, 0[M + H] ⁺ 659, 0 ЕЗ EZ О ^ 0-, _n Л'Лмн₂ HO-P< но о к 7 / ^J\MeO /0 Хо'^1__о__Рс_он г Т/> ° νη₂ O ^ 0-, _n L'Lmn ₂ HO-P <but o k 7 / ^ J \ MeO / 0 Xo '^ 1_ _o _ _P c _on r T /> ° νη ₂ 8,31 (с, 1Н) 8,29 (с, 1Н) 7,88 (с, 1Н) 6,19 (с, 1Н) 5,92 (д, J=8,7 Гц, 1Н) 5,71 (ддд, J=8,4, 8,3, 4,3 Гц, 1Н) 5,09 (ддд, J=9,8, 8.31 (s, 1H) 8.29 (s, 1H) 7.88 (s, 1H) 6.19 (s, 1H) 5.92 (d, J = 8.7 Hz, 1H) 5.71 (ddd, J = 8.4, 8.3, 4.3Hz, 1H) 5.09 (ddd, J = 9.8, -1,2 -2,5 Na⁺ соль в D₂O-1.2 -2.5 Na ⁺ salt in D ₂ O [М+Н] - 687,2 [M + H] - 687.2

- 66 037513- 66 037513

6,9, 4,2 Гц, 1Н) Na⁺ соль в D₂06.9, 4.2 Hz, 1H) Na ⁺ salt in D ₂ 0 E4 E4 O^>^ ° _ 7 n^nh₂ HO-P<f L·-⁰^ но о ч 7 / \ HO _/0 m r^O-^L_o_p-OH ^^N\^N II Я? ⁰ nh₂ O ^> ^ ° _ 7 n ^ nh ₂ HO-P <f L · - ⁰ ^ but about 7 h _/ \ HO / _{0 mr ^ O- ^ L o _p-} OH ^ N \ ^ N II I? ⁰ nh ₂ 8,24 (с, 1Н) 8,18 (с, 1Н) 7,97 (с, 1Н) 6,10 (д, 3=1,4 Гц, 1Н) 5,97 (д, 3=8,4 Гц, 1Н) 5,63 (ддд, 3=8,1, 7,9, 4,2 Гц, 1Н) 5,09 (м, 1Н) 8.24 (s, 1H) 8.18 (s, 1H) 7.97 (s, 1H) 6.10 (d, 3 = 1.4 Hz, 1H) 5.97 (d, 3 = 8.4 Hz, 1H) 5.63 (ddd, 3 = 8.1, 7.9, 4.2 Hz, 1H) 5.09 (m, 1H) -1,5 -2,4 -1.5 -2.4 [М+Н] ⁺ 713,2[M + H] ⁺ 713.2 E5 E5 0 _HOi<°^oJ| ^{N NH2} HO 0 4 Z Z \ OH 0 m ⁰ Lq—p-OH ,<^N^N II Г II \ ⁰ nh₂ 0 _HO i <° ^ oJ | ^{N NH2} HO 0 4 Z Z \ OH 0 m ⁰ Lq — p-OH, < ^N ^ N II Г II \ ⁰ nh ₂ 8,20 (с, 1Н) 7,95 (с, 1Н) 7,47 (д, 3=3,8 Гц, 1Н) 6,77 (д, 3=3,8 Гц, 1Н) 6,08 (д, 3=4,7 Гц, 1Н) 5, 80 (д, 3=4,9 Гц, 1Н) в d₂o-ch₃cn8.20 (s, 1H) 7.95 (s, 1H) 7.47 (d, 3 = 3.8 Hz, 1H) 6.77 (d, 3 = 3.8 Hz, 1H) 6.08 ( d, 3 = 4.7 Hz, 1H) 5, 80 (d, 3 = 4.9 Hz, 1H) c d ₂ o-ch ₃ cn [М+Н] ⁺ 673,7[M + H] ⁺ 673.7 E6 E6 0 <ώ ДдХ1 НО 0 Ч Ζ Л \ ОН _/0 м PO'^L_O—Р-ОН _N ¹¹ Т/> ^{0 Ν} изомер 1 νη₂ 0 <ώ DDX1 HO 0 H Ζ L \ OH _{/ 0} m PO '^ L _O —R-OH _N ¹¹ T /> ^{0 Ν} isomer 1 νη ₂ 8,25 (с, 1Н) 8,23 (с, 1Н) 8,02 (с, 1Н) 6,18 (с, 1Н) 5, 96 (д, J=8,6 Гц, 1Н) 5,43 (тд, 3=8,1, 3,9 Гц, 1Н) 8.25 (s, 1H) 8.23 (s, 1H) 8.02 (s, 1H) 6.18 (s, 1H) 5.96 (d, J = 8.6 Hz, 1H) 5.43 (td, 3 = 8.1, 3.9 Hz, 1H) 52,4 -2,4 52.4 -2.4 [М+Н]⁺ 691,0[M + H] ⁺ 691.0 E7 E7 0 сУл %о—I „ 7^ν^νη₂ HS-pC НО 0 4 ζ У \ ОН /0 м r^O^Lo^pioH г Y _z> ° N n изомер 2 nh₂ 0 cYl% o — I „7 ^ ν ^ νη ₂ HS-pC HO 0 4 ζ Y \ OH / 0 m r ^ O ^ Lo ^ pioH g Y _z > ° N n isomer 2 nh ₂ 8,29 (с, 1Н) 8,26 (с, 1Н) 7,85 (с, 1Н) 6,17 (с, 1Н) 5,92 (д, 3=8,5 Гц, 1Н) 5,61 (ддд, 3=7,9, 7,9, 4,0 Гц, 1Н) 5,20 (ддд, 3=8,8, 8.29 (s, 1H) 8.26 (s, 1H) 7.85 (s, 1H) 6.17 (s, 1H) 5.92 (d, 3 = 8.5 Hz, 1H) 5.61 (ddd, 3 = 7.9, 7.9, 4.0Hz, 1H) 5.20 (ddd, 3 = 8.8, 55, 1 -2,5 55, 1 -2.5 [М+Н]⁺ 691,0[M + H] ⁺ 691.0

- 67 037513- 67 037513

- 68 037513- 68 037513

E13 E13 0 _HS4<^on^oJ ^{N NH2} HO 0 X У J к OH _/0 7^:> ° 'γ^ N изомер 2 nh₂ 0 _HS 4 < ^o n ^ oJ ^{N NH2} HO 0 X Y J to OH _{/ 0} 7 ^: > ° 'γ ^ N isomer 2 nh ₂ [М+Н] ⁺ 707,0[M + H] ⁺ 707.0 E14 E14 0 °%o-| _n Y'n+h₂ hs-p< U-o^i HO 0 X У Z \ OH 0 Μ^Ί_₀-P-SH II L Π \ 0 _N // изомер3 nh₂ 0 °% o- | _n Y'n + h ₂ hs-p <Uo ^ i HO 0 X Y Z \ OH 0 Μ ^ Ί_ ₀ -P-SH II L Π \ 0 _N // isomer 3 nh ₂ [М+Н] ⁺ 707,0[M + H] ⁺ 707.0 E15 E15 0 нЛ<°^о-4 ^{n NH}= HO 0 X___У У Ч ОН 0 Т/> ° ν изомер 1 νη₂ 0 nL <° ^ o-4 ^{n NH} = HO 0 X ___ U U CH OH 0 T /> ° ν isomer 1 νη ₂ [М+2Н] ²⁺ 2 354,0[M + 2H] ²⁺ 2,354.0 E16 E16 0 _η HS—P<f L^°\j НО 0 X___У J к ОН 0 ^_Г°^О-Г^ЗН Т/> ⁰ N изомер 2 nh₂ 0 _η HS — P <f L ^ ° \ j HO 0 X ___ Y J k OH 0 ^ _G ° ^ O-G ^3N T /> ⁰ N isomer 2 nh ₂ 8,06 (с, 1Н) 8,03 (с, 1Н) 7,23 (д, J=3,7 Гц, 1Н) 6, 59 (д, J=3,7 Гц, 1Н) 6, 10 (д, J=6, 4 Гц, 1Н) 5,87 (д, J= 8,5 Гц, 8.06 (s, 1H) 8.03 (s, 1H) 7.23 (d, J = 3.7 Hz, 1H) 6, 59 (d, J = 3.7 Hz, 1H) 6, 10 (d, J = 6.4 Hz, 1H) 5.87 (d, J = 8.5 Hz, 57,9 51,7 в ДМСОde 57.9 51.7 in DMSOde [М+Н] ⁺ 706, 1[M + H] ⁺ 706, 1

- 69 037513- 69 037513

- 70 037513- 70 037513

- 71 037513- 71 037513

- 72 037513- 72 037513

EAl EAl о ΗΟ-ρΓ H^O'-J НО 0 V ζ / \ ОН 0 μ r^O'^L_o—Ρ-ΟΗ г Η \ ο у 1/ νη₂ about ΗΟ-ρΓ H ^ O'-J HO 0 V ζ / \ OH 0 _{μ r ^ O '^ L o} -Ρ-ΟΗ g Η \ ο y 1 / νη ₂ 8,07 (с, 1H) 7,37 (д, J=3,8 Гц, 1H) 7,09 (д, J=3,8 Гц, 1H) 6, 65 (д, J=3,7 Гц, 1H) 6,35 (д, J=3,7 Гц, 1H) 6,08 (д, J=7,4 Гц, 1H) 6,04 (д, J=8,4 Гц, 1H) 4,85 (m, 1H) 4,81 (m, 1H) в ДМСО-de 8.07 (s, 1H) 7.37 (d, J = 3.8 Hz, 1H) 7.09 (d, J = 3.8 Hz, 1H) 6.65 (d, J = 3.7 Hz, 1H) 6.35 (d, J = 3.7 Hz, 1H) 6.08 (d, J = 7.4 Hz, 1H) 6.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H) 4.85 (m, 1H) 4.81 (m, 1H) in DMSO-de 0, 98 0, 96 в ДМСО- de 0.98 0, 96 in DMSO- de [М+Н] ⁺ 673, 1[M + H] ⁺ 673, 1 EA2 EA2 0 71α °χθ—1 η ( 'А ЛН₂ но-p/f L^o^-J но о х ζ ^TSz° /° | о Lc_o—р-он />ⁿ^n _ ' II it X ,> ° νη₂ 0 71α ° χθ-1 η ('A LN ₂ but-p / f L ^ o ^ -J but o x ζ ^ TSz ° / ° | o Lc _o -p-on /> ⁿ ^ n _' II it X ,> ° νη ₂ 8,29 (с, 1H) 8,25 (с, 1H) 7,89 (с, 1H) 6,17 (с, 1H) 6, 01 (д, J=8, 6 Гц, 1H) 5,69 (ддд, J=8,7, 8,7, 4,0 Гц, 1H) 5,09 (m, 1H) Na⁺ соль в D2O8.29 (s, 1H) 8.25 (s, 1H) 7.89 (s, 1H) 6.17 (s, 1H) 6.17 (d, J = 8.6 Hz, 1H) 5.69 (ddd, J = 8.7, 8.7, 4.0 Hz, 1H) 5.09 (m, 1H) Na ⁺ salt in D2O -1,1 -2,3 Na⁺ соль в D₂O-1.1 -2.3 Na ⁺ salt in D ₂ O [М+Н] ⁺ 757,0 [М-Н] - 755, 0[M + H] ⁺ 757.0 [M-H] - 755.0 ЕАЗ EAZ О но4к°П^оЛ ^{Ν ΝΗ2} ^r^o ^xo χΓ Ίζ / \ OH /0 ^^Г^О-Р-он F T/> ⁰ nh₂ O no4k ° P ^ oL ^{Ν ΝΗ2} ^ r ^ o ^x o χΓ Ίζ / \ OH / 0 ^^ T ^ O-R-on FT /> ⁰ nh ₂ 8,26 (с, 1H) 8,23 (с, 1H) 7,85 (с, 1H) 6,27 (с, 1H) 5, 92 (д, J=8, 6 Гц, 1H) 5,63 (м, 1H) 5,10 (м, 1H) 8.26 (s, 1H) 8.23 (s, 1H) 7.85 (s, 1H) 6.27 (s, 1H) 5.92 (d, J = 8.6 Hz, 1H) 5.63 (m, 1H) 5.10 (m, 1H) -1, 6 -2,3 -sixteen -2.3 [М+Н] ⁺ 713, 0 [М-Н]- 711, 0[M + H] ⁺ 713, 0 [M-H] - 711, 0 EA4 EA4 0 °„O-| _n N 'N^'NH, hs—p< HO 0 X___z 4 OH 0 M P'O'^L_o_p-SH /5^N\-N II rT?N ⁰ 1 изомер 1 nh₂ 0 ° „O- | _n N 'N ^' NH, hs — p <HO 0 X___z 4 OH 0 M P'O '^ L _o _p-SH / 5 ^N \ -N II rT? N ⁰ 1 isomer 1 nh ₂ 8,19 (с, 1H) 8,18 (с, 1H) 8,15 (уш с, 1Н) 6,25 (д, 0=3,3 Гц, 1Н) 5, 92 (д, 0=8,5 Гц, 1Н) 5,24 (м, 2Η) в CD₃CN8.19 (s, 1H) 8.18 (s, 1H) 8.15 (br s, 1H) 6.25 (d, 0 = 3.3 Hz, 1H) 5.22 (d, 0 = 8, 5 Hz, 1H) 5.24 (m, 2Η) in CD ₃ CN 55, 4 53,5 в CD₃CN55.4 53.5 c CD ₃ CN [М+Н] ⁺ 707,1[M + H] ⁺ 707.1

- 73 037513- 73 037513

EA5 EA5 о _нзЛ_со^оЛ ^{Ν ΝΗ}> ΗΟ 0 V ζ к ОН _{/0 N}^°^O'i(-^SH 7 ¥> ⁰ изомер 2 ΝΗοo _ns A _with o ^ oL ^Ν > ΗΟ 0 V ζ k OH _{/ 0 N} ^ ° ^ O'i (- ^SH 7 ¥> ⁰ isomer 2 ΝΗο 59, 6 58,1 в CD₃CN59.6 58.1 in CD ₃ CN [M+H] ⁺ 707,1[M + H] ⁺ 707.1 EA6 EA6 0 ° ^-0-. „ Л'Щ'тн, hs-p< НО 0 X___ζ У к ОН _/0 м Xo^L_o_p-SH CQ ° [ изомер 1 nh₂ 0 ° ^ -0-. „L'SCH'Tn, hs-p <HO 0 X ___ ζ Y to OH _{/ 0} m Xo ^ L _o _p-SH CQ ° [isomer 1 nh ₂ 8,62 (с, 1H) 8,55 (с, 1H) 7, 69 (д, J=3,7 Гц, 1H) 6,59 (д, J=3,7 Гц, 1H) 6,41 (д, J=8,4 Гц, 1H) 6, 37 (д, J=4, 6 Гц, 8.62 (s, 1H) 8.55 (s, 1H) 7.69 (d, J = 3.7Hz, 1H) 6.59 (d, J = 3.7 Hz, 1H) 6.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H) 6, 37 (d, J = 4, 6 Hz, 58,1 56, 0 в D₂058.1 56.0 c D ₂ 0 [M+H] ⁺ 706, 0[M + H] ⁺ 706, 0 1H) 5,59 (m, 1H) 5,51 (m, 1H) в D₂01H) 5.59 (m, 1H) 5.51 (m, 1H) in D ₂ 0 EA7 EA7 0 1 ° ^-0- r. hs—P< HO 0 V z / A OH 0 M Xo'^L_o_pC_SH ΓΉ ⁰ m . У__⁷/ T изомер 2 NH₂ 0 1 ° ^ -0- r. hs — P <HO 0 V z / A OH 0 M Xo '^ L _o _pC _SH ΓΉ ⁰ m. Y__ ⁷ / T isomer 2 NH ₂ 56, 7 55, 6 в CD₃CN56, 7 55, 6 in CD ₃ CN [M+H] ⁺ 706, 0[M + H] ⁺ 706, 0

- 74 037513- 74 037513

- 75 037513- 75 037513

- 76 037513- 76 037513

EB4 EB4 0 Cl Г ° ^0-, „ C'O' NH, ηο-ρΧ X-o^i но о x___2 / \ OH 0 T/> ⁰ C'N | изомер 2 nh₂ 0 Cl Г ° ^ 0-, „C'O 'NH, ηο-ρΧ Xo ^ i but about x___2 / \ OH 0 T /> ⁰ C'N | isomer 2 nh ₂ 8,46 (с, 1H) 8,26 (с, 1H) 7,03 (д, 5=3,7 Гц, 1H) 6,38 (д, 5=3,7 Гц, 1H) 6,17 (д, 5^=2,7 Гц, 1H) 5,99 (д, 5=8,4 Гц, 1H) 5,63 (μ, 1H) 5,11 (ддд, 5=6,7, 6,6, 4,5 Гц, 1H) 8.46 (s, 1H) 8.26 (s, 1H) 7.03 (d, 5 = 3.7Hz, 1H) 6.38 (d, 5 = 3.7 Hz, 1H) 6.17 (d, 5 ^ = 2.7 Hz, 1H) 5.99 (d, 5 = 8.4 Hz, 1H) 5.63 (μ, 1H) 5.11 (ddd, 5 = 6.7, 6.6, 4.5 Hz, 1H) 56, 1 -0,7 56, 1 -0.7 [M+H] ⁺ 690,0[M + H] ⁺ 690.0

EB5 EB5 8,26 (с, 1H) 8,23 (с, 1H) 6,94 (д, 5=3,7 Гц, 1H) 6,26 (д, 5=3,7 Гц, 1H) 6,14 (с, 1H) 5, 92 (д, 5=8,5 Гц, 1H) 5,55 (m, 1H) 5,00 (m, 1H) 8.26 (s, 1H) 8.23 (s, 1H) 6.94 (d, 5 = 3.7 Hz, 1H) 6.26 (d, 5 = 3.7 Hz, 1H) 6.14 (s, 1H) 5.82 (d, 5 = 8.5 Hz, 1H) 5.55 (m, 1H) 5.00 (m, 1H) 51,5 -1,3 51.5 -1.3 [M+H]⁺ 734,0 [M-H] 732,0[M + H] ⁺ 734.0 [MH] 732.0 EB6 EB6 0 \ Jl X 0 N rT '_NH₂ hs—pX Χ'θ'Χ НО о к s / k OH 0 ГХ: ⁰ N изомер 1 nh₂ 0 \ Jl X 0 N rT ' _N H ₂ hs — pX Χ'θ'Χ HO o k s / k OH 0 GC: ⁰ N isomer 1 nh ₂ 8,55 (с, 1H) 8,26 (с, 1H) 7,55 (с, 1H) 6,22 (с, 1H) 6,08 (д, J= 8 , 6 Гц, 1H) 5,81 (ддд, 5=10,4, 8,6, 4,0 Гц, 1H) 5,32 (ддд, J=8,9, 8,8, 4,3 Гц, 1H) 8.55 (s, 1H) 8.26 (s, 1H) 7.55 (s, 1H) 6.22 (s, 1H) 6.08 (d, J = 8.6Hz, 1H) 5.81 (ddd, 5 = 10.4, 8.6, 4.0Hz, 1H) 5.32 (ddd, J = 8.9, 8.8, 4.3Hz, 1H) 54,1 52,5 54.1 52.5 [M-H] - 705, 0 [M-H] - 705, 0

- 77 037513- 77 037513

EB7 EB7 A nh₂ A nh ₂ 0 W /0 — HS-P<f HO 0 Ao-^L /> N 0 W / 0 - HS-P <f HO 0 Ao- ^ L /> N \ _ N Α'θΆ OH JO -0—P-SH II 0 изомер 2 \ _ N Α'θΆ OH JO -0 — P-SH II 0 isomer 2 0 La 0 La 8,59 (с, 1H) 8,26 (с, 1H) 7,79 (с, 1H) 6,21 (с, 1H) 6, 05 (д, 3=8, 6 Гц, 1H) 5,88 (ддд, 3=10,5, 8,6, 4,1 Гц, 1H) 5,31 (ддд, 3=8,4, 8,4, 4,1 Гц, 1H) 8.59 (s, 1H) 8.26 (s, 1H) 7.79 (s, 1H) 6.21 (s, 1H) 6.05 (d, 3 = 8.6Hz, 1H) 5.88 (ddd, 3 = 10.5, 8.6, 4.1Hz, 1H) 5.31 (ddd, 3 = 8.4, 8.4, 4.1Hz, 1H) 55, 4 54,2 55, 4 54.2 [М-Н] - 705, 0 [M-H] - 705, 0 — - 8,15 (с, 1H) 8.15 (s, 1H) 7,89 (с, 1H) 7.89 (s, 1H) 0 II 0 II 7,35 (д, 3=3,8 Гц, 7.35 (d, 3 = 3.8 Hz, /% /% A^NH 1 A ^ NH 1 1Н) 1H) ECI ECI nh₂ nh ₂ 0 n A W ^,0-1 _n | НО-PL HO 0 X / Л/ 1 ⁰ Цо—p—sh ,-N p p II \ ^ЕзС 0 изомер 10 n A W ^, 0-1 _n | HO-PL HO 0 X / L / 1 ⁰ Co — p — sh, -N pp II \ ^E3C 0 isomer 1 ^n^^nh₂ ^ n ^^ nh ₂ 6,27 (с, 1Н) 6,26 (д, 3=3,8 Гц, 1Н) 5, 98 (д, 3=8, 6 Гц, 1Н) 5,75 (ддд, 3=9,2, 6.27 (s, 1H) 6.26 (d, 3 = 3.8 Hz, 1H) 5.88 (d, 3 = 8.6 Hz, 1H) 5.75 (ddd, 3 = 9.2, 52,0 -1,3 52.0 -1.3 [М+Н] + 772,1 [M + H] + 772.1 9,1, 4,1 Гц, 1Н) 9.1, 4.1 Hz, 1H) 5,07 (м, 1Н) 5.07 (m, 1H) 8,15 (с, 1Н) 8.15 (s, 1H) 7,97 (с, 1Н) 7.97 (s, 1H) 0 0 7,56 (д, 3=3,8 Гц, 7.56 (d, 3 = 3.8 Hz, EC2 EC2 A N-xL nh₂ A N-xL nh ₂ » 0 W /0—1 _n I ho-pL Α^οΆ HO 0 X z /° 1 о Li₀—p-sh -N pA II \ ^F3^C 0 A изомер 2»0 W / 0—1 _n I ho-pL Α ^ο Ά HO 0 X z / ° 1 о Li ₀ —p-sh -N pA II \ ^F 3 ^C 0 A isomer 2 A_nh A _nh 1Н) 6,37 (д, 3=3,8 Гц, 1Н) 6,30 (д, 3=3,1 Гц, 1Н) 6,02 (д, 3=8,5 Гц, 1Н) 5,78 (ддд, 3=12,6, 1H) 6.37 (d, 3 = 3.8 Hz, 1H) 6.30 (d, 3 = 3.1 Hz, 1H) 6.02 (d, 3 = 8.5 Hz, 1H) 5.78 (ddd, 3 = 12.6, 56, 3 -0, 6 56, 3 -0.6 [М+Н]⁺ 772,1[M + H] ⁺ 772.1 8,5, 4,1 Гц, 1Н) 8.5, 4.1 Hz, 1H) 5,16 (м, 1Н) 5.16 (m, 1H)

- 78 037513- 78 037513

ЕСЗ ESZ 0 hoV^oJ ^N HO 0 X У ΛΔ/ /° 1 о L±_o—р-он /T/> ⁰ nh₂ 0 hoV ^ oJ ^N HO 0 X Y ΛΔ / / ° 1 о L ± _o -p-on / T /> ⁰ nh ₂ 8,15 (с, 1Н) 7,87 (с, 1Н) 7,33 (д, J=3,8 Гц, 1Н) 6,27 (с, 1Н) 6,24 (д, J=3,8 Гц, 1Н) 5, 98 (д, 7=8, 6 Гц, 1Н) 5,68 (ддд, J=8,5, 8,45, 4,0 Гц, 1Н) 5,08 (ддд, J=7,7, 7,5, 4,5 Гц,1Н) 8.15 (s, 1H) 7.87 (s, 1H) 7.33 (d, J = 3.8 Hz, 1H) 6.27 (s, 1H) 6.24 (d, J = 3.8 Hz, 1H) 5.88 (d, 7 = 8.6 Hz, 1H) 5.68 (ddd, J = 8.5, 8.45, 4.0 Hz, 1H) 5.08 (ddd, J = 7.7, 7.5, 4.5 Hz, 1H) -1,4 -2,4 -1.4 -2.4 [М+Н] ⁺ 756, 2[M + H] ⁺ 756, 2 ЕС4 ЕС5 EC4 EC5 0 /мм ° ^0-, _ nA_nA_NH2 но-ρζ^ L-°\l НО О X У / X ОН /О ИМ Ν ⁰ L_o—P-SH H2N. .N. _N μ г и \ о hn^JL# [j изомер 1 0 0 ° ю—, . ho—рС Д-°\1 НО 0 X У У к ОН _/0 ' Т /> ⁰ ΗΝ^Λ/ р| изомер 2 00 / mm ° ^ 0-, _ nA _n A _NH2 but-ρζ ^ L- ° \ l HO O X Y / X OH / O IM Ν ⁰ L _o —P-SH H2N. .N. _N μ r u \ o hn ^ JL # [j isomer 1 0 0 ° ω—,. ho — pC A- ° \ 1 HO 0 X Y Y k OH _{/ 0} 'T /> ⁰ ΗΝ ^ Λ / p | isomer 2 0 7,03 (д, 7=3,7 Гц, 1Н) 6,88 (м, 1Н) 6,34 (д, 7=3,7 Гц, 1Н) 6,31 (д, 7=3,7 Гц, 1Н) 6,08 (м, 1Н) 5,93 (м, 1Н) 5,05 (м, 1Н) 4,98 (м, 1Н) в flMCO-d₆/D₂O 7,02 (д, 7=3,7 Гц, 1Н) 6,92 (д, 7=3,7 Гц, 1Н) 6,33 (м, 2Н) 6,09 (д, 7=8,7 Гц, 1Н) 5, 92 (д, 7=7,9 Гц, 1Н) 4,94 (м, 1Н) 4,81 (м, 1Н) 4,60 (м, 1Н) 4,43 (м, 1Н) в flMCO-d₆/D₂O7.03 (d, 7 = 3.7 Hz, 1H) 6.88 (m, 1H) 6.34 (d, 7 = 3.7 Hz, 1H) 6.31 (d, 7 = 3.7 Hz , 1H) 6.08 (m, 1H) 5.93 (m, 1H) 5.05 (m, 1H) 4.98 (m, 1H) in flMCO-d ₆ / D ₂ O 7.02 (d, 7 = 3.7 Hz, 1H) 6.92 (d, 7 = 3.7 Hz, 1H) 6.33 (m, 2H) 6.09 (d, 7 = 8.7 Hz, 1H) 5.22 (d, 7 = 7.9 Hz, 1H) 4.94 (m, 1H) 4.81 (m, 1H) 4.60 (m, 1H) 4.43 (m, 1H) in flMCO-d ₆ / D ₂ O 61,1 -0,4 53, 1 -0, 8 61.1 -0.4 53, 1 -0.8 [М+Н] ⁺ 705, 0 [М+Н] ⁺ 704,9[M + H] ⁺ 705 0 [M + H] ⁺ 704.9

- 79 037513- 79 037513

- 80 037513- 80 037513

EC9 EC9 nh₂ €0 HO 0 4 S Z A OH 0 Ν Μ Μ Γ^ΟΆ_0 —P—SH ^H2^N\/^N\^,N II L If \ 0 А изомер 2 0nh ₂ € 0 HO 0 4 S ZA OH 0 Ν Μ Μ Γ ^ ΟΆ_0 —P — SH ^H 2 ^N \ / ^N \ ^, N II L If \ 0 А isomer 2 0 8,29 (с, 2H) 8,04 (с, 1H) 7,50 (д, J=3,8 Гц, 1H) 6,82 (д, J=3,7 Гц, 1H) 6,59 (д, J=3,8 Гц, 1H) 6,35 (д, J=3,7 Гц, 1H) 6,29 (д, J=8,5 Гц, 1H) 5, 98 (д, J=8,5 Гц, 1H) 5,11 (m, 1H) 4,40 (m, 1H) в flMCO-d₆ 8.29 (s, 2H) 8.04 (s, 1H) 7.50 (d, J = 3.8 Hz, 1H) 6.82 (d, J = 3.7 Hz, 1H) 6.59 ( d, J = 3.8 Hz, 1H) 6.35 (d, J = 3.7 Hz, 1H) 6.29 (d, J = 8.5 Hz, 1H) 5.88 (d, J = 8 , 5 Hz, 1H) 5.11 (m, 1H) 4.40 (m, 1H) in flMCO-d ₆ 57,1 1,4 в ДМСО- d₆ 57.1 1.4 in DMSO- d ₆ [M+H] ⁺ 689, 1[M + H] ⁺ 689, 1 EC1O EC1O 0 aY »Vv«4 ^{n 2} MeO 0 V Z i/ /° 1 0 Ll_o^p-oh _fA II A T з ^FsC ° ^NY4^Z nh₂ 0 aY "Vv" 4 ^{n 2} MeO 0 VZ i / / ° 1 0 Ll _o ^ p-oh _f A II AT s ^FsC ° ^N Y4 ^Z nh ₂ 8,28 (с, 1H) 8,26 (с, 1H) 7,83 (с, 1H) 6,26 (с, 1H) 5, 96 (д, J=8,6 Гц, 1H) 5,76 (ддд, J=8,6, 8,6, 4,1 Гц, 1H) 5,09 (m, 1H) 8.28 (s, 1H) 8.26 (s, 1H) 7.83 (s, 1H) 6.26 (s, 1H) 5.96 (d, J = 8.6 Hz, 1H) 5.76 (ddd, J = 8.6, 8.6, 4.1Hz, 1H) 5.09 (m, 1H) -1, 6 -2,7 -sixteen -2.7 [M+H] ⁺ 771,2[M + H] ⁺ 771.2 EC11 EC11 0 /Ax hoV^oY ^{N NH}= о S r Z А он о M Г^'0'^Lo—P—OH A Y/> ^{0 n}^-n^Z nh₂ 0 / Ax hoV ^ oY ^{N NH} = o S r Z A he o M Г ^ '0' ^ Lo — P — OH AY /> ^{0 n} ^ -n ^Z nh ₂ 8,32 (с, 1H) 8,27 (с, 1H) 7,93 (с, 1H) 6,47 (m, 1H) 5, 97 (д, J=8,3 Гц, 1H) 5,58 (m, 1H) 5,19 (m, 1H) 8.32 (s, 1H) 8.27 (s, 1H) 7.93 (s, 1H) 6.47 (m, 1H) 5.97 (d, J = 8.3Hz, 1H) 5.58 (m, 1H) 5.19 (m, 1H) [M+H] ⁺ 659, 0 [M-H]~ 656, 8[M + H] ⁺ 659, 0 [MH] ~ 656, 8

- 81 037513- 81 037513

- 82 037513- 82 037513

EC15 EC15 0 ⁰ \ J Ji ho-p-o—, оЛ ^{N NH2} о HO \C Cz / \ OH 0 N 1 ° 1—O-P-SH 1 F/> ^{0 Ν}ν4^ζ | изомер 2 nh₂ 0 ⁰ \ J Ji ho-po—, оЛ ^{N NH2} о HO \ C Cz / \ OH 0 N 1 ° 1 — OP-SH 1 F /> ^{0 Ν} ν4 ^ζ | isomer 2 nh ₂ 8,35 (с, 1H) 7,93 (с, 1H) 6,77 (д, J=3,8 Гц, 1H) 6,25 (д, J=8,l Гц, 1H) 6,17 (д, J=3,8 Гц, 1H) 6,10 (д, J=8,l Гц, 1H) 5,19 (ддд, J=8,6, 4,6, 4, 6 Гц, 1H) 5,14 (ддд, J=8,5, 4,4, 4,4 Гц, 1H) 8.35 (s, 1H) 7.93 (s, 1H) 6.77 (d, J = 3.8 Hz, 1H) 6.25 (d, J = 8, l Hz, 1H) 6.17 (d, J = 3.8 Hz, 1H) 6.10 (d, J = 8, l Hz, 1H) 5.19 (ddd, J = 8.6, 4.6, 4.6Hz, 1H) 5.14 (ddd, J = 8.5, 4.4, 4.4Hz, 1H) 52,1 -1, 6 52.1 -sixteen [M+H] ⁺ 690, 0[M + H] ⁺ 690, 0 EC16 EC16 0 <^/ΝΪα ^{N NH2 0} S г ^U°Y°-yoH ЦО ⁰ 0 < ^{/ Ν} Ϊα ^{N NH2 0} S g ^ U ° Y ° -yoH CO ⁰ 8,03 (с, 1H) 7,68 (m, 1H) 7,58 (д, J=8,0 Гц, 1H) 7,44 (д, J=3,4 Гц, 1H) 7,20 (μ, 2H) 6,59 (t, J=6,5 Гц, 1H) 6,55 (д, J=3,4 Гц, 1H) 6, 05 (д, J=8,5 Гц, 1H) 5,55 (m, 1H) 5,20 (m, 1H) 8.03 (s, 1H) 7.68 (m, 1H) 7.58 (d, J = 8.0 Hz, 1H) 7.44 (d, J = 3.4 Hz, 1H) 7.20 (μ, 2H) 6.59 (t, J = 6.5 Hz, 1H) 6.55 (d, J = 3.4 Hz, 1H) 6.05 (d, J = 8.5 Hz, 1H) 5.55 (m, 1H) 5.20 (m, 1H) -1,0 -1, 1 -1.0 -eleven [M+H] ⁺ 723, 1[M + H] ⁺ 723, 1 EC17 EC17 0 ° ζθ-1 n ho-p< O°O о x 7 / \ OH 0 Co ° изомер 1 0 ° ζθ-1 n ho-p <O ° O o x 7 / \ OH 0 Co ° isomer 1 8,03 (с, 1H) 7,67 (m, 1H) 7,58 (m, 1H) 7,44 (д, J=3,4 Гц, 1H) 7,18 (м, 2H) 6,57 ( t , J= 6, 4 Гц, 1H) 6,52 (μ, 1H) 6, 02 (д, J=8,5 Гц, 1H) 5,57 (m, 1H) 5,20 (m, 1H) 8.03 (s, 1H) 7.67 (m, 1H) 7.58 (m, 1H) 7.44 (d, J = 3.4 Hz, 1H) 7.18 (m, 2H) 6.57 (t, J = 6.4 Hz, 1H) 6.52 (μ, 1H) 6.02 (d, J = 8.5 Hz, 1H) 5.57 (m, 1H) 5.20 (m, 1H) 53, 0 -1,0 53, 0 -1.0 [M+H] ⁺ 657,0 [M-H] 655, 0[M + H] ⁺ 657.0 [MH] 655.0

- 83 037513- 83 037513

EC18 EC18 0 <^/ΝΧν ° η—, „ y''_N^'_N HO—P/f 0 X___ζ / \ ОН 0 ОО ⁰ изомер 20 < ^{/ Ν} Χν ° η—, „y '' _N ^ ' _N HO — P / f 0 X ___ ζ / \ OH 0 OO ⁰ isomer 2 8,16 (с, 1H) 7,68 (д, J=7,8 Гц, 1H) 7,62 (д, J=8,l Гц, 1H) 7,52 (д, J=3,5 Гц, 1H) 7,26 (m, 1H) 7,19 (m, 1H) 6,61 (μ, 2H) 6,05 (д, J=8,3 Гц, 1H) 5,50 (m, 1H) 5,31 (m, 1H) 8.16 (s, 1H) 7.68 (d, J = 7.8 Hz, 1H) 7.62 (d, J = 8, l Hz, 1H) 7.52 (d, J = 3.5 Hz, 1H) 7.26 (m, 1H) 7.19 (m, 1H) 6.61 (μ, 2H) 6.05 (d, J = 8.3 Hz, 1H) 5.50 (m, 1H) 5.31 (m, 1H) 59, 5 -1,0 59, 5 -1.0 [M+H] ⁺ 657,0 [M-H] 655, 0[M + H] ⁺ 657.0 [MH] 655.0 EC19 EC19 О ° /~ η | +/''^ΝΗ2 НО~Р< 0 X ζ / к О О Y'O'^Y_o--p-oh Г II Ί ^{F3C 0} О ° / ~ η | + / '' ^ΝΗ 2 HO ~ P <0 X ζ / k O O Y'O '^ Y _o --p-oh Г II ^{Ί F3C 0} 8,06 (m, 1H) 7,99 (m, 1H) 7,97 (с, 1H) 7,84 (д, J=8,3 Гц, 1H) 7, 69 (д, J=7,2 Гц, 1H) 7,59 (μ, 2H) 7,32 (t, J=7,7 Гц, 1H) 6,02 (м, 2H) 5,52 (ддд, J=8,7, 8,7, 4,2 Гц, 1H) 5,08 (m, 1H) 8.06 (m, 1H) 7.99 (m, 1H) 7.97 (s, 1H) 7.84 (d, J = 8.3 Hz, 1H) 7.69 (d, J = 7.2 Hz, 1H) 7.59 (μ, 2H) 7.32 (t, J = 7.7 Hz, 1H) 6.02 (m, 2H) 5.52 (ddd, J = 8.7, 8.7, 4.2 Hz, 1H) 5.08 ( m, 1H) -1,0 -1,2 -1.0 -1.2 [M+H] ⁺ 734,0[M + H] ⁺ 734.0 EC20 EC20 О но5<°^оЛ ^{N NH2} О X___ζ Ζ \ он о Vo'^L_o^p<-_SH W ⁰ /+/_/^\</ изомер 1 wOn no5 <° ^ ° A ^{N NH2} O X ___ ζ Ζ \ he about _{Vo '^ L o ^ p <} - SH W ⁰ / + / _ / ^ \ </ isomer 1 w 9,12 (с, 1H) 8,29 (д, J=9,3 Гц, 1H) 8,12 (μ, 5H) 8,00 (с, 2H) 7,93 (t, J=7, 6 Гц, 1H) 6,18 (μ, 2H) 5,36 (м, 2H) 9.12 (s, 1H) 8.29 (d, J = 9.3 Hz, 1H) 8.12 (μ, 5H) 8.00 (s, 2H) 7.93 (t, J = 7.6 Hz, 1H) 6.18 (μ, 2H) 5.36 (m, 2H) 62,8 -0,7 62.8 -0.7 [M+H] ⁺ 742,1[M + H] ⁺ 742.1

- 84 037513- 84 037513

EC21 EC21 0 /А _H0W<J ^{Ν ΝΗ}= 0 1 г / \ ОН 0 Αο·^Α_ο—ρΑη χη ⁰ Il изомер 20 / A _H0 W <J ^{Ν ΝΗ} = 0 1 y / \ OH 0 Αο · ^ Α _ο —ρΑη χη ⁰ Il isomer 2 9,09 (с, 1H) 8,28 (д, J=9,3 Гц, 1H) 8,11 (м, 5H) 7,98 (с, 2H) 7,93 (t, J=7,6 Гц, 1H) 6,17 (дд, J=10,5, 5,3 Гц, 1H) 6,13 (д, J=8,0 Гц, 1H) 5,46 (m, 1H) 5,13 (m, 1H) 9.09 (s, 1H) 8.28 (d, J = 9.3 Hz, 1H) 8.11 (m, 5H) 7.98 (s, 2H) 7.93 (t, J = 7.6 Hz, 1H) 6.17 (dd, J = 10.5, 5.3Hz, 1H) 6.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H) 5.46 (m, 1H) 5.13 (m, 1H) 56, 5 -0, 8 56, 5 -0.8 [M+H] ⁺ 742,0[M + H] ⁺ 742.0 EC22 EC22 О < Аг _HO#°^o# ^{N NH}^ HO 0 X У / \ OH NH л.» 45 ,CO «° nh₂ O <Ar _HO # ° ^ o # ^{N NH} ^ HO 0 X Y / \ OH NH l. " 45, CO "° nh ₂ 8,21 (с, 1H) 8,14 (с, 1H) 7,82 (с, 1H) 6,19 (д, J=7,7 Гц, 1H) 6,00 (д, J=3,l Гц, 1H) 8.21 (s, 1H) 8.14 (s, 1H) 7.82 (s, 1H) 6.19 (d, J = 7.7 Hz, 1H) 6.00 (d, J = 3, l Hz, 1H) -o, 1 -o, 1 [M+H] ⁺ 689, 0[M + H] ⁺ 689, 0 EC23 EC23 0 <^/NAt ° ^0-, _n #/¼ ho-p< L·-⁰^ но ο v у Z \ oh nh m ΗΆ_ΝΑο H H \ ¥/> ^{0 N}#-N^Z nh₂ 0 < ^{/ N} At ° ^ 0-, _n # / ¼ ho-p <L · - ⁰ ^ but ο v y Z \ oh nh m ΗΆ _Ν Αο HH \ ¥ /> ^{0 N} # -N ^Z nh ₂ 8,15 (с, 1H) 7,91 (с, 1H) 7,44 (с, 1H) 6,17 (с, 1H) 5,88 (д, J=9, 0 Гц, 1H) 5,13 (μ, 2H) 8.15 (s, 1H) 7.91 (s, 1H) 7.44 (s, 1H) 6.17 (s, 1H) 5.88 (d, J = 9.0 Hz, 1H) 5.13 (μ, 2H) -1,24 -1.24 [M+H] ⁺ 672,9[M + H] ⁺ 672.9

- 85 037513- 85 037513

ЕС24 EC24 О е VS „₀1у- oj » но о х У _N LSX/oh i 11 (Т/> ° nh₂ O e VS " ₀ 1y- oj" no o x U _N LSX / oh i 11 (T /> ° nh ₂ 8,31 (с, 1H) 8,26 (с, 1H) 7,84 (с, 1H) 6,17 (с, 1H) 5,86 (д, 7=8,4 Гц, 1Н) 5,68 (м, 1Η) 5,08 (м, 1Η) 8.31 (s, 1H) 8.26 (s, 1H) 7.84 (s, 1H) 6.17 (s, 1H) 5.86 (d, 7 = 8.4 Hz, 1H) 5.68 (m, 1Η) 5.08 (m, 1Η) -1,0 -2,2 -1.0 -2.2 [М+Н] ⁺ 701,2 [М-Н] - 699, 0[M + H] ⁺ 701.2 [M-H] - 699.0 ЕС25 EC25 О но^о^оА ^{N NH2} НО О X Z ? S ОН /О Xo'^L_o_p-_OH ГX -> ⁰ \лO but ^ o ^ oA ^{N NH2} HO O XZ? S OH / O Xo '^ L _o _p- _OH GX -> ⁰ \ l 9,08 (с, 1Н) 8,38 (с, 1Н) 7,96 (с, 1Н) 7,90 (с, 1Н) 7,57 (с, 1Н) 6,28 (с, 1Н) 5, 95 (д, 7=8,5 Гц, 1Н) 5,64 (ддд, 7=8,3, 9.08 (s, 1H) 8.38 (s, 1H) 7.96 (s, 1H) 7.90 (s, 1H) 7.57 (s, 1H) 6.28 (s, 1H) 5.95 (d, 7 = 8.5 Hz, 1H) 5.64 (ddd, 7 = 8.3, -1,3 -2,0 -1.3 -2.0 [М-Н] - 697,1 [M-H] - 697.1 8,3, 4,2 Гц, 1Н) 5,08 (ддд, 7=8,8, 6,5, 4,3 Гц, 1Н) 8.3, 4.2 Hz, 1H) 5.08 (ddd, 7 = 8.8, 6.5, 4.3 Hz, 1H) ЕС26 EC26 О ^{n nh}* НО О X Z /° 1 о И_о—р-он _fa II ( ¥ / ^{3 0} /¥¥ UО ^{n nh} * NO О XZ / ° 1 о И _о -р-on _f a II (¥ / ^{3 0} / ¥¥ U 9,15 (с, 1Н) 8,40 (с, 1Н) 8,02 (с, 1Н) 7,90 (с, 1Н) 7,63 (с, 1Н) 6,32 (с, 1Н) 5, 98 (д, 7=8, 6 Гц, 1Н) 5,72 (ддд, 7=8,7, 8,7, 4,1 Гц, 1Н) 5,11 (ддд, 7=8,6, 6,8, 4,3 Гц, 1Н) 9.15 (s, 1H) 8.40 (s, 1H) 8.02 (s, 1H) 7.90 (s, 1H) 7.63 (s, 1H) 6.32 (s, 1H) 5.88 (d, 7 = 8.6 Hz, 1H) 5.72 (ddd, 7 = 8.7, 8.7, 4.1Hz, 1H) 5.11 (ddd, 7 = 8.6, 6.8, 4.3Hz, 1H) -1,3 -2,3 -1.3 -2.3 [М-Н] - 779, 0 [M-H] - 779, 0

* в NaH2PO₄/Na₂HPO₄/D2O, если не указано иначе.* in NaH2PO ₄ / Na ₂ HPO ₄ / D2O, unless otherwise indicated.

- 86 037513- 86 037513

Стереохимическая информация представленных соединений показана ниже.The stereochemical information of the presented compounds is shown below.

Таблица 5Table 5

Р-конфигурация примеров Е23 и ЕВ3P-configuration of examples E23 and EB3

Биологические испытанияBiological testing

Последовательно разбавленные растворы соединений, являющихся цГАМФ аналогами, в фосфатносолевом буферном растворе (PBS) смешивали с ТНР1 клетками с люциферазным репортером в 96луночном планшете при 0,2х10⁶/лунка в присутствии или отсутствии 1 нМ перфринголизина О (PFO), который может способствовать поглощению соединения образованием открытых каналов в плазматической мембране. Через 16 ч 15 мкл среды из каждой лунки переносили в новый планшет и измеряли люминесценцию. Кратное увеличение люминесценции по сравнению с клетками, стимулированными PBS, наносили на график относительно логарифма концентраций каждого соединения и ЕС₅₀ рассчитывали, применяя Graphpad.Serially diluted solutions of cGAMP analog compounds in phosphate buffered saline (PBS) were mixed with THP1 cells with a luciferase reporter in a 96 well plate at 0.2x10 ⁶ / well in the presence or absence of 1 nM perfringolysin O (PFO), which can promote compound uptake the formation of open channels in the plasma membrane. After 16 hours, 15 μl of medium from each well was transferred to a new plate and the luminescence was measured. The fold increase in luminescence compared to cells stimulated with PBS was plotted against the logarithm of the concentrations of each compound and the EC _{50 was} calculated using Graphpad.

- 87 037513- 87 037513

Таблица 6Table 6

Активность циклических динуклеотидов и аналоговActivity of cyclic dinucleotides and analogs

Пример Example ТНР1ISG-Luc с PFO, ЕС₅₀, нМTHP1ISG-Luc with PFO, EC ₅₀ , nM THP-ISG- Luc без PFO, ЕС₅₀, мкМTHP-ISG-Luc without PFO, EC ₅₀ , μM Е1 E1 А BUT А BUT Е2 E2 А BUT А BUT ЕЗ EZ А BUT А BUT Е4 E4 А BUT А BUT Е5 E5 С FROM С FROM Е6 E6 А BUT А BUT Е7 E7 А BUT А BUT Е8 E8 В IN С FROM Е9 E9 А BUT А BUT ЕЮ EY С FROM С FROM Е11 E11 В IN С FROM Е12 E12 А BUT А BUT Е13 E13 В IN С FROM Е14 E14 В IN С FROM Е15 E15 С FROM С FROM Е16 E16 А BUT А BUT Е17 E17 С FROM С FROM Е18 E18 А BUT А BUT Е19 E19 С FROM С FROM Е20 E20 В IN А BUT Е21 E21 В IN А BUT

Пример Example ТНР1ISG-Luc с PFO, ЕС₅₀, нМTHP1ISG-Luc with PFO, EC ₅₀ , nM THP-ISG- Luc без PFO, ЕС₅₀, мкМTHP-ISG-Luc without PFO, EC ₅₀ , μM ЕА10 EA10 А BUT А BUT ЕА11 EA11 А BUT А BUT ЕВ1 EB1 С FROM В IN ЕВ2 EB2 А BUT А BUT ЕВЗ EVZ А BUT А BUT ЕВ4 EB4 С FROM В IN ЕВ5 EB5 В IN С FROM ЕВ6 EB6 С FROM С FROM ЕВ7 EB7 С FROM С FROM ЕС1 EC1 А BUT А BUT ЕС2 EC2 В IN В IN ЕСЗ ESZ В IN А BUT ЕС4 EC4 С FROM С FROM ЕС5 EC5 В IN В IN ЕС6 EC6 С FROM С FROM ЕС7 EC7 С FROM С FROM ЕС8 EC8 С FROM С FROM ЕС9 EC9 С FROM С FROM ЕС10 EC10 С FROM С FROM ЕС11 EC11 А BUT С FROM ЕС12 EC12 А BUT А BUT

- 88 037513- 88 037513

Е22 E22 В IN А BUT Е23 E23 А BUT А BUT Е24 E24 В IN А BUT Е25 E25 А BUT А BUT ЕА1 EA1 В IN С FROM ЕА2 EA2 А BUT А BUT ЕАЗ EAZ С FROM С FROM ЕА4 EA4 В IN А BUT ЕА5 EA5 С FROM С FROM ЕА6 EA6 С FROM С FROM ЕА7 EA7 В IN А BUT ЕА8 EA8 В IN А BUT ЕА9 EA9 А BUT А BUT

ЕС13 EC13 В IN А BUT ЕС14 EC14 С FROM С FROM ЕС15 EC15 В IN А BUT ЕС16 EC16 С FROM С FROM ЕС17 EC17 С FROM С FROM ЕС18 EC18 С FROM С FROM ЕС19 EC19 С FROM С FROM ЕС20 EC20 С FROM С FROM ЕС21 EC21 С FROM С FROM ЕС22 EC22 С FROM С FROM ЕС23 EC23 С FROM С FROM ЕС24 EC24 А BUT А BUT ЕС26 EC26 В IN С FROM

Код активност и Activity code А <100 нМ A <100 nM А < 30 мкМ A <30 μM В 100- 1000 нМ 100- 1000 nM В 30-100 мкМ B 30-100 μM С >1000 нМ C> 1000 nM С >100 мкМ C> 100 μM

Код активност и Activity code А <100 нМ A <100 nM А < 30 мкМ A <30 μM В 100- 1000 нМ 100- 1000 nM В 30-100 мкМ B 30-100 μM С >1000 нМ C> 1000 nM С >100 мкМ C> 100 μM

2'3'-цГАМФ может разрушаться ферментом, эктонуклеотидпирофосфатаза/фосфодиэстераза (ENPP1), который присутствует в фетальной бычьей сыворотке (FBS) (Li et al., 2015, Nat. Chem. Biol., 11, 235). Для исследования того, обладают ли цГАМФ аналоги улучшенной растворимостью, 5 мкл синтети ческих аналогов цГАМФ (100 мкМ исходный раствор) выдерживали с 45 мкл FBS в конечном объеме 50 мкл при 37°С в течение 1, 2 и 4 ч. В указанные моменты времени 10 мкл реакционной смеси отбирали и смешивали с 10 мкл фосфатно-солевого буферного раствора (PBS), затем нагревали при 95°С, денатурируя белки, которые удаляли центрифугированием при 13000 g в течение 5 мин. Надосадочные жидкости добавляли к THP1-ISG-люциферазной клеточной линии в присутствии PFO, измеряя активность оставшихся аналогов цГАМФ, как описано выше. Категория А показывает меньше чем 10% снижение активности после 4-часового инкубирования, В показывает 10-75% снижение активности после 4-часового инкубирования, и С показывает более чем 75% потерю активности после 4-часвого инкубиро вания.2'3'-cGAMP can be degraded by an enzyme, ectonucleotide pyrophosphatase / phosphodiesterase (ENPP1), which is present in fetal bovine serum (FBS) (Li et al., 2015, Nat. Chem. Biol., 11, 235). To investigate whether cGAMP analogs have improved solubility, 5 μl of synthetic cGAMP analogs (100 μM stock) were incubated with 45 μl of FBS in a final volume of 50 μl at 37 ° C for 1, 2 and 4 hours. At the indicated times 10 μl of the reaction mixture was taken and mixed with 10 μl of phosphate buffered saline (PBS), then heated at 95 ° С, denaturing proteins, which were removed by centrifugation at 13000 g for 5 min. The supernatants were added to the THP1-ISG luciferase cell line in the presence of PFO, measuring the activity of the remaining cGAMP analogs as described above. Category A shows less than 10% decrease in activity after 4 hours of incubation, B shows 10-75% decrease in activity after 4 hours of incubation, and C shows more than 75% loss of activity after 4 hours of incubation.

- 89 037513- 89 037513

Таблица 7Table 7

Растворимость циклических динуклеотидов и аналогов в фетальной бычьей сывороткеSolubility of Cyclic Dinucleotides and Analogs in Fetal Bovine Serum

Следующая серия возможных примеров также представляет собой соединения настоящего изобретения:The following series of possible examples are also compounds of the present invention:

Таблица 8Table 8

Структуры Р1-Р15Structures P1-P15

gg. Plgg. Pl

- 90 037513- 90 037513

- 91 037513- 91 037513

Claims (23)

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯCLAIM 1. Соединение, где соединение имеет формулу Ic1. A compound where the compound has the formula Ic где Z¹² и Z¹⁵ представляют собой N;where Z ¹² and Z ¹⁵ represent N; Z¹³ и Z¹⁶ представляют собой СН;Z ¹³ and Z ¹⁶ are CH; Z¹⁴ и Z¹⁷ независимо представляют собой СН или N;Z ¹⁴ and Z ¹⁷ independently represent CH or N; R³ представляет собой н-пропил или 2,2,2-триФторэтил-О-;R ³ is n-propyl or 2,2,2-triFluoroethyl-O-; R⁴ представляет собой гидроксил;R ⁴ is hydroxyl; R⁹ и R¹⁰ независимо представляют собой гидроксил, тиол или борано (-ВН₃ ^-), или его фармацевтически приемлемая соль.R ⁹ and R ¹⁰ independently represent hydroxyl, thiol or borano (-BH ₃ ^- ), or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 2. Соединение по п.1, где R³ представляет собой н-пропил.2. A compound according to claim 1, wherein R ³ is n-propyl. 3. Соединение по п.1, где R³ представляет собой 2,2,2-трифторэтил-О-.3. A compound according to claim 1, wherein R ³ is 2,2,2-trifluoroethyl-O-. 4. Соединение по п.1, имеющее структуру:4. A compound according to claim 1 having the structure: - 92 037513- 92 037513 или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 5. Соединение по п.1, имеющее структуру: или его фармацевтически приемлемая соль.5. A compound according to claim 1 having the structure: or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 6. Соединение по п.1, имеющее структуру: или его фармацевтически приемлемая соль.6. A compound according to claim 1 having the structure: or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 7. Соединение по п.1, имеющее структуру: или его фармацевтически приемлемая соль.7. A compound according to claim 1 having the structure: or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 8. Соединение по п.1, имеющее структуру:8. A compound according to claim 1 having the structure: или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 9. Соединение по п.1, имеющее структуру:9. A compound according to claim 1 having the structure: - 93 037513- 93 037513 или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 10. Соединение, где соединение имеет формулу Ic где Z¹² и Z¹⁵ представляют собой N;10. The compound, where the compound has the formula Ic where Z ¹² and Z ¹⁵ are N; Z¹³ и Z¹⁶ представляют собой СН;Z ¹³ and Z ¹⁶ are CH; Z¹⁴ и Z¹⁷ независимо представляют собой СН или N;Z ¹⁴ and Z ¹⁷ independently represent CH or N; R³ представляет собой С₂алкил, функционализированный одной тиольной, амино, C₁.₆алкиламино, ди(C₁.₆алкил)амино или гидроксильной группой;R ³ is C ₂ alkyl functionalized with one thiol, amino, C ₁ . ₆ alkylamino, di (C _{1. 6} alkyl) amino or hydroxyl group; R⁴ представляет собой гидроксил;R ⁴ is hydroxyl; R⁹ и R¹⁰ независимо представляют собой гидроксил или тиол, или его фармацевтически приемлемая соль.R ⁹ and R ¹⁰ independently represent hydroxyl or thiol, or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 11. Соединение по п.10, где R³ представляет собой С₂алкил, функционализированный гидроксилом.11. A compound according to claim 10 wherein R ³ is C ₂ alkyl functionalized with hydroxyl. 12. Соединение по п.10, где R³ представляет собой С₂алкил, функционализированный тиолом.12. A compound according to claim 10, wherein R ³ is C ₂ alkyl functionalized with thiol. 13. Соединение по п.10, имеющее структуру:13. A compound according to claim 10 having the structure: или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 14. Соединение по п.10, имеющее структуру:14. A compound according to claim 10 having the structure: или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 15. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-14 или его фармацевтически приемлемую соль и один или несколько фармацев-15. A pharmaceutical composition containing a therapeutically effective amount of a compound according to any one of claims 1 to 14, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and one or more pharmaceutical - 94 037513 тически приемлемых носителей.- 94 037513 technically acceptable media. 16. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-14 в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным терапевтическим агентом и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей.16. A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound according to any one of claims 1 to 14 in combination with at least one additional therapeutic agent and one or more pharmaceutically acceptable carriers. 17. Применение соединения по любому из пп.1-14 для получения лекарственного средства для стимулирования или активации иммунного ответа у пациента, нуждающегося в этом.17. Use of a compound according to any one of claims 1 to 14 for the manufacture of a medicament for stimulating or activating an immune response in a patient in need thereof. 18. Применение соединения по любому из пп.1-14 для получения лекарственного средства для лечения рака у пациента, нуждающегося в этом.18. Use of a compound according to any one of claims 1 to 14 for the manufacture of a medicament for the treatment of cancer in a patient in need thereof. 19. Применение соединения по любому из пп.1-14 в комбинации с ингибитором иммунных контрольных точек для получения лекарственного средства для лечения рака у пациента, нуждающегося в этом.19. Use of a compound according to any one of claims 1 to 14 in combination with an immune checkpoint inhibitor for the preparation of a medicament for the treatment of cancer in a patient in need thereof. 20. Применение соединения по любому из пп.1-14 для получения лекарственного средства для лечения инфекционного заболевания у пациента, нуждающегося в этом.20. Use of a compound according to any one of claims 1 to 14 for the manufacture of a medicament for the treatment of an infectious disease in a patient in need thereof. 21. Применение соединения по любому из пп.1-14 для получения лекарственного средства для лечения иммунного расстройства у пациента, нуждающегося в этом.21. Use of a compound according to any one of claims 1 to 14 for the manufacture of a medicament for the treatment of an immune disorder in a patient in need thereof. 22. Иммуногенная композиция, содержащая антиген или антигенную композицию и соединение или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-14.22. An immunogenic composition comprising an antigen or antigenic composition and a compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of claims 1-14. 23. Применение иммуногенной композиции по п.22 для получения лекарственного средства для лечения заболевания у пациента, нуждающегося в этом.23. The use of an immunogenic composition according to claim 22 for the preparation of a medicament for the treatment of a disease in a patient in need thereof.