EA036965B1

EA036965B1 - Ингибиторы деацетилаз гистонов и композиции и способы их применения

Info

Publication number: EA036965B1
Application number: EA201792247A
Authority: EA
Inventors: Селиа Домингез; Майкл К. Мейллард; Алан Ф. Хоган; Аманда Ван Де Пёл; Эндрю Дж. Стотт; Кристофер А. Лакхерст; Элизабет А. Севилл-Стоунс; Грант Вишарт; Майкл Уолл; Перла Бречча; Ребекка Е. Джарвис
Original assignee: Сиэйчдиай Фаундэйшн, Инк.
Priority date: 2015-05-07
Filing date: 2016-05-06
Publication date: 2021-01-20
Also published as: AU2016258188A1; US10053434B2; IL255448B2; JP2018515489A; MX2017014300A; EP3291810A4; JP6805172B2; IL255448A0; IL255448B1; HK1252487A1; EP3291810B1; BR112017023711A2; US20190202795A1; CA2984618A1; US20160326124A1; KR20180002729A; EP3291810A1; CN107735088A; EA201792247A1; CA2984618C

Abstract

В изобретении предложены определенные ингибиторы деацетилаз гистонов (HDAC) формулы I, содержащие их композиции и способы их применения.

Description

Область изобретения

В настоящем изобретении предложены определенные ингибиторы деацетилаз гистонов (HDAC), содержащие их композиции и способы их применения.

Уровень техники

Деацетилазы гистонов (HDAC) представляют собой цинксодержащие ферменты, катализирующие удаление ацетильных групп из s-amino концов остатков лизина, кластеризующихся возле аминоконцов нуклеосомальных гистонов. Известно 11 металл-зависимых деацетилаз гистонов человека, разделенных на четыре класса на основании структуры их вспомогательных доменов. Класс I включает HDAC1, HDAC2, HDAC3 и HDAC8, и указанные деацетилазы гистонов гомологичны белку дрожжей RPD3. HDAC4, HDAC5, HDAC7 и HDAC9 относятся к классу IIa и гомологичны HDAC1 дрожжей. HDAC6 и HDAC10 содержат два каталитических сайта и относятся к классу IIb, тогда как HDAC11 в каталитическом центре содержит консервативные остатки, которые присущи как деацетилазам класса I, так и класса II, и иногда их относят к классу IV.

Краткое описание

Предложено соединение формулы I о

Формула I или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь его оптических изомеров; где W представляет собой CR⁵;

X представляет собой N или CR⁶;

Y представляет собой CR⁷ и

Z представляет собой CR⁸;

R¹ выбран из H и C1-C₃ алкила;

R² представляет собой С₂-С₃ алкилен, незамещенный или замещенный С1-С2 галогеналкилом или 3или 4-членным циклоалкилом;

R³ и R⁴, совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-, 5-, 6- или 7-членный моноциклический гетероциклоалкил, имеющий 1-4 гетероатома, выбранных из N, O и S, и не имеющий заместителей или имеющий от 1 до 5 заместителей, независимо выбранных из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероциклоалкила, имеющего 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S, карбокси, C_6-12 арила, циано, галогена и 5-12-членного гетероарила, имеющего 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S, где C_6-12 арил и 5-12-членный гетероарил не содержат заместителей или дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, независимо выбранных из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена; или

6-, 7-, 8-, 9- или 10-членную гетеробициклическую группу, выбранную из

-азаспиро [3.3]гептан-1 -ила,

3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ила,

-азабицикло [3.2.0] гептан-3-ила,

3-азабицикло[3.2.1]гептан-3-ила,

3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ила,

3,4-дигидроизохинолин-2( 1 Н)-ила,

5-азаспиро[2.4]гептан-5-ила,

5-азаспиро [2.5]октан-5 -ила,

6-азаспиро [2.5]октан-6-ила,

-азаспиро [3.3]гептан-1 -ила,

6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ила, изоиндолин-2-ила и октагидроциклопента[с]пиррол-2-ила, каждая из которых не содержит заместителей или содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероциклоалкила, имеющего 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S, карбокси, C_6-12 арила, циано, галогена и 512-членного гетероарила, имеющего 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S, где C_6-12 арил и 5-12членный гетероарил не содержат или дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый

- 1 036965 из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена, каждый из R⁵, R⁶, R⁷ и

R⁸ независимо выбран из Н, С₁-С₄ алкила, С₁-С₄ галогеналкила и галогена;

при условии, что если R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5или 6-членный моноциклический гетероциклоалкил, тогда R² представляет собой С₂-С₃ алкилен, замещенный C1-C₂ галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом.

Также предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, и фармацевтически приемлемый носитель.

Также предложен способ получения фармацевтической композиции, включающий смешивание соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, и фармацевтически приемлемого носителя. Также предложен способ лечения состояния или нарушения, опосредованного по меньшей мере одной деацетилазой гистонов, у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Подробное описание изобретения

Предполагается, что следующие слова, фразы и обозначения, используемые в настоящем описании, в общем случае имеют значения, представленные ниже, за исключением случаев, когда в контексте, в котором они использованы, указано иное. Тире (-), не находящееся между двумя буквами или обозначениями, используется для обозначения точки прикрепления заместителя. Например, -CONH2 присоединяется через атом углерода.

Под терминами необязательный или необязательно подразумевается, что описанное далее событие или обстоятельство может произойти или не происходить, и что указанное описание включает примеры, при которых событие или обстоятельство происходит, и примеры, при которых оно не происходит. Например, необязательно замещенный алкил включает как алкил, так и замещенный алкил, как определено ниже. Специалисту в области техники будет понятно, что в отношении любой группы, содержащей один или более заместителей, не предполагается, что такие группы не предназначены для введения любого замещения или замещения фрагментов, которые являются пространственно затрудненными, синтетически невозможными и/или нестабильными сами по себе.

Алкил охватывает прямую цепь и разветвленную цепь, содержащую указанное количество атомов углерода, обычно от 1 до 20 атомов углерода, например от 1 до 8 атомов углерода, как например, от 1 до 6 атомов углерода. Например, C1-C6 алкил охватывает алкил как с прямой, так и с разветвленной цепью, содержащей от 1 до 6 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, 2-пентил, изопентил, неопентил, гексил, 2-гексил, 3гексил, 3-метилпентил и тому подобные. Алкилен представляет собой другую разновидность алкила, относящуюся к тем же остаткам, что и алкил, но содержащую две точки прикрепления. Алкиленовые группы обычно содержат от 2 до 20 атомов углерода, например от 2 до 8 атомов углерода, как например, от 2 до 6 атомов углерода. Например, С₀ алкилен означает ковалентную связь и C1 алкилен представляет собой метиленовую группу. В случае если обозначен алкильный остаток, содержащий конкретное количество атомов углерода, предполагается, что он включает все геометрические изомеры, содержащие указанное количество атомов углерода; так, например, бутил включает н-бутил, втор-бутил, изобутилитбутил; пропил включает н-пропил и изопропил.

Термин алкилен охватывает бирадикал с прямой и разветвленной цепью, содержащий указанное количество атомов углерода, обычно от 1 до 20 атомов углерода, например, от 1 до 8 атомов углерода, как например, от 1 до 6 атомов углерода или от 1 до 4 атомов углерода. Примеры С1-С4 алкилена включают метилен, 1,1-этилен, 1,2-этилен, 1,1-пропилен, 1,2-пропилен, 1,3-пропилен, 1,1-бутилен, 1,2бутилен, 1,3-бутилен, 1,4-бутилен, 2-метил-1,2-пропилен и 2-метил-1,3-пропилен. Под алкокси понимают алкильную группу, содержащую указанное количество атомов углерода, присоединенную через кислородный мостик, как например, метокси, этокси, пропокси, изопропокси, н-бутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, пентокси, 2-пентилокси, изопентокси, неопентокси, гексокси, 2-гексокси, 3-гексокси, 3метилпентокси и тому подобные. Алкоксигруппы обычно содержат от 1 до 6 атомов углерода, присоединенных через кислородный мостик.

Арил означает ароматическое углеродное кольцо, содержащее указанное количество атомов углерода, например от 6 до 12 или от 6 до 10 атомов углерода. Арильные группы могут быть моноциклическими или полициклическими (например, бициклическими, трициклическими). В некоторых случаях оба кольца полициклической арильной группы являются ароматическими (например, нафтил). В других случаях полициклические арильные группы могут включать неароматическое кольцо (например, циклоалкил, циклоалкенил, гетероцилоалкил, гетероциклоалкенил), сконденсированное с ароматическим кольцом, при условии, что указанная полициклическая арильная группа связана с основной структурой посредством атома в ароматическом кольце. Так, 1,2,3,4-тетрагидронафтален-5-ильная группа (где указанный фрагмент связан с основной структурой посредством ароматического атома углерода) рассматривается как арильная группа, тогда как 1,2,3,4-тетрагидронафтален-1-ил (где указанный фрагмент связан с основной структурой посредством неароматического атома углерода) не рассматривается как арильная группа. Аналогичным образом 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-8-ильная группа (где указанный фрагмент свя- 2 036965 зан с основной структурой посредством ароматического атома углерода) рассматривается как арильная группа, тогда как 1,2,3,4-тетрагидрохиноли-1-ильная группа (где указанный фрагмент связан с основной структурой посредством неароматического атома азота) не рассматривается как арильная группа. Однако, термин арил не охватывает или не перекрывается с термином гетероарил, описанным в настоящей заявке, независимо отточки присоединения (например, как хинолин-5-ил, так и хинолин-2-ил представляют собой гетероарильные группы). В некоторых случаях арил представляет собой фенил или нафтил. В конкретных случаях арил представляет собой фенил.

Бивалентные радикалы, образованные замещенными производными бензола и содержащие свободные валентности у атомов кольца, называются замещенными фениленовыми радикалами. Бивалентные радикалы, образованные из одновалентных полициклических углеводородных радикалов, названия которых заканчиваются на -ил, путем удаления одного атома водорода от атома углерода со свободной валентностью, называют путем добавления -иден к названию соответствующего одновалентного радикала, например нафтильная группа с двумя точками присоединения называется нафтилиденом. Карбокси обозначает -С(О)ОН. Циано относится к -CN.

Циклоалкил означает неароматическое, полностью насыщенное карбоциклическое кольцо, содержащее указанное количество атомов углерода, например от 3 до 10 или от 3 до 8, или от 3 до 6 атомов углерода в кольце. Циклоалкильные группы могут быть моноциклическими или полициклическими (например, бициклическими, трицикличскими). Примеры циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклопентенил и циклогексил, также как и мостиковые, спироциклические и каркасные кольцевые группы (например, норборнан, бицикло[2.2.2]октан). Кроме того, одно кольцо полициклической циклоалкильной группы может быть ароматическим, при условии, что указанная полициклическая циклоалкильная группа связана с основной структурой посредством неароматического атома углерода. Так, 1,2,3,4-тетрагидронафтален-1-ильная группа (где указанный фрагмент связан с основной структурой посредством неароматического атома углерода) представляет собой циклоалкильную группу, тогда как 1,2,3,4-тетрагидронафтален-5-ил (где указанный фрагмент связан с основной структурой посредством ароматического атома углерода) не рассматривается как циклоалкильная группа, т.е. рассматривается как арильная группа. Термин циклоалкокси относится к -O-циклоалкилу, причем циклоалкил является таким, как описано в настоящей заявке.

Термин галоген (halo) включает фтор-, хлор-, бром- и йод-, а термин галоген (haloen) включает фтор, хлор, бром и йод.

Термин галогеналкил означает C_1-6 алкильную группу, где указанный алкил содержит в качестве заместителя от одного галогена до полного замещения, и полностью замещенный C_1-6 галогеналкил может быть представлен формулой C_nL_2n+1, где L представляет собой галоген и n равен 1, 2, 3 или 4; когда присутствует более одного галогена, указанные атомы галогена могут быть одинаковыми или разными и выбраны из группы, состоящей из F, Cl, Br и I, как например, F. Примеры C_1-4 галогеналкильных групп включают, но не ограничиваются указанными, фторметил, дифторметил, трифторметил, хлордифторметил, 2,2,2-трифторэтил, пентафторэтил и тому подобные.

Термин галогеналкокси означает галогеналкил, непосредственно соединенный с атомом кислорода. Примеры включают, но не ограничиваются указанными, дифторметокси, трифторметокси, 2,2,2трифтопентокси, пентафторэтокси и тому подобные.

Гетероарил обозначает ароматическое кольцо, содержащее указанное количество атомов (например, от 5- до 12- или от 5- до 10-членный гетероарил), состоящее из одного или более гетероатомов (например, 1, 2, 3 или 4 гетероатома), выбранных из N, О и S, и остальные атомы кольца представляют собой углерод. Гетероарильные группы не содержат смежных атомов S и О. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения общее число атомов S и О в гетероарильной группе не превышает 2. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения общее число атомов S и О в гетероарильной группе не превышает 1. Если не указано иное, гетероарильные группы могут быть связаны с основной структурой посредством атома углерода или азота, в зависимости от валентности. Например, пиридил включает 2-пиридильную, 3-пиридильную и 4-пиридильную группы, и пирролил включает 1-пирролильную, 2-пирролильную и 3-пирролильную группы. Когда в гетероарильном кольце присутствует атом азота, если позволяет природа соседних атомов и групп, он может присутствовать в окисленном состоянии (т.е. N⁺-O^-). Кроме того, когда в гетероарильном кольце присутствует атом серы, если позволяет природа соседних атомов и групп, он может присутствовать в окисленном состоянии (т.е. S⁺-O^-или SO2). Гетероарильные группы могут быть моноциклическими или полициклическими (например, бициклическими, трициклическими). В некоторых случаях гетероарильная группа является моноциклической. Примеры включают пиррол, пиразол, имидазол, триазол (например, 1,2,3-триазол, 1,2,4-триазол), тетразол, фуран, изоксазол, оксазол, оксадиазол (например, 1,2,3-оксадиазол, 1,2,4-оксадиазол, 1,3,4-оксадиазол), тиофен, изотиазол, тиазол, тиадиазол (например, 1,2,3-тиадиазол, 1,2,4-тиадиазол, 1,3,4-тиадиазол), пиридин, пиридазин, пиримидин, пиразин, триазин (например, 1,2,4-триазин, 1,3,5-триазин) и тетразин.

В некоторых случаях оба кольца полициклической гетероарильной группы являются ароматическими. Примеры включают индол, изоиндол, индазол, бензимидазол, бензотриазол, бензофуран, бензоксазол, бензизоксазол, бензоксадиазол, бензотиофен, бензотиазол, бензоизотиазол, бензотиадиазол, 1H

- 3 036965 пирроло[2,3-Ь]пиридин, 1Н-пиразоло[3,4-Ь]пиридин, 3Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин, 3Н-[1,2,3]триазоло[4,5Ь]пиридин, 1Н-пирроло[3,2-Ь]пиридин, 1Н-пиразоло[4,3-Ь]пиридин, 1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин, 1H[1,2,3]триазоло[4,5-Ь]пиридин, 1Н-пирроло[2,3-с]пиридин, 1Н-пиразоло[3,4-с]пиридин, 3Н-имидазо[4,5с]пиридин, 3Н-[1,2,3]триазоло[4,5-с]пиридин, 1Н-пирроло[3,2-с]пиридин, 1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин, 1Н-имидазо[4,5-с]пиридин, 1Н-[1,2,3]триазоло[4,5-с]пиридин, фуро[2,3-Ь]пиридин, оксазоло[5,4Ь]пиридин, изксазоло[5,4-Ь]пиридин, [1,2,3]оксадиазоло[5,4-Ь]пиридин, фуро[3,2-Ь]пиридин, оксазоло[4,5-Ь]пиридин, изоксазоло[4,5-Ь]пиридин, [1,2,3]оксадиазоло[4,5-Ь]пиридин, фуро[2,3-с]пиридин, оксазоло[5,4-с]пиридин, изоксазоло[5,4-с]пиридин, [1,2,3]оксадиазоло[5,4-с]пиридин, фуро[3,2-с]пиридин, оксазоло[4,5-с]пиридин, изоксазоло[4,5-с]пиридин, [1,2,3]оксадиазоло[4,5-с]пиридин, тиено[2,3-Ь]пиридин, тиазоло[5,4-Ь]пиридин, изотиазоло[5,4-Ь]пиридин, [1,2,3]тиадиазоло[5,4-Ь]пиридин, тиено[3,2Ь]пиридин, тиазоло[4,5-Ь]пиридин, изотиазоло[4,5-Ь]пиридин, [1,2,3]тиадиазоло[4,5-Ь]пиридин, тиено[2,3-с]пиридин, тиазоло[5,4-с]пиридин, изотиазоло[5,4-с]пиридин, [1,2,3]тиадиазоло[5,4-с]пиридин, тиено[3,2-с]пиридин, тиазоло[4,5-с]пиридин, изотиазоло[4,5-с]пиридин, [1,2,3]тиадиазоло[4,5-с]пиридин, хинолин, изохинолин, циннолин, хиназолин, квиноксалин, фталазин, нафтиридин (т.е. 1,8-нафтиридин, 1,7-нафтиридин, 1,6-нафтиридин, 1,5-нафтиридин, 2,7-нафтиридин, 2,6-нафтиридин), имидазо[1,2а]пиридин, 1Н-пиразоло[3,4-d]тиазол, 1Н-пиразоло[4,3-d]тиазол и имuдазо[2,1-b]тиазол.

В других случаях полициклические гетероарильные группы могут включать неароматическое кольцо (например, циклоалкил, циклоалкенил, гетероцилоалкил, гетероциклоалкенил), сконденсированное с гетероарильным кольцом, при условии, что полициклическая гетероарильная группа присоединена к основной структуре посредством атома в ароматическом кольце. Например, 4,5,6,7тетрагuдробензо[d]тиазол-2-ильнαя группа (где указанный фрагмент связан с основной структурой посредством ароматического атома углерода) рассматривается как гетероарильная группа, тогда как 4,5,6,7тетрагuдробензо[d]тиазол-5-ил (где указанный фрагмент связан с основной структурой посредством неароматического атома углерода) не рассматривается как гетероарильная группа. Гетероциклоалкил означает неароматическое полностью насыщенное кольцо, содержащее указанное количество атомов (например, от 3 до 10 или от 3 до 7-членный гетероцилоалкил), состоящее из одного или более гетероатомов (например, 1, 2, 3 или 4 гетероатома), выбранных из N, О и S и остальные атомы кольца представляют собой углерод. Гетероцилоалкильные группы могут быть моноциклическими (т.е. гетеромоноциклическими) или полициклическими (например, бициклическими (т.е. гетеробициклическими), включая спироциклические и мостиковые кольцевые системы). Таким образом, определение гетеробициклический охватывает гетеромоноциклическое кольцо, 1,1-двузамещенное циклоалкильной или гетеромоноциклической группой, а также кольцевую систему, где гетеромоноциклическое кольцо является 1,2- или 1,3-сконденсированным с другим циклоалкильным или гетеромоноциклическим кольцом (где атом углерода или азота может образовывать кольцевое соединение (в случае, если такая структура возможна с химической точки зрения)), а также кольцевую систему, где гетеромоноциклическое кольцо содержит С1-С₂ алкильный мостик, а также кольцевую систему, где гетеромоноциклическое кольцо является 1,2сконденсированным с ароматическим или гетероароматическим кольцом, при условии, что указанный фрагмент связан с основной структурой посредством неароматического атома углерода или азота. Примеры моноциклических гетероцилоалкильных (т.е. гетеромоноциклических) групп включают оксиранил, азиридинил, азетидинил, оксетанил, пирролидинил, имидазолидинил, пиразолидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил и тиоморфолинил.

Примеры C₆ гетеробициклической группы включают 3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил.

Примеры C₈-Cio гетеробициклической группы, содержащей ароматическое кольцо, включают индолин-1-ил, изоиндолин-2-ил, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-2-ил, 3,4-дигидрохинолин-1(2Н)-ил и 7,8дигидро -1,6 -нафтиридин-6 (5Н)-ил.

Примеры гетеробициклических кольцевых систем, содержащих спироцикл, включают 1-окса-5азаспиро[3.3]гептан-5-ил, 1-окса-6-азаспиро[3.3]гептан-6-ил, 6-окса-1-азаспиро[3.3]гептан-1-ил, 2-окса-6азаспиро[3.3]гептан-6-ил, 1,5-диазаспиро[3.3]гептан-1-ил, 1,6-диазаспиро[3.3]гептан-6-ил, 1,6диазаспиро[3.3]гептан-1-ил, 2,6-диазаспиро[3.3]гептан-2-ил, 1-окса-5-азаспиро[3.4]октан-5-ил, 1-окса-6азаспиро[3.4]октан-6-ил, 2-окса-5-азаспиро[3.4]октан-5-ил, 2-окса-6-азаспиро[3.4]октан-6-ил, 1,5диазаспиро[3.4]октан-5-ил, 1,6-диазаспиро[3.4]октан-6-ил, 2,5-диазаспиро[3.4]октан-5-ил, 2,6диазаспиро [3.4] октан-6-ил, 1 -окса-5 -азаспиро [3.5]нонан-5 -ил, 1 -окса-6-азаспиро [3.5] нонан-6-ил, 1 -окса7-азаспиро[3.5]нонан-7-ил, 2-окса-5-азаспиро[3.5]нонан-5-ил, 2-окса-6-азаспиро[3.5]нонан-6-ил, 2-окса-7азаспиро[3.5]нонан-7-ил, 1,5-диазаспиро[3.5]нонан-5-ил, 1,6-диазаспиро[3.5]нонан-6-ил, 1,7диазаспиро[3.5]нонан-7-ил, 2,5-диазаспиро[3.5]нонан-5-ил, 2,6-диазаспиро[3.5]нонан-6-ил, 2,7диазаспиро[3.5]нонан-7-ил, 1-окса-5-азаспиро[3.6]декан-5-ил, 1-окса-6-азаспиро[3.6]декан-6-ил, 1-окса-7азаспиро[3.6]декан-7-ил, 2-окса-5-азаспиро[3.6]декан-5-ил, 2-окса-6-азаспиро[3.6]декан-6-ил, 2-окса-7азаспиро[3.6]декан-7-ил, 1,5-диазаспиро[3.6]декан-5-ил, 1,6-диазаспиро[3.6]декан-6-ил, 1,7диазаспиро[3.6]декан-7-ил, 2,5-диазаспиро[3.6]декан-5-ил, 2,6-диазаспиро[3.6]декан-6-ил, 2,7диазаспиро[3.6]декан-7-ил.

Примеры гетеробициклических кольцевых систем, содержащих С1-С4 мостиковый-алкилен, включают 2-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил, 2-азабицикло[3.2.1]октан-2-ил, 3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил и 6- 4 036965 азабицикло[3.2.1]октан-6-ил.

Если в гетероцилоалкильном кольце присутствует атом азота, если позволяет природа соседних атомов и групп, он может присутствовать в окисленном состоянии (т.е. N+-O^-). Примеры включают пиперидинил N-оксид и морфолинил-N-оксид. Кроме того, если в гетероцилоалкильном кольце присутствует атом серы, если позволяет природа соседних атомов и групп, он может присутствовать в окисленном состоянии (т.е. S+-O^- или -SO₂-). Примеры включают тиоморфолин S-оксид и тиоморфолин S,Sдиоксид.

Оксо относится к (=O) или (О). Нитро относится к -NO2.

Термин замещенный, используемый в настоящей заявке, означает, что любой один или более атомов водорода на указанном атоме или группе замещен на соответствующий атом или группу, выбранную из указанной группы, при условии, что общепринятая валентность соответствующего атома не превышена. В случае, когда заместителем является оксо (т.е. =O), тогда замещаются два атома водорода на указанном атоме. Комбинации заместителей и/или переменных допустимы только тогда, когда такие комбинации приводят к получению стабильных соединений или синтетически подходящих промежуточных соединений. Под стабильными соединениями или стабильными структурами подразумевают, что соединения являются достаточно устойчивыми, для того чтобы выдержать выделение из реакционной смеси и последующую разработку в качестве агента, имеющего, по меньшей мере, практическую применимость. Если не указано иное, заместители указываются в основной структуре. Например, следует понимать, что, когда (циклоалкил)алкил указан в качестве возможного заместителя, точка присоединения данного заместителя к основной структуре находится в алкильном фрагменте.

Термины замещенный алкил (включая, но не ограничиваясь указанным, С1-С4 алкил), циклоалкил, арил, гетероциклоалкил и гетероарил, если явным образом не указано иное, относятся соответственно к алкилу, циклоалкилу, арилу, гетероцилоалкилу и гетероарилу, причем один или более (как например, до 5, например до 3) атомов водорода замещены заместителем, независимо выбранным из -R^a, -OR^b, -O(C1-C2 алкил)О-(например, метилендиокси-), -SR^b, гуанидина (-NHC(=NH)NH2), гуанидина, где один или более атомов водорода гуанидина замещены на С1-С₄алкильную группу, -NR^bR^c, галоген, циано, оксо (в качестве заместителя для гетероцилоалкила), нитро, -COR^b, -CO2R^b, -CONR^bR^c, -OCOR^b, -OCO2R^a, -OCONRbRc, -NR^cCOR^b, -NR^cCO2R^a, -NR^cCONR^bR^c, -SOR^a, -SO2R^a, -SO2NR^bR^c и -NR^cSO2R^a, где R^a выбран из С1-С6алкила, циклоалкила, арила, гетероцилоалкила и гетероарила; R^b выбран из Н, C1-C6 алкила, арила и гетероарила; и R^c выбран из водорода и С₁-С₄ алкила; или

R^b и R^c и атом азота, к которому они присоединены, образуют гетероцилоалкильную группу; и где каждый из C1-C6 алкила, циклоалкила, арила, гетероцилоалкила и гетероарила необязательно содержит один или более заместителей, как например, один, два или три заместителя, независимо выбранных из С1-С₄ алкила, C₃-C₆ циклоалкила, арила, гетероарила, арил-С1-С₄алкила-, гетероарил-C₁-C₄алкила-, С1-С₄ галогеналкила-, -ОС1-С4 алкила, -ОС1-С4 алкилфенила, -С1-С₄ алкил-ОН, -С1-С₄ алкил-OC₁-C₄-алкила, -ОС1-С4 галогеналкила, галогена, -ОН, -NH2, -С1-С₄ алкил-NH₂, -N(C1-C₄ алкил)(C₁-C₄ алкил), -NH(C1-C₄ алкил), -N(C1-C₄ алкил)(C₁-C₄ алкилфенил), -NH(C1-C₄ алкилфенил), циано, нитро, оксо (в качестве заместителя для гетероарила), -СО₂Н, -C(O)OC1-C₄ алкила, -CON(C1-C₄ алкил)(C₁-C₄ алкил), -CONH(C1-C₄ алкил), -CONH2, -NHC(O)(C₁-C₄ алкил), -NHC(О)(фенил), -N(C1-C₄ алкил)С(О)(CC₁-C₄ алкил), -N(C1-C₄ алкил)С(О)(фенил), -C(O)C1-C₄ алкила, -C(O)C1-C₄ фенила, -C(O)C1-C₄ галогеналкила, -OC(O)C1-C₄ алкила, -SO₂(C1-C₄ алкил), -SO₂(фенил), -SO₂(C1-C₄ галогеналкил), -SO2NH2, -SO₂NH(C1С₄алкил), -SO₂NH(фенил), -NHSO₂(C1-C₄ алкил), -NHSO₂(фенил), и -NHSO₂(С₁-С₄гαлогеналкил). Соединения, описанные в настоящей заявке, включают, но не ограничиваются указанными, их оптические изомеры, рацематы и другие смеси. В таких случаях отдельные энантиомеры или диастереомеры, т.е. оптически активные формы, могут быть получены путем асимметрического синтеза или путем разделения рацематов. Разделение рацематов может осуществляться, например, обычными способами, такими как кристаллизация в присутствии разделяющего агента, или хроматография с использованием, например, хиральной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) или колонки для сверхкритической жидкостной хроматографии (СЖХ). Кроме того, такие соединения включают Z- и E-формы (или цис- и транс-формы) соединений с углерод-углерод двойными связями. В случае, если соединения, описанные в настоящей заявке, существуют в различных таутомерных формах, предполагается, что термин соединение включает все таутомерные формы указанного соединения. Такие соединения также включают кристаллические формы, включая полиморфы и клатраты. Аналогичным образом, предполагается, что термин соль включает все таутомерные формы и кристаллические формы указанного соединения.

В случае, когда конфигурация отдельного диастереомера неизвестна, указанная конфигурация обозначена как, например, D1 (диастереомер 1) и D2 (диастереомер 2) и неизвестный хиральный центр (центры) отмечены звездочкой. Например, D1 N-((R)-1-((abs)-3-(дифторметокси)πиπеридин-1-ил)проπан-2ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид и D2 N-((R)-1-((abs)-3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид представляют собой отдельные диастереомеры, для которых конфигурация у одного хирального центра точно известна (с соответствующим изображением конфигурации), а конфигурация у второго хирального центра является абсолютной, но неопределенной (изображена как связь со звездочкой), т.е. противоположная конфи

- 5 036965 гурация при неопределенном центре у D1 по сравнению с D2. В случае, когда для одного соединения с тремя хиральными центрами выделен единственный изомер, причем один стереоцентр известен, а абсолютная конфигурация двух других центров не определена, однако известно, что относительная конфигурация представляет собой цис-конфигурацию, например гомохиральная азабициклогептанильная кольцевая система, в изображении указанного соединения неопределенный(е) хиральный(е) центр(ы) обозначены звездочкой, и дано соответствующее название, т.е. D1: N-((R)-1-((abs-1,5-цис)-6азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид; и D2: N-((R)-1-((abs-1,5-цис)-6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамид.

Фармацевтически приемлемые соли включают, но не ограничиваются солями неорганических кислот, такие как гидрохлорид, фосфат, дифосфат, гидробромид, сульфат, сульфинат, нитрат и подобные соли; также как и соли органических кислот, таких как малат, малеат, фумарат, тартрат, сукцинат, цитрат, ацетат, лактат, метансульфонат, п-толуолсульфонат, 2-гидроксиэтилсульфонат, бензоат, салицилат, стеарат и алканоат, такой как ацетат, HOOC-(CH₂)q-COOH, где q представляет собой 0-4, и подобные соли. Аналогично, фармацевтически приемлемые катионы включают, но не ограничиваются такими как натрий, калий, кальций, алюминий, литий и аммоний. Кроме того, если соединения, описанные в настоящей заявке, получают в виде соли присоединения кислоты, то свободное основание может быть получено путем подщелачивания раствора соли кислоты. Напротив, если продукт представляет собой свободное основание, соль присоединения, в частности фармацевтически приемлемая соль присоединения, может быть получена путем растворения свободного основания в подходящем органическом растворителе и обработкой раствора кислотой, в соответствии с традиционными методиками для получения солей присоединения кислоты из основных соединений. Специалистам в данной области техники известны различные синтетические методологии, которые могут быть использованы для получения нетоксичных свободных оснований или нетоксичных фармацевтически приемлемых солей присоединения. Используемые в настоящей заявке термины группа, радикал или фрагмент являются синонимами и предназначены для обозначения функциональных групп или фрагментов молекул, присоединяемых к связи или другим фрагментам молекул.

Термин активный агент используется для обозначения соединения или его фармацевтически приемлемой соли, обладающих биологической активностью. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения активный агент представляет собой соединение или его фармацевтически приемлемую соль, обладающие фармацевтической полезностью. Например, активный агент может представлять собой противо-нейродегенеративное лекарственное средство. Термин терапевтически эффективное количество означает количество, эффективное при введении человеку или пациенту, не являющемуся человеком, для обеспечения терапевтического действия, такого как снижение интенсивности симптомов, замедление течения заболевания или предотвращение заболевания, например, терапевтически эффективное количество может представлять собой количество, достаточное для снижения симптомов заболевания, реагирующего на ингибирование активности HDAC.

Предполагается, что используемые в настоящей заявке термины деацетилаза гистонов и HDAC относятся к любому из семейства ферментов, которые удаляют №-ацетильные группы из s-амино групп лизиновых остатков белка (например, гистона или тубулина). Если в контексте не указано иное, предполагается, что термин гистон относится к любому гистоновому белку, включая Н1, Н2А, Н2В, Н3, Н4 и Н5, из любого биологического вида. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения деацетилаза гистонов представляет собой HDAC человека, включая, но не ограничиваясь указанными, HDAC-4, HDAC-5, HDAC-6, HDAC-7, HDAC-9 и HDAC-10. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения по меньшей мере одна деацетилаза гистонов выбрана из HDAC-4, HDAC-5, HDAC-7 и HDAC-9. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения деацетилаза гистонов представляет собой HDAC класса IIa. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанная деацетилаза гистонов представляет собой HDAC-4. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанная деацетилаза гистонов представляет собой HDAC-5. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанная деацетилаза гистонов получена из простейших или грибов.

Предполагается, что термины ингибитор деацетилазы гистонов и ингибитор гистоновых деацетилаз означают соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, которое способно взаимодействовать с деацетилазой гистонов и ингибировать ее ферментативную активность. Термин состояние или нарушение, опосредованное HDAC или состояние или нарушение, опосредованное деацетилазой гистонов, используемый в настоящей заявке, относится к состоянию или нарушению, при котором HDAC и/или действие HDAC является важным или необходимым, например, для возникновения, прогрессирования, проявления и т.п. указанного состояния или состояния, которое, как известно, лечат ингибиторами HDAC (такими как, например, трихостатин А). Термин эффект описывает изменение или отсутствие изменения в клеточном фенотипе или клеточной пролиферации. Эффект также может описывать изменение или отсутствие изменения в каталитической активности HDAC. Эффект также может описывать изменение или отсутствие изменения во взаимодействии между HDAC и природным связывающимся партнером. Предполагается, что термин ингибирование ферментной ак

- 6 036965 тивности деацетилазы гистонов или ингибирование деацетилазы гистонов означает снижение способности деацетилазы гистонов к удалению ацетильной группы из белка, например, но не ограничиваясь указанными, гистона или тубулина. Концентрация ингибитора, который снижает активность деацетилазы гистонов до 50% концентрации неингибированного фермента, определяется как значение IC₅₀. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения такое снижение активности деацетилазы гистонов составляет по меньшей мере 50%, например по меньшей мере 75%, например по меньшей мере 90%. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения активность деацетилазы гистонов снижается по меньшей мере на 95%, например по меньшей мере на 99%. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения соединения и их фармацевтически приемлемые соли, описанные в настоящей заявке, характеризуются значением IC₅₀ менее 100 нМ. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения соединения и их фармацевтически приемлемые соли, описанные в настоящей заявке, характеризуются значением IC₅₀от 100 нМ до 1 мкМ. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения соединения и их фармацевтически приемлемые соли, описанные в настоящей заявке, характеризуются значением IC₅₀ от 1 до 25 мкМ.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения такое ингибирование является специфичным, т.е. ингибитор деацетилазы гистонов снижает способность деацетилазы гистонов к удалению ацетильной группы из белка в концентрации, которая ниже, чем концентрация ингибитора, необходимая для получения другого, несвязанного биологического эффекта. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения концентрация ингибитора, необходимая для ингибирования активности деацетилазы гистонов по меньшей мере в 2 раза ниже, например по меньшей мере в 5 раз ниже, например по меньшей мере в 10 раз ниже, как например, по меньшей мере в 20 раз ниже, чем концентрация, необходимая для получения несвязанного биологического эффекта.

Терапия или лечение означает любое лечение болезненного состояния у пациента, включая:

a) предотвращение заболевания, то есть предотвращение развития клинических симптомов заболевания;

b) ингибирование заболевания;

c) замедление или остановку развития клинических симптомов и/или

d) облегчение заболевания, то есть обеспечение регрессии клинических симптомов.

Субъект или пациент относится к животному, такому как млекопитающее, которое является или будет являться объектом лечения, исследования или эксперимента. Способы, описанные в настоящей заявке, могут применяться как для лечения людей, так и для ветеринарного применения. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения субъектом является млекопитающее; и согласно некоторым вариантам реализации изобретения субъектом является человек. Следует понимать, что конкретные признаки, описанные в настоящей заявке, которые для ясности описаны в контексте конкретных вариантов реализации изобретения, в отдельном варианте реализации изобретения могут также быть представлены в комбинации. Напротив, различные признаки, описанные в настоящей заявке, которые для краткости описаны в контексте отдельного варианта реализации изобретения, также могут быть представлены отдельно или в любой подходящей подкомбинации. Все комбинации вариантов реализации настоящего изобретения, относящиеся к химическим группам, представленным переменными, содержащимися в формуле I, специальным образом включены в настоящую заявку, как если бы каждая комбинация была отдельно и явным образом описана в той мере, в какой такие комбинации охватывают соединения, которые приводят к образованию стабильных соединений (то есть соединений, которые могут быть выделены, охарактеризованы и исследованы в отношении биологической активности). Кроме того, все подкомбинации химических групп, перечисленные в вариантах реализации изобретения, описывающих такие переменные, а также все подкомбинации применений и медицинских показаний, описанные в настоящей заявке, такие как условия или нарушения, опосредованные HDAC, также специальным образом включены в настоящую заявку, как если бы каждая подкомбинация химических групп и подкомбинация применений и медицинских показаний была отдельно и явным образом описана в настоящей заявке. Кроме того, некоторые варианты реализации изобретения включают любую комбинацию одного или более дополнительных агентов, раскрытых в настоящей заявке, как если бы каждая комбинация была указана отдельно и явным образом. Настоящее изобретение относится к соединению формулы I о

Формула I или его фармацевтически приемлемая соль;

где W представляет собой N или CR⁵;

X представляет собой N или CR⁶;

Y представляет собой N или CR⁷ и Z представляет собой N или CR⁸; при условии, что не более, чем два из W, X, Y и Z представляют собой N;

- 7 036965

R¹ выбран из H и C₁-C₃ алкила;

R² представляет собой С₂-С₃ алкилен, необязательно замещенный С1-С₂ галогеналкилом или 3- или

4-членным циклоалкилом;

R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-, 5-, 6- или 7-членную гетеромоноциклическую группу или 6-, 7-, 8-, 9- или 10-членную гетеробициклическую группу, каждая из которых необязательно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероцилоалкила, карбокси, арила, циано, галогена и гетероарила, где арил и гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена, при условии, что если R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5или 6-членную гетеромоноциклическую группу, то:

i) R² представляет собой С₂-С₃ алкилен, замещенный С1-С₂ галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом, или ii) R⁸ представляет собой галоген или C1-C3 алкил, или iii) указанная 5- или 6-членная гетеромоноциклическая группа содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C₃ галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероцилоалкила, карбокси, арила, циано, галогена и гетероарила, где арил и гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена; и каждый из R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ независимо выбран из Н, C1-C4 алкила, C1-C4 галогеналкила и галогена.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R¹ выбран из H и метила. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R¹ представляет собой H.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R² представляет собой С₂-С₃ алкилен, необязательно замещенный 3- или 4-членным циклоалкилом.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R² выбран из -(CH₂)₂- и -СН(СН₃)СН₂-.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R⁵ представляет собой Н.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R⁶ представляет собой Н.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R⁷ представляет собой Н.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R⁸ выбран из Н, галогена и метила.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4- или 7-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероцилоалкила, карбокси, арила, циано, галогена и гетероарила, где арил и гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4- или 7-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C₁-C₃ алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероцилоалкила, арила и гетероарила, где арил и гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4- или 7-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независио выбран из C1-C3 алкила, C1C₃ галогеналкокси и арила, где арил необязательно дополнительно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4- или 7-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независио выбран из C1-C3 алкила, C1C₃ галогеналкокси и фенил, где фенил необязательно дополнительно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4- или 7-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независио выбран из метила, дифторметоксии фенила.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4- или 7-членную гетеромоноциклическую группу, выбранную из 3- 8 036965 фенилазетидин-1-ила, и азепан-1-ила.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу и R² представляет собой С2-С3 алкилен, замещенный С1-С2галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом, как например, R² представляет собой С2-С₃ алкилен, замещенный циклопропилом. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4членного гетероцилоалкила, карбокси, арила, циано, галогена и гетероарила, где арил и гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена, и R² представляет собой С2-С3 алкилен, замещенный С1-С2 галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом, как например, R² представляет собой С2-С3 алкилен, замещенный циклопропилом. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероцилоалкила, арила и гетероарила, где арил и гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена, и R² представляет собой С2-С₃ алкилен, замещенный С1-С₂ галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом, как например, R² представляет собой С₂-С₃ алкилен, замещенный циклопропилом.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси и арила, где арил необязательно дополнительно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена, и R²представляет собой С2-С3 алкилен, замещенный C1-C2 галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом, как например, R² представляет собой С2-С₃ алкилен, замещенный циклопропилом.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси и фенила, где фенил необязательно дополнительно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена, и R² представляет собой C2-C3 алкилен, замещенный С1-С2 галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом, как например, R² представляет собой C2-C₃ алкилен, замещенный циклопропилом. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из метила, дифторметокси и фенила, и R² представляет собой С2-С3 алкилен, замещенный С1-С2 галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом, как например, R² представляет собой C2-C₃ алкилен, замещенный циклопропилом.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, выбранную из пирролидин-1-ила и пиперидин-1-ила, каждый из которых необязательно содержит один заместитель, выбранный из метила, дифторметокси и фенила, и R² представляет собой C2-C3 алкилен, замещенный C1С2 галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом, как например, R² представляет собой С2-С₃ алкилен, замещенный циклопропилом.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, выбранную из пирролидин-1-ила, 2-метилпирролидин-1-ила, и 3-(дифторметокси)пиперидин-1-ила, и R² представляет собой C2-C3 алкилен, замещенный С1-С2 галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом, как например, R² представляет собой С2-С₃ алкилен, замещенный циклопропилом. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу и R⁸ представляет собой галоген или Cj-C3 алкил. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1 -С3 алкокси, C1 -С₃алкила, Q-C₃ галогеналкокси, Q-C₃ галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероцилоалкила, карбокси, арила, циано, галогена и гетероарила, где арил и гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из Ci-C₃ алкила, Ci-C₃ галогеналкила и галогена, и R⁸ представляет собой галоген или Q-C₃ алкил, например метил.

- 9 036965

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероцилоалкила, арила и гетероарила, где арил и гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена, и R⁸ представляет собой галоген или C1-C3 алкил, например метил.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси и арила, где арил необязательно дополнительно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена, и R⁸представляет собой галоген или C1-C3 алкил, например метил.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси и фенила, где фенил необязательно дополнительно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена, и R⁸ представляет собой галоген или C₁-C₃ алкил, например метил.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из метила, дифторметокси и фенила, и R⁸ представляет собой галоген или C1-C3 алкил, например, метил. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, выбранную из пирролидин-1ила и пиперидин-1-ила, каждая из которых необязательно содержит один заместитель, выбранный из метила, дифторметокси и фенила, и R⁸ представляет собой галоген или C₁-C₃ алкил, например метил.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, выбранную из пирролидин-1-ила, 2-метилпирролидин-1-ила и 3-(дифторметокси)пиперидин-1-ила, и R⁸ представляет собой галоген или C1-C3 алкил, например метил.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероцилоалкила, карбокси, арила, циано, галогена и гетероарила, где арил и гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C₁-C₃ алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси и арила, где арил необязательно дополнительно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси и фенила, где фенил необязательно дополнительно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из метила, дифторметокси и фенила. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, выбранную из пирролидин-1-ила и пиперидин-1-ила, каждый из которых содержит один заместитель, выбранный из метила, дифторметокси и фенила.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетеромоноциклическую группу, выбранную из 2метилпирролидин-1-ила и 3-(дифторметокси)пиперидин-1-ила.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют (2S)-метилпирролидин-1-ил. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 6-, 7-, 8-,

- 10 036965

9- или 10-членную гетеробициклическую группу, необязательно содержащую от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из Q-C3 алкокси, C₁-C₃ алкила, Q-C3 галогеналкокси, C₁C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероцилоалкила, карбокси, арила, циано, галогена и гетероарила, где арил и гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C₁C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 6-, 7-, 8-, 9- или 10-членную гетеробициклическую группу, выбранную из

-азаспиро [3.3] гептан-1 -ила,

3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ила,

-азабицикло [3.2.0]гептан-3 -ила,

-азабицикло [3.2.1] гептан-3 -ила,

-азабицикло [3.2.1] октан-3 -ила,

3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ила,

3,4 -дигидро -2,7 -нафтиридин-2 (1Н) -ила,

-азаспиро [2.4] гептан-5 -ила,

-азаспиро [2.5 ]октан-5 -ила,

-азаспиро [2.5 ]октан-6 -ила,

-азаспиро [3.3] гептан-1 -ила,

6-азабицикло [3.2.0] гептан-6 -ила, изоиндолин-2-ила и октагидроциклопента[с]пиррол-2-ила, и каждый из которых необязательно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из Q-C3 алкокси, Q-C3 алкила, Q-C3 галогеналкокси, Q-C3 галогеналкила, 3- или 4членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероцилоалкила, карбокси, арила, циано, галогена и гетероарила, где арил and гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из Q-C3 алкила, Q-C3 галогеналкила и галогена. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 6-, 7-, 8-, 9- или 10-членную гетеробициклическую группу, выбранную из

-азаспиро [3.3] гептан-1 -ила,

3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ила,

-азабицикло [3.2.0]гептан-3 -ила,

-азабицикло [3.2.1] гептан-3 -ила,

-азабицикло [3.2.1] октан-3 -ила,

3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ила,

3,4-дигидро-2,7-нафтиридин-2(1Н)-ила,

-азаспиро [2.4] гептан-5 -ила,

-азаспиро [2.5 ]октан-5 -ила,

-азаспиро [2.5 ]октан-6 -ила,

-азаспиро [3.3] гептан-1 -ила,

6-азабицикло [3.2.0] гептан-6 -ила, изоиндолин-2-ила и октагидроциклопента[с]пиррол-2-ила, и каждый из которых необязательно содержит один или два заместителя, каждый из которых независимо выбран из Q-C3 алкокси, Q-C3 алкила, Q-C3 галогеналкокси, Q-C3 галогеналкила и карбокси.

-азаспиро [3.3] гептан-1 -ила,

3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ила,

-азабицикло [3.2.0]гептан-3 -ила,

-азабицикло [3.2.1] гептан-3 -ила,

-азабицикло [3.2.1] октан-3 -ила,

3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ила,

3,4 -дигидро -2,7 -нафтиридин-2 (1Н) -ила,

-азаспиро [2.4] гептан-5 -ила,

-азаспиро [2.5 ]октан-5 -ила,

-азаспиро [2.5 ]октан-6 -ила,

-азаспиро [3.3] гептан-1 -ила,

6-азабицикло [3.2.0] гептан-6 -ила,

- 11 036965 изоиндолин-2-ила и октагидроциклопента[с]пиррол-2-ила, и каждый из которых необязательно содержит один или два заместителя, каждый из которых независимо выбран из C₁-C₃ алкила.

Также предложено соединение формулы II или его фармацевтически приемлемая соль

R⁶ О

R⁴

O-IN ГГ

Формула II где R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ являются такими, как описано в настоящей заявке. Также предложено соединение формулы III или его фармацевтически приемлемая соль

R⁴

N_ ,

R³

O-IN ГС

Формула III где R¹, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ являются такими, как описано в настоящей заявке.

Также предложено соединение формулы IV или его фармацевтически приемлемая соль

О = R³

Формула IV где R³ и R⁴ являются такими, как описано в настоящей заявке.

Также предложено соединение формулы V или его фармацевтически приемлемая соль о

О'¹ ^R². ^R⁴

Ν N

R¹ R³

Формула V где R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁷ и R⁸ являются такими, как описано в настоящей заявке.

Также предложено соединение формулы VI или его фармацевтически приемлемая соль

R³

Формула VI где R¹, R³, R⁴, R⁵, R⁷ и R⁸ являются такими, как описано в настоящей заявке.

Также предложено соединение формулы VII или его фармацевтически приемлемая соль

О

R³N.

O-N

Формула VII где R³ и R⁴ являются такими, как описано в настоящей заявке.

- 12 036965

Также предложено соединение, выбранное из (28)-2-метил-1-((Я)-2-(3-метил-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамидо)пропил)пирролидин-1-ий формиата;

Л/-(2-(3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

(Я)-Л/-(1-(изоиндолин-2-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол3-ил)бензамида;

Л/-((2Я)-1-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

(8)-Л/-(1-циклопропил-2-(пирролидин-1-ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

(/?)-Л/-(1-циклопропил-2-(пирролидин-1-ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

(Я)-Л/-(1-(3,4-дигидроизохинолин-2(1/7)-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

(Я)-Л/-(1-(3-фенилазетидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

D1: Л/-((Я)-1-((ад5)-3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

D2: Л/-((Я)-1-((ад5)-3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

(Я)-Л/-(1-(5-азаспиро[2.5]октан-5-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

(Я)-Л/-(1-(6-азаспиро[2.5]октан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

(Я)-Л/-(1-(азепан-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамида;

(Я)-Л/-(1-(1-азаспиро[3.3]гептан-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

(/?)-Л/-(1-(5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

Л/-((Я)-1-(3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

2-((Я)-2-(4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамидо)пропил)октагидроциклопента[с]пиррол-2-ий формиата;

(Я)-Л/-(1-(3,4-дигидро-2,7-нафтиридин-2(1/7)-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

Л/-((2Я)-1-(3-азабицикло[3.2.0]гептан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

D1: Л/-((Я)-1-((ад5-1,5-щ/с)-6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

D2: Л/-((Я)-1-((ад5-1,5-щ/с)-6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

Л/-((2Я)-1-(6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

(28)-1-((Я)-2-(3-фтор-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамидо)пропил)-2-метилпирролидин-1-ий формиата; и

Л/-((Я)-1 -((5)-2-метилпирролидин-1-ил)пропан-2-ил)-5-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)пиколинамида, или его фармацевтически приемлемая соль.

- 13 036965

/\/-(2-(3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

(/?)-Л/-(1-(изоиндолин-2-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол· 3-ил)бензамида;

(Я)-Л/-(1-циклопропил-2-(пирролидин-1-ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

(/?)-Л/-(1-(3,4-дигидроизохинолин-2(1/7)-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

D1: Л/-((/?)-1-((ад5)-3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

D2: Л/-((/?)-1-((ад5)-3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

(/?)-Л/-(1-(1-азаспиро[3.3]гептан-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

Л/-((/?)-1-(3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамида;

Л/-((2/?)-1-(3-азабицикло[3.2.0]гептан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

D1: Л/-((/?)-1-((ад5-1,5-цис)-6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

D2: Л/-((/?)-1-((ад5-1,5-цис)-6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

Л/-((2/?)-1-(6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

(28)-1-((Я)-2-(3-фтор-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамидо)пропил)-2-метилпирролидин-1-ий формиата;

Л/-((Я)-1-((8)-2-метилпирролидин-1-ил)пропан-2-ил)-5-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)пиколинамида;

3-метил-М-((Р)-1-((5)-2-метилпирролидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

- 14 036965

Ы-((2/?)-1-(гексагидроциклопента[с]пиррол-2(1/7)-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида;

3-фтор-Ы-((Я)-1-((8)-2-метилпирролидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида; и или его фармацевтически приемлемая соль.

Способы получения соединения или их фармацевтически приемлемых солей, описанных в настоящей заявке, будут очевидны для специалистов в области техники, подходящие процедуры описаны, например, в примерах ниже и в ссылках, упомянутых в настоящей заявке.

Также предложен способ ингибирования по меньшей мере одной деацетилазы гистонов. Также предложено применение по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, в получении лекарственного средства для ингибирования по меньшей мере одной деацетилазы гистонов. Также предложено по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, для применения в способе ингибирования по меньшей мере одной деацетилазы гистонов. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения по меньшей мере одна деацетилаза гистонов представляет собой HDAC класса IIa. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанная по меньшей мере одна деацетилаза гистонов гомологична HDA1 дрожжей. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанная по меньшей мере одна деацетилаза гистонов выбрана из HDAC-4, HDAC-5, HDAC-7 и HDAC-9. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное ингибирование происходит в клетке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, селективно в отношении ингибирования по меньшей мере одной деацетилазы гистонов класса II. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, являются селективными ингибиторами HDAC-4 и/или HDAC-5.

Также предложен способ лечения состояния или нарушения, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Также предложен способ лечения состояния или нарушения, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Также предложено применение по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, для получения лекарственного средства для лечения состояния или нарушения, опосредованного HDAC. Также предложено по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, для применения в способе лечения человека или животного организма посредством терапии. Также предложено по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, для применения в способе лечения состояния или заболевания.

Также предложен способ лечения состояния или нарушения, реагирующего на ингибирование по меньшей мере одной деацетилазы гистонов, у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанная по меньшей мере одна деацетилаза гистонов представляет собой HDAC-4. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение включает нейродегенеративную патологию. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение представляет собой болезнь Хантингтона.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает нейродегенеративную патологию. Соответственно, также предложен способ лечения нейродегенеративной патологии, опосредованной HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанная нейродегенеративная патология выбрана из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, нейрональная внутриядерная инклюзионная болезнь (NIID), дентато-рубро-паллидо-льюисовой атрофии (DRPLA), атаксии Фридрейха, синдрома Рубинштейна-Тейби и плиглутаминовых заболеваний, таких как болезнь Хантингтона; спиноцеребеллярной атаксии 1 типа (SCA 1), спиноцеребеллярной атаксии 7 типа (SCA 7), припадков, стриатонигральной дегенерации, прогрессирующего надъядерного паралича, торсионной дистонии, спастической кривошеи, дискинезии, наследственного тремора, синдрома Жилль де ла Туретта, болезни диффузных телец Леви, прогрессирующего надъядерного паралича, атрофии Пика, первичного латерального склероза, прогрессивной невральной мышечной атрофии, спинальной мышечной атрофии, гипертрофической интерстициальной полинейропатии, пигментного ретинита, врожденной атрофии зрительного нерва, наследственной

- 15 036965 параплегии, синдрома Шая-Дрейджера, болезни Кеннеди, нейродегенерации, связанной с агрегацией белков, болезни Мачадо-Джозефа, губчатой энцефалопатии, болезни, связанной с прионами, рассеянного склероза (PC), прогрессирующего надъядерного паралича (болезнь Стила-Ричардсона-Ольшевского), болезни Галлервордена-Шпатца, прогрессивной наследственной миоклонической эпилепсии, церебеллярной дегенерации, заболевания двигательных нейронов, заболевания Верднига-Хоффмана, заболевания Вольфарта-Кугельберга-Веландера, заболевания Шарко-Мари-Тута, болезни Дежерина-Сотта, пигментного ретинита, болезни Лебера, прогрессирующего системного склерза, дерматомиозита и смешанного заболевания соединительной ткани.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения нейродегенеративная патология представляет собой острое или хроническое дегенеративное заболевание глаз. Острые или хронические дегенеративные заболевания глаз включают глаукому, сухую возрастную макулярную дегенерацию, пигментный ретинит и другие формы нейродегенеративного заболевания сетчатки, отслойку сетчатки, макулярную складку, ишемию, поражающую внешнюю часть сетчатки, клеточное повреждение, связанное с диабетической ретинопатией и ретинальной ишемией, повреждение, связанное с лазерной терапией, глазных неоваскулярных заболеваний, диабетической ретинопатии, рубеоза радужной оболочки, увеита, новообразования, гетерохромного иридоциклита Фуча, неоваскулярной глаукомы, неоваскуляризации роговицы, ретинальной ишемии, хориоидальной сосудистой недостаточности, хориоидального тромбоза, ишемии сонной артерии, контузионного повреждения глаза, ретинопатии недоношенных, ретинальной закупорки вен, пролиферативной витреоретинопатии, ангиогенеза роговицы, ретинальной микроваскулопатии и отека сетчатки.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает фиброзное заболевание, такое как фиброз печени, кистозный фиброз, цирроз и фиброзные кожные заболевания, например гипертрофические рубцы, келоид и контрактура Дюпюитрена. Соответственно, также предложен способ лечения фиброзной болезни, опосредованной HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанной в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает психологическое расстройство, такое как депрессия, биполярное расстройство и деменция. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает депрессию. Соответственно, также предложен способ лечения психологического расстройства, такого как депрессия, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения депрессия выбрана из клинической депрессии и биполярного расстройства. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает тревожное расстройство. Соответственно, также предложен способ лечения тревожного расстройства, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает шизофрению. Соответственно, также предложен способ лечения шизофрении, опосредованной HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает болезнь двигательных нейронов, мышечную атрофию/истощение мышечной ткани или амиотрофический латеральный склероз (ALS). Соответственно, также предложен способ лечения болезни двигательных нейронов, мышечной атрофии/истощения мышечной ткани или амиотрофического латерального склероза (ALS), опосредованных HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает сердечнососудистое состояние. Соответственно, также предложен способ лечения сердечно-сосудистого состояния, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное сердечно-сосудистое состояние выбрано из кардиомиопатии, гипертрофии сердца, ишемии миокарда, сердечной недостаточности, сердечного рестеноза и артериосклероза.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает раковое заболевание. Соответственно, также предложен способ лечения

- 16 036965 рака, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное раковое заболевание выбрано из лимфомы, рака поджелудочной железы, колоректального рака, гепатоцеллюлярной карциномы, макроглобулинемии Вальденстрема, гормонрефрактерного рака предстательной железы и лейкоза, рака молочной железы, рака легких, рака яичников, рака предстательной железы, рака головы и шеи, рака почек, рака желудка, рака мозга, лимфомы Вклеток, периферической Т-клеточной лимфомы и кожной Т-клеточной лимфомы. Согласно некоторым дополнительным вариантам реализации изобретения раковые заболевания выбирают из следующих типов рака. Рак сердца: саркома (ангиосаркома, фибросаркома, рабдомиосаркома, липосаркома), миксома, рабдомиома, фиброма, липома и тератома; рак легких: бронхогенная карцинома (плоскоклеточная, недифференцированная мелкоклеточная, недифференцированная крупноклеточная, аденокарцинома), альвеолярная (бронхиолярная) карцинома, бронхиальная аденома, саркома, лимфома, хондроматозная гамартома, мезотелиома; рак желудочно-кишечного тракта: пищевода (плоскоклеточная карцинома, аденокарцинома, лейомиосаркома, лимфома), желудка (карцинома, лимфома, лейомиосаркома), поджелудочной железы (протоковая аденокарцинома, инсулинома, глюкагонома, гастринома, карциноидные опухоли, випома), тонкой кишки (аденокарцинома, лимфома, карциноидные опухоли, Саркома Капоши, лейомиома, гемангиома, липома, нейрофиброма, фиброма), толстой кишки (аденокарцинома, трубчатая аденома, ворсистая аденома, гамартома, лейомиома); рак мочеполового тракта: почек (аденокарцинома, опухоль Вильма [нефробластома], лимфома, лейкемия), мочевого пузыря и уретры (плоскоклеточная карцинома, транзиторно-клеточная карцинома, аденокарцинома), простаты (аденокарцинома, саркома), яичек (семинома, тератома, эмбриональная карцинома, тератокарцинома, хориокарцинома, саркома, интерстициальная клеточная карцинома, фиброма, фиброаденома, аденоматоидные опухоли, липома); рак печени: гепатома, холангиокарцинома, гепатобластома, ангиосаркома, гепатоцеллюлярная аденома, гемангиома; рак костей: остеогенная саркома (остеосаркома), фибросаркома, злокачественная фиброзная гистиоцитома, хондросаркома, саркома Юинга, злокачественная лимфома (саркома ретикулярной клетки), множественная миелома, злокачестенная гигантоклеточная хордома, остеохронфрома (костнохрящевые экзостозы), доброкачественная хондрома, хондробластома, хондромиксофиброма, остеоидостеома и гигантоклеточные опухоли; рак нервной системы: черепа (остеома, гемангиома, гранулема, ксантома, деформирующий остит), мягких оболочек мозга (менингиома, менингиосаркома, глиоматоз), мозга (астроцитома, медуллобластома, глиома, эпендимома, герминома [пинеалома], мультиформная глиобластома, олигодендроглиома, шваннома, ретинобластома, врожденные опухоли), спинного мозга (нейрофиброма, менингиома, глиома, саркома); гинекологический рак: матки (карцинома эндометрия), шейки матки (карцинома шейки матки, доопухолевая цервикальная дисплазия), яичников (карцинома яичника [серозная цистаденокарцинома, мукоидная цистаденокарцинома, неклассифицированная карцинома], гранулезные тека клеточные опухоли, клеточные опухоли Sertoli-Leydig, дисгерминома, злокачественная тератома), женских наружных половых органов (плоскоклеточная карцинома, внутриэпителиальный рак, аденокарцинома, фибросаркома, меланома), влагалища (светлоклеточный рак, плоскоклеточная карцинома, ботриоидная саркома (эмбриональная рабдомиосаркома) фаллопиевых труб (карцинома); гематологический рак: крови (миелоидный лейкоз [острый и хронический], острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, миелопролиферативные заболевания, множественная миелома, миелодиспластический синдром), болезнь Ходжкина, неходжкинская лимфома [злокачественная лимфома]; рак кожи: злокачественная меланома, базальноклеточная карцинома, плоскоклеточная карцинома, саркома Капоши, диспластическая невоидная опухоль, липома, ангиома, дерматофиброма, келоиды, псориаз; и рак надпочечников: нейробластома. Также предложены способы сенсибилизации опухолей к лучевой терапии путем введения соединения согласно настоящему изобретению до, во время или после облучения опухоли для лечения рака.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает состояние или нарушение, которые поддаются лечению путем иммунной модуляции. Соответственно, также предложен способ лечения состояния или нарушения, которые поддаются лечению путем иммунной модуляции, опосредованные HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, которые поддаются лечению путем иммунной модуляции, выбирают из астмы, синдрома раздраженного кишечника, болезни Крона, язвенного колита, нарушения моторики кишечника, артериальной гипертензии, ревматоидного артрита, остеоартрита, ювенильного хронического артрита, болезни трансплантата против хозяина, псориаза, спондилоартропатии, воспалительного заболевания кишечника, алкогольного гепатита, синдрома Шегрена, анкилозирующего спондилоартрита, мембранной гломерулопатии, дискогенной боли, системной красной волчанки, аллергической болезни кишечника, целиакии, бронхита, кистозного фиброза, ревматоидного спондилита, остеоартрита, увеита, воспаления радужной оболочки и конъюнктивита, ишемической болезни кишечника, псориаза, экземы, дерматита, септического артрита,

- 17 036965 подагры, ювенильного артрита, болезни Стилла, пурпуры Хеноха-Шонлейна, псориатического артрита, миалгии, реактивного артрита (синдрома Рейтера), гемохроматоза, гранулематоза Вегенера, семейной лихорадки Средиземноморья (FMF), HBDS (гипериммуноглобулинемии D и синдрома периодической лихорадки), TRAPS (TNF-alpha рецептор, связанный с синдромом периодической лихорадки), хронической обструктивной болезни легких, неспецифического воспалительного заболевания новорожденных (NOMID), связанного с криопирином периодического синдрома (CAPS) и семейного холодного аутовоспалительного синдрома (FCAS). Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает аллергическое заболевание. Соответственно, также предложен способ лечения аллергического заболевания, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Аллергические заболевания включают, но не ограничиваются указанными, респираторные аллергические заболевания, такие как аллергический ринит, гиперчувствительность легочных заболеваний, пневмония гиперчувствительности, эозинофильные пневмонии, синдром Леффлера, хроническая эозинофильная пневмония, гиперчувствительность замедленного типа, интерстициальные заболевания легких (ИЛД), идиопатический фиброз легких, полимиозит, дерматомиозит, системная анафилаксия, лекарственная аллергия (например, пенициллину или цефалоспоринам), а также аллергические реакции на укус насекомого.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает инфекционное заболевание, такое как грибковая инфекция, бактериальная инфекция, вирусная инфекция и протозойная инфекция, например, малярия, лямблиоз, лейшманиоз, болезнь Шагаса, дизентерия, токсоплазмоз и кокцидиоз. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает малярию. Соответственно, также предложен способ лечения инфекционного заболевания, такого как малярия, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает аутизм или синдром Ретта. Соответственно, также предложен способ лечения аутизма или синдрома Ретта, опосредованных HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает гематологическое нарушение, такое как талассемия, анемия и серповидноклеточная анемия. Соответственно, также предложен способ лечения гематологического нарушения, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающие введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает метаболическое заболевание, такое как преддиабет или диабет (типа I или II). Соответственно, также предложен способ лечения метаболического заболевания, такого как преддиабет или диабет (типа I или II), опосредованных HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающие введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает нарушение, которое также может быть вылечено с помощью лекарственных средств на основе клеток-предшественноков/стволовых клеток, как например: нарушения, связанные с диабетом (органная недостаточность, цирроз и гепатит); нарушения центральной нервной системы (ЦНС), ассоциированные с дисрегуляцией клеток-предшественников в мозге (например, посттравматическое стрессовое расстройство (ПТСР)); опухоли (например, ретинобластомы); нарушения, воздействующие на олигодендроцитарные клетки-предшественники (например, астроцитомы и опухоли эпендимальных клеток); рассеянный склероз; демиелинизирующие расстройства, такие как лейкодистрофия; невропатии, ассоциированные с потерей белого вещества мозга; и церебеллярные нарушения, такие как атаксия; и расстройства, связанные с клетками-предшественниками обонятельных клеток (например, аносмические состояния). Соответственно, также предложен способ лечения заболевания, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, до, во время, или после лечения лекарственными средствами на основе клеток-предшественников/стволовых клеток.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает нарушение, связанное с пролиферацией эпителиальных и мезенхимальных клеток (например, опухоли, заживление ран и хирргические операции). Соответственно, также предло- 18 036965 жен способ лечения нарушения, связанного с пролиферацией эпителиальных и мезенхимальных клеток, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает нарушение, связанное с пролиферацией предшественников костной ткани (например, остеобласты и остеокласты), нарушения, связанные с предшественниками волос и эпидермиса (например, выпадение волос, опухоли кожи, регенерация кожи, ожоги и косметическая хирургические операции); и нарушения, связанные с потерей костной массы во время менопаузы. Соответственно, также предложен способ лечения нарушений, связанных с пролиферацией предшественников костной ткани, нарушений, связанных с предшественниками волос и эпидермиса, или нарушений, связанных с потерей костной ткани, которые опосредуются HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, представляет собой вирусное нарушение, при котором клетки крови становятся чувствительными к другим способам лечения после ингибирования HDAC, после чего указанному субъекту вводят терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Соответственно, также предложен способ лечения вирусного нарушения, при котором клетки крови становятся чувствительными к другим способам лечения после ингибирования HDAC, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, представляет собой иммунное заболевание, которое может быть вылечено путем совместного введения TNFa или других иммуномодуляотров, после введения указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Соответственно, также предложен способ лечения иммунного заболевания, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, до, во время или после лечения с помощью TNFa или других иммуномодуляторов.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает отторжение графта или отторжение трансплантата. Соответственно, также предложен способ лечения нарушения, связанного с отторжением графта или отторжением трансплантата, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанное состояние или нарушение, опосредованное HDAC, включает нарушение артериального давления, связанное с регуляцией оксида азота (NO) (например, гипертензия, эректильная дисфункция, астма; и офтальмологические заболевания, такие как глаукома). Соответственно, также предложен способ лечения нарушения артериального давления, связанного с регуляцией оксида азота (NO), опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения состояние или нарушение представляет собой сердечное гипертрофическое нарушение. Соответственно, также предложен способ лечения сердечного гипертрофического нарушения, опосредованного HDAC, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Также предложены способы лечения, согласно которым по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, представляет собой единственный активный агент, получаемый субъектом, и способы лечения, согласно которым по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, вводят субъекту в комбинации с одним или более дополнительными активными агентами. В целом, соединения или их фармацевтически приемлемые соли, описанные в настоящей заявке, вводят в терапевтически эффективном количестве любым общеизвестным способом введения для агентов, используемых при сходных состояниях. Фактическое количество соединения, т.е. активного ингредиента, зависит от множества факторов, таких как тяжесть заболевания, которое лечат, возраста и относительного здоровья субъекта, эффективности используемого соединения, способа и формы введения и других факторов, хорошо известных специалисту в данной области техники. Лекарственное средство может быть введено по мень- 19 036965 шей мере один раз в день, например один или два раза в день.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения соединения или их фармацевтически приемлемые соли, описанные в настоящей заявке, вводят в виде фармацевтической композиции. Соответственно, предложены фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, совместно с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым наполнителем, выбранным из носителей, адьювантов и вспомогательных веществ. Соединение согласно настоящему изобретению может входить в состав фармацевтических композиций с использованием методик, хорошо известных специалистам в области техники.

Фармацевтически приемлемые носители должны обладать достаточно высокой чистотой и достаточно низкой токсичностью, чтобы подходить для введения животному, которое лечат. Наполнитель может быть инертным или обладать полезными фармацевтическими свойствами. Количество наполнителя, используемого в сочетании с соединением или его фармацевтически приемлемой солью, является достаточным для обеспечения подходящего количества вещества для введения на однократную дозу соединения или его фармацевтически приемлемой соли. Типичные фармацевтически приемлемые носители или их компоненты представляют собой сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлоза и ее производные, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза и метилцеллюлоза; измельченный в порошок трагакант; солод; желатин; тальк; твердые смазывающие вещества, такие как стеариновая кислота и стеарат магния; сульфат кальция; синтетические масла; растительные масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, кунжутное масло, оливковое масло и кукурузное масло; полиолы, такие как пропиленгликоль, глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; альгиновая кислота; растворы, забуференные фосфатом; эмульгаторы, такие как твины; смачивающие вещества, такие как лаурилсульфат натрия; красители; ароматизаторы; таблетирующие агенты; стабилизаторы; антиоксиданты; консерванты; апирогенная вода; изотонический физиологический раствор, раствор глюкозы и растворы, забуференные фосфатом.

Фармацевтическая композиция может необязательно содержать активные агенты, которые существенно не влияют на активность соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Эффективные концентрации по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, смешивают с подходящим фармацевтически приемлемым носителем. В случаях, когда указанное соединение или его фармацевтически приемлемая соль не являются растворимыми в достаточной степени, могут применяться способы растворения соединений. Такие способы известны специалистам в области техники и включают, но не ограничиваются указанными, применение сорастворителей, таких как диметилсульфоксид (DMSO), применение поверхностно-активных веществ, таких как TWEEN®, или растворение в водном бикарбонате натрия.

После примешивания или добавления соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, полученная смесь может представлять собой раствор, суспензию, эмульсию или подобную форму. Форма полученной смеси зависит от ряда факторов, в том числе, предполагаемого способа введения и растворимости соединения в выбранном носителе. Эффективную концентрацию, достаточную для смягчения симптомов заболевания, расстройства или состояния, от которого лечат, можно определить эмпирически. Соединения или их фармацевтически приемлемые соли, описанные в настоящей заявке, могут быть введены перорально, местно, парентерально, внутривенно, путем внутримышечной инъекции, с помощью ингаляции или спрея, подъязычно, трансдермально, путем буккального введения, ректально, в виде офтальмологического раствора или другими способами в виде единичных дозированных форм.

Фармацевтические композиции могут быть представлены в форме, подходящей для перорального применения, например, в виде таблеток, пастилок, таблеток для рассасывания, водных или масляных суспензий, диспергируемых порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул, или сиропов или эликсиров. Фармацевтические композиции, предназначенные для перорального применения, можно получить согласно любому способу, известному в области техники для получения фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или несколько агентов, таких как подсластители, ароматизаторы, красители и консерванты, для того, чтобы получить привлекательные внешне и приятные на вкус препараты. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения фармацевтические композиции для перорального применения содержат от 0,1 до 99% по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения фармацевтические композиции для перорального применения содержат по меньшей мере 5% (мас.%) по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Некоторые варианты реализации изобретения содержат от 25 до 50% или от 5 до 75% по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке.

Вводимые перорально фармацевтические композиции также включают жидкие растворы, эмульсии, суспензии, порошки, гранулы, эликсиры, тинктуры, сиропы и подобные формы. Фармацевтически приемлемые носители, подходящие для получения таких композиций, хорошо известны в области техники. Пероральные фармацевтические композиции могут содержать консерванты, ароматизаторы, подсласти

- 20 036965 тели, такие как сахароза или сахарин, вещества, скрывающие вкус, и красители.

Типичные компоненты носителей для сиропов, эликсиров, эмульсий и суспензий включают этанол, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, раствор сахара, сорбит и воду. Сиропы и эликсиры могут содержать подсластители, например, глицерин, пропиленгликоль, сорбит или сахарозу. Такие фармацевтические композиции также могут содержать средство, уменьшающее раздражение. Соединение или его фармацевтически приемлемые соли, описанные в настоящей заявке, могут входить в состав пероральных жидких препаратов, таких как водные или масляные суспензии, растворы, эмульсии, сиропы или эликсиры, например. Кроме того, фармацевтические композиции, содержащие указанно соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, могут быть представлены в виде сухого продукта для получения состава с водой или другим подходящим носителем перед применением. Такие жидкие препараты могут содержать обычные добавки, такие как суспендирующие вещества (например, сорбитный сироп, метилцеллюлозу, глюкозу/сахар, сироп, желатин, гидроксиэтилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, гель стеарата алюминия и гидрированные съедобные жиры), эмульгаторы (например, лецитин, моностеарат сорбитана или аравийскую камедь), неводные носители, которые могут включать пригодные в пищу масла (например, миндальное масло, фракционированное кокосовое масло, силиловые эфиры, пропиленгликоль и этиловый спирт), и консерванты (например, метил- или н-пропилп-гидроксибензоат и сорбиновую кислоту).

Для суспензий типичные суспендирующие агенты включают метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу натрия, Avicel® RC-591, трагакант и альгинат натрия; типичные смачивающие агенты включают лецитин и полисорбат 80; и типичные консерванты включают метилпарабен и бензоат натрия.

Водные суспензии содержат активное вещество (активные вещества) в смеси со вспомогательными веществами, подходящими для получения водных суспензий. Такие вспомогательные вещества представляют собой суспендирующие агенты, например, карбоксиметилцеллюлоза натрия, метилцеллюлоза, гидропропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и аравийская камедь; диспергирующие или смачивающие агенты; могут представлять собой встречающиеся в природе фосфатиды, например лецитин, или продукты конденсации алкиленоксида с жирными кислотами, например полиоксиэтиленстеарат, или продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, например гептадекаэтиленоксицетанолом, или продукты конденсации этиленоксида с неполными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, такие как замещенный полиоксиэтиленсорбит, или продукты конденсации этиленоксида с неполными эфирами, полученными из жирных кислот и ангидридов гексита, например замещенный полиоксиэтиленсорбитан. Водные суспензии также могут содержать один или более консервантов, например этил или н-пропил пгидроксибензоат. Масляные суспензии могут быть получены путем суспендирования активных ингредиентов в растительном масле, например арахисовом масле, оливковом масле, кунжутном масле или кокосовом масле, или в минеральном масле, таком как жидкий парафин. Масляные суспензии могут содержать загуститель, например пчелиный воск, твердый парафин или цетиловый спирт. Для получения лекарственных средств для перорального применения с привлекательным вкусом могут быть добавлены подсластители, такие как описаны выше, и ароматизаторы. В такие фармацевтические композиции в качестве консерванта может быть добавлен антиоксидант, такой как аскорбиновая кислота.

Фармацевтические композиции также могут быть представлены в виде эмульсий масло-в-воде. Масляная фаза может представлять собой растительное масло, например, оливковое масло или арахисовое масло, или минеральное масло, например, жидкий парафин или их смеси. Подходящие эмульгаторы могут представлять собой встречающиеся в природе камеди, например аравийскую камедь или трагакантовую камедь, фосфолипиды, встречающиеся в природе, например соевые бобы, лецитин и сложные эфиры или неполные сложные эфиры, полученные из жирных кислот и гексита, ангидриды, например сорбитанмоноолеат, и продукты конденсации указанных неполных сложных эфиров с этиленоксидом, например полиоксиэтилен сорбитанмоноолеат.

Диспергируемые порошки и гранулы, подходящие для получения водной суспензии путем добавления воды, обеспечивают активный ингредиент в смеси с диспергирующим или смачивающим агентом, суспендирующим агентом и одним или более консервантов. Примерами подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов являются вещества, указанные выше. Таблетки обычно содержат традиционные фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества в качестве инертных разбавителей, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, маннит, лактоза и целлюлоза; связующие вещества, такие как крахмал, желатин и сахароза; разрыхлители, такие как крахмал, альгиновая кислота и кроскармелоза; смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеариновая кислота и тальк. Для улучшения свойств текучести порошковой смеси могут быть использованы глиданты, такие как диоксид кремния. Для внешнего вида могут быть добавлены красители, такие как красители FD&C. Подсластители и ароматизаторы, такие как аспартам, сахарин, ментол, перечная мята и фруктовые отдушки, применимы в качестве вспомогательных веществ для жевательных таблеток. Капсулы (включая препараты с замедленным высвобождением и с отсроченным высвобождением) обычно содержат один или несколько твердых разбавителей, описанных выше. Выбор компонентов носителя часто зависит от вторичных признаков, таких как вкус, цена и устойчивость при хранении.

- 21 036965

На такие композиции также может быть нанесено покрытие с помощью традиционных способов, обычно pH-зависимое или время-зависимое покрытие, таким образом, что указанное соединение или его фармацевтически приемлемая соль высвобождается в желудочно-кишечном тракте вблизи желательного места применения или в разное время для продления нужного действия. Такие лекарственные формы типично включают один или несколько компонентов из числа ацетатфталата целлюлозы, поливинилацетатфталата, фталата гидроксипропилметилцеллюллозы, этилцеллюлозы, покрытий Eudragit, восков и шеллака.

Препараты для перорального применения могут быть представлены в виде твердых желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или в виде мягких желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с водной или масляной средой, например арахисовым маслом, жидким парафином или оливковым маслом.

Фармацевтические композиции также могут быть представлены в форме стерильной инъецируемой водной или масляной суспензии. Такую суспензию можно получить согласно известному уровню техники с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов, указанных выше. Стерильный препарат для инъекций также может представлять собой стерильный раствор для инъекций или суспензию для инъекций в нетоксичном парентерально приемлемом носителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых носителей, которые могут быть использованы, представлены вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используют стерильные нелетучие масла. Для такой цели можно использовать любую смесь нелетучих масел, в том числе моно- и диглицериды. Кроме того, при получении препаратов для инъекций применимы жирные кислоты, такие как олеиновая кислота. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, могут быть введены парентерально в стерильной среде. Парентеральное введение включает подкожные инъекции, внутривенные, внутримышечные и интратекальные инъекции или методы инфузии. Соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, в зависимости от используемых носителя и концентрации, можно или суспендировать или растворить в носителе. Целесообразным может быть растворение в носителе вспомогательных веществ, таких как местные анестетики, консерванты и забуферивающие вещества. Во многих фармацевтических композициях для парентерального введения носитель составляет, по меньшей мере, примерно 90 мас.% от всей композиции. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения носитель для парентерального введения выбран из пропиленгликоля, этил олеата, пирролидона, этанола и кунжутного масла.

Соединения или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, также могут быть введены в форме суппозиториев для ректального или вагинального введения лекарственного средства. Такие фармацевтические композиции могут быть получены путем смешивания лекарственного средства с подходящим не вызывающим раздражения вспомогательным веществом, который является твердым при обычных температурах, но жидким при ректальной температуре и будет, следовательно, плавиться в прямой кишке с высвобождением лекарственного средства. Такие вещества включают масло какао и полиэтиленгликоли. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, могут входить в состав лекарственного средства для локального или местного применения, например, для местного применения на коже и слизистых оболочках, таких как глаза, в форме гелей, кремов и лосьонов для введения через глаза. Фармацевтические композиции для местного применения могут быть представлены в любой форме, в том числе, например, в форме растворов, кремов, мазей, гелей, лосьонов, молочка, очищающих средств, увлажняющих средств, спреев, кожных пэтчей и тому подобных.

Такие растворы можно получить в виде 0,01-10% изотонических растворов, pH 5-7, с соответствующими солями. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, также могут входить в состав лекарственного средства для трансдермального введения в виде трансдермальных патчей.

Фармацевтические композиции для местного применения, содержащие по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, могут быть представлены в сочетании с различными носителями, хорошо известными в области техники, такими как, например, вода, спирты, гель алоэ вера, аллантоин, глицерин, масла с витаминами А и Е, минеральное масло, пропиленгликоль, PPG-2 миристилпропионат и тому подобные. Другие вещества, подходящие для применения в виде носителей для местного применения, включают, например, смягчающие вещества, растворители, увлажняющие вещества, загустители и порошки. Примерами каждого из указанных типов веществ, которые могут применяться по отдельности или в смеси с одним или несколькими веществами, являются следующие вещества.

Примеры смягчающих веществ включают стеариловый спирт, монорицинолеат глицерина, глицерилмоностерат, пропан-1,2-диол, бутан-1,3-диол, норковый жир, цетиловый спирт, изопропилизостеарат, стеариновая кислота, изобутилпальмитат, изоцетилстеарат, олеиловый спирт, изопропиллаурат, гексиллаурат, децилолеат, октадекан-2-ол, изоцетиловый спирт, цетилпальмитат, диметилполисилоксан, ди-н

- 22 036965 бутилсебацинат, изопропилмиристат, изопропилпальмитат, изпопропилстеарат, бутилстеарат, полиэтиленгликоль, триэтиленгликоль, ланолин, кунжутное масло, кокосовое масло, арахисовое масло, касторовое масло, ацетилированные ланолиновые спирты, вазелин, минеральное масло, бутилмиристат, изостеариновая кислота, пальмитиновая кислота, изопропиллинолеат, лауриллактат, миристиллактат, децилолеат и миристилмиристат; пропелленты, такие как пропан, бутан, изобутан, диметиловый эфир, диоксид углерода и оксид азота; растворители, такие как этиловый спирт, метиленхлорид, изопропанол, касторовое масло, моноэтиловый эфир этиленгликоля, монобутиловый эфир диэтиленгликоля, моноэтиловый эфир диэтиленгликоля, диметилсульфоксид, диметилформамид, тетрагидрофуран; увлажняющие вещества, такие как глицерин, сорбит, 2-пирролидон-5-карбоксилат натрия, растворимый коллаген, дибутилфталат и желатин; и порошки, такие как мел, тальк, фуллерова земля, каолин, крахмал, камеди, коллоидный диоксид кремния, полиакрилат натрия, тетраалкиламмониевые смектиты, триалкилариламмониевые смектиты, химически модифицированный алюмосиликат магния, модифицированная органически монтмориллонитовая глина, гидратированный алюмосиликат, высокодисперсный диоксид кремния, карбоксивиниловый полимер, карбоксиметилцеллюлоза натрия и моностеарат этиленгликоля. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, также могут быть введены местно в форме липосомных систем доставки, таких как мелкие однослойные везикулы, крупные однослойные везикулы и многослойные везикулы. Липосомы могут быть получены из ряда фосфолипидов, например, холестерина, стеариламина или фосфатидилхолинов. Другие фармацевтические композиции, подхолящие для достижения системной доставки соединения или фармацевтически приемлемой соли, включают подъязычные, буккальные и назальные лекарственные формы. Такие фармацевтические композиции обычно содержат одно или несколько растворимых веществ-наполнителей, таких как сахароза, сорбит и маннит, и связующие вещества, такие как аравийская камедь, микрокристаллическая целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза и гидроксипропилметилцеллюлоза. Также указанные композиции могут содержать глиданты, смазывающие вещества, подсластители, красители, антиоксиданты и ароматизаторы, описанные выше. Фармацевтические композиции для ингаляций обычно могут быть представлены в форме раствора, суспензии или эмульсии, которые могут быть введены в виде сухого порошка или в форме аэрозоля с использованием традиционного пропеллента (напимер, дихлордифторметан или трихлорфторметан). Указанные фармацевтические композиции также необяательно могут содержать усилитель активности. Указанный усилитель активности может быть выбран из широкого ряда молекул, действие которых различными способами направлено на усиление терапевтических эффектов или не связаны с терапевтическими эффектами соединения или его терапевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Конкретные классы усилителей активности включают уселители проникновения через кожу и усилители абсорбции. Фармацевтические композиции также могут содержать дополнительные активные агенты, которые могут быть выбраны из широкого ряда молекул, которые могут различными способами усиливать терапевтические эффекты по меньшей мре одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Такие необязательные другие активные агенты, в случае присутствия, обычно используются в указанных фармацевтических композициях в количестве от 0,01 до 15%. Некоторые варианты реализации изобретения содержат от 0,1 до 10 мас.% указанной композиции. Другие варианты реализации изобретения содержат от 0,5 до 5 мас.% указанной композиции. Также предложены упакованные фармацевтические композиции. Такие упакованные композиции включают фармацевтическую композицию, содержащую по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, и инструкцию по применению указанной композиции для лечения субъекта (обычно пациента, представляющего собой человека). Согласно некоторым вариантам реализации изобретения указанные инструкции представляют собой инструкции по применению фармацевтической композиции для лечения субъекта, страдающего от состояния или нарушения, опосредованного HDAC. Указанная упакованная фармацевтическая композиция может включать инструкцию по применению лекарственного средства; например, для пациента или лечащего врача, или в виде этикетки упакованной фармацевтической композиции. Инструкция по применению лекарственного средства может включать, например, сведения об эффективности, дозировке и способе введения, противопоказаниях и побочных эффектах, относящихся к фармацевтической композиции.

Согласно указанному выше указанное соединение или его фармацевтически приемлемая соль могут быть введены отдельно, в качестве смесей или в комбинации с другими активными агентами.

Способы, описанные в настоящей заявке, включают способы лечения болезни Хантингтона, включая лечение нарушения памяти и/или когнитивных функций, ассоциированных с болезнью Хантингтона, включающие одновременное или последовательное введение субъекту по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, и одного или более дополнительных агентов, применяемых для лечения болезни Хангтингтона, такие как, но не ограниченные указанными, Амитриптилин, Имипрамин, Дезипрамин, Нортриптилин, Пароксетин, Флуоксетин, Сертралин, Тетрабеназин, Галоперидол, Хлорпромазин, Тиоридазин, Сульприд, Кветиапин, Клозапин и Рисперидон. В способах с использованием одновременного введения указанные агенты могут быть представлены в комбинированной композиции или могут быть введены по-отдельности. Соответственно, также предложены фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение или

- 23 036965 его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, и один или более дополнительных фармацевтических агентов, применяемых для лечения болезни Хангтингтона, такие как, но не ограниченные указанными, Амитриптилин, Имипрамин, Дезипрамин, Нортриптилин, Пароксетин, Флуоксетин, Сертралин, Тетрабеназин, Галоперидол, Хлорпромазин, Тиоридазин, Сульприд, Кветиапин, Клозапин и Рисперидон. Аналогичным образом, также предложены упакованные фармацевтические композиции, содержащие фармацевтическую композицию, содержащую по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, и другую композицию, содержащую один или более дополнительных фармацевтических агентов, применямых для лечения болезни Хангтингтона, такие как, но не ограниченные указанными, Амитриптилин, Имипрамин, Дезипрамин, Нортриптилин, Пароксетин, Флуоксетин, Сертралин, Тетрабеназин, Галоперидол, Хлорпромазин, Тиоридазин, Сульприд, Кветиапин, Клозапин и Рисперидон.

Также предложены способы лечения болезни Альцгеймера, включая лечение нарушения памяти и/или когнитивного нарушения, ассоциированных с болезнью Альцгеймера, включающие одновременное или последовательное введение субъекту по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, и одного или более дополнительных агентов, применяемых для лечения болезни Альцгеймера, такие как, но не ограничивающиеся указанными, Реминил®, Когнекс®, Арисепт®, Экселон®, Акатинол®, Неотропин™, Элдеприл®, Эстроген и Клиохинол. В способах с использованием одновременного введения указанные агенты могут быть представлены в комбинированной композиции или могут быть введены по отдельности. Также предложены фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, и один или более дополнительных фармацевтических агентов, применяемых для лечения болезни Альцгеймера, такие как, но не ограничивающиеся указанными, Реминил®, Когнекс®, Арисепт®, Экселон®, Акатинол®, Неотропин™, Элдеприл®, Эстроген и Клиохинол. Аналогичным образом, также предложены упакованные фармацевтические композиции, содержащие фармацевтическую композицию, содержащую по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, и другую композицию, содержащую один или более дополнительных фармацевтических агентов, применямых для лечения болезни Альцгеймера, такие как, но не ограничивающиеся указанными, Реминил®, Когнекс®, Арисепт®, Экселон®, Акатинол®, Неотропин™, Элдеприл®, Эстроген и Клиохинол.

Также предложены способы лечения рака, включающие одновременное или последовательное введение субъекту по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, и одного или более дополнительных агентов, применяемых для лечения рака, такие как, но не ограничивающиеся указанными, следующие категории противоопухолевых агентов:

(i) другие ингибиторы клеточного цикла, механизм действия которых такой же или отличный от описанных в настоящей заявке, например, ингибиторы циклин-зависимой киназы (CDK), в частности, ингибиторы CDK2;

(ii) цитостатические агенты, такие как антиэстрогены (например, тамоксифен, торемифен, ралоксифен, дролоксифен и иодоксифен), прогестогены (например, мегестрола ацетат), ингибиторы ароматазы (например, как анастрозол, летрозол, воразол и эксеместан), антипрогестогены, антиандрогены (например, флутамид, нилутамид, бикалутамид и ципротерона ацетат), антагонисты и антагонисты LHRH (например, госелерин ацетат, лупролид), ингибиторы тестостерон-5а-дигидроредуктазы (например, финастерид), антиинвазивные агенты (например, ингибиторы металлопротеиназы, подобные маримастату, и ингибиторы функции рецептора для активатора плазминогена урокиназы) и ингибиторы функции фактора роста (такими факторами роста являются, например, фактор роста эндотелия сосудов, эпителиальный фактор роста, выделяемый из тромбоцитов фактор роста и гепатоцитный фактор роста; указанные ингибиторы включают антитела к факторам роста, антитела к рецепторам фактора роста, ингибиторы тирозинкиназы и ингибиторы серин/треонинкиназы);

(iii) антипролиферативные/антинеопластические лекарственные средства и их комбинации, используемые в онкологии, такие как антиметаболиты (например, антифолаты, подобные метотрексату, фторпиримидины, подобные 5-фторурацилу, аналоги пурина и аденозина, цитозинарабинозид); противоопухолевые антибиотики (например, антрациклины, подобные доксорубицину, дауномицину, эпирубицину и идарубицину, митомицину-С, дактиномицину, митрамицину); производные платины (например, цисплатин, карбоплатин); алкилирующие агенты (например, нитросоединение горчицы, мелфалан, хлорамбуцил, бусульфан, циклофосфамид, ифосфамид, нитрозомочевина, тиотепа); антимитотические агенты (например, винкаалкалоиды, подобные винкризитину, и таксоиды, подобные таксолу, таксотеру); ингибиторы топоизомеразы (например, эпиподофиллотоксины, подобные этопозиду и тенипозиду, амсакрину, топотекану);

(iv) антиангиогенные агенты, механизм действия которых отличен от описанных в настоящей заявке (например, рецепторные тирозинкиназы, такие как Tie-2, ингибиторы действия интегрина α_γβ₃, ангиостатин, разоксин, талидомид), и включая вещества, которые повреждают сосуды; и (v) дифференцирующие агенты (например, ретиноевая кислота и витамин D). В способах, в которых

- 24 036965 применяется одновременное введение, указанные агенты могут быть представлены в виде комбинированных композиций или могут быть введены по-отдельности. Также предложены фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, и один или более противоопухолевых агентов, описанных в настоящей заявке. Аналогичным образом, также предложены упакованные фармацевтические композиции, содержащие фармацевтичсекую композицию, содержащую по меньшей мере одно соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, и другую композицию, содержащую один или более противоопухолевый агент, описанный в настоящей заявке. При использовании в комбинации с одним или более дополнительным фармацевтическим агентом или агентами соединения, описанные в настоящей заявке, могут быть введены до, одновременно или после введения дополнительного фармацевтического агента или агентов.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения соединения или их фармацевтически приемлемые соли, описанные в настоящей заявке, вводят в сочетании с хирургическим вмешательством или лучевой терапией, необязательно в сочетании с одним или более дополнительными агентами, используемыми при лечении рака.

Дозировки соединений, описанных в настоящей заявке, зависят от различных факторов, включая среди прочего конкретный синдром, подлежащий лечению, тяжесть симптомов, путь введения, частоту дозирования, конкретное используемое соединение, эффективность, токсикологический профиль, фармакокинетический профиль соединения и наличие каких-либо вредных побочных эффектов. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, обычно вводят в таких дозировках и такими способами, которые являются обычными для ингибиторов HDAC. Например, соединение или его фармацевтически приемлемая соль, могут быть введены в одной или нескольких дозах, путем перорального введения при общей дозировке 0,001-100 мг/кг/день, например, 0,01-100 мг/кг/день, как например, 0,1-70 мг/кг/день, например 0,5-10 мг/кг/день. Единичные лекарственные формы могут содержать в целом 0,01-1000 мг по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, например 0,1-50 мг по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Для внутривенного введения указанные соединения могут быть введены в одной или нескольких дозах, в дозировке, например, 0,00150 мг/кг/день, как например, 0,001-10 мг/кг/день, например 0,01-1 мг/кг/день. Единичные лекарственные формы могут содержать, например, 0,1-10 мг по меньшей мере одного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке. Меченая форма соединения или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящей заявке, может быть использована как диагностическое средство для выявления и/или получения соединения, которое имеет функцию регулирования активности HDAC, описанной в настоящей заявке. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящей заявке, также дополнительно могут быть использованы для проверки, оптимизации и стандартизации биоисследований.

Под меченым в настоящей заявке подразумевается соединение, которое непосредственно или опосредованно было помечено меткой, которая обеспечивает обнаруживаемый сигнал, например радиоизотоп, флуоресцентная метка, фермент, антитело, частицы, такие как магнитные частицы, хемилюминисцентная метка или специфичные связанные молекулы и т.д. Специфически связанные молекулы включают пары, такие как биотин и стрептавидин, дигоксин и антидигоксин и т.д. Для специфического связывания элементов дополнительный элемент, как правило, метят молекулой, которая обеспечивает обнаружение, в соответствии с известными методиками, описанными выше. Метка может непосредственно или опосредовано обеспечивать обнаруживаемый сигнал.

Настоящее изобретение включает все изотопы атомов, встречающихся в соединениях и их фармацевтически приемлемых солях, описанных в настоящей заявке. Изотопы включают атомы, имеющие одинаковое атомное число, но разные массовые числа. Настоящее изобретение также включает любую комбинацию одного ли более атомов соединений или их фармацевтически приемлемых солей, описанных в настоящей заявке, замененных атомом, имеющим такое же атомное число, но иное массовое число. Таким примером является замещение атома, который является наиболее часто встречающимся в природе изотопом, например Ή или ¹²С, в одном из соединений ли их фармацевтически приемлемых солей, описанных в настоящей заявке, другим атомом, который не является наиболее часто встречающимся в природе изотопом, например ²Н или ³Н (вместо 1Н), или 11С, ¹³С или ¹²С (вместо ¹²С). Соединение, в котором имеет место такая замена, обычно называют изотопно-меченым. Изотопная маркировка соединений и их фармацевтически приемлемых солей, описанных в настоящей заявке, может быть осуществлена с использованием любого из множества различных способов синтеза, известных специалистам в данной области техники, которые с легкостью смогут подобрать способы синтеза и подходящие реагенты, необходимые для такой изотопной маркировки. Общеизвестные примеры изотопов водорода, не ограничиваясь указанными, включают ²Н (дейтерий) и ³Н (тритий). Изотопы углерода включают 11С, ¹³С и ¹⁴С. Изотопы азота включают ¹³N и ¹⁵N. Изотопы кислорода включают ¹⁵О, ¹⁷О и ¹⁸О. Изотоп фтора включает ¹⁸F. Изотоп серы включает ³⁵S. Изотоп хлора включает ³⁶Cl. Изотопы брома включают ⁷⁵Br, ⁷⁶Br, ⁷⁷Br и ⁸²Br. Изотопы йода включают ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I и ¹³¹I. Также предложены фармацевтические композиции, вклю

- 25 036965 чающие соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, где естественное распределение изотопов в фармацевтической композиции нарушается. Также предложены фармацевтические композиции, содержащие соединение или его фармацевтически приемлемую соль, описанные в настоящей заявке, обогащенные в одном или более положений изотопом, отличным от наиболее часто встречающегося в природе изотопа. Способы для определения таких изотопных нарушений или обогащений являются общедоступными, например, масс-спектроскопия, а для изотопов, являющихся радиоизотопами, доступны дополнительные способы, такие как радиодетекторы, используемые совместно с ВЭЖХ или газовой хроматографией (ГХ). Определенные соединения, меченные изотопами, и их фармацевтически приемлемые соли, описанные в настоящей заявке, подходят для исследований распределения в тканях соединения и/или субстрата. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения радионуклидные ³Н и/или ¹⁴С изотопы являются подходящими для таких исследований. Дополнительно замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (т.е. ²Н) может привести к получению определенных благоприятных терапевтических эффектов, возникающих в результате большей метаболической стабильности (например, увеличенное время полужизни in vivo или сниженная потребность в дозировке) и, соответственно, в определенных условиях может быть предпочтительным. Соединения, меченные изотопами и их фармацевтически приемлемые соли, описанные в настоящей заявке, как правило, могут быть получены согласно методикам, аналогичным методикам, раскрытым в Примерах ниже, путем замещения реагента, меченного изотопом, на немеченый изотопом реагент. Более того, следует понимать, что все атомы, представленные в соединениях и их фармацевтически приемлемых солях, описанных в настоящей заявке, могут представлять собой как наиболее часто встречающийся изотоп таких атомов, так и редковстречающийся радиоактивный изотоп или нерадиоактивный изотоп.

При осуществлении методик согласно способам, описанным в настоящей заявке, разумеется, следует понимать, что упоминание конкретных буферов, сред, реагентов, клеток, условий культивирования и тому подобного не предполагает ограничений, и их следует понимать как включающие все сопутствующие вещества, которые известны специалисту в данной области техники как представляющие интерес или ценность в конкретном контексте, в котором рассматривается настоящее изобретение. Например, часто можно заменить одну буферную систему или культуральную среду на другую и все равно получить схожий, если не идентичный результат. Специалисты в области техники достаточно хорошо знакомы с такими системами и методиками, чтобы без излишних экспериментов проводить такие замены, оптимально отвечающие требованиям для применения способов и методик, описанных в настоящей заявке.

Примеры

Соединения или их фармацевтически приемлемые соли, композиции и способы, описанные в настоящей заявке, дополнительно проиллюстрированы следующими неограничивающими примерами.

Следующие аббревиатуры, используемые в настоящей заявке, имеют следующие значения. Если аббревиатура не определена, ее значение соответствует общепринятому.

- 26 036965

Аббревиатуры.

АсОН уксусная кислота

Вп: бензил

ВОС или Вос: трет-бутилоксикарбонил сРг: циклопропил

DCM: дихлорметан

DIPE: диизопропиловый эфир

DIPEA: диизопропилэтиламин

DMAP: диметиламинопиридин DMF: диметилформамид

DMSO: диметилсульфоксид

EDC: 1-Этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид экв: эквиваленты

ES+: положительная электроспрей ионизация

Et₂O: диэтиловый эфир

EtOAc: этил ацетат

EtOH: этанол

FBS фетальная бычья сыворотка ч: час

HATU: (1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-Ь]пиридиний 3оксид гексафторфосфат) HBTU: Л/,Л/,Л/',Л/'-тетраметил-О-(1/7-бензотриазол-1-ил)уроний гексафторфосфат НОРО:2-гидроксипиридин-Л/-оксид ВЭЖХ: Высокоэффективная Жидкостная Хроматография /-hex: t/зо-гексан

IPA: t/зо-пропиловый спирт

ЖХМС: жидкостная хроматомасс-спектрометрия

М: масса

Me: метил

MeCN: ацетонитрил

МеОН: метанол мин: минута(ы)

Ms: метилсульфонил

ЯМР: ядерно-магнитный резонанс

Pd/C: палладиевый катализатор на углеродном носителе

Ph: фенил

ВУ: время удерживания

к.т.: комнатная температура

СЖХ: сверхкритическая жидостная хроматография

СКО: сильный катионный обмен

ТФУ: трифотруксусная кислота

ТФУА: Трифторуксусный ангидрид ТГФ: Тетрагидрофуран

Об./об. или Об./Об.: объем к объему

Названия соединений получены с помощью программного обеспечения Cambridgesoft Chemistry Cartridge (v. 9.0.0.182).

Все реакции, включающие воздухо- или влагочувствительные реагенты, осуществляли в атмосфере азота с использованием сухих растворителей и лабораторной посуды.

- 27 036965

Аналитические условия.

Аналитический способ #	Описание
Аналитический способ 1	Растворители: Ацетонитрил (градиент дальней области УФ спектра) с 0,1% (об./об.) муравьиной кислоты. Вода (высокой чистоты, полученная после очистки системой PureLab Option) с 0,1% муравьиной кислоты Колонка: Phenomenex Luna 5 мкм С18 (2),100x4,6 мм (плюс защитный картридж) Скорость потока: 2 мл/мин градиент: А: Вода/муравьиная кислота В: MeCN/ муравьиная кислота Время А% В% 0,00 95 5 3,50 5 95 5,50 5 95 5,60 95 5 6,50 95 5 Обычно инъекции составляли 2-7 мкл (концентрация ~ 0,2-1,0 мг/мл)
Аналитический способ 2	Растворители: Ацетонитрил (градиент дальней области УФ спектра) Вода (высокой чистоты, полученная после очистки системой PureLab Option) с 10 мМ бикарбоната аммония (гидрокарбоната аммония) Колонка:- Waters Xterra MS 5μ C18, 100 χ 4,6 мм (плюс защитный картридж) Скорость потока: - 2 мл/мин Градиент:- А: Вода / Бикарб В: MeCN Время А% В% 0,00 95 5 0,50 95 5 4,00 5 95 5,50 5 95 5,60 95 5 6,50 95 5 Обычно инъекции составляли 2-7 мкл (концентрация ~ 0,2-1,0 мг/мл)

- 28 036965

Аналитический способ 3

Растворители: Ацетонитрил (градиент дальней области УФ спектра) с 0,1% (об./об.) муравьиной кислоты. Вода (высокой чистоты, полученная после очистки системой PureLab Option) с 0,1% муравьиной кислоты Колонка: Hichrom АСЕ 3 C18-AR Колонка смешанного типа 100x4,6 мм Скорость потока: 1 мл/мин градиент: А: Вода / муравьиная кислота В: MeCN/ муравьиная кислота Время А% В% 0,00 98 2 3,00 98 2 12,00 0 100 15,4 0 100 15,5 98 2 17 98 2 Обычно инъекции составляли 2-10 мкл (концентрация ~ 0,2-1,0 мг/мл)

Аналитический способ 4

Растворители: Ацетонитрил (градиент дальней области УФ спектра) с 0,1% (об./об.) муравьиной кислоты. Вода (высокой чистоты, полученная после очистки системой PureLab Option) с 0,1% муравьиной кислоты Колонка: Supelco, Ascentis® Express С18 или Hichrom Halo C18, 2,7 мкм C18, 150 x 4,6 мм. Скорость потока: 1 мл/мин Градиент: А: Вода / муравьиная кислота В: MeCN/ муравьиная кислота Время А% В% 0,00 96 4 3.00 96 4 9,00 0 100 13,6 0 100 13,7 96 4 15 96 4 Обычно инъекции составляли 2-10 мкл (концентрация - 0,2-1,0 мг/мл)

Общие способы синтеза

Схема 1. Реакция сочетания амида

X = Н, алкил (наир., Me) или галоген (наир., F)

Y = СН или N

Z = Н, Me или сРг

Способ А (сочетание амида).

К раствору карбоновой кислоты (1,50 ммоль) в DCM (10 мл) при к.т. добавляли EDC (351 мг, 1,83 ммоль) и НОРО (203 мг, 1,83 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 мин с получением чистого рас- 29 036965 твора, затем добавляли амин (свободное основание или хлористоводородную соль) (1,65 ммоль) и DIPEA (1,3 мл, 7,5 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 18 ч. Смесь промывали водой, пропускали через картридж фазового сепаратора и концентрировали.

Способ В (восстановление амидов).

К раствору амида (1,30 ммоль) в диэтиловом эфире (50 мл) при -15°С в атмосфере азота по каплям добавляли алюмогидрид лития (1,30 мл, 2,6 ммоль, 2,0 М в ТГФ) в течение более 20 мин. Реакцию поддерживали при -10°С в течение 1,5 ч, а затем гасили водой (1,5 мл), 2 N NaOH (1 мл) и дополнительно водой (2 мл). Реакционную смесь нагревали до к.т. и перемешивали в течение 30 мин, затем добавляли MgSO4 и реакционную смесь фильтровали через Целит (Celite), тщательно промывали EtOAc. Фильтрат концентрировали и остаток очищали, пропуская через картридж СЖХ (5 г), элюировали 0-10% 7 М метанольным аммиаком в DCM.

Способ С (удаление Boc).

К раствору Вос-защищенного амина (0,76 ммоль) в DCM (5 мл) при 0°С в атмосфере азота по каплям добавляли 4 N HCl в диоксане (0,8 мл, 3,0 ммоль). Раствор нагревали до к.т. и перемешивали в течение 1 ч, затем концентрировали.

Схема 2. Способ замещения мезилата ~ 1 - Способ D BocHNiR^°^H * BocHN7r?^^OMS * BocHN^R^^²

Ппомежуточное соединение 1

Стадия 1. (R)-2-((трет-Бутоксикарбонил)амино)пропилметансульфонат (промежуточное соединение 1).

Раствор метансульфонилхлорида (7,29 мл, 94,2 ммоль) в сухом DCM (140 мл) по каплям добавляли в течение 1,5 ч к раствору (R)-трет-бутил (1-гидроксипропан-2-ил)карбамата (15 г, 85,6 ммоль) и триэтиламина (17,9 мл, 128,4 ммоль) в DCM (300 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, затем 1 ч при к.т., перед промыванием (300 мл), NaHCO₃ (300 мл) и солевым раствором (200 мл). Органические вещества пропускали через фазовый сепаратор и концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения в виде твердого вещества оранжево-розового цвета (21,5 г, 99%).

Способ D.

Амин (7,12 ммоль) добавляли к промежуточному соединению 1 (900 мг, 3,56 ммоль) и карбонату цезия (3,48 г, 10,7 ммоль) в DMF (8 мл) и полученную смесь перемешивали при 65°С в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т. и фильтровали через целит, промывали МеОН. Фильтрат концентрировали и остаток очищали, пропуская через картридж СЖХ (5 г), элюировали 0-10% 7 М метанольным аммиаком в DCM.

(R)-1-((S)-2-Метилпирролидин-1-ил)пропан-2-амин дигидрохлорид (промежуточное соединение 2)

Пплмежтгтчнле рпртинрнир 2

Стадия 1. трет-Бутил ((R)-1-((S)-2-метилпирролидин-1-ил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)аминопропионовой кислоты (1,14 г, 6,04 ммоль) и (S)-2-метилпирролидина (565 мг, 6,65 ммоль) получали титульное соединение в виде масла желтого цвета, которое поступало на следующую стадию в виде неочищенного продукта.

Стадия 2. трет-Бутил ((R)-1-((S)-2-метилпирролидин-1-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В из трет-бутил ((R)-1-((S)-2-метилпирролидин-1-ил)-1-оксопропан-2ил)карбамата (1,55 г, 6,04 ммоль) получали титульное соединение в виде бесцветного масла (1,43 г, 97%).

Стадия 3. (R)-1-((S)-2-Метилпирролидин-1-ил)пропан-2-амин дигидрохлорид (промежуточное соединение 2).

В соответствии со способом С из трет-бутил ((R)-1-((S)-2-метилпирролидин-1-ил)пропан-2ил)карбамата (1,43 г, 5,88 ммоль) получали титульное соединение в виде бесцветного масла (850 мг, 81%).

- 30 036965

Пример 1. (2S)-2-Метил-1-((R)-2-(3-метил-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамидо)пропил)пирролидин-1 -ий формиат

Стадия 1. (Z)-4-(N'-Гидроксикарбамимидоил)-3-метилбензойная кислота.

К перемешиваемому раствору 4-циано-3-метилбензойной кислоты (1,00 г, 6,21 ммоль) в EtOH (30 мл) добавляли NH₂OH-HCl (604 мг, 8,70 ммоль) и КОН (1,04 г, 18,6 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 17 ч, затем нейтрализовали 1 М НС1(_водн) и экстрагировали в EtOAc (3x25 мл). Объединенные органические слои высушивали (MgSO₄) и концентрировали с получением титульного соединения в виде твердого вещества желтого цвета (1,3 г, 108%).

Стадия 2. 3-Метил-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойная кислота.

К перемешиваемому раствору (Z)-4-(N'-гидроксикарбамимидоил)-3-метилбензойной кислоты (1,2 г, 6,21 ммоль) в ТГФ (30 мл) добавляли ТФУА (1,29 мл, 9,32 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 ч, после указанного времени добавляли 5 дополнительных экв. ТФУА. После дополнительного перемешивания в течение 2 ч, при помощи ЖХМС определяли завершение реакции. Смесь выливали в ледяную воду и подкисляли до pH 4 при помощи 1 М НС1(_водн), а затем экстрагировали в EtOAc (3x30 мл). Объединенные органические слои высушивали (MgSO4) и концентрировали. Путем очистки с помощью колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование i-hex [+3% АсОН] до 4:1 i-hex: EtOAc [+3% АсОН]) получали титульное соединение в виде твердого вещества серо-белого цвета. ЖХМС (ES+) в соответствии с целевым соединением (М+Н)⁺.

Стадия 3. (2S)-2-Метил-1 -((R)-2-(3 -метил-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамидо)пропил)пирролидин-1-ий формиат.

В соответствии со способом А из 3-метил-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (490 мг, 1,80 ммоль) и промежуточного соединения 2 (386 мг, 2,70 ммоль). Путем очистки с помощью обращено-фазовой хроматографии получали титульное соединение в виде смолы оранжевого цвета (65 мг, 9%). ЖХМС (ES+) 397 (М+Н)⁺, ВУ 2,85 мин (аналитический способ 1). Ή ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,40 (1Н, d, J = 8,3 Гц), 8,17 (1Н, s), 8,04 (1Н, d, J = 8,2 Гц), 7,92 (1H,s), 7,88-7,85 (1Н, m), 4,19-4,10 (1Н, m), 3,16-3,10 (1Н, m), 2,78-2,67 (1Н, m), 2,65 (3Н, s), 2,42-2,33(1Н, m), 2,29-2,15 (2Н, m), 1,93-1,83 (1Н, m), 1,72-1,62 (2Н, m), 1,36-1,25 (1Н, m), 1,19 (3Н, d, J = 6,7 Гц), 1,05 (3Н, d, J = 6,0 Гц). NH⁺ не наблюдали.

Пример ил)бензамид

2.

№(2-(3-Азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-

Стадия 1. N-(2-Гидроксиэтил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (1,5 г, 5,8 ммоль) и 2-аминоэтанола (420 мкл, 6,96 ммоль) получали титульное соединение в виде твердого вещества белого цвета (938 мг, 54%). ЖХМС (ES+) в соответствии с целевым соединением (М+Н)⁺.

Стадия 2. N-(2-Оксоэтил)-4-(5 -(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамид.

К суспензии N-(2-гидроксиэтил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида (938 мг, 3,11 ммоль) в DCM (50 мл) добавляли реагент Десс-Мартина (1,98 г, 4,67 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 66 с и затем гасили МеОН (15 мл). Смесь перемешивали в течение 15 мин и затем концентрировали на силикагеле. Путем очистки с помощью колоночной хроматографии (i-hex до EtOAc/i-hex (1:1)) получали титульное соединение (450 мг, 48%).

Стадия 3. N-(2-((1R,5S)-3-Азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол3-ил)бензамид.

К перемешиваемому раствору N-(2-оксоэтил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамида

- 31 036965 (87 мг, 0,4 ммоль) в DCM:AcOH (10:1, 4 мл) добавляли 3-азабицикло[3.2.1]октан (70 мг, 0,48 ммоль) и PS-триэтиламмоний цианоборгидрид (200 мг, 0,8 ммоль). Реакционную смесь встряхивали в течение 4 ч, а затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Путем очистки с помощью препаративной ВЭЖХ получали титульное соединение. ЖХМС (ES+) 395 (М+Н)⁺, ВУ 2,75 мин (аналитический способ 1); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,55-8,50 (1Н, m), 8,17 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 8,04 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 3,40-3,35 (2Н, m), 2,72-2,66 (2Н, m), 2,46 (2Н, dd, J = 6,8, 6,8 Гц), 2,09-2,03 (4Н, m), 1,60-1,51 (2Н, m), 1,50-1,38 (3Н, m), 1,31 (1Н, d, J = 10,7 Гц).

3.

Пример ил)бензамид (R)-N-(1-(Изоиндолин-2-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-

Стадия 1. (R)-трет-Бутил (1-(изоиндолин-2-ил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислоты (3,78 ммоль) и изоиндолина (4,16 ммоль). Путем очистки с помощью колоночной хроматографии (градиентное элюирование, 0-100% EtOAc в i-hex) получали титульное соединение в виде смолы бледно-желтого цвета (1,01 г, 87%, чистота 60%), которое использовали далее без дополнительной очистки.

Стадия 2. (R)-трет-Бутил (1-(изоиндолин-2-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В из (R)-трет-бутил (1-(изоиндолин-2-ил)-1-оксопропан-2ил)карбамата (3,78 ммоль). Титульное соединение получали в виде смолы желтого цвета (0,84 г, 80%).

Стадия 3. (R)-1-(Изоиндолин-2-ил)пропан-2-амин дигидрохлорид.

В соответствии со способом С из (R)-трет-бутил (1-(изоиндолин-2-ил)пропан-2-ил)карбамата (3,04 ммоль). Титульное соединение получали в виде пены темно-зеленого цвета (655 мг, 86%).

Стадия 4. (R)-N-(1-(Изоиндолин-2-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамид.

В соответствии со способом А из (R)-1-(изоиндолин-2-ил)пропан-2-амин дигидрохлорида (2,53 ммоль) и 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (2,78 ммоль). Путем очистки с помощью препаративной ВЭЖХ получали титульное соединение в виде твердого вещества бледнокоричневого цвета (60 мг, 6%). ЖХМС (ES+) 417 (М+Н)⁺, ВУ 9,72 мин (аналитический способ 3); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-de) 8,50 (1Н, d, J = 8,2 Гц), 8,17 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 8,08 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 7,25-7,16 (4Н, m), 4,33-4,24 (1Н, m), 3,98-3,88 (4Н, m), 2,89 (1Н, dd, J = 7,8, 11,9 Гц), 2,73 (1Н, dd, J = 6,4, 11,9 Гц), 1,23 (3Н, d, J = 6,7 Гц).

Пример 4. N-((2R)-1-(3-Азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3 -ил)бензамид

Стадия 1. 3-Бензил-3-азабицикло[3.1.0]гексан.

3-Бензил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2,4-дион (1,95 г, 9,69 ммоль, CAS No. 73799-63-0) суспендировали в ТГФ (11 мл) и охлаждали до 0°С в атмосфере азота. При перемешивании в течение нескольких минут добавляли LiAlH₄ (2 M в ТГФ, 19,5 мл, 39,0 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником и оставляли для перемешивания в течение 18 ч. Затем реакционную смесь гасили медленным добавлением воды (3 мл), 2 N NaOH (4 мл) и дополнительно воды (8 мл). Добавляли MgSO₄ и смесь перемешивали в течение 30 мин, затем фильтровали через Целит и промывали EtOAc. Растворите ли удаляли при пониженном давлении с получением титульного соединения в виде маслянистого твердого вещества желтого цвета (1,38 г, 82%). Указанное соединение использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. 3-Азабицикло[3.1.0]гексан гидрохлорид.

3-Бензил-3-азабицикло[3.1.0]гексан (1,1 г, 6,35 ммоль) растворяли в метаноле (40 мл) и добавляли 10% Pd/C (300 мг, 0,282 ммоль). Смесь встряхивали в атмосфере газообразного водорода (2 бар) в течение 18 ч при к.т. Реакционную смесь фильтровали через Целит, подкисляли 4 N HCl в диоксане (2,38 мл, 9,53 ммоль) и концентрировали с получением титульного соединения в виде твердого вещества коричневого цвета (680 мг, 90%), использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

- 32 036965

Стадия 3. трет-Бутил ((2R)-1-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат.

3-Азабицикло[3.1.0]гексан гидрохлорид (670 мг, 5,6 ммоль) растворяли в DMF (15 мл) и добавляли HATU (2,55 г, 6,70 ммоль) и Boc-D-аланин (1,06 г, 5,60 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 10 мин. Затем добавляли DIPEA (2,92 мл, 16,8 ммоль) и смесь оставляли для перемешивания при к.т. в течение 18 ч, затем разбавляли EtOAc (20 мл), промывали 1 М HCl (15 мл), насыщенным NaHCO₃ (15 мл) и солевым раствором (15 мл). Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и фильтрат концентрировали с получением масла желтого цвета. Путем очистки с помощью колоночной хроматографии (градиентное элюирование, i-hex до 60% EtOAc в i-hex) получали титульное соединение в виде прозрачного масла (380 мг, 27%).

Стадия 4. трет-Бутил ((2R)-1-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В из трет-бутил ((2R)-1-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)-1оксопропан-2-ил)карбамата (380 мг, 1,50 ммоль) получали титульное соединение в виде масла желтого цвета (290 мг, 80%). Указанное соединение использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 5. (2R)-1-(3-Азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-амин.

В соответствии со способом С из трет-бутил ((2R)-1-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2ил)карбамата (290 мг, 1,20 ммоль). Затем реакционную смесь концентрировали с получением масла коричневого цвета, которое очищали с помощью картриджа СЖХ, элюировали MeOH/DCM (1:1) и затем 0,5 N NH₃ в МеОН с получением титульного соединения в виде масла желтого цвета (110 мг, 65%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 6. N-((2R)-1-(3-Азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3 -ил)бензамид.

В соответствии со способом А из (2R)-1-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-амина (83 мг, 0,59 ммоль) и 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (153 мг, 0,59 ммоль). Путем очистки с помощью препаративной ВЭЖХ получали титульное соединение в виде твердого вещества серо-белого цвета. ЖХМС (ES+) 381 (М+Н)⁺, ВУ 2,61 мин (аналитический способ 1); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, CDCl₃) 8,19(2H, td, J = 1,8, 8,4 Гц), 7,92 (2H, td, J = 1,8, 8,5 Гц), 6,97 (1H, brs), 4,08 (1H, brs), 3,10 (1H, d, J = 8,8 Гц), 3,03 (1H, d, J = 8,8 Гц), 2,74 (1H, t, J = 10,3 Гц), 2,58 (1H, d, J = 8,4 Гц), 2,52 (1H, dd, J = 5,2, 12,3 Гц), 2,41 (1H, d, J = 8,1 Гц), 1,42-1,39 (2H, m), 1,31 (3H, d, J = 6,4 Гц), 0,65 (1H, dd, J = 3,9, 8,0 Гц), 0,40 (1H, dt, J = 4,3, 7,7 Гц).

Пример 5. (S)-N-(1-Циклопропил-2-(пирролидин-1-ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол3-ил)бензамид

I - ϊϋ- Y о

BocHNisbCO₂H BocHNWY^N^X BocHNis^¹⁴^

О

Стадия 1. (S)-трет-Бутил (1-циклопропил-2-оксо-2-(пирролидин-1-ил)этил)карбамат.

В соответствии со способом А из (S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2-циклопропилуксусной кислоты (1,0 г, 4,65 ммоль) и пирролидина (0,58 мл, 6,98 ммоль) получали титульное соединение в виде бесцветного масла, которое поступало на следующую стадию без дополнительной очистки.

Стадия 2. (S)-трет-Бутил (1-циклопропил-2-(пирролидин-1-ил)этил)карбамат.

В соответствии со способом В из (S)-трет-бутил (1-циклопропил-2-оксо-2-(пирролидин-1ил)этил)карбамата (1,53 г, 5,7 ммоль) получали титульное соединение, которое использовали без дополнительной очистки.

Стадия 3. (S)-1-Циклопропил-2-(пирролидин-1-ил)этанамин.

В соответствии со способом С из (S)-трет-бутил (1-циклопропил-2-(пирролидин-1ил)этил)карбамата (920 мг, 3,62 ммоль). Свободный амин выделяли путем растворения остатка, полученного после водной обработки в DCM/MeOH (1:1, 5 мл), и пропуская его через картридж СЖХ (элюирование DCM:MeOH:7 M NH₃ в МеОН (1:1:0,05). Титульное соединение получали в виде масла оранжевого цвета (390 мг, 70%).

Стадия 4. (S)-N-( 1 -Циклопропил-2-(пирролидин-1 -ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 ил)бензамид.

В соответствии со способом А из (S)-1-циклопропил-2-(пирролидин-1-ил)этанамина (134 мг, 0,87 ммоль) и 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (150 мг, 0,58 ммоль). ЖХМС (ES+) 395 (М+Н)⁺, ВУ 2,67 мин (аналатический способ 1). 1Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,42 (1Н, d, J = 8,7 Гц), 8,15 (2Н, d, J = 8,4 Гц), 8,05 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 3,71-3,63 (1Н, m), 2,80 (1Н, dd, J = 9,1, 12,1 Гц), 2,52-2,49 (3Н, m), 2,48-2,40 (2Н, m), 1,62 (4H,s), 1,02-0,93 (1Н, m), 0,50-0,43 (1Н, m), 0,36-0,29 (2Н,

- 33 036965

m), 0,24-0,17 (1Н, m).

Пример 6. (R)-N-( 1 -Циклопропил-2-(пирролидин-1 -ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол3-ил)бензамид

Стадия 1. (R)-трет-Бутил (1-циклопропил-2-оксо-2-(пирролидин-1-ил)этил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2-циклопропилуксусной кислоты (1,64 г, 7,62 ммоль) и пирролидина (0,95 мл, 11,4 ммоль) получали титульное соединение в виде бесцветного масла, которое поступало на следующую стадию без дополнительной очистки.

Стадия 2. (R)-трет-Бутил (1-циклопропил-2-(пирролидин-1-ил)этил)карбамат.

В соответствии со способом В из (R)-трет-бутил (1-циклопропил-2-оксо-2-(пирролидин-1ил)этил)карбамата (1,02 г, 3,81 ммоль) получали титульное соединение, которое использовали без дополнительной очистки.

Стадия 3. (R)-1 -Циклопропил-2-(пирролидин-1 -ил)этанамин.

В соответствии со способом С из (R)-трет-бутил (1-циклопропил-2-(пирролидин-1ил)этил)карбамата (860 мг, 3,39 ммоль). Свободный амин выделяли путем растворения остатка, полученного после водной обработки в DCM/MeOH (1:1,5 мл), и пропуская его через картридж СЖХ (элюировали DCM:MeOH:7 M NH₃ в МеОН (1:1:0.05). Титульное соединение получали в виде масла оранжевого цвета (190 мг, 36%).

Стадия 4. (R)-N-(1 -Циклопропил-2-(пирролидин-1 -ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол3-ил)бензамид.

В соответствии со способом А из (R)-1-циклопропил-2-(пирролидин-1-ил)этанамина (190 мг, 1,23 ммоль) и 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (212 мг, 0,82 ммоль). ЖХМС (ES+) 395 (М+Н)⁺, ВУ 2,69 мин (аналитический способ 1). Ή ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,42 (1Н, d, J = 8,7 Гц), 8,15 (2Н, d, J = 8,4 Гц), 8,05 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 3,71-3,63 (1Н, m), 2,80 (1Н, dd, J = 9,1, 12,1 Гц), 2,52-2,49 (3Н, m), 2,48-2,40 (2Н, m), 1,62 (4H,s), 1,02-0,93 (1Н, m), 0,50-0,43 (1Н, m), 0,36-0,29 (2Н, m), 0,24-0,17 (1Н, m).

Пример 7. (R)-N-(1-(3,4-Дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3 -ил)бензамид

Стадия 1. (R)-трет-Бутил (1-(3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислоты (720 мг, 3,78 ммоль) и 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин (0,52 мл, 4,016 ммоль). Путем очистки с помощью колоночной хроматографии (градиентное элюирование, от 0 до 100% EtOAc в i-hex) получали титульное соединение в виде смолы бледно-желтого цвета (1,01 г, 87%).

Стадия 2. (R)-трет-Бутил (1-(3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В из (1-(3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-1-оксопропан-2ил)карбамата (1,01 г, 3,31 ммоль) получали титульное соединение в виде смолы бледно-желтого цвета (0,86 мг, 89%).

Стадия 3. (R)-1-(3,4-Дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пропан-2-амин дигидрохлорид.

В соответствии со способом С из (R)-трет-бутил (1-(3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пропан-2ил)карбамата (860 мг, 2,96 ммоль) получали титульное соединение в виде стекла бледно-оранжевого цвета (788 мг, >99%). Указанное соединение использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4. (R)-N-(1-(3,4-Дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты

- 34 036965 (636 мг, 2,46 ммоль) и (R)-1-(3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пропан-2-амин дигидрохлорида (778 мг, 2,96 ммоль) и DIPEA (2,2 мл, 12,3 ммоль) добавляли и перемешивали смесь в течение 18 ч. Смесь промывали водой, пропускали через картридж фазового сепаратора и концентрировали с получением неочищенного продукта. Указанный остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ и затем дополнительно очищали с помощью хиральной СЖХ с получением титульного соединения в виде твердого вещества белого цвета. ЖХМС (ES+) 431 (М+Н)⁺, ВУ 2,80 мин (аналитический способ 1); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d6) 8,47 (1Н, d, J = 8,2 Гц), 8,16 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 8,06 (2Н, d, J = 8,7 Гц), 7,12-7,04 (4Н, m), 4,40-4,32(1Н, m), 3,63 (2Н, s), 2,82-2,62 (6Н, m), 1,22 (3Н, d, J = 6,5 Гц).

Пример 8. (R)-N-( 1 -(3-Фенилазетидин-1 -ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 ил)бензамид

Стадия 1. (R)-трет-Бутил (1-оксо-1-(3-фенилазетидин-1-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислоты (649 мг, 3,41 ммоль) и 3-фенилазетидина (0,5 г, 3,75 ммоль). Путем очистки с помощью колоночной хроматографии (градиентное элюирование, от 0 до 100% EtOAc/i-hex) получали титульное соединение в виде бесцветной смолы (0,87 г, 83%).

Стадия 2. (R)-трет-Бутил (1-(3-фенилазетидин-1-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В из (R)-трет-бутила (1-оксо-1-(3-фенилазетидин-1-ил)пропан-2ил)карбамата (0,87 г, 2,86 ммоль). Путем очистки с помощью колоночной хроматографии (градиентное элюирование, от 0 до 100% EtOAc/i-hex) получали титульное соединение в виде бесцветного масла (370 мг, 44%).

Стадия 3. (R)-1-(3-Фенилазетидин-1-ил)пропан-2-амин дигидрохлорид.

В соответствии со способом С из (R)-трет-бутил (1-(3-фенилазетидин-1-ил)пропан-2-ил)карбамата (370 мг, 1,27 ммоль) получали титульное соединение в виде твердого вещества серо-белого цвета (337 мг, >99%). Вещество поступало на следующую стадию без дополнительной очистки.

Стадия 4. (R)-N-( 1 -(3-Фенилазетидин-1 -ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 ил)бензамид.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (252 мг, 0,98 ммоль) и (R)-1-(3-фенилазетидин-1-ил)пропан-2-амин дигидрохлорида (348 мг, 1,07 ммоль). После обработки неочищенное вещество трижды перекристаллизовывали из диизопропилового эфира с получением титульного соединения в виде твердого вещества белого цвета (71 мг, 16%). ЖХМС (ES+) 431 (М+Н)⁺, ВУ 2,83 мин (аналитический способ 1); 1Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,42 (1Н, d, J = 8,0 Гц), 8.17 (2Н, d, J = 8.4 Гц), 8,07 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 7,35-7,28 (4Н, m), 7,23-7,18 (1Н, m), 4,11-4,00(1Н, m), 3,75-3,57 (3Н, m), 3,20-3,07 (2Н, m), 2,68-2,57 (1Н, m), 1,18 (3Н, d, J = 6,8 Гц). Один протон затемнен пиком DMSO.

Примеры 9 и 10. D1: N-((R)-1-((аbs)-3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид и D2: N-((R)-1 -((abs)-3 -(дифторметокси)пиперидин-1 ил)пропан-2-ил)-4-(5 -(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамид

Стадия 1. трет-Бутил ((2R)-1-(3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислоты (284 мг, 1,50 ммоль) и (±)-3-(дифторметокси)пиперидина (250 мг, 1,65 ммоль). Титульное соединение получали в виде смолы желтого цвета (424 мг, 87%) и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. трет-Бутил ((2R)-1-(3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В из трет-бутил ((2R)-1-(3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)-1оксопропан-2-ил)карбамат (420 мг, 1,30 ммоль).

Титульное соединение получали в виде смолы бледно-желтого цвета (234 мг, 58%).

- 35 036965

Стадия 3. (2R)-1-(3-(Дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-амин дигидрохлорид.

В соответствии со способом С из трет-бутил ((2R)-1-(3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2ил)карбамата (234 мг, 0,76 ммоль). Титульное соединение получали в виде пены бледно-желтого цвета (210 мг, 98%).

Стадия 4. D1: N-((R)-1-((abs)-3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамид и D2: N-((R)-1 -((abs)-3-(дифторметокси)пиперидин-1 -ил)пропан-2-ил)-4(5 -(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамид.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (178 мг, 0,69 ммоль) и (2R)-1-(3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-амин дигидрохлорида (210 мг, 0,76 ммоль). Неочищенное вещество очищали при помощи препаративной ВЭЖХ и хиральной препаративной СЖХ (LUX Cellulose-4, 5/95 IPA/CO2, 5,0 мл/мин, 120 бар, 40°С с получением титульных соединений в виде твердых веществ белого цвета. D1: N-((R)-1-((abs)-3-(дифторметокси)пиперидин-1ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид (50 мг, 16%): ЖХМС (ES+) 449 (М+Н)+, ВУ 2,74 мин (аналитический способ 1); СЖХ ВУ 4,48 мин; 1Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d6) 8,40 (1Н, d, J = 8,3 Гц), 8,17 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 8,05 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 6,72 (1Н, t, J = 76,3 Гц), 4,27-4,16 (1Н, m), 4,10-4,01 (1Н, m), 2,91 (1Н, dd, J = 3,0, 10,4 Гц), 2,68-2,60 (1Н, m), 2,35 (1Н, dd, J = 7,0, 12,4 Гц), 2,19-2,05 (2Н, m), 1,91-1,82 (1Н, m), 1,71-1,63 (1H, m), 1,47-1,27 (2Н, m), 1,16 (3Н, d, J = 6,5 Гц). 1 протон затемнен пиком DMSO. D2: N-((R)-1-((abs)-3-(дифторметокси)пиперидин-1-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид (53 г, 17%): ЖХмС (ES+) 449 (М+Н)+, ВУ 2,72 мин (аналитический способ 1); СЖХ ВУ 7,49 мин; 1Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d6) 8,40 (1Н, d, J = 8,2 Гц), 8,17 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 8,05 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 6,73 (1Н, t, J = 76,4 Гц), 4,27-4,16 (1Н, m), 4,11-4,02 (1Н, m), 2,92(1Н, dd, J = 3,3, 10,6 Гц), 2,72-2,67 (1Н, m), 2,35 (1H,dd,J = 6,7, 12,5 Гц), 2,15-2,02 (2Н, m), 1,92-1,83 (1Н, m), 1,70-1,62 (1Н, m), 1,46-1,25 (2Н, m), 1,16 (3Н, d, J = 6,7 Гц). 1 протон затемнен пиком DMSO.

Пример 11. (R)-N-(1-(5-Азаспиро[2.5]октан-5-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамид

Стадия 1. (R)-трет-Бутил (1-оксо-1-(5-азаспиро[2.5]октан-5-ил)пропан-2-ил)карбамат.

К перемешиваемому раствору (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислоты (648 мг, 3,43 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли HBTU (1,43 г, 3,73 ммоль), 5-азаспиро[2.5]октан гидрохлорид (500 мг, 3,43 ммоль) и DIPEA (3,16 мл, 17,1 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Смесь промывали водой, пропускали через картридж фазового сепаратора и концентрировали с получением титульного соединения (1,01 г), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. (R)-трет-Бутил (1-(5-азаспиро[2.5]октан-5-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В из (R)-трет-бутил (1-оксо-1-(5-азаспиро[2.5]октан-5-ил)пропан-2ил)карбамата (1,01 г, 3,58 ммоль) получали титульное соединение, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3. (R)-1-(5-Азаспиро[2.5]октан-5-ил)пропан-2-амин дигидрохлорид.

В соответствии со способом С из (R)-трет-бутил (1-(5-азаспиро[2.5]октан-5-ил)пропан-2ил)карбамата (866 мг, 2,29 ммоль) получали титульное соединение, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4. (R)-N-(1-(5-Азаспиро[2.5]октан-5-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол3-ил)бензамид.

Используя тот же способ, что и на стадии 1, из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензойной кислоты (590 мг, 2,29 ммоль) и (R)-1-(5-азаспиро[2.5]октан-5-ил)пропан-2-амин дигидрохлорида (770 мг, 2,29 ммоль). Титульное соединение получали в виде твердого вещества белого цвета. ЖХМС (ES+) 409 (М+Н)+, ВУ 3,58 мин (аналитический способ 2); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,38 (1Н, d, J = 8,2 Гц), 8,19 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 8,07 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 4,24-4,16 (1Н, m), 2,49-2,41 (2Н, m), 2,29 (11-1, dd, J = 7,2, 12,2 Гц), 2,18 (2H, dd, J = 11,8, 17,5 Гц), 1,63-1,57 (2H, m), 1,32-1,22 (3Н, m), 1,17 (3Н, d, J = 6,5 Гц), 0,31-0,22 (4H, m).

- 36 036965

Пример 12. (R)-N-(1-(6-Азаспиро[2.5]октан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамид

Стадия 1. (R)-трет-Бутил (1-оксо-1-(6-азаспиро[2.5]октан-6-ил)пропан-2-ил)карбамат.

Колбу загружали (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислотой (250 мг, 1,32 ммоль), 6-азаспиро[2.5]октаном (150 мг, 1,32 ммоль), HATU (602 мг, 1,60 ммоль) и безводным DMF (5 мл). Реакционную смесь перемешивали до образования бледно-желтого раствора и затем добавляли DIPEA (350 мкл, 2,0 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (25 мл), промывали 1 М HCl (15 мл), насыщ. NaHCO₃ (15 мл), затем солевым раствором (15 мл). Органические вещества высушивали (MgSO₄), фильтровали и концентрировали. Путем очистки с помощью колоночной хроматографии (градиентное элюирование, от 0 до 66% EtOAc в i-hex) получали титульное соединение в виде бесцветного масла (339 мг, 91%), которое затвердевает при отстаивании.

Стадия 2. (R)-трет-Бутил (1-(6-азаспиро[2.5]октан-6-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В (с использованием ТГФ вместо Et₂O) из (R)-трет-бутил (1-оксо-1-(6азаспиро[2.5]октан-6-ил)пропан-2-ил)карбамата (320 мг, 1,13 ммоль) получали титульное соединение в виде масла бледно-желтого цвета (260 мг, 86%).

Стадия 3. (R)-1-(6-Азаспиро[2.5]октан-6-ил)пропан-2-амин.

К раствору (R)-трет-бутил (1-(6-азаспиро[2.5]октан-6-ил)пропан-2-ил)карбамата (220 мг, 0,82 ммоль) в безводном DCM (10 мл) добавляли ТФУ (1,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 48 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и пропускали через картридж СЖХ (элюирование МеОН:7 М NH₃ в МеОН (4:1)). Основные фракции концентрировали с получением титульного соединения в виде масла коричневого цвета (120 мг, 85%).

Стадия 4. (R)-N-(1-(6-Азаспиро[2.5]октан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол3-ил)бензамид.

Согласно тому же способу, который использовали на стадии 1, из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (124 мг, 0,48 ммоль) и (R)-1-(6-азаспиро[2.5]октан-6-ил)пропан-2амина (80 мг, 0,48 ммоль). Путем очистки с помощью перпаративной ВЭЖХ получали титульное соединение в виде бесцветного твердого вещества. ЖХМС (ES+) 409 (М+Н)⁺, BY 2,11 мин (аналитический способ 1); 1Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d6) 8,16 (1Н, d, J = 8,1 Гц), 7,96-7,90 (2 Н, m), 7,82 (2 Н, d, J = 8,3 Гц), 4,00 (1Н, t, J = 7,2 Гц), 3,10 (4 Н, br s), 2,30-2,20 (5 Н, s), 2,14-2,08 (1Н, m), 1,08 (4 Н, s), 0,93 (3 Н, t, J = 6,6 Гц).

Пример ил)бензамид

13.

(R)-N-( 1 -(Азепан-1 -ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 „ „.AzOMs __►

BocHNW^ BocHN

Промежуточное соединение 1

Стадия 1. (R)-трет-Бутил (1-(азепан-1-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом D из промежуточного соединения 1 (1,0 г, 3,95 ммоль) и азепана (890 мкл, 7,91 ммоль) получали титульное соединение в виде масла желтого цвета (489 мг, 48%).

Стадия 2. (R)-1-(Азепан-1-ил)пропан-2-амин.

К раствору (R)-трет-бутил (1-(азепан-1-ил)пропан-2-ил)карбамата (489 мг, 1,91 ммоль) в безводном DCM (40 мл) добавляли ТФУ (0,8 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и пропускали через картридж СЖХ (элюирование МеОН:7 М NH₃ в МеОН (4:1)). Основные фракции концентрировали с получением титульного соединения в виде масла желтого цвета (310 мг, >99%).

Стадия 3. (R)-N-( 1 -(Азепан-1 -ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамид.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (427 мг, 1,65 ммоль) и (R)-1-(азепан-1-ил)пропан-2-амина (310 мг, 1,91 ммоль). Путем очистки с помощью препаративной ВЭЖХ и СЖХ получали титульное соединение в виде твердого вещества белого цвета (45 мг). ЖХМС (ES+) 397 (М+Н)⁺, ВУ 2,70 мин (аналитический способ 1); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d6) 8,35 (1Н, d, J = 8,2 Гц), 8,17 (2Н, d, J = 8,7 Гц), 8,05 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 4,17-4,09 (1Н, m), 2,68-2,59 (5Н, m), 2,45 (1Н, dd, J = 7,0, 12,4 Гц), 1,58-1,51 (8Н, m), 1,16 (3Н, d, J = 6,7 Гц).

- 37 036965

Пример 14. (R)-N-( 1 -(1 - Азаспиро [3.3]гептан-1 -ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид

Стадия 1. (R)-трет-Бутил (1-(1-азаспиро[3.3]гептан-1-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом D из промежуточного соединения 1 (326 мг, 1,29 ммоль) и 1азаспиро[3.3]гептана (250 мг, 2,53 ммоль) получали титульное соединение (250 мг), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. 1-((R)-2-Аминопропил)-1-aзaспиро[3.3]гептaн-1-ий 2,2,2-трифторацетат.

К раствору (R)-трет-бутил (1-(1-азаспиро[3.3]гептан-1-ил)пропан-2-ил)карбамата (0,25 мг, 1,00 ммоль) в безводном DCM (2 мл) добавляли ТФУ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения (268 мг), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3. (R)-N-( 1-(1 -Азаспиро[3.3]гептан-1 -ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид.

Колбу заполняли (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислотой (260 мг, 1,00 ммоль), 1-((R)-2-аминопропил)-1-азаспиро[3.3]гептан-1-ий 2,2,2-трифторацетатом (268 мг, 1,00 ммоль), HATU (690 мг, 1,5 ммоль), DMAP (30 мг) и безводным DMF (5 мл). Реакционную смесь перемешивали до образования раствора бледно-желтого цвета, затем добавляли DIPEA (1,5 мл, 72,0 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли DCM, промывали водой, пропускали через фазовый сепаратор, фильтровали и концентрировали. Путем очистки с помощью препаративной ВЭЖХ и СЖХ получали титульное соединение в виде твердого вещества белого цвета (12 мг). ЖХМС (ES+) 395 (М+Н)⁺, ВУ 2,65 мин (аналитический способ 1); Ή ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,42 (1Н, d, J = 8,1 Гц), 8,21 (2Н, d, J = 8,6 Гц), 8,11 (2Н, d, J = 8,6 Гц), 4,11-4,02 (1Н, m), 3,15-3,08 (2Н, m), 2,63 (1Н, dd, J = 6,4, 11,7 Гц), 2,49 (1Н, dd, J = 7,1, 11,9 Гц), 2,27-2,09 (4Н, m), 1,90 (2Н, m), 1,64-1,56 (2Н, m), 1,21 (3Н, d, J = 6,8 Гц).

Пример 15. (R)-N-( 1 -(5-Азаспиро[2.4]гептан-5-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид

F₃C

Стадия 1. (R)-трет-Бутил (1-(5-азаспиро[2.4]гептан-5-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом D из промежуточного соединения 1 (237 мг, 0,90 ммоль) и 5азаспиро[2.4]гептан-5-ий хлорида (250 мг, 1,80 ммоль) получали титульное соединение (100 мг), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. 5-((R)-2-Аминопропил)-5-азаспиро[2.4]гептан-5-ий 2,2,2-трифторацетат.

Стадия 3. (R)-N-( 1-(1 -Азаспиро [3.3]гептан-1 -ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид.

Колбу заполняли (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислотой (260 мг, 1,00 ммоль), (R)-1-(1-азаспиро[3.3]гептан-1-ил)пропан-2-амином (268 мг, 1,00 ммоль), HATU (690 мг, 1,5 ммоль), DMAP (30 мг) и безводным DMF (5 мл). Реакционную смесь перемешивали до образования раствора бледно-желтого цвета и затем добавляли DIPEA (1,5 мл, 72,0 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли DCM, промывали водой, пропускали через фазовый сепаратор, фильтровали и концентрировали. Путем очистки с помощью препаративной ВЭЖХ и SFC получали титульное соединение в виде твердого вещества белого цвета (12 мг). ЖХМС (ES+) 395 (М+Н)⁺, ВУ 2,65 мин (аналитический способ 1); Ή ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,48 (1Н, d, J = 8,1 Гц), 8,22 (2Н, d, J = 8,6 Гц), 8,12 (2Н, d, J = 8,3 Гц), 4,24-4,16 (1Н, m), 2,73 (2Н, dd, J = 6,9, 6,9 Гц), 2,62 (2Н, dd, J = 7,3, 11,6 Гц), 2,52-2,48 (2Н, m), 1,79-1,74 (2Н, m), 1,23 (3Н, d, J = 6,6 Гц), 0,54 (4Н, dd, J = 7,6, 18,9 Гц).

- 38 036965

Пример 16. N-((2R)-1-(3-Азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3 -ил)бензамид

BocHNW

Промежуточное соединение 1

Стядия 1. трет-Бутил ((R)-1-((1R,5S)-3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом D из промежуточного соединения 1 (736 мг, 2,90 ммоль) и (1R,5S)-3азабицикло[3.2.1]октан (730 мг, 4,94 ммоль) получали титульное соединение (186 мг, 21%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. (R)-1-((1R,5S)-3-Азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)пропан-2-амин.

К раствору трет-бутил ((R)-1-((1R,5S)-3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)пропан-2-ил)карбамата (186 мг, 0,62 ммоль) в безводном DCM (2,5 мл) добавляли ТФУ (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и пропускали через картридж СЖХ (элюирование МеОН:7 М NH₃ в МеОН (4:1)). Основные фракции концентрировали с получением титульного соединения (80 мг), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3. N-((R)-1-((1R,5S)-3-Азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (122 мг, 0,47 ммоль) и (R)-1-(3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)пропан-2-амина (80 мг, 0,47 ммоль). Путем очистки с помощью препаративной ВЭЖХ и СЖХ получали титульное соединение в виде твердого вещества белого цвета (33 мг). ЖХМС (ES+) 409 (М+Н)⁺, ВУ 2,81 мин (аналитический способ 1); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d6) 8,31 (1Н, d, J = 8,3 Гц), 8,17 (2Н, d, J = 8,7 Гц), 8,05 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 4,244,16 (1Н, m), 2,73-2,61 (2Н, m), 2,41 (1Н, dd, J = 8,3, 12,2 Гц), 2,26 (1Н, dd, J = 6,7, 12,2 Гц), 2,11-1,99(4Н, m), 1,55-1,36 (5Н, m), 1,29 (1Н, d, J = 10,4 Гц), 1,15 (3Н, d, J = 6,5 Гц).

Пример 17. 2-((R)-2-(4-(5-(Трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамидо)пропил)октагидроциклопента[с]пиррол-2-ий формиат

Стадия 1. трет-Бутил ((2R)-1-(гексагидроциклопента[с]пиррол-2(1Н)-ил)-1-охопропан-2ил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислоты (0,77 г, 4,09 ммоль) и октагидроциклопента[с]пиррола (0,50 г, 4,5 ммоль) получали титульное соединение в виде смолы желтого цвета (1,08 г, 93%). Указанное соединение содержало примеси, но было использовано на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. трет-Бутил ((2R)-1-(гексагидроциклопента[с]пиррол-2(1Н)-ил)-1-оксопропан-2ил)карбамат.

В соответствии со способом В из трет-бутил ((2R)-1-(гексагидроциклопента[с]пиррол-2(1H)-ил)-1оксопропан-2-ил)карбамата (1,08 г, 3,82 ммоль) получали титульное соединение в виде смолы бледножелтого цвета (0,61 г, 59%). Указанное соединение содержало примеси, но было использовано на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3. (2R)-1-(Гексагидроциклопента[с]пиррол-2(1H)-ил)пропан-2-амин гидрохлорид.

В соответствии со способом С из трет-бутил ((2R)-1-(гексагидроциклопента[с]пиррол-2(1H)-ил)-1оксопропан-2-ил)карбамата (0,61 г, 2,27 ммоль) получали титульное соединение в виде пены бледножелтого цвета (274 мг, >100%). Указанное соединение использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4. 2-((R)-2-(4-(5-(Трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамидо)пропил)октагидроциклопента[с]пиррол-2-ий формиат.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (0,48 г, 1,89 ммоль). Очистка путем колоночной хроматографии с использованием градиентного элюирования 0-20% метанола в DCM позволяла получить твердое вещество бледно-оранжевого цвета (700 мг). Указанное вещество дополнительно очищали путем препаративной ВЭЖХ с получением титульного соединения в виде стекла бледно-оранжевого цвета (142 мг). ЖХМС (ES+) 409 (М+Н)⁺, ВУ 2,74 мин (аналитический способ 1); 1Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d6) 8,40 (1Н, d, J = 8,2 Гц), 8,19-8,15 (3Н, m),

- 39 036965

8,05 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 4,23-4,11 (1Н, m), 2,60 (2Н, q, J = 7,5 Гц), 2,49-2,43 (3Н, m), 2,43-2,38 (1Н, m), 2,25 (2Н, ddd, J = 3,9, 8,4, 12,0 Гц), 1,59-1,52 (3Н, m), 1,41-1,29 (3Н, m), 1,17 (3Н, d, J = 6,7 Гц).

Пример 18. (R)-N-(1-(3,4-Дигидро-2,7-нафтиридин-2(1H)-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид

Стадия 1. (R)-трет-Бутил (1-(3,4-дигидро-2,6-нафтиридин-2(1H)-ил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислоты (1,28 г, 6,78 ммоль) и 1,2,3,4-тетрагидро-2,6-нафтиридина (1,0 г, 7,45 ммоль). Титульное соединение получали в виде смолы бледно-желтого цвета (2,43 г, >100%). Указанное соединение применяли на следующей стадии неочищенным.

Стадия 2. (R)-трет-Бутил (1-(3,4-дигидро-2,6-нафтиридин-2(1H)-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В из (R)-трет-бутил (1-(3,4-дигидро-2,6-нафтиридин-2(1H)-ил)-1оксопропан-2-ил)карбамата (2,43 г, 7,96 ммоль). Смесь очищали, пропуская через картридж СЖХ (элюирование МеОН:7 М NH₃ в МеОН (9:1)). В результате получали титульное соединение в виде смолы бледно-желтого цвета (810 мг, 34%). Продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3. (R)-1-(3,4-Дигидро-2,6-нафтиридин-2(1H)-ил)пропан-2-амин тригидрохлорид.

В соответствии со способом С из (R)-трет-бутил (1-(3,4-дигидро-2,6-нафтиридин-2(1H)-ил)пропан2-ил)карбамата (810 мг, 2,78 ммоль) получали титульное соединение в виде стекла бледно-оранжевого цвета (0,98 мг, >100%). Указанное соединение использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4. (R)-N-(1-(3,4-Дигидро-2,7-нафтиридин-2(1H)-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (650 мг, 2,5 ммоль) и (R)-1-(3,4-дигидро-2,6-нафтиридин-2(1H)-ил)пропан-2-амин тригидрохлорида (980 мг, 2,78 ммоль) и DIPEA (2,2 мл, 12,5 ммоль), которые смешивали и смесь перемешивали в течение 18 ч. Затем смесь промывали водой, пропускали через картридж фазового сепаратора и концентрировали с получением неочищенного продукта. Путем очистки с помощью препаративной ВЭЖХ получали титульное соединение в виде твердого вещества белого цвета (162 мг). ЖХМС (ES+) 432 (М+Н)⁺, ВУ 2,41 мин (аналитический способ 1); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,48 (1Н, d, J = 8,2 Гц), 8,29 (1Н, s), 8,26 (1Н, d, J = 5,0 Гц), 8,16 (3Н, d, J = 7,8 Гц), 8,06 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 7,11 (1Н, d, J = 5,1 Гц), 4,42-4,30 (1Н, m), 3,66 (2Н, s), 2,81-2,64 (6Н, m), 1,22 (3Н, d, J = 6,5 Гц).

Пример 19. N-((2R)-1-(3-Азабицикло[3.2.0]гептан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3 -ил)бензамид

Стадия 1. 3-(4-Метоксибензил)-3-азабицикло[3.2.0]гептан-2,4-дион.

4-Метоксибензиламин (1,04 мл, 7,93 ммоль) по каплям добавляли при 0°С к раствору 3оксабицикло[3.2.0]гептан-2,4-диона (1,0 г, 7,93 ммоль) в ТГФ (3 мл). Полутвердую смесь нагревали до 90°С для удаления ТГФ и твердые вещества медленно расплавляли при нагревании смеси до 180°С в течение 2 ч. Раствор охлаждали до 60°С и выливали в ледяной DIPE с получением титульного соединения в виде твердого вещества белого цвета (1,77 г, 91%), которое получали путем фильтрования.

Стадия 2. 3-(4-Метоксибензил)-3-азабицикло[3.2.0]гептан.

В соответствии со способом В из 3-(4-метоксибензил)-3-азабицикло[3.2.0]гептан-2,4-диона (1,0 г, 4,1 ммоль). Реакционную смесь перед обработкой нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч.

- 40 036965

Таким образом получали титульное соединение в виде смолы бледно-желтого цвета (1,0 г). Продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3. 3-Азабицикло[3.2.0]гептан гидрохлорид.

3-(4-Метоксибензил)-3-азабицикло[3.2.0]гептан (870 мг, 4,0 ммоль) растворяли в МеОН (100 мл) и добавляли 10% Pd/C (870 мг). Смесь встряхивали в атмосфере газообразного водорода (2 бар) в течение 18 ч при к.т. Затем реакционную смесь фильтровали через Celite, подкисляли с помощью 4 N HCl в диоксане (5 мл) и концентрировали с получением титульного соединения в виде стекла серо-белого цвета (590 мг), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4. трет-Бутил ((2R)-1-(3-азабицикло[3.2.0]гептан-3-ил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислоты (630 мг, 3,33 ммоль) и 3-азабицикло[3.2.0]гептан гидрохлорида (590 мг, 4,0 ммоль). Титульное соединение получали в виде смолы бледно-желтого цвета (490 мг, 55%). Указанное соединение использовали неочищенным на следующей стадии.

Стадия 5. трет-Бутил ((2R)-1-(3-азабицикло[3.2.0]гептан-3-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В из трет-бутил ((2R)-1-(3-азабицикло[3.2.0]гептан-3-ил)-1оксопропан-2-ил)карбамата (0,49 г, 1,80 ммоль). Смесь очищали, пропуская через картридж СЖХ (элюирование МеОН:7 М NH₃ в МеОН (9:1)). Таким образом получали титульное соединение в виде смолы бледно-желтого цвета (229 мг, 49%).

Стадия 6. (2R)-1-(3-Азабицикло[3.2.0]гептан-3-ил)пропан-2-амин гидрохлорид.

В соответствии со способом С из трет-бутил ((2R)-1-(3-азабицикло[3.2.0]гептан-3-ил)пропан-2ил)карбамата (490 мг, 0,90 ммоль) получали титульное соединение в виде твердого вещества бледножелтого цвета (254 мг, >100%). Указанное соединение использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 7. N-((2R)-1-(3-Азабицикло[3.2.0]гептан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (211 мг, 0,82 ммоль) и (2R)-1-(3-азабицикло[3.2.0]гептан-3-ил)пропан-2-амин гидрохлорида (254 мг, 0,90 ммоль) и DIPEA (0,73 мл, 4,09 ммоль), которые смешивали и смесь перемешивали в течение 18 ч. Смесь промывали водой, пропускали через картридж фазового сепаратора и концентрировали с получением неочищенного продукта. Полученный остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ и затем дополнительно очищали при помощи СЖХ с получением титульного соединения в виде твердого вещества белого цвета (65 мг). ЖХМС (ES+) 395 (М+Н)⁺, ВУ 2,71 мин (аналитический способ 1); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,44 (1Н, d, J = 8,3 Гц), 8,17 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 8,06 (2Н, d, J = 8,7 Гц), 4,31-4,22 (1Н, m), 2,83 (2Н, dd, J = 9,0, 29,3 Гц), 2,75-2,66 (2Н, m), 2,61 (1Н, dd, J = 7,7, 11,6 Гц), 2,53-2,50 (1Н, m, затемнен DMSO), 2,06-1,98 (4Н, m), 1,61-1,56 (2Н, m), 1,25 (3Н, d, J = 6,5 Гц).

Пример 20 и 21. D1: N-((R)-1-((abs-1,5-цис)-6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид и D2: N-((R)-1-((abs-1,5-цис)-6-азабицикло[3.2.0]гептан6-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид

Стадия 1. 6-Азабицикло[3.2.0]гептан гидрохлорид.

Раствор азабицикло[3.2.0]гептан-7-она (500 мг, 4,49 ммоль) в диэтиловом эфире (9 мл) по каплям добавляли в течение более, чем 0,5 ч к раствору LiAlH₄ (5,6 мл, 11,2 ммоль) в диэтиловом эфире (36 мл), нагреваемому с обратным холодильником. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 24 ч, охлаждали до 0°С, затем последовательно добавляли воду (3 мл), раствор 2 N NaOH (4 мл) и воду (8 мл). Реакционную смесь нагревали до к.т. и перемешивали в течение 30 мин, затем добавляли MgSO₄ и реакционную смесь фильтровали через Celite, тщательно промывали EtOAc. Фильтрат подкисляли 4 N HCl в диоксане (5 мл) и концентрировали с получением титульного соединения в виде непрозрачной смолы (270 мг, 45%). Неочищенное вещество использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. трет-Бутил ((2R)-1-(6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислоты (1,28 мг, 6,78 ммоль) и 6-азабицикло[3.2.0]гептан гидрохлорида (270 мг, 2,78 ммоль). Титульное соединение получали в виде смолы бледно-желтого цвета (0,61 мг, 89%). Указанное соединение использовали на следующей стадии неочищенным.

- 41 036965

Стадия 3. трет-Бутил ((2R)-1-(бицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)карбамат (два диастереоме ра).

В соответствии со способом В из трет-бутил ((2R)-1-(6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)-1оксопропан-2-ил)карбамата (0,61 г, 2,27 ммоль).

Смесь очищали, пропуская через картридж СЖХ (элюирование МеОН:7 М NH₃ в МеОН (9:1)). Таким образом получали смесь двух диастереомеров титульного соединения в виде смолы бледно-желтого цвета (250 мг, 43%).

Стадия 4. (2R)-1-(6-Азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-амин дигидрохлорид (два диастереоме ра)

В соответствии со способом С из трет-бутил ((2R)-1-(бицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2ил)карбамата (250 мг, 0,97 ммоль) получали смесь двух диастереомеров титульного соединения в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (257 мг). Указанное соединение использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 5. D1: N-((R)-1-((abs-1,5-цис)-6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид и D2: N-((R)-1-((abs-1,5-цис)-6-азабицикло[3.2.0]гептан6-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (228 мг, 0,88 ммоль) и (2R)-1-(6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-амин дигидрохлорида (257 мг, 0,98 ммоль ) и DIPEA (0,79 мл, 4,43 ммоль), которые смешивали и смесь перемешивали в течение 18 ч. Смесь промывали водой, пропускали через картридж фазового сепаратора и концентрировали с получением неочищенного продукта. Полученный остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ и затем дополнительно очищали при помощи СЖХ (LUX CELLUOSE-4 10/90 MeOH (0,1%DEA)/CO₂, 5,0 мл/мин, 120 бар, 40°С) с получением титульного соединения в виде твердого вещества белого цвета. D1: N-((R)-1-((abs-1,5-цис)-6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4 оксадиазол-3-ил)бензамид (8 мг). ЖХМС (ES+) 395 (М+Н)+, ВУ 3,67 мин (аналитический способ 2); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d6) 8,34 (1Н, br s), 8,17 (2Н, d, J = 8,3 Гц), 8,05 (2Н, d, J = 8,4 Гц), 3,93 (1Н, brs), 3,73 (1Н, brs), 3,14 (1Н, br s), 2,98 (1Н, br s), 2,76 (1Н, brs), 2,63 (1Н, brs), 2,47 (1Н, brs), 2,02-1,90 (1Н, m), 1,78-1,60 (3Н, m), 1,46-1,35 (1Н, m), 1,13 (4Н, d, J = 6,5 Гц). D2: N-((R)-1-((abs-1,5-цис)-6азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид (4 мг). ЖХМС (ES+) 395 (М+Н)+, ВУ 3,67 мин (аналитический способ 2); ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO) 8,31 (1Н, d, J = 8,2 Гц), 8,17 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 8,04 (2Н, d, J = 8,5 Гц), 3,94-3,86 (1Н, m), 3,65 (1Н, dd, J = 4,7, 6,0 Гц), 3,18 (1Н, dd, J = 7,9, 7,9 Гц), 2,93 (1Н, dd, J = 3,3, 7,5 Гц), 2,78-2,72 (1Н, m), 2,61 (1Н, dd, J = 8,1, 11,3 Гц), 2,46 (1Н, dd, J = 5,9, 11,9 Гц), 1,99-1,90(11-1, m), 1,73-1,56 (3Н, m), 1,45-1,34 (1Н, m), 1,17-1,13 (1Н, m), 1,10 (3Н, d, J = 6,7 Гц).

Пример 22. N-((2R)-1-(6,6-Диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамид

Стадия 1. 3-(2,4-Диметоксибензил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2,4-дион.

2,4-Диметоксибензиламин (1,45 г, 8,67 ммоль) по каплям добавляли при 0°С к раствору 6,6диметил-3-оксабицикло[3.1.0]гексан-2,4-диона (1,21 г, 8,67 ммоль) в ТГФ (5 мл). Полутвердую смесь нагревали до 90°С для удаления ТГФ и твердые вещества медленно расплавляли при нагревании смеси до 180°С в течение 2 ч. Раствор охлаждали до 60°С и выливали в ледяной DIPE с образованием смолы. Выделяли и выпаривали с получением титульного соединения в виде смолы оранжевого цвета (1,49 г, 59%).

Стадия 2. 3-(2,4-Диметоксибензил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан.

В соответствии со способом В из 3-(2,4-диметоксибензил)-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2,4-диона (1,49 г, 5,15 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч и обрабатывали обычным способом. В результате получали титульное соединение в виде смолы бледно-желтого цвета (1,31 г). Указанный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3. 6,6-Диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан гидрохлорид.

3-(2,4-Диметоксибензил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан (1,0 г, 3,83 ммоль) растворяли в

- 42 036965 метаноле (50 мл) и добавляли уксусную кислоту (5 мл) и затем 10% Pd/C (1,0 г). Смесь встряхивали в атмосфере газообразного водорода (5 бар) в течение 18 ч при к.т. Затем реакционную смесь фильтровали через Celite, подкисляли 4 N HCl в диоксане (5 мл) и концентрировали с получением титульного соединения в виде твердого вещества бледно-розового цвета (1,0 г), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4. трет-Бутил ((2R)-1-(6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)-1-оксопропан-2ил)карбамат.

В соответствии со способом А из (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропионовой кислоты (659 мг, 3,48 ммоль) и 6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан гидрохлорида (1,0 г, 3,83 ммоль). Титульное соединение получали в виде смолы бледно-желтого цвета (837 мг, 84%). Указанный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 5. трет-Бутил ((2R)-1-(6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-ил)карбамат.

В соответствии со способом В из трет-бутил ((2R)-1-(6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)1-оксопропан-2-ил)карбамата (837 мг, 2,96 ммоль).

Смесь очищали, пропуская через картридж СЖХ (элюирование МеОН:7 М NH₃ в МеОН (9:1)). В результате получали титульное соединение в виде смолы бледно-желтого цвета (525 мг, 66%).

Стадия 6. (2R)-1-(6,6-Диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-амин гидрохлорид.

В соответствии со способом С из трет-бутил ((2R)-1-(6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3ил)пропан-2-ил)карбамата (525 мг, 1,96 ммоль) получали титульное соединение в виде твердого вещества оранжевого цвета (900 мг, >100%).

Указанное соединение использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 7. N-((2R)-1-(6,6-Диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамид.

В соответствии со способом А из 4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (459 мг, 1,78 ммоль) и (2R)-1-(6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан-2-амин гидрохлорида (900 мг, 1,95 ммоль) и DIPEA (1,6 мл, 8,91 ммоль), которые смешивали и смесь перемешивали в течение 18 ч. Смесь промывали водой, пропускали через картридж фазового сепаратора и концентрировали с получением неочищенного продукта. Полученный остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением титульного соединения в виде твердого вещества серо-белого цвета (138 мг). ЖХМС (ES+) 409 (М+Н)⁺, ВУ 4,53 мин (аналитический способ 1); ¹Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d₆) 8,33 (1Н, d, J = 8,3 Гц), 8,15 (2Н, d, J = 8,7T4), 8,03 (2Н, d, J = 8,7 Гц), 4,13-4,04 (1Н, m), 2,88 (2Н, dd, J = 9,2, 24,6 Гц), 2,63-2,54 (3Н, m), 2,40 (1Н, dd, J = 7,0, 11,7 Гц), 1,14-1,10 (8Н, m), 0,92 (3Н, s).

Пример 23. (2S)-1-((R)-2-(3-Фтор-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамидо)пропил)-2метилпирролидин-1 -ий формиат

³ НСООСтадия 1. (Z)-3-Фтор-4-(N'-гидроксикарбамимидоил)бензойная кислота.

К перемешиваемому раствору 4-циано-3-фторбензойной кислоты (2,00 г, 12,1 ммоль) в EtOH (30 мл) добавляли NH₂OH-HCl (1,18 г, 17,0 ммоль) и КОН (2,03 г, 36,3 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 17 ч, затем нейтрализовали 1 М НС1(_водн) и экстрагировали в EtOAc (3x25 мл). Комбинированные органические слои высушивали (MgSO₄) и концентрировали с получением титульного соединения в виде масла желтого цвета, которое использовали далее без дополнительной очистки.

Стадия 2. 3-Фтор-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойная кислота.

К перемешиваемому раствору (Z)-3-фтор-4-(N'-гидроксикарбамимидоил)бензойной кислоты (12,1 ммоль) в ТГФ (30 мл) добавляли ТФУА (2,50 мл, 18,2 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 ч и затем выливали в ледяную воду и подкисляли до pH 4 с помощью 1 М НС1(_водн), затем экстрагировали в EtOAc (3x30 мл). Комбинированные органические вещества высушивали (MgSO₄) и концентрировали. Путем очистки с помощью колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование i-hex [+3% АсОН] до 4:1 i-hex: EtOAc [+3% АсОН]) получали титульное соединение в виде твердого вещества серо-белого цвета (150 мг, 4% (2 стадии)). ЖХМС (ES+) 277 (М+Н)⁺.

Стадия 3. (2S)-1 -((R)-2-(3-Фтор-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)бензамидо)пропил)-2метилпирролидин-1-ий формиат.

В соответствии со способом А из 3-фтор-4-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензойной кислоты (75 мг, 0,27 ммоль) и промежуточного соединения 2 (59 мг, 0,41 ммоль). Путем очистки с помощью препаративной ВЭЖХ получали титульное соединение в виде твердого вещества желтого цвета (39

- 43 036965 мг, 32%). ЖХМС (ES+) 447 (М+Н)⁺, ВУ 2,74 мин (аналитический способ 1). 11 ЯМР δ (м.д.) (400 МГц,

DMSO-d6) 8,55(1H,d, J = 8,2 Гц), 8,21-8,17 (2Н, m), 7,95-7,91 (2Н, m), 4,19-4,09 (11-1, m), 3,13 (1Н, ddd, J =

4,1, 7,2, 8,9 Гц), 2,74 (1Н, dd, J = 9,3, 11,7 Гц), 2,42-2,34 (1Н, m), 2,28(11-1, dd, J = 5,7, 11,3 Гц), 2,20 (1Н, q,

J = 8,7 Гц), 1,93-1,83 (1Н, m), 1,73-1,63 (2Н, m), 1,39-1,25 (1Н, m), 1,19 (3Н, d, J = 6,7 Гц), 1,05 (3Н, d, J =

6,0 Гц).

Пример 24. N-((R)-1 -((8)-2-Метилпирролидин-1 -ил)пропан-2-ил)-5-(5 -(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3 -ил)пиколинамид

Стадия 1. (Z)-5-(N'-Гидроксикарбамимидоил)пиколиновая кислота.

К перемешиваемому раствору 5-цианопиколиновой кислоты (1,51 г, 10,2 ммоль) в EtOH (30 мл) добавляли NH2OH-HC1 (999 мг, 14,3 ммоль) и КОН (1,71 г, 30,6 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 72 ч, затем нейтрализовали с помощью 1 М НС1(_водн). Полученный осадок собирали вакуумной фильтрацией, промывали H2O и EtOH и высушивали под вакуумом с получением титульного соединения в виде твердого вещества белого цвета (1,21 г, 63%).

Стадия 2. 5-(5-(Трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)пиколиновая кислота.

К перемешиваемому раствору (Z)-5-(N'-гидроксикарбамимидоил)пиколиновой кислоты (1,21 г, 6,47 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляли ТФУА (1,35 мл, 9,71 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 17 ч и затем выливали в ледяную воду и подкисляли до pH 4 при помощи 1 М НС1(_водн), а затем экстрагировали в EtOAc (3x30 мл). Объединенные органические слои высушивали (MgSO₄) и концентрировали. Полученный остаток обрабатывали DCM/MeOH (10 мл, 1:1) и нерастворимые твердые вещества собирали путем фильтрования в вакууме с получением титульного соединения в виде твердого вещества серобелого цвета (593 мг, 35%). ЖХМС (ES+) 260 (М+Н)⁺.

Стадия 3. N-((R)-1 -((S)-2-Метилпирролидин-1 -ил)пропан-2-ил)-5-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)пиколинамид.

В соответствии со способом А из 5-(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)пиколиновой кислоты (200 мг, 0,77 ммоль) и промежуточного соединения 2 (166 мг, 1,16 ммоль). Путем очистки с помощью обращено-фазовой хроматографии (градиентное элюирование, 5-95% MeCN в 0,1% муравьиной кислоте) и затем, пропуская через картридж СЖХ (элюирование МеОН:7 М NH₃ в МеОН (9:1)), получали титульное соединение в виде смолы оранжевого цвета (72 мг, 24%). ЖХМС (ES+) 384 (М+Н)⁺, ВУ 3,92 мин (аналитический способ 2). 1Н ЯМР δ (м.д.) (400 МГц, DMSO-d6) 9,25 (1Н, d, J = 1,8 Гц), 8,73 (1Н, d, J = 8,7 Гц), 8,64 (1Н, dd, J = 2,1, 8,2 Гц), 8,26 (1Н, d, J = 8,2 Гц), 4,19-4,09 (1Н, m), 3,15-3,07 (1Н, m), 2,82 (1Н, dd, J = 9,0, 11,8 Гц), 2,37-2,28 (1Н, m), 2,23 (1Н, dd, J = 5,1, 10,9 Гц), 2,16 (1Н, q, J = 8,7 Гц), 1,91-1,80 (1Н, m), 1,71-1,61 (2Н, m), 1,34-1,23 (1Н, m), 1,21 (3Н, d, J = 6,5 Гц), 1,02 (3Н, d, J = 6,0 Гц).

Таблица примеров

Наименование no IUPAC (2$)-2-метил-1 -((/?)-2-(3-метил-4-(5(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамидо)пропил)пирролидин-1ий формиат

Л/-(2-(3-азабицикло[3.2.1]октан-3ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид

- 44 036965

3		(Я)-М-(1-(изоиндолин-2-ил)пропан-2ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид
4	F	Л/-((2Я)-1-(3-азабицикло[3.1.0]гексан- 3-ил)пропан-2-ил)-4-(5- (трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамид
5	8~<? z—К Q 7=^°	(8)-Л/-(1-циклопропил-2-(пирролидин1-ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид
6	^{0 V} ГЛ a/U ^H ⁰ 1	(К)-/7-(1-циклопропил-2-(пирролидин1-ил)этил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид
7	A°x / Ύ / z—У о /=О г 8	(Я)-/У-(1-(3,4-дигидроизохинолин2(1 /7)-ил)пропан-2-ил)-4-(5- (трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамид
8	Ъ	(Я)-Л/-(1-(3-фенилазетидин-1- ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)- 1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид
9	° Ξ ^F ’^л F	D1: Л/-((Я)-1-((аМ)-3- (дифторметокси)пиперидин-1ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид

- 45 036965

10	ο ^Ξ 11 ^F F	D2: /V-((K)-1-((abs)-3- (дифторметокси)пиперидин-1ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид
11	i	(Я)-Л/-(1-(5-азаспиро[2.5]октан-5- ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)- 1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид
12	F У=/\ ^NX	(Я)-Л/-(1-(6-азаспиро[2.5]октан-6ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид
13	,^χτ^θ 0 J /	(Я)-Л/-(1 -(азепан-1 -ил)пропан-2-ил)-4(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол3-ил)бензамид
14	V=N F₃C'	(Я)-Л/-(1 -(1 -азаспиро[3.3]гептан-1 ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид
15	Уж/ x> о /° '1	(Я)-Л/-(1-(5-азаспиро[2.4]гептан-5ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)- 1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид
16	° \ о vy LL.	Л/-((Я)-1-(3-азабицикло[3.2.1]октан-3ил)пропан-2-ил)-4-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)бензамид

- 46 036965

17	J f н ДаУ о J \==N F^/ 7т F	2-((Я)-2-(4-(5-(трифторметил)-1,2,4- оксадиазол-3- ил)бензамидо)пропил)октагидроцикло пента[с]пиррол-2-ий формиат
18	ll	(Я)-Л/-(1-(3,4-дигидро-2,7- нафтиридин-2(1/7)-ил)пропан-2-ил)-4(5-(трифторметил)-1,2,4-оксадиазол3-ил)бензамид
19	ZI О =/ О \- / LlT	Л/-((2Я)-1-(3-азабицикло[3.2.0]гептан- 3-ил)пропан-2-ил)-4-(5- (трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамид
20	H ° = ,— 1 o^z Ύ \=N F F	D1: Л/-((Я)-1 -((abs-1,5-цис)-6азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид
21	H ο ^Ξ Г/ . ^H O^Z 1 F—T^^¹⁴	D2: Л/-((Я)-1 -((abs-1,5-цис)-6азабицикло[3.2.0]гептан-6-ил)пропан2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид
22	<λ °_x w Z z—У О \=° zz ζΛ	Л/-((2Я)-1-(6,6-диметил-3- азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пропан2-ил)-4-(5-(трифторметил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)бензамид

- 47 036965

23	О = г\ I ¹ ) У? \^N F О О F₃c/	(2 S)-1 -((Я)-2-(3-фтор-4-(5- (трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3- ил)бензамидо)пропил)-2- метилпирролидин-1-ий формиат
24	ДАЛ \^Ν F₃(/	Л/-((Я)-1-((8)-2-метилпирролидин-1ил)пропан-2-ил)-5-(5-(трифторметил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)пиколинамид
25	о = ΓΛ V=N ¹ F-X F F	3-метил-М-((Р)-1-((8)-2- метилпирролидин-1-ил)пропан-2-ил)4-(5-(трифторметил)-1,2,4- оксадиазол-3-ил)бензамид
26	Ο _Ξ Γ\Α nJU ^h о 1 \=N fA F F	N-((2R)-1- (гексагидроциклопента[с]пиррол- 2(1 /7)-ил)пропан-2-ил)-4-(5- (трифторметил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)бензамид
27	-П IZ	3-φτορ-Ν-((/?)-1-((δ)-2- метилпирролидин-1-ил)пропан-2-ил)4-(5-(трифторметил)-1,2,4- оксадиазол-3-ил)бензамид

Пример 25. Анализ ингибирования HDAC4 с помощью ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) класса IIa.

Эффективность ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) класса IIa количественно определяли путем измерения ферментативной активности каталитического домена деацетилазы гистонов 4 (HDAC4) с использованием флуорогенного субстрата, Boc-Lys(TOY)-AMC. Субстрат деацетилировали до Boc-LysАМС с помощью HDAC4. Расщепление трипсином приводило к высвобождению флуорофора АМС из деацетилированного субстрата. Флуоресценция образца непосредственно связана с активностью деацетилазы гистонов в образце. Серийно разведенные ингибиторы HDAC. Серийные разведения ингибиторов HDAC и контрольного эталонного соединения (1-(5-(3-((4-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)фенокси)метил)-1,2,4оксадиазол-5-ил)тиофен-2-ил)-2,2,2-трифторэтанон) были получены путем ресуспендирования лиофилизированного соединения до конечной концентрации 10 мМ в 100% диметилсульфоксиде (DMSO). Исходные растворы 60 мкл аликвот 10 мМ соединений в DMSO готовили и хранили при -20°С. Из одной аликвоты исходного раствора каждого исследуемого соединения и эталонного соединения готовили 16точечное разведение согласно табл. 1 с использованием 125 мкл 16-канальной многоканальной пипетки Matrix (Matrix Technologies Ltd).

- 48 036965

Таблица 1

Серийное разведение соединений

Резбавленные растворы	Лунка	Концентрация (мкМ)	Степень разведе НИЯ	Объемы
Концентрация 1	А	10000	-	60 мкл 10 мМ исследуемое соединение/ эталонный контроль
Концентрация 2	В	5000	1:2	30 мкл А + 30 мкл DMSO
Концентрация 3	С	2500	1:2	30 мкл В + 30 мкл DMSO
Концентрация 4	D	1000	1:2,5	30 мкл С + 45 мкл DMSO
Концентрация 5	Е	500	1:2	30 мкл D + 30 мкл DMSO
Концентрация 6	F	250	1:2	30 мкл Е + 30 мкл DMSO
Концентрация 7	G	125	1:2	30 мкл F + 30 мкл DMSO
Концентрация 8	Н	62,5	1:2	30 мкл G + 30 мкл DMSO
Концентрация 9	I	31,25	1:2	30 мкл Н + 30 мкл DMSO
Концентрация 10	J	15,63	1:2	30 мкл I + 30 мкл DMSO
Концентрация 11	К	7,81	1:2	30 мкл J + 30 мкл DMSO
Концентрация 12	L	3,91	1:2	30 мкл К + 30 мкл DMSO
Концентрация 13	М	1,95	1:2	30 мкл L + 30 мкл DMSO
Концентрация 14	N	0,98	1:2	30 мкл М + 30 мкл DMSO
Концентрация 15	О	0,49	1:2	30 мкл N + 30 мкл DMSO
Концентрация 16	Р	0,24	1:2	30 мкл 0 + 30 мкл DMSO

мкл (200х) каждого разведенного раствора и каждого контроля (полная активность: 100% только DMSO или полное ингибирование 1 мМ) вносили в полипропиленовые 384-луночные планшеты с Vобразным дном с использованием либо системы Bravo (384-лучночный наконечник производства Agilent) или 12,5 мкл 16-канальной многоканальной пипетки Matrix (Matrix Technologies Ltd). Каждую лунку с 200х раствором соединения разбавляли 1:20 добавлением 38 мкл аналитического буфера + DMSO (10,5% DMSO, 45 мМ Трис-HCl, 123 мМ NaCl, 2,4 мМ KCl и 0,9 мМ MgCl₂ при pH 8,0, доведенный до к.т.).

Подготовка каталитического домена фермента HDAC4 (0,2 мкг/мл).

Каталитический домен фермента HDAC4 представляет собой каталитический домен белка HDAC4 человека (аминокислоты 648-1032) с С-концевой 6х гистидиновой меткой, полученный от BioFocus. Рабочий раствор фермента получали из 500 мкг/мл исходного раствора аликвоты каталитического домена HDAC4 (оттаивали на льду), разведенной до 0,2 мкг/мл аналитическим буфером (50 мМ Трис-HCl, 137 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, и 1 мМ MgCl₂ при pH 8, доведенный до к.т.) непосредственно перед добавлением фермента к аналитическому образцу.

Подготовка 5х субстрата (50 мкМ) Boc-Lys(ТФУ)-AMC.

5х (50 мкМ) получали непосредственно перед добавлением к аналитическому образцу. 1 мМ исходный раствор субстрата получали путем разведения 100 мМ раствора Вос-Lys(ТФУ)-AMC в DMSO 1:100 при помощи добавления по каплям к аналитическому буферу (доведенному до к.т.) при перемешивании на вортексе на низкой скорости для предотвращения образования осадка. 5х субстрат получали путем разведения 1 мМ раствора субстрата 1:20 при помощи добавления по каплям к аналитическому буферу (доведенному до к.т.) при перемешивании на вортексе на низкой скорости для предотвращения образования осадка.

Подготовка 3х (30 мкМ) раствора для проявления/стоп-раствора.

3х (30 мкМ) раствор для проявления/стоп-раствор готовили непосредственно перед добавлением в планшет путем разведения исходного 10 мМ раствора эталонного соединения 1:333 в 25 мг/мл трипсине (РАА Laboratories Ltd.), доведенном до к.т.

Анализ.

мкл каждого раствора 1:20 разбавленного соединения, описанного выше, переносили в лунку черного 384-луночного планшета для анализа с прозрачным дном с использованием системы Bravo или Janus (384-луночный наконечник MDT производства Perkin Elmer). С использованием 16-канальной многоканальной пипетки Matrix 35 мкл рабочего раствора каталитического домена фермента HDAC4 (0,2 мкг/мл в аналитическом буфере) переносили в планшет для анализа. Затем начинали анализ путем добавления в аналитические планшеты 10 мкл 5х (50 мкМ) субстрата с использованием либо системы Bravo, либо Janus, или 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Затем аналитический планшет встря

- 49 036965 хивали в течение 2 мин на орбитальном шейкере при 900 об/мин (оборотов в минуту). Затем планшет инкубировали в течение 15 мин при 37°С. Реакцию останавливали путем добавления в аналитические планшеты 25 мкл 3х (30 мкМ) раствора для проявления/стоп-раствора с использованием либо системы Bravo, либо Janus или 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Затем аналитические планшеты встряхивали в течение 5 мин на орбитальном шейкере при 1200 об/мин. Затем планшеты инкубировали при 37°С в течение 1 ч в инкубаторе для тканевых культур. Наконец, измеряли флуоресценцию (возбуждение: 355 нм, эмиссия: 460 нм) с использованием PerkinElmer EnVision в режиме сканирования сверху.

Пример 26. Анализ ингибирования HDAC5 с помощью ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) класса IIa.

Эффективность ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) класса IIa количественно определяли путем измерения ферментативной активности каталитического домена деацетилазы гистонов 5 (HDAC5) с использованием флуорогенного субстрата, Вос-Lys(ТФУ)-АМС. Субстрат деацетилировали до Boc-LysАМС с помощью HDAC5. Расщепление трипсином приводило к высвобождению флуорофора АМС из деацетилированного субстрата. Флуоресценция образца непосредственно связана с активностью деацетилазы гистонов в образце.

Серийно разведенные ингибиторы HDAC.

Серийные разведения ингибиторов HDAC и контрольного эталонного соединения (1-(5-(3-((4(1,3,4-оксадиазол-2-ил)фенокси)метил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)тиофен-2-ил)-2,2,2-трифторэтанон) были получены путем ресуспендирования лиофилизированного соединения до конечной концентрации 10 мМ в 100% DMSO. Исходные растворы 60 мкл аликвот 10 мМ соединений в DMSO готовили и хранили при 20°С. Из одной аликвоты исходного раствора каждого исследуемого соединения и эталонного соединения готовили 16-точечное разведение согласно табл. 1 с использованием 125 мкл 16-канальной многоканальной пипетки Matrix.

мкл (200х) каждого разведенного раствора и каждого контроля (полная активность: 100% только DMSO или полное ингибирование 1 мМ) вносили в полипропиленовые 384-луночные планшеты с Vобразным дном с использованием либо системы Bravo, либо Janus, или 12,5 мкл 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Каждую лунку с 2 мкл 200х раствора соединения разбавляли 1:20 добавлением 38 мкл аналитического буфера + DMSO (10,5% DMSO, 45 мМ Трис-HCl, 123 мМ NaCl, 2,4 мМ KCl и 0,9 мМ MgCl₂ при pH 8,0, доведенный до 37°С).

Подготовка каталитического домена фермента HDAC5 (0,57 мкг/мл).

Каталитический домен фермента HDAC5 представляет собой каталитический домен белка HDAC5 человека (GenBank No. NM_001015053), аминокислоты 657-1123 с С-концевой гистидиновой меткой, который может быть получен от BioFocus. Масса белка составляет 51 кДа и он экспрессируется в бакулавирусной экспрессионной системе. Рабочий раствор фермента получали из 1,65 мг/мл аликвоты исходного раствора каталитического домена HDAC5 (оттаивали на льду), разведенной до 0,57 мкг/мл аналитическим буфером (50 мМ Трис-HCl, 137 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, и 1 мМ MgCl₂ при pH 8, доведенный до 37°С) непосредственно перед добавлением фермента к аналитическому образцу.

Подготовка 5х (40 мкМ) субстрата Boc-Lys(ТФУ)-AMC.

5х (40 мкМ) субстрат получали непосредственно перед добавлением к аналитическому образцу. 5х субстрат получали путем разведения 100 мМ Вос-Lys(ТФУ)-АМС в растворе DMSO 1:2500 путем добавления по каплям к аналитическому буферу (доведенному до 37°С) при перемешивании на вортексе на низкой скорости для предотвращения образования осадка.

3х (30 мкМ) раствор для проявления/стоп-раствор готовили непосредственно перед добавлением в планшет путем разведения исходного 10 мМ раствора эталонного соединения 1:333 в 25 мг/мл трипсине, доведенном до 37°С.

Анализ.

мкл каждого раствора 1:20 разведенного соединения, описанного выше, переносили в лунку черного 384-луночного планшета для анализа с прозрачным дном с использованием системы Bravo или Janus. С использованием 16-канальной многоканальной пипетки Matrix 35 мкл рабочего раствора каталитического домена фермента HDAC5 (0,57 мкг/мл в аналитическом буфере) переносили в планшет для анализа. Затем начинали анализ путем добавления в аналитические планшеты 10 мкл 5х (40 мкМ) субстрата с использованием либо системы Bravo, либо Janus, или 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Затем аналитический планшет встряхивали в течение 1 мин на орбитальном шейкере при 900 об/мин. Затем планшеты инкубировали в течение 15 мин при 37°С. Реакцию останавливали путем добавления в аналитические планшеты 25 мкл 3х (30 мкМ) раствора для проявления/стоп-раствора с использованием либо системы Bravo, либо Janus или 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Затем аналитические планшеты встряхивали в течение 2 мин на орбитальном шейкере при 900 об/мин. Затем планшеты инкубировали при 37°С в течение 1 ч в инкубаторе для тканевых культур, после чего встряхивали в течение 1 мин при максимальных оборотах на орбитальном шейкере перед считыванием на EnVision. Наконец, измеряли флуоресценцию (возбуждение: 355 нм, эмиссия: 460 нм) с использованием

- 50 036965

PerkinElmer EnVision в режиме сканирования сверху.

Пример 27. Анализ ингибирования HDAC7 с помощью ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) класса IIa.

Эффективность ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) класса IIa количественно определяли путем измерения ферментативной активности каталитического домена деацетилазы гистонов 7 (HDAC7) с использованием флуорогенного субстрата, Boc-Lys(TOY)-AMC. Субстрат деацетилировали до Boc-LysАМС с помощью HDAC7. Расщепление трипсином приводило к высвобождению флуорофора АМС из деацетилированного субстрата. Флуоресценция образца непосредственно связана с активностью деацетилазы гистонов в образце.

Серийно разведенные ингибиторы HDAC.

Серийные разведения ингибиторов HDAC и контрольного эталонного соединения (1-(5-(3-((4(1,3,4-оксадиазол-2-ил)фенокси)метил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)тиофен-2-ил)-2,2,2-трифторэтанон) были получены путем ресуспендирования лиофилизированного соединения до конечной концентрации 10 мМ в 100% DMSO. Исходные растворы 60 мкл аликвот 10 мМ соединений в DMSO готовили и хранили при 20°С. Из одной аликвоты исходного раствора каждого исследуемого соединения и эталонного соединения готовили 16-точечное разведение согласно Таблице 1 с использованием 125 мкл 16-канальной многоканальной пипетки Matrix.

мкл (200х) каждого разведенного раствора и каждого контроля (полная активность: 100% только DMSO или полное ингибирование 1 мМ) вносили в полипропиленовые 384-луночные планшеты с Vобразным дном с использованием системы Bravo, Janus или 12,5 мкл 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Каждую лунку с 200х раствором соединения разбавляли 1:20 добавлением 38 мкл аналитического буфера + DMSO (10,5% DMSO, 45 мМ Трис-HCl, 123 мМ NaCl, 2,4 мМ KCl и 0,9 мМ MgCl₂ при pH 8,0 и доведенный до 37°С).

Подготовка фермента HDAC7 (71 нг/мл).

Фермент HDAC7 представляет собой HDAC7 человека (GenBank No. AY302468), содержащий аминокислоты с 518 до конца с N-концевой глутатион S-трансферазной (GST) меткой, и может быть получен от BPS BioScience. Масса белка составляет 78 кДа и он экспрессируется в бакулавирусной экспрессионной системе. Рабочий раствор фермента получали из 0,5 мг/мл аликвоты исходного раствора HDAC7 (оттаивали на льду), разведенной до 71 нг/мл аналитическим буфером (50 мМ Трис-HCl, 137 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, и 1 мМ MgCl₂ при pH 8 и доведенный до 37°С) непосредственно перед добавлением фермента к аналитическому образцу.

Подготовка 5х (50 мкМ) субстрата Boc-Lys(ТФУ)-AMC.

5х (50 мкМ) субстрат получали непосредственно перед добавлением к аналитическому образцу. 5х субстрат получали путем разведения 100 мМ Вос-Lys(ТФУ)-АМС в растворе DMSO 1:2000 путем добавления по каплям к аналитическому буферу (доведенному до 37°С) при перемешивании на вортексе на низкой скорости для предотвращения образования осадка.

Анализ.

мкл каждого раствора 1:20 разведенного соединения, описанного выше, переносили в лунку черного 384-луночного планшета для анализа с прозрачным дном с использованием системы Bravo или Janus. С использованием 16-канальной многоканальной пипетки Matrix 35 мкл рабочего раствора фермента HDAC7 (71 нг/мл в аналитическом буфере) переносили в планшет для анализа. Затем начинали анализ путем добавления в аналитические планшеты 10 мкл 5х (50 мкМ) субстрата с использованием либо системы Bravo, Janus, либо 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Затем аналитический планшет встряхивали в течение 1 мин на орбитальном шейкере при 900 об/мин. Затем планшет инкубировали в течение 15 мин при 37°С. Реакцию останавливали путем добавления в аналитические планшеты 25 мкл 3х (30 мкМ) раствора для проявления/стоп-раствора с использованием либо системы Bravo, либо Janus или 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Затем аналитические планшеты встряхивали в течение 2 мин на орбитальном шейкере при 900 об/мин. Затем планшеты инкубировали при 37°С в течение 1 ч в инкубаторе для тканевых культур, после чего встряхивали в течение 1 мин при максимальных оборотах на орбитальном шейкере. Наконец, измеряли флуоресценцию (возбуждение: 355 нм, эмиссия: 460 нм) с использованием PerkinElmer EnVision в режиме сканирования сверху.

Пример 28. Анализ ингибирования HDAC9 с помощью ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) класса IIa.

Эффективность ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) класса IIa количественно определяли путем измерения ферментативной активности каталитического домена деацетилазы гистонов 9 (HDAC9) с использованием флуорогенного субстрата, Вос-Lys(ТФУ)-АМС. Субстрат деацетилировали до Boc-LysАМС с помощью HDAC9. Расщепление трипсином приводило к высвобождению флуорофора АМС из

- 51 036965 деацетилированного субстрата. Флуоресценция образца непосредственно связана с активностью деацетилазы гистонов в образце. Серийно разведенные ингибиторы HDAC. Серийные разведения ингибиторов HDAC и контрольного эталонного соединения (1-(5-(3-((4-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)фенокси)метил)-1,2,4оксадиазол-5-ил)тиофен-2-ил)-2,2,2-трифторэтанон) были получены путем ресуспендирования лиофилизированного соединения до конечной концентрации 10 мМ в 100% DMSO. Исходные растворы 60 мкл аликвот 10 мМ соединений в DMSO готовили и хранили при -20°С. Из одной аликвоты исходного раствора каждого исследуемого соединения и эталонного соединения готовили 16-точечное разведение согласно табл. 1 с использованием 125 мкл 16-канальной многоканальной пипетки Matrix.

Подготовка фермента HDAC9 (0,57 мкг/мл).

Фермент HDAC9 представляет собой HDAC9 человека (GenBank No. NM_178423), содержащий аминокислоты с 604-1066 с С-концевой гистидиновой меткой, и может быть получен от BPS BioScience. Масса белка составляет 50,7 кДа и он экспрессируется в бакулавирусной экспрессионной системе. Рабочий раствор фермента получали из 0,5 мг/мл аликвоты исходного раствора HDAC9 (оттаивали на льду), разведенной до 0,57 мкг/мл аналитическим буфером (50 мМ Трис-HCl, 137 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, и 1 мМ MgCl₂ при pH 8 и доведенный до 37°С) непосредственно перед добавлением фермента к аналитическому образцу.

Подготовка 5х (125 мкМ) субстрата Boc-Lys(ТФУ)-AMC.

5х (125 мкМ) субстрат получали непосредственно перед добавлением к аналитическому образцу. 5х субстрат получали путем разведения 100 мМ Вос-Lys(ТФУ)-АМС в растворе DMSO 1:800 путем добавления по каплям к аналитическому буферу (доведенному до 37°С) при перемешивании на вортексе на низкой скорости для предотвращения образования осадка.

Анализ.

мкл каждого раствора 1:20 разведенного соединения, описанного выше, переносили в лунку черного 384-луночного планшета для анализа с прозрачным дном с использованием системы Bravo или Janus. С использованием 16-канальной многоканальной пипетки Matrix 35 мкл рабочего раствора фермента HDAC9 (0,57 мкг/мл в аналитическом буфере) переносили в планшет для анализа. Затем начинали анализ путем добавления в аналитические планшеты 10 мкл 5х (125 мкМ) субстрата с использованием либо системы Bravo, Janus, либо 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Затем аналитический планшет встряхивали в течение 1 мин на орбитальном шейкере при 900 об/мин. Затем планшет инкубировали в течение 15 мин при 37°С. Реакцию останавливали путем добавления в аналитические планшеты 25 мкл 3х раствора для проявления/стоп-раствора с использованием либо системы Bravo, Janus, либо 16канальной многоканальной пипетки Matrix. Затем аналитические планшеты встряхивали в течение 2 мин на орбитальном шейкере при 900 об/мин. Затем планшеты инкубировали при 37°С в течение 1 ч в инкубаторе для тканевых культур, после чего встряхивали в течение 1 мин при максимальных оборотах на орбитальном шейкере перед считыванием на EnVision. Наконец, измеряли флуоресценцию (возбуждение: 355 нм, эмиссия: 460 нм) с использованием PerkinElmer EnVision в режиме сканирования сверху.

Пример 29. Анализ ингибирования клеточной активности HDAC класса IIa ингибиторами деацетилазы гистонов (HDAC) класса IIa; клеточный субстрат (Lys-ТФУ).

Эффективность ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) класса IIa количественно определяли путем измерения клеточной ферментативной активности деацетилазы гистонов с использованием флуорогенного субстрата, Вос-Lys(ТФУ)-АМС. После проникновения в клетки Jurkat E6-1 субстрат деацетилировался до Вос-Lys-AMC. После лизиса клеток и расщепления трипсином флуорофор АМС высвобождался только из деацетилированного субстрата. Флуоресценция образца была непосредственно связана с активностью деацетилазы гистонов в образце. Культура клеток Jurkat E6.1 и культивирование. Клетки Jurkat E6.1 культивировали в соответствии со стандартными протоколами культивирования клеток в среде Jurkat E6.1 Growth Media (RPMI без фенолового красного, 10% FBS, 10 мМ HEPES, и 1 мМ пирувата натрия). Клетки Jurkat E6.1 подсчитывали с использованием Coulter Counter и ресуспендировали в среде Jurkat E6.1 Growth Media в концентрации 75000 клеток/35 мкл. 35 мкл или 75000 клеток высевали в микротитрационные планшеты для анализа Greiner. Затем планшеты инкубировали при 37°С и 5% СО₂, при этом одновременно готовили другие компоненты для анализа.

Серийно разведенные ингибиторы HDAC.

- 52 036965

мкл (200х) каждого разведенного раствора и каждого контроля (полная активность: 100% только DMSO или полное ингибирование 1 мМ) вносили в полипропиленовые 384-луночные планшеты с Vобразным дном с использованием системы Bravo, Janus или 12,5 мкл 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Каждую лунку с 200х раствором соединения разбавляли 1:20 добавлением 38 мкл аналитического буфера Jurkat + DMSO (9,5% DMSO, RPMI без фенолового красного, 0,09% FBS, 9 мМ Hepes и 0,9 мМ пирувата натрия, доведенный до к.т.). Подготовка 5х (500 мкМ) субстрата Boc-Lys(ТФУ)-AMC. 5х (500 мкМ) субстрат получали непосредственно перед добавлением к аналитическому образцу. 5х субстрат получали путем разведения 100 мМ Вос-Lys(ТФУ)-АМС в растворе DMSO 1:200 путем добавления по каплям к каталитической среде Jurkat (RPMI без фенолового красного, 0,1% FBS, 10 мМ Hepes и 1 мМ пирувата натрия, доведенный до 37°С) при перемешивании на вортексе на низкой скорости для предотвращения образования осадка.

Подготовка 3х буфера для лизиса.

мл 3х буфера для лизиса получали добавлением 8,8 мл 3х исходного буфера для лизиса (50 мМ Трис-HCl, pH 8,0, 137 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, 1 мМ MgCl₂, 1% аналога Nonidet P40, доведенный до к.т.) и 1,2 мл 3 мг/мл трипсина, доведенного до к.т.

Анализ.

мкл каждого раствора 1:20 разведенного соединения, описанного выше, переносили в микротитрационные планшеты для анализа Greiner с 75000 клеток/лунку с использованием системы Bravo. Затем клетки инкубировали в течение 2 ч при 37°С и 5% СО₂. Затем начинали анализ путем добавления в аналитический планшет 10 мкл 5х (500 мкМ) субстрата с использованием либо Bravo, либо 16-канальной многоканальной пипетки Matrix. Затем клетки инкубировали в течение 3 ч при 37°С и 5% СО₂. Затем в каждую лунку добавляли 25 мкл 3х буфера для лизиса с использованием либо 125 мкл 16-канальной пипетки, либо системы Bravo.

Аналитический планшет инкубировали в течение ночи (15-16 ч) при 37°С и 5% СО₂. На следующий день планшеты встряхивали на орбитальном шейкере в течение 1 мин при 900 об/мин. Наконец, измеряли флуоресценцию (возбуждение: 355 нм, эмиссия: 460 нм) с использованием PerkinElmer EnVision в режиме сканирования сверху.

Пример 30. Анализ ингибирования клеточной активности HDAC класса I ингибиторами деацетилазы гистонов (HDAC) класса IIa; клеточный субстрат (Lys-Ac).

Активность в отношении HDAC класса I ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) класса IIa количественно определяли путем измерения клеточной ферментативной активности деацетилазы гистонов с использованием флуорогенного субстрата, Boc-Lys(Ac)-AMC. Указанные измерения выполняли согласно способу, описанному в примере 29, с использованием субстрата Boc-Lys(Ac)-AMC вместо ВосLys(ТФУ)-AMC.

Применяя способы синтеза, аналогичные описанным выше и протоколов анализа, описанных выше, были синтезированы и исследованы следующие соединения. Примеры 1, 17 и 23 в таблице ниже показаны в виде формиатных солей, однако предполагается, что в данных анализах эквивалентным образом действует и свободное основание.

Пример	Структурная формула	Биохимическ ая ICso HDAC4 (мкМ)	Клеточн ая (LysТФУ) IC50 (мкМ)	Клеточн ая (LysAc) IC50 (мкМ)
1	..... ^о=\ Λ—2 / jL а LL	0,10	1,6	>50

- 53 036965

- 54 036965

- 55 036965

14	°\ Ο л—^{ζ ч}о·^ ι£	0,016	0,18	7,7
15	-π 7¹ .......	0,008	0,069	5,1
16	........t Ο Α	0,007	0,012	0,89
17	Π	0,012	0,028	0,69
18	^чо^г> ΐιΓ	0,006	0,19	12,7

- 56 036965

Ссылки:

1) Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 17 (2007) 6476-6480.

Несмотря на то что показаны и описаны некоторые варианты реализации изобретения, в них могут быть внесены различные модификации и замены, не выходящие за рамки сущности и объема настоящего изобретения. Например, для целей толкования формулы изобретения предполагается, что указанная формула изобретения не должна толковаться каким-либо образом более узко, чем следует из ее буквального изложения, и, таким образом, не предполагается, что примеры вариантов реализации настоящего изобретения ограничивают формулу изобретения. Соответственно, необходимо понимать, что настоящее изобретение описано иллюстративно, без ограничения объема притязаний.

Claims

1. Соединение формулы I

или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров;

где W представляет собой CR⁵; X представляет собой N или CR⁶; Y представляет собой CR⁷ и Z

- 57 036965 представляет собой CR⁸;

R¹ выбран из H и C1-C3 алкила;

R² представляет собой С₂-С₃ алкилен, незамещенный или замещенный С1-С₂ галогеналкилом или 3или 4-членным циклоалкилом;

R³ и R⁴, совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-, 5-, 6- или 7-членный моноциклический гетероциклоалкил, имеющий 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S, и не имеющий заместителей или имеющий от 1 до 5 заместителей, независимо выбранных из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероциклоалкила, имеющего 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S, карбокси, C_6-12 арила, циано, галогена и 5-12-членного гетероарила, имеющего 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S, где C_6-12 арил и 5-12-членный гетероарил не содержат заместителей или дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, независимо выбранных из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена; или

1 -азаспиро[3.3]гептан-1 -ила,

3 -азабицикло [3.1.0]гексан-3 -ила,

3 -азабицикло [3.2.0]гептан-3 -ила,

3-азабицикло[3.2.1]гептан-3-ила,

3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ила,

3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ила,

5 -азаспиро[2.4]гептан-5 -ила,

5 -азаспиро[2.5]октан-5 -ила,

6-азаспир о[2.5] октан-6-ила,

1 -азаспиро[3.3]гептан-1 -ила,

6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ила, изоиндолин-2-ила и октагидроциклопента[с]пиррол-2-ила, каждая из которых не содержит заместителей или содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероциклоалкила, имеющего 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S, карбокси, C_6-12 арила, циано, галогена и 512-членного гетероарила, имеющего 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S, где C_6-12 арил и 5-12членный гетероарил не содержат или дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена, каждый из R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ независимо выбран из Н, C1-C4 алкила, C1-C4 галогеналкила и галогена;

при условии, что если R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5или 6-членный моноциклический гетероциклоалкил, тогда R² представляет собой С2-С3 алкилен, замещенный С1-С₂ галогеналкилом или 3- или 4-членным циклоалкилом.

2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где соединение формулы I представляет собой соединение формулы II

Формула II

3. Соединение формулы III

R⁶ О I R⁴

Формула III или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где каждый из R¹, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ представляет собой Н и

R³ и R⁴, совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный моноциклический гетероциклоалкил, имеющий 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S, и замещенный одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из 3- или 4-членного циклоалкила и 5-12-членного гетероарила, имеющего 1-4 гетероатома, выбранных из N, О и S.

4. Соединение по любому из пп.1, 2 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где R⁶ представляет собой Н.

5. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оп-

- 58 036965 тических изомеров, где указанное соединение формулы I представляет собой соединение формулы V

6. Соединение по любому из пп.1, 2 или 5 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где R² представляет собой С₂-С₃ алкилен, необязательно замещенный 3- или 4-членным циклоалкилом.

7. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где указанное соединение формулы I представляет собой соединение формулы VI

8. Соединение по любому из пп.1, 2 и 4-7 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где R⁵ представляет собой Н; или R⁷ представляет собой Н; или R⁸ выбран из Н, галогена и метила.

9. Соединение по любому из пп.1, 2 и 4-8 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где R¹ выбран из H и метила.

10. Соединение по любому из пп.1, 2 и 4-9 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4- или 7-членный моноциклический гетероциклоалкил, выбранный из 3-фенилазетидин1-ила, и азепан-1-ила.

11. Соединение по любому из пп.1, 2 и 4-9 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где

R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный моноциклический гетероциклоалкил, имеющий 1-4 гетератома, выбранных из N, О и S, и необязательно содержащий от одного до пяти заместителей, независимо выбранных из C1-C3 алкокси, C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4-членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероциклоалкила, имеющего 1-4 гетератома, выбранных из N, О и S, карбокси, C_6-12арила, циано, гало, и 5-12-членного гетероарила, имеющего 1-4 гетератома, выбранных из N, О и S, где C_6-12 арил и 5-12-членный гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена; или

R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный моноциклический гетероциклоалкил, имеющий 1-4 гетератома, выбранных из N, О и S, и необязательно содержащий от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкокси, C1C₃ алкила, C1-C3 галогеналкокси, C1-C3 галогеналкила, 3- или 4-членного циклоалкокси, 3- или 4членного циклоалкила, 3- или 4-членного гетероциклоалкила, имеющего 1-4 гетератома, выбранных из N, О и S, C_6-12 арила и 5-12-членного гетероарила, имеющего 1-4 гетератома, выбранных из N, О и S, где C_6-12 арил и 5-12-членный гетероарил необязательно дополнительно содержат от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена; или

R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный моноциклический гетероциклоалкил, имеющий 1-4 гетератома, выбранных из N, О и S, и необязательно содержащий от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси и C_6-12 арила, где C_6-12 арил необязательно дополнительно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена; или

R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный моноциклический гетероциклоалкил, имеющий 1-4 гетератома, выбранных из N, О и S, и необязательно содержащий от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкокси и фенила, где фенил необязательно дополнительно содержит от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила, C1-C3 галогеналкила и галогена; или

R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный моноциклический гетероциклоалкил, имеющий 1-4 гетератома, выбранных из N, О и S, и необязательно содержащий от одного до пяти заместителей, каждый из которых независимо выбран из метила, дифторметокси и фенила; или

R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный моно- 59 036965 циклический гетероциклоалкил, выбранный из пирролидин-1-ила и пиперидин-1-ила, каждый из которых необязательно содержит один заместитель, выбранный из метила, дифторметокси и фенила; или

R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членный моноциклический гетероциклоалкил, выбранный из пирролидин-1-ила, 2-метилпирролидин-1-ила и 3(дифторметокси)пиперидин-1 -ила.

12. Соединение по любому из пп.1-9 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-членный моноциклический гетероциклоалкил, имеющий 1-4 гетератома, выбранных из N, О и S, и замещенный одним 3- или 4-членным циклоалкилом или замещенный одним гетероарилом.

13. Соединение по любому из пп.1, 2 и 4-9 или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, где R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 6-, 7-, 8-, 9- или 10-членную гетеробициклическую группу, выбранную из

1 -азаспиро [3.3] гептан-1 -ила,

3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ила,

3 -азабицикло [3.2.0]гептан-3 -ила,

3 -азабицикло [3.2.1] гептан-3 -ила,

3 -азабицикло [3.2.1] октан-3 -ила,

3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ила,

5 -азаспиро [2.4] гептан-5 -ила,

5-азаспиро [2.5]октан-5 -ила,

6 -азаспиро [2.5 ]октан-6 -ила,

1 -азаспиро [3.3] гептан-1 -ила,

6-азабицикло [3.2.0] гептан-6 -ила, изоиндолин-2-ила и октагидроциклопента[с]пиррол-2-ила, и каждый из которых необязательно содержит один или два заместителя, каждый из которых независимо выбран из Ci-C₃ алкокси, Ci-C₃ алкила, Ci-C₃ галогеналкокси, Ci-C₃ галогеналкила и карбокси; или

R³ и R⁴ совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 6-, 7-, 8-, 9- или 10членную гетеробициклическую группу, выбранную из

1 -азаспиро [3.3] гептан-1 -ила,

3 -азабицикло [3.1.0]гексан-3 -ила,

3 -азабицикло [3.2.0]гептан-3 -ила,

3 -азабицикло [3.2.1]гептан-3 -ила,

3 -азабицикло [3.2.1]октан-3 -ила,

3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ила,

5 -азаспиро [2.4] гептан-5 -ила,

5 -азаспиро [2.5]октан-5 -ила,

6 -азаспиро [2.5] октан-6 -ила,

1 -азаспиро [3.3] гептан-1 -ила,

6-азабицикло[3.2.0]гептан-6-ила, изоиндолин-2-ила и октагидроциклопента[с]пиррол-2-ила, и каждый из которых необязательно содержит один или два заместителя, каждый из которых независимо выбран из C1-C3 алкила.

- 60 036965

14. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров, выбранное из

- 61 036965

- 62 036965

- 63 036965

- 64 036965

15. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания или состояния, опосредованного по меньшей мере одной деацетилазой гистонов, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-14 или его фармацевтически приемлемую соль, оптический изомер или смесь оптических изомеров и фармацевтически приемлемый носитель.

16. Способ получения фармацевтической композиции по п.15, включающий смешивание соединения по любому из пп.1-14 или его фармацевтически приемлемой соли, оптического изомера или смеси оптических изомеров и фармацевтически приемлемого носителя.

17. Способ лечения состояния или нарушения, опосредованного по меньшей мере одной деацетилазой гистонов, у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-14 или его фармацевтически приемлемой соли, оптического изомера или смеси оптических изомеров.

18. Способ лечения состояния или нарушения, реагирующего на ингибирование по меньшей мере одной деацетилазы гистонов, у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-14 или его фармацевтически приемлемой соли, оптического изомера или смеси оптических изомеров.

19. Способ по п.17 или 18, отличающийся тем, что указанная по меньшей мере одна деацетилаза гистонов представляет собой HDAC-4; или тем, что указанное состояние или нарушение включает нейродегенеративную патологию; или тем, что указанное состояние или нарушение представляет собой болезнь Хантингтона.