EA029234B1 - Нацеленная на egfr терапия - Google Patents

Нацеленная на egfr терапия Download PDF

Info

Publication number
EA029234B1
EA029234B1 EA201400012A EA201400012A EA029234B1 EA 029234 B1 EA029234 B1 EA 029234B1 EA 201400012 A EA201400012 A EA 201400012A EA 201400012 A EA201400012 A EA 201400012A EA 029234 B1 EA029234 B1 EA 029234B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
gefitinib
erlotinib
inhibitor
group
cetuximab
Prior art date
Application number
EA201400012A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201400012A1 (ru
Inventor
Кристиан Керстен
Марте Гронлье Камерон
Свейн Мьяланн
Original Assignee
Сюкехусет Сёрланнет Хф
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сюкехусет Сёрланнет Хф filed Critical Сюкехусет Сёрланнет Хф
Publication of EA201400012A1 publication Critical patent/EA201400012A1/ru
Publication of EA029234B1 publication Critical patent/EA029234B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Изобретение относится к композициям и способам для лечения неврологических расстройств. В частности, настоящее изобретение относится к EGFR в качестве клинической мишени для лечения неврологических расстройств.

Description

Изобретение относится к композициям и способам для лечения неврологических расстройств. В частности, настоящее изобретение относится к ΕΟΡΚ в качестве клинической мишени для лечения неврологических расстройств.
029234
Область, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к композициям и способам для лечения неврологических расстройств. В частности, настоящее изобретение относится к ЕОРК в качестве клинической мишени для лечения неврологических расстройств.
Предпосылки создания изобретения
Хроническая и/или нейропатическая боль в результате повреждения нервов представляет собой основную проблему здоровья во всем мире. Нейропатическая боль (НБ) вызывается первичным повреждением или заболеванием соматосенсорной системы (1еп8еи Т.8., Вагоп К., Наапраа М. и др. А пс\у бейтйои оГ пеигорабйс раш. Рат 2011; 152: 2204-5). Обычно ее тяжесть, хронический характер и неудовлетворительное соотношение побочных эффектов к выгоде при использовании современной фармакотерапии НБ (Ό\\όγ16η К.Н. Аи оуег\ае\у оГ иеигора1Ыс раш: куибготек, кутрЮтк, 51дик апб 5еуега1 тескатктк. СИи 1 Рат 2002; 18: 343-9; Ртиегир Ν.Β., 8тбтир 8.Н., 1еи8еи Т.8. Тке еуМеисе Гог ркагтасо1одюа1 1геа1теи! оГ иеигора1к1с раш. Рат 2010; 150: 573-81) приводят к тяжелому повреждению физического и психологического функционирования у больных (1еп8еи М.Р., СкобгоГГ М.Е, О\уогкт К.Н. Тке 1трас! оГ иеитора1кю раш ои кеакк-те1а1еб сщаШу оГ ИГе: ге\ае\у аиб ипрНсаОопк. №ито1оду 2007; 68: 1178-82). В общей популяции частота возникновения НБ оценивается на уровне 1% ЩеКтап 1.Р., Кегк1ааи 1., Ниудеи Р.Е, Войта Р.А., 81игкеиЬоот М.С. 1ис1беисе га1ек аиб 1геа1теи1 оГ иеигора1к1с раш соибкюик т !ке деиега1 рори1а!юи. Рат 2008; 137: 681-8) и продолжает расти (Ό\\όγ1<ητ выше). Вытекающее из этого преобладание умеренной -тяжелой НБ составляет 5% (Воикаккйа Ό., Еаи1ей-Мте1 М., А!!а1 Ν., Баитеи! В., ТоиЬои1 С. Ртеуа1еисе оГ сктошс раш \\кк иеитора1к1с скагасЮпкОск ш !ке деиега1 рори1акои. Раш 2008; 136: 380-7), что делает ее общей и труднопреодолимой проблемой здоровья в мире.
Несмотря на существование многочисленных видов этиологии НБ, механизмы ее сохранения вне зависимости от происхождение, как выяснилось, вовлекают взаимодействие нейронных, глиальных и иммунных клеток (8ско1/ 1., \Уоо1Г С.1. Тке иеитора1к1с раш ктаб: иеигопк, 1ттиие се11к аиб дка. №й №игокт 2007; 10: 1361-8). Взаимодействие между этими клетками было приписано передачи сигнала с помощью семейства белков активируемой митогеном протеинкиназы (МАРК) (Л К.К., Оегеаи К.^1., Ма1саидю М., 81пскаг1/ О.К. МАР кзиаке аиб раш. Вташ Кек Кеу 2009; 60: 135-48).
Нейропатическая боль представляет собой состояния хронической боли, которое обычно сопровождается повреждением тканей. При нейропатической боли нервные волокна сами по себе могут повреждаться, подвергаться нарушению функции или травмироваться. Такие поврежденные нервные волокна посылают неправильные сигналы к другим центрам боли. Последствия повреждения нервных волокон включают изменение функции нервов как в сайте повреждения, так и в участках, находящихся поблизости повреждения. Некоторые исследования нейропатической боли предлагают применять нестероидные противовоспалительные препараты, такие как Алив или Мотрин, которые могут облегчить боль. Некоторые люди могут нуждаться в более сильном обезболивающем средстве, таком как те, что содержат морфин. Противосудорожные препараты и антидепрессорные лекарственные средства, как выяснилось, могут работать в некоторых случаях. Если является втянутым другое состояние, такое как диабет, то более качественный контроль этого заболевания может ослабить боль.
В случаях, когда лечение является сложным, специалист, занимающийся болью, может использовать инвазивную терапию или терапию на основе вживляемого устройства для контроля боли. Электрическая стимуляция нервов, вовлеченных в возникновение нейропатической боли, может также контролировать симптомы боли.
К сожалению, нейропатическая боль часто является слабо чувствительной к стандартным способам лечения боли, и иногда пациенту может становиться хуже вместо облегчения в течение времени. Для некоторых людей это может приводить к серьезному нарушению функций. Современные способы лечения характеризуются неудовлетворительным соотношением побочных эффектов к пользе.
Таким образом, являются необходимыми дополнительные способы терапии, которые являются направленными на неврологические расстройства, такие как нейропатическая боль.
Краткое изложение сущности изобретения
Настоящее изобретение относится к композициям и способам для лечения неврологических расстройств. В частности, настоящее изобретение относится к ЕОРК в качестве клинической мишени для лечения неврологических расстройств.
В соответствии с этим в некоторых воплощениях настоящее изобретение обеспечивает способы лечения субъекта с неврологическим расстройством, включающие введение указанному субъекту агента, который ингибирует по крайней мере одну биологическую функцию ЕОРК полипептида. В некоторых воплощениях субъект демонстрирует симптомы неврологического расстройства, и указанный агент снижает или модулирует симптомы указанного неврологического расстройства. В некоторых воплощениях реагент представляет собой связывающий антиген белок, который специфически связывается с указанным ЕОРК полипептидом. В некоторых воплощениях связывающий антиген белок является выбранным из группы, которая состоит из бевацизумаба, цетуксимаба, конатумумаба, ганитумаба, матузумаба, нецитумумаба, нимотузумаба, панитумумаба, рилотумумаба, залутумумаба. В некоторых воплощениях связывающий антиген белок является предпочтительно выбранным из группы, которая состоит из цетукси- 1 029234
маба или панитумумаба. В некоторых воплощениях реагент представляет собой лекарственное средство на основе малой молекулы. В некоторых воплощениях лекарственное средство на основе малой молекулы является выбранным из группы, которая состоит из афатиниба, эрлотиниба, гефитиниба, лапатиниба, нератиниба и вандетаниба. В некоторых воплощениях лекарственное средство на основе малой молекулы является предпочтительно выбранным из группы, которая состоит из гефитиниба и эрлотиниба. В некоторых воплощениях субъект представляет собой животное. В некоторых воплощениях животное представляет собой человека. В некоторых воплощениях субъект не имеет рака или ранее не подвергался лечению от рака. В некоторых воплощениях неврологическое расстройство представляет собой нейропатическую боль. В некоторых воплощениях неврологическое расстройство является выбранным из группы, которая состоит из боли, воспаления седалищного нерва, рассеянного склероза, депрессии, деменции, болезни Паркинсона, инсульта, аксотомии и ишемии или реперфузионного повреждения, синдрома Дауна и аутизма. В некоторых воплощениях агент, который ингибирует по крайней мере одну биологическую функцию БОРК полипептида, вводится совместно по крайней мере с одним терапевтическим агентом. В некоторых воплощениях, по крайней мере, дополнительный терапевтический агент является выбранным из группы, которая состоит из нестероидных противовоспалительных препаратов, стероидных противовоспалительных лекарственных средств, лекарственных средств на основе опиоидов, антидепрессантов, противосудорожных агентов, противоэпилептических агентов, анксиолитиков, каннабиноидов и их комбинаций.
В некоторых воплощениях настоящее изобретение обеспечивает способы лечения неврологического расстройства, включающие введение реагента, который ингибирует по крайней мере одну биологическую функцию ЕОРК полипептида, субъекту, который демонстрирует симптомы неврологического расстройства, где указанное введение снижает, модулирует или устраняет указанные симптомы. В некоторых воплощениях агент, который ингибирует по крайней мере одну биологическую функцию ЕОРК полипептида, вводится совместно по крайней мере с одним терапевтическим агентом. В некоторых воплощениях, по крайней мере, дополнительный терапевтический агент является выбранным из группы, которая состоит из нестероидных противовоспалительных препаратов, стероидных противовоспалительных лекарственных средств, лекарственных средств на основе опиоидов, антидепрессантов, противосудорожных агентов, противоэпилептических агентов, анксиолитиков, каннабиноидов и их комбинаций.
В некоторых воплощениях настоящее изобретение обеспечивает применение агента, который ингибирует по крайней мере одну биологическую функцию ЕОРК для лечения неврологического расстройства. В некоторых воплощениях неврологическое расстройство является выбранным из группы, которая состоит из нейропатической боли, воспаления седалищного нерва, рассеянного склероза, депрессии, деменции, болезни Паркинсона, инсульта, аксотомии и ишемии или реперфузионного повреждения, синдрома Дауна и аутизма. В некоторых воплощениях реагент представляет собой связывающий антиген белок, который специфически связывается с указанным ЕОРК полипептидом. В некоторых воплощениях связывающий антиген белок является выбранным из группы, которая состоит из бевацизумаба, цетуксимаба, конатумумаба, ганитумаба, матузумаба, нецитумумаба, нимотузумаба, панитумумаба, рилотумумаба, трастумумаба и залутумумаба. В некоторых воплощениях связывающий антиген белок является предпочтительно выбранным из группы, которая состоит из цетуксимаба или панитумумаба. В некоторых воплощениях реагент представляет собой лекарственное средство на основе малой молекулы. В некоторых воплощениях лекарственное средство на основе малой молекулы является выбранным из группы, которая состоит из афатиниба, эрлотиниба, гефитиниба, лапатиниба, нератиниба и вандетаниба. В некоторых воплощениях лекарственное средство на основе малой молекулы является предпочтительно выбранным из группы, которая состоит из гефитиниба и эрлотиниба. В некоторых воплощениях агент, который ингибирует по крайней мере одну биологическую функцию ЕОРК полипептида, вводится совместно по крайней мере с одним терапевтическим агентом. В некоторых воплощениях, по крайней мере, дополнительный терапевтический агент является выбранным из группы, которая состоит из нестероидных противовоспалительных препаратов, стероидных противовоспалительных лекарственных средств, лекарственных средств на основе опиоидов, антидепрессантов, противосудорожных агентов, противоэпилептических агентов, анксиолитиков, каннабиноидов и их комбинаций. В некоторых воплощениях введение или совместное введение снижает или модулирует симптомы указанного неврологического расстройства.
Дополнительные воплощения описываются в данной заявке.
Описание фигур
Фиг. 1 а-ά обеспечивает графическое изображение способов лечения в соответствии с данным изобретением, а) Случай 2. Фотографии, отображающие персистенцию патологий, типичных для СКР81, в правой руке пациента. Лечение с помощью ингибитора ЕОКР цетуксимаба облегчило НБ, но не оказало влияния на вазомоторную патологию лежащего в основе заболевания, Ь) Случай 3. Магнитнорезонансное изображение, взятое через 6 недель после операции, по причине возобновления НБ после начального облегчения. Изображение демонстрирует образование патологической рубцовой ткани вокруг пятого поясничного корешка спинно-мозгового нерва пациента, с и ά) Случай 4. Компьютерная томограмма области таза пациента, полученная до с) и после ά) ингибирования ЕОРК. В интервале между
- 2 029234
томограммами пациент полностью освобождался от своей НБ, несмотря на растущую опухоль брюшной полости, которая все больше захватывала крестцовые нервы.
Фиг. 2 обеспечивает графические изображения ΒΡΙ-измерений до и после проведения ингибирования БОРК.
Определения
Для того чтобы способствовать пониманию данного изобретения ряд терминов и фраз будет определен ниже:
Как используется в данной заявке, термин "нейропатическая боль" относится к комплексному хроническому состоянию боли, которое обычно сопровождается повреждением тканей. Нейропатическая боль включает, но без ограничения таковыми, следующие синдромы и болезненные состояния: импинджмент нервов, синдром Лериша-Зудека типов I и II, невралгию тройничного нерва, фантомную боль, диабетическую нейропатию, повреждение спинного мозга и повреждение нервов по причине рака, ожогов и травмы.
Как используется в данной заявке, термин "ингибирует по крайней мере одну биологическую активность ЕОРК" относится к любому агенту, который снижает любую активность ЕОРК (например, включая, но без ограничения таковыми, активности, описанные в данной заявке), путем непосредственного контакта с ЕОРК белком, контакта с мРНК или геномной ДНК ЕОРК, вызывая конформационные изменения ЕОРК полипептидов, снижая уровни ЕОРК белка или препятствуя взаимодейстиям ЕОРК с партнерами передачи сигнала, подобными различным потенциальным лигандам, включая, но не ограничиваясь таковыми, ЕОР, ТОР-альфа, нейрегулин, ЫОР и/или гомо- и гетеродимеры рецепторов, включая, но не ограничиваясь таковыми, НЕК1, НЕК2, НЕК3 и НЕК4, и оказывая влияние на гены-мишени ЕОРК. Ингибиторы также включают молекулы, которые опосредованно регулируют биологическую активность ЕОРК путем перехвата расположенных выше сигнальных молекул.
Как используется в данной заявке, термин "миРНК" относится к малым интерферирующим РНК. В некоторых воплощениях миРНК включает дуплексный или двухцепочечный участок, имеющий приблизительно 18-25 нуклеотидов в длину; часто миРНК содержит от приблизительно двух до четырех неспаренных нуклеотидов на 3' конце каждой цепи. По крайней мере одна цепь дуплексного или двухцепочечного участка миРНК является существенно гомологичной или существенно комплементарной целевой молекуле РНК. Цепочка, комплементарная целевой молекуле РНК, представляет собой "антисмысловую цепочку", цепочка, гомологичная целевой молекуле РНК, представляет собой "смысловую цепочку" и также является комплементарной антисмысловой цепочке миРНК. миРНК может также содержать дополнительные последовательности; неограничивающие примеры таких последовательностей включают связывающие последовательности, или петли, а также стержневые и другие складчатые структуры. миРНК, как оказалось, по-видимому, функционируют в качестве ключевых посредников в запуске РНК интерференции у беспозвоночных и у позвоночных, а также в запуске специфической для последовательности деградации РНК в процессе посттранскрипционного сайленсинга генов у растений.
Термин "РНК интерференция" или "РНКи" относится к сайленсингу или снижению генной экспрессии с помощью миРНК. Таковой представляет собой процесс специфического для последовательности посттранскрипционного сайленсинга гена у животных и растений, который инициируется с помощью миРНК, которая является гомологичной в своем дуплексном участке последовательности молчащего гена. Г ен может быть эндогенным или экзогенным по отношению к организму, присутствует в интегрированном виде в хромосоме или присутствует в векторе трансфекции, который не является интегрированным в геном. Экспрессия гена является либо полностью, либо частично ингибированной. РНКи может также рассматриваться для ингибирования функции целевой РНК; функция целевой РНК может быть полной или частичной.
Термин "эпитоп", как используется в данной заявке, относится к той части антигена, которая осуществляет контакт с определенным антителом.
Когда белок или фрагмент белка используется для иммунизации животного-хозяина, многочисленные участки белка могут индуцировать выработку антител, которые специфически связываются с данным участком или трехмерной структурой на белке; эти структуры или участки называются "антигенными детерминантами". Антигенная детерминанта может конкурировать с интактным антигеном (то есть "иммуноген" используется для того, чтобы вызвать иммунный ответ) за связывание с антителом.
Термины "специфическое связывание" или "специфически связываются" в случае, когда они используются со ссыпкой на взаимодействие антитела и белка или пептида, означают, что взаимодействие является зависимым от присутствия определенной структуры (то есть антигенной детерминанты или эпитопа) на белке; другими словами, антитело узнается и связывается специфической структурой предпочтительнее, чем с белками в общем. Например, если антитело является специфическим для эпитопа А, то присутствие белка, содержащего эпитоп А (или свободного, немеченного А), в реакции, содержащей меченый А и антитело, будет снижать количество меченого А, связанного с антителом.
Как используется в данной заявке, термины "неспецифическое связывание" и "фоновое связывание", когда используются при упоминании взаимодействия антитела и белка или пептида, относятся к взаимодействию, которое не является зависимым от определенной структуры (то есть антитело связыва- 3 029234
ется с белками в общем случае предпочтительнее, чем с определенной структурой, такой как эпитоп).
Как используется в данной заявке, термин "субъект" относится к любому животному (например, млекопитающему), включая, но без ограничения таковыми, людей, приматов, отличных от человека, грызунов и подобных им, которое является реципиентом для определенного лечения. Типично, термины "субъект" и "пациент" используются попеременно в данной заявке при ссылке на субъекта, который представляет собой человека.
Как используется в данной заявке, термин "животные, отличные от человека" относится ко всем животным, отличным от человека, включая, но без ограничения таковыми, позвоночных, таких как грызуны, приматы, отличные от человека, овцы, коровы, жвачные животные, зайцеобразные, свиньи, козы, лошади, собаки, коты, птицы и т.д.
Термин "ген" относится к последовательности нуклеиновой кислоты (например, ДНК), которая включает кодирующие последовательности, необходимые для продукции полипептида, предшественника, или РНК (например, рРНК, тРНК). Полипептид может кодироваться кодирующей последовательностью полной длины или любой частью кодирующей последовательности длинной настолько, чтобы сохранялись желаемая активность или функциональные свойства (например, ферментативная активность, связывание лиганда, сигнальная трансдукция, иммуногенность и т.д.) последовательности полной длины или фрагмента. Термин также охватывает кодирующий участок структурного гена и последовательности, расположенные рядом с кодирующим участком на обоих 5' и 3' концах для расстояния приблизительно 1 кб или более на любом конце так, что ген соответствует длине полноразмерной мРНК. Последовательности, которые располагаются 5' или выше от кодирующего участка и присутствуют на мРНК, называются 5' нетранслируемыми последовательностями. Последовательности, которые расположены 3' или ниже от кодирующего участка и присутствуют на мРНК, называются 3' нетранслируемыми последовательностями. Термин "ген" охватывает как кДНК, так и геномные формы гена. Геномная форма или клон гена содержит кодирующий участок, который прерывается некодирующими последовательностями, которые называются "интронами" или "промежуточными последовательностями". Интроны представляют собой сегменты гена, которые транскрибируются в ядерную РНК (ЬиРНК); интроны могут содержать ядерные элементы, такие как энхансеры. Интроны удаляются или "вырезаются" из ядерного или первичного транскрипта; интроны, таким образом, являются отсутствующими в транскрипте информационной РНК (мРНК). мРНК функционирует в процессе трансляции для определения последовательности или порядка аминокислот в образующемся полипептиде.
Как используется в данной заявке, термин "генная экспрессия" относится к процессу превращения генетической информации, закодированной в гене, в РНК (например, мРНК, рРНК, тРНК или мяРНК) с помощью "транскрипции" гена (то есть посредством ферментативного действия РНК полимеразы), и для генов, которые кодируют белок, в белок с помощью "трансляции" мРНК. Генная экспрессия может регулироваться на многих этапах этого процесса. "Повышающая регуляция" или "активация" относится к регуляции, которая увеличивает выработку продуктов генной экспрессии (то есть РНК или белка), в то время как "понижающая регуляция" или "репрессия" относится к регуляции, которая снижает продукцию. Молекулы (например, транскрипционные факторы), которые являются вовлеченными в повышающую или понижающую регуляцию, часто называются "активаторами" и "репрессорами" соответственно.
"Аминокислотная последовательность" и термины, такие как "полипептид" или "белок", не подразумеваются как такие для ограничения аминокислотной последовательности до нативной аминокислотной последовательности, ассоциированной с приведенной белковой молекулой.
Термин "нативный белок", как используется в данной заявке, указывает на то, что белок не содержит аминокислотных остатков, которые кодируются векторными последовательностями, то есть нативный белок содержит только те аминокислоты, которые обнаружены в белке в том виде, в котором он существует в природе. Нативный белок может быть получен с помощью рекомбинантных способов или может быть изолирован из существующего в природе источника.
Как используется в данной заявке, термин "часть" при упоминании белка (например, в выражении "часть данного белка") относится к фрагментам этого белка. Фрагменты могут варьировать по размерам от четырех аминокислотных остатков до полной аминокислотной последовательности за вычетом одной аминокислоты.
Как используется в данной заявке, термин "ίη νίίτο" относится к искусственному окружению и к процессам или реакциям, которые происходят в искусственном окружении. Ιη νίίτο окружение может состоять из, но без ограничения таковыми, пробирок для исследований и культуры клеток. Термин "ίη νίνο" относится к естественному окружению (например, животному или клетке) и к процессам или реакции, которые осуществляются в природном окружении.
Термины "исследуемое соединение" и "кандидатное соединение" относятся к любой химической сущности, фармацевтической, лекарственной и тому подобное, которая является кандидатом для применения с целью лечения или предотвращения заболевания, расстройства, болезненного состояния или нарушения функции организма (например, неврологического расстройства). Исследуемые соединения включают как известные, так и потенциальные терапевтические соединения. Исследуемое соединение может быть определено как терапевтическое путем скрининга при использовании способов, описанных в
- 4 029234
данной заявке. В некоторых воплощениях исследуемые соединения включают антисмысловые соединения.
Как используется в данной заявке, термин "образец" используется в своем широком смысле. В одном смысле он предназначен для включения препаратов или культуры, полученных из любого источника, биологических образцов и образцов, полученных из окружающей среды. Биологически образцы могут быть получены от животных (включая людей) и охватывают жидкости, твердые вещества, ткани и газы. Биологические образцы включают как продукты, такие, как плазма крови, сыворотка и тому подобное. Образцы, полученные из окружающей среды, включают материалы из этой среды, такие как поверхностный материал, почва, вода, кристаллы и промышленные образцы. Такие примеры не следует трактовать как такие, которые ограничивают типы образцов, которые применяются для описанных композиций и способов.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к композициям и способам для лечения неврологических расстройств. В частности, настоящее изобретение относится к БОРК в качестве клинической мишени для лечения неврологических расстройств.
Терапевтические применения.
Настоящее изобретение относится к композициям и способам для лечения неврологических расстройств. В частности, настоящее изобретение относится к ЕОРК в качестве клинической мишени для лечения неврологических расстройств.
ЕОР-МАРК сигнальная система активируется в нейронах и глиальных клетках в ответ на повреждение и дисфункцию. Ингибирование ЕОРК может прерывать отрицательную обратную связь, облегчая, таким образом, симптомы неврологических расстройств (боль, нейропатическая боль, рассеянный склероз, депрессия, деменция, болезнь Паркинсона, инсульт, аксотомия и тому подобное). В частности, при нейропатической боли ингибируется патологическая чувствительность нервных волокон для боли.
Боль по причине повреждения нервов, как предполагается, вызывается и поддерживается МАРК путем передачи сигнала с помощью трех путей: ЕКК, р38 и ΊΝΚ в центральных, спинномозговых и периферических нервах, а также в глии центральной и периферической нервной системы, например в астроцитах и шванновских клетках (Л К.К., Оегеаи К\УТ. Ма1саидю М., НпсНаП/ О.К. МАР ктазе апб рат. Вгат Кез Кеу 2009; 60(1): 135-48). Кроме того, сообщение между нервными клетками, глиальными клетками и иммунными клетками представляет собой установленный патогенетический фактор при нейропатической боли (8с1ю1/ 1., \Уоо1Г С.1. ТНе пенгорабис рат Нзаб: пеигопз, 1ттипе се11з апб дПа. №-И. №игозск 2007; 10(11): 1361-8). Активация взаимодействия между этими клетками после повреждения нервной системы была продемонстрирована как зависимая от МАРК пути передачи сигнала, потенциально активируемого ЕОРК, который подвергается повышающей регуляции в нервной системе (ХУегпег М.Н., Nаппеу Б.В., §1озсНеск С.М., Кшд Ь.Е. босаП/аНоп оГ ПптипогеасПуе ер1бегта1 дго\\1Н ГасЮг гесерГогз ш Нитап пегуоиз зузГет. 1. НШосНет. СуГосНет. 1988; 36(1): 81-6; Мак1аб А., №со1ш 1.К., ВюНзе1 К.Т, Еуепзоп ТЕ., Бее Т.С., ТНгеабдШ Э.\У. и др. ТНе ЕОРК 18 гесцигеб Гог ргорег шпегуабоп 1о Не зкгп. 1. ГпуезГ. ИегтаГо1. 2009; 129(3): 690-8; Л К.К. МНодеп-асЛуаГеб ргоГет ктазез аз роГепЛа1 1агде1з Гог рат кШегз. Сигг Орш 1пуезЛд Игидз 2004; 5(1): 71-5).
Активация МАРК путей передачи сигнала имеет установленную значимость при неврологических заболеваниях и нейропатической боли. Ингибирование ЕОРК эффективно блокирует несколько из этих путей (1ΝΙ<, КА8-МЕК-ЕКК, 8ТАТ и т.д.). Воплощения настоящего изобретения обеспечивают способы лечения неврологических расстройств путем ингибирования ЕОРК. Настоящее изобретение не является ограниченным конкретным неврологическим расстройством. Например, в некоторых воплощениях настоящее изобретение обеспечивает способы ингибирования ЕОР рецептора для лечения боли, нейропатической боли, рассеянного склероза, депрессии, деменции, болезни Паркинсона, инсульта, ишемии и реперфузионного повреждения, ишемического повреждения мозга и аксотомии (см., например, Оуад1 и др., №игозс1епсе. 2011 1ип 30; 185: 116-24 и СНеп-Р1обкш и др., Апп №иго1. 2011 Арг; 69(4): 655-63). Также предполагается, что введение агентов в соответствии с настоящим изобретением будет являться полезным для ослабления симптомов, ассоциированных с генетическими расстройствами, такими как синдром Дауна и аутизм.
Эксперименты, проведенные в процессе разработки воплощений настоящего изобретения, демонстрируют значительное, немедленное и повторяемое снижение боли без регрессии опухоли у пациента с нейропатической болью. Этот эффект наблюдали у пациентов, которых подвергали лечению с помощью цетуксимаба.
В соответствии с этим настоящее изобретение обеспечивает способы использования реагента, который ингибирует по крайней мере одну биологическую функцию ЕОРК полипептида для снижения, ослабления или модулирования, или обеспечивает профилактику одного или более симптомов, ассоциированных со следующими заболеваниями или расстройствами: боль, нейропатическая боль, воспаление седалищного нерва, рассеянный склероз, депрессия, деменция, болезнь Паркинсона, инсульт, ишемия и реперфузионное повреждение, ишемическое повреждение мозга, аксотомия, синдром Дауна и аутизм.
А. Терапия на основе антител.
- 5 029234
В некоторых воплощениях настоящего изобретения используют антитела, которые нацелены на БОРК. Любое приемлемое антитело (например, моноклональное, поликлоналыюе или синтетическое) может использоваться в терапевтических способах, раскрытых в данной заявке.
В некоторых воплощениях неврологические расстройства, такие как нейропатическая боль, подвергаются лечению при использовании связывающего антиген белка. Приемлемые связывающие антигнен белки включают, но не ограничены таковыми, бевацизумаб, цетуксимаб, конатумумаб, ганитумаб, матузумаб, нецитумумаб, нимотузумаб, панитумумаб, рилотумумаб, трастузумаб и залутумумаб. В некоторых предпочтительных воплощениях используется моноклональное антитело цетуксимаб (Εΐί ЬШу и Сотрапу, Νθ№ Уогк, ΝΥ). Цетуксимаб представляет собой рекомбинантное химерное антитело человекамыши на основе иммуноглобулина О1, которое связывается с внеклеточным доменом рецептора эпидермального фактора роста с более высокой аффинностью, чем любой эндогенный лиганд. Это связывание ингибирует рецептор фосфорилирования и активации, что приводит к интернализации и деградации рецептора (ТЬе Ъю1одюа1 ргорегбек оГ сеЮхнпаЬ. νίηοβηζί В., 8еЫауоп О., 8Шеба Μ., δαηΐίηί Ό., Τοηίηί О. СгП Кеу Опсо1 Нета1о1. 2008 А 68(2): 93-106. ЕриЪ 2008 Аид 3. Ке\ае\у). Цетуксимаб является разрешенным для лечения рака и наиболее часто используется при колоректальном раке при отсутствии КΚΑδ мутации в ЕОР пути передачи сигнала. Цетуксимаб был разработан для ингибирования активации ЕОРК, что приводит к дальнейшему ингибированию нескольких путей, в том числе МАРК пути передачи сигнала. Это 1дО1 антитело используется при колоректальном раке для ингибирования активации лиганда ЕОР, но поскольку он блокирует ЕОРК, то он также ингибирует связывание других лигандов, связывающих ЕОР. В других предпочтительных воплощения используется моноклональное антитело панитумумаб (Атдеп, ТЬоикапб Оак8, С А).
В предпочтительных воплощениях связывающие антиген белки представляют собой гуманизированные антитела. Способы для гуманизации антител являются хорошо известными в области техники (см., например, патенты США №№ 6180370, 5585089, 6054297 и 5565332; каждый из которых является введенным в данную заявку в качестве ссылки).
В предпочтительных воплощениях терапевтические средства на основе антитела являются рецептированными в виде фармацевтических композиций, как описывается ниже. В предпочтительных воплощениях введение композиции антитела в соответствии с настоящим изобретением приводит к способному к измерению снижению симптомов неврологического расстройства.
В. РНК интерференция и антисмысловые терапии.
В некоторых воплощениях настоящее изобретение использует агенты, которые модулируют экспрессию ЕОРК. Например, в некоторых воплощениях настоящее изобретение использует композиции, которые включают олигомерные антисмысловые соединения или РНКи, в частности олигонуклеотиды (например, те, что описаны в данной заявке) для использования в модулировании функций молекул нуклеиновой кислоты, которые кодируют ЕОРК, модулируя, в конечном счете, количество экспрессированного ЕОРК.
1. РНК интерференция (РНКи).
В некоторых воплощениях РНКи используется для ингибирования функций ЕОРК белка. РНКи представляет собой эволюционно сохраненный способ клеточной защиты для контроля экспрессии чужеродных генов в большинстве эукариот, включая людей. РНКи типично запускается с помощью двухцепочечной РНК (дцРНК) и вызывает специфическую для последовательности мРНК деградацию одноцепочечного целевого гомолога РНК в ответ на дцРНК. Медиаторы деградации мРНК представляют собой малые интерферирующие РНК дуплексы (миРНК), которые в норме продуцируются из длинной дцРНК путем ферментативного расщепления в клетке. миРНК в общем случае содержат 21 нуклеотид в длину (например, 21-23 нуклеотида в длину) и имеют структуру на основе спаренных оснований, которая характеризуется двумя выступающими нуклеотидами на 3'-конце. После введения малой РНК, или РНКи, в клетку предполагается, что последовательность доставляется к ферментному комплексу, который называется ΚΙδί'.' (индуцированный РНК сайленсинг комплекс). ΚΙδί.' узнает цель и расщепляет ее с помощью эндонуклеазы. Следует отметить, что если большие последовательности РНК доставляются в клетку, то фермент РНКаза III (Нюег) превращает более длинные дцРНК в дц миРНК фрагменты, которые содержат 21-23 нуклеотида.
Химически синтезированные миРНК стали мощными реагентами полногеномного анализа функции генов млекопитающих в культивируемых соматических клетках. Кроме их значения для валидации функции генов, миРНК также имеет высокий потенциал в качестве специфических для гена терапевтических агентов (Ти8сЬ1 и ВогкЬагб!, Мо1еси1аг 1п1егуеп1. 2002; 2(3): 158-67, данный источник является введенным в данную заявку в качестве ссылки).
Трансфекция миРНК в клетки животных приводит к мощному длительному сайленсингу специфических генов (Сар1еп и др., Ргос №11 Асаб δ® υ.δΑ. 2001; 98: 9742-7; Е1Ъа8Ыг и др., №1иге. 2001; 411:494-8; Е1Ъа8Ыг и др., Оепек Эеу. 2001;15: 188-200; и Е1Ъа8Ыг и др., ЕМВО I. 2001; 20: 6877-88, все эти источники являются введенными в данную заявку в качестве ссылки). Способы и композиции осуществления РНКи с помощью миРНК являются описанными, например, в патенте США № 6506559, который является введенным в данную заявку в качестве ссылки.
- 6 029234
миРНК являются особенно эффективными при снижении количеств нацеленной РНК, и путем удлинении белков, часто до неспособных к определению уровней. Эффект сайленсинга может длиться несколько месяцев и является чрезвычайно специфическим, поскольку несовпадение в одном нуклеотиде между РНК-мишенью и центральным участком миРНК часто является достаточным для предотвращения сайленсинга (Вгитте1катр и др., 8с1епсе 2002; 296: 550-3; и Но1еп и др., Ыис1е1с Άοίάβ Кее. 2002; 30: 1757-66, оба источника являются введенными в данную заявку в качестве ссылки).
Важным фактором для конструирования миРНК является присутствие доступных сайтов для связывания миРНК. Βπΐιοίπ и др. (1. ΒίοΙ. СНет.. 2003; 278: 15991-15997; является введенным в данную заявку в качестве ссылки) описывает применение типа набора ДНК, который называется сканирующим набором для поиска доступных сайтов в мРНК для конструирования эффективных миРНК. Эти наборы включают олигонуклеотиды, имеющие размер, который колеблется от мономеров до определенного максимума, обычно Сотетв, синтезированные при использовании физического барьера (фильтра) путем пошагового присоединения каждого основания в последовательности. Таким образом, эти наборы представляют собой полный олигонуклеотидный комплемент участка целевого гена. Г ибридизация целевой мРНК с этими наборами обеспечивает исчерпывающий профиль доступности этого участка целевой мРНК. Такие данные являются полезными в конструировании антисмысловых олигонуклеотидов (размер которых колеблется от 7 до 20 м), где является важным достичь компромисса между длиной олигонуклеотида и связывающей аффинностью для сохранения эффективности и целевой специфичности (δοΗαίΙ и др., Ыискю АсА Кее., 2001; 29(10): 2041- 2045). Дополнительные способы для селекции миРНК являются описанными, например, в \\'О 05054270, \\'О 05038054А1, \\'О 03070966А2, 1 Μο1 ΒίοΙ. 2005 Мау 13; 348(4): 883-93, 1 Μο1 Βίο1. 2005 Мау 13; 348(4): 871-81, и Ыискю Ашйв Кее. 2003 Аид 1; 31(15): 4417-24, каждый из которых является введенным в данную заявку в качестве ссылки в своей целостности. Кроме того, программное обеспечение (например, М\УС средство для конструирования в онлайновом режиме 51МАХ миРНК) является коммерчески доступным или доступным общественности для применения в селекции миРНК.
В некоторых воплощениях настоящее изобретение использует миРНК, включающую тупые концы (см., например, заявку И8 20080200420, которая является введенной в данную заявку в качестве ссылки в своей целостности), выступы (см., например, заявку И8 20080269147А1, которая является введенной в данную заявку в качестве ссылки в своей целостности), закрытые нуклеиновые кислоты (см., например, \УО 2008/006369, \УО 2008/043753 и \7О 2008/051306, каждая из которых является введенной в данную заявку в качестве ссылки в своей целостности). В некоторых воплощениях миРНК доставляются с помощью генной экспрессии или при использовании бактерий (см., например, Х1апд и др., Ыа1иге 24: 6 (2006) и \7О 06066048, каждый источник является введенным в данную заявку в качестве ссылки в своей целостности).
В других воплощениях используются методики на основе кшРНК (короткая шпилечная РНК) (см., например, заявку 20080025958, которая является введенной в данную заявку в качестве ссылки в своей целостности). Малая шпилечная РНК или короткая шпилечная РНК (кшРНК) представляет собой последовательность РНК, которая создает тугой виток петли, который может использоваться для сайленсинга генной экспрессии с помощью РНК интерференции. кшРНК использует вектор, введенный в клетки, а также И6 промотор, для обеспечения того, что кшРНК всегда экспрессируется. Этот вектор обычно пассируют на дочерних клетках, что позволяет осуществлять сайленсинг генов, которые наследуются. Шпилечная структура кшРНК расщепляется с помощью клеточного механизма до миРНК, которая потом связывается с индуцированным РНК комплексом сайленсинга (К18С). Этот комплекс связывается с мРНК и расщепляет эту мРНК, совпадающую с миРНК, которая является связанной с ним. кшРНК транскрибируется с помощью РНК полимеразы III.
2. Антисмысловая методика.
В других воплощениях БОРК экспрессия модулируется при использовании антисмысловых соединений, которые специфически гибридизуются с одной или более нуклеиновыми кислотами, которые кодируют ЕОРК и/или ЕОРК. Специфическая гибридизация олигомерного соединения с его целевой нуклеиновой кислотой препятствует его нормальной функции нуклеиновой кислоты. Эта модуляция функции целевой нуклеиновой кислоты с помощью соединений, которые специфически гибридизуются с ней, в общем случае называется "антисмысловой." Функции ДНК, для которых создается препятствие, включают репликацию и транскрипцию. Функции РНК, для которых создается препятствие, включают все жизненные функции, такие, как, например, транслокация РНК к сайту белковой трансляции, трансляция белка из РНК, сплайсинг РНК с получением одного или более видов мРНК и каталитическая активность, которая может быть включена или улучшена с помощью РНК. Общий эффект такой интерференции с функцией целевой нуклеиновой кислоты заключается в модуляции экспрессии ЕОРК. В контексте настоящего изобретения "модуляция" означает либо повышение (стимуляцию), либо снижение (ингибирование) экспрессии гена. Например, экспрессия может быть ингибирована для лечения неврологического расстройства.
Является предпочтительным нацеливать специфические нуклеиновые кислоты на антисмысловую цепь. "Нацеливание" антисмыслового соединения на определенную нуклеиновую кислоту в контексте
- 7 029234
настоящего изобретения представляет собой многоэтапный процесс. Этот процесс обычно начинается с идентификации последовательности нуклеиновой кислоты, функция которой модулируется. Это может быть, например, клеточный ген (или мРНК, транскрибированная из этого гена), экспрессия которого ассоциируется с определенным расстройством или болезненным состоянием, или молекула нуклеиновой кислоты из инфекционного агента. В настоящем изобретении мишень представляет собой молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует БОРК. Процесс нацеливания также включает определение сайта или сайтов в пределах этого гена для возникновения антисмыслового взаимодействия так, что будет возникать желаемый эффект, например определение или модуляция экспрессии белка. В контексте настоящего изобретения желательный интрагенный сайт представляет собой участок, который охватывает кодон инициации трансляции или терминации открытой рамки считывания (ОКР) гена. Поскольку кодон инициации трансляции типично представляет собой 5'-АиО (в транскрибированных молекулах мРНК; 5'АТО в соответствующей молекуле ДНК), кодон инициации трансляции также называется "АИО кодоном", "стартовым кодоном" или "АИО стартовым кодоном". Незначительное количество генов имеют кодон инициации трансляции, содержащий последовательность РНК 5'-ОИО, 5'-ииО или 5'-СИО, и 5'АИА, 5'-АСО и 5'-СиО, которые были продемонстрированы для функционирования ίη νίνο. Таким образом, термины "кодон инициации трансляции" и "стартовый кодон" могут охватывать много последовательностей кодонов, даже несмотря на то что аминокислота-инициатор в каждом случае типично представляет собой метионин (у эукариот) или формилметионин (у прокариот). Эукариотические и прокариотические гены могут иметь два или более альтернативных стартовых кодонов, любой из которых может предпочтительно использоваться для инициации трансляции в определенном типе клеток или ткани или при определенном наборе условий. В контексте настоящего изобретения "стартовый кодон" и "кодон инициации трансляции" относится к кодону или кодонам, которые используются ίη νίνο для инициации трансляции молекулы мРНК, транскрибированной из гена, который кодирует ЕОРК.
Кодон терминации трансляции (или "стоп кодон") гена может иметь одну из трех последовательностей (то есть 5'-ИАА, 5'-ИАО и 5'-ИОА; соответствующие последовательности ДНК представляют собой 5'-ТАА, 5'-ТАО и 5'-ТОА соответственно). Термины "участок стартового кодона" и "участок кодона инициации трансляции" относятся к части такой мРНК или гена, которая охватывает от приблизительно 25 до приблизительно 50 последовательных нуклеотидов в любом направлении (то есть 5' или 3') от кодона инициации трансляции. Подобно этому термины "участок стоп кодона" и "участок кодона терминации трансляции" относится к части такой мРНК или гена, которая охватывает от приблизительно 25 до приблизительно 50 последовательных нуклеотидов любом направлении (то есть 5' или 3') от кодона терминации трансляции.
Открытая рамка считывания (ОКР) или "кодирующий участок", который относится к участку между кодоном инициации трансляции и кодоном терминации трансляции, также представляет собой участок эффективного нацеливания. Другие целевые участки включают 5' нетранслируемый участок (5' иТК), который относится к части мРНК в 5' направлении от кодона инициации трансляции и, таким образом, включающий нуклеотиды между 5' сайтом кэпирования и кодоном инициации трансляции мРНК или соответствующими нуклеотидами на гене, и 3' нетранслируемый участок (3' ИТК), который относится к части мРНК в 3' направлении от кодона терминации трансляции, который, таким образом, включает нуклеотиды между кодоном терминации трансляции и 3' концом мРНК или соответствующими нуклеотидами на гене. 5' кэп мРНК включает остаток Ю-метилированного гуанозина, присоединенный к последнему 5'-участку мРНК посредством 5'-5' трифосфатной связи. 5' кэп участок мРНК считается таким, который включает 5' структуру кэпирования саму по себе, а также первые 50 нуклеотидов, которые примыкают к кэпу. Участок кэпирования может также представлять собой предпочтительный целевой участок.
Несмотря на то что некоторые эукариотические транскрипты мРНК транслируются непосредственно, многие содержат один или более участков, известных как "интроны", которые вырезаются из транскрипта перед трансляцией. Оставшиеся (и, таким образом, транслируемые) участки известны как "экзоны" и являются спланированными вместе с образованием непрерывной последовательности мРНК. Сайты сплайсинга мРНК (то есть соединения интрон-экзон) могут также представлять собой предпочтительные целевые участки и являются, в частности, полезными в ситуациях, когда абберантный сплайсинг является непосредственно вовлеченным в заболевание, или тогда, когда сверхпродукция определенного продукта сплайсинга мРНК является втянутой в этой заболевание.
В некоторых воплощениях целевые сайты для антисмыслового ингибирования идентифицируются при использовании коммерчески доступных компьютерных программ (например, Вюдпойк. Оойшдеп, Оегтапу; ЗукАггй Зой^ате, Вапда1оге, Ιηάία; Апйкепке Кекеагск Огоир, ишуепйу οί Ьтуегроо1, Шегроо1, Еп§1апк; ОеηеТ^ονе, СатНЪак, СА). В других воплощениях целевые сайты для антисмыслового ингибирования идентифицируются при использовании метода доступных сайтов, описанного в публикации РСТ АО 0198537А2, которая является введенной в данную заявку в качестве ссылки.
Как только один или более целевых сайтов были идентифицированы, выбирают олигонуклеотиды, которые являются в достаточной мере комплементарными мишени (то есть достаточно хорошо гибридизуются и имеют достаточную специфичность) для получения желаемого эффекта. Например, в предпоч- 8 029234
тительном воплощения настоящего изобретения антисмысловые олигонуклеотиды являются нацеленными на стартовый кодон или на участки, находящиеся возле него.
В контексте данного изобретения термин "гибридизация" по отношению к антисмысловым композициям и способам означает образование водородных связей, которое может представлять собой уотсонкриковское, хугстиновское или обратное хугстиновское образование водородных связей, между комплементарным нуклеозидом или нуклеотидным основанием. Например, аденин и тимин являются комплементарными нуклеотидными основаниями, которые соединяются попарно посредством образования водородных связей. Является понятным, что не требуется 100%-ной комплементарности последовательности антисмыслового соединения с таковой нуклеиновой кислоты для того, чтобы быть способной к специфической гибридизации. Антисмысловое соединение является способным к специфической гибридизации тогда, когда связывание соединения с целевой молекулой ДНК или РНК препятствует осуществлению нормальной функции целевой ДНК или РНК с потерей своего назначения, и существует достаточная степень комплементарности для того, чтобы избежать неспецифического связывания антисмыслового соединения с нецелевой последовательностью при условиях, при которых специфическое связывание является желательным (то есть при физиологических условиях в случае ίη νίνο анализов или терапевтического лечения, а также в случае ίη νίίτο анализов, при условиях, в которых эти анализы осуществляются).
Антисмысловые соединения обычно используются как агенты для исследования и диагностические средства. Например, антисмысловые олигонуклеотиды, которые являются способными ингибировать генную экспрессию со специфичностью, могут использоваться для выяснения функции определенных генов. Антисмысловые соединения также используются, например, для разграничения между функциями различных компонентов биологического пути.
Специфичность и чувствительность антисмысловых соединений также используется при терапевтических применениях. Например, антисмысловые олигонуклеотиды использовались в качестве терапевтических остатков в лечении болезненных состояний у животных и человека. Антисмысловые олигонуклеотиды безопасно и эффективно назначались людям, и многочисленные клинические исследования находятся в настоящий момент в стадии реализации. Таким образом, установлено, что олигонуклеотиды представляют собой полезные терапевтические возможности, которые могут быть оптимизированы для того, чтобы быть полезными в режимах лечения, для проведения лечения клеток, тканей и животных, в частности людей.
В то время как антисмысловые олигонуклеотиды представляют собой предпочтительную форму антисмыслового соединения, настоящее изобретение также охватывает другие олигомерные антисмысловые соединения. Антисмысловые соединения в соответствии с данным изобретением предпочтительно включают от приблизительно 8 до приблизительно 30 нуклеотидных оснований (то есть от приблизительно 8 до приблизительно 30 связанных оснований), несмотря на то что как более длинные, так и более короткие последовательности могут найти применение в соответствии с настоящим изобретением. В частности, предпочтительные антисмысловые соединения представляют собой антисмысловые олигонуклеотиды, даже более предпочтительно те, которые включают от приблизительно 12 до приблизительно 25 нуклеотидных оснований.
Химерные антисмысловые соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть образованы в форме композитных структур из двух или более олигонуклеотидов, модифицированных олигонуклеотидов, олигонуклеотидов и/или олигонуклеотидных миметиков, как описывается выше.
Настоящее изобретение также включает фармацевтические композиции и рецептуры, которые включают антисмысловые соединения в соответствии с настоящим изобретением, как описывается ниже.
С. Г енетическая терапия.
Настоящее изобретение предполагает применение любой генетической манипуляции для использования в модуляции экспрессии ЕСРК. Примеры генетических манипуляций включают, но не ограничены таковыми, нокаут гена (например, удаление гена ЕСРК из хромосомы при использовании, например, рекомбинации), экспрессию антисмысловых конструкций с индуцибельными промоторами или без них, и тому подобное. Доставка конструкции нуклеиновой кислоты до клеток ίη νίίτο или ίη νίνο может осуществляться при использовании любого приемлемого способа. Приемлемый способ представляет собой такой, который вводит конструкцию нуклеиновой кислоты в клетки так, что возникает желательное событие (например, экспрессия антисмысловой конструкции). Генетическая терапия может также применять для доставки миРНК или другие интерферирующие молекулы, которые экспрессируются ίη νίνο (например, при стимуляции индуцибельного промотора).
Введение молекул, которые несут генетическую информацию, в клетки достигается с помощью различных способов, включая, но без ограничения таковыми, направленное введение конструкций оголенной ДНК, бомбардировку с помощью частиц золота, которые нагружены указанными конструкциями, и генный перенос, опосредованный макромолекулой, при использовании, например, липосом, биополимеров и подобных им. Предпочтительные способы используют векторы для доставки генов, которые происходят от вирусов, включая, но без ограничения таковыми, аденовирусы, ретровирусы, вирусы вакцины и аденоассоциированные вирусы. Благодаря высокой эффективности по сравнению с ретровируса- 9 029234
ми векторы, которые имеют происхождение от аденовирусов, являются предпочтительными векторами доставки генов для переноса молекул нуклеиновой кислоты в хозяйские клетки ίη νίνο. Примеры аденовирусных векторов и способы для генного переноса являются описанными в публикациях РСТ АО 00/12738 и АО 00/09675 и патентных заявках США №№ 6033908, 6019978, 6001557, 5994132, 5994128, 5994106, 5981225, 5885808, 5872154, 5830730, и 5824544, каждый из источников является введенным в данную заявку в качестве ссылки в своей целостности.
Векторы могут вводиться различными путями. Например, в некоторых воплощениях настоящего изобретения векторы вводятся в клетки при использовании непосредственной инъекции. В других воплощениях введение осуществляется через кровеносную или лимфатическую систему (см., например, публикацию РСТ 99/02685, которая является введенной в данную заявку в качестве ссылки в своей целостности). Примеры уровней доз аденовирусного вектора предпочтительно составляют от 108 до 1011 векторных частиц, которые прибавляются к перфузату.
Ό. Терапия на основе малых молекул.
Некоторые воплощения настоящее изобретение используют малые молекулы, которые ингибируют одну или более биологических активностей ЕОРК Терапевтические средства на основе малых молекул идентифицируются, например, при использовании способов скрининга лекарственных средств, описанных в данной заявке. В некоторых воплощениях терапевтические средства на основе малых молекул, полезные для настоящего изобретения, включают, но не ограничены таковыми, афатиниб, эрлотиниб, гефитиниб, лапатиниб, нератиниб и вандетаниб. В некоторых предпочтительных воплощениях малая единица представляет собой гефитиниб или эрлотиниб, которые имеют коммерческое наименование Пресса (АйгаХепеса, Ьопбоп, иК) и Тарцева (СспсЫссН. 8ои1й 8ап Ртап818со, СА), соответственно (Асйναΐίοη οί ерМегта1 цгоххТН Гас1от тесер1ог8 ш а81тосу1е8: £тот άеνе1οртеηΐ 1о пеига1 тщгу. Ьщ В., №иГе1б А.Н. 1 №иго8с1 Ке8. 2007 Эес; 85(16): 3523-9. обзор).
Е. Фармацевтические композиции.
Настоящее изобретение дополнительно обеспечивает фармацевтические композиции (например, такие, которые включают фармацевтические агенты, модулирующие экспрессию или активность ЕСРК) для применения в способах, описанных выше. Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением могут вводиться с помощью ряда способов в зависимости от того, является ли желательным местное или системное введение и каковой является площадь, которая подлежит обработке. Введение может быть местным (включая офтальмологическое и введение в слизистые оболочки, включая вагинальную и ректальную доставку), легочным (например, путем ингаляции или инсуффляции порошков или аэрозолей, включая введение с помощью распыливания; интратрахеальное, интраназальное, эпидермальное и трансдермальное), пероральное или парентеральное. Парентеральное введение включает внутривенную, внутриартериальную, подкожную, интраперитонеальную или внутримышечную инъекцию или инфузию; или интракраниальное введение, например интратекальное или интравентрикулярное введение.
Фармацевтические композиции и рецептуры для местного введения могут включать трансдермальные пластыри, мази, лосьоны, кремы, гели, капли, суппозитории, аэрозоли, жидкости и порошки. Могут быть необходимыми или желательными традиционные фармацевтические носители, жидкие, порошковые или масляные основания - загустители и тому подобное.
Композиции и рецептуры для перорального введения включают порошки и гранулы, суспензии или растворы в воде и неводной среде, капсулы, саше или таблетки. Загустители, вкусовые агенты, разбавители, эмульгаторы, диспергирующие добавки или связывающие агенты могут быть желательными.
Композиции и рецептуры для парентерального, интратрахеального или интравентрикулярного введения могут включать стерильные водные растворы, которые могут также содержать буферы, разбавители и другие приемлемые добавки, такие как, но без ограничения таковыми, агенты, которые способствуют пенетрации, соединения носителей и другие фармацевтически приемлемые носители или наполнители.
Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением также включают, но не ограничены таковыми, растворы, эмульсии и содержащие липосомы рецептуры. Эти композиции могут быть получены из различных компонентов, которые включают, но не ограничены таковыми, предварительно подготовленные жидкости, самоэмульгирующиеся твердые вещества и самоэмульгирующиеся мягкие лекарственные формы.
Фармацевтические рецептуры настоящего изобретения, которые традиционно могут быть представлены в единичной дозированной форме, могут быть получены в соответствии с традиционными методиками, хорошо известными в фармацевтической промышленности. Такие методики включают этап приведения в сочетание активного фармацевтического агента с фармацевтическим(и) носителем(носителями) или наполнителем(наполнителями). В общем случае композиции получают с помощью однородного и тщательного приведения в сочетание активных ингредиентов с жидкими носителями или тонко измельченными твердыми носителями или обоими, и потом в случае необходимости формовку продукта.
Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением могут быть рецептиро- 10 029234
ваны в виде одной из множества возможных дозированных форм, таких как, но без ограничения таковыми, таблетки, капсулы, жидкие сиропы, мягкие гели, суппозитории и клизмы. Композиции в соответствии с настоящим изобретением могут также быть рецептированы в виде суспензий в водной, неводной или смешанной среде. Водные суспензии могут также дополнительно содержать вещества, которые повышают вязкость суспензии, включая, например, карбоксиметилцеллюлозу натрия, сорбитол и/или декстран. Суспензии могут также содержать стабилизаторы.
Композиции в соответствии с настоящим изобретением могут дополнительно содержать другие дополнительные компоненты, которые традиционно содержаться в фармацевтических композициях. Таким образом, например, композиции могут содержать дополнительные совместимые фармацевтически активные материалы, такие как, например, средства против зуда, вяжущие средства, местные анальгетики или противовоспалительные агенты, или могут содержать дополнительные материалы, полезные для физического рецептирования различных дозированных форм композиций в соответствии с настоящим изобретением, такие как красители, вкусовые агенты, консерванты, антиоксиданты, вещества, делающие состав непрозрачным, загустители и стабилизаторы. Однако такие материалы при добавлении не должны неблагоприятным образом препятствовать проявлению биологических активностей компонентов композиций в соответствии с настоящим изобретением. Композиции могут подвергаться стерилизации, если это является желательным, смешиваться со вспомогательными агентами, например смазывающими агентами, консервантами, стабилизаторами, смачивающими агентами, эмульгаторами, солями для влияния на осмотическое давление, буферами, окрашивающими агентами и/или ароматическими веществами и подобными им, которые вредным образом не влияют на нуклеиновую(ые) кислоту(ы) этой рецептуры.
Дозировка зависит от тяжести и чувствительности болезненного состояния, которое подвергается лечению, при этом курс лечения длиться от нескольких дней до нескольких месяцев или до тех пор, пока осуществляется лечение, или пока не достигается уменьшение болезненного состояния. Расписания оптимальных режимов дозирования могут быть рассчитаны из измерений аккумуляции лекарственного средства в организме пациента. Лечащий врач, который назначает лечение, может легко определить оптимальные дозировки, методики дозирования и частоту введения. Оптимальные дозировки могут варьировать в зависимости от относительной эффективности индивидуальных агентов, и могут быть легко оценены на основе значений ЕС50, которые определены как эффективные в ίη νίίτο и ίη νίνο животных моделях, или основываются на примерах, описанных в данной заявке. В общем случае, дозировка составляет от 0,01 мкг до 100 г на кг веса тела и может осуществляться один или более раз в день, еженедельно, ежемесячно или ежегодно. Лечащий врач может оценить частоту введений для дозированной формы на основе измеренного времени удержания и концентраций лекарственного средства в жидкостях и тканях организма. После успешного лечения может быть желательным подвергнуть субъекта поддерживающей терапии для предотвращения рецидива болезненного состояния, где агент вводится в поддерживающих дозах, которые колеблются от 0,01 мкг до 100 г на кг веса тела от одного или более раз в день до одного раза каждые 20 лет.
Р. Комбинационная терапия.
В некоторых воплощениях настоящее изобретение обеспечивает терапевтические способы, включающие одну или более композиций, описанных в данной заявке (например, ингибиторы ЕОРК) в комбинации с дополнительным агентом (например, агентом для лечения неврологического расстройства или нейропатической боли). Настоящее изобретение не является ограниченным определенным агентом. Примеры включают, но не ограничены таковыми: противовоспалительные агенты, такие как нестероидные противовоспалительные препараты и стероиды; опиоидные болеутоляющие агенты; антидепрессанты, такие как трициклические антидепрессанты и избирательный ингибитор обратного захвата серотонина-норэпинефрина (8ΝΚΙ); противосудорожные агенты, такие как габапентин; противоэпилептические агенты; бензодиазепины; анксиолитические средства, такие как селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (88Ы); пищевые добавки, такие как антилипоевая кислота и бенфотиамин; каннабиноиды и тому подобное.
Классы полезных агентов для комбинационной терапии включают, например, нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП), такие как аспирин (анацин, аскриптин, байер, буфферин, экотрин, эксцедрин), салицилаты холина и магния (СМТ, трикозал, трилизат), салицилат холина (артропан), целекоксиб (целебрекс), диклофенак калия (катафлам), диклофенак натрия (волтарен, волтарен ХК), диклофенак натрия с мисопростолом (артротек), дифлунизал (долобид), этодолак (лодин, лодин ХЬ), фенопрофен кальция (налфон), флурбипрофен (ансейд), ибупрофен (адвил, мотрин, мотрин ΙΒ, нуприн), индометацин (индоцин, индоцин §К), кетопрофен (актрон, орудие, КТ, орувель), салицилат магния (артритаб, байер селект, Доанс пиллс, маган, мобидин, мобогезик), меклофенамат натрия (мекломен), мефенаминовая кислота (понстел), мелоксикам (мобик), набуметон (релафен), напроксен (напросин, напрелан), напроксен натрия (алив, анапрокс), оксапрозин (дайпро), пироксикам (фелден), рофекоксиб (виокс), сальсалат (амигезик, анафлекс 750, дизальцид, мартритик, моно-гезик, сальфлекс, сальситаб), салицилат натрия (разнообразные дженерики), сулиндак (клинорил), толметин натрия (толектин), вальдококсиб (бекстра); стероидные противовоспалительные лекарственные средства, включая гидрокортизон, преднизон, метилпреднизолон, беклометазон, будезонид, флунизолид, флутикозон пропионат, триамцинолон и дру- 11 029234
гие; и болеутоляющие агенты на основе опиатов, включая, но без ограничения таковыми, фентанил, гидроморфон, метадон, морфин, оксикодон и оксиморфон; антидепрессанты, включая трициклические соединения, такие как бупропион, нортриптилин, дезипрамин, амитриптилин, амитриптилиноксид, бутриптилин, кломипрамин, демексиптилин, дибензепин, диметакрин, досулепин/дотиепин, доксепин, имипрамин, аминептин, иприндол, опипрамол, тианептин, тримипрамин, имипраминоксид, лофепрамин, мелитрацин, метапрамин, нитроксазепин, ноксиптилин, пипофезин, пропизепин, протриптилин и квинупрамин, а также 8ΝΚΙ, такие как дулоксетин, венлафаксин, десвенлафаксин, милнаципран, левомилнаципран, сибутрамин, бицифадин и 8ЕР-227162; противосудорожные агенты, такие как прегабалин, габапентин, карбамазепин, а также окскарбазепин и бензодиазепины (например, алпразолам, бретазенил, бромазепам, бротилолам, хлордиазэпоксид, цинолазепам, клоназепам, клоразепат, клотиазепам, клоксазолам, делоразепам, диазепам, эстазолам, этизолам, флунитразепам, флуразапам, флутопразепам, галазепам, кетозолам, лопразолам, лоразепам, лорметазепам, медазепам, мидозолам, неметазепам, нитразепам, нордазепам, оксазепам, феназепам, пиназепам, празепам, премазепам, гуазепам, темазепам, тетразепам, триазолам, клобазам, ЭМСМ, флумазенил, эезопиклон, залеплон, золпидем и зопиклон); селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (δδΚΙ), такие как циталопрам, дапоксетин, эсциталопрам, флуоксетин, флувоксамин, индалпин, пароксетин, сертралин и зимелидин; а также каннабиноиды, такие, как дельта-9-тетрагидроканнабинол и набилон.
Применения для скрининга лекарственных агентов.
В некоторых воплощениях настоящее изобретение обеспечивает анализы скрининга лекарственных агентов (например, для скрининга лекарственных агентов, которые ингибируют ЕСРК). Способы скрининга в соответствии с настоящим изобретением используют ЕСРК. Например, в некоторых воплощениях настоящее изобретение обеспечивает способы скрининга соединений, которые изменяют (например, снижают) экспрессию ЕСРК. Соединения или агенты могут препятствовать транскрипции путем взаимодействия, например, с участком промотора. Соединения или агенты могут вступать в конфликт с мРНК, которая кодирует ЕСРК (например, путем РНК интерференции, антисмысловых методик и т.д.). Соединения или агенты могут вступать в конфликт с путями, которые размещаются выше или ниже от биологической активности ЕСРК. В некоторых воплощениях кандидатные соединения представляют собой антисмысловые агенты или агенты интерференции РНК (например, олигонуклеотиды), которые являются направленными против ЕСРК. В других воплощениях кандидатные соединения представляют собой антитела или малые молекулы, которые специфически связываются с ЕСРК и ингибируют его биологическую функцию.
В одном способе скрининга кандидатные соединения оцениваются на их способность изменять экспрессию ЕСРК путем контакта соединения с клеткой, экспрессирующей ЕСРК, и последующего анализа влияния кандидатного соединения на экспрессию. В некоторых воплощениях влияние кандидатного соединения на экспрессию ЕСРК оценивается путем определения уровня мРНК ЕСРК, которая экспрессируется клеткой. Экспрессия мРНК может определяться любым приемлемым способом.
В других воплощениях влияние кандидатного соединения на экспрессию ЕСРК подвергается анализу путем измерения уровня полипептида, который кодирует ЕСРК. Уровень экспрессированного полипептида может измеряться при использовании любого приемлемого способа.
В частности, настоящее изобретение обеспечивает способы скрининга для идентификации модуляторов, то есть кандидатных или исследуемых соединений или агентов (например, антител, белков, пептидов, пептидомиметиков, пептоидов, малых молекул или других лекарственных средств), которые связываются с ЕСРК, оказывают ингибиторное влияние, например, на экспрессию или активность ЕСРК, или обладают стимуляторным или ингибиторным эффектом, например, на экспрессию или активность субстрата ЕСРК. Идентифицированные таким образом соединения могут использоваться для модуляции активности продуктов целевого гена (например, ЕСРК) либо непосредственно, либо опосредованно в соответствии с терапевтической прописью, для уточнения биологической функции продукта целевого гена или для идентификации соединения, которое нарушает нормальные взаимодействия целевого гена. Соединения, которые ингибируют активность или экспрессию ЕСРК, являются полезными в лечении неврологического расстройства.
Исследуемые соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть получены при использовании любого из многочисленных подходов в способах комбинаторной библиотеки, известных в области техники, включая биологические библиотеки; библиотеки пептоидов (библиотеки молекул, которые имеют функциональность пептидов, но с новым непептидным скелетом, и которые являются устойчивыми к ферментному расщеплению, но несмотря на это остаются биоактивными; см., например, 2искеппапп и др., 1. Меб. Сксш. 37: 2678-85 [1994]); пространственно доступные параллельные библиотеки с твердой или жидкой фазой; способы на основе синтетической библиотеки, которые требуют обратной свертки; способ на основе библиотеки 'одна частица - одно соединение'; и способы искусственной библиотеки при использовании селекции на основе аффинной хроматографии. Подходы биологической библиотеки и пептоидной библиотеки являются предпочтительными для применения с пептидными библиотеками, в то время как четыре других подхода применяются для пептидных, непептидных, олигомерных библиотек соединений или библиотек на основе или малых молекул (Ьат (1997) Лпбсапсег Эгид
- 12 029234
Όβδ. 12: 145).
Примеры способов для синтеза молекулярных библиотек могут быть найдены в области техники, например у: Эе\УШ и др., Ргос. Ν;·ι11. Асаб. δει. ΰ.δ.Α. 90: 6909 [1993]; ЕгЬ и др., Ргос. Ыаб. Асаб. δει. υδΑ 91: 11422 [1994]; 2искегтаии и др., 1. Меб. СЬет. 37: 2678 [1994]; СЬо и др., δαε^ε 261: 1303 [1993]; Сагге11 и др., Апде\\\ СЬет. Ιηΐ. Еб. Еи§1. 33.2059 [1994]; Саге11 и др., Апде\\\ СЬет. Ιηΐ. Еб. Еи§1. 33: 2061 [1994]; и Оа11ор и др., 1. Меб. СЬет. 37: 1233 [1994].
Библиотеки соединений могут быть представленными в растворе (например, НоидЬЕеи, ВюЕесЬтдиек 13: 412-421 [1992]), или на частицах (Ьат, ЫаЕиге 354: 82-84 [1991]), чипах (Робот, ЫаЕиге 364: 555556 [1993]), бактериях или спорах (патент США № 5223409; является введенньм в данную заявку в качестве ссылки), на плазмидах (Си11 и др., Ргос. Ыаб. Асаб. δα. υδΑ 89: 18651869 [1992]) или на фаге ^соб и δт^ΐЬ, δ^ιτ^ 249: 386-390 [1990]; ЭеуЬи δ^ιτχ 249: 404-406 [1990]; С.’\\1г1а и др., Ргос. Ыаб. Асаб. δα. 87: 6378-6382 [1990]; РеЬсц 1. Мо1. Вю1. 222: 301 [1991]).
Экспериментальный раздел.
Следующие примеры обеспечиваются для того, чтобы продемонстрировать и дополнительно проиллюстрировать конкретные предпочтительные воплощения и аспекты в соответствии с настоящим изобретением, которые не могут трактоваться как такие, которые ограничивают объем изобретения.
Пример 1.
Мужчина 68 лет с метастатическим раком толстого кишечника страдал от нейропатической боли по причине тазовой возвратной боли в результате ущемления его седалищного нерва. На протяжении курса лечения, который составлял несколько лет, он подвергался лечению с помощью мощных опиоидных болеутоляющих агентов, противоэпилептических агентов, антидепрессантов, противовоспалительных средств, лучевой терапии, химиотерапии, воздействия кислорода под повышенным давлением и акупунктуре в качестве средства для того, чтобы ослабить эту боль. Эти способы лечения были только ограниченно эффективными, и повышение дозы было ограничено побочными эффектами.
Приблизительно через три года пациенту была назначена комбинация ХЕЬОХ химиотерапии (капецитабин и оксалиплатин) и ЕОРК антитела, цетуксимаба, в качестве еще одной попытки уменьшения его брюшной опухоли и, таким образом, ослабления его боли. В начале этого лечения пациенту было необходимо принимать 200 мг долконтина каждые 24 ч. На своем первом приеме после осуществления двух обработок он сообщил, что практически прекратил применения опиата. ЯМР-интроскопия брюшной полости, проведенная спустя четыре месяца, не показала никаких изменений размера брюшной опухоли, несмотря на то что нейропатическая тазовая боль полностью ушла из этой точки.
Во время последующего перерыва лечения боль пациента вернулась, и ему были необходимы более высокие дозы опиатов. Однако при каждом последующем повторном введении ХЕЬОХ и цетуксимаба болеутоляющий ответ повторялся, и боль полностью или почти полностью исчезала в течение 4-5 ч.
Через 22 месяца лечения при использовании ХЕЬОХ и цетуксимаба у пациента прогрессировали метастазы легких, и лечение на основе химиотерапии и антитела было приостановлено. В течение последующих месяцев боль у пациента в значительной мере увеличивалась, и его депо-доза повышалась до 320 мг/24 ч без достижения удовлетворительного эффекта. Приблизительно через четыре месяца ужасной боли при отсутствии какого-либо направленного на опухоль лечения монотерапия на основе цетуксимаба 450 мг внутривенно/250 мг на м2 была начата снова в качестве попытки уменьшить его боль. Опять же, в течение часа после первой инфузии цетуксимаба боль у пациента значительно снижалась, и он был способен снизить свою депо-дозу опиата наполовину в течение последующих четырех недель.
На протяжении последующих 20 месяцев, несмотря на то что его рак находился в состоянии прогрессирования, пациент продолжал получать инфузии цетуксимаба приблизительно каждые 12 дней после ослабления боли пациента. Несмотря на развитие симптомов и осложнений в результате его метастатического заболевания, его хроническая тазовая нейропатическая боль продолжала оставаться под хорошим контролем с помощью цетуксимаба.
Для того чтобы проанализировать, не является ли такой анальгетический эффект от более дорогого способа лечения зависимым от дозы, пациенту давали 20% от обычной дозы цетуксимаба (пациент не был осведомлен о таком изменении), что приводило к отсутствию анальгетического эффекта. Дозу цетуксимаба, таким образом, увеличивали до уровня ранее эффективной дозы, и он продолжал получать инфузии приблизительно каждые 12 дней с эффективной анальгезией, которая достигалась в течение 4-5 ч после введения и длилась почти 2 недели. В течение нескольких последних дней перед новой инфузией пациенту была необходима более высокая доза опиатов, но она могла быть снова снижена приблизительно почти до 1/3 дозы сразу же после очередной инфузии цетуксимаба.
Через шесть месяцев после начала монотерапии на основе цетуксимаба для обезболивания ЯМРинтроскопия тазовой области показала увеличение провоцирующего повреждения. Несмотря на этот факт, цетуксимаб продолжал вызывать описанный сильный анальгетический ответ, и пациент был способен поддерживать на много более высокое качество жизни.
Пример 2.
Мы недавно сообщили о нашем опыте в лечении НБ у пациента с ректальным раком с помощью цетуксимаба (КегкЕеи С., Сатегои М.О. СеЕихттаЬ аПеутаЕек иеигораЕЫс рат бекрЬе Еитоиг ргодгеккюи. ВМ1
- 13 029234
Саке Кер 2012 ;2012), моноклонального антитела против рецептора эпидермального фактора роста (ЕОР), который последовательно ингибирует МАРК путь передачи сигнала (Утсеп/1 В., Ζοοοοίί А., Рап1апо Р., УепФШ О., Οαΐΐυζζο δ. С’еШхппаЬ: Ггот ЬепсЬ ΐο Ьейыйе. Сигг Сапсег Эгид Тагдей 2010; 10: 80-95). Пациент систематически испытывал значительное ослабление НБ уже через час после инфузии цетуксимаба, несмотря на прогрессивную инвазию опухоли брюшной полости в нервы крестцового нервного сплетения, что предполагает непосредственный анти-НБ эффект.
Поскольку ингибиторы ЕОРК были широко исследованы в клинических опытах и представляют собой одобренные онкологические лекарственные средства с первичными временными побочными эффектами, поддающимися контролю, мы предложили это лечение для пяти пациентов с хронической, тяжело протекающей и устойчивой к терапии НБ (Ηοΐΐ К. Сοттοη к1Йе еГГесй апй ^пίе^асΐ^οпк οί ^1οΐΌ^;·ι1 сапсег Шегареийс адейк. ΐ Ргай Ыигк 2011; 61: 7-20; РейеШ Р., Βοι^οιιονο К., СаЫййи М., Вагт δ. ЕГПсасу οί ЕОРК Тугокше Капаке [пШЫЮгк ш РаНейк \νί!ΐι ЕСРК-Мйа1е0 ^п^таИ-СеИ Ьипд Сапсег: А Ме1аАпа1ук1к οί 13 Капάοт^ζеά Тпа1к. СПп Ьипд Сапсег 2012; 13:107-14; Вго\уп Т., ΒοΕπιά А., Вадик! А. и др. ОейПтЬ Гэг 1Пе йгкГ-Нпе 1геа1тей οί КсаПу а^апсе^ теййаНс гюп-ктаП се11 1ипд сапсег. НеаНЬ ТесЬпο1 Аккекк 2010; 14: 71-9).
Исследование серии случаев.
Начиная с декабря 2011 года, мы подвергали лечению трех нераковых пациентов, одного пациента с раком желчного пузыря и одного пациента с раком поджелудочной железы при использовании внутривенных (цетуксимаб, панитумумаб) и пероральных (гефитиниб) ингибиторов ЕОРК для лечения мучительной и длительной НБ, см. таблицу. Два из трех нераковых пациентов (случаи 2 и 3) и оба раковых пациента (случаи 4 и 5) обеспечивали ответ в течение 24 ч со средним значение снижения при очень сильной боли от 9 до 1, как было задокументировано в кратком вопроснике оценки выраженности болевого синдрома, краткая форма (ВР1)(21, 22) см. фиг. 2. Три пациента (случаи 2, 4 и 5), которые принимали анальгетики для своей НБ во время первого ингибирования ЕОРК, были способными значительно снизить свои дозы. Последующее врачебное наблюдение до сегодняшнего дня составляло 7-148 дней для тех, кто был чувствительным к лечению.
Основные характеристики пациентов
Случай Вес, пел История нейропатической боли Определенный балл боли а Тяжелое Врачиспециалисты для контроля боли Предыдущие способы лечения нейропатической боли
повреждение в соответствии с ΒΡΙ
1 53, м. Шестилетняя история прогрессирующей периферической полинейропатии неясной этиологии (возможно связанная с ВоггеПа) 30/38 Общая активность: 9 Настроение: 9 Способность 10 ходить: 10 Нормальная 8 работа: 9 Контакты: 8 Сон: Удовлетворенность жизнью: Невропатолог Ревматолог Анестезиолог Высококвалифицированная медицинская помощь в боксе для снятия боли Парацетамол НПВП Стероиды Антиэпилептические агенты Антидепрессанты* Заживление κιονιο (внутривенный иммуноглобул и н) Физические упражнения (отвлекающая терапия)*
2 53, ж. Восьмимесячная история комплексного регионарного болевого синдрома типа 1 (СКР51) правой руки 31/38 Общая активность: 10 Настроение: 5 Способность 0 ходить: 10 Нормальная 5 работа: 10 Контакты; 7 Сон: Удовлетворенность жизнью; Хирургортопед Невропатолог Ревматолог Анестезиолог Высококвалифицированная медицинская помощь в боксе для снятия боли Парацетамол* НПВП* Стероиды* Слабые опиаты* Антиэпилептические агенты* Антидепрессанты Блокадная анестезия Клонидин Физиотерапевтическое лечение
3 63, м. Восьмимесячная история раднкулопатии по причине синдрома неудачной операции на поясничном отделе позвоночника(БВЗЗ) с образованием рубцовой ткани на уровне Ь4/Ь5 26/38 Общая активность: 10 Настроение: 8 Способность 9 ходить: 9 Нормальная 8 работа: 8 Контакты: 8 Сон: Удовлетворенность жизнью: Нейрохирург Участковый терапевт Антиэпилептические агенты Опиаты
4 57, Двадцатимесячная история рецидива рака мочевого пузыря, распространившегося на органы брюшной полости, мускулатуру и корешки крестцовых нервов 24/38 Общая активность: 9 Настроение: 7 Способность 7 ходить: 9 Нормальная 7 работа: Контакты: 3 Сон: 16 Удовлетворенность жизнью: Онколог Специалист по паллиативной медицинской помощи Анестезиолог Парацетамол* Стероиды* Опиаты* Антиэпилептические агенты* Антидепрессанты* Химиотерапия* Паллиативное облучение органов таза
5 72, ж. Одиннадцатимесячная история фантомной боли в конечности после ампутации ниже коленного сустава по причине незаживающих язв в результате болезни периферических сосудов 16/38 Общая активность: 5 Настроение: 5 Способность 5 ходить: 6 Нормальная 5 работа: Контакты: 5 Сон: 5 Удовлетворенность жизнью: Хирургортопед Специалист реабилитации Парацетамол* НПВП Стероиды Опиаты* Антиэпилептические агенты* Бензодиазепины* Физиотерапевтическое лечение*
* лечение все еще использовалось на момент проведения первой инфузии цетуксимаба у пациентов в соответствии с инструментом для определения боли, балл от 19 до 38 делает нейропатический компонент боли более чем на 90% вероятным (16).
Ответ на лечение.
Пациентов просили ежедневно заполнять краткую форму ВР1 непосредственно до и во время ЕОРК
- 14 029234
ингибирования для того, чтобы задокументировать их нейропатическую боль и, таким образом, помочь им оценить их ответы и направлять лечение. Баллы пациентов подытожены на фиг. 2.
Случай 1.
Осуществляли три еженедельные инфузии цетуксимаба. Лечение не оказывало влияния на НБ пациента, и после введения третьей дозы лечение прекращали (данные не представлены).
Случай 2.
Было сделано в общей сложности шесть еженедельных инфузий цетуксимаба (фиг. 2, красные стрелки). Через 24 ч после введения первой дозы цетуксимаба пациентка испытывала полное ослабление боли, которое сохранялось до следующей инфузии. После проведения трех еженедельных инфузий цетуксимаба с длительным ответом осуществляли попытку лечения при использовании моноклонального антитела панитумумаба (фиг. 2, голубая стрелка). Благодаря своим фармакокинетическим свойствам этот внеклеточный ингибитор ЕОРК вводится раз в две недели. Таким образом, была сделана попытка упростить процедуру лечения для пациентки. Однако она сообщила о рецидиве тяжелой боли в тот же вечер, когда была проведена инфузия панитумумаба. Пациентка получила терапевтически успешную инфузию цетуксимаба на следующий день. После проведенных шести инфузий цетуксимаба ингибирование ЕОРК переводили на такое с помощью перорального ингибитора на основе малой молекулы, гефитиниба, так чтобы пациентка могла быть свободной для осуществления поездки заграницу на выходные.
Прием гефитиниба начинали через семь дней после последней инфузий цетуксимаба, и пациентка не испытывала рецидивов боли после перехода на таблетки. В настоящее время, которое составляет 15 недель после введения первой дозы гефитиниба, и через 21 неделю после осуществления первой инфузий цетуксимаба проблема НБ пациентки продолжала оставаться полностью решенной. Ингибирование ЕОРК не оказывало влияния на вазомоторные симптомы, которые сопровождают СКР81. Однако ослабление боли позволило пациентке осуществлять интенсивное физиотерапевтическое лечение, которое было ранее затруднено экстремальными уровнями боли. Таким образом, это, как оказалось, было опосредованным улучшением в отношении отека, который в противном случае осложнял бы ее состояние и мог бы привести к постоянной инвалидизации.
Случай 3.
Было проведено две еженедельные инфузии цетуксимаба (фиг. 2, красные стрелки). И на этот раз в течение часа после проведения первой инфузий тяжелая и постоянная боль пациента значительно снижалась, и в последующие дни НБ полностью исчезала. После введения второй дозы цетуксимаба пациент ожидал начала нового лечения до возобновления боли. Через 11 дней после вымывания цетуксимаба НБ пациента снова возвратилась.
На этой стадии пациента перевели на таблетки гефитиниба (фиг. 2, зеленая стрелка). Его боль продолжала увеличиваться в течение первых двух дней перорального лечения. Однако, начиная с третьей дозы гефитиниба, боль постепенно снижалась до столь хороших уровней, какие пациент испытывал при использовании цетуксимаба. НБ пациента подвергалась хорошему контролю как при использовании цетуксимаба, так и гефитиниба, так, что он смог возобновить свой активный туристический образ жизни. Однако у пациента развилась пневмония спустя один месяц после начала приема гефитиниба. После лечения пневмонии персистировала одышка, и интерстициальное заболевание легких (1ЬИ) не могло быть исключено. Таким образом, прием гефитиниба был остановлен (см. фиг. 2), и НБ возобновилась через 3 дня. После этого была введена доза панитумумаба, и НБ уменьшилась в тот же вечер, в результате чего он снова избавился от боли. Когда примерно через 3 недели его боль снова возникла, попробовали использовать прегабалин, лекарственное средство, одобренное для лечения НБ. Ранее пациента безуспешно пытались лечить с помощью габапентина, также одобренного для лечения НБ, но по причине нестабильности окружения и возможного интерстициального заболевания легких попытка традиционного лекарственного средства предполагалась оправданной перед осуществлением дальнейшего лечения с помощью перорального ингибитора ЕОРК. Пациент оказался чувствительным к прегабалину и не испытывал боли спустя 19 недель после этого.
Случай 4.
Осуществляли введение цетуксимаба после лечения при использовании комбинации габапентина, амитриптилина, парацетамола, стероидов и титрования до 24-часовой морфин-эквивалентной дозы 1800 мг, что было неуспешным для контроля НБ. В течение часа после инфузии ингибитора ЕОРК пациент испытывал полное ослабление своей НБ в первый раз за период более чем шесть месяцев. Через три дня после первого введения цетуксимаба его дозы опиата и габапентина были снижены на 50%, что обуславливается опасением абстинентных симптомов и побочных эффектов, которые могут ассоциироваться с внезапной отменой этих веществ. Цетуксимаб заменяли на пероральный гефитиниб во время последующего запланированного лечения (фиг. 2, зеленая стрелка). Полное ослабление НБ поддерживалось при таком переходе и в дальнейшем, и несмотря на прогрессивную инвазию опухоли в тазовые нервы (см. фиг. 1). Нейропатическая боль пациента продолжает оставаться полностью ослабленной с помощью гефитиниба в настоящее время (в последующий период 18 недель).
Случай 5.
Пациентка получала панитумумаб в то время, как ее подвергали лечению при использовании пал- 15 029234
лиативного гемцитабина для лечения метастатического рака. Несмотря на наличие симптоматического рака, хроническая фантомная боль конечности, распространяющаяся вниз по ее левой ноге, была ее основной жалобой. Она имела развитую атрофию культи, контрактуры и боль, которая мешала ей использовать свой протез. Таким образом, она была прикована к инвалидной коляске. В течение часа после инфузии панитумумаба ее фантомная боль конечности снизилась на 50% (см. фиг. 2). В соответствии с этим ей была необходимой меньшая устраняющая боль медикация, она могла спать в течение ночи, и ее связанное со здоровьем качество жизни (ООБ) улучшилось. Интенсивность сильной боли снова достигла уровней базовой линии после осуществления более интенсивной физиотерапии, но была вновь эффективно ослаблена в течение одного дня после инфузии панитумумаба (период врачебного наблюдения 3 недели до сегодняшнего дня).
Обсуждение.
Мы предполагаем, что эффективное ослабление НБ представляет собой мощный специфический для класса эффект ингибиторов БОРК, поскольку все три проанализированные лекарственные средства были эффективными. Успешное анальгетическое лечение НБ у двух нераковых пациентов и двух раковых пациентов с различными механизмами, которые лежат в основе боли, является последовательным с влиянием, описанным в нашем предыдущем сообщении ΕΝΡΕΡ19 Четыре из пяти пациентов, которым было предложено это лечение, испытывали сильные и быстрые анальгетические ответы длительной НБ, не поддающейся лечению с помощью стандартных способов лечения.
Как внеклеточное (цетуксимаб и панитумумаб), так и внутриклеточное (гефитиниб) ингибирование ЕОРК приводило к полному утиханию НБ.
Дополнительное подтверждение оригинального действия лекарственного средства является результатом корреляции между фармакокинетиками ингибитора ЕОРК и клиническими наблюдениями в случае
3. Тот факт, что боль пациента снова возвращалась через 11 дней после его последней инфузии цетуксимаба и приблизительно через 20 дней после применения панитумумаба является последовательным с периодом полувыведения этих лекарственных средств (Катапа(кап К.К. АНетпаЬуе бокшд кскеби1ек Гог СсЩхнпаЬ: а го1е Сот Ы\уеек1у абтппк(га(юп? С1ш Со1огес(а1 Сапсег 2008; 7: 364-8; 8аабек СЕ, Ьее Н8. РатЩтитаЬ: а Ги11у китап топос1опа1 апйЬобу \\'кк асйуйу ίη те(ак(аОс со1огес(а1 сапсег. Апп Ркагтасо(кег 2007; 41: 606-13), а также с наблюдениями, сделанными из нашего описанного предыдущего случая (Кегк(еп С., Сатегоп М.О. СеЩхнпаЪ а11е\аа(ек пенгорабис раш бекрке (итоиг ргодгеккюп. ΒΜί Саке Кер 2012; 2012). ΕΝΚΕΡ20. Кроме того, факт того, что боль пациента отвечала более медленно на пероральное лекарственное средство, чем внутривенное введение как цетуксимаба, так и панитумумаба, поддерживает гипотетическое причинное и непосредственное влияние ингибирования ΕΟΡΚ.
Случай 2 продемонстрировал значительное усиление боли только через часы после инфузии антиΕΟΡΚ антитела панитумумаба. Недавнее исследование продемонстрировало, что цетуксимаб и панитумумаб тормозят друг друга в отношении ингибирования ΕΟΡΚ (А1уатеп§а М.Б., Клккпеу ί.. Наппе\уа1б ί. и др. 1п-бер(к Ъюркуйса1 апа1ук1к оГ нКегасОопк Ъе(\уееп (кегареиОс апкЪобШ апб (ке ех(гасе11и1аг боташ оГ (ке ер1бегта1 дгоМк Гас(ог гесерЮг. Апа1 Вюскет 2012; 421: 138-51). Это, вероятно, может приводить к вытеснению цетуксимаба панитумумабом и, таким образом, вызывать быстрое возвращение боли, которое наблюдали в случае 2. Все анти-ΕΟΡΚ лекарственные средства, которые использовали у этих пациентов, были разработаны для ингибирования активации ΕΟΡΚ1 и, среди прочих, МАРК пути передачи сигнала ΕΟΡ при раке_ΕNΚΕΡ_6. Наблюдаемый эффект может осуществляться благодаря ингибированию ΕΟΡ, но при использовании блокирования ΕΟΡΚ1 эти лекарственные средства также обладают потенциалом для ингибирования других лигандов связывания ΕΟΡΚ1 (^кее1ег ИХ., Иипп Ε.Ρ., Натай Р.М. ипбеткИпбшд гейк(апсе (о ΕΟΡΚ нбнЪкогк-ппраП оп Ги(иге (геа(теп( к(га(еДек. №-1Щге гсу1с\ук СЬтса1 опсо1оду 2010; 7: 493-507), либо непосредственно, либо путем ингибирования семейства гетеродимеризации рецептора эпидермального фактора роста человека (ΗΕΚ) (№ш0уа1 Т, Κίδΐιί А.К., Мащшбат А.Р. Εтс^д^ηд (кегарШ ш дакйош1екЬпа1 сапсегк. ^от1б |оиРНК1 оГ дакйоеп1его1о§у: \νίΟ 2006; 12: 7440-50; 8скате1 νν, Эюк ТР. 81дпа1 (гапкбисОоп: кресбтску оГ дтоМк Гас(огк ехркппеб Ьу рага11е1 бМпЪШеб ргосеккшд. Меб Нуро(кекек 1996; 47: 249-55; 1ке Ν., От1 К., ШтЪага И., Нфайпуата 8., Оо1кЫ К. Оуегехргеккеб ЖК2 ш Ν8ί.Έί'.’ 1к а рокйЫе (кегареикс (агде( оГ ΕΟΡΚ нбпЪкогк. АпОсапсег Кек 2011; 31 :415561). В этом отношении интересно, что комплекс нейрегулин 1-ΕΦΒ3-Ε±Β2 был недавно предложен как такой, который является причинным механизмом при тригеминальной нейропатической боли, индуцированной повреждением нервов, у крыс (Ма Ρ., Ζΐκπίβ Б., Vекбиηб К.К Тпдепнгеб №туе 1и)игу ΕιΓΒ3/ΕιΓΒ2 Ргото(ек Мескатса1 НурегкепкШубу. Апек1кек1о1о§у 2012).
Некоторые рецепторные тирозинкиназы (КТК) имеют потенциал для активации МАРК путь передачи сигнала, который был предложен в качестве мишени для способов терапии, направленных против НБ, а также других хронических неврологических заболеваний (Л 2009, выше; Ιί КК. Мкодеп-асОуаЮб рго(ен1 Юпакек ак ро(епОа1 (агде(к Гог раш кШегк. Сигг Орш 1пуекЬд Итидк 2004; 5: 71-5; Уакиба 8., 8идшга Н., Тапака Н., Такфапп 8., Уатада(а К. р38 МАР кшаке нбиЪкогк ак ро(епОа1 (кегареикс бгидк Гог пеига1 б1кеакек. Сеп( Кету 8ук( Агенты Меб СЬет 2011; 11: 45-59). После повреждения нервов нейроны оказывают повышающую регуляцию на членов ΗΕΚ-семейства рецепторов (8ско1/, выше; Бт В., №иГе1б А.Н. Аскуакоп оГ ер1бегта1 §го>(к Гас(ог гесер(огк ш ак(госу(ек: Ггот беуе1ортеп( (о пеига1 т)игу. ί №игокс! Кек
- 16 029234
2007; 85: 3523-9; Сагго11 §.Ь., МШег М.Ь., РтоНией Ρ.ν., Ктт СогЬе(( ТА. Ехрте88юп оГ пеигеди1ш8
апй Ше1г рШаНуе тесер1от8, ЕгЬВ2 и ЕгЬВЗ, 18 шйисей йитшд \Уа11епап йедепегаОоп. ί Ыеигока 1997; 17: 1642-59), тем самым потенциально повышая их активацию каскада МАРК пути передачи сигнала (Л, 2009, выше). Это может приводить к дополнительному взаимодействию между клетками в триаде нейропатической боли (5>с1ю1/. выше). Так, ранее нами была выдвинута гипотеза непосредственного ингибирования МАРК пути передачи сигнала цетуксимабом в нейронных или глиальных клетках (Кет81еп С., Сатегоп М.О. Се1их1таЬ а11е\аа(е8 пеигораШс раш йе8рйе 1итот ргодге88юп. ВМ1 Са8е Кер 2012).
Нейрегулин представляет собой важный регулятор триады нейропатической боли (С.'а1уо М., Ζΐιιι Ν., Οτί8ΐ 1., Ма Ζ., ЬоеЬ ТА., Веппе(( ΌΧ. Ро11оМпд петуе щиту пеигеди1ш-1 йпуе8 т1стодНа1 ртоНГетаНоп апй пеитораШс ра1п \аа (Не МЕК/ЕКК ра(Н\уау. ОНа 2011; 59: 554-68). Изменения экспрессии в изоформах нейрегулина 1 в модели НБ у крыс предполагает связь между ЕОРК и НВ_ЕNКЕР_33 (Кап/аЮ Н., МК /оЬисЫ 8., ОЬа1а Ν. и др. Ехрте88юп сНапде8 оГ 1Не пеитедиНп 1 18оГогт8 ш пеитораШс ра1п тойе1 та18. №иго8с1 ЬеН 2012; 508: 78-83). Кроме того, пути передачи сигнала нейрегулина были продемонстрированы в качестве биомаркеров эффективности цетуксимаба (ОПуега8-Реггаго8 С., Уа/с|ие/-Маг(ш А., ОиегаН В. и др. 1п1етГетоп/8ТАТ1 апй пеитедиНп 81дпаНпд ра(Н\уау8 аге ехр1ота!оту Ыотаткеге оГ Се1их1таЬ (ЕтЬНих(К)) еГПсасу ш ККА8 \уПй-(уре 8диатои8 сатсшота8: а ра(Н\уау-Ьа8ей апа1у818 оГ \\1ю1е Нитап-депоте ткгоаггау йа(а Ггот Се1их1таЬ-айар1ей (итог се11-1ше тойе18. 1п1 1 Опсо1 2011; 39: 1455-79).
Спустя много месяцев мучительной НБ, что приводит к серьезному нарушению физического и психосоциального функционирования, все четыре пациента, которые были чувствительны к лечению, почти немедленно восстанавливали ООР что ранее было трудно себе представить.
Пример 3.
72-летняя пациентка с метастатическим раком толстой кишки (метастазы только в ее легких) начинала лечение с монотерапии при использовании панитумумаба. Она пришла на свой первый прием через 14 дней после первой инфузии и неожиданно сообщила, что она испытала полное избавление от ее периодического воспаления седалищного нерва, которое она имела в течение шести месяцев, в течение 24 ч после первой инфузии панитумумаба. В дальнейшем она получила две дополнительные дозы с двухнедельными интервалами и не получала инфузии в течение последующего периода 5 недель. Она ретроспективно описывала свое воспаление седалищного нерва как периодическое дифференцирование по степени от 6 до 8 по 10-балльной шкале, и до тех пор пока не началось лечение при использовании ингибитора ЕОРК, оно присутствовало в большинстве дней, временами значительно ограничивая ее активность и подвижность. С момента как было начато лечение, боль не возвратилась вновь, и она сообщила, что качество ее жизни значительно улучшилось. Предыдущие способы лечения этого состояния включали парацетамол, НПВП и бензодиазепины. Она больше не нуждалась в анальгетических средствах и не подвергалась сопутствующим вмешательствам или другим изменениям ее медикаментозного лечения.
Все публикации, патенты, патентные заявки и номера доступа, которые являются упомянутыми в приведенном выше описании, являются введенными в данную заявку в качестве ссылки в своей целостности. Несмотря на то, что изобретение было описано в связи со своими специфическими воплощениями, будет понятным, что заявленное изобретение не может быть чрезмерно ограничено такими специфическими воплощениями. Действительно, различные модификации и вариации описанных композиций и способов в соответствии с изобретением будут понятными среднему специалисту в данной области техники и являются предназначенными для того, чтобы быть охваченными объемом приведенных ниже пунктов формулы изобретения.

Claims (21)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Способ лечения субъекта с нейропатической болью, который включает введение указанному субъекту ЕОРК ингибитора, выбранного из группы, включающей цетуксимаб, матузумаб, нецитумумаб, нимотузумаб, панитумумаб, залутумумаб, афатиниб, эрлотиниб, гефитиниб, лапатиниб, нератиниб и вандетаниб.
  2. 2. Способ в соответствии с п.1, где указанный субъект демонстрирует симптомы нейропатической боли, и указанное введение указанного агента снижает или модулирует симптомы указанной нейропатической боли.
  3. 3. Способ в соответствии с п.1, где указанный ЕОРК ингибитор выбран из группы, которая состоит из цетуксимаба, матузумаба, нецитумумаба, нимотузумаба, панитумумаба и залутумумаба.
  4. 4. Способ в соответствии с п.3, где указанный ЕОРК ингибитор выбран из группы, которая состоит из цетуксимаба и панитумумаба.
  5. 5. Способ в соответствии с п.1, где указанный ЕОРК ингибитор выбран из группы, которая состоит из афатиниба, эрлотиниба, гефитиниба, лапатиниба, нератиниба и вандетаниба.
  6. 6. Способ в соответствии с п.5, где указанный ЕОРК ингибитор выбран из группы, которая состоит из гефитиниба и эрлотиниба.
  7. 7. Способ в соответствии с п.1, где указанный субъект представляет собой животное.
  8. 8. Способ в соответствии с п.7, где указанным животным является человек.
    - 17 029234
  9. 9. Способ в соответствии с п.1, где указанный ЕСРК ингибитор вводится совместно по крайней мере с одним терапевтическим агентом.
  10. 10. Способ в соответствии с п.9, где указанный по крайней мере один терапевтический агент является выбранным из группы, которая состоит из нестероидных противовоспалительных препаратов, стероидных противовоспалительных лекарственных средств, лекарственных средств на основе опиоидов, антидепрессантов, противосудорожных агентов, противоэпилептических агентов, анксиолитических средств, каннабиноидов и их комбинаций.
  11. 11. Способ лечения нейропатической боли, включающий введение ЕСРК ингибитора, выбранного из группы, включающей цетуксимаб, матузумаб, нецитумумаб, нимотузумаб, панитумумаб, залутумумаб, афатиниб, эрлотиниб, гефитиниб, лапатиниб, нератиниб и вандетаниб, субъекту, который демонстрирует симптомы нейропатической боли, где указанное введение снижает, модулирует или устраняет указанные симптомы.
  12. 12. Способ в соответствии с п.11, где указанный ЕСРК ингибитор вводится совместно по крайней мере с одним терапевтическим агентом.
  13. 13. Способ в соответствии с п.12, где указанный по крайней мере один терапевтический агент является выбранным из группы, которая состоит из нестероидных противовоспалительных препаратов, стероидных противовоспалительных лекарственных средств, лекарственных средств на основе опиоидов, антидепрессантов, противосудорожных агентов, противоэпилептических агентов, анксиолитических средств, каннабиноидов и их комбинаций.
  14. 14. Применение ЕСРК ингибитора, выбранного из группы, включающей цетуксимаб, матузумаб, нецитумумаб, нимотузумаб, панитумумаб, залутумумаб, афатиниб, эрлотиниб, гефитиниб, лапатиниб, нератиниб и вандетаниб, для лечения нейропатической боли.
  15. 15. Применение в соответствии с п.14, где указанный ЕСРК ингибитор является выбранным из группы, которая состоит из цетуксимаба, матузумаба, нецитумумаба, нимотузумаба, панитумумаба и залутумумаба.
  16. 16. Применение в соответствии с п.15, где указанный ЕСРК ингибитор является выбранным из группы, которая состоит из цетуксимаба и панитумумаба.
  17. 17. Применение в соответствии с п.14, где указанный ЕСРК ингибитор выбран из группы, которая состоит из афатиниба, эрлотиниба, гефитиниба, лапатиниба, нератиниба и вандетаниба.
  18. 18. Применение в соответствии с п.17, где указанный ЕСРК ингибитор выбран из группы, которая состоит из гефитиниба и эрлотиниба.
  19. 19. Применение в соответствии с любым из пп.14-18, где указанный ЕСРК ингибитор вводится совместно по крайней мере с одним терапевтическим агентом.
  20. 20. Применение в соответствии с п.19, где указанный по крайней мере один терапевтический агент является выбранным из группы, которая состоит из нестероидных противовоспалительных препаратов, стероидных противовоспалительных лекарственных средств, лекарственных средств на основе опиоидов, антидепрессантов, противосудорожных агентов, противоэпилептических агентов, анксиолитических средств, каннабиноидов и их комбинаций.
  21. 21. Применение в соответствии с любым из пп.14-20, где указанное введение или совместное введение снижает или модулирует симптомы указанной нейропатической боли.
EA201400012A 2011-07-06 2012-07-05 Нацеленная на egfr терапия EA029234B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161504737P 2011-07-06 2011-07-06
PCT/IB2012/001619 WO2013005108A1 (en) 2011-07-06 2012-07-05 Egfr targeted therapy

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201400012A1 EA201400012A1 (ru) 2014-07-30
EA029234B1 true EA029234B1 (ru) 2018-02-28

Family

ID=46845782

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201400012A EA029234B1 (ru) 2011-07-06 2012-07-05 Нацеленная на egfr терапия

Country Status (22)

Country Link
US (2) US10980879B2 (ru)
EP (1) EP2729173B1 (ru)
JP (6) JP2014520792A (ru)
KR (3) KR20160084505A (ru)
CN (1) CN103813805B (ru)
AU (1) AU2012279959B2 (ru)
BR (1) BR112014000021A2 (ru)
CA (1) CA2840856C (ru)
DK (1) DK2729173T3 (ru)
EA (1) EA029234B1 (ru)
ES (1) ES2592628T3 (ru)
HR (1) HRP20161148T1 (ru)
HU (1) HUE030501T2 (ru)
IL (1) IL230216A (ru)
LT (1) LT2729173T (ru)
MX (1) MX340536B (ru)
PL (1) PL2729173T3 (ru)
PT (1) PT2729173T (ru)
RS (1) RS55088B1 (ru)
SI (1) SI2729173T1 (ru)
WO (1) WO2013005108A1 (ru)
ZA (1) ZA201400205B (ru)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA029234B1 (ru) * 2011-07-06 2018-02-28 Сюкехусет Сёрланнет Хф Нацеленная на egfr терапия
WO2014095088A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Sykehuset Sørlandet Hf Egfr targeted therapy of neurological disorders and pain
CN106267368B (zh) * 2015-06-10 2019-08-30 北京中科再康生物技术有限公司 西妥昔单抗与负载该物质的胶原支架在制备修复脊髓损伤药物中的应用
AU2019328532A1 (en) * 2018-08-31 2021-03-11 The Johns Hopkins University Inhibition of RIP kinases for treating neurodegenerative disorders
US11103509B2 (en) * 2018-11-07 2021-08-31 University Of Kentucky Research Foundation Methods of treating pain and/or inflammatory disorders using lapatinib
WO2020115108A1 (en) 2018-12-06 2020-06-11 Sørlandet Sykehus Hf Egfr inhibitors and their use in the treatment of neuroathic pain
WO2021191094A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 University Court Of The University Of Edinburgh Erbb-targeted therapies for neuropathic pain

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005099756A2 (en) * 2004-04-08 2005-10-27 Agus David B ErbB ANTAGONISTS FOR PAIN THERAPY

Family Cites Families (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
GB9223084D0 (en) 1992-11-04 1992-12-16 Imp Cancer Res Tech Compounds to target cells
JP3816518B2 (ja) 1994-06-10 2006-08-30 ジェンベク、インコーポレイティッド 相補的なアデノウイルスベクター系と細胞系
ATE293701T1 (de) 1994-10-28 2005-05-15 Univ Pennsylvania Rekombinanter adenovirus und methoden zu dessen verwendung
US5872154A (en) 1995-02-24 1999-02-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Method of reducing an immune response to a recombinant adenovirus
US5707618A (en) 1995-03-24 1998-01-13 Genzyme Corporation Adenovirus vectors for gene therapy
US6019978A (en) 1995-06-05 2000-02-01 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Replication-defective adenovirus human type 5 recombinant as a vaccine carrier
KR100449181B1 (ko) 1995-06-15 2005-01-24 크루셀 홀란드 비.브이. 유전자요법에사용할수있는사람의재조합아데노바이러스패키징시스템
US5994132A (en) 1996-10-23 1999-11-30 University Of Michigan Adenovirus vectors
US5830730A (en) 1997-05-08 1998-11-03 The Regents Of The University Of California Enhanced adenovirus-assisted transfection composition and method
CA2290736A1 (en) 1997-07-11 1999-01-21 Introgene B.V. Interleukin-3 gene therapy for cancer
US6506559B1 (en) 1997-12-23 2003-01-14 Carnegie Institute Of Washington Genetic inhibition by double-stranded RNA
US5981225A (en) 1998-04-16 1999-11-09 Baylor College Of Medicine Gene transfer vector, recombinant adenovirus particles containing the same, method for producing the same and method of use of the same
CA2340682A1 (en) 1998-08-14 2000-02-24 Aventis Pharmaceuticals Products Inc. Adenovirus formulations for gene therapy
CN1257286C (zh) 1998-08-27 2006-05-24 森泰莱昂公司 用于递送异源基因的定向腺病毒载体
AU2001268513A1 (en) 2000-06-17 2002-01-02 Third Wave Technologies, Inc. Nucleic acid accessible hybridization sites
WO2002044321A2 (en) 2000-12-01 2002-06-06 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Rna interference mediating small rna molecules
CA2453183C (en) 2001-07-12 2016-05-10 University Of Massachusetts In vivo production of small interfering rnas that mediate gene silencing
EP1474433A4 (en) 2002-02-20 2005-02-23 Sirna Therapeutics Inc TARGET LOCALIZATION TARGETED BY RNA INTERFERENCE AND TARGET VALIDATION WITH SHORT INTERFERING NUCLEIC ACID (siNA)
AU2003283976B2 (en) 2002-09-27 2009-12-10 Cold Spring Harbor Laboratory Cell-based RNA interference and related methods and compositions
US20040147428A1 (en) 2002-11-15 2004-07-29 Pluenneke John D. Methods of treatment using an inhibitor of epidermal growth factor receptor
GB0320793D0 (en) 2003-09-05 2003-10-08 Astrazeneca Ab Chemical process
WO2005038054A1 (en) 2003-10-20 2005-04-28 Zicai Liang METHOD OF MEASURING THE EFFICACY OF siRNA MOLECULES
GB0327726D0 (en) 2003-11-28 2003-12-31 Isis Innovation Method
DE602005023345D1 (de) 2004-12-17 2010-10-14 Beth Israel Hospital Zusammensetzungen für bakteriell vermitteltes gen-silencing sowie verfahren zur verwendung davon
EP2089521A1 (en) 2006-02-08 2009-08-19 Ercole Biotech, Inc. Soluble tnf receptors and their use in treatment of disease
US20100062994A1 (en) 2006-07-14 2010-03-11 Santaris Pharma A/S Adenosine Receptor Antagonists
EP2444494B1 (en) 2006-10-09 2016-09-28 Roche Innovation Center Copenhagen A/S Rna antagonist compounds for the modulation of pcsk9
WO2009048947A1 (en) * 2007-10-09 2009-04-16 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of treatment of opioid tolerance, physical dependence, pain, and addiction with inhibitors of certain growth factor receptors
US9908884B2 (en) 2009-05-05 2018-03-06 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. EGFR inhibitors and methods of treating disorders
US8828391B2 (en) 2011-05-17 2014-09-09 Boehringer Ingelheim International Gmbh Method for EGFR directed combination treatment of non-small cell lung cancer
EA029234B1 (ru) * 2011-07-06 2018-02-28 Сюкехусет Сёрланнет Хф Нацеленная на egfr терапия

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005099756A2 (en) * 2004-04-08 2005-10-27 Agus David B ErbB ANTAGONISTS FOR PAIN THERAPY

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CRIPPS C. ET AL.: "Epidermal growth factor receptor targeted therapy in stages III and IV head and neck cancer", June 2010 (2010-06), CURRENT ONCOLOGY (TORONTO, ONT.) JUN 2010, vol. 17, NR. 3, page(s) 37-48, XP002686965, ISSN: 1198-0052 the whole document *
KERSTEN CHRISTIAN ET AL.: "Cetuximab alleviates neuropathic pain despite tumour progression", 2012, BMJ CASE REPORTS 2012, vol. 2012, XP9164568, ISSN: 1757-790X cited in the application the whole document *
MESÃA RICARD ET AL.: "Rapid palliation of symptoms with platinum-based chemotherapy plus cetuximab in recurrent oral cancer: a case report", HEAD & NECK ONCOLOGY, BIOMED CENTRAL LTD., LONDON, UK, vol. 2, no. 1, 27 January 2010 (2010-01-27), page 3, XP021070581, ISSN: 1758-3284 the whole document *
XIONG H.Q. ET AL.: "CETUXIMAB, A MONOCLONAL ANTIBODY TARGETING THE EPIDERMAL GROWTH FACTOR RECEPTOR, IN COMBINATION WITH GEMCITABINE FOR ADVANCED PANCREATIC CANCER: A MULTICENTER PHASE II TRIAL", JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY, AMERICAN SOCIETY OF CLINICAL ONCOLOGY, US, vol. 22, no. 13, 1 July 2004 (2004-07-01), pages 2610-2616, XP009061496, ISSN: 0732-183X, DOI: 10.1200/JCO.2004.12.040 the whole document *

Also Published As

Publication number Publication date
PT2729173T (pt) 2016-09-22
CN103813805A (zh) 2014-05-21
LT2729173T (lt) 2016-10-10
HRP20161148T1 (hr) 2016-11-18
WO2013005108A1 (en) 2013-01-10
JP2018016659A (ja) 2018-02-01
AU2012279959A1 (en) 2014-01-16
JP2019210295A (ja) 2019-12-12
PL2729173T3 (pl) 2017-06-30
US20140134161A1 (en) 2014-05-15
JP2022027977A (ja) 2022-02-14
SI2729173T1 (sl) 2016-10-28
KR101639141B1 (ko) 2016-07-12
KR20160084505A (ko) 2016-07-13
HUE030501T2 (en) 2017-05-29
KR20180033305A (ko) 2018-04-02
KR20140048938A (ko) 2014-04-24
CA2840856A1 (en) 2013-01-10
US20210236635A1 (en) 2021-08-05
JP6515061B2 (ja) 2019-05-15
IL230216A (en) 2017-09-28
AU2012279959B2 (en) 2016-03-24
KR102027715B1 (ko) 2019-10-01
EP2729173B1 (en) 2016-06-15
MX340536B (es) 2016-07-13
CN103813805B (zh) 2017-02-22
US10980879B2 (en) 2021-04-20
JP2024026630A (ja) 2024-02-28
DK2729173T3 (en) 2016-08-15
ZA201400205B (en) 2017-02-22
JP2016138152A (ja) 2016-08-04
JP2014520792A (ja) 2014-08-25
EA201400012A1 (ru) 2014-07-30
CA2840856C (en) 2017-09-19
ES2592628T3 (es) 2016-11-30
MX2013015347A (es) 2014-04-25
EP2729173A1 (en) 2014-05-14
BR112014000021A2 (pt) 2017-02-07
RS55088B1 (sr) 2016-12-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA029234B1 (ru) Нацеленная на egfr терапия
US20220033502A1 (en) METHODS FOR UPREGULATING IMMUNE RESPONSES USING COMBINATIONS OF ANTI-RGMb AND ANTI-PD-1 AGENTS
Baldassarre et al. Endophilin A2 promotes HER2 internalization and sensitivity to trastuzumab-based therapy in HER2-positive breast cancers
KR102228358B1 (ko) 신경 장애 및 통증의 ｅｇｆｒ 표적 치료
JP6306768B2 (ja) 疼痛抑制物質のスクリーニング方法および疼痛の予防または治療用医薬組成物
WO2014075124A1 (en) Methods and compositions for the treatment and/or prevention of bowel disorders
US8992923B2 (en) Means and methods for treating or preventing brain tumors based on the nuclear receptor tailless (TIx)
US20200331978A1 (en) Compositions and Methods for Treating or Preventing Endocrine FGF23-Linked Diseases
EP3353196B1 (en) Polypeptides capable of inhibiting the binding between leptin and neuropilin-1

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM