EA029215B1 - Стабильные водные составы адалимумаба - Google Patents

Стабильные водные составы адалимумаба Download PDF

Info

Publication number
EA029215B1
EA029215B1 EA201590518A EA201590518A EA029215B1 EA 029215 B1 EA029215 B1 EA 029215B1 EA 201590518 A EA201590518 A EA 201590518A EA 201590518 A EA201590518 A EA 201590518A EA 029215 B1 EA029215 B1 EA 029215B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
adalimumab
buffer
composition
bioanalog
citrate
Prior art date
Application number
EA201590518A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201590518A1 (ru
Inventor
Марк МЭННИНГ
Роберт В. Пэйн
Original Assignee
Кохерус Байосайенсис, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=50237778&utm_source=***_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA029215(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Кохерус Байосайенсис, Инк. filed Critical Кохерус Байосайенсис, Инк.
Publication of EA201590518A1 publication Critical patent/EA201590518A1/ru
Publication of EA029215B1 publication Critical patent/EA029215B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A61K2039/541—Mucosal route
    • A61K2039/542—Mucosal route oral/gastrointestinal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Oncology (AREA)

Abstract

Изобретение относится к водной буферной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб; буфер, содержащий только гистидин; и стабилизатор, состоящий из аминокислоты, выбранной из глицина, аргинина, метионина; где композиция не содержит полиол и имеет pH от 5 до 6. Изобретение также относится к водной буферной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб; буфер, состоящий только из гистидина; и стабилизатор, состоящий из полиола; где композиция не содержит кислоту, отличную от гистидина, и имеет pH от 5 до 6. Изобретение также относится к водной буферной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб; буфер, состоящий только из гистидина; и стабилизатор, состоящий из: (a) аминокислоты, выбранной из глицина, аргинина и метионина; и (b) полиола, где композиция имеет pH от 5 до 6.

Description

Изобретение относится к водной буферной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб; буфер, содержащий только гистидин; и стабилизатор, состоящий из аминокислоты, выбранной из глицина, аргинина, метионина; где композиция не содержит полиол и имеет рН от 5 до 6. Изобретение также относится к водной буферной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб; буфер, состоящий только из гистидина; и стабилизатор, состоящий из полиола; где композиция не содержит кислоту, отличную от гистидина, и имеет рН от 5 до 6. Изобретение также относится к водной буферной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб; буфер, состоящий только из гистидина; и стабилизатор, состоящий из: (а) аминокислоты, выбранной из глицина, аргинина и метионина; и (Ь) полиола, где композиция имеет рН от 5 до 6.
029215
Область изобретения
Изобретение относится к водным фармацевтическим композициям, подходящим для длительного хранения адалимумаба (включая белки-антитела, рассматриваемые или предполагаемые в качестве "биоаналогичных" или "биологически улучшенных" вариантов коммерчески доступного адалимумаба), к способам производства композиций, способам их введения и к содержащим их наборам.
Уровень техники, предшествующий изобретению
Фактор некроза опухоли альфа (ΤΝΡα) представляет собой природный цитокин млекопитающих, продуцируемый различными типами клеток, включая моноциты и макрофаги, в ответ на эндотоксин или другие стимулы. ΤΝΡα представляет собой основной медиатор воспалительных, иммунологических и патофизиологических реакций (Оге11, М., е! а1. (1995) Се11, 83: 793-802).
Растворимый ΤΝΡα образуется посредством расщепления трансмембранного белка-предшественника (Кпед1ег, е! а1. (1988) Се11 53: 45-53), и секретируемые полипептиды массой 17 кДа собираются в растворимые гомотримерные комплексы (8тйй, е! а1. (1987), 1. Βίο1. Сйет. 262: 6951-6954; для обзора ΤΝΡ, см. Ви!1ег, е! а1. (1986), №Циге 320:584; Θ1ά (1986), 8с1епсе 230: 630). Затем эти комплексы связываются с рецепторами, находящимися на множестве клеток. Связывание обеспечивает ряд провоспалительных эффектов, включая (ί) высвобождение других провоспалительных цитокинов, таких как интерлейкин (1Ь)-6, 1Ь-8 и 1Ь-1, (ίί) высвобождение матриксных металлопротеиназ и (ίίί) усиление экспрессии эндотелиальных молекул адгезии, дополнительно усиливая воспалительные и иммунный каскад, привлекая лейкоциты во внесосудистые ткани.
Существует множество нарушений, ассоциированных с повышенными уровнями ΤΝΡα. Например, показано, что экспрессия ΤΝΡα повышается при ряде заболеваний человека, включая такие хронические заболевания, как ревматоидный артрит (КА), воспалительные нарушения кишечника, включая болезнь Крона и язвенный колит, сепсис, застойную сердечную недостаточность, бронхиальную астму и рассеянный склероз. ΤΝΡα также обозначают как провоспалительный цитокин.
Физиологически ΤΝΡα также ассоциирован с защитой от конкретных инфекций (Сегатг е! а1. (1988), 1ттипо1. ΤοΦιν 9:28). ΤΝΡα высвобождают макрофаги, активированные липополисахаридами грамотрицательных бактерий. По существу, ΤΝΡα по-видимому является очень важным эндогенным медиатором, вовлеченным в развитие и патогенез эндотоксического шока, ассоциированного с бактериальным сепсисом.
Адалимумаб (Хумира (Нитка®), АЪЪМе, 1пс.) представляет собой рекомбинантное моноклональное антитело 1§О1 человека, специфичное к ΤΝΡ человека. Это антитело также известно как Ό2Ε7. Адалимумаб состоит из 1330 аминокислот, и его молекулярная масса составляет приблизительно 148 килодальтон. Адалимумаб описан и запатентован в патенте США № 6090382, описание которого, таким образом, включено в качестве ссылки полностью. Как правило, адалимумаб получают посредством технологии рекомбинантных ДНК в экспрессирующей системе с клетками млекопитающего, такими как, например, клетки китайского хомяка. Адалимумаб специфически связывается с ΤΝΡα и нейтрализует биологические функция ΤΝΡ, блокируя его взаимодействие с рецепторами ΤΝΡ р55 и р75 на клеточной поверхности.
В данной области известны различные составы адалимумаба. См., например, патенты США 8216583 и 8420081. Все еще остается необходимость в стабильных жидких составах адалимумаба, которые обеспечивают его длительное хранение без значительной потери эффективности.
Сущность изобретения
Изобретение относится к стабильным водным составам, содержащим адалимумаб, которые обеспечивают его длительное хранение.
В первом варианте осуществления изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб; стабилизатор, содержащий по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из полиола и поверхностно-активного вещества; и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 4 до приблизительно 8 и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанный буфер не содержит комбинации цитрата и фосфата и предпочтительно не содержит никакого цитратного буфера. В этом варианте осуществления стабилизатор предпочтительно содержит и полиол, и поверхностно-активное вещество.
Во втором варианте осуществления использования системы с одним буфером, изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, полиол, поверхностно-активное вещество и буферную систему, содержащую одно буферное средство, где указанное одно буферное средство выбрано из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата или малеата, но не включает комбинаций указанного выше; где рН состава составляет приблизительно от 4 до 8, и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6. Для применения в качестве единственных буферных средств особенно предпочтительными являются гистидин и сукцинат. Как используют в настоящем описании, термин буфер, буферная система или буферное средство и подобная терминология предназначены для обозначения компонентов буфера, которые добавляют в состав буферной емкости в дополнение к
- 1 029215
любой буферной емкости, обуславливаемой самим белком, таким образом, термин "буфер" и т.п., не предназначен для включения в качестве самостоятельного буферного объекта самого белка.
В третьем варианте осуществления изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, стабилизатор, содержащий по меньшей мере одно соединение, выбранное из полиола и поверхностно-активного вещества, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 4 до приблизительно 8 и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция по существу не содержит буфера.
В четвертом варианте осуществления изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, полиол и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 4 до приблизительно 8 и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция не содержит или по существу не содержит поверхностно-активного вещества. Предпочтительно, композиция (ί) не содержит буферной комбинации цитрата и фосфата; и (ίί) буфер содержит по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из гистидина и сукцината; и (ίίί) полиол выбран из группы, состоящей из маннита, сорбита и трегалозы.
В пятом варианте осуществления изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, поверхностно-активное вещество и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 4 до 8 и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция, по существу, не содержит полиола. Предпочтительно, композиция (ί) не содержит буферной комбинации цитрата и фосфата; и (ίί) буфер содержит по меньшей мере одно соединение, выбранного из группы, состоящей из гистидина и сукцината, включая их сочетания.
В каждом из пяти вариантов осуществления, описанных выше, композиция необязательно может дополнительно содержать стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислоты, соли, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла. Аминокислотный стабилизатор можно выбирать из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина. Солевой стабилизатор можно выбирать из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия. Стабилизатор в виде иона металла можно выбирать из группы, состоящей из цинка, магния и кальция. Предпочтительно, составы адалимумаба, содержащие стабилизаторы, указанные выше, также не содержат буферных систем, у которых в комбинации находятся фосфатный буфер и цитратный буфер, и, наиболее предпочтительно, содержат буферные системы, не содержащие или, по существу, не содержащие цитратного буфера. В особенно предпочтительных вариантах осуществления (ί) необязательный дополнительный стабилизатор, присутствующий в этом варианте осуществления, не является хлоридом натрия или содержит хлорид натрия, присутствующий в количествах, не превосходящих приблизительно 100 мМ, и содержит по меньшей мере один из аргинина и глицина, включая комбинации этих двух аминокислот; (ίί) буфер, когда присутствует, не содержит цитрата, или по меньшей мере комбинации цитрата и фосфата, но вместо этого содержит один из гистидина и сукцината, включая их сочетания; и (ίίί) стабилизатор, когда он содержит полиол, предпочтительно представляет собой маннит в количествах, превосходящих приблизительно 150 мМ.
В дополнительных вариантах осуществления изобретение относится к водной буферной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб и буфер, где (ί) композиция не содержит или, по существу, не содержит комбинации буферов, которая содержит и цитратный буфер и фосфатный буфер; и (ίί) композиция демонстрирует долговременную стабильность.
Другой вариант осуществления изобретения относится к водной буферной фармацевтической композиции, демонстрирующей долговременную стабильность, где указанная композиция, содержит: (ί) адалимумаб; (ίί) буфер, выбранный из группы, состоящей из гистидинового буфера, сукцинатного буфера и их сочетаний; (ίίί) полисорбатное или полоксамерное поверхностно-активное вещество или их сочетания; и (ΐν) один или оба из следующего: (а) стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина, метионина, ЭДТА, хлорида натрия, сульфата натрия, ионов металлов и их сочетаний; и (Ь) полиол, выбранный из сорбита, маннита и трегалозы или их сочетаний. Необязательно, состав также может содержать сахар, такой как сахароза.
В дополнительном варианте осуществления изобретение представляет собой водную буферную фармацевтическую композицию, содержащую адалимумаб и буфер, где (ί) композиция не содержит или по существу не содержит полиола; и (ίί) композиция демонстрирует долговременную стабильность.
В еще одном дополнительном варианте осуществления изобретение относится к водной буферной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб и буфер, где (ί) композиция не содержит или по существу не содержит поверхностно-активного вещества; и (ίί) композиция демонстрирует долговременную стабильность.
Другой вариант осуществления изобретения относится к водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, где: (ί) композиция не содержит или по существу не содержит буфера; и (ίί) композиция демонстрирует долговременную стабильность.
В другом варианте осуществления состав адалимумаба по настоящему изобретению содержит, со- 2 029215
стоит или по существу состоит из адалимумаба, гистидина буфер в качестве единственного буфера в составе, глицина (или аргинина или их сочетания) в качестве единственного стабилизатора из не являющихся поверхностно-активными веществами стабилизаторов, указанных ранее, и полисорбата 80. В этом составе количество адалимумаба составляет от 20 до 150 мг/мл; количество гистидинового буфера составляет приблизительно до 50 мМ; количество глицина составляет приблизительно до 300 мМ; и количество полисорбата 80 находится в диапазоне приблизительно от 0,01 до приблизительно 0,2 мас.%. Необязательно, этот состав может содержать приблизительно до 100 мМ ЫаС1. Настоящее изобретение также включает модификацию этого состава с комбинацией гистидинового буфера с одним или несколькими из цитратного, ацетатного, фосфатного, малеатного, тартратного буферов.
В еще одном варианте осуществления состав адалимумаба по настоящему изобретению содержит, состоит или, по существу, состоит из адалимумаба, гистидинового буфера в качестве единственного буфера, маннита (или сорбита или трегалозы) и полисорбата 80, и дополнительно не содержит или, по существу не содержит не являющихся поверхностно-активными веществами стабилизаторов (например, глицина, аргинина и т.д.), указанных выше. В этом составе количество адалимумаба составляет от 20 до 150 мг/мл; количество гистидинового буфера составляет приблизительно до 50 мМ; количество полиола составляет приблизительно до 300 мМ; и количество полисорбата 80 находится в диапазоне приблизительно от 0,01 до приблизительно 0,2 мас.%. Необязательно, этот состав может содержать приблизительно до 100 мМ ЫаС1. Настоящее изобретение также включает модификацию этого состава с комбинацией гистидинового буфера с одним или несколькими из цитратного, ацетатного, фосфатного, малеатного, тартратного буферов.
В методическом аспекте изобретение относится к способу увеличения долговременной стабильности в водном буферном составе адалимумаба, содержащем один или несколько этапов из:
(a) введения в состав гистидинового буфера, сукцинатного буфера или их сочетания на основе эмпирических данных, указывающих на то, что такие буферы вносят вклад в стабильность состава в большей степени, чем другие буферы или комбинации буферов; или
(b) введения в состав глицина, аргинина или их сочетания в качестве стабилизаторов, на основе эмпирических данных, указывающих на то, что такой стабилизатор вносит вклад в стабильность состава в большей степени, чем другие стабилизаторы; или (с) по существу исключения присутствия буфера или комбинации буферов, содержащих цитратный буфер (особенно комбинации буферов, одновременно содержащей цитрат и фосфат) на основе эмпирических данных, указывающих на то, что такой буфер или комбинации буферов неэффективны в отношении стабилизации состава по сравнению с другими буферами. Способ дополнительно может включать выбор в качестве поверхностно-активного вещества Р§ 80 на основе эмпирических данных, указывающих на то, что Р8 80 обеспечивает лучшую термостабильность составу адалимумаба, чем другие поверхностно-активные вещества, включая Р§ 20. Способ пригоден для получения состава адалимумаба, который демонстрирует долговременную стабильность, сравнимую или лучшую, чем у коммерчески доступных составов адалимумаба, продаваемых под торговой маркой хумира®.
В дополнительном методическом аспекте способа изобретение относится к способу лечения воспалительного состояния у индивидуума, который включает введение такому индивидууму любых вариантов осуществления составов адалимумаба, как описано в настоящем документе.
В указанных выше вариантах осуществления, где в составы могут быть включены указанные выше стабилизаторы, дополнительно обнаружено, что можно достигать удовлетворительной стабилизации, когда такие стабилизаторы используют вместо полиола и поверхностно-активного вещества и, таким образом, стабилизированные составы по настоящему изобретению могут не содержать или по существу не содержать полиола и поверхностно-активного вещества. Таким образом, в шестом варианте осуществления изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, необязательно буфер, стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислоты, соли, ЭДТА и иона металла, и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 4 до приблизительно 8 и предпочтительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция по существу не содержит полиола и поверхностно-активного вещества. Когда в этом варианте осуществления присутствует буфер, особенно предпочтительно, чтобы (ί) буфер не содержал комбинации цитрата и фосфата; (ίί) буфер был выбран из группы, состоящей из гистидина и сукцината и (ίίί) стабилизатор не содержал хлорида натрия, но вместо этого содержал по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из аргинина и глицина.
Важные аспекты настоящего изобретения в определенных вариантах осуществления включают то, что (ί) обнаружено, что сорбит и трегалоза являются значительно лучшими стабилизаторами составов адалимумаба, чем маннит, за исключением случаев, когда маннит используют в концентрациях в избытке приблизительно 200-300 мМ, в случае чего эти три вещества, как правило, эквивалентны; (ίί) обнаружено, что аргинин и глицин (и комбинации) являются значительно лучшими стабилизаторами составов адалимумаба, чем хлорид натрия; и (ίίί) когда в составе используют буферы, обнаружено, что комбинация цитрата и фосфата неожиданно значительно хуже стабилизировала адалимумаб, чем другие буферы, такие как сукцинат, гистидин, фосфат и тартрат. Относительно плохое действие комбинации буферов
- 3 029215
цитрата и фосфата является достаточно неожиданным, принимая во внимание очевидную важность, придаваемую использованию комбинированного цитратного/фосфатного буфера в патенте США 8216583. В противоположность этому авторы обнаружили, что комбинация фосфатного/цитратного буферов не является оптимальным выбором для получения стабилизированного состава адалимумаба, и фактически, одной из составляющих частей изобретения авторов настоящей заявки является открытие того, что этой комбинации вообще следует избегать в пользу других буферных систем.
Предпочтительно, полиол представляет собой сахарный спирт и даже более предпочтительно, сахарный спирт, выбранный из группы, состоящей из маннита, сорбита и трегалозы. Однако, как указано выше, в отношениях между маннитом и сорбитом, в изобретении выявлено явное преимущество в стабилизации при использовании сорбита или трегалозы вместо маннита, если только маннит не используют при концентрациях в избытке приблизительно 200 мМ, в случае чего маннит, сорбит и трегалоза, как правило, являются эквивалентными. При концентрациях ниже приблизительно 200 мМ, выявлено, что маннит в составе адалимумаба является более плохим стабилизатором, чем сорбит или трегалоза.
Предпочтительно, полисорбатное или полоксамерное поверхностно-активное вещество представляет собой и даже более предпочтительно Р§ 80, Р§ 40, Р§ 20, Плюроник Р-68 и комбинации. Авторы выявили явное и неожиданное преимущество в термостабильности при выборе Р8 80 вместо Р8 20.
Эти и другие аспекты будут понятны из приведенного ниже описания различных вариантов осуществления, хотя можно осуществлять их вариации и модификации без отклонения от сущности и объема новых принципов изобретения.
Следует понимать, что и указанное выше общее описание, и приведенное ниже подробное описание являются исключительно иллюстративными и пояснительными и не ограничивают изобретения, как оно описано в формуле изобретения. Кроме того типичные варианты осуществления указаны в многочисленных исследованиях состава, описанных в подробном описании, также как и различные варианты осуществления, перечисленные в приложениях А, В и С, приложенных к нему и составляющих его часть.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 представляет собой гистограмму стабильности различных составов адалимумаба, как определено посредством эксклюзионной хроматографии (§ЕС).
Фиг. 2 представляет собой гистограмму стабильности различных составов адалимумаба, как определено посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с обращенной фазой (ОФ).
Фиг. 3 представляет собой диаграмму модели частных наименьших квадратов (РЬ§) 1, демонстрирующую действие цитрата/фосфата на стабильность.
Фиг. 4 представляет собой диаграмму модели РЬ§ 2, демонстрирующую действие цитрата/фосфата на стабильность.
Фиг. 5 представляет собой диаграмму модели РЬ§ 1, демонстрирующую действие гистидина/глицина на стабильность.
Фиг. 6 представляет собой диаграмму модели РЬ§ 1, демонстрирующую действие аргинина/сорбита на стабильность.
Фиг. 7 представляет собой диаграмму модели РЬ§ 1, демонстрирующую действие рН/гистидина на стабильность.
Фиг. 8 представляет собой диаграмму модели РЬ§ 2, демонстрирующую действие рН/гистидина на стабильность.
Фиг. 9 представляет собой диаграмму модели РЬ§ 2, демонстрирующую действие трегалозы/РБ80 на стабильность.
Фиг. 10 представляет собой диаграмму модели РЬ§ 2, демонстрирующую действие маннита/Р380 на стабильность.
Фиг. 11 представляет собой диаграмму модели РЬ§ 1, демонстрирующую действие маннита/ЫаС1 на стабильность.
Фиг. 12 представляет собой диаграмму модели РЬ§ 1, демонстрирующую действие ЭДТА/метионина на стабильность.
Фиг. 13 представляет собой диаграмму модели РЬ§ А, демонстрирующую действие цитрата и фосфата на стабильность.
Фиг. 14 представляет собой диаграмму модели РЬ§ А, демонстрирующую действие рН и гистидинового буфера на стабильность.
Фиг. 15 представляет собой диаграмму модели РЬ§ А, демонстрирующую действие глицина и аргинина на стабильность.
Фиг. 16 представляет собой диаграмму модели РЬ§ А, демонстрирующую действие ЫаС1 и полисорбата 80 (Р§ 80) на стабильность.
Фиг. 17 представляет собой диаграмму модели РЬ§ В, демонстрирующую действие цитрата и фосфата на стабильность.
Фиг. 18 представляет собой диаграмму модели РЬ§ В, демонстрирующую действие рН и гистидинового буфера на стабильность.
- 4 029215
Фиг. 19 представляет собой диаграмму модели РЬ8 В, демонстрирующую действие аргинина и глицина на стабильность.
Фиг. 20 представляет собой диаграмму модели РЬ8 В, демонстрирующую действие Р880 и маннита на стабильность.
Фиг. 21 представляет собой диаграмму модели РЬ8 В, демонстрирующую действие ЭДТА и ЫаС1 на стабильность.
Фиг. 22 представляет собой диаграмму модели РЬ8 В, демонстрирующую действие сукцинатного буфера и гистидинового буфера на стабильность.
Фиг. 23 представляет собой диаграмму модели РЬ8 С, демонстрирующую действие цитрата и фосфата на стабильность.
Фиг. 24 представляет собой диаграмму модели РЬ8 С, демонстрирующую действие рН и гистидинового буфера на стабильность.
Фиг. 25 представляет собой диаграмму модели РЬ8 С, демонстрирующую действие аргинина и глицина на стабильность.
Фиг. 26 представляет собой диаграмму модели РЬ8 С, демонстрирующую действие маннита и Р8 80 на стабильность.
Фиг. 27 представляет собой диаграмму модели РЬ8 С, демонстрирующую действие Р8 80 и ЫаС1 на стабильность.
Фиг. 28 представляет собой диаграмму модели РЬ8 С, демонстрирующую действие рН и концентрации белка на стабильность.
Подробное описание изобретения
Далее подробно описаны различные варианты осуществления изобретения. Как используют в описании и на всем протяжении формулы изобретения, если из контекста явно не следует иначе, значение форм единственного числа включает указание на множественное число. Так же, как используют в описании и на всем протяжении формулы изобретения, если из контекста явно не следует иначе, значение "в" включает "в" и "на". Кроме того, ниже конкретно определены некоторые термины, используемые в описании.
Определения
Термины, используемые в настоящем описании, как правило, имеют их обычные для данной области значения в пределах контекста изобретения и в конкретном контекста, где используют каждый термин. Ниже, или в другом месте описания, определены некоторые термины, которые используют для описания изобретения, для предоставления практику дополнительного руководства в отношении описания изобретения. Приведены синонимы некоторых терминов. Изложение одного или нескольких синонимов не исключает использование других синонимов. Использование примеров в любом месте настоящего описания, включая примеры любых терминов, описываемых в настоящем документе, является исключительно иллюстративным и никоим образом не ограничивает объем и значение изобретения или любого иллюстрируемого объекта. Изобретение не ограничено различными вариантами осуществления, приведенными в настоящем описании.
Если не определено иначе, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют то же значение, которое обычно понимает специалист в области, к которой принадлежит изобретение. В случае конфликта руководствоваться следует настоящим документом, включая определения.
"Приблизительно", как правило, означает в пределах 20 процентов, в пределах 10 процентов, в пределах 5, 4, 3, 2 или 1 процента от приведенного значения или диапазона. Приведенные числовые значения являются приблизительными, что означает, что термин "приблизительно" можно получать, если он не указан явно.
Термин "адалимумаб" является синонимом активному фармацевтическому ингредиенту в хумире®, а также белком, рассматриваемым или подразумеваемым его биоаналогичными или биоулучшенными вариантами. Адалимумаб представляет собой рекомбинантное моноклональное антитело 1§С1 человека, специфичное к ΤΝΕ человека. Адалимумаб также известен как Ό2Ε7. Адалимумаб содержит две легкие цепи с молекулярной массой приблизительно 24 килодальтон (кДа) каждая и две 1§С1 тяжелые цепи с молекулярной массой приблизительно 49 кДа каждая. Каждая легкая цепь состоит из 214 аминокислотных остатков, а каждая тяжелая цепь состоит из 451 аминокислотного остатка. Таким образом, адалимумаб состоит из 1330 аминокислот и его общая молекулярная масса составляет приблизительно 148 кДа. Термин адалимумаб также предназначен для включения так называемых биоаналогичных или биоулучшенных вариантов белка адалимумаба, используемых в коммерчески доступной хумире®. Например, вариант коммерческой хумиры® может быть приемлем для ΡΌΑ, когда он оказывает по существу такое же фармакологическое действие, как коммерчески доступная хумира®, даже если он может демонстрировать определенные физические свойства, такие как профиль гликозилирования, которые могут быть, если не идентичными хумире®, то сходными с ними.
Для целей настоящей заявки, термин "адалимумаб" также включает адалимумаб с незначительными
- 5 029215
модификациями в структуре аминокислот (включая делеции, введения и/или замены аминокислот) или в свойствах гликозилирования, которые значимо не влияют на функцию полипептида. Термин "адалимумаб" включает все формы и составы хумиры®, включая в качестве неограничивающих примеров, концентрированные составы, инъецируемые готовые к применению составы; составы, восстанавливаемые водой, спиртом и/или другими ингредиентами, и другие.
Как используют в настоящем документе, термин "ΤΝΡα человека" (который можно сокращать как ΙιΤΝΡα или просто ΗΤΝΡ) предназначен для обозначения цитокина человек, который существует в виде секретируемой формы массой 17 кДа и мембраноассоциированной формы массой 26 кДа, биологически активная форма которого состоит из тримера нековалентно связанных молекул массой 17 кДа. Структура ΜΝΡα дополнительно описана, например, в Реишса, Ό., е! а1. (1984) ΝαΙιιΐΌ 312:724-729; Όανίδ, 1. М., е! а1. (1987) ВюсЬет18йу 26:1322-1326 и 1опе8, Ε. Υ., е! а1. (1989) ΝαΙιιΐΌ 338:225-228. Термин ΤΝΡα человека предназначен для включения рекомбинантного ΤΝΡα человека (ΛΊΝΕα), который можно получать стандартными способами рекомбинантной экспрессии или приобретать коммерчески (К & Ό §у81ет8, каталожный № 210-ТА, МшпеароНк, Мшп.).
Как используют в настоящем документе, термин "антитело" относится к молекулам иммуноглобулином, состоящим из четырех полипептидных цепей, двух тяжелых (Н) цепей и двух легких (Ь) цепей, соединенных между собой внутренними дисульфидными связями. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельной области тяжелой цепи (сокращаемой в настоящем документе как НСУК или УН) и константной области тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи состоит из трех доменов, СН1, СН2 и СН3. Каждая легкая цепь состоит из вариабельной области легкой цепи (сокращаемой в настоящем документе как ЬСУК или УЪ) и константной области легкой цепи. Константная область легкой цепи состоит из одного домена, СЬ. Области УН и УЪ можно дополнительно разделять на области гипервариабельности, обозначаемые определяющими комплементарность областями (СОК), чередуемые областями, которые являются более консервативными, называемые каркасными областями (РК). Каждая УН и УЪ состоит из трех СОК и четырех РК, расположенными от Ν-конца к С-концу в следующем порядке: РК1, СОК1, РК2, СОК2, РК3, СОК3, РК4. В одном из вариантов осуществления изобретения состав содержит антитело с последовательностями СОК1, СОК2 и СОК3, подобными тем, что описаны в патентах США №№ 6090382; 6258562 и 8216583.
Антитело или его антигенсвязывающая часть может являться частью более крупной молекулы иммуноадгезии, формируемой ковалентными или нековалентными ассоциациями антитела или части антитела с одним или несколькими другими белками или пептидами. Примеры таких молекул иммуноадгезии включают использование области сердцевины стрептавидина с получением тетрамерной молекулы 5сР\' (Клрпуапо\'. δ. М., е! а1. (1995) Нитап АпйЬоФек ап4 НуЬпбопт 6:93-101) и использование остатка цистеина, маркерного пептида и С-концевой полигистидиновой метки с получением бивалетных и биотинилированных молекул 8сΡν (Κ^р^^уаηоν, δ. М., е! а1. (1994) Мо1. 1ттипо1. 31:1047-1058). Из целых антител общепринятыми способами, такими как расщепление папаином или пепсином, можно получать части антител, такие как фрагменты РаЬ и Р(аЬ')2 целых антител, соответственно. Кроме того, антитела, части антител и молекулы иммуноадгезии можно получать стандартными технологиями рекомбинантных ДНК, как описано в настоящем документе.
Как используют в настоящем документе, термин "выделенное антитело" относится к антителу, которое по существу не содержит других антител с другими антигенными специфичностями (например, выделенное антитело, которое специфически связывается с ΡΤΝΡα, по существу не содержит антител, которые специфически связываются с антигенами, отличными от ΙιΤΝΡα). Однако выделенное антитело, которое специфически связывается с ΙιΤΝΡα может обладать перекрестной реактивностью с другими антигенами, такими как молекулы ΤΝΡα других видов. Кроме того, выделенное антитело может по существу не содержать других клеточных материалов и/или химических веществ.
Термин "глицин" относится к аминокислоте, кодонами для которой являются ΟΟΤ, ООС, ООА и ООО.
Термин "аргинин" относится к α-аминокислоте, кодонами для которой являются ОСИ, ССС, ССА и
ССО.
Термин "аланин" относится к аминокислоте, кодонами для которой являются ОСУ ОСС, ОСА и
ОСО.
Термин "метионин" относится к аминокислоте, кодоном для которой является АΤΟ.
Термин "глутамат" относится к аминокислоте, кодонами для которой являются ОАА и ОАО.
Термин "сахар" относится к моносахаридам, дисахариды и полисахариды.
Примеры сахаров в качестве неограничивающих примеров включают сахарозу, глюкозу, декстрозу и другие.
Термин "полиол" относится к спирту, содержащему несколько гидроксильных групп. Примеры полиолов в качестве неограничивающих примеров включают маннит, сорбит и другие.
Термин "ион металла" относится к атому металла с общим положительным или отрицательным электрическим зарядом. Для целей настоящей заявки термин "ион металла" также включает источники
- 6 029215
ионов металлов, включая в качестве неограничивающих примеров соли металлов.
Термин "длительное хранение" или "долговременная стабильность" следует понимать, как обозначение того, что фармацевтическая композиция может храниться в течение трех месяцев или более, в течение шести месяцев или более и предпочтительно в течение одного года или более, наиболее предпочтительно, с минимальным сроком хранения в стабильном состоянии по меньшей мере два года. В общем, термины "длительное хранение" и "долговременная стабильность" дополнительно включают продолжительности хранения в стабильном состоянии, которые по меньшей мере сравнимы или лучше, чем срок хранение в стабильном состоянии, как правило, необходимый для доступных в настоящее время коммерческих составов адалимумаба без потерь в стабильности, которые могут сделать состав непригодным для определенного для него фармацевтического применения. Длительное хранение также следует понимать, как обозначение того, что фармацевтическую композицию хранят или в виде жидкости при 2-8°С, или замораживают, например, при -20°С или более. Также предусмотрено, что композицию можно замораживать и размораживать более одного раза.
Термин "стабильное состояние" в отношении длительного хранения следует понимать, как означающий, что адалимумаб, содержащийся в фармацевтических композициях, теряет не более 20%, или более предпочтительно 15%, или даже более предпочтительно 10%, а наиболее предпочтительно 5% своей активности относительно активности композиции на начало хранения.
Термин "по существу не содержит" означает, что вещество или не присутствует, или присутствуют только минимальные, следовые количества вещества, которые не оказывают никакого существенного влияния свойства композиции. Если сделано оказание на отсутствие какого-либо количества вещества, это следует понимать как "отсутствие детектируемого количества".
Термин "млекопитающее" в качестве неограничивающих примеров включает человека.
Термин "фармацевтически приемлемый носитель" относится к нетоксическому твердому, полутвердому или жидкому наполнителю, разбавителю, инкапсулирующему веществу, вспомогательному для состава средству или эксципиенту любого общепринятого типа. Фармацевтически приемлемый носитель является нетоксическим для реципиента в применяемых дозах и концентрациях и совместим с другими ингредиентами состава.
Термин "композиция" относится к смеси, которая, как правило, содержит носитель, такой как фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент, который общепринят в данной области и подходит для введения индивидууму с терапевтическими, диагностическими или профилактическими целями. Он может включать культуру клеток, в которой в клетках или в среде для культивирования присутствует полипептид или полинуклеотид. Например, композиции для перорального введения могут формировать растворы, суспензии, таблетки, пилюли, капсулы, составы с длительным высвобождением, средства для полоскания рта или порошки.
Термины "фармацевтическая композиция" и "состав" используют взаимозаменяемо.
Термин "лечение" относится к любому введению или применению лекарственных средств при заболевании у млекопитающего и включает подавление заболевания, задержку его развития, смягчение заболевания, например, вызывая ремиссию или восстанавливая или исправляя потерянную, недостающую или дефектную функцию; или стимулируя неэффективный процесс. Термин включает получение желаемого фармакологического и/или физиологического действия, включая любое лечение патологического состояния или нарушения у млекопитающего. Действие может быть профилактическим в терминах полного или частичного предотвращения нарушения или его симптомов и/или может быть терапевтическим в терминах частичного или полного лечения нарушения и/или побочного действия, свойственного нарушению. Оно включает (1) предотвращение проявления или рецидива нарушения у индивидуума, который может быть предрасположен к нарушению, но у которого еще нет симптомов, (2) подавление нарушения, такое как задержка его развития, (3) остановка или прекращение нарушения или по меньшей мере ассоциированных с ним симптомов так, что хозяин больше не страдает от нарушения или его симптомов, например, вызывая ремиссию нарушения или его симптомов, например, восстанавливая или исправляя потерянную, недостающую или дефектную функцию или стимулируя неэффективный процесс, или (4) смягчение, облегчение или улучшение состояния при нарушении или ассоциированных с ним симптомах, когда улучшение состояния используют в широком смысле для обозначения по меньшей мере уменьшения величины параметра, такого как воспаление, боль и/или размер опухоли.
Термин "заболевание" относится к любому состоянию, инфекции, нарушению или синдрому, которые требуют медицинского вмешательства или для которых медицинское вмешательство желательно. Такое медицинское вмешательство может включать лечение, диагностику и/или профилактику.
Термин "терапевтически эффективное количество" относится к количеству, при введении которого живому существу достигается желаемое действие на живое существо. Например, эффективное количество полипептида по изобретению для введения живому существу представляет собой количество, которое предотвращает и/или лечит опосредуемое интегрином ανβ3 заболевание. Точное количество зависит от цели лечения и его известными способами определяет специалист в данной области. Как известно в данной области, могут понадобиться поправки на системное введение по сравнению с локальной доставкой,
- 7 029215
возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, диету, время введения, взаимодействие лекарственных средств и тяжесть состояния, и их определяют специалисты в данной области посредством общепринятого экспериментирования.
Варианты осуществления изобретения
Когда фармацевтические композиции, содержащие адалимумаб (хумиру®), включая водные и лиофилизированные составы адалимумаба, хранят на долговременной основе, активность адалимумаба может быть потеряна или снижаться вследствие агрегации и/или разрушения. Таким образом, настоящее изобретение относится к водным составам адалимумаба, которые обеспечивают длительное хранение адалимумаба в стабильном состоянии так, что адалимумаб стабилен в течение хранения в жидком или замороженном состояниях. Предоставляемые составы не требуют никаких дополнительных этапов, таких как разведение.
Ниже более подробно описаны многочисленные варианты осуществления настоящего изобретения. Адалимумаб
Все композиции по настоящему изобретению содержат адалимумаб. Как описано в разделе "Уровень техники, предшествующий изобретению" настоящей заявки, адалимумаб представляет собой рекомбинантное моноклональное антитело 1§О1 человека, специфичное к фактору некроза опухоли (ΤΝΡ) человека. Это антитело также известно как Ό2Ε7. Адалимумаб состоит из 1330 аминокислот, и его молекулярная масса составляет приблизительно 148 килодальтон. Адалимумаб описан и запатентован в патенте США № 6090382. Термин "адалимумаб" также предназначен для обозначения так называемых "биоаналогичных" и "биоулучшенных" версий активного белка адалимумаба, представленного в коммерчески доступной хумире®.
Адалимумаб, подходящий для хранения в фармацевтической композиции по настоящему изобретению, можно получать стандартными известными в данной области способами. Например, в патентах США 6090382 и 8216583 описаны различные способы, которые может использовать специалист в данной области для получения белка адалимумаба для применения в составах по настоящему изобретению. Эти способы включены в настоящий документ в качестве ссылки. Например, адалимумаб можно получать посредством рекомбинантной экспрессии генов легких и тяжелых цепей иммуноглобулина в клеткехозяине.
Очистку экспрессированного адалимумаба можно проводить любым стандартным способом. Когда адалимумаб получают внутриклеточно, дебрис из макрочастиц удаляют, например, посредством центрифугирования или ультрафильтрации. Когда адалимумаб секретируют в среду, супернатанты из таких экспрессирующих систем сначала можно концентрировать с использованием стандартных фильтров для концентрации полипептидов. Также можно добавлять ингибиторы протеаз для ингибирования протеолиза и можно включать антибиотики для предотвращения роста микроорганизмов.
Адалимумаб можно очищать, например, с использованием хроматографии на гидроксиапатите, электрофореза в геле, диализа и аффинной хроматографии и любой комбинации известных или еще неоткрытых способов, включая в качестве неограничивающих примеров хроматографию с белком А, фракционирование на ионообменной колонке, осаждение этанолом, ВЭЖХ с обращенной фазой, хроматографию на диоксиде кремния, хроматографию на гепарине δΕΡΗΆΚΘδΕΤ®, хроматографию на анионной или катионообменной смоле (такой как колонка с полиаспарагиновой кислотой), хроматофокусирование, δΌδ-ΡΛΟΕ и осаждение сульфатом аммония.
I. Составы адалимумаба с полиолом и/или поверхностно-активным веществом, но без цитратного/фосфатного буферов.
В первом варианте осуществления изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб; стабилизатор, содержащий по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из полиола и поверхностно-активного вещества; и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 4 до приблизительно 8 и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанный буфер не содержит комбинации цитрата и фосфата. В этом варианте осуществления стабилизатор предпочтительно содержит и полиол, и поверхностно-активное вещество. Фармацевтическая композиция может содержать один или любую комбинацию двух или более буферов при условии, что они не содержат цитрат и фосфат. Поверхностно-активное вещество может представлять собой любое фармацевтически приемлемое поверхностно-активное вещество, предпочтительно полисорбаты (например, полисорбат 80) или полоксамеры (например, плюроник Р-68).
II. Составы адалимумаба с использованием одной буферной системы.
Во втором варианте осуществления, использования одной буферной системы, изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, полиол, поверхностноактивное вещество и буферную систему, содержащую одно буферное средство, где указанное одно буферное средство выбрано из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата или малеата, но не включает комбинации указанного выше; где рН состава составляет приблизительно от 4 до 8 и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6. Для применения в качестве единственного буферного
- 8 029215
средства особенно предпочтительными являются гистидин и сукцинат. Неожиданно обнаружено, что композиции адалимумаба, которые содержат только один буфер (в противоположность двум или более буферам), являются более стабильными, чем композиции адалимумаба, содержащие цитратный буфер и фосфатный буфер. В варианте осуществления с одним буфером адалимумаб может присутствовать в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, более предпочтительно приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл и даже более предпочтительно приблизительно от 30 до приблизительно 50 мг/мл. Буфер присутствует в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ. рН композиций составляет приблизительно от 5 и приблизительно 6. Композиции с одним буфером по изобретению могут дополнительно содержать стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла. Аминокислота выбрана из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина, наиболее предпочтительно глицина, аргинина и метионина. Соль выбрана из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия. Ион металла выбран из группы, состоящей из цинка, магния и кальция. Композиции по изобретению могут дополнительно содержать поверхностно-активное вещество. Поверхностно-активное вещество представляет собой поверхностно-активное вещество, являющееся полисорбатом, или поверхностно-активное вещество, являющееся полоксамером. Поверхностно-активные вещества, являющиеся полисорбатами, включают полисорбат 80, полисорбат 40 и полисорбат 20. Предпочтительное поверхностно-активное вещество, являющееся полисорбатом, представляет собой полисорбат 80. Поверхностноактивные вещества, являющиеся полоксамерами, включают полоксамер 188 (также доступный коммерчески как плюроник Р-68). Наиболее предпочтительно, поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 80. Единственная буферная композиция может дополнительно содержать полиол. Предпочтительно, полиол представляет собой сахарный спирт и, даже более предпочтительно, сахарный спирт представляет собой маннит, сорбит или трегалозу. Композиция адалимумаба с одним буфером также может содержать сахар, предпочтительно сахарозу, глюкозу или декстрозу.
В одном из вариантов осуществления состава адалимумаба с одним буфером изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до 50 мкМ и сукцинат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит никаких других буферов.
В другом варианте осуществления состава адалимумаба с одним буфером изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до 50 мкМ и гистидин в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит никаких других буферов.
В дополнительном варианте осуществления состава адалимумаба с одним буфером изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до 50 мкМ и любой из тартрата, малеата или ацетата в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит никаких других буферов.
III. Составы адалимумаба, не содержащие буфера.
В третьем варианте осуществления изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, стабилизатор, содержащий по меньшей мере одно соединение, выбранного из полиола и поверхностно-активного вещества, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 4 до приблизительно 8 и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция по существу не содержит буфера. Следует понимать, что термин "не содержит буфера" допускает включение свойственного самому белку буферирующего эффекта. В не содержащем буфера составе также могут присутствовать стабилизаторы, указанные выше (например, глицин, аргинин и их сочетания).
IV. Составы адалимумаба, не содержащие поверхностно-активного вещества.
В четвертом варианте осуществления изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, полиол и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 4 до приблизительно 8 и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция не содержит или по существу не содержит поверхностно-активного вещества. Предпочтительно, композиция (ί) не содержит комбинации буферов цитрата и фосфата; и (ίί) буфер содержит по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из гистидина и сукцината; и (ίίί) полиол не является маннитом в концентрации менее чем приблизительно 150 мМ, но вместо этого выбран из группы, состоящей из маннита в концентрации, превышающей приблизительно 150 мМ, сорбита и трегалозы.
- 9 029215
V. Составы адалимумаба, не содержащие полиола.
В пятом варианте осуществления изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, поверхностно-активное вещество и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 4 до приблизительно 8 и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция по существу не содержит полиола. Предпочтительно, композиция (ί) не содержит комбинации буферов цитрата и фосфата; и (ίί) буфер содержит по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из гистидина и сукцината.
Дополнительные стабилизаторы, пригодные в вариантах осуществления Ι-ν.
Необязательно, в каждом из пяти вариантов осуществления приведенных выше, композиция может дополнительно содержать стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла. Аминокислотный стабилизатор можно выбирать из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина. Солевой стабилизатор можно выбирать из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия. Стабилизатор-ион металла можно выбирать из группы, состоящей из цинка, магния и кальция. Предпочтительно, составы адалимумаба, содержащие стабилизаторы, указанные выше, также не содержат буферных систем, в которых фосфатный буфер и цитратный буфер присутствуют в комбинации. Наиболее предпочтительно (ί) необязательный дополнительный стабилизатор, присутствующий в этом варианте осуществления, не является хлоридом натрия и содержит по меньшей мере один или оба из аргинина и глицина; (ίί) буфер, когда присутствует, не содержит комбинации цитрата и фосфата, но вместо этого представляет собой по меньшей мере один из гистидина и сукцината; и (ίίί) стабилизатор, когда он содержит полиол, не является маннитом, за исключением количеств, больших чем приблизительно 150 мМ, а также может включать трегалозу и сорбит. Предпочтительно количество маннита является большим, чем приблизительно 150 мМ, а наиболее предпочтительно, большим чем приблизительно 200 мМ.
VI. Составы адалимумаба с заменой поверхностно-активного вещества и полиола на другие стабилизаторы.
Кроме того выявлено, что удовлетворительной стабилизации можно достигать, когда вместо полиола и поверхностно-активного вещества используют стабилизаторы, указанные выше, таким образом, в шестом варианте осуществления изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, необязательно буфер, стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, ЭДТА и иона металла, и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 4 до приблизительно 8 и предпочтительно приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция не содержит или по существу не содержит полиола и поверхностно-активного вещества. Когда в этом варианте осуществления присутствует буфер особенно предпочтительно, чтобы (ί) буфер не содержал комбинации цитрата и фосфата; (ίί) буфер был выбран из группы, состоящей из гистидина и сукцината; и (ίίί) стабилизатор не содержал хлорида натрия, но вместо этого содержал по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из аргинина и глицина. Также предпочтительно, чтобы буфер не содержал или по существу не содержал цитратного буфера, так как авторы обнаружили, что, как правило, он является более слабым в отношении вклада в стабильность, чем другие буферы, такие как гистидин и сукцинат.
В каждом из вариантов осуществления, указанных выше, необязательно может присутствовать по меньшей мере одно из следующих предпочтительных условий (если не указано как необходимое): (ί) буфер предпочтительно не содержит комбинации цитрата и фосфата или не содержит или по существу не содержит цитратного буфера; (ίί) буфер предпочтительно содержит по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из гистидина и сукцината; и (ίίί) стабилизатор предпочтительно не содержит хлорида натрия или если присутствует, его присутствие поддерживают на уровнях менее чем приблизительно 100 мМ; (ΐν) стабилизатор содержит по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из аргинина и глицина, включая их сочетания; и (ν) полиол предпочтительно не является маннитом (за исключением случаев, когда маннит присутствует в количествах, больших чем приблизительно 150 мМ и предпочтительно больших чем приблизительно 200 мМ), но может содержать сорбит и трегалозу. При использовании для стабилизации полиолов в настоящей работе выявлено, что маннит является дестабилизирующим по сравнению с сорбитом и трегалозой, за исключением случаев, когда маннит присутствует в количествах, как правило, превышающих приблизительно количества от 150 до 200 мМ. При использовании других стабилизаторов в настоящей работе выявлено, что хлорид натрия является дестабилизирующим по сравнению с аргинином или глицином, но авторы наблюдали некоторую стабилизацию, когда уровни хлорида натрия поддерживают на уровнях менее чем приблизительно 100 мМ и предпочтительно менее чем приблизительно 75 мМ.
Предпочтительно, адалимумаб присутствует в композиции по настоящему изобретению в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, более предпочтительно приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл и даже более предпочтительно приблизительно от 30 до приблизительно 50 мг/мл.
Буфер, если присутствует, присутствует в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизитель- 10 029215
но 50 мМ.
Поверхностно-активное вещество, если присутствует, предпочтительно представляет собой полисорбат (Р8). Даже в более предпочтительном варианте осуществления полисорбат представляет собой полисорбат 80 (Р§ 80). Также подходят поверхностно-активные вещества, являющиеся полоксамерами, (например, плюроник® Р-68).
Полиол, если присутствует, представляет собой сахарный спирт. Даже в более предпочтительном варианте осуществления сахарный спирт выбран из группы, состоящей из маннита, сорбита и трегалозы, а наиболее предпочтительно - сорбита и трегалозы.
Предпочтительно, полиол находится в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10%, более предпочтительно, приблизительно от 2 до приблизительно 6% и даже более предпочтительно приблизительно от 3 до 5%, где указанные значения представляют собой массу от объема (мас./об.) общей композиции.
Стабилизатор, когда присутствует, можно выбирать из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла. Аминокислоту можно выбирать из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина. Соль можно выбирать из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия. Ион металла можно выбирать из группы, состоящей из цинка, магния и кальция. Особенно предпочтительными стабилизаторами являются глицин и аргинин.
Цинк, магний и кальций, когда присутствуют для стабилизации, могут находиться в концентрации приблизительно от 1 мМ до приблизительно 100 мМ, а более предпочтительно приблизительно от 1 до приблизительно 10 мМ.
Глицин или аргинин или их сочетания, если присутствует для стабилизации, находятся в общей концентрации приблизительно до 300 мМ, а предпочтительно приблизительно - от 150 до 300 мМ.
Метионин, если присутствует для стабилизации, присутствует в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10 мг/мл, более предпочтительно приблизительно от 1 мг/мл до приблизительно 5 мг/мл.
Хлорид натрия, если присутствует для стабилизации, находятся в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ, более предпочтительно - приблизительно от 20 до приблизительно 140 мМ, и даже более предпочтительно - менее чем приблизительно 100 мМ.
Сульфат натрия, если присутствует для стабилизации, находятся в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ, более предпочтительно - приблизительно от 20 до приблизительно 12 0 мМ, и даже более предпочтительно приблизительно от 60 до приблизительно 100 мМ.
ЭДТА, если присутствует для стабилизации, присутствует в концентрации приблизительно от 0,01% до приблизительно 0,05%, более предпочтительно - приблизительно от 0,05% до приблизительно 0,25%, и даже более предпочтительно приблизительно от 0,08% до приблизительно 0,2%.
Предпочтительно, рН композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5; и даже более предпочтительно составляет приблизительно от 5,2 до 5,4.
В примере вариантов осуществления I и II, приведенных выше, изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, сорбит или трегалозу в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об., полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до 50 мкМ и по меньшей мере один из сукцината, гистидина, фосфата, тартрата, малеата или цитратного буфера в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и предоставляемая указанная композиция не содержит или по существу не содержит комбинации цитратного/фосфатного буферов. Кроме того, авторы оценили цитрат как худший из буферов, и предпочтительно избегают его, хотя он все еще находится в объеме изобретения для формулирования стабильных составов адалимумаба, которые содержат цитратный буфер, если отсутствует их сочетание с фосфатом.
В примере варианта осуществления IV изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, сорбит или трегалозу в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об. и по меньшей мере один из сукцината, гистидина, фосфата, тартрата, малеата или цитратного буфера в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит поверхностноактивного вещества и, необязательно и предпочтительно, не содержит или по существу не содержит комбинации цитратного/фосфатного буферов.
В примере варианта осуществления VI изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, глицин в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 200 мМ, и по меньшей мере один из сукцината, гистидина, фосфата, тартрата, малеата или цитратного буфера в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция не содержит или по существу не содержит полиол; предпочтительно, но необязательно присутствует поверхностно-активное вещество (напри- 11 029215
мер, Р88); и композиция, необязательно и предпочтительно, не содержит или по существу не содержит комбинации цитратного/фосфатного буферов.
В дополнительном примере варианта осуществления VI изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, аргинин или глицин в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 250 мМ и по меньшей мере один из сукцината, гистидина, фосфата, тартрата, малеата или цитратного буфера в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит полиола. Предпочтительно, но необязательно присутствует поверхностно-активное вещество (например, Р880), и композиция, необязательно и предпочтительно, не содержит или по существу не содержит комбинации цитратного/фосфатного буферов.
В дополнительном примере варианта осуществления VI изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, хлорид натрия в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ и по меньшей мере один из сукцината, гистидина, фосфата, тартрата, малеата или цитратного буфера в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция не содержит или по существу не содержит полиола. Предпочтительно, но необязательно присутствует поверхностноактивное вещество (например, Р880); и композиция, необязательно и предпочтительно, не содержит или по существу не содержит комбинации цитратного/фосфатного буферов.
В примере варианта осуществления V изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, хлорид натрия в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до 50 мкМ и по меньшей мере один из сукцината, гистидина, фосфата, тартрата, малеата или цитратного буфера в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция не содержит или по существу не содержит полиола и, необязательно, и предпочтительно, не содержит или по существу не содержит цитратного/фосфатного буферов.
В примере вариантов осуществления I и II с дополнительной стабилизацией, изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 50 мкМ, сорбит или трегалозу в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10% масс./об., ЭДТА в концентрации приблизительно от 0,01% до приблизительно 0,5% и по меньшей мере один из сукцината, гистидина, фосфата, тартрата, малеата или цитрата в качестве единственного буфера в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где композиция не содержит или по существу не содержит комбинации цитратного/фосфатного буферов.
В дополнительном примере вариантов осуществления I и II с дополнительной стабилизацией, изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 50 мкМ, сорбит или трегалозу в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10% мас./об., метионин в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10 мг/мл и по меньшей мере один из сукцината, гистидина, фосфата, тартрата, малеата или цитрата в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, где композиция не содержит или по существу не содержит никакой комбинации цитратного/фосфатного буферов.
В дополнительном примере вариантов осуществления I и II с дополнительной стабилизацией аминокислотами, изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 50 мкМ, маннит, сорбит или трегалозу (предпочтительно сорбит) в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10% масс./об. и аминокислоту, которая предпочтительно представляет собой одну, но не обе из (а) аргинина в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 250 мг/мл и (Ь) глицина в концентрации приблизительно от 20 до 200 мг/мл и гистидиновый буфер или сукцинатный буфер в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5; и где композиция не содержит или по существу не содержит никакой комбинации цитратного/фосфатного буферов.
В дополнительном примере варианта осуществления IV с дополнительной стабилизацией аминокислотами, изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 50 мкМ, аргинин в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 250 мг/мл, глицин в концентрации приблизительно от 20 до 200 мг/мл и гистидино- 12 029215
вый буфер или сукцинатный буфер в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и она не содержит или по существу не содержит полиола; и, необязательно, где композиция предпочтительно не содержит никакой комбинации цитратного/фосфатного буферов.
Множество вариантов осуществления составов адалимумаба по настоящему изобретению получали в восьми раздельных блоках экспериментов, указываемых в настоящем документе как блоки от "блока А" до "блока Н" . Каждый блок содержит от 12 до 16 различных составов, которые подвергали форсированным условиям хранения, 1 неделя при 40°С и 2 недели при 25°С. Для каждого момента времени измеряли химическую и физическую стабильность белка адалимумаба посредством §ЕС, ОФ, УФ-излучения, рН, СЕ-1ЕР и СЕ-δΌδ.
Материалы и методы
1. Оборудование, используемое в исследованиях составов
Оборудование Пр оиз в о дител ь Модель Серийный номер
Весы Загкоггиз СРА1243 23350022
рН-метр Оепчег 1пзкгитепк Мос1е1 250 Е25006В100
Источник УФизлучения Сагу Βίο 100 ЕБ07Ю3025
ВЭЖХ ЭДопех 3 и1к±таке 3000 ирье 8047439
ВЭЖХ ϋίοηβχ 2 (Лкттаке 3000 ирье 8036991
СЕ Весктап Весктап Р/АСЕ 455436
СЕ АдИепк Ад11епк ЗРСЕ 1600А 3546С00736
Встряхивателькачалка ЬаЬпеЪ ОгЫк Р4 8091840
2. Химические вещества и материалы, используемые в исследованиях составов
Химические вещества/материалы Производитель Чистота Номер партии:
Цитрат Ма1Ипскго<Зк АС 8 Н28475
Фосфат ГтзЬег ЕСС 103372
ЕПзНег АСЗ 113670
Сукцинат Зрескгит Реагент ΖΜ0462
Гистидин Зрескгит изр ХУ0239
Зрескгит из? ζσθ2ΐ6
Тартрат Зрескгит гсс 1ВС0152
Малеат ТС1 >99% 206-733-1
Маннит ΒΌΗ изр 57910
Глицин Зрескгит ЕСС ΥΜ3312
Зрескгит ЕСС 1Β0Ό243
Гз-зЬег Чистота для применения в тканях 070082
Аргинин Зрескгит Ό3Ρ 2АК0233
Зрескгит изр 1СВ0771
Хлорид натрия МаШпскгобб АСЗ 052619
Масгоп изр 26434
Полисорбат 80 3 ί дта-А1 <1г 1 сЬ Низший пероксид 028К5309
Сорбит Зрескгит ΝΕ 1АН0521
Трегалоза Зрескгит Ν/Α 1АЕ0739
Ацетат МаШпскгосИ ЕСС Н31613
ЭДТА Зхдта 98,5% 057К00071
Метионин Зрескгит изр ΖΕ0377
- 13 029215
Е—68 Згдта Культура клеток 057К00331
Полисорбат 20 ЗресДгит ΝΕ 1АЕ0832
Додецилсульфат натрия ЕГ1ика АСЗ 1344034
Тг15 основание ЕьзЬег АСЗ 361374
2-меркаптоэтанол ПзНег Электрофорез 107667
Материалы/Реагенты Номер партии Поставщик
ЗЫбе-А-Ьугег с порогом 7К 66373 ТЬегто
Блоки для минидиализа 69550 ТЬегто
Фильтр Μί11βχΦ-(3ν 0,22 мкм 3Ε5ν0045Ε МИИроге
Флаконы 1 мл 4500050375 ЗСНОТТ
Раствор полимеров для геля с1ЕЕ 477497 Весктап Сои17ег
Набор маркеров ρί А58481 Весктап Сои17ег
Амфолит РЪагта1у7е 3-10 17-0456-01 СЕ Неа1РЬсаге
Капилляр из плавленого кварца (внутренний диаметр 50 мкм) Τ3Ρ050375 Ро1ут1сго
Буфер для геля 5ϋ3-ΜΉ А10663 Весктап
Внутренний стандарт 10 кДа А26487 Весктап
3. Колонки ВЭЖХ, используемые в исследованиях составов
Колонка Компания Номер партии Партия
РогозЬеН 3008В-С8,2,1*75 мм, 5 мкм АдИепР 660750-906 ϋ32Ν003083
РогозНеИ 3003В-С8,2,1*75 мм, 5 мкм АдИеп5 660750-906 изгиоозо73
ΑΟΟυΐΤΥ иръс ВЕН200 ЗЕС, колонка 1,7 мкм, 4,6*150 мм ТСаЪегз 136005225 138123331
ΑϋςυΐΤΥ ирье ВЕН200 ЗЕС, колонка 1,7 мкм, 4,6*150 мм ИаЪегв 186005225 01471130951
Обработка хумиры®.
В экспериментах блока А использовали адалимумаб, присутствующий в коммерчески доступной хумире®. Материал хумиры® подвергали диализу следующим образом: 100 мкл хумиры® помещали в блоки для минидиализа с МХУС'О 3,5 и подвергали диализу в 1 л буфера состава в течение 24 ч при температурах от 4 до 8°С. У нескольких образцов наблюдали небольшое увеличение объема вследствие диализа, но никогда до такой степени, чтобы концентрация полисорбата 80 падала ниже СМС (критической концентрации мицеллообразования).
Концентрацию белка в каждом составе измеряли посредством спектроскопии оптической плотности в УФ-излучении с использованием рассчитанной экспериментальной молярного удельного поглощения на основе опубликованной концентрации хумиры®, 50 мг/мл. Для ряда составов концентрацию белка корректировали с использованием центрифужного концентратора. Образец помещали в центрифужный концентратор и центрифугировали при 14000 об/мин в течение периода от 30 до 60 с. Затем проверяли концентрацию белка с использованием УФ-излучения. После достижения планируемой концентрации приблизительно 50 мг/мл образцы фильтровали через 0,22 мкМ стерильный фильтр в стерильные флаконы в биобезопасном вытяжном шкафу. Затем образцы помещали для определения стабильности при 40°С на одну и две недели.
Обработка собственного белка адалимумаба.
В исследованиях составов, описываемых в настоящем документе, использовали собственный биоаналогичный адалимумабу белок, не содержащий полисорбата 80. Вещества подвергали диализу с использованием §Ше-А-Ьу/ег с М\УСО 7000 в различных буферах составов в течение 24 ч в диапазоне температур от 4 до 8°С. После диализа измеряли концентрацию белка посредством УФ-излучения и измеряли рН образцов. Планируемая концентрация образцов составляла 50±2,5 мг/мл, которую корректировали, если концентрация образца выходила за пределы указанного выше диапазона. У некоторых образцов наблюдали увеличение объема образца вследствие разбавления, что требовало увеличение кон- 14 029215
центрации белка. Для этих образцов концентрацию белка увеличивали с использованием центрифужных концентраторов, как правило, при 14000 об/мин в течение периода от 30 до 60 секунд. В ряде образцов доводили рН с использованием 1М ЫаОН или 1М НС1 с достижением планируемого рН 5,2.
После определения того, что представляющая интерес концентрация белка и рН образцов находятся в пределах экспериментальных параметров, образцы фильтровали через 0,22 мкМ стерильный фильтр в стерильные флаконы в биобезопасном вытяжном шкафу. Затем образцы помещали для определения стабильности при 40°С на одну неделю и 25°С на две недели.
Условия замораживания-размораживания.
Замороженные и размороженные образцы получали на сутки анализа для соответствия 1=0. Образцы замораживали при -80°С на срок от 3 до 7 мин. Затем замороженный образец размораживали при комнатной температуре до размораживания всего льда. Цикл замораживания и размораживания повторяли 5 раз для каждого образца.
Исследования перемешиванием.
Образцы агрегировали при 150 об/мин в течение 24 ч при 4°С на встряхивателе-качалке. Для каждого образца, который подвергали перемешиванию, получали контроль и затем помещали на встряхиватель-качалку.
Измерения рН.
рН каждого образца измеряли с использованием микро-рН-зонда. Перед началом анализа рН-зонд калибровали с тремя упорядоченными стандартами рН из РВНег. Значения рН образцов с определяемой стабильностью измеряли посредством перенесения 60 мкл каждого образца с определяемой стабильностью в 100 мкл пробирку для ПЦР. Затем в образец погружали микро-рН-зонд и записывали значение после его стабилизации.
Спектроскопия оптической плотности в УФ-излучении.
Для измерения концентрации белка в образцах использовали УФ-спектроскопию. Молярный коэффициент экстинкции при 280 нм для вещества в объеме составлял 1,6355 мг/мл, что определяли экспериментально. Концентрации белков всех составов для БВ-140 измеряли с использованием длины пути в ячейке 0,0096 см. Ниже представлены параметры анализа, используемые для БВ-140.
Диапазон сканирования: от 400 до 200 нм.
Среднее время (мин): 0,1.
Интервал получения данных (нм): 1.
Скорость сканирования (нм/мин): 600.
Число циклов: 5.
Способ эксклюзионной хроматографии (§ЕС).
Способ 8ЕС, используемый для анализа образцов БВ-140 с определяемой стабильностью, разработан в Ьсдасу ВюЭсбдп. Ниже приведено краткое описание параметров способа 8ЕС, используемых для анализа образцов БВ-140.
Параметры способа.
Информация о колонке: ЛСРШТУ ИРБС ВЕН200 §ЕС, колонка 1,7 мкм, 4,6x150 мм.
Буфер для анализа: 50 мМ фосфат, 250 мМ ЫаС1, рН 6,8.
Скорость потока: 0,3 мл/мин.
Температура колонки: 30°С.
Детекция: 280 нм.
Объем впрыска: 2 мкл.
Температура образца: приблизительно 5°С.
Способ ВЭЖХ с ОФ.
Выявлено, что способ ВЭЖХ с ОФ является индикатором стабильности и его использовали для анализа образцов БВ-140 с определяемой стабильностью. Ниже кратко описаны параметры способа с ОФ, используемые для анализа БВ-140.
Параметры способа.
Информация о колонке: Рого8Йе11 300§В-С8,2,1х75 мм, 5 мкм.
Подвижная фаза А: 98% (об./об.) Н2О/2% (об./об.) 1РА/0,1% (об./об.) ТРА.
Подвижная фаза В: 10% (об./об.) Н2О/70% (об./об.) 1РА/20% (об./об.) АСЫ /0,1% (об./об.) ТРА.
Скорость потока: 0,25 мл/мин.
Температура колонки: 80°С.
Детекция: 225 нм.
Объем впрыска: 1 мкл.
Температура образца: приблизительно 5°С.
Время пробега: 15 мин.
- 15 029215
Градиент:
Анализ СЕ-1ЕР.
Изоэлектрофокусирование в капилляре (с1ЕР) проводили, как описано в РА 800 и в руководстве по применению, опубликованном Весктап СоиДег. Более подробное описание можно найти в научной статье, опубликованной Маск е1 аР. Все анализы проводили с использованием системы Весктап СоиДег Р/АСЕ М^^ (Весктап СоиИег, 1пс.; Вгеа, СА), эксплуатируемой при температуре окружающей среды с нейтральным капилляром с общей длиной 30 см (20 см эффективной). Нейтральный капилляр получали посредством иммобилизации поли(акриламида) на стенке капилляра способом, описанным Оао е1 а1.2 Образцы для с1ЕР получали, смешивая представляющий интерес белок с 0,25 мг/мл со смесью 3М мочевины-геля для с1ЕР, содержащего амфолит, катодный стабилизатор, анодный стабилизатор и маркеры р1. Образец под давлением 65,5 кПа инжектировали в капилляр в течение 4,1 мин, после чего его фокусировали, прилагая между анализируемым веществом и катодной жидкостью напряжение 25 кВ в течение 15 мин. После этого этапа проводили химическую мобилизацию при 30 кВ между анализируемым веществом и химическим мобилизатором в течение 30 мин. Маркеры р1 и представляющий интерес белок детектировали с использованием оптической плотности при 280 нм в течение этапа мобилизации, р1 белка рассчитывали на основе полученного уравнения регрессии р1 в зависимости от момента первого пика, получаемых с использованием стандартов р1.
Анализ СЕ-δΩδ.
Анализ посредством СЕ-δΩδ проводили в восстановительных условиях способом, адаптированным из δΟΡ, опубликованном Весктаи-СоиДег для определения чистоты/гетерогенности 1§О. В кратком изложении, антитело разбавляли водой ΩΩΙ до б мг/мл, денатурировали, добавляя буфер образца (0,1 М Ίηδ/1,0% δΩδ. рН 8,0), и восстанавливали посредством введения 2-меркаптоэтанола; конечная концентрация антитела составляла 1,2 мг/мл. Денатурацию и восстановление облегчали, нагревая образец при 70°С в течение 10 мин. Перед анализом образец охлаждали в течение 10 мин при комнатной температуре. До нагревания образца и непосредственно после его охлаждения применяли этап центрифугирования (300д, 5 мин). Анализ СЕ проводили с использованием системы Весктап СоиИег Р/АСЕ М^^. эксплуатируемой при температуре окружающей среды с капилляром с общей длиной 30 см (20 см эффективной, внутренний диаметр 50 мкм). Перед введением образца, капилляр последовательно промывали 0,1 М ЫаОН, 0,1М НСЬ, водой ΩΩΙ и раствором буфера δΩδ-геля. Образец электрокинетически инжектировали при 5 кВ в течение 30 с с последующим разделением при 30 кВ в течение 30 мин. При инжектировании и разделении устройство эксплуатировали в режиме обращенной полярности. Фрагменты антител детектировали с использованием оптической плотности при 214 нм (получение данных при 4 Гц) и для измеряемых пиков регистрировали нормализованные по времени области.
Исследования составов блока А
В исследованиях блока А исследовали различные буферные системы и использовали материал коммерчески доступного адалимумаба, который перерабатывали для этих исследований. Авторы отмечают, что в патенте США 8216583 указана стабильность состава адалимумаба по отношению к использованию системы цитратного/фосфатного буферов при рН 5,2, и, фактически, патент требует использования такой буферной комбинации. Проведенная авторами работа, отраженная в настоящем документе, демонстрирует, что цитрат/фосфат фактически является скорее плохим выбором буфера по сравнению с другими, такими как гистидин и сукцинат. В исследованиях блока А ниже, поддерживали постоянный рН 5,2. Концентрации маннита и полисорбата 80 также поддерживали постоянными. Образцы выдерживали при 40°С в течение двух недель. Схема исследования приведена в таблице ниже.
Таблица А. Схема исследования блока А
ΑΡΙ Цитрат (мМ) Фосфат (мМ) Сукцинат (мМ) Гистидин (мМ) Тартрат (мМ) Малеат (мМ) Маннит (мМ) РЗ 80 (%>
1 ХумираФ 3 13 0 0 0 0 12 0, 1
2 ХумираФ 10 0 0 0 0 0 12 0, 1
3 ХумираФ 0 10 0 0 0 0 12 0, 1
4 ХумираФ 0 0 10 0 0 0 12 0, 1
5 ХумираФ 0 0 0 10 0 0 12 0, 1
6 ХумираФ 0 0 0 0 10 0 12 0, 1
7 ХумираФ 0 0 0 0 0 10 12 0, 1
- 16 029215
Анализ 8ЕС продемонстрировал, что состав только с цитратом действовал хуже, чем буферная комбинация (табл. А), что продемонстрировало, что в этой комбинации фосфат являлся первичным стабилизатором. Это было удивительно и неожиданно, так как этот рН находится вне номинального диапазона буферной емкости фосфата, но хорошо попадает в пределы буферного диапазона цитрата. Кроме того, сукцинат, гистидин и тартрат действовали также хорошо или лучше, чем комбинация цитрата/фосфата, что продемонстрировало, что другие буферные системы могут обеспечивать равную или лучшую стабильность адалимумаба. Таким образом, настоящее изобретение в одном из своих вариантов осуществления относится к составам адалимумаба, демонстрирующим долговременную стабильность, где избегают комбинации цитратного и фосфатного буферов в пользу по меньшей мере одного буфера, выбранного из группы, состоящей из гистидина, фосфата, сукцината и тартрата. Также подходящей заменой для комбинации цитратного и фосфатного буферов является ацетат.
Чистоту этих хранимых образцов проверяли с использованием ВЭЖХ с ОФ (фиг. 2). Как и в 8ЕС состав с цитратом демонстрировал наихудшую стабильность, тогда как все другие буферы действовали также хорошо или лучше, чем буферная комбинация, присутствующая в коммерчески доступном адалимумабе (хумире®). Эти результаты демонстрируют открытие авторов, заключающееся в том, что замена буфера (т.е. устранение комбинации цитратного/фосфатного буферов коммерческого адалимумаба) может улучшать профиль стабильности адалимумаба.
Исследования составов блока В
Второе исследование ("блок В") проводили, изучая только изменения компонентов буфера, где рН (5,2) не изменяли, как приведено в таблице ниже, озаглавленной "Схема исследования блока В". В этом случае коммерчески доступный состав хумиры® использовали в качестве контроля, тогда как во всех других составах использовали собственный биоаналогичный адалимумабу белок. В табл. В-1, ниже, приведен процент мономеров для составов блока В (а также количество в процентах определенных примесей, являющихся фрагментами белка адалимумаба).
Таблица В. Схема исследования блока В
№ состава ΆΡΙ Цитрат (мМ) Фосфат (мМ) Сукцинат №4) Гистидин (мМ) Тартрат (мМ) Малеат (мМ) Маннит (мМ) Р8 60 (%)
1 Хумира® 8 18 0 0 0 0 12 0,1
2 Биоаналог адалимумаба 10 0 0 0 0 0 12 0,1
3 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 0 0 12 0, 1
4 Биоаналог адалимумаба 0 0 10 0 0 0 12 0/ 1
5 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 0 0 12 0,1
6 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 0 10 0 12 о, 1
7 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 0 0 10 12 0, 1
Таблица В-1. Процент мономеров для составов блока В в момент времени Ю и через две недели при 40°С (12)
№ состава ΑΡΙ Буфер Мономер (-ЬО) Мономер (¢2) Фрагмент (•ЬО) Фрагмент (Ь2)
1 Хумира© цитрат/фосфат 99,34 0,26
2 Биоаналог адалимумаба цитрат 98,71 97,92 0, 62 0,40
3 Биоаналог адалимумаба фосфат 99,21 98,07 0, 05 0, 30
4 Биоаналог адалимумаба сукцинат 99, 19 98,04 0, 04 0, 31
5 Биоаналог адалимумаба гистидин 99, 19 96,41 0, 07 0,23
6 Биоаналог адалимумаба тартрат 99, 13 98,10 0, 04 0,29
7 Биоаналог адалимумаба малеат 98,91 97,90 0, 36 0,76
- 17 029215
Как можно видеть в табл. В-1, приведенной выше, после хранения в течение двух недель при 40°С содержание мономеров снижается более чем на 1% для всех образцов в блоке В, за исключением одного буфера, содержащего гистидин (Ηίκ) (табл. В-1). На основе этого исследования авторы выявили, что вероятность того, что Ηίκ может быть лучшей буферной системой для адалимумаба. (Авторы отмечают, что уровень фрагментов, измеряемый посредством 8ЕС, приводимый для состава 2, по-видимому, является некорректным, так как все другие исходные уровни фрагментов составляют менее 0,1%.)
Исследования составов блока С
В исследованиях, проводимых в блоке С, проводили широкомасштабный скрининг составов (см. таблицу С, ниже). Образцы хранили в течение одной недели при 40°С (далее в настоящем документе обозначаемое как "11") или двух недель при 25°С (далее в настоящем документе обозначаемое как "12"). Эти условия использовали на всем протяжении оставшихся исследований авторов так, что эта терминология использована на всем протяжении настоящего подробного описания. Блок С разработан для расширения оценки буферов, проводимой в блоке В. Кроме того, в нем анализировали глицин (С1у) и/или аргинин (Агд) в качестве возможных стабилизаторов вместо маннита и/или ΝαΟ (табл. С). Следует отметить, что в буферной системе, используемой в продукте хумира®, используют буфер с 8 мМ цитратом/18 мМ фосфатом, который представляет собой композицию состава 1 блока С. В этом случае, для состава 1 блока С вместо белка адалимумаба, полученного из коммерчески доступной хумиры®, использовали собственный биоаналогичный адалимумабу белок.
Таблица С. Схема исследования блока С
№ состава ΑΡΙ цитра т фосфа т сукцинат гистидин глицин арги -НИН маннит ЫаС1
1 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 0 0 65 100
2 Биоаналог адалимумаба 18 8 0 0 0 0 65 100
3 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 0 0 65 100
4 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 65 0 0 100
5 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 65 0 0 100
6 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 0 65 0 100
7 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 0 65 0 100
8 Биоаналог адалимумаба 0 0 20 0 65 0 0 100
9 Биоаналог адалимумаба 0 0 20 0 0 65 0 100
10 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 20 65 0 0 100
11 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 20 0 65 0 100
12 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 0 130 0 35
13 Биоаналог адалимумаба 0 0 20 0 0 130 0 35
14 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 20 0 130 0 35
15 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 130 0 0 60
16 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 20 130 0 0 60
- 18 029215
Таблица С-1. Измеренный рН для составов блока С в Ю и И (одна неделя, 40°С)
№ состава цитрат фосфат сукцинат ГИСТИДИН ГЛИЦИН аргинин маннит НаС1 рН 10 рН 12
1 8 13 0 0 0 0 65 100 5, 51 5, 57
2 13 3 0 0 0 0 65 100 5, 46 5, 43
3 20 0 0 0 0 0 65 100 5,28 5,27
4 20 0 0 0 65 0 0 100 5,27 5,24
5 0 20 0 0 65 0 0 100 5, 43 5,44
6 20 0 0 0 0 65 0 100 5,29 5,29
7 0 20 0 0 0 65 0 100 5,23 5, 32
8 0 0 20 0 65 0 0 100 5,22 5,17
9 0 0 20 0 0 65 0 100 5,19 5,16
10 0 0 0 20 65 0 0 100 5,23 5, 30
11 0 0 0 20 0 65 0 100 5,26 5,29
12 0 20 0 0 0 130 0 35 5,24 5,24
13 0 0 20 0 0 130 0 35 5,13 5,16
14 0 0 0 20 0 130 0 35 5,28 5, 35
15 0 20 0 0 130 0 0 60 5,31 5,31
16 0 20 0 20 130 0 0 60 5,36 5,40
Таблица С-2. Содержание мономеров при δΕΘ для составов в блоке С в Ю, И (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава цитрат фосфат сукцинат Н±5 δίγ Агд маннит ЫаС1 ьо 11 Ъ2
1 8 18 0 0 0 0 65 100 98,75 97,90 98, 06
2 18 8 0 0 0 0 65 100 99,26 98,22 98, 80
3 20 0 0 0 0 0 65 100 99,28 98, 32 98,78
4 20 0 0 0 65 0 0 100 99, 36 98, 45 99, 03
5 0 20 0 0 65 0 0 100 99,25 98,20 98,77
6 20 0 0 0 0 65 0 100 99, 42 98, 68 99,10
7 0 20 0 0 0 65 0 100 99, 39 93, 59 99,13
8 0 0 20 0 65 0 0 100 99,41 98, 51 99, 04
9 0 0 20 0 0 65 0 100 99, 36 98, 52 98,96
10 0 0 0 20 65 0 0 100 99,41 98, 66 99,15
11 0 0 0 20 0 65 0 100 99, 37 93,70 99,15
12 0 20 0 0 0 130 0 35 99,41 98, 66 99, 14
13 0 0 20 0 0 130 0 35 99,42 98,71 99, 17
14 0 0 0 20 0 130 0 35 99,40 98,75 99,26
15 0 20 0 0 130 0 0 60 99,32 98,53 99,05
16 0 20 0 20 130 0 0 60 99,40 98, 66 99, 19
- 19 029215
Таблица С-3. Процент чистоты при ВЭЖХ с ОФ для составов в блоке С в ΐ0, Н (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава цитрат фосфат сукцинат Н±з СИу Агд маннит ИаС1 ьо ы 62
1 8 18 0 0 0 0 65 100 98,04 97,92 98, 10
2 13 3 0 0 0 0 65 100 97,94 97,83 93, 03
3 20 0 0 0 0 0 65 100 93,03 97,92 93, 00
4 20 0 0 0 65 0 0 100 97,94 97,75 97, 98
5 0 20 0 0 65 0 0 100 97,98 97,69 97, 95
6 20 0 0 0 0 65 0 100 97,89 97,72 97, 92
7 0 20 0 0 0 65 0 100 97,80 97,70 97, 91
3 0 0 20 0 65 0 0 100 97,98 97,77 93, 01
9 0 0 20 0 0 65 0 100 97,98 97,73 97, 94
10 0 0 0 20 65 0 0 100 97,98 97,76 93, 00
11 0 0 0 20 0 65 0 100 97,87 97,78 97, 97
12 0 20 0 0 0 130 0 35 97,88 97,71 97, 95
13 0 0 20 0 0 130 0 35 97,95 97,62 97, 93
14 0 0 0 20 0 130 0 35 97,98 97,72 93, 04
15 0 20 0 0 130 0 0 60 97,91 97,72 97, 96
16 0 20 0 20 130 0 0 60 98,00 97,79 97,78
Таблица С-4. Процентное содержание основных полос, наблюдаемых в профиле сГЕР составов в блоке С в Ю, Н (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
и? состава рН ъо 61 62
1 8,59 1, 94 1,97 1,82
8,43 11,76 11,30 12,49
8,27 58,29 49,88 51,54
8,20 7,13 7,59
8,05 21,49 22,33 19,79
7,86 6, 53 5, 35 4,66
2 8,60 1, 96 1,84
3,44 12,08 10,89
3,29 51,70 47,63
3,22 9,74 12,32
8,09 16,29 18,25
7,91 3, 50 3,64
3 8,60 1,83 1, 82 1,12
8,43 11, 58 9, 67 10,40
8,27 45,80 32, 99 44,04
8,20 12,44 22,27 18,68
8,01 17,57 16, 21 14,40
7,86 4,39 3,61
4 8,57 2,31 2, 04 2,13
8,41 12,94 11,51 12,62
8,25 33,37 59, 98 61,97
8,20 23,03
8,02 15,21 18,33 16,07
7,88 3,45 5,32 3,70
5 8,58 2,40 2, 00 2,30
8,41 13, 01 11, 02 12,34
8,25 42,09 46,32 37,30
8,21 15,58 10, 65 15,80
8,03 18,48 20,58 16,80
7,86 3,74 6,13 4,83
6 8,57 2,83
8,38 13, 17 13,23
8,23 32,66 31, 18
8,18 17,52 13,54
8,02 17,48 13, 82
- 20 029215
7, 91 5,30 5,83
7 6,58 2,08 2,41 2,64
Э, 44 13,42 12, 64 12,63
Э,27 56,79 52,43 54,76
б, 16 5,36 6,16 6,33
б, 04 16,91 20, 09 13,45
7, 94 5,44 4,12 5,15
3 δ,57 1,76 2,37 1,55
6,44 14,41 12,13 11,61
8,29 60, 01 48, 87 52,94
8, 19 7,07 10, 66
8, 10 16,22 16, 55 17,10
7, 95 7,61 5, 02 4,55
9 8, 58 2,19 2,06 0, 99
8, 41 11, 69 10, 64 12,73
8,26 50, 07 44,21 60, 33
8, 19 10, 66 10, 39
8, 01 15, 62 21, 51 17,79
7, 87 4,67 5,37 8,16
10 8, 57 1,78 2,64 1, 62
8, 41 10, 55 10, 95 8,11
8,25 43, 82 42, 93 36,11
δ,21 15,96 15,24 17,66
δ, 02 14,63 14,53 14,22
7, 68 3,82 4,21 3,95
11 8,58 1,59 1,81 1,89
6,41 12,98 11,53 12,86
6,23 62,74 29, 63 12,00
6, 19 22, 86 34,77
6, 02 17, 15 19,52 17,06
7, 67 5,54 5,56 4,77
12 8, 61 0,35 1,57 1/47
6,35 13,24 13,41 8,83
6,19 43,13 60,12 26,52
6, 15 15,43 20,46 25,60
7, 98 16,74 17,38
7, 88 4,96 4, 44 4,99
13 8, 58 1,71 1, 67
6,41 11,63 10, 01
6,26 49,19 42,65
6,20 14,25 16,64
8,03 17,35 13, 12
7,86 4,28 4,13
14 8,56 1,64 1,79 1,73
8,39 13, 17 10,45 10, 96
8,25 53, 68 46,06 45, 60
8,21 11,03 13,34
8,07 14,10 20,24 14,50
7,92 2,10 5, 13 4,28
15 8,57 1,74 1,22 1, 60
3,41 10, 49 15,21 10,78
8,25 46,06 55,05 44, 98
8,20 14,46 13,79
8,02 13,90 20,31 10,79
7,89 4,23 4,90 3,43
16 8,56 1, 96 1,08
8,40 9,25 12,23 12,58
8,24 38,03 31,03 58,61
8,20 19, 02 22,08 21, 50
8,03 12,00 13,24 7,31
7,89 4,73 4,82
- 21 029215
Таблица С-5. Процентное содержание полос легких цепей (ЬС), тяжелых цепей (НС), негликозилированных НС и других молекул для составов в блоке С в 10, Н (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
Обсуждение результатов блока С
В отношении табл. С-1 выше, проводили измерение рН и выявили, что он является относительно стабильным для всех составов. Однако исходные значения рН для составов цитрат/фосфат были немного выше. Наименее стабильный состав по анализу 8ЕС оказался состав 1, в котором использовали буферную систему хумиры®. Посредством сравнения авторы выявили, что составы с использованием в качестве буфера Ηΐδ и/или составы, содержащие С1у или Агд, демонстрировали наибольшую стабильность (см. табл. С-2). Сходные тенденции наблюдают при рассмотрении анализа чистоты посредством ВЭЖХ с
- 22 029215
ОФ (см. табл. С-3). По-видимому, §ЕС может быть более хорошим указывающим на стабильность способом, чем ВЭЖХ с ОФ, хотя, в целом способ ВЭЖХ с ОФ по-видимому действительно является индикатором стабильности. На основе данных блока С, кратко изложенных выше, авторы выявили, что гистидин подходит в качестве предпочтительного буфера в отношении стабильности состава, и что глицин или аргинин или их сочетания также являются увеличивающими стабильность компонентами при включении в состав адалимумаба.
Сохраненные образцы дополнительно анализировали посредством с1ЕР при 11 и 12 (табл. С-4 выше). Вещество собственного адалимумаба демонстрирует четыре-пять пиков с общей интенсивностью более 1% или приблизительно с этим. В целом, после хранения наблюдали некоторое небольшое снижение интенсивности основного пика. Как правило, эти потери являются большими при 11, чем при 12. Попрежнему, не наблюдают новых значимых пиков, что свидетельствует о том, что химическая деградация, которая бы приводила к изменениям общего заряда белка, минимальна. Разброс данных означает, что этот способ, несмотря на пригодность для характеристики, по-видимому, не является индикатором стабильности.
Последним аналитическим способом, используемым для оценки стабильности состава адалимумаба, является СЕ-δΌδ, который по существу представляет собой версию СЕ δΌδ-РЛОЕ в слоях гелей. Этот способ демонстрирует, что относительные площади пиков ЬС при хранении при повышенных температурах уменьшаются (табл. С-5), хотя количество новых пиков (суммарно называемых "Другие") увеличивается. Взятые вместе, эти изменения, как правило, составляют менее 2% для любых составов. Присутствуют образцы, где процентное содержание "Других" находится в диапазоне 4-6%, но вероятнее всего они представляют собой артефакты.
Исследования составов блока ϋ
Другой набор составов анализировали как "Блок Ό". Разработано шестнадцать составов для анализа других стабилизаторов, таких как сорбит и трегалоза, в качестве альтернатив манниту (см. табл. Ό). Блок Ό также анализировали с использованием маннита или ЫаС1 в качестве единственного средства придания тоничности вместо использования смеси двух эксципиентов. Стабильность рН составов была достаточно хорошей, хотя для некоторых составов фактические исходные значения рН были немного ниже, чем заданные значения (табл. Ό-1).
Таблица Ό. Схема исследования блока Ό
№ состава ΑΡΙ цитрат фосфат сорбит трегалоза маннит ИаС1 Р5 80
1 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 65 100 0,1
2 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 65 100 0
3 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 65 100 0, 1
4 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 65 100 0
5 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 65 100 0, 1
6 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 65 100 0
7 Биоаналог адалимумаба 8 18 65 0 0 100 0,1
8 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 65 0 100 0, 1
9 Биоаналог адалимумаба 0 20 65 0 0 100 0,1
10 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 240 0 0,1
11 Биоаналог адалимумаба 0 10 240 0 0 0 0,1
12 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 240 0 0 0,1
- 23 029215
13 Биоаналог адалимумаба 10 0 0 0 0 150 0,1
14 Биоаналог адалимумаба 10 0 0 0 0 150 0
15 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 0 150 0,1
16 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 0 150 0
Таблица Ό-1. Измеренный рН для составов блока Ώ при ΐ0 и И (одна неделя, 40оС)
№ состава ΑΡΙ цитрат фосфат сорбит трегалоза маннит ЫаС1 РЗ 80 ъо Ъ1 Ъ2
1 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 65 100 0, 1 5,09 5,17 5, 12
2 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 65 100 0 5,12 5,16 5,16
3 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 65 100 о, 1 5,11 5,16 5,14
4 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 65 100 0 5,13 5,17 5,18
5 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 65 100 о, 1 5,19 5,25 5, 24
6 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 65 100 0 5,16 5,24 5,17
7 Биоаналог адалимумаба 8 18 65 0 0 100 о, 1 5,14 5,17 5,18
8 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 65 0 100 о, 1 5,15 5,21 5,16
9 Биоаналог адалимумаба 0 20 65 0 0 100 о, 1 5,19 5,29 5, 28
10 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 240 0 0,1 5,23 5,28 5, 27
11 Биоаналог адалимумаба 0 10 240 0 0 0 о, 1 5,45 5,35 5, 33
12 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 240 0 0 о, 1 5,44 5,32 5,31
13 Биоаналог адалимумаба 10 0 0 0 0 150 о, 1 5,30 5,25 5,23
14 Биоаналог адалимумаба 10 0 0 0 0 150 0 5,39 5,20 5, 18
15 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 0 150 о, 1 5,35 5,30 5, 22
16 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 0 150 0 5,41 5,33 5, 28
Таблица Ό-2. Содержание мономеров при 8ЕС для составов в блоке Ώ в ΐ0, И (одна неделя при 40ОС) и ΐ2 (две недели при 25ОС)
№ состава ΑΡΙ цитрат фосфат сорбит трегалоза маннит ЫаС1 РЗ 80 60 Ъ1 Ъ2
1 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 65 100 0,1 99,28 98,21 98, 96
2 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 65 100 0 99, 25 98,11 98, 85
3 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 65 100 о, 1 99, 25 98,16 98,86
4 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 65 100 0 99, 27 98,26 98,92
5 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 65 100 о, 1 99, 24 98,16 98,84
6 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 65 100 0 99, 21 98,23 98,82
7 Биоаналог адалимумаба 8 18 65 0 0 100 о, 1 99, 30 98,19 98,94
8 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 65 0 100 о, 1 99, 28 98,14 98,85
9 Биоаналог адалимумаба 0 20 65 0 0 100 о, 1 99,29 98,23 98,90
- 24 029215
10 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 240 0 0,1 97,93 98,54
11 Биоаналог адалимумаба 0 10 240 0 0 0 0,1 99, 32 98, 65 99, 00
12 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 240 0 0 0,1 99,32 98,53 98,96
13 Биоаналог адалимумаба 10 0 0 0 0 150 0,1 99,29 98,12 98,84
14 Биоаналог адалимумаба 10 0 0 0 0 150 0 99,28 98,28 98,90
15 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 0 150 0,1 99,26 97,99 98,83
16 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 0 150 0 99,20 97,76 98,62
Таблица Б-3. Процент чистоты при ВЭЖХ с ОФ для составов в блоке Б в ΐ0, ΐ1 (одна неделя при 40°С) и ΐ2 (две недели при 25°С)
№ состава ΑΡΙ цитрат фосфат сорбит трегалоза маннит ЫаС1 РЗ 80 ъо Ъ1 Ъ2
1 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 65 100 0,1 98,17 97,75 98,02
2 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 65 100 0 98,09 97,84 98,08
3 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 65 100 0,1 98,03 97,81 98,19
4 Биоаналог адалимумаба 20 0 0 0 65 100 0 98,17 97,85 98,06
5 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 65 100 0,1 98,11 97,88 98,18
6 Биоаналог адалимумаба 0 20 0 0 65 100 0 98,21 97,77 98,10
7 Биоаналог адалимумаба 8 18 65 0 0 100 0,1 98,11 97,80 98,14
8 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 65 0 100 0,1 98,06 97,73 98,03
9 Биоаналог адалимумаба 0 20 65 0 0 100 о, 1 98,09 97,80 98,07
10 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 240 0 о, 1 98,13 97,82 98,08
11 Биоаналог адалимумаба 0 10 240 0 0 0 о, 1 98,10 97,90 98,06
12 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 240 0 0 о, 1 98,13 97,95 98,14
13 Биоаналог адалимумаба 10 0 0 0 0 150 0,1 98,07 97,79 98,02
14 Биоаналог адалимумаба 10 0 0 0 0 150 0 98,13 97,78 98,14
15 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 0 150 0,1 98,17 97,80 98,10
16 Биоаналог адалимумаба 0 10 0 0 0 150 0 98,14 97,79 98,06
- 25 029215
Таблица Ό-4. Процентное содержание основных полос, наблюдаемых в профиле сГЕР составов в блоке Ό в Ю, И (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава рн ЪО Ъ1 Ъ2
1 8, 56 2,26 1, 81
8, 41 13,84 12,88 11,73
8,25 62,27 59, 80 56, 15
8, 14 6, 48
8, 04 15, 71 22,93 13,73
7, 99 5, 92 4,39 4, 13
2 8,55 2, 08 1,58
8, 40 12,89 12,58
8,24 60,15 53,24
8, 14 5, 98 6, 69
8, 03 11,92 9, 72
7, 98 3, 65 5, 67
3 8,57 1,58 2, 10 1, 89
8, 41 11,87 11,83 11,99
8,26 54,93 54,45 54,51
8, 16 9, 10 6, 31 8,24
8, 05 9, 21 11,16 10,22
7, 91 7, 60 4, 16 5, 26
4 8, 57 3, 57 1, 82 1, 05
8, 40 11,12 10, 66 10,83
8,24 49, 37 47,85 42,34
8, 14 3, 01 1, 83 3, 68
8, 03 10, 11 10,06 17, 12
7, 90 2,78 4,72 3, 84
5 8, 55 2,30 2, 18 2, 13
8, 40 7, 63 8, 86 8, 63
8,25 33,90 14,41 16, 64
8,20 23,41 33,90 33,75
8, 03 10,14 20,39 19, 42
7,99 6, 76 5, 42 4, 63
6 8,59 1,87 1,39
8,42 11,25 11, 18 11, 89
8,27 50, 07 61,72 64, 17
8,20 12, 43 22, 08 19, 18
8,03 10, 20
7,91 2,70 5, 01 3,38
7 8,55
8,40
8,25
8,20
8,03
7,99
8 8,59 1,46 2, 64 1,16
8,39 13, 52 13, 62 7,37
8,22 60, 79 50, 83 55, 40
8,08 5,21 11,28 9, 78
8,02 15, 24 8,55 11, 94
7,91 3,79 3,02 5, 18
9 8,53 2, 64 3,25 1,94
8,38 13, 83 12,72 11, 67
8,25 64, 97 51,32 54, 14
8, 17 8,33 11,21 8, 61
8,06 11,75 9, 98 9, 03
8,01 5, 79 4,80 7,31
10 8,54 1,78 3,26
8,38 13, 04 11, 19
8,21 60, 53 44, 83
8,15 19, 60 10, 95
7,99 9, 41
7,90 5, 05 4,27
11 8,52 1,95 2,11 1,89
8,36 11,24 12, 43 12, 43
8,21 48, 64 54, 10 59, 90
- 26 029215
6, 13 И, 69 6, 31
8, 00 10,30 21,14 11,14
8, 01 5, 27 5, 64 8,32
12 8, 51 1, 85
8,29 11,31 11,38
8, 18 63,11 45,14
8, 14 2,54
8, 05 16,16 22,03
7, 94 5, 03 6, 88
13 8, 62 3, 51 3, 05
8, 44 12,44 12,30
8,29 65,10 51,44
8,21 12,18
8, 06 15, 37 17,25
7, 91 3, 58 3, 77
14 8, 61 2,74 1,73
8, 43 10, 60 12,19
8,27 46,23 41,11
8,21 13,97 10,49
8, 05 18,56 17,52
7, 91 5, 15
15 8, 62
8,35 12,40 10,91 8,34
8,21 31,87 30,32 36, 39
8,20 41,14 25, 57 30, 62
8, 02 12,42 13,72 18,26
7, 89 2, 18 5, 44 3, 86
16 8, 61
8, 48 12,96 12,86 13,19
8, 34 34,40 31,45 39,25
8, 31 27,74 20,29 18,81
8, 05 22,76 19, 35
7, 89 8, 17 7, 69 4, 83
Таблица 1)-5. Процентное содержание полос легкой цепи (ЬС), тяжелой цепи (НС), негликозилированной НС и других молекул для составов в блоке I) в 10, 11 (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава Момент времени ЬС НС пдНС Другие
1 Е0
Е1 34,11 62, 58 0, 58 2,73
Е2 33, 19 64,28 0, 60 1,92
2 Е0 30,25 66, 81 0, 64 2,31
Е1 30, 61 65, 79 0, 54 3,07
Е2 29,22 67, 04 0, 64 3, 10
3 Е0 27,48 68, 51 0, 59 3,42
Е1 30,84 67,27 0, 54 1,35
Е2 30,30 68, 13 0, 58 0,99
4 Е0 30,88 68, 33 0, 60 0,19
Е1 29, 76 68, 32 0, 57 1,34
Е2 31,49 66, 95 0, 55 1,01
5 Е0 33,77 64,50 0, 56 1,17
Е1 31,59 66, 54 0, 52 1,34
Е2 29,19 69, 16 0, 59 1,06
6 Е0 30,90 68, 08 0, 56 0,47
Е1 29, 32 69, 88 0, 54 0,26
Е2 31,08 67,58 0, 54 0,79
7 Е0 30,41 68, 60 0, 56 0,43
Е1 30,87 66, 95 0, 55 1, 63
Е2 30, 14 68,28 0, 55 1,03
8 Е0 31, 68 67, 41 0, 60 0,31
Е1
Е2
9 Е0 29, 62 68, 12 0, 51 1,75
Е1
Е2 29, 46 68, 10 0, 61 1,83
10 Е0 29, 80 67, 99 0, 58 1, 64
- 27 029215
Ь1 30, 04 65, 53 0,45 3, 98
Ь2 30, 41 66,27 0,53 2, 80
11 ЬО 29, 85 67, 63 0, 61 1/ 91
Ь1 29, 02 68, 18 0, 60 2,20
Ь2 30, 44 67, 14 0,58 1, 84
12 ЬО 29, 38 68,11 0,55 1, 96
Ь1 30, 16 65, 55 0,49 3, 80
Ь2 28,20 69,19 0,59 2, 02
13 ЬО 31, 38 66,28 0,55 1,79
Ь1 33, 67 64,10 0,56 1, 67
Ь2 29, 72 67,99 0,58 1,71
14 ЬО 37, 34 60,53 0,52 1, 62
Ь1 33, 03 63,46 0,53 2, 97
Ь2 34, 39 63, 62 0,54 1, 45
15 ЬО 30, 20 68,42 0,59 0, 79
Ь1 28, 67 69, 42 0,58 1, 33
Ь2 29, 96 68,24 0,56 1,24
16 ЬО 31, 62 66, 95 0,58 0, 85
Ь1 30, 48 66, 36 0,55 2, 61
Ь2 27, 94 70, 17 0, 60 1,29
Результаты для блока В
Стабильность рН этих составов была достаточно хорошей (табл. Б-1). В качестве контроля снова использовали коммерческий состав адалимумаба (хумиры®) (но с использованием в качестве АР1 собственного биоаналогичного адалимумабу белка). Коммерческий состав снова продемонстрировал худшую стабильность при ЗЕС, чем составы с использованием единственных буферов, таких как фосфат и ΗΪ8 (см. табл. Б-2). Из двух буферов, использованных в хумире® авторы к настоящему времени установили, что лучшим стабилизатором является фосфат. Это является неожиданным, так как фосфат фактически не обладает буферной емкостью при рН 5,2, тогда как цитратные буферы обладают буферной емкостью при этом рН. Это позволяют предположить, что различия в профиле стабильности могут являться следствием прямого взаимодействия буфера с белком, явления, которое по убеждению авторов в случае коммерческого состава хумиры®, авторы ранее не изучали или не принимали во внимание. Таким образом, сравнительное преимущество выбора фосфата в качестве буфера в составе адалимумаба вследствие превосходной стабильности в составе в отличие от выбора комбинации цитрата/фосфата составляет один из важных аспектов изобретения авторов.
И сорбит, и трегалоза при использовании в качестве единственного средства придания тоничности в этих составах демонстрируют лучшие профили стабильности, чем маннит. Также выявлено, что удаление полисорбата 80 (РЗ 80) в определенной степени снижает стабильность. Выявлено, что лучшим профилем стабильности при ЗЕС обладают составы 10 и 11, которые вместо маннита/ЫаС1 содержат высокие концентрации сорбита или трегалозы (табл. Б-2). Эти результаты демонстрируют, что удаление ЫаС1 из состава или ограничение его концентрации ниже определенных заданных уровней (например, менее чем приблизительно 100 мМ) является благоприятным для стабильности. (Авторы замечают, что маннит по-видимому не является стабилизирующим ингредиентом, но на уровнях предпочтительно выше 150, и наиболее предпочтительно.
Данные ОФ демонстрируют, что цитрат или фосфат обеспечивают лучшую стабильность, чем комбинация, используемая в хумире® (табл. Б-3). Снова, исключение комбинации цитрата/фосфата представляет важную характеристику изобретения авторов. Возможно не было известно или спрогнозировано, что цитрат отдельно или фосфат отдельно смогут обеспечить лучшую стабильность состава, чем коммерческая буферная система, содержащая комбинацию цитрата и фосфата.
Для образцов блока Б проводили анализы сГЕР (табл. Б-4 выше). Как и ранее наблюдают определенное снижение интенсивности основного пика, но новых пиков не наблюдают. В некоторых случаях наблюдают определенное небольшое повышение интенсивности более кислотных пиков. Наблюдают большее уменьшение основного пика при 11, чем при 12, что позволяет предполагать, что разрушение при 5°С является почти незаметным. Также, в общем, похоже, что разрушается менее 5% (а вероятно намного менее 5%) как измеряют в сГЕР (табл. Б-4). Подобным образом наблюдали незначительное разрушение в СЕ-ЗБЗ (табл. Б-5). Наблюдают самое большое от 2 до 4% разрушения, но вариабельность способа делает трудным определение существенности этих изменений. По-видимому, в составах 1 и 2 и 10-14 присутствуют более высокие уровни загрязнений (другие).
Исследования составов блока Е
Этот блок составов разработан для исследования стабильности составов при различных уровнях рН. Если буфер не указан, использовали ацетатный буфер (10 мМ) (табл. Е). Вторичной задачей являлось
- 28 029215
исследование С1у и Агд при более высоких концентрациях и в комбинации в качестве альтернативных манниту и ΝαΟ стабилизаторов.
Таблица Е. Схема исследования блока Е
№ состава ΑΡΙ рН цитрат фосфат сорбит Э1у Агд маннит ЫаС1 Р8 80
1 Биоаналог адалимумаба 5,2 8 18 0 0 0 65 100 0,1
2 Биоаналог адалимумаба 3, 5 8 18 0 0 0 65 100 0/1
3 Биоаналог адалимумаба 5,2 0 0 0 0 0 65 100 0,1
4 Биоаналог адалимумаба 3, 5 0 0 0 0 0 65 100 0/1
5 Биоаналог адалимумаба 3, 5 0 0 65 0 0 0 100 0/1
6 Биоаналог адалимумаба 3, 5 0 0 0 0 130 0 0 0,1
7 Биоаналог адалимумаба 3, 5 0 0 0 0 130 0 0 0
8 Биоаналог адалимумаба 3, 5 0 0 0 240 0 0 0 0
9 Биоаналог адалимумаба 5,2 0 0 0 240 0 0 0 0
10 Биоаналог адалимумаба 3, 5 0 0 0 100 100 0 0 0
11 Биоаналог адал имума б а 5, 2 0 0 0 100 100 0 0 0
12 Биоаналог адалимумаба 3, 5 0 0 0 150 50 0 0 0
Таблица Е-1. Измеренный рН для составов блока Е при Ю и И (одна неделя, 40°С)
№ состава рН цитрат фосфат сорбит <31у Агд маннит ЫаС1 РЗ 80 Ϊ.0 Ϊ.1 ¢2
1 5,2 8 18 0 0 0 65 100 0,1 5,15 5,11 5,21
2 3,5 8 18 0 0 0 65 100 0,1 3,36 3,49 3,50
3 5,2 0 0 0 0 0 65 100 0,1 5,13 5,24 5,24
4 3,5 0 0 0 0 0 65 100 0,1 3,31 3,43 3,45
5 3,5 0 0 65 0 0 0 100 0,1 3,30 3,48 3,42
6 3,5 0 0 0 0 130 0 0 0,1 3,24 3,52 3,42
7 3,5 0 0 0 0 130 0 0 0 3,27 3,59 3,48
8 3,5 0 0 0 240 0 0 0 0 3,27 3,33 3,39
9 5,2 0 0 0 240 0 0 0 0 5,05 5,25 5,20
10 3,5 0 0 0 100 100 0 0 0 3,30 3,45 3,41
11 5,2 0 0 0 100 100 0 0 0 5,20 5,38 5,39
12 3,5 0 0 0 150 50 0 0 0 3,24 3,38 3,37
Таблица Е-2. Содержание мономеров при 8ЕС для составов в блоке Е в Ю, И (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава рн цитрат фосфат сорбит С1у Агд маннит МаС1 Р8 80 •ьо •Ы Ь2
1 5, 2 8 18 0 0 0 65 100 0, 1 99, 23 98, 20 98,85
2 3, 5 8 18 0 0 0 65 100 0, 1 98, 82 44, 15 86, 37
3 5, 2 0 0 0 0 0 65 100 0, 1 99, 30 98, 37 99, 02
4 3, 5 0 0 0 0 0 65 100 0, 1 95, 85 33, 51 76, 21
5 3, 5 0 0 65 0 0 0 100 0, 1 97, 37 26,21 77, 80
б 3, 5 0 0 0 0 130 0 0 0, 1 97, 79 35, 67 65, 83
7 3, 5 0 0 0 0 130 0 0 0 99, 00 55, 51 90, 60
8 3, 5 0 0 0 240 0 0 0 0 99, 24 75, 60 98,24
9 5, 2 0 0 0 240 0 0 0 0 99, 08 98,63 99, 18
10 3, 5 0 0 0 100 100 0 0 0 99, 28 51,03 91, 66
11 5, 2 0 0 0 100 100 0 0 0 99, 32 98,54 99, 09
12 3, 5 0 0 0 150 50 0 0 0 99, 29 45,86 93, 06
- 29 029215
Таблица Е-3. Процент чистоты при ВЭЖХ с ОФ для составов в блоке Е в 10. 11 (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава рн цитрат фосфат сорбит С1у Агд маннит ИаС1 Р8 80 £0 Ъ1 1:2
1 5, 2 8 18 0 0 0 65 100 0, 1 98, 58 96, 88 96, 91
2 3, 5 8 18 0 0 0 65 100 о, 1 98, 51 90, 29 95, 99
3 5, 2 0 0 0 0 0 65 100 о, 1 98, 50 96, 90 96, 83
4 3, 5 0 0 0 0 0 65 100 о, 1 98, 56 91,18 95, 55
5 3,5 0 0 65 0 0 0 100 0, 1 98, 45 90,96 95, 71
6 3,5 0 0 0 0 130 0 0 0, 1 98, 71 93,28 95, 38
7 3,5 0 0 0 0 130 0 0 0 98, 40 90, 65 96, 54
8 3,5 0 0 0 240 0 0 0 0 98, 03 93,94 96, 82
9 5,2 0 0 0 240 0 0 0 0 98, 23 97, 19 97,12
10 3,5 0 0 0 100 100 0 0 0 98, 13 91,10 96, 67
11 5,2 0 0 0 100 100 0 0 0 98, 13 97,17 97, 12
12 3,5 0 0 0 150 50 0 0 0 98, 07 93,40 96, 48
Таблица Е-4. Процентное содержание полос легкой цепи (ЬС). тяжелой цепи (НС). негликозилированной НС и других молекул для составов в блоке Е в 10. 11(одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава Момент времени ЬС НС пдНС Другие
1 00 29, 97 68, 80 0, 59 0, 64
01 28,49 70, 07 0, 60 0,81
02 28,21 70, 29 0, 59 0,90
2 00 28, 50 68, 67 0,52 2,31
01 29, 69 50, 92 0,30 19, 09
02 28,76 69, 64 0, 60 1, 00
3 00 24,30 74,01 0, 60 1, 09
01 28,27 69, 63 0, 60 1,51
02 28, 17 69, 89 0,54 1, 40
4 00 29, 45 68, 73 0,56 1,26
01 29, 52 51, 33 0,30 18,86
02 27, 92 65, 73 0,52 5, 83
5 00 35, 59 63, 85 0,56 0, 00
01 32, 47 48, 72 0,30 18,52
02 34, 98 60, 88 0,46 3, 68
6 00 34, 33 63, 39 0,51 1,77
01
02 35, 32 61, 31 0,45 2, 92
7 00 30, 13 68, 87 0, 60 0, 40
01 28, 13 54,79 0,59 16, 49
02 34,39 63, 32 0,53 1,76
8 00 33, 27 64,97 0,55 1,21
01 33, 20 52, 62 0,33 13,85
02 33, 25 65,26 0,58 0, 92
9 00 32,28 66, 34 0,57 0, 81
01 31,81 65, 76 0,57 1, 86
02 31,23 66, 81 0, 57 1,39
10 00 35, 66 63, 36 0, 43 0,56
- 30 029215
51 24, 96 58, 61 0, 33 16, 10
62 33, 44 66, 03 0, 53 0, 00
11 60 29, 75 69, 08 0, 60 0, 57
61 27, 67 70, 83 0, 61 0, 89
62 28, 81 69, 86 0, 59 0, 73
12 60 30,23 49, 07 0, 26 20, 44
61 28, 14 70, 11 0, 58 1, 18
62 29, 75 69, 08 0, 60 0, 57
Таблица Е-5. Процентное содержание основных полос, наблюдаемых в профиле с1ЕР составов в блоке Е в !0, !1 (одна неделя при 40°С) и !2 (две недели при 25°С
№ состава рН 60 61 62
1 8, 56
8, 37 12, 52 12, 65
8,23 51, 77 50, 04
8, 14
8, 03 21, 54 12, 40
7, 93 14, 17 16, 26
2 1,88 1,49
8, 37 10, 07 17, 66 14, 15
8,21 37, 52 32, 26 33, 88
8, 13 19, 03 9, 96
8, 01 16, 57 28, 70
7, 93 4, 12 7,45
4 8, 54 1, 04 2, 67
8, 38 10, 50 9, 32
8,21 68, 34 31, 91
8, 13 28, 52
8, 02 16, 55 10, 05
Ί, 88 3, 57 8, 67
5
б
7
8
9 8, 60 1,40 2, 60 3, 26
8, 43 10,04 12, 33 12, 03
8, 26 62,39 63, 19 63, 89
8, 14
8, 03 15, 00 16, 95 16, 57
7, 88 7, 08 4, 93 4, 25
Результаты исследований для блока Е
Стабильность рН являлась умеренной с возрастанием рН, происходившим для многих составов в !1, особенно составов с ацетатным буфером при низком рН (табл. Е-1 выше). Два образца (составы 6 и 12) в !1 загустевали.
У образцов при рН 3,5 наблюдали стабильное снижение содержания мономеров (табл. Е-3), тогда как при рН 5,2 образцы демонстрировали стабильность, сравнимую с той, которую наблюдали в предыдущих блоках. Также стало понятным, что при 40°С разрушение было более заметным, чем при 25°С,
- 31 029215
несмотря на вдвое более длительное хранение. Фактически, у состава 8 утрачивалось менее 1% мономеров при ΐ2 (табл. Е-2). Все составы с О1у и Агд продемонстрировали хорошую стабильность при условии, что поддерживали рН 5,2. Данные в этом блоке исследований подтвердили открытие авторов, что глицин или аргинин или их смесь являются хорошими стабилизаторами в составе адалимумаба.
Данные ВЭЖХ с ОФ демонстрируют значительное уменьшение чистоты, хотя далеко не такое больше как для снижения содержания мономеров при §ЕС (табл. Е-3). Это позволяют предположить, что химическая нестабильность является меньшей, чем физическая нестабильность. Как и для результатов 8ЕС, потеря стабильности при И более заметна, чем при 12.
Результаты СЕ-δΌδ демонстрируют большое увеличение числа новых пиков, где категория "Другие" для образцов с низким рН в П возрастала до 15-20% (табл. Е-4). Наиболее стабильным составом при СЕ-δΌδ оказался состав 11, который в качестве регуляторов тоничности/стабилизаторов содержит О1у и Агд.
Авторы испытали сложности с проведением с1ЕР для многих образцов блока Е. Однако, принимая во внимание явно худшую стабильность при рН 3,5, маловероятно, что с1ЕР мог бы предоставить какуюлибо новую информацию относительно этих профилей стабильности. Например, состав 4 (рН 3,5) демонстрирует расщепление основного пика в И.
Исследования составов блока Г
Исследования блока Р предназначены изучения стабильности содержащих НЕ составов с использованием в качестве единственного регулятора тоничности маннита, О1у или Агд (табл. Р ниже). Они также служат в качестве благоприятной возможности для оценки добавок, таких как ЭДТА и метионин (Ме1), которые могут быть эффективными для замедления окисления. Кроме того, исследовали один состав с высокой концентрацией цитрата и один состав с высокой концентрацией фосфата.
Таблица Р. Схема исследования блока Р
№ состава ΑΡΙ рН цитрат фосфат Нтз С1у Агд маннит ЫаС1 РЗ 80 ЭДТА МеЪ
1 Биоаналог адалимумаба 5,2 8 16 0 0 0 65 100 0,1 0 0
2 Биоаналог адалимумаба 5,2 8 18 0 0 0 65 100 0,1 0, 5 0
3 Биоаналог адалимумаба 5,2 0 0 10 0 150 0 0 0 0, 1 0
4 Биоаналог адалимумаба 5, 2 0 0 10 0 150 0 0 0 0, 5 0
5 Биоаналог адалимумаба 5, 2 0 0 10 0 0 240 0 0 0 0
6 Биоаналог адалимумаба 5,2 0 0 10 0 0 240 0 0 0 10
7 Биоаналог адалимумаба 5,2 0 0 10 0 0 240 0 0 0 50
8 Биоаналог адалимумаба 5,2 30 0 0 240 0 0 0 0 0 0
9 Биоаналог адалимумаба 5, 2 0 30 0 240 0 0 0 0 0 0
10 Биоаналог адалимумаба 5, 2 0 0 30 240 0 0 0 0 0 0
11 Биоаналог адалимумаба 5, 2 0 0 20 0 25 120 0 0, 1 0 0
12 Биоаналог адалимумаба 5,2 0 0 20 0 25 120 0 0,1 0 0
Таблица Р-1. Измеренный рН для составов блока Р при Ю и П (одна неделя, 40°С)
№ состава цитрат фосфат ΗΪ3 С1у Агд маннит ΝΒΟΙ РЗ 80 ЭДТА МеЕ ьо Ь1 Е2
1 8 18 0 0 0 65 100 0, 1 0 0 4, 67 4, 88 4,77
2 8 18 0 0 0 65 100 0, 1 0, 5 0 5, 05 5, 15 5, 20
3 0 0 10 0 150 0 0 0 0, 1 0 5, 11 5, 22 5, 27
4 0 0 10 0 150 0 0 0 0, 5 0 4, 95 5, 06 5, 15
5 0 0 10 0 0 240 0 0 0 0 5, 12 5, 25 5, 29
6 0 0 10 0 0 240 0 0 0 10 4, 45 4, 74 4,67
7 0 0 10 0 0 240 0 0 0 50 5, 03 5, 24 5, 24
8 30 0 0 240 0 0 0 0 0 0 5, 09 5, 18 5, 22
9 0 30 0 240 0 0 0 0 0 0 5, 13 5, 25 5, 32
10 0 0 30 240 0 0 0 0 0 0 5, 08 5, 24 5, 24
11 0 0 20 0 25 120 0 о, 1 0 0 5, 01 5, 17 5, 18
12 0 0 20 0 25 120 0 о, 1 0 0 5, 06 5, 20 5, 19
- 32 029215
Таблица Р-2. Содержание мономеров при §ЕС для составов в блоке Р в 10. Ц (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава цитрат фосфат ΗΪ3 С1у Агд маннит ЫаС1 Р8 80 ЭДТА МеЕ Е0 Е1 Е2
1 8 18 0 0 0 65 100 0/ 1 0 0 97,69 94,75 96, 06
2 8 18 0 0 0 65 100 0х 1 0,5 0 99,25 98, 14 98,92
3 0 0 10 0 150 0 0 0 0,1 0 99, 30 98, 54 99, 16
4 0 0 10 0 150 0 0 0 0,5 0 99,28 98, 31 99, 14
5 0 0 10 0 0 240 0 0 0 0 99, 17 98, 64 99, 14
6 0 0 10 0 0 240 0 0 0 10 99, 07 98, 50 99, 07
7 0 0 10 0 0 240 0 0 0 50 99,29 98, 92 99, 24
8 30 0 0 240 0 0 0 0 0 0 99,28 98, 40 99, 04
9 0 30 0 240 0 0 0 0 0 0 99, 30 98, 50 99, 08
10 0 0 30 240 0 0 0 0 0 0 99, 31 98, 60 99, 23
11 0 0 20 0 25 120 0 0х 1 0 0 99,27 98, 64 99, 16
12 0 0 20 0 25 120 0 0х 1 0 0 99,29 98, 51 99, 17
Таблица Р-3. Процент чистоты при ВЭЖХ с ОФ для составов в блоке Р в 10. 11 (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава цитрат фосфат ΗΪ5 С1у Агд маннит ЫаС1 Р8 80 ЭДТА МеЕ Е0 Е1 Е2
1 8 18 0 0 0 65 100 о, 1 0 0 97, 47 96, 89 97, 98
2 8 18 0 0 0 65 100 о, 1 0,5 0 97, 33 97, 02 97, 99
3 0 0 10 0 150 0 0 0 0,1 0 97, 64 97,14 98, 04
4 0 0 10 0 150 0 0 0 0,5 0 97, 59 97, 00 97, 97
5 0 0 10 0 0 240 0 0 0 0 97, 11 97, 30 98, 03
6 0 0 10 0 0 240 0 0 0 10 97, 61 97,27 98, 03
7 0 0 10 0 0 240 0 0 0 50 97, 55 97, 37 98, 08
8 30 0 0 240 0 0 0 0 0 0 97, 48 97, 51 98, 05
9 0 30 0 240 0 0 0 0 0 0 97, 64 97, 58 98, 03
10 0 0 30 240 0 0 0 0 0 0 97, 68 97, 41 98, 06
11 0 0 20 0 25 120 0 0, 1 0 0 97, 67 97, 18 98, 03
12 0 0 20 0 25 120 0 0, 1 0 0 97, 68 97, 33 98, 02
- 33 029215
Таблица Р-4. Процентное содержание полос легкой цепи (ЕС), тяжелой цепи (НС), негликозилированной НС и других молекул для составов в блоке Р в ΐ0, Н (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава Момент времени ьс НС пдНС Другие
1 ГО 27, 36 71, 86 0, 60 0, 17
Е2 25, 34 73, 18 0, 63 0, 86
2 Е0 27, 80 71, 07 0, 60 0, 53
ы 28,29 71, 08 0, 63 0, 00
12 27, 53 70, 97 0, 64 0, 86
3 10 27, 78 70, 62 0, 65 0, 95
11 28,26 70, 85 0, 66 0, 23
Д2 28,26 70, 50 0, 63 0, 61
4 10 28,20 70, 24 0, 60 0, 96
11 29, 17 69, 30 0, 74 0, 80
12 29, 17 70, 27 0, 56 0, 00
5 10 27, 50 70, 74 0, 59 1, 17
11 29, 56 65, 79 0, 41 4,24
12 28,24 69, 90 0, 58 1,28
6 10 29, 10 68, 84 0, 54 1, 52
11 28, 58 69, 18 0, 54 1,70
12 27, 47 70, 39 0, 54 1, 60
7 10 27, 87 70, 28 0, 55 1,30
11
12
8 10 34, 72 64, 87 0, 41 0, 00
11 34, 94 64, 53 0, 53 0, 00
12 33,21 65,76 0, 50 0, 52
9 10 31, 96 68, 04 0 0
11 48, 51 51,49 0 0
12 33, 15 65, 82 0,57 0,46
10 10 27,81 71,27 0, 51 0,40
11 29, 59 68, 46 0, 53 1,43
12 31,25 67, 89 0, 50 0,36
11 10 27,33 70, 80 0, 61 1,26
11 26, 54 71, 00 0, 64 1,82
12 29,46 69, 85 0, 69 0,00
12 10 24,18 71,21 0 4,61
11
12 28,95 68, 98 0, 59 1,46
- 34 029215
Таблица Р-5. Процентное содержание основных полос, наблюдаемых в профиле сГЕР составов в блоке Р в Ю, Н (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С
№ состава рн ео Ь1 1:2
1 8, 65 2, 11
8, 31 13, 07 11, 43 34, 17
8, 24 64, 66 67, 99 28, 67
8, 14 2,29
8, 08 16, 13 17, 73 15, 98
Ί, 95 6, 14 4, 80
2 8, 60 1,56 1, 93 1, 12
8, 48 12, 95 11,26 11, 12
8, 24 58, 99 55, 85 60, 37
8, 13 20, 98 22, 43 18,77
7, 93 3, 56 6, 41 6, 09
8, 60 1, 56 1, 93 1, 12
3 8, 56 1, 56 1, 69
8, 34 10, 88 12, 85 10, 83
8, 18 66, 93 55, 35 62, 00
8, 02 17,28 19, 04 20, 13
7, 89 4, 91 11,21 5, 35
4 8, 58 1, 86 1, 68
8, 45 13, 79 10, 61 12, 84
8,27 65, Об 51,89 61, 94
8, Об 19,29 18,85 25, 22
7, 96 6, 28 4, 91
5 8, 60 1, 35 1, 78 1,45
8, 45 12, 35 13, 63 8,59
8,27 60, 12 55, 07 64, 28
8, 07 20, 50 20,35 19, 73
7, 94 5, 69 9, 17 5, 95
6 8,55 1, 30 1, 30 1,08
8, 43 13,29 13,26 13, 23
8,24 54, 83 56, 88 61, 67
8, 08 20, 76 19, 79 17, 19
7, 96 9, 82 8, 76 6, 84
7 8,57 1,28 1, 41 2,40
8, 44 12, 08 12, 63 13, 05
8,27 61,50 55, 33 60, 70
8, 08 17, 55 19,48 17, 43
7, 94 5, 93 8, 92 4,25
8 8, 55 1,32 0, 90
8, 43 11,51 12,47 10, 09
8,24 62, 99 54,09 63, 81
8, 05 15, 43 22,71 20, 91
7, 90 8,75 9, 83 5, 19
9 8, 59 1,35 1, 63
8, 45 11,59 13, 67 11, 40
8,28 63, 60 52,70 63, 11
8, 06 17, 98 24,08 18, 57
7, 94 2,28 7, 05 5,29
10 8,57 1,56 2, 50 2,08
8, 45 13,22 11,93 12, 90
8,28 61, 86 55,12 61, 87
8, 08 17, 87 20,99 18, 74
7, 97 5, 50 4, 71 4,41
11 8, 59 1, 43 1, 19
- 35 029215
8, 45 12,25 11, 42 9, 85
8,28 58,83 59, 88 64,13
8,08 18,18 22, 06 17,46
Ί, 97 9, 61 5, 45 6, 97
12 8,56 1,64 1, 39 0, 94
8,39 15, 30 13, 07 15,71
8,21 63,76 59, 71 62,92
8,02 16, 72 20, 51 16, 60
7,97 2,58 4,21 3, 85
Результаты для блока Р
В этом блоке составов значения рН были немного меньшими, чем заданное значение рН 5,2 (табл. Р-1). Кроме того, рН у большинства составов при измерении в 11 изменялся приблизительно на 0,1 единицу. Эти различия учитывали при построении математических моделей данных, как описано ниже.
Выявлено, что добавление ЭДТА увеличивает стабильность наихудшего состава (состав 1). На основе данных 8ЕС было менее ясно, увеличивает ли она стабильность в общем случае (табл. Р-2). После хранения все составы, содержащие высокие концентрации Агд или С1у, демонстрировали достаточно хорошие характеристики (табл. Р-2).
Исходная чистота при использовании ВЭЖХ с ОФ была везде ниже, чем ожидалось для этих составов (табл. Р-3). После хранения при И и 12, наблюдали определенные небольшие различия, где составы на основе С1у и Агд демонстрировали наилучшую стабильность. На основе данных ВЭЖХ с ОФ не выявлено, что ЭДТА является значимым стабилизатором (табл. Р-3). Подобным образом действие Мс1 на стабильность по измерениям посредством ВЭЖХ с ОФ или 8ЕС является минимальным, за исключением содержания мономеров при наибольшей концентрации Мс1 (табл. Р-2, состав 7).
Анализ посредством СЕ-8Б8 демонстрирует, что после хранения происходит очень небольшое разрушение (как правило, менее 1% увеличения "Других") (табл. Р-4). Однако существуют некоторые составы, которые начинаются с наибольшего содержания "Других" (например, составы 4-7). Во всех этих составах использовали высокую концентрацию маннита (240 мМ). По-видимому, это же верно для составов, содержащих 120 мМ маннит.
Как и для анализа посредством с1ЕР, наблюдают небольшое изменение относительных интенсивностей основного пика, по меньшей мере систематическое, которое может позволить выявить динамику стабильности (табл. Р-5). В целом, изменения в 12 являются меньшими, чем в И.
Исследования составов блока С
В исследованиях составов блока С изучали ряд составов с комбинациями С1у и Агд в качестве первичных стабилизаторов (табл. XXXIV). Кроме того, в дополнение к Р8 80 оценивали два других поверхностно-активных вещества (плюроник Р-68 и полисорбат 20, Р8 20). Наконец, оценивали диапазон концентраций Р8 80.
Таблица С. Схема исследования блока С
№ состава ΑΡΙ цитрат фосфат сукцинат Ηϊε αίγ Агд маннит ЫаС1 Р68 Р320 Р380
1 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0 0/ 1
2 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 0 0 65 100 0 о, 1 0
3 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 0 0 65 100 о, 1 0 0
4 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0, 1
5 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0, 05
6 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0, 01
7 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0, 05 0
8 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 120 120 0 0 0, 1 0 0
9 Биоаналог адалимумаба 0 0 10 0 120 120 0 0 0 0 0, 05
10 Биоаналог адалимумаба 0 0 20 0 150 100 0 0 0 0, 05 0
11 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 20 150 100 0 0 0 0 0, 01
12 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 20 120 120 0 0 0 0, 01 0
- 36 029215
Таблица О-1. Измеренный рН для составов блока О в !0, !1 (одна неделя, 40°С) и !2 (две недели, 40°С)
№ состава цитрат фосфат сукцинат ΗΪ3 С1у Агд маннит ЫаС1 Г68 Р320 Р380 ъо Ы 12
1 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0 0,1 5, 19 5, 38 5, 25
2 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0, 1 0 5, 23 5, 28 5, 24
3 8 18 0 0 0 0 65 100 0/ 1 0 0 5χ22 5, 26 5, 20
4 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0, 1 5, 20 5, 33 5, 29
5 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0, 05 5, 23 5, 34 5, 29
б 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0х 01 5, 19 5, 40 5, 27
Ί 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0, 05 0 5, 23 5, 39 5, 42
8 0 0 0 10 120 120 0 0 0/ 1 0 0 5, 19 5, 38 5, 41
9 0 0 10 0 120 120 0 0 0 0 Οχ 05 5, 19 5, 27 5, 24
10 0 0 20 0 150 100 0 0 0 0, 05 0 5, 23 5, 28 5, 24
11 0 0 0 20 150 100 0 0 0 0 0, 01 5,23 5, 33 5, 27
12 0 0 0 20 120 120 0 0 0 0, 01 0 5, 22 5, 29 5, 29
Таблица О-2. Содержание мономеров при δΕО для составов в блоке О в !0, !1 (одна неделя при 40°С) и !2 (две недели при 25°С)
№ состава цитрат фосфат сукцинат ΗΪ3 С1у Агд маннит ИаС1 Р68 Р320 Р380 ю 11 12
1 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0 0х 1 99, 17 97, 45 98, 09
2 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0, 1 0 99, 11 97, 78 98, 09
3 8 18 0 0 0 0 65 100 0, 1 0 0 98, 99 97, 74 97, 92
4 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0х 1 99, 12 98, 67 98, 68
5 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0х 05 99, 05 98, 57 98, 53
6 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 О, 01 99, 05 98, 66 98, 70
7 0 0 0 10 120 120 0 0 0 Οχ 05 0 99, 04 98, 63 98, 50
8 0 0 0 10 120 120 0 0 о, 1 0 0 99, 11 98, 64 98, 55
9 0 0 10 0 120 120 0 0 0 0 Οχ 05 99, 12 98, 56 98, 98
10 0 0 20 0 150 100 0 0 0 Οχ 05 0 99, 10 98, 49 98, 88
11 0 0 0 20 150 100 0 0 0 0 О, 01 99, 07 98, 76 98, 45
12 0 0 0 20 120 120 0 0 0 0, 01 0 99, 11 98, 48
Таблица О-3. Процент чистоты при ВЭЖХ с ОФ для составов в блоке О в !0, !1 (одна неделя при 40°С) и !2 (две недели при 25°С
№ состава цитрат фосфат сукцинат ΗΪ5 С1у Агд маннит ЫаС1 Г68 Р320 Р380 ю и 12
1 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0 о, 1 99, 74 99, 66 98, 93
2 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0, 1 0 99, 59 99, 66 98, 97
3 8 18 0 0 0 0 65 100 0, 1 0 0 99, 58 99, 60 99,22
4 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0/ 1 99, 62 99, 62 98, 99
5 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0х 05 99, 70 99, 61 99, 01
6 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0x01 99, 60 99, 66 99, 00
7 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0,05 0 99, 71 99, 65 98, 99
8 0 0 0 10 120 120 0 0 0, 1 0 0 99, 70 99, 61 99, 03
9 0 0 10 0 120 120 0 0 0 0 0х 05 99, 71 99, 60 99, 03
10 0 0 20 0 150 100 0 0 0 0,05 0 99, 72 99, 60 99, 02
11 0 0 0 20 150 100 0 0 0 0 Οχ 01 99, 72 99, 61 99, 05
12 0 0 0 20 120 120 0 0 0 0,01 0 99, 61 99, 04
- 37 029215
Таблица С-4. Процентное содержание полос легкой цепи (ЬС), тяжелой цепи (НС), негликозилированной НС и других молекул для составов в блоке С в 10, 11 (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ формы Момент времени ЬС НС пдНС Другие
1 ДО 28,55 70, 77 0, 50 0,17
Д1 29, 71 69, 42 0, 57 0,30
Д2 30, 32 68, 80 0, 53 0,35
2 ДО 37,14 62,38 0,49 0,00
Д1 30, 31 69, 38 0, 28 0,03
52 31,60 67, 87 0, 53 0,00
3 ДО 28,95 70, 40 0, 65 0,00
Д1 28, 17 70, 26 0, 58 0, 99
Д2 27, 32 71, 52 0, 56 0,59
4 ДО 29, 56 69, 02 0, 65 0,77
Д1 32,19 66, 09 0, 53 1,19
Д2 31,58 66, 03 0, 57 1,81
5 ДО 36, 54 62, 48 0, 56 0,42
Д1 28,77 69, 28 0, 62 1,33
Д2 23, 76 74, 49 0, 60 1,16
6 ДО 29. 60 68.61 0, 58 1,21
Д1 30, 37 67, 42 0, 59 1, 61
Д2 32,27 66, 08 0, 59 1,06
7 ДО 31, 90 65,50 0, 63 1, 97
Д1 31,26 66, 66 0, 56 1,51
Д2 31, 37 66, 64 0, 67 1,31
8 ъо 31,04 67,38 0, 54 1,04
Д1 30, 34 67,99 0, 62 1,05
Д2 30, 21 67,63 0, 68 1,48
9 ДО 33, 12 65, 34 0, 61 0, 94
Д1 34,01 63, 97 0, 56 1,46
Д2 34,47 63, 77 0, 57 1,19
10 ъо 36, 78 61,61 0, 54 1,07
Д1 39, 25 58,66 0, 53 1,56
Д2 32,83 65, 42 0, 55 1,21
11 ДО 36, 37 61,97 0, 54 1,11
Д1
12 34, 97 63, 14 0, 54 1,36
12 ДО 34,26 64,16 0, 52 1,05
Д1
Д2 34, 90 63, 35 0, 56 1,19
- 38 029215
Таблица О-5. Процентное содержание основных полос, наблюдаемых в профиле с1ЕР составов в блоке О в ΐ0, ΐ1 (одна неделя при 40°С) и ΐ2 (две недели при 25°С)
№ формы рН ЪО Ъ1 Ъ2
1 8,53 1,24 1, 21
8, 36 14,30 12,69 13,67
8,24 64,03 53,50 60,30
8, 14
8,01 15,77 9, 32 19,12
7, 86 3, 73 3,35 4,48
2 8, 52 1, Об 1,37 0, 88
8, 35 13,10 13,30 12,53
8,16 66, 28 59, 68 57,99
7, 97 17,14 19, 60 21,55
7, 83 2, 42 4,78 4, 92
3 8, 51 0, 65 0, 65 1, 03
8, 34 13, 31 14,00 15,31
8,16 65,13 59, 04 60,70
8,14
7, 98 17, 26 18,90 17,56
7, 82 2, 89 5,68 4,16
4 8, 36 1, 87 2,43 1, 00
8, 19 7,74 10, 89 11,69
7,99 61,91 54,27 59,10
7, 82 20, 94 22,72 19, 81
7,66 6, 35 7,98 6, 92
5 8, 44 1, 79 0, 95 071
8,26 13, 33 12,85 10,43
8, 06 61, 67 59, 94 60,12
7, 88 17,49 21,08 20,82
7,69 4,02 4,50 6, 50
Таблица О-5. Процентное содержание основных полос, наблюдаемых в профиле с1ЕР составов в блоке О в ΐ0, ΐ1 (одна неделя при 40°С) и ΐ2 (две недели при 25°С)
№ формы рН ЪО Ъ1 €2
6 8,36 1, 71 4,76
8,21 12,37 12,93 10,95
8,04 62,53 54,16 56,48
7,87 19,24 26,08 17,97
7, 64 4, 15 2,07 6, 50
7 8, 54 0,77 1,19 0, 79
8, 34 7,15 12,32 13,15
8,17 54,73 42,64 60,58
8,02 22,18 29,90 17,28
7, 83 7,12 11,47 4, 77
7, 69 1, 41 2,48 2,11
8 8,55 1,04 2,11
8,39 7, 28 10,69 14,82
8,23 64,01 57,42 55,68
8,05 20, 81 23,86 23,76
7,96 6, 79 5, 37 5,74
9 8,54
8,48 10, 99 7,91
8,31 53, 85 61,43
8,17 31,58 23,83
7,99 8,82
7,85 3,58 3,27
10 8,50 0, 95 2,16
8, 36 9,10 10, 65 15,79
8,18 59, 02 55,35 58,56
8, 02 23,76 24,79 25,66
7, 87 5, 63 7,05
11 8, 58 2,08 1, 68
8,40 9, 74 10,05 9, 67
8, 21 62, 70 56, 96 57,36
8,05 21,39 24,14 25,18
7,99 5,24 6,77 6, 11
- 39 029215
Таблица С-5. Процентное содержание основных полос, наблюдаемых в профиле с1ЕР составов в блоке С в Ю, П (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
Таблица С-6. Блок С схема исследования для исследования Р/Т и перемешивания
№ состава ΑΡΙ цитрат фосфат сукцинат ΗΪ5 С1у Агд маннит ИаС1 Е68 Р520 Р880
1 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0 0,1
2 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0, 1 0
3 Биоаналог адалимумаба 8 18 0 0 0 0 65 100 0,1 0 0
4 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0,1
5 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0, 05
6 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0, 01
Ί Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0, 05 0
8 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 10 120 120 0 0 0,1 0 0
9 Биоаналог адалимумаба 0 0 10 0 120 120 0 0 0 0 0, 05
10 Биоаналог адалимумаба 0 0 20 0 150 100 0 0 0 0, 05 0
11 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 20 150 100 0 0 0 0 0,01
12 Биоаналог адалимумаба 0 0 0 20 120 120 0 0 0 0,01 0
Таблица С-7. Содержание мономеров при §ЕС для выбранных составов в блоке С, которые не обрабатывали (С. покой), подвергали 5 циклам Р/Т или подвергали перемешиванию в течение 24 ч
№ состава цитрат фосфат сукцинат Ηί з С1у Агд маннит ЫаС1 Р68 Р320 Р380 0 Р/Т Перемет.
1 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0 0,1 99,15 99, 03 99,14
4 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0,1 99, 21 99, 11 99,18
8 0 0 0 10 120 120 0 0 0, 1 0 0 99,18 99,14 99,17
11 0 0 0 20 150 100 0 0 0 0 0, 01 99,16 99, 09 99,13
12 0 0 0 20 120 120 0 0 0 0,01 0 99,10
Таблица С-7. Процент чистоты при ВЭЖХ с ОФ для выбранных составов в блоке С, которые не обрабатывали (Р, покой), подвергали 5 циклам Р/Т или подвергали перемешиванию в течение 24 ч
№ состава цитрат фосфат сукцинат Н±з С1у Агд маннит N301 Е68 Р820 Р380 0 Р/Т Перемет.
1 8 18 0 0 0 0 65 100 0 0 0,1 99, 60 99, 72 99, 76
4 0 0 0 10 120 120 0 0 0 0 0,1 99, 56 99, 70 99, 59
8 0 0 0 10 120 120 0 0 0, 1 0 0 99, 58 99, 57 99, 73
11 0 0 0 20 150 100 0 0 0 0 0, 01 99, 72 99, 59 99, 65
12 0 0 0 20 120 120 0 0 0 0,01 0 99, 75 99, 56
Результаты для блока С
Все значения рН были близки к заданным значениям (табл. С-1) с относительно небольшими изменениями, происходящими после хранения. По измерениям §ЕС выявлено определенное предпочтение полисорбатов над Р-68 в отношении стабильности (табл. С-2). Однако различия являются относительно небольшими. Установлено, что составы с сукцинатом (составы 9 и 10) хранились достаточно хорошо, поскольку сохранялось содержание мономеров.
Все данные ВЭЖХ с ОФ были очень близки, делая определение любых различий в стабильности практически невозможным (табл. С-3). Эти данные интерпретируемы только при исследовании в большем масштабе всех блоков отборочных исследований.
Результаты СЕ-δΌδ позволяет предположить, что Р§ 20 для состава хумиры® является лучшим
- 40 029215
стабилизатором при концентрации 0,1% (составы 1-3) (табл. С-4). В остальных случаях различия являются слишком малыми и вариабельными для составления общего заключения.
Как продемонстрировано ранее, результаты для данных сIΕΡ являются достаточно вариабельными, чтобы сделать интерпретацию затруднительной (табл. С-5). Установлено, что изменения у составов с С1у/Агд являются меньшими, чем для составов с использованием других стабилизаторов, таких как маннит. Однако, в целом, выявлено, что стабильность при ΟΕΡ является достаточно хорошей для множества составов в этом исследовании.
Исследования блока С (Р/Т и перемешивание)
Для жидкого состава важно оценить чувствительность к межфазным воздействиям. Выбирали исследования двух типов воздействий. Первое представляет собой перемешивание при 150 об/мин на орбитальной мешалке в течение 24 ч при 2-8°С. Второе представляет собой пять последовательных циклов замораживания и оттаивания (Ρ/Τ), поскольку этот цикл должен приводить к появлению увеличивающихся количеств поврежденного белка, если белок чувствителен к межфазному повреждению. Для оценки из блока С выбирали четыре состава, и они в табл. С-6 выделены синим полужирным шрифтом.
После повторных циклов Ρ/Τ для всех тестируемых составов наблюдали очень небольшое снижение содержания мономеров (табл. С-7). Таким образом, по-видимому вследствие этого воздействия существует небольшая межфазная чувствительность, и что присутствие Р8 80 не критично для защиты. Как и для перемешиваемых образцов потери являются даже меньшими. Тенденции в данных ВЭЖХ с ОФ по существу являются такими же (табл. С-7). Существуют небольшие, если вообще существуют, потери чистоты после воздействия межфазного натяжения.
Исследования составов блока Н
Составы блока Н сфокусированы на трех аспектах составов адалимумаба: (1) повышенные концентрации белков, (2) составы с отсутствием буферов (отличных от белка) и (3) использование различных комбинаций буферов кроме цитрата-фосфата (см. табл. Н).
Таблица Н. Схема исследования блока Н
№ состава ΑΡΙ белок цитрат фосфат сукцинат ΗΪ5 ацетат <31у Агд маннит ЫаС1 Р380
1 + + +· 100 8 18 0 0 0 0 0 65 100 0, 1
2 *** 100 0 0 0 10 0 120 120 0 0 0,1
3 ★ ★ ★ 50 0 0 0 0 0 0 0 65 100 0, 1
4 * + + 50 0 0 0 0 0 120 120 0 0 0,1
5 50 0 0 0 0 0 120 120 0 0 0
6 50 0 0 0 10 10 0 0 65 100 0,1
7 *** 50 0 0 10 10 0 0 0 65 100 0, 1
3 * + + 50 0 10 0 10 0 0 0 65 100 0,1
9 50 0 0 10 0 10 0 0 65 100 0, 1
10 * * * 50 10 0 10 0 0 0 0 65 100 0,1
11 + + +· 50 10 0 0 10 0 0 0 65 100 0, 1
12 *** 50 0 0 10 10 0 120 100 0 0 0,1
*** означает собственный биоаналог адалимумаба
Таблица Н-1. Измеренный рН для составов блока Н в !0, !1 (одна неделя, 40°С) и !2 (две недели, 40°С)
№ состава белок Цитрат Фосфат Сукцинат Гистидин ацетат <31у Агд Маннит ЫаС1 Р380 ъо Ъ1 ¢2
1 100 8 13 0 0 0 0 0 65 100 0, 1 5, 19 5,30 5,29
2 100 0 0 0 10 0 120 12 0 0 0 0, 1 5,20 5, 19 5, 15
3 50 0 0 0 0 0 0 0 65 100 0, 1 5,21 5,23 5,21
4 50 0 0 0 0 0 120 12 0 0 0 0, 1 5,21 5, 41 5, 46
5 50 0 0 0 0 0 120 120 0 0 0 5,21 5,30 5,39
6 50 0 0 0 10 10 0 0 65 100 0, 1 5,20 5,28 5,28
7 50 0 0 10 10 0 0 0 65 100 0, 1 5,21 5,24 5,24
8 50 0 10 0 10 0 0 0 65 100 0, 1 5,20 5, 17 5, 16
9 50 0 0 10 0 10 0 0 65 100 0, 1 5,21 5,24 5,29
10 50 10 0 10 0 0 0 0 65 100 0, 1 5,20 5,24 5,26
11 50 10 0 0 10 0 0 0 65 100 0, 1 5,21 5,24 5,26
12 50 0 0 10 10 0 120 100 0 0 0, 1 5,21 5,26 5,29
- 41 029215
Таблица Н-2. Содержание мономеров при ЗЕС для составов в блоке Н в 10, 11 (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава белок Цитрат Фосфат Сукцинат Гистидин ацетат <31у Агд маннит КаС1 Р380 ¢0 Ϊ.1 ¢2
1 100 8 18 0 0 0 0 0 65 100 0,1 99, 25 98,36 98,42
2 100 0 0 0 10 0 120 120 0 0 0, 1 99, 19 98, 88 98, 47
3 50 0 0 0 0 0 0 0 65 100 0, 1 99, 06 98, 81 98,74
4 50 0 0 0 0 0 120 120 0 0 о, 1 99, 19 99, 06 98,99
5 50 0 0 0 0 0 120 120 0 0 0 99, 26 99, 03 98,96
6 50 0 0 0 10 10 0 0 65 100 0, 1 99, 26 98, 92 98, 86
7 50 0 0 10 10 0 0 0 65 100 0,1 99,14 98, 98 98,93
8 50 0 10 0 10 0 0 0 65 100 0, 1 99,11 98, 93 98,66
9 50 0 0 10 0 10 0 0 65 100 0, 1 99,16 98,79 98,63
10 50 10 0 10 0 0 0 0 65 100 0, 1 99, 10 98,79 98, 49
11 50 10 0 0 10 0 0 0 65 100 0, 1 99, 21 98, 93 98, 18
12 50 0 0 10 10 0 120 100 0 0 0, 1 99, 30 99,22 98,65
Таблица Н-3. Процент чистоты при ВЭЖХ с ОФ для составов в блоке Р в 10, 11 (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ состава белок цитрат фосфат сукцинат гистидин ацетат С1у Агд маннит ИаС1 Р580 ьо Ъ1 Ъ2
1 100 8 18 0 0 0 0 0 65 100 о, 1 99, 36 99, 64 99, 64
2 100 0 0 0 10 0 120 120 0 0 0,1 99, 37 99, 68 99, 74
3 50 0 0 0 0 0 0 0 65 100 0, 1 99, 45 99, 47 99, 70
4 50 0 0 0 0 0 120 120 0 0 0,1 99, 50 99, 69 99, 59
5 50 0 0 0 0 0 120 120 0 0 0 99, 47 99,71 99, 56
6 50 0 0 0 10 10 0 0 65 100 0,1 99, 48 99,56 99, 72
7 50 0 0 10 10 0 0 0 65 100 0, 1 99, 43 99, 45 99, 72
8 50 0 10 0 10 0 0 0 65 100 0,1 99, 43 99,51 99, 72
9 50 0 0 10 0 10 0 0 65 100 0, 1 99, 47 99, 55 99, 72
10 50 10 0 10 0 0 0 0 65 100 0,1 99, 48 99,53 99, 67
11 50 10 0 0 10 0 0 0 65 100 0,1 99, 45 99, 69 99, 60
12 50 0 0 10 10 0 120 100 0 0 0,1 99, 44 99,54 99, 72
- 42 029215
Таблица Н-4. Процентное содержание полос легкой цепи (ЬС), тяжелой цепи (НС), негликозилированной НС и других молекул для составов в блоке Н в Ю, И (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ формы Момент времени ЬС НС пдНС Другие
1 ЕО 32, 87 65,48 0, 54 1, 11
Е1 23, 03 70, 09 0,58 1, 25
Е2 52, 57 47,43 0,00 0, 00
2 ЕО 36, 20 62,40 0,55 0, 86
Е1 29, 64 68,68 0, 57 1,11
Е2 43, 09 55,23 0,57 1, 10
3 ЕО 34, 70 63,55 0, 57 1, 18
Е1 28, 24 69,72 0, 61 1, 57
Е2 34, 25 63, 97 0, 67 1,11
4 ЕО 41, 04 57,61 0,51 0, 84
Е1 27, 53 70, 65 0, 62 1, 15
Е2 34,14 64,01 0, 60 1, 26
5 ЕО 37, 64 60,77 0, 50 1, 09
Е1 23, 07 70,02 0, 61 1, 30
Е2 37, 67 60,76 0, 55 1, 02
б ЕО 31, 64 66, 4 6 0,55 1, 34
Е1 27, 67 70,19 0, 50 1, 64
Е2 34,07 63,49 0, 62 1, 81
7 ЕО 30, 33 69,10 0, 53 0, 00
Е1 27, 14 70, 55 0, 62 1, 69
Е2 46, 41 51,21 0,00 2, 33
8 ЕО 28, 46 71,19 0,35 0, 00
Е1 30, 05 68,71 0, 55 0, 69
Е2 34,14 63, 97 0, 63 1, 25
9 ЕО 27, 74 70, 63 0, 60 1, 03
Е1 27, 43 70,43 0, 61 1, 43
Е2 36, 56 61,59 0,49 1, 36
10 ЕО
Е1 27, 69 70, 46 0, 60 1, 24
Е2
11 ЕО 27, 64 70, 83 0,57 1, 13
Е1 31, 85 66, 08 0, 61 1, 46
Е2 38,58 59, 26 0,52 1, 64
12 Е0 29, 48 68,55 0,58 1, 40
Е1 29,53 63,68 0,53 1, 40
Е2 30, 64 68,2 0 0, 70 0, 46
- 43 029215
Таблица Н-5. Процентное содержание основных полос, наблюдаемых в профиле сГЕР составов в блоке Н в 10, 11 (одна неделя при 40°С) и 12 (две недели при 25°С)
№ формы рй ъо Ъ1
1 8,55 1, 20 1,17 1,21
8,39 9, 57 5,57 8,23
8,23 46, 34 38,13 39, 78
7,99 13, 67 12,64 11, 62
Ί, 31 6, 93 4,61 3, 70
2 8,43 1, 17 1,06 1,38
8, 26 8, 97 3,15 3, 33
8, 09 45, 46 40,27 39, 95
7, 87 13, 37 16, 45 6, 77
7, 72 5, 47 5,39 9, 55
7, 56 1, 64 1,52 3, 33
3 8, 36 0, 80 0,74 0, 61
8, 16 6, 02 6, 03 7, 30
7, 93 35, 60 35,58 37,24
7, 83 11, 75 14,10 13, 15
7, 64 2, 17 4,78 2, 00
7, 51 1,23 1,81
4 8, 40 0, 82 0,74 0, 30
8,22 7, 87 7,33 6, 29
8, 04 42, 46 34,42 35,89
7,89 14,44 13,71 11,34
7,71 3, 18 3,31 2, 69
7,56 0, 98 0, 95
5 8, 42 0, 32 1, 02
8,25 7,22 5, 09
8,07 34,68 23,99
7,91 2, 67 3, 63
7,86 10, 63 7, 83
7,72 2, 52 2, 05
6 8,42 1, 17 1,28 1, 22
3,23 9, 83 3,56 7, 90
3,09 45, 26 40,45 40, 30
7, 94 13, 23 16,50 13,23
7 3,59 1, 79 1,45 1, 90
3,45 11, 74 11,32 11,51
3,23 59, 90 61, 63 56,22
3,05 20, 34 19,49 22,98
7, 92 6, 24 6, 11 7, 39
3 3,58 1, 59 2,94 1, 33
3,44 11, 36 12,83 12,12
3,26 61, 03 60,20 63, 05
3,05 20, 21 24,03 23,45
7,83 5, 25 6,55
9 3, 61 1, 22 1,42 1, 21
3,43 12, 47 12,36 11,00
3,33 56, 64 54,59 55,34
3,10 23, 37 23,31 25,31
7, 94 6, 30 7,83
- 44 029215
Результаты для блока Н
Стабильность рН этих составов была приемлемой (<0,1 единицы) за исключением составов 4 и 5. Они представляют собой составы без буфера с использованием в качестве стабилизаторов С1у и Агд (табл. Н-1). Также наблюдали небольшое повышение рН для состава 1 (состав хумиры® при концентрации белка 100 мг/мл).
Стабильность составов блока Н определяли с использованием ЗЕС и ВЭЖХ с ОФ. Наблюдают небольшое снижение содержания мономеров, где наименее стабильным при использовании ЗЕС являлся состав 1 (табл. Н-2). При 100 мг/мл АРI биоаналога адалимумаба достаточно стабильным являлся состав с гистидиновым буфером, содержащий С1у и Агд. В целом, лучшей комбинацией буферов является Ηΐ8сукцинат (составы 7 и 12). Составы без буфера с С1у и Агд также демонстрируют приемлемую стабильность (табл. Н-2). Данные ВЭЖХ с ОФ показывают, что составы без буфера (4 и 5) могут не являются абсолютно такими, как продемонстрировано посредством ЗЕС (табл. Н-3), с измеримым снижением чистоты, но полагают, что этого достаточно для получения состава с долговременной стабильностью.
Данные СЕ-ЗИЗ выявили по меньшей мере изменение в составе 12, который представляет собой состав с Ηίδ-сукцинатом (табл. Н-4). Наибольшее изменение в П происходит в составе 7, который также представляет собой состав с Ηίδ-сукцинатом, но с использованием в качестве регуляторов тоничности маннита и ЫаС1.
Моделирование РЬ8 Способ РЬ8
Данные для составов адалимумаба в блоках А-Н анализировали совместно с использованием хемометрического способа, называемого частные наименьшие квадраты (РЬЗ).
Опубликованы подробные описания моделирования РЬЗ. См., например, Ка1/. Μ.Η. МиШуапа1с Аиа1у818: А Ргасйсе Ошйе ίοτ СЬшшаш. СатЬпйде ишусгзПу Рге88, №\ν Уогк, рр. 158-162 (1999); З1аН1с, Ь., Υο1ά, К., Ми1пуапа1е йа(а аиа1у818 аий ехрептеи1а1 йе81дп ίη ЬютеЛса1 ге8еагсЬ. Ргод. Мей. СЬет. 1988, 25: 291-338; \Уо1й З. РЬЗ-гедге88юи: а Ьа81с ΐοο1 οί сЬетотеЬтс8. СЬетот. ШеИ. ЬаЬ. Зу8к 2001, 58: 109-130; аий Маг1еи8, Η.; Маг1еи8, М. Ми1йуапа1е Аиа1у818 οί ОнаЛу: Аи Штойисйоп, \УПеу аий Зои8, СЫсЬе81ег, ИК (2001).
Для любой большой матрицы значений, где существует приемлемое количество образцов (совместно формирующих так называемую матрицу X), можно конструировать математические модели, которые описывают наибольшую величину дисперсии соответствующей зависимой переменной(ых) (матрица Υ). Наилучшее отдельное описание зависимости между дисперсией в матрице X и конечном состоянии (матрица Υ) называют первой главной компонентой, РС1. Следующую важную (в отношении описания дисперсии в матрице Υ) компоненту называют второй главной компонентой, РС2, и так далее. Достаточно часто, для объяснения большей части дисперсии в матрице Υ необходимы только одна или две РС. Каждая из этих РС содержит определенный вклад от каждой из переменных из матрицы X. Если переменная в матрице X вносит большой вклад в конструкцию данной РС, тогда ее ранжируют как значимую. Фактически, для данной модели, где модель является комплексом определенного количества РС, для получения адекватного описания матрицы Υ для каждой переменной в матрице X можно рассчитать коэффициенты регрессии. В итоге, РЬЗ берет информацию из матрицы X, рассчитывает желаемое количество РС и конструирует подходящую модель. Модель, включающую все образцы, называют калибровочной моделью [1, 2]. Общий коэффициент детерминации (г2) означает качество модели. Все расчеты РЬЗ проводили с использованием программного обеспечения ии8сгатЬ1ег® (САМО, Согуа1Ь8, ΘΚ). Анализ РЬЗ, проводимый с одной переменной в матрице Υ называют анализом РЬЗ1. Построение модели, которая аппроксимирует несколько переменных в матрице Υ, называют анализом РЬЗ2.
На всех калибровочных моделях стандартными способами проводили полную перекрестную проверку. В кратком изложении, за один раз удаляют по одному образцу, набор данных перекалибровывают и конструируют новую модель. Этот процесс повторяют до тех пор, пока не удалят все калибровочные образцы и представляют как валидационную модель. Таким образом, первый набор, содержащий все образцы, обозначают как калибровочный набор, а другой после перекрестной проверки, как валидационный набор. Для определения статистической значимости любого фактора, используемого в конструировании моделей РЬЗ, описанных выше, использовали алгоритм складного ножа (см., Маг1еи8 е( а1).
Моделирование РЬЗ составов адалимумава (блоки В, С и Ό)
(см. фигуры 3-12)
Примечание: поверхности диаграмм РЬЗ, изображенные на фигурах 3-12, основаны на данных, полученных из блоков В, С и Ό. Далее приведено обсуждение результатов, отображенных на графиках поверхностей РЬЗ, представленных на фигурах 3-12.
Модель РЬЗ 1 - фиг. 3.
Фиг. 3 содержит изображение содержания мономеров в П (модель 1) как функцию концентраций цитрата и фосфата. рН фиксировали на 5,2. Модель демонстрирует, что фосфат и цитрат самостоятельно являлись слабыми дестабилизаторами (не достигая статистической значимости), наряду с тартратом и малеатом. В сравнении с ними, сукцинат, который структурно сходен с цитратом, тартратом и малеатом,
- 45 029215
являлся слабым стабилизатором. Выявлено, что единственным буфером, являющимся значимым стабилизатором, являлся гистидин. Ни один из этих результатов невозможно предсказать на основе литературы или исследования химической структуры каждого буфера. Модель также демонстрирует, что когда вместе используют цитратный и фосфатный буфер, состав является наименее стабильным. Стабильность возрастает, если используют только один буфер, особенно фосфат. Это является неожиданным, так как фосфат обладает небольшой или не обладает буферной емкостью при рН 5,2, тогда как цитратный буфер обладает. Ни одну из этих характеристик невозможно предсказать на основе того, что было известно в данной области.
Модель РЬ8 2 - фиг. 4.
Фиг. 4 содержит изображение содержания мономеров в 12 (модель 2). Подобным образом, модель конструировали с использованием содержание мономеров при 8ЕС в 12 в качестве конечной точки. Эта модель также продемонстрировала, что когда цитрат и фосфат используют вместе, стабильность является наименьшей. Наименьшая стабильность выявлена, когда концентрация цитрата составляет более 10 мМ и концентрация фосфата составляет от 5 до 15 мМ. Стабильность улучшается, когда уменьшают концентрацию цитрата и/или уменьшают или поднимают концентрацию фосфата. Эти результаты позволяет предположить, что предпочтительной является композиция с одним буфером. Наблюдается такая же тенденция в стабилизации буферов, как и с моделью РЬ8 1, где цитрат и фосфат являются слабыми стабилизаторами (статистически не значимо), тогда как гистидин является сильным стабилизатором (статистически значимо).
Модель РЬ8 1 - фиг. 5.
Фиг. 5 представляет собой модель РЬ8 1, демонстрирующую действие гистидина и глицина на стабильность составов. Она содержит изображение содержания мономеров в 11 (модель 1). Эта модель демонстрирует, что комбинация гистидина и глицин обеспечивала очень хорошие результаты в отношении стабильности. Определено, что гистидин (Ηίκ) и глицин (С1у) являются стабилизаторами. Наименьшую стабильность на характеристической поверхности (представленной синим) наблюдают, когда присутствует наименьшая концентрация Ηίκ и С1у. Действие Ηίκ на стабильность является более значительным, где 20 мМ Ηίκ обеспечивают стабилизацию, сравнимую со 120 мМ С1у (см. противоположные вершины диаграммы). Модель демонстрирует, что при использовании обоих эксципиентов существует дополнительный выигрыш в стабильности, где наибольшую стабильность наблюдают, когда концентрация Ηίκ составляет 20 мМ, а концентрация С1у составляет 120 мМ.
Модель РЬ8 1 - фиг. 6.
Фиг. 6 представляет собой модель РЬ8 1, демонстрирующую действие аргинина и сорбита на стабильность составов. Она содержит изображение содержания мономеров в Н (модель 1). Эта модель показала, что аргинин являлся хорошим стабилизатором, тогда как сорбит являлся плохим стабилизатором. Подобным образом, аргинин (Агд) обеспечивает степень стабилизации, которая сходна со степенью стабилизации, выявленной для С1у. Как продемонстрировано этой моделью, наихудшую стабильность наблюдают, когда концентрация Агд является низкой и концентрация сорбита является низкой (синяя область диаграммы). По мере увеличения концентраций каждого эксципиента, возрастает содержание мономеров в ίί. Действие сорбита приблизительно линейно зависит от концентрации, тогда как действие Агд по-видимому возрастает более быстро после превышения концентрации 60 мМ. Несмотря на то, что определено, что сорбит увеличивает стабильность адалимумаба в отношении поддерживаемого содержания мономеров, его способность увеличивать стабильность является меньшей, чем выявлено для С1у и Агд (на основе молярности).
Модель РЬ8 1 - фиг. 7.
Фиг. 7 представляет собой модель РЬ8 1, демонстрирующую действие рН и гистидина на стабильность составов. Она содержит изображение содержания мономеров в Н (модель 1). Эта модель демонстрирует, что гистидин по-видимому является наилучшим буфером, тогда как рН для лучшей стабильности предпочтительно должен составлять 5 или выше.
Модель РЬ8 2 - фиг. 8.
Фиг. 8 представляет собой модель РЬ8 2, демонстрирующую действие рН и гистидина на стабильность составов. Она содержит изображение содержания мономеров в 12 (модель 2). Эта модель демонстрирует, что гистидин по-видимому является лучшим буфером, тогда как рН для лучшей стабильности предпочтительно должен составлять 5 или выше. Результаты демонстрируют, что оптимальный рН находится около 5,2. Из всех буферов, которые исследовали, гистидин обеспечивает наибольшую степень стабилизации. Эта характеристическая поверхность иллюстрирует два важных момента. Первое, стабильность по-видимому является максимальной около рН 5,2, снижаясь при более высоком и более низком рН. Второе, показано, что гистидин обеспечивает значимое увеличение стабильности. Когда гистидин используют при 20 мМ, он обеспечивает заметное увеличение стабильности по сравнению с меньшими концентрациями буфера. Фактически, действие по-видимому является нелинейным, с большей стабилизацией наблюдаемой при концентрациях от 10 до 20 мМ, чем от 0 до 10 мМ. Кроме того, потеря стабильности является более резкой при более высоком рН, чем при более низком рН.
Модель РЬ8 2 - фиг. 9.
- 46 029215
Фиг. 9 представляет собой модель РЬ8 2. демонстрирующую действие трегалозы и Р880 на стабильность составов. Она содержит изображение содержания мономеров в 12. Эта модель демонстрирует. что трегалоза по-видимому является слабым стабилизатором. тогда как Р880 улучшает термостабильность. Характеристическая поверхность. представленная на фиг. 9. демонстрирует. что Р8 80 является мощным стабилизатором для защиты адалимумаба от термического стресса. где максимальную стабильность обеспечивает концентрация 0.1%. Концентрацию Р8 80 не варьировали иначе как 0 и 0.1%. Посредством сравнения эта модель демонстрирует. что стабилизирующее действие трегалозы является очень небольшим. безусловно менее. чем то. что наблюдают для сорбита.
Модель РЬ8 2 - фиг. 10.
Фиг. 10 представляет собой модель РЬ8 2. демонстрирующую действие маннита и Р880 на стабильность составов. Она содержит изображение содержания мономеров в 12 (модель 2). Эта модель демонстрирует. что маннит по-видимому является дестабилизатором. тогда как Р880 улучшает термостабильность. Модель РЬ8 с использованием содержания мономеров при 8ЕС в 12 позволяет исследовать относительное действие любых факторов. включаемых в модель. По мере возрастания концентрации маннита. общая стабильность снижается. При сравнении влияние Р880 на стабильность является достаточно небольшим.
Модель РЬ8 1 - фиг. 11.
Фиг. 11 представляет собой модель РЬ8 1. демонстрирующую действие маннита и ЫаС1 на стабильность составов. Она содержит изображение содержания мономеров в 11 (модель 1). Эта модель демонстрирует. что маннит и ЫаС1 по-видимому являются дестабилизаторами. Стабильность. как демонстрирует содержание мономеров в 11. является наименьшей. когда концентрация маннита приблизительно составляет менее 150 мМ. Подобным образом. добавление ЫаС1 также уменьшает стабильность адалимумаба.
Модель РЬ8 1 - фиг. 12.
Фиг. 12 представляет собой модель РЬ8 1. демонстрирующую действие ЭДТА и метионин на стабильность составов. Она содержит изображение содержания мономеров в 11. В случае ЭДТА по мере увеличения концентрации этой добавки стабильность немного снижается. В отличие от этого. наблюдали. что добавление Ме1 увеличивает стабильность.
Моделирование составов адалимумаба посредством РЬ8 для блоков В-С (см. фиг. 13-28)
Первая модель РЬ8 ("модель РЬ8 А).
В первой модели РЬ8 (модели РЬ8 А) в качестве конечного критерия использовали различие содержания мономеров в 11. В модели использовали три РС. и ее коэффициент корреляции для калибровочного набора составлял 0.83. а значение г для валидационного набора составляло 0.67. Она представляла собой квадратичную модель. включающую элементы взаимодействия рН-буфер и буфер-буфер.
Таблица I. Коэффициенты "Модели РЬ8 А"
Примечание: общие коэффициенты корреляции для каждого линейного фактора включают в первую модель РЬ8 (модель РЬ8 А) с использованием в качестве конечного критерия различий в содержании мономеров при 8ЕС в 11. Факторы. признаваемые статистически значимыми. выделены полужирным шрифтом.
Принимая во внимание коэффициенты корреляции калибровочного и валидационного наборов ка- 47 029215
чество модели является приемлемым. Общие коэффициенты корреляции для различных факторов, включенных в модель, представлены в табл. ί. Следует отметить, что квадратичные и характеризующие взаимодействие члены здесь не приведены. В качестве конечного критерия принимают различие в содержании мономеров, стремясь минимизировать это значение. Таким образом, стабилизаторы демонстрируют отрицательные коэффициенты корреляции, тогда как дестабилизаторы демонстрируют положительные значения г. Из стабилизаторов самыми мощными являются Нк, С1у, Агд и Р8 80, хотя маннит и сукцинат также обладают стабилизирующим действием (табл. ί). В то же время, существуют определенные значимые дестабилизаторы, такие как ЫаС1, цитрат и фосфат. Учитывая, что эти модели являются комбинацией всех данных по стабильности, полученных в различных блоках составов, А-Н, и индивидуальные составы могут отличаться от модели. Хотя таблица коэффициентов корреляция полезна для оценки действия различных факторов, они не отражают нелинейных эффектов и эффектов взаимодействия, таким образом, она полезна для рассмотрения характеристических поверхностей для исследования действия различных параметров более подробно, как представлено характеристическими поверхностями, которые приведены на фигурах 13-28.
Обсуждение модели РЬ8 А - фиг. 13 и 14.
В патенте 8216583, выданном Кгаизе, описана цитрат-фосфатная буферная система, как являющаяся общей для обеспечения стабильности. Исследования авторов демонстрируют, что это неверно. Когда эти два буфера использовали в комбинации наблюдали наихудшую стабильность и эффект мог усугубляться по мере увеличения концентраций буфера по этой модели (фигура 13 [1]). Характеристическая поверхность демонстрирует, что фосфат и цитрат являются одинаково дестабилизирующими в отличие от некоторых более ранних наблюдений, но количественную характеристику этих поверхностей необходимо рассматривать с определенной осторожностью, так как они включают данные всех составов из блоков В-Н.
На фиг. 14 представлено действие рН и Нк. Она демонстрирует, что Нк при низком рН, когда он явно находится за пределами буферной емкости Нк, является дестабилизирующим. И снова этот результат является функцией всех наблюдений рН в этом исследовании, не только тех, которые включают Нк (хотя это могло быть сделано). В соответствии с этой характеристической поверхностью оптимальный рН может находиться ближе к 5,4, чем к 5,2, хотя поверхность в этой области является относительно плоской, что означает пологую характеристическую поверхность от рН 5 до 5,4 (фиг. 14).
Обсуждение модели РЬ8 А - фиг. 15.
На фиг. 15 приведена характеристическая поверхность для С1у и Агд. Исследования повторно демонстрируют, что эти две аминокислоты могут являться мощными стабилизаторами адалимумаба. Следует отметить, что минимальное различие в содержании мономеров (т. е. синяя часть поверхности) достигалось при 100 мМ Агд, но при 200 мМ С1у, что позволяет предполагать, что Агд может являться лучшим стабилизатором для адалимумаба при рН 5,2.
Обсуждение модели РЬ8 А - фиг. 16.
Конечная характеристическая поверхность, представленная для модели РЬ8 А, приведена для демонстрации действия ЫаС1 и Р8 80 (фиг. 16). Она демонстрирует, что стабильность адалимумаба при добавлении ЫаС1 снижается, особенно выше 100 мМ. В то же время Р8 20 при использовании в количестве более 0,04% обеспечивает значимую стабильность.
Вторая модель РЬ8 (модель РЬ8 В).
Во второй модели РЬ8 (модель РЬ8 В) в качестве конечного критерия использовали содержание мономеров в 11 и в 12. В модели использовали четыре РС, и ее коэффициент корреляции для калибровочного набора составлял 0,82, а значение г для валидационного набора составляло 0,67. Она представляла собой квадратичную модель, включающую элементы взаимодействия рН-буфер и буфер-буфер. В отношении качества модели, она является сравнимой с первой моделью РЬ8 А, описанной выше.
Таблица К (Ь). Коэффициенты корреляции "Модели РЬ8 В"
- 48 029215
Конечными критериями для модели РЬ§ В являются общее содержание мономеров в И и 12. Таким образом, стремятся максимизировать эти значения. Это означает, что стабилизаторы обладают положительными коэффициентами корреляции, а дестабилизаторы демонстрируют отрицательные значения г (табл. К). Как и в предыдущей модели, цитрат, фосфат и Ναί',Ί являются значимыми дестабилизаторами. С другой стороны, Ηΐδ, О1у, Агд и Ρδ 20 являются мощными стабилизаторами. В этой модели трегалоза, сорбит и маннит демонстрируют очень небольшое действие. Основными различия является то, что рН в этой модели является значимым фактором и ЭДТА является значимым дестабилизатором, хотя повидимому Мс1 также является стабилизатором.
Обсуждение модели ΡΕδ В - фиг. 17.
Эта модель позволяют предположить, что добавление цитрата обладает незначительным действием на стабильность, если отсутствует фосфат (см. черный край характеристической поверхности фиг. 5). С другой стороны, добавляемый фосфат снижает содержание мономеров (см. правый край), а комбинация является даже более стабилизирующей (фиг. 5). Таким образом, комбинация буферов цитрат-фосфат не является эффективной для стабилизации адалимумаба в отличие от того, что указано в патенте 8216583. По этой модели дестабилизирующее действие фосфата приблизительно в три раза больше, чем цитрата.
Обсуждение модели ΡΕδ В - фиг. 18.
Использование Ηΐδ при низком рН обладает небольшим или вредным действием (фиг. 18 [6\). Однако при использовании при рН 5,2 или выше, Ηΐδ обеспечивает значимое увеличение стабильности (как измеряли по содержанию мономеров при δΕΘ).
Обсуждение модели ΡΕδ В - фиг. 19.
На фиг. 19 представлена характеристическая поверхность для О1у и Агд. Добавление обоих стабилизаторов при высоких концентрациях могло быть благоприятным для стабильности, но непрактичным в отношении тоничности. В этой модели Агд по-видимому является более мощным стабилизатором по сравнению с О1у, так как концентрация 75 мМ Агд обладает таким же действием, как =120 мМ О1у. Модель демонстрирует что хорошо функционирует любой один из них, или что также эффективной является комбинация.
Обсуждение модели ΡΕδ В - фиг. 20.
Модель ΡΕδ В демонстрирует незначительное влияние маннита на стабильность, тогда как Ρδ 80 является эффективным стабилизатором при концентрациях, превышающих приблизительно 0,05% (фиг.
20) . Таким образом, из этих данных можно сделать заключение, что стабильный состав при рН 5,2 может содержать 240 мМ маннит и 0,1% Ρδ 80.
Обсуждение модели ΡΕδ В - фиг. 21.
Во всем проекте выявлено, что Ναί',Ί является дестабилизатором адалимумаба, особенно когда его концентрация достигает 100 мМ или более, как показано на этой характеристической поверхности (фиг.
21) . Хотя тестировали только небольшое количество составов, содержащих ЭДТА, по-видимому этот эксципиент являлся дестабилизирующим, если концентрация не составляла =0,1%. Авторы также отмечают, что действие Мс1 было благоприятным в отношении стабильности, но не доказано, что это являлось достоверным действием, вероятно ввиду относительно небольшого количества анализируемых примеров.
Обсуждение модели ΡΕδ В - фиг. 22.
Последняя характеристическая поверхность для модели ΡΕδ В для рассмотрения представляет собой действие сукцината и Ηΐδ (фиг. 22). Модель включает все значимые взаимодействия буфер-буфер. Эта поверхность демонстрирует, что сукцинат сам по себе обладает небольшим или даже вредным действием (см. передний край диаграммы). Однако подтверждено, что в сочетании с Ηΐδ он увеличивает общую стабильность (например, см. задний край поверхности). Таким образом, по-видимому, буферная система Ηίδ-сукцинат является наиболее подходящей из всех тестируемых до настоящего времени комбинаций буферов.
- 49 029215
Третья модель РЬ8 (модель РЬ8 С).
В третьей модели РЬ8 С в качестве конечного критерия использовали различия в проценте чистоты при ВЭЖХ с ОФ в 11. В модели использовали две РС. и ее коэффициент корреляции для калибровочного набора составлял 0.86. а значение г для валидационного набора составляло 0.67. Она представляла собой квадратичную модель. включающую элементы взаимодействия рН-буфер и буфер-буфер. В отношении качества модели. она является очень сходной с предыдущей моделью.
Таблица Ь. Коэффициенты корреляции "Модели РЬ8 С"
Модель РЬ8 С демонстрирует. что ВЭЖХ с ОФ является индикатором стабильности. даже несмотря на то. что чувствительность может быть меньше. чем для 8ЕС. В модели выявлено. что и фосфат. и цитрат являются дестабилизирующими. где действие фосфата является статистически значимым (таблица Ы). Подобным образом. ацетат является сильным дестабилизатором. как и ЭДТА. Продемонстрировано. что С1у и Агд являются стабилизаторами. но это действие не признано статистически значимым. Выявлено. что только Ηΐδ является значимым стабилизатором (вместе с концентрацией белка).
Обсуждение модели РЬ8 С - фиг. 23.
На фиг. 23[11] приведена характеристическая поверхность для цитрата и фосфата при рН 5.2. Оба буфера являются дестабилизирующими (в соответствии с передним и левым краями диаграммы). При концентрациях выше =10 мМ комбинация становится в достаточной степени дестабилизирующей. В целом. рассчитано. что в этой модели фосфат является более дестабилизирующим (фиг. 11).
Обсуждение модели РЬ8 С - фиг. 24.
Как видно в предыдущей модели. стабильность адалимумаба при снижении рН менее 5.0 уменьшается (фиг. 12). В этой модели стабилизирующее действие Ηΐδ наблюдают для всех значений рН. но более отчетливо. когда рН является меньшим.
Обсуждение модели РЬ8 С - фиг. 25.
На фиг. 25 представлено действие С1у и Агд. Оба эксципиента снижают потерю чистоты по мере роста концентрации и теоретически рассчитано. что они являются приблизительно равносильными. как оценивали по наклону вдоль краев характеристической поверхности. В остальном для достижения оптимальной потери чистоты (синяя область диаграммы) по-видимому необходимо брать меньше Агд (75 мМ). чем С1у (=200 мМ).
Обсуждение модели РЬ8 С - фиг. 26.
На характеристической поверхности на фиг. 26[14] представлено действие маннита и Р8 80. Понятно. что при добавлении Р8 80 значительно увеличивается химическая стабильность. особенно при концентрациях более 0.04%. В то же время маннит также является стабилизирующим. но даже 240 мМ маннит обладает меньшим действием. чем небольшое количество поверхностно-активного вещества.
Обсуждение модели РЬ8 С - фиг. 27.
Хотя полагают. что маннит в составе хумиры® является стабилизатором. ЫаС1 очевидно является дестабилизатором и в этой модели (см. фиг. 27[15]). и в предыдущих моделях РЬ8. Действие существенно. когда концентрация ЫаС1 превосходит 75 мМ или приблизительно.
Обсуждение модели РЬ8 С - фиг. 28.
- 50 029215
На фиг. 28 [16], описывающей действие рН и концентрации белка, представлена последняя характеристическая поверхность для модели РБ8 С. Как можно было видеть ранее, стабильность является лучшей, когда рН превосходит 4,8 или 5,0. В отношении действия белка эта модель прогнозирует, что стабильность на основе ВЭЖХ с ОФ является лучшей при более высоких концентрациях белков. Сходную тенденцию, хотя и достаточно слабую, наблюдали для данных §ЕС (содержание мономеров при И и 12). Таким образом, при концентрациях 100 мг/мл можно достигать профили стабильности сходные, с теми, которые можно получать при 50 мг/мл.
Обобщение результатов для блоков А-Н
В исследованиях составов в блоках А-Н оценивали составы адалимумаба, хранимые при повышенных температурах и содержащиеся в течение одной недели при 40°С или в течение двух недель при 25°С. Стабильность проверяли с использованием §ЕС, ВЭЖХ с ОФ, с1ЕР и СЕ-δΌδ.
Оптимальным рН по-видимому является 5,2±0,2. Из всех протестированных буферных композиций комбинация цитрат-фосфат является хуже почти любой другой анализируемой буферной системы, таким образом, важным аспектом настоящего изобретения является полный отказ от этой комбинированной буферной системы. Наилучшим единственным буфером по-видимому является Н18, хотя буфер НЕсукцинат также обеспечивает очень хорошую стабильность. Даже не содержащие буфера системы, которые основаны на способности белка буферировать состав, по-видимому обладают приемлемыми профилями стабильности в условиях форсированной нагрузки.
Из всех анализируемых стабилизаторов/регуляторов тоничности, очень хорошую стабилизацию адалимумаба демонстрируют Агд и О1у. Оба они функционируют лучше маннита. Маннит по-видимому является стабилизатором, однако авторы выявили, что если его использовать, он должен присутствовать в наибольшей возможной концентрации, но в любом случае, превосходящей приблизительно 150 мМ, а наиболее предпочтительно приблизительно 200 мМ или более. При сравнении ЫаС1 явно является дестабилизатором, особенно когда концентрации превосходят 75-100 мМ; таким образом, ЫаС1, если присутствует, следует регулировать до уровней, ниже приблизительно 75 мМ. Другие полиолы, такие как сорбит и трегалоза, по-видимому, функционируют приблизительно также, как и маннит и, таким образом, ими при желании можно заменять маннит.
Неожиданно полисорбат 80 (Р§ 80) обеспечивает значимую защиту против термического стресса. Хотя механизм стабилизации неизвестен, выявлено, что другие тестируемые поверхностно-активные вещества (Р8 20 и Р-68), не являются приблизительно такими же эффективными, как Р§ 80. Таким образом, выбор Р§80 вместо Р8 20 является предпочтительным признаком настоящего изобретения. Составы по настоящему изобретению предпочтительно содержат по меньшей мере 0,04% (масс./об.) Р8 80.
На основе изысканий в исследованиях составов блоков А-Н далее представлены особенно предпочтительные составы адалимумаба по настоящему изобретению.
Таблица М. Выбранные составы
№ состава. рН Н±з (мЫ) сукцинат (мМ) 31у {мМ> Агд (мМ) маннит (мМ) НаС1 (мМ) РЗ 30 (% масс.>
А 5,2 30 0 240 0 0 0 0,1
Б 5,2 30 0 240 0 0 0 0, 02
С 5,2 30 0 0 0 240 0 0,1
0 5,2 30 15 0 0 220 0 0,1
Е 5,2 30 0 90 0 150 0 о, 1
Е 5,2 30 0 240 0 0 0 0
е 5,2 20 0 0 0 240 0 0
н 5,4 30 0 240 0 0 0 0, 02
I 5,2 30 0 120 30 0 0 0,1
5,2 30 15 90 30 0 0 0,1
к 5,2 30 0 0 0 240 0 0,1
ь 5,2 30 0 0 50 160 0 0,1
м 5,2 30 0 90 100 0 0 0,1
N 5,2 20 0 120 90 0 0 0,1
О 5,4 30 0 120 80 0 0 0,1
Р 5,2 30 0 120 0 0 50 0, 01
0 5,2 30 0 0 0 240 0 0, 02
- 51 029215
Дополнительные компоненты предоставляемых фармацевтических композиций
Составы по изобретению также могут содержать другие буферы (если они конкретно не исключены в описании конкретных вариантов осуществления изобретения), регуляторы тоничности, эксципиенты, фармацевтически приемлемые носители и другие общепринятые неактивные ингредиенты фармацевтических композиций.
Регулятор тоничности представляет собой молекулу, которая вносит вклад в осмоляльность раствора. Осмоляльность фармацевтической композиции предпочтительно регулируют для максимизации стабильности активного ингредиента и/или для минимизации дискомфорта пациента при введении. Как правило, предпочтительно, чтобы фармацевтическая композиция являлась изотоничной с сывороткой, т.е. имела такую же или сходную осмоляльность, которую достигают добавлением регулятора тоничности.
В предпочтительном варианте осуществления осмоляльность предоставляемых составов составляет приблизительно от 180 до приблизительно 420 мОсм. Однако следует понимать, что осмоляльность может быть выше или ниже в зависимости от требований конкретных условий.
Примеры регуляторов тоничности, подходящих для регуляции осмоляльности, в качестве неограничивающих примеров включают аминокислоты (исключая аргинин) (например, цистеин, гистидин и глицин), соли (например, хлорид натрия или хлорид калия) и/или сахара/полиолы (например, сахарозу, сорбит, мальтозу и лактозу).
В предпочтительном варианте осуществления концентрация регулятора тоничности в составе предпочтительно составляет приблизительно от 1 мМ до приблизительно 1 М, более предпочтительно приблизительно от 10 мМ до приблизительно 200 мМ. Регуляторы тоничности хорошо известны в данной области и их производят известными способами, и они доступны у коммерческих поставщиков.
В композициях по изобретению могут присутствовать подходящие регуляторы тоничности, если они конкретно не исключены в описании конкретных вариантов осуществления изобретения.
Также в фармацевтическую композицию можно добавлять эксципиенты, также обозначаемые как химические добавки, совместно растворяющиеся вещества или сорастворители, которые стабилизируют полипептид в растворе (а также в сухой или замороженной формах). Эксципиенты хорошо известны в данной области, и их производят известными способами, и они доступны у коммерческих поставщиков.
Примеры подходящих эксципиентов в качестве неограничивающих примеров включают сахара/полиолы, такие как: сахароза, лактоза, глицерин, ксилит, сорбит, маннит, мальтоза, инозитол, трегалоза, глюкоза; полимеры, такие как: сывороточный альбумин (бычий сывороточный альбумин (ΒδΑ), δΑ человека или рекомбинантный НА), декстран, РУА, гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), полиэтиленимин, желатин, поливинилпирролидон (РУР), гидроксиэтилцеллюлоза (НЕС); неводные растворители, такие как: многоатомные спирты, (например, РЕО, этиленгликоль и глицерин), диметилсульфоксид (ΌΜδΟ) и диметилформамид (ΌΜΡ); аминокислоты, такие как: пролин, Ь-серин, глутамат натрия, аланин, глицин, гидрохлорид лизина, саркозин и гамма-аминомасляная кислота; поверхностно-активные вещества, такие как: Т\уссп®-80 (полисорбат 80), Т\уссп®-20 (полисорбат 20), δΌδ, полисорбаты, полоксамеры и различные эксципиенты, такие как: фосфат калия, ацетат натрия, сульфат аммония, сульфат магния, сульфат натрия, Ν-оксид триметиламина, бетаин, СΗАРδ, монолаурат, 2-О-бета-манноглицерат или любую комбинацию из указанного выше.
В композициях по изобретению могут присутствовать подходящие эксципиенты, если они конкретно не исключены в описании конкретных вариантов осуществления изобретения.
Концентрация одного или нескольких эксципиентов в составе по изобретению предпочтительно составляет приблизительно от 0,001 до 5 массовых процентов, более предпочтительно приблизительно от 0,1 до 2 массовых процентов.
Способы лечения
В другом варианте осуществления изобретение относится к способу лечения млекопитающего, включающему введение млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтических композиций по изобретению, где у млекопитающего может присутствовать заболевание или нарушение, которые можно эффективно лечить адалимумабом.
В предпочтительном варианте осуществления млекопитающее представляет собой человека.
Заболевания или нарушения, которые можно лечить предоставляемыми композициями, в качестве неограничивающих примеров включают ревматоидный артрит, псориатический артрит, анкилозирующий спондилит, болезнь (гранулематоз) Вегенера, болезнь Крона (или воспалительное заболевание кишечника), хроническое обструктивное заболевание легких (СОРО), гепатит С, эндометриоз, астму, кахексию, псориаз и атопический дерматит. Дополнительные заболевания или нарушения, которые можно лечить композициями по настоящему изобретению, включают заболевания, описанные в патентах США №№ 6090382 и 8216583, соответствующие части которых включены в настоящий документ в качестве ссылки.
Предоставляемые фармацевтические композиции можно вводить нуждающемуся в лечении индивидууму посредством системной инъекции, например, посредством внутривенной инъекции; или посредством инъекции или нанесения на соответствующий участок, например, посредством прямой инъекции
- 52 029215
или прямого нанесения на участок, когда участок доступен при хирургическом вмешательстве; или посредством местного применения.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения и/или профилактики ревматоидного артрита, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из предоставляемых композиций адалимумаба.
Терапевтически эффективное количество адалимумаба в предоставляемых композициях зависит от состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, предшествующей терапии и истории болезни пациента и реакции на терапевтическое средство. Подходящую дозу можно регулировать по решению лечащего врача так, что ее можно вводить пациенту один раз или посредством нескольких введений.
В одном из вариантов осуществления эффективное количество адалимумаба на дозу для взрослого составляет приблизительно от 1-500 мг/м2, или приблизительно 1-200 мг/м2, или приблизительно 1-40 мг/м2 или приблизительно 5-25 мг/м2.
Альтернативно, можно вводить постоянную дозу, количество которой может находиться в диапазоне 2-500 мг/дозу, 2-100 мг/дозу или приблизительно 10-80 мг/дозу.
Если дозу следует вводить более одного раза в неделю, иллюстративный диапазон доз является таким же, как указанные выше диапазоны доз или менее, и ее предпочтительно вводят два или более раз в неделю с диапазоном доз 25-100 мг/дозу.
В другом варианте осуществления приемлемая доза для введения посредством инъекции содержит 80-100 мг/дозу или, альтернативно, содержит 80 мг на дозу.
Дозу можно вводить раз в неделю, раз в две недели или разделять несколькими неделями (например, от 2 до 8).
В одном из вариантов осуществления адалимумаб вводят в дозе 40 мг посредством одной подкожной (п/к) инъекции.
В некоторых случаях улучшения состояния пациента можно добиться посредством введения дозы фармацевтической композиции приблизительно до 100 мг от одного до трех раз в неделю в течение периода по меньшей мере трех недель. Для достижения желаемой степени улучшения может быть необходимым лечение в течение более длительных периодов. Для неизлечимых хронических состояний схему лечения можно продолжать бессрочно. Для пациентов детского возраста (возраст 4-17 лет) подходящая схема лечения может включать введение дозы адалимумаба от 0,4 мг/кг до 5 мг/кг один или несколько раз в неделю.
В другом варианте осуществления фармацевтические составы по изобретению можно получать в виде нерасфасованного состава, и, по существу, компоненты фармацевтической композиции присутствуют в количествах выше, чем может требоваться для введения, и их соответствующим образом разбавляют до введения.
Фармацевтические композиции можно вводить в виде одного терапевтического средства или в комбинации с дополнительными терапевтическими средствами по мере необходимости. Таким образом, в одном из вариантов осуществления предоставляемые способы лечения и/или профилактика используют в комбинации с введением терапевтически эффективного количества другого активного средства. Другое активное средство можно вводить до, в течение или после введения фармацевтических композиций по настоящему изобретению. Другое активное средство можно вводить как часть предоставляемой композиции или, альтернативно, в виде отдельного состава.
Введение предоставляемых фармацевтических композиций можно проводить различными способами, включая парентеральное, пероральное, буккальное, назальное, ректальное, интраперитонеальное, интрадермальное, трансдермальное, подкожное, внутривенное, внутриартериальное, внутрисердечное, внутрижелудочковое, внутричерепное, внутритрахеальное, интратекальное введение, внутримышечную инъекцию, внутривитреальную инъекцию и местное введение.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению особенно пригодны для парентерального введения, т. е. подкожно, внутримышечно, внутривенно, интраперитонеально, в спинной мозг, в суставы, интрасиновиально и/или интратекально. Парентеральное введение можно проводить посредством болюсной инъекции или непрерывной инфузии. Фармацевтические композиции для инъекций могут находиться в стандартной лекарственной форме, например, в ампулах или в контейнерах с несколькими дозами с добавленным консервантом. Кроме того, разработан ряд недавних подходов к доставке лекарственного средства и, фармацевтические композиции по настоящему изобретению подходят для введения этими новыми способами, например, ΙηίοοΙ-αικο®. Ссп]сс1®. ручки-инжекторы, такие как СепРеи®, и безыгольные устройства, такие как МебНес1ог® и ВюЕсЮг®. Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению также можно адаптировать для еще не открытых способов введения. Также см. Ьаидег, 1990, 8с1еисе, 249:1527-1533.
Предоставляемые фармацевтические композиции также можно формулировать в качестве депопрепарата. Такие длительно действующие составы можно вводить посредством имплантации (например, подкожно или внутримышечно) или посредством внутримышечной инъекции. Таким образом, например, составы можно модифицировать с использованием подходящих полимерных или гидрофобных материа- 53 029215
лов (например, в виде эмульсии в приемлемом масле) или ионообменных смол, или в виде умеренно растворимых производных, например, в виде умеренно растворимой соли.
Фармацевтические композиции при желании можно предоставлять во флаконе, упаковке или в устройстве-распределителе, которые могут содержать одну или несколько стандартных лекарственных форм, содержащих активный ингредиент. В одном из вариантов осуществления устройствораспределитель может содержать шприц, содержащий однократную дозу жидкого состава, готового к инъекции. Шприц может сопровождаться инструкцией по введению.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к набору или контейнеру, содержащим водную фармацевтическую композицию по изобретению. Концентрация полипептида в водной фармацевтической композиции может варьировать в широком диапазоне, но, ка правило, в пределах диапазона приблизительно от 0,05 до приблизительно 20000 микрограмм на миллилитр (мкг/мл) водного состава. Набор также может сопровождаться инструкциями по применению.
В дополнение к составам, указанным в исследованиях составов блоков А-Н, предоставлены приведенные ниже дополнительные примеры в качестве дополнительных вариантов осуществления изобретения, а также типичные варианты осуществления, которые включены в приложения А-С, которые следует понимать как часть описания.
Примкр 1. Стабилизированный состав адалимумаба (единственный буфер), содержащий полиол, без поверхностно-активного вещества.
Стабильную водную фармацевтическую композицию, содержащую адалимумаб и по существу не содержащую поверхностно-активного вещества с использованием единственного буфера можно получать следующим образом.
Каждый твердый компонент состава можно навешивать до количества, требуемого для данного объема буфера состава. Затем эти компоненты можно комбинировать в стакан или колбу, в которых можно переносить и измерять данный объем буфера состава. В стакан можно добавлять объем деионизированной воды, равный приблизительно Н планируемого данного буфера состава, и компоненты можно растворять с использованием магнитной мешалки. рН буфера можно доводить до планируемого рН состава с использованием 1 молярного гидроксида натрия и/или 1 молярной соляной кислоты. Затем можно доводить объем до конечного объема буфера состава посредством добавления деионизированной воды. Затем после конечного добавления воды раствор можно перемешивать магнитной мешалкой. Затем раствор адалимумаба можно помещать в устройство для диализа (такое как ТНсгто 8с1СпНПс 8П0с-А-Еу/сг ΜΙΝΙ Б1а1у818 Ипй 10000 М\УСО). которое затем можно помещать в контакт с желаемым буфером состава на срок 12 часов при 4°С. Отношение объема буфера состава к объему раствора белка должно составлять не менее 1000:1. Затем устройство для диализа и раствор белка, который оно содержит, можно помещать во второй буфер состава равного объема на дополнительные 12 ч при 4°С.
Затем полученный раствор адалимумаба можно забирать из устройства для диализа и затем можно определять концентрацию адалимумаба с использованием спектроскопии в ультрафиолетовом свете. Затем концентрацию адалимумаба можно доводить до желаемого уровня с использованием центрифугирования (например, Аткоп ИНга 10,000 М\УСО Ссп1п£ида1 СопссШгаЮгз) и/или разбавляя буфером состава.
В табл. 1 ниже представлен образец композиции по изобретению.
Таблица 1
Ингредиент концентрация
Адалимумаб (активный ингредиент) 5 0 мг / мл
Маннит (неактивный ингредиент) 4%
Цитрат (рН 5,2) (единственный буфер) 15 мМ
Композиция, описанная в табл. 1, не содержит комбинации цитратного и фосфатного буферов. Она также не требует присутствия поверхностно-активного вещества.
Пример 2. Стабилизированный состав адалимумаба (единственный буфер) без полиола или поверхностно-активного вещества.
Ингредиент концентрация
Адалимумаб (активный ингредиент) 50 мг/мл
Цитрат (рН 5,2) 15 мМ
Глицин (неактивный ингредиент) 100 мМ
Пример 3. Стабилизированный состав адалимумаба (единственный буфер), содержащий полиол без поверхностно-активного вещества
- 54 029215
Ингредиент концентрация
Адалимумаб (активный ингредиент) 50 мг/мл
Маннит (неактивный ингредиент) 4%
Цитрат (рН 5,2) 15 мМ
Композиции из примеров 2 и 3 обладают долговременной стабильностью и не содержат комбинации цитратного и фосфатного буферов. и не требуют присутствия поверхностно-активного вещества.
Пример 4. Стабилизированный состав адалимумаба (единственный буфер). содержащий поверхностно-активное вещество; без полиола
4А
Ингредиент концентрация
Адалимумаб (активный ингредиент) 50 мг/мл
(Без ингредиента полиола) —
Гистидиновый буфер (рН 5,2) (единственный буфер) 20 мМ
Глицин (стабилизатор) 50 мМ
Аргинин (стабилизатор) 130 мМ
Полисорбат 80 0,1 (8 масс.) (масс./об.)
4В
Ингредиент концентрация
Адалимумаб (активный ингредиент) 5 0 мг/мл
(Без ингредиента полиола) —
Гистидиновыи буфер (рН 5,2) (единственный буфер) 20 мМ
Глицин (стабилизатор) 120 мМ
Аргинин (стабилизатор) 100 мМ
Полисорбат 80 0,1 (¾ масс.) (масс./об.)
4С
Ингредиент концентрация
Адалимумаб (активный ингредиент) 50 мг/мл
(Без ингредиента полиола) —
Гистидиновыи буфер (рН 5,2) (единственный буфер) 10 мМ
Глицин (стабилизатор) 50 мМ
Аргинин (стабилизатор) 130 мМ
Полисорбат 80 0,1 (% масс.) (масс./об.)
4Ό
Ингредиент концентрация
Адалимумаб (активный ингредиент) 50 мг/мл
(Без ингредиента полиола) —
Сукцинатный буфер (рН 5,2) (единственный буфер) 20 мМ
Глицин (стабилизатор) 50 мМ
Аргинин (стабилизатор) 130 ММ
Полисорбат 80 0,1 (% масс.) (масс./об.)
- 55 029215
4Е
Ингредиент концентрация
Адалимумаб (активный ингредиент) 50 мг/мл
(Без ингредиента полиола) —
Сукцинатный буфер (рН 5,2) (единственный буфер) 20 мМ
Глицин (стабилизатор) 120 мМ
Аргинин (стабилизатор) 100 мМ
Полисврбат 80 0,1 (% масс . ) (масс./об.)
4Р
Ингредиент концентрация
Адалимумаб (активный ингредиент) 50 мг/мл
(Без ингредиента полиола) —
Сукцинатный буфер (рН 5,2) (единственный буфер) 10 мМ
Глицин (стабилизатор) 50 мМ
Аргинин (стабилизатор) 130 мМ
Полисорбат 80 0,1 (ΐ масс.) (масс./об.)
Композиции, описанные в примерах 4(а)-4(Г) выше обеспечивают стабильность без необходимости в полиоле и без необходимости в комбинированной буферной системе. Поскольку в настоящем изобретении выявлено, что комбинация цитратного/фосфатного буферов, необходимая в патенте США 8216583 не требуется для стабилизации составов адалимумаба по настоящему изобретению, специалисты в данной области при практическом осуществлении примеров 4(а)-4(Г) могут понять, что в комбинации с гистидиновым и сукцинатным буферами, описываемыми в настоящем документе, можно использовать дополнительные буферы (например, ацетатный, цитратный, малеатный, тартратный и фосфатный буферы); при условии, что в составе не будет использована комбинация цитратного и фосфатного буферов.
Пример 5. Стабилизированный состав адалимумаба (единственный буфер), содержащий поверхностно-активное вещество и полиол
5А
Ингредиент Концентрация
.Адалимумаб (активный ингредиент) 50 мг/мл
Сорбит 65 мМ
Гистидиновый буфер (рН 5,2) (единственный буфер) 20 ММ
Аргинин (стабилизатор) 130 мМ
Полисорбат 80 0,1 (% масс.) (масс./об.)
5В
Ингредиент Концентрация
Адалимумаб (активный ингредиент) 50 мг/мл
Сорбит 65 мМ
Сукцинатный буфер (рН 5,2) (единственный буфер) 20 ММ
Аргинин (стабилизатор) 130 мМ
Полисорбат 80 0,1 (% масс.) (масс./об.)
- 56 029215
Указанное выше описание иллюстративных вариантов осуществления изобретения в исследованиях блоков А-Н, в примерах выше и в приложениях А-С предоставлено только с целью иллюстрации и описания и не предназначено для полного охвата или ограничения изобретения определенными описанными формами. Учитывая приведенные выше указания возможно множество модификаций и вариаций.
Специалистам в данной области на основании обсуждения описания и практического осуществления описываемого в настоящем документе изобретения очевидны другие варианты осуществления изобретения. Следует понимать, что описание и примеры следует рассматривать исключительно как иллюстративные с точным объемом и сущностью изобретения, указанными в приведенной ниже формуле изобретения.
Приложение А. Дополнительные типичные варианты осуществления (описаны в приоритетной заявке υδδΝ 61/698138).
A. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, полиол, поверхностно-активное вещество и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанный буфер не содержит цитрата и фосфата.
B. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, полиол и поверхностно-активное вещество, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция по существу не содержит буфера.
C. Композиция по любому из вариантов осуществления А-В, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
Ό. Композиция по любому из вариантов осуществления А-С, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 2 0 до приблизительно 100 мг/мл.
Е. Композиция по любому из вариантов осуществления А-Ό, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 30 до приблизительно 50 мг/мл.
Р. Композиция по любому из вариантов осуществления А-Е, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
С. Композиция по любому из вариантов осуществления А-Р, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 20 мМ.
H. Композиция по любому из вариантов осуществления А-С, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 10 мМ до приблизительно 20 мМ.
I. Композиция по любому из вариантов осуществления А-С, где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
I. Композиция по варианту осуществления I, где указанный полисорбат представляет собой полисорбат 80.
К. Композиция по любому из вариантов осуществления Λ-ί. где указанный полиол представляет собой сахарный спирт.
Ь. Композиция по варианту осуществления К, где указанный сахарный спирт выбран из группы, состоящей из маннита, сорбита и трегалозы.
М. Композиция по варианту осуществления Ь, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 1 до 10% масс./об. общей композиции.
Ν. Композиция по любому из вариантов осуществления Ь-М, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 2 до 6% масс./об. общей композиции.
O. Композиция по любому из вариантов осуществления Ь-Ν, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 3 до 5% масс./об. общей композиции.
P. Композиция по любому из вариантов осуществления А-О, дополнительно содержащая стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла.
р. Композиция по варианту осуществления Р, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина.
К. Композиция по варианту осуществления Р, где указанная соль выбрана из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия.
8. Композиция по варианту осуществления Р, где указанный ион металла выбран из цинка, магния и кальция.
Т. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, маннит в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об., полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до 50 мкМ и цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит фосфата.
υ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, полиол и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция по существу не содержит поверхностно-активного вещества.
- 57 029215
V. Композиция по варианту осуществления и, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
V. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-Ϋ, где указанный адалимумаб находится
в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл.
X. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-Ϋ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 40 мг/мл.
Υ. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-Υ, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
Ζ. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-Υ, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 20 мМ.
АА. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-Ζ, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 10 мМ до приблизительно 20 мМ.
ВВ. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-АА, где указанный полиол представляет собой сахарный спирт.
СС. Композиция по варианту осуществления ВВ, где указанный сахарный спирт выбран из группы, состоящей из маннита, сорбита и трегалозы.
ΌΌ. Композиция по варианту осуществления СС, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об. общей композиции.
ЕЕ. Композиция по любому из вариантов осуществления СС-ΌΌ, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 2 до 6% мас./об. общей композиции.
РР. Композиция по любому из вариантов осуществления СС-ЕЕ, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 3 до 5% мас./об. общей композиции.
СС. Композиция по любому из вариантов осуществления СС-РР, дополнительно содержащая стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла.
НН. Композиция по варианту осуществления СС, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина.
II. Композиция по варианту осуществления СС, где указанная соль выбрана из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия.
Л. Композиция по варианту осуществления СС, где указанный ион металла выбран из цинка, магния и кальция.
КК. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, маннит в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об. и цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит поверхностно-активного вещества.
ЬЬ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, буфер, стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла, и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция по существу не содержит полиола.
ММ. Композиция по варианту осуществления ЬЬ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
NN. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬ-ММ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл.
00. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬ-ΝΝ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 40 мг/мл.
РР. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬ-00, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
бб. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬ-РР, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 20 мМ.
КК. Композиция по любому из вариантов осуществления ЕР-СО, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 10 мМ до приблизительно 20 мМ.
88. Композиция по варианту осуществления ЬЬ, где указанный стабилизатор выбран из группы, состоящей из аминокислот, солей, ЭДТА и иона металла.
ТТ. Композиция по варианту осуществления 88, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из глицина, аланина и аргинина.
υυ. Композиция по варианту осуществления 88, где указанная соль выбрана из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия.
V. Композиция по варианту осуществления ТТ, где указанный глицин находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 200 мМ.
νν. Композиция по варианту осуществления V, где указанный глицин находится в концентрации приблизительно от 50 до приблизительно 200 мМ.
- 58 029215
XX. Композиция по варианту осуществления δδ, где указанный аргинин находится в концентрации
приблизительно от 1 до приблизительно 250 мМ.
ΥΥ. Композиция по варианту осуществления XX, где указанный аргинин находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 200 мМ.
ΖΖ. Композиция по варианту осуществления ΥΥ, где указанный аргинин находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мМ.
ААА. Композиция по варианту осуществления ИИ, где указанный хлорид натрия находится в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ.
ВВВ. Композиция по варианту осуществления ААА, где указанный хлорид натрия находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 140 мМ.
ССС. Композиция по варианту осуществления ВВВ, где указанный хлорид натрия находится в концентрации приблизительно от 75 до приблизительно 125 мМ.
ΌΌΌ. Композиция по варианту осуществления ИИ, где указанный сульфат натрия находится в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ.
ЕЕЕ. Композиция по варианту осуществления ИИ, где указанный хлорид натрия находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 120 мМ.
РРР. Композиция по варианту осуществления ЕЕЕ, где указанный хлорид натрия находится в концентрации приблизительно от 60 до приблизительно 100 мМ.
000. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬ-РР, дополнительно содержащая поверхностно-активное вещество.
ННН. Композиция по варианту осуществления 000, где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
III. Композиция по варианту осуществления ННН, где указанный полисорбат представляет собой полисорбат 80.
ОТ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, глицин в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 200 мМ, цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит полиола.
ККК. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, аргинин в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 250 мМ, цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит полиола.
ЕЬЬ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, хлорид натрия в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ, цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция, по существу, не содержит полиола.
МММ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, хлорид натрия в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до 50 мкМ, цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит полиола.
ΝΝΝ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, полиол, поверхностно-активное вещество, стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла, и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, тартрат и малеат, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6.
ООО. Композиция по варианту осуществления ΝΝΝ, где буфер не содержит комбинации цитрата и фосфата.
РРР. Композиция по варианту осуществления ΝΝΝ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
000. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-РРР, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл.
ККК. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-000, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 40 мг/мл.
δδδ. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-ККК, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
ТТТ. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-δδδ, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 20 мМ.
- 59 029215
иии. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-ТТТ. где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 10 мМ до приблизительно 20 мМ.
УУУ. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-υυυ. где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
\ν\ν\ν. Композиция по варианту осуществления УШ. где указанный полисорбат представляет собой полисорбат 80.
XXX. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-ШШШ. где указанный полиол представляет собой сахарный спирт.
ΥΥΥ. Композиция по варианту осуществления XXX. где указанный сахарный спирт выбран из группы. состоящей из маннита. сорбита и трегалозы.
ΖΖΖ. Композиция по варианту осуществления XXX. где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 1 до 10% масс./об. общей композиции.
АААА. Композиция по любому из вариантов осуществления XXX-ΖΖΖ. где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 2 до 6% масс./об. общей композиции.
ВВВВ. Композиция по любому из вариантов осуществления ΥΥΥ-АААА. где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 3 до 5% масс./об. общей композиции.
СССС. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-ВВВВ. где указанный стабилизатор представляет собой ЭДТА.
ΌΌΌΌ. Композиция по варианту осуществления СССС. где указанный ЭДТА находится в концентрации приблизительно от 0.01% до приблизительно 0.5%.
ЕЕЕЕ. Композиция по варианту осуществления ΌΌΌΌ. где указанный ЭДТА находится в концентрации приблизительно от 0.05% до приблизительно 0.25%.
РРРР. Композиция по варианту осуществления ЕЕЕЕ. где указанный ЭДТА находится в концентрации приблизительно от 0.08% до приблизительно 0.2%.
СССС. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝВВВВ. где указанный стабилизатор представляет собой метионин.
НННН. Композиция по варианту осуществления СССС. где указанный метионин находится в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10 мг/мл.
ΙΙΙΙ. Композиция по варианту осуществления СССС. где указанный метионин находится в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 5 мг/мл.
ЛЛ. Стабильная водная фармацевтическая композиция. содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл. полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 50 мкМ. маннит в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об.. ЭДТА в концентрации приблизительно от 0.01% до приблизительно 0.5%. цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ. и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5.5.
КККК. Стабильная водная фармацевтическая композиция. содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл. полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 50 мкМ. маннит в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об.. метионин в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10 мг/мл. цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ. и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5.5.
ЬЕШ Стабильная водная фармацевтическая композиция. содержащая адалимумаб. полиол и буфер. выбранный из группы. состоящей из цитрата. фосфата. сукцината. тартрата и малеата. где рН указанной композиции составляет приблизительно 3.5.
ММММ. Композиция по варианту осуществления ЬЕРЬ. где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
ΝΝΝΝ. Композиция по любому из вариантов осуществления ЕЕЕЬ-ММММ. где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл.
ОООО. Композиция по любому из вариантов осуществления ЕЕЕЬ-ΝΝΝΝ. где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 40 мг/мл.
РРРР. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЕРЬ-ОООО. где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
ΩΩΩΩ. Композиция по любому из вариантов осуществления ЕЬЕЕ-РРРР. где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 20 мМ.
ККРК. Композиция по любому из вариантов осуществления ЕЕЕЕ-СССС. где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 10 мМ до приблизительно 20 мМ.
8888. Композиция по любому из вариантов осуществления ЕЕЕЬ-КККК. где указанный полиол представляет собой сахарный спирт.
ТТТТ. Композиция по варианту осуществления 8888. где указанный сахарный спирт выбран из группы. состоящей из маннита. сорбита и трегалозы.
υυυυ. Композиция по варианту осуществления ТТТТ. где указанный маннит находится в концен- 60 029215
трации приблизительно от 1 до приблизительно 10% мас./об. общей композиции.
УУУУ. Композиция по любому из вариантов осуществления ТТТТ-υυυυ, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 2 до приблизительно 6% мас./об. общей композиции.
\ν\ν\ν\ν. Композиция по любому из вариантов осуществления ТТТТ-\У\У. где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 3 до приблизительно 5% масс./об. общей композиции.
ХХХХ. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬЬЬ-^^^^, дополнительно содержащая стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла.
ΥΥΥΥ. Композиция по варианту осуществления ХХХХ, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина.
ΖΖΖΖ. Композиция по варианту осуществления ХХХХ, где указанная соль выбрана из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия.
ААААА. Композиция по варианту осуществления ХХХХ, где указанный ион металла выбран из цинка, магния и кальция.
ВВВВВ. Композиция по любому из вариантов осуществления ТТТТ-ААААА, дополнительно содержащая поверхностно-активное вещество.
ССССС. Композиция по варианту осуществления ВВВВВ, где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
ΌΌΌΌΌ. Композиция по варианту осуществления ССССС, где указанный полисорбат представляет собой полисорбат 80.
Приложение В. Дополнительные типичные варианты осуществления (Описаны в приоритетной заявке υδδΝ 61/770421).
A. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, полиол, поверхностно-активное вещество и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанный буфер не содержит цитрата и фосфата.
B. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, полиол и поверхностно-активное вещество, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция по существу не содержит буфера.
C. Композиция по любому из вариантов осуществления А-В, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
Ό. Композиция по любому из вариантов осуществления А-С, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл.
Ε. Композиция по любому из вариантов осуществления А-Ό, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 30 до приблизительно 50 мг/мл.
Р. Композиция по любому из вариантов осуществления А-Е, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
О. Композиция по любому из вариантов осуществления А-Р, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 20 мМ.
H. Композиция по любому из вариантов осуществления А-О, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 10 мМ до приблизительно 20 мМ.
I. Композиция по любому из вариантов осуществления А-Н, где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
I. Композиция по варианту осуществления I, где указанный полисорбат представляет собой полисорбат 80.
К. Композиция по любому из вариантов осуществления А-Г где указанный полиол представляет собой сахарный спирт.
Ь. Композиция по варианту осуществления К, где указанный сахарный спирт выбран из группы, состоящей из маннита, сорбита и трегалозы.
М. Композиция по варианту осуществления Ь, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 1 до 10% масс./об. общей композиции.
Ν. Композиция по любому из вариантов осуществления Ь-М, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 2 до 6% масс./об. общей композиции.
O. Композиция по любому из вариантов осуществления Ь-Ν, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 3 до 5% масс./об. общей композиции.
P. Композиция по любому из вариантов осуществления А-О, дополнительно содержащая стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла.
р. Композиция по варианту осуществления Р, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина.
К. Композиция по варианту осуществления Р, где указанная соль выбрана из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия.
- 61 029215
δ. Композиция по варианту осуществления Р, где указанный ион металла выбран из цинка, магния и кальция.
Т. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, маннит в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об., полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до 50 мкМ и цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит фосфата.
и. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, полиол и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, гистидина, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция, по существу, не содержит поверхностно-активного вещества.
V. Композиция по варианту осуществления и, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
V. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-ν, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл.
X. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-ν, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 40 мг/мл.
Υ. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-Х, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
Ζ. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-Υ, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 20 мМ.
АА. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-Ζ, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 10 мМ до приблизительно 20 мМ.
ВВ. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-АА, где указанный полиол представляет собой сахарный спирт.
СС. Композиция по варианту осуществления ВВ, где указанный сахарный спирт выбран из группы, состоящей из маннита, сорбита и трегалозы.
ΩΩ. Композиция по варианту осуществления СС, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об. общей композиции.
ЕЕ. Композиция по любому из вариантов осуществления СС-ЭО, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 2 до 6% мас./об. общей композиции.
РР. Композиция по любому из вариантов осуществления СС-ЕЕ, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 3 до 5% мас./об. общей композиции.
ОО. Композиция по любому из вариантов осуществления υ-РР, дополнительно содержащая стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла.
НН. Композиция по варианту осуществления ОО, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина.
ΙΙ. Композиция по варианту осуществления ОО, где указанная соль выбрана из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия.
II. Композиция по варианту осуществления ОО, где указанный ион металла выбран из цинка, магния и кальция.
КК. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, маннит в концентрации приблизительно от 1 до 10% масс./об. и цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит поверхностно-активного вещества.
ЬЬ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, буфер, стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла, и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6, и где указанная композиция по существу не содержит полиола.
ММ. Композиция по варианту осуществления ЬЬ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
NN. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬ-ММ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл.
ОО. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬ-ΝΝ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 40 мг/мл.
РР. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬ-ОО, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
^^. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬ-РР, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 20 мМ.
КК. Композиция по любому из вариантов осуществления ^^-^^, где указанный буфер находится в
- 62 029215
концентрации приблизительно от 10 мМ до приблизительно 20 мМ.
ЗЗ. Композиция по варианту осуществления ЬЬ, где указанный стабилизатор выбран из группы, состоящей из аминокислот, солей, ЭДТА и иона металла.
ТТ. Композиция по варианту осуществления ТТ, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из глицина, аланина и аргинина.
ии. Композиция по варианту осуществления ТТ, где указанная соль выбрана из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия.
νν. Композиция по варианту осуществления ТТ, где указанный глицин находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 200 мМ.
ΥΥ. Композиция по варианту осуществления νν, где указанный глицин находится в концентрации приблизительно от 50 до приблизительно 200 мМ.
XX. Композиция по варианту осуществления ТТ, где указанный
аргинин находится в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 250 мМ.
ΥΥ. Композиция по варианту осуществления XX, где указанный аргинин находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 200 мМ.
ΖΖ. Композиция по варианту осуществления ΥΥ, где указанный аргинин находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мМ.
ААА. Композиция по варианту осуществления ии, где указанный хлорид натрия находится в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ.
ВВВ. Композиция по варианту осуществления ААА, где указанный хлорид натрия находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 140 мМ.
ССС. Композиция по варианту осуществления ААА, где указанный хлорид натрия находится в концентрации приблизительно от 75 до приблизительно 125 мМ.
ΌΌΌ. Композиция по варианту осуществления ии, где указанный сульфат натрия находится в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ.
ЕЕЕ. Композиция по варианту осуществления ии, где указанный хлорид натрия находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 120 мМ.
РРР. Композиция по варианту осуществления ЕЕЕ, где указанный хлорид натрия находится в концентрации приблизительно от 60 до приблизительно 100 мМ.
ООО. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬ-РР, дополнительно содержащая поверхностно-активное вещество.
ННН. Композиция по варианту осуществления ООО, где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
III. Композиция по варианту осуществления ННН, где указанный полисорбат представляет собой полисорбат 80.
III. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, глицин в концентрации приблизительно
от 20 до приблизительно 200 мМ, цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция, по существу, не содержит полиола.
ККК. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, аргинин в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 250 мМ, цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция, по существу, не содержит полиола.
ЬЬЬ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, хлорид натрия в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ, цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит полиола.
МММ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, хлорид натрия в концентрации приблизительно от 5 до приблизительно 150 мМ, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до 50 мкМ, цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит полиола.
ΝΝΝ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, полиол, поверхностно-активное вещество, стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла, и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6.
000. Композиция по варианту осуществления ΝΝΝ, где буфер не содержит комбинации цитрата и
- 63 029215
фосфата.
РРР. Композиция по варианту осуществления ΝΝΝ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
ООО. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-РРР, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл.
ККК. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-ΟΟΟ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 40 мг/мл.
888. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-ΚΚΚ, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
ТТТ. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-888, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 20 мМ.
иии. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-ТТТ, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 10 мМ до приблизительно 20 мМ.
УУУ. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-υυυ, где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
ΥΥΥ. Композиция по варианту осуществления УУУ, где указанный полисорбат представляет собой полисорбат 80.
XXX. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-ΥΥΥ, где указанный полиол представляет собой сахарный спирт.
ΥΥΥ. Композиция по варианту осуществления XXX, где указанный сахарный спирт выбран из группы, состоящей из маннита, сорбита и трегалозы.
ΖΖΖ. Композиция по варианту осуществления ΥΥΥ, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 1 до 10% масс./об. общей композиции.
АААА. Композиция по любому из вариантов осуществления ΥΥΥ-ΖΖΖ, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 2 до 6% масс./об. общей композиции.
ВВВВ. Композиция по любому из вариантов осуществления ΥΥΥАААА, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 3 до 5% мас./об. общей композиции.
СССС. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-ВВВВ, где указанный стабилизатор представляет собой ЭДТА.
ΌΌΌΌ. Композиция по варианту осуществления СССС, где указанный ЭДТА находятся в концентрации приблизительно от 0,01% до приблизительно 0,5%.
ЕЕЕЕ. Композиция по варианту осуществления ΌΌΌΌ, где указанный ЭДТА находится в концентрации приблизительно от 0,05% до приблизительно 0,25%.
РРРР. Композиция по варианту осуществления ЕЕЕЕ, где указанный ЭДТА находится в концентрации приблизительно от 0,08% до приблизительно 0,2%.
СССС. Композиция по любому из вариантов осуществления ΝΝΝ-ВВВВ, где указанный стабилизатор представляет собой метионин.
НННН. Композиция по варианту осуществления СССС, где указанный метионин находится в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10 мг/мл.
ΙΙΙΙ. Композиция по варианту осуществления СССС, где указанный метионин находится в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 5 мг/мл.
ЛЛ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 50 мкМ, маннит в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об., ЭДТА в концентрации приблизительно от 0,01% до приблизительно 0,5%, цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5.
КККК. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 50 мкМ, маннит в концентрации приблизительно от 1 до 10% мас./об., метионин в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10 мг/мл, цитрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5.
ЬЬЬЬ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб, полиол и буфер, выбранный из группы, состоящей из цитрата, фосфата, сукцината, тартрата и малеата, где рН указанной композиции составляет приблизительно 3,5.
ММММ. Композиция по варианту осуществления ЬЬЬЬ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
ΝΝΝΝ. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬЬЬ-ММММ, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/мл.
ОООО. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬЬЬ-ΝΝΝΝ, где указанный адали- 64 029215
мумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 40 мг/мл.
РРРР. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬЬЬ-0000, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
ΩΩΩΩ. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬЬЬ-РРРР, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 20 мМ.
ККРК. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬЬЬ-СССС, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 10 мМ до приблизительно 20 мМ.
δδδδ. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬЬЬ-КККК, где указанный полиол представляет собой сахарный спирт.
ТТТТ. Композиция по варианту осуществления δδδδ, где указанный сахарный спирт выбран из группы, состоящей из маннита, сорбита и трегалозы.
ииии. Композиция по варианту осуществления ТТТТ, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10% мас./об. общей композиции.
νννν. Композиция по любому из вариантов осуществления ТТТТ-υυυυ, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 2 до приблизительно 6% мас./об. Общей композиции.
\ν\ν\ν\ν. Композиция по любому из вариантов осуществления ТТТТ-νννν, где указанный маннит находится в концентрации приблизительно от 3 до приблизительно 5% мас./об. общей композиции.
ХХХХ. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬЬЬ-^Ψ^Ψ, дополнительно содержащая стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла.
ΥΥΥΥ. Композиция по варианту осуществления ХХХХ, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина.
ΖΖΖΖ. Композиция по варианту осуществления ХХХХ, где указанная соль выбрана из группы, состоящей из хлорида натрия и сульфата натрия.
ААААА. Композиция по варианту осуществления ХХХХ, где указанный ион металла выбран из цинка, магния и кальция.
ВВВВВ. Композиция по любому из вариантов осуществления ЬЬЬЬ-ААААА, дополнительно содержащая поверхностно-активное вещество.
ССССС. Композиция по варианту осуществления ВВВВВ, где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
ΌΌΌΌΌ. Композиция по варианту осуществления ССССС, где указанный полисорбат представляет собой полисорбат 80.
ЕЕЕЕЕ. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 50 мкМ; полиол, выбранный из сорбита, маннита или трегалоза в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 10% мас./об., и по меньшей мере один аминокислотный стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из (а) аргинина в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 250 мг/мл и (Ь) глицина в концентрации приблизительно от 20 до 200 мг/мл, и гистидиновый буфер или сукцинатный буфер в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5.
РРРРР. Композиция по варианту осуществления ЕЕЕЕЕ, где полиол представляет собой сорбит, и композиция не содержит или по существу не содержит никакой комбинации цитратного/фосфатного буферов, и состав содержит аргинин или глицин, но не оба.
ССССС. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 50 мкМ, аргинин в концентрации приблизительно от 1 до приблизительно 250 мг/мл, глицин в концентрации приблизительно от 20 до 200 мг/мл и гистидиновый буфер или сукцинатный буфер в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, и где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и указанная композиция не содержит или по существу не содержит полиола.
ННННН. Композиция по варианту осуществления ССССС, где композиция не содержит или по существу не содержит никакой комбинации цитратного/фосфатного буферов.
Приложение С. Дополнительные типичные варианты осуществления (Описаны в приоритетной заявке υδδΝ 61/769581).
A. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб и единственный буфер.
B. Композиция по варианту осуществления А, где указанный единственный буфер выбран из группы, состоящей из сукцината, гистидина, цитрата, фосфата, тартрата и малеата.
C. Композиция по любому из предшествующих вариантов осуществления, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 6.
Ό. Композиция по любому из предшествующих вариантов осуществления, где указанный адалимумаб, содержащийся в указанных фармацевтических композициях теряет не более 20% своей активности
- 65 029215
относительно активности композиции в начале хранения.
Е. Композиция по любому из предшествующих вариантов осуществления, дополнительно содержащая поверхностно-активное вещество.
Р. Композиция по варианту осуществления Е, где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
С. Композиция по варианту осуществления Р, где указанный полисорбат представляет собой полисорбат 80.
H. Композиция по любому из предшествующих вариантов осуществления, дополнительно содержащая полиол.
I. Композиция по варианту осуществления Н, где указанный полиол представляет собой сахарный спирт.
I. Композиция по варианту осуществления I, где указанный сахарный спирт представляет собой сорбит.
К. Композиция по любому из предшествующих вариантов осуществления, дополнительно содержащая сахар.
Ь. Композиция по варианту осуществления К, где указанный сахар выбран из группы, состоящей из сахарозы и трегалозы.
М. Композиция по любому из предшествующих вариантов осуществления, где указанный адалимумаб находится в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл.
Ν. Композиция по любому из предшествующих вариантов осуществления, где указанный буфер находится в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ.
O. Композиция по любому из вариантов осуществления А-Ν, дополнительно содержащая стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из аминокислот, солей, этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и иона металла.
P. Композиция по варианту осуществления О, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из глицина, аланина, глутамата, аргинина и метионина.
р. Композиция по варианту осуществления О, где указанный ион металла выбран из цинка, магния и кальция.
К. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 0,01% мас./об. до 0,5% мас./об. по массе всего состава и сукцинат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит никаких других буферов.
8. Стабильная водная фармацевтическая композиция,
содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 0,01% масс./об. до 0,5% масс./об. по массе всего состава и гистидин в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит никаких других буферов.
Т. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая адалимумаб в концентрации приблизительно от 20 до приблизительно 150 мг/мл, полисорбат 80 в концентрации приблизительно от 0,01% мас./об. до 0,5% мас./об. по массе всего состава и тартрат в концентрации приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ, где рН указанной композиции составляет приблизительно от 5 до приблизительно 5,5, и где указанная композиция по существу не содержит никаких других буферов.
и. Способ лечения млекопитающего, включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества композиции по любому из предшествующих вариантов осуществления, где указанное млекопитающее страдает заболеванием или нарушением, которое можно эффективно лечить адалимумабом.
V. Способ по варианту осуществления и, где указанное заболевание или нарушение выбрано из группы, состоящей из ревматоидного артрита, псориатического артрита, анкилозирующего спондилита, болезни (гранулематоза) Вегенера, болезни Крона (или воспалительного заболевания кишечника), хронического обструктивного заболевания легких (СОРБ), гепатита С, эндометриоза, астмы, кахексия, псориаза и атопического дерматита.

Claims (14)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Водная буферная фармацевтическая композиция, содержащая:
    (ί) адалимумаб;
    (ίί) буфер, содержащий только гистидин; и
    (ίίί) стабилизатор, состоящий из аминокислоты, выбранной из глицина, аргинина, метионина; где композиция не содержит полиол и имеет рН от 5 до 6.
  2. 2. Композиция по п.1, осмоляльность которой составляет от 180 до 420 мОсм, в которой концентра- 66 029215
    ция адалимумаба составляет от 30 до 50 мг/мл и доза содержит от 10 до 80 мг адалимумаба.
  3. 3. Композиция по п.2, содержащая до 100 мМ хлорида натрия, и где аминокислота состоит только из глицина.
  4. 4. Водная буферная фармацевтическая композиция, содержащая:
    (ί) адалимумаб;
    (ίί) буфер, состоящий только из гистидина; и (ίίί) стабилизатор, состоящий из полиола;
    где композиция не содержит кислоту, отличную от гистидина, и имеет рН от 5 до 6.
  5. 5. Композиция по п.4, где полиол представляет собой сорбит, маннит или трегалозу.
  6. 6. Композиция по п.5, где полиол представляет собой сорбит.
  7. 7. Композиция по п.4, осмоляльность которой составляет от 180 до 420 мОсм, в которой концентрация адалимумаба составляет от 30 до 50 мг/мл и доза содержит от 10 до 80 мг адалимумаба.
  8. 8. Композиция по п.7, содержащая до 100 мМ хлорида натрия, и где полиол представляет собой сорбит.
  9. 9. Композиция по п.7, содержащая до 100 мМ хлорида натрия, и где полиол представляет собой маннит.
  10. 10. Водная буферная фармацевтическая композиция, содержащая:
    (ί) адалимумаб;
    (ίί) буфер, состоящий только из гистидина; и (ίίί) стабилизатор, состоящий из:
    (a) аминокислоты, выбранной из глицина, аргинина и метионина; и
    (b) полиола,
    где композиция имеет рН от 5 до 6.
  11. 11. Композиция по п.1 или 10, где аминокислота представляет собой глицин.
  12. 12. Композиция по п.4 или 11, дополнительно содержащая соль, выбранную из хлорида натрия и сульфата натрия, в концентрации до 150 мМ.
  13. 13. Композиция по п.10, осмоляльность которой составляет от 180 до 420 мОсм, в которой концентрация адалимумаба составляет от 30 до 50 мг/мл и доза содержит от 10 до 80 мг адалимумаба.
  14. 14. Композиция по п.13, содержащая до 100 мМ хлорида натрия, где полиол представляет собой маннит и где аминокислота представляет собой глицин.
    - 67 029215
    Действие цитрата/фосфата (модель Ρίδΐ)
    98.285 ............98.319 98.336 98.353...........98.370
    Характеристическая поверхность
EA201590518A 2012-09-07 2013-09-06 Стабильные водные составы адалимумаба EA029215B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261698138P 2012-09-07 2012-09-07
US201361769581P 2013-02-26 2013-02-26
US201361770421P 2013-02-28 2013-02-28
PCT/US2013/058618 WO2014039903A2 (en) 2012-09-07 2013-09-06 Stable aqueous formulations of adalimumab

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201590518A1 EA201590518A1 (ru) 2016-05-31
EA029215B1 true EA029215B1 (ru) 2018-02-28

Family

ID=50237778

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201791717A EA201791717A1 (ru) 2012-09-07 2013-09-06 Стабильные водные составы адалимумаба
EA201590518A EA029215B1 (ru) 2012-09-07 2013-09-06 Стабильные водные составы адалимумаба

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201791717A EA201791717A1 (ru) 2012-09-07 2013-09-06 Стабильные водные составы адалимумаба

Country Status (31)

Country Link
US (39) US20140186361A1 (ru)
EP (2) EP3701968A1 (ru)
JP (3) JP6463268B2 (ru)
KR (3) KR102238677B1 (ru)
CN (1) CN104768576A (ru)
AR (1) AR092470A1 (ru)
AU (3) AU2013312300A1 (ru)
BR (1) BR112015004984A2 (ru)
CA (2) CA3153799A1 (ru)
CL (1) CL2015000574A1 (ru)
CY (1) CY1123407T1 (ru)
DK (1) DK2892550T3 (ru)
DO (1) DOP2015000051A (ru)
EA (2) EA201791717A1 (ru)
EC (1) ECSP15013227A (ru)
ES (1) ES2784861T3 (ru)
HK (1) HK1210601A1 (ru)
HR (1) HRP20200434T1 (ru)
HU (1) HUE049282T2 (ru)
IL (2) IL237583B (ru)
LT (1) LT2892550T (ru)
MX (1) MX2015003007A (ru)
PE (2) PE20191815A1 (ru)
PL (1) PL2892550T3 (ru)
PT (1) PT2892550T (ru)
RS (1) RS60226B1 (ru)
SG (2) SG11201501715QA (ru)
SI (1) SI2892550T1 (ru)
TW (2) TWI698253B (ru)
UY (1) UY35351A (ru)
WO (1) WO2014039903A2 (ru)

Families Citing this family (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040033228A1 (en) 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
WO2012149197A2 (en) 2011-04-27 2012-11-01 Abbott Laboratories Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins
AU2013255413C1 (en) 2012-03-07 2016-03-24 Cadila Healthcare Limited Pharmaceutical formulations of TNF-alpha antibodies
US9150645B2 (en) 2012-04-20 2015-10-06 Abbvie, Inc. Cell culture methods to reduce acidic species
US9067990B2 (en) 2013-03-14 2015-06-30 Abbvie, Inc. Protein purification using displacement chromatography
US9181572B2 (en) 2012-04-20 2015-11-10 Abbvie, Inc. Methods to modulate lysine variant distribution
WO2013176754A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Abbvie Inc. Novel purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography
US9512214B2 (en) 2012-09-02 2016-12-06 Abbvie, Inc. Methods to control protein heterogeneity
TWI698253B (zh) 2012-09-07 2020-07-11 美商柯赫勒斯生物科學有限公司 阿達木單抗（ａｄａｌｉｍｕｍａｂ）之穩定水性調配物
BR112015017619A2 (pt) * 2013-01-24 2017-11-21 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd formulação líquida, uso de uma formulação, e, kit
WO2014143205A1 (en) 2013-03-12 2014-09-18 Abbvie Inc. Human antibodies that bind human tnf-alpha and methods of preparing the same
WO2014151878A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosacharides
US9017687B1 (en) 2013-10-18 2015-04-28 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography
EP3052640A2 (en) 2013-10-04 2016-08-10 AbbVie Inc. Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins
US10376582B2 (en) 2013-10-16 2019-08-13 Outlook Therapeutics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
US9181337B2 (en) 2013-10-18 2015-11-10 Abbvie, Inc. Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same
US9085618B2 (en) 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
WO2015073884A2 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
IN2014MU01248A (ru) * 2014-04-02 2015-10-09 Intas Pharmaceuticals Ltd
ES2600488T3 (es) * 2014-05-23 2017-02-09 Ares Trading S.A. Composición farmacéutica líquida
ES2607489T3 (es) 2014-05-23 2017-03-31 Ares Trading S.A. Composición farmacéutica líquida
ES2572919T3 (es) * 2014-05-23 2016-06-03 Ares Trading S.A. Composición farmacéutica líquida
EP3156071A4 (en) * 2014-06-10 2018-01-10 Meiji Seika Pharma Co., Ltd. Stable aqueous adalimumab preparation
US9821059B2 (en) * 2014-10-17 2017-11-21 Alteogen Inc. Composition for stabilizing protein and pharmaceutical formulation comprising the same
HUP1400510A1 (hu) 2014-10-28 2016-05-30 Richter Gedeon Nyrt Gyógyászati TNFalfa ellenes antitest készítmény
EP3247718B1 (en) 2015-01-21 2021-09-01 Outlook Therapeutics, Inc. Modulation of charge variants in a monoclonal antibody composition
WO2016120413A1 (en) * 2015-01-28 2016-08-04 Mabxience S.A. Pharmaceutical formulations for anti-tnf-alpha antibodies
EP3053572A1 (en) * 2015-02-06 2016-08-10 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
BR112017016636A2 (pt) * 2015-02-13 2018-04-03 Sanofi Sa formulação líquida estável para anticorpos monoclonais
WO2016162819A1 (en) 2015-04-07 2016-10-13 Lupin Limited Stable aqueous pharmaceutical composition of anti-tnf alpha antibody
US11583584B1 (en) * 2015-10-28 2023-02-21 Coherus Biosciences, Inc. Stable protein compositions and methods of their use
US11229702B1 (en) 2015-10-28 2022-01-25 Coherus Biosciences, Inc. High concentration formulations of adalimumab
WO2017122121A1 (en) * 2016-01-12 2017-07-20 Dr. Reddy's Laboratories Limited Stable pharmaceutical composition
CA3013336A1 (en) * 2016-02-03 2017-08-10 Oncobiologics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
JP2019510078A (ja) * 2016-02-23 2019-04-11 セセン バイオ， インコーポレイテッド Ｉｌ−６アンタゴニスト製剤およびその使用
US20190060241A1 (en) * 2016-04-13 2019-02-28 Medimmune, Llc Use of amino acids as stabilizing compounds in pharmaceutical compositions containing high concentrations of protein-based therapeutic agents
US20180043020A1 (en) * 2016-04-20 2018-02-15 Coherus Biosciences, Inc. Method of reducing immunogenicity of drug products
US11071782B2 (en) 2016-04-20 2021-07-27 Coherus Biosciences, Inc. Method of filling a container with no headspace
MX2018015960A (es) 2016-06-30 2019-03-21 Celltrion Inc Formulacion farmaceutica liquida estable.
EP3533441A4 (en) * 2016-10-28 2019-12-04 Celltrion Inc. STABLE PHARMACEUTICAL FORMULATION
WO2018119142A1 (en) * 2016-12-21 2018-06-28 Amgen Inc. Anti-tnf alpha antibody formulations
US11608357B2 (en) 2018-08-28 2023-03-21 Arecor Limited Stabilized antibody protein solutions
EP3372242A1 (en) 2017-03-06 2018-09-12 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
EP3372241A1 (en) * 2017-03-06 2018-09-12 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
RU2756619C2 (ru) * 2017-03-16 2021-10-04 ЭлДжи КЕМ, ЛТД. Жидкая композиция антитела против TNF альфа
WO2018184693A1 (en) * 2017-04-07 2018-10-11 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
WO2018184692A1 (en) * 2017-04-07 2018-10-11 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
CN111491664A (zh) * 2017-09-20 2020-08-04 阿尔沃科技Hf公司 阿达木单抗的药物制剂
EP3909607A4 (en) * 2019-01-11 2022-10-26 Samsung Bioepis Co., Ltd. PHARMACEUTICAL COMPOSITION WITH ANTIBODIES, DEVICE CONTAINING THIS AND USE THEREOF
EP3927729A4 (en) * 2019-02-18 2023-10-11 Eli Lilly and Company THERAPEUTIC ANTIBODY FORMULATION
JP2022546400A (ja) * 2019-08-30 2022-11-04 カシーヴ バイオサイエンシズ，リミテッド・ライアビリティ・カンパニー 高濃度の薬理学的に活性な抗体の新規製剤
KR20220152540A (ko) * 2020-03-13 2022-11-16 삼성바이오에피스 주식회사 안정성이 증진된 액상 약제학적 조성물
WO2021234584A1 (en) * 2020-05-21 2021-11-25 Shilpa Biologicals Private Limited Pharmaceutical compositions comprising adalimumab
CN116963775A (zh) * 2021-03-03 2023-10-27 爱乐科斯公司 抗siglec-8抗体制剂
WO2023037384A1 (en) * 2021-09-07 2023-03-16 Dr. Reddy's Laboratories Limited Formulations of immune check point inhibitors or like
AU2022348349A1 (en) * 2021-09-16 2024-05-02 Aprogen Inc. PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING ANTI-TNFα ANTIBODY
CN114788809B (zh) * 2022-01-25 2023-04-14 江苏广承药业有限公司 一种氯雷他定液体制剂
WO2023183898A1 (en) * 2022-03-24 2023-09-28 Arch Oncology, Inc. Formulations for anti-cd47 antibodies

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090291062A1 (en) * 2007-11-30 2009-11-26 Wolfgang Fraunhofer Protein formulations and methods of making same
US20100278822A1 (en) * 2009-05-04 2010-11-04 Abbott Biotechnology, Ltd. Stable high protein concentration formulations of human anti-tnf-alpha-antibodies
US20120028877A1 (en) * 2005-06-14 2012-02-02 Amgen Inc. Self-Buffering Protein Formulations
WO2014039903A2 (en) * 2012-09-07 2014-03-13 Coherus Biosciences, Inc. Stable aqueous formulations of adalimumab

Family Cites Families (79)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4597966A (en) * 1985-01-09 1986-07-01 Ortho Diagnostic Systems, Inc. Histidine stabilized immunoglobulin and method of preparation
US5104651A (en) 1988-12-16 1992-04-14 Amgen Inc. Stabilized hydrophobic protein formulations of g-csf
US5945098A (en) 1990-02-01 1999-08-31 Baxter International Inc. Stable intravenously-administrable immune globulin preparation
DK0774963T3 (da) 1994-08-08 2001-01-29 Debiopharm Sa Farmaceutisk stabilt oxaliplatin-præparat
CA2195557C (en) 1994-08-12 2006-10-17 Shui-On Leung Immunoconjugates and humanized antibodies specific for b-cell lymphoma and leukemia cells
US6171576B1 (en) 1995-11-03 2001-01-09 Organix Inc. Dopamine transporter imaging agent
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
HU230048B1 (hu) 1996-02-09 2015-06-29 Abbvie Biotechnology Ltd Humán TNFalfa-kötő antitestek alkalmazása
GB9610992D0 (en) 1996-05-24 1996-07-31 Glaxo Group Ltd Concentrated antibody preparation
EP0938334A4 (en) 1996-07-26 2004-12-15 Smithkline Beecham Corp IMPROVED METHOD FOR TREATING IMMUNE-MEDIATED SYSTEMIC DISEASES
EP0852951A1 (de) * 1996-11-19 1998-07-15 Roche Diagnostics GmbH Stabile lyophilisierte pharmazeutische Zubereitungen von mono- oder polyklonalen Antikörpern
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
JP3919235B2 (ja) * 1997-06-13 2007-05-23 ジェネンテク，インコーポレイテッド 抗体製剤
US5886154A (en) 1997-06-20 1999-03-23 Lebing; Wytold R. Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies
US6171686B1 (en) 1997-10-03 2001-01-09 Marine Environmental Solutions, L.L.C. Synthetic aquatic structure
DE59804785D1 (de) 1997-11-22 2002-08-22 Roche Diagnostics Gmbh Verbessertes Verfahren zur Stabilisierung von Proteinen
AU2444899A (en) 1998-01-22 1999-08-09 Astrazeneca Ab Pharmaceutical formulation comprising an antibody and a citrate buffer
US6436897B2 (en) 1998-06-01 2002-08-20 Celtrix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical formulations for IGF/IGFBP
US6281336B1 (en) 1998-06-09 2001-08-28 Statens Serum Institut Process for producing immunoglobulins for intravenous administration and other immunoglobulin products
KR20140094647A (ko) 1999-03-25 2014-07-30 아비에 도이치란트 게엠베하 운트 콤파니 카게 사람 ｉｌ-12에 결합하는 사람 항체 및 이의 제조방법
ES2308978T3 (es) 1999-04-09 2008-12-16 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Composicion farmaceutica de eritropoyetina.
AUPQ026799A0 (en) 1999-05-10 1999-06-03 Csl Limited Method of increasing protein stability by removing immunoglobulin aggregates
US20030124119A1 (en) * 1999-12-28 2003-07-03 Tadao Yamazaki Stable antibody compositions and injection preparations
EP1336410A4 (en) 2000-08-04 2005-10-12 Chugai Pharmaceutical Co Ltd PROTEIN INJECTION PREPARATIONS
UA81743C2 (ru) 2000-08-07 2008-02-11 Центокор, Инк. МОНОКЛОНАЛЬНОЕ АНТИТЕЛО ЧЕЛОВЕКА, КОТОРОЕ СПЕЦИФИЧЕСКИ СВЯЗЫВАЕТСЯ С ФАКТОРОМ НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, КОТОРАЯ ЕГО СОДЕРЖИТ, И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА
JP5485489B2 (ja) 2000-08-11 2014-05-07 中外製薬株式会社 抗体含有安定化製剤
ES2332402T5 (es) 2000-10-12 2018-05-14 Genentech, Inc. Formulaciones de proteína concentradas de viscosidad reducida
GB0113179D0 (en) 2001-05-31 2001-07-25 Novartis Ag Organic compounds
CA2817619A1 (en) 2001-06-08 2002-12-08 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
PT2087908T (pt) 2001-06-26 2018-07-16 Amgen Inc Anticorpos contra opgl
IL161677A0 (en) * 2001-11-08 2004-09-27 Protein Design Labs Stable liquid pharmaceutical formulation of igg antibodies
ES2618832T3 (es) 2002-02-27 2017-06-22 Immunex Corporation Composición TNFR-FC estabilizada que comprende arginina
US20030206898A1 (en) 2002-04-26 2003-11-06 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US20040022792A1 (en) 2002-06-17 2004-02-05 Ralph Klinke Method of stabilizing proteins at low pH
CA2491478A1 (en) 2002-07-09 2004-01-15 Sandoz Ag Liquid formulations with high concentration of human growth hormone (hgh) comprising phenol
US20040033228A1 (en) 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
US7674885B2 (en) 2002-11-01 2010-03-09 Bayer Healthcare Llc Process for concentration of macromolecules
FR2853551B1 (fr) 2003-04-09 2006-08-04 Lab Francais Du Fractionnement Formulation stabilisante pour compositions d'immunoglobulines g sous forme liquide et sous forme lyophilisee
JPWO2005063291A1 (ja) * 2003-12-25 2007-07-19 麒麟麦酒株式会社 抗体を含有する安定な水性医薬製剤
WO2006022599A1 (en) 2004-08-27 2006-03-02 Marian Metke Production method for exfoliated graphite, equipment for its production, exfoliated graphite and means of its use
KR101378194B1 (ko) 2005-12-20 2014-03-27 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 안정한 단백질 제제
US20080071063A1 (en) 2006-02-03 2008-03-20 Medimmune, Inc. Protein Formulations
EP2094247B1 (en) 2006-10-20 2022-06-29 Amgen Inc. Stable polypeptide formulations
AU2008232902B2 (en) * 2007-03-30 2013-10-03 Medlmmune, Llc Antibody formulation
AU2008248780B2 (en) 2007-05-02 2013-01-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for stabilizing a protein
WO2009015345A1 (en) 2007-07-25 2009-01-29 Amgen Inc. Pharmaceutical compositions comprising fc fusion proteins
US20090151807A1 (en) 2007-08-07 2009-06-18 Davis Chanda Janese Container Insert for Zero Headspace
US20130195888A1 (en) 2007-11-30 2013-08-01 Abbvie Ultrafiltration and diafiltration formulation methods for protein processing
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
WO2009073805A2 (en) 2007-12-04 2009-06-11 Verdezyne, Inc. Aglycosylated therapeutic antibodies and therapeutic antibody-encoding nucleotide sequences
PE20091174A1 (es) * 2007-12-27 2009-08-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo
JP6078217B2 (ja) * 2008-01-15 2017-02-08 アッヴィ・ドイチュラント・ゲー・エム・ベー・ハー・ウント・コー・カー・ゲー 粉末化されたタンパク質組成物及びその作製方法
SG10201702922VA (en) * 2008-10-20 2017-06-29 Abbvie Inc Isolation and purification of antibodies using protein a affinity chromatography
US20100172862A1 (en) 2008-11-28 2010-07-08 Abbott Laboratories Stable antibody compositions and methods of stabilizing same
JP2012511531A (ja) 2008-12-09 2012-05-24 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 賦形剤不含抗体溶液を得るための方法
MY165614A (en) 2009-11-20 2018-04-18 Biocon Ltd Formulations of antibody
MX2012007676A (es) * 2009-12-29 2012-08-03 Hoffmann La Roche Nueva formulacion de anticuerpo.
JP5937523B2 (ja) * 2010-03-01 2016-06-22 サイトダイン インコーポレイテッドＣｙｔｏＤｙｎ， Ｉｎｃ． 濃縮されたタンパク質製剤およびその使用
RU2600847C2 (ru) 2010-05-10 2016-10-27 Интас Биофармасьютикалс Лимитед Жидкий состав полипептидов, содержащих fc-домен иммуноглобулина
FR2961107B1 (fr) 2010-06-15 2012-07-27 Lab Francais Du Fractionnement Composition d'immunoglobulines humaines stabilisee
CH703405B1 (de) 2010-07-05 2014-05-15 Melexis Tessenderlo Nv Magnetischer Winkelsensor.
AU2011291462A1 (en) * 2010-08-19 2013-03-14 Zoetis Belgium S.A. Anti-NGF antibodies and their use
AU2011301803A1 (en) * 2010-09-17 2013-03-21 Baxalta GmbH Stabilization of immunoglobulins and other proteins through aqueous formulations with sodium chloride at weak acidic to neutral pH
ME02506B (me) 2010-11-11 2017-02-20 Abbvie Biotechnology Ltd VISOKA KONCETRACIJA TEČNIH FORMULACIJA ANTI TNF alfa ANTITIJELA
EP2471554A1 (en) 2010-12-28 2012-07-04 Hexal AG Pharmaceutical formulation comprising a biopharmaceutical drug
JP5996631B2 (ja) 2011-04-20 2016-09-21 サンド・アクチエンゲゼルシヤフト ＴＮＦＲ：Ｆｃ融合タンパク質の安定した医薬液剤
KR20140023358A (ko) 2011-05-19 2014-02-26 노파르티스 아게 선양 낭성 암종의 치료에 사용하기 위한 4-아미노-5-플루오로-3-[6-(4-메틸피페라진-1-일)-1h-벤즈이미다졸-2-일]-1h-퀴놀린-2-온
UY34105A (es) 2011-06-03 2012-07-31 Lg Life Sciences Ltd Formulación líquida estable de etanercept
DK2726090T3 (da) 2011-07-01 2020-01-20 Biogen Ma Inc Argininfri tnfr: fc-fusionspolypeptidsammensætninger
GB201112429D0 (en) 2011-07-19 2011-08-31 Glaxo Group Ltd Antigen-binding proteins with increased FcRn binding
EP2771033A4 (en) 2011-10-28 2016-02-17 Integritybio Inc PROTEIN FORMULATIONS CONTAINING AMINO ACIDS
WO2013096835A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Abbvie Inc. Stable protein formulations
AU2013255413C1 (en) 2012-03-07 2016-03-24 Cadila Healthcare Limited Pharmaceutical formulations of TNF-alpha antibodies
WO2013186230A1 (en) 2012-06-12 2013-12-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical formulation for a therapeutic antibody
US20150102042A1 (en) 2012-07-10 2015-04-16 Gary Matsch Air Purging Lid
US9844594B2 (en) 2012-12-18 2017-12-19 Merck Sharp & Dohme Corp. Liquid formulations for an anti-TNF α antibody
CN102988984B (zh) 2012-12-21 2015-05-20 嘉和生物药业有限公司 增强稳定性的抗TNF-α人单克隆抗体的含水药物制剂
EP2996621B1 (en) 2013-05-13 2018-06-20 EndoChoice, Inc. An endoscope tip position visual indicator and heat management system
US9681695B2 (en) 2013-07-31 2017-06-20 Sport Maska Inc. Helmet with chin cup

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120028877A1 (en) * 2005-06-14 2012-02-02 Amgen Inc. Self-Buffering Protein Formulations
US20090291062A1 (en) * 2007-11-30 2009-11-26 Wolfgang Fraunhofer Protein formulations and methods of making same
US20100278822A1 (en) * 2009-05-04 2010-11-04 Abbott Biotechnology, Ltd. Stable high protein concentration formulations of human anti-tnf-alpha-antibodies
WO2014039903A2 (en) * 2012-09-07 2014-03-13 Coherus Biosciences, Inc. Stable aqueous formulations of adalimumab

Also Published As

Publication number Publication date
IL277652B2 (en) 2023-04-01
DK2892550T3 (da) 2020-03-30
US20190070294A1 (en) 2019-03-07
US20180311350A1 (en) 2018-11-01
US9757454B2 (en) 2017-09-12
US10207000B2 (en) 2019-02-19
US20180028654A1 (en) 2018-02-01
AU2018208699A1 (en) 2018-08-16
EP2892550A4 (en) 2016-04-13
SG10201705668XA (en) 2017-08-30
US9731009B2 (en) 2017-08-15
JP2019069993A (ja) 2019-05-09
US10716853B2 (en) 2020-07-21
EP2892550B1 (en) 2019-12-18
US20180028656A1 (en) 2018-02-01
CY1123407T1 (el) 2021-12-31
US9782479B2 (en) 2017-10-10
US20180028653A1 (en) 2018-02-01
PT2892550T (pt) 2020-03-27
US20180055930A1 (en) 2018-03-01
LT2892550T (lt) 2020-04-10
US10772959B2 (en) 2020-09-15
MX2015003007A (es) 2015-06-05
US20180311352A1 (en) 2018-11-01
US10155039B2 (en) 2018-12-18
US10159732B2 (en) 2018-12-25
US20160303233A1 (en) 2016-10-20
TWI698253B (zh) 2020-07-11
JP2021020930A (ja) 2021-02-18
US20190070293A1 (en) 2019-03-07
US9382317B2 (en) 2016-07-05
EP3701968A1 (en) 2020-09-02
IL237583A0 (en) 2015-04-30
EA201791717A1 (ru) 2018-03-30
CA2884182C (en) 2022-06-14
US20160256545A1 (en) 2016-09-08
US10286071B2 (en) 2019-05-14
IL237583B (en) 2020-10-29
US20170072054A1 (en) 2017-03-16
WO2014039903A2 (en) 2014-03-13
US20160303235A1 (en) 2016-10-20
WO2014039903A3 (en) 2014-06-26
AU2020202912A1 (en) 2020-05-21
US20180311351A1 (en) 2018-11-01
US20170312361A1 (en) 2017-11-02
US9724415B2 (en) 2017-08-08
US9682145B2 (en) 2017-06-20
US20180043019A1 (en) 2018-02-15
CL2015000574A1 (es) 2015-10-23
TW202042841A (zh) 2020-12-01
US20150191539A1 (en) 2015-07-09
IL277652B (en) 2022-09-01
BR112015004984A2 (pt) 2017-07-04
US9340612B2 (en) 2016-05-17
US10772960B2 (en) 2020-09-15
ECSP15013227A (es) 2016-01-29
US10716854B2 (en) 2020-07-21
US20190070292A1 (en) 2019-03-07
US9782480B2 (en) 2017-10-10
US20190060455A1 (en) 2019-02-28
HK1210601A1 (en) 2016-04-29
US20160304599A1 (en) 2016-10-20
US20140186361A1 (en) 2014-07-03
JP6783845B2 (ja) 2020-11-11
US9731008B2 (en) 2017-08-15
US10780163B2 (en) 2020-09-22
US20150190513A1 (en) 2015-07-09
US20160039926A1 (en) 2016-02-11
TW201424749A (zh) 2014-07-01
US9707293B2 (en) 2017-07-18
US10716852B2 (en) 2020-07-21
RS60226B1 (sr) 2020-06-30
US10786566B2 (en) 2020-09-29
US10799585B2 (en) 2020-10-13
CA3153799A1 (en) 2014-03-13
EA201590518A1 (ru) 2016-05-31
US20180028655A1 (en) 2018-02-01
HRP20200434T1 (hr) 2020-07-24
US20160256547A1 (en) 2016-09-08
US20180140701A1 (en) 2018-05-24
US9789185B2 (en) 2017-10-17
SI2892550T1 (sl) 2020-11-30
US20180043018A1 (en) 2018-02-15
US20150190512A1 (en) 2015-07-09
US20180028657A1 (en) 2018-02-01
US9724414B2 (en) 2017-08-08
JP2015527402A (ja) 2015-09-17
KR20220025196A (ko) 2022-03-03
US9861695B2 (en) 2018-01-09
US9808525B2 (en) 2017-11-07
DOP2015000051A (es) 2015-05-31
KR20150047140A (ko) 2015-05-04
US9737600B2 (en) 2017-08-22
US20160304600A1 (en) 2016-10-20
US20160263226A1 (en) 2016-09-15
US10722579B2 (en) 2020-07-28
JP6463268B2 (ja) 2019-01-30
US20180311349A1 (en) 2018-11-01
US10195275B2 (en) 2019-02-05
CA2884182A1 (en) 2014-03-13
KR102362829B1 (ko) 2022-02-15
CN104768576A (zh) 2015-07-08
AU2013312300A1 (en) 2015-04-16
US20160256546A1 (en) 2016-09-08
KR20210040470A (ko) 2021-04-13
EP2892550A2 (en) 2015-07-15
US20150182626A1 (en) 2015-07-02
HUE049282T2 (hu) 2020-09-28
US10286072B2 (en) 2019-05-14
PE20150964A1 (es) 2015-07-25
US20150191538A1 (en) 2015-07-09
US20180055929A1 (en) 2018-03-01
ES2784861T3 (es) 2020-10-01
US10159733B2 (en) 2018-12-25
US20160303234A1 (en) 2016-10-20
PE20191815A1 (es) 2019-12-27
PL2892550T3 (pl) 2020-07-27
US9340611B2 (en) 2016-05-17
US20160031982A1 (en) 2016-02-04
KR102238677B1 (ko) 2021-04-12
IL277652A (en) 2020-11-30
US20160304601A1 (en) 2016-10-20
UY35351A (es) 2014-08-29
US9346880B2 (en) 2016-05-24
US20180021433A1 (en) 2018-01-25
US10688183B2 (en) 2020-06-23
AR092470A1 (es) 2015-04-22
SG11201501715QA (en) 2015-05-28
US9770507B2 (en) 2017-09-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA029215B1 (ru) Стабильные водные составы адалимумаба