EA002379B1

EA002379B1 - Средство, обладающее антиишемической, гипотензивной и антигипоксической активностью

Info

Publication number: EA002379B1
Application number: EA199900877A
Authority: EA
Inventors: Павел Александрович Галенко-Ярошевский; Александр Викторович Уваров; Зинаида Ивановна Тюхтенева; Иван Николаевич Тюренков; Валентина Николаевна Перфилова; Валентина Михайловна Берестовицкая; Майя Михайловна Зобачева; Ольга Сергеевна Васильева; Нина Владимировна Усик; Борис Михайлович Новиков
Original assignee: Российский Государственный Педагогический Университет Им. А.И.Герцена; Закрытое Акционерное Общество "Асгл - Исследовательские Лаборатории"
Priority date: 1999-07-21
Filing date: 1999-07-21
Publication date: 2002-04-25
Also published as: EA199900877A1

Abstract

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается средств, влияющих на сердечно-сосудистую систему. Предлагаемое средство на основе N-карбамоилметил-4-фенил-2-пирролидона (КФП) дополнительно содержит двух- или трехосновную кислоту. В качестве двухосновной кислоты используют или щавелевую, или яблочную, или янтарную кислоту, в качестве трехосновной - лимонную. Отношение КФП:карбоновая кислота составляет 1:(0,5-2,0). Предлагаемое средство по эффективности превышает КФП и ряд известных лекарственных средств.

Description

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается средств, влияющих на сердечно-сосудистую систему.

Известны различные биологически активные соединения и их композиции, влияющие на сердечно-сосудистую систему. Описано средство [1], представляющее собой 3-метил-5[2-(3трет.бутиламино-2-оксипропокси)феноксиметил]-1,2,4-оксадиазол, проявляющее антигипертензивную, антиаритмическую, коронарорасширяющую, антиишемическую и антиглаукоматозную активность. Его антиишемическая активность не велика, антигипоксическая активность не описана.

Одним из широко применяемых средств, обладающих антиишемической активностью, является обзидан (анаприлин) [2]. Однако применение его ограничено у больных с обструктивными заболеваниями легких из-за бронхоспазматического эффекта и у больных с облитерирующими заболеваниями периферических сосудов из-за наличия у него отрицательного инотропного эффекта.

Наиболее известным антигипоксическим средством является пирацетам [3]. Он оказывает положительное влияние на обменные процессы и кровообращение. Имеются данные [4] также и о его положительном действии у больных с ишемической болезнью сердца, но только в пожилом и старческом возрасте.

Известно, что янтарная кислота и ее соли обладают адаптогенной способностью и оказывают антигипоксическое, антистрессовое и нейротропное действие, нормализуют энергетический обмен. Известно также кардиотропное и противоишемическое действие янтарной кислоты [5]. Гипотензивное действие янтарной кислоты не описано.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению является И-карбамоилметил-4-фенил2-пирролидон, проявляющий гипотензивную [6] и антигипоксическую активность [7, 8]. Его антиишемическая активность не описана.

Задача изобретения заключается в создании эффективного малотоксичного лекарственного средства, обладающего антиишемической, гипотензивной и антигипоксической активностью, расширении арсенала сердечно-сосудистых средств.

Поставленная задача реализуется предлагаемым средством, включающим Ν-карбамоилметил-4-фенил-2-пирролидон и двух- или трехосновную карбоновую кислоту. В качестве двухосновной кислоты используют или щавелевую, или яблочную, или янтарную кислоту, в качестве трехосновной - лимонную. Причем соотношение №карбамоилметил-4-фенил-2-пирролидон (КФП):карбоновая кислота составляет 1:(0,5-2) моль.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1.

В двухгорлую колбу, снабженную мешалкой и обратным холодильником, помещают 60-100 мл спирта (этилового, метилового, изопропилового), затем вносят соответствующие количества №карбамоилметил-4-фенил-2-пирролидона (КФП) и карбоновой кислоты. Смесь нагревают до кипения, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют при перемешивании на 1-1,5 ч. Выпавший кристаллический осадок отделяют и сушат.

Количества компонентов приведены в табл. 1.

Пример 2.

В шаровую мельницу загружают соответствующие количества КФП и карбоновой кислоты. Смесь тщательно перемешивают в течение 0,5-1 ч, затем выгружают полученный продукт.

Количества компонентов такие же, как в примере 1.

Таблица 1. Соотношение №карбамоилметил-4-фенил-2пирролидона (КФП) и карбоновых кислот

КФП, г(моль)	Щавелевая кислота, г (моль)	Янтарная кислота, г (моль)	Яблочная кислота, г (моль)	Лимонная кислота, г (моль)
10,9 (0,05)	9,0 (0,1)	11,8 (0,1)	13,4 (0,1)	21,0 (0,1)
21,8 (0,1)	9,0 (0,1)	11,8 (0,1)	13,4 (0,1)	21,0 (0,1)
32,7 (0,15)	9,0 (0,1)	11,8 (0,1)	13,4 (0,1)	21,0 (0,1)
43,6 (0,2)	9,0 (0,1)	11,8 (0,1)	13,4 (0,1)	21,0 (0,1)

Выход во всех примерах количественный.

Отношение КФП:карбоновая кислота равно 1 моль:(0,5-2).

Все перечисленные ниже композиции были изучены в опытах на животных в моделях на антиишемическую, гипотензивную и антигипоксическую активность.

№карбамоилметил-4-фенил-2-пирролидон+щавелевая кислота (КФП-Щ) №карбамоилметил-4-фенил-2-пирролидон+янтарная кислота (КФП-ЯН) №кабамоилметил-4-фенил-2-пирролидон+яблочная кислота (КФП-ЯБ) №карбамоилметил-4-фенил-2-пирролидон+лимонная кислота (КФП-Л)

Антиишемическая активность КФП и предлагаемых средств

Антиишемическое действие изучали в модели кратковременной ишемии, вызванной окклюзией нисходящей ветви левой коронарной артерии (ОНВЛК) на границе верхней и средней трети у кошек и у крыс (для КФП). Эффект препаратов оценивался по их влиянию на динамику суммарной величины подъема сегмента 8Т эпикардиальной электрограммы, регистрируемой с трех точек поверхности сердца, расположенных в зоне ишемии, на границе ишемии и интактной зоны, интактном участке, что отражает функциональное состояние очага ишемии. В качестве препарата сравнения использовали обзидан.

КФП вводили в/брюшино в дозе 50 мг/кг за 30 мин до ОНВЛКА, морфометрическим методом исследовали миокард животных, определяя площадь зоны некроза, зоны ишемии и совокупной зоны поражения (некроз+ишемия) миокарда в опытной и контрольной группах (при введении физ. раствора за 10 мин до ОНВЛКА и обзидана в дозе 0,5 мг/кг за 30 мин до ОНВЛКА). Результаты исследования представлены в табл. 2.

Таблица 2. Результаты исследований по влиянию КФП на зону поражения миокарда при экспериментальном инфаркте у крыс, вызванном ОНВЛКА

Группа	Площадь зоны миокарда, мм²	Площадь зоны ишемии, _мм ²	Соотношение зона ишемии/ миокард	Площадь зоны некроза, _мм ²	Соотношение зона некроза/ миокард	Площадь зоны поражения, _мм ²	Соотношение некроз/ ишемия
Физ. р-р	485,97±4,87	233,09±11,34	0,479±0,022	36,00±5,84	0,074±0,012	269,09±9,07	0,165±0,036
Обзидан	481,13±8,12	175,21±4,01*	0,365±0,009*	28,48±4,08	0,059±0,009	203,68±6,08*	0,163±0,024
КФП	492,55±4,85	163,33±7,84*	0,332±0,017*	19,21±6,35	0,039±0,013	182,53±12,16*	0,113±0,036

* - Различия достоверны по сравнению с группой, получавшей физиологический раствор.

Эти результаты показывают, что КПФ обладает четко выраженной антиишемической активностью, которая превосходит таковую обзидана.

Исследуемые вещества в дозе 50 мг/кг и препарат сравнения - обзидан в дозе 0,25 мг/кг вводили за 5 мин до ОНВЛК. Во всех группах исследованных веществ выявлено достоверное уменьшение суммарной величины подъема сегмента 8Т. Наибольший эффект отмечался при введении КФП-Щ, введение которого вызывало почти 50% снижение суммарной величины подъема сегмента 8Т к пятой минуте после ОНВЛК. Данный эффект превышал таковой у обзидана. Результаты представлены в табл. 3.

Таблица 3. Влияние предлагаемых средств на суммарную величину подъема сегмента 8Т у кошек после ОНВЛК

Название препарата	Исходно	Время после ОНВЛК, мин	Время после снятия ОНВЛК, мин
0,5	1	3	5	0,5	1	3	5
Физ. р-р	1,7±0,4	3,5±0,8	3,6±1,1	4,8±0,8	4,9±1	4,1±1	3,6±0,6	2,5±0,9	2,4±1
КФП-Щ	1,7±0,6	1,9±0,4 *(-45,7)	1,9±0,6 (-47,2)*	2,5±0,6 (-47,9)*	2,4±0,6 (-51)*	1,9±0,5 (-53,7)*	1,7±0,8 (-52,8)*	1,4±0,5 (-44)*	1,2±0,5 (-50)*
КФП-Л	1,7±1,3	2,0±1,2 (-42,9)*	2,0±1,3 (-44,4)*	2,5±1,2 (-47,9)*	2,6±1,1 (-46,9)*	2,6±0,8 (-36,6)*	2,7±1,2 (-25,0)*	1,9±1,1 (-24,0)*	1,5±1,6 (-37,5)*
КФП-ЯБ	1,7±0,3	2,3±0,3	2,4±0,5	2,5±0,8	2,6±0,0	2,5±0,6	1,9±0,3	1,8±0,4	1,6±0,3
*(-34,3)	(-33,3)*	(-47,9)*	(-46,9)	(-39,0)*	(-47,2)*	(-28,0)*	(-33,3)*
КФП-ЯН	1,7+0,9	2,2+1,3	2,7+0,6	2,8+1,8	3,3+1,5	2,3+1,2	1,9+0,8	1,3+0,6	1,3+0,6
(-42,9)	(-25,0)	(-41,7)	(-36,7)	(-43,9)	(-47,2)	(-48,0)	(-45,8)
Обзидан	1,7±1,4	2,8±1,6	2,9±1,7	5,5±2,1	5,6±2,2	5,9±2,5	4,7±1,9	3,4±2,0	3,5±2,3
(-20,0)	(-19,4)	(+14,6)	(+14,3)	(+43,9)	(+30,6)	(+36,0)	(+45,8)

* - Статистически достоверно (р<0.05) по сравнению с группой контроля (физ. раствор).

Таким образом, из приведенных данных видно, что все предлагаемые средства проявляют выраженную антиишемическую активность, превышающую такую активность КФП и обзидана.

Гипотензивная активность

Ранее было показано [6], что КФП проявляет гипотензивную активность в различных видах артериальной гипертензии, что подтверждается следующими данными.

В опытах на наркотизированных и ненаркотизированных кошках КФП в дозах 25-50 мг/кг снижал артериальное давление (АД) на 15-20%, максимум эффекта - на 60-90 мин. При этом снижение общего периферического сопротивления (ОПС) на 26±7,1% и увеличение минутного объема крови (МОК) на 14,9±3,8%. Метод определения МОК - терморазведение по Ред1ет (1954) в модификации М.И. Гуревича (1967), Д.Е. Ванькова и Ю.И. Цибина (1973).

Все предлагаемые средства в экспериментах на кошках проявили отчетливый гипотензивный эффект, наибольшую активность пока зала композиция КФП-ЯН. Препарат КФП-ЯН в экспериментах на кошках дает отчетливый гипотензивный эффект (в дозе 50 мг/кг в/венно снижение артериального давления (АД) на 18-20%, максимум эффекта на 60-90 мин, снижение общего периферического сопротивления на 38%) и снижает АД (на 28,2%) и ЧСС (на 15%) при введении в желудочки головного мозга крыс в дозе 10-500 мкг, что свидетельствует о его влиянии на центральные механизмы регуляции кровообращения. Реализация данного эффекта, вероятно, происходит при участии ГАМК-ергической (подавление гипотензивного действия КФП-ЯН бикукулином и пикротоксином) и норадренергической (подавление эффекта фентоламином, а₂-адреноблокатором йохимбином и предварительным введением резерпина) систем мозга.

При почечной (25 кошек), надпочечниково-регенеративной (25 кошек) и нейрогенной (25 кошек) моделях артериальной гипертензии (АГ) на введение КФП-ЯН (50 мг/кг, в/венно) наблюдалось умеренное, но продолжительное снижение АД за счет уменьшения общего периферического сопротивления (ОПС) при одновременном увеличении сердечного выброса. Прекращение лечения не вызывало синдрома отмены (табл. 4).

Таблица 4.Гипотензивный эффект КФП-ЯН при различных моделях артериальной гипертензии (р<0,05)

Вид АГ	Снижение АД (%)	Снижение ОПС (%) на протяжении лечения
Непоср. после введ-ия преп-та	Через 2 нед. лечения	Через 1 нед. по- сле отмены преп-та
Надпочечниково-регенеративная	23,3	25,3	25,2	32,5
Нейрогенная	21,1	28,1	23,2	39,4
Почечная	1,3	28,3	28,2	39,4

Композиции КФП-Л, КФП-Щ и КФП-ЯБ также показали отчетливый гипотензивный эффект, сравнимый с эффектом КФП-ЯН и превышающий такой у КФП.

Антигипоксическая активность

Антигипоксическая активность КФП была изучена на модели нормобарической гипоксической гипоксии [8] на мышах-самцах массой 20-30 г. Защитный эффект оценивался по продолжительности жизни животных, КФП увеличивал продолжительность жизни мышей в гермокамере, т.е. он в условиях нормобарической гипоксической гипоксии обладает антигипокси ческим действием, в отличие от пирацетама, который не проявляет таких свойств.

Антигипоксическая активность предлагаемых средств была изучена в условиях острой гипоксической гипоксии, чтобы более глубоко и детально оценить антигипоксическое действие. Все предлагаемые средства проявили выраженную антигипоксическую активность, более высокую, чем у КФП. Наиболее активной была композиция КФП-ЯН.

В условиях острой гипоксической гипоксии КФП-ЯН, вводимый крысам внутрибрюшинно, препятствует снижению активности ферментов глутатионовой антиоксидантной системы (глутатионредуктаза и глутатионпероксидаза на 19,3 и 30,5%, соответственно), 5'-нуклеотидазы (на 9,4%), Ыа⁺, К⁺ - АТФ-азы (на 24,9%) и оказывает депримирующее действие на активность лизосомальных ферментов (катепсина Ό и β-глюкозидазы на 25 и 32,8%, соответственно, по сравнению с контрольной группой) и интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в миокарде крыс; в условиях ишемического повреждения миокарда и головного мозга (перевязка сонной артерии) КФП-ЯН (50 мг/кг, в/венно) вызывал значимое снижение диеновых конъюгатов, свободных жирных кислот и малонового диальдегида в миокарде и головном мозге по сравнению с контрольной группой, табл. 5 и 6.

Таблица 5. Влияние КФП-ЯН на показатели ПОЛ и содержание энергетических субстратов при экспериментальной ишемии миокарда и головного мозга

Экспериментальный инфаркт мио- карда	АТФ	АДФ	Сумма нуклеотидов	АМФ
Миокард	Без лечения	433,3%	431,5%	423,9%	4116,7%
КФП-ЯН	440,0%	421,6%	426,8%	434,7%
Головной мозг	Без лечения	437,1%	426,5%	426,8%	нд
КФП-ЯН	430,0%	438,2%	431,1%	нд
Ишемия головного мозга	АТФ	АДФ	Сумма нуклеотидов	АМФ
Головной мозг	Без лечения	422,4%	422,2%	428,2%	483,0%
КФП-ЯН	485,9%	нд	451,9%	431,8%

Прим: 4 - увеличение, 4 - уменьшение, нд - данные не достоверны;

(р<0,05 по сравнению с данными до ишемии).

Таблица 6. Снижение (%) содержания продуктов ПОЛ на фоне введения КФП-ЯН 50 мг/кг в/брюшинно при экспериментальной ишемии миокарда и головного мозга крыс

Продукты ПОЛ	Диеновые конъюгаты, мкмоль/л	Свободные жирные кислоты, мкмоль/л	Малоновый диальдегид, ммоль/л
Миокард	Головной мозг
Ишемия миокарда	18,8	23,9	23,9	47,6
Ишемия головного мозга	33,9	29,3	29,3	37,5

При исследовании потребления миокардом кислорода манометрическим методом Варбурга показано, что у крыс в условиях острой гипоксической гипоксии привентивное введение КФП-ЯН в/брюшинно ведет к увеличению потребления кислорода миокардом, печенью и полушариями головного мозга. Следовательно,

КФП-ЯН препятствует формированию «кислородного долга» в исследуемых органах, способствуя извлечению тканями животных из крови необходимого количества кислорода.

Таблица 7. Влияние КФП-ЯН (50 мг/кг, в/брюшинно) и кордарона (10 мг/кг, в/брюшинно) на потребление кислорода миокардом, печенью и большими полушариями головного мозга

Группа	Потребление кислорода (мкл/ч/мг сухого вещества)
Миокард	Печень	Головной мозг
Исходное состояние	4,8±0,2	4,3±0,1	6,0±0,1
КФП-ЯН	4,8±0,1	4,4±0,2	6,1±0,1
Кордарон	4,7±0,2	4,3±0,2	5,9±0,2
Гипоксическая гипоксия (ГГ)	6,0±0,1	5,3±0,2	7,2±0,1
КФП-ЯН+ГГ	5,0±0,2*	4,5±0,1*	6,3±0,2*
Кордарон+ГГ	5,0±0,1*	4,4±0,2*	5,8±0,2*

* - Данные достоверны относительно гипоксической гипоксии (р<0.05).

КФП-ЯН, предварительно введенный в/брюшинно, предотвращает развитие в миокарде крыс изменений, связанных с повреждающим действием острой гипоксической гипоксии на ультраструктурную организацию гематопаренхиматозного барьера и митохондриального аппарата (данные патаморфологических исследований). Аналогичным действием обладали и остальные предлагаемые средства.

Результаты изучения острой токсичности показали, что у всех предлагаемых средств ЬИ 50 при внутрибрюшинном введении мышам составляет 1050-1340 мг/кг (ЬЭ 50 КФП 1030 мг/кг).

Предлагаемые средства малотоксичны, они могут быть использованы в любых подходящих лекарственных формах, содержащих эффективное количество предлагаемого средства и фармакологически приемлемые носители и/или наполнители.

Таким образом, предлагаемые средства обладают антиишемической, гипотензивной и антигипоксической активностью, превышающей аналогичную активность Ы-карбамоилметил-4фенил-2-пирролидон (КФП) и ряда известных лекарственных средств. Кроме того, наличие антиишемической активности в совокупности с гипотензивной и антигипоксической делает эти средства перспективными для лечения сердечно-сосудистых заболеваний.

Литература

1. Патент РФ № 1827067, А 61К 31/41, БИ № 19, 1994 г.

2. М.Д. Машковский. Лекарственные средства. Харьков: Торсинг, 1997, т.1, с.262-264.

3. Там же. с. 109-111.

4. Л.А. Лещинский, Л.Г.Пименов, В.С. Федоров. Лечебное применение пирацетама у больных инфарктом миокарда//Кардиология, 1987, № 2, с.46-49.

5. Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве. Сборник научных статей. Пущино, 1997 г.

6. А.С. СССР № 797219, БИ № 21, 1995, А 61 К 31/41, С07 Д 202/26.

7. Ю.Г. Бобков, И.С. Морозов, О.М. Глозман и др. Фармакологическая характеристика нового фенильного аналога пирацетама-4фенилпирацетама.//Бюл.экспер.биологии и медицины. 1983 г, ХСУ, с.50-53.

8. Патент РФ № 2050851. А 61 К 31/40, БИ № 36,1995 г.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Средство, обладающее антиишемической, гипотензивной и антигипоксической активностью, включающее Ы-карбамоилметил-4фенил-2-пирролидон, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит двух- или трехосновную карбоновую кислоту.

2. Средство по п.1, отличающееся тем, что в качестве двухосновной кислоты оно содержит щавелевую, или яблочную, или янтарную кислоту.

3. Средство по п.1, отличающееся тем, что в качестве трехосновной кислоты оно содержит лимонную кислоту.

4. Средство по пп.1-3, отличающееся тем, что отношение Ы-карбамоилметил-4-фенил-2пирролидон: карбоновая кислота составляет 1:(0,5-2,0) моль.