DK176653B1 - Fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad, amideret pektin, som er opnåeligt ved fremgangsmåden, og anvendelse af dette - Google Patents
Fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad, amideret pektin, som er opnåeligt ved fremgangsmåden, og anvendelse af dette Download PDFInfo
- Publication number
- DK176653B1 DK176653B1 DK200201033A DKPA200201033A DK176653B1 DK 176653 B1 DK176653 B1 DK 176653B1 DK 200201033 A DK200201033 A DK 200201033A DK PA200201033 A DKPA200201033 A DK PA200201033A DK 176653 B1 DK176653 B1 DK 176653B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- pectin
- amidated
- esterification
- degree
- biocatalyst
- Prior art date
Links
- 239000001814 pectin Substances 0.000 title claims description 263
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 title claims description 127
- 230000032050 esterification Effects 0.000 title claims description 96
- 235000019824 amidated pectin Nutrition 0.000 title claims description 88
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5-tetrahydroxypentanal Chemical compound OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 60
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 55
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 35
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 11
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 claims description 205
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 claims description 202
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 65
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 65
- 239000011942 biocatalyst Substances 0.000 claims description 65
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 63
- 230000009435 amidation Effects 0.000 claims description 48
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 claims description 48
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 44
- 238000007257 deesterification reaction Methods 0.000 claims description 43
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 claims description 24
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 17
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 15
- 108020004410 pectinesterase Proteins 0.000 claims description 10
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 2
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 claims description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 87
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 81
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 31
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 29
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 20
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 19
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 18
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 17
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N phenolphthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2C(=O)O1 KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 15
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 15
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 15
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 15
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 15
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 14
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 11
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 10
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 230000008859 change Effects 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 8
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 8
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 7
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008231 carbon dioxide-free water Substances 0.000 description 6
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 6
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 6
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 6
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 6
- AEMOLEFTQBMNLQ-YMDCURPLSA-N D-galactopyranuronic acid Chemical group OC1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-YMDCURPLSA-N 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000002210 biocatalytic effect Effects 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 5
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 5
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 5
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 5
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 4
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 4
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical group C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 3
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 3
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000007068 beta-elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 3
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 3
- GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N methyloxidanyl Chemical group [O]C GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 239000001508 potassium citrate Substances 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 238000000518 rheometry Methods 0.000 description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 3
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 3
- WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M sodium benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000010234 sodium benzoate Nutrition 0.000 description 3
- 239000004299 sodium benzoate Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 2
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 2
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 2
- 238000011993 High Performance Size Exclusion Chromatography Methods 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000141359 Malus pumila Species 0.000 description 2
- 229910052774 Proactinium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011034 Rubus glaucus Nutrition 0.000 description 2
- 244000235659 Rubus idaeus Species 0.000 description 2
- 235000009122 Rubus idaeus Nutrition 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910021607 Silver chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000005576 amination reaction Methods 0.000 description 2
- 235000021016 apples Nutrition 0.000 description 2
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 238000004049 embossing Methods 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000005297 material degradation process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 125000004492 methyl ester group Chemical group 0.000 description 2
- 238000001320 near-infrared absorption spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 229960002635 potassium citrate Drugs 0.000 description 2
- QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K potassium citrate (anhydrous) Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 235000011082 potassium citrates Nutrition 0.000 description 2
- 235000013995 raspberry juice Nutrition 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M silver monochloride Chemical compound [Cl-].[Ag+] HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(I) nitrate Inorganic materials [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YAONEUNUMVOKNQ-UHFFFAOYSA-N 15-(4-iodophenyl)pentadecanoic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC1=CC=C(I)C=C1 YAONEUNUMVOKNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 2,4-Hexadienoic acid, potassium salt (1:1), (2E,4E)- Chemical compound [K+].CC=CC=CC([O-])=O CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 231100000716 Acceptable daily intake Toxicity 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000144927 Aloe barbadensis Species 0.000 description 1
- 235000002961 Aloe barbadensis Nutrition 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102100032487 Beta-mannosidase Human genes 0.000 description 1
- 241000208199 Buxus sempervirens Species 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 1
- 240000000560 Citrus x paradisi Species 0.000 description 1
- 241001137251 Corvidae Species 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001096557 Dickeya dadantii (strain 3937) Rhamnogalacturonate lyase Proteins 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061459 Gastrointestinal ulcer Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000208818 Helianthus Species 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 241000030781 Ippa Species 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010029182 Pectin lyase Proteins 0.000 description 1
- 240000004760 Pimpinella anisum Species 0.000 description 1
- 235000012550 Pimpinella anisum Nutrition 0.000 description 1
- 239000004820 Pressure-sensitive adhesive Substances 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 240000006909 Tilia x europaea Species 0.000 description 1
- 241000382509 Vania Species 0.000 description 1
- -1 acetate ester Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002390 adhesive tape Substances 0.000 description 1
- 235000011399 aloe vera Nutrition 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-BKBMJHBISA-N alpha-D-galacturonic acid Chemical group O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-BKBMJHBISA-N 0.000 description 1
- 238000011938 amidation process Methods 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940125714 antidiarrheal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003793 antidiarrheal agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 108010055059 beta-Mannosidase Proteins 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 239000009194 citrus pectin Substances 0.000 description 1
- 229940040387 citrus pectin Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 235000021567 cream sauce Nutrition 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000017858 demethylation Effects 0.000 description 1
- 238000010520 demethylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 238000005485 electric heating Methods 0.000 description 1
- 208000010227 enterocolitis Diseases 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000019985 fermented beverage Nutrition 0.000 description 1
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N ferulic acid Chemical group COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 1
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 208000021302 gastroesophageal reflux disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 235000021474 generally recognized As safe (food) Nutrition 0.000 description 1
- 235000021472 generally recognized as safe Nutrition 0.000 description 1
- 235000021473 generally recognized as safe (food ingredients) Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 208000024798 heartburn Diseases 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 230000000260 hypercholesteremic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003871 intestinal function Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002356 laser light scattering Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M lithium acetate Chemical compound [Li+].CC([O-])=O XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Natural products C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N methyl red Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1C(O)=O CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000020124 milk-based beverage Nutrition 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 235000019825 non-amidated pectin Nutrition 0.000 description 1
- GHLZUHZBBNDWHW-UHFFFAOYSA-N nonanamide Chemical compound CCCCCCCCC(N)=O GHLZUHZBBNDWHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010087558 pectate lyase Proteins 0.000 description 1
- 239000010178 pectin extract Substances 0.000 description 1
- 108010072638 pectinacetylesterase Proteins 0.000 description 1
- 102000004251 pectinacetylesterase Human genes 0.000 description 1
- 235000015108 pies Nutrition 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229960003975 potassium Drugs 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 150000003109 potassium Chemical class 0.000 description 1
- 239000004302 potassium sorbate Substances 0.000 description 1
- 235000010241 potassium sorbate Nutrition 0.000 description 1
- 229940069338 potassium sorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 235000011962 puddings Nutrition 0.000 description 1
- 239000005297 pyrex Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000007916 tablet composition Substances 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 239000000606 toothpaste Substances 0.000 description 1
- 235000015870 tripotassium citrate Nutrition 0.000 description 1
- 210000002438 upper gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000000196 viscometry Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0045—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Galacturonans, e.g. methyl ester of (alpha-1,4)-linked D-galacturonic acid units, i.e. pectin, or hydrolysis product of methyl ester of alpha-1,4-linked D-galacturonic acid units, i.e. pectinic acid; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L21/00—Marmalades, jams, jellies or the like; Products from apiculture; Preparation or treatment thereof
- A23L21/10—Marmalades; Jams; Jellies; Other similar fruit or vegetable compositions; Simulated fruit products
- A23L21/15—Marmalades; Jams; Jellies; Other similar fruit or vegetable compositions; Simulated fruit products derived from fruit or vegetable juices
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/20—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing gelling or thickening agents
- A23L29/206—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing gelling or thickening agents of vegetable origin
- A23L29/231—Pectin; Derivatives thereof
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Jellies, Jams, And Syrups (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Description
DK 176653 B1
Titel. Fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med iav forestrinqsqrad, amideret pektin, som er opnåeligt ved fremgangsmåden, og anvendelse af dette 5 Teknisk område
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad, som tilvejebringer geler med høj styrke. Yderligere angår opfindelsen amiderede pektiner, som er opnåelige ved denne 10 fremgangsmåde, samt anvendelser af sådanne pektiner
Kendt teknik
Pektin er et komplekst polysaccharid, som er forbundet med plantecellevægge.
15 Det består af en α-Ι-4-forbundet polygalacturonsyre-rygrad, som har mellemliggende rhamnose-rester, og som er modificeret med neutrale sukker-sidekæder og ikke-sukker-komponenter, såsom acetyl-, methyl- og ferulasyre-grupper.
De neutrale sukker-sidekæder, som indbefatter arabinan og arabingalactaner, 20 er forbundet til rhamnose-resterne i rygraden. Rhamnose-resterne har tendens til at klumpe sammen på rygraden. Således omtales denne region med sidekæderne som hår-regionen, og resten af rygraden navngives følgelig den glatte region.
25 Pektiner anvendes traditionelt som fødevareadditiver. Deres anvendelse har imidlertid ligeledes bredt sig til de farmaceutiske områder. Pektiner har længe været anvendt som et anti-diarrémiddel, og de kan forbedre tarmfunktionen. An-ti-diarré-virkningen menes delvist at skyldes pektins anti-mikrobielle aktivitet.
30 Pektiner er også virkningsfulde mod gastrointestinal ulcus og enterocolitis Pektiner har desuden indflydelse på celle-proliferationen i tarmene. De har også blod-cholesterol-formindskende virkning og udviser inhibering af atherosclerosis. Denne virkning er resultatet af vekselvirkninger mellem pektiner og galde- DK 176653 B1 2 salte. Pektiner har også vist sig at påvirke fibrin-nettet hos hypercholesterolæ-miske individer.
Evnen ti! vekselvirkning med mange divaiente metalioner gør pektiner til et 5 stærkt detoksificerende middet.
Modstandsdygtigheden hos pektin over for nedbrydning i den øvre mave-tarm-kanal og dets fuldstændige opløsning i tyktarmen gør pektiner meget egnede til colon-specifik levering. Coacervering med gelatine muliggør dannelsen af mi-10 krokugler, som er egnede til produkter med styret frigivelse. Yderligere anvendes pektin i tablet-formuleringer
Ifølge Kertesz, Z.l: The Pectic Substances, Interscience Publishers, Inc., New York, 1951, forekommer pektin-materialer i alt plantevæv. Af industriel vigtighed 15 er imidlertid især æbler, roer, hør, grapefrugt, citroner, lime, appelsiner, kartofler og solsikke. For nyligt har også pektin i Aloe vera udvist industriel anvendelighed.
Historisk set har pektin hovedsageligt været anvendt som geleringsmiddel til 20 marmelade eller lignende frugt-holdige eller frugt-aromatiserede, sukker-rige systemer. Eksempler er traditionel marmelade, marmelade med reduceret sukkerindhold, klare geleer, frugt-aromatiserede konfektioneringsgeler, ikke-frugt-aromatiserede konfektioneringsgeler, varmereversible glasurer til bagein-dustrien, varme-resistente marmelader til bageindustrien, ripples til anvendelse i 25 flødeis og frugtfremstillinger til yoghurt.
En væsentlig del af pektin anvendes i dag til stabilisering af mælkedrikke med lav ρΗ-værdi, herunder fermenterede drikke og blandinger af frugtjuice og mælk.
For nyligt har pektiner vist sig at være effektive til behandling af halsbrand forårsaget af esophagealsyre-reflux 30 DK 176653 B1 3
Galacturonsyre-resterne i pektin er delvist esterificerede, og de er til stede som methylesteren. Esterificeringsgraden defineres som procentdelen af carbo-xylgrupper, som er esterificerede. Pektin med en esterificeringsgrad ("DE") over 50% kaldes pektin med høj methylforestringsgrad ("HM") eller pektin med høj 5 forestringsgrad og pektin med en DE på mindre end 50% omtales som pektin med lav methylforestringsgrad ("LM”) eller pektin med lav forestringsgrad. De fleste pektiner, som forefindes i frugt- og grøntsager, er HM-pektiner. Aceta-tester-grupper kan yderligere forekomme ved carbon-2 eller -3 af galacturonsy-reresterne. Graden af acetatesterificering ("DAc") defineres som procentdelen 10 af gaiacturonsyrerester, som indeholder en acetatester-gruppe De fleste naturlige pektiner har en lav DAc, idet en undtagelse er sukkerroe-pektin.
Pektiner er opløselige i vand og uopløselige i de fleste organiske opløsningsmidler Pektiner med en meget lav grad af methyl-forestring og pektinsyrer er til 15 praktiske formål kun opløselige i form af et kalium- eller natriumsalt
Pektiner er mest stabile ved pH-værdi 3-4. Under pH-værdi 3 Ijernes methoxyl-og acetyl-grupper og neutrale sukker-sidekæder. Ved forhøjede temperaturer accelereres disse reaktioner, og spaltning af glycosid-bindinger i galacturonan-20 rygraden forekommer. Under neutrale og alkaliske betingelser forsæbes methy-lestergrupper og polygalacturonan-rygraden går i stykker via β-elimineringsspaltning af glycosid-bindinger ved de ikke-reducerende ender af methoxylerede galacturonsyre-rester. Disse reaktioner fremskrider også hurtigere med forøget temperatur. Pektinsyrer og LM-pektiner er resistente over for 25 neutrale og alkaliske betingelser, eftersom der ikke er nogen eller kun er et begrænset antal methylestergrupper.
Der er mange biokatalysatorer, som specifikt kan modificere og nedbryde pektin-molekyler. Disse biokatalysatorer indbefatter endo- og exo-30 polygalacturonase, pektat-lyase, pektin-methylesterase, pektin-acetylesterase og rhamnogalacturonase. Ifølge Rastall, R.: LFR Ingredients Handbook, Leatherhead Food RA, marts 1999, indbefatter pektinaser fra Aspergillus spp: DK 176653 B1 4
Biokatalysator EC nr. Substrat Virkning pH Temp.
_______opt, opt.
Pektinlyase 4.2.2.10 Pektin med høj Endoa-1,4 5-5,5 50 forestringsgrad b eliminer- ____ing___
Pektinmethyl- 3.1.1.11 Pektin med høj Tilfældig de- 4-4,5 55 esterase forestringsgrad esterificer- ______ing___
Endo- 3.2,1.15 Pektin med lav Endoa-1,4 4-4,5 45-50 polygalacturonase forestringsgrad depoiymeri- _____sering___
Exo- 3.2.1.67 Pektin med lav Exoa-1,4 5 55 polygalacturonase___forestringsgrad hydrolyse__
Arabinogalac- 3.2,1,90 Hår-regioner af Endob-1,3 4 50 tanase pectin 1,6hydro- ____lyse____
Mannanase 3.2.1.78 Hår-regioner af Endob-1,4 3-6 80 __pectin_hydrolyse __
Leverandører indbefatter Gist-Brocades, Novo Nordisk A/S, Rohm, Shin Nihon og Solvay.
5 Både HM og LM-pektiner kan danne geler, men ved fuldstændigt forskellige mekanismer. HM-pektin danner geler i nærværelse af høje koncentrationer af co-opløst stof, såsom sukker ved lav pH-værdi. LM-pektiner danner termorever-sible geler i nærværelse af calcium. Yderligere kan sukkerroe-pektin danne geler via tværbinding af de ferulerede grupper som beskrevet af Rombouts (US 10 4.672,034).
Pektiner har god lovgivningsmæssig status som et fødevareadditiv. De klassificeres som "Generally Recognized As Safe" ("GRAS") i USA og "Acceptable Daily Intake ("ADI") i europa.
15 I US 2,480. 710, Bryant, beskrives en fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin. En langsomt gelé-dannende pektintype med 7,5% til 10% methoxy-indhold opsiæmmes i 65% IPA med 10% ammoniumhydroxid (28% ammoniak), og blandingen omrøres i to timer ved 25°C. Efter dræning af ammoniak-alkohol 20 tilsættes friskt 65% IPA. Koncentreret HCI tilsættes derefter til en surhed, som DK 176653 B1 5 resulterer i en pH-værdi af en 1% dispersion af det amiderede pektin på 3-4. pH-værdi højere end 5 og under 3 forårsager sandsynligvis yderligere uønsket modifikation under tørring. Opslæmningen filtreres og skylles først med 65% IPA og derefter med 90% IPA og tørres derefter Omdannelsen følger; 5
RCOOCHs + NH4OH = RCONHa + CH3OH + HzO
Den ønskede mængde ammoniak ligger i intervallet fra 2 til 16 gange mængden, som teoretisk påkræves til fuldstændig de-esterificering af det oprindelige 10 udgangsmateriale.
I stedet for anvendelse af et isoleret pektin, kan våd pektinudfældning benyttes.
I US 2.478.170 beskriver William et al., at pektin med lav forestringsgrad kan 15 fremstilles ved den delvise de-esterificering af enten pektin eller protopektin.
William et al anvender et pektin-udgangsmateriale, som er umodificeret, og som udviser en esterificeringsgrad på ca, 80%. Syre, alkali eller biokatalysatorer katalyserer denne de-esterificering I beskrivelsen anvendes alkali som de-esterificeringsmidlettil opnåelse af en esterificeringsgrad på 20 til 30%.
20 I US 2.448 818 beskriver McCready et al. anvendelsen af citrus-pektinesterase ti! in situ omdannelse af pektin til pektin med lav forestringsgrad og med et methoxyl-indhold på 6%, svarende til en esterificeringsgrad på ca. 37% Biokatalysatoren, som benyttes, er naturligt forekommende i citrusfrugt, og det er 25 kendt, at sådanne plante-esteraser resulterer i en blokvis de-esterificering.
I US 3.622.559 fremstiller Wiles et al. et pektin-udgangsmateriale via syreekstraktion ved ca. 70°C i 1-2 timer, Dette fører til et pektin med en molekylvægt (Mw) på 180.000 til 200.000 Dalton og et methoxyl-indhold på 10% (DE=61%) 30 til 10,5% (DE=64%). Dette pektin kan derefter yderligere de-esterificeres ved behandling af pektinet med syre eller en ammoniak-alkohol-blanding. Denne fremgangsmåde fører til pektin med lav forestringsgrad og med en molekylvægt (Mw) på 120.000 til 200 000 Dalton.
DK 176653 B1 6 I US 4.065.614 beskriver Nelson et amideret pektin med en amideringsgrad på mindst 27%. Udgangspektin-materialet skal have en esterificeringsgrad på over 60%, og amideringen gennemføres ved anvendelse af en blanding af flydende 5 ammoniak i et egnet organisk opløsningsmiddel, såsom isopropanol. Reaktionen gennemføres ved en temperatur inden for intervallet fra -15 - +15°C, indtil amideringsgraden har nået mindst 27%. Pektin-udgangsmaterialet beskrives som et hvilket som helst af de kommercielt tilgængelige pektiner med høj forestringsgrad.
10 I DK 157.616 B beskriver Buhi et al. et amideret pektin med en amideringsgrad på 5-25%, en forestringsgrad på mindst 50% og en gennemsnitlig molekylvægt på 15.000-75.000 Dalton Pektin-udgangsmaterialet fremstilles i overensstemmelse med en traditionel syreekstraktion, og amidering gennemføres i en blan-15 ding af flydende ammoniak og isopropanol ved 0°G..
I WO 98/58968 beskriver Larsen et al en fremgangsmåde til fremstilling af udvalgte fraktioner af pektin med høj forestringsgrad. Fremgangsmåden indbefatter to eller flere ekstraktionstrin, som er karakteristiske ved, at hvert foregående 20 trin indbefatter ekstraktion af pektinet fra det foregående trin ved lavere pH-værdi. Fraktioner af pektin med høj forestringsgrad er også nyttige som udgangsmaterialer til fremstilling af de-esterificeret pektin. Pektinudgangsmaterialet til de-esterificering har en DE på over 50%, og behandles med et de-esterificeringsmiddel til opnåelse af en pektin-fraktion med en 25 forestringsgrad, som reduceres med mindst 5% i forhold til graden for fraktionen af pektin med høj forestringsgrad og en amideringsgrad i intervallet 0-25%. De-esterificeringsmidler er syrer, alkalier eller kombinationer deraf.
I WO 00/08952 beskriver Madsen et al. en pektin-sammensætning, som ikke til-30 vejebringer nogen væsentlig gelering. Det beskrives, at forestringsgraden og/eller graden af blokstruktur kan modificeres ved anvendelse af biokatalysatorer, som opnås fra planter eller bakterier.
DK 176653 B1 7 I WO 00/15830 beskriver Christensen et al. en fremgangsmåde ti! behandling af pektin med en pektinmethylesterase. Pektin-methylesterasen hidrører ikke fra planter, men har mindst én plante-pektin-methylesterase-egenskab. Denne egenskab er den blok-vise de-esterificering af pektin, og det behandlede pektin 5 beskrives at indeholde mindst 70% estergrupper I US 6 069.000 beskriver Andersen et al. en biokatalysator med pektin-esterase-aktivitet. Opfinderne mener, at den forbedrede ydelse af pektin-esterasen ifølge opfindelsen skyldes virkningsmåden for biokatalysatoren ifølge 10 opfindelsen, idet der fortrinsvis tilvejebringes en blok-vis fordeling af syregrupperne i pektinet I US 5.707.847 har Cristgau et al. beskrevet en biokatalysator, som udviser pektin-methyl-esterase-aktivitet. Biokatalysatoren kan anvendes til demethyle-15 ring af pektin, f.eks. fra citrus, æbler, solsikker og/eller sukkerroe. Biokatalysatoren kan anvendes til fremstilling af lavt methyleret pektin ud fra højt methyleret pektin.
I denne reference er mikrobiel pektin-esterase sammenlignelig med hensyn til 20 virkning med syre og alkali, dvs. de-esterificering er tilfældig af beskaffenhed.
Ved de traditionelle fremgangsmåder til de-esterificering af pektin involverer kemiske fremgangsmåder anvendelsen af syre- eller alkalibehandiing af pektiner med høj forestringsgrad. Det er kendt, at disse fremgangsmåder resulterer i 25 depolymerisering af pektinet med høj forestringsgrad under de-esterificeringen, og som følge heraf skal kemisk de-esterificering typisk finde sted ved lave temperaturer. På den anden side gør dette de-esterificeringsprocessen langsom og yderligere gør investeringer i køleudstyr sådanne de-esterificerede pektiner mere omkostningsfyldte at fremstille. Yderligere, eftersom det er kendt, at de kemi-30 ske processer fjerner estergrupper på tilfældig vis, er de resulterende de-esterificerede pektiner med hensyn til carboxylsyregrupper mindre blok-agtige.
Det er kendt, at enzymatiske fremgangsmåder de-esterificerer pektin med høj DK 176653 B1 8 forestringsgrad på enten en tilfældig måde eller på en blok-vis måde. Yderligere er det kendt, at enzymatisk de-esterificering reducerer eller eliminerer depoly-merisation af pektinet med høj forestringsgrad under de-esterificeringen.
5 Imidlertid lider enzymatisk de-esterificering under det faktum, at esterificerings-graden ikke kan bringes under ca. 25%, som det beskrives af Smythe {US 2 599.531). Yderligere er der ikke beskrevet nogen enzymatisk proces, som resulterer i amiderede pektiner.
10 Der forbliver således det problem, at traditionelt fremstillede amiderede pektiner med lav forestringsgrad stadig lider under glycosid-nedbrydning og aggregering under amidering. Dette fører til amiderede pektiner med ændret konformation på grund af aggregering.
15 Tilstedeværelsen af pektin-aggregater i opløsning er rapporteret i litteraturen (Sorochan et al. 1971. Carbohydr. Res. bind 20, side 243-248; Jordan, R„ C. og Brant, D. A. 1978. Biopolymers, bind 17, side 2885-2895; Davis et al, 1980 Int J Biol, Macromol, bind 2, side 330-332). Pektin-aggregater dannes i opløsning under ikke-gelerende betingelser og kan anses for at være forstadier til gele- 20 ring; US patent nr. 6 143.337 i navnet Fishman, et al. Denne aggregering menes at forårsage, at det amiderede pektin bliver mindre opløseligt, hvilket fører til en lavere geleringsstyrke end den teoretisk mulige. Yderligere er ikke-amiderede pektiner med lav forestringsgrad med en esterificeringsgrad under 25% derfor fremstillet ved enten syre- eller alkali-de-esterificering, og for disse 25 pektiner med lav forestringsgrad forekommer det samme problem, nemlig at syre- eller alkali-hydrolyse reducerer molekylvægten af pektinet, og som følge heraf frembringes et pektin med lav forestringsgrad og med en lavere geleringsstyrke end det teoretisk mulige.
30 Følgelig er der et behov for en fremgangsmåde, som frembyder: ® En fremgangsmåde til reduktion af graden til esterificering til under 25% med mindre nedbrydning af glycosid-bindingerne i pektin-rygraden.
DK 176653 B1 9 ® Ikke-amiderede pektiner med lav forestringsgrad med en esterificeringsgrad under 25% med højere molekylvægt og en ikke-aggregeret eller mindre ag-gregeret konformation til tilvejebringelse afen stigning i geleringsstyrke.
• En fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med højere molekyl-5 vægt og en mindre aggregeret konformation.
• Amiderede pektiner med lav forestringsgrad og højere molekylvægt og en ikke-aggregeret eller mindre aggregeret konformation til tilvejebringelse af en stigning i geleringsstyrke.
10 Kort beskrivelse af opfindelsen
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde, med hvilken et pektinekstrakt først de-esterificeres ved anvendelse af en biokatalysator. Herefter de-esterificeres det de-esterificerede pektin med høj molekylvægt yderligere og det 15 amideres ved anvendelse af traditionelle fremgangsmåder. Eftersom biokatalysatoren kan de-esterificere til en DE på ca 25%, har traditionel de-esterificering og amidering lille indflydelse på molekylvægten af pektinet, da antallet af estergrupper væsentligt reduceres i den første del af fremgangsmåden 20 Nærmere bestemt angår den foreliggende opfindelse en fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad omfattende trinnene: opnåelse af et pektin-udgangsmateriale, at bringe pektin-udgangsmaterialet i kontakt med en biokatalysator, som er i stand til at de-esterificere pektin-udgangsmaterialet, at gøre det muligt for biokatalysatoren at de-estificere pek-25 tin-udgangsmaterialet ti! frembringelse af et de-esterificeret pektin, og yderligere de-esterificering af det de-esterificerede pektin ved at bringe det de-esterificerede pektin i kontakt med en syre eller et alkali, som er i stand til at de-esterificere, og at gøre det muligt for syren eller alkaliet yderligere at de-esterificere det de-esterificerede pektin ti! frembringelse af et pektin med lav 30 forestringsgrad, hvor pektin-materialet under eller efter den yderligere de-esterificering amideres ved at bringe det de-esterificerede pektin i kontakt med ammoniak.
DK 176653 B1 10
Ved fremgangsmåden gøres det fortrinsvis muligt for biokatalysatoren at de-esterificere pektin-udgangsmaterialet til en forestringsgrad under 60% før yderligere de-esterificering af det de-esterificerede pektin, idet man især foretrækker en forestringsgrad på mellem 60% og 30%, mere foretrukket mellem 45% og 5 30% og mest foretrukket mellem 45% og 40%, specielt en forestringsgrad på 42%, før yderligere de-esterificering af det de-esterificerede pektin.
Den ved fremgangsmåden udvalgte biokatalysator udvælges fortrinsvis fra gruppen omfattende pektin-methylesterase (E C 3.1.111), som enten de-10 esterificerer på tilfældig måde eller på blokagtig måde.
Den foreliggende opfindelse angår også et amideret pektin, som er ejendommeligt ved at have et forhold R2, mellem den indre viskositet for det de-esterificerede udgangs-pektin og den indre viskositet for det amiderede pektin i 15 intervallet fra 1,01 til 1,25, Det foretrækkes, at forholdet R2 ligger i intervallet fra 1,03 til 1,18, især fra 1,04 til 1,15. Det amiderede pektin har en forestringsgrad på 30% eller mindre, fortrinsvis 10-20%, og en amideringsgrad på 18% eller mindre..
20 De amiderede pektiner ifølge den foreliggende opfindelse er nyttige i fødevarer, mere specielt i marmelader og geléer og mejeriprodukter De amiderede pektiner ifølge den foreliggende opfindelse er også nyttige i farmaceutiske produkter, produkter til personlig pleje og i husholdningsprodukter..
25 Andre eksempler på udførelsesformer og fordele ifølge den foreliggende opfindelse kan fastslås ved at gennemgå den foreliggende beskrivelse og de tilhørende tegninger.
Kort beskrivelse af tegningerne
Fig. 2.3 afbilder data fra tabel 2.3 med gelstyrke langs y-aksen og calcium-koncentration langs x-aksen.
30 DK 176653 B1 11
Fig. 2 4 afbilder data fra tabe! 2,4, hvor y-aksen repræsenterer værdier af kritisk spænding, og x-aksen repræsenterer caiciumkoncentration
Fig. 2 5 er et plot med calcium-koncentration langs x-aksen og brudstyrke langs 5 y-aksen.
Fig. 2 6 afbilder data fra tabe! 2.6, med calcium-koncentration langs x-aksen og gelstyrke langs y-aksen.
10 Fig. 3.1 er et plot af data fra tabel 3,1 med DE langs x-aksen og Mark-Houwink-faktoren langs y-aksen,
Fig. 3.2 er et plot af data fra tabel 3.2 med DE langs x-aksen og brudstyrke langs y-aksen .
15
Fig 4.1 angiver data fra tabel 4.1, som vedrører test nr. 1 og viser gelstyrke af amideret pektin, som er fremstillet ud fra pektin-udgangsmateriale ved forskellige DE For hver udgangspektin-DE viser plottet også, hvorledes gelstyrken påvirkes af forskellige calciumion-koncentrationer 20
Fig. 4.2 er et plot af data fra tabel 4.1, som angår test nr. 2 og den viser gelstyrken af amideret pektin, som er fremstillet ud fra pektin-udgangsmateriale ved forskellige DE. For hver udgangspektin-DE viser plottet også, hvorledes gelstyrken påvirkes af forskellige calciumion-koncentrationer.
25
Bedste måde til udøvelse af opfindelsen
Uden at ønske at være bundet til nogen teori ændrer pektin-materialet molekylvægt og konformation under en amideringsproces. Pektinmolekyler påvirkes af 30 to fænomener. Et er β-eliminering, hvorved molekylet depolymeriseres til en lavere molekylvægt, og det andet er aggregering, hvorved molekylet ændrer konformation og molekylvægten forøges. Det har nu vist sig, at jo højere % DE forud for amidering, des mere aggregeret bliver det endelige produkt. Denne ag- DK 176653 B1 12 gregering antages sammen med en mere udtalt β-eliminerlng for pektin med høj %DE at være ansvarlig for faldet i gelstyrken, som observeres, når % DE af pektinet forud for amidering forøges Aggregering til det ekstreme vil føre til uopløselighed af polymeren og kan også forventes at være ansvarlig for mikro-5 geler eller præ-gelering, idet der resulteres i upassende gelstrukturer. Derfor skal pektinet, som anvendes til amidering, være de-esterificeret for at minimere tendensen til aggregering. Til opnåelse af et efterfølgende amideret pektin med høj geleringsstyrke, skal de-esterificeringstrinnet også gennemføres under betingelser, som minimerer depolymerisering, 10
Det er nu opdaget, ved først at anvende biokatalytisk (f.eks. enzymatisk) de-esterificering, at depolymerisationen og aggregeringen under en efterfølgende kemisk de-esterlficering og amidering reduceres betydeligt Resultatet er de-esterificerede og amiderede pektiner med hidtil ukendt lav tendens til aggrege-15 ring og samtidig ukendt høj molekylvægt.
I en foretrukken udførelsesform gennemføres de-esterificeringen med biokatalysatorer til en esterificeringsgrad på mellem 60 og 30% før amidering.
20 I en mere foretrukken udførelsesform gennemføres de-esterificeringen med biokatalysator til en esterificeringsgrad på mellem 45 og 30%.
I en endnu mere foretrukken udførelsesform gennemføres de-esterificeringen med biokatalysator til en esterificeringsgrad på mellem 45 og 40%.
25 I den mest foretrukne udførelsesform gennemføres de-esterificeringen med biokatalysator til en esterificeringsgrad på 42%,
Disse forskelle fra kendte pektiner resulterer i en række fordele: De-30 esterificerede pektiner, som er fremstillet i overensstemmelse med den foreliggende opfindelse, frembringer vandige geler med større stivhed og brudstyrker end kendte de-esterificerede pektiner, og den foreliggende opfindelse gør det let præcist at styre esterificeringsgraden og fordelingen af estergrupper og/elier DK 176653 B1 13 amid-grupper.
Fremgangsmåden indbefatter de følgende trin: 5 For det første ekstraheres pektin med høj forestringsgrad fra et pektin-holdigt udgangsmateriale i overensstemmelse med kendte fremgangsmåder, dvs, ekstraktion i enten surt eller alkalisk vand ved forhøjet temperatur. Eventuelt kan ekstraktet koncentreres ifølge kendt teknik. Alternativt opløses kommercielt, tørt pektin med høj forestringsgrad eller på forhånd ekstraheret, oprenset, isoleret 10 og tørret pektin med høj forestringsgrad igen, og det koncentreres eventuelt.
For det andet indstilles pektin-opløsningen, om nødvendigt, for at tilvejebringe de ønskede betingelser for aktiviteten af biokatalysatoren, Disse indstillinger kan indbefatte ændring eller overvågning af pektin-opløsningens temperatur, 15 pH-værdi eller ionisk koncentration.
Hvis pH-værdien af pektin-opløsningen skal indstilles til den optimale pH-værdi for den anvendte biokatalysator, og i tilfælde, hvor aktiviteten af biokatalysatoren skal forøges ved lavere pH-værdier, kan ionstyrken af udfældningen eller 20 opslæmningen forøges med salte, såsom natriumchlorid.
Under omrøring får biokatalysatoren mulighed for at virke på pektinet, og graden af esterificering overvåges let via den nødvendige tilsætning af alkali til opretholdelse af reaktionens pH-værdi. På denne måde er det let at opnå et de-25 esterificeret pektin med en særlig esterificeringsgrad. Fremgangsmåden kan også gennemføres kontinuert., I dette tilfælde kan in-line titreringsudstyr anvendes til overvågning af esterificeringsgraden og rørlængden, hvor de-esterificeringen finder sted og flowhastigheden af materialet, som skal de-esterificeres, bestemmer den endelige esterificeringsgrad. Andre fremgangs-30 måder til bestemmelse af esterificeringsgrad, såsom anvendelsen af nærinfrarød spektrometri (NIR), kan anvendes til overvågning af esterificeringsgraden DK 176653 B1 14
For det tredje kan den enzymatiske de-esterificering afsluttes med varme, syre eller alkali ved en hvilken som helst ønsket esterificeringsgrad.
Det er imidlertid opdaget, at særlig høj indre viskositet og høj Mark-Houwink-5 faktor, som uden at ønske at være bundet af teori kan henføres til lav aggregering, opnås, når de-esterificeringen af udgangsmaterialet bringes til afslutning, når esterificeringsgraden er reduceret til en værdi inden for intervallet på 30-60%. Dette fører til særlig høj gelstyrke af de resulterende amiderede pektiner Yderligere er det opdaget, at når de-esterificeringen bringes inden for samme 10 interval, dvs, 30-60% ved anvendelse af traditionelle midler, er aggregeringen af det resulterende amiderede pektin lignende aggregeringen af amideret pektin, som fremstilles ved først at de-esterificere med biokatalysator. Ved anvendelse af den traditionelle tilgang vil molekylvægten imidlertid være lavere end tilfældet er, når der anvendes biokatalysator. Yderligere opnås amiderede pektiner med 15 lavere gelstyrke, end amiderede pektiner, som fremstilles ved først at de-esterificere ved anvendelse af en biokatalysator.
For det fjerde udfældes det de-esterificerede pektin i alkohol, hvis de-esterificeringen fandt sted i opløsning Efter presning formindskes pH-værdien 20 af blandingen af udfældet de-esterificeret pektin og alkohol derefter med syre eller forøges med alkali i overensstemmelse med traditionel teknik. Ved at gøre dette kan esterificeringsgrader under 25% opnås uden et betydeligt tab af molekylvægt af det de-esterificerede pektin. Hvis det anvendte alkali er ammoniak, resulterer de-esterificerede og amiderede pektiner uden et betydeligt tab i mo-25 lekylvægt af det de-esterificerede og amiderede pektin.
Amideringen finder sted ved opslæmning af det udfældede de-esterificerede pektin i 60-70%, fortrinsvis 70% isopropanol, hvori der er opløst 20-30% (volu-men/volumen), fortrinsvis 25-26% (volumen/volumen) ammoniak. Denne op-30 slæmning holdes ved 0°C til stuetemperatur, fortrinsvis 0-10°C, og mest foretrukket ca. 5°C i et tidsrum, som er tilstrækkeligt til at forårsage den ønskede grad af amidering.. Efter fuldendelse af amideringen drænes det amiderede pektin, og det vaskes med 50-70%, fortrinsvis 60% isopropanol, hvorefter pH- DK 176653 B1 15 værdien indstilles til 4,2-4,4 med et alkali, såsom NaOH eller Na2C03 Endelig vaskes det amiderede pektin med 40-60% isopropanol, fortrinsvis 50% isopro-panol, hvorefter det presses og tørres ved en temperatur under 75°C.
5 Endelig tørres det resulterende slutprodukt, og det formales i overensstemmelse med traditionelle fremgangsmåder.
Denne fremgangsmåde fører til de-esterificerede og/eller eventuelt amiderede pektiner af hidtil ukendt funktionalitet, især med hensyn til gel-egenskaberne i 10 vandigt medium, herunder gelstyrke, brudstyrke, viskositet og til geler, som udviser en lavere grad af synerese og højere geleringstemperaturer og højere smeltetemperatur- Yderligere er de amiderede pektiner ifølge den foreliggende opfindelse fordelagtige på grund af deres forøgede opløselighed i vandige systemer.
15
Uden at ønske at være bundet til teori, menes det, at disse træk resulterer fra en væsentlig lavere depolymerisation af pektinet ifølge den foreliggende opfindelse sammen med en lavere tendens til aggregering.
20 Disse forbedrede egenskaber af det amiderede pektin ifølge den foreliggende opfindelse er nyttige til fremstillingen af fødevarer, farmaceutiske produkter, produkter til personlig pleje og til husholdningsprodukter.
De amiderede pektiner ifølge den foreliggende opfindelse er særligt nyttige til 25 fødevarer, såsom marmelader og geléer ved både høje og lave indhold af opløselige faststoffer med og uden frugt. Eksempler på sådanne slutanvendelser er traditionel marmelade, marmelade med reduceret sukkerindhold, klare geleer, frugt-aromatiserede konfektioneringsgeler, ikke-frugt-aTomatiserede konfektioneringsgeler, varmereversible glasurer til bageindustrien, varme-resistente syl-30 tetøjer til bageindustrien, ripples til anvendelse i flødeis og frugtfremstillinger til yoghurt.
De amiderede pektiner ifølge den foreliggende opfindelse er også nyttige til me- DK 176653 B1 16 jeriprodukter, såsom i yoghurt, cremesaucer, tærter, buddinger, pynt og fyld.
Eksempler på farmaceutiske produkter, hvor de amiderede pektiner ifølge den foreliggende opfindelse kan være nyttige, indbefatter tabletter, kapsler, forbin-5 dingspleje- og ostomi-produkter, som udnytter pektiner i deres formuleringer.
Eksempler på produkter til personlig pleje, hvor de amiderede pektiner ifølge den foreliggende opfindelse kan anvendes, indbefatter forskellige cremer, lotioner og tandpastaer, som benytter pektiner i deres formuleringer.
10
Eksempler på husholdningsprodukter, hvor de amiderede pektiner ifølge den foreliggende opfindelse kan anvendes, indbefatter forskellige luftforfriskende geler, renseprodukter og detergentformuleringer, som benytter pektiner i deres formuleringer.
15
Bestemmelse af rheoioaiske udtryk: ® Kritisk spænding som bestemt med RheoStress RS-100 er et mål for brudstyrken af gelen. De opnåede værdier med denne type udstyr karakteriseres 20 ved at være uafhængige af det særlige apparat, som benyttes ® Brudstyrke som målt ved TA.XT2 Analyser er en destruktiv fremgangsmåde til måling af kraften, som er nødvendig til at bryde en gel, og denne fremgangsmåde frembringer værdier, som ikke nødvendigvis er uafhængig af det anvendte apparat.
25 e Gelstyrke som målt med RheoStress RS-100 er en ikke-destruktiv måde til måling af hårdheden af en gel.
o Gelstyrke som målt med TA.XT2 Analyser er ligeledes et mål for hårdheden af gelen.
o Indre viskositet er viskositeten af en uendeligt fortyndet opløsning af polyme- 30 ren En lav indre viskositet indikerer en polymer, som er stærkt snoet eller forgrenet eller aggregeret og ligner en sfærisk konformatron. En høj indre viskositet indikerer en polymer, som er mere stang-formig og således mindre snoet, mindre forgrenet og mindre aggregeret. Disse indikationer er kun DK 176653 B1 17 sande, hvis polymererne, som det drejer sig om, har samme molekylvægt.
* Når konformationen af polymerer af forskellig molekylvægt skal sammenlignes, anvendes Mark-Houwink-faktoren, ”a". En lav værdi af "a" betyder en polymer, som er mere sfærisk eller aggregeret med hensyn til konformation, 5 hvorimod en høj værdi af "a" betegner en polymer, som er mindre aggregeret og således mere stang-formig, Mark-Houwink-faktoren er angivet med udtrykket "indre viskositet" = KM3, hvor "indre viskositet" repræsenterer den indre viskositet af polymeren, bestemt ved opløsningsviskositet-målefremgangsmåde, K er en konstant, og M er molekylvægten af polyme-10 ren, og "a" betegner Mark-Houwink-faktoren.
Bestemmelse af esterificerinasarad (DE) og qalacturonsvre (GAl i ikke-amid-pektin.
15 Princip:
Denne fremgangsmåde er en modifikation af FAO/WHO-fremgangsmåden til bestemmelse af % DE og % GA i pektin, som ikke indeholder amid og acetatester (Compendium of food additive specifications, Addendum 9, Joint 20 FAO/WHO Expert Committee on Food Additives, 57th session, Rom, Italien 5-14, juni 2001).
Fremgangsmåde - bestemmelse af % DE og % GA: 25 (syre-alkohol: 100 ml 60% IPA + 5 ml HCI, rygende 37%) 1. Afvej 2000 g pektin i et 250 ml glasbægerglas, 2. Tilsæt 100 ml syre-alkohol og omrør ved magnetisk omrøring i 10 minutter.
3. Filtrer gennem en tørret, afvejet glasfilterdigel.
30 4. Skyl bægerglasset fuldstændigt med 6 x 15 ml syre-alkohol 5. Vask med 60% IPA, indtil filtratet er chlorid-frit* (omtrent 500 ml).
6. Vask med 20 ml 100% IPA.
7. Tør prøven i 2½ time ved 105°C
DK 176653 B1 18 8. Afvej digelen efter tørring og afkøling i desikator 9. Afvej nøjagtigt 0,4000 g af prøven i et 250 ml glasbægerglas.
10 Afvej to prøver til dobbelt bestemmelse 11. Fugt pektinet med omtrent 2 ml 100% IPA og tilsæt omtrent 100 ml carbon-5 dioxid-frit, deioniseret vand under omrøring med magnetisk omrører *(Chloridtest: Overfør omtrent 10 ml filtrat til et reagensglas, tilsæt omtrent 3 ml 3N HN03 og tilsæt et par dråber AgN03 Filtratet er chloridfrit, hvis opløsningen er klar, ellers vil der være en udfældning af sølvchlorid).
10
Prøven er nu klar til titrering, enten ved hjælp af en indikator eller ved anvendelse af et pH-meter/autoburette.
Fremgangsmåde - bestemmelse af alene % DE: 15 (Syre-alkohol: 100 ml 60% IPA + 5 ml HCI, rygende 37%), 1. Afvej 2,00 g pektin i et 250 ml glasbægerglas.
2. Tilsæt 100 ml syre-alkohol og omrør med magnetisk omrøring i 10 minutter 20 3. Filtrer gennem en Buchner-tragt med filterpapir.
4. Skyl bægerglasset med 90 ml syre-alkohol.
5. Vask med 1000 ml 60% IPA.
6. Vask med omtrent 30 ml 100% IPA.
7. Tør prøven i omtrent 15 minutter på Buchner-tragt med vakuum-sug.
25 8., Afvej omtrent 0,40 g af prøven i et 250 ml glasbægerglas.
10. Afvej to prøver til dobbelt bestemmelse.
11. Fugt pektinet med omtrent 2 ml 100% IPA og tilsæt omtrent 100 ml deioniseret vand under omrøring på en magnetisk omrører 30 Prøven er nu klar til titrering, enten ved hjælp af en indikator eller ved anvendelse af et pH-meter/autoburette
Titrering ved anvendelse af indikator: DK 176653 B1 19 1. Tilsæt 5 dråber phenolphtalein-indikator og titrer med 0,1 N NaOH indtil ændring af farven (noter dette som Vi-titer).
2. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N NaOH under omrøring. Lad det stå i præcis 15 mi-5 nutter. Under henstand skal prøven være dækket med folie.
3. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N HCI under omrøring og omrør, indtil farven forsvinder 10 4. Tilsæt 3 dråber phenolphtalein og titrer med 0,1 N NaOH indtil ændring af farve (notér dette som Vj-titer).
Blindtesti 15 1 Tilsæt 5 dråber phenolphthalein til 100 mi carbondioxid-frit eller deionise- ret vand (samme type som der anvendtes til prøven) og titrer i et 250 ml glasbægerglas med 0,1 N NaOH indtil ændring affarve (1-2 dråber).
2. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N NaOH og lad prøven stå uberørt i præcist 15 minut-20 ter. Under henstand skal prøven være dækket med folie.
3. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N HCI og 3 dråber phenolphtalein og titrer indtil ændring affarve med 0,01 N NaOH (notér dette som Bi).
25 Titrering under anvendelse af pH-meter/autoburette:
Ved anvendelse af autoburette type ABU 80 kan de følgende indstillinger anvendes:
Prøve med % DE < 10 Blindtest
PiOportionalbånd 0.5 5
Forsinkelse sekunder 50 5
Hastighed-Vs 10 5
Hastighed - V2_15 5 DK 176653 B1 20 1. Titrer med 0,1 N NaOH til pH-værdi 8,5 (notér resultatet som Vi-titer).
5 2, Tilsæt 20,00 ml 0,5 N NaOH under omrøring og lad prøven stå uden omrøring i præcist 15 minutter. Under henstand skal prøven være dækket med folie.
3. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N HCI under omrøring og omrør, indtil pH er konstant.
10 4, Efterfølgende, titrer med 0,1 N NaOH til pH-værdi 8,5 (notér resultatet som V2-titer),
Blindtest 15 1. Titrer 100 ml carbondioxid-frit eller deioniseret (samme type som anvendt til prøven) vand til pH-værdi 8,5 med 0,1 N NaOH (1-2 dråber) .
2. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N NaOH under omrøring og lad blindtest-prøven hen-20 stå uden omrøring i præcist 15 minutter. Under henstand skal prøven være dækket med folie.
3. Tilsætning 20,00 ml 0,5 N HCI under omrøring og omrør, indtil pH-værdi er konstant.
25
4. Titrer til pH-værdi 8,5 med 0,1 N NaOH (notér dette som BO
Beregning:
Vt = V, + (V2-Bi)
% DE (grad af esterificering = ((V2 - Bi) x 100)ΛΛ % DFA (grad af fri syre) = 100 - % DE
30 DK 176653 B1 21 % GA* (grad af galacturonsyre) = (194,1 x Vt x N x 100) / 400 *På aske- og fugtfri basis 5 194,1: Molekylvægt af galacturonsyre N: Korrigeret normalitet for 0,1 N NaOH, som anvendes tii titrering (f.eks.
0,1002 N) 400: Vægt i mg af vasket og tørret prøve tii titrering % Rent pektin = (syre vasket og tørret mængde af pektin x 100) / (afvejet 10 mængde af pektin).
Bestemmelse af amiderinasarad (DA) oa forestrinasarad (DE) for pektin
Princip: 15
Denne fremgangsmåde er en modifikation af FAO/WHO-fremgangsmåden tii bestemmelse af % DE, % DA i pektin (Compendium of food additive specifications, Addendum 9, Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives, 57th session, Rom, Italien, 5-14 juni 2001, side 3-4), som ikke indeholder aceta-20 tester.
Procedure; (syre-alkohol: 100 ml 60% IPA + 5 ml HCI, rygende 37%) 25 1 Afvej 2.000 g pektin i et 250 ml glasbægerglas.
2. Tilsæt 100 ml syre-alkohol og omrør ved magnetisk omrøring i 10 minutter 3. Filtrer gennem en tørret BOchner-tragt og filterpapir af typen stærk, viskøs, super hurtig eller lignende.
30 4. Skyl bægerglasset fuldstændigt med 6 x 15 ml syre-alkohol.
5. Vask med 60% IPA, indtil filtratet er chlorid-frit* (omtrent 500 ml).
6. Vask med 20 ml 100% IPA.
7. Tør i ca 15 minutter på en Buchner-tragt under vakuumsug.
DK 176653 B1 22 8. Afvej digelen efter tørring og afkøling i exsikkator.
9. Afvej omtrent 0,4000 g af prøven i et 250 ml glasbægerglas.
10 Afvej to prøver til dobbelt bestemmelse.
11 Fugt pektinet med omtrent 2 ml 100% IPA og tilsæt omtrent 100 ml carbon-5 dioxid-frit vand under omrøring på en magnetisk omrører. Under disse be- tingelser går det amiderede pektin ikke i opløsning. Imidlertid er det amide-rede pektin opløseligt under de efterfølgende alkaliske betingelser.
*(Chlorid-test: Overfør omtrent 10 ml filtrat til et reagensglas, tilsæt omtrent 3 ml 10 3 N HN03 og tilsæt et par dråber AgN03. Filtratet er chloridfrit, hvis opløsningen er klar, ellers vil der være en udfældning af sølvchlorid).
Prøven er nu klar til titrering, enten ved hjælp af en indikator eller ved anvendelse af et pH-meter/autoburette 15
Indikator: 1. Tilsæt 5 dråber phenolphtalein-indikator og titrer med 0,1 N NaOH indtil farveændring {notér dette som Vi-titer).
20 2 Tilsæt 20,00 ml 0,5 N NaOH under omrøring. Lad det henstå i præcist 15 minutter. Under henstand skal prøven være dækket med folie, 3. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N HCI og omrør på en magnetomrører, indtil farven forsvinder 4. Tilsæt 3 dråber phenolphtalin og titrer med 0,1 N NaOH indtil farveændring 25 (notér dette som V2-titer).
Blindtest: 30 1. Tilsæt 5 dråber phenolphtaleintol til 100 ml carbondioxid-frit vand og titrer i et 250 ml glasbægerglas med 0,1 N NaOH indtil farveændring (1-2 dråber).
2. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N NaOH og lad prøven henstå uberørt i præcist 15 minutter., Under henstand skal prøven være dækket med folie.
DK 176653 B1 23 3. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N HCI og 3 dråber phenolphthalein og titrer indtil farveændring med 0,1 N NaOH (notér dette som Bi).
pH-meter/autoburette: 5 1. Titrer med 0,1 N NaOH til pH-værdi 8,5 (notér resultatet som V^titer).
2 Tilsæt 20,00 ml 0,5 N NaOH og lad prøven henstå uberørt i præcist 15 minutter Under henstand skal prøven være dækket med folie 3. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N HCI og omrør på en magnetomrører, indtil pH-værdien 10 er konstant.
4. Titrer efterfølgende med 0,1 N NaOH til pH-værdi 8,5 (notér resultatet som V2-titer)
Blindtest: 15 1. Titrer 100 ml carbondioxid-frit vand til pH-værdi 8,5 med 0,1 N NaOH (1-2 dråber).
2. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N NaOH og lad blindtest-prøven henstå uberørt i præcist 15 minutter. Under henstand skal prøven være dækket med folie.
20 3. Tilsæt 20,00 ml 0,5 N HCI og omrør på en magnetisk omrører, indtil pH- værdien er konstant 4. Titrer til pH-værdi 8,5 med 0,1 N NaOH (notér dette som Bi).
Destillation gennemføres på Kjeitex (destillationsapparat) 25
Kjeitex: Følg de angivne instruktioner med hensyn til start og afslutning.
30 1.. Overfør kvantitativt prøven til destruktionsrøret ved at skylle bægerglasset med en samlet mængde på 100 ml carbondioxid-frit vand i tre trin.
2. Anbring modtagelseskolben indeholdende 150 ml carbondioxid-frit vand og 10,00 ml 0,1 N HCI i apparatet.
DK 176653 B1 24 3. Tilsæt mindst 20 ml 10% NaOH til destruktionsrøret, som indeholder prøven.
4. Indstil destillationstiden til 5½ minut 5. Titrer destillatet med 0,1 N NaOH til pH-værdi 6,2 (notér dette som V3-titer) eller tilsæt 8 dråber methylrødt og titrer med 0,1 N NaOH indtil farveændring 5 (notér dette som V3-titer).
Blindtest-prøven destilleres og titreres som prøven (noter dette som B2-titer)
Beregning: 10 ® Vt = Vi + (V2- Bi) + (B2-V3) ® DE (forestringsgrad) = (V2 - Bi) x 100/Vt • DA (amideringsgrad) = (B2 - V3) x 100/Vt
Bestemmelse af molekylvægt (Mw) og indre viskositet (IV).
15
Til dette anvendes højtydende størrelsesudelukkelseschromatografi (HPSEC) med tripeldetektering.
Princip: 20
En pektin-prøve fraktioneres i overensstemmelse med hydrodynamisk volumen ved anvendelse af størreisesudelukkelseschromatografi. Efter separation analyseres prøven ved et tripel-detektorsystem bestående af brydningsindeks (Rl)-detektor, retvinkellaserlysspredning (RALLS)-detektor og et differential-25 viskometer. Information fra disse detektorer fører til bestemmelse af molekylvægt (Mw) og indre viskositet (IV). Mark-Houwink-faktoren beregnes ved anvendelse af molekylvægten og den indre viskositet, som opnås ved anvendelse af denne fremgangsmåde.
30 Materialer: • Pumpemodel 515, Waters, Hedehusene, Danmark.
• Afgasningsapparat, Gynkotek, Polygen Scandinavia, Århus, Danmark DK 176653 B1 25 ® Søjleovn, Waters, Hedehusene, Danmark.
o AS-3500 Autoprøveoptager med prøvepræpareringsmodul, Dionex Denmark, Rødovre, Danmark.
o 3 lineære mixed bed-søjier, TSK-GMPWXL, Supelco, Bellefonte, Pennsyl-5 vania, USA.
e Flydende fase: 0,3 M lithiumacetat-puffer, pH-værdi 4,8, Fluka Chemte AG,
Buchs, Schweiz.
• Dobbelt detektor, RI, Viscometry, Model 250, Viscotek, Houston, Texas, USA.
10 · RALLS Model 600, Viscotek, Houston, Texas, USA.
Fremgangsmåde:
Omtrent 2 mg af prøven afvejes i et 2000 ml prøveglas. Prøven opløses i auto-15 prøveoptageren efter følgende plan: 8 ml ethanol tilsættes, derefter 1300 ml acetatpuffer (0,3 M, pH-værdi 4,8), prøven opvarmes til 75°C og blandes i 9,9 minutter.. 300 ml af prøven opløses med 900 ml acetat-puffer, blandes derefter i 9,9 minutter. Prøven efterlades ved omgivelsernes temperatur i 20 minutter.
100 ml af prøven indsprøjtes med et 100 ml fuldstændigt loop, og flowhastighed 20 er 0,8 mi/min. To detektorer er til stede in-line, en retvinklet laserlysspred nings-(RALLS)-detektor (Viscotek) og en dobbeltdetektor bestående af brydningsindeks-detektor og et viskometer (Viscotek). Den specifikke stigning i brydningsindeks (dn/dc)-værdi for pektin indstilles til 0,144. Data fra detektorer forarbejdes med tri-SEC-software (Viscotek).
25 • Rheologiske målinger af syntetiske geler.
Materialer: 30 · 3,933 g kaliumcitrat, K3C6H5O7, H20, pro analyse, Merck KGaA, 64271
Darmstadt, Tyskland.
0 1,0 g natriumbenzoat, pro analyse, Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Tyskland DK 176653 B1 26 * 3,12 g pektinprøve, til analyse » 124,08 g sukker β X ml 0,1 M CaCI2, pro analyse, Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Tyskland, ® 18 + Y ml 50% vægt/volumen citronsyre, pro analyse, Merck KGaA, 64271 5 Darmstadt, Tyskland, ® Olie, flydende ved stuetemperatur.
® 260 g ionbyttet vand.
® 6 krystallisationsskåle, diameter: 61 mm, højde: 9 mm.
® Klart, tr/kfølsomt, klæbende tape.
10 ® TA.XT2 Texture Analyser, Stable Micro Systems, England ® RheoStress RS 100, Haake Fisons, Reciprotor Engineering A/S, DK-4930 Maribo, Danmark.
® Målesystem for RheoStress RS 100: kop/spindel Z20 DIN, Haake Fisons, Reciprotor Engineering A/S, DK-4930 Maribo, Danmark.
15 » Elektrisk varmeplade, Buch & Holm A/S, DK-2730 Herlev, Danmark.
® 1 liters kogekar.
® Elektrisk propelomrører, RW 20, Janke & Kunkel, IKA-Werk, Bie & Berntsen A/S, Rødovre, Danmark.
® Vægt, Mettler PJ 6000, Mettler Instruments, Greifensee-ZCirich, Schweiz.
20
Fremgangsmåde: 117 g IPPA-puffer (3,933 g kaliumcitrat/l, 18 ml citronsyre/!, 1,0 g natriumben-zoat/l) og 260 g ionbyttet vand blandes i et 1 liters kogekar Pektin-prøven, som 25 skal analyseres, tørblandes med 24 g sukker. Sukker- og pektin-blandingen tilsættes derefter til fremstillingen beskrevet ovenfor og opvarmes til kogning, medens der omrøres ved 500 omdrejninger pr. minut 100,08 g sukker tilsættes, og kogning fortsættes, indtil al sukker er opløst. Ion-byttet vand tilsættes, indtil en vægt på 520 g opnås. Bland Y ml CaCI2 og citronsyre, således at pH-30 værdien af den endelige fremstilling er 3,0 +/- 0,1 og tilsæt denne blanding til den kogende opløsning af pektin og sukker under omrøring ved 1000 omdrejninger pr. minut. Vægten af opløsningen indstilles til 520 g ved tilsætning af DK 176653 B1 27 ionbyttet vand og hældes i seks krystallisationsskåie (udstyret med klart, trykfølsomt klæbende tape) og en forvarmet rheometer-kop Z20 DIN ved 90°C,
Koppen dækkes med olie til forhindring af fordampning.
5 De 6 krystallisationsskåle efterlades natten over ved 25°C, derefter bestemmes gel- og brudstyrke sammen med afstand for brud ved anvendelse af TA.XT2-Texture Analyser.
Y-værdier:
Ca2* Ca2+ (4 mg/ml) (ppm) tilsat (ml) 0 0 2 15,4 4 30,8 8 61,5 — 92(3 _ 1231 10 ΤΑ XT2 Texture Analyser-analyser:
Et stempel på 0,5 tomme anvendes, og de følgende indstillinger benyttes: 15 ® Prætest-hastighed: 1,0 mm/s ® Test-hastighed: 0,5 mm/s ® Post-hastighed; 5,0 mm/s ® Brydningstest-hastighed: 1,00 mm/s ® Afstand: 7,00 mm 20 o Kraft: 10 g ® Tid; 5,00 sekunder ® Tælling. 5 DK 176653 B1 28 o Type: auto θ Udløsningskraft: 0,5/1,0 g
RheoStress RS-100-analyser: 5 Så snart prøven hældes i rheometer-koppen og dækkes med olie initieres en temperatursvingning (afkølingshastighed: rc/min, fra 90 til 25°C, frekvens 1 Hz, belastning 0,1-5 Pa) ti! bestemmelse af geleringstemperatur. Ved afslutningen af temperatursvingningen måles ved 25°C gelstyrke (G'} ved frekvensen 10 0,5 Hz, belastning 0,1-5 Pa (afhængigt af prøven). Endelig foretages en belast ningssvingning ved 25°C (frekvens 0,5 Hz, belastning 0,1-446 Pa). Den kritiske spænding angives som den sidste værdi af G', G" og den tilsvarende spænding før nedbrydning efter hærdning ved 25°C i 30 minutter, 15 Eksempler,
Ekstraktion af pektin fra skræl
En række pektin-holdige udgangsmaterialer blev ekstraheret til tilvejebringelse 20 af materiale til efterfølgende de-esterificering med traditionelle fremgangsmåder og de-esterificering med biokatalysatorer.
Tre forskellige pektin-udgangsmaterialer blev benyttet. Disse var tørrede skræller fra citron, appelsin og lime. Tørstoffet af udgangsmaterialerne var ca 90- 25 95%.
For hvert pektin-udgangsmateriale blev 30 kg tørret skræl tilsat til en 1000 liter rustfri ståltank indeholdende en blanding af 3,52 liter 65% salpetersyre og 931 liter ion-byttet vand,
Blandingen blev omrørt, medens den blev opvarmet til 70°C. Under fortsat omrøring fik blandingen lov at reagere ved 70°C i 6 timer.
Efter reaktion blev det varme ekstrakt siet på en vibrerende sigte (Vester Åby 30 DK 176653 B1 29 vibrator med maskestørrelse 0,25 mm, Danmark), Herefter blev det varme ekstrakt tilsat 50 ml ionbyttet harpiks pr. liter ekstrakt (Rbhm & Haas, Amberlite SR 1L, Tyskland), lonbytningen blev gennemført i 30 minutter under omrøring, og det resulterende ionbyttede ekstrakt blev filtreret på et roterende ru vakuum-5 tromlefilter ved 7Q°C. Før filtrering blev vakuumtromlen coatet med ca. 4 cm diatoméjord-filterhjælp (Celite 545).
Det filtrerede ekstrakt blev derefter inddampet under vakuum til ca. en tredjedel volumen 10
Dette koncentrerede ekstrakt blev anvendt i de følgende eksempler til de-esterificering.
Resultater: 15
Udgangsmateriale DE af ekstrakt Mw af ekstrakt Indre viskositet DA dl/g
Citronskræl 65,7 100300 4,267
Orangeskræ! 65J 113800 ' 3^941
Limeskræl 64,3 124950 5,00w
Tabel 1: Esterificeringsgrad, molekylvægt og indre viskositet af ekstrakter, som blev anvendt til yderligere de-esterificering. Wlw betegner molekylvægten.
20 Efter ekstraktion lå esterificeringsgraden mellem ca. 64 og ca. 66% afhængig af det anvendte udgangsmateriale. Molekylvægten viste et interval fra ca. 100 000 Dalton til ca. 125.000 Dalton for citrusfrugt-baserede udgangsmaterialer.
Sammenliqninqseksempel 1 25
De-esterificering ved anvendelse af syre:
Fra udgangspektin-materialerne blev 60 liter koncentreret ekstrakt afkølet til DK 176653 B1 30 50°C i en omrørt, kappe-om hyllet rustfri ståltank 456 g 65% salpetersyre blev tilsat under omrøring, og blandingen fik lov at reagere ved 50°C, indtil en ønsket esterificeringsgrad på ca. 40% blev opnået. Da dette var gennemført, blev 30 liter af reaktionsblandingen udfældet i 90 liter 80% isopropanol, vasket i ca. 5 5 minutter i 60% isopropanol, presset i en hydraulisk presse og ca. 100 g af det pressede materialet anvendt til måling af tørstof, forestringsgrad, molekylvægt etc. Det tilbageblevne pressede materiale blev delt i to afvejede portioner til senere amidering.
10 Det tilbageblevne 30 liter koncentreret ekstrakt blev yderligere omsat, indtil en forestringsgrad på ca. 30% og blev derefter behandlet i overensstemmelse med den tidligere prøve.
Resultater:
Udgangsmateriale Forestringsgrad Molekylvægt Delta Mw % Da (%)
Citron-pektin 39,3 62600 -37,6 65,7% DE 33,0 65800 -34,4
Appelsinskræl 36,6 60100 -47,2 65,1% DE 28,3 58000 -49,0
Limeskræl 40,0 73550 -41,1 64,3% DE 31,5 66500 -46,8 15
Tabel 2: Ændring i molekylvægt ved syre-de-esterlficerlng.
Når pektin-udgangsmaterialerne blev anvendt til syre-de-esterificering, blev molekylvægten af de de-esterificerede pektiner reduceret med ca. 34% og 49%, 20 Når man de-esterificerer pektin ved anvendelse af den traditionelle syre-de-esterificeringsproces, er reduktionen i molekylvægt således væsentlig .
Eksempel 1: 25 De-esterificerinq ved anvendelse af biokatalysator: DK 176653 B1 31
Pektin-udgangsmaterialerne, 60 liter koncentreret ekstrakt blev afkølet til 45°C i en kappeomhyllet rustfri ståltank under omrøring. pH-værdien af ekstraktet blev indstillet til 4,5 med en 10% natriumcarbonatopløsning. 540 enheder pr. liter koncentreret ekstrakt (fremgangsmåde) af Rheozym (Novozymes, Danmark) 5 blev tiisat. pH-værdien af ekstraktet blev holdt konstant på 4,5 ved tilsætning af en 10% natriumcarbonatopløsning. Den følgende beregning blev anvendt til at fastslå ændringen af forestringsgraden i pektinet, som resulterer fra den tilsatte mængde natriumcarbonat: Δ DE = (40,56541) (gram soda pr. gram pektin) + 3,383. Når den beregnede mængde natriumcarbonat blev tilsat for at nå en 10 forestringsgrad på 40%, blev 30 liter af reaktionsblandingen overført til en anden kappeomhyllet rustfri ståltank med omrøring. pH-værdien blev indstillet til 2,5 med fortyndet salpetersyre til standsning af biokatalysatorreaktionen, og blandingen blev opvarmet til 80°C og holdt ved denne temperatur i 10 minutter for at inaktivere biokatalysatoren.
15
Blandingen blev afkølet til under 50°C, og behandlet på samme måde som prøverne i sammenligningseksempel 1,
De tilbageblevne 30 liter koncentreret ekstrakt blev yderligere omsat, indtil en 20 beregnet forestringsgrad på ca. 30% og blev derefter behandlet i overensstemmelse med den tidligere prøve.
Resultater:
Udgangsmateriale Forestringsgrad Molekylvægt Delta Mw (%) Da %
Citronskræl 302 92200 43?! 65,7% DE 28,6 93350 -6,9
Appelsinskræl 39,9 101950 -10,4 65,1% DE 31,2 100550 -11,6
Limeskræl 39,1 114750 -8,2 64,3% DE 29,8 108500 -13,2 25 Tabel 11: Ændring i molekylvægt ved biokataiysator-de-esterificering DK 176653 B1 32 Når pektin-udgangsmaterialerne blev anvendt til biokatalysator-de-esterificering blev molekylvægten af de de-esterificerede pektiner reduceret med ca 7% og 13%. Anvendelsen af biokatalysatorer til de-esterificeringen af pektin resulterede således i meget mindre depolymerisering af pektin-udgangsmaterialerne.
5
Ud fra sammenligningseksempel 1 og eksempel 1 følger det, at forholdet R mellem molekylvægten af pektin-udgangsmateriale og molekylvægten af de-esterificeret pektinmateriale var som følger:
Prøve Citron Appelsin Lime _ _ _ ^ _ "Start 65/7 1~00 65J L00 64~3 L00 __ __ __ __ 33,0 1,52 28,3 1,96 31,5 1,88 Έϊό 36/2 L09 39^9 ΓΪ2 39J 0)9 28,6 1,07 31,2 1,13 29,8 1,15 10 --
Tabel 1.2: Opsummering af ændringer i molekylvægt
Ved anvendelse af en biokatalysator ti! de-esterificering forøges forholdet R betydeligt mindre, end når de-esterificeringen blev bragt i stand med traditionel sy-15 re Faktisk resulterede traditionel de-esterificering i en stigning af R fra 1 til så meget som 1,96, biokatalysator-de-esterificering resulterede i en stigning på kun 1,15.
Eksempel 2 20
Amidering:
De otte prøver fra sammenligningseksempel 1 og eksempel 1 blev amlderet 17 liter 70% isopropanol blev overført til en 30 liters kappeomhyllet rustfri ståitank 25 med omrøring, som var udstyret med et tæt låg. 6 liter 25% ammoniakopløsning blev tilsat, og temperaturen blev bragt ned til 5°C 1 kg presset materiale fra DK 176653 B1 33 sammenligningseksempel 1 og eksempel 1 blev tilsat i hvert af sammenligningseksempel 1 og eksempel 1 blev fire prøver amideret Af disse blev to prøver de-esterificeret til en højere esterificeringsgrad og to til 5 en lavere esterificeringsgrad.
For både den højere og lavere forestringsgrad var en højere og lavere amide-ringsgrad ønsket, og for at gennemføre dette blev amidering gennemført ved 5°C i 2½ time eller i 5 timer. Efter den specificerede reaktionstid blev det omsat-10 te pressede materiale drænet, vasket i 20 ml 60% isopropanol, drænet igen, tilsat 20 liter 60% isopropanol, og pH-værdien blev indstillet til 4,2 - 4,4 med fortyndet salpetersyre og drænet Endelig blev dette drænede materiale vasket i 20 liter 50% isopropanol, drænet, presset og tørret ved 70°C natten over .
15 Resultater;
Indre viskositet
Under amidering forekommer en konformationsændring i pektinet, som henfø-20 res til graden af aggregering af pektinet. Indre viskositet af et pektin påvirkes af både graden af aggregering og af molekylvægten af pektinet. Eftersom det har vist sig, at den indre viskositet af et pektin er direkte relateret til gelstyrken af geler, som er fremstillet med dette pektin, er den indre viskositet den foretrukne parameter at spore. Vi har derfor defineret R2 som forholdet mellem den indre 25 viskositet af pektin-udgangsmateriale i tabel 1 og den indre viskositet af det amiderede pektin, som resulterer fra en amidering af pektin-udgangsmaterialet.
DK 176653 B1 34
Amiderinq efter syre-de-esterificering;
Skræl DE start DE slut DA slut IVW R2 __%__%__% dl/g__
Citron 33,0 14,7 13,3 3,417 1,25 33.0 9,5 15,8 3,352 1,27 39.3 20,2 15,4 3,714 1,15 39.3 9,5 21,8 3,534 1,21
Appelsin 28,3 15^0 Ϊ3β 2,832 U9 28.3 9,6 13,7 2,794 1,41 36.6 17,7 14,4 3,253 1,21 36.6 10,4 22,1 3,098 1,27 lime 3l5 R3 Tlo ' 3,545 Ϊ7Ϊ 31,5 10,0 15,6 3,245 1,54 40.0 20,4 14,6 3,901 1,28 40.0 12,8 21,6 3,571 1,40 5 Tabe! 2.1: Indre viskositet af amiderede pektiner, som først er de-esterificeret Bemærkninger til søjler: * 1 "skræl" betegner pektin-udgangsmaterialet.
• 2 "DE start" betegner graden af forestring, som resulterer fra den første syre-de-esterificering * 3 "DE slut" betegner graden af esterlflcertng efter amidering 10 · 4 "DA slut" betegner graden af amidering efter amidering.
• 5 "IVw" betegner den indre viskositet efter amidering.
Dataene i tabel 2.1 viser de følgende ændringer i indre viskositet: 15 - Citron: syre-de-esterificering resulterer i et fald i indre viskositet på 15- 27%
Appelsin: syre-de-esterificering resulterer i et fald i indre viskositet på 21-41%
Lime: Syre-de-esterificering resulterer i et fald i indre viskositet på 28-54%.
Amiderinq efter biokatalvtisk de-esterificeringi 20 DK 176653 B1 35 _____ de start DE slut DA slut fiVw R2 __%__%__% dl/g__
Citron 28,6 12,9 9,5 3,644 1,17 28,6 10,2 12,7 3,874 1,10 36.2 17,7 14,2 4,148 1,03 36.2 11,0 17,0 3,711 1,15
Appelsin 31^2 TSjB 10,9 3,354 ΓΪ8 31.2 9,3 15,8 3,337 1,18 39.9 20,7 13,2 3,806 1,04 39.9 11,3 19,8 3,582 1,10 _____ __ ___ _____ _____ __ 29,8 7,9 16,1 4,266 1,17 39.1 18,1 16,1 4,569 1,09 39.1 10,9 21,7 4,422 1,13
Tabel 2.2: Indre viskositet af amiderede pektiner, som ferst er de-esterificeret med biokatalysator Bemærkninger til sejler; • 1 "skræl" betegner pektin-udgangsmaterialet.
5 o 2 "DE start” betegner graden af forestring, som resulterer fra biokatalysator-de-esterificering.
• 3 "DE slut" betegner graden af esterificering efter amidering.
• 4 "DA slut" betegner graden af amidering efter amidering, • 5 "IVw" betegner den indre viskositet efter amidering.
10 Dataene i tabe! 2 .2 viser de følgende ændringer i indre viskositet
Citron: biokatalytisk de-esterificering resulterer i et fald i indre viskositet på 3-17% 15 - Appelsin: biokatalytisk de-esterificering resulterer i et fald i indre viskositet på 4-18%
Lime: biokataiytisk de-esterificering resulterer i et fald i indre viskositet på 9-17%.
DK 176653 B1 36
Rheoloaiske målinger af syntetiske geler Gelstyrke på RheoStress RS-100
Skræl De-ester- DE DA Gelstyrke ved 25°C, Pa fremgangsmåde slut slut ___%_%__
Calcium-indhold, ppm - - — ggg,61i5| Q2 3 m i
Citron Syre 9,5 21,8 56,4 111 153 399 præ- præ- __________gel gel
Biokatalysator 11,0 17,0 202 459 545 668 792 1060
Appelsin Syre 17,7 14,4 οΧΤΪίΓ 16,9 217 326 364”
Biokatalysator 20,7 13,2 0$ 3,6 29,6 218 361 369“
Lime Syre 12,8 21,6 102 104 139 383 722 904” —— 0f18 048 5^5-209 492 596"
Biokatalysator 10,9 21,7 190 399 526 688 1250 1010 126 114 078 ig7 [g" “275 892 927~ 5
Tabel 2.3: Gelstyrke af amiderede pektin-geler ved forskellige caiciumkoncentrationer
Fig 2 3 viser data i tabel 2.3 med gel-styrken langs y-aksen og calcium-koncentrationen langs x-aksen.
10
Ved sammenligning af hver enkelt sæt amideret pektin baseret på udgangsmaterialet blev det bemærket, at for hvert udgangsmateriale, var gelstyrken af det amiderede pektin, som var de-esterificeret med biokatalysator, meget højere Dette var især bemærkelsesværdigt for udgangsmaterialerne citron og lime, 15 hvorimod effekten på gelstyrken for biokatalysator-de-esterificering var mindre udtalt for appelsin.
20 DK 176653 B1 37
Kritisk spænding på RheoStress RS-100
Skræl Deester- DE DA Kritisk spænding, Pa frem- slut slut gangs- % % __måde__________
Calcium-indhold, ppm _ 15)4 30,8 61,5 92,3 123,1
Citron Syre 9/5 2Ϊ/Ϊ 20,18 3ΪΤ 76,04 76,04 118,3 76,04
Biokataly- ThO 17/) 118,3 286,6 286,6 286,6 286,6 118,3 __sator____________
Appelsin Syre 17,7 14,4 NG 12,97 76,04 286,6 286,6 286,6
Biokataly- 20,7 13,2 NG 48,86 184,2 TS TS TS
__sator_________
Lime Syre 12,8 21,6 48,86 48,86 48,86 76,04 48,86 76,04 ___14,3 13,0 NG NG 31,4 184,2 286,6 286,6
Biokataly- 10,9 21,7 118,3 184,2 286,6 286,6 184,2 118,3 __sator_________
12,6 1 11,4 NG 3,44 76,04 TS TS TS
5 Tabel 2.4: Kritisk spænding for amiderede pektin-geler ved forskellige calcium-koncentrationer.
Fig. 2.4 viser data i tabel 2 .4 med kritisk spænding langs y-aksen og calciumkoncentration langs x-aksen.
10 Bemærk: • NG betegner, at ingen gel blev dannet, og således at prøven ikke kunne måles • TS betegner for stærk en gel og således uden for måieintervallet for appara-tet.
15
Som for gelstyrken blev den kritiske spænding stærkt forøget, når biokatalysator blev anvendt til de-esterificering sammenlignet med den traditionelle syre-de-esterificering.
DK 176653 B1 38
Brudstyrke på TA.XT2 Texture Analyser
Skræl Deester- DE DA Brudstyrke ved 25°C, gram frem- slut slut gangs- % % __måde____
Calcium-Indhold, ppm _ - 15|4 30 8 i 615 92]3 123i1
Citron Syre 21^8 ΗΪ0 5J0 5,50 7,80 10,20~ 8,70
Biokataly- 11,0 17,0 18,20 34,10 46,00 54,60 37,30 25,00 ___sator__________
Appelsin Syre 17,7 14,4 NG 11,70 13,50 31,30 42,00 36,40
Biokataly- 20,7 13,2 5,83 14,53 21,53 29,26 39,93 43,97 __sator___________
Lime Syre 12,8 21,6 14,10 5,10 5,50 7,80 10,20 8,70 _ 14,3 13,0 - - 20,20 46,30 57,90 43,40
Biokataly- 10,9 21,7 18,20 34,1 46,00 54,60 37,30 25,00 __sator__________ I 12,6 I 11,41 - I - I 32,6 76,20 101,20 94,40
Tabel 2.5: Brudstyrke af amiderede pektin-geler ved forskellige calcium-koncentrationer.
5
Fig. 2 5 viser data i tabel 2.5 med brudstyrke langs y-aksen og calciumkoncentration iangs x-aksen.
Bemærkninger: 10 · NG betegner, at ingen gel blev dannet, og således at prøven ikke kunne må les « - betegner, at ingen værdier blev genereret.
For udgangsmaterialerne citron og lime var forskellen i brudstyrke markant anis derledes ved sammenligning med traditionel de-esterificering ved anvendelse af syre i forhold til biokatalysator-de-esterificering. Ved de-esterificering med biokatalysator var brudstyrken af geler, som var fremstillet med de resulterende amiderede pektiner, meget højere end de tilsvarende brudstyrker af amiderede pektiner, som var fremstillet ud fra traditionelt syre-de-esterificerede udgangs-20 materialer. Virkningen var også tydelig for udgangsmaterialet appelsin.
DK 176653 B1 39
Gelstvrke på TA.XT2 Texture Analyser
Skræl Deester- DE DA Gelstyrke ved 25°C, gram fremgang slut slut __småde__%__%___________ ____Calcium-indhold, ppm
______ 0 15,4 30,8 | 61,5 I 92,3 123T
Citron Syre 9,5 21,8 - 2,30 5,10 5,40 6,70 4,60
Biokata- 11,0 17,0 4,60 7,60 15,10 15,80 13,10 8,50 iysator __
Appel- Syre 17,7 14,4 - 0,93 1,67 4,70 7,77 9,00 sin___________
Biokata- 20,7 13,2 0,70 1,07 1,73 3,57 5,50 7,40 __Iysator_________
Lime Syre 12,8 21,6 6,80 2,40 2,40 4,40 5,10 4,80_ ___14,3 13,0 5,20 9,60 16.20 18,90 15,70 12,60
Biokata- 10,9 21,7 - - 1,30 4,90 9,40 11,90
Iysator ___ _ 12,6 11,4 I - i - I 1,70 8,80 14,60 19,20 5 Tabel 2,6: Gelstyrke af amiderede pektin-geler ved forskellige calciumkoncentrationer,
Fig 2.6 viser data i tabel 2 6 med gelstyrke langs y-aksen og calcium kon centration langs x-aksen, 10 Bemærk: e betegner, at ingen værdier blev genereret..
Mønsteret var det samme. Citron- og lime-baserede amiderede pektiner viste en markant stigning i gelstyrke, når biokatalysator blev anvendt til de-15 esterificering af udgangsmaterialet, forud for amidering. Med hensyn til gelstyrke, forekom appelsin-udgangsmateriale at være upåvirket af de-esterificeringsfremgangsmåden før amidering.
Eksempel 3
Virkning af forestringsgrad af udgangsmateriale ti! amidering på Mark-Houwink- 20 DK 176653 B1 40 faktor og virkningen i hindbær-gel.
i dette eksempel blev udgangsmaterialet for amidering fremstillet i overensstemmelse med eksempel 2, Udgangsmaterialet blev imidlertid før amidering 5 de-esterificeret til en vis grad ved anvendelse af en biokatalysator.
Start DE, % "a" af det resulterende amiderede pektin 58 " 083 52 0,84 46 0,86 42 0,91 33 0,93 30 0,96
Tabel 31: Mark-Houwink-iaktor ved forskellige esterificeringsgrader 10 Fig. 3.1 viser data i tabel 3.1 med Mark-Houwink-faktor langs y-aksen og DE langs x-aksen.
Afbildningen viser en forøgelse af Mark-Houwink-faktoren, når DE for udgangsmaterialet formindskes. Den indikerer således, at når DE for udgangsma-15 terialet før amidering blev reduceret, opnåedes et mindre aggregeret, amideret pektin. Dette fører til et amideret pektin med bedre opløselighed, og følgelig et amideret pektin, som frembringer stærkere geler. Afbildningen indikerer også et lokalt maksimum ved ca. 42% DE, som indikerer, at et specielt stang-lignende amideret pektin blev fremstillet ud fra et sådant udgangsmateriale 20
For yderligere at klarlægge de særlige fordele ved anvendelse af et udgangsmateriale med en særlig DE, blev hindbær-geléer fremstillet med tre af de amiderede pektiner i overensstemmelse med eksempel 2.
DK 176653 B1 41
Materialer:
Emne Indhold Koncentration Forhandler
Opløsning Hindbærjuice 300 g/! Rynkeby, Ringe A Sukker 160 g/ί Danmark
De-ioniseret vand 185 g/l Danisco A/S,
Hanevand 185 g/l Danmark
Opløsning Pektin 0,56 g/l B De-ioniseret vand 160 g/l
Opløsning Natriumbenzoat 2 ml/kg Merck, Darm stadt, Tyskland C Kaliumsorbat 2 mi/kg Merck Darmstadt,
Tyskland
Opløsning Citronsyre (50% 5 ml/kg Merck, Darm- D (volumen/vægt)) stadt,
Tyskland • Vægt Mettler PJ 6000 (Mettler-Toledo, København, Danmark) • 2 liters kogekar 5 » Elektrisk varmeplade (Blomberg) • Waring-blandeapparat (Waring Products Division) • Bloom-glas, Pyrex • TA.TXT2 10 Fremgangsmåde
Hindbærjuice, sukker og vand (opløsning A) blev blandet Fremstillingen blev kogt, indtil al sukker blev opløst. Pektin blev opløst i varmt vand (90°C) (opløsning B) ved anvendelse af en Warring-blandemaskine med høj forskydning.
15 Pektinet (B) blev derefter tilsat til opløsning A, medens fremstillingen blev om-rørt kontinuert. Efter tilsætning af pektin-opløsningen, blev fremstillingen kogt i omtrent 2 min under omrøring Vand blev derefter tilsat, indtil en nettovægt på 1000 g.
42 DK 176653 B1
Konserveringsmidler (opløsning C) blev derefter tilsat. Endelig blev citronsyre (opløsning D) tilsat. Derefter blev igen nettovægten indstillet med vand til 1000 g. Fremstillingen blev fyldt i bloom-glas og blev efterladt natten over ved 25°C, 5 derefter blev gel- og brudstyrke bestemt sammen med afstand for brud ved anvendelse af TA.TXT2-analyseapparat.
TA.XT2-analvser: 10 Et stempel på V* tomme blev anvendt, og det følgende program blev benyttet; præ-test-hastighed 2,0 mm/s, test-hastighed 0,5 mm/s, post-hastighed 10,0 mm/s, brudtest-hastighed 1,00 mm, afstand 24,00 mm, kraft 40 g, tid 0,09 sek., tælling 5, type auto, udløsningskraft 2,5 g.
Start DE Brudstyrke, Ί Vurdering af geler % gram 58 337 Blødest gel, acceptabel, in gen prægelering 42 813 Stærkest gel. Ingen prægele ring 30 769 Stærk gel. Prægelering indi keret.
15
Tabel 3.2: Brudstyrke af amiderede pektin-geler.
Fig. 3.2 viser data i tabel 3.2 med brudstyrke langs y-aksen og DE langs x-aksen.
20 Særligt opløselige og således stærke gel-frembringende amiderede pektiner blev således fremstillet ud fra udgangsmaterialer, som var blevet de-esterificeret med biokatalysator til en forestringsgrad i intervallet fra ca. 30 til ca.
45%.
25 DK 176653 B1 43
Eksempel 4
Virkning af forestrinqsqrad og udgangsmaterialer til amiderinq på Mark-Houwink-faktor og virkningen i syntetiske geler.
5 1 dette eksempel blev udgangsmaterialet til amidering fremstillet ifølge eksempel 2. Før amidering blev udgangsmaterialet imidlertid de-esterificeret til et vist niveau ifølge tabel 3.1 ved anvendelse afen biokatalysator.
10 Yderligere blev pektinerne anvendt til fremstilling af syntetiske geler i overensstemmelse med fremgangsmåden beskrevet tidligere {Rheologiske målinger af syntetiske geler).
To forskellige udgangs-pektiner blev anvendt. I test nr. 1 havde udgangspekti-15 net en højere molekylvægt end udgangspektinet i test nr. 2;
Test Start DE Molekylvægt nr. % Dalton Ί 46 152100 38 Ϊ49550 34 156500 2 61 Ti 0950 49 121050 36 113650
Tabel 4.1: Molekylvægt og indre viskositet af de de-esterificerede pektiner før amidering DK 176653 B1 44
Test Start DE a Slut DE Slut DA Gelstyrke ved 25°C, Pa nr. % % %
Calcium-indhold, ppm " ~~ 61,5 I 92,3 123/Γ Ί 46 0,794 2Ϊ3 187 356 475 577 38 0815 10,8 193 951 1540 Ϊ9Ϊ0 _ ο,83Ϊ 93 17\6 1460 2090 2530 ~2 61 0857 205 2Ϊ3 98 97 64 49 0,872 2X0 19^3 315 468 497 36 0,933 Τθ3 Ϊ67 927 1530 1680
Tabel 4,2: To amiderede pektiner fremstillet ud fra forskellige udgangsmaterialer og virkningen af start DE på Mark-Houwink-faktor og gelstyrke, 5
Resultaterne fra test nr, 1 og 2 er som følger; I test nr 1 var gelstyrkerne, skønt de enkelte prøver af amideret pektin var lignende med hensyn til molekylvægt og amideringsgrad, af disse amiderede pek-10 tiner ikke så sammenlignelige som det ses i tabel 4.2. Resultaterne viser at fo restringsgrad en af det de-esterificerede pektin før amidering ultimativt har en effekt på gelstyrken af det resulterende amiderede pektin Uden at være bundet af nogen teori resulterer konformationelie ændringer i amiderede pektiner, som indikeret ved stigningen i Mark Houwink-faktor, ”a", i amiderede pektiner, som 15 udviser forbedrede gelstyrker Således indikerer tabe! 4.2, at anvendelsen af en bio-katalysator til de-esterificering af et pektin-udgangsmateriale forud for amt-dering, i et amideret pektin med forbedret gelstyrke.
I test nr. 2 vises også samme fænomen som test nr. 1. Imidlertid viser test nr. 2 20 yderligere, at graden af esterificering af det bio-katalysator-de-esterificerede pektin fortrinsvis er under 60%, for at det resulterende amiderede pektin udviser betydeligt forøgede gelstyrker, sammenlignet med pektiner, som er de-esterificeret ved anvendelse af syre.
DK 176653 B1 45 Værdien af reduktionen af graden af esterificering af udgangsmaterialet til under 60% før amidering for at forøge gelstyrken er fremhævet i fig 4.. 1 og fig. 4..2..
5
Claims (24)
1, Fremgangsmåde tii fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad omfattende trinnene: opnåelse af et pektin-udgangsmateriale, at bringe pektin- 5 udgangsmaterialet i kontakt med en biokatalysator, som er i stand til at de-este-rificere pektin-udgangsmaterialet, at gøre det muligt for biokatalysatoren at de-esterificere pektin-udgangsmaterialet til frembringelse af et de-esterificeret pektin, og yderligere de-esterificering af det de-esterificerede pektin ved at bringe det de-esterificerede pektin i kontakt med en syre eller et alkali, som er i stand 10 til at de-esterificere, og at gøre det muligt for syren eller alkaliet yderligere at de-esterificere det de-esterificerede pektin til frembringelse af et pektin med lav forestringsgrad, hvor pektin-materialet under eller efter den yderligere de-esterificering amideres ved at bringe det de-esterificerede pektin i kontakt med ammoniak, 15
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, hvor det gøres muligt for biokatalysatoren at de-esterificere pektin-udgangsmaterialet til en forestringsgrad under 60% før yderligere de-esterificering af det de-esterificerede pektin.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, hvor det gøres muligt for biokatalysatoren at de-esterificere pektin-udgangsmaterialet til en forestringsgrad på mellem 60% og 30% før yderligere de-esterificering af det de-esterificerede pektin.
4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, hvor det gøres muligt for biokatalysatoren 25 at de-esterificere pektin-udgangsmaterialet til en forestringsgrad på mellem 45% og 30% før yderligere de-esterificering af det de-esterificerede pektin.
5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, hvor det gøres muligt for biokatalysatoren at de-esterificere pektin-udgangsmaterialet til en esterificeringsgrad på mellem 30 45% og 40% før yderligere de-esterificering af det de-esterificerede pektin. DK 176653 B1 47
6, Fremgangsmåde ifølge krav 1, hvor det gøres muligt for biokatalysatoren at de-esterificere pektin-udgangsmaterialet til en forestringsgrad på 42% før yderligere de-esterificering af det de-esterificerede pektin.
7. Fremgangsmåde ifølge krav 1-6, kendetegnet ved, at biokatalysatoren udvælges fra gruppen omfattende pektin-methylesterase (E.C. 3.1.1.11).
8. Fremgangsmåde ifølge krav 7, kendetegnet ved, at pektin-methylestera-sen (E.C.3.1,1.11) de-esterificerer på en tilfældig måde. 10
9. Fremgangsmåde ifølge krav 7, kendetegnet ved, at pektin-methylestera-sen (E.C.3.1..1.11) de-esterificerer på en blokagtig måde.
10. Amtderet pektin, som er opnåeligt ved en fremgangsmåde ifølge ethvert af 15 kravene 1-9, kendetegnet ved, at det har et forhold R2, mellem indre viskositet af det de-esterificerede udgangspektin og den indre viskositet af det amiderede pektin i intervallet fra 1,01 til 1,25.
11. Amideret pektin ifølge krav 10, kendetegnet ved, at det har et forhold R2, 20 mellem indre viskositet af det de-esterificerede udgangspektin og den indre viskositet af det amiderede pektin i intervallet fra 1,03 til 1,18.
12. Amideret pektin ifølge krav 10, kendetegnet ved, at det har et forhold R2, mellem indre viskositet af det de-esterificerede udgangspektin og den indre vi- 25 skositet af det amiderede pektin i intervallet fra 1,04 til 1,15.
13. Amideret pektin ifølge krav 10, kendetegnet ved, at det har en forestringsgrad på 30% eller mindre og en amideringsgrad på 18% eller mindre.
14. Amideret pektin ifølge krav 10, kendetegnet ved, at det har en forestrings grad på 10-20% og en amideringsgrad på 10-20% DK 176653 B1 48
15. Amideret pektin ifølge krav 10, kendetegnet ved, at det har en forestrings-grad på 12-18% og en amideringsgrad på 5-30%,
16. Amideret pektin, som er opnåeligt ved en fremgangsmåde ifølge ethvert af 5 kravene 1-9, kendetegnet ved, at det udviser en Mark-Houwink-faktor, "a" på over 0,8.
17. Amideret pektin, som er opnåeligt ved en fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 1-9, kendetegnet ved, at det udviser en Mark-Houwink-faktor, "a", i in- 10 tervaliet fra 0,8 -1,0.
18. Amideret pektin, som er opnåeligt ved en fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 1-9, kendetegnet ved, at det udviser en Mark-Houwink-faktor, "a", i intervallet 0,85-0,95. 15
19. Anvendelse af et amideret pektin ifølge ethvert af kravene 10-18 i fødeva rer.
20 Anvendelse af et amideret pektin ifølge ethvert af kravene 10-18 i marme-20 lader og geléer.
21 Anvendelse af et amideret pektin ifølge ethvert af kravene 10-18 i mejeriprodukter.
22. Anvendelse af et amideret pektin ifølge ethvert af kravene 10-18 i farma ceutiske produkter.
23. Anvendelse af et amideret pektin ifølge ethvert af kravene 10-18 i produkter til personlig pleje. 30
24. Anvendelse af et amideret pektin ifølge ethvert af kravene 10-18 i husholdningsprodukter.
Priority Applications (9)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DK200201033A DK176653B1 (da) | 2002-07-02 | 2002-07-02 | Fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad, amideret pektin, som er opnåeligt ved fremgangsmåden, og anvendelse af dette |
ES03735333.1T ES2651865T3 (es) | 2002-07-02 | 2003-07-02 | Proceso para fabricar pectinas no esterificadas amidadas, su composición y usos de las mismas |
MXPA04012371A MXPA04012371A (es) | 2002-07-02 | 2003-07-02 | Proceso para preparar pectinas desesterificadas, su composicion y uso de las mismas. |
PCT/DK2003/000461 WO2004005352A1 (en) | 2002-07-02 | 2003-07-02 | Process for making de-esterified pectins, their composition and uses thereof |
US10/519,704 US8168765B2 (en) | 2002-07-02 | 2003-07-02 | Process for making de-esterified pectins their composition and uses thereof |
AU2003236822A AU2003236822B2 (en) | 2002-07-02 | 2003-07-02 | Process for making de-esterified pectins, their composition and uses thereof |
BRPI0312418-5A BRPI0312418B1 (pt) | 2002-07-02 | 2003-07-02 | Processo para produzir pectina com baixo teor de éster, pectina amidada obtida pelo mesmo e seus usos |
EP03735333.1A EP1517925B1 (en) | 2002-07-02 | 2003-07-02 | Process for making amidated de-esterified pectins, their composition and uses thereof |
DK03735333.1T DK1517925T3 (da) | 2002-07-02 | 2003-07-02 | Fremgangsmåde til fremstilling af amiderede, deesterificerede pektiner, deres sammensætning og anvendelser deraf |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DK200201033 | 2002-07-02 | ||
DK200201033A DK176653B1 (da) | 2002-07-02 | 2002-07-02 | Fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad, amideret pektin, som er opnåeligt ved fremgangsmåden, og anvendelse af dette |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DK200201033A DK200201033A (da) | 2004-01-03 |
DK176653B1 true DK176653B1 (da) | 2009-02-02 |
Family
ID=29797027
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK200201033A DK176653B1 (da) | 2002-07-02 | 2002-07-02 | Fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad, amideret pektin, som er opnåeligt ved fremgangsmåden, og anvendelse af dette |
DK03735333.1T DK1517925T3 (da) | 2002-07-02 | 2003-07-02 | Fremgangsmåde til fremstilling af amiderede, deesterificerede pektiner, deres sammensætning og anvendelser deraf |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK03735333.1T DK1517925T3 (da) | 2002-07-02 | 2003-07-02 | Fremgangsmåde til fremstilling af amiderede, deesterificerede pektiner, deres sammensætning og anvendelser deraf |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8168765B2 (da) |
EP (1) | EP1517925B1 (da) |
AU (1) | AU2003236822B2 (da) |
BR (1) | BRPI0312418B1 (da) |
DK (2) | DK176653B1 (da) |
ES (1) | ES2651865T3 (da) |
MX (1) | MXPA04012371A (da) |
WO (1) | WO2004005352A1 (da) |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK176653B1 (da) | 2002-07-02 | 2009-02-02 | Cp Kelco Aps | Fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad, amideret pektin, som er opnåeligt ved fremgangsmåden, og anvendelse af dette |
EP1563738A1 (en) * | 2004-02-13 | 2005-08-17 | Puratos Naamloze Vennootschap | Cold gelling pastry glaze based on pectin |
CA2582428A1 (en) * | 2004-03-26 | 2005-10-13 | Glycogenesys, Inc. | Modified pectins, compositions and methods related thereto |
AR048709A1 (es) | 2004-04-26 | 2006-05-17 | Cp Kelco Aps | Composicion dermoprotectora para controlar la alcalinidad y uso de la misma |
DK176573B1 (da) * | 2004-10-13 | 2008-09-22 | Cp Kelco Aps | Geleringsmiddel for geler med lave kalorieindhold |
US8716176B2 (en) | 2011-09-19 | 2014-05-06 | Cp Kelco Aps | Low soluble solids acid gels and methods for making same |
US8685420B2 (en) | 2012-03-02 | 2014-04-01 | Cp Kelco Aps | Personal care compositions with acidified pectins |
US20140274871A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Cp Kelco Aps | Low ester pectin air freshener gels and methods for making the same |
CN105777936B (zh) * | 2016-05-19 | 2018-06-22 | 江南大学 | 一种低酯果胶及其制备方法 |
CN107594483A (zh) * | 2017-01-13 | 2018-01-19 | 江苏西宏生物医药有限公司 | 一种稳定的果胶溶液 |
ES2811832T1 (es) | 2018-03-26 | 2021-03-15 | Cp Kelco Aps | Pectina caracterizada por un bajo grado de esterificación de metilo y una viscosidad intrínseca elevada |
CN113056291B (zh) * | 2018-08-17 | 2023-05-30 | 塞弗德公司 | 核酸去污方法 |
DE102020125815A1 (de) | 2020-10-02 | 2022-04-07 | Herbstreith & Fox Gmbh & Co. Kg Pektin-Fabriken | Niederverestertes, hoch-calciumreaktives Pektin und Verfahren zu seiner Herstellung |
WO2023212166A1 (en) * | 2022-04-28 | 2023-11-02 | Cargill, Incorporated | High methoxyl pectin composition, a method for preparing the same and a food composition thereof |
CN117625714A (zh) * | 2023-12-01 | 2024-03-01 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 具有调控冰晶生长效应的果胶多糖的制备方法 |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2444266A (en) | 1944-03-31 | 1948-06-29 | Us Agriculture | Pectic materials and method of preparing same |
US3622559A (en) | 1967-11-01 | 1971-11-23 | Sunkist Growers Inc | Method for producing pectins having high resistance to breakage and high capability for gelling in the presence of calcium |
US3636097A (en) * | 1969-12-17 | 1972-01-18 | Philip Morris Inc | Isolation of malic acid from tobacco |
DE2133572C2 (de) * | 1971-07-06 | 1982-07-15 | Sunkist Growers Inc., Los Angeles, Calif. | Verfahren zur Herstellung von Pektinen mit einem Methoxylgehalt von etwa 4,5 bis 7% und einem Molekulargewicht von mindestens 120 000 |
US4065614A (en) | 1976-01-13 | 1977-12-27 | Sunkist Growers, Inc. | Intermediate amide pectins |
DE4133920C1 (de) * | 1991-10-12 | 1993-11-04 | Herbert Dr Kunzek | Verfahren zur herstellung eiweissarmer, pectinreicher zellstrukturierter materialien |
EP0991669B1 (en) * | 1997-06-23 | 2001-09-05 | Danisco A/S | Methods of obtaining selected pectin fractions, such fractions and their use |
DK173377B1 (da) * | 1998-01-20 | 2000-09-11 | Hercules Inc | Pektin til brug i pastalignende materialer, fremgangsmåde til fremstilling heraf, pastalignende materialer omfattende pekti |
US6428837B1 (en) | 2000-06-09 | 2002-08-06 | Cp Kelco Aps | Deesterified pectins, processes for producing such pectins, and stabilized acidic liquid systems comprising the same |
WO2001096404A2 (en) | 2000-06-09 | 2001-12-20 | Cp Kelco Aps | Low methoxyl pectins, processes thereof, and stabilized aqueous systems comprising the same |
DE10057976B4 (de) * | 2000-11-22 | 2005-02-03 | Südzucker AG Mannheim/Ochsenfurt | Verfahren zur Herstellung von Pektinhydrolyseprodukten |
DK176653B1 (da) | 2002-07-02 | 2009-02-02 | Cp Kelco Aps | Fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad, amideret pektin, som er opnåeligt ved fremgangsmåden, og anvendelse af dette |
-
2002
- 2002-07-02 DK DK200201033A patent/DK176653B1/da not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-07-02 AU AU2003236822A patent/AU2003236822B2/en not_active Withdrawn - After Issue
- 2003-07-02 MX MXPA04012371A patent/MXPA04012371A/es active IP Right Grant
- 2003-07-02 US US10/519,704 patent/US8168765B2/en active Active
- 2003-07-02 ES ES03735333.1T patent/ES2651865T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-07-02 WO PCT/DK2003/000461 patent/WO2004005352A1/en not_active Application Discontinuation
- 2003-07-02 DK DK03735333.1T patent/DK1517925T3/da active
- 2003-07-02 EP EP03735333.1A patent/EP1517925B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-07-02 BR BRPI0312418-5A patent/BRPI0312418B1/pt active IP Right Grant
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2003236822A1 (en) | 2004-01-23 |
AU2003236822B2 (en) | 2009-07-23 |
EP1517925B1 (en) | 2017-10-18 |
ES2651865T3 (es) | 2018-01-30 |
EP1517925A1 (en) | 2005-03-30 |
US8168765B2 (en) | 2012-05-01 |
MXPA04012371A (es) | 2005-02-25 |
DK200201033A (da) | 2004-01-03 |
BR0312418A (pt) | 2005-04-19 |
WO2004005352A1 (en) | 2004-01-15 |
DK1517925T3 (da) | 2018-01-08 |
BRPI0312418B1 (pt) | 2015-08-11 |
US20060127991A1 (en) | 2006-06-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DK176653B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af amideret pektin med lav forestringsgrad, amideret pektin, som er opnåeligt ved fremgangsmåden, og anvendelse af dette | |
Rolin | Pectin | |
Chan et al. | Pectin as a rheology modifier: Origin, structure, commercial production and rheology | |
Buchholt et al. | Preparation and properties of enzymatically and chemically modified sugar beet pectins | |
US5656734A (en) | Methods for making pectin and pectocellulosic products | |
Yuliarti et al. | Influence of pH, pectin and Ca concentration on gelation properties of low-methoxyl pectin extracted from Cyclea barbata Miers | |
Dimopoulou et al. | Pectin recovery and characterization from lemon juice waste streams | |
RU2336280C2 (ru) | Улучшенный способ обработки растительного материала, содержащего пектин | |
EP1294920B1 (en) | Deesterified pectins, processes for producing such pectins, and stabilized acidic liquid systems comprising the same | |
EP1294773B1 (en) | Low methoxyl pectins, processes thereof, and stabilized aqueous systems comprising the same | |
US6699977B1 (en) | Low methoxyl pectins, processes thereof, and stabilized aqueous systems comprising the same | |
CN113667034B (zh) | 一种复合酶提取柑橘果胶的方法 | |
Qi et al. | Structural characteristics and gel properties of pectin from citrus physiological premature fruit drop | |
JP2023525962A (ja) | ペクチン抽出方法 | |
DK173377B1 (da) | Pektin til brug i pastalignende materialer, fremgangsmåde til fremstilling heraf, pastalignende materialer omfattende pekti | |
WO1989012648A1 (en) | Process of improving the gelling properties of high-esterified pectin | |
Zhang et al. | Gelation behavior between Nicandra physalodes (Linn.) Gaertn. pectin and Ca2+ is governed by degree and pattern of methylesterification | |
AU6923896A (en) | A process for the improvement of gel formation or viscosity increase | |
高峯和則 et al. | Physicochemical and gelling characterizations of pectin extracted from sweet potato pulp | |
WO2006039927A1 (en) | Gelling agent comprising a combination of pectins for low calorie gels | |
JPH11511331A (ja) | ペクチン含有水性素材の漿液分離を減らす方法 | |
Liu et al. | Effect of enzyme‐assisted acid extraction on citrus high‐methoxyl pectin riched in RG‐I: preparation, structure characterisation and physico‐chemical properties | |
ROLIN | The Copenhagen Pectin Factory, Ltd. Lille Skensved, Denmark (Subsidiary of Hercules, Inc., Wilmington, Delaware) | |
CN116903764A (zh) | 一种rg-i型苹果幼果果胶及其制备方法 | |
CN115251364A (zh) | 一种改性茶果胶的制备方法及其制品和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PUP | Patent expired |
Expiry date: 20220702 |