DK152655B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af (dl)- eller (l)-5-(2-furoyl)-, 5-(2-thenoyl)-, 5-(3-furoyl)- eller 5-(3-thenoyl)-1,2-dihydro-3h-pyrrolooe1,2-aaapyrrol-1-carboxylsyrederivater - Google Patents

Description

1 DK 152655B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukéndte (dl)- eller-(1)-5-(2-furoyl)-, 5-(2-thenoyl)-, 5-(3-furoyl)- eller 5-(3-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[ 1,2^-a]pyrrol-1-carboxylsyrederivater med den almene formel R\_ ^jri niiL- γτγυυ““ * 8 t T eiier * ^-1 (A1) (B')

2 DK 152655B

hvori X betegner oxygen eller svovl, R betegner hydrogen eller en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, R1 betegner hydrogen, methyl, chlor eller brom,.og M er hydrogen eller en farmaceutisk acceptabel saltrest, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i kravets kende-5 tegnende del anførte.

De ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede forbindelser udøver antiinflammatorisk, analgetisk og antipyretisk virkning og er således nyttige ved behandlingen af inflammation, smerte og/eller 10 pyrexi hos pattedyr som beskrevet nærmere i det følgende. De er også glatmuskelafslappelsesmidler.

Udtrykket "farmaceutisk acceptable, ikke-toksiske salte" anvendes heri til at betegne salte afledt af uorganiske baser omfattende natrium-, 15 kalium-, lithium-, arrmonium-, calcium-, magnesium-, ferro-, zink-, kobber-, mangan-, aluminium-, ferri-.og mangansalte - Sarligt foretrækkes ammonium-, kalium-, natrium-, calcium- og magnesiumsaltene. Saltene afledt af farmaceutisk acceptable organiske ikke-toksiske baser omfatter salte af primære, sekundære og tertiære aminer, substituerede 20 aminer inklusive naturligt forekommende substituerede aminer, cykliske aminer og basiske ionbytterharpikser, såsom isopropylamin, trimethylamin, diethylamin, triethylamin, tripropylamin, ethanolamin, 2-dimethylaminoethanol, 2-diethylaminoethanol, tromethamin, lysin, arginin, histidin, kaffein, prokain, hydrabamin, cliolin, betain, 25 ethylendiamin, glucosamin, methylglucamin, theobromin, puriner, pi= perazin, piperidin, N-ethylpiperidin eller polyaminharpikser.

Særligt foretrukne organiske ikke toksiske baser er isopropylamin, diethylamin, ethanolamin, piperidin, tromethamin, cholin og kaffein.

30 De omhandlede forbindelser med formlerne (A1) og (B1) og den nedenfor anførte formler (A), (B), (XI) og (XII) eksisterer som par af optiske isomere (eller enantiomorfe), dvs. en (dl)-blanding. Den foreliggende opfindelse omfatter imidlertid kun fremstilling af de (l)-isomere eller (dl)-blandingerne af forbindelserne med formlerne (A* ) eller (B1).

35 Når de hidtil ukendte forbindelser, fremstillet ifølge opfindelsen, skal anvendes til at frembringe en fysiologisk reaktion (f.eks. antiinflammatorisk, analgetisk eller antipyretisk virkning), dvs., de skal anvendes som

3 DK 152655B

medicin, er en foretrukket undergruppe, den gruppe, som består af forbindelserne med formlerne (A) og (B), og (l)-syreisomere deraf og farmaceutisk acceptable salte deraf.

Endnu en undergruppe af forbindelser, der skal anvendes som medicin, 5 er forbindelserne med formlerne (A) og (l)-syreisomeren med formlen (A) og farmaceutisk acceptable salte deraf, og denney under-gruppe kan opdeles i to yderligere undergrupper bestående af (a) sforbindelsen med formlen (A), dvs. (dl)-forbindelsen, hvori R og R1 begge er hydrogen, og X er svovl, og (b) (l)-syreisomeren med form-10 len (B), hvori R og R1 begge er hydrogen, og X er svovl, og de far-' maceutisk acceptable salte deraf.

De hidtil ukendte (dl)-forbindelser (XI) og (XII), der anvendes som udgangsmateriale ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse, 15 kan fremstilles ved hjælp af en fremgangsmåde, der kan illustreres ved hjælp af følgende reaktionsskema, hvor første trin af fremgangsmåden ifølge opfindelsen også er vist: 4 DK 152655B' „tr ^COOCH- -COOCH- iH2 + r ~e > ^ i <A/C00CH3 HtA^C00CH3 ,*„> I 2 ^ ^ H2C_(^H2 0H V / (I) * ^_ COOCE3 r^ ^C00CH3 ^Os^cooch3 * \»jOC00CH3

Γ2 \ H C-CH

?H2 (V) \ I (IV)

I \ OH

ψ 0S02CH3 \ V ^COOCH, ^ COOCH, tjC-3 > XX.COOCH3

CH |_J

IH2d

V

R. COOH R C00H

Tlf 2 <— ΎΎ ^ Ν^γ" coor ^n^Sj^cooh (IX) *- (VIII)

V

COOR2 ->

/ L-J (x) 8 LJ

til (XI) (XII) '~€OyL™ (A) W. 5 DK 152655Β .

R

;^!γ2^·:· : - }7~~7P M “^'n^N^cooh (XII) jj 0 | Ύ x ' · . (B) 1 2 hvori X, R og R har den ovenfor anførte betydning, og R er en alkylgruppe med 1-4 ca.rbonatoraer·, f.eks. methyl, ethyl, isopro= pyl eller n-butyl.

Når den ovennævnte fremgangsmåde gennemføres til fremstilling af 5 forbindelsen med formlen' (IV), hvori R er hydrogen, omsættes ækvi-molære mængder af ethanolamin (I) og dimethyl-1,3-acetonedicarboxy= x lat (II) ved en temperatur fra ca. 0°C til omkring stuetemperatur for let at danne en opløsning af vinylaminen med formlen (III), som derpå, fortrinsvis in situ, behandles i et egnet inaktivt organisk 10 opløsningsmiddel under vandfri betingelser med 2-bromaoetaldehyd eller 2-chloracetaldehyd ved en temperatur fra ca. 40°C til ca. 100°C i et tidsrum fra ca. 30 minutter til ca. 16 timer. Egnede opløsningsmidler for denne reaktion er de aprotiske opløsningsmidler, såsom acetonitril, tetrahydrofuran, dimethoxyethan, chloroform eller 15 dichlormethan. , Ved de foretrukne udførelsesformer gennemføres reaktionen i acetonitrilopløsning ved tilbagesvalingstemperatur i ca.

1 time. 2-brom-(chlor)-acetaldehydreagenserne er kendte forbindelser eller kan opnås ved pyrolyse af de tilsvarende diethylacetaler i nærværelse af oxalsyredihydrat.

20 ·

Til fremstilling af forbindelserne med formlen (IV), hvori R er en fortrinsvis ligekædet lavere alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, behandles en vandig blanding af ethanolamin (i) og dimethyl-1,3-acetone-dicarboxylat (II) med en forbindelse med formlen R^-C-CH9X, hvori X er brom eller chlor, og Rr er en lavere alkylgruppe, fortrinsvis ligekædet med 1-4 carbonatomer, og især 1-bromacetone, l-brom-2-butanon, l-brom-2-pentanon og l-brom-2-hexanon ved en temperatur fra ca. 40°C til ca. 100°C i et tidsrum fra ca. 30 minutter til ca. 16 timer. Ved den foretrukne udførelsesform gennemføres reaktionen ved

6 DK 152655B

en temperatur fra caQ -10°C til omkring stuetemperatur i fra 1 time til ca. 6 timer. R^-S-C^X-reagenserne er kendte forbindelser.

Porestring af forbindelse (IV) med methansulfonylchlorid i nærværelse 'af en tertiær amin, f.eks. triethylamin"eller pyridin, eventuelt 5 i nærværelse af et coopløsningsmiddel, såsom dichlormethan, ved en temperatur fra ca. -10°C til omkring stuetemperatur i ca. 10 minutter til ca. 2 timer, giver det tilsvarende mesylat med formlen (V), som omdannes til den tilsvarende N-(2-iodethyl)-pyrrol med formlen (Vi) ved reaktion med natriumiodid i acetonitrilopløsning, ved tilbage-10 svalingstemperatur i fra ca. 1 til ca. 10 timer.

Efter reaktion af iodethylforbindelser med formlen (VI) med natrium= hydrid i et egnet inaktivt organisk opløsningsmiddel, såsom dimethyl= formamidf fås dimethyl-1,2-dih.ydro-3H-pyrrolo [ 1,2-a] pyrrol-1,7-di= 15 carboxylat og de 6-alkylsubstituerede derivater deraf (VII). Denne ringslutning gennemføres under en inaktiv atmosfære, dvs. under en argon eller en nitrogenatmosfære ved temperaturer af størrelsesordenen fra ca. 15°C til ca. 40°C i et tidsrum fra ca. 15 minutter til ca. 4 timer. De bedste resultater opnås ved at gennemføre reaktionen 20 ved stuetemperatur i ca. 3 minutter, når R er hydrogen.

Forbindelserne med formlen (VII) kan alternativt fremstilles ved direkte ringslutning af mesylatet (V) med natriumhydrid i dimethylform= amidopløsning ved en temperatur fra ca. -10°C til omkring stuetem-25 peratur fra ca. 30 minutter til ca. 2 timer.

Basisk hydrolyse af en forbindelse med formlen (VII) med et alkali= metalhydroxid eller alkalimetalcarbonat, f.eks. natriumhydroxid, na=

triumcarbonat eller kaliumcarbonat i en - vandig_ lavere alifa-3Q

tisk alkohol, f.eks. methanol eller ethanol ved en temperatur mellem stuetemperatur og tilbagesvalingstemperaturen i fra ca. 4 til ca.

24 timer, giver den tilsvarende fri disyre med formlen (VIII), dvs.

1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]-pyrrol-1,7-dicarboxylsyre og 6-ålkyl-derivaterne deraf. Hydrolysen gennemføres fortrinsvis under anvendel-35 se af vandig methanolisk kaliumhydroxid ved tilbagesvalingstemperaturen i ca. 10 timer.

Carboxylsyregruppen i C-l-stillingen i forbindelsen (VIII) forestres derpå selektivt ved behandling med en lavere alifatisk alkohol, f.eks. 40

7 DK 152655B

methanol, ethanol, isopropanol eller n-butanolf i nærværelse af hydrogenchlorid til fremstilling af den tilsvarende alkyl-1,2-di= hydro-3H-pyrrolo[l,2-a]-pyrrol-l-carboxylat-7-carboxylsyre med formlen (IX). Reaktionen gennemføres ved en temperatur fra ca. 0°C til 5 ca. 50°C, i fra ca. 1 til ca. 4 timer.

Decarboxylering af de monoforestrede.forbindelser (IX) til de tilsvarende forbindelser med formlen (X), de vigtigste mellemprodukter ved fremgangsmåden til opnåelse af forbindelserne ifølge den fore-10 liggende opfindelse^opnås ved at opvarme (IX) ved en forhøjet temperatur af størrelsesordenen fra ca. 230°C til ca. 280°C i et.tidsrum, som er tilstrækkeligt til at få reaktionen til at forløbe til ende. Reaktionsforløbet kan følges ved omfanget af carbondioxidudvikling og tyndtlagskromatografisk analyse, idet decarboxyleringen 15 almindeligvis er forløbet til ende i løbet af ca. 45 til ca. 90 minutter. Reaktionsproduktet, nemlig alkyl-1,2-dihydro-3H-pyrrolo-[l,2-a]pyrrol-l-carboxylat og 6-alkylderivaterne deraf (X)^kan renses vved hjælp af kromatografiske metoder. Alternativt og specielt til decarboxyleringen af små portioner af forbindelse (IX) kan reaktions-. 20 produktet (x) destilleres direkte fra reaktionsbeholderen.

Kondensation af en forbindelse (X) med et amid med formlerne __ CON(CH3)2 25 ' »MFT h« ri . \X^^CON(CH3)2 hvori X og R1 har de ovenfor anførte betydninger, giver de tilsvaren-' 3 0 de alkyl-5-substitueret-l,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carb= oxylater med formlerne henholdsvis (XI) eller (XII).

Denne reaktion gennemføres i et inaktivt organisk aprotisk opløsningsmiddel og i nærværelse af phosphoroxychlorid ved tilbagesvalingstem-35 peratur i tidsrum fra ca. 1 til ca. 72 timer under en inaktiv atmosfære efterfulgt af yderligere tilbagesvaling' i nærværelse af natrium= acetat i fra ca. 2 til ca. 10 timer. I stedet for phosphoroxychlorid kan der alternativt anvendes andre syrechlorider, såsom phosgen eller ' oxalylchlorid.

40

8 DK 152655B

Ved de foretrukne udførelsesformer gennemføres denne kondensation ved at sætte en opløsning af forbindelse (X) i et egnet opløsningsmiddel til en forud tilbagesvalet blanding af 1,1-2 molærækvivalenter af både den ønskede amin og phosphoroxychlorid i det samme opløsnings-5 middel, tilbagesvale den således opnåede reaktionsblanding i fra ca. 2 til ca. 30 timer under en argonatmosfære og derpå hertil sætte fra ca. 3 til ca. 10 molærækvivalenter natriumacetat, efterfulgt af en yderligere tilbagesvalingsperiode fra ca. 4 til ca. 6 timer.

10 Passende opløsningsmidler til denne reaktion er de halogenerede hydro= carboner, såsom dichlormethan, 1,2-dichlorethan, chloroform eller carbontetrachlorid, demethoxyethan og tetrahydrofuran. Det foretrukne opløsningsmiddel er 1,2-dichlorethan.

Repræsentative eksempler på N,N~dimethylamiderne, der kan anvendes, er: N, N-dimethylthiophen-2-carboxamid, N,N-dimethylfuran-2-carboxamid, N,N-dimethyl-3-methylthiophen-2-carboxamid,

2D

N,N-dimethyl-4-methylthiophen-2-carboxamid, N,N-dimethyl-5-methylthiophen-2-carboxamid, N, N-dimethyl-4-chlorthiophen-2-carboxamid,- N, N-dimethyl-5-chlorthiophen-2-carboxamid, • N,N-dimethyl-3-bromthiophen-2-carboxamid, 25 N,N-dimethyl-5-bromthiophen-2-carboxamid, N,N-dimethyl-3-methylf uran-2-carboxamid, N,N-dimethyl-4-methylfuran-2-carboxamid, N,N-dimethyl-4-chlorfuran-2-carboxamid, N,N-dimethyl-5“Chlorfuran-2-carboxamid, 30 N,N-dimethyl-4-bromfuran-2-carboxamid, N,N-dimethyl-5-bromf uran-2-carboxamid, Ν,Ν-dimethylthiophen-3-carboxamid og N,N-dimethylf uran-3-carboxamid.

35

Disse amider kan fremstilles på sædvanlig måde ud fra de tilsvarende thiophen- eller furan-2-(3)-carboxylsyrer, dvs. ved omdannelse til syrechloriderne efterfulgt af behandling med dimethylamin.

Ved alkalisk hydrolyse af alkylestergruppen i en forbindelse med formlerne (XI) eller (XII) fås de tilsvarende fri syrer henholdsvis med formlerne (A) eller (B). Hydrolysen gennemføres på sædvanlig måde mad

9 DK 152655 B

et alkalimetalhydroxid eller alkalimetalcarbonat, f.eks. natrium= hydroxid, kaliumhydroxid, natriumcarbonat eller kaliumcarbonat i en vandig lavere alifatisk alkohol, f.eks. methanol eller . ethanol.ved en temperatur fra omkring stuetemperatur til tilbage-5 svalingstemperaturen i fra ca. 30 minutter til ca. 4 timer under en inaktiv atmosfære. Ved de foretrukne udførelsesformer gennemføres denne hydrolyse med vandig methanolisk kaliumhydroxid ved tilbagesvalingstemperatur i ca. 2 timer.

10 Forbindelserne med formlerne (A) og (b) kan spaltes i overensstemmelse med i teknikken kendte metoder til opnåelse af de tilsvarende enkelte isomere deraf. · Forbindelsen med formlen (A), hvori R og R1 begge er hydrogen, og X er svovl kan således f.eks. udsættes for en yderligere behandling i overensstemmelse med følgende diagram: J-;---;-—~ .·.··. (A1) ; ·-spaltning.‘ \:V / ·'.:·· . A1- (1) -syreisomer^id) r^phet'amin.salt .

· i ^ - - -- i'. ·' ’·' '"·· A -(l)-:syreisomejs! .. .

• * *» *.***·. * * * -' · '· > 1 v .·“.··:· V.

'".Blanding af V A “(d) ~ syreisoraexr (d) -amphetaminsal-t ,· )

10 DK 152655 B

En mere detaljeret beskrivelse af denne fremgangsmåde findes i det efterfølgende eksempel 2.

(l)-syreisomere og (d)-syreisomere af forbindelserne med formlerne 5 (A) og (B) kan alternativt opnås ved at anvende den kendte teknik med højtryksvæskekromatografi (HPLC) på a-phenethyldiastereoisomere estre af forbindelserne med formlerne (A) og (B) efterfulgt af syrespaltning. Forbindelserne med formlen (A), hvori R og begge er hydrogen, og X er svovl, kan således f.eks. underkastes en yderligere 10 behandling i overensstemmelse med følgende diagram: . - y C00H ^"——— · . . · _ ^ ) . -adskilligel, ' · ‘ '· ' ; ·:. ·.· ' . . . .

·; (A^) - (1)- syréisomer-(l)va-phénethylest-er.s y , 'Blanding af f Λ ’......... - £

' ------.- - / (£/·) - (<^) - syre isomer^ 1) - a-phenathy lester- A

- . - · ' ; . .. ’ . ’ separering under ' .

. anvendelse af . .. _ ’· .* * . ' -· højt^ksvæskekromatografi (A1} - (1 j - syreisomer^^ ' (A^j - (d) -syreisomer- (1) -phenethylester - v 4/ (A1) - (1) -syreisomer r- ' (A1) - (d) -syreisomer-_

: DK 152655B

11 ·*4

En mere detaljeret beskrivelse af· denne fremgangsmåde findes i det efterfølgende eksempel 3.

Saltderivaterne af forbindelserne med formlerne (A) og (B) og (1)— syreisomere deraf fremstilles ved at behandle disse fri syrer med en 5 passende mængde af en farmaceutisk acceptabel base. Eksempler på farmaceutisk acceptable baser er natriumhydroxid, kaliumhydroxid, lithium= hydroxid, ammoniumhydroxid, calciumhydroxid, magnesiumhydroxid, ferro= hydroxid, zinkhydroxid, kobberhydroxid, manganhydroxid, aluminiumhy= ' droxid, ferrihydroxid, manganhydroxid, isopropylamin, trimethylamin, 2q diethylamin, triethylamin, tripropylamin, ethanolamin, 2-dimethylamino= ethanol, 2-diethylaminoethanol, tromethamin, lysin, arginin, histidin, kaffein, procain, hydrabamin, cholin, betain, ethylendiamin, glucos-amin, methylglucamin, theobromin, puriner, piperazin, piperidin, N-ethylpiperidin, polyaminharpikser og lignende. Reaktionen gennemføres 25 i vand alene eller i kombination med et inaktivt med vand blandbart organisk opløsningsmiddel ved en temperatur fra ca. 0°C til ca. 100°C, fortrinsvis ved stuetemperatur. Typiske inaktive med vand blandbare organiske opløsningsmidler omfatter methanol, ethanol, isopropanol, butanol, acetone, dioxan eller tetrahydrofuran. Det molære forhold af 20 forbindelser med formlerne (A) eller (B) eller (1)-syreisomere deraf til base, der anvendes, vælges, så der tilvejebringes det til det pågældende salt ønskede forhold. Til fremstilling for eksempel af calciumsaltene eller magnesiumsaltene af forbindelserne med formlerne (A) eller (B) eller (1)-syreisomere deraf, kan det fri syreudgangs-25 materiale behandles med mindst et halvt molærækvivalent farmaceutisk acceptabel base til dannelse af et neutralt salt. Når aluminiumsaltene af forbindelserne med formlerne (A) eller (B) eller (1)-syreisomere deraf fremstilles, anvendes mindst en tredjedel molærækvivalent af den farmaceutisk acceptable base, hvis der ønskes et neutralt saltprodukt. 1 2 3 4 5 6

Det må forstås, at isolering af de heri beskrevne forbindelser om øn 2 sket kan gennemføres ved hjælp af enhver egnet separerings- eller 3 rensningsmetode, såsom f.eks. ekstraktion, filtrering, inddampning, 4 ' destillation, krystallisation, tyndtlagskromatografi eller søjlekro 5 matografi, højtryksvæskekromatografi (HPLC) eller en kombination af 6 disse metoder. I eksemplerne belyses egnede separerings- og isoleringsmetoder. Der kan naturligvis også anvendes andre ækvivalente separerings- eller isoleringsmetoder.

12

DK 152655B

Forbindelserne med formlerne (i£) og (E?) og (1)-syreisomere deraf og de farmaceutisk acceptable ;ikke-toksiske salte deraf er nyttige som antiinflammatoriske midler, analgetiske midler/ blodplade-aggregationsinhibitorer, fibrinolytiske midler, og som glatmuskelaf- 5. slappelsesmidler. Disse forbindelser kan anvendes både profylaktisk og terapeutisk.

Produkterne, som indeholder disse forbindelser^er således nyttige ved behandlingen og elimineringen af inflammation, såsom betændelsestil-10 stande i det muskulære skeletsystem, skeletled og andre væv, f.eks. ved behandlingen af betændelsestilstande, såsom rheumatisme, konkus-sion, laceration, arthritis, benbrud, posttraumatiske tilstande og gigt. I de tilfælde, hvor de ovennævnte tilstande omfatter smerte og pyrexi i forbindelse med inflammation, er de foreliggende for-15 bindeiser nyttige til at lindre disse tilstande, såvel som inflammationen.

Den foretrukne administrationsmåde i forbindelse med de ovenfor beskrevne tilstande er den orale, idet der anvendes en passende daglig 20 dosismængde, der kan justeres i overensstemmelse med lidelsens karakter og omfang. En daglig dosis fra 25 mg til 500 mg af den aktive forbindelse med formlerne (A) eller (B) eller (1)-syreisomere deraf, og de farmaceutiske acceptable ikke-toksiske estere og salte deraf anvendes. De fleste lidelser reagerer på en behandling, som omfatter en 25 dosismængde af størrelsesordenen 0,5 mg til 6 mg pr. kg legemsvægt pr. dag.

Forbindelserne med formlerne (A) og (B) og (1)-syreisomererne deraf og de ikke-toksiske/farmaceutisk acceptable salte deraf som beskrevet 30 ovenfor er også uterin-glatmuskelafslappelsesmidler og er således nyttige som midler til at opretholde graviditet hos gravide kvinder og drægtige pattedyr til gavn for moder og/eller foster, indtil afsluttelse af graviditeten fra et medicinsk synspunkt findes gunstigt eller mere gunstigt for moderen og/eller fosteret.

A. Prøve for analgetisk (vridningsmodvirkende) virkning på mus.

35

Protokol: Forbindelserne (A*) og (B'), der skal afprøves, administreres oralt ved indgivelse i en vandig bærer på tidspunkt 0 til 18-20 g han

DK 152655B

13

Swiss-Webster-mus. 20 minutter senere injiceres 0,25 ml af en 0,02% opløsning af phenylquinon intraperitonealt. Denne opløsning frembringer vridning. Dyrene observeres derpå i de næste 10 minutter med hensyn til vridning.

5 Slutpunkt: Det samlede antal mus, som vrider sig, og det gennemsnitlige antal vridninger pr. mus.

Under anvendelse af den ovennævnte protokol bestemmes det, at 5—(2— thenoyl)-l,2-dihydro~3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre har en 20 analgetisk virkning på omkring 350 gange aspirins, og (1)-5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre har en analgetisk virkning på 670 gange aspirins.

B. Test for antiinflammatorisk virkning under anvendelse af Carrageenin-15 induceret poteinflammation i rotte.

Protokol: Simonsen hunrotter med en vægt på 80-90 g anvendes. Materialerne, der skal afprøves,indgives time 0 oralt ved indgivelse i 1 ml vandig bærer. 1 time senere injiceres 0,05 ml af en 1%'ig opløsning 20 (0,9% NaCl) af carrageenin i højre bagpote. Denne injektion forårsager en inflammation af poten. Rotterne aflives 4 timer efter forsøgets start, på hvilket tidsrum begge bagpoter aftages og vejes særskilt.

Slutpunkt: % forøgelse i potestørrelse beregnet som følger: 25 Væ9ft af højre pote -vægt af venstre pote χ ^qq Vægt af venstre pote

Under anvendelse af den ovennævnte protokol bestemmes det, at 5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre har en 30 antiinflammatorisk virkning på 48 (95% konfidensgrænser: 32-72) gange phenylbutazons.

C. Test for antipyretisk virkning.

Protokol: Simonsen hunrotter med en vægt på 90-100 g anvendes. "Normal" rektaltemperaturen for rotterne bestemmes ved time 0, efterfulgt af en subkutaninjektion af 2 ml af en gærsuspension (1 ml dorsalt, 1 ml ven— 35 '· 14

DK 152655B

trait). Injektionsstederne masseres for at fordele suspensionen under huden. Gærinjektionen bevirker forhøjet legemstemperatur (pyrese). Ved time 17 masseres rotterne igen for at stimulere en yderligere forøgelse af legemstemperaturen. Ved time 18 foretages den anden rektal tempera-5 turmåling, hvorefter forbindelserne (A1) eller (B*), der skal afprøves, administreres oralt ved indgivelse i 1 ml vandig bærer. Den tredje rektal temperaturmåling foretages 2 timer efter administrationen af forbindelserne (A1) eller (B'), der skal undersøges.

10 Slutpunkt: Temperaturfald (°F) fra anden temperatunnåling til tredje temperaturmåling.

Under anvendelse af den ovennævnte protokol bestemmes det, at 5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre har en antipyretisk virkning på 17 gange aspirins.

D. Akut oral toksicitet (LD50) hos mus.

Protokol: Forbindelserne (A*) eller (B'), der skal afprøves, suspenderes i 2% vandig 20 stivelse. Koncentrationer indstilles således, at der kan gives doser i voluminer fra 0,1 ml/10 g legemsvægt. Seks grupper (bestående af seks Swiss-Webster hunmus i hver gruppe) mus anvendes. En enkelt oral dosis ved hjælp af mavesonde pr. kg legemsvægt af enten 50 mg, 100 mg, 200 mg, 400 mg, 800 mg eller 1600 mg 5-(2-thenoyl)-l,2-dihydro-3H-pyrrolo[l,2-a]-25 pyrrol-l-carboxylsyre administreres til musene. Efter administrationer, overvåges musene i en to ugers periode.

Under anvendelse af den ovennævnte protokol bestemmes den akutte orale LD50-værdi af 5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-1-30 carboxylsyre til at være 631 mg/kg med et 95% konfidensinterval fra 404 til 991 mg/kg.

De følgende fremstillingsmetoder og eksempler illustrerer nærmere henholdsvis fremstillingen af udgangsmaterialer og fremgangsmåden 35 ifølge opfindelsen. Alle blandingsforhold, der anvendes med hensyn til væsker, refererer til volumenforhold. Hvor det er nødvendigt, gentages eksempler for at fremstille yderligere materiale til efterfølgende eksempler, og med mindre andet er anført, gennemføres reaktionerne ved stuetemperatur (20-30°C).

DK 152655B

15

Fremstillingsmetode 1

En blanding af 23 g 4-chlorthiophen-2-carboxylsyre (J, Iriarté et al., J, Heterocyclic Chem. 13, 3931 og 80 ml thionylchlorid opvarmes til tilbagesvaling under vandfri betingelser i 4 timer, Thionylchlorid-5 overskudet fjernes, og resten destilleres under reduceret tryk (60°C/2 mm Hg), hvilket giver 18 g 4-chlorthiophen-'2-carboxylsyrechlorid« \

En opløsning af 10,5 g 4-chlorthiophen-2-carboxylsyrechlorid i 500 ml vandfri benzen afkøles i et is-vandbad, og dimethylamin bobles langsomt gennem opløsningen i 30 minutter. Is-vandbadet fjernes, idet dimethyl= aminstrømmen opretholdes i yderligere 15 minutter. Reaktionsblandingen .fortyndes så med 100 ml 10% natriumchloridopløsning og omrøres i 5 minutter ved stuetemperatur, den organiske fase skilles fra, vaskes med 10% saltsyre, mættet natriumbicarbonatopløsning og mættet natrium^ chloridopløsning, tørres over'natriumsulfat og inddampes til tørhed 15 under reduceret tryk. Herved fås N,N-dimethyl-4-chlorthiophen-2-carboxamid.

På tilsvarende måde omdannes thiophen- og furan-2-carboxylsyrerne, som er anført nedenfor under I til Ν,Ν-dimethylamiderne, som er anført 20 under II:

I II

Thiophen-2-carboxylsyre N,N-dimethylthiophen-2-carboxamid furan-2-carboxylsyre ' N,N-dimethylfuran-2-carboxamid 25 3- méthylthiophen-2-carboxylsyre Ν,Ν-dimethyl-3-methylthiophen-2- carboxamid * \ .

4- methylthiophen-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-4-methylthiophen-2~ carboxamid 5- methylthiophen-2-carboxylsyre N, N-dimethy 1-5-me thyl thiophen-2-- carboxamid 30 5-chlorthiophen-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-5-chlorthiophen-2- carboxamid 3- bromthiophen-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-3-bromthiophen-2- carboxamid 4- bromthiophen-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-4-bromthiophen-2- carboxamid 35 5- bromthiophen-2-carboxylsyre Ν,Ν-dimethy1-5-bromthiophen-2- carboxamid

DK 152655B

16 3- methylfuran-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-3-methylfuran-2- carboxamid i 4- methylfuran-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-4-methylfuran-2- carboxamid 5- methylfuran-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-5-methylfuran-2- carboxamid 5 3-chlorfuran-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-3-chlorfuran-2- carboxamid 4- chlorfuran-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-4-chlorfuran-2- carboxamid 5- chlorfuran-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-5-chlorfuran-2- carboxamid 10 4-bromfuran-2-carboxylsyre N,N-dimethyl~4-bromf.u ran-2- carboxamid 5-bromfuran-2-carboxylsyre N,N-dimethyl-5-bromfuran-2- carboxamid thiophen-3-carboxylsyre N,N-dimethylthiophen-3-carboxam.id furan-3-carboxylsyre N,N-dimethylfuran-3-carboxamid.

Fremstillingsmetode 2

En 250 ml 3-halset, rundbundet kolbe med magnetisk omrøring og forsynet med et calciumchloridfyldt tørringsrør er forbundet direkte (via en 2Q af de udvendige halse) ved hjælp af et tilpasningsstykke og en kort (3") vandsvaler til acetalpyrolyseapparatet. Dette sidstnævnte apparat består af en 100 ml rundbundet kolbe (forud fyldt med 15,6 g oxalsyre= dihydrat og 11,82 g bromacetaldehyddiethylacetal, fremstillet af vinyl= acetat, som beskrevet af P.Z. Bedoukian, J. Am. Chem. Soc. 66, 651 25 (1944)), med en 6" Vigreuxkolonne i toppen, med et termometer forbun det til ovennævnte svaler.

Den 3-halsede kolbe forsynes med 3,36 g ethanolamin, afkølet i et isbad til 0-10°C og behandles dråbevis under omrøring med 8,7 g dimethyl-3ø . 1,3-acetonedicarboxylat. Methyl-3-carbomethoxymethyl-3(2T-hydroxyethyl)-aminoacrylat (III) dannes straks. Efter endt tilsætning fjernes isbadet, og 100 ml tør acetonitril tilsættes. Apparatets pyrolysedel anbringes i et oliebad, og temperaturen heraf hæves til 150 til 160°C. Bromacetaldehydopløsningen, der dannes, destillerer (kogepunkt 80-83°C/ 35 · 580 mm Hg) direkte over i den magnetisk omrørte opløsning af vinylaminen (III). Når destillationstemperaturen falder under 80°C, afbrydes forbindelsen til pyrolyseapparatet, og i stedet anbringes en tilbagesva-

BK 152655B

17 ler forsynet med et tørrerør indeholdende calciumchlorid. Opløsningen opvarmes ved tilbagesvalingstemperaturen i 1 time, opløsningsmidlet fjernes under reduceret tryk, og derpå sættes 200 ml methanol og 20 g silicagel til resten. Blandingen inddampes til tørhed under vakuum, og 5 anbringes i toppen af en søjle af 200 g silicagel pakket i hexan. Søjlen elueres derpå med hexan/ethylacetat (80:20, 500 ml) og hexan/ethyl= acetat (1:1, 9 x 500 ml). Fraktionerne 2 og 3 indeholder mindre polære urenheder, og dimethyl-1,3-acetonedicarboxylat, fraktionerne 4-8 giver 4,1 g methyl-N-(2-hydroxyethyl)-3-carbomethoxypyrrol~2-acetat (IV, -*-0 R=H), som efter omkrystallisation fra ether/hexan har et smeltepunkt på 52-540C.

Fremstillingsmetode' 3 15

Til en omrørt opløsning af 4,1 g methyl-N-(2-hydroxyethyl)-3-carbo= methoxypyrrol-2-acetat i· 35 ml tør dichlormethan afkølede til -10°C, sættes 2,65 ml triethylamin og derefter tildryppes 1,46 ml methansulfo= nylchlorid, idet reaktionsblandingens temperatur holdes på -10 - -5°C, ^ Reaktionens forløb følges ved. hjælp af tyndtlagskromatografiske analyser under anvendelse af chloroform/acetone (90:10). Når reaktionen viser sig at være forløbet fuldstændig (ca. 30 minutter efter at methan sulfonylchloridtilsætningen er ophørt) tilsættes langsomt 10 ml vand. Den organiske fase skilles fra, vaskes med vand (3 x 30 ml),tørres over natriumsulfat og inddampes under reduceret tryk. Krystallisation 25 , af resten fra dichlormethan/hexan giver 4,75 g (77,7%) methyl-N-(2- mesyloxyethyl)-3-carbomethoxypyrrol-2-acetat (V, R = H),·smeltepunkt 99-101°C.

'Fremstillingsmetode 4

o U

En opløsning af 785 mg methyl-N-(2-mesyloxyethyl)-3-carbomethoxypvrrol- 2-acetat og 1,83 g natriumiodid i 10 ml acetohitril tilbagesvales i -- 1 time. Den afkølede reaktionsblanding inddampes til tørhed under reduceret tryk, og resten sønderdeles med vand. Det uopløselige materiale

OO

filtreres fra og lufttørres. Således fås 840 mg (97%) methyl-N-(2-iodethyl)-3-carbomethoxypyrrol-2-acetat (VI, R = H), smeltepunkt 137-138°C.

s 40

DK 152655B

18

Fremstillingsmetode 5

En opløsning, af 1 g methyl-N-(2-iodethyl)-3-carbomethoxypyrrol-2-acetat i 5 ml tør dimethylformamid omrøres under en argonatmosfære med 137 mg 50% natriumhydrid i mineralolie. Reaktionsblandingen holdes i 30 minut-® ter ved stuetemperatur og afkøles derpå hurtigt med 100 ml vand. Produktet ekstraheres med ethylacetat (3 x 50 ml), de forenede ekstrakter vaskes med vand, tørres over magnesiumsulfat og inddampes til tørhed. Kromatografi af resten på silicagel (20 g) under anvendelse af hexan/ ethylacetat (4:1) som elueringsmiddel giver 500 mg (80%) dimethy1-1,2-10 dihydro-3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l,7-dicarboxylat (VII, R = H), smelte punkt 70-71°C.

En opløsning af 1,80 g dimethyl-l,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-1, 7-dicarboxylat i 20 ml methanol behandles med en opløsning af 4,48 g 15 kaliumhydroxid i 20 ml vand, og reaktionsblandingen tilbagesvales i 6 timer. Den afkølede opløsning inddampes til tørhed, og resten behandles med 50 ml mættet natriumchloridopløsning. Den resulterende opløsning syrnes med 6N saltsyre og ekstraheres med ethylacetat (3 x 50 ml). De forenede ekstrakter tørres over magnesiumsulfat og inddampes til tør-^ hed under reduceret tryk. Herved fås 1,51 g (95%) 1,2-dihydro-3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l,7-dicarboxylsyre (VIII, R = H), smeltepunkt 220°C under dekomponering.

Fremstillingsmetode 6

En opløsning af 1,34 g l,2-dihydro-3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l,7-di= carboxylsyre i 50 ml isopropanol, afkøles i et isbad, mættes med hydro= genchloridgas, idet reaktionsblandingens temperatur holdes under 50°C.

Isbadet fjernes derpå, og reaktionsblandingen omrøres i 1 1/2 time 30 ved stuetemperatur og inddampes til tørhed under reduceret tryk. 10 ml benzen sættes til resten, og opløsningen inddampes endnu en gang under vakuum, idet denne behandling gentages i alt tre.gange for fuldstændigt at fjerne hydrogenchloridoverskud. Således fås 1,58 g (96%) isopropyl- \ 1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat-7-carboxylsyre (IX, 35 2 R = H, R = iso-CgHy), som efter omkrystallisation fra methanol/ethyl= acetat har et smeltepunkt på 144-145°C.

DK 152655B

19 På tilsvarende måde, men ved anvendelse af methanol, ethanol, propanol • og n-butanol i stedet for isopropanol ved den ovennævnte fremgangsmåde opnås henholdsvis: methyl-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat-7-carboxylsyre, 5 ethyl-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat~7-carboxylsyre, propyl-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat-7-carboxylsyre, °9 butyl-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat-7-carboxylsyre.

10 / Fr emstillih^satetode 7 1,054 g isopropyl-1,2-dihydro~3H-pyrrolo I1,2-a]pyrrol-l-carboxylat-7- carboxylsyre opvarmes til 240-250°C i en tør 10 ml rundbundet kolbe, idet reaktionsproduktet destilleres direkte fra reaktionsbeholderen.

15 På denne måde fås 745 mg (87%) isopropyl-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]- pyrrol-l-carboxylat (X, R = H, R = iso-CoH7), en lysegul olie med følgende fysiske konstanter: U.V,: 'λ , 215 nm (e 6020), I.R.: v , 3 -1 ' rnn maxs 1725 cm , N.M.R. (kernemagnetisk resonans) : ^ 1,22 (d, J = 7 Hz, 6H), 2,40-2,90 (m, 2H), 3,60-4,20 (m, 2H) , 4,65-5,2 (m, IH), 5,73-20 5,92 (m, IH), 6,10 (t, J = 3 Hz, IH), 6,43-6,53 (m, IH).

Fremstillingsmetode 8

En 100 ml trehalset rundbundet kolbe forsynet med en svaler, nitrogen-25 tilledningsrør og en gasbobler forsynes med 5,0 g isopropyl-1,2-di= hydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat-7-carboxylsyre. Apparatet gennemblæses fuldstændig med nitrogen og derpå standses nitrogenstrømmen. Apparatet neddykkes i et oliebad, opvarmet til 270°C., og reaktionen følges ved hjælp af carbondioxidudviklingens omfang (gasbobler) 30 og ved hjælp af tyndtlagskromatografi på silicagel under anvendelse af benzen/dioxan/eddikesyre (90:10:1) som fremkaldermiddel. Efter 45 minutters forløb er reaktionen forløbet næsten fuldstændig. Efter 1 times forløb fjernes beholderen fra oliebadet, og reaktionskolbens indhold overføres til en rundbundet kolbe med 500 ml acetone. Opløsningsmidlet 35 fjernes under reduceret tryk, og resten renses ved søjlekromatografi v på 100 g silicagel. De med hexan/benzen (70:30) og hexan/benzen (50:50)

DK 152655B

20 eluerede fraktioner giver 2,77 g (68%) isopropyl-1,2-dihydro-3H-pyrro= lo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat (X, R = H, R2 = iso-C3H7), en olie, hvis fysiske konstanter er identiske med de i fremstillingsmetode 7 anførte.

5 Fremstillingsmetode 9 710 mg af en 50%'ig suspension af natriumhydrid i mineralolie vaskes med vandfri hexan under en nitrogenatmosfære og suspenderes derpå i 50 ml dimethylformamid. Suspensionen afkøles til -5°C, og 4,5 g methyl-N-(2-mesyloxymethyl)-3-carbomethoxypyrrol-2-acetat tilsættes, idet reaktionsblandingen omrøres ved -5°C til 0°C i 1 time. Reaktionsblandingen hældes derpå i iskold natriumchloridopløsning og ekstraheres adskillelige gange med benzen. De forenede ekstrakter vaskes med vand, tørres og inddampes til tørhed under reduceret tryk. Den faste rest ^5 krystalliseres fra ether. Således fås dimethyl-l,2-dihydro-3H-pyrrolo-[l,2-a]pyrrol-l,7-dicarboxylat (VII, R = H), der er identisk med det ved fremstillingsmetode 5 opnåede produkt.

Fremstil lingsmetode 10 20 En opløsning af 232,5 mg N,N-dimethylthiophen-2-carboxamid og 0,15 ml phosphoroxychlorid i 2 ml 1,2-dichlorethan tilbagesvales i 30 minutter. Til denne opløsning sættes en opløsning af 181 mg isopropyl-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l-carboxylat i 2 ml 1,2-dichlorethan. Reaktionsblandingen tilbagesvales under en argonatmosfæ-re i 8 timer, behandles med 450 mg natriumacetat og tilbagesvales i yderligere 5 timer. Den resulterende blanding inddampes så til tørhed, og resten kromatograferes på 12 g silicagel, idet der elueres med hexan/ethyl= acetat (3:1). Således fås isopropyl-5-(2-thenoyl)-l,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat (XI, R og R1 = H, R2-= iso-C3H7, X = 30 S) ·

Fremstillingsmetode 11

Ved at følge fremgangsmåderne fra fremstillingsmetode 7 eller 8 om-dannes den ved fremstillingsmetode 6 opnåede ethyl-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]-l-carboxylat-7-carboxylsyre til ethyl-1,2-dihydro-3H-pyrrol[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat.

21

DK 152655B

Ved kondensation af forbindelsen med N,N-?dimethylthiophen-2-carboxamid 1 overensstemmelse med fremgangsmåden fra fremstillingsmetode 10 fås ethyl-5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l-carboxylat,

Xmaks 265' 328 ^ (e 7580' 1778°)·

8 Fremstillingsmetode 12A

En 250 ml 3-halset rundbundet kolbe med magnetisk omrøring og forsynet med et calciumchlorid fyldt tørrerør forsynes med 3,36 g etha= nolamin, afkøles på et isbad til 0-10°C og behandles dråbevis under omrøring med 8,7 g dimethyl-l,3-acetonedicarboxylat. Methyl-3-carbo= methoxymethyl-3-(2'-hydroxyethyl)-aminoacrylat (III) dannes straks. Efter endt tilsætning fjernes isbadet, og 80 ml tør acetonitril tilsættes. Reaktionsblandingen behandles så dråbevis med 6,75 g brom= acetaldehyd i 20 ml acetonitril og opvarmes derpå ved tilbagesvalings-15 temperaturen i 2 timer. Opløsningsmidlet fjernes derpå under reduceret tryk, og 200 ml methanol og 20 g silicagel sættes til resten. Denne blanding inddampes til tørhed under vakuum og anbringes i toppen af en søjle af 200 g silicagel pakket i hexan, idet søjlen elueres med hexan/ethylacetatblandinger. Fraktioner elueret med hexan/ethyl= 20 acetat (1:1) giver methyl-N-(2-hydroxyethyl)-3-carbomethoxypyrrol- 2-acetat (IV, R = H), der er identisk med det ved fremstillingsmetode 2 opnåede produkt.

Fremstillingsmetode 12B

25 Til en opløsning af 6 ml ethanolamin i 5 ml vand sættes 1,74 g di= methyl-1,3-acetonedicarboxylat. Den resulterende blanding afkøles hurtigt til -10°C og behandles dråbevis i løbet af en 15 minutters periode under omrøring med 1,67 ml l-bromacetone, medens reaktionsblandingen holdes ved en temperatur på højst 40°C. Efter endt tilsæt-3Q ning omrøres den mørke reaktionsblanding i yderligere i 1 time ved stuetemperatur og hældes derpå i en blanding af saltsyre/is mættet med fast natriumchlorid og ekstraheres med ethylacetat (3 x 100 ml).

Den samlede mængde organisk ekstrakt vaskes med koldt vand til neutral reaktion, tørres med vandfri natriumsulfat og inddampes til tør-hed under reduceret tryk. Kromatografi af resten på 30 g silicagel under anvendelse af hexan/ethylacetat (70:30) som elueringsmiddel

DK 152655B

22 giver 890 mg krystallinsk methyl-N- (2-hydroxyethyl)-3-carbomethoxy- 4-methylpyrrol-2-acetat, som ved omkrystallisation fra methylenchlo= rid/hexan smelter ved 78°C og har følgende analyse: 5 Beregnet for ci2H17N®5: C, 56,45, H, 6,71

Fundet: C, 56,41 H, 6,73

Fremstillingsmetode 13 10 Véd at følge fremgangsmåden fra fremstillingsmetode 3 omdannes methyl-N-(2-hydroxyethyl)-3-carbomethoxy-4-methylpyrrol-2-acetat (IV, R= CH^) til methyl-N-(2-mesyloxyethyl)-3-carbomethoxy-4-methylpyrrol-2-acetat og derpå omkrystalliseres med natriumhydrid i dimethylformamid i overensstemmelse med fremgangsmåden fra fremstillingsmetode 9 til frem-15 stilling af dimethyl-l,2-dihydro-6-methyl-3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol- 1,7-dicarboxylat.

Ved hydrolyse af sidstnævnte forbindelse med kaliumhydroxid i overensstemmelse med fremgangsmåden fra fremstillingsmetode 5 efterfulgt af 20 selektiv forestring ved C-l og decarboxylering ved C-7 i overensstemmelse med fremgangsmåderne fra henholdsvis fremstillingsmetoderne 6 og 8, opnås successivt l,2-dihydro-6-methyl-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-1, 7-dicarboxylsyre, isopropyl-l,2-dihydro-6-methyl-3H-pyrrolo[1,2-a]-pyrrol-l-carboxylat-7-carboxylsyre og isopropyl-1,2-dihydro-6-methyl-25 3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat (X, R = CHg, R = iso-C^H^).

Fremstillingsmetode 14 I overensstemmelse med fremgangsmåden fra fremstillingsmetode 10 kon- 30 denseres isopropyl-1,2-dihydro-6-methyl-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l- carboxylat med N,N-dimethylthiophen-2-carboxamid til fremstilling af isopropyl-5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-6-methyl-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol- 1 2 1-carboxylat (XI, R = CHg, R - H, R er iso-CjH^, X = S), med et smeltepunkt på 102,5°C.

35

Fremstillingsmetode 15

En opløsning af 232,5 mg N,N-dimethylthiophen-3-carboxamid og 0,15 ml phosphoroxychlorid i 2 ml 1,2-dichlorethan tilbagesvales i 30 min.

DK 152655B

23

Til denne opløsning sættes en opløsning af 181 mg isopropy1-1,2-51= hydro-3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l-carboxylat i 2 ml 1,2-dichlorethan.

Reaktionsblandingen tilbagesvales under en argonatmosfære i 8 timer, behandles med 450 mg natriumacetat og tilbagesvales i yderligere 5 5 timer. Den resulterende blanding inddampes så til tørhed, og resten kromatograferes på 12 g silicagel, idet der elueres med hexan/ethyl= acetat (3:1). Således fås isopropyl-5-(3-thenoyl)-1,2-dihydro-3H- 2- pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l-carboxylat (XIX, R = H, R = iso-C^H^, X = S), Smp. 67-68°C.

10 Når N,N-dimethylfuran-3-carboxamid anvendes i stedet for N,N-dimethyl= thiophen-3-carboxamid fås på samme måde*.

Isopropyl-5-(3-furoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-aJ pyrrol-l-carboxy= 25 lat, en olie med følgende fysiske konstanter: U.V. Xmaks 222' 244**277 (skulder), 314 nm (ε 6750, 4250, 14800); I.R. VCH?l3 1730, 1610, 1560 cm-1; males 20 N.M.R. ^TMS1·3 1,23 [d' 6Er J = 6 HZi 2^ ' 2,50-3,00 (m, 2H) , 3,92 (dd, 2H, = 6 Hz, JBX = 7 Hz; H-l), 4,10-4,60 (m, 2H), 4,95 [sept., IH, J = 6 Hz; (CH3)2CH], 5,95 (d, IH, 25 J = 4 Hz; H-7), 6,78 (m, IH), 6,83 (d, IH, J = 4 Hz; H-6), 7,30 (m, IH), 7,83 ppm (m, IH); M.S. m/e 270 (M+) , 3g Fremstillingsmetode 16

En opløsning af 200 mg 5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-aJ-pyrrol-l-carboxylsyre i 5 ml dichlormethan behandles med et overskud af etherisk diazomethan, og reaktionsblandingen holdes ved stuetemperatur i 30 min. Opløsningsmidlerne og reagensoverskud fjernes 3 5 under reduceret tryk, og resten krystalliseres fra ethylacetat/methanol.

Herved fås methyl-5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-ΜρΩΤΤ 1-carboxylat, 265, 328 nm (ε 7580, 17780).

DK 152655B

24

Eksempel 1

En opløsning af 300 mg isopropyl-5-(2-thenoyl)-l,2-dihydro-3H-pyrrolo-[l,2-a]pyrrol-l-carboxylat i 30 ml 50% vandig methanol indeholdende 1% kaliumhydroxid, tilbagesvales under en nitrogenatmosfære i 2 timer.

5 Methanolen fjernes derpå under reduceret tryk, og den basiske opløsning, der er tilbage, fortyndes med vand og ekstraheres med chloroform til . fjernelse af eventuelt uforsæbeligt produkt. Den vandige alkaliske fase syrnes med 20% saltsyre og ekstraheres tre gange med ethylacetat. De forenede ekstrakter tørres over natriumsulfat og inddampes til tørhed 10 under reduceret tryk. Således fås 250 mg rå 5-(2-thenoyl)-l,2-dihydro-3H-pyrrolo[l,2-ajpyrrol-l-carboxylsyre, i(A), R og R^ = Η, X = S], med et smeltepunkt på 145-148°C, som efter omkrystallisation fra ethyl= acetat smelter ved 152-153°C under dekomponering.

15 ' Eksempel 2 · * t 410 mg 5-(2-thenoyl)-l,2-dihydro-3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre s og 212,3 mg (cl)-amphetamin opløses i 15 ml absolut methanol og opvarmes under tilbagesvaling i 15 minutter, efterfulgt af fjernelse af methano= 20 let under vakuum. Den resulterende diastereoisomere (d)-amphetaminsalt- blanding (612,3 mg) opløses i det mindst mulige volumen varm (55°C) acetone, afkøles til stuetemperatur og filtreres, og vaskes med 2 ml kold (-10°C) acetone. Denne omkrystallisationsmetode gentages yderligere tre gange. Herved fås 247 mg (1)-5-(-2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo- CHC1 λ 25 [1,2-ajpyrrol-l-carboxylsyre-(d)-amphetaminsalt med et αβ 3 = -181,3 og et smeltepunkt på 168-170°C, t

Det umiddelbart ovenfor opnåede (1)-syreisomer-(d)-amphetaminsalt sættes til 30 ml methylenchlorid og omrystes tre gange med 10 ml Ο,.ΊΝ 30 vandig saltsyre. Methylenchloridopløsningen vaskes tre gange med 15 ml mættet natriumchlorid/vand (2:l/volumen:volumen) og tørres over vand- j fri natriumsulfat. Filtrering og fjernelse af det organiske opløsningsmiddel under vakuum giver 90 mg (1)-5-(2-thenoyl)-l,2-dihydro-3H- prrni _ pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre, der har et x3 = -177° og et 35 smeltepunkt på 134-135,5°C.

DK 152655B

25

Acetonemoderluden, som fås fra spaltningen (dvs. de gentagne krystallisationer) af den diastereoisomere-(d)-amphetaminsaltblanding, der er beskrevet ovenfor, forenes og omdannes under anvendelse af saltsyrespaltningsmetoden som beskrevet ovenfor« Herved fås 245 mg af en blan-E ding beriget på (d)-5-(2-thenoyl)-l,2-dihydro-3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol- l-carboxylsyre og indeholdende (1)-5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyr= rolo [1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre. Denne blanding racemiseres (recirkuleres) tilbage til en 1;1 blanding af de (d)- og (1)-isomere af 5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-aJpyrrol-l-carboxylsyre som 10 følger: De 245 mg af blandingen, der er beriget på den (d)-isomere og « indeholdende den (1)-isomere, der er beskrevet ovenfor, opløses i 15 ml methanol. 1,5 ml methanol og 350 mg natriumhydroxid tilsættes, og opløsningen opvarmes under tilbagesvaling under nitrogen i 1 time. Metha= nolet fjernes under vakuum, 2,5 ml vand tilsættes, og opløsningen syr-nes til pH-yærdi 2 med 10% vandig saltsyre. Blandingen ekstraheres med . tre 10 ml portioner methylenchlorid, og methylenchloridekstrakterne forenes og vaskes neutrale igen (pH-værdi 7), tørres over vandfri natriumsulfat og koncentreret i vakuum. Herved fås 230. mg rå krystallinsk produkt, som efter omkrystallisation fra ethylacetat/hexan giver 180 mg 5- (2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxyl= syre med et αρβ0Η = 0,0° og et smeltepunkt på 152-154°C.

Eksempel 3 1

Til en opløsning af 118 mg 5-(2-thenoyl)-lf2-dihydro-3H-pyrrolo(1,2-al-pyrrol-l-carboxylsyre i 8 ml tør benzen sættes 0,234 g trifluoredd.ike= syreanhydrid. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 10 minutter, og den resulterende opløsning afkøles til 0-5°C, og 0,55 g tør triethyl= amin tilsættes umiddelbart fulgt af tilsætningen af 0,2 g (i)-a-phenyl= 30 ethylalkohol. Den således opnåede reaktionsopløsning omrøres ved stuetemperatur i 15 minutter og hældes i 20 ml vand indeholdende 1 ml tri= ethylamin, efterfulgt af ekstraktion med éthylacetat, Ethylacetateks-trakten tørres over natriumsulfat, efterfulgt af fjernelse af opløsningsmidlet og overskud af (l)-a-phenylethylalkohol under vakuum« Her- 3 5 ved fås 0,166 g af en blanding af (1).-5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H~ ' pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre-(l.)'-a-phenethylester og (d}-5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo Γ1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre-(1)-α-phenethylester, som separeres ved højtryksvæskekromatografi (under 26

DK 15 2 6 5 5 B

anvendelse af 4% EtOAc/hexan på en 11 mm x 50 cm 10pm"Lichrosorb^31-60-søjle]. Herved fås 68 mg af en mere polær ester (a^e0H =.149fl°) og 73 mg af en mindre polær ester (a^e0H - +105,2°), 5 62,1 mg af den mere polære ester opløses i 3 ml tør benzen. Opløsningen afkøles til 15-20°C, og 2,5 ml trifluoreddikesyre tilsættes, pg opløsningen omrøres ved stuetemperatur i 1 time og 40 minutter. Reaktionsopløsningen hældes i 60 ml tør benzen, pg opløsningsmidlerne fjernes under vakuum og ved omgivelsernes temperatur. Rensningen gennemføres 10 ved hjælp af højtryksvæskekromatografi (under anvendelse af en søjle, som den ovenfor beskreyne, bortset fra at 35% EtOAc/hexan i 1/2% eddikesyre anvendes i stedet for 4% EtOAc/hexan), Herved fås 41 mg (1)- 5- (2-thenoyl) -1,2-dihydro-3H'-pyrrolo [1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre med QMeOH _ „^4400 et SIneitepunkt på 130-132°C, 15 Spaltning af den mindre polære ester i overensstemmelse med den ovenfor beskrevne metode for spaltning af den mere polære ester giver på lignende måde (d)-5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carb= oxylsyre med = +142,4°C og et smeltepunkt på 127-129°C. Den så ledes opnåede (d)-syreisomer kan om ønsket racemiseres (og recirkuleres) 20 i overensstemmelse med.i teknikken kendte metoder.

Eksempel 4

En opløsning af 336 mg isopropyl-5-(2-thenoyl)-l,2-dihydro-3H-pyrrolo- . [l,2-a]pyrrol-l-carboxylat i 10 ml methanol behandles med en opløsning af 690 mg kaliumcarbonat i 5 ml vand. Reaktionsblandingen tilbagesva-, les under en nitrogenatmosfære i 2 timer, afkøles og inddampes til tørhed. Resten optages i 10 ml 10% vandig saltsyre og 50 ml vand, og den resulterende blanding ekstraheres med ethylacetat (2 x 50 ml). De 30 forenede ekstrakter tørres oyer magnesiumsulfat og inddampes til tørhed under reduceret tryk. Krystallisation af resten fra ethylacetat giver 5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre, der er identisk med det i eksempel 2 , sidste afsnit, opnåede produkt.

DK 152655B

27

Eksempel 5

Ved at følge fremgangsmåden fra fremstillingsmetode 10 og anvende 1,1-2 molærækvivalenter N,N-dimethylfuran-2-carboxamid, N,N-dimethyl-5-methylthiophen-2-carboxamid, 5 N,N-dimethyl-4-chlorthiophen-2-carboxamid, N,N-dimethyl-thiophen-3-carboxamid, N,N-dimethyl-furan-3-carboxamid i stedet for N,N-dimethylthiophen-2-carboxamid og følge reaktionens · forløb ved hjælp af tyndtlagskromatografi, fås henholdsvis: 'isopropyl-5-(2-furoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[l,2~a]pyrrol-l-carboxylat, en olie med følgende fysiske konstanter:

15 · ’ MeOH

'u-v‘ Xmaks 275, 332,5 nm (e 8900, 17800); I R CHC13 -1 Χλ*·' vmaks 1735, 1685, 1605 cm ; . CDCl, n.m.k. fiTMS J lf23 [d^ 6H^ j = 6 Hz. (CH3)2CH], 20 2,60-3,00 (m, 2H), 3,90 (dd, IH, JAX= 6 Hz; JBX = 7 Hz; H“1J' 4,10-4,67 (m, 2H) , 4,95 [sept., IH, J = 6 Hz; (CH3)2CH], 6,00 (d, IH, J = 4 Hz; II-7) , 6,40 (m, IH), 7,10 (m, IH), 7,23 (d, HI, J = 4 Hz; H-6), 25 · ' 7,43 ppm {m, IH); M.S. m/e 287 (M+), isopropyl-5- (5-methyl-2-thenoyl) -1,2-dihydi:o-3H-py rrolo [ 1,2-a] pyr= rol-l-carboxylat, med smeltepunkt 82°-82,5°C, . 30 isopropyl-5-(4-chlor-2-thenoy])-l,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat, olie, isopropyl—5—(3—thenoyl)—1,2—dihydro—3H—pyrrolo[1,2—a]pyrrol-l-carboxylat, smp. 67-68°C, og isopropyl-5-(3-furoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a] pyrrol-1-25 carboxylat, olie.

Ved hydrolyse af isopropylestergruppen i overensstemmelse med fremgangsmåderne fra eksemplerne 1 eller 4 fås de tilsvarende fri

DK 152655B

28 5-(2-furoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre, smeltepunkt 184-184#5°G.

5-(5-methyl-2-thenoy1}-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxyl= syre, smeltepunkt 169-170°C, 5- (4-chlor-2-thenoyl) -1,2-dihydro~3H-pyrro.lo [1,2-a] pyrrol-l-carboxyl= syre, smp. 169—169,5 C, 5-(3-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre, smp. 166-167,5°C, og 5- (3—furoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre, smp. 156°C.

10

Eksempel 6

En opløsning af 500 mg isopropyl-5-(2-thenoyl)-l,2-dihydro-6-methyl-3H-pyrrolo[l,2-a]pyrrol-l-carboxylat i 15 ml methanol behandles med 1 c en opløsning af 1,05 g kaliumcarbonat i 8 ml vand. Reaktionsblandingen tilbagesvales under en nitrogenatmosfære i tre timer, afkøles og ind-, dampes til tørhed. Resten optages i 10 ml 10% vandig saltsyre og 50 ml vand, og den resulterende blanding ekstraheres med ethylacetat (3 x 50 ml). De forenede ekstrakter tørres over magnesiumsulfat og inddampes 20 . .

til tørhed under reduceret tryk. Herved fås 5-(2-thenoyl)-l,2-dihydro- 6- methyl-3H-pyrrolo[i,2-a]pyrrol-l-carboxyl’syre [(A),· R = CH3, R^ = . Η, X = S] med et smeltepunkt på 166°C,

Eksempel 7 25

En opløsning af 300 mg isopropyl-5- (3-thenoyl) -1,2-dihydro-3H--pyrrolo-[l,2-a]pyrrol-l-carboxylat i 30 ml 50% vandig methanol indeholdende 1% kaliumhydroxid tilbagesvales under en nitrogenatmosfære i 2 timer, Methanolet fjernes derpå under reduceret tryk, og den basiske opløs-30 ning, der er tilbage, fortyndes med vand, og ekstraheres med chloro= form til fjernelse af eventuelt uforsæbeligt produkt. Den vandige alkaliske· fase syrnes med 20% saltsyre og ekstraheres tre gange med ethylacetat. De forenede ekstrakter tørres over natriumsulfat og inddampes til tørhed under reduceret tryk. Således fås 250 mg rå 5-(3-3 5 thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre, [ (B), R = Η, X = S]. SJftp. 166-167,5°C.

Den ved fremstillingsmetode 15 opnåede forbindelse, isopropyl-5-(3-furoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat, omdannes ^ véd hjælp af samme metode til den frie syre

Claims (1)

1. DK 152655B 5-(3-furoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylsyre, smp. 156°C. Eksempel 8 Til en opløsning af 300 mg 5-(2-rthenoyl)-l,2-dihydro-3H-pyrrolo[l,2-a]-5 pyrrol-l-carboxylsyre i 5 ml methanol sættes 1 molærækvivalent natrium= hydroxid i form af 0,1N opløsning. Opløsningsmidlet afdampes under reduceret tryk, og resten optages i 2 ml methanol efterfulgt af udfældning med ether til fremstilling af rå natrium-5-(2-thenoyl)-1,2-di= hydro-3H-pynplo(l, 2-a]pyrrol-l-carboxylat, der kan omkrystalliseres fra isopropanol. Denne forbindelses antiinflammatoriske virkning er -48 gange så kraftig som phenylbutazons virkning bestemt ved hjælp af den carragejnio-inducerede inflammation i rotter. Eksempler på forbindelser, der er opnået ved hjælp af den ovennævnte 15 fremgangsmåde er: natrium-5-(5-methyl-2-thenoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-aJpyrrol- 1-carboxylat (denne forbindelse har en antiinflammatorisk virkning, der er -10 gange virkningen af phenylbutazon i den carragednin-inducerede inflammationstest i rotter), 20 natrium-5-(2-thenoyl)-1,2-dihydro-6-methyl-3H-pyrrolo[1,2-aJ pyrrol- 1-carboxylat ( denne forbindelse har en -27 gange så kraftig antiinflammatorisk virkning som phenylbutazon bestemt ved den carrageinin-inducerede pote-inflammationstest i rotter), og 25 natrium-5-(3-furoyl)-1,2-dihydro-3H-pyrrolo[1,2-a]pyrrol-l-carboxylat, (denne forbindelse har en -3 gange så kraftig antiinflammatorisk virkning som phenylbutazon ved den carrageinin-inducerede pote-inflammations test i rotter). 3Q Patentkrav Analogifremgangsmåde til fremstilling af (dl)- eller (l)-5-(.2-furoyl)-, 5-(2-thenoyl)-, 5-(3-furoyl)- eller 5-(3-thenoyl)-l,2-dihydro-3H-pyr-35 rolo[l,2-a]pyrrol-l-carboxysyrederivater ;méd den almene formel: DK 152655 B Yl Yi n'"\v/coom c--rr—c—k .coom » eller ! J - XX^ _ (A’) (B') hvori X betegner oxygen eller svovl, R betegner hydrogen eller en i alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, R betegner hydrogen, methyl, chlor eller brom, og M er hydrogen eller en farmaceutisk acceptabel saltrest, kendetegnet ved, at en tilsvarende alkylester 5 hydrolyseres til dannelse af den fri syre eller saltet deraf af formlen (A') eller (B') eventuelt efterfulgt af spaltning af den fri syre af formlen (A1) eller (B') i de optiske isomerer eller isolering af (i)-syreisomeren eller'salte deraf.