DE69813554T2

DE69813554T2 - Cyclische harnstoff- und lactamderivate von benzo(5,6)cycloheptapyridinen zur verwendung als farnesyl-protein-transferase-hemmer

Info

Publication number: DE69813554T2
Application number: DE69813554T
Authority: DE
Inventors: George F. Njoroge; Bancha Vibulbhan; A. Patrick PINTO; M. Viyyoor GIRIJAVALLABHAN
Original assignee: Schering Corp
Current assignee: Merck Sharp and Dohme Corp
Priority date: 1997-06-17
Filing date: 1998-06-15
Publication date: 2004-02-26
Anticipated expiration: 2018-06-16
Also published as: ATE237611T1; EP0991644B1; JP3515787B2; IL133414A0; HK1024909A1; DE69813554D1; AU7953898A; NZ501570A; AU744182B2; EP0991644A1; US6039683A; JP2000513033A; ES2195352T3; CA2293712A1; CA2293712C; CN1267297A; WO1998057963A1; US5852034A; HUP0004521A3; HUP0004521A2

Description

HINTERGRUND
Die am 20. April 1995 veröffentlichte Internationale Veröffentlichung mit der Nummer WO 95/10516 offenbart Verbindungen der Formel:
in welcher R Heterocycloalkyl sein kann, welches an das Kohlenstoffatom der Gruppe -C(=Z)- durch ein Heteroatom, ein substituiertes Piperidinyl oder substituiertes Piperidinylmethyl gebunden ist. Es wird angegeben, dass die Verbindungen nützlich sind, um Farnesyl-Proteintransferase zu inhibieren.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Verbindungen der Erfindung werden repräsentiert durch Formel I:
oder ein N-Oxid davon oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz oder Solvat davon, wobei:
R und R² unabhängig ausgewählt sind aus Halogen;
R¹ und R³ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus H und Halogen, unter der Voraussetzung, dass mindestens eins von R¹ und R³ H ist;
W N, CH oder C ist, wenn die Doppelbindung an der C-11Position vorliegt;
R⁴-(CH₂)_n-R⁵ oder
ist;
R⁵
oder
ist;
R⁶ R⁵ oder
ist;
Z¹ und Z² unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus =O und =S;
n 1–6 ist; und
n₁ 0 oder 1 ist.
Bei den Verbindungen der Erfindung ist R vorzugsweise Br, ist R² Halogen und ist R¹ Halogen; oder ist R Br, ist R² Halogen und ist R³ Halogen; oder ist R Br, ist R² Halogen und R¹ und R³ sind jeweils H. R² ist vorzugsweise Br oder Cl. Wenn R¹ oder R³ Halogen ist, ist es vorzugsweise Br oder Cl. Z¹ ist vorzugsweise =O. Z² ist vorzugsweise =O. W ist vorzugsweise CH. Bevorzug te Werte für n sind 1–3. R⁵und R⁶ sind vorzugsweise
und
Wenn R⁴
ist, ist n₁ vorzugsweise 1 und die resultierende Piperidinylgruppe ist vorzugsweise an dem Kohlenstoff-Ringelement in Position 4 an das Methylen gebunden.
Die Verbindungen dieser Erfindung: (i) inhibieren in vitro Farnesyl-Proteintransferase stark, nicht aber Geranylgeranyl-Proteintransferase I; (ii) blockieren die Phänotypveränderung, welche durch eine Form von transformierendem Ras, welche ein Farnesyl-Akzeptor ist, nicht aber durch eine Form von transformierendem Ras, welche gentechnisch so modifiziert worden ist, dass sie ein Geranylgeranyl-Akzeptor ist, induziert wird; (iii) blockieren die intrazelluläre Prozessierung von Ras, welches ein Farnesyl-Akzeptor ist, aber nicht von Ras, welches gentechnisch so modifiziert worden ist, dass es ein Geranylgeranyl-Akzeptor ist; und (iv) blockieren die abnormale Zellvermehrung in Kultur, welche durch transformierendes Ras induziert wird.
Die Verbindungen dieser Erfindung inhibieren Farnesyl-Proteintransferase und die Farnesylierung des Onkogenproteins Ras. Diese Erfindung stellt ferner ein Verfahren zur Inhibition von ras-Farnesyl-Proteintransferase in Säugetieren, insbesondere Menschen, bereit durch die Verabreichung einer wirksamen Menge der oben beschriebenen tricyclischen Verbindungen. Die Verabreichung der Verbindungen dieser Erfindung an Patienten, um Farnesyl-Proteintransferase zu inhibieren, ist bei der Behandlung der nachfolgend beschriebenen Krebserkrankungen nützlich.
Diese Erfindung stellt ein Verfahren zur Inhibition oder Behandlung der abnormalen Vermehrung von Zellen, einschließlich transformierten Zellen, bereit, indem eine wirksame Menge einer Verbindung dieser Erfindung verabreicht wird. Rbnormale Vermehrung von Zellen bezieht sich auf eine Zellvermehrung, die von normalen regulatorischen Mechanismen unabhängig ist (z. B. Verlust von Kontakthemmung). Dies umfasst die abnormale Vermehrung von: (1) Tumorzellen (Tumoren), welche ein aktiviertes Ras-Onkogen exprimieren; (2) Tumorzellen, in welchen das Ras-Protein als Ergebnis einer onkogenen Mutation in einem anderen Gen aktiviert ist; und (3) gutartigen und bösartigen Zellen von anderen proliferativen Erkrankungen, bei welchen eine fehlerhafte Ras-Aktivierung auftritt.
Diese Erfindung stellt auch ein Verfahren zur Inhibition oder Behandlung von Tumorwachstum bereit, indem eine wirksame Menge der hier beschriebenen tricyclischen Verbindungen an ein Säugetier (z. B. einen Menschen), welches einer solchen Behandlung bedarf, verabreicht wird. Diese Erfindung stellt insbesondere ein Verfahren zur Inhibition oder Behandlung des Wachstums von Tumoren, welche ein aktiviertes Ras-Onkogen exprimieren, durch die Verabreichung einer wirksamen Menge der oben beschriebenen Verbindungen bereit. Beispiele von Tumoren, die inhibiert oder behandelt werden können, umfassen, sind aber nicht beschränkt auf Brustkrebs, Prostatakrebs, Lungenkrebs (z. B. Lungenadenokarzinom), Krebserkrankungen des Pankreas (z. B. Pankreaskarzinom, wie beispielsweise exokrines Pankreaskarzinom, Krebserkrankungen des Kolons (z. B. Kolorektalkarzinome, wie beispielsweise Kolonadenokarzinom und Kolonadenom), myeloische Leukämien (beispielsweise akute myeloische Leukämie (AML)), Schilddrüsenfollikel-Krebs, myelodysplastisches Syndrom (MDS), Blasenkarzinom und Epidermiskarzinom.
Es wird angenommen; dass diese Erfindung auch ein Verfahren zur Inhibition oder Behandlung von proliferativen Krankheiten, sowohl gutartigen als auch bösartigen, bereitstellt, bei welchen Ras-Proteine fehlerhaft als Ergebnis einer onkogenen Mutation in anderen Genen aktiviert sind – d.h. das Ras-Gen selbst ist nicht durch Mutation zu einer onkogenen Form aktiviert – wobei die Inhibition oder Behandlung durch die Verabreichung einer wirksamen Menge der hier beschriebenen tricyclischen Verbindungen an ein Säugetier (z. B. einen Menschen), welches einer solchen Behandlung bedarf, bewerkstelligt wird. Es können beispielsweise die gutartige proliferative Erkrankung Neurofibromatose oder Tumore, bei welchen Ras aufgrund einer Mutation oder Überexpression von Tyrosinkinase-Onkogenen (z. B. neu, src, abl, lck und fyn) aktiviert ist, durch die hier beschriebenen tricyclischen Verbindungen inhibiert oder behandelt werden.
Die in den Verfahren dieser Erfindung nützlichen tricyclischen Verbindungen inhibieren oder behandeln die abnormale Vermehrung von Zellen. Ohne auf eine Theorie festgelegt werden zu wollen, wird angenommen, dass diese Verbindungen durch die Inhibition von G-Protein-Funktion, wie ras p21, wirksam werden könnten, indem die G-Protein-Isoprenylierung blockiert wird, was diese folglich bei der Behandlung von proliferativen Krankheiten wie Tumorwachstum und Krebs, nützlich macht. Ohne auf eine Theorie festgelegt werden zu wollen, wird angenommen, dass diese Verbindungen ras-Farnesyl-Proteintransferase inhibieren und dementsprechend antiproliferative Aktivität gegenüber durch ras transformierten Zellen zeigen.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Wie hier verwendet, werden die folgenden Begriffe verwendet, wie nachfolgend definiert, sofern nicht anders angegeben:
MH⁺ repräsentiert das Molekülion plus Wasserstoff des Moleküls im Massenspektrum;
Bh steht für Butyl; Et steht für Ethyl; Me steht für Methyl;
Ph steht für Phenyl; und
Halogen steht für Fluor, Chlor, Brom und Iod.
Auf die folgenden Lösemittel und Reagenzien kann hier Bezug genommen werden durch die angegebenen Abkürzungen: Tetrahydrofuran (THF), Ethanol (EtOH); Methanol (MeOH); Essigsäure,(HOAc oder AcOH); Ethylacetat (EtOAc); N,N-Dimethylformamid (DMF); Trifluoressigsäure (TFA); Trifluoressigsäureanhydrid (TFAA); 1-Hydroxybenzotriazol (HOBT); m-Chlorperbenzoesäure (MCPBA); Triethylamin (Et₃N); Diethylether (Et₂O); Ethylchlorformiat (ClCO₂Et); und 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidhydrochlorid (DEC).
Repräsentative Strukturen der Formel I in Hinblick auf W und die optionale Doppelbindung sind, wie folgt:
und
In die Ringsysteme eingezeichnete Linien geben an, dass die angegebene Bindung zu einem jeglichen der substituierbaren Ringkohlenstoffatome ausgehen kann.
Bestimmte Verbindungen der Erfindung können in verschiedenen isomeren (z. B. enantiomeren und diastereoisomeren) Formen existieren. Die Erfindung zieht alle derartigen Isomere sowohl in reiner Form als auch in Form einer Mischung, einschließlich racemischer Mischungen, mit in Betracht. Es werden auch Enol-Formen mit umfasst.
Bestimmte tricyclische Verbindungen werden von saurer Natur sein, z. B. jene Verbindungen, welche eine Carboxyl- oder phenolische Hydroxylgruppe aufweisen. Diese Verbindungen können pharmazeutisch akzeptable Salze bilden. Beispiele von solchen Salzen können Natrium-, Kalium-, Calcium-, Aluminium-, Goldund Silbersalze umfassen. Es werden auch Salze, die mit pharmazeutisch akzeptablen Aminen, wie Ammoniak, Alkylaminen, Hydroxyalkylaminen, N-Methylglucamin und ähnlichen Verbindungen gebildet werden, in Betracht gezogen.
Bestimmte basische tricyclische Verbindungen bilden ebenfalls pharmazeutisch akzeptable Salze, z. B. Säureadditionssalze. Beispielsweise können die Pyrido-Stickstoffatome Salze mit starken Säuren bilden, während Verbindungen mit basischen Substituenten, wie Aminogruppen, auch mit schwächeren Säuren Salze bilden. Beispiele von geeigneten Säuren für eine Salzbildung sind Salzsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Essigsäure, Citronensäure, Oxalsäure, Malonsäure, Salicylsäure, Äpfelsäure, Fumarsäure, Bernsteinsäure, Ascorbinsäure, Maleinsäure, Methansulfonsäure und andere Mineral- und Carbonsäuren, die den Fachleuten auf diesem Gebiet wohlbekannt sind. Die Salze werden hergestellt, indem die freie Basenform mit einer ausreichenden Menge der gewünschten Säure in Kontakt gebracht wird, um auf herkömmliche Weise ein Salz herzustellen. Die freien Basenformen können regeneriert werden, indem das Salz mit einer geeigneten verdünnten wässrigen Basenlösung, wie verdünnter wässriger NaOH, Kaliumcarbonat, Ammoniak und Natriumbicarbonat, behandelt wird. Die freien Basenformen unterscheiden sich in bestimmten physikalischen Eigenschaften, wie Löslichkeit in polaren Lösemitteln, etwas von ihren jeweiligen Salzformen, aber die Säure-und-Base-Salze sind ansonsten für die Zwecke der Erfindung zu ihren jeweiligen freien Basenformen äquivalent.
Alle derartigen Säure-und-Base-Salze sollen innerhalb des Umfangs der-Erfindung pharmazeutisch akzeptable Salze sein und alle Säure-und-Base-Salze werden für die Zwecke der Erfindung als äquivalent zu den freien Formen der entsprechenden Verbindungen angesehen.
Verbindungen der Erfindung können durch die in den nachfolgenden Beispielen beschriebenen Verfahren und durch Verwendung der Verfahren, die in WO 95/10516 beschrieben sind –siehe beispielsweise die Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel 400.00 – hergestellt werden.
Verbindungen der Erfindung, in welchen Z¹ und Z² =O sind, können hergestellt werden, indem eine Verbindung der Formel II oder III
wobei alle anderen Substituenten wie für Formel I definiert sind, mit einer Säure der Formel HOOC-(CH₂)_n-NHR⁷ bzw. HOOC(CH₂)_n3–NHR⁷, wobei n wie oben definiert ist und R⁷ eine Aminoschutzgruppe, wie tert.-Butoxycarbonyl (BOC), ist, umgesetzt wird. Die Umsetzung wird unter Verwendung von Standard-Amidkopplungsbedingungen ausgeführt; die Umsetzung kann beispielsweise bei Raumtemperatur, in einem inerten Lösemittel, wie DMF, in Gegenwart eines Kondensationsmittels, wie 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid-hydrochlorid, einer Base, wie N-Methylmorpholin, und eines Aktivierungsmittels, wie 1-Hydroxybenzotriazol, ausgeführt werden. Die R⁷-Schutzgruppe wird dann entfernt, beispielsweise durch Behandlung mit Trifluoressigsäure, wodurch das entsprechende Amin der Formel IIA oder IIIA erhalten wird:
Um Verbindungen der Formel I herzustellen, in welcher R⁵ oder R⁶ ein cyclisches Lactam umfasst, wird eine Verbindung der Formel IIA oder IIIA mit 4-Brombutyrylchlorid oder 4-Bromvalerylchlorid umgesetzt, gefolgt von einer Cyclisierung mit einem Reagens, wie NaH. Verbindungen der Formel I, in welcher R⁵ oder R⁶ einen cyclischen Harnstoff umfasst, werden in ähnlicher Weise hergestellt, indem ein Amin der Formel IIA oder IIIA mit 2-Bromethylisocyanat oder 3-Chlorpropylisocyanat umgesetzt wird, gefolgt, wie zuvor, von einer Cyclisierung mit einem Reagens, wie NaH.
Alternativ kann ein Amin der Formel IIA oder IIIA mit einem Lactam-substituierten Acetat unter Standard-Amidkopplungsbedingungen, wie oben beschrieben, umgesetzt werden.
Wenn Z¹ oder Z¹ und Z² für Schwefel stehen, wird eine Verbindung der Formel I, in welcher Z¹ oder Z¹ und Z² Sauerstoff ist, mit P₂S₅, Lawesson's Reagens oder einem anderen Reagens, welches in der Lage ist, Schwefel anstelle von Sauerstoff einzuführen, umgesetzt. Die Umsetzung kann bei erhöhter Temperatur in Pyridin, Toluol oder anderen geeigneten Lösemitteln stattfinden. Für Verbindungen, in welchen Z¹ und Z² unter schiedlich sind, kann die Umwandlung von Sauerstoff zu Schwefel ausgeführt werden, bevor die Ausgangsmaterialien (d. h. Verbindungen der Formel IIIA und das Alkanoylchlorid oder -isocyanat) umgesetzt werden.
Verbindungen der Formel I, welche ein Pyridyl-N-oxid in Ring I des tricyclischen Abschnitts umfassen, können durch Vorgehensweisen, die in diesem Fachgebiet wohlbekannt sind, hergestellt werden. Beispielsweise kann die Verbindung der Formel II, in welcher W C oder CH ist, mit MCPBA in einem geeigneten organischen Lösemittel, z. B. CH₂Cl₂ (üblicherweise wasserfrei), bei einer geeigneten Temperatur umgesetzt werden, wodurch ein N-Oxid der Formel IIa erhalten wird
Im allgemeinen wird die Lösung von Formel II in organischem Lösemittel auf ungefähr 0°C abgekühlt, bevor das MCPBA zugesetzt wird. Man lässt die Reaktionsmischung sich dann während der Umsetzungsdauer auf Raumtemperatur erwärmen. Das gewünschte Produkt kann durch Standardtrennmaßnahmen gewonnen werden; beispielsweise kann die Reaktionsmischung mit einer wässrigen Lösung einer geeigneten Base, z. B. gesättigter NaHCO₃-Lösung oder NaOH (z. B. i N NaOH), gewaschen und dann über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet werden. Die das Produkt enthaltende Lösung kann im Vakuum aufkonzentriert werden und das Produkt kann durch Standardmaßnahmen gereinigt werden, z. B. durch Chromatographie unter Verwendung von Kieselgel (z. B. Flash-Säulenchromatographie).
Verbindungen der Formel II werden durch Verfahren, welche in diesem Fachgebiet bekannt sind, beispielsweise durch Verfahren, welche in WO 95/10516, in U.S. 5,151,423 offenbart werden, und jene, die nachfolgend beschrieben werden, hergestellt. Verbindungen der Formel II, in welcher die C-3-Position des Pyridinrings in der tricyclischen Struktur durch Brom substituiert ist, können auch durch ein Verfahren hergestellt werden, welches die folgenden Schritte umfasst:

(a) Umsetzen eines Amids der Formel
in welcher R^11a Br ist, R^5a Wasserstoff ist und R^6a C₁-C₆-Alkyl, Aryl oder Heteroaryl ist; R^5a C₁-C₆-Alkyl, Aryl oder Heteroaryl ist und R^6a Wasserstoff ist; R^5a und R^6a unabhängig aus der Gruppe bestehend aus C₁-C₆-Alkyl und Aryl ausgewählt sind; oder R^5a und R^6a zusammen mit dem Stickstoffatom, an welches sie gebunden sind, einen Ring bilden, welcher 4 bis 6 Kohlenstoffatome umfasst oder 3 bis 5 Kohlenstoffatome und eine Hetero-Komponente, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -O- und -NR^9a-, wobei R^9a H, C₁-C₆-Alkyl oder Phenyl ist, umfasst; mit einer Verbindung der Formel
in welcher R^1a, R^2a, R^3a und R^4a unabhängig aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff und Halogen ausgewählt sind und R⁷ ^a Cl oder Br ist, in Gegenwart einer starken Base, wodurch eine Verbindung der Formel
erhalten wird;
(b) Umsetzen einer Verbindung aus Schritt (a) mit
(i) POCl₃, wodurch eine Cyanoverbindung der Formel
erhalten wird; oder
(ii) DIBALH, wodurch ein Aldehyd der Formel
erhalten wird;
(c) Umsetzen der Cyanoverbindung oder des Aldehyds mit einem Piperidinderivat der Formel
in welcher L eine austretende Gruppe ist, welche aus der Gruppe bestehend aus Cl und Br ausgewählt wird, wodurch ein Alde hyd bzw. ein Alkohol der nachfolgend gezeigten Formel erhalten wird:
oder
(d)(i) Cyclisieren des Aldehyds mit CF₃SO₃H, wodurch eine Verbindung der Formel II erhalten wird, in welcher die gestrichelte Linie eine Doppelbindung darstellt; oder
(d)(ii) Cyclisieren des Alkohols mit Polyphosphorsäure, wodurch eine Verbindung der Formel II erhalten wird, in welcher die gestrichelte Linie eine Einfachbindung darstellt.

Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel II, die in WO 95/10516, U.S. 5,151,423 offenbart werden und nachfolgend beschrieben werden, setzen ein tricyclisches Keton-Zwischenprodukt ein. Solche Zwischenprodukte der Formel
in welcher R¹¹ ^b , R^1a, R^2a, R^3a und R^4a unabhängig aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff und Halogen ausgewählt werden, können hergestellt werden durch das folgende Verfahren, welches umfasst:

(a) Umsetzen einer Verbindung der Formel
(i) mit einem Amin der Formel NHR^5aR^6a, in welcher R^5a und R^6a wie beidem obigen Verfahren definiert sind, in Gegenwart eines Palladium-Katalysators und von Kohlenmonoxid, wodurch ein Amid der Formel:
erhalten wird; oder
(ii) mit einem Alkohol der Formel R¹⁰ ^aOH, in welcher R^10a C₁-C₆-Niederalkyl oder C₃-C₆-Cycloalkyl ist, in Gegenwart eines Palladium-Katalysators und von Kohlenmonoxid, wodurch der Ester der Formel
erhalten wird, gefolgt von Umsetzen des Esters mit einem Amin der Formel NHR^5aR^6a wodurch das Amid erhalten wird;
(b) Umsetzen des Amids mit einer Iod-substituierten Benzylverbindung der Formel
in welcher R^la, R^2a, R^3a, R^4a und R^7a wie oben definiert sind, in Gegenwart einer starken Base, wodurch eine Verbindung der Formel
(c) Cyclisieren einer Verbindung aus Schritt (b) mit einem Reagens der Formel R^8aMgL, in welcher R^8a C₁-C₈-Alkyl, Aryl oder Heteroaryl ist und L Br oder Cl ist, mit der Maßgabe, dass vor der Cyclisierung Verbindungen, in welchen R^5a oder R^6a Wasserstoff ist, mit einer geeigneten N-Schutzgruppe umgesetzt werden.

(+)-Isomere von Verbindungen der Formel II, in welcher X CH ist, können mit hoher Enantioselektivität hergestellt werden, indem ein Verfahren verwendet wird, welches eine Enzym-katalysierte Umesterung umfasst. Vorzugsweise wird ein racemische Verbindung der Formel II, in welcher X C ist, die Doppelbindung vorhanden ist und R³ nicht H ist, mit einem Enzym, wie Toyobo LIP-300, und einem Acylierungsmittel, wie Trifluorethylisobutyrat, umgesetzt; das resultierende (+)-Amid wird dann hydrolysiert, beispielsweise durch Rückflusskochen mit einer Säure, wie H₂SO₄, wodurch das entsprechende optisch angereicherte (+)-Isomer, in welchem X CH ist und R³ nicht H ist, erhalten wird. Alternativ wird eine racemische Verbindung der Formel II, in welcher X C ist, die Doppelbindung vorhanden ist und R³ nicht H ist, zuerst zu der entsprechenden racemischen Verbindung der Formel II, in welcher X CH ist, reduziert und dann mit dem Enzym (Toyobo LIP-300) und Acylierungsmittel, wie oben beschrieben, behandelt, wodurch das (+)-Amid erhalten wird, welches hydrolysiert wird, um das optisch angereicherte (+)-Isomer zu erhalten.
Verbindungen der Formel III können aus Verbindungen der Formel II durch Vorgehensweisen, die in diesem Fachgebiet bekannt sind, hergestellt werden, beispielsweise durch Umsetzen von 1-N-tert.-Butoxycarbonylpiperidinyl-4-essigsäure mit der Verbindung der Formel II unter den Standard-Amidkopplungsbedingungen, die oben beschrieben worden sind.
Verbindungen, die im Rahmen dieser Erfindung nützlich sind, werden durch die folgenden Herstellungsbeispiele, welche nicht so verstanden werden sollten, dass sie den Umfang der Offenbarung beschränken, exemplifiziert. Alternative mechanistische Wege und analoge Strukturen innerhalb des Umfangs der Erfindung können den Fachleuten auf diesem Gebiet ersichtlich sein.
HERSTELLUNGSBEISPIEL 1
Schritt A:
25,86 g (55,9 mmol) 4-(8-Chlor-3-Brom-5,6-dihydro-11Hbenzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yliden)-1-piperidin-1-carbonsäureethylester und 250 ml konzentrierte H₂SO₄ bei -5°C zusammengeben, dann 4,8 g (56,4 mmol) NaNO₃ zugeben und 2 h rühren. Die Mischung in 600 g Eis gießen und mit konzentrierter NH₄OH (wässrig) basisch machen. Die Mischung filtrieren, mit 300 ml Wasser waschen, dann mit 500 ml CH₂Cl₂ extrahieren. Den Extrakt mit 200 ml Wasser waschen, über MgSO₄ trocknen, dann filtrieren und im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren. Den Rückstand einer Chromatographie (Kieselgel, 10% EtOAc/CH₂Cl₂) unterziehen, wodurch 24,4 g (86% Ausbeute) des Produkts erhalten werden. Schmp. = 165–167°C, Massenspektr.: MH⁺ = 506,508 (Cl) .
Elementaranalyse: berechnet - C, 52,13; H, 4,17; N, 8,29
gefunden - C, 52,18; H, 4,51; N, 8,16 Schritt B:
20 g (40,5 mmol) des Produkts von Schritt A und 200 ml konzentrierte H₂SO₄ bei 20°C zusammengeben, dann die Mischung auf 0°C abkühlen. 7,12 g (24,89 mmol) 1,3-Dibrom-5,5-dimethylhydantoin der Mischung zusetzen und 3 h bei 20°C ruhren. Auf 0°C abkühlen, ein weiteres 1,0 g (3,5 mmol) des Dibromhydantoins zusetzen und bei 20°C 2 h rühren: Die Mischung in 400 g Eis gießen, mit konzentrierter NH₄OH (wässrig) bei 0°C basisch machen und den resultierenden Feststoff durch Filtration sammeln. Den Feststoff mit 300 ml Wasser waschen, in 200 ml Aceton aufschlämmen und filtrieren, wodurch 19,79 g (85, 6 Ausbeute) des Produkts erhalten werden. Schmp. = 236–237°C, Massenspektr.: MH⁺ = 586 (Cl) .
Elementaranalyse: berechnet - C, 45,11; H, 3,44; N, 7,17
gefunden - C, 44,95; H, 3,57; N, 7,16 Schritt C:
25 g (447 mmol) Fe-Späne, 10 g (90 mmol) CaCl₂ und eine Suspension von 20 g (34,19 mmol) des Produkts von Schritt B in 700 ml 90 : 10 EtOH/Wasser bei 50°C zusammengeben. Die Mischung über Nacht unter Rückfluss erwärmen, durch Celite® filtrieren und den Filterkuchen mit 2 × 200 ml heißem EtOH waschen. Das Filtrat und die Waschflüssigkeiten zusammengeben und im Vakuum zu einem Rückstand auf konzentrieren. Den Rückstand mit 600 ml CH₂Cl₂ extrahieren, mit 300 ml Wasser waschen und über MgSO₄ trocknen. Filtrieren und im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren, dann einer Chromatographie (Kieselgel, 30% EtOAc/CH₂Cl₂) unterziehen, wodurch 11,4 g (60% Ausbeute) des Produkts erhalten werden. Schmp. = 211–212°C, Massenspektr.: MH⁺ = 556 (Cl).
Elementaranalyse: berechnet - C, 47,55; H, 3,99; N, 7,56
gefunden - C, 47,45; H, 4,31; N, 7,49 Schritt D:
Langsam (in Anteilen) 20 g (35,9 mmol) des Produkts aus Schritt C zu einer Lösung von 8 g (116 mmol) NaNO₂ in 120 ml konzentrierter HCl (wässrig) bei –10°C zusetzen. Die resultierende Mischung bei 0°C 2 h rühren, dann langsam (tropfenweise) 150 ml (1,44 mol) 50% H₃PO₂ bei 0°C über einen Zeitraum von 1 h zusetzen. Bei 0°C 3 h rühren, dann in 600 g Eis gießen und mit konzentrierter NH₄OH (wässrig) basisch machen. Mit 2 × 300 ml CH₂Cl₂ extrahieren, die Extrakte über MgSO₄ trocknen, dann filtrieren und im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren. Den Rückstand einer Chromatographie (Kieselgel, 25% EtOAc/Hexane) unterziehen, wodurch 13,67 g (70% Ausbeute) des Produkts erhalten werden. Schmp.= 163–165°C, Massenspektr.: MH⁺ = 541 (Cl).
Elementaranalyse: berechnet - C, 48,97; H, 4,05; N, 5,22
gefunden - C, 48,86; H; 3,91; N, 5,18 Schritt E:
6,8 g (12,59 mmol) des Produkts von Schritt D und 100 ml konzentrierte HCl (wässrig) zusammengeben und bei 85°C über Nacht rühren. Die Mischung abkühlen, diese in 300 g Eis gießen und mit konzentrierter NH₄OH (wässrig) basisch machen. Mit 2 × 300 ml CH₂Cl₂ extrahieren, dann die Extrakte über MgSO₄ trocknen. Filtrieren, im Vakuum zu einem Rückstand auf konzentrieren, dann einer Chromatographie (Kieselgel, 10% McOH/EtOAc + 2% NH₄OH (wässr.)) unterziehen, wodurch 5,4 g (92% Ausbeute) der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten werden. Schmp. = 172–174°C, Massenspektr.: MH⁺ = 469 (FAB).
Elementaranalyse: berechnet - C, 48,69; H, 3,65; N, 5,97
gefunden - C, 48,83; H, 3,80; N, 5,97.
HERSTELLUNGSBEISPIEL 2
Schritt A:
2,42 g 4-(8-Chlor-3-Brom-5,6-dihydro-11H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yliden)-1-piperidin-1-carbonsäureethylester durch Lösen in konzentrierter HCl und Erwärmen auf ungefähr 100°C für 16 h hydrolysieren. Die Mischung abkühlen, dann mit 1 M NaOH (wässrig) neutralisieren. Mit CH₂Cl₂ extrahieren, die Extrakte über MgSO₄ trocknen, filtrieren und im Vakuum aufkonzentrieren, wodurch 1,39 g (69% Ausbeute) des Produkts erhalten wird.
Schritt B:
1 g (2,48 mmol) des Produkts aus Schritt A und 25 ml trockenes Toluol zusammengeben, 2, 5 ml 1 M DIBRL in Toluol zusetzen und die Mischung unter Rückfluss erwärmen. Nach 0,5 h weitere 2,5 ml 1 M DIBAL in Toluol zusetzen und 1 h unter Rückfluss erwärmen. (Die Reaktion wird durch DSC unter Verwendung von 50% Me-OH/CH₂Cl₂ + NH₄OH (wässrig) überwacht). Die Mischung auf Raumtemperatur abkühlen, 50 ml 1 N HCl (wässrig) zusetzen und 5 min rühren. 100 ml 1 N NaOH (wässrig) zugeben, dann mit EtOAc (3 × 150 ml) extrahieren. Die Extrakte über MgSO₄ trocknen, filtrieren und im Vakuum aufkonzentrieren, wodurch 1,1 g der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wird.
HERSTELLUNGSBEISPIEL 3

[racemisch wie auch (+)- und (-)-Isomere]
Schritt A:
16,6 g (0,03 mol) des Produkts aus Herstellungsbeispiel 1, Schritt D, mit einer 3 : 1-Lösung von CH₃CN und Wasser (212,65 ml CH₃CN und 70, 8 ml Wasser) zusammengeben und die resultierende Aufschlämmung über Nacht bei Raumtemperatur rühren. 32,833 g (0,153 mol) NaIO₄ und dann 0,31 g (2,30 mmol) RuO₂ zusetzen und bei Raumtemperatur rühren, wodurch 1,39 g (69% Ausbeute) des Produkts erhalten wird. (Die Zugabe von RuO wird von einer exothermen Reaktion begleitet und die Temperatur steigt von 20°C auf 30°C an). Die Mischung 1,3 h rühren (nach ungefähr 30 min kehrte die Temperatur auf 25°C zurück), dann filtrieren, um die Feststoffe zu entfernen, und die Feststoffe mit CH₂Cl₂ waschen. Das Filtrat im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren und den Rückstand in CH₂Cl₂ lösen. Filtrieren, um unlösliche Feststoffe zu entfernen, und die Feststoffe mit CH₂Cl₂ waschen. Das Filtrat mit Wasser waschen, auf ein Volumen von ungefähr 200 ml aufkonzentrieren und mit Bleichlauge, dann mit Wasser waschen. Mit 6 N HCl (wässrig) extrahieren. Den wässrigen Extrakt auf 0°C abkühlen und langsam 50% NaOH (wässrig) zusetzen, um auf pH = 4 einzustellen, während die Temperatur < 30°C gehalten wird. Zweimal mit CH₂Cl₂ extrahieren, über MgSO₄ trocknen und im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren. Den Rückstand in 20 ml EtOH aufschlämmen und auf 0°C abkühlen. Die resultierenden Feststoffe durch Filtration sammeln und die Feststoffe im Vakuum trocknen, wodurch 7,95 g des Produkts erhalten werden. ¹H-NMR (CDCl₃, 200 MHz): 8,7 (s, 1H); 7, 85 (m, 6H); 7,5 (d, 2H); 3,45 (m, 2H); 3,15 (m, 2H).
Schritt B:
21,58 g (53,75 mmol) des Produkts aus Schritt A und 500 ml einer wasserfreien 1 : 1-Mischung von EtOH und Toluol zusammengeben, 1,43 g (37,8 mmol) NaBH₄ zusetzen und die Mischung 10 min unter Rückfluss erwärmen. Die Mischung auf 0°C abkühlen, 100 ml Wasser zusetzen, dann mit 1 M HCl (wässrig) auf pH = 4–5 einstellen, während die Temperatur < 10°C gehalten wird. 250 ml EtOAc zusetzen und die Phasen trennen. Die organische Phase mit Kochsalzlösung (3 × 50 ml) waschen, dann über Na₂SO₄ trocknen. Im Vakuum zu einem Rückstand (24,01 g) auf konzentrieren und den Rückstand einer Chromatographie (Kieselgel, 30% Hexan/CH₂Cl₂) unterziehen, wodurch das Produkt erhalten wird. Unreine Fraktionen wurden durch erneute Chromatographie gereinigt. Insgesamt wurden 18,57 g des Produkts erhalten. ¹H-NMR (DMSO–d₆, 400 MHz): 8,5 (s, 1H); 7,9 (s, 1H); 7,5 (d von d, 2H); 6,2 (s, 1H); 6,1 (s, 1H); 3,5 (m, 1H); 3,4 (m, 1H); 3,2 (m, 2H).
Schritt C:
18,57 g (46, 02 mmol) des Produkts aus Schritt B und 500 ml CHCl₃ zusammengeben, dann 6,70 ml (91,2 mmol) SOCl₂ zusetzen und die Mischung bei Raumtemperatur 4 h rühren. Eine Lösung von 35,6 g (0,413 mol) Piperazin in 800 ml THF über einen Zeitraum von 5 min zusetzen und die Mischung 1 h bei Raumtemperatur rühren. Die Mischung über Nacht unter Rückfluss erwärmen, dann auf Raumtemperatur abkühlen und die Mischung mit 1 l CH₂Cl₂ verdünnen. Mit Wasser (5 × 200 ml) waschen und die wässrige Waschflüssigkeit mit CHCl₃ (3 × 100 ml) extrahieren. Alle organischen Lösungen vereinigen, mit Kochsalzlösung (3 × 200 ml) waschen und über MgSO₄ trocknen. Im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren und einer Chromatographie (Kieselgel, Gradient von 5%, 7,5%, 10% MeOH/CH₂Cl₂ + NH₄OH) unterziehen, wodurch 18,49 g der in der Überschrift angegebenen Verbindung als eine racemische Mischung erhalten werden.
Schritt D – Trenrtung der Enantiomere:
Die in der Überschrift angegebene, racemische Verbindung aus Schritt C wird durch präparative chirale Chromatographie (Chiralpack AD, 5 cm × 50 cm-Säule, Flussrate 100 ml/min, 20% iPrOH/Hexan + 0,2% Diethylamin) getrennt, wodurch 9,14 g des (+)-Isomers und 9,30 g des (-)-Isomers erhalten werden. Physikalisch-chemische Daten für das (+)-Isomer: Schmp. = 74,5°–77,5°C; Massenspektr. MH⁺ = 471,9; [a]= +97,4° (8,48 mg/2 ml MeOH) .
Physikalisch-chemische Daten für das (-)-Isomer: Schmp. - 82,9°–84,5°C; Massenspektr. MH⁺ = 471,8; [a]= –97,4° (8,32 mg/2 ml MeOH).
HERSTELLUNGSBEISPIEL 4
Schritt A:
15 g (38,5 mmol) 4-(8-Chlor-3-brom-5,6-dihydro-11H-benzo[5,6]-cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yliden)-1-piperidin-1-carbonsäureethylester und 150 ml konz. H₂SO₄ bei 5°C zusammengeben, dann 3,89 g (38,5 mmol) KNO₃ zusetzen und 4 h rühren. Die Mischung in 3 l Eis gießen und mit 50% NaOH (wässrig) basisch machen. Mit CH₂Cl₂ extrahieren, über MgSO₄ trocknen, dann filtrieren und im Vakuum zu einem Rückstand auf konzentrieren. Den Rückstand in Aceton umkristallisieren, wodurch 6,69 g des Produkts erhalten werden. ¹H-NMR (CDCl₃, 200 MHz): 8,5 (s, 1H); 7,75 (s, 1H); 7,6 (s, 1H); 7,35 (s, 1H); 4,15 (q, 2H); 3,8 (m, 2H); 3,5–3,1 (m, 4H); 3,0–2,8 (m, 2H); 2,6–2,2 (m,4H); 1,25 (t, 3H).
Schritt B:
6,69 g (13,1 mmol) des Produkts von Schritt A und 100 ml 85% EtOH/Wasser zusammengeben, 0,66 g (5,9 mmol) CaCl₂ und 6,56 g (117, 9 mmol) Fe zusetzen und die Mischung über Nacht unter Rückfluss erwärmen. Die heiße Reaktionsmischung durch Celite® filtrieren und den Filterkuchen mit heißem EtOH spülen. Das Filtrat im Vakuum aufkonzentrieren, wodurch 7,72 g des Produkts erhalten werden. Massenspektr.: MH⁺ = 478, 0.
Schritt C:
7,70 g des Produkts aus Schritt B und 35 ml HOAc zusammengeben, dann 45 ml einer Lösung von Br₂ in HOAc zugeben und die Mischung bei Raumtemperatur über Nacht rühren. 300 ml 1 N NaOH (wässrig), dann 75 ml 50% NaOH (wässrig) zusetzen und mit EtOAc extrahieren. Den Extrakt über MgSO₄ trocknen und im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren. Den Rückstand einer Chromatographie (Kieselgel, 20%–30% EtOAc/Hexan) unterziehen, wodurch 3,47 g des Produkts (zusammen mit weiteren 1,28 g von teilweise gereinigtem Produkt) erhalten werden.
Massenspektr.: MH⁺ = 555,9.
¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) : 8,5 (s, 1H); 7,5 (s, 1H); 7,15 (s, 1H); 4,5 (s, 2H); 4,15 (m, 3H); 3,8 (br s, 2H); 3,4–3,1 (m, 4H); 9–2,75 (m, 1H); 2,7–2,5 (m, 2H); 2,4–2,2 (m, 2H); 1,25 (m, 3H).
Schritt D:
0,557 g (5,4 mnol) tert.-Butylnitrit und 3 ml DMF zusammengeben und die Mischung bei auf 60°–70°C erwärmen. Langsam (tropfenweise) eine Mischung von 2,00 g (3,6 mmol) des Produkts aus Schritt C und 4 ml DMF zusetzen, dann die Mischung auf Raumtemperatur abkühlen. Weitere 0,64 ml tert.-Butylnitrit bei 40°C zusetzen und die Mischung erneut 0,5 h auf 60°–70°C erwärmen. Auf Raumtemperatur abkühlen und die Mischung in 150 ml Wasser gießen. Mit CH₂Cl₂ extrahieren, über MgSOq trocknen und im Vakuum zu einem Rückstand auf konzentrieren. Den Rückstand einer Chromatographie (Kieselgel, 10%–20% EtOAc/Hexan) unterziehen, wodurch 0,74 g des Produkts erhalten wird. Massenspektr.: MH⁺ = 541,0. ¹H-NMR (CDCl₃, 200 MHz): 8,52 (s, 1H); 7,5 (d, 2H); 7,2 (s, 1H); 4,15 (q, 2H); 3,9-3,7 (m, 2H) 3,5-3,1 (m,4H); 3,0–2,5 (m, 2H); 2,4–2,2 (m, 2H); 2,1–1,9 (m, 2H); 1,26 (t, 3H).
Schritt E:
0,70 g (1,4 mmol) des Produkts aus Schritt D und 8 ml konzentrierte HCl (wässrig) zusammengeben und die Mischung über Nacht unter Rückfluss erwärmen. 30 ml 1 N NaOH (wässrig), dann 5 ml 50% NaOH (wässrig) zusetzen und mit CH₂Cl₂ extrahieren. Den Extrakt über MgSO₄ trocknen und im Vakuum aufkonzentrieren, wodurch 0,59 g der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wird. Massenspektr.: M⁺ = 468,7. Schmp. = 123,9°,-124,2°C.
ERSTELLUNGSBEISPIEL 5

[racemisch wie auch (+) – und (-) -Isomere]
Schritt A:
Eine Lösung von 8,1 g der in der Überschrift angegebenen Verbindung-aus Herstellungsbeispiel 4 in Toluol herstellen und 17,3 ml einer 1 M Lösung von DIBAL in Toluol zusetzen. Die Mischung unter Rückfluss erwärmen und langsam (tropfenweise) weitere 21 ml von 1 M DIBAL/Toluol-Lösung über einen Zeitraum von 40 min zusetzen. Die Reaktionsmischung auf ungefähr 0°C abkühlen und 700 ml 1 M HC1 (wässrig) zusetzen. Die organische Phase abtrennen und verwerfen. Die wässrige Phase mit CH₂Cl₂ waschen, den Extrakt verwerfen, dann die wässrige Phase durch Zugeben von 50% NaOH (wässrig) basisch machen. Mit CH₂Cl₂ extrahieren, den Extrakt über MgSO₄ trocknen und im Vakuum aufkonzentrieren, wodurch 7,30 g der in der Überschrift angegebenen Verbindung, welche eine racemische Mischung von Enantiomeren ist, erhalten werden.
Schritt B - Trennung der Enantiomere:
Die in der Überschrift angegebene, racemische Verbindung aus Schritt A wird durch präparative chirale Chromatographie (Chiralpack AD, 5 cm × 50 cm-Säule, unter Verwendung von 20% iPrOH/Hexan + 0,2% Diethylamin) getrennt, wodurch das (+)-Isomer und das (-)-Isomer der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten werden.
Physikalisch-chemische Daten für das (+)-Isomer: Schmp. 148,8°C; Massenspektr. MH⁺ = 469; [a]= +65,6° (mg/2 ml McOH). Physikalisch-chemische Daten für das (-)-Isomer: Schmp. 112°C; Massenspektr. MH⁺ = 469; [a]= -65,2° ( mg/2 ml McOH).
HERSTELLUNGSBEISPIEL 6
[racemisch wie auch (+)- und (-)-Isomere]
Schritt A:
40,0 g (0,124 mol) des Ausgangsketons und 200 ml H₂SO₄ zusammengeben und auf 0°C abkühlen. Langsam 13,78 g (0,136 mol) KNO₃ über einen Zeitraum von 1,5 h zusetzen, dann auf Raumtemperatur erwärmen und über Nacht rühren. Die Reaktionsmischung unter Verwendung von im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Herstellungsbeispiel 1, Schritt A beschrieben aufarbeiten. Einer Chromatographie (Kieselgel, 20%, 30%,40%, 50% EtOAc/Hexan, dann 100 EtOAc) unterziehen, wodurch 28 g des 9-Nitro-Produkts zusammen mit einer geringeren Menge des 7-Nitro-Produkts und 19 g einer Mischung der 7-Nitro- und 9-Nitro-Verbindungen erhalten werden.
Schritt B:
28 g (76 2 mmol) des 9-Nitro-Produkts aus Schritt A,400 ml 85% EtOH/Wasser, 3,8 g (34,3 mmol) CaCl₂ und 38,28 g (0,685 mol) Fe unter Verwendung von im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Herstellungsbeispiel 1, Schritt C beschrieben umsetzen, wodurch 24 g des Produkts erhalten werden.
Schritt C:
13 g (38,5 mmol) des Produkts aus Schritt B, 140 ml HOAc zusammengeben und langsam eine Lösung von 2,95 ml (57,8 mmol) Br₂ in 10 ml HOAc über einen Zeitraum von 20 min zusetzen. Die Reaktionsmischung bei Raumtemperatur rühren, dann im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren. CH₂Cl₂ und Wasser zusetzen, dann mit 50% NaOH (wässrig) auf pH = 8–9 einstellen. Die organische Phase mit Wasser, dann Kochsalzlösung waschen und über Na₂SO₄ trocknen. Im Vakuum aufkonzentrieren, wodurch 11,3 g des Produkts erhalten werden.
Schritt D:
100 ml konzentrierte HCl (wässrig) auf 0°C abkühlen, dann 5,61 g (81,4 mmol) NaNO₂ zusetzen und 10 min rühren. Langsam (in Anteilen) 11,3 g (27,1 mmol) des Produkts von Schritt C zusetzen und die Mischung bei 0°–3°C 2,25 h rühren. Langsam (tropfenweise) 180 ml 50% H₃PO₂ (wässrig) zusetzen und die Mischung bei 0°C über Nacht stehenlassen. Langsam (tropfenweise) 150 ml 50% NaOH über 30 min zusetzen, um auf pH = 9 einzustellen, dann mit CH₂Cl₂ extrahieren. Den Extrakt mit Wasser, dann Kochsalzlösung waschen und über Na₂SO₄ trocknen. Im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren und einer Chromatographie (Kieselgel, 2% EtORc/CH₂Cl₂) unterziehen, wodurch 8,6 g Produkt erhalten werden.
Schritt E:
8,6 g (21,4 mmol) des Produkts aus Schritt D und 300 ml McOH zusammengeben und auf 0°–2°C abkühlen. 1,21 g (32,1 mmol) NaBH₄ zusetzen und bei ~0°C 1 h rühren. Weitere 0,121 g (3,21 mmol) NaBH₉ zusetzen, 2 h bei 0°C rühren, dann über Nacht bei 0°C stehen lassen. Im Vakuum zu einem Rückstand auf konzentrieren, dann den Rückstand zwischen CH₂Cl₂ und Wasser verteilen. Die organische Phase abtrennen und im Vakuum (50°C) aufkonzeritrieren, wodurch 8,2 g des Produkts erhalten werden.
Schritt F:
8,2 g (20,3 mmol) des Produkts aus Schritt E und 160 ml CH₂Cl₂ zusammengeben, auf 0°C abkühlen, dann langsam (tropfenweise) 14,8 ml (203 mmol) SOCl₂ über einen Zeitraum von 30 min zusetzen. Die Mischung auf Raumtemperatur erwärmen und 4,5 h rühren, dann im Vakuum zu einem Rückstand auf konzentrieren, CH₂Cl₂ zusetzen und mit 1 N NaOH (wässrig), dann Kochsalzlösung waschen und über Na₂SO₄ trocknen. Im Vakuum zu einem Rückstand auf konzentrieren, dann trockenes THF und 8,7 g (101 mmol) Piperazin zusetzen und bei Raumtemperatur über Nacht rühren. Im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren, CH₂Cl₂ zusetzen und mit 0,25 N NaOH (wässrig), Wasser, dann Kochsalzlösung waschen. Über Na₂SO₄ trocknen und im Vakuum aufkonzentrieren, wodurch 9,46 g Rohprodukt erhalten werden. Einer Chromatographie (Kieselgel, 5% McOH/CH₂Cl₂ + NH₃) unterziehen, wodurch 3,59 g der in der Überschrift angegebenen Verbindung als ein Racemat erhalten werden. ¹H-NMR (CDCl₃; 200 MHz): 8,43 (d, 1H),7,55 (d, 1H); 7,45 (d, 1H); 7,11 (d, 1H); 5,31 (s, 1H); 4,86–4,65 (m, 1H); 3,57–3,40 (m, 1H); 2,98–2,55 (m, 6H); 2,45–2,20 (m, 5H).
Schritt G – Trennung der Enantiomere:
Die in der Überschrift angegebene, racemische Verbindung aus Schritt F (5,7 g) wird einer Chromatographie wie für Herstellungsbeispiel 3, Schritt D, beschrieben unter Verwendung von 30% iPrOH/Hexan + 0,2% Diethylamin unterzogen, wodurch 2,88 g des R-(+)-Isomers und 2,77 g des S-(-)-Isomers der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten werden. Physikalisch-chemische Daten für das R-(+)-Isomer: Massenspektr. MH⁺ = 470; [a]= +12,1° (10,9 mg/2 ml McOH). Physikalisch-chemische Daten für das S-(-)-Isomer: Massenspektr. MH⁺ = 470; [a]= -13,2° (11,51 mg/2 ml McOH).
HERSTELLUNGSBEISPIEL 7
[racemisch wie auch (+)- und (-)-Isomere]
Schritt A:
13 g (33,3 mmol) der in der Überschrift angegebenen Verbindung aus Herstellungsbeispiel 1, Schritt D und 300 ml Toluol bei 20°C zusammengeben, dann 32, 5 ml (32, 5 mmol) einer 1 M Lösung von DIBAL in Toluol zusetzen. Die Mischung 1 h unter Rückfluss erwärmen, auf 20°C abkühlen, weitere 32,5 ml einer 1 M DIBAL-Lösung zusetzen und 1 h unter Rückfluss erwärmen. Die Mischung auf 20°C abkühlen und diese in eine Mischung von 400 g Eis, 500 ml EtOAc und 300 ml 10% NaOH (wässrig) gießen. Die wässrige Phase mit CH₂Cl₂ (3 × 200 ml) extrahieren, die organischen Phasen über MgSO₄ trocknen, dann im Vakuum zu einem Rückstand aufkonzentrieren. Einer Chromatographie (Kieselgel, 12% Me-OH/CH₂Cl₂ + 4% NH₄OH) unterziehen, wodurch 10,4 g der in der Überschrift angegebenen Verbindung als ein Racemat erhalten werden. Massenspektr.: MH⁺ = 469 (FAB). Partielles ¹H-NMR (CDCl₃,400 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,57 (s, 1H); 7,27 (d, 1H); 7,06 (d, 1H); 3,95 (d, 1H).
Schritt B – Trennung der Enantiomere:
Die in der Überschrift angegebene, racemische Verbindung aus Schritt A wird durch präparative chirale Chromatographie (Chiralpack AD, 5 cm × 50 cm-Säule, unter Verwendung von 5% iPrOH/Hexan + 0,2% Diethylamin) getrennt, wodurch das (+)-Isomer und das (-)-Isomer der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten werden.
Physikalisch-chemische Daten für das (+)-Isomer.: Massenspektr. MH⁺ = 470,9 (FAB); [a]= +43,5° (c=0,402, EtOH); partielles ¹H-NMR (CDCl₃,400 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,57 (s, 1H); 7,27 (d, 1H); 7,05 (d, 1H); 3,95 (d, 1H).
Physikalisch-chemische Daten für das (-)-Isomer: Massenspektr. MH⁺ = 470,9 (FAB); [a]= -41,8° (c=0,328, EtOH); partielles ¹H-NMR (CDCl₃,400 MHz) : 8,38 (s, 1H); 7,57 (s, 1H); 7,27 (d, 1H); 7,05 (d, 1H); 3,95 (d, 1H).
HERSTELLUNGSBEISPIEL 8
[racemisch wie auch R-(+)- und S-(-)-Isomere]
4-(8-Chlor-3-brom-5,6-dihydro-11H-benzo[5,6]cyclohepta[1;2-b]pyridin-11-yliden)-1-piperidin-1-carbonsäureethylester mittels im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie in Her-, stellungsbeispiel 3, Schritte A-D, beschrieben behandeln, wodurch als das Produkt von Schritt C die in der Überschrift angegebene, racemische Verbindung und als Produkte von Schritt D das R-(+)-Isomer und das S-(-)-Isomer der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten werden.
Physikalisch-chemische Daten für das R-(+)-Isomer: ¹³C-NMR (CDCl₃): 155,8 (C); 146,4 (CH); 140,5 (CH); 140,2 (C); 136,2 (C); 135,3 (C); 133,4 (C); 132,0 (CH); 129,9 (CH); 125,6 (CH); 119,3 (C); 79,1 (CH); 52,3 (CH₂); 52,3 (CH); 45,6 (CH₂); 45,6 (CH₂); 30,0 (CH₂); 29,8 (CH₂). [a]= +25,8° (8,46 mg/2 ml Me-OH).
Physikalisch-chemische Daten für das S-(-)-Isomer: ¹³C-NMR (CDCl₃): 155,9 (C); 146,4 (CH); 140,5 (CH); 140,2 (C); 136,2 (C); 135,3 (C); 133,3 (C); 132,0 (CH); 129,9 (CH); 125,5 (CH); 119,2 (C); 79,1 (CH); 52,5 (CH₂); 52,5 (CH); 45,7 (CH₂); 45,7 (CH₂); 30,0 (CH₂); 29,8 (CH₂). [a] = 27,9° (8, 90 mg/2 ml Me-OH) .
HERSTELLUNGSBEISPIEL 9
Schritt A:
9,90 g (18,9 mmol) des Produkts aus Herstellungsbeispiel 4, Schritt B, in 150 ml CH₂Cl₂ und 200 ml CH₃CN lösen und auf 60°C erwärmen. 2,77 g (20,8 mmol) N-Chlorsuccinimid zusetzen und 3 h unter Rückfluss erwärmen, wobei die Umsetzung durch DSC (30% EtOAc/H₂O) überwacht wird. Weitere 2,35 g (10,4 mmol) N-Chlorsuccinimid zusetzen und weitere 45 min unter Rückfluss kochen. Die Reaktionsmischung auf Raumtemperatur abkühlen und mit 1 N NaOH und CH₂Cl₂ extrahieren. Die CH₂Cl₂-Phase über MgSO₄ trocknen, filtrieren und durch Flash-Chromatographie (1200 ml normale Phase-Kieselgel unter Elution mit 30% EtOAc/H₂O) reinigen, wodurch 6,24 g des gewünschten Produkts erhalten werden. Schmp. 193–195,4°C.
Schritt B:
Zu 160 ml konz. HCl bei –10°C 2,07 g (30,1 mmol) NaNO₂ zusetzen und 10 min rühren. 5,18 g (10,1 mmol) des Produkts aus Schritt A zusetzen und die Reaktionsmischung 2 h von –10°C auf 0°C erwärmen. Die Reaktionsmischung auf –10°C abkühlen, 100 ml HP₃O₂ zusetzen und über Nacht stehenlassen. Um die Reaktionsmischung zu extrahieren, über zerstoßenes Eis gießen und mit 50% NaOH/CH₂Cl₂ basisch machen. Die organische Phase über MgSO₄ trocknen, filtrieren und bis zur Trockene auf konzentrieren. Durch Flash-Chromatographie (600 ml normale Phase-Kieselgel unter Elution mit 20% EtOAc/Hexan) reinigen, wodurch 3, 98 g Produkt erhalten werden. Massenspektr.: MH⁺ = 497,2.
Schritt C:
3,9 g des Produkts aus Schritt B in 100 ml konz. HCl lösen und über Nacht unter Rückfluss kochen. Die Mischung abkühlen, mit 50% (Gew./Gew.) NaOH basisch machen und die resultierende Mischung mit CH₂Cl₂ extrahieren. Die CH₂Cl₂-Phase über MgSO₄ trocknen, das Lösemittel verdampfen und unter Vakuum trocknen, wodurch 3,09 g des gewünschten Produkts erhalten werden. Massenspektr.: MH⁺ = 424,9.
Schritt D:
Unter Verwendung einer ähnlichen Vorgehensweise zu jener, die in Herstellungsbeispiel 5 beschrieben worden ist, 1,73 g des gewünschten Produkts, Schmp. 169,6–170,1°C; [a] = +48,2° (c = 1, McOH) erhalten.
HERSTELLUNGSBEISPIEL 10
Schritt A:
1,33 g des (+)-Enantiomers der Verbindung aus Herstellungsbeispiel 5, Schritt B, in wasserfreiem DMF mit 1,37 g 1-N-tert.-Butoxycarbonylpiperidinyl-4-essigsäure und mit DEC, HOBT und N-Methylmorpholin zusammengeben. Die Mischung bei Raumtemperatur über Nacht rühren. Im Vakuum aufkonzentrieren, um das DMF zu entfernen, und 50 ml gesättigte NaHCO₃-Lösung (wässrig) zusetzen. Mit CH₂Cl₂ (2 × 250 ml) extrahieren, die Extrakte mit 50 ml Kochsalzlösung waschen und über MgSO₄ trocknen. Im Vakuum zu einem Rückstand auf konzentrieren und einer Chromatographie (Kieselgel, 2% CH₃OH/CH₂Cl₂ + 10% NH₄OH) unterziehen, wodurch 2,78 g des Produkts erhalten werden. Massenspektr.: MH⁺ = 694, 0 (FAB); [α] = +34,1° (5,45 mg/2 ml, McOH). 2,78 g des Produkts aus Schritt A und CH₂Cl₂ zusammengeben, dann auf 0°C abkühlen und TFA zusetzen. Die Mischung 3 h bei 0°C rühren, dann 1 N NaOH (wässrig) zusetzen, gefolgt von 50% NaOH (wässrig). Mit CH₂Cl₂ extrahieren, über MgSO₄ trocknen und im Vakuum auf konzentrieren, wodurch 1,72 g des Produkts erhalten werden. Schmp. = 104,1°C; Massenspektr.: MH⁺ = 594; [α] = +53,4 ° (11,42 mg/2 ml, CH₃OH).
Schritt B:
Schritt 1: (+)-1,1-Dimethylethyl[2-[4-(3,10-dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11=y1)-1-piperidinyl]-2-oxoethyl]carbamat
Das Produkt von Herstellungsbeispiel 5, (+)-Isomer (0,4 g, 0,85 mmol) wurde in DMF (10 ml) gelöst und dann auf ~4°C abgekühlt. BOC-Glycin (0,19 g, 1,1 mmol) wurde dann zugesetzt, gefolgt von DEC (0,2 g, 1,1 mmol), HOBT (0,15 g, 1,1 mmol) und 4-Methylmorpholin (0,11 g, 0,12 μl, 1,1 mmol). Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt, dann wurde sie im Vakuum zu einem Rückstand auf konzentriert und zwischen CH₂Cl₂ und gesättigter NaHCO₃-Lösung (wässrig) verteilt. Die wässrige Phase wurde weiter mit CH₂Cl₂ extrahiert, die vereinigten CH₂Cl₂-Fraktionen wurden über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum aufkonzentriert, wodurch ein Rückstand erhalten wurde, der einer Chromatographie an einer Kieselgelsäule unter Verwendung von 5% (mit NH₃ gesättigtes CH₃OH)/CH₂Cl₂ als Elutionsmittel unterzogen wurde, wodurch die in der Überschrift angegebene Verbindung als weißer Feststoff erhalten wurde: 0, 52 g, 99% Ausbeute, Schmp. = 95–96°C, MH⁺ = 628.
Schritt 2:
Das Produkt aus Schritt 1 (2,65 g,4,2 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (20 ml) gelöst und auf 0°C abgekühlt. Dann wurde Trifluoressigsäure (10 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur 4 h gerührt, dann in Eis gegossen und der pH wurde unter Verwendung von 50% (Gew./Vol.) wässrigem NaOH auf 10 eingestellt. Die Reaktionsmischung wurde mit CH₂Cl₂ extra hiert, die vereinigten CH₂Cl₂-Extrakte wurden mit H₂O und Kochsalzlösung gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet. Die Lösemittel wurden durch Rotationsverdampfung entfernt, wodurch die in der Überschrift angegebene Verbindung als weißer Feststoff, erhalten wurde: 2,18 g, 98% Ausbeute, Schmp. = 150%–152°C, MH⁺ = 528.
HERSTELLUNGSBEISPIEL 12 (+)-1-(3-Amino-1-oxopropyl)-4-(3-dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)piperidin
Schritt 1: (+)-1,1-Dimethylethyl[3-[4-(3,10-dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-y1)-1-piperidinyl]-2-oxopropyl]carbamat
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie in Herstellungsbeispiel 11, Schritt 1 beschrieben gefolgt wurde mit der Ausnahme, dass BOC-β-Alanin anstelle von BOC-Glycin verwendet wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Ausbeute = 99%, MH⁺ = 642.
Schritt 2:
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde herge- stellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie in Herstellungsbeispiel 11, Schritt 2 beschrieben gefolgt wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Ausbeute = 100, Schmp. = 136–137°C, MH⁺ = 642.
HERSTELLUNGSBEISPIEL 13 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6, 11-dihydro-5Hbenzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-y1)-1-[4-amino]-1-oxobutyl]piperidin
Schritt 1: (+)-1,1-Dimethylethyl[4-[4-(3,10-dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-piperidinyl]-2-oxobutyl]carboxamid
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie in Herstellungsbeispiel 11, Schritt 1 beschrieben gefolgt wurde mit der Ausnahme, dass BOC-α-Aminobuttersäure anstelle von BOC-Glycin verwendet wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Ausbeute = 79%, Schmp. = 102–103°C, MH⁺ = 781.
Schritt 2:
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Herstellungsbeispiel 11, Schritt 2 beschrieben gefolgt wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Ausbeute = 94%, Schmp. = 114–115°C, MH⁺ = 681.
HERSTELLUNGSBEISPIEL 14 (+)-1-(Aminoacetyl)-4-[2-[4-(3,10-dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-piperidinyl]-2-oxoethyl]piperidin
Schritt 1: (+)-1,1-Dimethylethyl[2-[4-[2-[4-(3,10-dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-llyl)-1-piperidinyl]-2-oxoethyl]-1-piperidinyl]-2-oxoethyl]carbamat
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Herstellungsbeispiel 11, Schritt 1 beschrieben gefolgt wurde mit der Ausnahme, dass die Verbindung aus Herstellungsbeispiel 10 -(+-Isomer) anstelle der Verbindung aus Herstel lungsbeispiel 5 verwendet wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Ausbeute = 82%, Schmp. = 98–99°C, MH⁺ = 753.
Schritt 2: Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie in Herstellungsbeispiel 11, Schritt 2 beschrieben gefolgt wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Ausbeute = 89%, Schmp. = 130–131°C, MH⁺ = 653.
HERSTELLUNGSBEISPIEL 15 (+)-1-(3-Amino-1-oxopropyl)-4-[2-[4-(3,10-dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-y1)-1-piperidinyl]-2-oxoethyl]piperidin
Schritt 1 : (+) -1,1-Dimethylethyl[3-[4-[2-[4-(3,10-dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-llyl)-1-piperidinyl]-2-oxoethyl]-1-piperidinyl]-3-oxopropyl]carbamat
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Herstellungsbeispiel 12, Schritt 1 beschrieben gefolgt wurde mit der Ausnahme, dass die Verbindung aus Herstellüngs beispiel 10 anstelle der Verbindung aus Herstellungsbeispiel 5 verwendet wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Ausbeute = 84%, Schmp. = 87–88°C, MH⁺ = 767.
Schritt 2: Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Herstellungsbeispiel 11, Schritt 2 beschrieben gefolgt wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Ausbeute = 84%, Schmp. = 120–121°C, MH⁺ = 667.
HERSTELLUNGSBEISPIEL 16 (+)-1-(4=Amino-1-oxobutyl)-4-[2-[4-(3,10-dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-piperidinyl]-2-oxoethyl]piperidin
Schritt 1: (+)-1,1-Dimethylethyl[4-[4-[2-[4-(3,10-dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-lly1)-1-piperidinyl]-2-oxoethyl]-1-piperidinyl]-4-oxobutyl]carbamat
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Herstellungsbeispiel 13, Schritt 1 beschrieben gefolgt wurde mit der Ausnahme, dass die Verbindung aus Herstellungs beispiel 10 anstelle der Verbindung aus Herstellungsbeispiel 5 verwendet wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Ausbeute = 79%, Schmp. = 102–103°C, MH⁺ = 782.
Schritt 2: Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Herstellungsbeispiel 11, Schritt 2 beschrieben gefolgt wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Ausbeute = 94%, Schmp. = 114–115°C, MH⁺ = 681.
HERSTELLUNGSBEISPIEL 17
2 g (12,7 mmol) Methyl-2-oxo-1-pyrrolidinacetat in 20 ml EtOH lösen und dann 20 ml 1 M LiOH zusetzen. Die Reaktionsmischung bei Raumtemperatur 16 h rühren. Die Lösemittel abstreifen, das resultierende Material in Wasser lösen und den pH auf ~4 einstellen. Die Reaktionsmischung auf konzentrieren, wodurch das Produkt erhalten wird. Massenspektr.: MH⁺ = 144.
BEISPIEL 1 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-SH-benzo[5,6]cyclohepta-[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[(2=oxo-1-pyrrolidinyl]acetyl]piperidin
Die Verbindung aus Herstellungsbeispiel 15 (0, 15 g, 0, 32 mmol) wurde in DMF (5 ml) gelöst und dann auf ~4°C abgekühlt. Dann wurde die Verbindung aus Herstellungsbeispiel 17 (0,06 g; 0,4 mmol) zugesetzt, gefolgt von DEC (0, 08 g, 0,4 mmol) , HOBT (0, 6 g, 0,4 mmol) und 4-Methylmorpholin (0, 04 g, 50 μl, 0,4 mmol) und die Umsetzung wurde dann bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die Reaktionsmischung wurde im Vakuum zu einem Rückstand auf konzentriert, welcher zwischen CH₂Cl₂ und gesättigter NaHCO₃-Lösung (wässrig) verteilt wurde. Die wässrige Phase wurde mit CH₂Cl₂ weiter extrahiert, die vereinigten CH₂Cl₂-Fraktionen wurden über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum aufkonzentriert, wodurch ein Rückstand erhalten wurde, welcher einer Chromatographie an einer Kieselgelsäule unter Verwendung von 5% (mit NH₃ gesättigtes CH₃OH)/CH₂Cl₂ als Elutionsmittel unterzogen wurde, wodurch die in der Überschrift angegebene Verbindung als weißer Feststoff erhalten wurde: 0,11 g, 61% Ausbeute, Schmp. = 118–119°C, MH⁺ = 596.
BEISPIEL 2 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5Hbenzyl[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[1-oxo-3-(2-oxo-1-pyrrolidinyl)propyl]piperidi
Die in der Überschrift angegebene Verbindung aus Herstellungsbeispiel 12 (0,4 g, 0,74 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (10 ml) gelöst und -4-Brombutyrylchlorid (0,2 g, 0,13 ml, 1,11 mmol) und Et₃N (0,164 g, 0,23 ml, 1,62 mmol) wurden dann zugesetzt. Die Reak tionsmischung wurde bei Raumtemperatur 16 h gerührt. Die Reaktionsmischung würde zwischen gesätt. NaHCO₃-Lösung und CH₂Cl₂ verteilt. Die wässrige Phase wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert,die vereinigten CH₂Cl₂-Extrakte wurden über MgSO₄ getrocknet und das Lösemittel wurde durch Rotationsverdampfung entfernt. Das resultierende Produkt wurde in THF (10 ml) gelöst, auf -10°C abgekühlt, es wurde NaH (0,09 g,3,79 mmol) zugesetzt und die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, wobei man die Temperatur auf Raumtemperatur kommen ließ. Die Reaktionsmischung wurde dann zwischen gesätt. NaHCO₃-Lösung und EtOAc verteilt. Die organische Phase wurde über MgSOq getrocknet und durch Flash-Chromatographie an Kieselgel unter Elution mit 3% CH₃OH (gesätt. mit NH₃)/CH₂Cl₂ gereinigt, wodurch die in der Überschrift angegebene Verbindung als weißer Feststoff (0,07 g), Schmp. = 128–129°C, MH⁺ = 610; erhalten wurde.
BEISPIEL 3 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-SH-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[1-oxo-4-(2-oxo-1-pyrrolidinyl)butyl]piperidin
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wird ausgehend von dem Produkt aus Herstellungsbeispiel 13 hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Beispiel 2 beschrieben gefolgt wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wird, Schmp. = 127–128°C, MH = 624.
BEISPIEL 4 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[(2-oxo-1-piperidinyl)acetyl]piperidin
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wird ausgehend von dem Produkt aus Herstellungsbeispiel 11 hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Beispiel 2 beschrieben gefolgt wurde mit der Ausnahme, dass 4-Bromvalerylchlorid anstelle von 4-Brombutyrylchlorid verwendet wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde.
Ausbeute = 50%, Schmp. = 138–139°C, MH = 610.
BEISPIEL 5 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[1-oxo-3-(2-oxo-1-piperidinyl)propyl]piperidin
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wurde aus gehend von dem Produkt aus Herstellungsbeispiel 12 hergestellt, indem im wesentlichen=der gleichen-Vorgehensweise wie für Beispiel 2 – beschrieben gefolgt wurde mit der Ausnahme, dass 4-Bromvale rylchlorid anstelle von 4-Brombutyrylchlorid verwendet wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde.
Ausbeute = 50%, Schmp. = 138–139°C, MH = 610.
BEISPIEL 6 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[1-oxo-4-(2-oxo-1-piperidinyl)butyl]piperidin
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wird ausgehend von dem Produkt aus Herstellungsbeispiel 13 hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Beispiel 2 beschrieben gefolgt wurde mit der Ausnahme, dass 4-Bromvalerylchlorid anstelle von 4-Brombutyrylchlorid verwendet wurde, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde.
Ausbeute = 81%, Schmp. = 101–102°C, MH = 638.
BEISPIEL 7 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[(2-oxo-1-imidazolidinyl)acetyl]piperidin
Das Produkt aus Herstellungsbeispiel 11 (2,08 g, 3,9 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (20 ml) gelöst und es wurde 2-Bromethylisocyanat (0,8 g, 0,5 ml,7,9 mmol) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur 16 h gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zwischen gesätt. NaHCO₃-Lösung und CH₂Cl₂ verteilt. Die wässrige Phase wurde mit CH2Cl₂ extrahiert, die vereinigten CH₂Cl₂-Extrakte wurden über MgSO₄ getrocknet und das Lösemittel wurde durch Rotationsverdampfung entfernt. Das resultierende Produkt wurde in THF (20 ml) gelöst, auf –10°C abgekühlt, NaH (0,46 g, 19,5 mml) wurde zugesetzt und die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, wobei man die Temperatur auf Raumtemperatur kommen ließ. Die Reaktionsmischung wurde dann zwischen gesätt. NaHCO₃-Lösung und EtOAc verteilt. Die organische Phase wurde über MgSO₄ getrocknet und durch Flash-Chromatographie an Kieselgel unter Elution mit 5% CH₃OH (gesättigt mit NH₃)/CH₂Cl₂ gereinigt, wodurch die in der Überschrift angegebene Verbindung als ein weißer Feststoff erhalten wurde: 1,95 g, Ausbeute = 80%, Schmp. = 167–168°C, MH⁺ = 597.
BEISPIEL 8 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5Hbenzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[3-(2-oxoimidazolidinyl)-1-oxopropyl]piperidin
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wird ausgehend von dem Produkt aus Herstellungsbeispiel 12 hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie in Beispiel 7 beschrieben gefolgt wird, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wird.
Ausbeute = 45%, Schmp. = 202–203°C, MH⁺ = 611.
BEISPIEL 9 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[1-oxo-4-(2-oxo-1-imidazolidinyl)butyl]piperidin
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wird ausgehend von dem Produkt aus Herstellungsbeispiel 13 hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie in Beispiel 7 beschrieben gefolgt wird, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wird.
Ausbeute = 52%, Schmp. = 120–123°C, MH⁺ = 625.
BEISPIEL 10 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[(hexahydro-2-oxo-1-pyrimidinyl)acetyl]piperidin
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wird ausgehend von dem Produkt aus Herstellungsbeispiel 11 hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Beispiel 7 beschrieben gefolgt wird, wobei 2-Bromethylisocyanat durch 3-Chlorpropylisocyanat ersetzt wird, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wird.
Ausbeute = 56%, Schmp. = 155–156°C, MH⁺ = 611.
BEISPIEL 11 (+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[1-oxo-3-(hexahydro-2-oxo-1-pyrimidinyl)oxopropyl]piperidin
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wird ausgehend von dem Produkt aus Herstellungsbeispiel 12 hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Beispiel 10 beschrieben gefolgt wird, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wird.
Ausbeute = 40%, Schmp. = 135–136°C, MH⁺ = 625.
BEISPIEL 12 -(+)-4-(3,10-Dibrom-8-chlor-6,11-dihydro-5H- benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-1-[4-(hexahydro-2-oxo-1-pyrimidinyl)oxobutyl]piperidin
Die in der Überschrift angegebene Verbindung wird ausgehend von dem Produkt aus Herstellungsbeispiel 13 hergestellt, indem im wesentlichen der gleichen Vorgehensweise wie für Beispiel 10 beschrieben gefolgt wird, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wird. Ausbeute = 63%, Schmp. = 157–158°C, MH⁺ = 639.
Unter Verwendung der oben beschriebenen Ausgangsmaterialien und der geeigneten Vorgehensweise werden Verbindungen der folgenden Struktur hergestellt:
FPT-IC₅₀ (Inhibition der Farnesyl-Proteintransferase, in vitro-Enzymassay), COS-Zellen-IC₅₀(auf Zellen basierender Assay), GGPT-IC₅₀ (Inhibition der Geranylgeranyl-Proteintransferase, in vitro-Enzymassay), Cell-Mat-Assay und Antitumoraktivität (in vivo-Antitumor-Untersuchungen) werden durch die in WO 95/10516 beschriebenen Assayprozeduren bestimmt. Das Testprotokoll für den Assay, der verwendet wurde, um die Inhibition der Vermehrung von menschlichen Tumorzellen zu bestimmen, der Soft Agar(Weichagar)-Assay, ist, wie folgt:
Verankerungs-unabhängige Vermehrung ist ein Merkmal von tumorerzeugenden Zelllinien. Menschliche Tumorzellen werden in Kulturmedium, welches 0,3% Agarose und eine angegebene Konzentration eines Farnesyltransferase-Inhibitors enthält, suspendiert. Die Lösung wird mittels Überschichtung auf mit 0,6% Agarose verfestigtes Kulturmedium, welches die gleiche Konzentration des Farnesyltransferase-Inhibitors wie die obere Schicht enthält, aufgetragen. Nachdem die obere Schicht sich verfestigt hat, werden die Platten 10–16 Tage bei 37°C unter 5% CO₂ kultiviert, um das Auswachsen von Kolonien zu ermöglichen. Nach der Inkubation werden die Kolonien angefärbt, indem der Agar mit einer Lösung von MTT (3-[4,5-Dimethylthiazol-2-y1]2,5-diphenyltetrazoliumbromid, Thiazolylblau) (1 mg/m1 in PBS) überschichtet wird. Der Ras-Mutationsstatus wurde durch ELISA (Oncogene Science) bestimmt. Die Kolonien werden gezählt und die IC₅₀-Werte bestimmt.
Die für Verbindungen dieser Erfindung bestimmten FPT-IC₅₀-Werte lagen im Bereich von 0,0014 bis 0,085 μM.
Die IC₅₀-Werte für eine Inhibition der Ras-Prozessierung in COS-Zellen lagen für Verbindungen dieser Erfindung im Bereich von < 0,010 bis 0,16 μM.
Die Ergebnisse des Weichagar (Soft Agar)-Assays unter Verwendung der Tumorzelllinie NIH 3T3 mit aktiviertem H-ras lagen für Verbindungen der Erfindung im Bereich von 0,145 bis > 0,500.
Zur Herstellung von pharmazeutischen Zusammensetzungen aus den durch diese Erfindung beschriebenen Verbindungen können inerte, pharmazeutisch akzeptable Träger entweder fest oder flüssig sein. Zubereitungen in fester Form umfassen Pulver, Tabletten, dispergierbare Körner, Kapseln, Oblatenkapseln und Zäpfchen. Die Pulver und Tabletten können ungefähr 5 bis ungefähr 70 Prozent Wirkstoff enthalten. Geeignete feste Träger sind in diesem Fachgebiet bekannt, z. B. Magnesiumcarbonat, Magnesiumstearat, Talkum, Zucker, Lactose. Tabletten, Pulver, Oblatenkapseln und Kapseln können als feste Dosierungsformen, die für eine orale Verabreichung geeignet sind, verwendet werden.
Zur Herstellung von Zäpfchen wird zuerst ein niedrig schmelzendes Wachs, wie eine Mischung von Fettsäureglyceriden oder Kakaobutter, geschmolzen und der Wirkstoff wird darin homogen dispergiert, wie durch Rühren. Die geschmolzene homogene Mischung wird dann in Formen geeigneter Größe gegossen, man lässt sie abkühlen und sich dadurch verfestigen.
Zubereitungen in flüssiger Form umfassen Lösungen, Suspensionen und Emulsionen. Als Beispiel können wässrige oder Wasser-Propylenglycol-Lösungen für eine parenterale Injektion erwähnt werden.
Zubereitungen in flüssiger Form können auch Lösungen für eine intranasale Verabreichung umfassen.
Aerosol-Zubereitungen, welche für eine Inhalation geeignet sind, können Lösungen und Feststoffe in Pulverform, die in Kombination mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger, wie einem inerten verdichteten Gas vorliegen können, umfassen.
Auch umfasst werden Zubereitungen in fester Form, die dazu bestimmt sind, kurz vor einer Verwendung in Zubereitungen in flüssiger Form für eine entweder orale oder parenterale Verabreichung umgewandelt zu werden. Solche flüssigen Formen umfassen Lösungen, Suspensionen und Emulsionen.
Die Verbindungen der Erfindung können auch transdermal verabreichbar sein. Die transdermalen Zusammensetzungen können die Form von Cremes, Lotionen, Aerosolen und/oder Emulsionen annehmen und können in einem transdermalen Pflaster vom Matrixoder Reservoir-Typ, wie sie in diesem Fachgebiet für diesen Zweck üblich sind, enthalten sein.
Die Verbindung wird vorzugsweise oral verabreicht.
Die pharmazeutische Zubereitung liegt vorzugsweise in Einheitsdosierungsform vor. In einer solchen Form ist die Zubereitung in Einheitsdosen unterteilt, welche geeignete Mengen des Wirkstoffs, z. B. eine wirksame Menge, um den gewünschten Zweck zu erzielen, enthalten.
Die Wirkstoffmenge in einer Einheitsdosis der Zubereitung kann von ungefähr 0,1 mg bis 1000 mg, mehr bevorzugt von ungefähr 1 mg bis 300 mg gemäß der jeweiligen Anwendung variiert oder angepasst werden.
Die tatsächliche eingesetzte Dosierung kann abhängig von den Bedürfnissen des Patienten und der Schwere des behandelten Leidens variiert werden. Die Bestimmung der korrekten Dosierung für eine spezielle Situation liegt im Rahmen der Fachkenntnisse auf diesem Gebiet. Im allgemeinen wird eine Behandlung mit niedrigeren Dosen, die geringer als die optimale Dosis der Verbindung sind, begonnen. Danach wird die Dosierung um kleine Inkremente erhöht, bis die optimale Wirkung unter den Umständen erreicht wird. Aus Bequemlichkeitsgründen kann die gesamte tägliche Dosis aufteilt und in Anteilen während des Tags verabreicht werden, sofern gewünscht.
Die Verabreichungsmenge und -häufigkeit der Verbindungen der Erfindung und der pharmazeutisch akzeptablen Salze davon wird gemäß dem Urteil des behandelnden Arztes unter Berücksichti gung von solchen Faktoren, wie Alter, Zustand und Größe des Patienten wie auch der Schwere der zu behandelnden Symptome, reguliert werden. Ein typisches empfohlenes Dosierungsschema ist eine orale Verabreichung von 10 mg bis 2000 mg/Tag, vorzugsweise 10 bis 1000 mg/Tag in zwei bis vier aufgeteilten Dosen, um Tumorwachstum zu blockieren. Die Verbindungen sind nicht-toxisch, wenn sie innerhalb dieses Dosierungsbereichs verabreicht werden.
Das Folgende sind Beispiele von pharmazeutischen Dosierungsformen, die eine Verbindung der Erfindung enthalten. Der Umfang der Erfindung wird in seinem Aspekt pharmazeutischer Zusammensetzungen durch die bereitgestellten Beispiele nicht beschränkt.
Beispiele von pharmazeutischen Dosierungsformen BEISPIEL A Tabletten
Herstellungsverfahren
Positionen Nr. 1 und 2 in einem geeigneten Mischer 10–15 min mischen. Die Mischung mit Position Nr. 3 granulieren. Die feuchten Körner, sofern erforderlich, durch ein grobes Sieb (z. B. 1/4'', 0,63 cm) mahlen. Die feuchten Körner trocknen. Die getrocknete Körner, sofern erforderlich, sieben und mit Position Nr. 4 mischen und 10–15 min mischen. Position Nr. 5 zusetzen und 1–3 min mischen. Die Mischung zu geeigneter Größe und geeignetem Gewicht an einer geeigneten Tablettenherstellungsmaschine verdichten.
BEISPIEL B Kapseln
Herstellungsverfahren
Positionen Nr. 1, 2 und 3 in einem geeigneten Mischer 10–15 min mischen. Position Nr. 4 zusetzen und 1–3 min mischen. Die Mischung an einer geeigneten Verkapselungsmaschine in geeignete zweiteilige Hartgelatinekapseln füllen.
Obwohl die Erfindung in Verbindung mit den speziellen Ausführungsformen, die oben erläutert worden sind, beschrieben worden ist, werden viele Alternativen, Modifizierungen und Variationen davon für die Fachleute auf diesem Gebiet ersichtlich sein. Alle derartigen Alternativen, Modifizierungen und Variationen sollen unter den Geist und Umfang der Erfindung fallen.

Claims

Verbindung, repräsentiert durch die Strukturformel
oder ein N-Oxid davon, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz oder Solvat davon, wobei: R und R² unabhängig ausgewählt sind aus Halogen; R¹ und R³ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus H und Halogen, unter der Voraussetzung, dass mindestens eins von R¹ und R³ H ist; W N, CH oder C ist, wenn die Doppelbindung an der C-11 Position vorliegt; R⁴-(CH₂)_n-R⁵ oder
ist; R⁵
oder
ist; R⁶ R⁵ oder
ist; Z¹ und Z² unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus =O und =S; n 1 bis 6 ist; und n₁ 0 oder 1 ist.
Verbindüng nach Anspruch 1, bei der Z¹ = O ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 oder 2, bei der R⁴
ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 3, bei der R Brom und R² Chlor oder Brom ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 3, bei der R Brom ist, R² Chlor oder Brom ist, R¹ H ist, und R³ Chlor oder Brom ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 3, bei der R Brom ist, R² Chlor oder Brom ist, R³ H ist, und R¹ Chlor oder Brom ist.
Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus
Pharmazeutische Zusammensetzung zur Inhibierung des abnormalen Wachstums von Zellen, die eine wirksame Menge einer Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 oder 8 in Kombination mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger enthält.
Verwendung einer Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 oder 8 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Tumorzellen, die ein aktiviertes ras-Onkogen exprimieren.
Verwendung nach Anspruch 9, wobei die behandelten Zellen pankreatische Tumorzellen, Brustkrebszellen, Prostatakrebszellen, Lungenkrebszellen, myeloische Leukämietumorzellen, Schilddrüsenfollikeltumorzellen, myelodysplastische Tumorzellen, epidermale Karzinomtumorzellen, Blasenkarzinomtumorzellen oder Kolontumorzellen sind.
Verwendung einer Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1, 2, 3,4, 5, 6,7 oder 8 zur Herstellung eines Medikaments zur Inhibierung der Farnesyl-Proteintransferase.