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TECHNISCHES
GEBIET
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Die
vorliegende Erfindung betrifft eine Trockentestmessvorrichtung.
Insbesondere betrifft die vorliegende Erfindung eine Trockentestmessvorrichtung
zur Bestimmung einer in einer flüssigen
Probe zu messenden Substanz, indem die zu messende Substanz einer
Farbreaktion unterzogen wird und der Grad der so erhaltenen Färbung als
Reflektion gemessen wird, was eine rasche und sehr genaue Messung
ermöglicht.
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Unter
den Verfahren zum Bestimmen einer speziellen Komponente in einer
flüssigen
Probe, sind insbesondere Verfahren, bei denen eine Trockentestmessvorrichtung,
wie beispielsweise ein Testpapier, verwendet wird, derzeit für verschiedene
Zwecke in großem
Umfang eingesetzt worden, da ihre Handhabung vergleichsweise einfach
ist. Derartige Trockentestmessvorrichtungen weisen im Wesentlichen
eine Struktur auf, die eine Reagensschicht umfasst, die eine Matrix
aufweist, in die eine flüssige
Probe eindringen und entwickelt werden kann, die ein Reagens enthält, das
in der zuvor genannten flüssigen
Probe löslich
ist und mit der zu messenden Substanz unter Erzeugung eines Signals,
wie beispielsweise Farbe, Licht oder dergleichen reagiert, das nachgewiesen
und mittels Analysegeräten
bestimmt werden kann.
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In
der US-A-4430436 wird ein Analyseelement zur Analyse einer Flüssigkeit
beschrieben, das eine Zone untereinander verbundener Hohlraumstrukturen
aufweist, das auf einer Seite eines flüssigkeitsundurchlässigen,
lichtdurchlässigen
Trägers
positioniert ist und dadurch gekennzeichnet ist, dass die Zone untereinander
verbundener Hohlraumstrukturen eine Struktur gebundener Partikel
umfasst, die ein dreidimensionales Gitter ist, in der Flüssigkeit
nicht quellbar ist und untereinander verbundene Hohlräume mit
einem Hohlraumvolumen von 25 bis 85% zwischen den Partikeln aufweist,
um einen Transport der Flüssigkeit
bereit zu stellen und die Struktur gebundener Partikel aus hitzestabilen,
organischen, reaktive Gruppen aufweisende Polymerpartikeleinheiten
mit Partikelgrößen von
1 bis 350 Mikron gebildet ist, die miteinander durch die reflektierenden Gruppen
in den Kontaktflächen
direkt chemisch verbunden sind. Ein Analyseverfahren, bei dem das
Analyseelement des Immunoassays verwendet wird, ist ebenfalls beschrieben.
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In
der US-A-4839278 wird ein integrales, mehrschichtiges Analyseelement
für die
Messung der alkalischen Phosphataseaktivität beschrieben, welches eine
poröse,
sich ausbreitende Schicht umfasst, die ein in Antwort auf einen
Kontakt mit alkalischer Phosphatase sich selbst entwickelndes Substrat,
eine Pufferschicht, die eine diffusionsbeständige Base enthält und einen
Träger
in einer laminierten Form enthält.
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In
der
EP 0612302 wird
ein integrales, mehrschichtiges Analyseelement beschrieben, das
zur Bestimmung eines Analyten in einer flüssigen Probe, beispielsweise
einer Körperflüssigkeit,
eingesetzt wird, das umfasst: eine poröse, sich ausbreitende Schicht
aus Maschenware, die in der Lage ist, eine darauf aufgetragene flüssige Probe
in seitlicher Richtung zu verbreiten, um die flüssige Probe in die im folgenden
genannte Wasser absorbierende Schicht zu leiten, und zwar in einem
im Wesentlichen gleichförmigen
Volumen pro Oberflächeneinheit;
eine Wasser absorbierende Schicht, die ein hydrophiles Polymer enthält; und
einen lichtdurchlässigen, wasserundurchlässigen Träger. Die
Ausbreitungsschicht und/oder Wasser absorbierende Schicht können ein Reagens
enthalten, das an der Nachweisreaktion beteiligt ist.
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Bei
den zuvor beschriebenen Trockentestmessvorrichtungen wird bei Trockentestmessvorrichtungen, bei
denen eine in einer flüssigen
Probe zu messende Substanz durch die Farbreaktion zwischen der zu
messenden Substanz und dem Reagens bestimmt wird, die in der flüssigen Probe
zu messende Substanz üblicherweise
quantitativ bestimmt, indem eine Menge eines Färbemittels, das durch die Reaktion
der zu messenden Substanz mit dem Reagens gefärbt wird als Reflektion von
in die Reagensschicht einfallendem Licht gemessen wird. Um eine
exakte Messung durchzuführen,
enthalten derartige Trockentestmessvorrichtungen, die auf einer
Farbreaktion beruhen, in der Reagensschicht einen Reflektor, sowie
das Reagens für
die Färbung. Beispielsweise
weist die in der geprüften
japanischen Patentveröffentlichung
Nr. 7-21455 beschriebene
Trockentestmessvorrichtung eine Reagensschicht auf, die nicht nur
das für
die Messung zu verwendende Reagens enthält, sondern auch Licht reflektierende
wasserunlösliche
Partikel, z. B. weiße
Pigmente wie Titanoxid, Zinkoxid, Bariumsulfat, Magnesiumoxid oder
dergleichen als einen Reflektor. Wenn die Probe Vollblut ist, weisen diese
Pigmente manchmal die Funktion auf, rote Blutzellen, die Messfehler
verursachen, daran zu hindern, in die Reagensschicht einzudringen.
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Selbst
wenn jedoch der Reflektor, wie zuvor beschrieben, in der Reagensschicht
enthalten ist, muss, da die Reagensschicht im Wesentlichen eine
solche Struktur aufweisen muss, dass eine Probe ohne weiteres eindringen
und in die Schicht diffundieren kann, sie so dünn wie möglich und porös sein.
Wenn eine große Menge
weißer
Pigmente enthalten sind, um die Messgenauigkeit zu verbessern, wird
die Reagensschicht so dicht, dass eine flüssige Probe kaum in sie eindringt,
weil der Partikel durchmesser der weißen Pigmente äußerst klein
ist (0,1 bis 0,3 μm).
Zur Zeit der Messung verläuft
das Eindringen und die Entwicklung der flüssigen Probe demgemäß langsam
und es dauert lange, bis die durch die Reaktion mit dem Reagens
erzeugte Menge an Färbemittel
für eine
Messung ausreicht. Es liegt somit ein Problem in der Leistungsfähigkeit
vor.
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Auch
ist in den Trockentestmessvorrichtungen der Konzentrationszustand
der Reaktion ziemlich hoch, da das Reagens in der flüssigen Probe
aufgelöst
ist, um die Reaktion zu starten. Die Matrix, die die Reagensschicht
bildet, weist darüber
hinaus üblicherweise
so eine Struktur auf, dass sie ohne weiteres trocknet, da ihre Oberfläche, die
mit Luft in Kontakt kommt, groß ist.
Obwohl es nicht von großer
Bedeutung ist, wenn die Messung durch Eintauchen der Trockentestmessvorrichtung
in eine vergleichsweise große
Menge der flüssigen Probe
durchgeführt
wird, ist es in dem Fall, dass die Messung durch punktförmiges Auftragen
einer kleinen Menge der flüssigen
Probe durchgeführt
wird, dadurch nachteilig, dass die Messgenauigkeit möglicherweise vermindert
wird, indem sie durch die Trockenheit beeinträchtigt wird, wenn die Messzeit
verlängert
ist, wie zuvor beschrieben wurde.
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Wenn
die Menge des weißen
Pigments in dem Maße
reduziert wird, dass die Reagensschicht eine poröse Struktur aufweisen kann,
dringt die flüssige
Probe ein und wird ohne weiteres entwickelt und die für die Messung
erforderliche Zeit kann verkürzt
werden. Jedoch kann eine solche Reagensschicht, wenn sie getrocknet
ist, eine starke Weiße
behalten, die Effizienz der Lichtreflektion wird jedoch unzureichend,
wenn die flüssige
Probe die Reagensschicht durchdringt, d. h. zum Zeitpunkt der Messung.
Folglich wird die Messung durch Transmission, Absorption und Streuung
des Messlichts oder durch Lichteinfall von außerhalb der Testvorrichtung
und dergleichen leicht beeinträchtigt.
Das liegt daran, weil in dem Falle, in dem die Reagensschicht eine poröse Struktur
aufweist, eine darin enthaltene Luftschicht den Lichtbrechungsindex
erhöht
und gestreutes Reflektionslicht zunimmt, was die anscheinende Weiße erhöht, wenn
die Schicht getrocknet ist, wogegen wenn die Schicht befeuchtet
wird, in die Schicht aufgenommene Feuchtigkeit den Lichtbrechungsindex
senkt und das übertragene
Licht mehr zunimmt, als das gestreute Reflektionslicht, wodurch
die scheinbare Weiße
abnimmt.
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Insbesondere
wenn die flüssige
Probe eine Farbkomponente enthält,
z. B. Blutzellen oder dergleichen, verursacht die Komponente Absorption,
Streuung und dergleichen des Messlichts, selbst wenn es in die Reagensschicht
eingedrungen ist. Alternativ verursacht die Farbkomponente Absorption,
Streuung und dergleichen von Messlicht, das durch die Reagensschicht
hindurchgegangen ist, selbst wenn die Komponente außerhalb
der Reagensschicht vorliegt. Wenn die Probe Vollblut ist, gibt jede
Probe eine unterschiedliche Menge an Messlicht, das eintritt und
von der Reagensschicht auf Grund der Differenz im Hämatokritwert
oder dergleichen reflektiert wird. Wenn die Trockentestmessvorrichtung
einen Träger
oder dergleichen aufweist, wird Messlicht, das durch die Reagensschicht
hindurchgeht, von dem Träger
reflektiert und das reflektierte Licht tritt in die Reagensschicht
ein. Dieses reflektierte Licht wird ungünstigerweise zusammen mit dem
Licht erfasst, das von der Reagensschicht reflektiert wird. Dementsprechend
variiert die reflektierte Lichtmenge von dem Träger oder dergleichen je nach
beispielsweise dem Hämatokritwert
im Falle von Vollblutproben, was die gemessenen Werte beeinträchtigt.
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Um
eine rasche und sehr exakte Messung unter Verwendung einer Trockentestmessvorrichtung
zu realisieren, die eine in einer flüssigen Probe zu messende Substanz
bestimmt, indem die Substanz einer Farbreaktion unterzogen wird
und der Grad der Färbung
als Reflektion bestimmt wird, war es unter diesen Umständen erwünscht, ein
Verfahren zum Erreichen einer ausreichend messbaren Reflektion zu
entwickeln, entsprechend einem geringen Färbegrad bei Messung der Reflektion
oder ein Verfahren zum Vermindern des Einflusses von Absorption
und Streuung von Messlicht, was auf Feststoffe zurückgeführt wird,
die in der flüssigen Probe
enthalten sind und von externem Streulicht, das von der gegenüberliegenden
Seite der Oberfläche
der Lichtmessstelle eintritt, wobei eine solche Struktur aufrecht
erhalten wird, dass die flüssige
Probe in die Reagensschicht der Trockentestmessvorrichtung eindringt,
um eine messbare Menge Färbemittel
innerhalb eines kurzen Zeitraums zu erzeugen, nämlich, dass die Messzeit so
kurz ist, dass der Einfluss von Trockenheit verringert werden kann.
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Die
vorliegende Erfindung ist in Hinblick auf den zuvor genannten Punkt
gemacht worden und daher ist es ein Ziel der Erfindung, eine Trockentestmessvorrichtung
zur Bestimmung einer in einer flüssigen
Probe zu messenden Substanz bereit zu stellen, indem die Substanz
einer Farbreaktion unterzogen wird und der Grad der als Reflektion
erhaltenen Färbung
bestimmt wird, was eine kurze Messzeit ermöglicht und ausreichend messbare
Reflektion ergibt, entsprechend einem geringen Grad an Färbung bei
der Messung der Reflektion, um eine rasche und sehr exakte Messung
zu erreichen. Ein anderes Ziel der Erfindung ist es, eine Trockentestmessvorrichtung
zur Bestimmung einer in einer flüssigen
Probe zu messenden Substanz bereit zu stellen, indem die Substanz
der Farbreaktion unterzogen und der Färbegrad bestimmt wird, der
als Reflektion erhalten wird, was eine kurze Messzeit ermöglicht und
bei der Messung der Reflektion den Einfluss von Absorption und Streuung
von Messlicht vermindert, welche auf Feststoffe, die in der flüssigen Probe
enthalten sind und auf externes Streulicht, das von der gegenüberliegenden
Seite der Oberfläche
der Messlichtstelle eintritt, zurückgeführt wird, um eine rasche und
sehr exakte Messung zu erreichen.
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Als
ein Ergebnis intensiver Untersuchungen um die zuvor genannten Ziele
zu erreichen, haben die Erfinder gefunden, dass in einer Trockentestmessvorrichtung
zur Bestimmung einer in einer flüssigen
Probe zu messenden Substanz, wobei die Substanz einer Farbreaktion
unterzogen wird und der als Reflektion erhaltene Grad der Färbung bestimmt
wird, nicht nur eine rasche Penetration der flüssigen Probe in die Reagensschicht erreicht
werden kann, sondern auch das Eindringen roter Blutzellen in die
Reagensschicht verhindert werden kann, indem eine Reagensschicht
bereit gestellt wird, die ein Reagens, das ein Chromogen enthält, das
mit der zu messenden Substanz unter Farbentwicklung reagiert und
Polymerbeads umfasst, in die Licht reflektierende Partikel als eine
Komponente der Trockentestmessvorrichtung eingeschlossen sind.
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Darüber hinaus
wurde gefunden, dass in einer Trockentestmessvorrichtung zur Bestimmung
einer in einer flüssigen
Probe zu messenden Substanz, wobei die Substanz der Farbreaktion
unterzogen wird und der als Reflektion erhaltene Grad der Färbung bestimmt
wird, das Eindringen von Feststoffen, die in der flüssigen Probe
enthalten sind und der Einfall von externem Streulicht in die Reagensschicht
verhindert werden kann, wobei eine rasche Permeabilität der flüssigen Probe
zur Reagensschicht aufrecht erhalten wird, indem eine Reagensschicht
bereit gestellt wird, die ein Reagens umfasst, das ein Chromogen
enthält,
das mit der zu messenden Substanz unter Farbentwicklung reagiert
und eine Licht blockierende Schicht umfasst, die Licht blockierende
Partikel enthält
und die auf die Reagensschicht auflaminiert ist, als Komponente
der Trockentestmessvorrichtung. Auf diese Weise wurde die vorliegende
Erfindung ausgeführt.
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Gemäß der vorliegenden
Erfindung wird eine Trockentestmessvorrichtung bereit gestellt,
welche eine Reagensschicht umfasst, die ein Reagens umfasst, das
ein Chromogen enthält,
und eine Matrix umfasst, die das Reagens in Form einer Schicht zurückhält, um eine
in einer flüssigen
Probe zu messende Substanz durch Messen des Grades der Färbung des
Chromogens zu bestimmen, welches durch die Reaktion zwi schen der zu
messenden Substanz und dem Reagens als Reflektion des Lichts gemessen
wird, das in die Reagensschicht eingetreten ist, wobei die Reagensschicht
darüber
hinaus Polymerbeads umfasst, welche Licht reflektierende Partikel
mit einschließen,
und der Gehalt der Polymerbeads nicht mehr als etwa 30 Gew.-% des
Gesamtgewichts der Reagensschicht beträgt.
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In
die erfindungsgemäße Trockentestmessvorrichtung
sind in die Polymerbeads, die in der Reagensschicht enthalten sind,
Licht reflektierende Partikel eingeschlossen. Spezielle Beispiele
für Licht
reflektierende Partikel umfassen Titandioxid, Zinkoxid, Bariumsulfat,
Magnesiumoxid, Eisen-(III)-oxid, Eisen-(III)-hydroxid und dergleichen.
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Die
Polymerbeads, in die die zuvor genannten Licht reflektierenden Partikel
eingeschlossen sind, die in der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
verwendet werden, umfassen solche, die als Hauptkomponente eine
hoch molekulare Verbindung enthalten, wie beispielsweise: ein Polymer
oder Copolymer, das als eine Hauptkomponente Monomere aufweist,
die ausgewählt
sind aus der Gruppe bestehend aus Acrylsäure, Methacrylsäure, Maleinsäure, Ester
dieser Substanzen, Styrol und Alkylstyrol; Polyurethan; Polyharnstoff;
Polyethylen; Polypropylen; und Polyvinylchlorid und dergleichen.
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In
der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
weisen die in der Reagensschicht enthaltenen Polymerbeads vorzugsweise
eine Größe von etwa
1 bis 40 μm
als durchschnittlichen Partikeldurchmesser auf.
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In
der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
enthalten die Polymerbeads darüber
hinaus vorzugsweise Licht reflektierende Partikel in einer Menge
von etwa 10 bis 70% Gew./Vol., bezogen auf die Gesamtmenge an Polymerbeads.
Solche Polymerbeads sind in der Reagensschicht vorzugsweise in einer
Menge von etwa 5 bis 80 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der
Reagensschicht, enthalten.
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Die
erfindungsgemäße Trockentestmessvorrichtung
ist im Folgenden ausführlich
beschrieben.
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Zunächst werden
das Reagens und die Polymerbeads erläutert, die die Licht reflektierenden
Partikel mit einschließen,
welche beide in der Reagensschicht (der Schicht, in der die Matrix
eine reagenshaltige Zusammensetzung in Form einer Schicht enthält) der
erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
enthalten sind. Danach werden die sie enthaltende Reagensschicht
und die erfindungsgemäße Trockentestmessvorrichtung,
die die zuvor genannte Reagensschicht enthält, in dieser Reihenfolge erläutert.
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(1) Reagens
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Das
Reagens, das in der Reagensschicht der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
enthalten ist, umfasst ein Chromogen, das durch Reaktion mit der
in der flüssigen
Probe zu messenden Substanz eine Farbe entwickeln kann. Es kann
jedes Chromogen verwendet werden, so lange die in der flüssigen Probe zu
messende Substanz durch Färben
des Chromogens durch die Reaktion zwischen dem Reagens, das es enthält, und
der zu messenden Substanz nachgewiesen werden kann. Der Begriff „Färben", der hier verwendet wird,
bedeutet nicht nur Farbentwicklung sondern auch Farbänderung.
Darüber
hinaus schließt
die „Reaktion zwischen
der zu messenden Substanz und dem Reagens" den Fall mit ein, dass die zu messende
Substanz selbst ein Reaktant ist, sowie den Fall, dass es an der
Reaktion als ein Katalysator beteiligt ist.
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Das
Reagens, das das zuvor genannte Chromogen enthält, variiert je nach dem zu
messenden Substanztyp und wird in Abhängigkeit davon in geeigneter
Weise ausgewählt.
Diese Auswahl unterscheidet sich nicht besonders von derjenigen
für die
herkömmliche
Trockentestmessvorrichtung.
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Beispielsweise
wird die Trockentestmessvorrichtung vorzugsweise zum Messen einer
Substanz verwendet, die in einer Körperflüssigkeit, wie beispielsweise
Blut, Urin, Speichel und dergleichen durch die auf einer Oxidations-Reduktions-Reaktion
beruhenden Farbreaktion zu messen ist. In diesem Fall ist das vorzugsweise
zu verwendende Reagens dasjenige, das Oxidase, welche die zu messende
Substanz oxidiert, ein Chromogen und, falls erforderlich, Peroxidase
enthält.
Bei der Bestimmung der zu messenden Substanz durch die zuvor genannte
Oxidationsreaktion unter Verwendung von Oxidase wird ein Färbemittel
unter der Bedingung erzeugt, dass das zu oxidierende Chromogen durch
Wasserstoffperoxid, welches durch Oxidation der zu messenden Substanz
durch die Wirkung von Oxidase erzeugt wird direkt oxidiert wird,
oder dass das Chromogen durch die Wirkung von Peroxidase eine Oxidationskopplung
durchläuft,
und das so hergestellte Färbemittel
mittels Absorptimetrie oder Luminiszenz kolorimetrisch gemessen
wird, wodurch die zu messende Substanz bestimmt wird.
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Spezielle
Beispiele für
das in der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
verwendete Reagens schließen
eine Zusammensetzung mit ein, die Glucoseoxidase, Peroxidase, 4-Aminoantipyrin,
und MAOS (N-Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-dimethylanilin) oder DAOS (N-Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-dimethoxyanilin)
enthält,
wenn die zu messende Substanz Glucose ist, eine Zusammensetzung,
die Cholesterinoxidase, Peroxidase, 4-Aminoantipyrin, und MAOS oder
DAOS enthält,
wenn die zu messende Substanz Cholesterin ist, eine Zusammensetzung,
die Lactatdehydrogenase, NAD+, Diaphorase
und Tetrazoliumviolett enthält,
wenn die zu messende Substanz Milchsäure ist, und p-Nitrophenylphosphat,
wenn die zu messende Substanz Alkaliphosphatase ist.
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Die
erfindungsgemäß verwendeten
Reagenzien sind nicht auf die zuvor beschriebenen beschränkt, sondern
können
je nach der zu messenden Substanz ausgewählt werden. Wenn die Farbreaktion
enzymatisch durchgeführt
wird, umfassen Beispiele für
die Enzyme zusätzlich
zu den zuvor beschriebenen Enzymen Uricase, Grycerol-3-phosphatoxidase,
Cholinoxidase, Acyl-CoA-oxidase, Sarcosinoxidase, verschiedene Aminosäureoxidasen,
Bilirubinoxidase, Lactatoxidase, Lactoseoxidase, Pyruvatoxidase,
Galactoseoxidase, Glycerinoxidase und dergleichen.
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Beispiele
für das
Chromogen umfassen ein so genanntes Trinder's Reagens (Ann. Clin. Biochem. 6, 24,
1960), zu oxidierende Chromogene, wie o-Anindin, Benzidin, o-Tridin
oder Tetramethylbenzidin und dergleichen.
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Die
zuvor beschriebenen Enzyme können
sowohl die zu messende Substanz als auch das Reagens sein.
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(2) Polymerbeads, die
Licht reflektierende Partikel mit einschließen
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Die
Reagensschicht der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
umfasst Polymerbeads, die zusätzlich
zu dem zuvor beschriebenen Reagens die Licht reflektierenden Partikel
mit einschließen.
Die Polymerbeads weisen die Funktion auf, eine ausreichend messbare
Reflektion zu ergeben, entsprechend einem niederen Färbegrad
bei der Messung des Färbegrads,
der bezogen auf die Reflektion von reflektierendem Licht erhalten
wird, das in die Reagensschicht eingetreten ist, wenn die zu messende
Substanz in der flüssigen Probe
mit dem Reagens unter Farbentwicklung umgesetzt wird. Wenn die flüssige Probe
Farbkomponenten enthält,
wie Vollblut, bewirken die Polymerbeads auch, dass die Färbekomponenten
daran gehindert werden, in die Reagensschicht einzudringen oder
durch diese hindurch zu gehen und reduzieren den Einfluss des reflektierenden
Lichts an der Reagensschicht.
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Als
die Licht reflektierenden Partikel, die in den Polymerbeads enthalten
sind, die in der vorliegenden Erfindung verwendet werden, können beliebige
Partikel verwendet werden, solange sie ein solches Lichtreflektionsvermögen aufweisen,
das eine ausreichende Reflektion ergibt, entsprechend einem niedrigen
Färbegrad, wenn
sie in die Polymerbeads mit eingeschlossen sind, die in der Trockentestmessvorrichtung
gemäß dem ersten
Aspekt der vorliegenden Erfindung verwendet werden. Spezielle Beispiele
hierfür
umfassen weiße
Pigmente, wie Titandioxid, Zinkoxid, Bariumsulfat oder Magnesiumoxid,
Farbpigmente, wie Eisen-(III)-oxid (rot) oder Eisen-(III)-hydroxid
(rotbraun oder gelb) und dergleichen. Obwohl die Farbe dieser Licht
reflektierenden Partikel nicht speziell begrenzt ist, solange sie
Partikel sind, die das Licht der für die Messung benutzten Wellenlänge reflektieren,
werden weiße
Licht reflektierende Partikel in der vorliegenden Erfindung bevorzugt
verwendet.
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Als
die Polymerbeads, in die die zuvor beschriebenen Licht reflektierenden
Partikel mit eingeschlossen sind, können beliebige Polymerbeads
verwendet werden, solange sie Polymere sind, die zu Beads geformt
werden können
und durch Miteinschließen
der zuvor beschriebenen Licht reflektierenden Partikel eine ausreichende
Reflektion entsprechend einem niederen Färbegrad ergeben können, wenn
sie in der Trockentestmessvorrichtung gemäß dem ersten Aspekt der vorliegenden
Erfindung verwendet werden. Bevorzugte Beispiele hierfür umfassen
diejenigen, die als eine Hauptkomponente eine hochmolekulare Verbindung
enthalten, die vergleichsweise einfach in Form von Beads hergestellt
werden kann, wie beispielsweise: ein Polymer oder Copolymer, das
als eine Hauptkomponente hydrophobe Vinylmonomere aufweist, die
ausgewählt
sind aus der Gruppe bestehend aus Acrylsäure, Methacrylsäure, Maleinsäure, Ester
dieser Substanzen, Styrol, Alkylstyrol und dergleichen; Polyurethan;
Polyharnstoff; Polyethylen; Polypropylen; Polyvinylchlorid oder
dergleichen.
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In
der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
enthalten solche Polymerbeads die zuvor genannten Licht reflektierenden
Partikel in einer Menge von vorzugsweise etwa 10 bis 70 Gew./Vol.-%,
bevorzugter etwa 20 bis 50 Gew./Vol.-%, bezogen auf die Gesamtmenge
der Polymerbeads. Wenn die in der flüssigen Probe zu messende Substanz
der Farbreaktion mit dem Reagens unterzogen wird und der so erhaltene Färbegrad
mittels Absorptimetrie, Luminiszenz oder dergleichen kolorimetrisch
gemessen wird, kann eine ausreichende Reflektion entsprechend einem
nied rigen Färbegrad
erhalten werden, indem der Gehalt der Polymerbeads auf etwa 5 bis
80 Gew.-%, bevorzugter etwa 10 bis 30 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der
Reagensschicht in der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
eingestellt wird.
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Der
Partikeldurchmesser, der in der vorliegenden Erfindung verwendeten
Polymerbeads liegt im Bereich von vorzugsweise von etwa 1 bis 40 μm, bevorzugter
etwa 2 bis 30 μm,
am meisten bevorzugt etwa 3 bis 15 μm, bezogen auf einen durchschnittlichen
Partikeldurchmesser. Wenn der durchschnittliche Durchmesser der
Polymerbeads kleiner als 1 μm
ist, wird die sie enthaltende Reagensschicht gelegentlich so dicht,
dass die flüssige
Probe kaum in sie eindringt und die Messung lange Zeit dauert, weil
das Eindringen und die Entwicklung der flüssigen Probe langsam fortschreitet.
Wenn der durchschnittliche Partikeldurchmesser der Polymerbeads
größer als
40 μm ist,
können
sie färbende
Komponenten, wie Blutzellen, die die Messung des Grades der Färbung stören, nicht
vollständig
davon abhalten, in die Reagensschicht einzudringen.
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Die
Polymerbeads, in die die in der vorliegenden Erfindung verwendeten
Licht reflektierenden Partikel mit eingeschlossen sind, können durch
allgemein verwendete Verfahren hergestellt werden, beispielsweise das
Verfahren, das umfasst, dass man eine geeignete Menge der Licht
reflektierenden Partikel zu dem Rohmaterial für die Polymerbeads zugibt und
das so erhaltene Material unter der Bedingung polymerisiert, dass das
erhaltene Polymer in Form von Beads, die einen geeigneten Partikeldurchmesser
aufweisen, hergestellt wird. Die Polymerbeads, die die Licht reflektierenden
Partikel mit einschließen,
wie zuvor beschrieben wurde, sind auch im Handel erhältlich und
daher können
solche Produkte auch in der vorliegenden Erfindung verwendet werden.
Im Handel erhältliche
Polymerbeads, in die die Licht reflektierenden Partikel mit eingeschlossen sind,
sind beispielsweise Techpolymer, das von Sekisui Kaseihin Kogyo
Kabushiki Kaisha hergestellt wird und dergleichen.
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(3) Reagensschicht
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Die
Zusammensetzung, die das zuvor genannte Reagens enthält, wird
in der Matrix in Form einer Schicht unter Bildung der Reagensschicht
zurückgehalten.
Die Reagensschicht, die in der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
enthalten ist, enthält
und speichert das zuvor genannte Reagens, das in der Lage ist, die
zu messende Substanz durch Farbentwicklung durch die Reaktion mit
der zu messenden Substanz und Polymerbeads, in die die Licht reflektierenden
Partikel eingeschlossen sind, nachzuweisen.
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Das
Reagens kann in der Reagensschicht in einer ähnlichen Menge wie in der Reagensschicht
der herkömmlichen
Trockentestmessvorrichtung enthalten sein. Es kann eine Menge sein,
die für
die zu messende Substanz in der flüssigen Probe, die in der Trockentestmessvorrichtung
bei der Messung absorbiert ist, ausreichend und geeignet ist. Der
Gehalt der Polymerbeads, in die die Licht reflektierenden Partikel
in der Reagensschicht mit eingeschlossen sind, ist wie zuvor beschrieben.
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Zusätzlich zu
dem Reagens und den Licht reflektierende Partikel mit einschließenden Polymerbeads kann
die Reagensschicht der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
falls erforderlich einen Puffer, eine hydrophile, hochmolekulare
Substanz, ein oberflächenaktives
Mittel, einen Weichmacher, einen Stabilisator, ein Vorbehandlungsmittel
und dergleichen in einer geeigneten Menge enthalten.
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Beispiele
für den
Puffer umfassen Phosphatpuffer, Acetatpuffer, Boratpuffer, Trispuffer,
Good-Puffer, wie TES (N-Tris(hydroxymethyl)methyl-2-aminoethansulfonsäure), PIPES
(Piperidin-1,4-bis-(2-ethansulfonsäure)) und dergleichen. Beispiele
für die
hydrophile, hochmolekulare Substanz umfassen Hydroxypropylcellulose,
Methylcellulose, Natriumalginat, Polyvinylalkohol, Polyvinylpyrrolidon,
Gelatine, modifizierte Gelatine, Agar, Acrylamidpolymer, Agarose
und dergleichen. Es ist möglich,
zu diesen hydrophilen, hochmolekularen Substanzen ein Adhäsiv vom
Emulsionstyp zu geben, wie Propiofan (RTM) (BASF), das ein Copolymer
aus Vinylpropionat und Vinylacetat ist, Latexpartikel oder dergleichen.
Darüber
hinaus umfassen spezielle Beispiele für das oberflächenaktive
Mittel Triton X-100, Triton X-405, Tween-20, Tween-80, Brij-35 und
dergleichen. Als das Vorbehandlungsmittel kann Ascorbatoxidase und
dergleichen verwendet werden.
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Als
die Matrix, die dazu verwendet wird, das Reagens in der Form einer
Schicht, welche die Licht reflektierende Partikel mit einschließenden Polymerbeads
und die zuvor genannten Komponenten, die der Reagensschicht der
Trockentestmessvorrichtung gegebenenfalls zuzufügen sind, zu enthalten und
zu speichern, kann jede Matrix verwendet werden, die in der üblicherweise
verwendeten Trockentestmessvorrichtung eingesetzt wurde, und zwar
ohne jegliche Einschränkung.
Beispiele für
die Matrix umfassen Filterpapier, Baumwollpapier, Textilverbundstoffe,
die aus Glasfaser oder Glaswarenbahnen hergestellt sind, Asbestpapier,
Asbestwarenbahnen, textile Flächengebilde
oder Textilverbundstoffe, die aus synthetischen Fasern hergestellt
sind, wie Nylon, Polyester, Polystyrol und dergleichen. Wie zuvor
beschrieben wurde, kann, obwohl die hydrophile, hochmolekulare Substanz
zu der Reagensschicht zugegeben werden kann, sie auch ein Material
sein, das die Matrix selbst bildet. Wenn die Reagensschicht die
zuvor genannte hydrophile, hochmolekulare Substanz enthält, wird
demgemäß das zuvor
beschriebene Material, wie Filterpapier oder dergleichen, nicht
notwendigerweise verwendet. Wenn Filterpapier und ähnliches
Material oder die hydrophile, hochmolekulare Substanz alleine als
die Matrix verwendet wird, liegt ihre Dicke darüber hinaus im Bereich von vorzugsweise
etwa 5 bis 100 μm.
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Das
Reagens, die Polymerbeads, die die Licht reflektierenden Partikel
mit einschließen,
und die anderen Komponenten können
in der Matrix in der Form einer Schicht mittels des üblicherweise
verwendeten Verfahrens enthalten sein und zurückgehalten werden. Solche Verfahren
umfassen beispielsweise das Verfahren des direkten Eintauchens,
das umfasst, dass die in einer Flüssigkeit zu enthaltenden Komponenten
aufgelöst
oder dispergiert werden, die erhaltene Flüssigkeit auf ein Tablett gegeben
wird und die Matrix darin eingetaucht wird, das Verfahren, das umfasst,
dass ein Polymerfilm, wie Polyethylentelephthalat (im Folgenden
als „PET" bezeichnet) mit
der Flüssigkeit
beschichtet wird, die die zuvor genannten verschiedenen Komponenten enthält, welcher
leicht abgetrennt werden kann und wobei eine gleichmäßige Dicke
erhalten wird, die Matrix darauf gegeben wird, um sie die Flüssigkeit
absorbieren zu lassen und die Matrix anschließend getrocknet und von dem
Polymerfilm abgetrennt wird, das Verfahren, die Flüssigkeit,
die die zuvor genannten verschiedenen Komponenten enthält, unter
Verwendung eines Sprays oder dergleichen auf eine Matrix zu sprühen, und
das Verfahren, die Matrix mit einer Streichstange oder dergleichen
mit der Flüssigkeit
zu beschichten. Das Trocknen nach dem Eintauchen kann auf herkömmliche
Weise durchgeführt
werden. In der Reagensschicht der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
liegen die Trocknungstemperaturen vorzugsweise im Bereich von 20
bis 60°C.
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Wenn
die Matrix durch die zuvor genannte hydrophile, hochmolekulare Substanz
alleine gebildet wird, kann dies darüber hinaus beispielsweise durchgeführt werden
durch Auflösen
oder Dispergieren des Reagenses, der die Licht reflektierenden Partikel
mit einschließenden
Polymerbeads, der hydrophilen, hochmolekularen Substanz und anderer
beliebiger Komponenten, in einer Flüssigkeit, wie Wasser oder dergleichen,
Beschichten eines Polymerfilms, wie PET oder dergleichen mit der
erhaltenen Flüssigkeit,
wobei eine geeignete nasse Dicke erhalten wird, Trocknen derselben und
Abtrennen der Matrix von dem Polymerfilm. Wenn die Reagensschicht
auf dem Polymerfilm gebildet ist, kann der Polymerfilm behalten
werden, falls dies notwendig ist.
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(4) Trockentestmessvorrichtung
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Wie
zuvor beschrieben wurde, umfasst die erfindungsgemäße Trockentestmessvorrichtung
die Reagensschicht, in der das Reagens, das in der Lage ist, mit
der in der flüssigen
Probe zu messenden Substanz unter Farbentwicklung zu reagieren,
wodurch sie nachgewiesen wird, die Polymerbeads, in die die Licht
reflektierenden Partikel mit eingeschlossen sind, und verschiedene
beliebige Komponenten sind in der Matrix in der Form einer Schicht
zurückgehalten.
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In
der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
reagiert, während
die flüssige
Probe punktförmig
aufgetragen wird, eindringt und sich in der Reagensschicht entwickelt,
das in der Reagensschicht enthaltene Reagens mit der in der flüssigen Probe
zu messenden Substanz unter Bildung eines Färbemittels. Bei kolorimetrischer
Bestimmung des auf diese Weise erzeugten Grades der Färbung mittels
Absorptimetrie, Luminiszenz oder dergleichen, haben die die Licht
reflektierenden Partikel mit einschließenden Polymerbeads in der
Reagensschicht die Funktion, eine für die Messung ausreichende
Reflektion zu ergeben. Wenn die flüssige Probe Farbkomponenten,
wie Vollblut, enthält,
hindern die Polymerbeads die Farbkomponenten daran, in die Reagensschicht
einzudringen.
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Zusätzlich zu
der zuvor genannten Reagensschicht kann die erfindungsgemäße Trockentestmessvorrichtung,
falls notwendig, Komponenten enthalten, die in den herkömmlichen
Trockentestmessvorrichtungen enthalten sind, wie beispielsweise
ein Substrat zum Stützen
der Reagensschicht, eine Probenrückhalteschicht, die
die flüssige
Probe zurückhält, einen
Träger
um zu gewährleisten,
dass zum Zurückhalten
der Flüssigkeitsprobe
Raum vorhanden ist und dergleichen.
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Beispiele
für Substrate
zum Auflegen der zuvor genannten Reagensschicht umfassen einen Polymerfilm,
wie er bei der Herstellung der zuvor genannten Reagensschicht beschrieben
wird, vorzugsweise einen Polymerfilm, der in der Lage ist, Licht
durchzulassen, jedoch keine Flüssigkeit
durchzulassen, wie PET, Polypropylen oder dergleichen. Wenn ein
Substrat ein Polymerfilm ist, der Licht durchlässt, Flüssigkeit jedoch nicht, und
auf die Reagensschicht auflaminiert ist, ist es möglich, den
Grad der Färbung
zu bestimmen, indem von der Seite des Substrats Licht eingestrahlt
wird, ohne von der Oberfläche
der Reagensschicht die überschüssige flüssige Probe
zu entfernen, die von der Reagensschicht nicht absorbiert worden
ist, nachdem die flüssige Probe
auf die Oberfläche
der Reagensschicht punktförmig
aufgetragen wurde.
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Die
Polymerbeads, in die die Licht reflektierenden Partikel der zuvor
genannten Reagensschicht mit eingeschlossen sind, haben die Funktion,
ein Eindringen der Partikelkomponenten der flüssigen Probe zu verhindern,
wie beispielsweise Blutzellen, die in die Reagensschicht eindringen
können,
wobei die Empfindlichkeit für
die Messung des Grades der Färbung
vermindert wird. Wenn es möglich
ist, den Grad der Färbung
von der gegenüberliegenden
Seite der Seite zu messen, an der die flüssige Probe unter Verwendung
des zuvor genannten Substrats aufgetragen wird, kann die Messung
ohne den Einfluss des Färbemittels,
wie beispielsweise Blutzellen, exakter durchgeführt werden, da das Färbemittel
auf der Auftragsseite gehalten wird.
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Wenn
die Farbreaktion zwischen der in der flüssigen Probe zu messenden Substanz
und dem Reagens durch die Permeation von Gas, wie beispielsweise
Sauerstoff, beschleunigt wird, ist es bevorzugt, als ein Substrat
einen porösen
Film zu verwenden, der lichtdurchlässig, flüssigkeitsundurchlässig und
gasdurchlässig ist.
Das liegt daran, dass die Porosität des Substratfilms die Farbreaktion
beschleunigt und dadurch die Reaktionszeit verkürzt. Bezüglich der porösen Filme,
die lichtdurchlässig,
flüssigkeitsundurchlässig, gasdurchlässig sind,
wird Bezug genommen auf die geprüfte
japanische Patentveröffentlichung
Nr. 7-21455, in der solche Filme ausführlich beschrieben werden.
Darüber
hinaus sind derartige poröse
Filme im Handel erhältlich
und diese können
in der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
verwendet werden. Beispiele für
die im Handel erhältlichen
porösen
Filme, die die zuvor genannten Eigenschaften aufweisen, umfassen
Nuclepore (RTM) (Nuclepore), Cell Guard (RTM) (Hoechst Cellanese),
Cyclopore (RTM) (Whatman), und dergleichen.
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Als
die Probenrückhalteschicht
zum Zurückhalten
der zuvor beschriebenen flüssigen
Probe können diejenigen
verwendet werden, die die selbe Konstruktion aufweisen, als die
Probenrückhalteschicht
(die allgemein als die "Diffusionsschicht" oder die "Entwicklungsschicht" bezeichnet werden
kann), die in der herkömmlichen
Trockentestmessvorrichtung verwendet werden.
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In
der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
ist es möglich,
Raum zu schaffen, um die flüssige
Probe zurückzuhalten,
anstatt die zuvor genannte Probenrückhalteschicht anzuordnen.
Zu diesem Zweck kann ebenfalls ein Träger verwendet werden. Die Trockentestmessvorrichtung,
die den zuvor genannten Träger
aufweist, ist beispielsweise eine, die durch die Reagensschicht,
auf der das zuvor beschriebene Substrat auflaminiert sein kann und
dem Träger
zum Schaffen von Raum um die flüssige
Probe zurückzuhalten,
gebildet wird, wie die Schnittdarstellung von 1 zeigt.
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In 1 weist
ein Träger 1 in
seinem Inneren einen Kapillarraum 2 auf, um die flüssige Probe
zurückzuhalten
und drei Öffnungen,
die den Kapillarraum mit der Außenseite
des Trägers
verbinden, nämlich
eine Lichteinstrahlungsöffnung 3 zum
Messen des Grades der Färbung,
eine Einspritzöffnung
für die
flüssige
Probe 4 und eine Luftöffnung 5.
Eine Reagensschicht 6 wird so in den Kapillarraum des Trägers gegeben,
dass die Lichteinstrahlungsöffnung 3 abgedeckt
wird. Wenn das Substrat auf der Reagensschicht auflaminiert ist,
wird es so angeordnet, dass das Messlicht von der Seite des Substrats
eingestrahlt werden kann. Der Träger
in einer solchen Trockentestmessvorrichtung kann mittels eines Polymers
gebildet werden, das flüssigkeitsundurchlässig ist
und sich in der flüssigen
Probe nicht auflöst.
In der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
ist es bevorzugt, dem Träger
eine Licht blockierende Eigenschaft zu verleihen, beispielsweise
durch Schwärzen
des Trägers.
Der Träger,
der eine Licht blockierende Eigenschaft aufweist, ermöglicht es,
die Einflüsse
von Absorption und Streuung des Messlichts durch feste Materie in
der flüssigen
Probe, und von externem Streulicht, das von außerhalb des Trägers eingetreten
ist, zu vermindern.
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Obwohl
die erfindungsgemäße Trockentestmessvorrichtung
für jedes
Verfahren zum Messen der Substanz in einer flüssigen Probe verwendet werden
kann, die durch die Reaktion mit verschiedenen Reagenzien ein Färbemittel
erzeugen kann, kann es bevorzugt auf die Messung der Substanz angewendet
werden, die in Körperflüssigkeiten,
wie Blut, Urin, Speichel oder dergleichen enthalten sind und durch
die Farbreaktion zu messen ist, wobei eine Oxidations-Reduktions-Reaktion
verwendet wird, beispielsweise die Messung des Gehalts an Glucose
in Blut unter Verwendung des Reagenses, wie zuvor ausführlich beschrieben
worden ist.
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Wenn
die erfindungsgemäße Trockentestmessvorrichtung,
wie zuvor beschrieben, für
die Messung der in der flüssigen
Probe zu messenden Substanz verwendet wird, indem die Substanz der
Farbreaktion unterzogen und der Grad der Färbung als Reflektion bestimmt
wird, ist es möglich,
die Messzeit zu verkürzen
und entsprechend dem niedrigen Grad der Färbung bei der Messung der Reflektion
eine ausreichend messbare Reflektion zu erhalten. Es wird daher
eine rasche und sehr exakte Messung ermöglicht.
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In
den beigefügten
Zeichnungen:
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ist 1 eine
Schnittdarstellung, die ein Beispiel für die erfindungsgemäße Trockentestmessvorrichtung
zeigt;
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zeigt 2 eine
Veränderung
der bei 640 nm gemessenen Reflektion einer Probe 2 in Abhängigkeit von
der Zeit, die hergestellt wurde, indem Vollblut einer Glycolyse
unterworfen wurde und hierzu Lebensmittelfarbe blau Nr. 1 zugegeben
wurde, wobei die in Beispiel 1 und Vergleichsbeispiel 1 der vorliegenden
Erfindung erhaltenen Trockentestmessvorrichtungen verwendet wurden;
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zeigt 3 die
Veränderung
der bei 640 nm gemessenen Reflektion einer Vollblutprobe in Abhängigkeit
von der Zeit unter Verwendung der in Beispiel 1 und Vergleichsbeispiel
1 der vorliegenden Erfindung erhaltenen Trockentestmessvorrichtungen;
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BESCHREIBUNG
DER BEVORZUGTEN AUSFÜHRUNGSFORMEN
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Beispiele
der vorliegenden Erfindung werden im Folgenden aufgezeigt.
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Beispiel 1: Erfindungsgemäße Trockentestmessvorrichtung
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Herstellung der Trockentestmessvorrichtung
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Es
wurde jede Komponente gemischt, um eine Zusammensetzung wie in Tabelle
1 gezeigt zu erhalten, um die Beschichtungsflüssigkeit für die Reagensschicht herzustellen.
Cell Guard (RTM) (Hoechst Cellanese), das für die Matrix der Reagensschicht
verwendet wurde, wurde so auf eine Glasplatte aufgebracht, dass
sich keine Falten bildeten. Die zuvor genannte Beschichtungsflüssigkeit
wurde auf dem so erhaltenen Cell Guard (RTM) unter Verwendung einer
Messerstreichmaschine aufgetragen, um eine Dicke von 50 μm zu erhalten
und bei 25°C
und einer Feuchtigkeit von 15% 30 Minuten lang unter Bildung der
Reagensschicht getrocknet. Dann wurde die Reagensschicht mit Cell
Guard (RTM) von der Glasplatte abgezogen und auf Größen von
7 mm × 7
mm zugeschnitten.
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Die
erhaltene Reagensschicht mit Cell Guard (RTM), die eine Größe eines
Quadrats von 7 mm aufwies, wurde auf einem PET-Film befestigt, der
eine Größe von 30
mm × 7
mm mit einer Öffnung
mit einem Durchmesser von 4 mm (eine Einstrahlöffnung für das Messlicht) aufwies, so
dass die Seite des Cell Guard (RTM) dem PET-Film gegenüberliegen kann, um die Öffnung abzudecken.
Auf der Reagensschichtseite des PET-Films wurde mit einem thermoplastischen
Harz eine Abdeckung befestigt, um den Kapillarraum zwischen der
Abdeckung und dem PET-Film zu bilden. Mithin wurde ein Beispiel
für die
erfindungsgemäße Trockentestmessvorrichtung
hergestellt. Die hier verwendete Abdeckung wies die Flüssigprobenzufuhröffnung und
die Luftöffnung
auf (vgl. 1).
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Zum
Vergleich wurde die Trockentestmessvorrichtung von Vergleichsbeispiel
1 auf die selbe Weise, wie in Beispiel 1 hergestellt, mit der Ausnahme,
dass die Licht reflektierenden Partikel (Titandioxid) verwendet werden,
welche in den Polymerbeads (Techpolymer MBX-5/White) (RTM) nicht
enthalten waren, und zwar anstelle der Licht reflektierende Partikel
mit einschließenden
Polymerbeads, die in der Beschichtungsflüssigkeit für die Reagensschicht verwendet
wurden.
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In
der obigen Tabelle 1 ist Techpolymer MBX-5/White (RTM) (Sekisui
Kaseihin Kogyo) Polymerbeads aus echt kugelförmigem, quervernetztem Polymethylmethacrylat,
das eine durchschnittliche Partikelgröße von 5 μm aufweist, wobei jedes Bead
Titandioxid in einer Menge von 50 Gew./Vol.-% enthält.
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Evaluierung der erfindungsgemäßen Trockentestmessvorrichtung
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Die
in Beispiel 1 und Vergleichsbeispiel 1 erhaltenen Trockentestmessvorrichtungen
wurden auf Durchlässigkeit
und Reaktionsgeschwindigkeit geprüft.
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(1) Permeabilitätstest
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Nachdem
Vollblut einen Tag lang bei Raumtemperatur zur Glycolyse stehen
gelassen worden war, wurde Lebensmittelfarbe blau Nr. 1 in einer
beliebigen Menge dazu gegeben und der Hämatokritwert wurde auf 68%
eingestellt. Auf diese Weise wurde Probe I erhalten. 10 μl von Probe
I wurden durch die Flüssigprobenzufuhröffnung in
die Reagensschicht der in Beispiel 1 erhaltenen Trockentestmessvorrichtung
eingeführt. 5
Sekunden später
wurde Licht mit 640 nm von der Seite von Cell Guard durch die Messlichteinstrahlöffnung eingestrahlt
und die erhaltene Reflektion mittels eines Reflektiometers (Farbunterschiedmesser) über einen Zeitraum
von 125 Sekunden in 10-Sekunden-Intervallen gemessen. Der selbe
Test wurde für
die in Vergleichsbeispiel 1 erhaltene Trockentestmessvorrichtung
durchgeführt. 2 zeigt
die Ergebnisse der zeitabhängigen Veränderung
der Reflektion, welche für
Probe I gemessen wurde, wobei die Trockentestmessvorrichtungen, die
in Beispiel 1 und Vergleichsbeispiel 1 erhalten wurden, verwendet
wurden. In 2 stehen die Achse der Ordinate
bzw. die Achse der Abszisse für
Reflektion (%) bzw. Messzeit (Sek.).
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(2) Reaktionsgeschwindigkeitstest
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Vollblut
(Glucosekonzentration: 99 mg/dl), ergänzt mit einem Glycolyseinhibitor
(NaF) wurde so eingestellt, dass es einen Hämatokritwert von 68% aufwies,
und dienten als Probe Nr. II. 10 μl
der Probe II wurden in die Reagensschicht der in Beispiel 1 erhaltenen
Trockentestmessvorrichtung durch die Flüssigprobenzufuhröffnung eingeführt. 5 Sekunden
später
wurde Licht mit 640 nm von der Cell Guard (RTM)-Seite durch die Messlichteinstrahlöffnung eingestrahlt
und die erhaltene Reflektion wurde mittels eines Reflektiometers
(Farbdifferenzmesser) 125 Sekunden lang in 10-Sekunden-Intervallen gemessen. Der selbe
Test wurde für
die in Vergleichsbeispiel 1 erhaltene Trockentestmessvorrichtung
durchgeführt. 3 zeigt
die Ergebnisse der zeitabhängigen
Veränderung
der Reflektion, die für
Probe II gemessen wurden, wobei die in Beispiel 1 und Vergleichsbeispiel
1 erhaltenen Trockentestmessvorrichtungen verwendet wurden. In 3 steht
die Ordinatenachse bzw. die Achse der Abszisse für Reflektion (%) bzw. Messzeit
(Sek.).
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Wie
aus diesen Ergebnissen ersichtlich ist, durchdrang die Probenflüssigkeit
die Reagensschicht gut und die Reaktionsgeschwindigkeit der Reaktion
zwischen dem Reagens und der zu messenden Substanz war in der in
Beispiel 1 erhaltenen Trockentestmessvorrichtung hoch im Vergleich
zu der herkömmlichen
Trockentestmessvorrichtung (Vergleichsbeispiel 1), die Titandioxid
als ein reflektierendes Element enthielt.
