DE69727332T2 - Zubereitungen enthaltend Kollagen, Vitamin D3 und Kalzium zur Verstärkung des Knochens - Google Patents
Zubereitungen enthaltend Kollagen, Vitamin D3 und Kalzium zur Verstärkung des Knochens Download PDFInfo
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Description
- Gebiet der Erfindung
- Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf eine Medizin, ein Getränk, ein Nahrungsmittel und ein Futtermittel mit einer knochenstärkenden Wirkung. Die Medizin, das Getränk, das Nahrungsmittel oder das Futtermittel, enthaltend Collagen und/oder ein Abbauprodukt von Collagen, kombiniert mit Calcium und Vitamin D3, hat Wirkungen der Förderung der Knochenbildung, der Stärkung von Knochen, der Verhinderung und Behandlung von Knochenstoffwechselerkrankungen, wie z. B. Osteoporose, Knochenbruch, Knochenschmerz u. s. w.
- Hintergrund der Erfindung
- In Begleitung mit der Verlängerung der menschlichen Lebensspanne hat das Auftreten von Stoffwechselknochenerkrankungen, wie z. B. Osteoporose, Knochenbruch, Knochenschmerz etc., in letzter Zeit zugenommen. Im Knochengewebe treten stets Knochenbildung und Knochenresorption auf. Während in der Jugend das Gleichgewicht zwischen Knochenbildung und Knochenresorption gehalten wird, übersteigt die Knochenresorption die Knochenbildung aufgrund verschiedener Gründe bei zunehmendem Alter (Entkoppelung). Und wenn die Knochenresorption für eine lange Zeitdauer andauert, wird das Knochengewebe brüchig, was Stoffwechselknochenerkrankungen, wie z. B. Osteoperose, Knochenbruch, Knochenschmerz etc., verursacht, was erwartet wird, verhindert zu werden.
- Als übliche Verfahren zur Verhinderung oder Behandlung von Stoffwechselknochenerkrankungen durch Verhinderung des Entkoppelns werden als Beispiele genannt: (1) Calcium-ergänzte Diäten, (2) leichte Bewegung, (3) Sonnenbaden, (4) medizinale Therapie, etc. Für Calcium-ergänzte Diäten werden Calciumsalze, wie z. B. Calciumcarbonat, Calciumphosphat etc., und natürlich vorkommende Calcium-enthaltende Präparate, wie z. B. Rinderknochenpulver, Eierschale, Fischgrätenpulver etc., verwendet. Sie sind jedoch nicht notwendigerweise gut genug für eine orale Aufnahme. Als leichte Bewegung kann Jogging oder Walking empfohlen werden. Jedoch sind sie mühsam für eine Person, welche schwach wird, und ziemlich schwierig für eine unbewegliche bejahrte Person. Von Sonnenbaden wird angenommen, dass es gut für eine Ergänzung einer aktiven Form von Vitamin D3 ist, aber es ist nicht ausreichend. Als eine medizinale Therapie kann 1 α-Hydroxyvitamin D3 und/oder Calcitonin verwendet werden und von diesen ist bekannt, dass sie wirksam zur Behandlung von Osteoporose sind. Jedoch sind sie selber Arzneien und können nicht als Nahrungsquellen verwendet werden.
- Andererseits ist Collagen als eine Hauptproteinkomponente bekannt, die tierisches Bindegewebe bildet und nahezu 30% des gesamten Proteins im säugetierischen, insbesondere menschlichen, Körper darstellt. Dieses Collagen ist ein Protein der zellulären Matrix und kann als eine Substanz mit α-Ketten definiert werden, welche helikale Abschnitte sind, bestehend aus drei Polypeptidketten und einen multimolekularen Komplex bildend. Weiterhin bildet Collagen eine interzelluläre Matrix mit Glykoproteinen, wie z. B. Proteoglycan, Fibronectin, Laminin etc., und ist eine essenzielle Komponente, um ihre Funktion als zusammengesetztes Gewebe aus Zellen in vielzelligen biologischen Organismen zu zeigen.
- Die gegenwärtigen Erfinder haben geforscht, um eine Substanz mit einer knochenstärkenden Wirkung herauszufinden, welche für Nahrungsquellen geeignet ist. Schließlich haben wir herausgefunden, dass eine Collagen-enthaltende Fraktion, wie z. B. eine Hautproteinfraktion oder eine Knochenproteinfraktion, kombiniert mit Calcium und Vitamin D3, eine die Proliferation von Osteoblasten fördernde Wirkung hat. Weiterhin haben die gegenwärtigen Erfinder gefunden, dass die Abbauprodukte der Collagen-enthaltenden Fraktion, kombiniert mit Calcium und Vitamin D3, auch eine die Proliferation von Osteoblasten fördernde Wirkung haben, und haben die vorliegende Erfindung vollbracht.
- Zusammenfassung der Erfindung
- Entsprechend ist eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung, eine Medizin, ein Getränk, ein Nahrungsmittel und ein Futtermittel mit einer knochenstärkenden Wirkung bereitzustellen. Insbesondere soll die vorliegenden Erfindung eine Medizin, ein Getränk, ein Nahrungsmittel und ein Futtermittel mit einer knochenstärkenden Wirkung bereitstellen, enthaltend Collagen und/oder ein Abbauprodukt davon, kombiniert mit Calcium und Vitamin D3.
- Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, eine Medizin, ein Getränk, ein Nahrungsmittel und ein Futtermittel, kombiniert mit Collagen, einer Collagen-enthaltenden Fraktion oder einem Abbauprodukt derselben bereitzustellen, welches mit Calcium und Vitaminen kombiniert wird.
- Als eine in der vorliegenden Erfindung verwendete Collagen-enthaltende Fraktion kann als Beispiel genannt werden: eine Hautproteinfraktion, eine Knochenproteinfraktion, das Lyophilysierungsprodukt von pulverisierter und Hautcoriumschicht, das Lyophilysierungsprodukt von pulverisierten und entkalkten Knochen und eine Fraktion, welche durch Behandlung einer Hauptproteinfraktion oder einer Knochenproteinfraktion mit Säure oder Alkali hergestellt wird. Weiterhin kann ein Abbauprodukt verwendet werden, welches durch Hydrolyse mit einem proteolytischen Enzym hergestellt wird und ein Molekulargewicht von 2–150 kDa hat.
- Kurze Beschreibung der Figuren
-
1 zeigt eine die Collagensynthese in Osteoblasten fördernde Wirkung einer Collagen-enthaltenden Fraktion oder eines Abbauproduktes davon, erhalten in Testbeispiel 2. -
2 zeigt die Bruchkraft von Oberschenkelknochen von Ratten, denen oral eine Collagen-enthaltende Fraktion oder ein Abbauprodukt davon verabreicht wurde, erhalten in Testbeispiel 3. - Detaillierte Beschreibung der Erfindung und bevorzugte Ausführungsformen
- In der vorliegenden Erfindung wird Collagen, eine Collagen-enthaltende Fraktion und/oder ein Abbauprodukt davon mit Calcium und Vitamin D3 in einer Medizin, einem Getränk, einem Nahrungsmittel oder Futtermittel zur Verleihung einer knochenstärkenden Wirkung kombiniert. Diese Collagen-enthaltende Fraktion ist eine Proteinfraktion, die aus Haut oder Knochen erhalten wird. Wenn sie z. B. aus Haut hergestellt wird, kann Haut depiliert werden und die Coriumschicht wurde abgeschnitten. Das Gewebe kann mit einem Hochgeschwindigkeitsschneider in Stücke geschnitten werden, mit einem organischen Lösungsmittel entfettet werden und lyophilisiert werden, um eine Collagen-enthaltende Fraktion zu ergeben. Und wenn sie aus Knochen hergestellt wird, kann Knochen mit Säure etc. entkalkt werden, mit einem Hochgeschwindigkeitsschneider pulverisiert werden, wiederum mit Säure etc. entkalkt werden, und lyophilisiert werden, um eine Collagen-enthaltende Fraktion zu ergeben. Collagen kann weiter gereinigt werden, indem die Hautproteinfraktion oder die Knochenproteinfraktion, enthaltend Collagen, mit Säure oder Alkali behandelt wird. Die Behandlung mit Säure oder Alkali kann durchgeführt werden, indem diese Fraktionen in einer 5–30%igen, flüssigen Lösung von Säure, wie z. B. Chlorwasserstoffsäure oder Salpetersäure, oder Alkali, wie z. B. Natriumhydroxid oder Kaliumhydroxid, bei 20–50°C für 0,5–3 Stunden eingeweicht werden. Nach dem Einweichen sollten diese Fraktionen ausreichend mit Wasser gewaschen werden. Eine Heißwasserextraktion dieser Fraktionen kann durchgeführt werden, indem sie mit 70–80°C heißem Wasser behandelt werden.
- Weiterhin können diese Collagen-enthaltenden Fraktionen hydrolysiert werden durch ein proteolytisches Enzym, wie z. B. Pepsin, Trypsin, Chymotrypsin, etc., dessen Löslichkeit verstärkt und verwendet werden kann. Die Hydrolyse durch ein proteolytisches Enzym kann durchgeführt werden, indem die zuvor beschriebenen Fraktionen pulverisiert werden, in Wasser suspendiert werden, mit etwa 1% proteolytischem Enzym versetzt werden und bei 37°C für 0,5–6 Stunden gehalten werden. Nach der Hydrolyse wurde die Reaktionsmischung geheizt, um das proteolytische Enzym zu deaktivieren, und ultrafiltriert, gefolgt von der Sammlung des Filtrates. Die Hydrolyse kann vorzugsweise so ausgeführt werden, dass das Molekulargewicht des Abbauproduktes 2–200 kDa betragen wird.
- Zusätzlich werden Calcium und Vitamine mit diesen Collagen-enthaltenden Fraktionen kombiniert. Als eine Calciumquelle kann Calciumchlorid, Calciumcarbonat, Calciumlactat, Eierschale oder aus Milch stammendes Calcium verwendet werden. Als Kombinationsverhältnis von Calcium mit der Collagen-enthaltenden Fraktion werden 0,5–5,0 Gewichtsteile der Fraktion zu 1 Gewichtsteil Calcium bevorzugt sein. Als Vitamine können Vitamin D3 oder jegliche Substanz, die Vitamin D3 enthält, verwendet werden. Als ein Rohmaterial, das eine beträchtliche Menge Collagen enthält, kann frische Haut oder Knochen von Rindern, Schweinen, Hühnern, Schafen und Pferden als Beispiel genannt werden.
- In der vorliegenden Erfindung kann Collagen, eine Collagen-enthaltende Fraktion und/oder ein Abbauprodukt davon, kombiniert mit Calcium und Vitamin D3, mit einer Medizin, wie z. B. einer Tablette oder einem Pulver, und mit einem Getränk oder Nahrungsmittel, wie z. B. Milch, Yoghurt, Eiscreme, Milchgetränk, Kaffeegetränk, Saft, Gelee, Nudeln, Cracker, Brot oder Wurst, kombiniert werden, um eine knochenstärkende Wirkung zu verleihen. Weiterhin können in derselben Weise diese Fraktionen oder das Abbauprodukt mit einem Futtermittel kombiniert werden, um eine knochenstärkende Wirkung zu verleihen. Zusätzlich werden ein Calciummittel mit guter Aufnahmefähigkeit, wie z. B. Calciumchlorid, Calciumcarbonat, Calciumlactat, Eierschale oder aus Milch stammendes Calcium, etc., und Vitamin D3 so kombiniert, dass ihre knochenstärkende Wirkung verstärkt werden wird.
- In der vorliegenden Erfindung können, da orale Verabreichung von 10–2500 mg Collagen, Collagen-enthaltender Fraktion und/oder Abbauprodukt davon pro Tag in einem Erwachsenen eine knochenstärkende Wirkung zeigen kann, Collagen, eine Collagen-enthaltende Fraktion und/oder ein Abbauprodukt davon mit einer Medizin, einem Getränk oder einem Nahrungsmittel unter Berücksichtigung der obigen wirksamen Menge kombiniert werden. Eine akute Toxizität der Collagen-enthaltenden Fraktionen, wie z. B. einer Hautproteinfraktion oder einer Knochenproteinfraktion, wurde bei Ratten nicht beobachtet.
- Da eine Medizin, ein Getränk, ein Nahrungsmittel oder ein Futtermittel, kombiniert mit Collagen, einer Collagen-enthaltenden Fraktion und/oder einem Abbauprodukt davon, eine knochenstärkende Wirkung hat, wird die orale Verabreichung von diesen zur Prävention und/oder Verbesserung von Knochenstoffwechselerkrankungen, wie z. B. Osteoporose etc., geeignet sein.
- Zusätzlich kann eine Stärkung der Knochen von Vieh oder Geflügel auch durchgeführt werden, indem Collagen, eine Collagen-enthaltende Fraktion und/oder ein Abbauprodukt davon, kombiniert mit Calcium und Vitamin D3, mit Futtermittel kombiniert wird.
- Die Präparation von Collagen-enthaltenden Fraktionen und Abbauprodukten davon, und eine knochenstärkende Wirkung werden beschrieben werden, indem Vergleichsbeispiele und Testbeispiele unten als Beispiele genannt werden. Weiterhin wird die vorliegende Erfindung durch beispielhaft ausgeführte Beispiele beschrieben werden. Jedoch werden diese Beispiele nicht den Umfang der vorliegenden Erfindung einschränken.
- Vergleichsbeispiel 1
- Schweinehaut (10 kg) wurde depiliert und die Coriumschicht wurde genommen, mit einem Hochgeschwindigkeitsschneidegerät in kleine Stücke gehackt, mit einem Lösungsmittel aus Hexan : Ethanol (5 : 1) entfettet und lyophilisiert, um 1,354 g Collagen-enthaltene Hautproteinfraktion (Fraktion A) zu ergeben. Diese Fraktion enthielt 85% Protein und die Molekulargewichtsverteilung davon war 50–200 kDa. Die Proteinmenge wurde gemäß der Methode nach Lowry bestimmt (Lowry O. H., et al. (1951) J. Biol. Chem., 193, 265–275). Die Molekulargewichtsverteilung wurde durch SDS-Polyacrylamidelektrophorese bestimmt. Die unten beschriebenen Proteinmengen und Molekulargewichtsverteilungen wurden auch durch dieselbe Methode wie die obige bestimmt.
- Vergleichsbeispiel 2
- Die in Vergleichsbeispiel 1 erhaltene Collagen-enthaltende Hautproteinfraktion (1000 g) wurde so in Wasser suspendiert, dass ihre Konzentration 5% sein würde, gefolgt von Einweichen in einer flüssigen Lösung von Chlorwasserstoffsäure, so dass ihre Konzentration 10% sein würde, und ausreichend mit Wasser gewaschen. Dann wurde es wiederum in Wasser suspendiert, so dass seine Konzentration 10% sein würde und für 30 Minuten auf 90°C geheizt, gefolgt von Lyophilisierung, um 620 g Collagen-enthaltende Hautproteinfraktion (Fraktion B) zu ergeben. Diese Fraktion enthielt 93% Protein und die Molekulargewichtsverteilung davon war 50–200 kDa.
- Vergleichsbeispiel 3
- Die in Vergleichsbeispiel 2 erhaltene Collagen-enthaltende Hautproteinfraktion (300 g) wurde so suspendiert, dass ihre Konzentration 5% sein würde, und 1% Pancreatin (Sigma) wurde dazu zugegeben, welches für 2 Stunden bei 37°C gehalten wurde, und dann für 10 Minuten auf 80°C geheizt wurde, um das Pankreatin zu deaktivieren, gefolgt von Lyophilisierung, um 280 g Abbauprodukt der Collagen-enthaltenden Hautproteinfraktion (Fraktion C) zu ergeben. Diese Fraktion enthielt 95% Protein und die Molekulargewichtsverteilung war 2–50 kDa.
- Vergleichsbeispiel 4
- Rinderknochenpulver (10 kg) wurde so in Wasser suspendiert, dass seine Konzentration 10% sein würde, und durch Behandlung mit Chlorwasserstoffsäure entkalkt, so dass ihre Konzentration 10% sein würde. Dann wurde es mit einem Hochgeschwindigkeitsschneidegerät in Stücke gehackt und durch Einweichen in einer flüssigen Lösung von Chlorwasserstoffsäure entkalkt, so dass ihre Konzentration 10% sein würde. Weiterhin wurde es ausreichend mit Wasser gewaschen, lyophilisiert und mit einem Pulverisierungsgerät pulverisiert, um 2210 g Knochenproteinfraktion (Fraktion D) zu ergeben. Diese Fraktion enthielt 89% Protein und die Molekulargewichtsverteilung davon war 50–150 kDa.
- Vergleichsbeispiel 5
- Die in Vergleichsbeispiel 4 erhaltene Collagen-enthaltene Knochenproteinfraktion (1000 g) wurde in Wasser so suspendiert, dass ihre Konzentration 5% sein würde, gefolgt von Einweichen in Natriumhydroxydlösung, so dass ihre Konzentration 10% sein würde, und ausreichend mit Wasser gewaschen, um 540 g Collagen-enthaltene Knochenproteinfraktion (Fraktion E) zu ergeben. Diese Fraktion enthielt 92% Protein und die Molekulargewichtsverteilung war 50–150 kDa.
- Vergleichsbeispiel 6
- Die in Vergleichsbeispiel 5 erhaltene Collagen-enthaltene Knochenproteinfraktion (300 g) wurde so suspendiert, dass ihre Konzentration 5% sein würde, und 1% Pancreatin (Sigma) wurde dazu zugegeben, welches für 2 Stunden bei 37°C gehalten wurde, und dann für 10 Minuten auf 80°C aufgeheizt wurde, um das Pankreatin zu deaktivieren, gefolgt von Lyophilisierung, um 290 g Abbauprodukt der Collagen-enthaltenen Knochenproteinfraktion (Fraktion F) zu erhalten. Diese Fraktion enthielt 95% Protein und die Molekulargewichtsverteilung war 3–70 kDa.
- Testbeispiel 1
- Die in den Vergleichsbeispielen erhaltenen Fraktionen A–F wurden bezüglich einer die Knochenresorption inhibierender Wirkung untersucht. Röhrenknochen wurden aus 10–20 Tagen alten ICR-Mäusen entfernt und die gesamten Knochenmarkszellen, umfassend Osteoclasten, wurden erhalten, indem das Weichgewebe aus den Knochen entnommen wurde und die Knochen in α-modifizierten minimalessentiellen Medium (α-MEM), enthaltend 5% Rinderfötenserum, mechanisch zerhackt wurden. Etwa 2 × 106 dieser Zellen in α-MEM, enthaltend 5% Rinderfötenserum, wurden auf einem Stück Zahnbein plaziert. Zwei Stunden danach wurde eine Testprobe in α-MEM, enthaltend 5% Rinderfötenserum, hinzugegeben, so dass die Endkonzentration 10 μg/ml wäre, welches für 5 Tage kultiviert wurde und die knochenresorptive Wirkung der Osteoclasten wurde untersucht. Analyse der Knochenresorption wurde ausgeführt, indem Zellen von einem Stück Zahnbein nach Kultivierung davon entnommen wurden, sie mit Hematoxylinfarbstoff gefärbt wurden und die Anzahl an Knochenresorptionslöchern durch morphometrische Analyse mit PIALA-555 gezählt wurden. Als Kontrolle wurde eine Kultur ohne jegliche Zugabe verwendet und die knochenresorptive Wirkung wurde für jeden Fall berechnet, indem der Fall der nicht zugegebenen Gruppe als 100% definiert wurde. Die Ergebnisse wurden in Tabelle 1 wiedergegeben.
- Im Vergleich mit der knochenresorptiven Wirkung der nicht zugegebenen Gruppe wurde gefunden, dass jede Gruppe mit Zugabe der Fraktionen A–F, welche Hautproteinfraktion oder Knochenproteinfraktion waren und Collagen enthielten, erhalten in den Vergleichsbeispielen, eine Wirkung der Knochenresorptioninhibierung haben.
- Testbeispiel 2
- Die Wirkung der Förderung der Collagensynthese der in den Vergleichsbeispielen erhaltenen Fraktionen (A–F) wurde untersucht. Das heißt, 2 × 104 Zellen/ml einer osteoblastischen Zelllinie MC3T3-E1 in α-MEM, enthaltend 10% Rinderfötenserum (Flow Laboratories), wurde in jede Vertiefung einer 96-Vertiefungsplatte geimpft und für 24 Stunden bei 37°C in der Gegenwart von 5% CO2 kultiviert. Dann wurde das Medium zu α-MEM gewechselt, welches kein Rinderfötenserum enthielt, zu welchem die in den Referenzbeispielen erhaltenen Fraktionen A–F zugegeben wurden, so dass die Endkonzentration davon 10 μg/ml sein würde, und für 3 Tage bei 37°C kultiviert. Danach wurde die Menge des synthetisierten Collagens gemessen, indem Hydroxyprolin bestimmt wurde. Die Bestimmung von Hydroxyprolin wurde durchgeführt, indem eine Suspension von durchlöcherten kultivierten Zellen mit 6 N Chlorwasserstoffsäure hydrolysiert wurde, und unter Verwendung von p-Dimethylaminobenzaldehyd gemäß dem Verfahren nach Woessner (Woessner, J. F., Arch. Biochem. Biophys., vol. 93, pp 440–337, 1961) und die Ergebnisse wurden in
1 wiedergegeben. Die Menge an Hydroxyprolin in Kultur mit Zugabe der Fraktionen A–F, erhalten in den Vergleichsbeispielen, welche Hautproteinfraktion oder Knochenproteinfraktion waren und Collagen enthielten, war höher als die in Kultur ohne Zugabe dieser Fraktionen, was auf eine Stimulierung der Collagensynthese in Osteoblasten durch die Fraktionen hinwies. - Testbeispiel 3
- Die knochenstärkende Wirkung der Fraktionen B, C, E und F wurde in Tierexperimenten untersucht. Osteoporotische Modellratten wurden durch Ovariektomie 6 Wochen alter weiblicher SD-Ratten nach Aufzucht für eine Woche und Fütterung mit einer Niedrig-Calciumdiät für 2 Monate hergestellt und in den Tierexperimenten verwendet. Diese Ratten wurden in 5 Gruppen geteilt, die aus 7 Ratten bestanden, d. h., Kontrollgruppe, 1,5% Fraktion B verabreichte Gruppe (I Gruppe), 1,5% Fraktion C verabreichte Gruppe (II Gruppe), 1,5% Fraktion E verabreichte Gruppe (III Gruppe) und 1,5% Fraktion F verabreichte Gruppe (IV Gruppe) und für einen Monat mit Testdiäten gefüttert, bestehend aus den in Tabelle 2 wiedergegebenen Komponenten. Zusätzlich wurden 7 Scheinratten auch durch eine Scheinoperation hergestellt, wobei die Gebärmutter nicht entnommen wurde, und in den selben Experimenten verwendet. Als Calciumquelle der Mineralmischung in Tabelle 2 wurde Calciumcarbonat verwendet.
- Zusätzlich wurden Testdiäten, bestehend aus den in Tabelle 3 wiedergegebenen Komponenten, auch in einer anderen Experimentgruppe gefüttert, d. h. (1,5% Fraktion B + aus Milch stammendes Calcium + Vitamin D3 400 IU) verabreichte Gruppe (V Gruppe), 1,5% Fraktion E + aus Milch stammendes Calcium + Vitamin D3 400 IU) verabreichte Gruppe (VI Gruppe), 0,2% Fraktion B verabreichte Gruppe, 2,0% Fraktion B verabreichte Gruppe. Als Calciumquelle in der Mineralmischung wurde Calciumcarbonat in der VII Gruppe und VIII Gruppe verwendet und aus Milch stammendes Calcium (veröffentlichte ungeprüfte japanische Patentanmeldung Nr. 6-125740) wurde in der V Gruppe und VI Gruppe verwendet. In den Testdiäten in Tabelle 2 und Tabelle 3 wurde die Menge Kasein so eingestellt, dass der Stickstoffgehalt in allen Testdiäten dergleiche sein würde. Und in 100 g der Testdiät waren 400 mg Calcium und 300 mg Phosphat enthalten.
- Nach Verabreichung für 1 Monat wurden die Oberschenkelknochen der Ratten in jeder Testgruppe entnommen und die Bruchkraft davon wurde durch einen Bruchkraftanalysator (Rheometer, Max RX-1600, I-thechno) bestimmt, dessen Ergebnisse in
2 wiedergegeben wurden. - Wie in dieser Figur wiedergegeben, wurde gefunden, dass die Fraktionen B, C, E und F, welche Hautproteinfraktionen oder Knochenproteinfraktionen waren und Collagen umfassten, eine signifikante knochenstärkende Wirkung haben. Es wurde gefunden, dass die knochenstärkende Wirkung davon durch Kombination mit aus Milch stammenden Calcium mit guter Aufnahmefähigkeit und Vitamin D3 verstärkt wurde. Weiterhin, da es keine signifikante Differenz bezüglich der Knochenstärke gab, wenn das Verhältnis von Calcium zu Collagen 1.0 : 0.5–5.0 war, wurde gefunden, dass eine Kombination von 0.5–5.0 Gewichtsteilen der Collagen-enthaltenden Fraktion mit 1 Gewichtsteil Calcium wirksam war. Die vorliegende Erfindung wird durch beispielhafte Ausführung von Referenzbeispielen erklärt werden.
- Referenzbeispiel 1
- Eine Tablette mit knochenstärkender Wirkung wurde hergestellt, indem die in Tabelle 4 wiedergegebenen Rohmaterialien gemischt wurden und unter Druck formuliert wurden.
- Referenzbeispiel 2
- Ein Getränk mit knochenstärkender Wirkung wurde hergestellt, indem die in Tabelle 5 wiedergegebenen Rohmaterialien gemischt wurden, es in einen Behälter gepackt wurde und durch Erhitzen sterilisiert wurde.
- Referenzbeispiel 3
- Ein Cracker mit knochenstärkender Wirkung wurde hergestellt, indem die in Tabelle 6 wiedergegebenen Rohmaterialien gemischt wurden, ein Teig hergestellt wurde, formuliert und gebacken wurde.
- Referenzbeispiel 4
- Ein Gelee mit knochenstärkender Wirkung wurde hergestellt, indem die in Tabelle 7 wiedergegebenen Rohmaterialien gemischt wurden, es in einen Container gepackt und durch Erhitzen sterilisiert wurde.
- Referenzbeispiel 5
- Ein Schmelzkäse mit knochenstärkender Wirkung wurde hergestellt, indem die in Tabelle 8 wiedergegebenen Rohmaterialien gemischt wurden und bei 85°C emulsiert wurden.
- Referenzbeispiel 6
- Nach Sterilisieren für 20 Minuten bei 90°C wurden 12 Gew.-% reduzierte entfettete Milch mit Lactobacillus acidophilus und Streptococcus thermophilus geimpft, um 2 Arten Starterkultur zu ergeben, welche mit dergleichen Menge gemischt wurden. Ein Yoghurt mit knochenstärkender Wirkung wurde hergestellt, indem die in Tabelle 9 wiedergegebenen Rohmaterialien gemischt und fermentiert wurden.
- Referenzbeispiel 7
- Ein Milchpulver für Kinder mit knochenstärkender Wirkung wurde hergestellt, indem die in Tabelle 10 wiedergegebenen Rohmaterialien gemischt wurden.
- Referenzbeispiel 8
- Ein Hundefutter mit knochenstärkender Wirkung wurde hergestellt, indem die in Tabelle 11 wiedergegebenen Rohmaterialien gemischt wurden.
Claims (9)
- Medizin, Getränk, Nahrungsmittel oder Futtermittel, enthaltend Collagen und/oder ein Abbauprodukt von Collagen, das durch Hydrolyse mit einem proteolytischen Enzym erhalten wird, kombiniert mit Calcium und Vitamin D3.
- Medizin, Getränk, Nahrungsmittel oder Futtermittel nach Anspruch 1, wobei das Collagen in einer Hautproteinfraktion oder einer Knochenproteinfraktion umfasst ist.
- Medizin, Getränk, Nahrungsmittel oder Futtermittel nach Anspruch 2, wobei die Hautproteinfraktion ein Lyophylisierungsprodukt einer pulverisierten und entfetteten Hautcoriumschicht ist.
- Medizin, Getränk, Nahrungsmittel oder Futtermittel nach Anspruch 2, wobei die Knochenproteinfraktion ein Lyophylisierungsprodukt von pulverisierten und entkalkten Knochen ist.
- Medizin, Getränk, Nahrungsmittel oder Futtermittel nach Anspruch 2, wobei das Collagen in einer behandelten Hautproteinfraktion oder einer behandelten Knochenproteinfraktion umfasst ist, und die behandelte Hautproteinfraktion oder die behandelten Knochenproteinfraktion durch Einweichen in Säure oder alkalischer Lösung behandelt wird.
- Medizin, Getränk, Nahrungsmittel oder Futtermittel nach Anspruch 1, wobei das Abbauprodukt von Collagen ein Abbauprodukt einer Hautproteinfraktion oder einer Knochenproteinfraktion ist und wobei das Abbauprodukt ein Molekulargewicht von 2–150 kDa hat und durch Hydrolyse einer Hautproteinfraktion oder einer Knochenproteinfraktion mit einem proteolytischen Enzym erhalten wird.
- Medizin, Getränk, Nahrungsmittel oder Futtermittel nach Anspruch 1, wobei das Abbauprodukt von Collagen ein Abbauprodukt einer Hautproteinfraktion oder einer Knochenproteinfraktion ist und wobei das Abbauprodukt ein Molekulargewicht von 2–150 kDa hat und durch Hydrolyse einer Säure- oder Alkali-behandelten Hautproteinfrakion oder Knochenproteinfraktion mit einem proteolytischen Enzym erhalten wird.
- Medizin, Getränk, Nahrungsmittel oder Futtermittel nach Anspruch 1, wobei 0,5–5,0 Gewichtsteile Collagen, Hautproteinfraktion oder Knochenproteinfraktion oder Abbauprodukt einer Hautproteinfraktion oder einer Knochenproteinfraktion mit 1 Gewichtsteil Calcium kombiniert werden.
- Verwendung einer Kombination aus Collagen, Hautproteinfraktion, Knochenproteinfraktion und/oder Abbauprodukt einer Hautproteinfraktion oder einer Knochenproteinfraktion, erhalten durch Hydrolyse mit einem proteolytischen Enzym, jeweils Collagen enthaltend, mit Calcium und Vitamin D3 für die Herstellung eines therapeutischen Mittels in der Form einer Medizin, eines Getränks, eines Nahrungsmittels oder eines Futtermittels für die Stärkung von Knochen.
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