DE69200843T2 - Reinigungsmittel. - Google Patents

Reinigungsmittel.

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Description

  • Die vorliegende Erfindung betrifft ein neues Reinigungsprodukt, das im Zusammenhang mit der Körperhygiene o.ä. zur wirksamen Entfernung von Bakterien verwendet werden kann, insbesondere Bakterien E. coli, Typ-1 befimbert, wenn z.B. die Hände abgewischt werden.
  • Zum Abwischen, Reinigen usw. ist eine Vielzahl von Produkten bekannt, die entweder vom trockenen Typ, z.B. Gesichtstücher unterschiedlicher Arten, oder vom feuchten Typ sein können, sogenannte Feuchtwischtücher. Die letzteren werden in einem verschlossenen Umschlag geliefert, damit ein vorzeitiges Verdampfen verhindert wird. All diese bekannten Produkte sind für den gewünschten Zweck gut geeignet, es fehlt ihnen jedoch eine wirksame Entfernung von Bakterien von der betreffenden Stelle. Dies trifft besonders auf die Bakterien E. coli zu, wenn sie Typ-1 befimbert sind.
  • Der Zweck der bereits bekannten Reinigungsprodukte, die mit Bakterien in Wechselwirkung treten, z.B. Tücher zum Abwischen, besteht in der allgemeinen Inaktivierung oder Tötung dieser Bakterien. WO 8905093 beschreibt folglich ein Wischtuch, das Mittel zur Desinfektion freisetzt. WO 8701400 beschreibt ein Gewebe, das eine antimikrobielle Substanz enthält, die für die Fasern des wesentlich ist, damit die Diffusion der antimikrobiellen Substanz verhindert wird.
  • Ein Nachteil dieser bekannten Reinigungsprodukte besteht darin, daß sie Nebenwirkungen verursachen kdnnen, die im Allgemeinen nen schnell vorübergehen, jedoch auch ernsthafterer Art sein können.
  • In den letzten Jahren stellte die Bindung von Kohlenwasserstof fen an Bakterien ein allgemein untersuchtes Phänomen dar. Die spezifische Bindung von E. coli, Typ-1 bef imbert, an Mannose wurde u.a. von Feron et al. untersucht ("Carbohydrate binding sites of the mannose-specific fimbrial lectins of enterobacteria", Infection and Immunity, Bd. 43, 1984, S. 1088-90 und "Carbohydrate specificity of the surface lectins of E. coli, K. pneumonia, s. typhimurium", Carbohydrate Research, Bd. 120, 1983, S. 235 - 249).
  • DE 34 08 653 beschreibt ein Deodorant-Körperreinigungsmittel, das mindestens einen Kohlenwasserstoff, der aus Glucose, Mannose und Oligomeren davon ausgebildet ist, als Mittel zur Reduzierung einer geruchsverursachenden Bakterienpopulation auf dem Körper in einem anionischen ein Detergens enthaltenden Träger umfaßt.
  • Der Hauptzweck der vorliegenden Erfindung besteht darin, einen neuen Typ eines Reinigungsproduktes zu erreichen, der die wirksame Entfernung von Bakterien, insbesondere E. coli, Typ-1 befimbert, beim vorgesehenen Verwendungszweck ermöglicht, z.B. beim Abwischen der Hände oder im Zusammenhang mit der Körperhygiene usw.
  • Ein weiterer Zweck dieser Erfindung besteht in der Bereitstellung eines Reinigungsproduktes der gedachten Art, das eine wirksame Komponente enthält, die mit jenen Bakterien in Wechselwirkung tritt, die entfernt werden sollen, und das somit einen Rezeptor für diese Bakterien darstellen soll.
  • Ein weiterer Zweck dieser Erfindung besteht in der Bereitstellung eines Reinigungsproduktes dieser Art, wobei die wirksame Komponente durch eine Kohlenwasserstoffstruktur dargestellt wird.
  • Im Zusammenhang mit Forschungs- und Versuchsarbeiten zeigte sich somit überraschend, daß bei der Bindung eines Mannosederivats, insbesondere eines Mannosids, an die Matrix des Reinigungsproduktes eine wirksame Entfernung der in Frage kommenden Bakterien von der Reinigungsstelle erreicht wird.
  • Es ist besonders bevorzugt, als Mannosederivat p-Aminophenyl-α-D-mannopyranosid zu verwenden.
  • Die Bindung an die Matrix kann willkürlich stattfinden und kann in einer nichtspezifischen Haftung an der Matrix des Reinigungsproduktes bestehen. Diese Haftung kann erreicht werden, wenn die Matrix einfach in eine Lösung getaucht wird, die die wirksame Komponente enthält, die dann in das Material aufgesaugt wird und nach dem Trocknen des Materials dort verbleibt.
  • Es ist jedoch besonders bevorzugt, das Mannopyranosid durch seine p-Aminogruppe spezifischer an die Matrix des Produktes zu binden. Diese Bindung ist vorzugsweise eine kovalente Bindung, entweder direkt an die p-Aminogruppe des Mannosids oder indirekt über irgendeine Linker-Art, wie es auf diesem Fachgebiet allgemein bekannt ist.
  • Ein weiterer Weg der Bindung dem wirksamen Komponente an das Reinigungsprodukt besteht nach der vorliegenden Erfindung in deren Integration durch Copolymerisation; es besteht im letztgenannten Fall geeigneterweise aus einem Verbundmaterial, das z.B. Cellulose und/oder regenerierte Cellulose und ein synthetisches Copolymer umfaßt, in dem die Kohlenwasserstoffstruktur enthalten ist. Dieses Copolyiner kann mit einem Mannosederivat und einem Amid als Ausgangsmaterialien aufgebaut werden. Das Copolymer kann insbesondere die Formel aufweisen:
  • worin R2 die Formel aufweist:
  • R³ H oder CH&sub3; ist;
  • x eine ganze Zahl von 0 bis etwa 20 ist; und
  • m derart ist, daß das Molekulargewicht des Copolymers etwa 5 bis etwa 2000 kDa beträgt.
  • Ein besonders bevorzugtes Mannosederivat zur Verwendung bei dieser Copolymerisation weist die Formel auf:
  • worin R² und R³ die obengenannte Bedeutung haben.
  • Bezüglich weiterer Details für das Verfahren, das diese Copolymerisation betrifft, wird auf die schwedische Patentanmeldung 463314 Bezug genommen, deren Beschreibung hier als Bezug aufgenommen wird.
  • Wie es bereits vorgeschlagen wurde, kann das erfindungsgemäße Reinigungsprodukt in Form einer Serviette oder eines Rollenproduktes, z.B. Toilettenpapier, vorliegen, es kann jedoch auch aus einem sogenannten Feuchtwischtuch bestehen, das dann geeignet in einem verschlossenen Umschlag enthalten ist.
  • Die vorliegende Erfindung wird nachfolgend durch konkrete Beispiele weiter erläutert, die jedoch nicht als den Schutzumfang dieser Erfindung begrenzend interpretiert werden sollen.
    • BEISPIEL 1
  • a) Kopplung von Mannosid an Fractogel
  • Für die Kopplungsreaktion wurden Aldehydo-Fractogel TSK HV 65(F) (100g) im feuchten filtrierten Zustand (0,1 m KH&sub2;PO&sub4;, mit NaOH oder HCl auf pH = 7 eingestellt), 10 uMol p-Aminophenyl-α-D-mannopyranosid (A 1394, Sigma), 630 mg NaCNBH&sub3; (10 uMol) und 250 mg NaBH&sub4; als Ausgangsmaterialien verwendet.
  • Das Fractogel wird gründlich entwässert und in einen Saugkolben gegeben, und 0,1 m Phosphatpuffer, pH = 7 (400 ml), das Mannopyranosid und das Natriumcyanoborhydrid wurden zugegeben. Der Kolben wird auf einen Schütteltisch gestellt, und durch das Anschalten des Schütteltischs wird eine Suspension erreicht. Die Reaktion kann 4 Tage lang bei Raumtemperatur andauern.
  • Überschusslge Formylgruppen werden anschließend durch sorgfältige Zugabe von Natriuiborhydrid zerstört, und der Inhalt des Kolbens wird dann eine weitere Stunde lang geschüttelt. Das Gel wird abfiltriert und gründlich mit Wasser gewaschen. Dann wird das Gel eine weitere Stunde in reinem Wasser geschüttelt, ehe es schließlich abfiltriert wird. Das hergestellte Gel wird bis zum Versuch, bei dem E. coli daran gebunden wird, in einer 25%igen Ethanollösung aufbewahrt.
  • b) Binden von E. coli an mit Mannose substituiertes Fractogel
  • 50 ul E. coli KSKP 373, 382 bzw. 395, die mit radioaktivem Jod markiert worden waren, wurden zu 1,5 ml mit Phosphat gepufferter KochBalzlösung (PBS) gegeben. Zu 0,2 ml jeder Bakteriensuspension wurden 0,2 ml substituiertes bzw. unsubstituiertes Fractogel gegeben. Die Suspensionen ließ man 30 min lang auf einem Schütteltisch inkubieren und sie wurden anschließend 10 min lang bei 500 U/min zentrifugiert. Der Überstand wird abdekantiert, und die Radioaktivität des Fractogels wird vor dem Waschen, nach dem Waschen mit PBS und nach zwei Waschungen mit PBS gemessen. Beim vorliegenden Versuch sind die Stämme von E. coli KSKP 373 und 382 Typ-1 befimbert, während KSKP 395 die Fimbrien vom Typ-1 fehlen.
    • ERGEBNISSE:
  • Die Ergebnisse dieser Versuche sind in der folgenden Tabelle I gezeigt. TABELLE I Stamm E,coli vor dem Waschen nach der 1. Wäsche Kontrollgel Substituiertes Gel
  • Wie es aus dieser Tabelle ersichtlich ist, führt die Substitution mit Mannose zu einer beträchtlich verbesserten Haftung der Bakterien im Vergleich mit einem unsubstituierten Gel. Außerdem wird aus dieser Tabelle ersichtlich, daß die Bakterien mit den Fimbrien vom Typ-1 eine etwas bessere Haftung am substituierten Gel als die Bakterien zeigen, denen diese Fimbrien fehlen.
  • Es müßte hinzugefügt werden, daß die Struktur des mit Mannose substituierten Fractogels auf folgende Weise schematisch dargestellt werden kann:
    • BEISPIEL 2
  • a) Herstellung eines Konjugats von p-Aminophenyl-α-D-mannopyranosid und Huianserumalbumin (HSA)
  • p-Aminophenyl-α-D-annopyranosid (0,1 uMol, Sigma Chemicals) wird in einem konischen 50 ml Kolben in 0,1 in Phosphatpuf fer pH = 7,0 (50 ml) gelöst und anschließend wird Ethanol (10 ml) zugesetzt. Danach wird unter Rühren mit einem Magneten Thiofosgen (0,040 ml) zugesetzt, und nach 10 min wird der Magnetstab entfernt und es erfolgt eine gründliche Wäsche mit destilliertem Wasser (insgesamt etwa 5 ml). Danach wird dem KolbenDiethylether (etwa 10 ml) zugesetzt, und der Kolben wird anschließend sorgfältig kräftig geschüttelt, wobei der Stopfen verschlossen bleibt. Die Phasen können sich trennen, und die untere Wasserphase wird anschließend mit einer Pasteurpipette in einen konischen 100 ml Kolben gegeben. Der verbleibenden Etherphase wird destilliertes Wasser (etwa 2 ml) zugegeben; danach wird sorgfältig geschüttelt, und nach der Trennung wird die neue Wasserphase in den konischen Kolben gegeben. Der konische Kolben wird auf einem Rollverdampfer befestigt, und der Inhalt wird auf etwa 2 ml verringert.
  • Die erhaltene Lösung wird einer bereits hergestellten Proteinlösung zugesetzt, die HSA (162,5 mg) enthält, das in Boratpuffer (pH = 9,2, 26,3 ml) gelöst ist, wobei die Auflösung nach etwa einer Stunde abgeschlossen ist. Der pHWert wird dann mit einer 2 in NaOH-Lösung auf 9,5 eingestellt. Die Mischung wird unter langsamem Rühren über Nacht stehengelassen, und der pH-Wert wird so geregelt, daß er im Bereich von 8,5 bis 9,5 liegt. Der Verlauf der Reaktion wird durch TLC kontrolliert. Die Reaktionsmischung wird auf einen Ultrafilter gegeben, der mit 10 bis 150 ml destilliertem Wasser gefüllt ist. Die Ultrafiltration erfolgt, bis nur einige zehn Milliliter verbleiben, es wird nachgefüllt, und danach erfolgt die Filtration, danach wird ein weiteres Mal nachgefüllt und bis zu wenigen Millilitern filtriert. Die Mischung wird in einem vorher gewogenen Gefäß durch Glaswolle filtriert, wonach gefriergetrocknet wird.
  • Der Inhalt des Konjugats wird entweder durch Analyse mit Zucker oder durch Kolorimetrie bestimmt.
  • b) Binden von E. coli an ein Papierhandtuch, das mit dein HSA-Konjugat beschichtet ist
  • Bei diesen Versuchen wurden die gleichen Stämme von E. coli wie im Beispiel 1 verwendet. Substituiertes bzw. unsubstituiertes HSA wird in PBS (1 mg/ml) gelöst. 10 ul jeder Lösung werden auf ein Papierstück aufgebracht, das mit einer Stanzvorrichtung aus einem Papierhandtuch mit Standardqualität ausgestanzt wurde. Nach dein Trocknen des Papiers werden dem Papierstück in einem Testrohr 100 ul der Bakteriensuspension zugegeben, und es wird 30 min lang bei 37ºC inkubiert. Danach wird die Radioaktivität mit einem γ-Zählgerät aufgezeichnet, und das Papierstück wird zweimal mit PBS gewaschen. Das Auf zeichnen mit diesem γ-Zählgerät erfolgt vor dem Waschen und nach jeder Wäsche. Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle II gezeigt. TABELLE II Stamm E.coli vor dem Waschen nach der 1. Wäsche HSA-Papier (Kontrolle) Substituiertes HSA-Papier
  • Diese Versuchsergebnisse bestätigen auch, daß die Substitution mit Mannosid eine beträchtlich verbesserte Haftung am Papier mit sich bringt. Es sollte hinzugefügt werden, daß das genannte Konjugat zwischen Mannosid und HSA wie folgt dargestellt werden kann:
  • Diese Erfindung ist nicht auf die beschriebenen und detailliert gezeigten Ausführungsformen begrenzt, da unterschiedliche Modifikationen vorgenommen werden können, ohne daß vom Schutzumfang dieser Erfindung abgewichen wird. Die Erfindung soll in allen Fällen angewendet werden, bei denen ein Reinigungsprodukt der obengenannten Art verwendet werden kann, um andere Bakterien, als E. coli, Typ-1 befimbert, zu entfernen, die sich spezifisch an andere Kohlenwasserstoffderivate binden, als jene, die nur das Monosaccharid Mannose enthalten. Der Grund dafür, daß diese entsprechenden Ausführungsformen hier nicht gezeigt werden, besteht darin, daß diese anderen Kohlenwasserstoffderivate gegenwärtig nur sehr teuer hergestellt werden, jedoch erwartet wird, daß dies zukünftig beträchtlich billiger sein kann.

Claims (12)

1. Reinigungsprodukt, z.B. zum Abwischen der Hände, im Zusammenhang mit Körperhygiene o.ä., das eine Matrix eines Gewebematerials umfaßt, dadurch gekennzeichnet, daß mit dieser Matrix ein Kohlenwasserstof fderivat verbunden ist, das mit Bakterien E. coli, Typ-1 befimbert, in Wechselwirkung tritt, um diese Bakterien durch das Haften der Bakterien am Reinigungsprodukt von der Reinigungsstelle zu entfernen.
2. Reinigungsprodukt nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Kohlenwasserstoffderivat ein Mannosederivat ist.
3. Reinigungsprodukt nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das Mannosederivat α-D- Mannopyranosid ist.
4. Reinigungsprodukt nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß das α-D-Mannopyranosid p-Aminophenyl-α-D-inannopyranosid ist.
5. Reinigungsprodukt nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß das α-D-Mannopyranosid durch seine p-Amlnogruppe an die Matrix gebunden ist.
6. Reinigungsprodukt nach Anspruch 4 oder 5, dadurch gekennzeichnet, daß das α-D-Mannopyranosid kovalent an die Matrix gebunden ist.
7. Reinigungsprodukt nach einem der vorstehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Matrix aus Papier auf Cellulosebasis besteht.
8. Reinigungsprodukt nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß die Matrix aus einem Verbundmaterial besteht, das Cellulose und/oder regenerierte Cellulose und ein synthetisches Polymer oder Copolymer umfaßt.
9. Reinigungsprodukt nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß die Matrix ein Copolymer eines Mannosederivats und eines Amids umfaßt.
10. Reinigungsprodukt nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß das Copolymer die Formel aufweist:
worin R² die Formel hat:
R³ H oder CH&sub3; ist;
x eine ganze Zahl von 0 bis etwa 20 ist; und
m derart ist, daß das Molekulargewicht des Copolymers etwa 5 bis etwa 2000 kDa beträgt.
11. Reinigungsprodukt nach einem der vorstehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß das Gewebe eine Serviette oder ein Rollenprodukt umfaßt.
12. Reinigungsprodukt nach einem der Ansprüche 1 bis 10, dadurch gekennzeichnet, daß das Gewebe eine feuchte Serviette umfaßt, die in einem verschlossenen Umschlag enthalten ist.
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