-
TECHNISCHER
BEREICH
-
Die
vorliegende Erfindung ist im Bereich von Geräten, Kits und Verfahren zum
Testen von Körperflüssigkeiten
zum Screening von Neugeborenen durch Tandem-Massenspektrometrie-Kits.
-
HINTERGRUND
-
Neugeborene
Säuglinge
werden in allen entwickelten Ländern
der Welt auf Stoffwechselkrankheiten gescreent. Zudem beginnen viele
Entwicklungsländern
rund um die Welt Neugeborenenscreening einzuführen. Vor dem Einsatz von Tandem-Massenspektrometrie
durch einige Neugeborenenscreeningprogramme war die Anzahl der gescreenten
Erbkrankheiten in den meisten Programmen beschränkt. In den USA wird ein Programm
typischerweise auf nicht mehr als sechs Krankheiten screenen.
-
Um
die Anzahl der gescreenten Krankheiten zu erhöhen und um auf Fettsäurenstoffwechselkrankheiten
zu screenen, haben einige Programme Tandem-Massenspektrometrie zum Neugeborenenscreening
eingeführt.
Dies erlaubt das Screening auf mehrere Krankheiten aus einer einzigen
Blutfleckausstanzung. Das Tandem-Massenspektrometrie-Screening
wird typischerweise durch Extrahieren einer Probe des Blutes des
Kindes, aus der Blutfleckausstanzung, mit einem Lösungsmittel,
wie beispielsweise Methanol, welches auch einen isotopenmarkierten
Standard bekannter Konzentration enthält, durchgeführt. Die
Menge des, durch Tandem-Massenspektrometrie vermessenen, Materials
im Blutfleckextrakt wird aus der Beobachtung des Verhältnisses
der Instrumentenantwort des bekannten Standards zur unbekannten
Substanz, die analysiert wird, abgeleitet. Üblicherweise werden die internen
Standards als eine Lösung
vorbereitet und über
einen Zeitraum gelagert, bis die Lösung verbraucht wird. Lagerung
dieser alkoholischen Lösungen
interner Standards kann, auf Grund von Verdampfen des Lösungsmittels,
zu Problemen bei der Quantifizierung führen. Diese Verdampfung kann,
wegen des wiederholten Öffnens
des Standardlösungsgefäßes, mit
der Zeit erfolgen, selbst wenn Vorkehrungen getroffen werden, um
sie zu vermeiden. Jede Unvorsichtigkeit bei Verwendung oder Lagerung
der Standardlösungen
verschlimmert dieses Problem. Verdampfung des Lösungsmittels führt zur
falschen Berechnung der Menge des Analyten, weil die Konzentration
der Standards nicht länger
zuverlässig
bekannt ist.
-
Wenn
die Standards als Feststoffe gelagert werden, unterliegen solche
wie Acrylcarnitin Degradation auf Grund von Hydrolyse. Dies hat
den Nutzen trockener Standards begrenzt, da sie unter Inertgasen
und bei niedrigen Temperaturen gelagert werden müssen. Die festen Standards
waren dafür
bekannt, dass sie bei niedrigen Temperaturen stabil sind, wenn sie
unter Stickstoff gelagert werden. Diese Bedingungen erlauben keine
effiziente Herstellung von individuellen Proben der Standards, ihren ökonomischen
Transport auf das Gelände
des Verbrauchers oder die Lagerung individueller Proben auf dem
Gelände
des Anwenders.
-
Schraag
B. et. al. offenbart in Analytical Biochemistry, Vol. 221, NO. 2,
1993, Seiten 223-239
ein Verfahren für
eine enzymgebundene immunsorbierende Prüfung zur Bestimmung der Protein-Tyrosin-Kinase
(PTK) Aktivität
aus cytolsolischen und löslich
gemachten Membranfraktionen von Brustkrebsen. Das allgemeine PTK
Substrat wird in den Vertiefungen einer Mikrotiterplatte aufgetragen.
Nach Inkubation mit PTK Probe und ATP wird die Menge phosphorylierter
Tyrosylrückstände mit
phosphotyrosinspezifischen Antikörpern
und einem sekundären
peroxidasemarkierten Antikörper
quantifiziert. Tyrosin wird als getrockneter interner Standard verwendet.
In diesem Dokument wird außerdem
ein Verfahren zur Herstellung einer Testschale offenbart, welche
eine Vielzahl von Testzellen umfasst, umfassend das Anordnen eines
Aliquots einer Flüssigkeit,
welche einen internen Standard enthält in jeder besagter Testzellen
besagter Schale und Trocknen besagter Flüssigkeit, welche einen internen
Standard enthält.
Es wird auch beschrieben, dass die Vertiefungen der Mikrotiterplatte
entweder mit BSA-Phosphotyrosin oder Poly(glutaminsäureayrosin)
(PGT) beschichtet sind.
-
Naylor
Edwin W. et. al. beschreibt im Journal Of Child Neurology, Vol.
14, NO. Suppl. 1, November 1999 (199-11), Seiten S4-S8, dass isotopenmarkierte interne
Standards in automatischer Tandem-Massenspektrometrie zum Massenneugeborenenscreening auf
Erkrankungen im Fettsäure-,
organische Säure- oder
Aminosäure-Stoffwechsel
verwendet werden können.
-
Demgemäß ist es
wünschenswert,
in der Lage zu sein, Testschalen und Test-Kits und zugehörige Verfahren
zu entwickeln die genaueres und zuverlässigeres Testen durch Verwendung
konzentrationsstabilerer interner Standards bereitstellen.
-
Es
ist auch wünschenswert,
Testschalen und Test-Kits zu entwickeln, die zweckgemäße Lagerung, Transport
und Verwendung interner Standards, die beim Testen, beispielsweise
Neugeborenesceening anwesend sind, bieten. Es ist auch vorteilhaft,
in der Lage zu sein, diese Vorteile bereitzustellen, während die
Stabilität
dieser internen Standards erhalten bleibt.
-
Obgleich
vor dem Hintergrund von Neugeborenenscreening-Techniken beschrieben,
mögen andere
Vorteile der vorliegenden Erfindung dem Durchschnittsfachmann durch
Verwendung der Erfindung in diesem Feld oder in anderen Anwendungen
ersichtlich werden.
-
ZUSAMMENFASSUNG
DER ERFINDUNG
-
Folglich
umfasst die vorliegende Erfindung Testschalen, ein Verfahren zu
ihrer Herstellung und Kits und analytische Methoden, welche sie
verwenden.
-
Die
Testschale zur Durchführung
einer Vielzahl von Tests an einer biologischen Flüssigkeit
umfasst: (a) Eine Testschale umfassend eine Vielzahl von Zellen;
und (b) zumindest zwei der Zellen enthalten einen getrockneten internen
Standard der jeweils in jedem der Vielzahl von Tests verwendet wird.
-
Der
getrocknete interne Standard umfasst einen isotopenmarkierten Standard,
ausgewählt
aus der Gruppe, bestehend aus Carnitin, Acetylcarnitin, Propionylcarnitin,
Butyrylcarnitin, Isovalerylcarnitin, Octanoylcarnitin, Myristoylcarnitin,
Palmitoylcarnitin, Glycin, Alanin, Valin, Leucin, Methionin, Phenylalanin,
Tyrosin, Aspartat, Glutamat, Ornithin, Citrullin, Arginin, Polysacchariden,
protein- oder proteinfragment-gebundenden Polysacchariden und Mischungen
davon.
-
Es
ist zudem bevorzugt, dass die Testschale mit einem Abdeckstück versehen
wird, wie beispielsweise einer polymeren aseptischen Abdeckung,
und dass sie verpackt wird, um Kontaminierung zu vermeiden und um
Lagerung und Transport zu erleichtern.
-
Die
vorliegende Erfindung umfasst auch ein Verfahren zur Durchführung einer
Vielzahl von in-vitro-Tests, um Analyten in einer Körperflüssigkeitsprobe
zu untersuchen, wobei das Verfahren umfasst: (a) Bereitstellen einer
Probe einer Körperflüssigkeit;
(b) Anordnen von Aliquots der Körperflüssigkeitsprobe
in eine Vielzahl von Zellen einer Testschale, wobei die Testschale
umfasst: (i) eine Vielzahl von Zellen; und (ii) mindestens zwei
der Zellen enthalten einen getrockneten internen Standard (wie oben
beschrieben), der in jedem der Tests verwendet wird; um eine entsprechende
Vielzahl an Test-/Standardproben zu erzeugen, gefolgt von (c) der
Durchführung
eines Untersuchungstests bei jeder der jeweiligen Vielzahl an Test-/Standardproben.
-
Die
Tests, die bei jeder der entsprechenden Vielzahl an Test-/Standardproben
durchgeführt
werden, können
mindestens zwei Tests einschließen,
die angepasst sind, um unterschiedliche Analyten von entsprechenden
der Vielzahl an Test-/Standardproben zu untersuchen oder können mindestens
zwei Tests einschließen,
die angepasst sind, um den gleichen Analyten von der jeweiligen
Vielzahl an Test-/Standardproben (wie beispielsweise für wiederholtes
Testen) zu untersuchen.
-
Typischerweise
wird die Vielzahl von Tests unter Verwendung von Tandem-Massenspektrometrie
durchgeführt.
-
Die
vorliegende Erfindung beinhaltet auch ein Kit, beinhaltend eine
Testschale zur Durchführung
einer Vielzahl an Tests, um Analyten in einer Körperflüssigkeit zu untersuchen, wobei
das Kit umfasst: (a) Eine Testschale enthaltend eine Vielzahl von
Zellen; (b) zumindest zwei der Zellen enthalten besagten trockenen
internen Standard; (c) ein Lösungsmittel
zur Zugabe zu den Zellen, das einen getrockneten internen Standard
(wie oben beschrieben) enthält;
und (d) einen optionalen Lösungsmittelspender
(wie beispielsweise eine Mikropipette).
-
Die
vorliegende Erfindung bietet auch ein Neugeborenenscreeningverfahren
zur Durchführung einer
Vielzahl von Tests an Blut eines neugeborenen Menschen, um mindestens
einen Analyten daraus zu untersuchen, wobei das Verfahren umfasst:
(a) Erhalten einer Testschale, wobei die Testschale umfasst: (i)
eine Vielzahl von Zellen; und (ii) wobei mindestens zwei der Zellen
einen getrockneten internen Standard (wie oben beschrieben) enthalten,
der bei jedem der Tests für
jede Testprobe/Standard in jeder Zelle nach Versehen mit einem Lösungsmittel
und Blutprobe verwendet wird; (b) Anordnen einer Vielzahl von Probenpapierabschnitten,
die jeder getrocknete Blutproben eines neugeborenen Menschen tragen,
in die jeweiligen Zellen der Testschale; (c) Anordnen von Aliquots
des Blut in die jeweiligen Zellen der Testschale, um eine entsprechende
Vielzahl an Test-/Standardproben zu erzeugen; und (d) Durchführen von
Tandem-Massenspektrometrie bei jeder der jeweiligen Vielzahl an
Test-/Standardproben.
-
Die
Blutproben können
vom Blutstropfenprobenpapier, das von Hospitalen oder Kliniken dem
Laboratorium geliefert werden kann, genommen werden. Andernfalls
kann die Blutprobe in jeder anderen, für den/die gewünschten
Tests) und/oder andere Anwendung angemessenen Weise bereitgestellt
werden, wie beispielsweise in Form von Hämosylat, gelagertem flüssigem Blut
oder Blutprodukten oder gefriergetrockneten Proben, etc.
-
Die
Tests, die an jeder der jeweiligen Vielzahl von Test-/Standardproben
vorgenommen werden, können
dieselben oder andere Tests oder Kombinationen davon, wie hierin
beschrieben, umfassen. Diese können
Tests auf einen oder mehrere einer breiten Auswahl an, Stoffwechselkrankheiten
anzeigenden, Analyten (wie beispielsweise jene, die gegen bekannte oder
empirisch entwickelte Schwellen oder Bereiche gemessen werden) sein,
oder andernfalls die Notwendigkeit einer weiteren Untersuchung des getesteten
Individuums anzeigen.
-
Der
getrocknete interne Standard kann jeder geeignete isotopenmarkierte
Standard für
den/die gewünschten
Tests) sein. Die getrockneten internen Standards können alle,
im Stand der Technik bekannten, Standards sein, und können jene
umfassen, die entweder einzeln oder in Kombination mit 2H, 13C und 15N markiert
sind, so wie die hierin erwähnten.
-
Das
Verfahren der vorliegenden Erfindung umfasst auch ein Verfahren
zur Durchführung
einer Vielzahl von in-vitro-Tests an Blut eines neugeborenen Menschen,
um zumindest einen der Analyten darin zu untersuchen, umfassend:
(a) Bereitstellen einer Blutprobe eines neugeborenen Menschen; (b) Anordnen
von Aliquots des Bluts in eine Vielzahl von Zellen einer Testschale,
wobei die Testschale umfasst: (i) eine Vielzahl von Zellen; und
(ii) wobei mindestens zwei der Zellen einen getrockneten internen Standard
(wie oben beschrieben) enthalten, der in jedem der Tests verwendet
wird, um eine entsprechende Vielzahl an Test-/Standardproben zu
erzeugen; und (c) Durchführung
eines Untersuchungstests bei jeder der jeweiligen Vielzahl an Test-/Standardproben.
-
Die
Blutfleckextrakte, welche die isotopenmarkierten Standards enthalten,
können
dann chemischer Modifizierung unterworfen oder direkt analysiert
werden. Alle Bedingungen, denen die Probe ausgesetzt ist, finden
auch auf den internen Standard Anwendung.
-
Die
Schale kann aus jedem geeigneten Material angefertigt sein, wie
beispielsweise Plastik oder Metall oder Kombinationen und kann Zellen
von variierender Größe und Anzahl
enthalten. Die Zellen können
vorzugsweise eine Anzahl von 4 bis 96 haben. Diese können in Übereinstimmung
mit der Anzahl der vorzunehmenden Tests angeordnet werden. Die Zellen
können
typischerweise ein Viertel Inch bis drei Viertel Inch Durchmesser
haben.
-
Die
Körperflüssigkeit,
die untersucht werden kann, ist jede Körperflüssigkeit, an der Tests vorgenommen
werden und kann Blut, Sperma, Speichel oder Rückenmarksflüssigkeit umfassen.
-
Die
Standards können
gemäß bekannten Verfahren
getrocknet werden, einschließlich
Hitzetrocknung und Gefriertrocknung (Lyophilisation).
-
Die
Anzahl der Tests, die mit jeder Testschale durchgeführt werden
kann, kann mit dem Typ des, in jeder Zelle vorgelegten, Standards
variieren. Die Schale kann alle Zellen mit einem einzigen Standard haben
oder kann ein oder mehr Serien enthalten, die angepasst sind, um
eine, einer Serie von Tests durchzuführen; beispielsweise zwanzig
Zellen mit fünf
Serien von vier Standards für
vier Iterationen von fünf
unterschiedlichen Tests.
-
Die
bevorzugte Ausführungsform
der vorliegenden Erfindung verwendet getrocknete isotopenmarkierte
Standards zum Neugeborenenscreening, welche auf einer Probe-bei-Probe
Basis gelöst
und verwendet werden. Dies vermeidet Verlust an Lösungsmittel
und folgende Änderungen
der internen Standard-Konzentration.
-
Typischerweise
werden Blutflecken von Neugeborenen von Papierprobenkarten genommen,
indem Teile des Blutflecks ausgestanzt werden um Proben zu erzeugen.
Dies wird mit, im Stand der Technik bekannten, Stanzgeräten durchgeführt. Die Gestaltung
von Probenkarten variiert, aber typischerweise umfassen die Probenkarten
von 2 bis 10 Flecken pro Karte.
-
Die
Fleckenausstanzungen werden individuell in Zellen einer Multi-Zellen
Testschale platziert. Die Blutproben sind typischerweise gelöst, beispielsweise
durch Verwendung eines Lösungsmittels,
wie beispielsweise Methanol oder Ethanol.
-
An
diesem Punkt werden die gelösten
Proben dann in eine zweite Multi-Zellen Testschale transferiert.
Die Probe wird typischerweise derivatisiert, um die Probe vorzubereiten,
so dass die Moleküle
(z.B. typische Aminosäuren
und Fettsäuren) dem
Massenspektrometer in einer protonierten Form präsentiert werden. Typischerweise
wird ein Derivatisierungsmittel, wie beispielsweise Buthanol-n-HCl
für diesen
Zweck verwendet, oder ein anderes angemessenes Derivatisierungsmittel.
-
Der
Transfer der Proben kann gemäß Verfahren
und unter Verwendung von Geräten,
die im Stand der Technik bekannt sind und Verwendung finden, wie
beispielsweise durch Verwendung von Mikromultipipetten und robotischen
Ausspendern erfolgen.
-
Die
Proben müssen
dann erneut getrocknet werden, um überschüssiges Derivatisierungsmittel zu
entfernen.
-
Schließlich wird
ein Protonierungsmittel, wie beispielsweise eine Kombination von
Acetonitril und Wasser der Probe hinzugefügt, bevor sie mit Tandem-Massenspektrometrie
analysiert wird. Ein interner Standard, typischerweise wiedereingesetzt
von einem getrocknet der Zustand in eine Flüssigkeit wird der Probe der
hinzugefügt,
bevor sie analysiert wird.
-
In Übereinstimmung
mit einer bevorzugten Ausführungsform
der Erfindung werden die Blutfleck-Ausstanzungen in einer Multi-Zellen
Testschale platziert, wobei die Testschale über Zellen verfügt, die
bereits mit einem getrockneten internen Standard versehen wurden.
-
Die
Blutproben und die getrockneten internen Standards in jeder Zelle
der Testschale werden durch Zugabe eines Protonierungsmittels/Lösungsmittels
gelöst,
wie beispielsweise einer Mischung von Methanol und Wasser.
-
In
der bevorzugten Ausführungsform
der Erfindung werden die gelösten
Testproben/Standards direkt in ein Tandem-Massenspektrometer eingeführt, welches
angepasst ist, um die Testproben/Standards unter Verwendung eines
Elektrosprays zu verarbeiten. Das Tandem-Massenspektrometer kann
jedes geeignete Spektrometer sein, wie beispielsweise jene, die
kommerziell von MDS SCIEX aus Concord, Ontario Kanada, erhältlich sind.
-
Die
bevorzugte Ausführungsform
der Erfindung beseitigt folglich die Notwendigkeit, die Testprobe/Standard
Mischungen aus jeder Zelle zu Transferieren, Derivatisieren und
Trocknen. Die bevorzugte Ausführungsform
der Erfindung beseitigt auch die Verwendung einer gesondert vorbereiteten
oder gelagerten Standardlösung,
da der interne Standard zusammen mit der ausgestanzten Blutprobe
wiedereingesetzt wird. Dies ist auch vorteilhaft, weil gelagerte interne
Standards Kontaminierung oder Änderungen der
Konzentration auf Grund von Verdampfen des Lösungsmittels (typischerweise
ein Alkohol) unterliegen. Die bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden
Erfindung überwindet
die Änderung
der Standardkonzentration durch Ablagern von festen Proben der Standards
in individuellen Mikrotiterplattenvertiefungen. Diese Standards
werden dann gelöst,
wenn der Blutfleck extrahiert wird und im selben Verfahren verwendet.
Jede Verdampfung des Standardlösungsmittels
und folgende Ungenauigkeit oder Fehler in der Berechnung der Menge
des Analyten wird dadurch vermieden, dass der Standard bis zum Ende der
Prozedur exakt genauso behandelt wird, wie der Analyt aus dem Extraktionsschritt. Änderungen
der Konzentration des Standards durch Verdampfung werden vermieden,
indem sie trocken gelagert werden, mit keiner Möglichkeit für das Lösungsmittel vor der Verwendung
zu verdampfen. Degradation der Acrylcarnitin-Standards durch Hydrolyse
wird durch Verschließen
der Platte unter trockener Luft vermieden, gefolgt von Verschließen der
verschlossenen Platte in einer getrockneten Verpackung.
-
Die
Verfahren zum Neugeborenenscreening können Testprotokolle verwenden,
wie jene die beschrieben sind in Rashed et al., "Diagnosis of Inborn Errors of Metabolism
from Blood Spots by Acylcarnitines and Amino Acids Profiling Using
Automated Electrospray Tandem Mass Spectroscopy," Pediatric Research, Vol. 38, no. 3,
pp. 324-331 (1995); Chace et al., "Rapid Diagnosis of Homocystinuria and
other Hypermethionimias from Newborns' Blood Spots by Tandem Mass Spectroscopy," Clinical Chemistry,
Vol. 42:3, pp. 349-355 (1996); Millington, et al., "Tandem Mass Spectroscopy:
A New Method for Acylcarnitine Profiling with Potential for Neonatal
Screening for Inborn Errors of Metabolism," J. Inher. Metab. Dis. Vol. 13, pp.
321-324 (1990); Rashed et al., "Screening Blood
Spots for Inborn Errors of Metabolism by Electrospray Tandem Mass
Spectroscopy with a Microplate Bach Process and a Computer Algorithm
for Automated Flagging," Clinical
Chemistry, Vol. 43:7, pp. 1129- 1141
(1997); Magera et al., "Method
for the Determination of Total Homocysteine in Plasma and Urine
by Stable Isotope Dilution and Electrospray Tandem Mass Spectroscopy," Clinical Chemistry,
Vol. 45:9, pp. 1517-1522 (1999); Chace et al., "Use of Phenylalanine-to-Tyrosine Ratio
Determined by Tandem Mass Spectrometry to Improve Newborn Screen for
Phenylketonuria of Early Discharge Specimens Collected in the First
24 Hours," Clinical
Chemistry, Vol. 44:12, pp. 2405-2409 (1998); Chace et al., "Rapid Diagnosis of
Phenylketonuria by Quantitative Analysis for Phenylalanine and Tyrosine
in Neonatal Blood Spots by Tandem Mass Spectrometry," Clinical Chemistry,
Vol. 39:1, pp. 66-71 (1993); Chace et al., "Rapid Diagnosis of MCAD Deficiency:
Quantitative Analysis of Octanoylcarnitine and Other Acylcarnitines
in Newborn Blood Spots by Tandem Mass Spectrometry," Clinical Chemistry,
Vol. 43:11, pp. 2106-2113 (1997); Chace, et al., "Rapid Diagnosis of Phenylketonuria
by Quantitative Analysis for Phenylalanine and Tyrosine in Neonatal
Blood Spots by Tandem Mass Spectrometry," Clinical Chem. vol. 38:66-71 (1993);
Chace, et al., "Rapid
Diagnosis of Maple Syrup Urine Disease in Blood Spots from Newborns
by Tandem Mass Spectrometry," Clinical Chem.
vol. 41:62-8 (1995); Rashed, et al., "Electrospray Tandem Mass Spectrometry
in the Diagnosis of Organic Acidemias"' Rapid
Commun. Mass Spectrom. 8:129-33 (1994); Rashed, et al., "Diagnosis of Inborn
Errors of Metabolism from Blood Spots by Acylcarnitines and Amino
Acid Profiling using Automated Electrospray Tandem Mass Spectrometry," Pediatric Res. 38:324-331
(1995); Rinaldo, et al. "Medium
Chain Acyl-CoA Dehydrogenase Deficiency. Diagnosis by Stable Isotope
Dilution Measurement of Urinary N-Hexanoylglycine and 3-Phenylpropionylglycine," New Eng. J. Med.
Vol. 319:1308-1313 (1988); Magera, et al. "Method for the Determination of Total
Homocysteine in Plasma and Urine by Stable Isotope Dilution and
Electrospray Tandem Mass Spectrometry," Clinical Chemistry, vol. 45:1517-22 (1999);
Chace et al., "Rapid
Diagnosis of Homocystinuria and Other Hypermethioninemias from Newborns' Blood Spots by Tandem
Mass Spectrometry," Clinical
Chem. Vol. 42:349-355 (1996); Rashed, et al. "Screening Blood Spots for Inborn Errors
of Metabolism by Electrospray Tandem Mass Spectrometry with a Microplate
Batch Process and a Computer Algorithm for Automated Flagging of
Abnormal Profiles. Clinical Chem, vol. 43:1129-42 (1997); Lowes
et al., "Identification
of Urinary Acylcarnitines using Gas Chromatography-Mass Spectrometry:
Preliminary Clinical Applications," J. Chromatogr. Vol. 577:205-14 (1992);
Millington et al., "Tandem
Mass Spectrometry: A New Method for Acylcarnitine Profiling for
Neonatal Screening for Inborn Errors of Metabolism," Journal of Inher.
Metab. Dis. Vol. 13:321-324 (1990); Millington et al., "The Analysis of Diagnostic Markers
of Genetic Disorders in Human Blood and Urine using Tandem Mass
Spectrometry with Liquid Secondary Ion Mass Spectrometry. Int. J.
Mass Spectrom. Ion Processes," vol.
111: pp. 211-28 (1991); Millington et al., "New Developments in Fatty Acid Oxidation.
In: Coates PM, Tanaka K eds. The Role of Tandem Mass Spectrometry
in the Diagnosis of Fatty Acid Oxidation Disorders," New York: Wiley-Liss,
pp. 339-54 (1992); Chace, et al., "Rapid Diagnosis of MCAD Deficiency:
Quantitative Analysis of Octanoylcarnitine and Other Acylcarnitines
in Newborn Blood Spots by Tandem Mass Spectrometry," Clinical Chemistry,
vol. 43:11, pp. 2106-2113 (1997); Chace, et al., "Use of Phenylalanine-to-Tyrosine
Ratio Determined by Tandem Mass Spectrometry to Improve Newborn
Screening for Phenylketonuria of Early Discharge Specimens Collected
in the First 24 Hours," Clinical
Chemistry, vol. 44:12, pp. 2405-2409 (1998); and Rashed, et al. "Diagnosis of Inborn
Errors of Metabolism from Blood Spots by Acylcarnitines and Amino
Acids Profiling Using Automated Electrospray Tandem Mass Spectrometry," Clinical Chemistry,
Vol. 38, No. 3 (1998).
-
Auch
ist in der vorliegenden Erfindung ein Verfahren zur Herstellung
einer Testschale, die eine Vielzahl von Test-Zellen umfasst, zur
Durchführung einer
Vielzahl von Tests an einer biologischen Flüssigkeit, enthalten, wobei
das Verfahren umfasst: (a) Anordnen eines Aliquots einer Flüssigkeit,
die einen internen Standard wie oben beschrieben enthält, in jede
der Test-Zellen der Schale; und (b) Trocknen der Flüssigkeit,
die einen internen Standard (wie hierin beschrieben) enthält, um eine
Schicht aus getrocknetem internem Standard auf der Oberfläche jeder
Zelle in der Schale zu bilden.
-
Das
Trocknen kann gemäß bekannten
Verfahren erfolgen, wie beispielsweise Hitzetrocknung oder Gefriertrocknung
(Lyophilisation).
-
DETAILLIERTE
BESCHREIBUNG DER BEVORZUGTEN AUSFÜHRUNGSFORM
-
Wie
oben beschrieben.
-
Angesichts
der vorhergehenden Offenlegung, wird es innerhalb der Möglichkeiten
eines Fachmanns für
Neugeborenenscreening liegen, Modifikationen an der vorliegenden
Erfindung vorzunehmen, wie beispielsweise durch die Substitution
von äquivalenten
Chemikalien, Verbindungen und ihren Konzentrationen, oder der Anwendung
von äquivalenten
Verfahrensschritten.