DE3786256T2

DE3786256T2 - Antifolat-mittel.

Info

Publication number: DE3786256T2
Application number: DE87907792T
Authority: DE
Inventors: Roger John Griffin; Michelle Anne Nee Mee Robinson; Malcolm Francis Graham Stevens
Original assignee: British Technology Group Ltd
Current assignee: BTG International Ltd
Priority date: 1986-12-02
Filing date: 1987-11-30
Publication date: 1993-10-07
Anticipated expiration: 2007-12-01
Also published as: GB2204867A; EP0290558A1; DE3786256D1; JPH01501477A; US4992444A; ATE90673T1; JP2704747B2; EP0290558B1; GB8728018D0; GB2204867B; WO1988004293A1

Description

Die Erfindung bezieht sich auf Antifolat-Mittel und insbesondere in der Chemotherapie anwendbare Verbindungen.
Antifolat-Mittel wie etwa Methotrexat sind seit vielen Jahren als Antitumor-Mittel verwendet worden. Im Jahre 1954 begannen klinische Untersuchungen mit Metoprin (Verbindung mit der Formel I, wobei R¹=Cl, R²=Cl, R³=Me sind).
Obgleich eine hohe, diesem Mittel zugehörige Toxizität eine weitere Auswertung ausschloß, ist die Anwendung von Pyrimethamin (I, wobei R¹=Cl, R²=H, R³=Et sind) erforscht worden. Außerdem wurden Diaminopyrimidin-Verbindungen entwickelt, die eine Eigenspezies-Selektivität wie antibakterielle und Antimalaria-Mittel aufweisen.
Nun sind Verbindungen mit einer dem Metoprin vergleichbaren oder größeren Inhibition der Dihydrofolat-Reduktase entwickelt worden, die relativ gering toxisch sind. Diese Verbindungen sind von Interesse als antiproliferative Mittel, welche zur Behandlung von Tumoren, Psoriasis, bakteriellen, Malaria- und Trypanosomen-Infekten eingesetzt werden.
Einige dieser Verbindungen sind indessen als Zwischenprodukte in der unter der Nummer WO 84/04746 veröffentlichten internationalen Anmeldung angegeben, die sich auf azido- substituierte Pyrimidinderivate bezieht.
Die Erfindung umfaßt in einem ersten Aspekt eine Verbindung für die Anwendung in der Therapie mit der Formal I oder deren Säureadditionssalz, in welcher R¹ eine C&sub1;&submin;&sub6;- Alkoxygruppe, eine Arylalkoxygruppe wie etwa eine Benzyloxygruppe oder eine substituierte Aminogruppe -NR&sub1;R&sub2; bezeichnet, wobei R&sub1; und R&sub2; unabhängig voneinander stehen für Wasserstoff, eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppe oder für eine Arylalkylgruppe mit einem C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylrest, mit der Maßgabe, daß R&sub1; und R&sub2; nicht gleichzeitig Wasserstoff sind, R² eine Nitrogruppe und R³ eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppe bezeichnet.
Die Erfindung umfaßt ferner innerhalb ihres Schutzbereichs als neue Substanzen zumindest die Verbindungen der Formel I als solche und deren Säureadditionssalz, in der R¹ steht für eine Arylalkoxygruppe wie etwa eine Benzyloxygruppe oder eine substituierte Aminogruppe -NR&sub1;R&sub2;, wobei R&sub1; und R&sub2; unabhängig voneinander stehen für Wasserstoff, eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppe oder für eine Arylalkylgruppe mit einem C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylrest, mit der Maßgabe, daß R&sub1; und R&sub2; nicht gleichzeitig Wasserstoff sind, R² eine Nitrogruppe und R³ eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppe bezeichnet.
Erfindungsgemäß werden bei Verbindungen mit der Formel I, wenn R¹ eine Alkoxygruppe bezeichnet, die Gruppen -OMe, -OEt und OBun besonders bevorzugt. Wenn R¹ für eine Arylalkoxygruppe steht, wird eine Benzyloxygruppe bevorzugt. Wenn Aminogruppen vorliegen, werden sie im allgemeinen durch eine oder zwei Alkyl- oder Arylalkylgruppen substituiert; in diesem Fall werden die folgenden R¹ bezeichnenden Gruppen besonders bevorzugt:
-NHMe, -NHEt, NHBun, -NHCH&sub2;CH&sub2;Ph, -NHCH&sub2;Ph, -NMeCH&sub2;Ph, -N(CH&sub2;Ph)&sub2;, -NEtCH&sub2;Ph, -NHCH(Me)Ph.
Im Hinblick auf die Alkylgruppe R³ sind bei bevorzugten Verbindungen Methyl- und insbesondere Äthylgruppen von besonderem Interesse.
Viele der in Übereinstimmung mit der Erfindung zuvor beschriebenen besonders bevorzugten Verbindungen, insbesondere aber nicht ausschließlich für die Anwendung in der Therapie, können auch als Verbindungen der Formel I einschließlich deren Säureadditionssalze definiert werden, wobei
R¹ für eine substituierte Aminogruppe -NR&sub1;R&sub2; steht, wobei
R&sub1; für Wasserstoff oder für eine Alkylgruppe steht; und
R&sub2; für eine Arylalkylgruppe mit der Strukturformel IB steht;
wobei R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; unabhängig voneinander stehen für:
Wasserstoff; eine Alkylgruppe; eine Alkoxygruppe;
eine Halogengruppe; eine Nitrogruppe; eine Perfluoralkylgruppe;
-CO&sub2;Ra, wobei Ra steht für
Wasserstoff, eine Alkyl- oder eine Alkoxyalkylgruppe; oder
-CONRbRc, wobei Rb und Rc jeweils für eine Alkylgruppe stehen, entweder identisch oder unterschiedlich sind, oder wobei Rb oder Rc für Wasserstoff und die jeweils andere Komponente für eine Alkylgruppe steht.
und wobei die Alkylgruppen, wenn sie als solche oder in anderen Gruppen, wie etwa in Alkoxygruppen auftreten, 1-6 C-Atome aufweisen.
In einem besonderen, spezifischeren Aspekt bezieht sich die Erfindung auch auf eine Verbindung mit der Formel IA oder deren Säureadditionssalz:
in welcher: n 1-6 ist; R&sub1; für Wasserstoff oder eine Alkylgruppe steht; R&sup4;, R&sup5; und R&sup6;, die identisch oder unterschiedlich dein können, für Wasserstoff, eine Alkyl-, Alkoxy-, Halogen-, Nitro-, Perfluoralkyl-Gruppe, eine Gruppe mit der Formel -CO&sub2;Ra, wobei Ra für Wasserstoff, eine Alkyl- oder Alkoxyalkylgruppe steht, oder für eine Gruppe mit der Formel -CONRbRc stehen, wobei Rb und Rc, die identisch oder unterschiedlich sein können, jeweils für eine Alkylgruppe stehen oder wobei Rb oder Rc Wasserstoff sind und die jeweils andere Komponente für eine Alkylgruppe steht; und R³ für eine Alkylgruppe steht; die Alkylgruppen, wenn sie als solche oder als ein Rest in anderen Gruppen wie etwa in Alkoxygruppen auftreten, 1-6 C-Atome aufweisen.
In bevorzugten Verbindungen der Erfindung gemäß der Formel IA sind die Alkylgruppen, wenn sie als solche oder in anderen Gruppen wie etwa in Alkoxygruppen vorliegen, im allgemeinen wie angegeben C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppen, insbesondere Methyl- oder Äthylgruppen. R¹ steht insbesondere für Wasserstoff, eine Methyl- oder Äthylgruppe, und R³, wie bereits angegeben, steht für eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppe, wobei eine Methylgruppe, insbesondere eine Äthylgruppe, bevorzugt sind. In einem bestimmten Bereich der bevorzugten Verbindungen steht wenigstens eines der Radikale R&sub1;, R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; für eine andere Komponente als Wasserstoff, und/oder wenigstens eines der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für eine andere Komponente als Wasserstoff. Wenn zwei der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; für Wasserstoff stehen und das andere Radikal ein Substituent an dem aromatischen Ring ist, wobei dieser Substituent für eine andere Komponente als Wasserstoff steht, wird das andere Radikal in der 4-(para) Stellung in einigen bevorzugten Verbindungen mitgeführt. Falls Halogen-Substituenten vorliegen, stehen diese im allgemeinen für Fluor oder Chlor, und eine Perfluoralkylgruppe steht üblicherweise für eine C&sub1;&submin;&sub4;-perfluoralkylgruppe, wie z.B. -CF&sub3;. Wenn der Ring substituiert wird durch -CO&sub2;Ra, üblicherweise in der 4-Stellung, stehen R&sup4; und R&sup5; normalerweise beide für Wasserstoff. Wenn Ra für Wasserstoff steht, liegt die Verbindung im allgemeinen in Form eines Hydrats oder eines anderen einfachen Additionsproduktes vor. Wenn Ra für eine Alkylgruppe, vorzugsweise für eine Methyl- oder Äthylgruppe steht, und wenn Ra für eine Alkoxyalkylgruppe steht, ist die Gruppe -(CH&sub2;)x-ORd bevorzugt, in der Rd eine C&sub1;&submin;&sub4;-Alkylgruppe darstellt und x 1 oder 2 ist, wie etwa in -CH&sub2;CH&sub2;OEt.
Die Gruppe -CONRbRc ist von besonderem Interesse, insbesondere wenn eines der Radikale Rb und Rc für Wasserstoff und das andere für eine Alkylgruppe, d.h. eine C&sub1;&submin;&sub4;-Alkylgruppe, wie z.B. eine Methyl- oder Äthylgruppe, steht. In diesem Fall steht n im allgemeinen für 1.
Besonders bevorzugte Verbindungen der Formal IA, wobei wenigstens eines der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; für eine andere Komponente als Wasserstoff steht, umfassen das Folgende:
Verbindung (f) liegt im allgemeinen in der Form eines Hydrats vor. Für die Behandlung von Tumoren sind zumindest die Verbindungen (e), (l) und (n), insbesondere Verbindung (l), besonders bevorzugt.
Im allgemeinen sind erfindungsgemäße Verbindungen durch ein Ersetzen des Chlors in einem Nitropyrimethamin der Formel IC:
durch den Rest der benötigten Gruppe R¹ herstellbar.
Wenn R¹ für eine Alkoxy-(oder Arylalkoxy-)Gruppe steht, können die benötigten Verbindungen an Hand der vorerwähnten unter der Nummer WO 84/04746 veröffentlichten internationalen Anmeldung hergestellt werden, welche deren Anwendung als Zwischenprodukte beschreibt. Wenn R¹ jedoch für eine mono- oder disubstituierte Aminogruppe, -NR&sub1;R&sub2;, steht, wobei R&sub1; und R&sub2; wie zuvor beschrieben für Wasserstoff oder Substituenten wie etwa eine Alkyl- oder Arylalkylgruppe stehen, können die Verbindungen gemäß einem weiteren Aspekt der Erfindung durch Behandlung eines Nitropyrimethamins, d.h. einer Komponente mit der Formel IC, mit einer Verbindung der Formel R&sub1;R&sub2;NH hergestellt werden.
Die Reaktion kann in einigen Fällen ohne zusätzliche Lösungsmittel, jedoch unter Anwendung von Wärme erfolgen, wobei das Reagens R&sub1;R&sub2;NH sowohl als Reaktionsmittel als auch als Lösungsmittel wirkt. In anderen Fällen, insbesondere beim Herstellen von Verbindungen mit der Formel IA, wird die Reaktion normalerweise in einem polaren Lösungsmittel, z.B. in einem Alkohol wie etwa Methanol, Äthanol oder Äthylglykol , üblicherweise unter Anwendung von Wärme durchgeführt.
Gemäß einem anderen Aspekt der Erfindung wird eine Komponente der Formel IA durch Behandlung einer Verbindung der Formel IC mit einer Verbindung der Formel ID hergestellt:
wobei n, R&sub1;, R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; für die zuvor angegebenen Komponenten stehen.
In einigen Fällen kann die ein Benzylamin darstellende Verbindung ID selbst zunächst durch Reduktion des entsprechenden Benzylamids, d.h. durch Behandlung mit einem Hydrid wie etwa Lithiumaluminiumhydrid, in einem nicht wässerigen Lösungsmittel hergestellt werden. Das Benzylamid kann durch Reaktion eines Benzoylchlorids mit einem Alkylamin hergestellt werden.
Säureadditionssalze der erfindungsgemäßen Verbindungen mit der Formel (I) und mit der Formel (IA) sind insbesondere pharmazeutisch zulässig, obgleich andere Säureadditionssalze innerhalb des Umfangs der Erfindung liegen. Geeignete Salze werden z.B. von den folgenden Säuren erhalten: Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Isäthionsäure, Phosphorsäure, Maleinsäure, Salizylsäure, p-Toluolsulfonsäure, Weinsteinsäure, Zitronensäure, Laktobionsäure, Ameisensäure, Malonsäure, Pantothensäure, Bernsteinsäure, Naphtalin-2-Sulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Methansulfonsäure und Äthansulfonsäure. Bevorzugte Salze sind im Hinblick auf die pharmazeutische Zulässigkeit die Äthansulfonsäuresalze.
Derartige Salze können von der freien Base durch Behandlung mit der Säure geeigneterweise in einem polaren Lösungsmittel wie etwa Wasser gegebenenfalls unter Anwendung von Wärme hergestellt werden.
Es wurde herausgefunden, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen die Dihydrofolat-Reduktase (DHFR) bei Säugern und anderen biologischen Systemen hemmen und eine Antitumor-Wirksamkeit aufweisen. Soweit sie lipophil sind, können sie besonders vorteilhaft bei der Behandlung von Tumoren und bösartigen Erkrankungen, wie etwa im zentralen Nervensystem, sein, die für polare Mittel unzugänglich sind. Sie sind auch von Interesse im Hinblick auf ihre antipsoriatische, antibakterielle und antimalarische Wirksamkeit. Die Antitumor-Wirksamkeit ist z.B. durch die Verringerung der Zahl der Tumorzellen bei an aszitischen Tumoren leidenden Säugern und ihrer sich ergebenden höheren Überlebensrate im Vergleich zu Kontrollgruppen nachgewiesen, die nicht behandelt wurden. Die Antitumor-Wirksamkeit ist ferner durch die meßbare Verringerung der Größe von festen Tumoren als Folge einer Behandlung mit den erfindungsgemäßen Verbindungen im Vergleich zu Tumoren von unbehandelten Kontrolltieren nachgewiesen. Die bei Mäusen und Ratten auftretenden Tumorlinien, gegen die die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) wie geplant aktiv sind, umfassen beispielsweise aber nicht ausschließlich die Lymphozytenleukämie P388, die Lymphozytenleukämie L1210, das melanotische Melanom B16, den Grimmdarm 38, das TLX5 Lymphom, das W3129 Myelom, das Walker 256 und M5 Retothelsarkom.
Wie zuvor beschrieben, sind die erfindungsgemäßen Verbindungen geeignet für die Behandlung von Tumoren, Psoriasis, Malaria- oder Trypanosomen- und bakterielle Infekte; die Erfindung gibt somit ferner ein Verfahren zur Behandlung eines an einer psoriatischen, trypanosomenischen oder bakteriellen Krankheit leidenden Patienten an. Zu diesem Zweck kann eine wirksame, nicht toxische Menge der Verbindung mit der Formel (I) oder eines Säureadditionssalzes davon in geeigneter Weise oral, parenteral (einschließlich subkutan, intramuskulär und intravenös) oder äußerlich verabreicht werden. Im allgemeinen wird die Verabreichung in bestimmten Intervallen, z.B. einmal oder mehrere Male pro Tag, wiederholt durchgeführt.
Die Menge an Verbindungen der Formel (I) , wie sie zuvor gemäß der Erfindung beschrieben wurde, welche für ein wirksames Antitumor-, Antipsoriasis-, antibakterielles oder Antitrypanosomen-Mittel zur Behandlung von Säugern erforderlich ist, wird natürlich variieren und bleibt letztlich dem den Säuger in jedem einzelnen Fall behandelnden Human- oder Veterinärmediziner überlassen. Die von einem solchen Praktiker, z.B. einem Internisten, in Betracht zu ziehenden Faktoren umfassen die Verabreichungsart und die pharmazeutische Zubereitungsform; das Körpergewicht, die Oberfläche, das Alter und den Allgemeinzustand des Säugers; und das individuelle, zu verabreichende Salz. Eine geeignete, wirksame Antitumor-Dosis liegt im Bereich von etwa 1,0 bis etwa 75 mg/kg Körpergewicht, vorzugsweise im Bereich von etwa 5 bis 40 mg/kg, wobei die am besten geeignete Dosis z.B. im Bereich von 10 bis 30 mg/kg liegt. Bei täglicher Behandlung beispielsweise kann die gesamte tägliche Dosis in einem Mal, in mehreren Malen, z.B. zwei bis sechsmal pro Tag, oder mittels einer intravenösen Infusion beliebiger Dauer verabreicht werden. Bei einem Säuger mit einem Körpergewicht von z.B. 75 kg liegt der Dosisbereich zwischen etwa 75 und 500 mg pro Tag, wobei eine typische Dosis üblicherweise etwa 100 mg pro Tag betragen würde. Wenn getrennte, mehrfache Dosen angezeigt sind, kann die Behandlung typischerweise mit 50 mg einer Verbindung der zuvor beschriebenen Formel (I) viermal am Tag in Form einer Tablette, Kapsel, Flüssigkeit (z.B. Sirup) oder Injektion erfolgen.
Die Wirksamkeit dieser Verbindungen der Formel (I) liegen normalerweise bei der freien Base, so daß die Art der in den Säureadditionssalzen vorliegenden Säure weniger bedeutend ist. Bei einer Anwendung in der Medizin sind die Salze dieser Verbindungen der Formel (I) jedoch normalerweise pharmakologisch und pharmazeutisch zulässig; andererseits können pharmazeutisch und pharmakologisch nicht zulässige Salze zum Herstellen der freien aktiven Verbindung oder deren pharmazeutisch zulässigen Salze verwendet werden, so daß sie vom Umfang der Erfindung nicht ausgeschlossen werden.
Obgleich es möglich ist, die wirksame Verbindung der Erfindung (hier definiert als eine Verbindung der Formel (I) mit den zuvor angegebenen Substituenten) allein in Form der Rohchemikalie zu verabreichen, ist es bevorzugt, die wirksame Verbindung in einer pharmazeutischen Zubereitungsform herzustellen. Zubereitungsformen der Erfindung für die medizinische Anwendung umfassen die wirksame Verbindung zusammen mit einem oder mehreren pharmazeutisch zulässigen Träger sowie wahlweise anderen therapeutischen Zusatzstoffen. Der/die Träger müssen pharmazeutisch zulässig in dem Sinne sein, daß sie mit den anderen Zusatzstoffen der Zubereitungsform verträglich und für den Empfänger nicht schädlich sind.
Die Erfindung bezieht sich deshalb auch auf eine pharmazeutische Zubereitungsform, die eine Komponente der Formel (I) mit Substituenten, wie zuvor beschrieben (in der Form der freien Base oder eines pharmazeutisch zulässigen Säureadditionssalzes) zusammen mit einem pharmazeutisch zulässigen Trägerstoff aufweist.
Die Zubereitungsformen umfassen solche, die für die orale, rektale, äußerliche oder parenterale (einschließlich subkutane, intramuskuläre und intravenöse) Verabreichung geeignet sind.
Die Zubereitungsformen können zweckmäßig in einer Einheitsdosierungsform dargeboten werden und durch jedes auf dem Gebiet der Pharmazie bekannte Verfahren hergestellt werden. Alle Verfahren umfassen im allgemeinen den Schritt des Zusammenbringens der wirksamen Verbindung mit einem Trägerstoff, welcher einen oder mehrere Zusatzstoffe enthält. Üblicherweise werden die Zubereitungsformen hergestellt, indem die wirksame Verbindung gleichmäßig und innig mit einem flüssigen Trägerstoff oder mit einem fein verteilten festen Trägerstoff oder mit beiden verbunden wird.
Anschließend wird das Produkt, falls nötig, in die gewünschte Zubereitungsform gebracht.
Für die orale Verabreichung geeignete Zubereitungsformen der Erfindung können als getrennte Einheiten, wie etwa Kapseln, Kacheten (Gelatinekapseln), Tabletten oder Pastillen, von denen jede eine bestimmte Menge der aktiven Verbindung enthält; als Pulver oder Granulat; oder als Suspension in einer wässerigen oder nicht wässerigen Flüssigkeit, wie etwa als Sirup, einem Elixier, einer Emulsion oder einem Trunk dargeboten werden. Die aktive Verbindung kann auch als große Pille (Bolus), Latwerge (Elektuarium) oder als Salbe dargeboten werden.
Die Tabletten können durch Zusammendrücken oder Formpressen wahlweise mit einem oder mehreren Zusatzstoffen hergestellt werden. Zusammengedrückte Tabletten können in einer geeigneten Vorrichtung durch Zusammendrücken der aktiven Verbindung in einer frei fließenden Form, wie etwa einem Pulver oder Granulat, hergestellt und wahlweise mit einem Bindemittel, Gleitmittel, inerten Verdünnungsmittel, oberflächenaktiven Mittel oder Dispergier-Mittel vermischt werden. Formgepreßte Tabletten können in einer geeigneten Vorrichtung durch Formpressen einer Mischung der pulverförmigen aktiven Verbindung mit einem geeigneten Trägerstoff hergestellt werden.
Ein Sirup kann durch Hinzufügen der aktiven Verbindung zu einer konzentrierten, wässerigen Lösung eines Zuckers, z.B. Rohrzuckers, hergestellt werden, der irgendein Zusatzstoff hinzugefügt werden kann. Ein solcher Zusatzstoff bzw. solche Zusatzstoffe kann bzw. können Geschmacksstoffe, ein Mittel zum Verzögern der Kristallisation des Zuckers oder ein Mittel zum Erhöhen der Löslichkeit eines anderen Zusatzstoffes, wie etwa einen Alkohol mit mehr als zwei Hydroxylgruppen, wie z.B. Glyzerin oder Sorbit, umfassen.
Zubereitungsformen für die rektale Verabreichung können als Zäpfchen mit einem herkömmlichen Trägerstoff, wie etwa Kakaobutter, dargeboten werden.
Für die parenterale Verabreichung geeignete Zubereitungsformen weisen üblicherweise ein steriles, wässeriges Präparat der aktiven Verbindung auf, das vorzugsweise isotonisch mit dem Blut des Empfängers ist.
Zusätzlich zu den vorerwähnten Inhaltsstoffen können Zubereitungsformen der Erfindung, wie z.B. Salben oder Cremes, einen oder mehrere aus Verdünnungsmitteln, Pufferlösungen, Geschmacksstoffen, Bindemitteln, oberflächenaktiven Mitteln, Verdickungsmitteln, Gleitmitteln oder Konservierungsmitteln (einschl. oxidationshemmender Stoffe) ausgewählte Zusatzstoffe enthalten.
Die Erfindung bezieht sich deshalb in einem weiteren Aspekt auch auf die Anwendung einer Verbindung der Formel I mit Substituenten, wie sie zuvor angegeben wurden, oder eines Säureadditionssalzes zum Herstellen eines medizinischen Präparates für die Behandlung von Tumoren, der Psoriasis, bakterieller Infekte, Malaria-Infekte und/oder trypanosomaler Infekte bei Säugern.
Insgesamt gesehen umfaßt die Erfindung jedes und irgendein neues Merkmal oder eine Kombination von Merkmalen, wie sie in dieser Schrift offenbart sind, wobei aber unterschiedliche Aspekte der Erfindung hauptsächlich aber nicht ausschließlich die folgenden Merkmale aufweisen:
(i) Verbindungen der Formel (I) mit den zuvor angegebenen Substituenten für die Therapie oder zur Anwendung in der Medizin und zum Herstellen medizinischer Präparate, wie z.B. Antitumor-Mittel, Antipsoriasis- Mittel, Antimalaria-Mittel, antibakterielle Mittel und Antitrypanosomen-Mittel;
(ii) Neue Verbindungen der Formel (I) oder (IA), wie sie in diesem Dokument angegeben sind;
(iii) Verfahren zum Herstellen neuer Verbindungen der Formel (I) oder (IA), wie sie in diesem Dokument angegeben sind, einschließlich aller neuer Zwischenverbindungen, die beim Durchführen solcher Verfahren hergestellt werden;
(iv) Eine pharmazeutische Zubereitungsform, welche eine Verbindung der Formel (I) und (IA) aufweist, wie sie in diesem Dokument zusammen mit einem pharmazeutisch zulässigen Trägerstoff angegeben wird;
(v) Verfahren zum Herstellen einer zuvor unter (iv) angegebenen pharmazeutischen Zubereitungsform mit Hilfe der in diesem Dokument beschriebenen Methoden.
Die folgenden Beispiele und Angaben der Stufen auf den synthetischen Herstellungswegen bevorzugter Verbindungen erläutern die Erfindung.

Beispiel 1

2,4-Diamino-5-(4-methylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (Verbindung 1)

Eine Suspension aus 2,4-Diamino-5-(4-chlor-3-nitrophenyl)- 6-äthylpyrimidin (Nitropyrimethamin) (10 g) in wässeriger Methylamin-Lösung (40 %; 200 ml) wurde für 48 Stunden mit der weiteren Zugabe der Methylamin-Lösung (100 ml) bei 24 Stunden und 36 Stunden am Rückfluß gekocht. Eine orange Färbung entwickelte sich langsam, und der Verbrauch an Anfangssubstanz wurde mittels der Dünnschichtchromatographie (T.L.C.) überwacht. Nach dem Kühlen und Verdünnen mit Wasser wurde das kristalline Produkt gesammelt und aus wässerigem Dimethylformamid (DMF) wieder auskristallisiert, so daß sich orangefarbene Prismen aus 2,4-Diamino-5-(4-methylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (9,0 g, 92 %) mit einem Schmelzpunkt von 262º bis 265ºC ergeben (Elementaranalyse: C 53,9; H 5,9; N 29,3 %; berechnet: C 54,2; H 5,6; N 29,2 %).

Beispiel 2

2,4-Diamino-5-(4-äthylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (2)

Eine Suspension aus Nitropyrimethamin (10 g) in wässeriger Äthylamin-Lösung (70 %; 200 ml) wurde für 48 Stunden mit der weiteren Zugabe der Äthylamin-Lösung (100 ml) bei 24 Stunden und 36 Stunden am Rückfluß gekocht. Eine orange Färbung entwickelte sich langsam, und der Verbrauch der Anfangssubstanz wurde durch Dünnschichtchromatographie überwacht. Nach dem Kühlen und Verdünnen mit Wasser wurde das kristalline Produkt gesammelt und aus wässerigem Dimethylformamid rekristallisiert, so daß sich orangefarbige Prismen aus 2,4-Diamino-5-(4-äthylamino-3-nitrophenyl)-6- äthylpyrimidin (9,0 g, 87 %) mit einem Schmelzpunkt von 275º bis 276ºC ergeben (Elementaranalyse: C 55,6; H 5,9; N 28,0 %; berechnet: C 55,6; H 6,0; N 27,8 %).

Beispiel 3

2,4-Diamino-5-(4-dimethylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (3)

Einer Lösung von Nitropyrimethamin (2 g) in Dimethylformamid (10 ml) wurde bei 94ºC (Badtemperatur) 2-Aminoäthanol (0,84 g) tropfenweise über 5 Minuten zugegeben. Die Mischung wurde über Nacht bei derselben Temperatur gerührt. Die tiefrote Mischung wurde gekühlt, mit Wasser (50 ml) verdünnt und bei 4ºC über Nacht stehen gelassen, wonach sich eine rote Kristallmasse absetzte, die gesammelt und wieder aus wässerigem Dimethylformamid auskristallisiert wurde, um orangefarbene Prismen aus 2,4-Diamino-5-(4-dimethylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (1,8 g, 87 %) mit einem Schmelzpunkt von 156º bis 158ºC zu erhalten (Elementaranalyse: C 55,6; H 5,9; N 27,8 %; berechnet: C 55,6; H 5,9; N 27,8 %).

Beispiel 4

2,4-Diamino-5-(4-dimethylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (3)

Eine Suspension aus Nitropyrimethamin (10 g) in wässeriger Dimethylamin-Lösung (40 %; 200 ml) wurde für 48 Stunden unter weiterer Zugabe der Dimethylamin-Lösung (100 ml) bei 24 Stunden und 36 Stunden am Rückfluß gekocht. Eine orange Färbung entwickelte sich langsam. Der Verbrauch an Anfangssubstanz wurde mittels Dünnschichtchromatographie überwacht. Nach dem Abkühlen und Verdünnen mit Wasser wurde das kristalline Produkt gesammelt und aus wässerigem Dimethylformamid wieder auskristallisiert, um orangefarbene Prismen aus 2,4-Diamino-5-(4-dimethylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (7,0 g, 68 %) mit einem Schmelzpunkt von 256º bis 257ºC zu erhalten (Elementaranalyse: C 55,6; H 5,9; N 27,4 %; berechnet: C 55,6; H 5,9; N 27,8 %).

Beispiel 5

2,4-Diamino-5-(4-n-butylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (4)

Eine Suspension aus Nitropyrimethamin (10 g) in n-Butylamin (30 ml) wurde für 4 Stunden am Rückfluß gekocht. Die tiefrote Flüssigkeit wurde gekühlt, mit Wasser verdünnt und 12 Stunden stehen gelassen, wonach sich rote Kristalle absetzten und gesammelt wurden. Eine Rekristallisation aus wässerigem Äthylglykol ergab karmesinrot gefärbte Platten aus 2,4-Diamino-5-(4-n-butylamino-3-nitrophenyl)-6- äthylpyrimidin (11,0 g, 95 %) mit einem Schmelzpunkt von 252º bis 254ºC (Elementaranalyse: C 58,2; H 6,8; N 25,5 %; berechnet: C 58,2; H 6,7; N 25,5 %).

Beispiel 6

2,4-Diamino-5-(4-benzylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (5)

Eine Lösung aus Nitropyrimethamin (2 g) in Benzylamin (20 ml) wurde für 4 Stunden gekocht, gekühlt und in Äther (50 ml) gegossen. Die Ausfällung wurde mit Äther und anschließend mit Wasser gewaschen und nachfolgend aus Äthylglykol rekristallisiert, um rote Mikroprismen aus 2,4-Diamino-5-(4-benzylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (1,8 g, 73 %) mit einem Schmelzpunkt von 253º bis 255ºC zu erhalten (Elementaranalyse: C 63,0; H 5,8; N 23,3 %; berechnet: C 62.6; H 5,5; N 23,1 %).

Beispiel 7

2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-N-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)pyrimidin (6)

Eine Lösung aus Nitropyrimethamin (2 g) in N-Methylbenzylamin (20 ml) wurde für 4 Stunden gekocht, abgekühlt und in Äther (50 ml) gegossen. Die Ausfällung wurde mit Äther und anschließend mit Wasser gewaschen und nachfolgend aus wässerigem Äthylglykol rekristallisiert, um rote Mikroprismen aus 2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-N-methylbenzylamino-3- nitrophenyl)-pyrimidin (2,3 g, 91 %) mit einem Schmelzpunkt von 210º bis 211ºC zu erhalten (Elementaranalyse: C 63,5; H 6,1; N 22,3 %; berechnet: C 63,5; H 5,8; N 22,2 %).

Beispiel 8

2-4-Diamino-6-äthyl-5-(4-N-äthylbenzylamino-3-nitrophenyl) pyrimidin (7)

Eine Lösung aus Nitropyrimethamin (2 g) in N-Äthylbenzylamin (20 ml) wurde für 4 Stunden gekocht, abgekühlt und in Äther (50 ml) gegossen. Die Ausfällung wurde mit Äther und anschließend mit Wasser gewaschen und nachfolgend aus wässerigem Äthylglykol rekristallisiert, um rote Mikroprismen aus 2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-N-äthylbenzylamino-3-nitrophenyl)pyrimidin (2,3 g, 86 %) mit einem Schmelzpunkt von 214º bis 216ºC zu erhalten (Elementaranalyse: C 64,2; H 6,2; N 21,1 %; berechnet: C 64,3; H 6,1; N 21,4 %).

Beispiel 9

2,4-Diamino-5-(4-dibenzylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (8)

Eine Lösung aus Nitropyrimethamin (2 g) in Dibenzylamin (20 ml) wurde für 4 Stunden gekocht, abgekühlt und in Äther (50 ml) gegossen. Die Ausfällung wurde mit Äther und anschließend mit Wasser gewaschen und nachfolgend aus wässerigem Äthylglykol rekristallisiert, um rote Mikroprismen aus 2,4-Diamino-5-(4-dibenzylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin (1,5 g, 49 %) mit einem Schmelzpunkt von 197º bis 199ºC zu erhalten (Elementaranalyse: C 68,6, H 5,6; N 18,3 %; berechnet: C 68,7; H 5,7; N 18,5 %).

Beispiel 10

2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-(+ )-α-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)pyrimidin (9)

Eine Lösung aus Nitropyrimethamin (2 g) in (±)α-Methylbenzylamin (20 ml) wurde für 4 Stunden gekocht, abgekühlt und in Äther (50 ml) gegossen. Die Ausfällung wurde mit Äther und anschließend mit Wasser gewaschen und nachfolgend aus Äthylazetat rekristallisiert, um rote Mikroprismen aus 2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-(±)-α-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)-pyrimidin (2,2 g, 85 %) mit einem Schmelzpunkt von 208º bis 210ºC zu erhalten (Elementaranalyse: C 63,5; H 5,9; N 22,2 %; berechnet: C 63,5; H 5,8; N 22,2 %).

Beispiel 11

2,4-Diamino-6-äthyl-5-(3-nitro-4-phenyläthylaminophenyl)pyrimidin (10)

Eine Mischung aus Nitropyrimethamin (5 g) und Phenyläthylamin (20 ml) wurde für 4 Stunden gekocht, abgekühlt und in Äther (100 ml) gegossen. Die Ausfällung wurde mit Äther und anschließend mit Wasser gewaschen und nachfolgend aus wässerigem Äthylglykol rekristallisiert, um rote Nadeln aus 2,4-Diamino-6-äthyl-5-(3-nitro-4-phenyläthylaminophenyl)pyrimidin (4,5 g, 70%) mit einem Schmelzpunkt von 222º bis 225ºC (Sinter) zu erhalten (Elementaranalyse: C 63,7; H 6,2; N 22,4 %; berechnet: C 63,5; H 5,8; N 22,2 %).

Beispiel 12

2,4-Diamino-5-(4-N-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)-6- methylpyrimidin (11)

2,4-Diamino-5-(4-chlor-3-nitrophenyl)-6-methylpyrimidin (0,01 Mol-Äquivalent) wurde mit N-Methylbenzylamin (15 ml) bei 150ºC für 2 Stunden erwärmt. Die Mischung wurde in Äther (50 ml) gegossen und das feste Produkt gesammelt, mit Äther gewaschen und aus wässerigem Äthylglykol kristallisiert.

Beispiel 13

2,4-Diamino-5-(4-N-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)-6- methylpyrimidinäthansulfonatsalz (12)

Die freie Base des o.g. Pyrimidins (0,4 g) wurde in Wasser (5 ml) suspendiert, und Äthansulfonsäure (0,13 g; 1,1 Mol- Äquivalent) wurde zugegeben. Die Mischung wurde unter der weiteren Zugabe von Wasser mäßig gekocht, bis eine Auflösung eintrat. Die Lösung wurde abgekühlt und der rote Feststoff (0,5 g) wurde gesammelt und aus Wasser rekristallisiert, um orangefarbene Mikrokristalle (0,4 g; 77 %) mit einem Schmelzpunkt von 253º bis 254ºC (ermittelt: M&spplus; 364) zu erhalten. C&sub1;&sub9;H&sub2;&sub0;N&sub6;O&sub2; (freie Base) erfordert ein Molekulargewicht (M.W.) von 364; ermittelt: C 53,04, H 5,52; N 17,65 %. C&sub2;&sub1;H&sub2;&sub6;N&sub6;SO&sub5; erfordert C 53,16; H 5,49; N 17,72 %.

Beispiele 14 und 14a

2,4-Diamino-5-(4-N-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)-6- äthylpyrimidin (Verbindung 13) und 2,4-Diamino-5-(4-N- methylbenzylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidinäthansulfonatsalz (14)

Die freie Base des Pyrimidins (Methobenzaprim, MBP) wurde nach demselben Verfahren wie in Beispiel 12, aber unter Verwendung von 2,4-Diamino-5-(4-chlor-3-nitrophenyl)-6- äthylpyrimidin (Nitropyrimethamin) hergestellt. Nach Kristallisation aus wässerigem Äthylglykol wurde eine Ausbeute von 91 % bei einem Schmelzpunkt von 210º bis 211ºC erhalten (ermittelt: C 63,5; H 6,1; N 22,3 %. C&sub2;&sub0;H&sub2;&sub2;N&sub6;O&sub2; erfordert C 63,5; H 5,8; N 22,2 %). Um das Äthansulfonatsalz zu erhalten, wurde diese Verbindung (1.0 g) in Wasser (5 ml) suspendiert. Äthansulfonsäure (1.1 Mol-Äquivalent) wurde hinzugegeben. Die Mischung wurde unter weiterer Zugabe von Wasser mäßig gekocht, bis eine Auflösung eintrat. Die Lösung wurde abgekühlt und der rote Feststoff wurde eingesammelt und aus Wasser rekristallisiert, um orangefarbene Mikrokristalle (1,1 g; 85 %) mit einem Schmelzpunkt von 242º bis 243ºC zu erhalten (ermittelt: M&spplus; 378). C&sub2;&sub0;H&sub2;&sub2;N&sub6;O&sub2; (freie Base) erfordert ein Molekulargewicht (M.W.) von 378.

Beispiel 15

2,4-Diamino-6-äthyl-5-{4-[N-(4-methoxycarbonylbenzyl)-N- methylamino]-3-nitrophenyl}pyrimidin (15)

Methyl 4-(methylaminomethyl)benzoat (1,06 g, 6 mMol), Nitropyrimethamin (1) (860 mg, 3 mMol), Triäthylamin (0,8 ml, 9 mMol) und Äthylglykol (10 ml) wurden zusammen für 72 Stunden am Rückfluß gekocht. Äthylglykol wurde unter vermindertem Druck verdampft. Die dunkelrote/braune viskose Flüssigkeit wurde der Säulenchromatographie (Siliziumoxid; Chloroform 95 %; Methanol 5 %) ausgesetzt, welche nach dem Entfernen des Lösungsmittels unter verringertem Druck ein gelbes Öl ergab. Eine Trituration in petroliumäther ergab einen orangefarbenen Feststoff (190 mg). NMR und MS-Analysen zeigten das Vorliegen von zwei Verbindungen an. Diese Mischung wurde am Rückfluß in Methanol (30 ml) mit konzentrierter Schwefelsäure (0,5 ml) für 6 Stunden gekocht. Das Methanol wurde unter verringertem Druck verdampft. Der erhaltene Feststoff wurde in wässerigem, 10%-igem Kaliumkarbonat aufgelöst und mit Äthylazetat (3 x 50 ml) extrahiert. Die Äthylazetatschicht wurde getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;),filtriert, und das Lösungsmittel wurde unter verringertem Druck verdampft, um ein orangefarbenes Pulver (160 mg, 6 %) mit einem Schmelzpunkt von 198º bis 200ºC zu erhalten (ermittelt: C 60,34; H 5,77; N 18,90 %. C&sub2;&sub2;H&sub2;&sub4;N&sub6;O&sub4; erfordert C 60,55; H 5,50; N 19,27 %).

Beispiel 16

2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-{N-[4-(2-äthoxyäthoxy)carbonylbenzyl]-N-methylamino}-3-nitrophenylpyrimidin (16)

2-Äthoxyäthyl-4-(methylaminomethyl)benzoat (10,7 g), Nitropyrimethamin (3,5 g, 12 mMol) und Äthylglykol (10 ml) wurden 20 Stunden am Rückfluß gekocht, bevor das Lösungsmittel unter vermindertem Druck verdampft wurde. Das dunkelrote Öl wurde der Säulenchromatographie (Siliziumoxid; Chloroform 90 %; Methanol 10 %) ausgesetzt, und das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck verdampft. Eine Trituration in Diäthyläther ergab den 2-Äthoxyäthylester als gelbes Pulver (180 mg).
Der Schmelzpunkt beträgt 114º bis 116ºC (ermittelt: C 60,55; H 6,08; N 17,17 %. C&sub2;&sub5;H&sub3;&sub0;N&sub6;O&sub5; erfordert C 60,73; H 6,07; N 17,00 %).

Beispiel 17

2,4-Diamino-6-äthyl-5-{4-[N-(4-methoxybenzyl)-N-methylamino]-3-nitrophenyl}pyrimidin (17)

N-Methyl-4-methoxybenzylamin (4,07 g, 27 mMol), Nitropyrimethamin (2,0 g, 6,8 mMol) und Äthylglykol (20 ml) wurden 12 Stunden am Rückfluß gekocht. Nachdem die Mischung in Diäthyläther gegossen ,und abgekühlt wurde, ergab eine Filtration ein orangefarbenes Pulver. Dieses wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und aus wässerigem Äthylglykol kristallisiert, um das Produkt als orangefarbenes Pulver (680 mg, 24,5 %) zu erhalten.
Der Schmelzpunkt beträgt 201º bis 203ºC (ermittelt: C 61,61; H 5,97; N 20,44 %. C&sub2;&sub1;H&sub2;&sub4;N&sub6;O&sub3; erfordert C 61,76; H 5,88; N 20,59 %).

Beispiel 18

2,4-Diamino-6-äthyl-5-{4-[N-(4-methoxybenzyl)amino]-3- nitrophenyl}pyrimidin (18)

4-Methoxybenzylamin (3,6 g, 27,2 mMol), Nitropyrimethamin (2,0 g, 6,8 mMol) und Äthylglykol (15 ml) wurden zusammen 12 Stunden am Rückfluß erhitzt. Die Lösung wurde in Diäthyläther gegossen, filtriert und mit Wasser gewaschen. Das sich ergebende orangefarbene Pulver wurde aus wässerigem Äthylglykol kristallisiert und ergab die rote kristalline Verbindung (930 mg, 35 %)
Der Schmelzpunkt beträgt 241º bis 242ºC (ermittelt: C 60,76; 20 H 5,74; N 21,59 %. C&sub2;&sub0;H&sub2;&sub2;N&sub6;O&sub3; erfordert C 60,91; H 5,58; N 21,32 %).

Beispiel 19

2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-{N-[4-(N-methylcarbamoyl)benzyl]- N-methylamino}-3-nitrophenyl)pyrimidin (19)

N-Methyl-4-(methylaminomethyl)benzamid (2,56 g, 14,4 mMol), Nitropyrimethamin (2,1 g, 7,2 mMol) and Äthylglykol (25 ml) wurden 6 Stunden am Rückfluß gekocht. Die Reaktionsmischung wurde dann in Wasser gegossen und im Kühlschrank abgekühlt. Die Ausfällung wurde gefiltert und gewaschen und ergab ein schwach orangefarbenes Pulver (800 mg, 26 %).
Der Schmelzpunkt beträgt 235º bis 237ºC (ermittelt: C 60,22; H 5,73; N 21,99 %. C&sub2;&sub2;H&sub2;&sub5;N&sub7;O&sub3; erfordert C 60,69; H 5,75; N 22,53 %).

Beispiel 20

2,4-Diamino-6-äthyl-5-{4-[N-(4-carboxybenzyl)-N-methylamino]-3-nitrophenyl}pyrimidinmonohydrat (20)

Der Methylester (1) (0,92 g, 2,11 mMol) und Natriumhydroxid (500 mg, 12,5 mMol) in Methanol (25 ml) wurden 16 Stunden am Rückfluß gekocht. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt, bevor konzentrierte Salzsäure tropfenweise bis zu einem pH-Wert von 6,0 zugegeben wurde. Nachdem der gebildete Niederschlag gefiltert und mit Methanol gewaschen wurde, so daß sich ein orangefarbenes Pulver (720 mg) bildete, wurde er in Wasser suspendiert und in einer Lösung aus wässeriger Äthansulfonsäure (0,21 g, 1,88 mMol) gekocht. Beim Abkühlen bildete sich ein gelber Niederschlag, der gefiltert und aus Wasser kristallisiert wurde, so daß sich das Produkt als gelbes Pulver (410 mg, 44 %) ergab.
Der Schmelzpunkt beträgt 244º bis 246ºC (ermittelt: C 56,88; H 5,43; N 18,90 %. C&sub2;&sub1;H&sub2;&sub4;N&sub6;O&sub5; erfordert C 57,27; H 5,45; N 19,10 %).

Beispiele 21 bis 28

Die nachstehenden Verbindungen (21 bis 28) wurden mit Hilfe des Verfahrens A, B oder C hergestellt:

Verfahren A

2,4-Diamino-5-(4-chlor-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin ('Nitropyrimethamin'; 1) (0,01 Mol-Äquivalent) wurde mit dem passenden Benzylamin (15 ml) auf 150ºC für 2 Stunden erwärmt. Die Mischung wurde in Äther (50 ml) gegossen und das feste Produkt wurde gesammelt, mit Äther gewaschen und aus wässerigem Äthylglykol kristallisiert.

Verfahren B

Nitropyrimethamin (0,01 Mol-Äquivalent), 2-Chlorbenzylamin (10 ml) und Äthylglykol (10 ml) wurden gekocht (10 Stunden). Die rote Lösung wurde mit Äther (50 ml) verdünnt, und das orangefarbene Produkt, 2,4-Diamino-5-[4-(2-chlorbenzylamino)-3-nitrophenyl]-6-äthylpyrimidin (21) wurde gesammelt (55 %). Das Produkt hat einen Schmelzpunkt von 243º bis 244ºC, (ermittelt: M&spplus; 398. C&sub1;&sub9;H&sub1;&sub9;ClN&sub6;O&sub2; erfordert ein Molekulargewicht (M.W.) von 398).

Verfahren C

Nitropyrimethamin (0,01 Mol-Äquivalent), das substituierte Benzylaminhydrochloridsalz (0,04 Mol-Äquivalent), Triäthylamin (0,04 Mol-Äquivalent) und Äthylglykol (30 ml) wurden 10 Stunden am Rückfluß gekocht. Die Mischung wurde in Äther (50 ml) gegossen. Das Produkt wurde gesammelt und mit Äther, anschließend mit Wasser gewaschen. Die Kristallisation aus wässerigem Äthylglykol ergab das Diaminopyrimidin.
Die nachstehenden Produkte wurden durch das Verfahren A hergestellt:
2,4-Diamino-5-[4-(4-chlorbenzylamino)-3-nitrophenyl]-6- äthylpyrimidin (22), aus 4-Chlorbenzylamin, Schmelzpunkt 247º bis 248ºC (75 % Ausbeute) (ermittelt: M&spplus; 398 (400) C&sub1;&sub9;H&sub1;&sub9;ClN&sub6;O&sub2; erfordert ein Molekulargewicht (M.W.) von 398 (400); ermittelt: C 56,1; H 4,8; N 21,1 %. C&sub1;&sub9;H&sub1;&sub9;ClN&sub6;O&sub2; erfordert C 57,2; H 4,7; N 21,1 %.
2,4-Diamino-5-[4-(4-methylbenzylamino)-3-nitrophenyl]-6- äthylpyrimidin (25), aus 4-Methylbenzylamin, (85 % Ausbeute), Schmelzpunkt 237º bis 238ºC (ermittelt: M&spplus; 378. C&sub2;&sub0;H&sub2;&sub2;N&sub6;O&sub2; erfordert ein Molekulargewicht von 378); ermittelt: C 63,25; H 5,9; N 22,55 %. C&sub2;&sub0;H&sub2;&sub2;N&sub6;O&sub2; erfordert C 63,4; H 5,8; N 22,2 %.
2,4-Diamino-5-[4-(4-fluorbenzylamino)-3-nitrophenyl]-6- äthylpyrimidin (24) aus 4-Fluorbenzylamin, Schmelzpunkt 250º bis 251ºC (60 % Ausbeute), (ermittelt: M&spplus; 382. C&sub1;&sub9;H&sub1;&sub9;FN&sub6;O&sub2; erfordert ein Molekulargewicht (M.W.) von 382); ermittelt: C 59,2; H 5,00; N 21,3 %. C&sub1;&sub9;H&sub1;&sub9;FN&sub6;O&sub2; erfordert C 59,7; H 5,00; N 22,o %.
2,4-Diamino-5-[4-(3,4-dimethoxybenzalamino)-3-nitrophenyl] -6-äthylpyrimidin (26), aus 3,4-Dimethoxy-benzylamin, Schmelzpunkt 232º bis 233ºC (95 % Ausbeute) , (ermittelt: M&spplus; 424. C&sub2;&sub1;H&sub2;&sub2;N&sub6;O&sub4; erfordert ein Molekulargewicht (M.W.) von 424). Ermittelt: C 59,6; H 5,85; N 18,5 %. C&sub2;&sub1;H&sub2;&sub2;N&sub6;O&sub2; erfordert C 58,4; H 5,7; N 19,8 %.
Die nachstehende Verbindung (28) wurde durch das Verfahren B hergestellt:
2,4-Diamino-5-[3-nitro-4-(4-trifluormethylbenzylamino) phenyl)-6-äthylpyrimidin (28), (40 % Ausbeute) , Schmelzpunkt 253º bis 254ºC, (ermittelt: M&spplus; 432. C&sub2;&sub0;H&sub1;&sub9;F&sub3;N&sub6;O&sub2; erfordert ein Molekulargewicht (M.W.) von 432.
Die nachstehenden Verbindungen wurden durch das Verfahren C hergestellt:
2,4-Diamino-5-[4-(3,4-dichlorbenzylamin)-3-nitrophenyl]- 6-äthylpyrimidin (23), aus 3,4-Dichlorbenzylaminhydrochlorid, Ausbeute 65 %, Schmelzpunkt 244º bis 245ºC (ermittelt: M&spplus; 433. C&sub1;&sub9;H&sub1;&sub8;Cl&sub2;N&sub6;O&sub2; erfordert ein Molekulargewicht (M.W.) von 433).
2, 4-Diamino-5-[4-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)-3-nitrophenyl]-6-äthylpyrimidin (27), aus 2,4,6-Trimethoxybenzylaminhydrochlorid, (ermittelt: M&spplus; 454. C&sub2;&sub2;H&sub2;&sub6;N&sub6;O&sub5; erfordert ein Molekulargewicht (M.W.) von 454).

Beispiel 29

2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-{N-[4-fluorbenzyl]-N-methylamino}-3-nitrophenyl)pyrimidin (29)

Diese Verbindung wurde aus 4-Fluor-N-methylbenzylamin hergestellt, die wiederum aus 4-Fluor-N-methylbenzamid hergestellt wurde. Praktische Einzelheiten werden wie folgt angegeben:
4-Fluorbenzoylchlorid (25 g) wurde tropfenweise einer gerührten wässerigen Lösung aus Methylamin (40 % Gewichtsteil (w/v); 250 ml) bei 0ºC über 30 Minuten zugegeben. Die Mischung wurde 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, auf das halbe Volumen konzentriert, und der sich ergebende kristalline Niederschlag wurde gesammelt und aus Wasser rekristallisiert, so daß sich N-Methylbenzamid als farblose Nadeln ergab (24,1 g; 89,1 %), Schmelzpunkt 131º bis 132ºC.
Einer gerührten Lösung aus Lithiumaluminiumhydrid (10 g) in trockenem Tetrahydrofuran (250 ml) wurde eine Lösung aus 4-Fluor-N-methylbenzamid (21,6 g) in trockenem Tetrahydrofuran (150 ml) tropfenweise über eine Stunde bei Raumtemperatur zugegeben. Als dich die Aufwallung gesenkt hatte, wurde die Mischung für 24 Stunden mäßig am Rückfluß erhitzt, als die Dünnschichtchromatographie (Tlc)-Analyse die Abwesenheit der Anfangssubstanzen anzeigte. Nach dem Kühlen der Mischung wurde Wasser (10 ml) vorsichtig über 2 Stunden, gefolgt von 2-molarer Natriumhydroxid-Lösung (30 ml), und schließlich Wasser (10 ml) zugegeben, woraufhin die Suspension für weitere 30 Minuten gerührt wurde. Feststoffe wurden mittels Filtration durch Infusorienerde entfernt. Das Filtrat wurde unter Vakuum bis zur Trockene verdampft. Der Rückstand wurde in Äthylazetat (200 ml) erheut aufgelöst und über Natriumsulfat getrocknet. Ein Entfernen des Äthylazetats ergab das N- Methylbenzylamin-Produkt in Form eines schwach gelben Öls (14,3 g; 72,6 %), welches ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Nitropyrimethamin (2 g) wurde einer Lösung aus dem oben erwähnten 4-Fluor-N-methylbenzylamin (5 g) in Äthylglykol (5 ml) zugegeben. Die Mischung wurde bei 160ºC (Ölbadtemperatur) 12 Stunden gerührt, als die Dünnschichtchromatographie-Analyse die Produktbildung bestätigte. Die orangefarbene Mischung wurde gekühlt, in Diäthyläther (100 ml) gegossen und bei 4ºC 12 Stunden lang stehen gelassen, wonach der sich ablagernde orangefarbene Feststoff gesammelt und mit Äther (3 x 100 ml), anschließend mit Wasser (2 x 100 ml) gewaschen würde, um ein gelbes Pulver (1,5 g; 55,6 %) zu erzeugen.
Die erhaltene freie Base des Fluorbenzylpyrimidins wurde zu dem entsprechenden Äthansulfonatsalz wie folgt umgewandelt: Äthansulfonsäure (0,24 g) wurde tropfenweise einer Suspension der freien Base (0,8 g) in Wasser (10 ml) zugegeben. Die Mischung wurde bis zum Sieden erwärmt, woraufhin die Auflösung eintrat. Der sich beim Kühlen ablagernde gelbe Feststoff wurde gesammelt und zweimal aus Wasser rekristallisiert, so daß sich das Äthansulfonatsalz als orangefarbenes Pulver (0,46 g; 45 %) ergab.
(Ermittelt: C 52,07; H 5,52; F 3,90; N 17,21 %. C&sub2;&sub2;H&sub2;&sub7;FN&sub6;O&sub5;S erfordert C 52,17; H 5,34; F 3,75; N 16,60 %).
Verbindungen der zuvor angegebenen Beispiele wurden zum Gegenstand von Untersuchungen zur DHFR-Inhibierung, Antitumorwirksamkeit gegen die P388-Leukämie und das M5076- Retothel-Sarkom bei Mäusen sowie von Untersuchungen zur Zytotoxizität gegen L1210-Zellen in vitro gemacht. Die Ergebnisse einiger dieser Untersuchungen sind in Tabellen I bi VII gezeigt. Die nachstehenden Verfahren und Substanzen wurden verwendet:

A. Verbindungsauflösung

Inhibitor-Lösungen wurden auf Vorrat durch Auflösen der geeigneten Verbindung in Wasser, 0,1 molarer (M-) Salzsäure oder Äthanol mit einer Endkonzentration von 1 x 10&supmin;³ Mol hergestellt. Wo Schwierigkeiten beim Auflösen der Verbindung auftraten, wurde die Mischung in einem Wasserbad auf 40ºC vor der Verdünnung auf das erforderliche Volumen erwärmt. Alle Lösungen wurden am Tag vor dem Versuch hergestellt und vor der Verwendung im Dunkeln bei 4ºC gelagert.
Die Vorratslösungen wurden, falls nötig, unmittelbar vor der Verwendung verdünnt, um die erforderliche Inhibitor- Konzentration herzustellen. Bei der nachfolgenden weiteren Verdünnung in der Endreaktionsmischung betrugen die höchsten Lösungsmittelkonzentrationen jeweils 5 x 10&supmin;³ Mol und 1,1 x 10² Mol für Salzsäure bzw. Äthanol. Bei diesen Lösungsmittelkonzentrationen wurde kein Einfluß auf die DHFR- Wirksamkeit beobachtet.

B. DHFR-Untersuchungen

B.1 Herstellen teilweise reiner DHFR

Teilweise reine Enzyme wurden nach dem Verfahren von J.R. Bertino und G.A. Fischer (Meth. Med. Res., 1964, 10, 297) wie folgt hergestellt: Zwei männliche Wistar-Ratten wurden getötet, und die Lebern wurden schnell entfernt und mit Wasser gewaschen, um Blut zu entfernen. Alle weiteren Arbeiten wurden bei 4ºC durchgeführt: Die Lebern (30,7 g) wurden zu einer Waring-Mischpumpe überbracht, welcher ungefähr 8 Volumen Wasser zugeführt wurden (Endvolumen ca. 300 ml) woraufhin die Mischung 2 Minuten lang für Zeiträume von 30 s homogenisiert wurde, wobei zwischen jedem Lauf 30 s lagen, um die Erwärmung möglichst gering zu halten. Das Leberhomogenat wurde bei etwa 20.000 g 20 Minuten lang zentrifugiert. Die Tablette wurde weggeworfen. Die überstehende Flüssigkeit wurde mit verdünnter Essigsäure (anfangs 1,0 molar und schließlich 0,1 molar) auf einen pH-Wert von 5,1 eingestellt. Nach einer Zentrifugierung bei 27.000 g für weitere 20 Minuten wurde die klare, weinrote Lösung zu einer Visking-Rohrleitung (2,5 cm Durchmesser) überbracht und 12 Stunden lang gegen eine 0,01 Natriumazetat-Pufferlösung dialysiert. Das Dialysat wurde untersucht und, falls es trübe war, erneut bei 27.000 g 20 Minuten lang zentrifugiert. Das klare Präparat wurde in sterile, kunststoffverschlossene Röhrchen (10 ml) gefüllt und vor der Verwendung bei -10ºC gelagert. Auf diese Weise gefriergelagerte Enzympräparate zeigten nach 12 Monaten keine bedeutende Abnahme an DHFR-Wirksamkeit.

B.2 Herstellung von Reagens-Lösungen

Eine 0,15 molare Phosphat-Pufferlösung (pH-Wert 7,0) wurde für alle DHFR-Versuche verwendet und hergestellt, indem Kaliumhydrogenorthophosphat (10,21 g) in Wasser (ca. 300 ml) gelöst, die Lösung auf einen pH-Wert von 7,0 mit Kaliumhydroxid eingestellt und mit Wasser auf 500 ml verdünnt wurde. Die Pufferlösung wurde auf 4ºC gehalten, um ein Bakterienwachstum zu verhindern, und nach 3 Tagen weggeschüttet.
Eine 2-Merkaptoäthanol-Lösung (0,25 molar) wurde durch Lösen von 2-Merkaptoäthanol (1,75 ml) in Wasser (zu 100 ml) hergestellt. Die Lösung wurde vor der Verwendung im Dunkeln bei 4ºC gelagert.
Eine Dihydrofolat-Lösung (1 mg ml&supmin;¹, 2 mMol) wurde unmittelbar vor der Verwendung durch Suspendieren des Dihydrofolats in 0,23 molarer 2-Merkaptoäthanol-Lösung und unter tropfenweisem Hinzufügen einer einmolaren Natriumhydroxid- Lösung unter heftigem Umrühren hergestellt, bis die Auflösung eintrat. Die Lösung wurde bei 0ºC gehalten.
Eine wässerige Lösung aus NADPH (2 mg ml&supmin;¹, 2 mMol) wurde unmittelbar vor der Verwendung hergestellt und ebenfalls bei 0ºC gehalten.

B.3 Untersuchung zu der Inhibitor-Wirksamkeit

Die spektralphotometrische Untersuchung wurde mit einem Cary Modell 16KC Spektralphotometer durchgeführt, das mit einem thermostatisierten, rotierenden Zellfach zum Aufnehmen von 5 Proben und 5 Vergleichscuvetten ausgestattet ist. Die Reaktionsgeschwindigkeiten wurden mit einem Schreibgerät des Typs Varian Model G2500 bei einer Registriergeschwindigkeit von 1 cm min&supmin;¹ und einem vollen Endausschlag von 0,1 Absorptionseinheiten aufgezeichnet. Die Cuvetten wurden in Zeitintervallen von 10 s fortlaufend abgelesen. Es wurden ausschließlich Einwegcuvetten aus Kunststoff verwendet.
Die Untersuchung wurde wie folgt durchgeführt:
NADPH (0,1 ml) und das Enzympräparat (0,1 ml) wurden bei 30ºC für 5 Minuten in einer Phosphat-Pufferlösung (Gesamtvolumen 1,9 ml) inkubiert. Die Reaktion wurde durch die Zugabe von Dihydrofolat (0,1 ml) eingeleitet und durch ein Verfolgen der Absorptionsabnahme bei 340 nm überwacht. Parallelversuche wurden durchgeführt, bei denen die Reaktionsmischung 0,1 ml an Inhibitor bei der benötigten Konzentration enthielt und das Puffervolumen entsprechend eingestellt wurde, so daß sich ein Endvolumen von 2 ml nach der Zugabe des Dihydrofolats ergab.
Vergleichscuvetten wurden aufgestellt, welche NADPH, eine Pufferlösung, falls erforderlich einen Inhibitor und Dihydrofolat, jedoch keine Enzyme (Tabelle A) enthielt. TABELLE A DHFR Untersuchung: Volumen der verwendeten Reagenzien, des Inhibitors und Enzyms Art der Untersuchung Enzym (ml) Pufferlösung (ml) Inhibitorb (ml) Dihydrofolatc (ml) Endvolumen (ml) Ungehemmte Enzyme Vergleich Gehemmte Enzyme a 1 x 10&supmin;&sup4; Mol Endkonzentration (sättigend) b Die starke Färbung mehrerer Inhibitoren machte die Verwendung einer Vergleichscuvette notwendig c 1 x 10&supmin;&sup4; Mol Endkonzentration
Die Enzym-Wirksamkeit wurde aus der Neigung der Absorptionsänderung mit der Zeit abgeschätzt und willkürlich zu 100 % für die nicht gehemmten Enzyme festgelegt. Die beobachtete Abnahme in der Wirksamkeit in Gegenwart des Inhibitors wurde in % der Wirksamkeit des nichtgehemmten Enzyms ausgedrückt.
Die Wirksamkeit gegenüber DHFR wurde anfangs zweifach bei einer End-Inhibitor-Konzentration von 2,5 x 10&supmin;&sup5; Mol gemessen. Verbindungen, die bei dieser Konzentration eine Hemmung von weniger als 50% erzeugten, wurden als unwirksam betrachtet. Die verbleibenden Inhibitoren wurden für I&sub5;&sub0; Bestimmungen ausgewählt. Die inhibitorische Wirksamkeit wurde zweifach wenigstens aus vier Inhibitor-Konzentrationen ermittelt, woraus der I&sub5;&sub0;-Wert durch ein grafisches Verfahren bestimmt wurde.
Für Bestimmungen der Inhibitions-Konstante (KI) ausgewählter Verbindungen wurden nach einem identischen, wie zuvor beschriebenen Verfahren mit der Ausnahme untersucht, daß die inhibitorische Wirksamkeit zweifach zumindest aus zehn Inhibitor-Konzentrationen ermittelt wurde, aus denen die passenden KI-Werte durch eine Zone B-Analyse ermittelt wurden. Ein Km-Wert von 0,2 uMol für Dihydrofolat (S.Webber und J.M. Whiteley, Arch, Biochem. Biophys., 1985, 236 681) wurde für die Berechnung von KI angenommen.
Einige Ergebnisse sind in Tabellen I und II gezeigt. TABELLE I Rattenleber DHFRa-Hemmung Lösungsmittel Methylamino Dimethylamino Äthylamino -Butylamino Benzylamino N-Methylbenzylamino N-Äthylbenzylamino (±)α-Methylbenzylamino Dibenzylamino Phenyläthylamino Metoprin Lösungsmittel: A = Wasser, B = 0,1 molare Salzsäure, C = Äthanol, a Unter identischen Versuchsbedingungen ergab MTX einen I&sub5;&sub0;-Wert von 0,0019 uMol. b Als Äthansulfonatsalze getestete Verbindungen. TABELLE II Kinetische Daten ausgewählter Diaminopyrimidin DHFR-Inhibitoren gegen Rattenleber DHFR -Butylaminob -Butoxy N-Methylbenzylamino N-Äthylbenzylamino Metoprin a 95% Vertrauensgrenzen b als Äthansulfonatsalz getestet.

In vitro zytotoxische Untersuchungen

Kulturen von L1210 murinen (mäuse-rattenartig) Leukämiezellen entstanden als Suspension im RPMl 1640 Medium (mit 25 mMol Hepes und L-Glutamin) und 10 % Pferdserum (horse serum) (Gibco Ltd., Paisley, Scotland). Die Zellen wurden alle 72 Stunden bei 10&sup4; Zellen x ml&supmin;¹ laufend geimpft und bei 10&sup6; Zellen x ml&supmin;¹ vor jedem Experiment gezählt, wobei die Zählungen nach der Inkubation (5% CO&sub2; in der Luft bei 100% Feuchtigkeit) für 72 Stunden bei 37ºC mit der passenden Medikamentenkonzentration durchgeführt wurden. Normalerweise wurden die Inkubationen zweifach ausgeführt. Die Zunahme der Zellzahl in Gegenwart des Inhibitors nach 72 Stunden wurde in Prozent der Kontrollzellzählung ausgedrückt. Einige Ergebnisse sind in Tabelle III gezeigt. Weitere Ergebnisse sind in Tabelle IV dargestellt. TABELLE III Zytotoxizität ausgewählter Diaminopyrimidine gegen L1210- Zellen in vitro n-Butylamino Benzylamino a Erforderliche Medikamentenkonzentration, um die Zellzählung bei 72 Stunden auf 50% der Kontrollzählung zu verringern. TABELLE IV In vitro Wirksamkeit des neuen Diaminopyrimidins gegen Rattenleber-Dihydrofolatreduktase und L1210-Zellen Verbindung Metoprin

Antitumor-Untersuchung

Die Ergebnisse der in vivo Voruntersuchungen gegen die P388- Lymphozyten-Leukämie bei Mäusen sind in der nachstehenden Tabelle V gezeigt. TABELLE V Antitumor-Wirksamkeit für Diaminopyrimidine gegen die P388-Leukämiea Optimale Dosis (mg.kg&supmin;¹) Optimumb T/C (%) NCI Status Methylamino Dimethylamino n-Butylamino Benzylamino N-Methylbenzylamino N-Äthylbenzylamino (±)α-Methylbenzylamino Phenyläthylamino Metoprin a Alle Komponenten wurden den Mäusen als freie Basen via intraperitonalem Applikationsweg gemäß den NCI-Protokollen verabreicht.
Die Ergebnisse der in vivo Voruntersuchungen der Verbindungen (19), (20), (23), (25) und (28) gegen das M5076 Retikulumzellen-Sarkom bei Mäusen sind an Hand weiterer Beispiele 5 in den Tabellen VI bis X dargestellt. TABELLE VI In vivo Wirksamkeit der Verbindung (19) gegen das M5076- Retikulumzellen-Sarkom bei Mäusen. Tumor: Intramuskulär eingesetzt am Tag 1 Medikament: in 10% Dimethylsulfoxid (DMSO)/Arachisöl, täglich 17 Tage lang intraperitonal verabreicht. Dosis (mg/kg/Tag) Tumorvolumen (mm³) : Tage nach der Tumorimplantation Kontrolle * Test/Kontrolle festgestellt am Tag 24 NM = nicht meßbar TABELLE VII In vivo Wirksamkeit der Verbindung (20) gegen das M5076- Retikulumzellen-Sarkom bei Mäusen. Einzelheiten des Tumors und der Medikamentenverabreichung siehe Angaben bei Verbindung (19). Dosis (mg/kg/Tag) Tumorvolumen (mm³): Tage nach der Tumorimplantation Kontrolle TABELLE VIII In vivo Wirksamkeit der Verbindung (23) gegen das M5076- Retikulumzellen-Sarkom bei Mäusen. Einzelheiten des Tumors und der Medikamentenverabreichung siehe Angaben bei Verbindung (19). Dosis (mg/kg/Tag) Tumorvolumen (mm³): Tage nach der Tumorimplantation Kontrolle TABELLE IX In vivo Wirksamkeit der Verbindung (25) gegen das M5076- Retikulumzellen-Sarkom bei Mäusen. Einzelheiten des Tumors und der Medikamentenverabreichung siehe Angaben bei Verbindung (19). Dosis (mg/kg/Tag) Tumorvolumen (mm³): Tage nach der Tumorimplantation Kontrolle TABELLE X In vivo Wirksamkeit der Verbindung (28) gegen das M5076- Retikulumzellen-Sarkom bei Mäusen. Einzelheiten des Tumors und der Medikamentenverabreichung siehe Angaben bei Verbindung (19). Dosis (mg/kg/Tag) Tumorvolumen (mm³): Tage nach der Tumorimplantation Kontrolle

Claims

1. Verbindung für die Anwendung in der Therapie, gekennzeichnet durch nachstehende Strukturformel (I)

entweder in Form der freien Base oder in Form eines Säureadditionssalzes, wobei:

R¹ steht für eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkoxygruppe,

eine Arylalkoxygruppe wie etwa eine Benzyloxygruppe, oder für eine substituierte Aminogruppe -NR&sub1;R&sub2;, wobei

R&sub1; und R&sub2; unabhängig voneinander stehen für:

Wasserstoff,

eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppe, oder für eine Arylalkoxygruppe mit einem C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylrest, mit der Maßgabe, daß R&sub1; und R&sub2; nicht gleichzeitig Wasserstoff sind;

R² steht für eine Nitrogruppe; und

R³ steht für eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppe.

2. Verbindung nach Anspruch 1 für die Anwendung als wirksame therapeutische Substanz, wobei

R¹ steht für -OMe, -OEt oder -OBun.

3. Verbindung nach Anspruch 1 für die Anwendung als wirksame therapeutische Substanz, wobei

R¹ steht für -NHMe, -NHEt, -NHBu-, -NHCH&sub2;CH&sub2;Ph, -NHCH&sub2;Ph, -NMeCH&sub2;Ph, -N(CH&sub2;Ph)&sub2;, -NEtCH&sub2;Ph oder -NHCH(Me)Ph.

4. Verbindung nach Anspruch 1 für die Anwendung als wirksame therapeutische Substanz, wobei R¹ steht für -NR&sub1;R&sub2; und

R&sub1; steht für Wasserstoff oder eine Alkylgruppe;

R&sub2; steht für eine Arylalkylgruppe mit der Strukturformel (IB)

wobei R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; unabhängig voneinander stehen für:

Wasserstoff;

eine Alkylgruppe;

eine Alkoxygruppe;

eine Halogengruppe;

eine Nitrogruppe;

eine Perfluoralkylgruppe;

-CO&sub2;Ra, wobei Ra steht für

Wasserstoff,

eine Alkylgruppe oder eine Alkoxyalkylgruppe; oder

-CONRbRc, wobei Rb und Rc jeweils für eine Alkylgruppe stehen, entweder identisch oder unterschiedlich sind oder wobei entweder Rb oder Rc für Wasserstoff stehen und die jeweils andere Komponente für eine Alkylgruppe steht,

und wobei Alkylgruppen, wenn sie als solche oder in anderen Gruppen, wie etwa in Alkoxygruppen vorliegen, 1 bis 6 C-Atome aufweisen.

5. Verbindung, gekennzeichnet durch die nachstehende Strukturformel (I):

entweder in Form der freien Base oder eines Säureadditionssalzes, wobei:

R¹ steht für eine Arylalkoxygruppe wie etwa eine Benzyloxygruppe oder für eine substituierte Aminogruppe -NR&sub1;R&sub2;, wobei

R&sub1; und R&sub2; unabhängig voneinander stehen für

Wasserstoff,

eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppe oder für eine Arylalkylgruppe mit einem C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylrest,

mit der Maßgabe, daß R&sub1; und R&sub2; nicht gleichzeitig Wasserstoff sind;

R² steht für eine Nitrogruppe; und

R³ steht für eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppe.

6. Verbindung nach Anspruch 5, wobei

R¹ steht für -NHMe, -NHEt, -NHBun, -NHCH&sub2;CH&sub2;Ph, -NHCH&sub2;Ph, -NMeCH&sub2;Ph, -N(CH&sub2;Ph)&sub2;, -NEtCH&sub2;Ph oder -NHCH(Me)Ph.

7. Verbindung der Formal (IA) oder eines Sa-ureadditionssalzes:

dadurch gekennzeichnet , daß: n steht für 1-6; R¹ steht für Wasserstoff oder eine Alkylgruppe; R&sup4;, R&sup5; und R&sup6;, die identisch oder unterschiedlich sein können, stehen jeweils für Wasserstoff, eine Alkyl-, Alkoxy-, Halogen-, Nitro-, Perfluoralkyl-Gruppe, eine Gruppe der Formel -CO&sub2;Ra wobei Ra steht für Wasserstoff, eine Alkyl- oder Alkoxygruppe, oder eine Gruppe der Formel -CONRbRc, wobei Rb und Rc identisch oder unterschiedlich sein können und jeweils für eine Alkylgruppe stehen, oder wobei entweder Rb oder Rc Wasserstoff ist und die jeweils andere Komponente für eine Alkylgruppe steht; und

R³ für eine Alkylgruppe steht; und

die Alkylgruppen, wenn sie als solche oder als Rest in anderen Gruppen, wie etwa einer Alkoxygruppe auftreten, 1-6 C-Atome aufweisen.

8. Verbindung nach Anspruch 4 oder 7, gekennzeichnet durch wenigstens eine der nachfolgenden Bedingungen:

(a) Wenigstens einige der Alkylgruppen, wenn sie als solche oder als Rest in anderen Gruppen, wie etwa einer Alkoxygruppe auftreten, sind Methyl- oder Äthylgruppen;

(b) R&sub1; steht für Wasserstoff, eine Methyl- oder Äthylgruppe;

(c) In dem Fall, daß zwei der Gruppen oder Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; jeweils Wasserstoff sind, befinden sich die dritte Gruppe oder das Radikal, welche einen Substituenten an dem aromatischen Ring mit Ausnahme von Wasserstoff darstellt, in der 4-(para)-Stellung;

(d) Wenn sie vorliegen, sind Halogen-Substituenten Fluor oder Chlor;

(e) Wenn es vorliegt, ist Perfluoralkyl aus 1-4 C-Atomen zusammengesetzt;

(f) Eines der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für -CO&sub2;Ra und die anderen zwei Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; stehen jeweils für Wasserstoff;

(g) wenigstens eine der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für -CO&sub2;H, und die Verbindung liegt in Form eines Hydrats oder anderen Additionsproduktes vor;

(h) Wenigstens eines der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für -CO&sub2;Me oder für -CO&sub2;Et;

(i) Wenigstens eines der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für -CO&sub2;(CH&sub2;)x-ORd, wobei x für 1 oder 2 und Rd für

x für 1 oder 2 und

Rd für eine C&sub1;&submin;&sub4;-Alkylgruppe steht;

(j) Wenigstens eines der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für -CO&sub2;CH&sub2;CH&sub2;OEt;

(k) Wenigstens eines der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für -CONRbRc, wobei

Rb oder Rc für Wasserstoff stehen und die jeweils andere Komponente Rb oder Rc für eine C&sub1;&submin;&sub4;-Alkylgruppe steht;

(l) Wenigstens eines der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für -CONRbRc und n ist 1;

(m) Wenigstens eines der Rakikale R&sub1;, R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für eine andere Komponente als Wasserstoff;

(n) Wenigstens eines der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für etwas Anderes als Wasserstoff;

(o) Wenigstens zwei der Radikale R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; steht für Chlor.

9. Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei R³ für eine Methyl- oder Äthylgruppe steht.

10. Verbindung der Formel (IA):

entweder in Form der freien Base oder eines Säureadditionssalzes oder in Form des Hydrats, dadurch gekennzeichnet, daß die Substituenten einer der folgenden Bedingungen entsprechen:

11. Verbindung nach Anspruch 5 oder 7, welche für eine der nachstehenden Stoffe steht:

(1) 2,4-Diamino-5-(4-methylamino-3-nitrophenyl)-6- äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(2) 2,4-Diamino-5-(4-äthylamino-3-nitrophenyl)-6- äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(3) 2,4-Diamino-5-(4-dimethylamino-3-nitrophenyl)-6- äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(4) 2,4-Diamino-5-(4-n-butylamino-3-nitrophenyl)-6- äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(5) 2,4-Diamino-5-(4-benzylamino-3-nitrophenyl)-6- äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(6) 2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-N-methylbenzylamino-3- nitrophenyl)pyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(7) 2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-N-äthylbenzylamino-3- nitrophenyl)pyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(8) 2,4-Diamino-5-(4-dibenzylamino-3-nitrophenyl)-6- äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(9) 2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-(±)α-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)pyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(10) 2,4Diamino-6-äthyl-5-(3-nitro-4-phenyläthylaminophenyl)pyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(11) 2,4-Diamino-5-(4-N-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)-6-methylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(12) 2,4-Diamino-5-(4-N-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)-6-methylpyrimidinäthansulfonatsalz;

(13) 2,4-Diamino-5-(4-N-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(14) 2,4-Diamino-5-(4-N-methylbenzylamino-3-nitrophenyl)-6-äthylpyrimidinäthansulfonatsalz;

(15) 2,4-Diamino-6-äthyl-5-{4-[N-(4-methoxycarbonylbenzyl)-N-methylamino]-3-nitrophenyl}pyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(16) 2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-{N-[4-(2-äthoxyäthoxy) carbonylbenzyl]-N-methylamino}-3-nitrophenylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(17) 2,4-Diamino-6-äthyl-5-{4-[N-(4-methoxybenzyl)-N- methylamino]-3-nitrophenyl}pyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(18) 2,4-Diamino-6-äthyl-5-{4-[N-(4-methoxybenzyl) amino]-3-nitrophenyl}pyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(19) 2,4-Diamino-6-äthyl-s-(4-{N-[4-(N-methylcarbamoyl) benzyl]-N-methylamino}-3-nitrophenyl)pyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(20) 2,4-Diamino-6-äthyl-5-{4-[N-(4-carboxybenzyl)-N- methylamino]-3-nitrophenyl}pyrimidinmonohydrat;

(21) 2,4-Diamino-5-[4-(2-chlorbenzylamino)-3-nitrophenyl]-6-äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(22) 2,4-Diamino-5-[4-(4-chlorbenzylamino)-3-nitrophenyl]-6-äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(23) 2,4-Diamino-5-[4-(3,4-dichlorbenzylamino)-3- nitrophenyl]-6-äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(24) 2,4-Diamino-5-[4-(4-fluorbenzylamino)-3-nitrophenyl]-6-äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(25) 2,4-Diamino-5-[4-(4-methylbenzylamino)-3-nitrophenyl]-6-äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(26) 2,4-Diamino-5-[4-(3,4-dimethoxybenzylamino)-3- nitropheny4-6-äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(27) 2,4-Diamino-5-[4-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)nitrophenyl]-6-äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(28) 2,4-Diamino-5-[3-nitro-4-(4-trifluormethylbenzylamino)phenyl]-6-äthylpyrimidin oder eines Säureadditionssalzes;

(29) 2,4-Diamino-6-äthyl-5-(4-{N-[4-fluorbenzyl]-N- methylamino}-3-nitrophenyl)pyrimidin oder eines Säureadditionssalzes

12. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11, dadurch gekennzeichnet, daß sie ein Säureadditionssalz von einer Säure ausgewählt aus der nachstehenden Gruppe ist:

Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Isäthionsäure, Phosphorsäure, Maleinsäure, Salizylsäure, p-Toluolsulfonsäure, Weinsteinsäure, Zitronensäure, Laktobionsäure, Ameisensäure, Malonsäure, Pantothensäure, Bernsteinsäure, Naphtalin-2-sulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Methansulfonsäure und Äthansulfonsäure.

13. Verfahren zum Herstellen einer Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei R¹ eine mono- oder disubstituierte Aminogruppe -NR&sub1;R&sub2; darstellt, bei welcher R&sub1; und R&sub2; unabhängig voneinander stehen für Wasserstoff, eine C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppe oder eine Arylalkylgruppe mit einem C&sub1;&submin;&sub6;-A1kylrest, mit der Maßgabe, daß R&sub1; und R&sub2; nicht gleichzeitig Wasserstoff sind, dadurch gekennzeichnet, daß das Verfahren den Schritt einer Nitropyrimethamin-Behandlung, d.h. einer Verbindung der Formel (IC):

mit einer Verbindung der Formel R&sub1;R&sub2;NH umfaßt.

14. Verfahren nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, daß die bei der Behandlung des Nitropyrimethamins (IC) mit der Verbindung R&sub1;R&sub2;HN auftretende Reaktion unter Abwesenheit eines zusätzlichen Lösungsmittels, aber unter Anwendung von Wärme durchgeführt wird.

15. Verfahren zum Herstellen einer Verbindung nach Anspruch 4, 7 oder 8, dadurch gekennzeichnet, daß es den Schritt einer Nitropyrimethamin-Behandlung, d.h. einer Verbindung der Formel (IC):

mit einer Verbindung der Formel (ID):

umfaßt, wobei n, R¹, R&sup4;, R&sup5; und R&sup6; wie zuvor definiert sind und die auftretende Reaktion in einem polaren Lösungsmittel unter Anwendung von Wärme durchgeführt wird.

16. Verfahren nach Anspruch 13 oder 15, wobei die Verbindung R&sub1;R&sub2;NH oder die Verbindung der Formel (ID) ein Benzylamin darstellt, das wiederum durch Reduktion des entsprechenden Benzylamids durch Behandlung mit einem Hydrid hergestellt wird.

17. Verfahren nach Anspruch 16, wobei das Hydrid Lithiumaluminiumhydrid ist.

18. Verfahren nach Anspruch 16 oder 17, wobei das Benzylamid durch Reaktion eines Benzoylchlorids mit einem Alkylamin hergestellt wird.

19. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 12, für die therapeutische Anwendung als Antitumormittel, Antipsoriasis-, antibakterielles Mittel oder Antitrypanosomen- oder Antimalariamittel bei der Behandlung von Säugern.

20. Verbindung nach Anspruch 19 in der Form eines pharmakologisch und pharmazeutisch zulässigen Säureadditionssalzes.

21. Verbindung nach Anspruch 19 oder 20 in Form einer Einheitsdosierung hergestellt zur Verabreichung an Säuger.

22. Verbindung nach Anspruch 19 oder 20 in Kombination mit einem pharmazeutisch zulässigen Trägerstoff oder Arzneimittelträger.

23. Pharmazeutische Zubereitungsform für die medizinische Anwendung, umfassend als die wirksame Verbindung eine Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 12 in der Form der freien Base oder eines pharmazeutisch zulässigen Säureadditionssalzes zusammen mit einem pharmazeutisch zulässigen Trägerstoff dafür.

24. Verfahren zum Herstellen einer pharmazeutischen Zubereitungsform, wie sie in Anspruch 23 angegeben ist, wobei das Verfahren den Schritt des Zusammenbringens der wirksamen Komponente mit dem Trägerstoff umfaßt, welcher einen oder mehrere Zusatzstoffe enthält.

25. Medizinisches Präparat enthaltend eine therapeutisch wirksame nicht toxische Menge einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 12 und einen pharmazeutischen Träger.

26. Pharmazeutisches Präparat in Form einer Dosierungseinheit zur Verabreichung zum Erzielen einer therapeutischen Wirkung als ein Antitumor-, Antripsoriasis-Mittel, antibakterielles Mittel, Antitrypanosomen- oder Antimalariamittel zur Behandlung von Säugern, umfassend pro Dosierungseinheit eine therapeutisch wirksame nicht toxische Menge einer Komponente gemäß einem der Ansprüche 1 bis 12.

27. Pharmazeutische Zusammensetzung für die Anwendung in der Antitumor-, Antipsoriasis-Therapie- antibakteriellen Therapie, Antritrypanosomen- oder Antimalaria-Therapie, welche eine wirksame Antitumor-, Antipsoriasis-, antibakterielle, Antitrypanosomen oder Antimalaria-Menge der Verbindung oder des Salzes nach einem der Ansprüche 1 bis 12 umfaßt.

28. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 12 zur Herstellung eines medizinischen Präparates für die Behandlung von Tumoren, der Psoriasis, bakterieller, Malaria- und/oder Trypanosomen-Infekte bei Säugern.