DE3587969T2 - Testverfahren zum nachweis von menschlichem lymphotropischem virus. - Google Patents
Testverfahren zum nachweis von menschlichem lymphotropischem virus.Info
- Publication number
- DE3587969T2 DE3587969T2 DE3587969T DE3587969T DE3587969T2 DE 3587969 T2 DE3587969 T2 DE 3587969T2 DE 3587969 T DE3587969 T DE 3587969T DE 3587969 T DE3587969 T DE 3587969T DE 3587969 T2 DE3587969 T2 DE 3587969T2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- glycoprotein
- iii
- htlv
- daltons
- human
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title abstract description 14
- 238000010998 test method Methods 0.000 title description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims abstract description 60
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims abstract description 60
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 35
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 13
- 241000598436 Human T-cell lymphotropic virus Species 0.000 claims description 8
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 claims description 5
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 claims description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 3
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 claims 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 6
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 abstract description 2
- 208000000389 T-cell leukemia Diseases 0.000 abstract 2
- 208000028530 T-cell lymphoblastic leukemia/lymphoma Diseases 0.000 abstract 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 17
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 17
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 17
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 16
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 15
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 10
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 7
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 6
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 6
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 5
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000000211 autoradiogram Methods 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 230000000652 homosexual effect Effects 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 102100034349 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 2
- YJQCOFNZVFGCAF-UHFFFAOYSA-N Tunicamycin II Natural products O1C(CC(O)C2C(C(O)C(O2)N2C(NC(=O)C=C2)=O)O)C(O)C(O)C(NC(=O)C=CCCCCCCCCC(C)C)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1NC(C)=O YJQCOFNZVFGCAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000002967 competitive immunoassay Methods 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- MURGITYSBWUQTI-UHFFFAOYSA-N fluorescin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C1C2=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C21 MURGITYSBWUQTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- ZHSGGJXRNHWHRS-VIDYELAYSA-N tunicamycin Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@@H](O)[C@@H](CC(O)[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C=C2)=O)O)O1)O)NC(=O)/C=C/CC(C)C)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1NC(C)=O ZHSGGJXRNHWHRS-VIDYELAYSA-N 0.000 description 2
- MEYZYGMYMLNUHJ-UHFFFAOYSA-N tunicamycin Natural products CC(C)CCCCCCCCCC=CC(=O)NC1C(O)C(O)C(CC(O)C2OC(C(O)C2O)N3C=CC(=O)NC3=O)OC1OC4OC(CO)C(O)C(O)C4NC(=O)C MEYZYGMYMLNUHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100040510 Galectin-3-binding protein Human genes 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 1
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 241000609499 Palicourea Species 0.000 description 1
- 108010065081 Phosphorylase b Proteins 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 1
- 239000002543 antimycotic Substances 0.000 description 1
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 108010078428 env Gene Products Proteins 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000012133 immunoprecipitate Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 108010034897 lentil lectin Proteins 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- HOVAGTYPODGVJG-VEIUFWFVSA-N methyl alpha-D-mannoside Chemical compound CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O HOVAGTYPODGVJG-VEIUFWFVSA-N 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000003156 radioimmunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000013643 reference control Substances 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
- G01N33/56988—HIV or HTLV
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16111—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV env
- C12N2740/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/974—Aids related test
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/82—Proteins from microorganisms
- Y10S530/826—Viruses
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
- Die Erfindung betrifft neue und gereinigte Formen von Glykoproteinen, die in Zellen gefunden werden, die mit menschlichem lymphotropem T-Zell-Virus vom Typ III (HTLV- III) infiziert sind, und Tests, um in einer biologischen Probe das Vorhandensein von Antikörpern gegen die antigenen Determinanten, die auf dem Glykoprotein präsentiert werden, zu erkennen.
- Es wird vermutet, daß HTLV-III eine Schlüsselrolle bei der Pathogenese des erworbenen Immunschwächesyndroms (AIDS) spielt. Es wurde gezeigt, daß menschliche Patienten, die in ihrem Körper Antikörper gegen HTLV-III-infizierte Zellen enthalten, ersichtlich latent oder manifest mit dem Virus infiziert sind.
- Gemäß der EP-A-0 201 540 ist ein Glykoprotein bekannt, das ein Molekulargewicht von naherungsweise 90.000 Daltons in der nicht-glykolisierten Form und 110.000 Dalton in der glykolisierten Form aufweist. Dieses Glykoprotein kann aus einem Lysat eines lymphadenopathischen Retrovirus enthalten werden, der Antigene aufweist, die in vitro durch ein Serum von Patienten selektiv erkannt werden, die mit AIDS infiziert sind, oder mittels eines Serums eines nicht symptomatischen Trägers für das AIDS- Virus. Ferner kann dieses Glykoprotein aus Kulturen von T- Lymphozyten erhalten werden, die mit HTLV-III infiziert sind sowie aus HTLV-III Präparationen.
- Es wurde herausgefunden, daß spezielle Polypeptide oder Glykoproteine, die in HTLV-III Virionen oder menschlichen Zellen enthalten sind, die mit HTLV-III und verwandten Viren infiziert sind, sobald sie gereinigt und isoliert sind, eine antigene Determinante oder Determinanten enthalten, die ein hohes Maß an Sensitivität und Immunospezifität für Antikörper gegen menschliche Zellen zeigen, die mit HTLV-III und verwandten Viren infiziert sind. Wenn wir entweder den Ausdruck "HTLV-III" oder den Ausdruck "HTLV-III" verwandte Viren" verwenden, so meinen wir damit aus Vereinfachungsgründen, daß damit sämtliche Viren umfaßt sind, die infolge serologischer, biochemischer und Molekularkriterien dem HTLV-III eng verwandt sind, einschließlich lymphadenopatischer assoziierter Viren (LAV) (siehe Barre-Sinoussi (1983) in Science 220: 859), ARV (siehe Sanchez-Pescador (1985) in Science 227: 484) und Aids Retrovirus (RV) (siehe Folks, (1985) Proc. Nat'l. Acad. Sci. 82 : 4539) und andere Formen, Untertypen und Varianten einschließlich des Simian-Virus. Die Ausdrücke "human T-cell lymphotrophic virus-III" und "human T-cell leukemia virus III" werden abwechselnd benutzt, obwohl die vorherige Ausdrucksweise bevorzugt ist.
- Folglich sind die im wesentlichen reinen Glykoproteine oder ihre unglykolisierten Teile als diagnostisches Werkzeug zum Testen biologischer Proben verwendbar, um zuvor oder eine laufende Infektion mit HTLV-III zu bestimmen. Andere Polypeptide, die immunologisch kreuzreagierende antigene Determinanten enthalten, sind für denselben Zweck ebenfalls verwendbar. Unter "Polypeptiden", die immunologisch querreaktive antigene Determinanten" enthalten, verstehen wir Polypeptide, die antigene Determinanten gemeinsam haben, mit denen ein gegebener Antikörper reagiert. Solche anderen Polypeptide umfassen den unglykolisierten Teil der Glykoproteine, chemisch synthetisierte Polypeptide und Polypeptide, die durch Organismen oder Zellen produziert werden, die durch rekombinante DNA-Techniken gentechnisch hergestellt sind. Sie umfassen auch Antikörper oder Fragmente hiervon, die anti-idiotypisch in Richtung auf die aktive Determinante oder Determinanten auf dem erfindungsgemäßen Glykoprotein sind. Es wurde auch gezeigt, daß anti-idiotypische Reagenzien als diagnostische Werkzeuge für die Erkennung von Antigen tragenden Stellen brauchbar sind, die mit jenen auf Antikörpern immunologisch kreuzreagieren (Potocnjak et al., Science 215 : 1637-1639 (1982)). Somit kann ein Test auf HTLV-III Infektion mit Hilfe eines an anti-idiotypischen oder immunologischen aktiven Fragments hiervon ausgeführt werden, das eine antigene Stelle oder Stellen trägt, die immunologisch ähnlich der antigenen Stelle oder den Stellen auf den erfindungsgemäßen Glykoproteinen sind. Solche anti-idiotypischen Antikörper können gegen die ersten Antikörper, die eine Spezifität gegen die antigenen Stellen auf den Glykoproteinen gemäß der Erfindung haben, eingesetzt werden (d. h. anti-idiotypische Antikörper sind Anti-Antikörper) Vorzugsweise werden monoklonale anti-idiotypische Antikörper verwendet.
- Die Erfindung umfaßt deswegen mm wesentlichen reines Glykoprotein mit einem Molekulargewicht von näherungsweise 160.000 Dalton, wovon näherungsweise 90.000 Dalton das Molekulargewicht des unglykolisierten Teils sind, wobei das Glykoprotein im wesentlichen gleich einem Hüll-Glykoprotein ist, das durch den größten offenen Leseraster in der 3'-Hälfte des für menschliche T-Zellen lymphotropischen Virus vom Typ III-Genom kodiert und von Zellen zu erhalten ist, die mit dem lymphotropen Virus vom Typ III für menschliche T-Zellen infiziert sind.
- Ein Test auf HTLV-III-Infektion ist wichtig, da der Virus leicht von den peripheren Blutleukozyten von Antikörper-positiven Menschen auf Leukozyten von Antikörpernegativen Menschen übertragen werden, wenn beide gemeinsam kultiviert werden. Popovic et al., Science, Vol. 219, 856- 859 (1983). Folglich scheint ein großes Infektionsrisiko bei Vollbluttransfusionen zu bestehen, wenn das übertragene Blut infizierte Zellen enthält. Der Test ist wichtig, weil biologische Proben von Personen, die die erworbene Immunschwäche (AIDS) zeigen, einen positiven Test für Antikörper gegen antigene Determinanten des neuen Glykoproteins liefern und somit die Diagnose dieser Krankheit erleichtern.
- Folglich umfaßt die Erfindung auch das Testverfahren von biologischen Proben auf das Vorhandensein von Antikörpern gegen HTLV-III-spezifische Glykoproteine mit den Schritten: 1) Inkubieren der Proben mit einem Polypeptid, das eine antigene Determinante oder Determinanten enthält, die mit denen eines Glykoproteins immunoligisch kreuz-reagieren, das ein Molekulargewicht von näherungsweise 160.000 Dalton (gp160) hat, wobei 90.000 Dalton der unglykolisierte Teil hiervon alle antigenen Determinanten des Glykoproteins trägt, das Glykoprotein ein Hüll-Glykoprotein ist, das durch den größten offenen Leseraster in der 3'-Hälfte des HTLV-III-Genoms kodiert ist und von Zellen zu erhalten ist, die mit HTLV-III infiziert sind; und 2) bestimmen, ob zwischen dem Antikörper und dem Polypeptid ein Immunokomplex gebildet wird oder nicht.
- Die Erfindung umfaßt außerdem ein Verfahren zum Testen einer biologischen Probe auf das Vorhandensein einer antigenen Determinante oder antigenen Determinanten, die mit den Determinanten des Glykoproteins mit einem Molekulargewicht von 160.000 Dalton immunologisch kreuzreagieren. Die zu untersuchenden Determinanten können auf dem erwähnten Glykoprotein selbst oder anderen Polypeptiden auftreten. Sie können in den Körperflüssigkeiten oder in Lymphozyten frei zirkulieren. Der Test kann durch bekannte Immunotestverfahren unter Verwendung von monoklonalen oder polyvalenten Antikörpern durchgeführt werden, die eine Immunreaktivität mit antigenen Determinanten haben, die auf den erwähnten Glykoproteinen auftreten. Beispielsweise können konkurrierende Immunotests oder immunometrische (sandwich) Tests verwendet werden. Immunoprezipitation, ELISA, oder Western Blot sind andere Beispiele für die Tests, die ausgeführt werden können.
- In der Zeichnung veranschaulicht Fig. 1 ein Autoradiogramm, das die spezifische Aktivitäten von gp120 und gp160 zeigt, wie sie durch Gelelektrophorese bestimmt sind.
- Fig. 2 zeigt ein Autoradiogramm, das die spezifische Aktivitäten von gp120 und gp160 zeigt, die durch Gelelektrophorese ermittelt sind.
- Fig. 3 zeigt ein Autoradiogramm, das die spezifische Aktivität von gp90 zeigt, wie sie durch Gelelektrophorese bestimmt ist.
- Fig. 4 zeigt ein Autoradiogramm von löslichen Zelllysaten, die mit Speichel reagiert haben.
- Fig. 5 zeigt eine Nukleotidsequenz und eine vorhergesagte Aminosäuresequenz für das aminoterminale Ende von gp160 und gp120.
- Das Glykoprotein der vorliegenden Erfindung weist ein Molekulargewicht von näherungsweise 160.000 Dalton auf, wie dies mit Hilfe von Natriumdodecylsulfat-Gelelektrophorese (SDS) bestimmt ist und ist in SDS-Puffer löslich, der 0,15 M Natriumchlorid, 0,05 M Tris Hydrochlorid, pH-Wert 7,2, 1% Triton X-100 (bei Triton handelt es sich um ein Warenzeichen), 1% Natriumdeoxicholat, 0,1% Natriumdodecylsulfat und 1 mM Phenylmethylsulfonylfluorid enthält. Triton X-100 ist ein nicht-ionisches Detergentium (Octylphenoxypolyethoxy (9-10) Ethanol). Der unglykolisierte Teil des 160.000 Dalton Glykoproteins hat ein Molekulargewicht von näherungsweise 90.000 Dalton und enthält im wesentlichen dieselbe antigene Determinante oder Determinanten wie das Glykoprotein selbst.
- Die Glykoproteine können von Zellen, die mit HTLV-III infiziert sind, erhalten werden; gp120 kann außerdem von HTLV-III-Virionen erhalten werden. Es wurde eine Varietät von Zellinien bereitet, die dauernd und fortwährend mit HTLV-III infiziert sind; unter diesen können HTLV-III infizierte H9-Zellen, NC37-Zellen, die mit dem lymphadenopathisch assoziierten Virus (LAV) infiziert sind, und Molt 3- und HUT 78-Zellen erwähnt werden, die mit frischen AIDS-Isolierungen infiziert sind.
- Es kann sein, daß die exakten Größen der neuen Glykoproteine in unterschiedlichen Linien geringfügig differieren; Jedoch sind die gemeinsamen immunologischen kreuzreaktiven Teile der Glykoproteine dieselben, unabhängig von der Zellinie, da es sich um Teile handelt, die durch HTLV-III kodiert sind. Somit kann jede Zelle, die den Virus beherbergt, eine geeignete Quelle für das neue Glykoprotein sein. Um das Protein von beliebigen infizierten Zellen, die den Virus tragen, zu erhalten, werden die Zellen metabolisch markiert (z. B. mit ³&sup5;S-Cystein) und mit Antiseren immunoprezipitiert, die von HTLV-III Infizierten erhalten wurden. Die neuen Glykoproteine können durch Gelelektrophorese oder andere Chromatographieverfahren aufgefunden und isoliert werden.
- Die Glykoproteine sind env-Glykoproteine und werden durch den größten offenen Leseraster in der 3'-Hälfte des HTLV-III-Genoms kodiert. Fig. 5 zeigt die Nukleotidsequenz und die vorhergesagte Aminosauresequenz, die durch den Aminoendabschnitt des Hüllgenbereichs von HTLV-III kodiert wird. Die HTLV-III-Sequenz ist von Ratner et al. (1985) Nature (London) 313 : 277 abgeleitet worden. Der dunkle Pfeil kennzeichnet die Spaltstelle zwischen der Führungssequenz und gp160. Die Sternchen bezeichnen Cystein, Leucin und Valinreste, wie sie durch Sequenzanalyse mittels radioaktiver Markierung bestimmt wurden. Das erste präsentierte Nukleotid entspricht der Nukleotidsequenz 5802 des HTLV-III-Genom.
- Die Glykoproteine sind beispielsweise in HTLV-III- infizierten menschlichen T-Zellen der Linie H9, LAV-infizierten NC37-Zellen und Molt 3- sowie Hut 78-Zellen, die mit frischen AIDS-Virus-Isolaten infiziert sind, vorhanden. Die Glykoproteine können leicht von den Zellen dieser Zellinien durch Lyse und SDS-Gelelektrophorese getrennt werden.
- Die gereinigten und isolierten Glykoproteine und alle damit immunologisch kreuz-reagierenden Antigene können als Standardantigen in allen üblichen Testverfahren verwendet werden, um biologische Proben auf das Vorhandensein von hiergegen spezifischen Antikörpern zu prüfen und somit für das Vorhandensein einer HTLV-III-Infektion und/oder AIDS. Die Antikörper, die gegen solche HTLV-III-Antigene spezifisch sind, werden nicht in Patienten gefunden, die unter Krankheiten wie Hepatitis leiden, die nicht von einer HTLV-III-Infektion begleitet sind.
- Die Glykoproteine oder Polypeptide, die hiermit immunologisch kreuz-reagieren, können durch übliche Verfahren mit ¹&sup5;²I oder ³&sup5;S oder ³H zur Verwendung in einem Radioimmuntest markiert werden, mit Fluoirescin für einen Fluoreszenzimmunotest, mit einem Enzym für einen Enzymimmunotest oder mit Biotin für Biotin-Avidin-gekoppelte Tests. Sie können wunschgemäß markiert oder unmarkiert in kompetitiven Immunotests ebenso wie in Tests mit zweifachen Antikörpern unter Verwendung zweier Antikörper verwendet werden, die entweder von der Idiotyp: Antiidiotypvarietät oder insbesondere von dem zweiten Antikörpertyp sind, bei dem ein Anti-Fc-Antikörper verwendet wird, oder für andere Tests.
- Alternativ können die neuen Glykoproteine oder die damit immunologisch kreuz-reaktiven Polypeptide in einer unlöslichen Phase immobilisiert sein, beispielsweise als unlösliches Harz, und die Erkennung der Anti-Glykoprotein- Antikörper wird durch Messung ihrer Bindung an die unlosliche Phase ausgeführt. Unlösliche Phasen umfassen auch Latexpartikel, die, wenn sie mit dem neuen Glykoprotein oder ihren damit immunologisch kreuz-reagierenden Polypeptiden beschichtet sind und Anti-Glykoprotein-Antikörpern ausgesetzt sind, agglutinieren. Noch andere unlösliche Phasen umfassen Teströhrchen, Violen, Titrationstüpfelatten u. dgl., an die das neue Glykoprotein oder ihre damit immunologisch kreuz-reagierenden Polypeptide gebunden werden können, sowie Antikörper hierfür, die durch zweifache Antikörpertechniken oder Protein-A-abhängige Techniken erkannt werden können.
- Der Test auf Antikörper, die HTLV-III induzierte Antigene erkennen, kann das Glykoprotein oder Glykoproteine bzw. unglykolisierte Teile der Glykoproteine in Rohform verwenden und ist nicht darauf beschränkt, diese Proteine in im wesentlichen reiner Form zu verwenden. Beispielsweise können das Glykoprotein oder die Glykoproteine zunächst im wesentlichen gereinigt und dann miteinander gemischt werden. Alternativ können auch rohe Mischungen verwendet werden.
- Die Elemente, die zum Durchführen der oben beschriebenen diagnostischen Methoden nötig sind, können in einem Set enthalten sein. Ein solches Set enthält einen Träger mit Kammern, in denen ein oder mehrere Behälter aufgenommen sind, wobei jeder Behälter ein oder mehrere der Elemente enthält, die zum Ausführen der Tests notwendig sind.
- Beispielsweise kann der erste Behälter eine oder beide gereinigte Glykoproteine oder ihre immunologisch kreuz-reaktiven Polypeptide in erkennbar markierter oder unlöslich gemachter Form enthalten.
- Ein zweiter Behälter kann einen Anti-IgG-Antikörper, polyklonal oder monoklonal, wie er in Doppel-Antikörperbindungstests zu verwenden ist, oder Elemente enthalten, die zur Erkennung der Markierungen auf dem Glykoprotein oder seinen immunologisch kreuz-reaktiven Polypeptiden gebraucht wird (beispielsweise chromogene Substrate)
- Weitere Container können unterschiedliche Mengen von einem der Glykoproteine oder seiner immunologischer kreuzreagierenden Polypeptide enthalten, die dazu verwendet werden, eine Standardkurve herzustellen, deren die experiementellen Ergebnisse zu interpolieren sind. Die Materialien selbst können in dem Set in Lösung in gefriergetrockneter Form in Mischung mit anderen inerten Materialien, wie inerten Proteinen u. dgl. enthalten sein.
- Die biologischen Proben, die testbar sind, umfassen Blut, Serum, Lymphozyten, Urin, Gewebe, Speichel, Stuhlproben u. dgl. Von besonderem Interesse ist die Durchmusterung von Blut in Blutbanken, um sicherzustellen, daß das Blut nicht mit HTLV-III kontaminiert ist. Die Durchmusterung von aus Blut hergestellten Produkten, wie Impfstoffen, kann ebenfalls durch die erfindungsgemäßen Verfahren durchgeführt werden.
- Die nachfolgenden speziellen Beispiele sollen genauer das Wesen der Erfindung erläutern, jedoch nicht den Schutzumfang beschränken.
- Die Reaktivität von Serumproben, die mit Antikörpern gegen Zellmembranantigene induziert durch HTLV-III (HTLV- III-MA) positiv reagieren, wurde durch RIP-SDS-PAGE bestimmt, wobei die Proteine auf einem 12,5% SDS-Polyacrylamidgel mit 3,5% Stapelgel unter Verwendung des Laemmli- Puffersystems getrennt wurden.
- Nichtinfizierte H9-Zellen (a) und mit HTLV-III infizierte H9-Zellen (b) wurden auf dem Scheitel ihrer logarithmischen Wachstumsphase geerntet und [³&sup5;S]-Cystein (100 uCi/ml; spezifische Aktivität 957,5 Ci/mmole) 14 bis 16 Stunden lang ausgesetzt. Es wurde ein lösliches Zelllysat erhalten und einmal mit einem Kontrollserum als negative Referenz geklärt, das an Protein-A Sepharose CL4B (Protein-A Perlen) gebunden ist, wie dies von Essex et al., (1983) in Science 220 : 859, beschrieben ist, ehe die Teile zur Reaktion mit 8 ul der nachfolgenden Seren zur Reaktion kamen, die an Protein-A Perlen zuvor absorbiert waren, wobei die in Fig. 1 der Zeichnung gezeigten Ergebnisse zustande kamen: (A) die Seren von 8 bei Anti-HTLV- III-MA positiven AIDS-Patienten (Bahnen 1-8) , (B) die Seren von 4 Anti-HTLV-III-MA-positiven ARC-Patienten (Bahnen 1-4) und die Seren von 4 Anti-HTLV-III-MA-positiven gesunden Homosexuellen (Bahnen 5-8); (C) Seren von 2 Anti-HTLV-III-MA-negativen gesunden Homosexuellen (Bahnen 1-2), Seren von 2 Anti-HTLV-III-MA-negativen Labortechnikern (Bahnen 3-4), ein monoklonaler Mausantikörper für p24 HTLV-III (Bahn 5), ein normales Karnickelserum (Bahn 6), ein Karnickelantiserum als Referenz gegen disrupten HTLV- III (Bahn 7) und ein positiver ARC-Patient als Kontrolle (Bahn 8). Die Markierungen für das Molekulargewicht waren ¹&sup4;C-markiertes Myosin (200.000), Phosphorylase-b (92.500), Albumin-Rinderserum (69.000), Eiweiß (46.000) , Karbonatdehydrase (30.000) und Lysozym (14.300).
- Es wurden H9-Zellen, die mit HTLV-III infiziert waren, auf dem Scheitel ihrer logarithmischen Wachstumsphase geerntet und 14 bis 16 Stunden lang [³&sup5;S]-Cystein ausgesetzt (100 uCi/ml; spezifische Aktivität 957,5 Ci/ mmole). Um die Glykoproteinfraktionen anzureichern, ließ man zunächst das lösliche Zelllysat zunächst mit Lentilsectinsepharose 4B in einem Verhältnis von 20 · 106 Zellen pro 1 ml von Lentillectin 4B bei 4ºC 3 Stunden lang reagieren. Deoxycholatfreier RIPA-Puffer in Anwesenheit von 5% Methyl α D Mannosid wurde dazu verwendet, die Glykoproteine zu eluieren. Die Glykoproteinfraktion wurde unter Verwendung von RIP-SDS-PAGE mit menschlichen Seren, die für Anti-HZLV-III-MA positiv sind, analysiert. Die [³&sup5;S] Cystein-markierten Glykoproteine ließ man mit 8 ul der folgenden Seren, min den in Fig. 2 gezeigten Ergebnis reagieren:
- Vier Seren von vier für Anti-HTLV-III-MA positiven Aids-Patienten (Bahnen 1-4) , zwei Seren von zwei Anti- HTLV-III-MA positiven ARC-Patienten (Bahnen 5-6), zwei Seren von zwei Anti-HTLV-III-NA positiven gesunden Homosexuellen (Bahnen 7 bis 8), zwei Seren von Anti-HTLV-III-MA negativen gesunden Homosexuellen (Bahnen 9-10) unter zwei Seren von zwei Anti-HTLV-III-NA negativen Labortechnikern (Bahnen 11-12).
- HTLV-III infizierte H9 Zellen wurden auf dem Scheitel ihrer logarithmischen Wachstumsphase geerntet und zwei Stunden lang in McCoy's 5A Medium erneut suspendiert, das mit 10% fetalem Rinderserum, 1% einer antibiotischenantimykotischen Mischung und 20 ug/ml von Tunicamycin ergänzt wurde. Nach diesem Einstellschritt wurden die Zellen mit [³&sup5;S]-Cysteine, wie oben beschrieben, in Anwesenheit von 20 ug/ml Tunicamycin drei Stunden lang markiert. Das markierte Material wurde dann denselben Lyse- und Vorklärungsverfahren wie oben beschrieben unterzogen.
- Die Proteine von behandelten und unbehandelten Zellen wurde mittels Anti-HTLV-III-NA positiven menschlichen Seren unter Verwendung von RIP-SDS-PAGE, wie in Fig. 3, linke Bahn analysiert. Die löslichen Zellysate von Tunicamycin-unbehandelten (a) und -behandelten Zellen (b) ließ man mit 8 ul eines für Antikörper gegen HTLV-III negativen Referenzserums (Bahnen 1-2) und 8 ul eines für Antikörper gegen HTLV-III positiven Referenzserums eines ARC-Patienten (Bahnen 3-4) reagieren, wobei die in Fig. 3 gezeigten Ergebnisse erhalten wurden.
- Die nachfolgenden speziellen Beispiele betreffen den Test von Speichelproben auf Antikörper gegen HTLV-III.
- Von Personen wurde Vollspeichel gesammelt und bei -70ºC gelagert. Nach einer 1 : 2 Verdünnung mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung oder Wasser wurden die Proben zentrifugiert und durch ein Filter mit einer Porengröße von 0,22 M (Millipore Corporation, Bedford, NA) gefiltert. Sodann wurde eine Radioimmunoprezipitation von ³&sup5;S Cysteine markierten H9/HTLV-III infizierten und H9 infizierten Zellysaten durchgeführt, wie dies oben beschrieben ist, mit der Einschränkung, daß man vor der Zugabe von 150 ul der Speichelproben die Protein-A-Perlen zunächst mit 10 ul sekretorischem Anti-Mensch Schaf-IgA-Serum (Cappel Lab. Inc., Cochranville, PA) reagieren ließ. Seren eines Aids- Patienten, der bekanntermaßen für die HTLV-III Anti-Gene p24, p55, gp120 und gp160 positiv ist, wurde als positive Kontrolle verwendet. Die Immunoprezipitate wurden in einem 10%igen Acrylamidauflösungsgel mit 3,5% Stapelgel entsprechend den diskontinuierlichen Puffersysteme analysiert, wie dies oben beschrieben ist. Bei -70ºC wurde fünf Tage lang eine Autoradiografie ausgeführt. Etwa zur selben Zeit wurden von denselben Patienten Serenproben genommen und wie vorher beschrieben durch Immunoprezipitation getestet.
- Wie im einzelnen in Fig. 4 gezeigt, wurden aus H9- Zellen (Bahnen a, c, e, g, i, k) und H9/HTLV-III Zellen (Bahnen b, d, f, h, J, l), die ³&sup5;S-Cystein ausgesetzt waren, geerntet wurden und mit RIPA-Puffer lysiert wurden, lösliche Zellysate hergestellt. Diese Lysate ließ man sodann mit 150 ul einer 1 : 2 Verdünnung von Speichel reagieren, der an Protein A-Sepharose CL-4B (Protein A-Perlen, Sigma) mit 10 l Anti-Mensch IgA-Schaf-Seren gebunden wurde. Die Proben sahen wie folgt aus: Speichel des Aidspatienten 1 (Bahnen a, b), normaler Labortechniker (Bahnen c, d); Aidspatient 2 (Bahnen e, f) Aids-Patient 3 (Bahnen i, J) Aidspatient 4 (Bahnen k, l) . Referenzserum eines Aidspatienten, der bekanntermaßen für HTLV-III-Antigene positiv ist (Bahnen g, h) . Die angenäherten Molekulargewichte in Tausend sind an der rechten Seite angegeben.
Claims (3)
1. Im wesentlichen reines Glykoprotein mit einem
Molekulargewicht von näherungsweise 160.000 Dalton, von
dem näherungsweise 90.000 Dalton das Molekulargewicht des
unglykolisierten Teils ist, wobei das Glykoprotein im
wesentlichen gleich einem Hüllglykoprotein ist, das von
dem größten offenen Leseraster in der 3'-Hälfte des
lymphotropen Virus vom Typ III für menschliche T-Zellen
codiert wird und von Zellen zu erhalten ist, die mit dem
lymphotropen Virus vom Typ III für menschliche T-Zellen
infiziert sind.
2. Protein mit 90.000 Dalton, dadurch gekennzeichnet,
daß das Protein der nichtglykolisierte Teil eines
Glykoproteins mit einem Molekulargewicht von näherungsweise
160.000 Dalton ist, wobei das Glykoprotein im wesentlichen
identisch mit dem Hüllglykoprotein ist, das durch den
größten offenen Leseraster in der 3'-Hälfte des
lymphotropen Virus mit dem Typ III Genom, für menschliche T-Zellen
codiert wird und von Zellen zu erhalten ist, die mit dem
lymphotropen Virus vom Typ III für menschliche T-Zellen
infiziert sind.
3. Verfahren zum Untersuchen einer biologischen Probe
nach Antikörpern, die für die Infektion mit einem
lymphotropen Virus vom Typ III für menschliche T-Zellen
kennzeichnend ist, wobei das Verfahren darin besteht, daß
die Probe mit einem Reagens inkubiert wird, das das
Glykoprotein nach Anspruch 1 oder das Protein nach
Anspruch 2 enthalt und
indem bestimmt wird, ob zwischen dem Antikörper und
dem Reagens ein Immunokomplex gebildet wird oder nicht.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US06/670,361 US4725669A (en) | 1984-11-09 | 1984-11-09 | Assay for detecting infection by human T-cell lymphotropic virus-III |
PCT/US1985/002227 WO1986002930A1 (en) | 1984-11-09 | 1985-11-08 | Assay for detecting infection by human t-cell lymphotrophic virus |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE3587969D1 DE3587969D1 (de) | 1995-02-16 |
DE3587969T2 true DE3587969T2 (de) | 1995-05-11 |
Family
ID=24690118
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE3587969T Expired - Lifetime DE3587969T2 (de) | 1984-11-09 | 1985-11-08 | Testverfahren zum nachweis von menschlichem lymphotropischem virus. |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US4725669A (de) |
EP (1) | EP0201588B1 (de) |
AT (1) | ATE116658T1 (de) |
DE (1) | DE3587969T2 (de) |
WO (1) | WO1986002930A1 (de) |
Families Citing this family (93)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8429099D0 (en) | 1984-11-16 | 1984-12-27 | Pasteur Institut | Closed dna sequences |
US7205102B1 (en) | 1983-09-15 | 2007-04-17 | Institut Pasteur | Cloned DNA sequences related to the genomic RNA of lymphadenopathy-associated virus (LAV) and proteins encoded by said LAV genomic RNA |
GB8423659D0 (en) | 1984-09-19 | 1984-10-24 | Pasteur Institut | Cloned dna sequences |
US7232654B1 (en) | 1983-09-15 | 2007-06-19 | Institut Pasteur | DNA sequence of the LTR region of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) |
US5843638A (en) * | 1983-12-05 | 1998-12-01 | Institut Pasteur And Centre National De La Recherche Scientifique | Nucleic acids and pepties of human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1). |
US7351412B1 (en) * | 1983-12-05 | 2008-04-01 | Institut Pasteur | Cloned DNA sequences related to the genomic RNA of lymphadenopathy-associated-virus (LAV) and proteins encoded by said LAV genomic RNA |
US5610035A (en) * | 1983-12-05 | 1997-03-11 | Institut Pasteur Centre National De La Recherche Scientific | Methods for the preparation of hybridomas producing lymphadenopathy-associated virus (LAV) GP110-specific monoclonal antibodies and methods for the purification of GP110 employing said monoclonal antibodies |
US4716102A (en) * | 1984-08-15 | 1987-12-29 | Regents Of The University Of California | Purified AIDS-associated virus ARV-2 |
US9309574B1 (en) | 1984-08-22 | 2016-04-12 | The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Molecular cloning of HIV-1 from immortalized cell lines |
US6610476B1 (en) | 1984-08-22 | 2003-08-26 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Detection of HIV-1 DNA |
US9328391B1 (en) | 1984-08-22 | 2016-05-03 | The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Cloning and expression of HIV-1 DNA |
US5705612A (en) | 1984-10-18 | 1998-01-06 | Institut Pasteur And Centre National De La Recherche Scientifique | NEF peptide encoded by human immunodefiency virus type 1 (HIV-1) |
US7045130B1 (en) | 1984-10-18 | 2006-05-16 | Institut Pasteur | Antibodies against antigens of human immunodeficiency virus (HIV-1) |
CA1341423C (en) * | 1984-10-31 | 2003-03-04 | Paul A. Luciw | Recombinant proteins of viruses associated with lymphadenopathy syndrome and/or acquired immune deficiency syndrome |
US4725669A (en) * | 1984-11-09 | 1988-02-16 | President And Fellows Of Harvard College | Assay for detecting infection by human T-cell lymphotropic virus-III |
US6894152B1 (en) | 1984-11-16 | 2005-05-17 | Institut Pasteur | Cloned DNA sequences related to the genomic RNA of lymphadenopathy-associated-virus (LAV) and proteins encoded by said LAV genomic RNA |
FR2580177B2 (fr) * | 1985-04-15 | 1989-06-02 | Pasteur Institut | Antigenes apparentes a la glycoproteine d'enveloppe du virus du sida, notamment precurseurs de cette glycoproteine, procedes d'obtention de ces antigenes et moyens mis en oeuvre dans ces procedes, applications de ces antigenes a la preparation de compositions immunogenes ou pour le diagnostic du sida ou des affections qui lui sont apparentees |
FI861626A (fi) * | 1985-04-19 | 1986-10-20 | Hoffmann La Roche | Foervaervat immunbristsyndrom (aids) -relaterat viralt rekombinant hoeljeprotein samt ett testfoerfarande foer aids. |
US5773210A (en) * | 1985-04-19 | 1998-06-30 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Acquired immune deficiency syndrome (AIDS) viral envelope protein and method of testing for AIDS |
US4843011A (en) * | 1985-08-01 | 1989-06-27 | Akzo N.V. | Monoclonal antibodies for binding HTLV-III proteins, and cell lines for their production |
GR862335B (en) * | 1985-09-13 | 1987-01-13 | Pasteur Institut | Method for utilizing cell lines which lack human class ii histocompatibility antigens |
EP0249611A4 (de) * | 1985-11-14 | 1988-04-26 | Harvard College | T-lymphotrophisches virus. |
US6541609B2 (en) | 1985-11-14 | 2003-04-01 | President And Fellows Of Harvard College | HIV-2 peptides |
US4794077A (en) * | 1985-12-13 | 1988-12-27 | Biosciences Corporation Of Texas | Detection of human cancer cells with anitbodies to human cancer nucleolar antigen p145 |
US5364933A (en) | 1986-03-03 | 1994-11-15 | Institut Pasteur | Methods of immunopurification of antigens of human immunodeficiency virus type 2 (HIV-2) |
US6514691B1 (en) | 1986-01-22 | 2003-02-04 | Institut Pasteur | Peptides of human immunodeficiency virus type 2 (HIV-2), antibodies against peptides of HIV-2, and methods and kits for detecting HIV-2 |
US4839288A (en) * | 1986-01-22 | 1989-06-13 | Institut Pasteur | Retrovirus capable of causing AIDS, antigens obtained from this retrovirus and corresponding antibodies and their application for diagnostic purposes |
US4734362A (en) * | 1986-02-03 | 1988-03-29 | Cambridge Bioscience Corporation | Process for purifying recombinant proteins, and products thereof |
US4753873A (en) * | 1986-02-03 | 1988-06-28 | Cambridge Bioscience Corporation | Peptides for the diagnosis of HTLV-III antibodies, their preparation and use |
CA1310924C (en) * | 1986-04-24 | 1992-12-01 | Francis P. Mccormick | Infective drug delivery system |
US4785077A (en) * | 1986-05-05 | 1988-11-15 | Scripps Clinic And Research Foundation | Substantially pure cytotoxicity triggering factor |
DE3722272A1 (de) * | 1986-07-08 | 1988-01-21 | Bio Rad Laboratories | Differenzierung des krankheitszustandes bei aids-antikoerpertests |
EP0255190A3 (de) * | 1986-08-01 | 1990-08-29 | Repligen Corporation | Rekombinante Polypeptide und ihre Verwendungen sowie Test für den AIDS-Virus |
US5142025A (en) * | 1986-08-01 | 1992-08-25 | Repligen Corporation | Recombinant HTLV-III proteins and uses thereof |
WO1988000980A1 (en) * | 1986-08-04 | 1988-02-11 | The United States Of America, As Represented By Th | Human b lymphotropic virus (hblv) isolation and products |
WO1988001387A1 (en) * | 1986-08-11 | 1988-02-25 | The United States Of America, As Represented By Th | Testing for the human b lymphotropic virus (hblv) |
DE3784939T2 (de) * | 1986-08-12 | 1993-07-08 | Us Commerce | Molekulare klonierung und human b lymphotropischer virus klon (hblv). |
US6290963B1 (en) * | 1986-08-22 | 2001-09-18 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Anti-HIV compositions containing native and recombinant peptides |
IL85149A0 (en) * | 1987-01-27 | 1988-06-30 | Microgenesys Inc | Hiv gp160 aids virus envelope protein-containing substrates and methods for detection of aids antibody thereby |
US4902615A (en) * | 1987-03-27 | 1990-02-20 | Biosciences Corporation Of Texas | Detection of human cancer cells with antibodies to human cancer nucleolar antigen p120 |
US4865966A (en) * | 1987-04-17 | 1989-09-12 | New York University | Method for detecting antibodies to human immunodeficiency virus |
US5122446A (en) * | 1987-04-17 | 1992-06-16 | New York University | Method for detecting antibodies to human immunodeficiency virus |
US4921787A (en) * | 1987-05-01 | 1990-05-01 | Cambridge Bioscience Corporation | Detection of antibodies to human immunodeficiency virus by agglutination of antigen coated latex |
US6657050B1 (en) | 1987-05-29 | 2003-12-02 | Tanox, Inc. | Chimeric viral-neutralizing immunoglobulins |
US5981278A (en) * | 1987-05-29 | 1999-11-09 | Tanox, Inc. | Chimeric monoclonal antibodies which neutralize HIV-1 infection and their applications in therapy and prevention for AIDS |
DE3854857T2 (de) * | 1987-06-10 | 1996-08-22 | The Immune Response Corp. Inc., La Jolla, Calif. | Verhütung und behandlung einer retrovirenkrankheit |
US5256767A (en) * | 1987-06-10 | 1993-10-26 | The Immune Response Corporation | Retroviral antigens |
US5447837A (en) * | 1987-08-05 | 1995-09-05 | Calypte, Inc. | Multi-immunoassay diagnostic system for antigens or antibodies or both |
US6210873B1 (en) | 1987-08-28 | 2001-04-03 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for the priming of specific cytotoxic T-lymphocyte response |
US5128319A (en) * | 1987-08-28 | 1992-07-07 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Prophylaxis and therapy of acquired immunodeficiency syndrome |
US5019387A (en) * | 1987-09-08 | 1991-05-28 | Duke University | Production of antibodies to HIV |
US4879211A (en) * | 1987-11-30 | 1989-11-07 | United Biomedical Inc. | Rapid immunoagglutination test for presence of HIV in body fluids |
US5215913A (en) * | 1987-11-30 | 1993-06-01 | Roger Williams General Hospital | IgG-1 human monoclonal antibody reactive with an HIV-1 antigen and methods of use |
US5716826A (en) * | 1988-03-21 | 1998-02-10 | Chiron Viagene, Inc. | Recombinant retroviruses |
US6133029A (en) * | 1988-03-21 | 2000-10-17 | Chiron Corporation | Replication defective viral vectors for infecting human cells |
US5077198A (en) * | 1988-04-14 | 1991-12-31 | Eastman Kodak Company | Diagnostic kit and method for rapid detection of antibodies |
US5268299A (en) * | 1988-04-14 | 1993-12-07 | Eastman Kodak Company | Diluent composition useful in the detection of antibodies in assays |
US5338829A (en) * | 1988-04-20 | 1994-08-16 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Peptides derived from human immunodeficiency virus-1 GP160 |
US5008183A (en) * | 1988-05-10 | 1991-04-16 | Bio-Research Laboratories, Inc. | Assay system for detecting antibody and a method of producing non-human immune antibody |
US5529776A (en) * | 1988-07-06 | 1996-06-25 | Verigen Inc. | Anti-HIV-1 neutralizing antibodies |
US5658569A (en) * | 1988-07-06 | 1997-08-19 | Verigen, Inc. | Anti-HIV-1 neutralizing antibodies |
SE8803870D0 (sv) * | 1988-10-28 | 1988-10-28 | Medscand Ab | Method for detection of human papillomavirus (hpv) for diagnostic purposes |
DE69032841T2 (de) * | 1989-01-23 | 1999-05-12 | Chiron Corp., Emeryville, Calif. | Rekombinante zellen für therapien von infektionen und hyperprolieferative störungen und deren herstellung |
US6165710A (en) * | 1989-10-23 | 2000-12-26 | Robinson; James E. | Method for immobilizing viral glycoproteins for use in solid-phase immunoassays |
CA2067821A1 (en) * | 1989-10-24 | 1991-04-25 | Cetus Oncology Corporation | Infective drug delivery system using recombinant retroviral vectors |
WO1991015238A1 (en) * | 1990-04-03 | 1991-10-17 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for vaccination against hiv |
US7041293B1 (en) | 1990-04-03 | 2006-05-09 | Genentech, Inc. | HIV env antibodies |
US5298391A (en) * | 1990-04-23 | 1994-03-29 | Consiglio Nazionale Delle Ricerche | Use of the SP-2 monoclonal antibody for the clinical diagnostics and for the monitoring of the HIV infection progress |
WO1991019011A1 (en) * | 1990-06-08 | 1991-12-12 | Repligen Corporation | Immunoassays for anti-hiv-1 antibodies |
US5914109A (en) * | 1990-06-15 | 1999-06-22 | New York University | Heterohybridomas producing human monoclonal antibodies to HIV-1 |
US5817491A (en) * | 1990-09-21 | 1998-10-06 | The Regents Of The University Of California | VSV G pseusdotyped retroviral vectors |
EP0554401A4 (en) * | 1990-10-26 | 1996-10-30 | New York Health Res Inst | Neutralizing human monoclonal antibodies specific for the v3 loop and cd-4 binding site of hiv-1 gp120 |
US5587285A (en) * | 1992-01-31 | 1996-12-24 | University Of Texas System | Generation serological assay for monitoring HIV exposure |
US5464740A (en) * | 1992-09-08 | 1995-11-07 | Amur Research Corp. | Diagnositc agent and methods for identifying HIV infected individuals and monitoring their therapy |
CA2164505A1 (en) * | 1993-06-07 | 1994-12-22 | Phillip W. Berman | Hiv envelope polypeptides |
US5603933A (en) * | 1993-08-31 | 1997-02-18 | Board Of Regents, The University Of Texas | CD4 peptides for binding to viral envelope proteins |
US6074646A (en) * | 1993-10-26 | 2000-06-13 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Nondenatured HIV envelope antigens for detecting early HIV-specific antibodies |
US6171596B1 (en) | 1993-12-10 | 2001-01-09 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Oligomeric HIV-1 envelope glycoproteins |
US6039957A (en) * | 1993-12-10 | 2000-03-21 | United States Of America, As Represented By The Department Of Health And Human Services | Oligomeric HIV-1 envelope glycoproteins |
US5888814A (en) * | 1994-06-06 | 1999-03-30 | Chiron Corporation | Recombinant host cells encoding TNF proteins |
US6585979B1 (en) * | 1996-07-08 | 2003-07-01 | Genentech, Inc. | HIV envelope polypeptides and immunogenic composition |
US6274900B1 (en) * | 1998-01-05 | 2001-08-14 | Texas Instruments Incorporated | Semiconductor device architectures including UV transmissive nitride layers |
US6537631B1 (en) * | 1999-04-30 | 2003-03-25 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Roll of wet wipes |
IL149202A0 (en) | 1999-11-05 | 2002-11-10 | Biogen Inc | Hedgehog fusion proteins and uses |
ATE438883T1 (de) * | 2001-09-04 | 2009-08-15 | Wisconsin Alumni Res Found | Flüssigkristallumschaltmechanismus |
AU2002341900A1 (en) * | 2001-10-04 | 2003-04-14 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Detection of dna hybridization on surfaces |
AU2003212466A1 (en) * | 2002-02-28 | 2003-09-16 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Method and composition for detecting early hiv antibody |
US7807348B2 (en) * | 2002-03-20 | 2010-10-05 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Optical imaging of nanostructured substrates |
US7125592B2 (en) * | 2002-04-10 | 2006-10-24 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Detecting interactions at biomimetic interfaces with liquid crystals |
AU2002368337A1 (en) * | 2002-11-08 | 2004-06-03 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Surfaces with gradients in surface topography |
WO2005010160A2 (en) * | 2003-07-17 | 2005-02-03 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Liquid crystals with reduced toxicity and applications thereof |
WO2007111681A2 (en) * | 2005-10-31 | 2007-10-04 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Device and methods for liquid crystal-based bioagent detection |
EP2748186A1 (de) | 2011-08-23 | 2014-07-02 | Skau Aps | Verfahren zur entfernung der immunsuppressiven eigenschaften aus hiv-hüllglykoproteinen |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8324800D0 (en) * | 1983-09-15 | 1983-10-19 | Pasteur Institut | Antigens |
DE3334405A1 (de) * | 1983-09-23 | 1985-04-04 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Membranassoziierte proteine (mp(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts)), verfahren zu ihrer gewinnung sowie ihre verwendung |
NZ228756A (en) * | 1984-04-23 | 1990-10-26 | Us Health | Detection of hiv antigen using competition immune assay or western blot assay |
US4520113A (en) * | 1984-04-23 | 1985-05-28 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Serological detection of antibodies to HTLV-III in sera of patients with AIDS and pre-AIDS conditions |
US4716102A (en) * | 1984-08-15 | 1987-12-29 | Regents Of The University Of California | Purified AIDS-associated virus ARV-2 |
DE3587181T2 (de) * | 1984-10-18 | 1993-06-24 | Centre Nat Rech Scient | F antigene vom menschlichen immunodefizienz-virus und deren verwendungen. |
US4725669A (en) * | 1984-11-09 | 1988-02-16 | President And Fellows Of Harvard College | Assay for detecting infection by human T-cell lymphotropic virus-III |
FR2580177B2 (fr) * | 1985-04-15 | 1989-06-02 | Pasteur Institut | Antigenes apparentes a la glycoproteine d'enveloppe du virus du sida, notamment precurseurs de cette glycoproteine, procedes d'obtention de ces antigenes et moyens mis en oeuvre dans ces procedes, applications de ces antigenes a la preparation de compositions immunogenes ou pour le diagnostic du sida ou des affections qui lui sont apparentees |
-
1984
- 1984-11-09 US US06/670,361 patent/US4725669A/en not_active Expired - Lifetime
-
1985
- 1985-11-08 AT AT85905989T patent/ATE116658T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-11-08 WO PCT/US1985/002227 patent/WO1986002930A1/en active IP Right Grant
- 1985-11-08 DE DE3587969T patent/DE3587969T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1985-11-08 EP EP85905989A patent/EP0201588B1/de not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-05-17 US US08/245,077 patent/US5731142A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP0201588A4 (de) | 1988-03-18 |
EP0201588A1 (de) | 1986-11-20 |
DE3587969D1 (de) | 1995-02-16 |
WO1986002930A1 (en) | 1986-05-22 |
US5731142A (en) | 1998-03-24 |
EP0201588B1 (de) | 1995-01-04 |
US4725669A (en) | 1988-02-16 |
ATE116658T1 (de) | 1995-01-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE3587969T2 (de) | Testverfahren zum nachweis von menschlichem lymphotropischem virus. | |
DE3751310T2 (de) | Peptide zur Diagnose von HTLV-III-Antikörpern, deren Herstellung und Verwendung. | |
DE3876496T2 (de) | Synthetisches peptid-antigen fuer nachweis von hiv-2-infektionen. | |
DE3486404T2 (de) | Verfahren und produkte zur feststellung von menschlichem t-zellen-leukämie-virus. | |
DE3689097T2 (de) | Synthetisches Peptid und Verfahren für dessen Benutzung zum Nachweis von Antikörpern zu HTLV-III, Diagnose von AIDS und PRE-AIDS-Bedingungen und als Impfstoffe. | |
DE3750339T2 (de) | HTLV-III umhüllende Peptiden. | |
EP0770679B2 (de) | HCV-spezifische Peptide, Mittel dazu und ihre Verwendung | |
DE68924878T2 (de) | Bestimmung eines felinen pathogen-specifischen Antikörpers und eines felinen pathogenen Antigens in einem Immuntest. | |
DE68918497T2 (de) | Monoklonale Mäuseantikörper gegen HIV-IP24 und ihre Verwendung in Diagnostika. | |
EP0673948B1 (de) | Von einem Retrovirus aus der HIV-Gruppe abgeleitete Peptide und deren Verwendung | |
DE68916421T2 (de) | Synthetische peptidantigene zum nachweis von htlv-1-infektionen. | |
DE69223250T3 (de) | Detektion des immunschwäche-virus aus felis | |
EP0972198B2 (de) | Verfahren zur simultanen bestimmung von hiv-antigenen und hiv-antikörpern | |
DE3789633T2 (de) | HTLV-III(LAV)Decke-Peptide. | |
DE3854550T2 (de) | HIV-Peptide und Methoden für den Nachweis von HIV. | |
DE69327529T2 (de) | Immunologisch mit HLA homologe HIV Protein Epitope | |
EP0922958B1 (de) | Entstörung von diagnostischen Verfahren durch Peptide aus D-Aminosäuren | |
DE68921360T2 (de) | Monoklonale Antikörper von Mäusen gegen das gp41 Protein von menschlichem Immunmangelsyndrom-Virus. | |
DE69330164T2 (de) | Htlv-i/htlv-ii assay und verfahren | |
DE69402961T2 (de) | Verfahren zum Nachweis von viralen Komponenten mittels eines Glykoproteins | |
DE3889581T2 (de) | Monoklonale Antikörper gegen spezifische antigene Regionen des humanen Immundefizienzvirus und Methoden zur Verwendung. | |
DE69015708T2 (de) | Künstliche peptid-zusammensetzungen mit immunoreaktiven antikörpern von htlv-1. | |
Perrin et al. | A modified rapid enzyme immunoassay for the detection of rabies and rabies-related viruses: RREID-lyssa | |
DE69909897T2 (de) | Nachweis von Antikörpern gegen FIV unter Benutzung von ENV/GAG Polypeptiden | |
DE69028561T2 (de) | Immunoassay zum Nachweis von Antikörpern gegen HIV |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
8363 | Opposition against the patent |