DE3486293T4 - Impfstoff-Zubereitung. - Google Patents

Impfstoff-Zubereitung.

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Claims (18)

1. Verfahren zur Herstellung einer Veterinärvakzin- Zusammensetzung, enthaltend eine ausreichende Menge von Hundecoronavirus(CCV)-Antigen zur Erzeugung einer Immunreaktion beim Hund, einen pharmazeutisch akzeptablen veterinärmedizinischen Träger und mindestens ein Adjuvans, welches Verfahren die Gewinnung des CCV-Antigens durch Inokulieren von Gewebezellkulturen von Säugern mit CCV, die Kultivierung der Zellen in eine dichte konfluente Einzelzellschicht vor dem Inokulationsschritt oder innerhalb von 24 Stunden ab dem Inokulationsschritt, das Ernten der Zellen innerhalb von 96 Stunden ab der Inokulation und die Inaktivierung sämtlicher Viren in den geernteten Zellen, wobei der Präinaktivierungsvirustiter in dem Verfahren mindestens etwa 1000 Virusteilchen pro ml, gemessen durch die FAID&sub5;&sub0;- Methode, beträgt, und das Formulieren des erhaltenen CCV- Antigens mit dem Träger und dem Adjuvans umfaßt.
2. Verfahren nach Anspruch 1, worin der Präinaktivierungstiter etwa 4,0 log Virusteilchen pro ml beträgt.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, worin etwa zur Inokulationszeit die Zellen in einer Menge vorhanden sind, die zur Bildung einer Einzelzellschicht mit mindestens 100 000 Zellen pro cm² ausreicht.
4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, worin die Zellen in einer Menge vorhanden sind, die zur Bildung einer Einzelzellschicht mit etwa 150 000 Zellen pro cm² ausreicht.
5. Verfahren nach einem der AnsPrüche 1 bis 4, worin die Zellen in einem Verhältnis von CCV-Viren, gemessen durch die FAID&sub5;&sub0;-Methode, zu Zellen von etwa 1:1 bis etwa 1:500 mit CCV inokuliert werden.
6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, worin die Zellen in einem Verhältnis von CCV-Viren, gemessen durch die FAID&sub5;&sub0;-Methode, zu Zellen von etwa 1:100 mit CCV inokuliert werden.
7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, worin das inokulierte Virus vor der Kultivierung weniger als 300 Minuten in einem Kulturmedium auf den Zellen absorbiert wird.
8. Verfahren zur Herstellung einer Veterinärvakzin- Zusammensetzung, enthaltend eine ausreichende Menge von Hundecoronavirus (CCV) -Antigen zur Erzeugung einer Immunreaktion beim Hund, einen pharmazeutisch akzeptablen veterinärmedizinischen Träger und mindestens ein Adjuvans, welches Verfahren die Gewinnung des CCV-Antigens durch Inokulieren von Gewebezellkulturen von Säugern mit CCV, das Ernten der Zellen, nachdem Virustiter von mindestens 2 000 Teilchen pro ml, gemessen durch die FAID&sub5;&sub0;-Methode, erreicht worden sind, das Sammeln des von Lebendvirus freien CCV- Antigens und die Formulierung des erhaltenen CCV-Antigens mit dem Träger und dem Adjuvans umfaßt.
9. Verfahren nach Anspruch 8, worin die Zellen in einer Menge vorhanden sind, die zur Bildung einer Einzelschicht mit mindestens etwa 100 000 Zellen pro cm² ausreicht, und die Zellen in einem Verhältnis von CCV-Viren, gemessen durch die FAID&sub5;&sub0;-Methode, zu Zellen von etwa 1:1 bis etwa 1:500 mit CCV inokuliert werden.
10. Verfahren nach Anspruch 8 oder 9, worin die Zellen geerntet werden, nachdem Virustiter von mindestens 4 log Virusteilchen, gemessen durch die FAID&sub5;&sub0;-Methode, erhalten sind.
11. Verfahren nach einem der Ansprüche 8 bis 10, worin die Zellen innerhalb von 96 Stunden oder weniger nach der Inokulierung geerntet werden.
12. Verfahren zur Herstellung einer Veterinärvakzin- Zusammensetzung, enthaltend einen pharmazeutisch akzeptablen veterinärmedizinischen Träger, zumindest ein Adjuvans zur Förderung der Immunreaktion und eine ausreichende Menge Coronavirusantigen zur Erzeugung einer protektiven Immunreaktion bei Hunden, die bei einer späteren virulenten Hundecoronavirus (CCV)-Exposition eine Reduktion der Darminfektion von mindestens etwa 80 % bewirkt, welches Verfahren die Gewinnung des CCV-Antigens durch Inokulieren von Gewebezellkulturen von Säugern mit einem Impfvirus zur Erzeugung von CCV-Antigen, die Kultivierung der Zellen zu einer dichten konfluenten Einzelzellschicht vor dem Inokulationsschritt oder innerhalb von 24 Stunden ab dem Inokulationsschritt in einer Menge, die zur Bildung einer Einzelzellschicht mit mindestens 100 000 Zelle pro cm² ausreicht, gegebenenfalls das Absorbieren des Impfvirus an den Zellen über einen Zeitraum von bis zu 300 Minuten, das Ernten der Zellen, nachdem Virustiter von mindestens 4 log Teilchen pro ml, gemessen durch die FAID&sub5;&sub0;-Methode, erreicht worden sind, das Sammeln des von Lebendvirus freien Antigens und das Formulieren des erhaltenen CCV-Antigens mit dem Träger und dem Adjuvans umfaßt.
13. Verfahren nach Anspruch 12, worin die Zellen zum Zeitpunkt der Inokulation in einer Menge vorhanden sind, die zur Bildung einer Einzelzellschicht mit mindestens 100 000 Zellen pro cm² ausreicht.
14. Verfahren nach einem der Ansprüche 12 oder 13, worin die Zellen mit ausreichendem Virus inokuliert werden, um ein minimales Infektionsmultiplizitätsverhältnis von etwa 1:500 zu erreichen.
15. Verfahren nach einem der Ansprüche 12 bis 14, worin das Impfvirus etwa 60 Minuten lang an den Zellen absorbiert wird.
16. Verfahren zur Herstellung eines Hundecoronavirus(CCV)- Vakzins, umfassend die folgenden Schritte:
a) Inokulieren von Gewebekulturzellen von Säugern mit einer CCV-Menge (gemessen durch die FAID&sub5;&sub0;-Methode), die zur Erzielung eines minimalen Infektionsmultiplizitätsverhältnisses (MOI) von etwa 1:500 ausreicht;
b) Kultivieren der Zellen zu einer dichten konfluenten Einzelzellschicht vor dem Inokulationsschritt oder innerhalb von etwa 12 bis 48 Stunden ab dem lnokulationsschritt, wobei die Zellen zur Zeit der Inokulation in einer Menge von mindestens etwa 100 000 Zellen pro cm² vorhanden sind;
c) Ernten der Zellen innerhalb von 96 Stunden ab der Inokulation zur Gewinnung des CCV-Antigens;
d) lnaktivieren des mit den Zellen geernteten CCV-Virus zur Gewinnung einer inaktivierten CCV-Antigenzusammensetzung;
e) Zusetzen mindestens eines Adjuvans zur inaktivierten CCV- Antigenzusammensetzung; und
f) Herstellen des CCV-Vakzins, enthaltend die inaktivierte CCV-Antigenzusammensetzung, einen pharmazeutisch akzeptablen Träger und zumindest ein Adjuvans.
17. Veterinärvakzinzusammensetzung, umfassend ein von Lebendvirus freies Coronavirusantigen in einer parenteral wirksamen Menge zur Erzeugung systemischer Immunität und lokaler Immunität im Darm von Hunden gegen eine Infektion mit virulentem Hundecoronavirus, einen pharmazeutisch akzeptablen veterinärmedizinischen Träger und zumindest ein Adjuvans.
18. Veterinärvakzinzusammensetzung, umfassend ein von Lebendvirus freies Coronavirusantigen in einer zur Erzeugung von alpha-Immunglobulin(IgA)-Antikörpern und zur Induktion von lokaler Immunität im Darm gegen infektiösen Hundecoronavirus ausreichenden Menge, einen pharmazeutisch akzeptablen veterinärmedizinischen Träger und zumindest ein Adjuvans.
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