DE3326165C2

DE3326165C2 -

Info

Publication number: DE3326165C2
Application number: DE3326165A
Authority: DE
Inventors: Joachim Karl 2061 Borstel De Seydel
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 1982-07-29
Filing date: 1983-07-20
Publication date: 1993-07-22
Also published as: GB8320438D0; FR2531861A1; NL194535C; FR2531861B1; JPS5933218A; IT1171692B; BE897397A; NL194535B; GB2125293A; CH651473A5; DE3326165A1; IT8322089A0; IT8322089A1; GB2125293B; JPH0419968B2; NL8302579A

Description

Die Erfindung betrifft ein neues pharmazeutisches Präparat, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß es als Wirkstoff ein Gemisch von Diaminodiphenylsulfon (DDS) und 2,4-Diamino-5-(4-bromo-3,5-dimethoxybenzyl)pyrimidin (Brodimoprim) enthält.

Die Erfindung betrifft weiterhin die Verwendung einer solchen Wirkstoffkombination zur Behandlung der Lepra und/oder anderer Mycobacteriosen.

Aus der GB-A-20 82 063 ist eine antibakteriell wirksame Formulierung bekannt, die ein Sulfon und ein Pyrimidinderivat, nämlich Trimethoprim enthält.

In der DE-OS 24 52 889 wird eine Vielzahl von Benzylpyrimidinen offenbart. Weiterhin wird auch erwähnt, daß die offenbarten Benzylpyrimidine einen synergistischen Effekt mit Sulfonamiden aufweisen können.

Es ist bekannt, DDS zur Behandlung der Lepra zu verwenden. Überraschend wurde gefunden, daß ein Gemisch von DDS und Brodimoprim gegenüber Lepraerregern eine im Vergleich zur Wirkung der Einzelkomponenten synergistisch erhöhte Wirkung entfaltet.

In einer bevorzugten Ausführungsform enthält das erfindungsgemäße Präparat die Wirkstoffe im Molverhältnis DDS : Brodimoprim = 1 : 1 bis 1 : 10.

Die ausgeprägte synergistische Wirkung der erfindungsgemäßen Kombination von DDS und Brodimoprim gegen Lepraerreger wird aus den nachstehend beschriebenen Versuchen deutlich:

Eine mit 0,25 Gewicht/Vol.-% Rinderserumalbumin (Fraktion V) modifizierte Dubos-Davis-Nährlösung wurde mit Mycobacterium lufu von einer 4-6 Wochen alten Gottsacker-Schrägkultur beimpft. Um eine einheitliche Suspension zu erhalten, wurden die Bakterien in 5 ml Medium homogenisiert, die Suspension wurde dann mit 15 ml Medium verdünnt und 4 Minuten bei 150 g zentrifugiert. Ein Teil des Überstandes wurde für das elektronische Auszählen und der Rest für das Ansetzen der Kulturen verwendet. Die Suspension wurde auf etwa 10⁵ Zellen/ml verdünnt und 50-ml-Portionen wurden in 300-ml-Erlenmeyer-Kulturflaschen gegeben, die einen Magnetrührer enthielten. Der Hemmstoff wurde zugesetzt und die Kulturen bei 31°C gehalten. Vor der Entnahme von Proben zum Auszählen wurden die Kulturen 1 Minute kräftig magnetisch gerührt. Die Auszählung wurde mit einem Coulter-Counter vorgenommen. Zur Bestimmung der Gesamtkeimzahl wurden Kulturproben mit partikelfreier Kochsalz (0,85%)-Formaldehyd (0,2%)-Lösung verdünnt, so daß eine Zahl von 500:20 000 Organismen erhalten wurden. Zur Bestimmung der Lebendkeimzahl wurden 0,5-ml-Proben von Zeit zu Zeit entnommen, in 50 ml frische Nährlösung gegeben und bei 31°C inkubiert. Die Kulturen wurden nach 8 Tagen - wie oben beschrieben - mit dem Coulter Counter ausgezählt.

Die Veränderung der Wachstumsraten der Kulturen in Gegenwart der einzelnen Hemmstoffe wurde ermittelt. Dazu wurde die Geschwindigkeitskonstante k_app [Sek.^-1] für die beobachtete Vermehrungsgeschwindigkeit erster Ordnung, in Abwesenheit und Gegenwart der Hemmstoffe, aus der Steigung der Wachstumskurven nach der Gleichung

log N = k_app t/2.303 + log N₀

bestimmt, wobei N die Anzahl der Mikroorganismen in einem definierten Kulturvolumen, t die Zeit in Sekunden und N₀ die Anzahl der Keime zum Zeitpunkt t = 0 ist.

Die Resultate sind in der Tabelle I für DDS-sensible und in der Tabelle II für DDS-resistente (= 100 µM DDS) Mycobacterien (M. lufu) zusammengefaßt. Es werden die Konstanten für die beobachtete Dauervermehrungsgeschwindigkeit (steady state generation rate) für M. lufu bei 31°C bei Anwesenheit verschiedener Inhibitoren, bei unterschiedlichen Konzentrationen angegeben:

Tabelle I

Tabelle II

Die Tabellenwerte zeigen, daß in Gegenwart der erfindungsgemäßen Wirkstoffkombinationen kein Wachstum der Mikroorganismen und sogar eine Reduktion der Lebendkeimzahl in der Kultur beobachtet wurde, wogegen das Kulturwachstum - wenn auch in verlangsamter Weise - fortschritt, wenn die Wirkstoffe einzeln anwesend waren. Auch DDS-resistente Kulturen werden durch die Kombination DDS-Brodimoprim in geeigneten Konzentrationen vollständig gehemmt.

Vergleichsversuche A) In vitro Vergleichsversuch

Es wurde die Wirksamkeit eines Diaminodiphenylsulfon (DDS) und Brodimoprin (BDP) enthaltenden Präparats verglichen mit einem Präparat, das DDS und Trimethoprim (TMP) enthielt.

Bei den Tests wurden die Konstanten für die beobachtete Dauervermehrungsgeschwindigkeit (steady state generation rate) für DDS-sensible Mycobakterien (M. lufu) angegeben. Die Resultate sind in der nachstehenden Tabelle angegeben:

Tabelle III

B) In vivo-Test

Es wurden die Wirksamkeiten der Kombination von einerseits DDS und TMP und andererseits DDS und BDP im Mäusepfoten-Test, (beschrieben in Lepr. Rev. 49, 1978, 7) bestimmt.

In diesem Test zeigte eine Kombination von 0,0001% DDS und 0,1% TMP keinen Hemmeffekt.

Eine Kombination von 0,0001% DDS und 0,03% BDP bewirkte dagegen eine Verzögerung der Bakterienvermehrung (M. leprae) von 120 Tagen.

Dies zeigt, daß die erfindungsgemäße Kombination bedeutend wirksamer ist als die Kombination von DDS und TMP obwohl bei der erfindungsgemäßen Kombination eine bedeutend niedrigere Konzentration von BDP als TMP (Stand der Technik) verwendet wurde.

Die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Präparate enthalten die erwähnte Wirkstoffkombination zusammen mit einem verträglichen pharmazeutischen Träger. Dieser Träger kann ein für die enterale, perkutane oder parenterale Verabreichung geeignetes organisches oder anorganisches Trägermaterial sein, wie z. B. Wasser, Gelatine, Gummi arabicum, Lactose, Stärke, Magnesiumstearat, Talk, pflanzliche Oele, Polyalkylenglykole, Vaseline und dergleichen. Darüberhinaus können die pharmazeutischen Präparate weitere pharmazeutisch wertvolle Stoffe enthalten, wie fiebersenkende Mittel, schmerzstillende Mittel, entzündungshemmende Mittel und dergleichen. Die pharmazeutischen Präparate können oral, z. B. in Form von Tabletten, Kapseln, Pillen, Pulver, Granulaten, Lösungen, Sirupen, Suspensionen, Elixiren und dergleichen verabreicht werden. Die Verabreichung kann aber auch parenteral, z. B. in Form von sterilen Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen, oder lokal, in Form von Lösungen, Suspensionen, Salben, Pudern, Aerosolen und dergleichen, erfolgen. Die pharmazeutischen Präparate können sterilisiert sein und/oder Bestandteile enthalten, wie Konservierungsmittel, Stabilisatoren, Netzmittel, Emulgatoren, Salze, um den osmotischen Druck zu variieren, und Puffersubstanzen.

Die erfindungsgemäßen Präparate können zur Behandlung der Lepra, auch der DDS-resistenten Lepra, Verwendung finden. Die Präparate eignen sich besonders bei der nicht ärztlich überwachten Therapie der Lepra und zur Vermeidung der Resistenzentwicklung bei DDS-Monotherapie.

Zur therapeutischen Anwendung können die erfindungsgemäßen Präparate in täglichen Dosen von 50-100 mg DDS und einer entsprechenden Menge Brodimoprim beim Erwachsenen verabreicht werden.

Die Dosis kann als Einzeldosis oder in mehreren über den Tag verteilten Teildosen verabreicht werden. Vorzugsweise wird eine Tablette täglich verabreicht.

Ein Beispiel einer typischen Dosierungsform ist die folgende:

Tablette
DDS\|100 mg
Brodimoprim	200 mg
PRIMOJEL (Stärke-Derivat)	6 mg
Povidone K 30 (Polyvinylpyrrolidon)	8 mg
Magnesiumstearat	6 mg
Totalgewicht	420 mg

Claims

1. Pharmazeutisches Präparat, enthaltend Diaminodiphenylsulfon und 2,4-Diamino-5-(4-bromo-3,5-dimethoxy-benzyl)-pyrimidin.

2. Präparat gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Molverhältnis Diaminodiphenylsulfon : 2,4-Diamino- 5-(4-bromo-3,5-dimethoxybenzyl)-pyrimidin 1 : 1 bis 1 : 10 ist.

3. Verwendung eines Präparates gemäß Anspruch 1 oder 2 zur Behandlung der Lepra und/oder anderer Mycobacteriosen.