DE3220232A1 - Verfahren zur stabilisierung von blutplaettchen bei der bestimmung mehrfacher blutplaettchenparameter in vergleichskontrollen und eichzusammensetzungen - Google Patents
Verfahren zur stabilisierung von blutplaettchen bei der bestimmung mehrfacher blutplaettchenparameter in vergleichskontrollen und eichzusammensetzungenInfo
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Description
Dipl.-Ing. K. Schieschke
8000 München 40, Etisabethstr. 34 _. 4 _
Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Stabilisierung
von menschlichen und tierischen Blutplättchen ohne die Verwendung von Aldehyden oder anderen Fixiermitteln
zur Bestimmung mehrfacher Blutplättchenparameter in Vergleichskontrollen unter Verwendung einer elektronischen
Vorrichtung sowie auf Verdünnungsmittel dafür. Der technologische Fortschritt in jüngster Zeit hat die
Entwicklung der Geräte zur Zählung von biologischen Zellbestandteilen für klinische Diagnosezwecke beschleunigt,
was einen Wunsch nach Verbesserung von Qualitätskontrollprodukten hervorgerufen hat.
Um. Blutplättchenvergleichskontrollen herzustellen, werden die Blutplättchen aus dem Blut durch Zentrifugieren entfernt,
mit gepufferter Salzlösung gewaschen und dann mit Mitteln "fixiert" wie Glutaraldehyd, Formaldehyd, Brenztraubensäure
oder dergleichen. Die mit Aldehyd umgesetzten Blutplättchen werden dann in einem Puffer suspendiert.
Die suspendierten Blutplättchen sind nicht stabil und bilden unter zahlreichen Umständen Aggregate. Darüber
hinaus ändern die mit Aldehyd umgesetzten Blutplättchen allmählich ihre Form, wobei sie mit ztmehmendem Alter
zusammenschrumpfen.
Die aldehydumgesetzten Blutplättchen sind dazu vorgesehen, in Teilchenzellgeräten verwendet zu werden, die durch die
Teilchengröße beeinträchtigt werden. Die Vergleichskontrolle sollte daher im Idealfall Blutplättchen enthalten,
^O die der Größe nach den Blutplättchenteilchen im normalen
menschlichen Blut möglichst ähnlich sind. Es ist ersichtlich, daß die Aggregation die Zählung und die Größe
der Teilchen in den Vergleichskontrollen beeinträchtigt. Es ist auch ersichtlich, daß jede vorkommende Schrumpfung
oder Schwellung den Wert der Kontrolle beeinträchtigt, da die Blutplättchen dann nicht mehr die gleiche Größe
aufweisen wie die Blutplättchen im frischen menschlichen Blut.
Es werden gegenwärtig mehrere menschliche Blutplättchenyergleichskontrollen
auf den Markt gebracht. Es ist jedoch eine Verbesserung in bezug auf eine langanhaltende
Stabilität bei der Messung des mittleren Blutplättchenvolumens
und der Größenverteilungsbreite erforderlich.
Ein derartiges Gerät ist das Coulter Counter Model S-Plus
Hämatologiesystem, das zählt und die Zählung sowie die Volumenverteilung menschlicher Blutplättchen in Gesamtblutproben
überprüft. Ähnliche Geräte dieses Typs werden von anderen Unternehmen zu diesem Zweck hergestellt. Die
Einzelheiten der elektronischen Eichung werden der Bedienungsperson derartiger Geräte genau beschrieben.
Eine menschliche Blutplättchenvergleichskontrolle muß sämtliche Kriterien erfüllen, die mit menschlichen
Patienten-Proben gemessen werden. Die Vergleichskontrolle muß einer normalen frischen Gesamtblutprobe möglichst
nahe kommen. Sie muß auch den genau eingestellten Grenzwerten in bezug auf die Zählweise, genau ausgeglichenen
Öffnungen, dem Strom, den Verstärkungseinstellungen und der Empfindlichkeit des Systems hinsichtlich sämtlichen
funktioneilen Gesichtspunkten entsprechen.
Die mittlere Blutplättchenvolumenverteilungs-Analyse
hat in jüngerer Zeit zunehmend Beachtung gefunden als geeignete Messung für die klinische Anwendung. Die Großenverteilungsbreite
menschlicher Blutplättchen kann jetzt aufgrund spezifisch gemessener Parameter errechnet werden.
Jed.em der gemessenen Parameter trägt zu einer Verbesserung
bei der Prüfung der loaarithmischen normalen Verteilung
von menschlichem Blutplättchen bei. Auch führen Änderungen und Verschiebungen bei dem Verfahren zu falschen Zählungen.
Der Grund für diese Zählabweichungen ist im allgemeinen die Aggregation. Die Aggregation der Blutplättchen führt
zu Doubletten, die bei dem weißen Blutkörperchenverfahren gezählt werden, was zu unzuverlässigen Qualitätskontrollmessungen
führt. In dem Ausmaß, in dem die Blutplättchen
τ- 6 -
j einer Aggregation unterliegen, erscheinen die Blutplättchen
Aggregate der automatischen Vorrichtung als weiße Blutkörperchen und werden als solche gezählt.
Da die Zahl der vorhandenen Blutplättchen. etwa 30 mal größer ist als die Zahl der im frischen Blut vorhandenen
weißen Blutkörperchen, kann, selbst wenn nur ein kleiner Anteil der Blutplättchen Aggregate bildet, dies zu unzuverlässigen
Ergebnissen bezüglich der Zählung der weißen Blutkörperchen führen, insbesondere nach Behandlung mit
IQ den üblichen Fixiermitteln.
Die Haftfähigkeit der Blutplättchen führt gleichfalls zu falschen Zählungen. Die Adhäsion der Blutplättchen der
Blutplättchen an "fremde" Oberflächen ist mit einer Viel-
l.h zahl von Methoden gemessen worden. Im Prinzip sind alle
diese Tests die gleichen. Die Verringerung der Blutplattchenzahl,
die auftritt, wenn Blut mit einer "fremden" Oberfläche für einen bestimmten Zeitraum in Berührung
kommen kann, wird bestimmt. Diese Verringerung ist zum Teil ein Hinweis auf die Zahl der Blutplättchen, die an der
fremden Oberfläche haften, wobei dieser Wert, der als Prozentsatz der ursprünglichen Blutplättchenzahl ausgedrückt
wird, als Haftfähigkeit bezeichnet wird. Es ist jedoch bekannt, daß der Blutplättchenverlust zum Teil auch
auf die Blutplättchenaggregation zurückzuführen ist. Die Haftfähigkeit der Blutplättchen, obgleich entweder von
Kalzium- oder Magnesiumionen abhängig, ist nicht so selektiv in dieser Beziehung als die Haftfähigkeit der
Polymorphonukleozyten.
Die Blutplättchen nehmen an der primären Hämostase
teil, in dem sie Aggregate an verletzten Blutgefäßstellen bilden. Das Mittel, das letztlich für die Blutplättchenaggregation
verantwortlich ist, dürfte Adenosindiphosphat (ADP) sein, das von verletztem Gewebe oder Erythozyten
abgegeben werden kann oder von den Blutplättchen selbst abgegeben wird u. a. durch Kollagen, Thrombin und Epenephrin.
Bei einigen Patienten mit Blutungsstörungen und bei
normalen Patienten nach der Einnahme von Arzneimitteln
kann die Blutplättchenaggreaation durch eine oder mehrere dieser Mittel beeinträchtigt werden. Diese Beeinträchtigung
der Blutplättchenaggregation kann zu einer verlängerten Blutungsdauer führen, die bei diesen Patienten oft auftritt .
Eine weitere Abweichung der Blutplättchenzählung wird durch
das schlechte Stabilitätsverhalten bis zu dem erwarteten Verfallsdatum der Kontrolle hervorgerufen. Versuche, die
menschlichen Blutplättchen zu stabilisieren, haben sich als außerordentlich schwierig erwiesen. Ein Hauptproblem
besteht in der Zersetzung der Blutplättchenmembran. Es . sind Fixiermittel verwendet worden, um die Zersetzung zu
l·1' steuern. Wenn die Blutplättchenmembranen sich zersetzen,
bilden sie Zerfallsprodukte, wodurch falsche Zählungen
hervorgerufen werden.. Den neuen Methoden aufgrund einer
verbesserten Computertechnologie zur Kurvenanpassung von Ausgangsdaten haften diese Probleme an.
In der-US-PS 4 198 206 wird ein Verfahren zur Herstellung
von Kontrollen aus Blutplättchen beschrieben, die keine Aggregate bilden und die die gleiche Größe wie Blutplättchen
im menschlichen Blut aufweisen sowie ihre Größe mindestens sechs Monate beibehalten. Diese Kontrolle ist
eine Suspension aus mit Aldehyd umgesetzten Blutplättchen, die mit einer Lösung gewaschen worden sind aus
"!)· einer Aminosäure, nämlich Glycin oder Alanin;
ow 2) Glycol, Glyzerin oder Methanol;
3) Natriumchlorid und Natriumphosphat; und
4) ein festes Polyäthylenglycol (Molekulargewicht 4000
bis 20000).
Der vorgeschlagene Mechanismus dieser Reaktion zeigt, daß die Aminogruppe der Aminosäure mit der Aldehydgruppe
reagiert, so daß eine weitere Reaktion, die eine Ver~
netzxing einschließt, die zu ". einer Verhärtung und einer
- 8 Schrumpfung der Blutplättchen führt, nicht auftreten kann.
Die Erfiridung bezieht sich auf ein Verfahren zur Aufarbeitung
von menschlichen oder tierischen Blutplättchen und zur Stabilisierung von Blutplättchen ohne Verwendung
von Fixiermitteln, wie Glutaraldehyd, das dazu beiträgt,
die vorstehend erwähnten Abweichungen zu verhindern. Es werden überraschende und überlegene Ergebnisse durch
die Verwendung von Jodacetamid erhalten, das die Formel JCH-CONHp aufweist, sowie von ADA, das die Formel
.H2NCOCh2N(CH2COOH)2 besitzt, ohne Verwendung aldehydbehandelter
Blutplättchen. Die Stabilität der Zellen während eines langen Zeitraums wird erhöht, ohne daß die
Zellgrößenverteilung verändert wird.
Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Stabilisierung von menschlichen und tierischem Blutplättchen ohne
die Verwendung von Aldehyden oder anderen Fixiermitteln zur Bestimmung mehrfacher Blutplättchenparameter in Ver-
*i0 gleichskontrollen unter Verwendung einer elektronischen
Vorrichtung, Insbesondere wird durch die .Erfindung eine
neue stabilisierende Zusammensetzung zur Suspendierung von Blutplättchen zur Verfügung gestellt, die als Kontrollreagenz eingesetzt werden kann, das in der Lage ist die
gewünschten Blutplättchenparameter der Patientenblutprobe zu überwachen. Diese Parameter umfassen die Blutplättchenzählung,
die Größenverteilungsbreite, das mittlere Blutplättchenvolumen sowie das Signal/Untergrund-Verhältnis
(Zerfallsprodukte), insbesondere in Einzelpräparationen.
30
Die Stabilisierung der Blutplättchen wird dann durchgeführt,
indem zu einer wässrigen Elektrolytlösung davon eine geeignete Menge einer Kombination von (1.) Jodacetamid und
(2) Iminodiessigsäure sowie dessen Alkalimetall- und ^° Alkalipuffersalz gegeben wird, zusammen mit einem
verträglichen bakteriostatischon Mittel, während die Lösung in einem vorbestimmten pH- und Osmolalitätsbereich
gehalten wird.
— ΟΙ Die Iminodiessigsäure ist vorzugsweise N-- (2-Acetamido)-iminodiessigsäure
(ADA) und die bakteriostatische Verbindung gehört vorzugsweise zur Penicillingruppe und ist
insbesondere Natriumpenicillin, das eine weitere stabilisierende Wirkung auf die Blutplättchen haben kann.
Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA), dessen Natrium-oder
Kaliumsalz oder Hydroxyäthyläthylendiamintriessigsäure können in der Formulierung enthalten sein.
Bei der Erfindung wird zur Stabilisierung von Blutplättchen
eine Kombination von Jodacetamid und eine 'Iminoessigsaure
oder dessen Salz zusammen mit einem verträglichen bakteriostatischen Mittel verwendet, und zwar in einer wässrigen
Ib elektrolytischen Lösung, die auf einem vorbestimmten pH-
und Osmolalitätsbereich gehalten wird.
Durch Jodacetamid wird eine Herabsetzung oder Beseitigung
der Haftfähigkeit der Blutplättchen und der polymorphonuklearen Zellen bewirkt. Ohne Einschränkung auf irgendeine theoretische
Wirkungsweise ist es bekannt, daß Blutplättchen und polymorphonukleare Zellen aktive glycolisierende Systeme
aufweisen, wobei die Daten übereinstimmen mit der Hypothese, daß Jodacetanid auf die Haftfähigkeit durch Blockierung der
Glycolyse einwirkt. Die Daten stimmen jedoch auch mit einer Hypothese überein, die die Haftfähigkeit einem schwefel—
hydridabhängigen Mechanismus mit einer ähnlichen Empfindlichkeit gegenüber Jodacetamid zuschreibt.
Die Haftfähigkeit der Blutplättchen scheint gleichfalls
von den zweiwertigen Kationen abhängig zu sein, obgleich die für die Blutplättchen erforderliche Konzentration viel
niedriger zu sein scheint als diejenige, die für die polymorphonuklearen Zellen erforderlich ist. Sowohl
Magnesium- wie Kalziumionen sind für die Haftfähigkeit
erforderlich. Kalziumionen allein sind nicht in der Lage, die Haftfähigkeit der polymorphonuklearen Zellen aus Blut
wieder herzustellen, das mit einem Chelatharz behandelt
- το -
worden ist, um die zweiwertigen Kationen zu entfernen.
Die kombinierte Verwendung von N-*(2-Acetamido) iminodi-■
essigsäure (ADA) und Jodacetamid als spezifische Chelatreagenzien hat auch gezeigt, daß menschliche Blutplättchen
für eine ausgedehnte Zeitspanne ohne Aggregation oder Verlust ihrer Unversehrtheit stabilisiert werden können.
Jodacetamid allein gleicht diese Faktoren nicht aus.: Auch sind die Puffereigenschaften für die Suspendierung in
blutplättchenreichem Plasma nicht ausreichend.
Die Kombination von Iminodiessigsäuresalzen, insbesondere
ADA, mit Jodacetamid erhöht die Stabilität, beseitigt die Aggregation und erhöht die Wirkung der antikoagülierenden
Eigenschaften, des ADA. Die Puffereigenschaften des ADA sind
für menschliche Blutplättchen ideal. Etwa 0,5 Gramm bis etwa 2,0 Gramm Jodacetamid werden pro Liter Stabilisierungslösung zugesetzt.
Geeignete Iminodiessigsäureverbindungen sind:
N-(2-Aoetamido)iminodiessigsäure (ADA), Natrium ADA,
Kalium ADA, Lithium ADA, Tris-ADA oder Imidazol ADA. -. ·. Etwa 0,5 bis. 2,0 Gramm ADA oder das Ä'quivalentgewicht von
dessen Salz wird pro Liter wässrige Blutplättchensu's— pension, beispielsweise einem blutplättchenreichen Plasma,
zugesetzt.
Das verträgliche bakteriostatische Mittel umfaßt Natriumpenicillin
G, Kaliumpenicillin G, Procainpenicillin G, ^ Kaliumpenicillin V, Ampicillin und Carbenicillin.
Bevorzugte Formulierung
1.. Jodacetamid 1,0 g
2. N-(2-Acetamido)iminodiessigsäure (ADA) 1,0 g
3. Natriumchlorid 9,4166 g
4. Natriumpenicillin 0,155 q' aufgefüllt auf einen Liter mit destilliertem
Wasser
Osmolalität = 31.0 ; pH "
eingestellt auf 7,0 _+ 0,1 mit NaOH.
Bei der vorstehenden Formulierung ist es wünschenswert,
Äthylendiamintetraessigsäure (EDTA) oder dessen Salze
als möglichen Bestandteil zuzusetzen, um als Chelatreagenz für zweiwertige Ionen zu wirken. Etwa 0,5 Grammbis etwa 2,0
Gramm EDTA oder das Äquivalentgewicht dessen Salzes werden pro Liter wässrige Blutplättchensuspension zugesetzt.
Herstellungsverfahren
1. Etwa 500 ml destilliertes Wasser werden in einen
1.-Liter-Kolben gegeben..
:::, - .2. 1 Gramm ADA wird zugesetzt und aufgelöst.
:::, - .2. 1 Gramm ADA wird zugesetzt und aufgelöst.
3. Wenn die Formulierung Dinatrium EDTA umfaßt,wird 1. Gramm zugegeben und aufgelöst.
4. 1. Gramm Jodacetamid wird zugegeben und aufgelöst.
5. 9,4166 Gramm Natriumchlorid werden zugegeben und aufgelöst.
6. 0,155 Gramm Natriumpehicillin werden zugegeben und aufgelöst.
7. Mit destilliertem Wasser.wird auf einen Liter aufgefüllt.
8. Mit Natriumhydroxid wird der pH auf 7,0 +_ 0,5 eingestellt,
und die Osmolalität mit Natriumchlorid auf 330 +_ 30.
9. Durch einen 0,22 Mikron Filter wird in sterile Beutel filtriert.
1.0. Es erfolgt eine Aufbewahrung bei Raumtemperatur bis
zu sechs Monaten.
In der US-PS 4 116 635 werden die antikoagulierenden Eigenschaften
sowohl von EDTA wie von ADA unter Verwendung von Gesamtblut beschrieben, wobei die in Tabelle I dieser
Patentschrift angegebenen Ergebnisse genannt werden.
Log K1, die bedingte Stabilitätskonstante bei pH 7,5 betrug 7,9 für EDTA und lediglich 4,0 für ADA. Nach einem
Verfahren zur Prüfung einer Blutprobe bezüglich der Koagulation und anderer Faktoren gemäß dem Anspruch 1.
dieser Patentschrift wies das gewählte Antikoagulanz einen Log K1 von 3,4 bis etwa 4,2 auf, schloß also ADA ein,
jedoch EDTA aus.
Es ist überraschend, daß erfindungsgemäß die besseren
Ergebnisse erhalten werden, wenn sowohl ADA wie EDTA in etwa gleichen Mengen in der Formulierung verwendet werden.
IQ Die Menge des EDTA, das der wässrigen Formulierung der
Blutplättchen zugegeben wird, beträgt etwa 0,5 Gramm bis
etwa 2,0 Gramm je Liter..
Die nachstehenden Beispiele veranschaulichen das Verfahren zur Stabilisierung der Blutplättchen ohne die Verwendung
von Fixiermitteln zur Bestimmung mehrfacher Blutplättchenparameter
mit einer elektronischen Vorrichtung.
Stabilität eines blutplättchenreichen Plasmas
ohne Behandlung mit einer stabilisierenden Lösung
Zeit S/N MPV
6 ,6u
nach 4 Tagen 5,00 6,6ui:
6,1u 6,Ou ungeeignet
Die vorstehenden Ergebnisse wurden erhalten, wenn eine stabilisierende Lösung bei 2 bis 80C aufbewahrt und eine
Bestimmung mit einem Standard Coulter Counter Model S-Plus Gerät erfolgte.
Das Signal/Untergrund-V.erhältnis nahm mit der Zeit ab, d. h. der Untergrund erhöhte sich gegenüber dem Signal. Alle
Parameter zeigten Veränderungen mit der Zeit. Nach 7 Tagen zeigte sich ein vollständiger Zellzerfall, der zu einer
zu Beginn | 5,55 |
nach 4 Tagen | 5,00 |
nach 4 Tagen | 2,08 |
nach 6 Tagen | 1,82 |
nach 7 Tagen | 1., 43 |
■ - 13 -
ungeeigneten Form der Verteilungsanalysen-Aufzeichnung
führte. Die Blutplättchenzählung, das mittlere Blutplättchenvolumen
(MPV) und die Größenverteilung konnten mit diesem Gerät nicht bestimmt werden.
Repräsentative Proben von glutaraldehydfixierten Blutplättchen
in einer phosphatgepufferten salzhaltigen Lösung zeigten ebenfalls eine Abnahme des mittleren Blutplättchenvolumens
nach einer bestimmten Zeit. Die gegenwärtig hergestellten klinischen hämatologischen Geräte können eine
Verschiebung nach links (Abnahme) von der mittleren Blutpiättchengrößenverteilung
nicht aufnehmen. Diese Verschiebung führt zu einer ungeeigneten Bedingung.
Eine zu große Menge an Bruchstücken führt zu ungeeigneten
Größenverteilungskurven.
Repräsentative Proben nach der Behandlung von Blutplättchen mit einer stabilisierenden Lösung mit der
bevorzugten· Formulierung
Mittleres Mittlere Tag Nr. S/N Zählung Blutplättchen Vol. Größenverteilung
17,1 17,1
17,2 17,1
Die vorstehenden Ergebnisse wurden erhalten, wenn bei 2 bis 80C aufbewahrt und mit einem Standard Coulter Counter
Model S-Plus Gerät bestimmt wurde. Diese Ergebnisse zeigen, daß eine signifikante Änderung bei irgendeinem
Parameter nach 1.80 Tagen auftritt. Es liegt eine hervorragende Stabilität in bezug auf sämtliche kritischen
Parameter vor, die für Qualitätskontrollanwendungen, die mit elektronischen Vorrichtungen gemessen werden,
notwendig sind.
30 | 4,54 | 206 | 7,8 |
60 | 4,0 | 202 | 7,9 |
90 | 4,0 | 193 | 7,6 |
120 | 4,0 | 206 | 7,7 |
• 180 | 4,0 | 193 | 7,6 |
Die Signal/Untergrund-Verhältnisse müssen maximiert werden,
damit die Bedienungsperson sicher ist, daß das Instrument sich entsprechend den Daten des Herstellers verhält. Ein
zu starker Untergrund ist ein stets vorhandenes Problem, aufgrund der Blutplättchenzerfallsprodukte und des Zellzerfalls
während der Lebensdauer dieser Produkte. Bei diesen Proben zeigte das Signal/Untergrund-Verhältnis keine
Abnahme, wodurch das Gerät nicht mehr in der Lage wäre, die Parameter bei Qualitätskontrollmessungen exakt zu
messen. Verminderte Signal/Untergrund-Verhältnisse können bei elektronischen Teilchen Größenbestimmungsgeräten
nicht akzeptiert werden, insbesondere bei niedrigen Grenzwerten, bei denen die Blutplättchen gezählt und ihre
Teilchenverteilung bestimmt wird.
Statistische Daten dokumentieren die Verwendung der vorstehend angegebenen stabilisierten menschlichen Blutplättchen
in Gesamtblutkontrollpräparaten nach 100 Tagen
in mehreren klinischen hämatologischen Laboratorien. •AU
Durch die Vorbehandlung menschlicher Blutplättchen mit der erfindungsgemäßen stabilisierenden Lösung können die
Zellen erneut in menschlichen oder tierischen roten Blutkörperchenpräparaten als Kontrolle zur überwachung
elektronischer Geräte suspendiert werden. Auch ist es möglich, menschliche Blutplättchen für invitrotherapeutische
Anwendungen zu stabilisieren.
Zur Vorbehandlung der Blutplättchen werden etwa 50 bis
100 ml des stabilisierenden Verdünnungsmittels direkt zu einer 200 +5Og Menge eines blutplättchenreichen
Plasmas (PRP) gegeben und gut vermischt. Das stabilisierte PRP kann dann bei Raumtemperatur 7 Tage stehen gelassen
werden vor dem Zentrifugieren zur Erzeugung eines Blut—
plättchenkonzentrats. Statt dessen kann das PRP durch die Zugabe des stabilisierenden Verdünnungsmittels bei 4 bis
60C bis zu 3 Monaten aufbewahrt werden, bevor eine Weiterverarbeitung
durch Zentrifugieren erfolgt, um das
- 15 Blutplättchenkonzentrat zu erhalten.
PRP wird bei etwa 3800 U/min 5 Minuten lang (gekühlte
Zentrifuge) zentrifugiert und der überstand wird abgedrückt
und verworfen.. Eine phosphatgepufferte Salzhaltige
Lösung mit einem pH von 7,0 bis 7,2 und 320 mOs/kg wird
unter Rühren zugegeben und der Waschschritt wird ein zweites Mal wiederholt. Die Blutplättchen werden nach dem
zweiten Waschgang konzentriert und zu einem einzigen hochkonzentriertem Vorrat zusammengefaßt.
Das Blutplättchenkonzentrat wird dann erneut in dem Verdünnungsmittel
in der gewünschten Konzentration suspendiert, wobei dieses Präparat zu den stabilisierten Erythrozyten
zugegeben wird, um als eine Gesamtblutkontrolle eingesetzt zu werden. Das Endpräparat wird bei 2 bis 80C
bis zu 6 Monaten aufbewahrt.
. Dieses Verdünnungsmittel stabilisiert ein blutplättchenreiches Plasma mit Erfolg, das unter Verwendung von herkömmlich
hergestellten Antikoagulanzien erhalten worden
ist, wie CPD (Citrat-phosphat-dextrose), ACD (Säurecitratdextrose)
und EDTA (Äthyl!endiamintetraessigsäure).
Die stabilisierten Blutplättchen können in einzelnen Blutplättchenkontrollen Verwendung finden, desgleichen in
Gesamtblutvergleichskontrollen, um gute Qualitätskontrollverfahren
sicherzustellen und mehrfache Blutplättchenparameter
zu überwachen, einschließlich (1) der Zählung,
(2) der mittleren Teilchenverteilung, (3) dem mittleren Blutplättchenvolumen und (4) dem Signal/Untergrund-Verhältnis
(Zerfallsprodukte).
Es ist bekannt, daß stabilisierte Blutzellenpräparate, ·.-?! ~ die sich zur überprüfung der Genauigkeit automatischer
Zählgeräte für Blutbestandteile eignen, in einem gewissen Ausmaß akzeptierbaren Veränderungen unterliegen. Derartige
Präparate werden kurz auf Seite 14 des Buchs "Hematology"
,. 1.6 -
von Williams, Beutler, Erslev und Rundles, McGraw-Hill, Inc. (1.972) erörtert.
In der Hämatologie wird ein Unterschied zwischen der
Bezeichnung""Eichung" und "Vergleichskontrolle" gemacht. Eichungen sind Blutzellenpräparate, die verwendet werden,
um das automatische Gerät im Hinblick auf bestimmte wesentliche Zahlen einzustellen wobei sie lediglich
einmal verwendet werden. Vergleichskontrollen sind Blutzellenpräparate,
die von Zeit zu Zeit verwendet werden, um die kontinuierliche Genauigkeit eines automatischen
Geräts zu überprüfen, das vorher "geeicht" worden ist, mit dem. Blutzelleneichpräparat.
"j5 Ein Vorteil der Erfindung besteht darin, daß Blutplättchen,
die nach dem hier beschriebenen Verfahren ohne die Verwendung von Aldehyden als Fixiermitteln stabilisiert
worden sind, um. Vergleichskontrollen zu erhalten, die 60 Tage und mehr stabil sind, dann einer zweiten Stabilisierungsbehandlung
nach anderen Verfahren unterworfen werden können, einschließlich Verfahren, bei denen
Aldehyde und/oder oberflächenaktive Mittel eingesetzt werden, um Blutplättchenpräparate zu erhalten, die eine
verbesserte Stabilität über einen langen Zeitraum aufweisen, insbesondere für bestimmte Zwecke. Solche
Präparate sind insbesondere für Eichzusammensetzungen geeignet.
Diß Blutplättchen, die nach einer bevorzugten erfindungsgemäßen Formulierung stabilisiert sind, können beispielsweise
dann mit einem Fixiermittel-Stabilisier-Medium behandelt werden, das folgende Formulierung aufweist:
- 17 - | 0,1.96 | g | |
NaH2PO4-H2O | 9,980 | g | |
Na2HPO4-7H2O | 0,098 | g | |
NaN3 | 7,9 | g | |
NaCl | 8,4 | g | |
Glutaraldehyd, 49 % | 0,5 | g | |
Tergitol 1.5-S-1.2 | 1 | L | |
Wasser (gefüllt) | |||
Der pH wird mit Phosphat auf 7,3 bis 7,4 eingestellt, und die Osmolalität auf 290 mOs/kg mit
10 NaCl.
Tergitol 15-S—12 ist ein Gemisch aus Äthoxylaten isomerer
linearer Alkohole, die in der US-PS 3 912 450 (1975)
und der US-PS 3 968 248 (1976) beschrieben werden. Das l_5 Gemisch weist folgende Formel auf:
CH3-(CH2Jn-CH3
0-(CH2-CH2-O)x-H
2Ü
worin die Polyoxyäthylenkette zufallsverteilt an die
lineare aliphatische Kette gebunden und η = 9 bis 13 und χ = 9 bis 13 ist.
o,- Patentanwälte
Claims (11)
- PatentanwälteDipl.-Ing. E. EderDipl.-Ing. K. SchieschkeMünchen 40, Elisabsthstr. 34COULTER ELECTRONICS, INC Hialeah / Florida U.S.A.Verfahren zur Stabilisierung von Blutplättchen bei der Bestimmung mehrfacher Blutplättchenparameter in Vergleichskontrollen und Eichzusammensetzungen; Verdünnungsmittel dafür sowie kombinierte StabilisierunasverfährenPate nt ansprücheVerfahren zur Stabilisierung von Blutplättchen, dadurch gekennzeichnet, daß zu den Blutplättchen in einer Suspensionsflüssigkeit eine stabilisierende Lösung zugegeben wird, die eine wässrige Lösung von Jodacetamid und einer Iminodiessigsäure sowie den Alkalimetall- und alkalischen Puffersalzen dieser Säure ist,zusammen mit einem verträglichen bakteriostatischen Mittel, wobei das'gebildete Medium in einem vorgegebenen pH- und Osmolalitätsbereich unter Verwendung eines Alkalimetallhydroxids und eines Alkalimetallchlorids gehalten wird.
- 2. Verfahren nach Anspruch 1., dadurch gekennzeichnet, daß die Blutplättchen eine geeignete Zeit bei einer geeigneten Temperatur stehen gelassen werden, um wenigstens eine teilweise Stabilisierung zu erreichen, die Blutplättchen von der stabilisierenden Lösung getrennt werden und dazu eine geeignete Menge Glutaraldehyd und eines nichtionischenoberflächenaktiven Mittels gegeben wird, das ein Gemisch aus Äthoxylaten isomerer linearer Alkohole mit der Formel0-(CH^CH9O)-Hist, worin die Polyoxyäthylenkette zufallsverteilt an die lineare aliphatische Kette gebunden und η = 9 bis χ = 9 bis 1.3 ist, wobei die Zusammensetzung auf einen vorbestimmten pH-*· und. Osmolalitätsbereich eingestellt wird..
- 3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß .Ethylendiamintetraessigsäure sowie deren Natrium oder Kaliumsalze als zusätzlicher Bestandteil der stabilisierenden Losung vorliegen.
- 4. Verfahren nach Anspruch 1, 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Iminodiessigsäure N-(2-Acetamido) iminodiessigsäure ist.
- 5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß die Iminodiessigsäure in einer Konzentration von 0,5 g bis 2,0 g pro Liter vorliegt.
- 6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurchgekennzeichnet, daß das bakteriostatische Mittel derPenicillingruppe angehört, einschließlich Pencillin G, Kali=\ampenicillin G, Procainpenicillin G, Kaliümpenicillin V, Ampicillin und Carbenicillin.
- 7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1. bis 6, dadurchgekennzeichnet, daß die stabilisierende Lösung z.u einem blutplättchenreichen Plasma gegeben wird.
- 8. Verfahren nach einem der Ansprüche 1. bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß das Jodacetamid in einer Konzentration von 0,5 g bis 2,0 g pro Liter vorliegt.
- 9. Hämatologisches Vergleichskontrollmedium zur Be-^ Stimmung mehrfacher Blutplättchenparameter mit einer elektronischen Vorrichtung, gekennzeichnet durch eine Suspension von Blutplättchen, die nach dem Verfahren nach einem der Ansprüche 1. bis 8 stabilisiert sind.
- 1.0. Hämatologisches Vergleichskontrollmedium zur Mehrfachanalyse, gekennzeichnet durch eine Suspension roter Blutkörperchen und Blutplättchen, die nach dem Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 8 stabilisiert sind, wobei das Vergleichsmedium zur überprüfung der Genauigkeit der herkömmlichen roten Blutkörperchen- und Blutplättchenparameter geeignet ist.
- 11.. Verdünnungsmittel zur Verwendung in einer elektronischen Vorrichtung zur Stabilisierung von Blutplättchen für die Bestimmung von mehrfachen Blutplättchenparametern, gekennzeichnet durch eine wässrige Lösung von Jodacetamid und einer Iminodiessigsäure sowie den Alkalimetall- und alkalischen Puffersalzen dieser Säure zusammen mit verträglichen bakteriostatischen Mitteln, wobei das Verdünnungsmittel eine wässrige elektrolytische Lösung ist, die in einem vorbestimmten pH^· und Osmolalitätsbereich gehalten wird, um eine langandauernde Blutplättchenstabilität und Abwesenheit von Bruchstücken, die zu falschen Ergebnissen führen, zu gewährleisten.PatentanwälteDipl.-lnc/fe. EderDipl.- Ing. Jfflfechieschk©BQOO Münche^sf&PsabBllistr. 3*
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Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3938907A1 (de) * | 1989-11-24 | 1991-05-29 | Behringwerke Ag | Mittel zum lagern und suspendieren von zellen, insbesondere erythrozyten |
WO1995001796A1 (en) * | 1993-07-05 | 1995-01-19 | Northern General Hospital N.H.S. Trust | Preparation and stabilisation of cells |
WO1995027203A1 (en) * | 1994-04-05 | 1995-10-12 | Northern General Hospital N.H.S. Trust | Preparation and stabilisation of cell suspensions |
EP0721104A2 (de) * | 1993-07-05 | 1996-07-10 | Northern General Hospital N.H.S. Trust | Herstellung und Stabilisierung von Zellen |
Families Citing this family (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA1216518A (en) * | 1982-11-01 | 1987-01-13 | Gail A. Rock | Plasma-free medium for platelet storage |
US4471051A (en) * | 1983-06-13 | 1984-09-11 | New England Medical Center Hospitals, Inc. | Stabilization of neutrophils and platelets |
US4828976A (en) * | 1983-12-29 | 1989-05-09 | Thomas Jefferson University | Glucose free media for storing blood platelets |
US4704364A (en) * | 1984-05-18 | 1987-11-03 | Coulter Electronics, Inc. | Hematology control compositions for three populations of leukocytes; and methods for their preparation and use in whole blood control systems |
US4847204A (en) * | 1984-05-24 | 1989-07-11 | Southeast Vetlab, Inc. | Calibrator composition and method of producing and using same for veterinary applications |
US4711852A (en) * | 1984-11-05 | 1987-12-08 | Akzo N.V. | Control for blood gas analyzers and hemoglobin analysis |
US4858154A (en) * | 1986-04-07 | 1989-08-15 | Coulter Electronics, Inc. | Interlaboratory quality assurance program |
US4788139A (en) * | 1987-08-06 | 1988-11-29 | Streck Laboratories, Inc. | Platelet aggregation reagent, reagent container and method of determining platelet aggregation in EDTA-anticoagulated blood |
US5008202A (en) * | 1988-11-29 | 1991-04-16 | Sequoia Turner Corporation | Blood diluent for red blood cell analysis |
US5256571A (en) * | 1991-05-01 | 1993-10-26 | Cytyc Corporation | Cell preservative solution |
US6509192B1 (en) | 1992-02-24 | 2003-01-21 | Coulter International Corp. | Quality control method |
US6362003B1 (en) | 1992-02-24 | 2002-03-26 | Coulter Corporation | Hematological reference control composition containing leukocyte analogs, methods of making, and uses thereof |
JPH09509681A (ja) | 1994-12-16 | 1997-09-30 | バクスター、インターナショナル、インコーポレイテッド | 供血者血液特性の制御 |
DE19634313A1 (de) * | 1996-08-24 | 1998-02-26 | Behringwerke Ag | Methode zur Stabilisierung von Plättchen |
US7198953B2 (en) * | 2003-10-12 | 2007-04-03 | Beckman Coulter, Inc. | Method of using a reference control composition for measurement of nucleated red blood cells |
JP4993603B2 (ja) * | 2004-04-07 | 2012-08-08 | ベックマン コールター, インコーポレイテッド | 有核赤血球成分を含む参照対照 |
US7109036B2 (en) * | 2004-05-13 | 2006-09-19 | Beckman Coulter, Inc. | Hematology reference control containing an immature granulocyte component |
US7531357B2 (en) * | 2005-04-04 | 2009-05-12 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Preparation of platelet analogs |
US7354767B2 (en) * | 2006-03-16 | 2008-04-08 | Beckman Coulter, Inc. | Reference control composition containing a nucleated red blood cell component made of non-nucleated blood cells |
US7754487B2 (en) * | 2006-11-14 | 2010-07-13 | Beckman Coulter, Inc. | Hematology linearity control composition, system and method of use |
US8835104B2 (en) | 2007-12-20 | 2014-09-16 | Fenwal, Inc. | Medium and methods for the storage of platelets |
WO2012139017A1 (en) | 2011-04-07 | 2012-10-11 | Fenwal, Inc. | Automated methods and systems for providing platelet concentrates with reduced residual plasma volumes and storage media for such platelet concentrates |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4160644A (en) * | 1977-06-13 | 1979-07-10 | Streck Laboratories, Inc. | Platelet reference control and method of preparation |
US4198206A (en) * | 1977-06-13 | 1980-04-15 | Ryan Wayne L | Method for preparing a platelet reference control |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3968250A (en) * | 1971-06-21 | 1976-07-06 | Wave Energy Systems, Inc. | Method and sporicidal compositions for synergistic disinfection or sterilization |
US3873467A (en) * | 1974-02-01 | 1975-03-25 | United Medical Lab Inc | Hematologic reference control |
US3962125A (en) * | 1975-01-13 | 1976-06-08 | Coulter Diagnostics, Inc. | Multi-purpose diluent for use in blood analysis by electronic instrumentation of the coulter type |
DE2546166A1 (de) * | 1975-10-15 | 1977-04-28 | Behringwerke Ag | Gegerbte thrombozyten |
US4116635A (en) * | 1977-03-14 | 1978-09-26 | Jaeger Mark A | General purpose in vitro anticoagulant |
US4302355A (en) * | 1977-08-01 | 1981-11-24 | Warner-Lambert Company | Platelet reference control |
US4213876A (en) * | 1978-08-22 | 1980-07-22 | Coulter Electronics, Inc. | Multi-purpose blood diluent for use in electronic blood analysis instrumentation |
US4299726A (en) * | 1979-05-07 | 1981-11-10 | Coulter Electronics, Inc. | Process for preparing whole blood reference controls having long term stability, preconditioning diluent and media therefor |
US4324686A (en) * | 1979-06-11 | 1982-04-13 | R & D Systems, Inc. | Hematology control composition and methods for its use |
-
1981
- 1981-05-29 US US06/268,050 patent/US4405719A/en not_active Expired - Fee Related
-
1982
- 1982-04-13 CA CA000400904A patent/CA1195931A/en not_active Expired
- 1982-05-28 JP JP57090032A patent/JPS57203957A/ja active Granted
- 1982-05-28 FR FR8209414A patent/FR2506945A1/fr active Granted
- 1982-05-28 ES ES512661A patent/ES8400874A1/es not_active Expired
- 1982-05-28 DE DE19823220232 patent/DE3220232A1/de active Granted
- 1982-05-28 GB GB8215792A patent/GB2099281B/en not_active Expired
-
1986
- 1986-02-13 HK HK106/86A patent/HK10686A/xx unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4160644A (en) * | 1977-06-13 | 1979-07-10 | Streck Laboratories, Inc. | Platelet reference control and method of preparation |
US4198206A (en) * | 1977-06-13 | 1980-04-15 | Ryan Wayne L | Method for preparing a platelet reference control |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3938907A1 (de) * | 1989-11-24 | 1991-05-29 | Behringwerke Ag | Mittel zum lagern und suspendieren von zellen, insbesondere erythrozyten |
DE3938907C2 (de) * | 1989-11-24 | 1999-11-04 | Dade Behring Marburg Gmbh | Mittel zum Lagern und Suspendieren von Zellen, insbesondere Erythrozyten |
WO1995001796A1 (en) * | 1993-07-05 | 1995-01-19 | Northern General Hospital N.H.S. Trust | Preparation and stabilisation of cells |
EP0721104A2 (de) * | 1993-07-05 | 1996-07-10 | Northern General Hospital N.H.S. Trust | Herstellung und Stabilisierung von Zellen |
EP0721104A3 (de) * | 1993-07-05 | 1996-08-14 | North Gen Hospital Nhs Trust | |
WO1995027203A1 (en) * | 1994-04-05 | 1995-10-12 | Northern General Hospital N.H.S. Trust | Preparation and stabilisation of cell suspensions |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US4405719A (en) | 1983-09-20 |
CA1195931A (en) | 1985-10-29 |
ES512661A0 (es) | 1983-12-01 |
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GB2099281A (en) | 1982-12-08 |
JPS57203957A (en) | 1982-12-14 |
JPS648306B2 (de) | 1989-02-13 |
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