DE3214317A1 - Mikrotiterplatte - Google Patents
MikrotiterplatteInfo
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Description
32H317
BEHR1NGWERKE AKTIENGESELLSCHAFT Hoe 82/B 00 7 - Ma
ANR - 1 000 764 Dr.Ha/Bl.
Mϊkrotiterplatte
Die Erfindung betrifft eine Mikrotiterplatte, bei der
sich Randbezirke und Mittelteil gleichmäßig erwärmen, wenn sie auf eine Unterlage mit höherer Temperatur aufgelegt
wird, so daß kein Temperaturgradient zwischen Reaktions!ösungen
in Gefäßen am Rand und solchen im Mittelteil entsteht. Diese Platte hat demnach. Eigenschaften,
die den sogenannten Rahmeneffekt (edge effect) herkömmlicher
Platten vermeiden.
Dieser Rahmeneffekt ist als Fehlerquelle im Enzyme
Linked Immuno Sorbent Assay CELISA) bekannt, wenn dieser auf Mikrotiterplatten ausgeführt wird (Denmark und
Chessum, Med. Lab. Sei. (1978) ~55_, 227). Die Verfälschung
des Testergebnisses besteht in einer Erhöhung der
Färbintensitat in den Randvertiefungen der verwendeten
Mikrotiterplatten, obwohl von der Testanlage her ein nahezu
gleicher Extinktionswert in allen Vertiefungen zu erwarten
wäre.
Diese typische Erhöhung der Färbintensitat ist nicht mit
den allgemein als "Ausreißer" bezeichneten Einzelabweichungen zu verwechseln, die zufallsverteilt über die
Mikrotiterplatte aufzutreten scheinen. Hier sind Fehler
bei der Testdurchführung, der Plattenbeschichtung oder
der Materialquälitat der Platte die Ursachen.
Der Rahmeneffekt dagegen wird durch ein Temperaturgefälle
zwischen den Randvertiefungen und den übrigen Näpfchen
der Mikrotiterplatte während der immunologischen Reaktionen
und der Enzymreaktion des ELISA verursacht (Burt et al., ü. Immunol. Meth. (1979) 31, 231).
32U317
Bei einer in den Randvertiefungen bis zu 1,6 C höheren
Temperatur verlaufen dort temperaturabhängige Reaktionen
wie die Antigen-Antikörper-Bindung oder eine Enzymreaktion
schneller als in der übrigen Platte. Dies manifestiert sich in einer erhöhten Färbintensitat der betroffenen
Näpfchen im ELISA.
Der Temperaturgradient zwischen Randvertiefungen und
Plattenmitte entsteht durch die schnellere Erwärmung des Plattenrandes. Dies kann sowohl mit der Auflage der Platte
auf einegut wärmeleitende Unterlage, beispielsweise dem
Metallboden eines Brutschrankes, als auch mit der Wärmeisolierung
der Plattenmitte durch das Luftpolster unter der Platte erklärt werden. Je höher die Inkubationstemperaturen
und je kürzer die Inkubationszeiten, desto stärker
ist normalerweise der Rahmeneffekt ausgeprägt. Durch Aufeinanderstapeln
der Platten läßt sich der Rahmeneffekt mindern und durch blasenfreies Aufschwimmen der Mikrotiterplatte
in einem Warmwasserbad oder Verwendung geeigneter Heizgebläse eliminieren.
Die beiden letztgenannten Möglichkeiten sind jedoch entweder
schwierig durchzuführen oder technisch aufwendig (Oliver et al., J. Immunol. Meth. (1981) 1Vl., 195). '
Die Erfindung hat sich die Aufgabe gestellt, eine Mikrotiterplatte,
das heißt eine Vorrichtung, die im wesentlichen aus einem plattenförmigen Träger mit mehreren Gefäßen
besteht, zu schaffen, die eine zeitlich gleichförmige
Temperaturveränderung des Inhalts aller Gefäße gewährleistet, wenn die Vorrichtung auf eine Unterlage mit
einer höheren Temperatur aufgebracht wird.
Es wurde nun überraschenderweise gefunden, daß die Entstehung
eines Temperaturgradienten zwischen den Randbezirken
und dem Inneren einer Mikrotiterplatte beim Erwärmen
- v-
durch eine geeignete Formgebung des Plattenmaterials vermieden
werden kann.
Gegenstand der Erfindung ist, daß die Form einer herkömmliehen
Mikrotiterplatte so verändert wird, daß die Erwärmbarkeit
der Randvertiefungen über den Plattenrand stark
reduziert und gleichzeitig die Erwärmbarkeit der übrigen
Plattenvertiefungen erhöht wird. Beide Wärmetransporteffekte
wirken in der Weise zusammen, daß der Rahmeneffekt eliminiert wird.
Dies wird erfindungsgemäß durch die im folgenden näher
beschriebenen oder ähnliche, wirkungsgleiche Formveränderungen
einer herkömmlichen Mikrotiterplatte erreicht,
wobei
Figur 1 eine Aufsicht auf eine erfindungsgemäße Platte,
Figur 2 die Ansicht von unten dieser Platte,
Figur 3 eine Seitenansicht dieser Platte und
Figur h den Schnitt IV - IV in der Figur 1 zeigt :
a) Der obere Plattenrand (2) der hikrotiterplatte wirdbis
auf wenige Verbinduiigspunkte (3), die von den.gespitzten
Enden von Stegen C5) gebildet werden, vom Plattenteil CO getrennt, so daß ein umlaufender
Durchbruch C1O entsteht;
b) gegebenenfalls sind diese senkrecht zur Plattenobel—
fläche stehenden Stege C5) so hoch wie möglich gehalten,
ohne die Stapelfähigkeit der Mikrotiterplatte zu
beeinträchtigen. Die Stege können zwischen der ersten
und zweiten, dritten und vierten, fünften und sechsten, siebten und achten, neunten und zehnten sowie
elften und zwölften Reihe der Gefäße (8) angelegt sein, wie in den Figuren 1 und 2 dargestellt. Die
Stege C5) können aber auch senkrecht zu den Gefäßreihen zwischen den Gefäßzeilen A bis H angeordnet sein;
c) gegebenenfalls werden Aussparungen (6), vorzugsweise
kleine Kerben, an der Auflagekante des unteren Plattenrandes (7) so angebracht, daß sie sich zwischen
den Stegen (5) gegenüberliegen.
Der Durchbruch 4 reduziert die Wärmeübertragung des sich
schnell erwärmenden Plattenrandes auf die Randgefäße.
Durch die Maßnahmen unter a, b und c wird auch bei übereinandergestapelten
Platten ein schneller Abbau des Luftpolsters unterhalb jeder Platte erzielt(Fal1schachtprinzip
für die kältere Luft). Hierdurch können sich die freistehenden und großflächigen Stege schneller erwärmen.
Durch die Maßnahme unter b) geben die erwärmten Stege die
Wärme gleichmäßig an die jeweils benachbarten Gefäße ab, wobei die Erwärmung durch den Steg selbst schneller
als über die Verbindungspunkte mit dem Plattenrand erfolgt. Der Resteinfluß des Plattenrandes wird durch die
Abschrägung des Steges zum Plattenrand hin ausgeglichen.
· Die Summe dieser Maßnahmen el iminiert den Rahmeneffekt.
Die erfindungsgemäße Mikrotiterplatte ist verwindungsstabil,
automatengerecht, stapelbar und beschriftbar.
Sie ist besonders für den Gebrauch in Wärmeschränken geeignet.
Claims (9)
- 32H317Patentansprüche:./ M i krot i terpl atte mit einem aufliegenden Rand und einem mit Gefäßen versehenen Mittelteil, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine gleichmäßige Temperaturveränderung des Inhalts aller Gefäße gewährleistet, wenn sie auf eine Unterlage mit höherer als der Temperatur der Platte aufgelegt wird.
- 2. Mikrotiterplatte, insbesondere nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Rand und Mittelteil durch einen Durchbruch weltgehend voneinander getrennt und nur an einigen Stellen miteinander verbunden sind.
- 3. Mikrotiterplatte, insbesondere nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß an der Plattenunterseite in einer Richtung verlaufende Stege angeordnet sind.
- ^f. Mi krot i terpl atte, insbesondere nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß am aufliegenden Plattenrand Aussparungen vorhanden sind.
20 - 5. Mikrotiterplatte nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, .daß der Durchbruch zwischen Rand und Mittelteil so nahe wie möglich an den Gefäßen am Rand angeordneti st.
25 - 6. Mikrotiterplatte nach Anspruch 2 und/oder 5, dadurch gekennzeichnet, daß der Durchbruch zwischen Rand und Mittelteil zu Aussparungen erweitert ist.
- 7. Mikrotiterplatte nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Gefäße in Reihen angeordnet sind und zwischen jeweils zwei Reihen ein senkrechter Steg angebracht ist.- er -
- 8. Mikrotiterplatte nach Anspruch 2 und/oder 3,dadurch gekennzeichnet, daß die Enden der Stege gespitzt sind und Rand und Mittelteil verbinden.
- 9. Mikrotiterplatte nach Anspruch 2 und/oder k, dadurch gekennzeichnet, daß die Aussparungen am Plattenrand sich zwischen den Stegen gegenüberliegen und kerbförmig ausgebildet sind.
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