DE2616939C3 - Use of placenta extract residues and process for the production of a collagen-containing placenta extract - Google Patents
Use of placenta extract residues and process for the production of a collagen-containing placenta extractInfo
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Description
Die Erfindung betrifft die Verwendung von bei der Placentafrischextrakt-Fabrikation anfallenden ätherhaltigen Rückständen und ein Verfahren zur Herstellung eines kollagenhaltigen Placentaextrakts.The invention relates to the use of the ether-containing substances obtained in the manufacture of placenta African extracts Residues and a process for the preparation of a collagen-containing placenta extract.
Lösliches Kollagen, das eine biologische Vorstufe des reifen Kollagens darstellt, wird seit einigen Jahren in zunehmendem Maße als Wirkstoffkomponente in kosmetischen Präparaten verarbeitet. Derartige Präparate sollen durch percutane Zufuhr biologischer Wirkstoffe den Stoffwechsel der Haut- und Bindegewebszellen beleben und welke, faltige Haut durch Erhöhung des Hautturgors wieder straffen. Kollagen ist ein faserförmiges Scleroprotein, das in Knochen und im Bindegewebe der Tiere enthalten ist. Entsprechend wird Kollagen durch Extraktion aus dem Bindegewebe meist embryonaler oder junger Säugetiere gewonnen. Die Beschaffung des Rohmaterials ist jedoch wegen der benötigten Menge teuer und zudem meist mit erheblichen Schwierigkeiten verbunden, da es möglichst frisch und frei von nicht verwertbaren Abfällen und anderen Verunreinigungen sein muß.Soluble collagen, which is a biological precursor to mature collagen, has been used in increasingly processed as an active ingredient component in cosmetic preparations. Such preparations are supposed to stimulate the metabolism of the skin and connective tissue cells through the percutaneous supply of biological agents revitalize and tighten withered, wrinkled skin by increasing the skin turgor. Is collagen a fibrous scleroprotein found in the bones and connective tissue of animals. Accordingly Collagen obtained by extraction from the connective tissue of mostly embryonic or young mammals. the Procurement of the raw material is expensive because of the quantity required and is usually also included associated with considerable difficulties, since it is as fresh as possible and free of unusable waste and other impurities must be.
Aus der DE-OS 24 05 002 ist es bekannt, lösliches natives Kollagen aus Humangewebe, insbesondere Placemen, zu gewinnen. Zu diesem Zweck wird das gereinigte und zerkleinerte Humangewebe stufenweise fraktioniert, indem zunächst mit Hilfe einer wäßrigen Salzlösung das neutralsalzlösliche Tropokollagen und anschließend das säurelösliche Prokollagen sowie eine weitere strukturierte Modifikation des nativen Kollagens extrahiert wird. Dieses bekannte Verfahren ist jedoch wegen der Vielzahl der Verfahrensstufen und der vorhandenen, den verschiedensten Stoffklassen angehörenden Placentainhaltsstoffe verhältnismäßig aufwendig. Außerdem sind Humanplacenten und ebenso Placemen tierischen Ursprungs als Ausgangsmaterial für die Gewinnung löslicher Kollagene nicht zuletzt wegen ihrer Knappheit äußerst unwirtschaftlich, zumal auf diese Weise der Rohstoff für die Gewinnung des wertvolleren Placentaextrakts verlorengeht.From DE-OS 24 05 002 it is known, soluble native collagen from human tissue, in particular Placemen, to win. For this purpose, the cleaned and shredded human tissue is made gradually fractionated by first using an aqueous salt solution, the neutral salt-soluble tropocollagen and then the acid-soluble procollagen and another structured modification of the native collagen is extracted. However, this known method is because of the large number of process steps and of the existing placental constituents belonging to the most varied of substance classes in proportion laborious. In addition, human placents and placemas of animal origin are the starting material extremely uneconomical for the production of soluble collagens, not least because of their scarcity, especially since in this way the raw material for obtaining the more valuable placenta extract is lost.
Aufgabe der Erfindung ist es, für die Gewinnung löslicher Kollagene ein preiswertes Rohmaterial zu finden, das in ausreichender Menge zur Verfügung steht.The object of the invention is to provide an inexpensive raw material for the production of soluble collagens find that is available in sufficient quantity.
Der Erfindung liegt die Erkenntnis zugrunde, die bei der Placentafrischextrakt-Fabrikation anfallenden ätherhaltigen Rückstände für die Gewinnung des löslichen Kollagens zu nutzen.The invention is based on the knowledge that occurs in the manufacture of placenta African extract to use ethereal residues for the extraction of the soluble collagen.
Das Ausgangsmaterial zur Gewinnung von Placentafrischextrakten ist ausnahmslos tierischen Ursprungs, da entsprechendes Humangewebe in den erforderlichen Mengen in der Regel nicht zur Verfugung steht Zu Beginn des Fabrikationsprozesses werden die zuvorThe starting material for obtaining placenta African extracts is without exception of animal origin, as the corresponding human tissue is required Quantities usually not available At the beginning of the manufacturing process, the previously
ίο zerkleinerten Plaeenten tage- oder sogar wochenlang in
der Kälte mit Äther behandelt, um die Zellen aufzuschließen und Hormone sowie Fett- und Lipoidstoffe
weitgehend zu extrahieren. Nach Abtrennung der wäßrigen Anteile verbleibt schließlich ein überwiegend
aus Feststoffen bestehender Rückstand, der stark ätherhaltig ist und bisher den Abdeckereien zur
Vernichtung bzw. Weiterverarbeitung z. B. zu Düngezwecken (vgl. auch DE-AS 11 42 373) zugeführt wurde.
Diese bis dahin als wertlos verworfenen Organrückstände werden erfindungsgemäß nunmehr zur Gewinnung
des löslichen nativen Kollagens genutzt, wobei die Langzeiteinwirkung des Äthers keinen Einfluß auf die
Nativität der löslichen Kollagene hat und ihre Ausbeute wegen der weitgehenden Denaturierung von Fremdeiweißstoffen
und der restlosen Entfernung von Lipoiden und Fetten zudem verbessert werden konnte.
Diese Organrückstände sind äußerst preiswert, da sie in großen Mengen anfallen und ihre bisherige Vernichtung
sogar erhebliche Kosten verursachte.ίο treated with ether in the cold for days or even weeks in order to break down the cells and largely extract hormones as well as fat and lipoid substances. After the aqueous components have been separated off, a residue consisting predominantly of solids remains, which contains a lot of ether and has hitherto been used in the coverings for destruction or further processing, for example. B. for fertilization purposes (see. Also DE-AS 11 42 373) was fed.
These organ residues, which were previously discarded as worthless, are now used according to the invention to obtain the soluble native collagen, whereby the long-term action of the ether has no influence on the nativity of the soluble collagens and their yield because of the extensive denaturation of foreign proteins and the complete removal of lipoids and fats could be improved. These organ residues are extremely inexpensive because they are produced in large quantities and their previous destruction has even resulted in considerable costs.
Die Erfindung besteht weiterhin hi einem Verfahren zur Herstellung eines kollagenhaltigen Placentaextraktes, das dadurch gekennzeichnet ist, daß die bei der Placentafrischextrakt-Fabrikation anfallenden Rückstände bei 0-3° C zunächst durch Waschen mit einer gepufferten schwachen NaCl-Lösung von einem Teil der vorhandenen Fremdeiweißstoffe befreit und durch Zugabe einer ausreichenden Menge einer Neutralsalzlösung innerhalb von 2-6 Tagen extrahiert werden, daß anschließend das neutralsalzlösliche Kollagen nach Abtrennung der restlichen Placentarückstände durch Aussalzen mit einer ausreichenden Menge Kochsalz gefällt wird und daß das ausgefällte lösliche Kollagen in einer ein Konservierungsmittel enthaltenden Pufferlösung aus Placentaextrakt mit einem pH-Wert unter 7 gelöst wird.The invention also consists in a method for the production of a collagen-containing placenta extract, which is characterized in that the at from the production of placenta African extracts at 0-3 ° C, initially by washing with a buffered weak NaCl solution freed from some of the foreign proteins present and extracted by adding a sufficient amount of a neutral salt solution within 2-6 days that then the neutral salt-soluble collagen after separation of the remaining placenta residues is precipitated by salting out with a sufficient amount of common salt and that the precipitated soluble Collagen in a buffer solution containing a preservative made from placenta extract with a pH value below 7 is dissolved.
Der auf diese Weise hergestellte kollagenhaltige Placentaextrakt ist besonders haltbar und wird bevorzugt zur Herstellung von Hautpflegemitteln verwendet, da die neutralsalzlösliche Vorstufe des nativen Kollagens wegen seiner geringen inter- und intramolekularen Quervernetzung besonders förderlich für den biologischen Aktivierungsprozeß ist.The collagen-containing placenta extract produced in this way is particularly durable and is preferred Used in the manufacture of skin care products as the neutral salt soluble precursor of native collagen because of its low inter- and intramolecular cross-linking, it is particularly beneficial for the biological Activation process is.
Die Erfindung wird nachfolgend an Hand von Ausführungsbeispielen näher erläutert.The invention is explained in more detail below on the basis of exemplary embodiments.
Vor Durchführung der präparativen Versuche zur Gewinnung von löslichem Kollagen aus Placentarückständen der Extrakt-Fabrikation war zunächst der Nachweis zu führen, daß überhaupt biologisch aktives Kollagen im Ausgangsmaterial vorhanden ist, und der Gesamtkollagengehalt (lösliches und unlösliches Kollagen) zu bestimmen. Zu diesem Zweck wurden Proben eines ätherhaltigen Placentarückstandes aus der Fabrikation auf der Stufe der Gewinnung des Rohzentrifugates gefriergetrocknet, genau gewogen (Tabelle 1) und jede Probe mit 4 ml 6n HCl in einem verschlossenen Reagenzglas 24 Stunden auf 1020C erhitzt, um die Probe zu hydrolysieren. Nachdem das Hydrolysat nochmals 9 Stunden mit 100 ml 6n HCl unterBefore carrying out the preparative experiments to obtain soluble collagen from placental residues from the extract production, it was first necessary to prove that biologically active collagen was actually present in the starting material, and to determine the total collagen content (soluble and insoluble collagen). For this purpose, samples of an ether-containing placenta residue from manufacture were freeze-dried at the stage of obtaining the crude centrifugate, weighed precisely (Table 1) and each sample was heated to 102 ° C. for 24 hours with 4 ml of 6N HCl in a sealed test tube in order to close the sample hydrolyze. After taking the hydrolyzate again for 9 hours with 100 ml of 6N HCl
Rückfluß erhitzt worden war, wurde zur Trockne eingedampft und eine bekannte Menge Wasser hinzugefügt (Tabelle 1: 500 bzw. 624 ml). 1 ml dieser Lösung wurde zur Hydroxyprolin-Bestimmung nach derAfter refluxing, it was evaporated to dryness and a known amount of water added (Table 1: 500 or 624 ml). 1 ml of this solution was used for hydroxyproline determination according to the
Methode von Logan und Neumann verwendet Die Meßergebnisse sind in Tabelle 1 sowie in den Abb. 1 und 2 zusammengestelltMethod used by Logan and Neumann The measurement results are shown in Table 1 and in Fig. 1 and 2 put together
Versuchsdaten zur Bestimmung des KoUagengelialts von Placentarückständen (Hydroxyprolingehalt des Kollagens ist 13,5%).Test data to determine the amount of coagulation in placental residues (hydroxyproline content of collagen is 13.5%).
EinwaageInitial weight
Wasser
hinzugefügtwater
added
mlml
Extinktion des Hydrolysates mit PAB bei 560 nm*) HydroxyprolinExtinction of the hydrolyzate with PAB at 560 nm *) hydroxyproline
KollagenCollagen
ε
c ε
c
ο
o>
roο
o>
ro
**) nach Eichkurve.*) Mean values.
**) according to calibration curve.
CC.
CC.
12,25
9,9
8,912.25
9.9
8.9
29,4
27,6
28,029.4
27.6
28.0
Abb. IFig. I.
A b b. 1 zeigt das sichtbare Spektrum der Farbe, die durch die Reaktion des Hydrolysats mit p-Aminobenzaldehyd (PAB) erzeugt worden ist;A b b. 1 shows the visible spectrum of color produced by the reaction of the hydrolyzate with p-aminobenzaldehyde (PAB) has been generated;
A b b. 2 gibt das in entsprechender Weise unter Verwendung von 13,4 γ Hydroxyprolin gemessene Spektrum. Die Übereinstimmung der Kurven von A b b. 1 und 2 bestätigt, daß die Placentarückstände Hydroxyprolin im Hydrolysat enthalten, das durch Spaltung des Kollagens entstanden ist. Der Kollagengehalt der Proben erreichnet sich zu 28 bis 29% (Tabelle IlA b b. 2 gives the spectrum measured in a corresponding manner using 13.4 γ-hydroxyproline. The correspondence of the curves of A b b. 1 and 2 confirm that the placental residues contain hydroxyproline in the hydrolyzate, which was formed by the breakdown of the collagen. The collagen content of the samples is 28 to 29% (Table II
6060
65 Abb. 2 65 Fig. 2
Gewinnung löslichen Kollagens aus Placentarückständen der Fabrikation von PlacentaextraktenRecovery of soluble collagen from placenta residues from the manufacture of placenta extracts
320 kg Placentarückstände, die bei der Gewinnung von Placentafrischextrakt nach Abtrennung des Rohextrakts beim Zentrifugieren anfallen, werden — ggf. nach Gefriertrocknen — erneut zerkleinert und mit 300 kg Eiswasser bei 0° bis +3° C gewaschen. Nach Zentrifugieren (30 Minuten, 4000 rpm) wird der Rückstand nach Zusatz einer kleineren Menge Toluol320 kg placental residues, which are produced in the production of placenta African extract after separation of the crude extract incurred during centrifugation, are - if necessary after freeze-drying - crushed again and with 300 kg of ice water washed at 0 ° to + 3 ° C. After centrifugation (30 minutes, 4000 rpm) the Residue after adding a small amount of toluene
zur Verhinderung einer eventuellen bakteriellen Tätigkeit 24 Stunden mit 500 kg einer 0,01 molaren Natriumchlorid-Lösung von pH 7,4 (Phosphat-Puffer: 152 g Na2HPO4 und 18,5 g NaH2PO4 auf 701 Wasser) bei 0° bis 3° C stehengelassen. Der nz.ch einstündigem Zentrifugieren bei 4000 rpm erhaltene Rückstand wird zur Gewinnung des neutralsalzlöslichen Kollagens 4 Tage bei 0° bis +30C mit 0,15 molarer Natriumchlorid-Lösung bei pH 7,1 extrahiert (Toluolzusatz) und dann zentrifugiert: Zentrifugat A.to prevent possible bacterial activity for 24 hours with 500 kg of a 0.01 molar sodium chloride solution of pH 7.4 (phosphate buffer: 152 g Na 2 HPO 4 and 18.5 g NaH 2 PO 4 in 701 water) at 0 Let stand to 3 ° C. The nz.ch hour centrifugation at 4000 rpm resulting residue and then centrifuged to collect the neutral salt soluble collagen for 4 days at 0 ° to + 3 molar 0 C with 0.15 sodium chloride solution at pH 7.1 is extracted (addition of toluene): A centrifugate .
Aus diesem Zentrifugat A wird das neutralsalzlösliche Kollagen durch Zugabe von festem Natriumchlorid bis zu einer Konzentration von 12% bei +20C ausgefällt und abzentrifugiert. Eine Reinigung des ausgefällten neutralsalzlöslichen Kollagens kann durch Dialyse und ggf. mehrmalige Umfällung erfolgen. Vor Herstellung einer haltbaren konservierten Endlösung des neutralsalzlöslichen Kollagens wird, wie unten beschrieben, der Kollagengehalt durch eine Hydroxyprolin-Bestimmung ermittelt. Das isolierte, gereinigte l.autralsalzlösliche Kollagen wird in einer solchen Menge 0,1 molarer konservierter Citrat-Pufferlösung gelöst, daß der Kollagengehalt 4 g pro Liter beträgt. Vor Sterilabfüllung wird die so erhaltene Kollagenlösung noch einmal zentrifugiert.For this centrifugate A, the neutral salt soluble collagen is precipitated by addition of solid sodium chloride to a concentration of 12% at +2 0 C and collected by centrifugation. The precipitated, neutral salt-soluble collagen can be purified by dialysis and, if necessary, repeated reprecipitation. Before a stable, preserved final solution of the neutral salt-soluble collagen is prepared, the collagen content is determined by a hydroxyproline determination as described below. The isolated, purified, partially salt-soluble collagen is dissolved in such an amount of 0.1 molar preserved citrate buffer solution that the collagen content is 4 g per liter. The collagen solution obtained in this way is centrifuged again before sterile filling.
Der bei der Gewinnung von Zentrifugat A verbleibende Rückstand wird zur Isolierung säurelöslichen Kollagens nach Toluol-Zusatz mit 100 kg Citrat-Puffer von pH 3,7 (die Pufferlösung ist durch Auflösen von 21kg Zitronensäure und 4,4 kg NaOH in 1000 kg Eiswasser hergestellt und auf pH 3.7 feineingestellt worden) unter Rühren in der Kälte bei +2°C extrahiert und nach 2 bis 5 Tagen erneut zentrifugiert: Zentrifugat B I.The residue remaining in the recovery of centrifugate A becomes acid-soluble for isolation Collagen after addition of toluene with 100 kg citrate buffer of pH 3.7 (the buffer solution is obtained by dissolving 21 kg of citric acid and 4.4 kg of NaOH in 1000 kg Ice water prepared and fine-tuned to pH 3.7) extracted with stirring in the cold at + 2 ° C and centrifuged again after 2 to 5 days: centrifugate B I.
Der Rückstand dieser Zentrifugation wird erneut bei + 20C bis +4°C mit 1000 Liter Citrat-Puffer der oben angegebenen Zusammensetzung ausgezogen und dann ebenfalls nach einigen Tagen zentrifugiert: Zentrifugat B 2.The residue of this centrifugation is again 2 0 C to + 4 ° C with 1000 liters of citrate buffer of the above composition taken off at + and then centrifuged also after several days: centrifugate B2.
Die Zentrifugate B 1 und B 2 werden, jedes für sich, zur Abtrennung der Kollagen-Fraktion durch Zugabe von Natriumchlorid auf eine Konzentration von 7% NaCl gebracht, wobei immer noch eine Temperatur von + 2° bis +30C eingehalten wird. Der erhaltene Niederschlag jeder Fällung wird durch Zentrifugieren oder Filtration in der Kälte gesammelt und durch Waschen mit Eiswasser von Salzen befreit. Eine weitere Reinigung der Kollagen-Fraktion kann durch Dialyse oder/und Umfallen aus neutralem oder saurem Milieu erfolgen. Nach der Reinigung wird die Kollagen-Fraktion unter Rühren in eine 0,1 molare Natriumcitrat-Pufferlösung gebracht, die 0,2 bis 0,5% Konservierungsmittel, z. B. Phenonip, 1 bis 5% Tween 80 und 0,3 bis 2% Propylenglykole enthält. Diese Lösung wird ggf. nochmals zentrifugiert bzw. filtriert und bei 20C aufbewahrt.The centrifugates B 1 and B 2 are each brought in itself for separating the collagen fraction by addition of sodium chloride to a concentration of 7% NaCl, while still at a temperature of + 2 is maintained ° to +3 0C. The resulting precipitate of each precipitation is collected by centrifugation or filtration in the cold and freed from salts by washing with ice water. The collagen fraction can be purified further by dialysis and / or falling over from a neutral or acidic medium. After purification, the collagen fraction is brought into a 0.1 molar sodium citrate buffer solution, with stirring, containing 0.2 to 0.5% preservatives, e.g. B. Phenonip, 1 to 5% Tween 80 and 0.3 to 2% propylene glycols. This solution is centrifuged or filtered again, if necessary, and stored at 2 ° C.
Vor der Herstellung eines haltbaren konservierten säurelöslichen Kollagenpräparates wird von je einer Probe des Kollagens aus Zentrifugat B 1 und B 2 zur Ermittlung des Kollagengehaltes eine Hydroxyprolin-Bestimmung durchgeführt:Before a long-life, preserved, acid-soluble collagen preparation is manufactured, one Sample of the collagen from centrifugate B 1 and B 2 to determine the collagen content, a hydroxyproline determination carried out:
Eine nach erneutem Zentrifugieren gefriergetrocknete Probe hatte in vorliegendem Fall ein Gewicht von 2,13 g. Davon werden 7,1 mg für eine Zeit von 24 Stunden mit 2 ml 6n HCl bei 102° C im verschlossenen Reagenzglas hydrolisiert Die Farbbildung des Hydrolysates mit p-Aminobenzaldehyd (PAB) ergab eine Extinktion von 0,194, was nach der aufgestellten Eichkurve einem Hydroxyprolin-Gehah von 11,2 γ entspricht Die Analysenprobe enthielt demnach 0,248 g Kollagen.A sample freeze-dried after centrifuging again had a weight of 2.13 g in the present case. 7.1 mg of this are hydrolyzed for 24 hours with 2 ml of 6N HCl at 102 ° C in a sealed test tube. Gehah of 11.2 γ corresponds to the test specimen thus contained 0.248 g collagen.
Herstellung eines kollagenhaltigen Placenta-Production of a collagen-containing placenta
extraktes durch Auflösen von Kollagen in einemextract by dissolving collagen in one
Placentaextrakt als PufferlösungPlacenta extract as a buffer solution
Neutralsalzlösliches bzw. säurelösliches Kollagen, wie aus Beispiel 1, kann nach Reinigung (Dialyse, Umfallen) anstatt in einer Citrat-Puffer- oder Essigsäure-Lösung auch in Placentaextrakten, die entsprechend gepuffert sind, aufgelöst werden. Zum Beispiel läßt sich ein 0,3 bis 0,4% Kollagen enthaltender Placentaextrakt von pH 4,0 erhalten, in dem eine nach Hydroxyprolin-Bestimmung charakterisierte Kollagenmenge bei +10C unter Rühren in einen standardisierten Placentaextrakt eingerührt wird, der folgende Kennzahlen aufweist:Neutral salt-soluble or acid-soluble collagen, as in Example 1, can also be dissolved in placenta extracts, which are appropriately buffered, after cleaning (dialysis, falling over) instead of in a citrate buffer or acetic acid solution. For example, a placenta extract containing 0.3 to 0.4% collagen with a pH of 4.0 can be obtained by stirring an amount of collagen characterized by hydroxyproline determination at +1 ° C. into a standardized placenta extract which has the following parameters :
Nachgewiesene Aminosäuren GIy, Ala, VaI, Tyr, Ser,Detected amino acids GIy, Ala, VaI, Tyr, Ser,
Phe, Try, Asp, GIu, Leu, Iso-Leu, Arg, Met, His, Pro OH-Pro u. a.Phe, Try, Asp, GIu, Leu, Iso-Leu, Arg, Met, His, Pro OH-Pro et al.
Nachgewiesene Stoffwechsel-Aktivitäten:Proven metabolic activities:
Atmungssteigerungsfaktor (O2-Verbrauch
1,0)Respiratory increase factor (O 2 consumption
1.0)
des Leberhomogenats = 1,0) 1,9
P/O-Quotientof liver homogenate = 1.0) 1.9
P / O quotient
vor Bestimmung des O2-Verbrauchs 2,7before determining the O 2 consumption 2.7
nach Bestimmung des O2-Verbrauchs 2,8
Gärungssteigerungsfaktor (CO2-Entwicklungafter determining the O 2 consumption 2.8
Fermentation increase factor (CO 2 development
von Bäcker-Hefe nach 20 Minuten 1,0) 1,6of baker's yeast after 20 minutes 1.0) 1.6
Sterilitätstest negativSterility test negative
Konservierungsmittel >0,4%Preservative> 0.4%
Abschließend wird in dem kollagenhaltigen Placentaextrakt der Kollagengehalt nochmals durch Hydroxyprolin-Bestimmung kontrolliert und ggf. auf einen angestrebten Wert korrigiert: Kollagengehalt im allgemeinen 0,3 bis 0,4%.Finally, the collagen content of the collagen-containing placenta extract is again determined by hydroxyproline controlled and, if necessary, corrected to a desired value: collagen content generally 0.3 to 0.4%.
Die Anteile von niedermolekularen Komponenten zu hochmolekularen (Molekulargewicht < 10 000 bzw. > 100 000) liegen im allgemeinen bei 5 :1 bis 9 :1. Das Kollagen läßt sich, ggf. nach Ausblenden einiger Komponenten des Placentaextraktes, auch durch Aufnahme eines UV-Spektrums charakterisieren: λ max. bei 255 nm. Auch der Gesamtstickstoffwert nach Kjeldahl eignet sich zur Charakterisierung in Verbindung mit der Hydroxyprolin-Bestimmung und unter Berücksichtigung der durch den Placentaextrakt eingebrachten Stickstoffverbindungen.The proportions of low molecular weight components to high molecular weight (molecular weight <10,000 or> 100,000) are generally from 5: 1 to 9: 1. That Collagen can also pass through, if necessary after hiding some components of the placenta extract Characterize the recording of a UV spectrum: λ max. At 255 nm Kjeldahl is suitable for characterization in connection with the hydroxyproline determination and under Consideration of the nitrogen compounds introduced by the placenta extract.
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