DE2554386A1 - Elutions-einrichtung - Google Patents
Elutions-einrichtungInfo
- Publication number
- DE2554386A1 DE2554386A1 DE19752554386 DE2554386A DE2554386A1 DE 2554386 A1 DE2554386 A1 DE 2554386A1 DE 19752554386 DE19752554386 DE 19752554386 DE 2554386 A DE2554386 A DE 2554386A DE 2554386 A1 DE2554386 A1 DE 2554386A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- elution
- gel
- sample
- electrophoresis
- cavities
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44717—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones
- G01N27/4473—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones by electric means
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Electrostatic Separation (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
PATENTANWÄLTE A. GRÜNECKER
DIPL-(NG
H. KINKELDEY
DR ING
W. STOCKMAIR
DR-ING. - AiE(CALrECHi
K. SCHUMANN
DR RER ΜΑΓ OiPL PHYS
P. H. JAKOB
DJPL-ING
G. BEZOLD
DR HER NAT- DiPL-ChEM
MÜNCHEN E. K. WEIL
DR BER OEC INC»
LINDAU
β MÜNCHEN 22
MAXIMILIANSTRASSE 43
3. Dezember 1975
PH 9869
The Upjohn Company
301 Henrietta Street, Kalamazoo, Michigan, USA
Die Erfindung betrifft eine Elutions-Einrichtung zum Eluieren eines gelbsten Stoffes aus einem Elektrophorese-Trenngel
mit ersten und zweiten Behältern, die jeweils einen Hohlraum für die Aufnahme einer Pufferlösung
und in jedem Hohlraum eine Elektrode aufweisen, und mit einer Aussparung, um ein längliches, dünnes
Elektrophorese-Trenngel abgedichtet zwischen den Behältern zu haltern.
Allgemein bezieht die vorliegende Erfindung sich auf ein Verfahren und eine Einrichtung, um durch Elektrophorese
eine oder mehrere ausgewählte Fraktionen auszuspülen bzw. zu eluieren, die in einem Elektrophorese-Trägermaterial
oder einem Trenngel vorliegen, das ver-
609828/0537
schiedene discrete Bänder bzw. Bereiche von unterschiedlichen
Fraktionen enthält.
Ausgezeichnete Fraktionierungen oder Trennungen von Gemischen verschiedener Substanzen, wie beispielsweise
Proteine, Glykoproteine, nucleotide, Nukleinsäuren, usw.
lassen sich durch Elektrophorese erhalten, wobei Gele als elektrophoretische Trennmatrix eingesetzt werden. Zu diesem
Zweck werden Gele aus verschiedenen Materialien, wie beispielsweise Polyakrylamid, Stärke, Agar und Gelatine
verwendet. Bevorzugt werden Polyakrylamidgele in Form
von langgestreckten Zylindern oder flachen Platten bzw. Tafeln eingesetzt.
Bei der Gelelektrophorese wandern Teilchen mit einer effektiven elektrischen Ladung unter der Einwirkung eines elektrischen
Feldes (Potentialgradient), das an das Gel angelegt wird, in dem Gel. Teilchen mit unterschiedlicher Ladung
wandern mit unterschiedlichen Geschwindigkeiten durch das Gel. Bei Teilchen mit gleicher Ladung bewegen sich
die größeren Moleküle während ihrer Wanderung durch die Poren der dreidimensionalen Gelstruktur langsamer als
die kleineren Moleküle, und zwar wegen des Molekularsiebeffektes. Ein Gemisch von Ausgangsbestandteilen wird also
scharf in bestimmte, definierte Fraktionen aufgetrennt, wozu sowohl die Unterschiede in den elektrischen Ladungen
der Bestandteile des Ausgangsgemischs als auch die Unterschiede in ihren Molekülgrößen beitragen. Als Folge der
Elektrophorese befinden sich die einzelnen Bestandteile des Ausgangsgemischs als getrennte, longitudinal im Abstand
angeordnete, im allgemeinen quer verlaufende, diskrete Bänder oder Zonen in dem Gel. In der longitudinalen
Eichtung des Gels gemessen, können diese Zonen verschiedene
Breiten haben, die im Bereich von ungefähr 1 mm bis ungefähr 1,5 cm liegen. Diese in dem Gel vorliegenden getrennten
Fraktionen können festgestellt oder besser sichtbar gemacht werden, indem das Gel mit Fixativ-Farbstoff--,
lösungen versetzt wird. Als Alternative hierzu kann das Ausgangsgemisch mit einem Radioisotop gekennzeichnet werr-■
■ :- 609828/0537
den; die getrennten Fraktionen lassen sich dann durch
Ermittlung des Radioisotops lokalisieren. Die Gele könnenverschiedenen analytischen Bestimmungen unterworfen werden,
wie es auf diesem Gebiet oft durchgeführt wird.
Es wird angestrebt, die einzelnen, als Bänder in dem Trenngel vorliegenden Fraktionen getrennt wiederzuge-.
winnen, um die einzelnen Fraktionen in einem Zustand zu erhalten, der für die weitere Analyse geeignet ist.
Es aind "bereits Verfahren vorgeschlagen worden , eine
ausgewählte Gelfraktion zu extrahieren, indem der GeI-zyiinoer
oder die Geltafel in getrennte Segmente zerschnitten wirdj anschließend wird Jedes Segment (oder
mehrere entsprechende Gelsegmente aus verschiedenen Trenngelen) homogenisiert; dann wird das Segment mit
Wasser oder einer Pufferlösung eluiert, und das Eluat wird durch Zentrifugieren oder Filtrieren getrennt. Bei
diesem Verfahren ergehen sich jedoch nur geringe Ausbeuten. Bei einem anderen Elutionsverfahren wird jedes
Gelsegment (oder entsprechende Gelsegmente von verschiedenen Trenngelen) homogenisiert und dann mit einer neuen
Gellösung gemischt, die polymerisiert wird, so daß ein neuer Gelzylinder oder eine neue Gelplatte entsteht. Das
neue Gel wird dann der Elektrophorese unterworfen, bis die Fraktion durch Freifluß-Elektrophorese aus dem Gel
gespült ist. Dieses Verfahren ist jedoch sehr komplex, seine Ausbeute ist gering, und die extrahierte Fraktion
ist sehr stark verdünnt.
Weiterhin ist ein Verfahren zur kontinuierlichen Trennung und Elution durch Elektrophorese vorgeschlagen worden.
Diese Technik eignet sich als Präparat ions verfahr en,
bei dem die Fraktionen in mg-Mengen wiedergewonnen werden. Die Ausrüstung für dieses Verfahren ist jedoch kompliziert
und kostspielig. Außerdem läßt sich das Verfahren nicht gut im Laboratorium einsetzen, um mikroanalytische
Trennungen (im mg-Bereich) oder ultramikro-
609828/0537
-4- 255A386
analytische 'Trennungen (Nanogramm-oder Pie ograinm-Bereich)
durchzuführen»
Der Erfindung liegt deshalb die Aufgabe zugrunde, eine
Elutions-Einrichtung sowie ein Verfahren zum Eluieren von gelösten Stoffen zu schaffen,mit der "bzw. dem die
einzelnen Fraktionen von gelösten Stoffen, die in einem
Elektrophorese-Trenngel vorliegen, getrennt und mit hoher Ausbeute wiedergewonnen werden können.
Diese Aufgabe wird bei einer Elutionseinrichtung der
angegebenen Gattung dadurch gelöst, daß sich ein Paar seitlich ausgerichteter, durchgehender Elutionsöffnungen
von den gegenüberliegenden seitlichen Seiten der Aussparung zu den jeweiligen Hohlräumen erstreckt, wobei die
Elutionsöffnungen wenigstens eine Oberflächenabmessung haben, die kurzer als die entsprechende Oberflächenabmessung
der Aussparung ist, so daß eine Zone mit begrenzter Fläche der Aussparung direkt durch die Elutionsöffnungen
mit den Hohlräumen in Verbindung steht, damit der in der entsprechenden Zone eines in dem Hohlraum angeordneten
Elektrophorese-Trenngels vorliegende gelöste Stoff in eine der Pufferlösungen eluierbar ist, indem
die Elektroden erregt werden, um einen Potentialgradienten
quer zu dem Gel zu erzeugen.
Die mit der Erfindung erzielten Vorteile liegen insbesondere darin, daß eine Elutions-Einrichtung bzw. ein
Verfahren geschaffen werden, die insbesondere für die Durchführung von mikroanalytischen und ultramikroanalytischen
Trennungen geeignet sind, wobei die gewünschten Fraktionen mit einer sehr hohen Ausbeute wiedergewonnen
werden. Außerdem ist die Elutionseinrichtung relativ einfach und läßt sich mit geringen Kosten herstellen;
sie ist einfach zu handhaben und zuverlässig sowie stabil beim G&rauch.
609828/0537
Gemäß der vorliegenden Erfindung wird also ein ausgewähltes
Segment eines Elektrophorese-Trenngel, das eine oder mehrere Bänder von Fraktionen oder gelösten Stoffen enthält,
auf seinen gegenüberliegenden Seiten in einer Zone, die sich nur über einen Bruchteil der Gesamtoberfläche
des Gelsegmentes erstreckt, mit Pufferlösungen in Kontakt gebracht. Die Zone enthält im wesentlichen nur ein Band
eines gelösten Stoffes. Ein Potentialgradient wird zwischen den Pufferlösungen angelegt, so daß nur der gelöste
Stoff in der Zone durch Elektrophorese in eine der Pufferlösungen wandert. D.h. also, daß sich nur eine Fraktion
oder ein Klöster Stoff in der zuletzt erwähnten Pufferlösung
befindet und für die Wiedergewinnung aus der Pufferlösung.zur
Verfügung steht. Die Einrichtung weist ein Paar Kammern für die Aufnahme der Pufferlösungen, ein
Paar Elutionsfenster, die sich zwischen den Kammern befinden,
und eine Anordnung auf, um ein Gelsegment sicher zwischen den Penstern zu haltern. Die Elutionsfenster haben
durchgehende Öffnungen begrenzter Breite und/oder Höhe, so daß die Pufferlösungen nur mit der Zone des Gelsegmentes
in Kontakt kommen können, die ein einziges Band de3 gelösten Stoffes enthält. ¥enn der elektrische
Potentialgradient mit Hilfe der Elektroden, die sich in den Kammern befinden, zwischen den Pufferlösungen angelegt
wird, kann nur der gelöste Stoff in der Zone, die zu den Pufferlösungen freiliegt, aufgrund der Elektrophorese
wandern, so daß sich nur dieser gelöste Stoff in eine der Pufferlösungen bewegt.
Die Erfindung wird im folgenden anhand von Ausführungsbeispielen unter Bezugnahme auf die beiliegenden, schematischen
Zeichnungen näher erläutert.
Es zeigen:
Fig. 1 eine idealisierte, isometrische Ansicht
609828/0537
eines Elektrophorese-Trenngels in Form einer flachen Platte, die diskrete Bänder von gelösten
Stoffen enthält, wie durch die sdraffierten Flächen angedeutet wird. Diese Figur soll nicht
das Produkt irgend eines spezifischen Gel-Elektrophorese-Trennverfahrens
darstellen;
Fig. 2 eine explidierte perspektivische Ansicht der Einrichtung nach der Erfindung;
Fig. 3 eine mittlere, horizontale Schnittansicht der Einrichtung nach Fig. 2im zusammengebauten
Zustand;
Fig. 4 eine Schnittansicht längs Linie III III von Fig. 3;
Fig. 5 eine einem Teil von Fig. 3 entsprechende Ansicht zur Erläuterung einer modifizierten
Ausführungsform, die bei einem Gelsegment verwendbar ist, das aus einem zylindrischen Elektrophorese-Trenngel
geschnitten ist;
Fig. 6 eine Vorderansicht der Ausführungsform nach Fig. 5; und
Fig. 7 eine einem Teil von Fig. 3 entsprechende Ansicht zur Erläuterung einer weiteren, modifizierten
Ausführungsform.
In Fig. 1 ist eine idealisierte Darstellung des Gelproduktes eines herkömmlichen Elektrophorese-Trennverfahrens
gezeigt. Die einzelnen Verfahrensschritte selbst sind bekannt, so daß sie nicht erläutert werden müssen.
Das Gel A ist in Form einer flachen Platte bzw. Tafel dargestellt; selbstverständlich läßt sich die Erfindung
609828/0537
jedoch auch, "bei herkömmlichen zylindrischen Elektrophorese-Trenngelen
anwenden. Gemäß der Darstellung weist
das Gel A vier diskrete Bänder von gelösten Stoffen B, G, D und B auf. Diese Bänder:, sind longitudinal in dem
Gel A im Abstand angeordnet und erstrecken sich im allgemeinen q.uer über das Gel. Die Bänder.' sind in Pig. 1
jedoch idealisiert dargestellt, um die Klarheit und Übersichtlichkeit der Zeichnung und der Beschreibung
zu erhöhen. In der Praxis kann das Gel eine Vielzahl von Bändern mit verschiedenen Breiten enthalten, die im
allgemeinen im Bereich von ungefähr 1mm bis ungefähr 1,5 cm liegen; außerdem können die Bänder in Bezug auf
die Vertikale geneigt oder etwas gebogen bzw. gekrümmt sein. Hier soll nur zu den Elektrophorese-Trenngelen
gesagt werden, daß die Bestandteile des Ausgangsgemischs getrennt werden und einzeln als diskrete Bänder in der
Gelstruktur vorhanden sind.
Um die Fraktion zu gewinnen, die eines der Bänder, wie beispielsweise das Band C in Fig. 1, aufweist, wird das
Gel A quer in ein Segment F zerschnitten, welches das Band G sowie auch Teile der Bänder B und D enthält. Dieses
Segment F wird dann durch das im folgenden zu beschreibende Verfahren eluiert, um die im Band C vorhandene
Fraktion in im wesentlichen reiner Form zu gewinnen.
Wie sich aus den Figuren 2 bis 4 ergibt, weist die EIutions-Einrichtung
10 ein Paar im allgemeinen rechtwinkliger Pufferbehälter 11 und 12 auf. Der Behälter 1.1
enthält Seitenwände 13 und 14 sowie eine Bodenwand T6. Die Wände 13, 14 und 16 bilden einen im allgemeinen
rechtwinkligen, inneren Hohlraum 17, der längs seiner axial inneren Seite offen ist. Die axial inneren Oberflächen
der TSände 13» 14 und 16 sind flach bzw. eben
und koplanar. Die äußere axiale Seite des Hohlraums 17 ist durch eine Endwand bzw. Stirnwand 18 verschlossen.
609828/0537
Bine flexible, elasbische Dichtung 19 ist an den koplanaren,
axial inneren Oberflächen der Seitenwände 13 und H und der Bodenwand 16 vorgesehen. Die Dichtung 19 umgibt
den Urifaag.des Hohlraums 17 auf drei Seiten, so
daß ein lecksicherer bzw. dichter Eingriff mit dem noch zu beschreibenden Elutionsfenster entsteht. Die Dichtung
19 hat nach einer bevorzugten Ausfuhrungsform einen rohrförmigen
Querschnitt und besteht beispielsweise aus einem dünnwandigen Polytetrafluoräthylen-Rohr.
Quer verlaufende Plansche bzw. umgebogene Sander 21 und
22 sind an den Seitenwänden 13 und 14 in der ÜTähe ihrer
axial inneren Oberflächen ausgebildet; die Plansche stehen in Richtung aufeinander zu vor, und zwar teilweise
über die offene, axial innere Seite des Hohlraums 17. Diese Plansche wirken mit dem Elutionsfenster auf eine
Weise zusammen, wie sie im folgenden beschrieben werden soll.
Eine im allgemeinen U-förmige Elektrode 23? beispielsweise
ein Platindraht, ist so in dem Hohlraum 17 angeordnet, daß sie sich im Kontakt mit der Stim^zand 18
befindet trad von ihr gehaltert wird. Ein Ende der Elek-_ trode 23 ist an einem Ansehlußteil 24 angebracht, dae
an der äußeren Seite der Stirnwand 18 befestigt.ist, vm
die Elektrode mit einem Anschluß einer herkömmlichen
Quelle für ein Gleichstrom-Blektrophoresepotential zu
verbinden* Die Elektrode 23 erstreckt sich im wesentlichen von der Oberseite des Hohlraums zu seinem Boden.
33as andere Bade der Elektrode ~23 ist is die Stirswasd 18
eingebettet und wird von ihr gehaltert.
Ε±ώ Sühlmitteldurchgaag 26 ist in den Seitenwinden 13
und H some der Bodenwaad 16 des BeiiäTtera vorgesehen,
um die ^shresä der Elektrophorese erzeugte ohmsche ULrme
abzuleiten, feiterhin sind iia de» Se it en wän den mit einem
609828/0537
Gewinde versehene öffnungen 27 ausgebildet, um die Bolzen
bzw. Schrauben aufzunehmen, mit denen die einzelnen Teile
der Elutionseinrichtung zusammenmontiert werden.
Der andere Pufferbehälter 12 hat im wesentlichen den
gleichen Aufbau wie der Pufferbehälter 11, so daß entsprechende Teile mit den gleichen Bezugszeichen, jedoch
mit den Zusatz "a" versehen, bezeichnet sind. Die Öffnungen
27a in dein Behälter 12 weisen jedoch kein Gewinde auf.
Ein Elutionsfenster bzw. eine Elutionsöffnung 28 ist in
der Nähe der axial inneren Oberfläche des Pufferbehälters
11 so angeordnet, daß sich eine abgedichtete Verbindung bzw. Berührung ergibt. Das Elutionsfenster 28 weist eine
flache Platte mit einem in der Mitte angeordneten Vorsprung 29 auf der Seite auf, die dem Hohlraum 17 des Behälters
11 gegenüberliegt. Der Vorsprung 29 ist rechtwinklig ausgelegt; seine Größe ist so bemessen, daß er
fest bzw. eng anliegend in den Hohlraum 17 paßt; er erstreckt sich teilweise in den Hohlraum 17, um seine offene
Seits abzuschließen. Zu diesem Zweck passen die Seitenränder des Vorsprungs 29 fest bzw. eng anliegend zwischen
die Flansche 21 und 22, während der Bodenrand des Vorsprungs eine ähnliche Passung mit dem Bodenrand des
Hohlraums 17 aufweist. Die Randbereiche 31 des den Vorsprung
29 umgebenden Elutionsfensters sind flach, so daß sie Fläche-an-Fläche in Eingriff mit den koplauaren,
flachen, inneren Oberflächen der Seitenwände 13 und 14- und der Bodenwand 16 des Behälters 11 kommen.
Die Dichtung 19 stellt eine fluiddichte Abdichtung zwischen dies.en Teilen her. Bei der in den Figuren 2 bis
4 gezeigten Ausführungsform ist die gegenüberliegende
Oberfläche 32 des Elutionsfensters flach. Ein Durchgang
33, der hier als vertikal verlaufender, länglicher Schlitz ausgebildet ist, ist in dem Elutionsfenster 28
609828/0537
ausgebildet, so daß eine Flüssigkeit bzw. ein fluides
Medium durchströmen kann. Der Durchgang 33 erstreckt sich vollständig durch den Vorsprung 29, so daß er
sich in seinem Mitt elfter eich zu dem Hohlraum 17 öffnet;
der Durchgang ist im wesentlichen symmetrisch zwischen den Schenkeln der Elektrode 23 angeordnet. Das Elutionsfenster
weist Öffnungen 34 auf, durch welche sich die Bolzen "bzw. Schrauben erstrecken. Außerdem enthält es
einen vorstehenden Rand 35, der den Durchgang 33 umgibt, um in die 6-elprobe einzudringen; dadurch läßt sich die
Abdichtung verbessern.
Ein zweites Elutionsfenster 36 wirkt in ähnlicher Weise
mit dem zweiten Pufferbehälter 12 zusammen. Entsprechende Teile sind mit gleichen Bezugszeichen, jedoch mit dem
Zusatz "a" versehen, gekennzeichnet.
Die Schlitze 33 und 33a haben im wesentlichen die gleiche Größe und Form und sind miteinander ausgerichtet. Die
Schlitze 33 und 33a haben eine solche Größe und Form, daß sie sich nur über einer ausgewählten Zone des Gelsegmentes
Fbefinden und diese freigeben; diese Zone ist ein Bruchteil der Gesamtoberfläche des Segmentes F. Sie
bedeckt die gesamte oder einen Bruchteil der Breite des Bandes C.
Ein flaches Abstandsstück 37 ist zwischen den einander gegenüberliegenden, flachen Oberflächen 32 und 32a der
Elutionsf enster 28 und 36' vorgesehen, um eine Abdichtung zwischen diesen Teilen herzustellen. Das Abstandsstück
weist einen rechtwinkligen Hohlraum 38 mit im-wesentlichen der gleichen Größe wie die Hohlräume 17 und
17a auf; der Hohlraumes hat eine größere vertikale Abmessung als die Durchgänge 33 und 33a. Das Abstandsstück
weist Öffnungen 39 auf, durch welche sich die Bolzen bzw. Schrauben erstrecken. Das Segment F. des vorhex·
durch Elektrophorese getrennten Gelmaterials wird eng
609828/0537
anliegend in dem Hohlraum 38 aufgenommen, so daß eine
ausgewählte Zone dieses Segmentes Fläche-an-Fläche den
Durchgängen 33 und 33a in den Elutionsfenstern gegenüberliegt. Das Abstandsstück 37 verhindert, daß das relativ
zerbrechliche Gelsegment F allzu stark zusammengedrückt wird, wenn die Einrichtung 10 zusammengebaut wird; dadurch
bleibt der Aufbau bzw. die Struktur des Gelsegmentes unverändert. Die Dicke des Gelsegmentes ist jedoch
etwas größer als die Dicke des Abstandsstückes 37; wenn also die Teile miteinander verbunden werden, wird das
Gelsegment etwas zusammengedrückt, so daß eine Abdichtung zwischen den Oberflächen 32 und 32a der Elutionsfenster
entsteht. Das Gelsegment F kann beispielsweise eine Dikke von ungefähr 2mm haben; es kann ungefähr 0,1 mm zusammengedrückt
werden, d.h., auf eine Dicke von ungefähr 1,9 mm.
Bei der Benutzung der Einrichtung werden die oben beschriebenen Teile mit Hilfe von Bolzen bzw. Schrauben
miteinander verbunden.
längs ihrer oberen Seite ist die Elutionseinrichtung 10 offen. Proben der die gewünschte Fraktion enthaltenden
Pufferlösung können von Zeit zu Zeit mittels einer Pipette oder einem ähnlichen Gerät entnommen werden. Am
Ende der Elution kann die gesamte Pufferlösung in ähnlicher Weise entnommen werden.
Mit Ausnahme der Elektroden 23 und 23a und der Anschlußteile 24 und 24a sind alle oben beschriebenen Teile aus
einem geeigneten, elektrisch isolierenden Material hergestellt; als Material kann beispielsweise ein Polykarbonat-Kunstharz,
z. B. Lexan-Kunstharz, ein Produkt der
General Elejbric Company, verwendet werden.
In den Figuren 5 und 6 ist eine modifizierte Ausführungs-
60 9 828/0537
25b4386
- "44- —
form dargestellt, bei der das Gelsegment F' die Form eines
Halbzylinders hat; diese Form wird dadurch erhalten,
daß ein zylindrisches Elektrophorese-Trenngel in seiner
Länge aufgeschnitten wird. Es wird kein Abstandsstück 37 verwendet; stattdessen weist eins der Elutionsfenster,
in diesem Pail das Fenster 28', einen halbzylindrischen
Hohlraum 51 auf, der das G-elsegment F1 eng
anliegend aufnimmt. Statt der vertikalen Schlitze 33 und 33a haben die Elutionsfenster 28' und 36' horizon«
tale Schlitze 52 und 52a, so daß längs der vertikalen
Ausdehnung des Gelsegmentes P' nur eine ausgewählte Zone
freiliegt. Die Schlitze erstrecken sieb/über die gesamte
Breite des Gelsegmentes.
Pig. 7 zeigt eine weitere Modifikation, bei der sdeder kein Abstandsstück 37 verwendet wird. Hierbei haben
die Elutionsfenster 28*s und 36IJ zusammenwirkende
Aussparungen 53 und 54 in ihren einander gegenüberliegenden
Oberflächen, so daß ein Hohlraum entsteht, um das Gelsegment P aufzunehmen und eng anliegend au halten.
Es sind also verschiedene Ausgestaltungen möglich, um das Gels egment zu halten; außerdem können die Elutionsfenster
mit Durchgängen unterschiedlicher Größe, Formen und Ausrichtungen versehen werden, so daß nur eine ausgewählte
Zone des Ge!segmentes freiliegt.
Im folgenden soll die Punktionsweise der erfindungsge—
mäßen Elutionseinriohtung im einzelnen erläutert werden.
Das frenngel A wird mit der herkömmlichen G-el-Elektrophorese
erhalten, Wenn das Gel A die Form eluar flachen
3?afel hat, wie sie in Pig. 1 dargestellt ist, wird das
Gel zerschnitten, so daß ein Segment P entsteht welches
das Band C und Bereiche der Bänder D und B enthält· 33as
609828/0537
Gelsegiaent wird in dem Halter 37 angeordnet, so daß sich
das Band c im wesentlichen senkrecht in den Hohlraum
erstreckt. Dann werden die Elutionsfenster 28 und 36 und
die Behälter 11 und 12 für die Pufferlösung montiert;
diese Teile werden durch die Schrauben 41 miteinander
verbunden. Zu diesem Zeitpunkt befinden sich die Durchgänge 33 und 33a über einem Teil oder über dem ganzen
Band C; sie liegen jedoch nicht über den anderen Bändern in dem Segment P. D.h. also, daß nur das Band C zu den
Hohlräumen 17 und 17a freiliegt. Die gesamte Einrichtung wird längs ihrer Seiten und ihres Bodens abgedichtet;
dazu werden sowohl die Dichtung 19 als auch die Eandbereiche des Segmentes P verwendet, die etwas elastisch
zwischen den einander gegenüberliegenden Oberflächen 32 und 32a der Elutionsfenster zusammengedrückt werden.
Dann werden die Hohlräume mit Pufferlösungen gefüllt,
die für die Elektrophorese geeignet sind. Die Pufferlösungen können in Abhängigkeit von der verwendeten,
bekannten Technik ausgewählt werden, wobei die Art der zu gewinnden Fraktion, die Art des Gelsystems, der
erforderliche pH-Wert und ähnliche Paktoren berücksichtigt werden. Als Puffer werden wässrige Lösungen verwendet,
die sauer oder alkalisch sein können; sie haben im allgemeinen eine Konzentration von ungefähr 10 $
der Pufferbestandteile. Zu den geeigneten Pufferbestandteilen
gehören Tris~(Hydroxymethyl)-Aminomethan, Borsäure, Glyzin usw.
Die Elektroden 23 und 23a werden nun mit einer Elektrophorese-Gleichstromquelle
verbunden. Solche Quellen sind im Handel erhältlich. Sie liefern im allgemeinen bis zu
ungefähr. 400 Y und bis zu ungefähr 50 mA. Im allgemeinen wird die Stromintensität reguliert, so daß eine
konstante Stromzuführung erfolgt. Dabei werden Ströme
609828/0537
von mehr als 40 elA zweckmäßigerweise vermieden, um die
Erzeugung einer zu hohen ohmschen T»Värme zu verhindern.
■Während der Elektrophorese werden die Behälter 11 und
12 ständig gekühlt, indem ein Kühlmittel im Kreislauf
durch die Durch]änge 26 und 26a geführt wird, so daß
sich das Gel nicht überhitzen kann. Dadurch kann mit höheren Strömen gearbeitet werden.
Die Stromzuführung wird solange fortgesetzt, bis der größte Seil der oder die gesamte fraktion, die sich im
Kontakt mit den Pufferlösungen befindet, in die Pufferlösung
eluiert bzw. ausgespült ist, die sich im Konfekt mit der als positivem Pol dienenden Elektrode befindet.
Während dieses Vorgangs wird eine bestimmte Menge ohmsche Wärme erzeugt; diese Wärme wird abgeleitet, indem
ein Kühlmittel im Kreislauf durch die Durchgänge 26 und 26a geleitet wird. Im allgemeinen wird die Kühlung
so durchgeführt, daß die Temperatur des Gels 40 0 nicht übersteigt. Eine zu starke Erwärmung kann reduziert
werden, indem die Stromdichte verringert und die Laufzeit verlängert werden.
Schließlich wird die Energiezuführung beendet, und die Elektrodenpufferlösungen abgezogen bzw. dekantiert.
Die Pufferlösung, die sich im Kontakt mit dem positiven Pol befand, enthält die gewünschte Fraktion in im
wesentlichen reiner Form. Diese Fraktion kann gewonnen und für die weitere Analyse eingesetzt werden.
Die Größe der gewünschten Fraktion und die Stelle, an der sie dem Trenngel A entnommen werden soll, wird
vorher durch ein geeignetes Fixierverfahren festgelegt;
dazu kann entweder eine Probe des Gels A oder ein weiteres Trenngel, das unter den gleichen Bedingungen präpariert
wurde, mit einem Farbstoff versetzt oder mittels eines radioaktiven oder Ultraviolett-Detektors abgetastet
609828/05 3 7
werden. Wegen der hohen Ileproduzierbarkeit der Slektrophorese-Geltrennungen
läßt sich In dieser V/eise die Zone in dem Gel A anzeigen, ais der die gewünschte Fraktion
gewonnen werden kann. Die Größe und die Form der Durchgänge 33 und 33a kann so vorher festgelegt werden, um
die gewünschte Entnahme einer einzigen Fraktion aus dem Gelsegment F zu erreichen.
Mit der hier te schriet» en en Einrichtung läßt sich das
Gelsegment leicht eingehen und mechanisch stabilisieren; außerdem wird die ohmsche Wärme entfernt; schließlich
las"sen sich eine gleichmäßige Geometrie des elektrischen Feldes und das hydrostatische Gleichgewicht "beibehalten;
alle diese Merkmale erleichtern die Elution.
Die Elution Ist diskontinuierlich und kann sehr gut im Laboratorium durchgeführt werden. Die gewünschte Fraktion
wird in sehr viel konzentrierterem Zustand gewonnen
als es bei den bisher verwendeten, herkömmlichen Elutionsverfahren der Fall war; dadurch kann die anschließende
Gewinnung der Fraktion aus der Pufferlösung einfacher und mit höheren Wiedergewinnungsraten durchgeführt
werden. Die Fraktion wird in einer biologisch aktiven Form wiedergewonnen, d.h., sie ist nicht denaturiert,
Sie kann analysiert werden, um die Isolierung und Aktivität der Gattung bzw. Spezies zu verifizieren.
Die in Fig. 7 gezeigte Modifikation kann auf die gleiche Weise eingesetzt werden, wie es oben beschrieben wurde.
In diesem Fall wird das Gelsegment F in dem Hohlraum gehaltert, der durch die Aussparungen 53 und 54 in den
Elutionsfenstern gebildet wird.
Die in den Fig. 5 und 6 dargestellte Modifikation verwendet ein halbzylindrisches Gelsegment F', das erhalten
wird, indem ein zylindrisches· Trenngel longitudinal aufgeschnitten wird; dadurch entstehen mehr oder weniger
hälbzylindrische Bereiche, während bei der Ausführungs-
609828/0537
form nach den Figuren 2 bis 4 die Platte q.uer zerschnitten
wurde. In dieser Ausführungsform enthält
das Gelsegment Ff also alle Bänder der Fraktionen,
die durch die Gel-Elektrophoresetrennung hergestellt wurden; diese Bänder liegen als einzelne, longitudinal
getrennte, im allgemeinen q.uer verlaufende Bänder vor. Deshalb erstrecken sich die Durchgänge 52 und 52a
in Querrichtung und haben eine solche Größe und Form, daß nur eins der Bänder oder ein Bereich eines solchen
Bandes freiliegt. Die Elution selbst erfolgt auf die gleiche Weise, wie es oben teschrieben wurde.
Im folgenden soll die Funktionsweise der Elutions-Einrichtung
nach der Erfindung anhand eines Beispiels erläutert werden.
Als Ausgangssubstanz wird als Elektrophorese-Gel eine Platte aus Polyakrylamid-Gel für die Elektrophorese
zur Präparation eines Ei- bzw. Ovin FSH (follikelstimulierendes Hormon) (Papkoff et al., Arch. Biochem.,
Biophys., 120,434) verwendet, das mit J-131 versetzt
war; als Puffer wurde Tris-Borsäure-EDTA mit einem pH-Wert von 8,4 verwendet; die Elektrophorese wurde
3,5 Stunden lang bei 15 mA und einer Spannung von 150 V durchgeführt. Eine Probe der Tafel wird analysiert,
indem die Radioaktivität von 1 cm Sektionen der Probe gezählt wird, um die Stelle festzulegen, an
der sich das gekennzeichnete Hormon befindet. Dabei wird festgestellt, daß sich das gekennzeichnete Hormon
in dem Gel in einem Band von ungefähr 1,0 cm Breite
befindet. Eine Elusions-Einrichtung, wie sie in Fig". 2 dargeetellt ist, wird eingesetzt, wobei die Breite
der Durchgänge 33 und 33a ungefähr 1cm beträgt. Die Tafel wird zerschnitten, so daß ein Segment mit einer
Breite von 3 cm entsteht; das Segment wird in dem HaI-
609828/0537
-Vb-
& 25bA386
ter angeordnet, und anschließend wird die Elusions-Einrichtung
zusamengebaut. Eine Pufferlösung von Tris-3orsäure-SDTA
mit einem pH-Wert von 8,4 wird in die Kammer 17 eingefüllt, während eine Pufferlösung aus phosphatgepuffertem
Salz "bzw. Saline mit einem pH-Wert von 7,4 in die Kammer 17a eingefüllt wird. Die Energiequelle
wird für die Elelctrophorese so geschaltet, daß die Elektrode 23 negativ und die Elektrode 23a positiv ist. Die
Elektrophorese wird hei 30 mA und 20 V 75 Minuten lang durchgeführt. Es ergeben sich die in der folgenden Tabelle
1 zusammengestellten Resultate:
Tabelle 1
Rate und Wirkungsgrad der Elution
Rate und Wirkungsgrad der Elution
Zeit (min.) |
Teilchen/ min. |
YoI. der Pufferprobe (Mikrolioer) |
Teilchen/ min, die im Gel zu |
Elu tion |
rückbleiben | ||||
0 | 0 | 25 | 0 | |
15 | 5746 | 25 | 15 | |
30 | 13842 | 25 | 36 | |
45 | 25370 | 25 | 67 | |
60 | 28728 | 25 | 75 | |
75 | 32024 | 25 | 84 | |
75 | ||||
Anreiche | 38 400 000 | 30 ml | 7 350 000 | 83 |
rung am Schluß |
- |
- Patentansprüche
609828/0537
Claims (13)
1. Elutions-£Ln richtung zum Eluieren eines gelösten Stoffes
aus einem Elektrophorese-Trenngel mit ersten und zweiten Behältern, die jeweils einen Hohlraum für die Aufnahme
einer Pufferlösung und in jedem Hohlraum eine Elektrode aufweisen, und mit einer Aussparung, um ein längliches,
dünnes Elektrophorese-Trenngel abgedichtet zwischen den Behältern zu haltern, dadurch gekennzeichnet,
daß sich ein Paar seitlich ausgerichteter, durchgehender Elutionsöffnungen (33, 33a) von den
gegenüberliegenden seitlichen Seiten der Aussparung (38) zu den jeweiligen Hohlräumen (17, 17a) erstreckt, wobei
die Elutionsöffnungen (33, 33a) wenigstens eine Oberflächenabmessung
haben, die kürzer als die entsprechende Oberflächenabmessung der Aussparung (38) ist, so daß eine
Zone mit begrenzter Fläche der Aussparung (38) direkt durch die Elutionsöffnungen (33, 33a) mit den Hohlräumen
(17, 17a) in Verbindung steht, damit der in der entsprechenden Zone eines in dem Hohlraum (17, 17a) angeordneten
Elektrophorese-Trenngels vorliegende gelöste Stoff in eine der Pufferlösungen eluierbar ist, indem die Elektroden (23,
23a) erregt werden, um einen Potentialgradienten quer zu
dem Gel zu erzeugen.
2. Elutions-Einrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Behälter (11, 12) einander gegenüberliegende
Elutionsfenster (28, 36) aufweisen, die zwischen der Aussparung (38) und den Hohlräumen (17, 17a) angeordnet
sind, und daß die Elutionsfenster (28, 36) jeweils einen Elutionsschlitz (33, 33a) enthalten, der eine der
Elutionsöffnungen bildet, wobei die Elutionsschlitze (33, 33a) miteinander direkt axial ausgerichtet sind.
3· Elutions-Einrichtung nach einem der Ansprüche 1 oder 2,
609828/0537
2 5 b 4 3 8
dadurch gekennzeichnet, daß die Aussparung (38) in einem
Abstandsstück (37) vorgesehen ist, das zwischen den Elutionsfenstern (28, 36) angeordnet ist.
4· Elutions-Binrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 3,
dadurch gekennzeichnet, daß jeder der Behälter (11, 12) ein Paar Seitenwände (13, H), eine Bodenwand (16) und
eine Stirnwand (18) aufweist, so daß ein Hohlraum entsteht, der längs der inneren Seiten des Behälters offen
ist, wobei das zugehörige Elutionsfenster (28, 36) fluiddicht
mit der inneren Seite des Behälter in Eingriff
kommt und die offene Seite des Hohlraums im wesentlichen verschließt.
5· Elutions-Sinrichtung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet,
daß der erste und zweite Behälter (11, 12) und die Elutionsfenster (28, 36) so aneinander befestigt
sind, daß die offenen Seiten der Hohlräume einander zugewandt und axial zueinander ausgerichtet sind, wobei die
Elutionsfenster (28, 36) mit den Elutionsschlitzen (33, 33a) zwischen den offenen Seiten axial mit den offenen
Seiten der Hohlräume ausgerichtet angeordnet sind.
6. Elutions-Sinrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß sich jede Elektrode (23, 23a)
im wesentlichen direkt gegenüber ihrem zugehörigen EIutionsschlitz
(33, 33a) befindet.
7. Elutions-Binrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 6,
dadurch gekennzeichnet, daß jede Elektrode (23, 23a). ein
langgestrecktes, im allgemeinen U-fÖrmiges, elektrisch
leitendes Teil aufweist, das symmetrisch in Bezug auf den Elutionsschlitz (33, 33a) in dem zugehörigen Elutionsfenster
angeordnet ist.
8. Elutions-Einrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß in den Behältern (11, 12) in-
•6 09828/0537
η ere Kühlleitungen (26, 26a) vorgesehen sind, um den Inhalt der Hohlräume zu kühlen.
9· Elutions-Einrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß die Elutionsfenster (28, 36)
plattenförmige Teile, die gegen die inneren Seiten der Behälter stoßen, sind und Vorsprünge (29, 29a) aufweisen,
die teilweise in die Hohlräume vorstehen und ihre offenen Seiten verschließen, wobei die Elutionsschlitze (33, 33a)
zwischen den Rändern der Torsprünge ausgebildet sind.
10. Elutions-Einrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 9,
dadurch gekennzeichnet, daß die Aussparung'(51 oder 53 >
54) in weaigs^esB eiser der einander gegenüberliegenden
Oberflächen der Elutionsfenster ausgebildet ist.
11. Elutions-linrichtung nach einem der Ansprüche 3 bis 10,
dadurch, gekennzeichnet, daß das Abstandsstück ©iOe XJ-förmige
Abstandsplatte ist, die zwischen den einander gegenüberliegenden
Oberflächen der Elutionsfenster (28, 36) angeordnet ist.
12. Verfahren zum. Bluieren von gelösten Stoffen aus Elektrophoxese-SrejQDgeleB,
dadurch gekennzeichnet, üaB s±ne yqxgeformte,
langgestreckte, dünne Elektrophorese—3?reaagelprobe,
die wenigstens ein Band des gelösten Stoffes enthält, in einem Halter (37)' für die fielprobe angeordnet
wirdj wobei die Probe einen feil eines Elektrophorese-Irenagels
aufweist, der durch Gel-Elektrophorese eines Äusgaögsgemischs
ύόώ gelöstes Stoffen präpariert wird, iss die
Bestandteil« des AüBgasgsgemisclia zu treagea, die ale
diskrete Bänder in dem G-el vorliegen, daß Pufferlösuöges
. in direkten Oberflächenkontalrt mit den gegenübexliegenden,
seitlichen Oberflächen einer Elutionsflache der Probe
gefeaelit werden, die kleider als die S-esamtoberflache
der Probe is*t5 uisd daß ein ö-leichpoteötialgradieiat
603828/0 537
sehen den Pufferlösungen q.uer zu der Elutionsflache der
Probe angelegt wird, um nur den gelösten Stoff in eine
der Pufferlösungen zu eluieren, der sich in der Slutionsflache
der Probe befindet.
13. Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet,
daß die Elektrophorese-Trenngel-Probe erhalten wird, indem eine langgestreckte, flache Platte aus einem Elektrophorese-Trenngel
mit longitudinal im Abstand angeordneten Bändern von gelösten Stoffen in Querrichtung zerschnitten
wird, um eine Probe zu gewinnen, deren Länge kleiner als die der Platte ist und die nur einen Teil
der Bänder enthält, daß die Probe vertikal ausgerichtet wird, und daß die Pufferlösungen nur mit einer vertikal
verlaufenden Elutionsfläche der Probe in Kontakt gebracht werden.
H. Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet,
daß die Elektrophorese-Trenngelprobe erhalten wird, indem ein langgestrecktes, zylindrisches Elektrophorese-Trenngel
mit longitudinal im Abstand angeordneten Bändern von gelösten Stoffen in seiner länge zerschnitten wird,
daß die Probe vertikal ausgerichtet wird, und daß die Pufferlösungen in Kontakt mit einem horizontal verlaufenden
Elutionsbereich der Probe gebracht werden.
609828/0537
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US05/536,575 US3989612A (en) | 1974-12-26 | 1974-12-26 | Elution device for gel electrophoresis |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE2554386A1 true DE2554386A1 (de) | 1976-07-08 |
Family
ID=24139073
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE19752554386 Withdrawn DE2554386A1 (de) | 1974-12-26 | 1975-12-03 | Elutions-einrichtung |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US3989612A (de) |
JP (1) | JPS5189879A (de) |
CH (1) | CH612761A5 (de) |
DE (1) | DE2554386A1 (de) |
GB (1) | GB1528604A (de) |
Families Citing this family (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4049534A (en) * | 1976-04-12 | 1977-09-20 | E-C Apparatus Corporation | Electrophorectic apparatus for elution from preparative gels |
US4169036A (en) * | 1978-03-24 | 1979-09-25 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | System for loading slab-gel holders for electrophoresis separation |
US4321120A (en) * | 1980-03-19 | 1982-03-23 | Nardi Ronald V | Process for detecting proteins specific to hypertension in mammals |
JPS58177864U (ja) * | 1982-05-20 | 1983-11-28 | 森永製菓株式会社 | 電気抽出用チユ−ブ |
JPS58204361A (ja) * | 1982-05-24 | 1983-11-29 | Morinaga & Co Ltd | 電気抽出法 |
JPS5992849U (ja) * | 1982-12-15 | 1984-06-23 | 森永製菓株式会社 | 電気抽出用チユ−ブ |
US4541910A (en) * | 1983-11-07 | 1985-09-17 | Yale University | Method for electroblotting macromolecules from a chromatographic gel |
DE3417180C1 (de) * | 1984-05-09 | 1985-05-15 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen | Vorrichtung zum Eluieren von elektrisch geladenen Makromolekuelen,insbesondere Biopolymeren |
JPS6135345A (ja) * | 1984-07-28 | 1986-02-19 | Tetsuro Asao | ゲル内から泳動分画等を回収する装置 |
US4576703A (en) * | 1984-11-05 | 1986-03-18 | International Biotechnologies, Inc. | Preparatory electroelution device |
US4576702A (en) * | 1984-11-05 | 1986-03-18 | International Biotechnologies, Inc. | Analytical electroelution device |
US4617102A (en) * | 1985-03-21 | 1986-10-14 | Lifecodes Corp. | Process and apparatus for purifying and concentrating DNA from crude mixtures containing DNA |
DE3578216D1 (de) * | 1985-10-01 | 1990-07-19 | Honda Motor Co Ltd | Verfahren und vorrichtung fuer die bestimmung von sauerstoff in gasen. |
US4614576A (en) * | 1985-10-22 | 1986-09-30 | Ionics, Incorporated | Microliter scale electrodialysis apparatus |
US4747918A (en) * | 1986-06-18 | 1988-05-31 | William Bellomy | Electroelution apparatus and method of using same |
US4773984A (en) * | 1987-02-02 | 1988-09-27 | Life Technologies, Inc. | Vertical gel slab electrophoresis apparatus |
US4830725A (en) * | 1987-08-04 | 1989-05-16 | Life Technologies, Inc. | Electrophoresis apparatus |
US5034119A (en) * | 1989-03-28 | 1991-07-23 | Mobil Oil Corporation | Non-carcinogenic bright stock extracts and deasphalted oils |
US5139637A (en) * | 1991-03-13 | 1992-08-18 | Macconnell William P | Plasmid purification system and method |
US5217593A (en) * | 1991-03-13 | 1993-06-08 | Macconnell William P | Nucleic acid purification system and method |
US5562812A (en) * | 1995-04-03 | 1996-10-08 | The Penn State Research Foundation | Free flow electrophoresis device for biomolecule purification and separation in zero and one G |
US5888364A (en) * | 1997-03-13 | 1999-03-30 | Life Technologies, Inc. | Gel electrophoresis apparatus |
WO2003029820A1 (fr) * | 2001-09-28 | 2003-04-10 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Appareil d'electrophorese, systeme electrophoretique, procede electrophoretique et procede de detection d'echantillon |
US7025864B2 (en) * | 2003-03-10 | 2006-04-11 | Elchrom Scientific A.G. | Method and apparatus for recovering target molecules from a gel containing said target molecules |
WO2015084887A2 (en) | 2013-12-02 | 2015-06-11 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Mini-gel comb |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3346479A (en) * | 1964-04-09 | 1967-10-10 | Scientific Industries | Preparative separation by a combination of gel separation and electrophoresis |
US3255100A (en) * | 1964-09-15 | 1966-06-07 | Raymond Samuel | Elution electrophoresis |
GB1021287A (en) * | 1964-09-21 | 1966-03-02 | Samuel Raymond | Improvements in vertical gel electrophoresis apparatus |
US3567611A (en) * | 1968-09-16 | 1971-03-02 | Gen Motors Corp | Two-stage electromagnetophoresis |
US3719580A (en) * | 1971-06-04 | 1973-03-06 | R Roberts | Electrophoretic apparatus |
-
1974
- 1974-12-26 US US05/536,575 patent/US3989612A/en not_active Expired - Lifetime
-
1975
- 1975-11-24 GB GB48239/75A patent/GB1528604A/en not_active Expired
- 1975-12-03 DE DE19752554386 patent/DE2554386A1/de not_active Withdrawn
- 1975-12-05 CH CH1583475A patent/CH612761A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-12-24 JP JP50155743A patent/JPS5189879A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US3989612A (en) | 1976-11-02 |
CH612761A5 (de) | 1979-08-15 |
GB1528604A (en) | 1978-10-18 |
JPS5189879A (de) | 1976-08-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE2554386A1 (de) | Elutions-einrichtung | |
DE60206937T2 (de) | Vorrichtung und verfahren für die trennung von analyten | |
DE69326680T2 (de) | Verfahren zum aufbringen/zurückgewinnen einer gelelektrophorese-probe | |
DE60112276T2 (de) | Elektrophoretische trennung von verbindungen | |
DE3513652C2 (de) | Vorrichtung für die vertikale Gel-Elektrophorese | |
DE69109589T2 (de) | Multifunktionelle elektrische Trennvorrichtung und Trennverfahren. | |
DE68918550T2 (de) | Vorgegossene Gelsysteme für zweidimensionale Elektrophorese. | |
DE69928230T2 (de) | Elektrophoretisches nukleinsäure-aufreinigungsverfahren | |
DE69637485T2 (de) | Vorrichtung und Verfahren zur Elektrophorese | |
DE2828179C2 (de) | ||
DE1923613C3 (de) | Vorrichtung zum isoelektrischen Trennen von ampholytischen Mischungen | |
DE2847444C2 (de) | Mikroelektrophoretische Vorrichtung zum Trennen und Identifizieren von Komponenten von zwei oder mehr Proteinsystemen | |
DE68919375T2 (de) | Elektroforesegerät. | |
DE2929478A1 (de) | Verfahren und vorrichtung zur durchfuehrung einer ein- und zweidimensionalen mikro-gelelektrophorese | |
DE69503189T2 (de) | Umhüllung für elektroforetische Gelplatten insbesondere Gradientgele | |
DE69816661T2 (de) | Vorrichtung für elektrophorese | |
DE102008020428B3 (de) | Vorrichtung und Verfahren und Gelsystem zur analytischen und präparativen Elektrophorese | |
DE3600214C2 (de) | ||
DE2365284C2 (de) | Kammer und Verfahren für die Durchführung des zweiten Kreuz-Elektrophoreseschrittes | |
DE2508844A1 (de) | Verfahren und einrichtung zur ablenkungselektrophorese | |
DE69721473T2 (de) | Injektion durch elektromigration von einer mikroreservoir elektrode in ein kapillares separationssystem | |
DE1598110A1 (de) | Vorrichtung zur Elektrophoreses | |
DE1243647B (de) | Geraet fuer die in senkrechter Richtung erfolgende Gel-Elektrophorese | |
DE2808344C2 (de) | ||
DE3234565C2 (de) | Zelle für einen Stützkörper in einem elektrophoretischen Apparat |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
8139 | Disposal/non-payment of the annual fee |