-
Eliahu Caspi Worchester, Mass. / U S A Donald J. Aberhart Washington,
D.C. / U S A Herstellung von 14ß-Hydroxysteroiden Die wichtigen, als Herzmittel
wirksamen Steroidverbindungen besitzen eine I4ßHydroxygruppe und eine Ketopyran-
oder Ketofurangruppe in der 1713-Stellung des Steroidkernes. Alle diese Teile sind
bekanntlich gegenüber vielen, üblicherweise bei der Steroidsynthese verwendete Reaktionsteilnehmern
empfindlich, und es war bisher schwierig, Verbindungen herzustellen, in welchen
beide Gruppen anwesend sind. Die Einführung der 14ß-Hydroxygruppe hat sich als besonders
schwierig erwiesen. Eine Synthese von Digitoxigenin ist von Sondheimer (J.Am.Chem.Soc.,
84, 876 (1962); Tetrahedron 22, 3189 (1966)) beschrieben. Diese Synthese geht von
Methyl-3ß-acetoxy-114ßhydroxy-55-etianat aus, das seinerseits vorher aus 6ß-Androstan-3ß-ol-17-on-acetat
in einer 9-Stufenfolge hergestellt worden ist (Meyer, Helv.Chim.
-
Acta, 29, 1580 (1964) und Ruzücke, ibid, 30, 1342 (1947)).
-
Daher ist es wünschenswert, ein einfacheres Verfahren zur Herstellung
von Digitoxigenin und verwandter Verbindungen als die oben genannten zu finden.
-
Ein solches Herstellungsverfahren würde von billigen und leicht verfügbaren
Steroidausgangsmaterialien ausgehen und von recht breiter Verwendbarkeit sein.
-
Im erfindungsgemäßen Verfahren wird als Ausgangsmaterial ein 3,22-Dihydroxy-23,24-dinor-5
-chol-7-en (iii), zweckmäßig in Form des 3-Acylates, verwendet. Dieses Ausgangsmaterial
kann man aus dem entsprechenden 5-Cholesta-7,22-3-acylat, zweckmäßig dem Acetat
(I), erhalten, das einer selektiven Ozonolyse der C22 Doppelbindung zur Bildung
des entsprechenden 22-Als (II) unterworfen wird; letzteres wird seinerseits in bekannter
Weise reduziert und liefert das Ausgangsmaterial (III). Das 3-Acyloxy-22-hydroxysteroid
(III) wird mit einem Phosphortrihalogenid, zweckmäßig Phosphortribromid, behandelt
und liefert nicht die erwartete 22-Bromidverbindung, sondern dBs vollkommen unerwartete
14,22-Epoxyd (IV). Das Epoxyd kann'auch durch Behandlung des Steroids (III) mit
einem anderen Cyclisierungsmittel, wie Salzsäure usw., gebildet werden.
-
Dieses Epoxyd kann leicht durch geeignete Oxydationsmittel zur Bildung
desentsprechenden 14ß,22-Lactons (V) oxydiert werden. Wo die Bildung der entsprechenden
14ß,22-Dihydroxyverbindung (VII) gewünscht ist, wird das Lacton mit einem starken
Reduktionsmittel reduziert.
-
Wird die Herstellung von Digitoxigenin gewLnsctrt, dann wird als Ausgangsmaterial
ein 5ß-Ergosta-7,22-dien-3ß-acetylat (eine Verbindung der Formel I) verwendet, das
Lacton (V) wird mit einem geeigneten Grignard-Reagenz oder einem organometallischen
Mittel, wie eireAlkalimetallaryl- oder -alkylverbindung, zur Bildung des entsprechenden
14ß-Hydroxy-20-disubstituierten-Methylenderivates (VI) behandelt, das dann mischt
durch Ozonolyse in das 14ß-Hydroxy-20-oxopregnan
-3-acylat, zweckmäßig
das Acetat, d.h. das bekannte 14ß-Hydroxy-20-oxo-5B-pregnan-3B-acetat, gespalten
wird, das dann nach dem oben genannten Verfahren von Sondheimer in Digitoxigenin
umgewandelt werden kann.
-
Im erfindungsgemäßen Verfahren wird das Ausgangsmaterial, nämlich
das 3,22-Dihydroxy-23,24-dinor-5#-chol-7-en (III), zweckmäßig in Form des 3-Acylates,
wie z.B. eines 3-A'lkano'a'ten oder 3-Aralkanoates, z.B. das 3-Acetat, 3-Benzoat
usw., aus dem entsprechenden 3-Acyloxy-5#-ergosta-7,22-dien durch Ozonolyse und
anschließende Reduktion des so gebildeten Aldehyds-erhalten.
-
In der bevorzugten Modifi kation dieses Verfahrens wird das 3-Acyl-ergostadien
in einem geeigneten Lösungsmittel, wie ein Kohlenwasserstoff oder halogenierter
Kohlenwasserstoff, z.B. Methylenchlorid usw., aufgenommen und bei einer Temperatur
zwischen -900C. und -500C. zweckmäßig in Anwesenheit einer Base, zweckmäßig einer
organischen Base, wie Pyridin, ozonisiert, bis etwa 1,5 Äquivalente Ozon absorbiert
sind. Dann wird die Reaktionsmischung in üblicher Weise aufgearbeitet, und zwar
zweckmäßig durch Abschrecken mit Methanol und Dimethylsulfid. Die Mischung wurd
unter einem Stickstoffstrom zur Trockne eingedampft, erneut in einem Alkanol und
gesättigtem wässrigem Natriumbisulfit gelöst. Die wässrige Lösung wird mit Äther
extrahiert und der Äther verworfen. Die wässrige Phase wird basisch gemacht und
erneut mit Äther extrahiert, worauf nach Aufarbeiten das entsprechende 22-Al (II)
erhalten wird Dieser Aldehyd kann dann zur entsprechenden 22-Hydroxyverbindung (III)
reduziert werden.
-
In der bevorzugten Ausführungsform wird diese Reduktion unter Verwendung
eines Reduktionsmittels, wie Metallhyciride, ihre Alkoxyanalogen usw., z.B.
-
Natriumborhydrid, Diboran usw., durchgeführt. Es wird besonders bevorzugt,
den Aldehyd (I1) in einer Mischung aus Methanol und Methylenchlorid aufzunehmcn
und
diese mit einer Lösung aus Natriumborhydrid, zweckmäBig inçeinem 1-1,5 molaren Überschuß
an Hydrid, zu behandeln, um nach Aufarbeiten die gewünschte Verbindung (III) zu
erhalten.
-
Das so erhaltene 3-Acyloxy-22-hydroxy-23,24-dinor-5#-chol-7-en wird
in einem Lösungsmittel, zweckmäßig einem Halogenkohlenwasserstofflösungsmittel,
wie Methylenchlorid, Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff usw., aufgenommen und mit
Phosphortrihalogenid, zweckmäßig PhosphortribrDmid, behandelt.
-
Die Reaktionskann bei niedriger Temperatur zweckmäßig von 0-30°; vorzugsweuse
bei Zimmertemperatur, für etwa 1-72 Stunden, vorzugsweise etwa 48 Stunden, durchgeführt
werden. Die Reaktionsmischung wird in keiner Weise aufgearbeitet, sondern direkt
durch Chromatographie gereinigt, und zwar zweckmäßig durch Dünnschichtchromatographie;
; so erhält man nach Umkristallisation des Eluates das 14,22-Epoxy-23,24-dinor-5#-cholan-3-acylat
(IV).
-
Das 14,22-Epoxyd (IV) wird dann mit einem starken Oxydationsmittel
oxydiert.
-
L)as Epoxyd wird vorzugsweise in einem nic1it-hydroxyliscten, polaren,
organischen Lösungsmittel, zweckmäßig Aceton usw., aufgenommen und mit einem entsprechenden
Oxydationsmittel, wie Chromsäure oder Rutheniumtetroxyd, behandelt, wobei frisch
hergestelltes Rutheniumtetroxyd besonders bevorzugt wird.
-
Diese Reaktion erfolgt gemäß dem Verfahren von Piatak (J.Org.Chem.
34, 116 (1969)).
-
Die Reaktionsmischung wird durch Filtrieren, zweckmäßig durch ein
Material, wie Celite, gereinigt, wobei das Filtrat in seinem Volumen verringert,
mit Wasser verdünnt und mit einem mit Wasser nicht mischbaren Lösungsmittel, wie
iithers extrahiert wird; so erhält man nach Abdampfen des Äthers das entsprechende
14,22-Lacton (V), das gegebenenfalls weiter gereinigt werden kann.
-
Wo die' Synthese' von Digitoxigenin gewünscht wird, wird das Lacton
- in diesem Falls das 3ß-Acyloxy-23,24-dinor-5ß-cholano-14,22-lacton (V), in einem
geeigneten Lösungsmittel, wie einem KohlenwasserStofflösungsmittel , z.B. Benzol,
Toluol, oder ein ätherisches Lösungsmittel, wie Diäthyläther oder Tetrahydrofuran,
das vorher nach bekannten Verfahren getrocknet worden ist, aufgenommen. Zur Reaktionsmischung
wird ein leichter Überschuß, zweckmäßig zwischen 3-4 Mol, eines organometallischen
Aryls oder Alkyls, wie Lithiumbutyl oder Lithiumphenyl, zugegeben. Obgleich auch
die entsprechenden Grignard-Reagenzien verwendet werden können, haben sich die Lithiumderivate
als zweckmäßiger erwiesen. Die Reaktionsmischung wird etwa 30 Minuten bis etwa 2
Stunden gJeruh'rt,zum Rückfluß erhitzt, abgekühlt und das überschüssige organometallische
Reagenz zerstört, dann wird in üblicher Weise aufgearbeitet.
-
Der Rückstand wird acetyliert, wcrauf die Acetate in einem geeigneten
Lösungsmittel, wie Benzol, gelost werden; es wird eine kleine Menge einer Saure,
wie p-Toluolsulfonsqure, zugefügt und die Mischung 2-6 Stunden zum RückfluB erhitzt.
Nach üblichem Aufarbeiten wird das so erhaltene 22-disubstituierte 20-Methylensteroid
tVÍ) vom Rückstand isoliert.
-
Die Methylengruppe kann durch Ozonolyse abgespalten werden und liefert
das bekannte 14ß-Hydroxy-20-keton (VIII) (Sondheimer, Tetrahedron 22, 3189 (1966)).
Obgleich in diesem Fall eine selektive Ozonolyse nicht erforderlich ist, da nur
die 27-olefinische Gruppe abgespalten werden soll, kann es dennoch zweckmäßig sein,
milde Reaktionsbedingungen anzuwenden.
-
Das so hergestellte 3ß-Dihydroxy-20-oxo-5ß-pregnan-3-acylat kann dann
gemäß dem Verfahren von Sodnheimer, J.Am.Chem.Soc., 84, 875 (1962) in Digitoxigenin
umgewandelt werden.
-
Wo die Herstellung des 14R,22-Dihydroxysteroids (VII) gewünscht wird,
wird anstelle der Behandlung des entsprechenden Lactons (v) mit einem organometallischen
Alkyl oder Aryl, mit einem starken Reduktionsmittel, wie seinem Metallhydrid, Diboran
usw., insbesondere Lithiumaluminiumhydrid, unter denselben Reaktionsbedingungen
behandelt. Nach Aufarbeitung erhält man das gewünschte Triol (VII). Wo das Triol
(VII) weiter in das entsprechende j Steroid (IX) umgewandelt werden soll, wird die
Verbindung (VII) zweckmäßig durch Behandlung mit Essigsäureanhydrid in Pyridin bei
Zimmertemperatur acyliert und liefert das entsprechende 3,22-Diacetat (VIII).
-
Dieses Diacetat wird dann dehydratisiert. In der bevorzugten Modifikation
wird das acetat in einem geeigneten basischen organischen Lösungsmittel, wie Pyridin,
aufgenommen und mit einem leichten Überschuß an Phosphoroxychlorid etwa 8-18 Stunden
bei Zimmertemperatur behandelt. Die übliche Aufarbeitung liefert das gewünschte
#14-3,22-Diacetat (IX).
-
Es wird bemekrt, daß das erfindungsgemäße Verfahren offenbar von einer
Anzahl stereochemischer Faktdren abhangt. So wirde z.B. gefunden, daß bei Verwendung
von 22RS-Hydroxy-5#-cholest-7-en-3ß-ol, d.h. dem Analogen der Verbindung (VII) mit
einem an das 22-Kohlenstoffatom gebundenen Isopentylteil als Steroid kein Epoxyd
gebildet wird; statt dessen erhält man eine Mischung aus den entspre chenden #B
(IX) und #14-22-Hydroxyderivaten. Weiterhin wurde gefunden, daß das Verfahren mit
einem konjugierten Polyensystem nicht durchführbar
ist; so erhält
man z.D. aus der Behandlung von 3α,5-Cyclo-23,24-dinor-5α-cholesta-6,8(14)-dien-22-ol
mit Phosphortribomid kein Epoxyd, sondern ein Bromid.
-
Das erfindungsgemäße Verfahren ist auch auf #8(9)-,#8(14)- und #14-Steroide
der 5α- - oder 5ß-Reihe als Ausgangsmaterialien anwendbar, Die folgenden Beispiele
voranschaulichen die vorliegende Erfindung, ohne sie zu beschränken. Die Schmelzpunkte
wurden in heißem Zustand gemessen und korrigiert. Die spezifische Drehung wurde
für 1- bis 2-%ige Lösungen in Chloroform bestimmt. Zur Dünnschichtchromatographie
wurde Kieselsäuregel.
-
der Firma Merck, Typ HF254+366, verwendet. Die IR-Spektren wurden
auf einer Perkin-Elmer Vorrichtung 237 als gepreßte Scheiben in KBr bestimmt. Die
UV-Spektren wurden auf einer Perkin-Elmer Vorrichtung 202 in Methanollösung bestimmt.
Falls nicht anders angeyeben, wurden die NMR Spektren an einem bei 60 mcs arbeitenden
Varjan HA-GO Instrument unter Verwendung von CDCl3 als Lösungsmittel besimmt. Die
chemischen Verschiebungen sind in # ppm in Bezug auf einen inneren Standard von
Tetramethylsilan angegeben. Die Massenspektren vjurden an einer Varian M-66 Vnrrichtung'
bestimmt. in bestimmten fällen wurden präzise Massen an den auf einer Varian M-66
Vorrichtung erhaltenen Spektren bestimmt. Massenspektren mit hoher Auftrennung wurden
an einer NIH Vorrichtung der Firma Arthur D.Little Co., Cambridge, Mass., ergab
ten.
-
Beispiel 1 3α-Acetoxy-22-hydroxy-23,24-dinor-5ß-chol-7-en (III)
a Eine auf -780C. abgekühlte Lösung aus 9,09 g 3α-Acetoxy-5ß-ergosta-7,22-dien
(Ia) in 400 ccm CH2Cl2 und 2,5 ccm Pyridin wurde mit 1,5 Äquivalenten 03 behandelt,
die mit einer Geschwindigkeit von 42,5 mg O³ pro Minute eingelei-(jodometrisch bestimmt)
tet wurde Es wurden 5 ccm Methanol und 5 ccm Dimethylsulfid zugefügt und die Lösung
sich auf Zimmertemperatur erwärmen gelassen. Dann wurde sie in einem Stickstoffstrom
zur Trockne eingedampft.
-
Der Rückstand wurde in 80 ccm Methanol gelöst und-mit 50-ccm gesättigtem
wässrigem Natriumhydrogensulfit behandelt. Nach 10 Minuten langem Schütteln wurde
die viskose Mischung 4 Mal mit je 250 ccm Äther extrahiert, -wobei nach jeder Extraktion
5 Minuten bei 500 Umdr./min zentrifugiert wurde. Der Ätherextrakt wurde getrocknet
und eingedampft und ergab vorherrschend zurückgewonnenes Ausgangsmaterial (3,5 g).
-
Dann wurde die wässrige Phase mit wässrigem Natriumhydroxyd neutralisiert
und mit 20 ccm gesättigtem Natriumcarbonat behandelt. Die Lösung wurde 4 Mal mit
je 250 ccm Äther extrahiert, wobei wie oben zentrifugiert wurde.
-
Das Ätherextrakt wurde über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft.
Das Hauptprodukt wurde durch präparative Dünnschichtchromatographie (System 10%
Äthylacetat/Hexan; Rf0,5)) isoliert; man erhielt 2,07 g Aldehyd (IIa) der aus MeOH
umkristallisiert wurde; F. 90-920C.; [α]20 + 74° (c, 2,22) #max2680, 1730,
1720, 1255,1125 cm 0 NMR Bänder bei 0,61 (18-Me), 0,88 (19-Me), 1,15 (3H, d, J'v6
cps, 21-Me), 2,0 (OAc), 4,72 (1H, m, 3B-H), 5,13 (1H, m, vinylisch), 9,57 (1H1-
-d, J~3 cps, CHC); äußerliche Spitzen bei 3s4Z und 0,57 zeigten eine Verunrei-nigung.
-
Das Massenspektrum hatte Spitzen bei m/e 312 (M-CH3CD2H), 297 (M-(CH3C02H
+ CH3)), 284 und 269.
-
Dann wurde 1,92 g des Aldehyds (IIa) in 25 ccm Chloroform und 25
ccm Methanol gelöst und mit 300 mg Natriumborhydrid 1 Stunde bei Zimmertemperatur
behandelt. Es wurde 1 g Ammoniumchlorid in 100 ccm -Wasser zugefügt und die Mischung
mit Chloroform extrahiert. Der Chloroformextrakt wurde getrocknet, eingedampft und
das Rohprodukt durch präparative Dünnschichtchromatographie 25 o Äthylacetat/Hexan)
getrennt. 1,25 g des Hauptproduktes (Rf 0,5) wurden isoliert und aus Chloroform/Methanol
in Form von Prismen umkristallisiert.
-
Man erhielt 3α-Acetoxy-22-hydroxy-23,24-dinor-5ß-chol-7-en (IIIa)
mit einem F. von 132-133°C.; [α]D22 + 83°; # max 3560, 3400 (br.), 1720, 1250
cm-1; NMR Bänder bei 0-,57 (18-Me), 0,87 (19-Me), 1,05 (3H, d, J = 6 cps, 21-Me),
1,62 (1H, D20 austauschbar, -OH), 1,99 (OAc), 3,53 (2H, m- CH2OH), 4,68 (1H, m,
3ß-H), 5,25 (1H, m, vinylisch); Das Massenspektrum gibt eine wenig intensive Spitze
bei m/e 374 (M C24H3803) und Spitzen bei 314 (Basis Spitze, M-CH3CO2H) und 299 (M-CH3CO2H-CH3).
-
Wurden im obigen Verfahren anstelle von 3α-Acetoxy-5ß-ergosta-7,22-dien
(Ia) als Ausgangsmaterialien 3α-Acetoxy-5α-ergosta-7,22-dien (Ib), 3ß-Acetoxy-5α-ergosta-7,22-dien
(Ic), 3ß-Acetoxy-5ß-ergosta-7,22-dien (Id) verwendet, so erhielt man das entsprechende
3α-Acetoxy-22-hydroxy-23,24-dinor-5α-chol-7-en (Ib), 3ß-Acetoxy-22-hydroxy-23,24-dinor-5α-chol-7-en
(Ic)', 3ß-Acetoxy-22-hydroxy-23,24-dinor-5ß-chol-7-en (Id). Wurden anstelle des
3-Acetoxyderivates die 3-Benzoxyderivate verwendet, so erhielt man in ähnlicher
Weise die entsprechenden 3-Benzoxyderivate.
-
Beispiel 2 3α-Acetoxy-14,22-epoxy-23,24-dinor-5ß-cholan (IVa)
Eine Lösung aus 0,0845 cm Phosphortribromid in 50 ccm Chloroform wurde hergestellt.
Zu 36 cm dieser Lösung wurden 705 mg 3α-Acetoxy-22-hydroxy-23,24-dinor-5B-chol-7-en
(IIIa) zugefügt und die Mischung 48 Stunden bei Zimmertemperatur stehen gelassen.
Die Lösung wurde mit Natriumbicarbonat gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet
und eingedampft. Das Rohprodukt wurde durch präparative Dünnschichtchromatographie
gereinigt und ergab 530 mg 3α-Acetoxy-14,22-epoxy-23,24-dinor-5ß-cholan (IVa)s
das in Prismenform aus Methanol umkristallisiert wurde; F. 139-141°C.; [α]D22-9°
(c, 2,00); #max 1725, 1230, 1220, 1010 cm-1; NMR Bänder bei 0,68 (3H, d, J= 6 cps,
21-Me), 0,92 (19-Me), 1,02 (18-Me), 2,03 (QAc); der Teil eines ABX Musters (2H)
zwischen # 3,0 und 3,83, mit JAB = 11,0 cps, JBX = 11,0 cps und JAX = 6,0 cps;-
4,7? t1H, m, 3ß-H).
-
Das Massenspektrum zeigt intensive Spitzen bei m/e 374.2813 (M+, berechnet
für C24H38O3 (374.2821) und m/e 359 (Basis-Spitze).
-
Beispiel 3 3ß-Acetoxy-14,22-epoxy-23,24-dinor-5ß-cholan (IVd) Eine
Lösung aus 0,0845 cm Phosphortribromid in 50 ccm Chloroform wurde hergestellt. Zu
36 cm dieser Losung wurden 705 mg 3ß-Acetoxy-22-hydroxy-23,24-dinor-5ß-chol-7-en
(IIId) zugefügt und die Mischung 48 Stunden bei Zimmertemperatur stehen gelassen;
Die Lösung wurde mit Natriumbicarbonat gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet
und eingedampft. Das Rohprodukt wurde durch präparative Dünnschichtchromatographie
gereinigt und Iieferte 3ß-Acetoxy-14,22-epoxy-23,24-dinor-5ß-cholan (IVd), das aus
Methanol umkristallisiert wurde.
-
Beispiel 4 3ß-Benzoyloxy-14,22-epoxy-23,24-dinor-5α-cholan (IVc')
79 mg 3ß-Benzoyloxy-22-hydroxy-23,24-dinor-5α-chol-7-en (IIIc') wurden mit
3,15 mg (1 Äquivalent) einer Lösung aus 0,0181 ccm Phosphortribromid in 10 ccm Chloroform
bei Zimmertemperatur für 18 Stunden behandelt. Die Lösung wurde direkt ohne vorherige'
Aufarbeitung durch präparative Dünnschichtchromatographie (20 % Äthylacetat/Hexan;
Rf 0,7) getrennt und ergab 52,5 mg 3ß-Benzoyloxy-14,22-epoxy-23,24-dinor-5α-cholan
(IVc'), das aus Chloroform/Methanol in Form-von Nadeln umkristallisiert wurde; F.
190-191°C. [α]D20 270 /D #max 1715, 1480, 1470, 1450, 1275, 1115, 710 cm-1;
NMR Bänder bei 0,68 (3H, d, J= 6 cps, 21-Me), 0,88 (19-Me), 1,03 (18-Me), 4,91 (1H,
m, 3α-H); der Teil eines ABX Muster (2H) erscheint zwischen # 3,12 und 3,83,
mit berechnetem JAX = 6,5 cps., JBX = 11,0 cps. und JAB = 11,0 cps.
-
Das Massenspektrum zeigt Hauptspitzen bei m/e 436 (M+, C29H40O3),
421 (Basis-Spitze), 314 (M-C6H5CO2H).
-
Analyse für C29H40O3 ber.: C 79,75 H 9,25 gef.: C 79,75 H 8,85 B e
i s p, i e 1 3α-Benzoyloxy-14,22-epoxy-23,24-dinor-5α-cholan (IVb')
79 mg 3α-Benzoyloxy-22-hydroxy-23,24-dinor-5α-chol-7-en (IIIb') wurden
mit 3,15 ccm (1 Äquivalent) einer Lösung aus 0,0181 ccm Phosphortribromid in 10
ccm Chloroform' bei, Zimmertemperatur für 18 Stunden behandelt. Die Lösung wurde
ohne vorherige Aufarbeitung direkt durch präparative Dünnschichtchromatographie
(20% Äthylacetat/Hexan) getrennt und ergab 52,5 mg 3α-Benzoyloxy-14,22-epoxy-23,24-dinor-5α-cholan
tIVb'), das aus Chloroform/Methanol umkristallisiert wurde.
-
Beispiel 6 3α-Acetoxy-23,24-dinor-5ß-cholano-22#14-lacton (Va)
210 mg 5ß-Epoxy (IVa) wurden bei Zimmertemperatur mit 40 mg-'Rutheniumdloxyd und
1,0 g Natriumperjodat in 15 ccm Wasser und 30 ccm Aceton 18 Stunden gerührt. Die
Mischung wurde mit Wasser verdünnt und mit Äther extrahiert. Der Ätherextrakt wurde
mit Wasser und gesättigtem Natriumchlorid- gewaschen, über Na2SO, getrocknet und
eingedampft Das Lacton wurde' durch präparative Dünnschichtchromatographie (10 %
Äthylacetat/texan; RfO,3) gereinigt und ergab 184 mg 3α-Acetoxy-23,24-dinor-5ß-cholano-22#14-lacton
(Va), das aus Methanol umkristallisiert wurde; F. 179-181°C.; [α]D20-36° (c,
3,05) #max 1725, 1720, 1230, 1130, 1015, 975 cm-1; NMR Bänder bei 0,97 (19-Me),
1,07 (18-Me), 1,23 (3H, d, J~7 cps, 21-Me), 2,03 (OAc), 2,90 (1H, m, C-20 H), 4,68
(1H, m, 3ß-H).
-
Das Massenspektrum zeigt eine Spitze für das molekulare Ion bei m/e
388.2602 (M+, berechnet für C24H38O3 = 388,2613) und wenig intensive Spitzen bei
m/e 360 (M-CO), 344 (M-C02), 328 (M-CH3CD2H). Intensive Fragmente erscheinen bei
m/e 292 (M-C6HBO) und m/e 284 (M.(CH3CO2H + CO2)).
-
B e i s p i e l 7 3ß-Acetoxy-23,24-dinor-5ß-cholano-22#14-lactol (Vd)
210 mg des 5B-Epoxyds (IVd) wurden bei Zimmertemperatur mit 40 mg R-utheniumdioxyd
und 1,0 g Natriumperjodat in 15 ccm Wasser und 30 ccm Aceton 18 Stunden gerührt.
Die Mischung wurde mit Wasser verdünnt und mit Äther extrahiert Der Ätherextrakt
wurde mit Wasser und gesättigtem Natriumchlorid gewaschen, übei Na2SO4 getrocknet
und eingedampft. Das Lacton wurde durch präparative Dünnschichtchromatographie (10
% Äthylacetat/Hexan) gereinigt und ergab das 3ß-Acetoxy-23,24-dinor-5ß-cholano-22#14-lacton
(Vd), das aus Methanol umkristallisiert wurde.
-
Beispiel 8 3ß-Benzoyloxy-23,24-dinor-5ß-cholano-22#14-lacton (Vc')
5 mg Rutheniumdioxyd in 2 ccm Aceton wurden mit 22 mg Natriumperjodat (in Zccm einer
1:1-Mischung aus Aceton und Wasser gelöst) behandelt. Die gelbe Lösung wurde zu
25 mg Epoxyd (IVc') in 2 ccm Aceton zugefügt und die, Mischung bei Zimmertemperatur
gerührt. Als die Lösung schwarz wurde, wurde innerhalb von 3 Stunden absatzweise-eine
Lösung aus 100 mg Natriumperjodat in 1 ccm einer 1:1 Mischung aus Aceton und Wasser
zugegeben. Nach insgesamt 5 Stunden wurden 2 ccm Isopropanol zugefügt, worauf eine
weitere Stunde gerührt wurde.
-
Die Mischung wurde durch Ceiite filtriert, auf das halbe Volumen eingedampft,
mit Wasser verdünnt und mit Äther extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen,
getrocknet und eingedampft.
-
Das Produkt wurde durch präparative Dünnschichtchromatographie (10
% Äthylacetat/Hexan; Rf 0,15) gereinigt und ergab 3ß-Benzoyloxy-23,24-dinor-5ßcholano-22#14-lacton
(Vc'), das aus Chloroform:Methanol in Form von Nadeln umkristallisiert wurde; die
Ausbeute betrug 20 mg mit einem F. von 227-232°C.; [α]D20 + 12° (c, 1,96);
#max 1720, 1275,cm-1; NMR Bänder bei 0,93 (19-Me), 1,10 (18-Me), 1,27 (3H, d, J~6
cps, 21-Me), 2,97 (1H, m, C-20-H), 4,93 (1H, m, 3α-H).
-
Das Massenspektrum hatte Spitzen bei m/e 450.2783 (M+, berechnet für
C29H3804 = 450.2770), 422.2815 (M-CO; berechnet für C28H3803 = 423.2821), 406.2873
(M-CO2; berechnet für C28H38O3 = 406.2871) 354 (M-C6H80, Basis-Spitze), 328 (M-C6H5CO2H).
-
B~e ispi-l 9 3α-Benzoyloxy-23,24-dinor-5α-cholano-22#14-lacton
(Vb') 5 mg Rutheniumdioxyd in 2 ccm Aceton wurden mit 22 mg Natriumperjodat (in
2 ccm einer 1:1-Aceton/Wasser-Mischung gelöst) behandelt. Die gelbe Lösung wurde
zu 25 mg Epoxyd (IVb') in 2 ccm Aceton zugefügt und die Mischung bei Zimmertemperatur
gerührt. Als die Lösung schwarz wurde, wurde eine Lösung aus 100 mg Natriumperjodat
in 1 ccm einer 1:1-Aceton/Wasser-Mischung innerhalb von 3 Stunden absatzweise zugefügt.
Nach insgesamt 5 Stunden wurden 2 ccm Isopropanol zugefügt, und es wurde ~eine weitere
Stunde gerührt. Die Mischung wurde durch Celite filtriert, auf ds halbe Volumen
konzentriert, mit Wasser verdünnt und mit Äther extrahiert. Der Extrakt wurde mit
Wasser gewaschen, getrocknet und eingedampft. Das Produkt wurde durch präparative
Dünnschichtchromatographie (10 °j5 Äthylacetat/Hexan) gereinigt und ergab nach Umkristallisation
aus Chloroform/Methanol 3α-Benzoyloxy-23,24-dinor-5α-cholano-22 #14-lacton
(Vb').
-
B e i s p i e l 10 3α,14ß,22-Trihydro-23,24-dinor-5ß-cholan
(VIIa") 68 mg Lacton (Va) in 50 ccm Äther wurden mit 500 mg Lithiumaluminiumhydrid
24 Stunden unter Rückfluß behandelt. Das überschüssige Hydrid wurde mit Äthylacetat
zerstört, dann wurde, Wasser eingetropft, bis sich ein weißer granularer Niederschlag
gebildet hatte. Dieser wurde abfiltriert und mit Äther gewaschen Die vereinigte
Ätherlösung wurde über Na2S04 getrocknct und eingedampft. Als Produkt erhielt man
60 mg 3α,14ß,22-Trihydroxy-23,24-dinor-5B-cholan (VIIa"), das zu Nadeln mit
einem F. von 195-197 C. aus Äthylacetat umkristallisiert wurde; [α]20 + 18°C
(c, 1,74); D
NMR (DMSO -d6) Bänder bei 0,85 (19-Me), 0,93 (18-Me),
etwa 0,93 (21-Me, unter 18-Me Signal), 3,25 (1H, m, 3ß-H), 3,35 (2H, D2O austauschbar,
-OH), 3,92 (1H, D2O austauschbar, -OH), 4,38 (2H, m, C-22-H2).
-
Das Massenspektrum zeigt eine niedrig molekulare Ionenspitze bei m/e
350 (C22H38O3) und Hauptspitzen bei m/e 338 (M-H2O), 317 M-(H2O + CH3)), 314 M-2H2O),
299 (M-(2H2O + CH3)), 274 (M-C3H6O + H2O)), 273 (M-(C3H7O + H2O)), 255 (M-(C3H7O
+ 2H2O)).
-
B e i s p i e l 11 3ß,14ß,22-Trihydroxy-23,24-dinor-5ß-cholan (VIId")
68 mg Lacton (Vd) in 50 ccm Äther wurden mit 500 mg Lithiumaluminiumhydrid 24 Stunden
bei Rückfluß behandelt. Das überschüssige Hydrid wurde mit Äthylacetat zerstört,
dann wurde Wasser eingetropft, bis sich ein weißer granularer Niederschlag gebildet
hatte. Dieser wurde abfiltriert und mit Äther gewaschen Die vereinigte Ätherlösung
wurde über Na2SO4 getrocknet und eingedampft; das Produkt wurde aus Äthylacetat
umkristallisiert und ergab 3ß,14ß,22-Trihydroxy-23,24-dinor-5ß-cholan (VIId").
-
B e i s p i e l 12 3α,14ß,22-Trihydroxy-23,24-dinor-5α-cholan
(VIIb") 68 mg Lacton (Vb') in 50 ccm Äther wurden mit 500 mg Lithiumaluminiumhydrid
bei Rückfluß für 24 Stunden behandelt. Das überschüssige Hydrid wurde mit Äthylacetat
zerstört, dann wurde Wasser eingetropft, bis sich ein weißer granularer Niederschlag
gebildet hatte. Dieser wurde abfiltriert und mit Äther gewaschen. Die vereinigte
Ätherlösung wurde über Na2SO4 getrocknet und eingedampft. Das Produkt wurde aus
Äthylacetat umkristallisiert und ergab 3α,14ß,22-Trihydroxy-23,24-dinor-5α-cholan
(VIIb").
-
Beins p i e 1 13 3ß,14ß,22-Trihydroxy-23,24-dinor-5α-cholan
(VIIc) 68 mg Lacton (Vct) in 50 ccm Äther wurden mit 500 m,g Lithiumaluminiumhydrïd
24 Stunden bei Rückflu-B behandelt. Das überschüssige Hydrid wurde mit Äthylacetat
zerstört, dann wurde Wasser eingetropft, bis sich ein weißer granularer Niederschlag
gebildet hatte. Dieser wurde abfiltriert und mit Äther gewaschen. Die vereinigte
Ätherlösung wurde über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Produkt wurde
aus Äthylacetat umkristallisiert und ergab 3ß,14ß,22-Trihydroxy-23,24-dinor-5α-cholan
(VIIc).
-
B e i s p i e~l 14 3ß-Acetoxy-14ß-hydroxy-23,24-dinor-22-diphenyl-5ß-chol-2-en
)VId) 68 mg Lacton (Vd) in 50 ccm Äther wurden mit 500 mg Phenyllithium bei Zimmertemperatur
und anschließend für 2-8 Stunden unter Rückfluß behandelt.
-
Die Reaktionsmischung wurde in üblicher Weise zur Bildung einer Ätherlösung
aufgearbeitet. Die Ätherlösung wurde über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft
und der Rückstand in üblicher Weise acetyliert. Das erhaltene Acetat wurde in Benzol
gelöst, es wurden einige Kristalle p-Toluolsulfonsäure zugefügt und die Mischung
2-6 Stunden zum Rückfluß erhitzt. Die Lösung wurde gewaschen und zur Trockne eingedampft;
so erhielt man 3ß-Acetoxy-14ßhydroxy-23,24-dinor-22-diphenyl-5ß-20-en (VId).
-
Wurde im obiyen Verfahren anstelle von Phenyllithium Butyllithium
verwendet, so erhielt man das 3ß-Acetoxy-14ß-hydroxy-23,24-dinor-22-dibutyl-5ß-chol-20-en
(VId).
-
B e 1 s p L e 1 15 3ß-Acetoxy-14ß-hydroxy-20-oxo-5ß-pregnan (VIIIId)
213 mg 3ß-Acetoxy-14ß-hydroxy-23,24-dinor-22-duphenyl-5ß-chol-22-en in 100 ccm Methylenchlorid
wurde bei -78°C. mit Ozon behandelt.
-
Nach Zugabe von Wasser wurde die Mischung 2-16 Stunden bei Zimmertemperatur
geschüttelt. Die organische Phase wurde mit gesättigtem Natriumchlorid gewaschen,
über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Hauptprodukt, nämlich 3ß-Acetoxy-14ß-hydroxy-20-oxo-5ß-pregnan
wurde durch präparative Dünnschichtchromatographie (20 % ÄthylacetatlH'exan) isoliert
und aus Methanol umkristallisiert; F. 150-151°C.; [α]D22+25° (CHCl3) #max
1727, 1697 cm-1.
-
max Wurde im obigen Verfahren von 3ß-Acetoxy-14ß-hydroxy-22-dibutyl-5ß-pregn-20-en
ausgegangen, so erhielt man dasselbe Produkt.
-
Fig. 1
Fig. 1 Fortsetzung
oben bedeutet R = Acetyl oder C6H5. CO-a: 3α-Acetoxy-5ß-steroid b: 3α-Acetoxy-5α-steroid
c: 3ß-Acetoxy-5α-steroid d: 3ß-Acetoxy-5ß-steroid a',b',c',d' : die entsprechenden
3-C6H5. COO-Steroide a",b",c",d" : die entsprechenden 3-HO-Steroide