DE19823484A1

DE19823484A1 - 5'-Desoxycytidin-derivate

Info

Publication number: DE19823484A1
Application number: DE19823484A
Authority: DE
Inventors: Kazuo Hattori; Tohru Ishikawa; Hideo Ishitsuka; Yasunori Kohchi; Nobuhiro Oikawa; Nobuo Shimma; Hitomi Suda
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 1997-06-02
Filing date: 1998-05-26
Publication date: 1998-12-03
Also published as: ZA984478B; CN1197871C; ID19801A; PL192832B1; AR012878A1; HU9801256D0; SG66466A1; CZ295706B6; GB9811762D0; TW584636B; PL326604A1; BR9801744A; NO982473L; NO316609B1; GB2325931B; NZ330360A; PE79599A1; RU2238278C2; JPH10330395A; US6114520A

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue 5'-Desoxy cytidinderivate, pharmazeutische Zusammensetzungen und einen Kit, um die Zufuhr von 5'-Fluoruracil selektiv zu Tumorgewebe zu fördern, und ein Verfahren zur Herstellung der neuen 5'-Desoxycytidinderivate.

Genauer betrifft die vorliegende Erfindung neue 5'-Desoxycytidinderivate der allgemeinen Formel (I)

worin R¹ ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe ist, die unter physiologischen Bedingungen leicht hydrolysierbar ist;
R² ein Wasserstoffatom oder eine -CO-OR⁴-Gruppe ist, worin R⁴ eine gesättigte oder ungesättigte, gerade oder verzweigte Kohlenwasserstoffgruppe ist, die aus 1 bis 15 Kohlenstoffato men besteht, oder eine Gruppe der Formel -(CH₂)_n-Y ist, worin Y ein Cyclohexyl- oder Phenylrest ist und n eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist;
R³ ein Wasserstoffatom, Brom, Iod, ein Cyanorest, eine C₁-C₄- Alkylgruppe, die mit Halogenatomen substituiert sein kann, eine Vinyl- oder Ethinylgruppe, die jeweils mit Halogenato men, C₁-C₄-Alkylresten, Cycloalkylresten, Aralkylresten oder einem aromatischen Ring, der 1 oder mehrere Heteroatome auf weisen kann, substituiert sein kann, ist, oder eine Aralkyl gruppe, die substituiert sein kann, mit dem Vorbehalt, daß R² und R³ nicht gleichzeitig Wasserstoffatome sein können.

Obwohl 5'-Fluoruracil (5-FU) oder seine Derivate klinisch nützlich sind als Antitumormittel zur Behandlung von ver schiedenen festen Tumoren, sind sie im allgemeinen noch nicht befriedigend im Hinblick auf die Wirksamkeit und Sicherheit. Diese Nachteile beruhen hauptsächlich auf der schnellen Inak tivierung von 5-FU durch Dihydropyrimidindehydrogenase (DPD) und/oder die unbefriedigende Zufuhr von 5-FU zu Tumorgewebe im Hinblick auf die Tumorselektivität. Über Versuche, die Antitumoraktivität von 5-FU oder seinen Derivaten durch Hem mung von DPD zu verbessern, wurde bereits berichtet: die gleichzeitige Verabreichung von 5-FU oder seinem Derivat mit einem DPD-Inhibitor, wie Uracil [USP 4328229], 5-Ethinyluracil [WO 92/04901] 5-Chlor-2, 4-dihydroxypyridin [USP 5525603] etc. Eine solche gleichzeitige Verabreichung führte zur Verbesserung der Antitumoraktivität von 5-FU oder seinen Derivaten, aber das Sicherheitsprofil war nicht so stark ver bessert aufgrund der ungenügenden Selektivität bei der Zufuhr des DPD-Inhibitors zu Tumorgewebe (als Konsequenz ist der 5-FU-Pegel sowohl bei den Tumoren als auch im Plasma erhöht).

Im Gegensatz dazu wurde erfindungsgemäß festgestellt, daß die gleichzeitige Verabreichung eines neuen 5'-Desoxycytidin derivats mit der allgemeinen Formel (I) mit 5-FU oder seinem Derivat zu einer signifikant verbesserten Zufuhr von 5-FU se lektiv zu Tumorgeweben führt, verglichen mit der Kombination von 5-FU oder einem Derivat davon mit einem bekannten DPD-Inhibitor, wie 5-Ethinyluracil, und es wird eine signifikat verbesserte Antitumoraktivität bei menschlichen Krebs xenotransplantat-modellen gezeigt.

Die jeweiligen Gruppen der allgemeinen Formel (I) werden im folgenden genauer erläutert:

Erklärung von R¹:
R¹ ist ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe, die unter phy siologischen Bedingungen leicht hydrolysierbar ist.

Der Ausdruck "eine Gruppe, die leicht unter physiologischen Bedingungen hydrolysierbar ist" bedeutet bevorzugt Acetyl-, Propionyl-, Benzoyl-, Toluoyl-, Glycyl-, Alanyl-, β-Alanyl-, Valyl-, Lysylgruppen und dergleichen.

Erklärung von R²:
R² ist ein Wasserstoffatom oder eine -CO-OR⁴-Gruppe, worin R⁴ eine gesättigte oder ungesättigte, gerade oder verzweigte Kohlenwasserstoffgruppe ist, die aus 1 bis 15 Kohlenstoffato men besteht, oder eine Gruppe der Formel -(CH₂)_n-Y, worin Y ein Cyclohexyl- oder Phenylrest ist und n eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist.

Der Ausdruck "eine gesättigte oder ungesättigte, gerade oder verzweigte Kohlenwasserstoffgruppe, die aus 1 bis 15 Kohlen stoffatomen besteht" für die obige Gruppe R⁴ bedeutet bevor zugt Methyl-, Ethyl-, n-Propyl-, 1-Isopropyl-2-methylpropyl-, 1,1, 2-Trimethylpropyl-, n-Butyl-, Isobutyl-, 2-Ethylbutyl-, 3,3-Dimethylbutyl-, n-Pentyl-, Isopentyl-, Neopentyl-, 2-Propylpentyl-, n-Hexyl-, 2-Ethylhexyl-, n-Heptyl-, n-Octyl-, Allyl-, 2-Buten-1-yl-, 3-Buten-1-yl-, 3-Penten-1-yl-, 4-Penten-1-yl-, 3-Hexen-1-yl-, 4-Hexen-1-yl-, 5-Hexen-1-yl-, n-Tridecylgruppen und der gleichen.

Der Ausdruck "eine Gruppe der Formel (CH₂)_n-Y, worin Y ein Cyclohexyl- oder Phenylrest ist und n eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist" bedeutet bevorzugt Cyclohexyl-, Cyclohexylmethyl-, 2-Cyclohexylethyl-, 3-Cyclohexypropyl-, 4-Cyclohexylbutyl-, Phenyl-, Benzyl-, Phenetyl-, 3-Phenylpropyl-, 4-Phenyl butylreste und der gleichen. In der am meisten bevorzugten Ausführungsform der erfindungsgemäßen Verbindungen bedeutet R⁴ einen n-Propyl-, n-Butyl-, n-Pentyl-, Isopentyl-, Neopen tyl-, n-Hexyl-, 3,3-Dimethylbutyl-, 2-Ethylbutyl-, Phenyl ethyl- und Cyclohexylmethylrest.

Erklärung von R³:
R³ ist ein Wasserstoffatom, Brom, Iod, ein Cyanorest, eine C₁-C₄-Alkylgruppe, die mit Halogenatomen substituiert sein kann, eine Vinyl- oder Ethinylgruppe, die jeweils mit Halo genatomen, C₁-C₄-Alkyl-, Cycloalkyl-, Aralkylresten oder einem aromatischen Ring, der ein oder mehrere Heteroatome aufweisen kann, substituiert sein kann, oder eine Aralkyl gruppe, die substituiert sein kann, mit dem Vorbehalt, das R² und R³ nicht gleichzeitig Wasserstoffatome bedeuten können.

Der Ausdruck "C₁-C₄-Alkylgruppe, die mit Halogenatomen sub stituiert sein kann" bedeutet bevorzugt Methyl-, Trifluor methyl-, Ethyl-, Propylgruppen und der gleichen.

Der Ausdruck "eine Vinyl- oder Ethinylgruppe, die mit Halo genatomen, C₁-C₄-Alkyl-, Cycloalkyl-, Aralkylresten oder einem aromatischen Ring, der ein oder mehrere Heteroatome aufweisen kann, substituiert sein kann" bedeutet bevorzugt einen Vinyl-, 1-Chlorvinyl-, 2-Bromvinyl-, 2-Brom-1- chlorvinyl-, Ethinyl-, Prop-1-inyl-, But-1-inyl-, Pent-1- inyl-, Hex-1-inyl-, 3,3-Dimethyl-but-1-inyl-, Cyclopentyl ethinyl-, Cyclohexylethinyl-, Phenylethinyl-, 3-Phenylprop-1- inyl-, Pyrid-2-ylethinyl-, Imidazol-2-ylethinylrest und der gleichen. Die am meisten bevorzugte Gruppe ist eine Ethinyl gruppe und Iod.

Der Ausdruck "eine Aralkylgruppe, die substituiert sein kann" bedeutet bevorzugt einen 3-(Benzyloxy) benzyl-, 3-Methoxy benzyl-, 3-Brombenzyl-, 3-Methylbenzyl-, 3-Hydroxybenzylrest und der gleichen.

Bevorzugte 5'-Desoxycytidinderivate der vorliegenden Erfin dung sind:
5'-Desoxy-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-5-prop-1-inylcytidin,
5-But-1-inyl-5'-desoxycytidin,
5'-Desoxy-5-pent-1-inylcytidin,
5'-Desoxy-5-hex-1-inylcytidin,
5'-Desoxy-5-iodcytidin,
5-Brom-5'-desoxycytidin,
5-(1-Chlorvinyl)-5'-desoxycytidin,
5'-Desoxy-5-vinylcytidin,
5'-Desoxy-5-trifluormethylcytidin,
5-(3-Benzyloxybenzyl)-5'-desoxycytidin,
5-Cyano-5'-desoxycytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-prop-1-inylcytidin,
5-But-1-inyl-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-pent-1-inyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-hex-1-inyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-iod-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5-Brom-5-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5-(1-Chlorvinyl)-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
N⁴-(Ethoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-vinylcytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-propoxycarbonyl)-5-vinylcytidin,
N⁴-(n-Butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-vinylcytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-vinylcytidin,
N⁴-(Benzyloxycarbonyl)-5'-desoxy-5-vinylcytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-trifluormethylcytidin,
5-(3-Benzyloxybenzyl)-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)- cytidin,
5-Cyano-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(methoxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-(ethoxycarbonyl)-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-propoxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(isopropoxycarbonyl)cytidin,
N⁴-(n-Butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(isobutoxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2-propylpentyloxy)carbonyl]cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(isopentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2-methylpentyloxy)carbonyl]cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(3-methylpentyloxy)carbonyl]cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-hexyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-[(2-ethylbutyl) oxycarbonyl]-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-N⁴-[(2-ethylhexyl) oxycarbonyl]-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2-phenylethoxy)carbonyl]cytidin,
N⁴-(Cyclohexyloxycarbonyl)-5'-desoxy-5-ethinylcytidin,
N⁴-[(Cyclohexylmethoxy)carbonyl]-5'-desoxy-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(neopentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-[(3,3-dimethylbutoxy)carbonyl]-5-ethinylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-propoxycarbonyl)- cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxy carbonyl)cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-vinylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-N⁴-(ethoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-vinyl cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-N⁴ -(n-propoxycarbonyl)-5-vinyl cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-N⁴-(n-butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-vinyl cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-vinyl cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-N⁴-(benzyloxycarbonyl)-5'-desoxy-5-vinyl cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-decyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2,6-dimethylcyclohexyloxy) carbonyl]cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(benzyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(1-isopropyl-2-methyl-propoxy) carbonyl]cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(3-methoxybenzyloxy)-carbonyl] cytidin.

Die neuen 5'-Desoxycytidinderivate der Formel (I) können mit den folgenden Methoden hergestellt werden. In den folgenden Verfahren A bis F bedeutet P¹ eine Hydroxyschutzgruppe, z. B. eine Acetyl-, Benzoyl-, Trimethylsilyl-, tert.-Butyldimethyl silylgruppe und der gleichen.

Verfahren A

Verbindungen der Formel (I), worin R¹, R² und R³ wie oben de finiert sind, können hergestellt werden, indem eine Verbin dung der Formel (II)

worin P¹ eine Hydroxyschutzgruppe ist und R³ die gleiche Be deutung wie oben definiert hat, mit einer Verbindung der all gemeinen Formel (III)

R⁴OCOX (III)

worin R⁴ wie oben definiert ist und X Chlor oder Brom ist, in Gegenwart eines Säureakzeptors umgesetzt wird und anschlie ßend, falls notwendig, die Schutzgruppen abgespalten werden.

Verfahren B

Verbindungen der Formel (I), worin R¹ und R² wie oben defi niert sind und R³ eine Ethinyl- oder Vinylgruppe ist, die mit Halogenatomen C₁-C₄-Alkyl-, Cycloalkyl-, Aralkylresten oder einem aromatischen Ring, der ein oder mehrere Heteroatome aufweisen kann, substituiert sein kann, können auch herge stellt werden, indem eine Verbindung der Formel (IV)

worin P¹ und R² wie oben definiert sind, mit einem Acetylen- oder Vinylderivat in Gegenwart eines Palladiumkatalysators umgesetzt wird und anschließend, falls notwendig, die Schutz gruppen abgespalten werden.

Verfahren C

Verbindungen der Formel (I), worin R¹ und R² wie oben defi niert sind und R³ eine Cyanogruppe ist, können hergestellt werden, indem eine Verbindung der Formel (IV)

worin P¹ und R² wie oben definiert sind, mit einem Alkalicya nid umgesetzt wird und, falls notwendig die Schutzgruppen ab gespalten werden.

Verfahren D

Verbindungen der Formel (I), worin R¹ und R³ wie oben defi niert sind, und R² ein Wasserstoffatom ist, können auch her gestellt werden, indem eine Verbindung der Formel (V)

worin P¹ und R³ wie oben definiert sind, mit Phosphorylchlo rid in Gegenwart eines Säureakzeptors umgesetzt wird, woran sich eine Behandlung mit Ammoniak anschließt und wobei, falls notwendig, anschließend die Schutzgruppen entfernt werden.

Verfahren E

Verbindungen der Formel (I), worin R¹, R² und R³ wie oben de finiert sind, können auch hergestellt werden, indem eine Ver bindung der Formel (VI)

worin R² und R³ wie oben definiert sind, mit einer Verbindung der Formel (VII)

worin P¹ wie oben definiert ist, in Gegenwart eines Lewis säurekatalysator gekuppelt wird und anschließend, falls not wendig, die Schutzgruppen entfernt werden.

Verfahren F

Verbindungen der Formel (I), worin R³ ein Vinylrest ist, der mit Halogenatomen, C₁-C₄-Alkyl-, Cycloalkyl-, Aralkylresten oder einem aromatischen Ring, der ein oder mehrere Hetero atome aufweisen kann, substituiert sein kann, und R¹ und R² wie oben definiert sind, können hergestellt werden durch katalytische Hydrierung einer Verbindung der Formel (VIII)

worin P¹ eine Hydroxyschutzgruppe ist, R³ ein Ethinylrest ist, der mit Halogenatomen, C₁-C₄-Alkyl-, Cycloalkyl-, Aral kylresten oder einem aromatischen Ring, der ein oder mehrere Heteroatome aufweisen kann, substituiert sein kann, und R² wie oben definiert ist, mit einem Lindlar-Katalysator, woran sich, falls notwendig, die Entfernung von Schutzgruppen anschließt.

Im folgenden wird ein Verfahren zur Herstellung neuer 5'-Des oxycytidinderivate der Formel (I) gemäß der vorliegenden Erfindung genauer erläutert.

Verfahren A

Spezifische Beispiele für Verbindungen der allgemeinen Formel (II) schließen ein:
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinylcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-ethinyl cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-prop-1-inylcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-prop-1- inylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5-but-1-inyl-5'-desoxycytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-but-1-inyl-5'-desoxy cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-pent-1-inylcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-pent-1- inylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-hex-1-inylcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-hex-1- inylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-iodcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-iodcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5-brom-5'-desoxycytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-brom-5'-desoxy cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5-(1-chlorvinyl)-5'-desoxycytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-(1-chlorvinyl)-5'- desoxycytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-vinylcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-vinyl cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-trifluormethylcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldiemthylsilyl)-5'-despxy-5-trifluor methylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5-(3-benzyloxybenzyl)-5'-desoxycytidin,
5-(3-Benzyloxybenzyl)-2',3'-bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)- 5'-desoxycytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5-cyano-5'-desoxycytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-cyano-5'-desoxy cytidin, und dergleichen.

Die Reaktion der Verbindung der obigen allgemeinen Formel (II) mit der Verbindung der obigen allgemeinen Formel (III) kann in einem Lösungsmittel, wie Pyridin, "bam"Dioxan, Tetrahydro furan, "bam"Acetonitril, Chloroform, Dichlormethan und der glei chen, in Gegenwart eines Säureakzeptors, wie "bam"Triethylamin, Pyridin, "bam"Picolin, "bam"4-(N,N-Dimethylamono)pyridin, Lutidin und der gleichen durchgeführt werden. Die Reaktion kann bei einer Temperatur zwischen 0 und 30°C durchgeführt werden. Die Schutzgruppen können, falls notwendig, nach der Reaktion ent fernt werden mit Verfahren, die dem Fachmann auf diesem Gebiet bekannt sind, z. B. durch basische oder saure Hydrolyse oder Behandlung mit Fluoridanionen.

Verfahren B

Spezifische Beispiele für Verbindungen der allgemeinen Formel (IV) schließen ein:
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-iod-N⁴- (methoxycarbonyl)cytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-N⁴-(ethoxy carbonyl)-5-iodcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-iod-N⁴- (propoxycarbonyl)cytidin,
N⁴-(n-Butoxycarbonyl)-2',3'-bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)- 5'-desoxy-5-iodcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-iod-N⁴-(n-penty loxy-carbonyl)-cytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-iod-N⁴- (isopentyloxy-carbonyl)-cytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-iod-N⁴-(n-hexy loxy-carbonyl)-cytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-N⁴ -[(2-ethyl butyl)oxycarbonyl]-5-iodcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-iod-N⁴-[(2- phenylethoxy)-carbonyl] cytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-N⁴-[(cyclohexyl methoxy)carbonyl]-5'-desoxy-5-iodcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-iod-N⁴- (neopentyloxy-carbonyl)cytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-N⁴-[(3, 3-di methylbutoxy)-carbonyl]-5-iodcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-iod-N⁴-(ethoxycarbonyl)-cyti din,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-iod-N⁴-(n-propoxy carbonyl)cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-(n-butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-iod-cyti din,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-iod-N⁴-(n-pentyloxy carbonyl)cytidin, und dergleichen.

Spezifische Beispiele für Acetylen- oder Vinylderivate, die für diese Kupplungsreaktion verwendet werden, sind Trimethyl silylacetylen, tert-Butylsilylacetylen, 1-Butin, 1-Pentin, 1- Heptin, 1-Hexin, 3-Methyl-1-butin, 3,3-Dimethyl-1-butin, Cyclohexylacetylen, Phenylacetylen, 3-Phenyl-1-propin, Tri-n- butyl(vinyl)stannan und dergleichen.

Die Kupplungsreaktionen einer Verbindung der Formel (IV) mit einem Acetylenderivat kann in Gegenwart eines Palladiumkata lysators, wie Bis-(triphenylphosphin)palladium(II)chlorid- Kupfer(I)iodid, Bis-(triphenylphosphin)palladium(II)acetat- Kupfer(I)iodid und der gleichen durchgeführt werden. Die Kupplungsreaktion einer Verbindung der Formel (IV) mit einem Vinylderivat kann in Gegenwart eines Palladiumkatalysators, wie Tris-(dibenzylidenaceton)dipalladium, Tetrakis-(tri phenylphosphin)palladium, Bis-(acetonitril)palladium(II) chlorid in Gegenwart von Tri-2-furylphosphin, Triphenylphos phin und dergleichen durchgeführt werden.

Diese Reaktion kann in einem Lösungsmittel, wie Chloroform, Dichlormethan, Tetrahydrofuran, N-Methylpyrrolidon, N,N-Dime thylformamid und der gleichen durchgeführt werden. Die Reak tion kann bei einer Temperatur zwischen 0 und 80°C, bevorzugt 10 und 60°C durchgeführt werden.

Verfahren C

Die Reaktion der Verbindung der obigen Formel (IV) mit einem Alkalicyanid wie Natriumcyanid, Kaliumcyanid etc., kann in einem Lösungsmittel, wie N,N-Dimethylformamid, Dimethylsulf oxid, Acetonitril und dergleichen durchgeführt werden. Die Reaktion kann bei einer Temperatur zwischen 0 und 100°C, bevorzugt 10 und 30°C, durchgeführt werden.

Verfahren D

Spezifische Beispiele der Verbindungen der allgemeinen Formel (V) schließt ein:
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-ethinyl uridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-prop-1- inyluridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-but-1-inyl-5'- desoxyuridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-pent-1- inyluridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-hex-1- inyluridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-ioduridin,
5-Brom-2',3'-bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxyuridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-(1-chlorvinyl)-5'- desoxyuridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-vinyl uridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-trifluor methyluridin,
5-(3-Benzyloxybenzyl)-2',3'-bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)- 5'-desoxyuridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-cyano-5'-desoxyuridin und dergleichen.

Die oben aufgeführten Ausgangsmaterialien können aus den bekannten 5-substituierten Uracilderivaten mit einer Methode ähnlich dem Verfahren E hergestellt werden, worin ein 5-sub stituiertes Uracilderivat an Stelle eines 5-substituierten Cytosinderivats verwendet wird.

Die Reaktion der Verbindung der obigen Formel (V) mit Phos phorylchlorid kann in einem Lösungsmittel, wie Pyridin, Di oxan, Tetrahydrofuran, Acetonitril, Chloroform, Dichlormethan und dergleichen in Gegenwart eines Säureakzeptors, wie Tri ethylamin, Pyridin, Picolin, 4-(N,N-Dimethylamino) pyridin, Lutidin, Imidazol, N-Methylimidazol, Triazol und dergleichen, bei einer Temperatur zwischen 0 und 30°C durchgeführt werden, woran sich eine Behandlung mit wäßrigem Ammoniak oder Ammo niakgas in einem Lösungsmittel, wie Methanol, Ethanol, Aceto nitril, N,N-Dimethylformamid und dergleichen anschließt bei einer Temperatur zwischen 0 und 30°C.

Verfahren E

Spezifische Beispiele für Verbindungen der allgemeinen Formel (VI) schließen 5-Ethinylcytosin, 5-Prop-1-inylcytosin, 5-But- 1-inyl-5'-desoxycytosin, 5-Pent-1-inylcytosin, 5-Hex-1-inyl cytosin, 5-Iodcytosin, 5-Bromcytosin, 5-(1-Chlorvinyl) cytosin, 5-Vinylcytosin, 5-Trifluormethylcytosin, 5-(3-Ben zyloxybenzyl)cytosin, 5-Cyanocytosin, 5-Ethinyl-N⁴-(n-pen tyloxycarbonyl)cytosin und dergleichen ein.

Spezifische Beispiele für Verbindungen der allgemeinen Formel (VII) schließen die bekannten Verbindungen 5-Desoxy-1,2,3-O- triacetyl-D-ribofuranosid, 5-Desoxy-1, 2,3-O-tribenzoyl-D- ribofuranosid und dergleichen ein.

Eine Verbindung der Formel (VI) kann zuerst in das Trimethyl silylderivat mit einem Silylierungsreagenz, wie Hexamethyl disilazan umgewandelt werden, woran sich die Kupplungsreak tion mit einer Verbindung der Formel (VII) in Gegenwart eines Lewis-Säurekatalysators, wie Zinn(IV)chlorid, Titan(IV)-chlo rid und dergleichen anschließt. Diese Kupplungsreaktion erfolgt in einem Lösungsmittel, wie Acetonitril, Dichlor methan, Chloroform, 1,2-Dichlorethan, Nitromethan, Toluol und dergleichen bei einer Temperatur zwischen 0 und 30°C, bevor zugt 0 und 10°C.

Verfahren F

Spezifische Beispiele für Verbindungen der allgemeinen Formel (VIII) schließen ein:
5'-Desoxy-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(ethoxycarbonyl)-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-propoxycarbonyl)cytidin,
N⁴-(n-Butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
N4-(Benzyloxycarbonyl)-5'-desoxy-5-ethinylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinylcytidin
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinyl-N⁴-(ethoxycarbonyl) cytidin
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-propoxycarbonyl) cytidin
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxy carbonyl)cytidin und dergleichen.

Die katalytische Hydrierung der Ethinylgruppe der Verbindung der Formel (VIII) kann durchgeführt werden unter Verwendung eines Lindlar-Katalysators mit dem Fachmann auf diesem Gebiet bekannten Methoden [siehe Synthetic Method, 1952, Band 7, S. 38 (Interscience Publishers, Inc., New York)].

Die neuen 5'-Desoxy-cytidinderivate der vorliegenden Erfin dung können als Antitumormittel zusammen mit bekannten phy siologisch annehmbaren pharmazeutischen Trägern verwendet werden.

Die vorliegende Erfindung liefert auch eine pharmazeutische Zusammensetzung, die ein 5'-Desoxycytidinderivat der allge meinen Formel (I) und 5-Fluoruracil (5-FU) oder ein Derivat davon enthält. Bei dieser Zusammensetzung potenziert das 5'-Desoxycytidinderivat die Antitumorwirkung von 5-Fluoruracil oder einem Derivat, indem eine wesentlich höhere Menge an 5-FU selektiv dem Tumorgewebe zugeführt wird, ohne eine signi fikante Erhöhung der 5-FU-Konzentration im Plasma.

Für die Kombination eines 5'-Desoxycytidinderivats der allge meinen Formel (I) mit 5-FU oder einem Derivat davon zur Behandlung von Krebs mit verbesserter Wirksamkeit und einem verbesserten Sicherheitsprofil wird das 5-FU-Derivat bevor zugt aus der Gruppe ausgewählt, die aus den folgenden Verbin dungen besteht:
5-Fluor-1-(2-tetrahydrofuryl)uracil,
1-(n-Hexyloxycarbonyl)-5-fluoruracil,
5'-Desoxy-5-fluoruridin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(n-propoxycarbonyl)cytidin,
N⁴-(n-Butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-fluorcytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(isopentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(n-hexloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-[(2-ethylbutyl)oxycarbonyl]-5-fluorcytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-[(2-phenylethoxy)carbonyl]cytidin,
N⁴-[(Cyclohexylmethoxy)carbonyl]-5'-desoxy-5-fluorcytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(neopentyloxycarbonyl)-cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-[(3,3-dimethylbutoxy)carbonyl]-5-fluorcytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(3,5-dimethylbenzoyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(3,5-dichlorbenzoyl)cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-fluor-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl) cytidin und dergleichen.

Eine Verbindung der Formel (I) kann entweder allein oder gleichzeitig mit 5-FU und einem Derivat davon verabreicht werden.

Somit kann die pharmazeutische Zusammensetzung der vorliegen den Erfindung erhalten werden, indem eine Verbindung der For mel (I) und 5-FU oder ein Derivat davon zu einem einzigen Präparat formuliert werden oder kann in Formel von zwei getrennten einzelnen Präparaten bereitgestellt werden.

Eine pharmazeutische Zusammensetzung der Formel (I) kann vor oder gleichzeitig mit der Verabreichung von 5-FU oder einem Derivat davon verabreicht werden, bevorzugt innerhalb von 3 Stunden vor oder gleichzeitig mit der Verabreichung von 5-FU oder einem Derivat davon.

Bei der pharmazeutisch Zusammensetzung der vorliegenden Erfindung, die 5-FU oder ein Derivat davon, und ein 5'-Des oxycytidinderivat der allgemeinen Formel (I) enthält, ist das geeignete molare Verhältnis der beiden Komponenten etwa 0,001 bis 10 mol, bevorzugt 0,002 bis 0,5 mol einer Verbindung der Formel (I) pro mol 5-FU oder seinem Derivat.

Die vorliegende Erfindung liefert auch einen Kit, der eine pharmazeutische Zusammensetzung (Komponente A), die eine Ver bindung der Formel (I) enthält, und eine pharmazeutische Zusammensetzung (Komponente B), die 5-FU oder ein Derivat davon enthält, umfaßt.

Somit betrifft die vorliegende Erfindung auch pharmazeutische Zusammensetzungen einer Verbindung der Formel (I) und gegebe nenfalls 5-FU oder einem Derivat davon und einen Kit zur Behandlung von Kolorektalkrebs, Brustkrebs, Magenkrebs, Lun genkrebs, Gebärmutterhalskrebs, Blasenkrebs und anderen malignen Erkrankungen und dergleichen.

Die pharmazeutischen Zusammensetzungen und die Komponenten A und B des erfindungsgemäßen Kits können in jeder Form verab reicht werden, z. B. als Tabletten, Pillen, Zäpfchen, Kapseln, Körnchen, Pulver oder Emulsionen etc.

Pharmazeutisch annehmbare Träger und Hilfsstoffe, die zur Formulierung der pharmazeutischen Zusammensetzung der vorlie genden Erfindung geeignet sind, sind die, die im allgemeinen verwendet werden. Ein pharmazeutisch annehmbares Material kann ein organisches oder anorganisches inertes Trägermate rial sein, das für enterale, perkutane oder parenterale Ver abreichung geeignet ist, z. B. Wasser, Gelatine, Gummi arabi cum, Lactose, Stärke, Magnesiumstearat, Talkum, pflanzliche Öle, Polyalkylenglycole und Vaseline. Die erfindungsgemäß bereitgestellte pharmazeutische Zusammensetzung kann oral verabreicht werden, z. B. in Form von Tabletten, Kapseln, Pillen, Pulvern, Körnchen, Lösungen, Sirupen, Suspensionen oder Elixieren. Die Verabreichung kann auch parenteral durch geführt werden, z. B. in Form von sterilen Lösungen, Suspen sionen oder Emulsionen; oder lokal, z. B. in Form von Lösun gen, Suspensionen, Salben, Pulvern oder Aerosolen. Die phar mazeutische Zusammensetzung kann sterilisiert werden und/oder weitere Hilfsstoffe enthalten, wie Konservierungsmittel, Sta bilisierungsmittel, Abbindemittel, Emulsionsmittel, das Aroma verbessernde Mittel, Salze zur Einstellung des osmotischen Drucks oder Substanzen, die als Puffer dienen.

Die pharmazeutische Zusammensetzung kann in üblicher Weise hergestellt werden.

Dosierungsbereiche für die pharmazeutische Zusammensetzung der vorliegenden Erfindung hängen ab vom Weg der Verabrei chung, dem Alter, dem Gewicht und dem Zustand des Patienten und der jeweils zu behandelnden Krankheit. Im Fall einer oralen, rektalen oder parenteralen Verabreichung für Erwach sene liegt eine ungefähre tägliche Dosierung im Bereich von etwa 1 mg bis etwa 2000 mg einer Verbindung der Formel (I) und etwa 10 mg bis etwa 4000 mg 5-FU oder seinem Derivat, abhängig von der Art des verwendeten 5-FU-Derivats. Eine orale Verabreichung ist ein bevorzugter Verabreichungsweg für die erfindungsgemäße pharmazeutische Zusammensetzung.

Die tumorselektive Zufuhr von 5-FU durch die Tumor-DPD-selek tive Hemmung durch eine Verbindung der Formel (I) ergibt sich aus dem unten beschriebenen Test.

1. Tumor-DPD-selektive Hemmung durch die Verbindung A von Beispiel 6

Die Aktivität der Verbindung A von Beispiel 6, die DPD-Akti vität zu hemmen, wurde mit der des bekannten DPD-Inhibitors 5-Ethinyluracil (5-EU) bei nackten BALB/c-Mäusen, die das Krebsxenotransplantat PC-3 aus menschlicher Prostata trugen, verglichen. Leber- und Tumorgewebe wurden aus jeder Gruppe von 3 Mäusen 2 und 8 Stunden nach der Verabreichung der Ver bindung A (0,5 mmol/kg) und 5-EU (0,05 µmol/kg) entnommen. Die DPD-Aktivität in diesen Geweben wurde dann gemessen, wie an anderer Stelle beschrieben (Naguib et al., Cancer Research 45, 5405-5412, 1985). 5-EU hemmte die DPD-Aktivität sowohl in Leber- als auch Tumorgewebe, wohingegen die Verbindung A die Aktivität nur in Tumorgewebe stark hemmte (Tabelle 1). Diese Ergebnisse deuten darauf hin, daß die Verbindung A von Bei spiel 6 die DPD-Aktivität selektiv in Tumorgewebe hemmt.

DPD-Aktivitäten (pmol/mg Protein/min)

2. Selektiver Anstieg der 5-FU-Pegel in Tumoren durch Verbin dung A von Beispiel 6 bei Mäusen, die mit Fluorpyrimidinen behandelt wurden

Der in Tabelle 2 dargestellte Versuch zeigt, daß Verbindung A von Beispiel 6 den Flächeninhalt (AUC) für 5-FU selektiv in Tumoren bei Mäusen, die mit Fluorpyrimidinen behandelt wur den, erhöht. Bei dieser Untersuchung erhielten nackte BALB/c-Mäuse, die das Krebsxenotransplantat MKN28 von menschlichem Magenkrebs trugen, 5-FU, Doxifluridin [5'-Desoxy-5-fluoruri din] und Capecitabin [5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(n-pentyloxycar bonyl)cytidin] in Kombination entweder mit der Verbindung A oder mit 5-EU. Dann wurden die 5-FU-Pegel im Plasma und Tumorgewebe 0,25, 0,5, 2, 4 und 7 Stunden nach jeder Verab reichung von Fluorpyrimidin (n = 3 Mäuse) gemessen und die AUC für 5-FU wurde berechnet. Der bekannte DPD-Inhibitor 5-EU erhöht die AUC für 5-FU sowohl im Plasma als auch im Tumorge webe bei Mäusen, die entweder mit 5-FU, Capecitabin oder Doxifluridin behandelt wurden, sehr stark. Da der Anstieg des 5-FU-Pegels in Plasma zu einer systemischen Toxizität von 5-FU führt, sollte 5-EU sowohl die Wirksamkeit als auch die Toxizität der Fluorpyrimidine erhöhen.

Im Gegensatz dazu erhöht die Verbindung A die AUC für 5-FU nur in Tumorgewebe sehr stark, wahrscheinlich wegen der tumor-selektiven Hemmung der DPD-Aktivität der Verbindung A, die 5-FU katabolisiert. Die Verbindung A von Beispiel 6 ver bessert daher die Wirksamkeit von Fluorpyrimidinen bei gleichzeitig geringem Anstieg ihrer Toxizität.

5-FU-AUC in Plasma und Tumoren von Mäusen, die mit Fluor pyrimidinen behandelt wurden

3. Verbesserung der Antitumoraktivität von Capecitabin durch Verbindung A von Beispiel 6

Die Verbindung A von Beispiel 6 wurde bezüglich ihrer Aktivi tät, die Wirksamkeit von Capecitabin bei nackten BALB/c-Mäu sen, die das Krebsxenotransplantat PC-3 aus menschlicher Pro stata tragen, zu verbessern. Die Verbindung A und Capecitabin wurden gleichzeitig oder aufeinanderfolgend an 5 aufeinander folgenden Tagen pro Woche 3 Wochen lang beginnend am Tag 53 nach der Einimpfung des Tumors, sobald der Tumor tastbar wurde, oral gegeben. Am Tag 75 nahm das Tumorvolumen zu und der Prozentanteil der Hemmung des Tumorwachstums wurde berechnet. Wie Tabelle 3 zeigt, hemmte Capecitabin das Tumor wachstum in einem größeren Ausmaß, wenn Verbindung A entweder gleichzeitig oder nachfolgend in Kombination gegeben wurde. Da Verbindung A selbst nicht cytotoxisch ist (Daten nicht gezeigt), verbessert sich die Wirksamkeit von Capecitabin durch Hemmung der DPD-Aktivität.

Verbesserung der Capecitabinwirksamkeit durch Verbindung A von Beispiel 6

Die folgenden Beispiele sollen die vorliegende Erfindung genauer erläutern, aber nicht ihren Schutzbereich in irgend einer Weise beschränken.

Referenzbeispiel 1 a) Herstellung von 2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinyl uridin

5-Ethinyluracil (12 g, 88,2 mmol) wurde in einer Lösung von Ammoniumsulfat (570 mg, 4,3 mmol) in Hexamethyldisilazan (240 ml) suspendiert. Die Suspension wurde 6 Stunden lang am Rück fluß erhitzt. Nach Einengen der Reaktionsmischung bei vermin dertem Druck wurde eine Lösung von 5-Desoxy-1,2,3-tri-O-ace tyl-D-ribofuranosid (27,5 g, 105,8 mmol) in Acetonitril (300 ml) zu dem Rückstand zugegeben. Dann wurde eine Lösung von wasserfreiem Zinn(IV)tetrachlorid (27,6 g, 105,8 mmol) in Nitromethan (60 ml) tropfenweise zu der Mischung zugegeben, wobei die Temperatur unter 0°C gehalten wurde. Nach weiterem 4-stündigem Rühren der Mischung bei 0°C wurde Natriumbicarbo nat zugegeben und anschließend wurde Wasser tropfenweise zugegeben. Nachdem die Mischung 2 Stunden lang gerührt worden war, wurde die Reaktionsmischung filtriert, um unlösliches Material zu entfernen, das mit Ethylacetat gewaschen wurde. Das Filtrat und die Waschlösungen wurden vereinigt und über MgSO₄ getrocknet und filtriert. Das Filtrat wurde bei vermin dertem Druck eingedampft.

Die Reinigung des Rückstandes mit Silicagelchromatographie (unter Verwendung von n-Hexan : Ethylacetat = 1 : 2 als Elu tionsmittel) lieferte 2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinyl uridin (13,7 g, 48% Ausbeute).
MALDI-MS: (m/z) 359 [M+Na]⁺, 375 [M+K]⁺
¹H-NMR: (270 MHz; CDCl₃): δ 1,47 (3H, d, J = 6,6), 2,10 (3H, s), 2,21 (3H, s), 3,23 (1H, s), 4,19-4,28 (1H, m), 5,01-5,05 (1H, m), 5,30-5,34 (1H, m), 5,90 (1H, d, J = 4,95), 7,57 (1H, s), 8,34 (1H, br.s).

b) Herstellung von 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'- desoxy- 5-ethinyluridin

Zu einer Lösung von 2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinyl uridin (13,7 g, 40,7 mmol), gelöst in Methanol (100 ml), wurde tropfenweise eine Lösung von Natriumhydroxid (3,3 g, 81,4 mmol) in Wasser (10 ml) unter Rühren bei 0°C zugegeben. Nach weiterem 30minütigem Rühren bei 0°C wurde der pH der Reaktionsmischung mit wäßriger 1 n Salzsäure auf 7 einge stellt. Dann wurde die Mischung bei vermindertem Druck einge engt.

Der Rückstand wurde in DMF, (250 ml) gelöst und Imidazol (41,6 g, 610 mM) und tert-Butyldimethylchlorsilan (30,7 g, 203 mmol) wurden zu der Lösung unter Rühren zugegeben. Die Mischung wurde weitere 23 Stunden lang gerührt. Die Reak tionsmischung wurde zwischen Ethylacetat und Wasser aufge trennt. Die wäßrige Phase wurde mit Ethylacetat rückextra hiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Koch salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und bei vermindertem Druck eingeengt. Die Reinigung des Rückstan des mit Silicagelchromatographie (unter Verwendung von n-Hexan : Ethylacetat = 3 : 1 als Elutionsmittel) lieferte 2',3'- Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-ethinyluridin (14,9 g, 76% Ausbeute).
FAB-MS: (m/z) 481 [M+H]⁺
¹H-NMR: (270 MHz, CDCl₃): δ 0,10-0,13 (12H, m), 0,91 (18H, m), 1,40 (3H, d, J = 6,6), 3,21 (1H, s), 3,58 (1H, dd, J = 4,29, 6,6), 4,08-4,17 (2H, m), 5,62 (1H, d, J = 2,64), 7,68 (1H, s), 8,24 (1H, br.s).

Die folgenden Verbindungen wurden in gleicher Weise, wie oben beschrieben, hergestellt, unter Verwendung der entsprechenden bekannten 5-substituierten Uracilderivate:

2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-ioduridin

FAB-MS: (m/z) 583 [M+H]⁺, 605 [M+Na]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ -0,09 (3H, s), -0,03 (3H, s), 0,00 (3H, s), 0,02 (3H, s), 0,75 (9H, s), 0,81 (9H, s), 1,24 (3H, d, J = 6,6), 3,75 (1H, dd, J = 4,6, 4,0), 3,86 (1H, m), 4,36 (1H, dd, J = 5,3, 5,0), 5,59 (1H, d, J = 5,6), 7,91 (1H, s), 11,69 (1H, br.s)

2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-trifluormethyluridin

FAB-MS: (m/z) 525 [M+H]⁺
¹

H-NMR: (400 MHz, CDCl₃

): δ 0,00 (6H, s), 0,02 (3H, s), 0,06 (3H, s), 0,83 (9H, s), 0,83 (9H, s), 1,32 (3H, d, J = 5,9), 3,47 (1H, m), 4,05 (1H, m), 4,16 (1H, m), 5,54 (1H, d, J = 2,2), 7,84 (1H, s), 8,43 (1H, br.s)

2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-(3-benzyloxybenzyl)5'-desoxy-5-uridin

FAB-MS: (m/z) 653 (M+H)⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, CDCl₃

): δ -0,09-0,01 (12H, m), 0,77-0,82 (18H, m), 0,90 (3H, d, J = 6,3), 3,27 (1H, m) 3,31 (1H, d, J = 16,5), 3,61 (1H, d, J = 16,5), 3,86 (1H, m), 3,95 (1H, m) 4,94 (2H, s), 5,50 (1H, d, J = 2,0), 6,68-6,78 (4H, m), 7,12- 7,34 (6H, m) 8,54 (1H, br.s).

Die folgenden Verbindungen können auf gleiche Weise, wie oben beschrieben, hergestellt werden, unter Verwendung der ent sprechenden bekannten 5-substituierten Uracilderivate:
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-prop-1- inyluridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-but-1-inyl-5'- desoxyuridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-pent-1- inyluridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-hex-1- inyluridin,
5-Brom-2',3'-bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxyuridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-(1-chlorvinyl)-5'- desoxyuridin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-vinyl uridin,

Beispiel 1 Herstellung von 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy- 5-ethinylcytidin

Zu einer Lösung von Dimethylaminopyridin (19,0 g, 155,5 mmol) in Acetonitril (120 ml) und Pyridin (12,6 ml, 155,5 mmol) wurde Phosphorylchlorid (14,4 g, 93,8 mM) tropfenweise in einem Eisbad unter Ar-Atmophäre zugegeben. Nach 1-stündigem Rühren der Mischung bei Raumtemperatur wurde eine Lösung von 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-ethinyl uridin (14,9 g, 31,1 mmol) in Acetonitril (80 ml) bei 5°C unter Kühlen in einem Eisbad zugegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur 2 Stunden lang gerührt. Dann wurde eine 25%-ige wäßrige Ammoniaklösung (10 ml) in einem Anteil zu der Reaktionsmischung zugegeben, wobei die Temperatur unter 10°C gehalten wurde. Ein zweiter Anteil an 25%-iger wäßrige Ammo niaklösung (65 ml) wurde zu der Reaktionsmischung zugegeben, wobei dei Temperatur unter 10°C gehalten wurde. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur 45 Minuten lang gerührt. Dann wurde die Reaktionsmischung mit Wasser (200 ml) bei Raumtemperatur verdünnt und dann 3 mal mit Ethylacetat extrahiert. Die ver einigten organischen Phasen wurden aufeinanderfolgend mit wäßriger 1 n Salzsäurelösung, wäßrigem gesättigtem Natriumbi carbonat und Kochsalzlösung gewaschen. Die organische Phase wurde über MgSO₄ getrocknet, filtriert und bei vermindertem Druck eingeengt. Die Reinigung des Rückstandes mit Silica gelchromatographie (unter Verwendung von n-Hexan : Ethyl acetat = 2 : 1 als Elutionsmittel) lieferte 2',3'-Bis-O-(tert- butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-ethinylcytidin (14,8 g, 99% Ausbeute).
MALDI-MS: (m/z) 502 [M+Na]⁺, 518 [M+K]⁺
¹H-NMR: (400 MHz, CDCl₃): δ 0,05 (3H, s), 0,06 (3H, s), 0,12 (3H, s), 0,24 (3H, s), 0,89 (9H, s), 0,92 (9H, s), 1,41 (3H, d, J = 6,35), 3,36 (1H, s), 3,46 (1H, dd, J = 3,91, 7,81), 4,19-4,26 (2H, m), 5,57 (1H, s), 5,79 (1H, br.s), 7,57 (1H, br.s), 7,80 (1H, s).

Die folgenden Verbindungen wurden in analoger Weise, wie in Beispiel 1, erhalten.

Beispiel 2 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-iodcytidin

FAB-MS: (m/z) 582 [M+H]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,00 (3H, s), 0,02 (3H, s), 0,06 (3H, s), 0,08 (3H, s), 0,82 (9H, s), 0,88 (9H, s), 1,30 (3H, d, J = 6,6), 3,78 (1H, dd, J = 4,6, 4,3), 3,93 (1H, m), 4,33 (1H, dd, J = 4,9, 4,6), 5,67 (1H, d, J = 5,0), 6,67 (1H, br.s), 7,87 (2H, br.s).

Beispiel 3 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-trifluormethylcytidin

FAB-MS: (m/z) 524 [M+H]⁺
¹

H-NMR: (400 MHz, CDCl₃

): δ 0,00 (6H, s), 0,08 (3H, s), 0,19 (3H, s), 0,84 (9H, s), 0,87 (9H, s), 1,35 (3H, d, J = 6,6), 3,38 (1H, m), 4,15 (1H, m), 4,21 (1H, m) 5,51 (1H, s), 7,97 (1H, s).

Beispiel 4 5-(3-Benzyloxybenzyl)-2',3'-bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxycytidin

FAB-MS: (m/z) 652 [M+H]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, CDCl₃

): δ -0,01 (3H, s), 0,00 (3H, s), 0,09 (3H, s), 0,22 (3H, s), 0,86 (9H, s), 0,90 (9H, s), 1,10 (3H, d, J = 6,6), 3,37 (1H, m), 3,57 (2H, s), 4,08-4,18(2H, m), 5,03 (2H, s), 5,59 (1H, s), 6,75-6,90 (3H, m), 7,11 (1H, s), 7,26 (1H, m), 731-7,44 (5H, m)

Beispiel 5 2',3'-bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-cyano-5'-desoxycytidin

FAB-MS: (m/z) 481 [M+H]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ -0,04 (3H, s), 0,00 (3H, s), 0,02 (3H, s), 0,76 (9H, s), 0,82 (9H, s), 1,21 (3H, d, J = 6,3), 3,81 (1H, m), 4,05 (1H, t, J = 5,0), 4,71 (1H, t, J = 5,0), 5,65, (1H, d, J = 5,3), 6,41 (1H, s), 7,69 (1H, br.s), 7,85 (1H, br.s).

Die folgenden Verbindungen können analog zu Beispiel 5 erhal ten werden.
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-prop-1- inylcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-but-1-inyl-5'-desoxy cytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-pent-1- inylcytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-hex-1- inylcytidin,
5-Brom-2',3'-bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy cytidin,
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-(1-chlorvinyl)-5'- desoxycytidin
2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-vinyl cytidin

Beispiel 6 Herstellung von 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxy carbonyl)cytidin

a) 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-ethinyl cytidin (45 mg, 0,09 mmol) wurde in Dichlormethan (1 ml) und Pyridin (33 µl, 0, 42 mM) gelöst. Zu der Mischung wurde n-Pen tylchlorformiat (42 mg, 0,28 mmol) tropfenweise in einem Eis bad und unter Ar zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur 2 Stunden lang gerührt. Wasser wurde zugegeben und die Reaktionsmischung 30 Minuten lang gerührt. Die Reak tionsmischung wurde zwischen Dichlormethan und Wasser aufge trennt. Die wäßrige Phase wurde mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Na₂SO₄ getrocknet und filtriert. Das Filtrat wurde bei vermindertem Druck eingedampft.
Die Reinigung des Rückstandes mit Silicagelchromatographie (unter Verwendung von n-Hexan:Ethylacetat = 4 : 1 als Elutions mittel) lieferte 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'- desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin (40 mg, 72% Ausbeute).
FAB-MS: (m/z) 594 [M+H]⁺
¹H-NMR: (270 MHz, CDCl₃): δ 0,12-0,27 (12H, m), 0,90-0,92 (21H, m), 1,26-1,42 (7H, m), 1,64-1,74 (2H, m), 3,25-3,51 (2H, m), 4,15-4,23 (4H, m), 5,55-5,60 (1H, m), 7,62 (0,5H, br.s), 7,73 (0,5H, br.s), 8,00 (0,5H, br.s), 12,3 (0,5H, br.s).
b) Zu einer Lösung von 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)- 5'-desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin (19 mg, 0,03 mmol) in Tetrahydrofuran (500 µl) wurde tropfenweise Tetrabutylammoiumfluorid (93 µl, 0,09 mmol) [1,0 M Tetra hydrofuranlösung) bei Raumtemperatur unter Ar-Atmosphäre zu gegeben. Nachdem die Mischung bei Raumtemperatur 2 Stunden lang gerührt worden war, wurde die Reaktionsmischung bei ver mindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wurde zwischen Dichlormethan und Wasser aufgetrennt. Die wäßrige Phase wurde mit Dichlormethan rückextrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und bei ver mindertem Druck eingedampft. Die Reinigung des Rückstandes mit Silicagelchromatographie (unter Verwendung von Dichlor methan:Methanol = 20 : 1 als Elutionsmittel) lieferte 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin (Verbindung A) (9 mg, 81% Ausbeute).
FAB-MS: (m/z) 366[M+H]⁺
¹H-NMR: (400 MHz, DMSO-d₆): δ 0,88 (3H, t, J = 6,84), 1,30- 1,32 (7H, m), 1,59-1,63 (2H, m), 3,67-3,71 (1H, m),3,90-4,46 (5H, m) 5,07 (1H, m), 5,42 (1H, m), 5,66 (1H, m), 7,89 (0,5H, br.s), 8,14 (0,5H, br.s), 9,53 (0,5H, br.s), 11,7 (0,5H, br.s).

Die folgenden Verbindungen (Beispiele 7 bis 35) wurden analog zu Beispiel 6 erhalten.

Beispiel 7 5'-Desoxy-5-ethyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 370 [M+H]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, CDCl₃

): δ 0,91 (3H, t, J = 6,93), 1,16 (3H, t, J = 7,5), 1,36 (4H, m), 1,41 (3H, d, J = 6,6), 1,72 (2H, m), 2,47 (2H, q, J = 7,5), 3,22 (1H, br.s), 3,93 (1H, m), 4,16 (2H, t, J = 6,93), 4,28 (2H, m), 4,49 (1H, br.s), 5,66 (1H, d, J = 3,63), 7,37 (1H, br.s), 12,46 (1H, br.s).

Beispiel 9 5'-Desoxy-5-iod-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 468 [M+H]⁺, 490[M+Na]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 1,36 (3H, t, J = 7,0), 1,76-1,78 (7H, m), 2,09 (2H, m), 4,18 (1H, m), 4,36 (1H, m), 4,54 (2H, t, J = 5,9), 5,54 (1H, br.d, J = 5,0), 5,84 (1H, br.d, J = 5,0), 6,09 (1H, d, J = 4,3), 8,47 (1H, s), 12,24 (1H, br.s).

Beispiel 9 5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-trifluormethylcytidin

FAB-MS: (m/z) 410 [M+H]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, CDCl₃

): δ 0,88-0,94 (3H, m) 1,32-1,39 (4H, m), 1,42 (3H, d, J = 6,6), 1,68-1,75 (2H, m), 3,09-3,30 (1H, m), 3,92 (1H, m), 4,15-4,27 (5H, m), 5,67 (1H, -d, J = 3,3), 8,05-8,31 (1H, m), 12,6 (1H, br.s).

Beispiel 10 5-(3-Benzyloxybenzyl)-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 538 [M+H]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, CDCl₃

): δ 0,90 (3H, t, J = 6,9), 1,04 (3H, d, J = 6,6), 1,26-1,39 (4H, m), 1,72 (2H, m), 3,16 (1H, br.s), 3,67 (1H, d, J = 16,5), 3,71 (1H, m), 3,75 (1H, d, J = 16,5), 4,10 (2H, m) 4,16 (2H, t, J = 6,9), 4,40 (1H, br.s), 5,04 (2H, s), 5,62 (1H, d, J = 3,3), 6,79 (1H, d, J = 7,6), 6,84-6,89 (2H, m), 6,97 (1H, br.s), 7,22-7,43 (6H, m), 12,41 (1H, br.s).

Beispiel 11 5-Cyano-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 367 [M+H]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,88 (3H, t, J = 6,9), 1,30 (4H, s), 1,31 (3H, d, J = 6,3), 1,62 (2H, m), 3,81 (1H, Quin., J = 6,3), 3,91 (1H, Quin., J = 6,3), 4,13 (2H, t, J = 6,6), 4,39 (1H, m), 5,09 (1H, d, J = 6,3), 5,31 (1H, d, J = 5,3), 5,83 (1H, d, J = 4,0), 7,57 (1H, s), 11,23 (1H, br.s).

Beispiel 12 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-propoxycarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 338 [M+H]⁺, 360 [M+Na]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,91 (3H, t, J = 7,3), 1,31 (3H, d, J = 6,3), 1,63 (2H, Sextett, J = 7,3), 3,69 (1H, dt, J = 5,9, 5,3), 3,91 (1H, Quin., J = 5,9), 4,03 (2H, t, J = 6,6), 4,13 (1H, dt, J = 5,0, 4,3), 4,35 (1H, br.s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,41 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 8,01 (1H, br.s).

Beispiel 13 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(isopropoxycarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 338 [M+H)+,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 1,24 (6H, d, J = 5,9), 1,31 (3H, d, J = 6, 6), 3,68 (1H, dt, J = 5,9, 5,6), 3,90 (1H, Quin., J = 5,9), 4,12 (1H, m), 4,30 (1H, s), 4,85 (1H, m), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,40 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 3,6), 8,02 (1H, br.s).

Beispiel 14 N⁴-(Isobutoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-ethinylcytidin

FAB-MS: (m/z) 352 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,91 (6H, d, J = 6,6), 1,30 (3H, d, J = 6,3), 1,91 (2H, m), 3,68 (1H, dt, J = 5,9, 5,3), 3,84 (2H, d, J = 6,6), 3,89 (1H, Quin., 6,3), 4,11 (1H, m), 4,30 (1H, s), 5,03 (1H, d, J = 5,9), 5,38 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 7,96 (1H, s).

Beispiel 15 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2-methylpentyloxy)carbonyl]-cytidin

FAB-MS: (m/z) 380 [M+H]⁺, 402 [M+Na]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,85-0,93 (7H, m), 1,31 (3H, d, J = 6,3), 1,28-1,37 (3H, m), 1,77 (1H, m), 3,69 (1H, dt, J = 5,9, 5,6), 3,88 (2H, m), 3,92 (1H, m), 4,13 (1H, dt, J = 4,9, 4,6), 4,37 (1H, br.s), 5,06 (1H, d, J = 5,9), 5,41 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 8,02 (1H, br.s).

Beispiel 16 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(3-methylpentyloxy)carbonyl]-cytidin

FAB-MS: (m/z) 380 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, CDCl₃

): δ 0,86-0,98 (6H, m), 1,15-1,80 (8H, m), 3,25-3,26 (1H, m), 3,53 (1H, brs), 3,90-3,95 (1H, m), 4,25-4,37 (4H, m), 5,33 (1H, brs), 5,71 (1H, d, J = 4,28), 7,69 (1H, br.s), 8,13 (1H, br.s).

Beispiel 17 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2-proylpentyloxy)carbonyl]-cytidin

MALDI-MS: (m/z) 408,5 [M+H]⁺, 430,5 [M+Na]⁺, 446 [M+K]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,87 (6H, br.m), 1,29 (11H, br.m), 1,66 (1H, br.m), 3,69 (1H, br.m), 3,94-4,5 (5H, br.m), 5,06 (1H, br.m), 5,42 (1H, br.m), 5,66 (1H, br.m), 7,90 (0,5H, br.s), 8,14 (0,5H, br.s), 9,53 (0,5H, br.s).

Beispiel 18 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-octyloxycarbonyl]cytidin

FAB-MS: (m/z) 408 [M+H]⁺, 430 [M+Na]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,86 (3H, t, J = 5,0), 1,26 (10H, m), 1,31 (1H, d, J = 6,0), 1,60 (2H, m), 3,69 (1H, dt, J = 5,9, 5,6), 3,90 (1H, Quin., J = 6,3), 4,06 (2H, t, J = 6,3), 4,13 (1H, m), 4,35 (1H, br.s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,41 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 8,02 (1H, br.s).

Beispiel 19 5'-Desoxy-N⁴-[(2-ethylhexyl)oxycarbonyl]-5-ethinyl-cytidin

FAB-MS: (m/z) 408 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, CDCl₃

): δ 0,88-0,94 (6H, m), 1,30-1,41 (12H, m), 3,25 (1H, d, J = 3,63), 3,53 (1H, m), 3,92-3,94 (1H, m), 4,15-4,37 (4H, m), 5,32 (1H, m), 5,70 (1H, dt, J = 4,61), 7,86 (1H, br.s), 8,14 (1H, br.s).

Beispiel 20 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2-phenylethoxy)carbonyl]-cytidin

FAB-MS: (m/z) 400 [M+H]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 1,31 (3H, d, t, J = 6,3), 2,94 (2H, t, J = 6,9), 3, 69 (1H, dt, J = 5,9, 5, 6), 3,90 (1H, Quin., J = 6,3), 4,14 (1H, m), 4,28 (2H, t, J = 6,9), 4,31 (1H, br.s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,41 (1H, d, J = 4,9), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 7,27 (5H, m), 8,01 (1H, br.s).

Beispiel 21 N4-(Cyclohexyloxycarbonyl)-5'-desoxy-5-ethinylcytidin

FAB-MS: (m/z) 378 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 1,06-1,48 (9H, m), 1,69 (2H, m), 1,86 (2H, m), 3,65-3,72 (1H, m), 3,88-3,93 Q1H, m), 4,13-4,61 (3H, m), 5,06 (1H, d, J = 6,27), 5,42 (1H, d, J = 4,95), 5,66 (1H, d, J = 3,63), 7,9-8,1 (1H, m), 9,4 (0,5H, br.s), 11,8 (0,5H, br.s).

Beispiel 22 N⁴-[(Cyclohexylmethoxy)carbonyl]-5'-desoxy-5-ethinylcytidin

FAB-MS: (m/z) 392 [M+H]⁺, 414 [M+Na]⁺
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,86-1,25 (5H, m), 1,31 (3H, d, J = 6,3), 1,61-1,72 (6H, m), 3,69 (1H, dt, J = 5,9, 5,6), 3,89 (2H, d, J = 6,3), 3,90 (1H, m), 4,14 (1H, m), 4,36 (1H, br.s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,41 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 8,02 (1H, br.s).

Beispiel 23 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(neopentyloxycarbonyl)-cytidin

FAB-MS: (m/z) 366 [M+H)+, 388 [M+Na]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,93 (9H, s), 1,30 (3H, br.d), 3,67-4,27 (5,5H, br.m), 4,47 (0,5H, br.s), 5,06 (1H, br.m), 5,39 (1H, br.m), 5,43 (1H, br.m),7,88 (0,5H, br.s), 8,16 (0,5H, br.s), 9,56 (0,5H, br.s), 11,69 (0,5H, br.s).

Beispiel 24 5'-Desoxy-N⁴-[(3, 3-dimethylbutoxy)carbonyl]-5-etinylcytidin

FAB-MS: (m/z) 380 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 1,01 (9H, s), 1,39 (3H, br.d), 1,63 (2H, br.t), 3,77 (1H, br.m), 3,98-4,32 (4,5H, br.m), 4,56 (0,5H, br.s), 5,13 (1H, br.m), 5,45-5,51 (1H, br.m), 5,73-5,75 (1H, br.m), 7,96 (0,5H, br.s), 8,23 (0,5H, br.s), 9,57 (0,5H, br.s), 11,76 (0,5H, br.s).

Beispiel 25 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(tridecyloxycarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 478 [M+H]⁺, 516 [M+K]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,85 (3H, d, J = 4,6), 1,24 (20H, m), 1,30 (3H, d, J = 6,3), 1,60 (2H, m), 3,68 (1H, dt, J = 5,9, 5,6), 3,90 (1H, Quin., J = 6,3), 4,05 (2H, t, J 6, 6), 4,13 (1H, dt, J = 5,0, 4,3), 4,34 (1H, br.s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,40 (1H, d, J = 5,3), 5,65 (1H, d, J = 3,6); 8,00 (1H, br.s).

Beispiel 26 N⁴-(n-Butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-ethinylcytidin

FAB-MS: (m/z) 352 [M+H]⁺, 374 [M+Na]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,89 (3H, t, J = 7,2), 1,28-1,41 (5H, m), 1,53-1,64 (2H, m), 3,64-3,71 (1H, m), 3,85-3,92 (1H, m), 4,03-4,15 (3H, m), 4,34 (1H, s), 5,04 (1H, d, J = 5,9), 5,39 (1H, d, J = 5,3), 5,64 (1H, d, J = 3,6), 8,06 (1H, br.s).

Beispiel 27 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-hexyloxycarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 380 [M+H]⁺, 402 [M+Na]⁺,
H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,95 (3H, t, J = 6, 6), 1,38-1,40 (9H, m), 1,63-1,71 (2H, m), 3,74-3,80 (1H, m), 3,94-4,03 (1H, m), 4,14 (2H, t, J = 6,6), 4,19-4,24 (1H, m), 4,43 (1H, s), 5,13 (1H, d, J = 5,9), 5,49 (1H, d, J = 5,3), 5,74 (1H, d, J = 4,0), 8,09 (1H, br.s).

Beispiel 28 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-decyloxycarbonyl)cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 436 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): d 0,85 (3H, t, J = 6,4), 1,15- 1,42 (17H, m), 1,60 (2H, m), 3,69 (1H, m), 3,90 (1H, m), 4,05 (2H, t, J = 6,6), 4,13 (1H, m), 4,34 (1H, br.s), 5,04 (1H, d, J = 5,6), 5,40 (1H, d, J = 4,9), 5,66 (1H, d, J = 3,6), 8,01 (1H, br.s).

Beispiel 29 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2, 6-dimethylcylohexyloxy)-carbonyl]cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 406 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): d 0,83 (36H, t, J = 6,3), 1,20- 1,50 (9H, m), 1,55-1,75 (2H, m), 3,68 (1H, m), 3,93 (1H, m), 4,12-4,20 (2H, m), 4,45 (0,7H, s), 4,86 (0,3H, s), 5,04 (1H, d, J = 5,6), 5,43 (1H, br.s), 5,67 (1H, br.s), 7,96 (0,3H, br.s), 8,14 (0,7H, br.s), 9,50 (0,7H, br.s), 12,00 (0,3H, br.s).

Beispiel 30 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(benzyloxycarbonyl)cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 386 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): d 1,30 (3H, d, J = 6,3), 3,69 (1H, m), 3,89 (1H, m), 4,13 (1H, m), 4,35 (1H, br.s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,14 (2H, s), 5,41 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 3,6), 7,31-7,45 (5H, m), 8,01 (1H, br.s).

Beispiel 31 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(isopropyl-2-methylpropoxy)- carbonyl]cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 394 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): d 0,93 (12H, d, J = 6,6), 1,40 (3H, d, J = 6,6), 1,97 (2H, m), 3,33 (1H, d, J = 3,6), 3,55 (1H, s), 3,91 (1H, m), 4,30 (1H, m), 4,36 (1H, m), 4,62 (1H, m), 5,40 (1H, s), 5,72 (1H, d, J = 4,3), 7,69 (1H, s), 8,11 (1H, s).

Beispiel 32 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(3-methylbenzyloxy)-carbonyl]cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 416 [M+H]⁺,
¹

H-NNR: (270 MHz, DMSO-d'₆

): d 1,31 (3H, d, J = 6,0), 3,70 (1H, m), 3,76 (3H, s), 3,90 (1H, m), 4,14 (1H, m), 4,26 (0,5H, br.s), 4,44 (0,5H, br.s), 5,06 (2H, s), 5,16 (1H, br.s), 5,41 (1H, br.s), 5,66 (1H, m), 6,19 (1H, d, J = 7,9), 7,00 (2H, m), 7,30 (1H, dd, J = 7,9, 7,9), 7,89 (0,5H, br.s), 8,14 (0,5H, br.s), 9,72 (0,5H, br.s), 11,7 (0,5H, br.s).

Beispiel 33 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(methoxycarbonyl]cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 310 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): d 1,30 (3H, d, J = 6,3), 3,66 (3H, s), 3,70 (1H, m), 3,90 (1H, Quin., J = 6,3), 4,13 (1H, m), 4,34 (1H, s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,40 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 8,00 (1H, br.s).

Beispiel 34 5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(ethyloxycarbonyl]cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 324 [M+H]⁺,
H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): d 1,23 (3H, t, J = 6,93), 1,31 (3H, d, J = 6,27), 3,69 (1H, m), 3,90 (1H, m), 4,08-4,14 (3H, m), 4,35 (1H, br.s), 5,05 (1H, d, J = 5,94), 5,40 (1H, d, J = 5,27), 5,66 (1H, d, J = 3,63), 8,02 (1H, br.s).

Beispiel 35 5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 342 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,88 (3H, t, J = 6,9), 1,31 (4H, m), 1,32 (3H, d, J = 6,3), 1,55-1,63 (2H, m), 3,63 (1H, dt, J = 5,6, 5,6), 3,93 (1H, Quin., J = 6,3), 3,98 (1H, m), 4,01 (2H, t, J = 6,9), 5,04 (1H, d, J = 5,9), 5,42 (1H, d, J- 4,6), 5,73 (1H, d, J = 3,0), 7,07 (1H, d, J = 7,6), 7,97 (1H, d, J = 7,6), 10,66 (1H, br.s).

Beispiel 36 5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-vinylcytidin

MS:LC-MS: (in/z) 368 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 0,88 (3H, t, J = 7,1), 1,31 (7H, m), 1,61 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,91 (1H, m), 4,06 (2H, t, J = 6,4), 4,22 (1H, m), 5,08 (1H, d, J = 5,3), 5,20 (1H, d, J = 11,3), 5,40 (1H, d, J = 4,9), 5,69 (1H, d, J = 4,0), 5,88 (1H, d, J = 17,9), 6,57 (1H, dd, J = 11,3, 17,9), 7,78 (1H, s), 11,88 (1H, s).

Beispiel 37 5'-Desoxy-N⁴-(benzyloxycarbonyl)-5-vinylcytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 388 [M+H]⁺, 410 [M+Na]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 1,30 (3H, d, J = 6,3), 3,73 (1H, m), 3,92 (1H, m), 4,23 (1H, m), 5,13 (2H, s), 5,04-5,22 (2H, m), 5,42 (1H, d, J = 5,3), 5,69 (1H, d, J = 4,3), 5,69. (1H, dd, J = 15,8, 2,0), 6,55 (1H, dd, J = 11,2, 15,8), 7,36- 7,42 (5H, m), 7,78 (1H, s), 11,87 (1H, s).

Beispiel 38 N⁴-(Ethoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-vinylcytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 326 [M+H]⁺, 348 [M+Na]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): Δ 1,23 (3H, T, J = 7,26), 1,32 (3H, D, J = 6,27), 3,70-3,76 (1H, M), 3,89-3,94 (1H, M), 4,11 (2H, Q, J = 7,26), 4,22 (1H, M), 5,09 (1H, D, J = 5,61), 5,18-5,22 (1H, M), 5,42 (1H, D, J = 5,61), 5,69 (1H, D, J = 3,96), 5,85-5,92 (1H, M), 6,57 (1H, DD, J = 11,88, 17,82), 7,79 (1H, S), 11,88 (1H, br.s).

Beispiel 39 5'-Desoxy-5-iod-N⁴-[(2-phenylethoxy)carbonyl]cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 502 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 1,30 (3H, d, J = 6,3), 2,96 (2H, t, J = 7,1), 3,69 (1H, m), 3,88 (1H, m), 4,17 (1H, m), 4,29 (2H, t, J = 7,1), 5,07 (1H, d, J = 5,9), 5,38 (1H, d, J = 5,3), 5,62 (1H, d, J = 4,6), 7,19-7,35 (5H, m), 8,01 (1H, s), 11,70 (1H, br.s).

Beispiel 40 5'-Desoxy-5-iod-N⁴-(isopropoxycarbonyl]cytidin

MS:MALDI-TOF: (m/z) 462,5 [M+Na]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 1,24 (6H, d, J = 6,3), 1,30 (3H, d, J = 6,3), 3,69 (1H, m), 3,88 (1H, m), 4,17 (1H, m), 4,87 (1H, m), 5,07 (1H, d, J = 5,6), 5,38 (1H, d, J = 5,3), 5,62 (1H, d, J = 4,3), 8,02 (1H, s), 11,77 (1H, br.s).

Beispiel 41 N⁴-(Cyclohexyloxycarbonyl)-5'-desoxy-5-iodcytidin

MS:LC-MS: (m/z) 479,9 [M+H]⁺,
¹

H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆

): δ 1,23-1,42 (6H, m), 1,29 (3H, d, J = 6,3), 1,70 (2H, m), 1,89 (2H, m), 3,69 (1H, m), 3,88 (1H, m), 4,16 (1H, m), 4,60 (1H, m), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,37 (1H, d, J = 5,3), 5,62 (1H, d, J = 4,3), 8,00 (1H, s).

Die folgenden Verbindungen können auch analog zu Beispiel 6 erhalten werden:
5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-prop-1-inylcytidin,
5'-But-1-inyl-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-pent-1-inyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-hex-1-inyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-brom-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-(1-chlorvinyl)-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-vinylcytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(isopentyloxycarbonyl)cytidin, und
5'-Desoxy-N⁴-[(2-ethylbutyl)oxycarbonyl]-5-ethinylcytidin.

Beispiel 42 Herstellung von 2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-iodcytidin

5-Iodcytosin (1,0 g, 4,22 mmol) und eine katalytische Menge (NH4)2SO4 wurden in einer Lösung von Toluol (10 ml) und Hexa methyldisilazan (20 ml) suspendiert. Die Suspension wurde 18 Stunden lang auf 110°C erhitzt, damit eine klare Lösung ent stand. Nach Einengen der Reaktionslösung bei vermindertem Druck wurden Acetonitril (25 ml) und 5'-Desoxy-1,2,3-tri-O- acetyl-D-Ribofuranosid (1,32 g, 5,06 mmol) zu dem Rückstand zugegeben. Dann wurde wasserfreies Zinn(IV)chlorid (0,58 ml, 5,06 mmol) in Nitromethan (5 ml) zu der Mischung 5 Minuten lang tropfenweise zugegeben. Während der Zugabe wurde die Mischung durch Eiskühlung unter 0°C gehalten. Nach 2-stündi gem Rühren der Mischung bei 0 bis 5°C wurden 2 g Natriumbi carbonat zugegeben und anschließend wurde Wasser (0,7 ml) tropfenweise zugegeben. Nach der Zugabe wurde die Mischung 30 Minuten lang heftig bei Raumtemperatur gerührt. Die Reak tionsmischung wurde filtriert, um unlösliches Material zu entfernen, was mit CH₂Cl₂ gewaschen wurde. Das Filtrat und die Waschlösungen wurden vereinigt und mit Wasser und gesät tigtem Natriumbicarbonat gewaschen und dann über Na₂SO₄ getrocknet und filtriert. Das Filtrat wurde bei vermindertem Druck eingedampft. Das rohe Produkt wurde mit Blitzchromato graphie auf SiO₂ gereinigt (Elutionsmittel: 5% MeOH/CH₂Cl₂), was 5'-Desoxy-2',3'-di-O-acetyl-5-iodcytidin als farblosen Feststoff lieferte (1,22 g, 66% Ausbeute).
FAB-MS: (m/z) 438 [M+H]⁺, 460[M+Na]⁺,
¹H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆): δ 1,32 (3H, d, J = 6,3), 2,04 (3H, s), 2,06 (3H, s), 4,02 (1H, Quin., J = 6,3), 5,14 (1H, t, J = 6,6), 5,48 (1H, dd, J = 6,6, 4,3), 5,69 (1H, d, J = 4,0), 6,78 (1H, br.s), 8,01 (1H, br.s), 8,11 (1H, s).

Beispiel 43 Herstellung von 2',3'-Bis-O-(tert butyldimethylsilyl)-5'- desoxy-5-iod-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin

a) 5'-Desoxy-2',3'-di-O-acetyl-5-iodcytidin (200 mg, 0,46 mmol) wurde in Methanol (5 ml) gelöst. Zu dieser Lösung wurde 1 mol/l Natriumhydroxidlösung tropfenweise bei 0°C zugegeben. Nach 10-minütigem Rühren wurde der pH der Reaktionsmischung mit 1 n Salzsäurelösung auf 7 eingestellt. Die Reaktions mischung wurde bei vermindertem Druck verdampft.
Eine Mischung von Imidazol (467 mg, 6,9 mmol) und DMF (5 ml) wurde zu dem Rückstand zugegeben. Dann wurde tert-Butyldi methylchlorsilan (354 mg, 2,29 mmol) zu der Mischung zugege ben. Die Reaktionsmischung wurde 1 Stunde lang bei 50°C gerührt. Die Mischung wurde mit Dichlormethan extrahiert, mit Wasser gewaschen und dann über Na₂SO₄ getrocknet und fil triert. Das Filtrat wurde bei vermindertem Druck eingedampft. Das rohe Produkt wurde mit Blitzchromatographie auf SiO₂ gereinigt (Elutionsmittel: 70% EtOAc/n-Hexan bis 100% EtOAc), was 5'-Desoxy-2',3'-di-O-tert-butyldimethylsilyl-5-iodcytidin als farblosen Feststoff lieferte (176,5 mg, 66% Ausbeute).
FAB-MS: (m/z) 582 [M+H] +,
¹H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆): δ 0,00 (3H, s), 0,02 (3H, s), 0,06 (3H, s), 0,08 (3H, s), 0,82 (9H, s), 0,88 (9H, s), 1,30 (3H, d, J = 6,6), 3,78 (1H, dd, J = 4,6, 4,3), 3,93 (1H, m), 4,33 (1H, dd, J = 4,9, 4,6), 5,67 (1H, d, J = 5,0), 6,67 (1H, br.s), 7,87 (2H, br.s).
b) Zu einer gerührten Lösung von 5'-Desoxy-2',3'-bis-O-(tert- butyldimethylsilyl)-5-iodcytidin (116 mg, 0,200 mmol) in CH₂Cl₂ (2 ml) wurden Pyridin (84 µl, 1,00 mmol) N,N-Dimethyl aminopyridin (6 mg, 0,05 mmol) und n-Pentyl chlorformiat (95 µl, 0,600 mmol) bei Raumtemperatur unter Ar zugegeben. Nach 30-minütigem Rühren wurde die Reaktions mischung zwischen Dichlormethan und Wasser aufgetrennt und die organische Phase abgetrennt und die Wasserphase mit CH₂Cl₂ (15 ml × 4) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und filtriert. Das Filtrat wurde bei ver mindertem Druck eingedampft. Das rohe Produkt wurde mit Blitzchromatographie auf SiO₂ gereinigt (Elutionsmittel: 20% EtOAc/n-Hexan), was 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'- desoxy-5-iod-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin als farblosen amorphen Feststoff lieferte (132,4 mg, 91% Ausbeute).
FAB-MS: (m/z) 696 [M+H]⁺,
¹H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆): δ 0,00 (3H, s), 0,03 (3H, s), 0,05 (3H, s), 0,07 (3H, s), 0,77 (9H, s), 0,81 (9H, s), 1,20- 1,27 (10H, m), 1,46-1,55 (2H, m), 3,74 (1H, dd, J = 4,6, 4,6), 3,89-4,01 (3H, m), 4,37 (1H, dd, J = 4,5, 4,6), 5,55 (1H, d, J = 4,6), 7,92 (1H, s), 11,70 (1H, br.s).

Beispiel 44 Herstellung von 2',3'-Bis-O-(tert butyldimethylsilyl)-5'-desoxy-5-[(trimethylsilyl) ethinyl]-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin

Zu einer Lösung von 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'- desoxy-5-iod-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin (130 mg, 0,18 mmol) in CH₂Cl₂ (2 ml) und Et₃N (2 ml) wurden CuI (10,7 mg, 0,1056 mmol), Pd(PPh₃)₂Cl₂ (2,6 mg, 0,0036 mmol) und Trime thylsilylacetylen (58,6 µl, 0,40 mmol) zugegeben und 2 Stun den lang bei Raumtemperatur unter Ar im Dunklen gerührt. Die Reaktionsmischung wurde bei vermindertem Druck eingeengt und der Rückstand in EtOAc (25 ml × 3) gelöst, mit 2% wäßrigem EDTA × 2Na (10 ml × 2), Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und filtriert. Das Filtrat wurde bei vermindertem Druck eingeengt. Das rohe Produkt wurde mit Blitzchromatographie auf SiO₂ gereinigt (Elutionsmittel: 10% EtOAc/n-Hexan), was 2',3'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5'- desoxy-5-[(trimethylsilyl) ethinyl]-N4-(n-pentyloxycarbonyl) cytidin als farblosen armorphen Feststoff lieferte (30,2 mg, 26% Ausbeute).
FAB-MS: (m/z) 666 [M+H]⁺, 688 [M+Na]⁺,
H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆): δ -0,18 (3H, s), -0,16 (3H, s), -0,14 (3H, s), -0,12 (3H, s), 0,00 (9H, s), 0,64 (9H, s), 0,65 (3H, s), 0,67 (9H, s), 1,01 (4H, m), 1,14 (3H, d, J = 6,6), 1,40 (2H, m), 3,58 (1H, t, J = 4,9), 3,79 (1H, m), 3,87 (2H, m), 4,20 (1H, m), 5,43 (1H, d, J = 3,6), 7,88(1H, br.s).

Beispiel 45 5'-Desoxy-2',3'-bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-5-cyanocytidin

Zu einer gerührten Lösung von 5'-Desoxy-2',3'-bis-O-(tert-bu tyldimethylsilyloxy)-5-iodcytidin (153 mg, 0,263 mmol) in DMF (5 ml) wurde NaCN (34,3 mg, 0,70 mmol) bei Raumtemperatur zu gegeben. Nach 1-tägigem Rühren wurde die Reaktionsmischung bei vermindertem Druck eingeengt. Das rohe Produkt wurde in EtOAc gelöst und dann mit Wasser und Kochsalzlösuns gewa schen. Der Extrakt wurde über Na₂SO₄ getrocknet und fil triert. Das Filtrat wurde bei vermindertem Druck eingeengt. Das rohe Produkt wurde mit Blitzchromatographie auf SiO₂ gereinigt (Elutionsmittel: EtOAc), was 5'-Desoxy-2',3'-bis-O- (tert-butyldimethylsilyl)-5-cyanocytidin als fahlgelben Fest stoff lieferte (71,1 mg, 56% Ausbeute).
FAB-MS: (m/z) 481 [M+H]⁺,
¹H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆): δ -0,04 (3H, s), 0,00 (3H, s), 0,02 (3H, s), 0,76 (9H, s), 0,82 (9H, s), 1,21 (3H, d, J = 6,3), 3,81 (1H, m), 4,05 (1H, t, J = 5,0), 4,71 (1H, t, J = 5,0), 5,65 (1H, d, J = 5,3), 6,41 (1H, s), 7,69 (1H, br.s), 7,85 (1H, br.s).

Beispiel 46 Herstellung von 2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-vinylcytidin

Zu einer Lösung von 2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-iodcytidin, Ro 09-4620 (1,6 g, 3,66 mmol) in 10 ml DMF wurden Pd₂(dba)₃ (67 mg, 0,073 mmol) und Tri-2-furylphosphin (85 mg, 0,366 mmol) und Tri-n-butyl(vinyl)stannan (2,1 ml, 7,318 mmol) unter Ar-Atmosphäre bei Raumtemperatur zugegeben. Nach 19 stündigem Rühren wurde Tri-n-butyl(vinyl)stannan (2,1 ml, 7,318 mmol) zu der Reaktionsmischung zugegeben und dann die Reaktionsmischung auf 40°C erwärmt, wobei 24 Stunden lang gerührt wurde. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand auf einer Silicagelsäule gereinigt (Elutions mittel: Ethylacetat CH₂Cl₂: MeOH = 95 : 5), was 2',3'-Di-O-ace tyl-5'-desoxy-5-vinylcytidin (1,13 g, 92%) als farblosen Feststoff lieferte.
MS:FAB-MS: (m/z) 338 [M+H]⁺,
¹H-NMR: (270 MHz, DMSO-d₆): d 1,33 (3H, d, J = 6,3), 2,05 (3H, s), 2,06 (3H, s), 4,05 (1H, Quin., J = 6,3), 5,14 (1H, d, J = 10,8), 5,16 (1H, t, J = 6,6), 5,54 (1H, d, J = 17,2), 5,53 (1H, dd, J = 6,9, 5,9), 5,73 (1H, d, J = 4,3), 6,55 (1H, dd, J = 17,2 10,8), 7,20 (1H, br.s), 7,57 (1H, br.s), 7,88 (1H, s).

Beispiel 47 Herstellung von 5'-Desoxy-5-vinylcytidin

Zu einer Lösung von 2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-vinylcyti din (111 mg, 3,29 mmol) in 5 inl Methanol wurde 1 n NaOH (0,32 ml, 0,32 mmol) bei Raumtemperatur zugegeben. Nach 1stündigem Rühren wurde 1 n HCl (ca. 0,3 ml) zu der Reak tionsmischung zugegeben und dann die Reaktionsmischung bei vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde durch Fest phasenextraktion gereinigt (MEGA-Bond-Elute-LRC, Elutions mittel: H₂O bis H₂O : MeOH = 1: 1, stufenweiser Gradient), was 5'-Desoxy-5-vinylcytidin (82 mg, 98%) als farblosen Feststoff lieferte.
MS:LC-MS: (m/z) 253,9 [M+H]⁺,
¹H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): d 1,29 (3H, d, J = 6,3), 3,68 (1H, m), 3,86 (1H, m), 4,08 (1H, m), 4,97 (1H, d, J = 5,9), 5,12 (1H, d, J = 11,1), 5,28 (1H, d, J = 5,3), 5,50 (1H, d, J = 17,2), 5,70 (1H, d, J = 3,6), 6,58 (1H, dd, J = 11,1, 17,2), 7,10 (1H, br.s), 7,42 (1H, br.s), 7,64 (1H, s).

Die folgenden Beispiele erläutern pharmazeutische Präparate, die eine erfindungsgemäß bereit gestellte Verbindung enthal ten.

Beispiel A

Ineinandergreifende Gelatinekapseln, die jeweils die folgen den Inhaltsstoffe enthielten, wurden in an sich bekannter Weise hergestellt:

5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin	40 mg
Lactose	70 mg
Maisstärke	25 mg
Magnesiumstearat	1 mg
Crospovidone	4 mg
140 mg

Beispiel B

5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin	100 mg
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin	10 mg
Lactose	70 mg
Maisstärke	25 mg
Magnesiumstearat	1 mg
Crospovidone	4 mg
210 mg

Beispiel C

Tabletten, die jeweils die folgenden Inhaltsstoffe enthiel ten, wurden in an sich bekannter Weise hergestellt:

5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin	40 mg
Lactose	70 mg
Maisstärke	3 mg
Magnesiumstearat	1 mg
Crospovidone	7 mg
Povidone	10 mg
130 mg

Falls notwendig wird die Tablette mit Hydroxypropylmethylcel lulose, Talkum und Farbstoff filmbeschichtet.

Beispiel D

5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin	300 mg
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin	20 mg
Lactose	70 mg
Magnesiumstearat	3 mg
Crospovidone	7 mg
Povidone	10 mg
186 mg

Falls notwendig, wird die Tablette mit Hydroxypropylmethyl cellulose, Talkum und Farbstoff filmbeschichtet.

Claims

1. Verbindung der allgemeinen Formel (I)
worin R¹ ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe ist, die leicht unter physiologischen Bedingungen hydrolysierbar ist;
R² ein Wasserstoffatom oder eine -CO-OR⁴-Gruppe, worin R⁴ eine gesättigte oder ungesättigte, gerade oder ver zweigte Kohlenwasserstoffgruppe mit 1 bis 15 Kohlen stoffatomen oder eine Gruppe der Formel -(CH₂)_n-Y, worin Y ein Cyclohexyl- oder Phenylrest ist und n eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist, bedeutet;
R³ ein Wasserstoffatom, Brom, Iod, ein Cyanorest, eine C₁-C₄-Alkylgruppe, die mit Halogenatomen substituiert sein kann, eine Vinyl- oder Ethinylgruppe, die mit Halo genatomen, C₁-C₄-Alkyl-, Cycloalkyl-, Aralkylresten oder einem aromatischen Ring, der ein oder mehrere Hetero atome aufweisen kann, substituiert sein kann, oder eine Aralkylgruppe, die substituiert sein kann, ist,
mit dem Vorbehalt, daß R² und R³ nicht gleichzeitig Wasserstoffatome bedeuten.

2. Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R³ ein Wasserstoffatom, Brom, Iod, ein Trifluormethyl-, Ethyl-, Propyl-, Cyano-, Vinyl-, 1-Chlorvinyl-, Ethinyl-, Prop-1-inyl-, But-1-inyl-, Pent-1-inyl-, Hex- 1-inyl- oder Bromethinylrest ist.

3. Verbindung nach Anspruch 1 oder Anspruch 2 ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus
5'-Desoxy-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-5-prop-1-inylcytidin,
5-But-1-inyl-5'-desoxycytidin,
5'-Desoxy-5-pent-1-inylcytidin,
5'-Desoxy-5-hex-1-inylcytidin,
5'-Desoxy-5-iodcytidin,
5-Brom-5'-desoxycytidin,
5-(1-Chlorvinyl)-5'-desoxycytidin,
5'-Desoxy-5-vinylcytidin,
5'-Desoxy-5-trifluormethylcytidin,
5-(3-Benzyloxybenzyl)-5'-desoxycytidin,
5-Cyano-5'-desoxycytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-prop-1-inylcytidin,
5-But-1-inyl-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-pent-1-inyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-hex-1-inyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-iod-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5-Brom-5-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5-(1-Chlorvinyl)-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl) cytidin,
N⁴-(Ethoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-vinylcytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-propoxycarbonyl)-5-vinylcytidin,
N⁴-(n-Butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-vinylcytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-vinylcytidin,
N⁴-(Benzyloxycarbonyl)-5'-desoxy-5-vinylcytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5-trifluormethyl cytidin,
5-(3-Benzyloxybenzyl)-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxy carbonyl)cytidin,
5-Cyano-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(methoxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-(ethoxycarbonyl)-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-propoxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(isopropoxycarbonyl)cytidin,
N⁴-(n-Butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-ethinylcytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(isobutoxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2-propylpentyloxy)carbonyl] cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(isopentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2-methylpentyloxy)carbonyl] cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(3-methylpentyloxy)carbonyl] cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-hexyloxycarbonyl)cytidin, 5'-Desoxy-N⁴-[(2-ethylbutyl)oxycarbonyl]-5-ethinyl cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-[(2-ethylhexyl)oxycarbonyl]-5-ethinyl cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2-phenylethoxy)carbonyl] cytidin,
N⁴-(Cyclohexyloxycarbonyl)-5'-desoxy-5-ethinylcytidin,
N⁴-[(Cyclohexylmethoxy)carbonyl]-5'-desoxy-5-ethinyl cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(neopentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-[(3, 3-dimethylbutoxy)carbonyl]-5-ethinyl cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-propoxy carbonyl)cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-pentyloxy carbonyl)cytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-vinylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-N⁴-(ethoxycarbonyl)-5'-desoxy-5- vinylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-N⁴-(n-propoxycarbonyl)-5- vinylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-N⁴-(n-butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5- vinylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)-5- vinylcytidin,
2',3'-Di-O-acetyl-N⁴-(benzyloxycarbonyl)-5'-desoxy-5- vinylcytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(n-decyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(2, 6-dimethylcyclohexyloxy)- carbonyl]cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-(benzyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(1-isopropyl-2-methyl-propoxy)- carbonyl]cytidin und
5'-Desoxy-5-ethinyl-N⁴-[(3-methoxybenzyloxy)-carbonyl] cytidin.

4. Verbindung nach einem der Anspüche 1, 2 oder 3 zur Ver wendung in der medizinischen Therapie.

5. Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 3 zur Ver wendung zur Behandlung eines Tumors.

6. Pharmazeutische Zusammensetzung enthaltend eine Verbin dung, wie in einem der Ansprüche 1, 2 oder 3 definiert, als aktiven Inhaltsstoff.

7. Pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung eines Tumors enthaltend eine Verbindung, wie in Anspruch 1, 2 oder 3 definiert, und einen aktiven Inhaltsstoff.

8. Pharmazeutische Zusammensetzung enthaltend eine Verbin dung nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 3, und 5-Fluor uracil oder ein Derivat davon.

9. Zusammensetzung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß das 5-Fluoruracil oder sein Derivat ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus:
5-Fluor-1-(2-tetrahydrofuryl)uracil,
1-(n-Hexyloxycarbonyl)-5-fluoruracil,
5'-Desoxy-5-fluoruridin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(n-propoxycarbonyl)cytidin,
N⁴-(n-Butoxycarbonyl)-5'-desoxy-5-fluorcytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(n-pentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(isopentyloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(n-hexloxycarbonyl)cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-[(2-ethylbutyl) oxycarbonyl]-5-fluorcytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-[(2-phenylethoxy)carbonyl]cytidin,
N⁴-[(Cyclohexylmethoxy)carbonyl]-5'-desoxy-5-fluor cytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(neopentyloxycarbonyl)-cytidin,
5'-Desoxy-N⁴-[(3, 3-dimethylbutoxy)carbonyl]-5-fluor cytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(3, 5-dimethylbenzoyl)cytidin,
5'-Desoxy-5-fluor-N⁴-(3, 5-dichlorbenzoyl)cytidin und
2',3'-Di-O-acetyl-5'-desoxy-5-fluor-N⁴-(n-pentyloxycar bonyl)cytidin.

10. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 8 zur Behandlung eines Tumors.

11. Verwendung einer Verbindung nach einem der Anspüche 1, 2 oder 3 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behand lung eines Tumors.

12. Kit umfassend eine pharmazeutische Zusammensetzung ent haltend eine Verbindung, nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 3 als aktiven Inhaltsstoff, und eine pharmazeu tische Zusammensetzung enthaltend 5-Fluoruracil oder ein Derivat davon, als aktiven Inhaltsstoff.

13. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der allgemei nen Formel (I)
worin R¹ ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe ist, die leicht unter physiologischen Bedingungen hydrolysierbar ist;
R² ein Wasserstoffatom oder die Gruppe -CO-OR⁴ ist, worin R⁴ eine gesättigte oder ungesättigte, gerade oder verzweigte Kohlenwasserstoffgruppe mit 1 bis 15 Kohlen stoffatomen oder eine Gruppe der Formel -(CH₂)_n-Y, worin Y ein Cyclohexyl- oder Phenylrest ist und n eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist, bedeutet;
R³ ein Wasserstoffatom, Brom, Iod, ein Cyanorest, eine C₁-C₄-Alkylgruppe, die mit Halogenatomen substituiert sein kann, eine Vinyl- oder Ethinylgruppe, die mit Halo genatomen, C₁-C₄-Alkyl-, Cycloalkyl-, Aralkylresten oder einem aromatischen Ring, der ein oder mehrere Hetero atome aufweisen kann, substituiert sein kann, oder eine Aralkylgruppe, die substituiert sein kann, ist,
mit dem Vorbehalt, daß R² und R³ nicht gleichzeitig Was serstoffatome bedeuten können, das umfaßt, daß man

(A) für eine Verbindung der allgemeinen Formel (I), worin R¹, R² und R³ wie oben definiert sind, eine Verbindung der Formel (II)
worin P¹ eine Hydroxyschutzgruppe ist und R³ wie oben definiert ist, mit einer Verbindung der allgemeinen For mel (III)
R⁴OCOX (III)
worin R⁴ wie oben definiert ist, X, Chlor oder Brom ist, in Gegenwart eines Säureakzeptors umsetzt und anschlie ßend, falls notwendig, die Schutzgruppen entfernt,
(B) für eine Verbindung der Formel (I), worin R¹ und R² wie oben definiert sind und R³ eine Ethinyl- oder Vinyl gruppe, die mit Halogenatomen, C₁-C₄-Alkyl-, Cyclo alkyl-, Aralkylresten oder einem aromatischen Ring, der ein oder mehrere Heteroatome aufweisen kann, substitu iert sein kann, bedeutet, eine Verbindung der Formel (IV)
worin P¹ und R² wie oben definiert sind, mit einem Ace tylen- oder Vinylderivat in Gegenwart eines Palladium katalysators umsetzt und anschließend, falls notwendig, die Schutzgruppen entfernt,
(C) für eine Verbindung der Formel (I), worin R¹ und R² wie oben definiert sind und R³ eine Cyanogruppe ist, eine Verbindung der Formel (IV)
worin P¹ und R² wie oben definiert sind, mit Alkali cyanid umsetzt und anschließend, falls notwendig, die Schutzgruppen entfernt,
(D) für eine Verbindung der Formel (I), worin R¹ und R³ wie oben definiert sind und R² ein Wasserstoffatom ist, eine Verbindung der Formel (V)
worin P¹ und R³ wie oben definiert sind, mit Phospho rylchlorid in Gegenwart eines Säureakzeptors umsetzt, anschließend mit Ammoniak behandelt und, falls notwen dig, anschließend die Schutzgruppen entfernt,
(E) für eine Verbindung der Formel (I), worin R¹, R² und R³ wie oben definiert sind, eine Verbindung der Formel (VI)
worin R² und R³ wie oben definiert sind, mit einer Ver bindung der FormeI (VII)
worin P¹ wie oben definiert ist, in Gegenwart eines Lewissäurekatalysators kuppelt und anschließend, falls notwendig die Schutzgruppen entfernt,
(F) für eine Verbindung der Formel (I), worin R³ ein Vinyl rest ist, der mit Halogenatomen, C₁-C₄-Alkyl-, Cyclo alkyl-, Aralkylresten oder einem aromatischen Ring, der ein oder mehrere Heteroatome aufweisen kann, substi tuiert sein kann, R¹ und R² wie oben definiert sind, eine Verbindung der Formel (VIII)
worin P¹ eine Hydroxyschutzgruppe ist, R³ ein Ethinyl rest ist, der mit Halogenatomen, C₁-C₄-Alkyl-, Cyclo alkyl-, Aralkylresten oder einem aromatischen Ring, der ein oder mehrere Heteroatome aufweisen kann, substi tuiert sein kann, und R² wie oben definiert ist, mit einem Lindlarkatalysator katalytisch hydriert und, falls notwendig, anschließend die Schutzgruppen entfernt.

14. Verbindung nach Anspruch 1, hergestellt mit einem Ver fahren nach Anspruch 13.