DE1643464C3 - Fluorescein-Dicarbonsäureester - Google Patents
Fluorescein-DicarbonsäureesterInfo
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Description
in der R dnen Alkylrest mit 7 bis 17 C-Atomen bedeutet.
2. Diagnostisches Mittel zur quantitativen Bestimmung der Pankreasenzyme in KörperfKissigkeiten,
gekennzeichnet durch einen Gehalt an Fluorescein - Dicirbonsäureestern gemäß Anspruch
1 neben üblichen Puffersubstanzen oder Geschmacksstoffen.
die mit der Gallenflüssigkeit in das Duodenum gelangt
verseift werden und daher eine spezifische Bestimmung der Pankreasenzymkonzentrationen im
Duodenum nicht erlauben. · rv u
Die erfindungsgemäßen Fluorescein - Dicarbonsäureester
besitzen dagegen nicht die Nachteile der bekannten Ester. Es war zu erwarten, daß auch
höhere Fluorescein - Dicarbonsäureester in gleichermaßen unspezifischer Weise gespalten werden. Ferner
war aus der langsameren Spaltung der Caprcylester aeeenüber den Butyryl- und Acetylestern zu erwarten,
daß höhere Ester so langsam gespalten werden, daß ein diagnostisches Mittel damit nicht herstellbar ist
überraschenderweise treffen diese Erwartungen nicht zu Die erfindungsgemäßen Fluorescein-Dicarbonsäureester
lassen sich daher insbesondere zur quantitativen Bestimmung der Pankreasenzyme in Körperflüssigkeiten
verwenden. Sie stellen farblose, nichtresorbierbare Substrate dar, aus denen durch Reaktion
mit den Pankreasenzym en das Fluorescein als resorbierbarer Farbstoff freigesetzt wird, wie dies
nachstehend für den Fluoresce: n-di-Myristinsäureester
durch die folgende Reaktionsgleichung veranschaulich; wird:
O=C-(CH2I12-CH, O=C-(CH2I12-CH,
Die Erfindung betrifft Fluorescein - Dicarbonsäureester der allgemeinen Formel
in der R einen Alkylresf mit 7 bis 17 C-Atomen bedeutet.
Fluoresceinester von niedrigen Fettsäuren, wie Essigsäure, Buttersäure und Propionsäure sind bereits
bekannt. Solche Fluoresceinester haben die Eigenschaft, bei der Hydrolyse chinoide Gruppierungen
anzunehmen und infolgedessen Farbreaktionen zu geben, wodurch sie für analytische Zwecke technisch
interessant sind, wobei insbesondere auf die Eignung als Substrate Für Enzyme hingewiesen sei, die in der
klinischen Laboratoriumsdiagnostik von Bedeutung sind (Chem. Abstracts, Bd. 64 [1966], S. 6973a-c,
und Chem. Abstracts, Bd. 60 [1964], S. 10 985g-h). So werden die Ester beispielsweise von Enzymen
des Pankreassekrets (Lipase und Chymotrypsin) verseift, woraus sich (ήη einfaches und zuverlässiges
Verfahren zur Erkennung der Pankreasfunktion herleiten
läßt. Die bisher bekannten Ester mit kurzkettigcn Fettsäuren 'haben außer dem Nachteil einer
Spontanhydrolyse in wäßriger Lösung und einer sehr raschen Verseifung durch Esterasen den weiteren
Nachteil, daß sie auch von alkalischer Phosphatase,
O
Ester (farblos)
Ester (farblos)
Pankreas-Enzyme
+ 2 H2O
50
55
+ 2CH3(CHj)112COOH
Fluorescein + 2 Myristinsäure
Fluorescein + 2 Myristinsäure
Das resorbierbare Fluorescein ist im Serum oder, nach Ausscheidung durch die: Niere, im Urin quantitativ
beispielsweise mittels Fluoreszenz- oder Absorptionsmessung erfaßbar. Ferner ist eine Inkubation
von Serum, das auf seinen Gehalt an Esterasen geprüft werden soll, mit den farblosen Estern möglich,
aus denen durch enzymatisch«1 Verseifung das Fluoresccin
freigesetzt wird und als Maß für die Enzymkonzentration gemessen werden kann.
Mittels der erfindungsgemäßen Verbindungen lassen
sich die Routinebestimmungen der Pankreasfunktion
erheblich vereinfachen. Es genügt, zu einer definierten Zeit, etwa 2 Stunden nach oraler Einnahme einer der
erfindungsgemäßen Substanzen, die über Diurese eliminierte Farbstoffmenge zu bestimmen und mit
dem individuellen Sollwert des Probanden, der durch Bestimmung der z. B. am Vortag nach Verabreichung
einer dem Ester äquimolaren Dosis unveresterten Fluoresceins ausgeschiedenen Farbstoffmenge ermittelt
wird, in Beziehung zu setzen. Auf diese Weise lassen sich Reihenuntersuchungen mit Hilfe der
erfindungsgemäßen Substanzen wesentlich genauer als bisher und in wesentlich kürzerer Zeit durchführen.
Geeignet sind insbesondere der Fluorescein-di-Laurinester,
der Fluorescein-di-Myristinester und der Fluorescein-di-Palmitinester, wobei der Fluorescein-di-Myristinester
sich als besonders vorteilhaft erwiesen hat.
Ein geeignetes Mittel für die Diagnostik von Pankreaserkrankungen
ist ein solches, das die erfindungsgemäßen Verbindungen vermischt mit einem üblichen Zusatzstoff, wie einer Puffersubstanz oder
Geschmacksstoffen enthält und das auch in einem dünndarmlöslichen Kapselmaterial eingekapselt werden
kann.
Die erfindungsgemäßen Fluorescein - Dicarbonsäureester der oben angegebenen allgemeinen Formel
werden in der nachstehend beschriebenen Weise hergestellt:
0,01 Mol Fluorescein-Kalium werden in 30 ml Aceton bei 40 bis 45° C gelöst, es wird 0,1 Mol Pyridin
zugefügt, und unter Rückfluß werden 0,06 Mol eines entsprechenden Carbonsäurechlorids zugetropft. Mau
rührt noch etwa 1 Stunde, läßt dann abkühlen und schüttelt den gebildeten Ester nach der Hydrolyse
von überschüssigem Säurechlorid mit Chloroform aus. Die Chloroformphase wird bei Raumtemperatur
im Vakuum getrocknet, bis sie keinen Geruch nach Pyridin mehr aufweist, und dann wird das Produkt
auf einer Kieselgelsäule mit einem Gemisch, bestehend aus Chloroform zu Essigester = 1:2, gereinigt. Die
den farblosem Ester (Prüfung mit methanolischer KOH) enthaltenden Fraktionen werden vereinigt,
und man erhält den Ester in einer Ausbeute von 87 bis 92% der Theorie. Durch Lösen in Chloroform
und Zugabe von Äthanol erhält man den Ester in kristalliner Form.
Nach der obigen Methode wurden die folgenden Fluorescein-Dicarbonsäureester hergestellt:
Fluorescein-di·
Fluorescein-di-Fluorescein-di·
Flucrescein-di-Fluorescein-di-Fluortscein-di-
Fluorescein-di-Fluorescein-di·
Flucrescein-di-Fluorescein-di-Fluortscein-di-
Caprylsäureester ..
Pelargonsäureester
Caprinsäureester ..
Myristinsäureester
Palmitinsäureester
Stearinsäureester ..
Pelargonsäureester
Caprinsäureester ..
Myristinsäureester
Palmitinsäureester
Stearinsäureester ..
45-46° C
40-^7,5° C 640C
71,5°C
79—80°C
88—890C
40-^7,5° C 640C
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88—890C
Claims (1)
- Patentansprüche:
1. Fluorescein-Dicarbonsäiireester der allgemei-R-CXIl V-O-C-R"5
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DEM0075946 | 1967-10-20 | ||
DEM0075946 | 1967-10-20 |
Publications (3)
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DE1643464A1 DE1643464A1 (de) | 1971-05-27 |
DE1643464B2 DE1643464B2 (de) | 1976-02-12 |
DE1643464C3 true DE1643464C3 (de) | 1976-09-23 |
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