DE1620258A1

DE1620258A1 - Verfahren zur Herstellung von Thiaminderivaten

Info

Publication number: DE1620258A1
Application number: DE19651620258
Authority: DE
Inventors: Seiji Mitsui; Genshun Sunagawa; Hiroshi Watanabe
Original assignee: Sankyo Co Ltd
Current assignee: Sankyo Co Ltd
Priority date: 1964-04-08
Filing date: 1965-04-01
Publication date: 1970-03-19
Also published as: DK119708B; BE662035A; NL7000669A; US3507854A; DE1620258B2; NL6504410A; DE1620258C3; LU48334A1; SE334158B; NL129626C; GB1092664A; NO118065B; CH459215A

Description

Dipl.-Ing. Kar! Kiekeben *

Patentanwalt iconoco

Berlin 19, Kalserdamra 28 - · D Δ U ά O O

Dr. Expl.

1. April 1965

. P.4497

Sankyo Company, Limited in Tokyo (Japan).

Verfahren zur Herstellung von Thiaminderivaten,

Die Erfindung bezieht sich auf ein neues Verfahren

zur Herstellung von Thiaminderivaten. Sie bezieht sich

zur Heystellung insbesondere auf ein neues Verfahren⁷von Thiaminderivaten der Formel

N=C-NH. _CH

ΟΗ,-C C-CH₀-N j

" " C = C 0 0 ^N"^CH 1 I Il Il

₃ CK^CH₂-O-P-O-P-OR₁

worin R^ ein Glied ist,, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend

aus Wasserstoff der Gruppe -Ρ*-ΟΗ, ^'-Adenosin und 5'-UrIdIn.

OH

Einige der Thiaminderivate der obigen Formel (I) sind bekannt als wichtige biochemische Verbindungen. Beispielsweise ist Thiamin-0-diphospinat seit langem als ein Ooenzyra

0098t271778 - 2 ·

BAD ORIGINAL : / -',-.XuU ^ *

mit der Bezeichnung Cocarboxylase. Thiamin-0-trIphosphat ist bekannb als eine Verbindung mit starker Phosphatbindung, * die in der Leber und der Muskulatur der Säugetiere ebenso wie in Mikroorganismen enbhalben ist, wo sie eine bedeutende Rolle spielt, beispielsweise als eine Quelle hochenergatischer Phosphatbindung.

Bisher sind diese Thiaminderivate hergestellt worden durch Reaktion von Thiamin mib Polyphosphorsäuren die aus Phosphorsäure erhalben wurde; durch Erhibzen beider ergibt sich ein Gemisch von Thiaminphosphaben, das Thiamin-O-monophosphat, Thiamin-O-diphosphat, Thiamin-O-triphosphat und Thiamin-O-polyphosphab enthält. Jedes Phosphab kann aus dem Reakbionsgemisch isolierb werden. Das bisherige Verfahren ist jedoch in wirtschaftlicher Hinsicht unzweckmäßig, weil die Ausbeuten der isolierten Phosphate außerordentlich gering sind.

Als ein Ergebnis umfangreicher Studien zur Auffindung eines neuen und wirbschaftlich prakbischen Verfahrens zur Herstellung von Thiaminphospjiaten ist nun gefunden worden, dass Thiaminderivate der obigen Formel (I) mib hohem Rein'r heitsgrad und mit ausgezeichneben Ausbeuben hergestellt werden können durch Reaktion der Thioltype Thiaminmonophosphat mit Diphenyl-(oder Dialkoxyphenyl)-phosphorohalogenidat (englisch» diphenyl (or dialkoxyphenyl) phosphorohalidate) in Gegenwart eines tertiären Amins zur Herstellung der Thiöl· bype Thiamindiphenyl-(oder Dialkoxyphenyl)-phosphatderivat, und durch Reaktion des lebzberen Derivabes mib einem Phosphafcderivat In Gegenwart eines berbiären Amins mit anschließender Γ Behandlung mit einer Mercapto enbhaltenden Verbindung.

009*12/179* .v** '

- 3 -BAD ORIGINAL· _;

ι *

■Es ist daher ein Zweck dieser Erfindung, ein neues und wirtschaftlich zweckmäßiges Verfahren zur Herstellung.

von Thiaminderivate*! der obigen Formel (X) aufzuzeigen.

Weitere Merkmale der Erfindung ergeben sich aus der folgenden Beschreibung.

Gemäß_>dem Verfahren nach der Erfindung werden Thiaminderivate der obigen Formel (I) hergestellt durch Reaktion einee Thiaminderivates der Formel,

H-O-IiH₂

N-OH Y

-OH₅, ₂₂

■■■;"■-■" OH

worin R₂ ein Glied ist, ausgewählt aus der Gruppe, enthaltend' aliphatisch^ Acy!gruppe, aromatische Acylgruppe, Alkylthiogruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen im Alkylteil und die Gruppe

CHO ₅-N^ S-

* C-C , -CH ' ?*\ fi

P OH

OH CH₂GH₂-O-P-OH 3 'I

mit einer Verbindung, ausgewählt aus der Klasse, enthaltend Diphenylphosphorohalogenidate und Di-(alkoxy-substituiertes phenyl)-phosphorofaalogenidate in Gegenwart eines tertiären Amins zur Bildung von Thiaminderivaten der Formel

009812/17 78 ■ - * -

BAD ORfGlNAL

N-C-NH₂

-C C-GH₂-N

ΛΊΙ P Π PW -TVT £!_Ώ

Ο1Ι5»—O Ο—L»Ilp—IM Ο—Iw β Γ)

I JL- Ν«/ I! Ii

" ■ I CH₀CH₀-O-P-O-P-OR_x . ■·'

CH_x * * I 1 > ■ ■ ⁵ OH ORi

worin R'_x ein Glied ist, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Pheny!gruppe und. alkoxy-substituierten Phenylgruppen, und R_x ein Glied ist, ausgewählt aus der Gruppe, enthaltend aliphatisch^ Acylgrupp·, aromatische Acylgruppe, Alkylthiogruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen im Alkylteil, und die Gruppe

N-CH , ,

S-

^ OH OR'

worin R*_x die oben beschriebene Bedeutung hat, und durch Reaktion der letzteren Verbindung mit einer Verbindung der

Formel 0

Il
H₄-O-P-OH (IV)

¹ 1
• OH

worin R^ die oben beschriebene Bedeutung hat, in Gegenwart eines tertiären Amins mit anschließender Behandlung mit einer Verbindung, welche die Mercaptogruppe enthält.

Die Reaktion des erfindungsgemäßen Verfahrens kann durch die folgende Gleichung dargestellt werden:

009812/1778 - 5

BAD ORIGINAL

CH₂-C C-CH₀-N

M-Oh.

OH

S-R_{0 n}

CH₀CH₀-O-P-OH
OH

(II)

N=C-NH₂ CHO

CH-,-C C-CH₀-N^ ^ IMI \n_n'

,S-R,

0 0

N-CH

CHoCH^-O-P-O-P-OR-¹

IqUIIq

(in)

OH OR« 5

N=C-PIII-

CH₅-CC-CH₂-N

Ich

(D

^CH₀CH₀-O-P-O-P-OR

O 0

worin R^, R₀, R-, und RV die oben beschriebene Bedeutung haben«, '

Die erste Stufe des erfindungsgemäßen Verfahrens umfasst die Reaktion eines Thiaminderivabes der obigen Formel (II) mit Diphenylphosphorohalogenidat oder Di-(alkoxy-substituiertes phenyl)-phosphorohalogenidat in Gegenwart eines tertiären Amins _t um ein Thiaminderivat der obigen Formel (III) zu bilden. Bei Ausführung der

009812/1778 BAD ORIGINAL

- 6 -■

ersten Stufe v/ird ein Thiaminderivat der obigen Formel (II) in einem organischen Lösungsmittel gelöst oder suspendiert mit anschliessender Hinzufügung eines tertiären Amins, und dann wird Wasser von dem erhaltenen Gemisch durch bekannte Verfahren abgezogen, um das im v/esentlichen wasserfreie Gemisch zu bilden, zu dem ein Diphenylphosphorohalogenidat oder ein Di-(alkoxy-substituiertes)-phosphorohalogenidat hinzugefügt wird. Es tribb eine Reaktion der letzteren Verbindung mit dem genannten Aminsalz des Thiaminderivates der Formel (II) auf. Beispiele besonders geeigneter organischer Lösungsmittel sind niedere Alkanole, wie Methanol und Äbhanol, Amide, wie Dirnebhylfdrmamid und Formamid, zyklische Äbher, wie Dioxan, Dialkylsulfoxyde, wie Dirnebhylsulfoxyd und Diäbhylsulfoxyd, und organische Basen, wie Pyridin. Das in der ersten Sbufe verwendete bertiäre Amin schließt ein Trialkylamin, wie Triäbhylamin, Tributylamin, Tri-(isoocbyl)-amin, Tri-(n-ocbyl)-amin, Tri-(iso-nonyl)-amin und N.Nr-Didodecyl-N-n-bubylamin, und Dialkyl-monoaryl-amin, wie Dirnebhylphenylamin und Diäthylphenylamin.

Die Phosphorohalogenidat-Reakbanten können sein Diphenylphosphorohaiogenidab sowie Diphenylphosphorohalogenidat, das in jedem Phenylteil mit einer oder mehreren Alkoxygruppen mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen subsbibuiert ist. Beispiele der Phosphorohalogenidab-Reaktanfcen sind Diphenylphosphorochloridab, Diphenylphosphorobromldab, Di-(p-mebhoxyphenyl)-phosphorochloridat und Di-(p-äthoxyphehyl)-phosphorobromidat. Die Zeib und Temperatur der Reaktion sind keine kribischen Merkmale der Erfindung, und die Reakbion wird vorzugsweise bei Zimmertemperatur für 1 bis 5 Stunden ausgeführt. ' 009812/17 78

BAD ORrGINAL - 7 - -

Nach Beendigung der Reaktion kann das aus der ersten Stufe erhaltene Endprodukt, nämlich ein Thiaminderivat der Obigen Formel (II), durch eine der üblichen Methoden leicht zurückgewonnen werden, beispielsweise durch Entfernung des Lösungsmittels aus dem Reaktionsgemisch, und das so erhaltene Produkt kann für die folgende zweite Stufe des vorliegenden Verfahrens verwendet werden, entweder so wie es ist oder nach weiterer Reinigung mit Hilfe bekannter Verfahren.

i)ie zweite Stufe des erfindungsgemäßen Verfahrens umfasst zwei Abschnitte, die Reaktion des Thiaminderivates mit der obigen Formel (III), welches in der obigen ersten Stufe erhalten wurde, mit einem Phosphatderivat der obigen Formel (IV) in Gegenwart eines tertiären Amins, und die Behandlung des Zwischenproduktes aus dem ersten Behandlungsabschnitt mit einer Verbindung, welche die Mercaptogruppe enthält, um das gewünschte Produkt, nämlich Verbindungen der obigen Formel (I), zu erhalten. Bei der Ausführung der obigen zweiten Stufe wird das in der ersten Stufe erhaltene ©liarainderivat in einem geeigneten organischen Lösungsmittel gelöst oder suspendiert» und das erhaltene Gemisch wird mit einem Phosphatderivat der obigen Formel (IV) in Gegenwart

■ *

eines tertiären Amins und eines organischen Lösungsmittels behandelt, mit anschließender Behandlung mit einer Verbindung! welche die Mercaptogruppe enthält. Beispiele besonders

geeigneter organischer Lösungsmittel sind diejenigen, welche bei der obigen ersten Stufe erwähnt sind. Die Phosphatderivate der Formel (IV) umfassen Phosphorsäuren, wie Phosphorsäure und Pyrophosphorsäure, 5^l-Adenylsäure und ^'-Uridylsäure.

009812/1778 - ^b -

Die Mercapto enthaltende Verbindung, die in dem letzten Abschnitt der zweiten Verfahrensstufe verwendet wird, kann irgend eine Verbindung sein, welche die Mercaptogruppe ("SH) -#: in der Molekel enthält. Die Mercapto enthaltenden Verbindungen umschließen somit beispielsweise Hydrogensulfidj Alkylmercaptane, wie Methylmercaptan und Äthylmercaptanj Arylmercaptane, wie Thiophenol undoC-(oder ß-)-Thionaphthol; Mercapto enthaltende Aminosäuren, wie Cystein; und Thioglykolsäure. *

! Die Zeit und die Temperatur sind bezüglich beider Abschnitte der zweiten Stufe nicht kritisch, und es wird die

j Reaktion vorzugsweise während 1 bis 24· Stunden bei Zimmertemperatur im ersten Abschnitt und für eine Zeitdauer von

1 bis 4- Stunden bei Zimmertemperatur oder unter leichtem Erwärmen im zweiten Abschnitt durchgeführt·

^! Nach Beendigung der Reaktion kann das Endprodukt aus der zweiten Stufe aus dem Reaktionsgemisch durch irgend eine der bekannten Methoden zurückgewonnen werden, beispielsweise durch Entfernung des Lösungsmittels aus dem Reaktionsgemisch, und es kann das Endprodukt weiterhin durch ein bekanntes Verfahren gereinigt werden, wie durch die Entfernung von Verr unreinigungen mit einem geeigneten Lösungsmittel, Vie Methanol oder Äthanol, oder durch Behandlung mit einem Ionenaustauscherharz*

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele näher · erläutert.

009812/1778
BAD ORIGINAL

- Beispiel 1

Thiamin-O-trlphospfaat

Zu einer Suspension von 5 S S-Benzoylthiamin-O-mono-. -.- phosphat in Methanol-Äthanol werden 10 ml Tri-(n-octyl)-.. amin hinzugefügt· Das Gemisch wird zur Trockne eingeengt, der Rückstand wird in wasserfreiem Dioxan gelöst, und die Dioxanlösung wird erneut zur Trockne eingeengte Das vorbeschriebene Verfahren wird dreimal wiederholt, wonach eine Spur Wasser aus der Dioxanlösung entfernt wird.

Zu der wasserfreien-Dioxanlösung werden 3 ml Diphenylphosphorochloridat hinzugefügt, und nach Rühren wird die erhaltene Lösung 3 Stunden bei Zimmertemperatur stehengelassen. Das Lösungsmittel wird dann aus dem Reakbionsgemisch durch Destillation unter vermindertem Druck entfernt, der Rückstand wird mit wasserfreiem Äther gerührt, und dann wird die Lösung stehengelassen, wobei sich eine kristalline Substanz abscheidet, die dann durch !Filtration zurückgewonnen wird

ρ
und 6 g P -Diphenyl-S-benzoylthiamin-O-pyröphosphab als weiße pulverförmige Substanz ergibb, Analysenwerte:

Berechnet, für 0-,AL-O₀N_nSP- $ C=53,2Ö#; H=4,62#; N=»8,O2#;

Gefunden

Das üo erhaltene P -Diphenyl-S-benzoylthiamin-O-pyrophosphat (6 g) wird in Dimethylformamid gelöst. Zu der Lösung wird eine Lösung von 3»6 S Pyrophosphorsäure in Dioxan, das 3}ri-(n-octyl)-amin enthält, hinzugefügt, und das Gemisch wird heftig geschütbelt und dann über Nacht bei Zimmertemperatur

* I

stehengelassen. Das Lösungsmittel v/ird aus dem Reaktlons-

,00981271778

BAD ORIGINAL : * - 10 -

gemisch abdesbilliert, und der Rückstand wird mit überschüssigem, wasserfreiem Äther behandelt, wobei man 5»5 ß S-Benzoylfchiamin-O-triphosphat als weiße pulverförmige Substanz erhält» Das so erhaltene S-Benzoylthiamin-sO-triphosphat (5 g) wird in einem Gemisch von Methanol und Wasser (70:35) gelöst, und es wird 1 ml Thiophenol zu der Lösung hinzugefügt, die dann mit Natriumhydroxyd auf einen pH von 6,5 neutralisiert wird. Die neutralisierte Lösung wird auf einem Wasserbad auf 50 ⁰C erwärmt, 2 Stunden bei Zimmertemperatur stehengelassen und dann eingeengt, wobei eine kristalline Substanz zurückbleibt, die in Form langer Nadeln abgeschieden v/ird und unlöslich in Wasser und löslich in Äthanol ist. Die kristalline Subsbanz wird durch Filtration enbfernt, und die Mubberflüssigkeit wird gefriergetrocknet und ergibt 5,86 g pulverförmiges Thiamin-0-briphosphab mit einem Reinheibsgrad von 75 %* . -

1 g Thiamin-O-triphosphat wird der Behandlung mit einem Ionenaustauscherharz unterworfen und ergibt 0,57 g einer reinen Subsbanz, die mit einer authentischen Probe " durch Chromatographie identifiziert wird.

Beispiel 2 Thiamin-O-dipho sphat

S-Benzoylthiamini-O-diphosphat wird* aus S-Benzoyl- i

• ρ
bhiäininrO-monophosphat über P -Diphenyl-S-benzoylthiamin- .

0-pyrophosphat durch das gleiche Verfahren wie. in Beispiel 1 hergestellt.

Das so erhaltene S-Benzoylthiamin-O-diphosphab wird in das Thiamin~0-diphosphat mit einem Reinheitsgrad von 90*$

^v 009812/17 78 - Ί1 - * ^j

BAD ORIGINAL ^K ^

.-■ 11 -

"in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 übergeführt* Ausbeute: 55 #. Bas so erhaltene Produkt wird durch die authentische Probe durchChromatographie identifiziert.

'" Beispiel 5

(Phiamin-Q-tripho sphat

Zu einer Lösung von bis-(Thiamin-0-monophosphat)-disulfid (1MoI) und Tri-(n-octyl)-amin (4 Mol) in Dimethylformamid wird D'iphenylphosphorochloridat (6 Mol) hinzugefügt.

Das erhaltene Gemisch wird wie in Beispiel 1 behandelt

und ergibt bis-(P "Diphenyl-thiamin-0-pyrophosphat)-disulfid.

Das so erhaltene biS"-(P -Diphenyl-thiamin-O-pyröpho sphat)—disulfid wird in Dimethylformamid gelö st,, und zu der Iiösung wird eine Lösung von Pyrophoöphorsäure (8 Mol) in Dimethylformamid» welches !fci-Cn-octyl)-amiri enthält_# hinzugefügt· Das Gemiarch wird etwa 48 Stunden bei Zimmertemperatur gerührt· Das Heaktionsgemisch wird■; filtriert, und die Mutterflüssigkeit wird zur Trockne eingeengt, und der Rückstand wird mit wasserfreiem Äther Tsehandelt, wodurch sich ein weißes Pulver ergibt, das in Wasser gelöst wird· Die •wäßrige Losung wird wie in Beispiel 1 mit Cystein behandelt imd ergibt Thiamih-O-triphosphat, das ebenso wie in Beispiel Λ dujSicli .Chromatographie identifiziert wird.

"/ ": ■- ^{: :} " V ,■ Beispiel M '■- y .;.*-' ■·■-·-

^ ^ g) wird hergestellt

." aüö S-BeniioyXthiarain-O^mQnopliosphat (5 g) durch das gleiche , VeiJfahreii wie in 3e4splel Λ. '

009012/1778

bad j

Eine Lösung des so erhaltenen S-Benzoylthiamin-0-triphosphat in Methanol-Wasser (70:35) wird durch Hinzufügen ■ von wasserfreiem Natriumhydroxyd auf einen pH von 6,5 neutralisiert, und Hydrogensulfid wird 30 Minuten bei 40 bis 50 ⁰C durch die Lösung geleitet. Das Methanol wird dann durch Destillation unter vermindertem Druck aus dem Reaktionsgemisch entfernt j und der Rückstand wird in 20 ml Äther gerührt. Die wäßrige Schicht wird abgeschieden und durch Hinzufügen von 7 ml 80 #iger Ameisensäure auf einen pH von 2,7 angesäuert. Zu der sauren Lösung werden 20 ml Äther hinzugefügt, das Gemisch wird eine Weile gerührt, und die wäßrige Schicht wird abgeschieden und dann gefriergetrocknet, wobei sich rohes Thiamin-O-triphosphat als weiße pulverförmige kristalline Substanz ergibt. Das so erhaltene rohe Produkt wird mit einem Ionenaustauscherharz behandelt und ergibt 1,8 g einer kristallinen Substanz mit einer Reinheit von 85 bis 90 #, die aus verdünntem Äthanol umkristallisiert wird und das im wesentlichen reine kristalline Material ergibt.
Analysenwerte: -

Berechnet für C₁₂H₁₉N₄P₂P₂S^H₂O : C=26,15#j. H=4-,80#;

Gefunden : 0=25,85$J H«4,48#;

#; P«16,67#; H₂0=

Beispiel 5 ·

Thiamin-O-tripho spfaat ' ,

Eine Lösung von S-Benzoylthiamin-O-triphosphat wird aus S-BenÄoylthiamin-O-monophosphat durch das. gleiche Verfahren

009812/1778 . /

BAD ORIGINAL - 13 -

wie In Beispiel 4- hergestellt.

Zu der so erhaltenen Lösung werden 2,7 g ß-Thlonaphthol ' hinzugefügt, und das Gemisch wird 10 Minuten auf 50 ⁰G er-'■ wärmt. Die kristalline Substanz, welche in dem Reaktlonsge-Hiis'ch abgeschieden wird, wird durch Filtration entfernt, ' und es wird aus dem Filtrat das Methanol entfernt. Die zurückbleibende Lösung wird in der gleichen Weise wie in

- Beispiel 4· behandelt und ergibt 1,7 g Thiamin-O-triphosphat mit einer Reinheit von 85 bis 90 #. ■"■"",

Beispiel 6 _:

Thiamin-Q-triphosphat .

Das gleiche Verfahren wie in Beispiel 5 wird wiederholt mit der Ausnahme, dass 1,6 g Thioglykolsäure anstelle von 2>7 g ß-Thionaphthol verwendet werden, wobei man 1,8 g Thiamin-0-tr!phosphat mit einer Reinheit von 85 bis 90 % erhält, das mit dem des Beispiels 5 Identifiziert wird.

Beispiel. 7 ., Thiamln-adenosIn-diphospha b

P -Drpheny.l-S-benzoylthIamin-0-pyrophosphat wird aus S-Benzoylthiamin-O-monopho'sphät durch das gleiche Verfahren wie in .Beispiel 1 hergestellt.

2
Zu einer Lösung des P--Diphenyl-S-benzQylthiamin-O-py.ro-

- phosphat (1 Mol), welches v/ie oben beschrieben In Dimethylformamid, welches Tri-(n-octyl)-amin enthält> erlangt wurde, wird eine Lösung von ^''-Ädenylsäure (2 Mol) in Dimethyl-'formamid, welches Tri-(n-octyl)-amin enbhälb, hinzugefüg b, und das Gemisch wird e^wa 48 Stunden bei Zimmertemperabur

0 0 9^12/1110.
BAD iiIA"

stehengelassen. Das Lösungsmittel wird aus dem Reaktionsgemisch durch Destillation entfernt, und der Rückstand wird mit Äther behandelt und ergibt eine weiße gelartige Substanz, die wie in Beispiel 1 mit Cystein debenzoyIiert wird und Thiamin-adenosin-diphosphat ergibt; Rf-Wert = 0,41 (n-Propanol-0.5n-ammoniumacetat 5:2; Rf-Wert von Thiamin-

2 0-monophosphat: 0,55 und Rf -Wert von P -Adenosin-thiamin-0-monophosphat: 0,49).

Analysenwerte:

Berechnet für C₂₂H₅₀NqO₁₀SP₂CI*5H₂O : N=16,50#; P=8,11#.

Gefunden : N=16,26#; P=?,980.

Beispiel 8 Thiamin-uridin-diphosphat

2
P -Diphenyl-S-benzoylthiamin-O-pyrophosphat wird aus

S-Benzoylthiamin-0-monophosphat (12,5 g) durch das gleiche Verfahren wie in Beispiel 1 hergestellt.

. Zu einer Lösung des in oben beschriebener Weise erlang-

ben P -Diphenyl-S-benzoylbhiamiri-O-pyrophosphat in Dimethylformamid, welches Tribubylamin enbhälb, wird eine Lösung von 17,5 S 5'--üridylsäure in Dirnebhylformamid, welches Tribubylamin enbhälb, hinzugefügt, und das Gemisch wird 2 Stunden bei Zimmerbemperabur stehengelassen. Das Lösungsmibbel wird aus dem Reakbionsgemisch durch JDesbillabion entfernt, d'er Rucks band wird in v/äßrigem Methanol gelöst, und die Lösung wird mit Cysbein behandelt und ergibt ^O g rohes'

P -Uridin-bhiamin-O-diphOsphat als weiße pulverförmige Substanz* ■ '

009812/1778 - 15 -

BAD ORIGINAL

Pie so erhaltene Substanz wird mit Döwex-1 (in der Chloridform j Warenzeichen eines Aniorienaustauscherharzes, hergestellt und vertrieben durch die Firma Dow Chemical Company) behandelt· und ergibt 4,5 S reines Thiamin-uridindiphosphat als weiße pulverförmig« Substanz, die durch Elektrophorese charakterisiert wird.

Patentanspruch;

.: - '■"" ; ... ..-.;■ ..■-■-,■■■/■■■- 16*-- 0 09812/17 78

Claims

Pat ei t

¥erfalaren zur Herstellung einer Verbindung der.

Formel" . '

g * 0 0

■ I X |j_s G ' 1 ■ Ji

U-GH j, x_G„ GH₀-O-P-O-P

0 Ji

j ₀P

GH, ^ ^ Ϊ 1 3

i" worin E- ein Glied ist, adfsgewälalt aus der Gruppe, !bestellend

aus Wasserstoff, der Gruppe -P-OH , 5^s~Adenosin and

5j dadurch. gj6ke3Mzeidanetr₉ dass-eia© i ; J?0rmel ; - - ' "^; - ". " " -

I worin Ep ein Glied ist, ausgewählt aus der Gruppej entnal-

f ^; - ■■ ■■" ■■':'■ Λ ■■"-■■■'■ \ tend alipnatisclie Acylgruppe, aromatisclie Acylgruppe, AUkyl-

mit 1 Ms 5 KoMeiasttiffatomen Im V Gruppe

ßS₃-G
³ t G-GH
I - . - - -- §. - _: ^XC
OH^ 008812i
BAD i mg mg ■■ f-1 T7 8
ORSeiNAL

OH

, - ι?-. 1Μ0258

.zur Reaktion gebracht wird mit einer Verbindung, ausgewählt aus der Klasse, enthaltend Diphenyl-phosphorohalogenidat undDi-(alkoxy-substituiertes)-phenylphosphorohalogenidat in Gegenwart eines tertiären Amins, zur Bildung einer Verbindung der Formel

*i om

η " ^ G-G H IJmQH * "" ^v -- - — - —

cc i| H

I NCH₀CH₀-O^P-Q-P-ORi Au d d , \ 5

CH,

OH ORi

worin R', ein Glied ist, ausgewählt aus der Gruppe* bestehend aus Phenylgruppe und alkoxy-substituiertenPhenylgruppen, und R, ein Glied ist, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus aliphatischer Acylgruppe, aromatischer Aöy!gruppe, Alkylthiogruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen im Alkylteil und der Gruppe

C C-GH₀-N S- η λ

CH₀CH₀-O-P-O-P-OR' Q_Rr

worin R', die oben beschriebene Bedeutung hat,und dass die letztere Verbindung zur Reaktion gebracht wird mit einer bindung der Formel · '

. "■:■ 0 ■'" ^:"- ■"■- ■ ^: Λ. '

·■'■■■■■ ti ■-:■■ -^:

R₄-O-P-OH -

■■-■■■...■ oh ' }■ ■ _ ■ _; ν ..-"ν.. -;■".

«- 18 -

worin R,. die oben beschriebene Bedeutung hat| in Gegenwart; eines tertiären Amins, mit anschließender Behandlung alt einer Verbindung, welche die Mercaptogruppe enthält·

009812/1778

BAD ORIGINAL