DE1445835A1 - Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinderivaten - Google Patents

Description

Verfahren zur Herstellung von Cephaloaporinderivaten

Die Erfindung betrifft Verfahren zur Heretellung von Antibiotika und insbesondere von Derivaten des Antibiotikums Oepheloaporin C, dae folgende Struktur besitzt.:

R-NH.

T ! I

.CH₂OAc

worin B die Oruppt HOOCCH(HH₂)(GH₂)^CO- darstellt, d.b. dlt α-Aeino-adipinoy!gruppe.

Cephalosporin O wurde bereite in die ?~Amltto-cepbeloBporan~ säure (7-ACA) überführt, und das erhaltene Amin wurde alt verschiedenen Aeyliernitteln unter Bildung von 7-AcylaMido-Analogen dee Cephaloeporia C mit verbesserter oder nodifisierter Aktivität acyliert. Beiapielsneiee besitzt die durch Umsetzung

▼on 7-ACA mit einem Fhenylacetylhalogenid erhalte»e 7-Phenyl-. 809»«2/0897 _tAD original

acetamido-ecpnalosporcnaäure (7-PAC) tin« weit grS6«re Aktivität gegen bestimmtβ Organismen, ale dies bei Cephalosporin C der Fall ist, Auf diese Weise kann man Verbindungen der Formel I herstellen, worin R eine andere Acylgruppe bedeutet, ale die a-Aminoadipinoylgruppe, Die Aktivität der Verbindungen gemäß formel I, worin R eine Acylgruppe, eine a-Aminoadipinoylgruppe oder eine andere Gruppe ist, kann weiterbin durch Umsetzung mit einem nu'Ie ο ph ilen Mittel modifiziert werden, durch welches die Acetatgruppe an der außerhalb dee Ringes stehenden Iiethylengruppe ersetzt wird. Verbindungen dieser Art lassen sich durch folgende Formel wiedergeben.

R₁-NI

worin E; eine Acylgruppe und Z den Reet des nucleophilen Mittels bedeuten.

Beispielsweise kann Z die Fyridiniumgruppe sein und S₁ die Fhenylacetylgruppe, d.h, die Verbindung der folgenden Formel

°6^H5^GH2^ÖOa2iiL

III

§Q0§Q2/OS®7

Diese Verbindung wird beispielsweise durch limeeissung Ton Pyridin mit 7-PAC in einem wäßrigen Iledium erhalten»

Z kann auch den Root «ines nucleophilen !litte Is darstellen, wie sie in der belgischen Fatentschrift 61? 687 beschrieben Bind, in der die Verwendung verschiedener nucliopbiltr Uitttl mit schwefelhaltigen Gruppen behandelt iet.

Verbindungen der Formel IT, worin Z Pyridinium oder ein substituiertes I^ridinium bedeutet, besitzen Interessante antibiotische Aktivitäten, jedoch führen die vorliegenden Verfahren für deren Herstellung nur eu niedrigen Ausbeuten an dem gewünschten Endprodukt. So führte die Umsetzung von 7-PAO alt Py rid in lit wäßrigen Lied i en geuüQ dem Verfahren nach Haie, Hewton und Abrehaia, Biochem.J., 1961, Band 79, Seite 403/ nur eu Ausbeuten von etwa 22 '/**

Andererseits kann die tTaaetzung von 7-Acylamido-oephalosporaoofeuren mit schwefelhaltigen nucleophilen Uitteln eu höheren Ausbeuten führen, jedoch besitzen die erhaltenen Verbindungen den Nachteil einer geringen Löslichkeit in Wasser, was deren Bedeutung aia Antibiotika für praktische Zwecke erheblich vermindern kann. Veraucbe, den schwefelhaltigen nucleophilen Rest in diesen Vorbinciur^^en durch ein nucleophiles Hittel voe idin-Typ z\x ersetzen, "brachten wenig Erfolg.

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Ea wurde nun gefunden, daß dieses Ersetzen durch Verwendung bestimmter Metallsalze erleichtert wird. Die erhältlichen Pyridinium- oder substituierten Pyridinlumderivate des Cephalosporine lassen sich dann in mindestens Gleich guten und meiot besseren Ausbeuten erhalten, als sie durch direkte Umsetzung erhalten werden ,

Das erfindungsgemäße Verfahren zur Herstellung von Derivaten des Cephalosporins der allgemeinen Formel

-CH,

./Λ

IV

worin R₁ eine Acylgruppe bedeutet, oder von analogen Derivaten, in denen der Pyridinring durch eines oder mehrere Atome oder Gruppen substituiert ist, besteht darin, daß eine Schwefelverbindung der allgemeinen Formel

R₂-NH

-CH₂-S-Y

worin Rg eine Acylgruppe oder ein Waaseretoffatom, die Gruppierung -S-Y, den Rest eines nucleophilen Mittels und I «Ic Kation bedeuten, mit Pyridin oder einem im Ring substituierten idin, dem sogenannten "Pyridinroagens", in einem Reaktiona-

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■ediua umgeaetat wird, in dta tin Sale τοη Queckeilber, Silber oder ©old gelöit wird, welcbea «it der Gruppierung -S-Tf in Xomplcxbindung treten kann und in Wee·er ionleiert, wobei die erhaltene Verbindung, falle B₂ Wasβeratoff bedeutet, anschließend acyliert wird.

Der Beat X kann aus Waaeeretoff, einem Alkalimetall, de« Ammoniumreat oder einen quaternären Ammoniumreat beeteben,

E₈ ist su bemerken, daB die Gruppen B₁ und B₂ für daa trfindungagemäSe Verfahren relativ unwichtig aind, da die Tfaeetiun an der außerhalb dea Ringeβ etehendeu Uethylengruppe etattfindet.

Schwefelverbindungen

Sie Verbindung gemäd foratl T kann durch Oeuietaung einer Verbindung der ellgteeiaea yojwel ; ν . _νΛ

worin B₂ und X die Yoretebend angegebenen Bedeutungen beeitsen, alt eine« eonwefelbaltlgen nucleopbilea Mittel (YSH oder eines SaIa davon) oder aua einem enteprechend aubatituierten

·Ο9ίΟ2/Ο09Τ

Cephaloaporin-Vorläufer, beispielsweise unter Verwendung dea Verfahrens gemäß der belgischen Patentschrift 621 452 hergestellt werden_;

Zu άβη schwefelhaltigen nucleophilen Mitteln, die verwendet werden können, gehören die in der belgischen Patentschrift 617 687 beschriebenen, d.h. Thiosulfate, Thiole, Thioharnstoffe. Tbloomide oder Thiophenole. Von diesen wurden besondere gute Ergebnisse bei Verwendung von 2-lIerkapto-pyrlmidinen, beispielsweise 2~ilerkapto-4~ffletbylpyrimidin und Alk&lithiosulfaten, erzielt,Es können auch die in der belgischen Patentschrift 637 547 beschriebenen Ditbiooarbamate verwendet werden oder Verbindungen der Formel H*Ά·Μ oder £*.SOgSH/ worin Z Schwefel oder Sauerstoff und R, eine aliphatische, araliphatisch©, heterocyclische oder beterocycliacb substituierte allphatische oder Ärylgruppe oder lösliche Salze davon bedeutet. Andererseits kenn man auch Verbindungen der Formel AIk-O.QMB oder lösliche daljse davon verwenden, wobei Alk eine Alkylgruppe wiedergibt,

Besondere gute Ergebnisse wurden mit nucleophilen llitteln der letzteren Art und insbesondere mit Thiobenzoesäure und deren Alkallsalzen, beispielsweise Natriumthiobenzoat, i&it Verbindungen der Formel

N
HS. CO—L

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worin die HS.CO-Gruppe in der α-, ß- oder γ-Stellung, jedoch Vorzügeweise in der α- oder γ-Steilung gebunden iet und worin R. eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder einen angeschlossenen Benzolring bedeutet und η die Zahl 0, 1 oder 2 darstellt, sowie dft? Alkalisalzen davon, z.B, Thioplcolinsäure und Natriumthiopicolinat_vVerbindungen der Formel

HS.CO(CHg)₁₁₁ W-. _4_ (R₄)

worin m die Zahl 0 oder 1 und Q Sauerstoff, Schwefel, NH oder N-Alkyl (C- bis C₄) bedeuten, während R, und η die vorstehend angegebenen Bedeutungen besitzen, und deren Alkalisalze, beispielsweise 2-Thiolcarboxymetbyltbiophen und dessen Natritmerbalten salj/. Palls Q die Gruppierung HH bedeutet, kann es notwendig sein, das Wasserstoffatom während der Herstellung der Thioeäure zu schützen. Ea wurde gefunden, daß diese nucleopbilen Mittel hohe Ausbeuten der Verbindungen entsprechend Formel ? erbringen.

Die Verbindungen der Formel V können auch nach den in den belgischen Patentschriften 617 C87 und 637 547 beschriebenen Verfahren hergestellt werden,

Acy!gruppen

R₁ bedeutet ganz allgemein eine Acylgruppe, bo daß man spezifische Acylderiv8te verwenden kann, für die Alkanoyl-, Alkene— yl-, substituierte Alkanoyl-, beispielsweise Aralkanoyl-, Aryloxyalkanoyl-, S-Arylthioalkanoyl- und S-Aralkylthioalkeno-

809902/0897 _0BS1NAL

ylgruppen und dergleichen Beispiele eind. Unter diese Acylderivate fallen auch diejenigen der folgenden allgemeinen Formeln:

1.) R¹CCH₂) CO, worin R¹ Phenyl-, Cycloalkyl-, substituierte Phenyl-, oubatituierte Cycloalkyl- oder 0-, K- oder S-Gruppen, insbesondere 5- oder 6-gliedrige monocyclische heterocyclische Gruppen bedeutet und η eine ganze Zahl von 1 bie 4 darstellt. Beispiele dieser Gruppen eind Pheny!acetyl-, Nitrophenyleeetyi-·» thenylpropionyl-, Cyc Io pe η ty lace ty ί-, Thienyl-2-acetyl-, Thienyl-3-acetyl- und Cyclohexylacetylgruppen.

2..) ^c _n ^H2n+i^C0^ ^{worin n eine} ganze Zahl von 2 bis 7 darstellt.

Die Alkylgruppe kann geradkettig oder verzweigtkettig sein

durch

UTiJ kann gegebenenfalls/ein Sauerstoff - oder Schwefelatom unterbrochen Bein oder durch eines oder mehrere Halogenatome substituiert sein? Beispiele für derartige Gruppen sind Hexanoyl-, Heptanoyl-, Octanoyl- und Butyltbioacety!gruppen.

_ri2n-1 worin η eine ganze Zahl von 2 bis 7 darstellt Me iilkeny!gruppe kann geradkettig oder verzweigtkettig sein und gegebenenfalls durch ein Sauerstoff- oder Schwefelatom unterbrochen sein. Beispiele für derartige Gruppen eind Aerylyl-, Crotonyl- und Allylthioacetylgruppen..

R^f
4..) R¹O CJR¹¹R¹"-CO-, worin/die unter 1.) angegebene Bedeutung besitzt oder eine AÜkylgruppe bedeutet und R" und R**, die bleich oder unterschiedlich sein können, Y/ass er stoff atome

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oder Alkyl-, Aryl- oder heterocyclische Gruppen bedeuten. Ein Beispiel einer derartigen Gruppe ist die Phenoxyacetylgruppe·

5.) R¹SCR¹¹R¹^CO-, worin R¹, R" und R^nt die vorstehend angegebene Bedeutung besitzen. Beispiele derartiger Thlogruppen elnd S-Phenylthioacetyl-, S-Chlorphenylthioacetyl- und S-Bromphenylthioacetylgruppen-

6.) R^I(CH₂)_JBS(CH₂)_nCR^MR^Ml.C0-, worin R¹, R^M und R^MI die vorstehend angegenenen Bedeutungen besitzen, m eine ganse Zahl von 1 bis 4 und η die Zahl 0 odor eine ganze Zahl von 1 bis 4 darstellen,, Beispiele derartiger Gruppierungen sind ß-Benzylthioacetyl-, Benzylthiopropionyl- und ß-Phenfltbylthioacety>-gruppen.

7.) R¹CO-, worin R* die vorstehend angegebene Bedeutung besitzt. Beispiele derartiger Gruppen sind Benzoyl-, substituierte Bensoyl- und Cyclopentanoylgruppen.

Im allgemeinen wird es bevorzugt, daß der Rest R₁ aus den Acyl·» gruppen des Abschnittes 10 gewählt wird«

Bs soll jedoch erwähnt werden, daß gegebenenfalls der Rest die a-Amino-adipinoylgruppe, d.h. die Acy!gruppe des Cephalosporin C, oder irgendeine andere Acylgruppe, die eine Amino-

gruppe enthält, beispielsweise die in der belgischen Patentschrift 635 137 beschriebenen, darstellen kann.

8QÖ902/0ÖÖ7 BADOBiGiNAU

- ίο -

Pvridin-Reagentien

Bei dem erfindungsgemäGen Verfahren kann man im Ring substituierte Pyridine anstelle von Pyridin verwenden, und Beispiele derartiger substituierter Pyridine sind α-, fl- und γ-Picolin, die lutidine, Nicotinamid, Isonicotinamid, Nicotinsäure und Isonicotinsäure und deren Ester. Das Pyridin-Reagens sollte vorzugsweise keinen ocnwefel enthalten. Palls die Gruppe R₁ ein Schwefel- oder Ilalogenatom enthält, kann das Pyridin-iieagene auch die Gruppe R₁ angreifen.

Die genaue Art des Pyridin-Reagenβ bangt von der Art des gewünschten Endproduktes ab und dessen antibakterieller Eigenschaften, Z„B. kann das Pyridin-Reagens aus Pyridiqfeelbst besteben, oder es kann eines der folgenden Formel sein:

worin R,- eine niedrige Alkyl-, Carfeamoyl-, H-Iiono-niedrigalkyl-carbamoyl-, Ιί,Ν-Di-niedrig-alkyl-carbamoyl-, Niedrigalkoxycarbonyl-, Hydroxy-niedrig-alkyl-, N-(Hydroxy-niedrig-. alkyl)-carbaraoyl- oder Carbamoyl-niedrig-alkyl-Gruppen bedeutet und ρ die Zahl 1, 2 oder 3 darstellt. Hit den Ausdrücken "Niedrig-alkyl" und "Medrig-alkoxy" sind Gruppen mit 1 bis 6, vorzugsweise 1 bis 2 Kohlenstoffatomen zu verstehen. I?aa Pyridiniaolekm kann mit 2 oder mehr unterschiedlichen Arten der Gruppen R^ substituiert sein.

• 09002/Oit?

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Metallsalze

Han kann Salze von Silber, Quecksilber oder Gold verwenden. Besondere bevorzugt wird die Verwendung von Queokellber-XI-Salzen (Hg**). Die Wirksamkeit der Umsetzung hängt auch von anderen Faktoren eb einschließlich der Art des Anions des Salzes, der Art der Kationen, die es in wäßriger lösung ergibt, und von der Löslichkeit dea Salzes in Wasser.

Das ilatallaalz ist vorteilhaft eines der Formel HgD₂ oder HgD, welche Hg"*"*-und/oder HgD^f-Kationen, vorzugsweise das erstere, in wäßriger Lösung ergeben, wobei D*" ein schwach nucleophilee Anion ist; oder ein gleich-wirkendes Salz Hg_nE₂ ^von Quecksilber mit einem zwei- oder mehrwertigen Anion, worin E ein nwertiges Anion daratellt, wobei η die Zahl 2 oder größer bedeutet, oder ein Salz der Formel AgJF*, worin P ein m-wertigea Anion von schwach nucleopbiler Art darstellt und m die Zahl 1 oder darüber bedeutet.

Daa Anion des Salzes sollte praktisch gegenüber der Verbindung V und insbesondere gegenüber der Gruppierung -S-Y unter den Reaktionabedingungen nicht-oxydlerend sein, und es sollte vorzugsweise ein Anion einer starken Säure, d„h₀ einer Säure mit einem pKa-V/ert in wäßriger Lösung von weniger als 2 sein,* um die Ausbildung der gewünschten Kationen zu erleichtern,,

Nucleophile Eigenschaften des Anions können mit denjenigen dee gewählten nucleophilen Mittels in Konkurrenz treten; deshalb

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let ts wünechenewert, daß daa Anion eine nucleophila Konstante besitzt, die kleiner iat als diejenige dea Acetatione für übliche nucieophilp Ein-Stufen-Eraetsung in wäßrigen !ledten an einem Setraedriechen Kohlenatoffzentru« (eieht z.B. Hin», "Phyaical Organic Cheeietry", McGraw-Hill₉ 1962, Seite 159 *!· 161). Quecksilber-II-ilalze mit Anionen mit einer nucleophilen Konstante „ die niedriger iot ele dee Acetat, beschleunigen Im ellr.emeinen raoch die Umsetzungen der gewünschten Art. Die Löslichkeit dtc ealzea in Vteeaer ist ebenfalls ein nichtiger Aktors Queckeilber-11-sulfat gibt Anlontn In V/aeaer alt einer nucleophilen Konstanten, die geringfügig niedriger let ale diejenige des Acetates, ist jedoch in V/aaaer weniger löslich als Queck-8ilber~II~8cetat, und es wurde gefunden $ daß ee ale Promoter beiß Ersetzen des Thiobenzoylreatea unterlegen let, Queckeilber* II- und Silberealze mit den voratehend angegebenen Elgtnechaften sind z,Bo die Perchlorate. Nitrate, Trlfluorseetat und Totra.-fluorborate« Auch Quecke!iber-I-perchloret beeitet die gewünecbten Eigenachaften-

Das Iletallsalz sollt® in einer llenge Terwendet werden, die mindeatene äquivalent zu derjenigen der "Verbindung der Formel T ist, und es wird" giinatigerweise in einem mehrfachen ÜbereehuS verwendet, beiapieleweise 2 bis 5 Äquivalente.,

Anateile der Verwendung des lletallsalzes und einer Verbindung der Formel V kann man ein Salz eines entaprechenden Iletallea mit der Verbindung der Formel V. verwenden, a.B, das Silbersalz,

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«ad ilt»·· kann vorgßtoTmt aein odar in ti tu la de« ttakti onegeaiach gebildet werden.

De dit Jyridin-Reagentien mit den Hetallaaleen unter Bildung gut ausgebildeter Komplexe reagieren, können dieae Komplexe •naUlla ύtr aineelnen Uetallaalae verwendet werdan, Beiapielsveiee aataen aich Pyridin und Queckailber-II-perchlorat in Vaaeer unter Bildung einer Verbindung u», die »abracbeiBlich folgende Struktur hat ι

Ö-—O

(ClOJ)₂

Dia Terwendung derartiger Komplexe kann gegenüber der Verwendung der einfachen Uetallealse dann Torteilbaft aain, wenn die letsteren dazu neigen, aicb in wäßriger Löaung zu zereet- sen, da ee dadurch ermöglicht wird, die Konzentration des Metallioaa genau eu regeln.

Reaktipnabad ingungen

I. WtBrig

Im allgemeinen wird Wasser ala daa Reektionsmedium bevorzugt, obwohl dae Y/aseer auch in die Reaktion eintreten kann und als nucleophilea Mittel mit dem Pyridin-Reagens in Konkurrenz tre ten kann» Obwohl die ümaetzung unter nicht-wäßrigen Bedingungen »it beachtlichem Erfolg auageführt werden kann, scheinen

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utsess

die beaten QtaaatcucbtnttD» wtaa asdtrc faktor« siebt verändert wardto, er&lelt au warden, «tan faaaer al« Etaktionamedium verwendet wird, vermutlich deawegen, well dlee die Bildung der gtwünachteii Uetalisalekafionen erleichtert, welche wiederum wesentlich für den l?felg der Ueaetstuig su βain acheinen. Dqs Vaettr kasn «u de& anderen !taktlose tellneliatni entweder ala wäßrig« Iöiusg dt· J^ridlD-Äeecece eier dta Uetallealsee zugegeben werden· Tslla daa Pyridin-Reagene in faaaer wenig löslich let, tödeso sit laaaer aitobber* orgcslacbe IHaungeBittel verwendet warte», um die Ifieliehkeit su verbessern. Vorzugawaiae wird die Uefeteuag bei einer Teeperstur in Bereich vo» 20 bia 100*C auagefUbrt, wobei dtr Bereich von 35 bis 70*0 beaondere wirksam let, Die Umsetzung kann im allgemeinen in kUrserer Ztit aueg·führt werden, ala ea bei der direkten Ersetzung der Acetatgruppe möglicfc iat. Siea Terslnderi die acbüdlient Wirkimg dta Pyridia-Reegene auf das gewünechte Produkt.

Verlauf der tJoeetzung Ulfit ticb öurcb Papierelektropboreae verfolgaa. Sit Ytrbinduagen im? formel 17 eio4 oermalerweiae Betaine, Jedoch verbalten ait eicfc während dtr Pro ton ie rung bei Pj₁ ¹t9 ala achwacbe Baatn, so <9*? «la ·ύ» den Hohgemiechen durch PepierelektroPhoreat ftbgttrtsnt v/erden können. Die Fraktionen la θ β en sich als dunkle flecken feststellen, wenn das Papier unter Ultreviolettlicht betrachtet wird; die Zone kann dann ausgeschnitten werden, mit Wasser ausgespült und die Menge des Betaine durch die Ultraviolettabßorptlon der wäßrigen löeung bestimmt werden. Alle

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beispielsweise der Reet R₁ In der formel ZT eine Thitnylacetylgruppe darstellt, dann gibt dae Terbältola der optischen Dichte bei 24Ob Ai zu derjenigen bei 255 «/U ein KaS für die Reinheit der Fraktion an: bei dieeem βpeeleilen Betain sollte das Verhältnis 1_%09:1 sein,und der Wert für ^Eicm ^{ö0llte 584 bel 24}° ■/* u»* 351 bei 255 «yu betragen.

Noch beendeter Urneβtrübg enthält daa Produkt ein Sale dee Res tee der Gruppierung -S-Y, das abfiltriert werden kann. Eventuell übriggebliebene Metsllionen können durch Ausfällen beispielsweise in Form ihrer Sulfide mittels HpS, entfernt werden. Die gewünschten Endprodukte eind in V/aeeer löslich und können von sauren Verunreinigungen durch Durchleiten durch ein Anionenaustausehbar« befreit werden« Sie wäßrigen üluate können dann durch Gefriertrocknung und dergleichen konzentriert werden, und der Rückstand kann durch Umkristalli sieren gereinigt werden..

Zb Hinblick auf die Tatasche, daß die Quecksilber-, Silber* oder Goldeal*e für den Erfolg der Ueaeteung notwendig eind, und ebenso auf Grund der Tatsache, daS diese Salsa io&iech zu wirken scheinen, war es überraschend, aufzufinden, daß die Umnetzung in praktisch nicht-wäßrigen organischen Medien ebenfalle durchgeführt werden kann, ganz gleich, welchen Grad νου Polarität daa organische Medium hat. Die Heaktionsbedin* gungen und Reagentien oind aneonaten im allgemeinen so, wie

sie vorstehend beschrieben wurden. Jedoch kann dta Uaaetsung bei irgendeiner Temperatur bis hinauf sun Siedepunkt dee Beaktionsgemisches ausgeführt «erden, soweit dieβ natürlich alt der Stabilität der Reagentien vertraglich iat. Auch der Verlauf der Uneetsung kann elektrophoretisch, «la Toratebend beachrleben, verfolgt werden.

Zu den verwendbaren Medien gehören b,B. Sfcurenitrile niedriger Alkansfiuren, r.B. Acetonitril oder Propionitril, halogeaierte Xohlenwafi8eretoffe_t ζ ,B. Uethylanchlorid, Tetrachlorkoblenetoff, Chloroform, Äthylendlcblorld oder Percblore/thylan, niedere Nitroalkane, a,B. «itroaethan, aroaatieoba litroverbindungen, r.B. Hltrobimol, cycliicbe Äther, i,B. Dioxan oder Tetrahydrofuran, Aaide der allgeaelnan ?or«el H^.CO.IH-,H^, worin Hg ein ifeaaeratoffatoB oder aina Alk/lgruppe alt 1 bie 5 Kohlenstoffatonen und R- und Hg, dia gleich oiir unteraohiedllch sein köanan, Waaaaratoffatoaa oder Alkylgruppan alt 1 bit 5 Kohlenstoffatoaen bedeuten, oder worin andereraeite JU und S₈ eine awei«@rtlge alipbatiaeha Gruppe liildea ktfaeaa, welsbe alt den benachbarten Stlckatoffatoa alnan bataroejoliacban Hing bilden, fielapiele für Aaldt dieaer Art alsd 1,1-Biaathylforeaffiid, Η,Η-DlÄthylforBaeii, I,I-J)iaathylÄcatajil«_t fcraaald und N-Urthyiforaaaid. Andere Löeungealtttl, die verwendet werden können, aind a.B. K-Hiedrig-alkyl-pyiTolideae, baiapieleweiee lM"ethylpyrrolidon und Dl-niadrig-alkyl-aulfoxyde, beiapielsweise Dimethyleulfoxyd., obwohl daa letitere explosive G_enii_echci mit Quecksilberperchlorat bildet.

809902/OÖÖf *^°

Pyridin-Beagsntien können als solche ala Reaktionamedium ver wendet werden, vorausgesetzt, daß ale bei der Reaktionstempe ratur flÜBiig aind>

ist nicht erforderlich, daß das Rdaktlonaaedlum bei Raumtemperatur flüssig let. Featatoffo, is.B, Aoetamld, können verwendet werden, β of em aie bei der Reaktionatemperatur flüaeig sind ,

lomplexe von fyridia-Reagentien und Uetallaalse%k8an9n ait Vorteil in nicht-wäßrigen Uedienauf Orund ihrer Ie allgemeinen darin verbeeeerten LöeHenkelt vorwendet vrden«

In der Praxis kann die Verbindung V in dem gewählten Uedium, das daa Pyridin-Heagena, voreugaweiae is Uberaehufi, tüx die Reaktion enthält, gelöst oder auapendiert werden, wobei ein Gemiecb im Verhältnis 1:1 von Fyridin-&eagena und dem gewählten t!edium im allgemeinen eufriedeneteilend 1st. Sin SaIs, beiapieleweiae Queckallberpercblorat, inabeaondere Utrouripar» ohiorat, wird zugegeben; 2 Molekularäquivalent· davon gegenüber 1 der Verbindung II sind ausreichend_t und ea iat im allgemeinen ratearn, dieaea Verhältnia unterhalb 6:1 tu halten· Die Reaktion kann bei etwa 50* auegeführt werden.

Bei dem vorstehend angegebenen Verhältnis von 2:1 fällt die Hauptmenge dea Quecksilbers aus, und welters Stufen, «.Β. Einleiten von Schwefelwasserstoff, eu seiner Foifstrung lassen eich vermeiden. Las fyridiniumderivat k&n» in eiemlioh

reinem Zustand mit besser extrahiert werden, usd des iH?«r« schüsalge Pyriöin-Refagens wird durch lüok®aitraktioa_f s.3* mit Llethylendicblorid, entfernt. Ionische Verunreinigungen közmen aus der wäßrigen Paaββ mit g©eignetan Austaueobern entfernt werden; nach der Verdampfung binierfeleibt dann daa Betein als Rückstand, ode* ea keim auch ale 3©1κ tiureb Ztigsbo aia©r Säure, z*B. Salpetei'säure oder Perchlorsäure, auegeföllt «eiv Om, wie in dar ,^Xglaoho Fftfeeateoto^ift 6S5 ^73

Die folgenden Beispiele dienen Eur weiteren ErlSuterusg der 'Άτϊjndung, ohne eia zu begrenzen,- In den Beiepielen. sind die Verbindungen unitar Bezugnahme auf öi© Substanz Oeph&m beachri«- b@n, d,h', nach .folgender Formel

Präparote 1

Herstellung tom fbiosäuren und ihren

Aus den Säarechloriden nach den ang@geben@n Verfahren für Thiobenzoeeäure (Organic Syntfessls, 1952₉ ^2, 101}_ffür TbIo asieinsäur® (Block und Bergmann» Bsriobte, 1920_ö §J_, 975), für p-»Mitrob®rigoöääsir@ (Kfeelettskli uad YaaoTFitekaja, Jeden-

- 19 -

ChenuuSSH., 1949» Ü, ¹¹93ϊ CA., 1950, $£, 2952), für 2-Tbio« ί uransäure (Patten, J Am.Chem.Coc, 1949, H, 3571),fUr Ihionicotinsäure (Böhm und Ulcheloki, Roczniki Chem., 1954, gjj., 501).

Methode f>:

Aus dem ßemlechten Anhydrid mit Chlorameieentftureäthyleater «le duroll Cronyn und Jui (J.Am-,Chtn,Soc., 1952, J±, 4726) beschrieben.

Die Eigenschaften dtr Thioeäurtn oder deren Salt· sind nachfolgend in labe11· I zueaaotngefaet,

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2Γ-τ Ln-	OO	I	c ',	Formel	Ver fah	■bfamela- Punkt	λ max. ΐημ	ε	930 500	Ü	■	4	Gefunden	2	H	9	S"	4	Empirische Formel	!· 'ι ϊ	0	50.	Berechnet	M	7	—	.6	S.
mg r*	O co			ren		261 293		200 460	50.	51	2	H	3	-	3	16.	1		i 0		58.		3.	1	8	.9	15.S
	CO" CJ ro·	£-0Η,0»C6H4COSNa	A		245 290-1	9, 11,	350 750	59.		2	3.	4	8.	0	19 ο	3	C8H7O2SSa			47*	5	3.	0	6	.5	19.7
	OO	2-CH-C6H4COSH	A	~	243 290	17, β,	070	47.		5	3.	0	7.		16.	8	C8H5NOS		0	39.	9	3.	35	6		15-8
I	co	2-CN-C6H4COSHa	A	'-	249	17, 6,	350	39.	4	2.	.5	7.		14.	3	CnH.HOSNa.H5O 0 4 £		0	49.	3	2.	9	-		15.C
	£-N02.C6H4COSNa	A	90-1	259	13,	800	49.	.0	2.	9	-	4	16.	8	C7H4NO3SNa^-H2O		46.	25	3.	4	—	.1	16.5
2-CH3CC6H4COSITa	A	174-5	258-9	6,	180 000	47	8	4.	3	-		30.	9	CgH7NaO2S^H2		51.	4	3.	6	10		31.1
0-CHxS.CCH.COSHa — 3 ο 4	A	—._	263-4 311-3	9ρ	750 300	51.	,5	3	8	10.		22.	5	CgH7OS2Na		Η»	6	3.		Γ		23.0
^ >>- COSH	3	130-1	258 308	6, 4,	080 600	34.	.3	3.	,0	—	8	34.	1	CcHcNOS 0 ο	37c	8		5	—	.4	36.6
^Tr- COSHa ILJJ	A		260-1 300	9, 8,	600 100	38	.0	2.		—		18.	4	C5H3OS2Na.1-H2	63.		2.	7	7		20.1
Or C031Ia	A-		239-40 281-2	8, 11»	200	53		2,	.7	7.	.8	16.		C5H3O2SNa^H2	tm	7	3.			.1	16.S
GO-cosh	B	162	239	31, 7,	000 ObO	.8	4.	"				C10H7NOS	51	4		5	10
[JjJ-CH2 C OSNa	A	mm.	271-3 3O5mf	14,			9	22	C6H5OS2Na		3.			23.0
N^-COSH	B	160	5, 3,	3			C6H5NOS	.8

VerbIndunf 12

4-carbonafrure

a) 13,9 g Tbiopicolineäure (100 mmol) wurden is 250 al Waeeer gelöst, das 8,4 g Hetriumbiearbonat (100 aol) totbitlt, und dl« erhaltene Ltfeung wurde su 20,9 β l»t*iu»~7-2' ~ thlenylacetaBldocephaloeporanat ic 250 al faaier itigegeben. Die lößung wurde während 29 Stunden unter Sticketoff auf 50⁴C erwäret Da« Gemiech wurde dann abgekühlt uad der alealieh weiOe Feststoff abfiltriert uad getrocknet, wobei aicb 11,6 g robte Batrlusaals ergaben (46,7 f). Dieeee Produkt wurde in einen öeaieob aue 290 ml Aceton und 290 «1 feeeer mit 500 ml EselgeMureätbyleeter geeobUttelt und Mit 2n~Salaeäure (12,5 »1) angeaäuert. Die wÄßrlge Sobicbt (i^ ca. 2) wurde »it 2 aal 250 ml Beaige&ureäthyleater erneut extrahiert. Die rerei*igten Iitrakte wurden aufeinaaierfolgend alt 250 al 10Jt-ige» Vatriuaohlorld und 2 Ml 250 al feeeer geweechen und aber Ia₂SO^ getrocknet. Hacb Ilndaapfen auf ca. 50 ml ergab sieb ein welfier, krl/stalllner Peet8toff (10,44 g, 43, 9 TO, r*y|⁸- 78,6° (c 0,85 tn Dio*an), Xaax. (H₂O) 274 bie 276 myu(e 17,500) und 252 a/u (21,700). Analyeet O₃₀H₁₇I₃O₅S₃ Berechnet: 0 50,5 H 3,6 jß Gefunden: 50,8 3,65 +.

Dieeea llaterial ergab zufriedenstellende Infrarot- und aagnetiacbe Protonenreeonansapektren, und ee zeigte nur einen

Tleoken, wenn ea papierohronatographiert wurde alt dea 3y-

eten JLtbylacetat/n-Butanol/o.ia-latriuaaoetftt (pg 5,0)

809902/0897

(8s1*8), und swar auf einem mit O,1ra-Kat$riuiaae®tat Toa pg 5_SÖ Whatman Hr„1—Bipler.

Ausbeuten von." 59 bis 63 5» wurdtn erhalten_s w®nn di@ bei einem niedrigeren p_ä-W®rt₉ beispielsweise 4,5 bis 5. ausgeführt wurd®* Bei äitetn.?trsuebeö wurS@ Pfeosphorsämr« lang» a am zu dem Eeaktiaii6g®üi@eh, w®lc&©8 Blsiati^ji^shj4l?agfapbosphet enthielte zugegöbeii,, bis der gewünschte Pg-Wert erreicht war_o

Koch hiißere Äuabeuteii i®eeen siels erreichen*'wenn msn bsi höht» rer Temperatur unä während ©iner kür^eron Zeit al® votstehend arbeitet, und ebenfalls« w$m m@n bei einea pg-^ert ¥Db 3,6 big 4,6 arbeitet, da diee der natürlich« Pg-W^rt ist, der erhalt an 'ülruf wenn oine Lösung von Thiopicoliaeaure mit Hatriua-7-(2'-thieny!acetamido)-e«ph«loeporaaat verwendet iviri. Dies * wird im nachfolgenden Präparat gegeigt,

b) 6,6 g ihiopicolinsäure wurden ia 150 al Waeeer hei ?f*O unter Rühren gelöst. %95 g Hatrium-.T-CS'-thienvlaeetaBidoJ-cephalo^ sporanat wurö®« zugegebess, und das Gemisch (pn = 5«6) wurde bei 75°C 2 Stunden lang gerührt., Die dick© Suspension (p_g = 4»6) wurde abgekühlt, bei 5⁰C 1 Stunde lang e»?Ubrt m$ ösnn filtriert. Der fauchte ^estatoff wurde in eintm Semiieh eue 240 ml Aceton und 80 ml Wasser bei 4O⁹C gelöst, und dann wurden 8,5" ml kon-üentrierte 'Salzsäure zugefügt,

ORIG«NAL

400 ml Yfaeser wurden dann langeam zugefügt und das Gemisch auf 5° abgekühlt, 2 Stunden gerührt und filtriert. Der Filterkuchen wurde mit 25 ml Wasser gewaschen und bei 4O°C über Nacht unter Vakuum getrocknet« Die Auebeute aa 3-Picolinoylthiomethyl-7-(2^f-thienylacetemido)-ceph-3-««-4-oarlJiinBäur« betrug 83₁5 $ der Theoria (9_t42 g), C^Jj₃ ^m 79-β* (c 0,8 in Slogan),

Die Werte für die Verbindung 12a und für weitere Verbindungen entaprechend Formel V (R^ * Thienyl-2-acetyl)_t die in gleicher Weise hergestellt wurden, sind in den Tabellen Ha und Hb zusammengefaßt ο

8 0 '"> 3 Q 2 / Γ- 8 H 7

Tabelle Ila

G-..ftil

Εοαΐ S-I »
(Jörne1 Y)

Rest xj (For»

ElQl V)

Tomp

Zeit
(Std.)

Ib oliöjrung·

λ max.·

max.

ΐημ

50

29

Λ,Β

.-79

274-6

17,500

232

21,7(

50

32

-H₄

289

26,100

239

16,2C

46

15«5 j Λ

-140

37

140

147°

268-9

21,400

242-3

276*7

20,600

243-4

19, K 30,6c

Be.
H

50

42.5

»24 -147

266

266

18,600
19,800

232-5 232-->5

21,OC

-sco-tVj

50

30

201

234-5

31,300

273-4

17 »5C

II

30

-43

271-5 \

238-9 19,OC

50

26

-150

295-7 16,700 241-3

17,5c

50

26

-103

292

22,700

232_Τ8

15,6c

29 Λ

22.5

269-74

16,700

243-4

51,2c

-SCOC

i£UL

50

31 236

24,1OC

Na
H

50

21.5

-274^U

298*301
296-302

16,600

15,300

229-232 229-232;

19,40c 18_?70C

-SSO

52

23

-18

11,700

227-8

20,20C

50

16

+3

260-263

10,50c

236-7

16,COC

II

100

25

min.

-88

266(Sh)

18,400

240

22,40C

-S Λ } ⁵

100

25 min.

-72

262(Sh)

18,100

240-1

21,2OC

ioo:

25

min.

-IU

260(Sh) 17,800

241-2

21,6OC

50

29

-8/

17,800

231

21,0OC

-SCO-Ql

H.

60

15.5

-82

275-4

16,400

8 0

0 2/0897

gAD ORIGINAL

14458

	Stfuaden	C	.7	3	H	4	•	9	)	17	S	I	C20II17N5O5S3	50	C	SöroohaiQ-t	H	•	5	.0	17	3
	51.45	.7 . .6	4	.8	8	7 »	0		18	-	I (kriat.aua. Prosanol	53	• 5		,6		δ	1	18
	53.6	.7	3	.85	8	5.75	5		19	Λ	j CjJ1II17N5O7S5	48	.2	3	.0		8,	4	19	,0
	48	,9	3	.6	7 6	η	5	17 17	.6	ι O1Oi T X *\ *t	52	,5	5	.3	7. 8.	8 0	17 18	.5 =
	53	.75	l· 3	.6	5	11,	6	24	.3	§ ^ w ?τ f^ ^i T1TjSl y .. ΓΙ» μ*· ^»y«^^ * y**n' *	j 46 47	.9	3	.4	5-	3	24	.3
	47 47	θ	4	.7 .5	5	12.		16	.7 .8	C22K2ON2OtjS4	49	.6 .75	3	.0- .4	5.	55	19	.8 .2
	49	7	4.	.2	5	Ii.	26	.2	C22H20Iy6S1J1	52	.9	3 3	.0	5. I	θ	26	.2
Tay- bißfl	51	4	3	,1	5		20	.7		47	,4	4	»0	6.	0	20	.1
I2(a)	47	1	3.	7	7.	θ,	18	.0	C19H16H2°6S5	49	5	4	4	8.	0	18	.7
13	4a	2	3.	9	6.		21	.0	C24H19N3°5S3	54.	1	3	.5	7.	1	'21	.7
14	55.		5.	9	5.		27. ■	,0	C26H51N5O5S4	52.	9	3	6 <	5.	5	25 ■	.3
15	m 52.	6	3. m	» 4		23.	• 0	C21K17?2O4S4Na ·	49.	6	3	3	5.	3	24.	.6
16	46,	5	3.	6 »	N	«	8 ■		47.	2	• 5.	3	-		τ	0 »
				9	-	20.	5		-	3	3. «	9	12	.1	20.	0
		1	4. 4.		.9	19.		C19H18N4S5O4	49.		3.		11	-5	19.	'·
	49.	6	3.	3	.2	20.	7	C20H20K4S3O4^O-	49.	4		9	11	.4	19.	8
	49.		3.	5	.2	19.	3	(kriat.aua wä&ri-;	48.	5	3.	3.	8	.5	19.	8
	49.		3.	9	.9 .4	19.	ϊ	. C20H17N^O5S ,^,HgO**	51.	9	4.	9	8	.8	20.	5
	51.·		ί	,2		7	C20H17N5O5S5	50.	O	3.	9				4 *
	50.	θ	,3		7			5	3.	6				2.
			7					3.
			7
		8
18
19
20
21
22
25
24
26
27
29
*9
30

»ue wäSrigsa ioaton

IAD ORIGINAL

■■■■ ■-■;■■ · - 2« -

fiaBnöten für dit Tabellen IH und lib

lBolg.erunff8Verfahrenι

Ä Ee wurden die unlöslichen Kstriumaalze gebildet und entweder aIb solche gereinigt oder in die freie Säure überführt» wie im Beispiel beschrieben.

B Beste Ausbeuten erhalten durch Durchführen de® nuel@ophllen AuatauaohaaJSei Pg 5»0.

G über das Cyclohexylaminsalz gereinigte

D Ansäuern dee rohen Heaktionsgamisehes und Reinigung als
freie Säuren

E Ca« 50 i> des isolierten Produktes wurden während der Reaktion ausgefällt, oder beim Abkühlen auf 0* nach beendeter TJaiätzung. Bex Riet wurde durch Anaäutrn der Mutterlauge isoliert und durch Umfallen mit einer Säure aus neutraler Lösung und aus organischen Lösungsmitteln durch Zugabe von Waakvr gereinigt,

····) Die optischen Drehungen wurden in Dioxan (c β 15*) beetimt, mit Ausnahme des Natriumealzee 16« welches in ÄtbOH-H«0

es,
(2:1) bestimmt wurde, des Natrlumaele/23 uad dor Satiren 18»

24» 29 und 30» die in Dime thylaulfos^d fee et lasst würfen, und des KaliuEaalz/'25, das in Aceton/Waseer 1x1 bestlmnt wurde· +♦) Die Ultraviolettabaoyptionswerte wurden tüw löeunges in 0,1ä-Phoephatpuffer, eingestellt auf p_H 6,0_t erhalten mit Auenahtse der Verbindung 12„ welche in Wasser bettlest wurde, und für die Verbindung 18 und 21, 61$ in Xthano-I bestimmt wurden_o

?) Die Infrarote pektr en (¥ujol) und die ®agis»t i sch en Pjpo tonen* reeon&nsepfktreii (i^ridin) jeder Verbindung etia&ten Bit de? «agebeneii Struktsit Jw9$»ia. ^₀9002 f 01S1

SADÖRiGWAL

■1**5835

« 27 -

Β«icpiels

Die in den !Tabellen Ha und Hb angegelsesaen VerfcinduBgin dtp allgemeinen Formel

wurden der durch Quecksilber-Il-Verbindungtn aktivierten Umsetzung in einem Medium aus Wasaer/Pyridin (111 _v auf Volumen bezogen) bei 50°C entßj>2^yechend den in Beiepiel 23 aufgeführten allgemeinen YerfanrenBiaaßnahmen untermorfen^ Die Ergebnisse sind in Tabelle III zusammengefaßt ζ

U-.

8 0 K 8 0 2 / 0 0 E) 7

> 28 Tabelle III

Bei-' ■ ρ υ. ^l Gruppe S-T Wt. ■

Aktivator

Mol Aktivator/ Mol Sub-8trat ■

Zeit bis
zur maxim.
Ausbeute

Ausbeuto

Ver-

ai

nie

f -£

Hg(OAc),

2.0

1*5 St

47

1,11

2.0

6-7 Std

28

2.5

2.5

Min,

\, I

70" 1.08

Mir,

86

1,02

-S. CO

2.5

Min, j 74

1,10

-5. CO

2.5

Min.

50

1.10

-s.cs-

2,5

+) 1

Std. .>52

2.5

I,n6

2.5

Std.

44.,O

1.10

,H₅

2.5

Std. -(■ 63

1.10

2.5

■30 Min.

55.4

1.09

-S.50,

Hg(SCN).

5.0

Min.

57

1.11

Min,

55

.1.11

Hg(NO

3.0

Min.

64

1., 10

2.5

Min.

73

1,08 -

H_S(C.1O₄)₂

3.0

60

1.07

2.5

35MIn. i 63

-SCO-

kkt?°2

2.5

Std .

55

2.5

Std.

30

■ 1.04

1.11

1.07-

" ²⁹ ~ 144583S

la III (Portsetag.) ;

Beisp. Ur.

Sruppe S-Y

Aktivator

MbI Aktivator /
UI Sb

Zeit biß

zur maz_#

Sub- Ausbeuto

to

-i Yflr f hält

111 P,

2.5

51.5; 1.10

18

2.75 St.

60 i 1.10

19

2.5

sta. 70

20

2,5

10 Min,

63

1.15

CBjO

2.5

ι sta. 66

1.09

-S-CO-^ ^

2.5

2 Std.

54

2.5

2.5

1 Std.

20

45 «In/

+ ) Dit Auebtutewerte waren bei 1 Stunde nooJa anet«igdl## ++) Ytreucht wurden bei 25*0 durchgeführt. A) Vtnuoh b«i 35⁰C auageführt.

Bt iep.lel 23 ·

>-,( 712* -Thlenyiac ©taffiiffocfpfe-ffi-fa~?_ryliigthsrl} ggrY.iai carboxyIat bub 3-Btn«oyithloEMrttgrlr-Tr.C?* -thfo&ylaoetaELjffio) -

Terwtitdimg tob, Quecksilber;» IX

9,492 g. Tniobensoat wurfcit is 100 ml -i^-rjldjttIwi 51* gelöst und dann aufeiisana^rfolgsisi 25 sil Wsss@i*,. 50 al Il-pei'c-hlorat-Iöaung / bergestellt üweeh Siisptaeion tos QueGkailbtr-IX-osyd (0,25 .Mol} in 100 isl \7&amT und Zugabe von 0,52^s MoI FQrcttloreäuM, Rühren isBi filtrieren -und 'firgMIfsen auf-250 BiI mit Wasser^/ und. 25 eI Waeeer -imtcr' Eüfeaa eugegebeii* wobei oieb nach 'wenigen. ÖiHisten eiE Buimmmmv SissSsreolilag «u bilden 'begann. Die = Vneetsuag^ iaiiert® 25 'Hlmitea-» wurauaf daiin der Kolben in' eitfen. DMftvertfaftpfer ulvsry^eki «urde m$ das Gemiech an uor Waeacrstrshlpusps bei 50 bis 53⁹O «Übre^d 20 I,Ilöutö2i eingedampft sari's» Se mirdßß 150 ml Wommv und i« die Susponeion wurd« Seh^efelwaea^ratciff ?0' lang eingeleitet. B£e schwarsie Siispeitifon; wurie atf die Spit-. ze eine?- Kolonne (Inneziiu?chs£r@e@r 5*4 ^m) gtgiben₉. ®im ein inttigie.GaqilSieh .von. 150- pl 9jmüi*1 ..CO*»") 'Wf ISO ff COAc") oMrfaalb'troa 5C"b1 ge©«iEar% 226¹ SMl 47 (H*) wobei aäratliöiie Barae eine fr^Se mlmbm, ?i ^pi I£2 - (oeeh eise 100-200)' ätif^rieeen.^ Ihirel ll«ti#rei& ait Weaepr ergaben olch 1560 ml Flüssigkeit, welefo® g.efrlergatro®luiet «w de« wobei eieh ein ordm®-farbiger Seeta-töff' eveab· Bis« wei» tore £luieniüa§ alt 'Vaaaer.eiia-b'220 ül^ atm filtriert »nd

tee

14*5835

verwandet wurden. Pie erhaltene Kiöung nurde filtriert und mit 1,0 ial Salpetersäure (epeeifischeß Gewicht 1,42) unter Rühren behandelt. Nach 2 Stunden bei 5° wurde dsr erhofeli--Gho niederschlag abfiltriert und über P₃Q^ bei Saumterape« ratur und 0,5 mn Druck, getrocknet* wobei eich das salpetersäure Sols ergab (5*902 ß, 61,6 #),X max. (H_g0) 240 ιγι (E.! ^ 329) und 255 m/u (.is! J 300). Kach Eindampfen de» Filtratee auf etwa 5 ial ergab eich eine zweite Menge (0,052 0,6 ^»Xniai. (H₂O) 240 (E^ 309) UBd 255 syu (B^_c^ 2B3).

5»742 ß dee Salpfitareäuresolzee (12 ramol) wurden in 20 nl ¥asaer eiispendiert uad tropfenweise unter Rühren mit Ammoniak (apoKifiBches Gewicht 0,86) behandelt, bie eich der Feststoff gerade gelöst hatte (p„ 4_t0)· Die erhaltene braune liisuiiß wurde mit Wasser auf 45 EtI Terdünnt und durph eine Kolonne mit einem IrinendurchmesBer von 2,1 cm gegeben, die ein innigen Gemiscb aus 15 ml Dowex-1 (OAc") und 15 ml Deacidite T?¥ (OAc") oberhalb 50 ml Zeo-Karb 226 SHO 47 (H⁴) oberhalb 15 ml Deaeldite FI¹ (OAc*") enthielt« Durch Sluieren mit Waesser ergeben eich 56B ml, da dann die Drehung des Eluatee zu ternachläsoigen war. Biese Menge wurde gefriergetrocknet, wolüei sich ein weißer li'eatetoff ergab, der mit 45 ml trockenem '«ethanol verrieben wurde, wobei eich das Pyrid iniumä erivat ergab (4,436 g, 89,3 $> Ausbeut«) _t C*Jj) + ⁴^*⁸" i^c» ¹t¹25 in H₂O) ,λmax. (H₂O) 240 (E^ 3ßO) und Xinf. 255 myu (B^J 34 OK

603902/ v'f'h 1

1445636

In nachfolgend ear Tabelle XY Bind die Auebetitea »η %·>(*?-£*- Üihieny !acetamid o-ceph^-®ia™3*yliaithyl)p!yriäiniua*4-HJÄrboaty lAt aus 3-BensQyltiJioinethyl-7-(2 · -tbienylacetamiäo)cepb--3-eB-4ⁱcarbonsäure bei 50° in 50^-igem (V/V) wäßrigen Pyridin in Gegenwart verschiedener Metallealze aufgeführt.

Tabelle.IT

Verwendetea Salz	Mol Ketalyeator/ Hol iPhiobenzoat	Zeit biß eist max-, Auebeute	Auebeute	U.V.- Vei»- hältnie
1IgBr2	2,0	4 Std.	13,9	1,07
Hg(SGK)2	2,0	1-4 Std.	31,4	1*11
HeCOlO4I2	2,0	0,75 Std,	58	1,10
	2,5	25 Min.	74,0	1.11
E ^ (OCOCE-),*	2,0	2,5»3 Std	·." 60	1,13
Hg-(PO. )n	2,0		gebildet	-
. ß v 6 5 Sj	2,0	3-5 Sta.	— 25	1,09

Beiapiel 24
Hsratellang von iJT-

aue

4,98 gdea Uerkaptopyrimidinderivatee wurden in 40 ml Pyri--idin bei 51° gelöst j eine löeung von 7,70 g Queckeilber-II-. acetat (2,25 Äquivalente) in wäßrigem Pyridln (25 ml> 10 »1) wurde raaoh zugegeben und mit 25 ml Wasear nachgespült* Die lösung dunkelte rasch, und ea begann die Ausfüllung eines Peetetoffes sofort*

Bas Gemisch wurde während 1 Stunde kräftig gerührt, worauf der Kolben in einen Drehverdampfer überbracht wurde und die lösungsmittel unter vermindertem Druck bei 50° während 25 Minuten entfernt wurden. Dann wurden 10 ml Wasser zugegeben und während weiterer 10 Iünuten erneut eingedampft.

Der Rückstand wurde mit 50 ml V/ass er auf geschlämmt und während "5 5 bie 20 Minuten mit Schwefelwasserstoff behandelt. Die ßchwarzQ Suspension wurde sorgfältig auf den oberen Teil einer I_onenaustau3chharakalonne mit mehrfachen Betten gegeben, die Betten aus 25 ml Zeo-karb 226 SRC 47 (H⁺), 50 ml Dowex-'; (OAc") und 50 ml Deacidite W (0Ac~) enthielt, sämtliche in einer Größe zwischen 76 und 152 Mikron (mesh size "00-200J, die in dieser Reihenfolge gepackt waren, wobei jedes Bett vom anderen durch ein Filterpapier getrennt war* liach dem Eluieren mit Wasser ergab eich ein gelbes Eluat, das zu einem gelben Peststoff gefriergetrocknet wurde„

Beim Behandeln mit etwa 20 ml Wasser wurde dieser Feststoff nur teilweise gelöst, wobei ein schwach gelber Rückstand (0,8 g) hinterblieb, der sich nachfolgend auf Grund von Elektrophorese, Chromatographie, U,V»~ und I„R.-Spektren als 2-IIerkapto-4-methylpyrimidin erwies. Dieser Rückstand wurde abfiltriert, und die orangefarbene lösung wurde mit 0,8 ml konzentrierter Salpetersäure (spezifisches Gewicht = "1,42) unter Rühren behandelt» Nach Abkühlen auf 0° wurde das ausgefallene Pyridiniumnltrat abfiltriert und über B₃O₅ im Vakuum

getrocknet (2,73 g, 53,3 £)_vJlmax. (tUO) 240 nyu (bJJ£

809902/0807 ^{/ om}

255 ffi/u (b|_cJ 282).

1.,C g des ETitraten wurden in 25 ml wäßrigem Aceton suspendiert und mit 2i3~Ammoniak--Lc5sung neutralisiert. Ein schmutziggelbsr Rückstand wurde abfiltriert und die erhaltene schwach gelbe Lösung auf eine Kolonne von 10 ml Dowex-1 (OAc"*) (1C0-2Ö0 meoh) gageben und mit V/asser elulert. Die praktisch .farblosen 33luate wurden genaamelt und einzeln gefriergetrocknet« Beim Verreibon der gefriergetrockneten Feststoffe mit Methanol ergaben sich weiße Pulver, da die geringegelbe Farbe in !!ethanol verblieb (0,75 g, 07 $> Auebeute, GeaamtausbeUte 46_S4 ^). U.V.-Werte der am wonigsten reinen Probe (erste Praktioö): Λ max. (HgO) 240 iß]^ 365) und Λ (inf.) 255 π/U (e]^ 333). ■ '.■''■■■-.■■■ .- . ■■ - ■■- ■

Ia Tabelle Y eind die Ergebnisse ähnlicher .Versuche aufgeführt, bei denen 2"~(7~2¹~Thienylacetamido-4-cerbo3cy-ceph-3-eiB-3-ylmetfaylthlo)-4"-methylpyriniiäin in Ιϊ-(7-2 ^f-Thienylacetamidloceph~3-eBi-3-yliaethyl)pyridiniuia-4-carbo3fylat in Gegenwart verschiedener Queckailbersalze überführt wurde.

809902/0887

~ 35 Tabelle T

Verwendetea Salz	Tempe ratur 0C	Verhältnis von Pyridin zu V/asscr	Zeit bis zur optimalen Auabeuto (Min.)	Optimale Ausbeute
HgBr2	50	50:50	360	25 a)
Hg(O.COCH5)2	50	50:50	60	50
Hg(H03)2	50	50:50	15	68
fl	50	50:50	45	61 *>
Ug(OlO4)a	50	50:50	10	70
ti	35	50:50	75	75
ti	19	50:50	210	75
ti	35	25:75	160	82
Ii	35	1Οϊ9Ο	90	42 *>

Fußnoten:

a) Optimale Ausbeuten innerhalb des Reaktlonszoitraumeß nicht erhalten, jedoch schwingt die Auebeute/Zeit-Kurve bei dieeer Stufe aua.

b) 1_t25 Äquivalente Quecksilber-II-nitrat verftendet.

809902/089?

Beispiel 25

ff- (7-2' -Thienylacetaaidoca ph-3~em-5-ylme thyl) pyria initua--4-carboxylat über das S-(7~2^<--Thlenylacetainidocepfa-3»gn--3~yl-· me tbyl)thiosulfat aua Natrlum~7-(2'-tbienylacetamidoj-ceph.alpeppranat

4,16 g Natriuin-T-iS'-thienylacetamidoJcepbaloeporanat (10 inmol) wurden In i"8 ml Wasser gelöst, und β β ergab eich eine klare Lösung, p_H 3,8. Kiereu wurden 2,73 g Hatriumthlooulfatpontabydrat (11 mmol) in 7 ml Wasser zugefügt und das GemlaQb auf 60 mX gebracht, bevor es in einen Kolben Ton go°C überbracht ,wurde-·' Anstelle dee Natriumsalzee kann auch Araraoniunithioaülfat verweBdet werden „Die Umsetzung wurde bei diessr Temperatur 30 Minuten lang unter kräftigem Rühren unter Stickatoff ausgeführt. Bie Umeetzung kann auch bei 37°C während 64 Stunden oder bei 50° während 40 Stunden durchgeführt werden. Dann wurde die Lösung auf 27° abgekühlt und 60 ml Ityridin zugefügt? 22 ml einer molaren Lösung Ton Quecksllberperchlorat (22 mmol) (es kann auch eine 4-molare Lösung verwendet werden) wurden tropfenweisβ unter Rühren zugegeben, so daß die Temperatur 25° nicht überetieg. Die Zugabe dauerte 7 Hinuten,,und das Gemisch wurde weitere 53 Mimten bei 25° gerührt. Bei anderen Umsetzungen wurde diese Stufe bei 50° und 25 Uinuten ausgeführt-,

Die grüne Lösung wurde auf ungefähr 10° mit Eis abgekühlt und 7 Minuten lang mit Scbwafelwaßöerstoff behandelt. Das

Queckeilbersulfid. wurde auf einem Kieselgurbett

8Ö 9 8 02/08§1 IAD ORIGINAL

entfernt, und es wurde gründlich mit Wasser gewäachen{ dft« Ml trat wurde mit Amberlite IA-I (40 ml) in 100 ml Bensol, Amberlite IA-I (20 ml) in 50 ml Benzol und mit zweiaal 100 ml kathylenchlorid ausgewaschen, wobei IA einen Pitts s ig·- Anionen-Austauscher angibt«. Die organischen Extrakte wurden mit 50 ml Wasser zurückextrahiert. Die vereinigten wäßrigen lösungen wurden bei 30* während 1/2 Stunde ssur Entfernung der galanten organischen lösungsmittel dreheingedampft, dann wurden sie auf eine Kolonne gegeben, die aus 25 ml oaurem Woelia-Alumiaiumoxyd über 50 ml Dowex-1 (Acetatform), über 10 ml Zeo-karb 226 (Wasserstoff-Form) bestand. Das Bluieren mit Wasser wurde so lange durchgeführt, bis die Drehung (1 dni-Hobr) weniger als 0,02° betrugi das gesamte Eluat wurde dann £8friergetrocknet.

Der in 40 ml Ytesaer gelöste Rückstand wurde mit Salpetersäure (konzentrierte Salpetersäure/Waseer = 1*1) behandelt, bis-der powert auf 1,5 abgefallen war» Das Gemisch wurde wHhrend 1 Stunde auf 0* gekühlt, worauf das Hydronitrat abfiltriert und mit Wasser gewaschen wurde. Dae Produkt wurde im Vakuum über PgO^ getrocknet. Eine zweite Ausbeute dta Produktes wurde aus der Mutterlauge erhalten. Ausbeutet 2,12 g (44,5 #),X(Beugung) 238 bis 240 nyt* (b]_c* 320), λ afc*. 255 tt/i(S"j_c£ 289), £~^aJ ψ + 40% (P_H 6 Pboeph«tpuffert O a 0,98), Das Produkt kann auch nach dem in Beispiel 23 für das Shiobenzoat beschriebenen Verfahren isoliert werden*

809902/0897

.■■■ ,'■ ■■'. _ -..■■■-.■ 38 - . ,' .;■..■ .'.■: ■;.''"

Ein Teil des im. vorstehenden beschriebenen Hydronitratea (1 g) wurde in 10 ml Wasser"suspendiert und durch Steigerung das p_K~\VertG,B auf 5,0 durch eine 7,5n-Ainmoniäklö8ung in HS~ sußg gebracht. Doa Greraisch wurde von einer Kolonne aus 15 ml DowQx~1-Harz (Acetatform) elulert, hie die Drehung des Elua-»' tea weniger" al a 0,02° betrug (1 dm-Eohr)· Da« Eluat wisrd« gefrlergetrocknat und der Rückstand aus 20 ml Mathanol gefällt ,.wobei eich ei» weißer Pestatoff* ergab (Q_ff?75 g, 90 $> aus dan Bydronitrat)..,.--?i/ (Beugung) 240 rayu (S* JL 372) _r.JL pax,

255 aa (E^ t_mj^¹)t /^Ta/n^3ss> 47.,5* (Wasaer, C » 0^965).

~ 40 ?S*

a) g~Bengoylthip-methy^
carbonaaure ■

4 _S27 kg üiatriuio»?- (2⁵-tblenylacetanrido-jcephaiosporanat _t 5,55 1 Katriuathiobensoatloeuag (40\ $ "Cfewicftt/VOluiffea), 1,08 kg ITatriunidlbydrogen-orthophQ&'phat-dibydrat, 7₉27 ml Orthophosphorsäure uad 27,8 1 Wasser wurden zusammen auf 90''C unter Rühren t Stunde lang erhitzt. Ber geregelte Ρττ-V/ort das Eeaktionsgemisch.es betrug 4*5 ans Beginn ,und er stieg auf 5»2 am Ende der tTmaetzung. Das !aaktioBsg®-' misch wurdö 30 Hinutan auf to* gekühlt und das kristallin© Kavrium~3~(beßney lth^:iömat-hyl)-7- (2 * -th ienylacetamid ö )-c*ph--3-eni-4*carboxy2#t abfiltriert*

-Das Rohprodukt wurde in einem Ge mi ach aus 125 1 Aceton 'und 125 1 Wasser "bei 35° gelöst und gerührt, während 3,5 konzentrierter Salzsäure langsam zugegeben wurden. Darauf wurde das Gemisch über liacht auf -5° abgekühlt* Das kristalline Material wurde ab filtriert, mit Wasser gewaschen rjid bei 40°C über liacht im Vakuum getrocknet, wobei sich 4.047 kg 3~Benzoylthiomethyl~7~(2'«thieny!acetamid ο)eeph~ >er."4-carbon säure ergab'en (83,5 $), C^Js ^s 131° (c 1 in jJ5oxan),3-max. 237 bis 238» 272 bis 275 aya (B^ ]f_m 481 χ ml *<72^< id sr."tifiziert durch das Infrarotspektrum,

^-(''-2'-*£hienylacetamidoceph«-3-em~3~y!methyl)|>yrid 4~ y_si*b ο yy la t ·

?3,73 g ihiobenaoat wurden in 125 ml i^yridin gelöst und die erhaltene Lösung wurde auf 51 "* erwärmt,, 125 ml Quecke.ι.!.!«erperchlo^'atlösung /Hergestellt durch Suspendieren von 54.¹-5 g gelbem Quecksilberoxyd (0^25 Mol) in 100 ml Vfeeeer, Zugabe von 55_t5 ml Perchlorsäure (spezifisches Gewicht 1,54, 0,52 KoI), Rühren, Filtrieren und Ergänzen auf 250 ml mit V/aas er JTwurd cn zugegeben und das Gemisch 50 llinuten lang bei 51° gerührt. Das Gemisch wurde auf 0° abgekühlt, 50 ml Thiobenzoesäure zugegeben und mit dem Rühren 10 llinuten fortgefahren. Die Lösung wurde durch ein Kieaelgurbett filtriert und aufeinanderfolgend mit 300 ml Benzol, mit einer Lösung aua 550 ml iviabarlite IA 2-Anionenaustauscher in ^5CO ml Benaol, mit eiiior Lösung aus 50 ml IA 2 in 100 ml Benzol und mit 100 ml Benzol extrahiert» Der Niederschlag

809302/0897 IAD original

Pitt gweinii W jxO/gswaseii^a «Jid $£*

t?.«! eiirer Kolonne mit film« 3a8#8&»jpetune£fi97 ^op .6,5

200), ixhsv Aimi-ntmexfä VHmi®, mn**, Aktivität 1, IfO über -25 ml 3*?j>h£tda3t SH -Xf_r2$ ffii) (Ä^^ ait Wsuaer bq Jengq, We 4^?" .Afeisujf eiiije "Drebrng

Ο⁹ (1 eaH9teÖHP-). hatt«, ergal) #ich 950 .mit i?f ml. 4ifcgaJMters?iw!re l)«b?ii?4e

2$ ml -W*im§r.. m& 300

40*

» wobei piefe 1§>ä? g ffs

^^ % 7 ^Q^faatpi^^r) + 42,^ k, 1,20), 7 )

C 10 £>v

9.561 g dea Hydronitratsalaes (20 pmol) wurden in 66_t0 iVasoer suspendioxt und mit einer Lijaung von 10,0 ml Amber-3ito LA 2 in CO ml Petzoläthor (Kp. 40 bis 60°) geschüttelt Hie y/äßrigs Schicht wurde aufeinanderfolgend mit 2 ml IA ί? in 25 ml Petroliither, mit 2 ml LA 2 in 25 ml Petrolätöer und mit «w ei mal 25 ral Petro3_fäther exirahiort. Die organ!-.

ψ/ί

Mt „

sehen Sabiclitenwürden auf&inanderfolgend Mt 20 al und 10 ial Wasser ruckextrahlart und die Lösung und ©ttrakte über eine Kolonne von Dowex-1-Barg (OAc-Förm, 18 ml, 100 bis 2QO aeab), über Sephadex CLI C-25 (mittel) (18 ml) gegeben, Beim Eluie- ■ren mit V/aeaer ergaben aicb 170 ml, worauf dia Drehung des Bluatea su vernachlässigen war.-

Biese Lösung \iui*<3e gefriergetrocknet* und es ergab sich ein weißer Feststoff/ der mit 90 ml trockenem !!ethanol verrieben wurde und dann Bei 0⁰G 2 Stunden gehalten wurde, Der Feststoff wurde abfiltriert» mit 40 ml Hatbanol gewaacbea mid im Vakuum über Ifecbt bei Eauratemperatur getrock.net, wobei eich 7,304 g dea Syridiniuffiderivatee ergaben (88,0 ?S Ausbeute), C^aJj_} * 46,1° (e, 1.03 H₂O), λϊΠΕί. (H_?0) 259 ia/u {b\^ 583),

X (Beugung) 2I55 biä i^\J^ 352), Peuehtigkeit (Karl Pieeher) 0,7 i*_% Queckailbergebalt (1O ρ,ρ,π», Lovibond-Farbe Löaung, 2 cva Zelle) 0^6 Y, 0,2 R.

Beispiel 27
a) 5~

carl?onaäure

4,975 g 7~Thienylaeetainidocephaloaporansäure (12^5 mmol}, 1 ,.05 g iiatriumbcarbonat (12,5 mmol) und 4»0 g■ Hatriumtbiobenaoat (25 mmol) wurden in 125 ml Waseer gelöst, Die Lösung wurde filtriert und das Filtrat 18 Stunden lang unter Stickstoff auf 50° erhitzt. Der kristalline Kiederaehlag wurde geaammelt, mit \7osi3er gewascben und im Yakutua über P₂O₅ getroclcaet.. wooai 4-3S g liatrium-^-b'eczo^ltbiö-·. -

fföiÖ/ & ^: '■' - ■-· .-" .-

IAO ORIGINAL

netbyZ-7-(2'-thienjlaeetamido 5 -ceph~3-eHi-4-carboxylüt erhalten wurden (70,6 ji)_f ν* max. (Hujol) 175B (ß~lactam)»·:-₅,, 1660 (-S-OO-), 1G48, 1530 (CQKH) und 1625 , cm"*¹ (COwT*) *... - ■ > ,_;

Das Rätrlütnealz wurde in 50?o~igei5 wäßrigen Aceton (50 Eil) · suspendiert und mit 100 ral ßBsigsäureäthyleetsr überdeckt, während 2n-Sals3äure zugegeben wurde» Das Gemisch wurde geschüttelt, bis faat der gesarate ieatstoff gelögt war_r. Das Aceton wurde im Vakuum entfernt, und die Schichten wurden getrennt. Die wäßrige ööbiübt wurde mit weiterem Sssigeaure^athj^leater (50 si) extrahiert,-die Extrakte wurden vereinigt» mit Vase er gewaschen und über llagneeiiim-. 'sulfat getrocknet. STech Eindampfen ergaben sich 4,2 g eines" weißen' Feststoffes, welcher aus 180 ml - siedendem-" ^eeton/v/asaer-GeEnlsch (2:1) umkristallisiert wurde, wobei eich die vorstehend angegf/bene Verbindung ergab (1,6 g, 25, 8 ^), /*"a7|⁶158° (Bioxen), Λ na*. (p_H 6 Phosphat puff er) 238 bis 239 «yu (^23,500), 273 bis 274 mn. (21 050)_tKaex.. (ffujol) 1770 (ß^Lactam), 1722, i700 (COOH), ΐ£82 (-SGOPh), 1643, 1538 cm"¹ (002JH).

Berechnet -χ ΰ 53,1 H 3,6 '.JT 5>5 S Gefunden^ ' 53,4 4,1 6,1_f 20,0 £/.. Mine zweite, ^usbeut^ (2^337 ^)₅, steigerte, die Geeemtaus·

beute auf_v63>5, ^,

sadofhgimäl

S j lb(3r~3"1teng oy 3, thJoroetb^lyfcj a

it ρ 8fiti?e <4_#7 WBOl) ta 135 ml Mmm SmPIsP mit lbernitratl88U8g gebändelt· 110 ml Vsfsav , mü 4 ie trUtig^ibQ Xöeouf ww^e beft4g mit 0_fin*llatrltt9d9ydrc»{7^ (etwa 50 ©3·} behead«It_t ms den pjj-'iVert auf 7«0 zu byiagen, Per braune Me^eygohlag wurde afefiitriert, grUudlieli mit Weseer gevaecbflQ uniä im Vakuum gotreeknet, wobei sich 2,54 β dee SiJ.l3fr^alses er gaben (Berechnet für G₂₁H₁₇JJgO₅S₅Ag? Ag 18,S Jfi

Gefwident Ag 19*5 $).

27

c) IJmeetzung. vo» Silber^5^benzoy^tbioiagthy 1^7^(2^f"y

mit wäßrigem Jfiyrldin

0,58 g 4ea Silb«j*0al«es (1 moX) im B ml Vpri&iz m$ 8 ml

V/a es er wurden bei 46*0 17 8tif»den .erbttet· Das de mit 25 öl V/eeeer ves^öjrint, dorcb Kieeelßur unä dreimal mit SEethylencbloTld gewas<;bes* ^i,e

Schicht wurde gefriere trocknet, dez- braune Biickstand mit 10 ml V/aoaer verriebsp, filtriert und das Filtriit erneut

gefriergetrocknet, wobei sich 0,1 Tj? § eines

Feststoffes ergaben» Puren

geigte eich dae Torliegeji d«s Ί?γτid3nderivatea von 7^(2*-

fbienylacetaaiid0)~cephaI00 poransäuro an_P

^ ^t; BAD

1445938

M'm&e Material wurde in Wesetr übes* eine koloaae sue ce. 10 ml Dowex-I (üAe%dfoxa)'gegeben, tmS die

Blust« wurflen so lauge geaatnelt , bis sich die eptiscbe
Drehung als vernaebläeBigbar zeigte« Die vereinigten Sluate wurden gefriergetrocknet, wobei aleh ein® roiie Prob© äea

carboxylates ergeV, Bai dei» Slektfophorftse if Igte eich ein otarker Flecken, der öem^Bigea .©ötepracb, der von einer rainen Probe aer Pyriöiniumverbindwng iieretamjate·

Ein Lgerversuch' ait .-3-~BenEoyltb.iome.tbyl~7->(2'-r acetaißidö)-ceph~'3~eiE~4-carboH8äure (0,479 g» 1 rnmol) ,öl

•

in 8 ml Pyridin und 8 «1 Ifeeeer TRäbreiad 1$ Stuö䮫 bei 46⁰O erhitzt wordeia wsr und, wie Torstiafhefiä »&g«@ebezi₉ aufgearbeitet «ordeu w®r^ ergab kein.An&eiebfa Öer Bildung des 'i-PyridiöiuiBisjetbyl^-CS'-tbieaylacetaaido)—cepb

Pyr id iniüsaae t h.Yl ~7~( 2* »f"hie ayl® c e tsrold o)«-

öarbpxylat aug_; gyBgpzoyltbioi^

cei>b~5--eia-4-c?ag]|>oaaaiara HBter Verwendupg το-a, Silberaitgytι-y.

4,275 g ^-BenzoylthioiBötbyl^^ig'^tbieöylacetagtidoJ
em^-caxbonsäure (9»^^raiBol) bürden in 45 mi l^ridüi
und bei 50^pC mit 3-,OS⁵^¹Siibern'itrat (18 mmoD^ln" 45^f aä%i^.^aCl aer behandelt«; Daa Beaktionsgeroisch wurde 5 Stunden lang auf
50 erhitzt* Eine su diesem 2_eitpunlKt.«urt&tHtjWMMF- f^ötriiy -4$*,. ^:r^r

BAD ORlG¹NAL

wtti! ■"^: · : '

1445S36

durch Elektrophorese und Ultraviölettabsorptioa untersucht wurde, zeigte das Vorhandensein von 24 $£ der lyridiniumverbindung. Die abgekühlte Lösung wurde mit 50 ml ftaseer verdünnt, mit 50 ml Methylenehlorid extrahiert und filtriert» Der Rückstand wurde mit V/aas er gewaschen, der organische Extrakt wurde wieder mit Yiaeaer gewaschen,und die vereinigten Waschflüssigkeiten und die wäßrige Schicht wurden durch eine Kolonne aus 100 ml Dowex I (GAc"-Pona) gegeben» llit denl 551uieren wurde idrtgefahren, bis der Drehwert unterhalb + 0,025° ab.'.:-fallen war. Dsa Volumen der vereinigten Eluate wurde durch Drehverdampfen bei einer !!temperatur unterhalb 35 °C auf 50 ml gebracht. Diese lösung wurde durch eine Kolonne aus 40 ml Dowex I (0Äc""~?orm) gegeben» '

Die üluate wurden gefriergetrocknet und ergaben eineß braunen, gummiartigen Rückstand (0,86 g), welcher mit !!ethanol verrieben wurde und die Pyridiniumverbindung ala flockigen Feststoff (0,4-3 ß) ergab, Λ max. (K₂O) 240 nyu (kJ ^ 342) und 255 ^ 309). Die weitere Reinigung wurde dureö lonenauetauecb

und Verreiben in Ilethanol erreicht, wobei sich die l*yridiniumverbindung in Form von ganz schwach gelfcsi? Kristallen in einer Menge von 0,215 g ergab. C* JJi ^{+ 47}»⁶* C° ¹»9* **

λ max. (H₂O) 240 nyu (S|_c^ 358) und λ (Beugung) 255 m/

* ⁵²⁹^^{f Verbältni}s 1»°9· Infrarot- und Molekularrotati-

onas|ektren bestätigten die Identität dieses Produktes.

BAD 809902/088T

Beioplfel 29

oxylat aua ^-Betigoylthlome tbyl-7~ (2'«-thienylacetamidp)-ceph*-

unter Verwendung yon_ _i <^\eckallbfreblprld

/,745 κ ?-Benzoylthio!aethyl-7-(2'~thieöylacetaraldo)-cepb«!J~ em-4-carbonsäure (1.0 mmol) in 25 ml Pyridin wurden in einem durch einen 3?hermo8taten geregelten Bad bei 50°C erwärmt, ger'hrt und mit einer LOeung von 5,43 g Quecksilber-II-cblorid (20 niiüol) in 75 ail Y/a es er behandelte Fach 3 Stunden wurde eine Probe τοπ 10 λιΙ entnoiaoien und der Elektrophorese unterzogen« Der Flecken des Produktes wur^d® eluiert und durch sein Ultraviolettabeorptionsepektruia bei 240 und 255 uyaauf eis Verhältnis von 1,11 bestimmt. Dieae Analyse zeigte» daS 50 ^ des gewünecbten rroduktee vorlagen.

Der graue Feststoff wurde abfiltriert und mit 25 ml tfaseer gewaschen, Filtrat und V/äschflOasigkeitea wurden vereinigt und mit,'dreimal 50 ml liethylenchlorid extrahiert und daiiB filtriert, Die wäßrige Schiebt wurde durch eine Kolonne aue etwa 150 ml Döwex 1 (OÄc~-Forra) gegeben, bis dta EXuat einen Drehisert hatte, der kleiner war ala ·♦· 0,02°. Nach dem Gefriertrooknen ergab sich eine braune, gummiert ige JIa see, welche in Wasser gelöst wurde und anf einer Kolonne aue etwa 50 ml Deeciäite W (OAc~-Porin) chromatographiert wurde. Be wurden zwei_:-Frslttiο« ,-aen gesammelt, und ee seigte sich, daß eie 96 ^ bevi» 88 ?* des gowüaecbten Produktes enthielten. Die Behandlung dieeer Fraktionen mit Methanol ergab flockige Kristalle (1,2 g_f I9 5ε Ausbeute) djsr PyridiniuBiverbindung,^ nsax. (H₂O) 240 m/a (S^os

·^χ fO8902/0887 bad original

144S835

- -47 -

367) und 255 m/a (β{₀^ 333). Me Verbindung Tmräe weiterhin durch Chromatographie auf 100 ml DeacidIte W _.{Ck<F~loTm) gereinigt, und ee wurde die erot» braune Fraktion (0,57 g) verworfen. Die anschließenden Fraktionen wurden vereinigt und aufl I!ethanol umkriat&lliaiert, wodurch sich 0,52 β des J?yr~ idiniuinderivats ergsben (12 ;i), C^J% .* 4fi°,Ai3ax (H₂O) 240 iyu <Ε^^Γς 356) und Λ (Beugung) 235 öytt <β{^ 324), Verhältnis ' »1Qi Infrarot- und llolakularrotötionaapektren be~ at fit igt ei j öiq₄ Identität des Produktes,

])1ö ^ethylenchloridextrakte wurden getrocknet_f eingedampft . und das Produkt mit Aceton verrieben_t wobei 1;,·3β g der 3-Ben" üoyithioflictfcyl -7-(2 '-thienylaeetamidο) -ceph-3'-em-4-carboneäu- Tc (29 \>) mit einer größeren Reinheit eis 90 ^c/> zurilckgewonnen

wurden.

In der folgenden labeile TTI aind die maximalen Ausbeuten an 3~£yridiniuniffiBthyl-7-(2' -thienylaeetamido)*-eeph-3-em->4-carboxylat aufgeführt, die erhalten wurden., wenn verschiedene 3 -Y-S -I Ie thy 1-7 - (2' ~t h ieny la c e tamid ο) -ce ph~3 -em-4-car'b^nsiiuren bei 50° in ⁽3C4-lgem wäßrigen Pyridin (V/"V) in Gse^Gö'.vört ver~ EChirjdenez* lletnllaalze erhitst wurden. Die '"'erto wurden erhalten, indem das KeaktionsRemiach wie folgt beötimmt wurde: 1OyU "L-Trober .wurden der Elektrophorese untereorf en, die der gewünschter. Pyridiniumverbindung entsprechenden Flecken wurden ausgeschnitten, mit V/aööor 5η ¹C inl-Kolfcen eluiert und ih« ro IH.trav./ ölet tabsorption bei 260 und 250 m/U bestimmt.

803902

1445836

Als weiteres Kriterium für die Reinheit, wurde daß Verhältnie der optischen Dichten bei diesen Wellenlängen (1,10 für reines IJsterial) verwendete

B 0 9 S 0 2 / 0 8 9 7 ' ^BAD original

144583

Tabelle VI

Bei-

Verwendetes Salz

Mol Katalyaat„/Mol Substrat

- SY

Zelt biß
2ur maxο
Ausbeute

Deute ?6

Verhält«

ohne

AgFO,

Ag(OCOCH-)

H-O U

]<ii^ Uü.T.

1 2 3 3

t: tt ti

11

ti H ti If ti

-8-0

2,25 -

2,5

2,5

-SGO-/' \ >5 Std.
Std.
4,5

4,5

.5
2-3
2,5
5

nicht
"best iramt

2
3,5

1.5

kein

Prodiikt

12

26,5
31,5
39
38

<5 ^
30
26,5
55
53

25

et-

1,18 •1,11 1,12 1,11 1,11

1,11

1,1? 1,10 1,11

25

30

durchgeführt mit dem 7-Phenylaestsmid©derivat

durchgeführt Kit dem 7· Phenylacet-

amidoderivat

η 09

1,13 1,09

Ausbeute ent~ Eprechend der Anwesenheit το; Thiopicoliaeäure

Br.inpifll 4 3 ü'irrda euch mix der analogen 7-?henylacetaiuidoverbirid urι g d u ' Ό h g fj ■»" i ih f t -

' ■ - 50 --

Beispiel 46

a) ITisgandlun^ von 3^BanEQ,ylthloaiethyl«"7~i2'^

in H-(7-2'-

l-yliaetbyl) -»pyrId laiiiBi-4 -carb oaylat unter.. Yerarend uafc yoa Queckailberp-ltrat la wasserfreiem Iladi-um

Ea wurden die folgenden Ergebnisse erhalten, wenn 0,237 g Thiobeiizoat (0,5 tamol) In 2,5 ml Pyridin gelöst wurden und ein Comiacb aua wasserfreiem Queckeilbar-I.I-nitrat (0,40>g. 1,25 Eimol), das einige Tage über PpOr im Vakuum getrocknet

^J" wurd@«

norJen war, in 2,5 ml des zweiten Lösungsmittels zugegeben /

Bis Mischungen wurden 5 Stunden lang auf 50° erhitzt und aliquote Hangen in gseigaeten Zeitabetänden entnommen und durch Elektrophorese analysiert, wobei der der Pyridinium-., verbindung ..entsprechende Flecken eluiert wurde und seine tlltraviolettabsorptio» bei 240 und 255 inyu gemeaeen wurde» Die folgenden Werte geben die Zeit Bn₉ bis der höchste Ϊ3©8-wert erreicht war, und ee sind auch dia Auabeuten der-Pyr-. idiniumverbindung zu diesem Zeitpunkt bei LlißchungeH von Pyridin mit den im folgenden auigefübrten Lösitßgamltteln angegebenί

Zeit bie jsi

lösungsmittel max j. ..Meßwert; Ausbeute

Acetonitril 3,0 8td_o 27 S

C₀ Aceton 2_r5 - 3,0 Std. 12 ί>

° Moxan 3*0 Std» /^

cd Iiethylend.lcblorid⁺^^A) ^ frl· .

17 otd_s 11 ^

ο, * j AIn elektrophil-eä iaittel wurde- üilbernitrat vei*wei5det.

^ A) UIo Losung b-eatand βίώ l^ridin/llethylen^hlorid im-Ver-~- bäitnle von 2t9-^J» auf dao Voinmexi bezogen.

B; Me0oSeaktio.t132G.it entspricht nicht der besten, '

144SS36

~ Silt) UnwaadluKR von

in Jf^-C7-g'~

uater Teyfteaauag voa

Queckeilfaerperchlorat la weaBeyfrelem

^a würden die folgenden Ergebnieee erzielt, wenn 0,238 g dee hlQf&oollis&ts (0,!3 mtcol) in 2,5 ml Pyridin gelöst wurden und ein Gemisch aus wööserfreiem Queckeilberperchlorat (1,25 mno hergestellt durch Gefriertrocknung von 1,25 ml einer 1m-Lösung in y/asser und Trocknen des Produktes über Pp^5 ^^{m Valtuuia} während einiger Tage_üin 2,5 ml <2ee zweiten löeungsmittelB augo&eben wurde. Die Gemieche (ursprüngliche Srwornung auf et7?a 35°) wurden bei 25 bie 30^e 4 Stufiden ßtehengelaeoen, · und aliquot« Teile wurde» zn geeicßetöu Z*itttbetäliÄen iur Ultravioletteetimraung, wie i» Beispiel 1 beschrieben, entnommen.

LBeuaftoHlttel	Zeit aaax.	fcie »us Maßwtrt	Ausbeute	■	(4t-carb«ty~7	•-2«-thienylacet-
Acetonitril H-Uetbylpyrrolid an	ca* <o,	2Std. 5 Stä.	67 # 72 i>	1-Thlenylac etamid ocöph-3-®ra-3~ylmöthyl)-	oV4~metbyl-p	yrimiüin
Beispiel 47			t aua 2-
Herstellung von ϊί-7-(2
pyrid inium-4-carboxyla
amidoceph~3'~em-3'-ylin

Zu einer im Kühren gehaltenen Löeung von 4,€ g 2-f4'-carboxy-7' -2"-thlenylacetamiäoceph-3' ~em-3' -ylmethylthio)~4«-metbylpyrimidln (10 ramol) in 50 ml Pyridin wurde eine Löeung von g gefriergetrocknetem Quecka Über per chlorat (20 nmol) In ml Acetonitril zugegeben. Das SeaiiBcb wurde 20 IJÜjauttn lang

000002/0897

1M6S36

; ■ > 52 - λ- '■■■ ■

bei 50⁰C gerührt unü wurde darin in einem Brehv.erdaiapfer bei erheblich taateröslb 40° während 35 ^iautea sur Etookne eingedampft, Der Rückstand T»urde in 100 ml Wasser suspendiert und ein Schwefelwasserstoffstrom durch die Suspension während 15 Minuten geleitet. Sin eventueller Überschuß von Schwefelwasserstoff wurde durch Durchblasen mit Stickstoff während 20 Jliimten entfernt, worauf dann das ausgefallste Queeksilber*· oulfid dureh Filtration durch Kieselgur entfernt wurde» Das jpiltrat wurde dann auf Oine Kolonne von 3 cm Durchmesser gegß« ben« die Absclmitte sue 20 ml Zeo-kali 226 in der Wasserstoff*- forta, 60 ml Dcaeidite PP in der Acetatform, 20 al Zeo-karb 22€ in der v/asserstofform und 60 ©1 Dowsx-1 in der Äeetatforsa anthielt. Hit dem Eluleren der Kolonne wurde iii3t«r Yenseadtmg der Wa&ohflüesigkeiten von der Kieoelgurfiltrieruag fortgefahrej3y bis 1,5 1 gesßfflmalt wären\ if±© Elusate «urden dann vereinigt und gefriergetrocknet _o 3,34 g gefriergetroeknettr Peatetoff wurden in ca. 15 »1 Wasser euapsjadlert, uud die SuspeJssion mit einem pg-V/ert von 3_P5 wurde duroh Zugabe Ton Aasmoniak auf einen p_H-W©rt rosa 4,5 singeeteilte Iteoh der filtration «ur Entfernung einer geringen. !!©age unlöalichen Hateriale wurde daa Piltrat durch Zugabe von Salpetersäure ©uf pg 1,2 eingeetellt. Das Nitratsalg des PyΓidiniiaa5derivat^Ί8oliied sieh als blaßgelber, kristalliner Festetoff ab (2_f9 g, 60 'J*) , X uax, 237 biß 239 m/u (e]_c^ 314), Λ, (Beugung) 255 mp. (s]_c^ 286), ΛαJt£ λ 43° (C, 1,1 in p_H 7~Phosphatpuffer).

AADORiGiNAL

144583S

Bei einem ähnlichen Versuch ergab elob bei Versranduisg von 4 g trockenem Quecksilbern!trat (12,4 maol) BlMung yö» 0,68 g des lyridiniumaerivata (35 #)» ^**&&· 240 «yu (B_{1 e}J 569), J^ (Beugung) 255 syi (E¹ _|o^ 337) C?erisältnie 1,095), C «-/j> ■* 43° (c 1,Ü, Vaaaer). Da ο bei einem weiteren Yareuoh unter Verwendung von QueckeiHjernitrat leollerte Pyridlniumäertvat hatte folgende V/erte: Xn»J. 240 um (b]_q^ 3.63)tX(Beoeiiiis) 255 aytt(B]_c$ 328) (Verhältnis 1,09), /~«/_D + 47 (o 1,0,

Reagenzglasversucne mit elektrophoretlacher Aüswertimg sseigten, daß das Tyridiniumderivat dee 4~^iaetbyl-2-merkaptoiyrisiidinderiYata gebildet wird, wenn folgende lösungsmittel mit VyT-idln In gleichen Volumen gemischt werden und U@rkurlnitrat als elektrophller Aktivator verwendet wird, Ia jedem Pail wurde das Pyridiniumderivat durch das Abeorptioasverbältnis (wäSrige löaungen) bestimmt:

OptiBche Dichte bei 238 m/a

, .—, -^.—JL- «1,1

Optische Dichte bei 255 mn

1. Dimethyleulfoxyd

2. Dimatbylacetamld

3. DimethyIformamid 4» Acetonitril 5* Ilethyleneiilorid 6, Absoluter Äthylalkohol 7·» Nitromethan 8.» H-Iiethylpyrrolidon

80990?/0837

Die Beweglichkoiten der E&aktioneproduktö bei P₃ 1»9 wurden mit StandaräbezugsproLen des PyriöiniuxaderiYats irerglionea ₉ wobei die BqStimmung unter einer Ultraviolettlampe oäer BQBj)TtIhBn mit einem &alium;jodplatinatr©!Sgena wurde.

dem allgemeinen Verfahren dee B^ispisla 47 wurden andere Queckailbersalae und Löauugsmit/tel bei deneelben Auögangama-terialien verwendet. Es wurden folgende Ergebnisse erhalten:

Queokailbersalz	LösungBmittel '	maximale Ausbeute ■*	Zeit «/ (Minu ten)
Acetat	Aceton	12	60
Nitrat	Aceton	24	15
Acetat	Acetonitril	10	60
Kitrat Acetat M trat	Acetonitril Dioxan Dioxan	59 12	40 >150 ^ >18O 3)

1) 50■'-$ des angegebenen-Lösungsmittels-mit. fyridia.

2) Angenäherte Zeit bis zur ciasimalen Ausbeute.

5) Optimale Ausbeute innerhalb der Reaktionszeit noch nioist erreicht.

umwandlung von _2~j(4 '-Carbcocy-T'-g'V-

3 ^f~ylnieth.ylthio)r4--meth.vlpyrimidin in H~7~(2'-Thlepylaeetamidoceph .J-em-^-ylmathy 1) pyrid inium-4 -carboxylat mit lleta^Llaalzen in wasserfreien Lösungsmitteln-

809902/0897 bad original

	Hg(OlO4	Äquivalente	lößunfsmitte1	Jjax, Ausbeute	Zeit
	13		Acetonitril		lila«
Aktivator	St	3	π	80	40
1.	ti	3	Kitrometban	ti	20
2.	Hg(BP4)	3	Pyridin	73	40
3.	Hg(CK)2	2 2	Acetonitril	58	40
4.	AfiBP,	1-3	Il	60	50
5«		2	η	<10	120
6.		45'	30
7.

Die Versuche wurden bei 50° mit dem «iagiigebeaea

plus demoelben Volumen Pyridiä ausgeführte Bgigpiel, 4g

Umwandluan voa 2~(4' -Carboxy~7 ^r "-2"~tbienylacetamidpceph-3 ' -eni_3'.-y3_OTetbylthio)->4~methylftyrliuiair Ca) gu Q^-Terbinduagen mit Quecksilberpercfalorat . ·

Zu dem 2-12erkapto~4-siethylijyrimidiiiderivat in dea enteprecbea- 6en Lösungsmittel wurde das aucleopbile Hitt.el und 2 Äquivalente gefriergetroeknetea Quecksilberperebiorat eugegeben«

Die Versuche wurden nach 15, 30 und 60 Hinuten durch Papierelektrophorese bei Pjj 1 »9 bei 30 Volt/cm auf \Vhetöan pier führend 1 1/2 bi.B 3 Stunden untersucht. Me Ö^ dungön wanderten zur Kathode und ließen, eich als jPleqkeö, die tllträviolettlicht absorbierten, lokalisieren und durch ihre Fähigkeit, mit Jodplatinreagens Flecken zu ergeben«,

Die -tirgebniase sind nachfolgend aufgeführt.

Wanderung bei &QT Blektro-

A Siucleo ph lies lösungsmittel Soap·--. Seit jjfeor«©« zur

lag Mittel, ag ml ratur Kta«

1	20	Xsonicotinasnid ΟΗ,ΟΪ 378 I	-(21-Thienylacotainidoceph-3-<	.35	0-60	/1 fB 08 ;. '
2	46	Isonicotinamid Me0N.Ac 61 ■-■■"■ .Z1 ■■-	pyridinium-4-earboxylat	50	0-60	1,5 ca"
3	20	a-Picolin CiLGS. 0,25 ml 0,25	35	0-60	- 1,5 :oa...
4	20	Nicotinamid GH,CN 378 H	35	0-60	1,1 Qm
	Beispiel 50
	ϊί-7	5m~^-yImetby1-4	" -carb ox amid ο -

Die ümsetäsung wurde durchgeführt wie bei mit der Ausnahme, daß folgende llengen eingtseiat und. folgende Produkte erhalten wurdens 2-(4 '-Carboxy-T^Z^-thien acetamidoceph-3' ~em-3 '~ylmethyltiiio)-4-methylpyrimidln (23 mg), Ieonlcotinamid (9,2 mg), 0,25 ml AcetODitril, 0,25 ml Wasser bei 50° während 60 iilinuteoj da* Srodukt lief 1,5 em zur !Cathode „

Beispiel 51

gwlgebea. 3-BenzQylthiome _i thy3L~7~phenylacetaiaido-- und Micotinaäürefithylaater uater

Verwenäung von Quecksilberperchlorat 117 !Hg 3~Ben5^1thioaethyl-7-pbeiiylacetamidOceph-3^*eBi-4-carbonsäure (0,25 rnmol) in 1,25 ml Nicotlnaäureäthyleater

mit 0,625 ml Quecksilberperchloratlösung, hergestellt

3 Π 9 9 0 2 Λ 0 8 S 7 bad

durcb Sue pen a ion von gelbem Qutcka iXb9V0Xf$ {0,25 tfoiy in 100 ml «fässer und Zugab« von 0,52 Hol £er@blöysSö3Pt_t Filtrieren und Ergänzung des Filtrates auf 250 al Bit W behandelt und anschließend mit 0,625 ml Acetonitril verdünnt. Das Reaktionsgemlacb wurde 1 Stunde auf 50" exv&rat· Baa schwarze Gemisch wurde mit einem langsamen Strom von Schwefelwasserstoff 5 Minuten lang behandelt, filtriert und der niederschlag mit 10 ml Y/asser gewaschen. Piltrat und Y/aschf!flüsigkeiten wurden vereinigt und aufeinenderfolgend mit zweimal 20 ml Amberllte IA 1 in Benzol (2:1), 10 ml Jtensol und 10 al Uethylenchlorid extrahiert. Die wä0rigt Schicht wurd« a» Äcebverdampfer zur Entfernung von Spuren organischar lüeungemittel eingedampft und dann durch eiae kleine Kbloone aua 10 ml Dowex 1 (OAe"*-Porm) gegeben« Die Kolonne wurde alt V/eseer elulert, bis ein Gesemtvolumen tos T£ »1 ^?!&$.„' Dieo«e de lyopbilisiört, wobei sieb blfißgislbdß Pulver trgßb_B nach der Elektrophorese bei 15 YoTt/en nt&h'mM 1Q Hismtim unter Vorwondung eines Puffere rom Pw 1*9 eiseti ©insigen fielt» ken'zeigte, der sich 0,7 cm zur Kathode hin bewegt hatte und bei Besprühen mit wäßrigem Kaliumjodplatinat eine graubraune Farbe ergab. Diese Eigenschaften zeigte auch das Produkts welches aus T-^henylacetamidocephaloaporaneäur© und Hlcotinsäureäthylester nach dem Verfahren von Haie, Newton und Abraham, Biochemical Journal, 1961» 2Sl, 403, erhalten worden war.

808902/0897

BeIopie1 52

a) 2~(7-D-5*-Αηιίηο«-5"-

(KaliumaalzJ

50 g Kaliumaalii von Cephalosporin C wurden su einer heißen IöGung (80°) von 4,6~Dinietbyl-2-merkaptoi^rifflidiB_r hergestellt durch .Auflösen von 4_r6-Dimetiiyl-2~ffierkaptopyrimidia™ hydrocblorid (23,4 g» 1?2 Äquivalente) in 200 ml Y/aaser und Einstellen der Lösung auf p*r 6_r0 mit FatrlumhydroxydlSBungs zugege-ben_c Baa Gemisch wurde unter Stickstoff während 1 Stunde auf 80⁰C erhitzt, dann gekühlt und über !lacht in den Eiööchrank gestellt. Die vorstehend angegebene Verbindung kristallisierte in einer Ilecge von 6,02 g (10 nahezu reiner Form aus, /"<*„/£, 4^⁰ (c 1 _}0 ELO),^ 265 m/u Cb]_c^ 339, e 18.100) ι Bf 0,24 relativ zu, 7~Ph@ByX«~ acetemidocepbaloeporaneäure (η-ΡτΟΗ-Η^Ο, 7s-3}» bewegte sich äla Kation 2,5 cm in-90'Minuten bei p_H 1,9 und 16 ToIt je' cait

Durch Einenge» desk Volumens des Filtrates im Vakuum ©rgab sich eine zvsit.e Menge dec Produktes C17*92 g» 30 ^S}J^ i®s_β 265 bio 268 m/u (s! £ 320)„ Die abBchließsnde Ausfällung der Filtrate durch Zugabe von Äthanol ergab ein ziemlich rohes Produkt (18,91 g, 32 95), A aex. 262 bis 266 sya

pyrid

%ch einem ähnlichen Verfahren wie Beispiel 24 ₁ Jedoch

«D9902/0<S7"^V. -

1**6836

~ 59

unter Verwendung von 2-(7-S~5"~Aaino-5"-carboxypentanamido-4 '~earboxyeepb-3'-611-3' -ylaethyl)-thio-4,6-dia·- thylpyrimidin wurde die vorstehend aufgeführt© Verbindung in 63 i> Ausbeute erhalten» £"<*./$ + 14* (c 1,0 H₂O), Rf 0,062, relativ au T-PfcenylacetamiÄoetpltaleeporaneäure (n-PrOH-H^ _Jl?)f ^_QgtQ sichele Kation 3,1 cm in 70 Minuten bei 16 Volt je cm bsi einem Puffer vom p_H 1,9,. Diese Werte entsprechen dem Ilaterial, welchea dui'ch direktes Ersetzen der Acetoxygruppe von Cepbaloeporin C durch Pyrldin erhalten wurde.

a) 2-(7 ^r*- el i me thy 1 py r imid in

lisch dem Verfahren von Beispiel 12 ergaben sieh 53 f« Ausbeute bei Umsetzung von Y-Aminocepfcaioöporaaääiire und 4 ₄ 6«Dimethyl~2-merkaptopyrimidin; £~*J^—104° (C t,0, 3 ^-MaHGO₃) λ max. 266 bis 268 nyu (B^₀J 43Oj € 15 100)| Rji O₉71" relativ zu 7~£henylacet&midoeephaloeporansäure Cn-PrOH-H₂O, 7:35» bewegte eich ic p_ß 1_t9-Puffer 3,5 ce in 90 Minuten bei 16 Volt 3e om

Uach dem Verfahren von Beispiel 26 b), ,jedoch mit 2-(7'*· Amino-4 * -carboxy^ e ph-3' -em-3 * -ylme thy 1) tbio-4,6~dliaethylpy-iiiuidir; v?urdo eine rohe Pro "be öer vorstehend aufgeführten Varbindung erhallen, die mit 4»6-Dimethyl~2~inerfcapto~

803002/003?

1445035

pyrimidin verunreinigt wer. Pie vorstehend angegebene Verbindung zeigte einen Hp-tfert von 0,21 be.tUglich T-^nenylacetamidocephaloBporaaeaure (n-FrOH-HgO, 7*3) und bewegte sich als Kation bei der Elektrophorese bei Pjjr 1,9 um 6,2 cm in 90 Minuten bei 16 Volt Je OB. Die Verbindung ergab eine gelbe Farbe mit Hinbydrinreagens.

In Beispiel 54 wird die Verwendung eines li

·Komplexea besehrieben.»

Beispiel 5ji

a) 20 ml einer wäßrigen MarkurlparchloratlöSung (0*40 m), hergestellt durch Auflösen Ton gslbess Queckailb«ro2j<3 in einem geringen Überschuß von Perchloreäure, bei O⁰C zu 20 ml Pyridin zugegeben. Der wurde mit kaltem Wasser gewaschen und aua heiieai V/asser umkrietallisiert, Die farbloaen nadeln wurden unter Vakuum über P₂O₅ getrocknet (3_S?5 g, 84 Ά), 9 «* (Zera.). AnaIyBSiO₁QB₁QOl₂KgSgOg

Bereojiaeii 0 21 \$ H 1,9 Mg 3$,0 H 5,0 Gefunden! 21,6 2,1 54,9 5,5

b) 1,19 g ^) ceph.-.3^eta^4'-carUonsäure wurden in 10 ml Pyridin gelöst. 10 ml \7aaser wurden zugegeben und die lösung auf 23 ⁰C abgekühlt. 3,35 g Dipyridinguecksilber-ll-perchlorat (2,4 Äquivalente), hergestellt nach a), in 20 ml wä0rigera Pyridin (t;1, auf das Volumen bezogen) wurden unter

80990-2/0807

1Λ46835

Rühren zu der Lösung während 2 Minuten xugefügt. Haoh . 1 Stunde bei 23 *C wurde Schwefelwaseeretoff 5 !Hauten lang eingeleitet und der schwarse Siedersehlag ebfiltriert. Baa PiItrat wurde, wie in Beispiel 26 beeebrieben, aufgearbeitet, wobei sieb des ifydronitrataals ergab. Das Hydronitrat wurde Über PgOc bei 1 na getrocknet (0,74 g, 62 £),Xmax. (H₂O) 237 bis 239 ■/» (£

354) und λ (Beugung) 255 nyu (e]_q* 318). Dae Bfrdronitrat kann in das Betain, wie in Beispiel 26 beschrieben, überführt werden.

Beispiel 55

carboxyla^aus dem C^cloheaylaminealg von 3-(7~2^>-thienyl-

carbamat unter Verwendung von Qufokijilbgrsserohlor»t

Zu einer Lösung des CycloheatylaeiaaalKes de« Mietbyldithiocarbamatderivateβ (55 Sg₉ 1 amol) in 0,5 ml Pyriöic und 0,25 ml V(asaer wurden 0,25 ml einer Im-Queckellberperohloratlösunß (2,5 Äquivalente) zugegeben. Das Gemiach wurde 45 Uinuten auf 50° erwärmt. Aliquote Teile wurden in geeigneten Zeitabständen entnommen,und. die llenge der gewünschten Pyridiniumverbindung, d^e sich gebildet hatte, wurde durch Bapierchromatographie bestimmt.

8 09 90 27 0 Sf i

14*6035

- 62> ; ■■^:; - ■ - ■ ■■' - ■

	Verhältnis	Ausbeute
Zeit Min.	B1cm bei 2*° 10Z1
3	E· bei 255 n/u	27
5	1,02	29
7	1,1	30
10	1,07	34
15	1,1 '	36
30	1,09	35
45	1,1	34
M

Die obere Phase eines Gemisches aus Butenol, Äthanol und Wasser (4? 1:5) wurde als Lösungsmittel τ en» end et, und der Behälter wurde mit der unteren Phase ins Gleichgewicht gebracht. Se wurden Whatman-Papier® Jfr· 3 MM verwendet, und die Chroiaatograiame wurdenüber H&oht abwarte lao£«n Das derivat wurde bestimmt, isoliert und nach ähnlichen thoden_f wie sie bei den Torstehend beschriebenen elektifophoretlachen Versuchen angewandt wurden, bestiau&t, wobei die Spektraleigenschaften einen reinen Prob· dea Pjridintumd«rl-> vat α verwendet w,urden.

In Beispiel 56 wird gezeigt, daß es nicht notwendig ist, wäßrige "Medien weder bei der Herstellung der Verbindung T noch bei der Heretellung der Verbindung IV zu verwenden,

ab
und dai3 die erstere nicht/i!gtrennt zu werden braucht, wenn

sie in die letztere überführt wird*

n ο ti οι / α β öf ^BAD

Beispiel 56 Herstellung von N~(7-2'"Tbienylaootamidocepb~3~»m«>3»yl—tbyl)

pyridinium-4-carbo:icylat aus 7-(2'

säure in Formamid mittels Natriumthioeulfat und Quecksilberjrarchlorat

Zu einer Lösung aus 0_f88 g wasserfreiem HatriumtbioBulfat (1,1 Äquivalente) in 25 ml Formamid von 100° wurden 2,09 g Hatrium~7~(2Hhienylacetamido)-cephelosporanat sugegebexu Das Gemisch wurde 2Q Uinutsn lang auf 100° erhitzt und wurde dann abgekühlt. Die lienge des gebildeten Thiosülfatderivatea wurde durch Papierchromatograpbie beatimiat, und aie betrug 57 $t wobei liethoden ähnlich denjenigen im vorherigen Beispiel angewandt wurden, ,

Zu einem Teil des Reaktiouagemischee C13»5 til)* ävr'wxt 40°C abgekühlt war, wurden 13,5 ml Pyridin und 2,5 g gefriergetrocknetes Queckeilberperchlorat (2,5 Äquivalente) zugegeben. Dieses Gemisch wurde bei 40° während 35 Minuten gerührt, wobei aliquote Teile in Zeitabständen entnommen wurden. Die Utage der gewünschten Pyridiniuiaverbindung, die aiöh gebildet hat te, wurde nach der vorstehend beschriebenen Pepierelektrophoresemethode beotinrat.»

Zeit	S& Pyriöinium-
Min.	verbindung
5	30,5
10	32,2
15	35
20	36^5
30	35
35	40

Claims (1)

1. P a t e η t a η β ρ r tt c h β

   1.) Verfahren zur Hera teilung τοη Gephaloeporiiiderliraten der allgemeinen Formel

   worin R^ eine Äoylgrupp© beäöutet» oder von analogen Derivaten, worin der iyridinring durch ein oder aelirare Atoa· oder Gruppen substituiert ist, dadiarea geksnnssietffiöt, daß eine Sehwef elYerMnduiig der allgemeinta Ponael

   -OH₂-S-Y

   σο^χ : " ■

   worin; Rg eine Aeylg^apge od·* «In Wasserst offfcto^r Gruppierung -S-ϊ den R@@t #ia@s ^uelftapäil^m lütt@ls nssd X ein Kation bedeuten, mit iyridin oder einem ringaubstituierten Pyridin (I^rriäin~Reagens) in einem Re@ktionsmii<dium, das gelöst ein Quecksilber«», Silber- oder Solösalr enthäLt, welches Komplexe mit der Gruppierung -S-Y" bilden und in Wasser ionisieren kann, umgesetzt wird und daß, falls in der erhaltenen VerbindungR₂ Wasserstoff bedeutet, diese anschließend acyliert wird.

   / 80890270887

   BAD

   2.) Verfahren naeb Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, Verbindungen verwendet werden, in denen Bg «ine Aeylgruppe darstellt·

   3.) Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dafi als Salz ein Queckeübersalz oder ein Silberaals verwendet wird.

   4·) Verfahren nach Anspruch 2 oder 5, dadurch gekennzeichnet, daß das Salz in einer Hange von 2 hie 5 Äquivalenten verwendet wird.

   5.) Verfahren nach Anspruch 2 t>ia 4, dadurch gekernte lohnet, daß das Reaktionsmedium aus Wfcteer besteht.

   6») Verfahren nach Anspruch 2 Die 5, dadurch gekennzeichnet, daß die Umsetzung mit den Pjrridin-^eagene hei einer Temperatur von 20 bis 100*0 durchgeführt wird.

   7·} Verfahren nach Anspruch 2 bia 6, dadurch gekenaselcbnet, daß Verbindungen verwendet werden _f in denen die Gruppe R₁ die Formel R¹COHg)_nCO besitzt, worin R¹ eine Phenyl-, substituierte Phenyl-, Cycloalkyl-, substituierte Cycloalkyl- oder heterocyclische Gruppe bedeutet und η eine ganze Zahl von 1 bis 4 darstellt.

   8.) Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gek ennzreiobnet, daß Verbindungen verwendet werden, in denen Rj eine Sbienyl-., ^; ■ 80SSÖ2/08ST bad original

   2-acetylgruppo bedeutet.

   9.) Verfahren nach Anspruch 2 bis 8« dadurch gekeasialeBnct, daß eine Verbindung der Formel V verwendet wird, wsleh* durch direkte Umsetzung der Verbindung

   R₂-HH-

   worin R₂ und X die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung besitzen, mit einem schwefelhaltiges nucleqphileJt lX£tt«l erhalten "wurde·

   10.,) Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekexineelohiitt, daß ale nueleophilea Mittel die la der belgiachen Patentschrift 617 687 beschriebenen, insbesondere Thiosulfate, Thiole, Thioharnetoffe, XhiosBidt oder Thiopheaol@_y7er~ wendet wurden,

   11,) Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß als nucleophileo Mittel 2-lIerkapto-4-methylpyriaidin oder JJa tr iumt hi Os ulfat verwendet wird»

   12,) Verfahren nach Anspruch 9* dadurch gekennzeichnet, daß die in der belgischen Patentschrift 637 547 beschriebenen nucleophilen Mittel verwendet werden.

   BAD 8Ö99O2/08ST

   13.) Verfahren nach Anaprucb 9, dadurch gekennzeichnet, dsl ein nucleophiles Kittel der Formel YSH verwendet wird, worin Y die Gruppe R,.CZ-oder R,,SO₂- bedeutet, nobel Z Schwefel oder Sauerstoff und H, eine alipbatiiche, Aryl-, araliphatische» heterocyclische oder heterocyclisch substituier te aliphatisch* Gruppe darstellt, oder ein wasserlösliches Salz davon.

   14») Verfahren nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, da3 als Eucleophilea llittel Tbiobenzoesäure oder ein Alkaliealz davon verwendet wird«

   15r) Verfahren nach Anspruch 13» dadurch gekenneeichnet, d»8 als nucleophllee llitt«! «ine Verbindusis d«? W&tml

   HS,

   worin S, eine Alkylgruppe mit 1 him 4 Kobl*netoffmtoeen oder einen ankondeneierten Bensolring bedeutet und a die Zahl 0, 1 oder 2 darstellt, oder ein Alkalisals davon verwendet wird.

   H09902/0897

   16.) Verfahren nach Anspruch 15_fdadurch gekexmsel0£ääet₉ daS ale nueleopbiles Mittel fbiopieoliaeätire ©der Bfttsltaa-

   thiopieolinat verwendet wir#«

   17.) Verfahren nach Anspruch XJ₉ dadurch gekemiseieimet, daß ._f

   als nucleopMlee Mittel eine Verbindung ö«P Formel ίΓ·

   H3.CG·

   worin m die Zähl 0 oits¹ "f daretellt taad Q Sobwefel SauerstOfr_s 9B''oder-einen M»Jilt3?l3?®st mit 1 M® 4 stoff atomtB--bedeutet iffid-E» Bsi s tft« M&ptmbAS -<üLg«i·« Bedeutungen beaitse»,

   18,,) Terfahren nach Anspruch 1?» dediarc-h.-'gekeiiaaeiöhaet,· da-0' als nuöleophiles Mitt@l
   oder dessea

   t"9«) Verfahren nach Anspruob 2 bis 18, 'dad-urch g«&#2iiiiie:iatinet₉ daß ein lletallaalz der allgeiaeijaeiJ Poirael BEgBp ©der Hj£D_e worin D eis schwach nucleophilee Iniofi bedeutet uiid des Hetallsalz Hg⁺^-und/oder %D⁺~Eati©aen ia wäßriger lösuag ergibt, eii3 gleich wirkeades Salz der Pormtl lg^% το» _: Quecksilliser mit eineip. ziiiei*-"'oder^^ mehrwertigen iaiöa, worin S ein n-wertiges Anion bedeutet, oder der Forst 1

   BAD

   F, worin F «in κ-vertigee Anion τοπ «o&waelt zniel«ophiltr Art und a dl« Zahl 1 oder darüber bedeuten, verwendet wird·

   20«) Verfahren nach Anspruch 19, dadurch gekennzeichnet, daß ein Salz verwendet wird, dessen Anion eines von einer Säure mit einem pKa-VTert in wäßriger lösung von weniger als 2 iat«,

   21.) Verfahren nach Anspruch Ig oder 20, dadurch gektnn«eicbnet, daß ein Salz verwendet wird» dessen Anton ein· niedrigere nucleophile Konstante als das Acetation bei Üblichen nucleophilen Sin-Sttifen-Srsetxungen in wttirigest Medien besitzt*

   22«) ^erfahren nach Anspruch I9 bis 21, dadurch gekennzeichnet, daß ein lletallsale verwendet wird« das eine größere löslichkeit in Vase er als das entspreclt ende Acetat besitzt.

   23.) Verfshrtß nach Anspriieh 19 bi» 22 _s

   daß als Meta11salz ein Quecksilber- oder Silbereale der Perchlorsäure oder Salpetersäure verwendet wird,

   24») Verfahren nach Anspruch 23, dadurch gekennxeiolinet, daß als Salz Queckeilber-II-perchlorat verwendet wird»

   25·) Verfahren nach Anspruch 19 bis 22, dadurch gakeaastlohnet, daß ale Salz Quecksilber-I-perchlorat verwandet wird·

   26.) Verfahren nach Anspruch 19 bis 22, dadurch g®kiimz®IcJbn«t ₉ daß ale Salz Quecksilber-II-trifluoraeetat verwendet wird;

   27.) Vorfahren nach Anspruch 1 bis 26, dadurch gekeanseielmet, daß lletallsalz und Pyridin-Reagens in Form eines verge-. bildeten Komplexes verwendet werden.

   28.) Verfahren nach Anspruch 1 bis 4 und β bis 27» dadurch gekennzeichnet, daß die Umsetzung unter praktisch wasserfreien Bedingungen in einem nicht-wäßrigen lösungsmittel als I led ium durchgeführt wird,

   29.) Verfahren nach Anspruch 28, dadureb gekennzeichnet_r daß mim Losungsmedium ein flüssiges Pyridin-^eagens verweBd®t wird _o "

   Verfahren na en Anspruch 28, dadurch gekenn seiell3@6t₉ daß als lösungsmedium eis Säurenitril «inor niedrigtn Alkas-

   <
   säure verwendet wird. '

   31») Verfahren nach Anspruch 30, dadurch gekennzeichnet, daß als Mtril Acetonitril oder Propionitril verwendet wird*

   32ä) Verfahren nach Anspruch 28, dadurch gekennzeichnet, daß als- Iösungsmedium ein halogenierter Kohlenwasserstoff

   Iäd original

   144583S

   verwendet wird,

   33.) Verfahren nach Anspruch 32, dadurch «tkennzeichnet, d*0 als balogenierter Kohlenwasserstoff SetraefaloxköKUaatoxf, Chloroform , Ithylendicblorid, Eereblarfitnyltn oder Uethylenchlorid verwendet wird·

   34.) Verfahren nach Anspruch 28, dadur/ch gekennzeichnet, daß ala LSsungsmediun ein niedriges Hitroelkan oder eine Hitro-aroraatische Verbindung verwendet wird,

   35.) Verfahrensch Anspruch 34, dadurch gekennzeichnet, daß ale Nitroalkan Kitromethan verwendet wird,

   36.) Verfahren nach Anspruch 28, dadurch getenngelübnei* daß als XöaungBmedium ein eye 1 iacJ^r Äther v@^we^et wird.

   37.) Verfahren nach Anspruch 36, dadurch ß9kennseiebnet, daß ala cyclischer Äther Dioxan oder Tetrahydrofuran verwendet wird.

   38.) Verfahren nach Anspruch 28, dadurch gekennzeichnet, daS als Iöeungamadium ein Amid der allgemeinen Pormel H,.CO.NR^Rc verwendet wird, worin H₅ ein Waaseretoffato· oder eine Alkylgruppe mit 1 bis 5 Koblenatoffatomen und R. und Hc, die gleich oder unterschiedlich sein können, Wasserstoffatome oder Alkylgruppen mit 1 bia 5 Kohlenstoffatomen darstellen, oder worin andererseits R* und

   ausaisnHra eine zweiwertige alipbatiacho Gruppe bilden ₉ weiche zusammen mit dem benachbartes Stiekatoffatom einen hetero«?yclischea Hing Midst.

   39«) Verfahren aach Anspruch 38,

   daß als Amid Ii, Η-Dim® thy !formamid, Η,ΙΓ-DIgthylf ormaaiid, Formamid, H«-l^ethylforisamid oder l?_fH-»Diffiethyl-

   acetainid verwendet werden,,

   40.) ^erfahren nach Anspirueh 1 bis 39 ₉ dadurch net_s daß als Pyridia-Reageas Pyridia verwendet

   41.) Verfahren nach Anspruch 1 bis 39 $ dadujcoii net, daß oin'Qrridin-Rtsgraft dtr

   verwendet wird, worin Rc eine niedrige Älkyl-, Carbainoyl-, H-Uono-niedrig-alkylearbsmoyl-, H_eIi-Di-aI@drig-alkylcarl<amoyl-, Nieäxigalkoxycsrbonyl-, l^rdrosy-niedrig-alkyl-, H-Chydroxy-niedrig-alkylJ-carbaaoyl- oder Garbamoylniedrig-alkylgruppe und ρ die Zahlen 1, 2 oder 3 bedeutet,

   Z₉) Verfahren nach Anspruch 1 bie 26 und 2C bis 41» dadurch gekennzeichnet, daß ein Salz des Metalles mit der Verbindung der Formel V verwendet wird_o

   BAD ORIGiNAL