DE133694T1 - Verfahren zur herstellung von neuraminidase und verfahren und reagenz zur quantitativen bestimmung einer sialinsaeure enthaltenden substanz unter verwendung von neuraminidase. - Google Patents

Verfahren zur herstellung von neuraminidase und verfahren und reagenz zur quantitativen bestimmung einer sialinsaeure enthaltenden substanz unter verwendung von neuraminidase.

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DE133694T1 DE198484109221T DE84109221T DE133694T1 DE 133694 T1 DE133694 T1 DE 133694T1 DE 198484109221 T DE198484109221 T DE 198484109221T DE 84109221 T DE84109221 T DE 84109221T DE 133694 T1 DE133694 T1 DE 133694T1
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Kazuo Machida-Shi Tokyo Aisaka
Takayuki Uwajima
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Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd
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Claims (1)

  1. VOSSIUS · VOSSIUS- TAUC H N F. R :· HEUNEMANN ■ RAUH
    SIEBERTSTRASSE 4 · 8OOO MÜNCHEN 86 PHONE: (O89) 4 7 4O 75 CABLE: BENZOLPATENT MÜNCHEN TELEX 5-29 453 VOPAT D
    u.Z.: T 202 EP
    EP 84109221.6 13.6.1985
    Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd.
    Patentansprüche
    (Deutsche Übersetzung nach Artikel 67 EPU)
    1. Verfahren zur Herstellung von Neuraminidase in dem IQ ein Neuraminidase-bildender Mikroorganismus der Gattung Micromonospora in einem Kulturmedium vermehrt wird, die Neuraminidase in der Kulturflüssigkeit eingesammelt wird und anschließend die Neuraminidase aus der Kulturflüssigkeit wiedergewonnen wird.
    2. Verfahren nach Anspruch 1, in dem der genannte Mikroorganismus der Species Micromonospora viridifaciens, Micromonospora globosa oder Micromonospora chalcea angehört.
    3. Verfahren nach Anspruch 2, in dem der genannte Mikroorganismus Micromonospora viridifaciens ATCC 31146, Micromonospora globosa NRRL B-267 3 oder Micromonospora chalcea ATCC 12452 ist.
    4. Verfahren nach Anspruch 1, in dem die Vermehrung
    4 bis 5 Tage bei 25 bis 35°C und einem pH-Wert von 6,0 bis 7,0 durchgeführt wird.
    QQ 5. Verfahren zur quantitativen Bestimmung einer Sialinsäure-enthaltenden Substanz in einer Probe, gekennzeichnet durch die folgenden Verfahrensschritte:
    Abbau der genannten Sialinsäure-enthaltenden Substanz in der Probe mit Meuraminidase aus einem Mikroorganismus der Gattung Micromonospora zur Bildung von N-Acetylneuraminsäure; Abbau der genannten N-Acetylneuraminsäure mit
    0133634
    N-Acetylneuraminsäurelyase zur Bildung von Brenztraubensäure; Umsetzung der gebildeten Brenztraubensäure mit NADH in Gegenwart von Milchsäuredehydrogenase und Bestimmung des Reduktionsausmaßes in der NADH-Menge; oder Umsetzung der gebildeten Brenztraubensäure mit Pyruvatoxidase in Gegenwart von Peroxidase, Thiaminpyrophosphat, 4-Aminoantipyrin, Phenol und Magnesiumsalz und colorimetrische Bestimmung der gebildeten Farbstoffmenge.
    6. Verfahren nach Anspruch 5, in dem die Neuraminidase aus einem Mikroorganismus stammt, der zur Spezies Micromonospora viridifaciens, Micromonospora globosa oder Micromonospora chalcea gehört.
    7. Verfahren nach Anspruch 5, in dem die Neuraminidase aus dem Mikroorganismus Micromonospora viridifaciens ATCC 31146, Micromonospora globosa NRRL B-267 3 oder Micromonospora chalcea ATCC 12452 stammt.
    8. Verfahren nach Anspruch 5, in dem die genannte Sialinsäure-enthaltende Substanz Mucin, Futuin, Immunglobulin, ein Ery.throcyt, Serum oder Gangliosid ist.
    9. Verfahren nach Anspruch 5, in dem das Magnesiumsalz MgSO4.7H2O oder MgCl2-OH2O ist.
    10. Reagens zur quantitativen Bestimmung einer Sialinsäureenthaltenden Substanz in einer Probe, dadurch gekennzeichnet, daß es die folgenden Substanzen enthält: 0,5 bis 2,0 Einheiten Neuraminidase aus einem Mikroorganismus der Gattung Micromonospora; 1 bis 10 Einheiten N-Acetylneüraminsäurelyase; und ein Gemisch von 0,3 bis 0,9 μΜοΙ NADH mit 2 bis 5 Einheiten Milchsäuredehydrogenase.
    11. Reagens zur quantitativen Bestimmung einer Sialinsäure-enthaltenden Substanz in einer Probe, dadurch gekennzeichnet, daß es folgende Substanzen enthält: 0,5 bis 2,0 Einheiten Neuraminidase aus einem Mikroorganismus der Gattung Micromonospora; 1 bis 10 Einheiten N-Acetylneuraminsäurelyase, und ein Gemisch aus 5 bis 10 Einheiten Pyruvatoxidase mit 50 bis 100 Einheiten Peroxidase, 1 bis 5 mg Thiaminpyrophosphat, 1 bis 5 mg eines Magnesiumsalzes, 1 bis 5 mg 4-Aminoantipyrin und Phenol. 10
    12. Reagens nach Anspruch 11, in dem das genannte Magnesiumsalz MgSO4.7H-O oder MgCl-.6H-0 ist.
DE198484109221T 1983-08-04 1984-08-03 Verfahren zur herstellung von neuraminidase und verfahren und reagenz zur quantitativen bestimmung einer sialinsaeure enthaltenden substanz unter verwendung von neuraminidase. Pending DE133694T1 (de)

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