DE1158746B - Herstellung von Insektiziden auf biologischem Wege - Google Patents
Herstellung von Insektiziden auf biologischem WegeInfo
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Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung
eines durch Mikroorganismen erzeugten Insektizids; es bezieht sich insbesondere auf Verbesserungen in
bezug auf die Einleitung der Sporenbildung und Bildung eines Parasporalkörpers bei aktivem, insektizid
wirkendem Material, wie es im folgenden eingehend erläutert wird.
Es ist bereits bekannt, Insektenschädlinge mittels Wirkstoffen zu bekämpfen, die auf mikrobiologischem
Wege hergestellt wurden. Die Vorteile können wie folgt zusammengefaßt werden:
1. Die nichttoxische Natur solcher Insektenbekämpfungsmittel, mit denen anderen Lebensformen
kein Schaden zugefügt wird, und infolgedessen das Fehlen von giftig wirkenden Rückständen;
2. der ungewöhnlich hohe Grad der Spezifität des Insektizids der für die als Wirtstiere dienenden
Insekten;
3. die Möglichkeit einer kombinierten Anwendung mit organischen Schädlingsbekämpfungsmittehi,
wodurch sich die Schutzwirkung in einem bestimmten Gebiet erhöht;
4. die Einfachheit, mit welcher solche Insektizide auch ohne große Kosten hergestellt werden „
können;
5. der offensichtliche Mangel an Widerstandsfähigkeit gegenüber solchen Mitteln seitens der
Insekten.
Bei der praktischen Durchführung der vorliegenden Erfindung hat es sich als vorteilhaft erwiesen, einen
Sporen bildenden Bazillus zu verwenden, welcher als Bacillus thuringiensis identifiziert worden ist. Dieser
Sporen bildende Bazillus wurde zuerst durch E. Berliner aus erkrankten Larven der Mittelmeermehlmotte
isoliert. (Zeitschrift für das gesamte Getreidewesen, 3, S. 63 bis 70, 1911). Berliner beschreibt
diesen Organismus als ein grampositives, mit Geißeln versehenes sporenbildendes Stäbchen. Nach
der Sporenbildung enthalten die Zellen des das Insektizid erzeugenden Bacillus an ihrem einen Ende eine
Spore und an ihrem anderen Ende einen wie einen Diamant geformten Parasporalkörper, d. h. einen
nicht sporenartigen Körper. Ein proteinartiger Giftstoff, welcher in der Zusammensetzung dem nicht
sporenartigem kristallinen Einschluß entsprach, ist schon aus der Sporenbildung unterworfenen Kulturen
von Bacillus thuringiensis isoliert worden (C. L.Hannay and P.Fritz-James, Can. J. Microb.,
Vol. 1, pp. 694 bis 710, 1955). Andere sporenbildende Bazillen, welche in ihren Zellen ebenfalls
einen insektizid wirksamen nicht sporenartigen Körper Herstellung von Insektiziden
auf biologischem Wege
auf biologischem Wege
Anmelder:
Bioferm Corporation,
Wasco, Calif. (V. St. A.)
Wasco, Calif. (V. St. A.)
Vertreter: Dr.-Ing. K. Boehmert
und Dipl.-Ing. A. Boehmert, Patentanwälte,
Bremen, Feldstr. 24
Beanspruchte Priorität:
V. St. v. Amerika vom 14. Juli 1958 und 9. Juni 1959
(Nr. 748 164 und Nr. 818 999)
(Nr. 748 164 und Nr. 818 999)
John Cosimo Megna, Wasco, CaHf. (V. St. A.),
ist als Erfinder genannt worden
ist als Erfinder genannt worden
bzw. einen Parasporalkörper bilden, können gleichfalls zur Anwendung kommen, insbesondere Bacillus
sotto (Nature, Vol. 173, pp. 545, 546, 1954; Can. J. Microb., Vol. 2, pp. Ill bis 121, 1956).
Während die Sporenbildung und Parasporalkörperbildung beim Wachstum von Bacillus thuringiensis
und Bacillus sotto und ähnlichen Insektizide erzeugenden Bazillen stets unter bestimmten Bedingungen in
gewissen Fermentationsmedien beobachtet werden, treten doch zahlreiche Schwierigkeiten auf, wenn man
versucht, solche bekannten Arbeitsweisen für die industrielle Herstellung einzusetzen. Diese Schwierigkeiten
betreffen unter anderem die viel zu langen Fermentationszeiten, eine ungenügende oder zu langsame
Sporen- und Parasporalkörperbildung sowie das damit zusammenhängende Problem der Abtrennung
des aktiven Insektenbekämpfungsmittels.
Es wurde nun gefunden, daß bei Durchführung der Fermentation mittels der vorstehend genannten
Mikroorganismen in einer wässerigen Nährlösung unter Belüften und submers dann wesentliche Verbesserungen
erzielt werden können, wenn diese Nährlösungen ein gewisses Gleichgewicht aufweisen, wie
dieses Merkmal hier bezeichnet werden soll. Dieses Gleichgewicht beruht gemäß einer besonders bevorzugten
Ausführungsform der Erfindung darauf, daß die fermentierbaren Kohlehydrate und der für das
Wachstum der betreffenden Mikroorganismen zur
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Verfügung stellende Stickstoff so aufeinander abgestimmt sind, daß sie praktisch zur gleichen Zeit
nach dem Beginn der Sporenbildung erschöpft oder verbraucht sind.
Wenn der vorstehend genannten Bedingung nicht Rechnung getragen wird, beginnt die Sporenbildung
nur sehr langsam und schreitet mit einer geringen Geschwindigkeit fort mit dem Ergebnis, daß die zuerst
zur Sporenbildung angeregten Zellen, bevor über-
hydrolysiertes Maiserzeugnis ist, und in Selbstauflösung begriffene Hefesorten, obwohl die zuletzt genannten
Substanzen weniger befriedigende Ergebnisse liefern. Weiterhin hat sich gezeigt, daß der Einsatz
5 von ölfreiem Mehl aus den Schalen von Baumwollsamen in dem Nährmedium, beispielsweise des schon
erwähnten »Pharmamedia«-Erzeugnisses, eine ganz besonders günstige Wirkung zeigt, doch können statt
dessen auch andere ölfreie Getreidemehle oder Ge-
haupt ein wesentlicher Teil der vorhandenen Zellen io treideschrote verwendet werden, beispielsweise Maiszur
Sporenbildung gekommen ist, unter Bildung freier schrotmehl, Saflorschrotmehl, Sojabohnenschrot und
Sporen und Parasporalkörper auseinanderbricht, wor- andere, ähnliche Produkte. Die vorliegende Erfindung
auf dann einige der Sporen zu sprossen beginnen und sieht aber die Verwendung solcher Mehle oder Schrote
so die Gesamtmenge der lebensfähigen Sporen ver- nicht zwangsweise vor und diese können daher auch
ringern, während gleichzeitig die Filtration und Ab- 15 fortgelassen werden. Der Zusatz von »Pharmamedia«
trennung erschwert wird. Beispielsweise werden in oder vergleichbaren Produkten führt aber zu einem
einer vorgegebenen Nährlösung innerhalb eines prak- Anwachsen der gesamten Zellbevölkerung um das
tisch verwendbaren Fermentationszyklus nicht einmal Mehrfache, beispielsweise um das Zwei- bis Fünf-10%
der gesamten Kultur zur Sporenbildung an- fache, verglichen mit Nährlösungen, welche keinen
geregt, falls kein Gleichgewicht der vorstehend be- 20 derartigen Getreidestoff enthalten. Bei der praktischen
schriebenen Art zwischen den fermentierbaren Kohle- Durchführung der Erfindung werden bevorzugt wässehydraten
und dem für das Wachstum zur Verfügung rige Nährlösungen eingesetzt, welche zwischen 0,6
stehenden Stickstoff besteht. und 2% und insbesondere 1,4 bis 1,9 °/o an irgend-
Ganz im Gegensatz hierzu werden bei Befolgung einer Melasse, vorteilhaft Rübenmelasse, und bis zu
der erfindungsgemäßen Lehre leicht 75 bis 95% der 25 etwa 2%, vorteilhaft zwischen 1 und 1,5% »Pharmagesamten
Zellen zur Sporenbildung gebracht. media« oder ein ähnliches ölfreies Getreidemehl bzw.
Darüber hinaus werden öfters auch größere Para- Getreideschrot und ferner zwischen etwa 0,5 und
sporalkörper erhalten. Ein weiterer Vorteil der vor- 1,9% und insbesondere zwischen etwa 0,8 und 1,7%
liegenden Erfindung besteht darin, daß die Möglich- Feststoffe aus einer Getreideweiche enthalten. Außerkeit
einer Verseuchung der Kulturen durch andere 30 dem enthalten diese Lösungen eine geringe Menge
Mikroorganismen infolge der relativ kurzen Fermen- eines Pufferstoffes, vor allem Calciumcarbonat, wobei
tationsperiode wesentlich verringert worden ist. ein geeigneter Zusatz bei 0,1% liegt.
Unter Berücksichtigung der vorstehend erwähnten Für die Durchführung des Fermentationsverfahrens
Grundsätze können zahlreiche Nährlösungen ver- wird der Pü-Wert der Nährlösung mittels Natriumwendet
werden, welche die erwähnten Merkmale auf- 35 hydroxyd, Caliumhydroxyd oder einem anderen geweisen.
Ein außerordentlich befriedigend arbeitendes eigneten Alkali auf einen Wert im Bereich zwischen
Nährmedium besteht aus einer wässerigen Flüssigkeit, 7,2 und 7,6 eingestellt. Die Nährlösung wird anwelche
1,86% Zucker- oder Rübenmelasse, 1,4% schließend 20 bis 30 Minuten lang bei 121° C in ein-
»Pharmamedia« (ölfreies Mehl aus den Schalen von zelnen Ansätzen sterilisiert. Der Fermentationsbottich,
Baumwollsamen), 1,67% Feststoffe aus einer Ge- 40 welcher die so hergestellte Nährlösung aufnimmt,
treideweiche sowie einen Pufferstoff enthält, um den wird dann mit etwa 5 Volumprozent vegetativem
pH-Wert innerhalb der nachstehend genannten bevor- Impfgut beimpft, welches sich vorzugsweise in der
zugten Bereiche zu halten. Calciumcarbonat in einer »Log Phase« des Wachstums befindet, obwohl an
Menge von 0,1%, bezogen auf die Nährlösung, hat dieser Stelle bemerkt werden kann, daß das Stadium
sich als ein besonders günstiger Pufferstoff erwiesen. 45 der Überführung des Impfgutes für den Enderfolg
Gute, aber nicht in gleicher Weise befriedigende Er- nicht kritisch ist.
gebnisse werden erstens mit einer wässerigen Flüssig- Das vegetative Impfgut für die Behälter der Aus-
keit mit einem Gehalt von 1,4% an Rübenmelasse saat und der Fermentationsbottiche kann mittels der
und 1,2% an Feststoffen aus einer Getreideweiche üblichen im Tauchverfahren arbeitenden Fermentie-
und zweitens mit einer wässerigen Nährlösung er- 50 rungsmethoden hergestellt werden, und es besteht im
halten, welche 0,6% Rübenmelasse und 0,5% Fest- allgemeinen aus zwei oder mehr Übergangsstadien
stoffe aus einer Getreideweiche enthält, wobei in einer in Flaschen geschüttelten, auf einer Nährbrühe
jedem Fall noch 0,1% Calciumcarbonat als Puffer- gezüchteten Kultur. Im folgenden wird eine geeignete
stoff vorliegen. Die zwei zuletzt erwähnten Nährlösun- Arbeitsweise zur Herstellung eines solchen Impfgutes
gen bewirken zwar eine ausgezeichnete Sporenbildung, 55 beschrieben:
doch ist das Zellwachstum wesentlich geringer im Von einer 24 bis 48 Stunden alten Kultur des
Vergleich zu dem zuerst erwähnten besonders bevor- Bacillus thuringiensis, welche auf der Oberfläche eines
zugten Nährmedium. Nährbodens aus Agar-Agar wächst, wird mit einer
Obwohl zahlreiche assimilierbare Kohlehydrate im Schlinge ein Teil der Organismen entnommen und
Rahmen der Erfindung verwendet werden können, 60 zur Beimpfung von 75 ml Nährbrühe verwendet,
wie die verschiedensten Zuckerarten, Rohrzucker- welche sich in einer Erlenmeyerflasche von 500 ml
melasse, Rübenmelasse und ähnliche Stoffe, so haben Inhalt befindet. Die Inkubationsperiode wird mit Vorsieh
doch Rübenmelassen als ganz besonders günstig teil bei einer Temperatur von 30° C unter intensiver
erwiesen. In gleicher Weise können an Stelle der Fest- Sauerstoffzufuhr durchgeführt. Die Belüftung erfolgt
stoffe aus Getreideweichen, welche zu besonders gün- 65 vorteilhaft in der Weise, daß man die beimpften
'Stigen Resultaten führen, auch andere Materialien zur Flaschen in einen drehbaren Schüttler einstellt,
Anwendung kommen, beispielsweise Sojawürze, Würz- welcher pro Minute 220 Bewegungen von 2,54 cm
grundlage 2 C (A. E. Staley Mfg. Co.), welches ein Länge ausführt. 24 Stunden nach der obenerwähnten
ersten Inkubationszeit wird ein Kolben von 11 Inhalt,
welcher 125 ml eines wässerigen Mediums mit 1,02 % Rübenmelasse, 0,8510Zo' Festkörpern aus einer Getreideweiche
und 0,1% Calciunicarbonat enthält, mit 5 bis 10% dieser Kultur in der Nährbrühe beimpft
und dann, wie schon beschrieben, inkubiert. Nach 24 Stunden Inkubationszeit kann der Inhalt des zuletzt
erwähnten Kolbens als Saatkultur für das weitere Verfahren verwendet werden.
Die Fermentation selbst wird nach erfolgter Beimpfung, wie oben beschrieben, vorzugsweise bei
einem Druck von 0,35 kg/cm2 und einer Oberflächengeschwindigkeit
von etwa 1,61 m/min am Belüfter mit oder ohne Rühren und bei einer Inkubationstemperatur
von etwa 30° C durchgeführt. Der pH-Wert des Fermentationsansatzes sinkt schnell von seinem Anfangswert
zwischen etwa 7,2 und 7,6 bis auf etwa 6,4 bis 6,6 ab und steigt anschließend sehr rasch auf
einen Wert zwischen 7,5 und 8,5. Insbesondere wenn Fermentationsmedien verwendet werden, welche etwa
1,86% Rüben- oder Rohrzuckermelasse, 1,4% »Pharmamedia«, 1,7% Festkörper aus Getreideweicheln
und 0,1% Calciumcarbonat enthalten, beträgt die Gesamtmenge an Bakterienzellen pro Kubikzentimeter
etwa 2 bis 5 · 109 und etwa 3 bis 4 Stunden; nachdem das größte Wachstum erreicht worden
ist, beginnt die Sporenbildung. Diese Sporenbildung setzt sich dann in relativ konstanter Geschwindigkeit
noch etwa 5 bis 10 Stunden nach Erreichen der Wachstumsspitze fort, und vor diesem Zeitpunkt tritt
kaum eine Zellzersetzung ein. Die Fermentationsperiode dauert gewöhnlich etwa 14 bis 32 Stunden,
wobei das Optimum üblicherweise zwischen 16 und 20 Stunden liegt.
Die Isolierung der gebildeten Sporen und Parasporalkörper wird vorteilhaft unter Zusatz einer
Filterhilfe, beispielsweise »Celite 512«, in Mengen von etwa 2% durchgeführt, wobei durch eine Filterpresse
(Druckfilter) filtriert und der Filterkuchen unter erzwungener Luftzirkulation oder in einem
Vakuumtrockner bei 40 bis 50° C getrocknet wird. Die Abtrennung der Zellen und Parasporalkörper von
der verbrauchten Fermentationsbrühe kann jedoch auch auf andere Weise erfolgen, beispielsweise mittels
Zentrifugen mit festen oder perforierten Auffangkörben oder mittels Separatoren; es brauchen auch
keine Filtermittel zur Anwendung zu kommen. Die für die Isolierung getroffenen Maßnahmen sollen so
schnell als möglich durchgeführt werden, insbesondere die Filtration selbst, damit noch nicht beschädigte
Zellen möglichst nicht aufgebrochen werden und die Sprossung der Sporen und/oder eine Selbstzersetzung
ganz verhindert oder wesentlich verringert wird.
Wenn in der vorliegenden Beschreibung auf die Zeit Bezug genommen wird, in welcher eine Erschöpfung
oder ein Verbrauch der fermentierbaren Kohlehydrate stattfindet, so bezieht sich diese Aufgabe
auf diejenigen Kohlehydrate, welche für das Wachstum der Mikroorganismen zur Verfügung
stehen. Dieser Anteil kann leicht mittels üblicher Arbeitsweisen der einschlägigen Technik bestimmt
werden. In gleicher Weise bezieht sich die Erschöpfung oder der Verbrauch von Stickstoff im vorliegenden
Fall auf denjenigen Anteil, welcher für das Wachstum der Mikroorganismen zur Verfügung steht.
Auch dieser Anteil läßt sich durch analytische Verfahren messen, welche in der Fermentationstechnik
bekannt sind.
Wie schon erwähnt wurde, soll das Gleichgewicht in der Nährlösung so eingestellt werden, daß die fermentierbaren
Kohlehydrate und der für das Wachstum von Bacillus thuringiensis oder Bacillus sotto
5 oder einem vergleichbaren, einen Insektenkrankheitsstoff erzeugenden Bazillus, wie Bacillus entomocides
var. entomocides, zur Verfügung stehende Stickstoff zum gleichen Zeitpunkt nach Beginn der Sporenbildung
erschöpft oder verbraucht sind. Bei Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens dauert
die Fermentation gewöhnlich etwa 28 bis 32 Stunden, obwohl diese Zeit selbstverständlich auch variieren
kann. Mehrere Stunden nach Erreichen des maximalen Wachstums beginnt die Sporenbildung, und im
allgemeinen liegt dieser Beginn etwa 10 bis 18 Stunden nach dem Fermentationsanfang. Es werden aber
auch gute Ergebnisse erzielt, wenn die Erschöpfung oder der Verbrauch der zur Verfugung stehenden
fermentierbaren Kohlehydrate und die Erschöpfung oder der Verbrauch des für das Wachstum verfügbaren
Stickstoffes nach Einsetzen der Sporenbildung inerhalb eines Zeitabstandes zueinander von 2 bis
4 Stunden und selbst bis zu 6 Stunden eintreten.
Die folgende Tabelle zeigt die Ergebnisse von verschiedenen Fermentationsansätzen, welche unter den oben beschriebenen Fermentierungsbedingungen durchgeführt wurden. Bei den ersten sieben Versuchen wurde ein wäßriges Fermentationsmedium mit einem Gehalt von etwa 1,4% Rübenmelasse, etwa 1,2% Feststoffen aus einer Getreideweiche und 0,1% Calciumcarbonat verwendet, während bei den Versuchen 8 und 9 ein wäßriges Fermentationsmedium zur Anwendung kam, welches etwa 1,86% Rübenmelasse, etwa 1,4%' Pharmamedia, etwa 1,7% Feststoffe aus Getreideweichen und 0,1% Calciumcarbonat enthielt. Die Fermentation wurde in jedem Fall mittels Bacillus thuringiensis durchgeführt.
Die folgende Tabelle zeigt die Ergebnisse von verschiedenen Fermentationsansätzen, welche unter den oben beschriebenen Fermentierungsbedingungen durchgeführt wurden. Bei den ersten sieben Versuchen wurde ein wäßriges Fermentationsmedium mit einem Gehalt von etwa 1,4% Rübenmelasse, etwa 1,2% Feststoffen aus einer Getreideweiche und 0,1% Calciumcarbonat verwendet, während bei den Versuchen 8 und 9 ein wäßriges Fermentationsmedium zur Anwendung kam, welches etwa 1,86% Rübenmelasse, etwa 1,4%' Pharmamedia, etwa 1,7% Feststoffe aus Getreideweichen und 0,1% Calciumcarbonat enthielt. Die Fermentation wurde in jedem Fall mittels Bacillus thuringiensis durchgeführt.
Versuch Nr. |
Alter des Fermen tations- ansatzes bei Erschöpfung an Kohle hydraten in Stunden |
Alter des Fermen | Sporen bildung zum Zeit punkt der Isolierung in°/o |
|
40 45 |
1 | 10 | tationsansatzes zum Zeitpunkt des Auf hörens des Zellenwachstums (Verbrauch des verfügbaren Stickstoffes) in Stunden |
90 |
2 | 16 | 15 | etwa 100 | |
3 | 16 | 10 | 87 | |
4 | 12 | 20 | etwa 100 | |
50 | 5 | 12 | 18 | etwa 100 |
6 | 16 | 16 | etwa 100 | |
7 | 16 | 14 | etwa 100 | |
8 | 10 | 16 | etwa 100 | |
9 | 10 | 12 | etwa 100 | |
55 | 14 | |||
Bei Beachtung der erfindungsgemäßen Lehre gemäß den vorstehenden Erläuterungen wurden in typischen
Versuchen, bei welchen Kulturen mit einem Gesamtgewicht von 149,7 kg und einer Gesamtmenge
an Bakterienzellen zwischen 1 und 5 · 109 und einer gleichen Menge an Sporen verwendet worden sind,
nach einer Behandlung mit 2% »Celite 512«, Trocknen und Vermählen etwa 3,40 bis 4,08 kg eines
feinen Pulvers erhalten, welches einen Festkörpergehalt von 96,7% und eine Sporenmenge zwischen
15 und 35 · 109 aufwies. Falls »Celite« oder eine ähnliche Filterhilfe nicht verwendet wird, können End-
produkte erhalten werden, deren Wirksamkeit noch einige Male größer ist, beispielsweise fünf- bis zehnmal so groß.
Es hat sich für die praktische Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens als vorteilhaft erwiesen,
den Mikroorganismus Bacillus thuringiensis bzw. seine verschiedenen Abarten oder Mutanten zu
verwenden.
Wie schon dargelegt wurde, hat es sich weiterhin als besonders vorteilhaft erwiesen, die Gewinnung der
Sporen und Parasporalkörper mittels einer Filterhilfe, wie »Celite 512«, durchzuführen, wobei mit einem
Druckfilter filtriert und dann getrocknet wird. Es wurde auch schon auf die Bedeutung hingewiesen,
welche der Schnelligkeit des Arbeitens insbesondere in der Filtrationsstufe zukommt, weil nur so ein Aufbrechen
der noch nicht beschädigten Zellen sowie eine Sprossung der Sporen und/oder eine Selbstauflösung
der Zellen verbindert oder wenigstens stark verringert werden kann. Diese Maßnahme stellt ein
Kennzeichen der Erfindung dar, welche ganz unabhängig davon ist, ob die weitere erfindungsgemäße
Lehre befolgt wird, nämlich die Einregulierung des Nährmediums im Fermentationsprozeß, derart, daß
die fermentierbaren Kohlhydrate und der für das Wachstum verfügbare Stickstoff etwa gleichzeitig
oder mit einem Zeitunterschied, der nicht mehr als 6 Stunden beträgt, nach dem Einsetzen der Sporenbildung
erschöpft sind. An Stelle von »Celite 512« können dabei andere Filterhilfen, wie Diatomeenerde,
Bentonit, absorbierende Silicate, wie Methocel, und ähnliche Stoffe verwendet werden.
Claims (5)
1. Verfahren zur Herstellung von Insektiziden auf üblichem biologischem Wege unter Verwendung
eines fermentierbaren Kohlehydrates und assimilierbaren Stickstoff enthaltenden Nährmediums
und eines sporenbildenden Mikroorganismus, der gleichzeitig einen Parasporalkörper
erzeugt, dadurch gekennzeichnet, daß die Zusammensetzung des Nährmediums so eingestellt
wird, daß die Kohlehydrate und der assimilierbare Stickstoff in einem Abstand von nicht mehr als
6 Stunden untereinander und seit Beginn der Sporenbildung erschöpft werden, worauf die gebildeten
Sporen und die Parasporalkörper aus dem Nährmedium abgetrennt werden.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Fermentation während
eines Zeitraums von 14 bis 32 Stunden und bei einem Anfangs-pg-Wert zwischen 7,2 und 7,6
durchgeführt wird.
3. Verfahren nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß die fermentierbaren Kohlehydrate
und der für das Wachstum der Mikroorganismen zur Verfügung stehende Stickstoff etwa zum gleichen Zeitpunkt nach Beginn der
Sporenbildung erschöpft sind, welche vorzugsweise innerhalb von 3 bis 7 Stunden nach
Erreichen der Wachstumsspitze einsetzt.
4. Verfahren nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Abtrennung der Sporen
und Parasporalköxper auf dem erschöpften Nährmedium unter Verwendung einer Filterhilfe in
Mengen von vorzugsweise 2% durchgeführt wird.
5. Verfahren nach Anspruch 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß als fermentierbare Kohlehydrate
in der Nährlösung für den Mikroorganismus Rübenmelassen und ölfreie Getreidemehle
oder -schrote zur Anwendung kommen.
©309 767/393 11.63
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US74816458A | 1958-07-14 | 1958-07-14 | |
US818999A US3073749A (en) | 1959-06-09 | 1959-06-09 | Preparation of microbial insecticide |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE1158746B true DE1158746B (de) | 1963-12-05 |
Family
ID=27114890
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DEB53932A Pending DE1158746B (de) | 1958-07-14 | 1959-07-09 | Herstellung von Insektiziden auf biologischem Wege |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE1158746B (de) |
FR (1) | FR1233208A (de) |
GB (1) | GB907030A (de) |
-
1959
- 1959-06-30 GB GB22440/59A patent/GB907030A/en not_active Expired
- 1959-07-08 FR FR799647A patent/FR1233208A/fr not_active Expired
- 1959-07-09 DE DEB53932A patent/DE1158746B/de active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
FR1233208A (fr) | 1960-10-12 |
GB907030A (en) | 1962-09-26 |
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