DE102007050165B4 - Stabilisierte Lösung, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung und Arzneimittel in Form einer stabilisierten Lösung - Google Patents
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Abstract
Stabilisierte Lösung umfassend ein hydrophobes Protein, ausgewählt aus der Gruppe natürliches oder rekombinantes humanes Interferon-alpha, –β, gamma, Interleukin II, G-CSF, Kolonie stimulierende Faktoren, Insulin, Growth Hormon, Cytokin, und/oder Mischungen hiervon und mindestens einen mehrwertigen Alkohol in einer Konzentration von 5 bis 15 Vol.-% bezogen auf das Gesamtvolumen der Lösung zur Stabilisierung der Lösung, wobei die Lösung einen pH-Wert in einem Bereich von pH 6,5–8,0 aufweist, frei von humanem Serumalbumin ist und das hydrophobe Protein in einer Konzentration von 80 bis 120 μg/ml, bezogen auf das Gesamtvolumen der stabilisierten Lösung, in der stabilisierten Lösung enthalten ist.
Description
- Die vorliegende Erfindung betrifft eine stabilisierte Lösung umfassend ein hydrophobes Protein, ein Verfahren zu dessen Herstellung sowie die stabilisierte Lösung als Arzneimittel und dessen Verwendung.
- Hydrophobe Proteine werden in der Humanmedizin häufig als Therapeutika eingesetzt. Problematisch bei diesem Einsatz ist jedoch, dass die hydrophoben Proteintherapeutika in Abwesenheit von speziellen Stabilisatoren abhängig von ihrer Konzentration, pH-Wert und Ionenstärke der Reagenzien während der Aufarbeitung, Formulierung und Lagerung Aggregate bilden, die inaktives und immunogenes Protein enthalten. Um diese Problematik zu umgehen, wurde in der Vergangenheit humanes Serumalbumin (HSA) während der Kultivierung, Aufarbeitung und Formulierung eingesetzt. Da bei dem Einsatz von natürlichem HSA (welches aus menschlichem Blutplasma gewonnen wird) die Gefahr einer Viruskontamination gesteigert ist und der Einsatz von rekombinantem HSA aus finanziellen Gründen nicht wirtschaftlich ist, wird HSA heutzutage nicht mehr eingesetzt. Auch wird HSA von den Zulassungsbehörden aus vorstehend genannten Gründen und der Tatsache, dass die Anwesenheit von HSA die Qualitätskontrolle in Bezug auf den Reinheitsgrad erschwert, nicht mehr zugelassen.
- Als HSA-Ersatz werden derzeit Kohlenhydrate und Detergenzien wie Polysorbate eingesetzt, die jedoch aufgrund ihrer Neigung immunogene Aggregate auszubilden nachteilig sind. Alternativ werden Aminosäuren mit Kohlenhydraten zur Stabilisierung der Proteintherapeutika eingesetzt, die jedoch den Zusatz von hohen Argininkonzentrationen (bis zu 50 mg/ml) erfordern und dennoch keine zufrieden stellenden Ergebnisse im Hinblick auf die Stabilisierung liefern. Zusätzlich bedingt der Zusatz von hohen Argininkonzentrationen einen extrem niedrigen pH-Wert der damit stabilisierten Therapeutika, so dass bei beispielsweise parenteraler Applikation die applizierten Proteine aggregieren und somit Noxen an den Einstichstellen bedingen.
- In „Mechanism of Polyol-Induced Protein Stabilization: Solubility of Amino Acids and Diglycine in Aqueous Polyol Solutions” von K. Gekko aus J. Biochem. 90, 1633–1641 (1981) wird die Stabilisierung von Proteinen durch Polyole wie z. B. Glycerin beschrieben.
- Die
WO 96/33257 A1 - Weiterhin ist der in der
japanischen Druckschrift 59025333 A - In der
WO 2004/108152 A1 - Die
EP 1 224 940 B1 betrifft flüssige Formulierungen von humanem Interferon-β. Die Formulierungen sind dadurch gekennzeichnet, dass sie einen pH-Wert im schwach sauren bis neutralen Bereich zwischen 5 und 8 aufweisen und eine Wirkstoffkonzentration von bis zu 10 MU/ml aufweisen. - Die
DE 38 88 197 T2 betrifft eine flüssige pharmazeutische Zusammensetzung mit γ-Interferon. Für diese Zusammensetzung, die bevorzugt einen pH-Wert im Bereich von 4 bis 6 aufweist, können mehrwertige Zuckeralkohole enthalten sein. - In der
EP 0 080 879 A2 ist eine pharmazeutische Zusammensetzung beschrieben, die Interferon, Zuckeralkohol als Stabilisator, übliche pharmazeutische Träger oder Verdünnungsmittel enthält. - Die
WO 2005/054289 A1 - In der
GB 2 119 383 A - Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es daher, eine stabilisierte Lösung eines hydrophoben Proteins bereitzustellen, bei der die Gefahr einer Viruskontamination nicht gegeben ist und deren Applikation bei gleichzeitiger gesundheitlicher Verträglichkeit keine unerwünschten Reaktionen bei dem Patienten hervorruft. Desweiteren sollte bei deren Lagerung keine Aktivitätsverluste und Aggregatbildungen auftreten und die Lösung einfach und kostengünstig in der Herstellung sein.
- Diese Aufgabe wird durch die stabilisierte Lösung, das Verfahren zu deren Herstellung sowie das Arzneimittel und dessen Verwendung gemäß den vorliegenden unabhängigen Ansprüchen gelöst. Vorteilhafte Ausführungen werden in den abhängigen Ansprüchen gegeben.
- Erfindungsgemäß ist unter dem Begriff hydrophobes Protein ein Protein zu verstehen, das durch einen hohen Anteil an hydrophoben Aminosäuren und eine geringe Löslichkeit gekennzeichnet ist. Beispielsweise weist natürliches oder rekombinantes humanes Interferon-β einen Anteil von 40% hydrophober Aminosäuren auf. Unter einer geringen Löslichkeit ist eine Löslichkeit von ≤ 0,3 mg/ml zu verstehen. In der vorliegenden Erfindung werden als hydrophobe Proteine Proteine eingesetzt, die mit den jeweiligen Rezeptorproteinen über hydrophobe sites (Bindungsstellen) hoch affin binden. Erfindungsgemäß werden als hydrophobe Proteine natürliches oder rekombinantes Interferonalpha, -β, -gamma, Erythropoietin, Interleukin II, G-CSF, Kolonie stimulierende Faktoren, Insulin, Growth Hormone, Cytokine und/oder Mischungen hiervon eingesetzt. Erfindungsgemäß ist natürliches oder rekombi setzt. Erfindungsgemäß ist natürliches oder rekombinantes humanes Interferon-β zu nennen.
- Die zur Stabilisierung eingesetzten mehrwertigen Alkohole sind Alkohole, die mindestens zwei OH-Gruppen aufweisen, wobei die OH-Gruppen derart angeordnet sind, dass die Alkohole einen hydrophilen und hydrophoben Bereich aufweisen. Desweiteren sollten die eingesetzten mehrwertigen Alkohole keine gesundheitsschädlichen Eigenschaften aufweisen und gegebenenfalls für eine parenterale Applikation zugelassen sein. Beispiele der für die Erfindung geeigneten mehrwertigen Alkohole sind kurzkettige, mehrwertige Alkohole sowie Oligomere hiervon. Bevorzugt zu nennen sind Propylenglycol, Glycerin, Butylenglycol, Pentandiol und/oder Mischungen hiervon. Besonders bevorzugt sind Propylenglycol und Glycerin zu nennen. Die Konzentration des einzusetzenden Alkohols ist abhängig von dem Hydrophobizitätsgrad des hydrophoben Proteins. So werden beispielsweise im Falle von rhuInterferon-β 1–60%ige mehrwertige Alkohole zur Stabilisierung eingesetzt.
- Erfindungsgemäß sind die mehrwertigen Alkohole in einer Konzentration von 5 bis 15 Vol.-%, bezogen auf das Gesamtvolumen der stabilisierten Lösung, in der stabilisierten Lösung enthalten.
- Die erfindungsgemäßen hydrophoben Proteine sind in einer Konzentration von 80 bis 120 μg/ml, bezogen auf das Gesamtvolumen der stabilisierten Lösung, in der stabilisierten Lösung enthalten.
- Bevorzugt ist das hydrophobe Protein und der mehrwertige Alkohol üblicherweise in einem Verhältnis von 1:1.000 bis 1:10.000, bevorzugt von 1:200 bis 1:2.000, besonders bevorzugt von 1:500 bis 1:1.500, in der stabilisierten Lösung enthalten.
- Erfindungsgemäß weist die Lösung einen pH-Wert in einem Bereich von pH 6,5 bis pH 8 auf.
- Neben den mehrwertigen Alkoholen kann die erfindungsgemäß stabilisierte Lösung weitere Hilfs- und Zusatzstoffe enthalten. Beispiele hierfür sind Zuckeralkohole, wie z. B. Mannitol und/oder Sorbitol.
- Geeignete Puffermedien, die gegebenenfalls in der erfindungsgemäßen stabilisierten Lösung enthalten sein können sind gepufferte Salzlösungen mit neutralem pH-Wert. Bevorzugt wird als Puffermedium ein Na-Phosphatpuffer eingesetzt. Ebenso können Trispuffer oder Hepes-Puffer eingesetzt werden.
- Die erfindungsgemäß stabilisierte Lösung kann auch lyophilisiert werden. Das entsprechende Lyophilisat ist vor Applikation in einem entsprechenden Puffermedium aufzulösen.
- Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung einer erfindungsgemäßen stabilisierten Lösung, welches durch den sukzessiven Einsatz von mehrwertigen Alkoholen und der Einhaltung eines neutralen pH-Wertes während der einzelnen Verfahrensschritte gekennzeichnet ist. Die Herstellung einer erfindungsgemäß stabilisierten Lösung umfassend ein hydrophobes Protein gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, dass die Aufarbeitung des hydrophoben Proteins über mindestens einen chromatographischen Schritt, bevorzugt drei chromatographische Schritte, erfolgt, in denen mindestens ein mehrwertiger Alkohol dem aus der Zellkultivierung erhaltenen Zellkulturüberstand und/oder den aus den jeweiligen Chromatographieschritten erhaltenen Eluaten und/oder den Elutionsmitteln zugesetzt wird, und die einzelnen Schritte bei einem neutralen pH-Wert durchgeführt werden. Gegebenenfalls kann bereits bei der Kultivierung (Expression und Sekretion) der das jeweilige hydrophobe Protein produzierenden Zellen ein mehrwertiger Alkohol zugegeben werden.
- Unter dem Begriff „Aufarbeitung” ist im vorliegenden Zusammenhang die Aufkonzentrierung des jeweiligen hydrophoben Proteins unter gleichzeitiger Abtrennung von sekretierten Wirtszellproteinen und Fremdproteinanteilen, welche beispielsweise aus den in der Medienmischung, die zur Zellkultivierung dient, bereits vorhandenen Proteinzusätzen resultieren, zu verstehen. Als bevorzugte Trennverfahren, die zu einer Hochreinigung des hydrophoben Proteins führen, sind chromatographische Verfahren zu nennen.
- Als Chromatographieverfahren für die einzelnen erfindungsgemäßen Chromatographieschritte sind Affinitätschromatographie- und/oder Gelfiltrationschromatographieverfahren zu nennen. Bevorzugt werden für die Affinitätssäulenchromatographie Säulen eingesetzt, deren Säulenmatrix mit den hydrophoben Proteinen hydrophobe Wechselwirkungen und/oder Metallchelatkomplexe ausbilden. Für die Gelfiltrationssäulenchromatographie werden Säulen eingesetzt, die die Proteine aufgrund ihrer unterschiedlichen Größe auftrennen.
- Die anspruchsgemäße Reihenfolge der einzelnen Chromatographieschritte ist nicht zwingend und kann variiert werden.
- Geeignete Elutionsmittel zur Durchführung einer Affinitätschromatographie, bei der die Säulenmatrix hydrohobe Wechselwirkungen mit dem hydrophoben Protein ausbildet, sind Elutionsmittel, die die Wechselwirkungen zwischen hydrophobem Protein und hydrophobem Affinitätschromatographiematerial eliminieren, wie beispielsweise Ethylenglycol, Propylenglycol, Glycerin und/oder Mischungen hiervon. Als einzusetzende Säulen kommen Cibacron Blue-Sepharose, poly(A)-, Glutathion-, ConA-, Heparinsepharose Säulen und/oder Kombinationen dieser Säulen, bevorzugt eine Cibacron Blue-Sepharose-Säule, in Frage, aber auch jede andere Art von Trägermaterial in Form von ähnlichen Polymermaterialien.
- Geeignete Elutionsmittel zur Durchführung einer Affinitätschromatographie, bei der die Säulenmatrix Metallchelatkomplexe mit dem hydrophoben Protein ausbildet, sind Salze, die geeignet sind eine Änderung des pH-Wertes zu bewirken und/oder Imidazol. Als einzusetzende Säulen kommen Zink Chelat-, Nickel Chelat, Chrom Chelat-Säulen und/oder Kombinationen dieser Säulen, bevorzugt Zink Chelat (Chelating Sepharose) Säulen, in Frage.
- Geeignete Elutionsmittel zur Durchführung einer Gelfiltrationschromatographie sind Elutionsmittel, die geeignet sind abhängig vom Säulenmaterial das jeweilige hydrophobe Protein in einem Molekulargewichtsbereich von 5 bis 200 000 Da aufzutrennen. Das Säulenmaterial sollte so gewählt werden, dass zwischen Säulenmaterial und hydrophoben Protein nur geringe hydrophobe Wechselwirkungen ausgebildet werden. Als einzusetzende Säulen kommen P75-, S-100-, S-200-, Bio-Gel P30-Säulen, bevorzugt eine P75-Säule, in Frage.
- Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die erfindungsgemäße stabilisierte Lösung als Arzneimittel, wobei dieses noch weitere Hilfs- und Zusatzstoffe, wie z. B. Zuckeralkohole, wie bspw. Mannitol und/oder Sorbitol umfassen kann.
- Die Applikation des erfindungsgemäßen Arzneimittels erfolgt parenteral beispielsweise intramuskulär, subkutan oder intravenös. In dem erfindungsgemäßen Arzneimittel ist das jeweilige hydrophobe Protein jeweils in einer Menge von 5 bis 300 μg/Dosis, bevorzugt von 5 bis 100 μg/Dosis enthalten, wobei die Injektionsfrequenz von dem jeweiligen eingesetzten hydrophoben Protein und der Indikation abhängig ist.
- Das erfindungsgemäße Arzneimittel kann neben der erfindungsgemäßen stabilisierten Lösung auch noch weitere Arzneistoffe umfassen. Lediglich beispielhaft sei die Kombination von humanem Interferon-β mit Glatirameracetat (Copaxone) genannt.
- Ebenfalls Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäß stabilisierten Lösung zur Behandlung von Diabetes, Anämie, Virusinfektionen, Tumoren, Autoimmunerkrankungen und/oder Kombinationen dieser Erkrankungen.
- Lediglich beispielhaft wird nachstehend anhand von humanem Interferon-β (IFN-β) eine mögliche Ausführung der vorliegenden Erfindung erläutert, ohne sie hierauf zu beschränken.
- Bei %-Angaben wird im Folgenden immer von Volumenprozent (V/V) ausgegangen.
- Die Konzentrationsangabe H bedeutet mol/l.
- Kultivierung der Zellen
- Als Zellen werden CHO-Zellen (Ovarialzellen des chinesischen Hamsters) eingesetzt. Die Zellen werden in einer Medienmischung aus 50% MEM-alpha und 50% CHO-S-SFM-II mit 1% MEM Vitamins und 1% Glycerin kultiviert. Es konnte kein Einfluss auf die Zellvitalität durch das Glycerin festgestellt werden.
- 1. Säulenschritt: Cibacron Blue-Sepharose-Säule
- Einstellen des Zellkulturüberstandes auf 15% Ethylenglycol und 1 M NaCl in einem Zellkulturpuffer (Nacarbonat, Kohlensäurepuffer) pH 7,2.
- Elution von der Säule mit einem 0,02 M Phosphatpuffer pH 7,2 mit 1 M NaCl und 60% Ethylenglycol.
- Das zugesetzte Ethylenglycol wird in den späteren Schritten vollständig abgetrennt. Möglich ist jedoch auch, auf Ethylenglycol vollständig zu verzichten und anstelle dessen Propylenglycol einzusetzen.
- 2. Säulenschritt: Zink-Chelat-Säule (Chelating Sepharose)
- Einstellen des Eluats der Cibacron Blue-Sepharose (Blue Sepharose Eluat) auf 0,02 M Phosphatpuffer pH 7,0 mit 0,5 M NaCl und 30% Ethylenglycol.
- Nach dem Auftrag waschen mit einem Waschpuffer der 10% Glycerin und 0,5 M NaCl in einem 0,02 M Phosphat pH 7,0 enthält.
- Elution mit einem Phosphatpuffer (0,02 M) mit 0,5 M NaCl, 10% Glycerin und 0,1 M Imidazol.
- 3. Säulenschritt: Gelfiltration in einer P75 16 60
- Einspritzen des Eluats der Chelatsäule; Lauf dann im Puffer:
0,02 M Phosphatpuffer, 10% Propylenglycol, 0,5 M NaCl pH 6,8 - Eine anschließende sofortige Stabilisierung mit HSA ist nicht erforderlich. Übersicht über die Bilanzen der Aufarbeitungsmethode
Erfindungsgemäße Aufarbeitung (ohne HSA mit mehrwertigen Alkoholen) Ausbeute (gesamt) [%] Zellkulturüberstand 100 Cibacron Blue-Sepharose 85 (85) Chelating Sepharose 81 (72) Gelfiltration 77 (53) -
1 zeigt eine Übersicht über die Aufarbeitung über alle Säulen sowohl in der Silberfärbung als auch im spezifischen Westernblot. -
2 zeigt die Silberfärbung und den Westernblot der einzelnen Fraktionen einer Gelfiltration. Wie aus2 ersichtlich, ist das Interferon beta lediglich in Fraktion III der Gelfiltration zu finden. Auffällig hierbei ist die gute Trennung des Interferons (Fraktion III) von Fremdproteinen. Als Referenz diente das Eluat der Chelating Sepharose. - Einen Überblick über den Stabilitätstest gibt
3 : Um die Stabilität der Formulierung zu überprüfen, wurde das Produkt der Gelfiltration aufkonzentriert und sterilfiltriert. Eine Probe wurde 15 Tage bei Raumtemperatur inkubiert, als Vergleich diente ein Aliquot bei 4°C. Es zeigte sich, dass keine Abbauprodukte oder Degradation festzustellen waren. Auch die Aktivität der Probe im Vergleich zu der 4°C Kontrolle und dem Messwert vor der Inkubation war innerhalb der Messungsgenauigkeit identisch. Dies belegt, dass hydrophobe Proteine alleine durch mindestens einen mehrwertigen Alkohol stabilisierbar sind. -
3 zeigt den Stabilitätstest des gelfiltrationsgereinigten und aufkonzentrierten Produktes. Es ist deutlich zu erkennen, dass keine Degradation nach 15 Tagen bei Raumtemperatur festzustellen ist.
Claims (17)
- Stabilisierte Lösung umfassend ein hydrophobes Protein, ausgewählt aus der Gruppe natürliches oder rekombinantes humanes Interferon-alpha, –β, gamma, Interleukin II, G-CSF, Kolonie stimulierende Faktoren, Insulin, Growth Hormon, Cytokin, und/oder Mischungen hiervon und mindestens einen mehrwertigen Alkohol in einer Konzentration von 5 bis 15 Vol.-% bezogen auf das Gesamtvolumen der Lösung zur Stabilisierung der Lösung, wobei die Lösung einen pH-Wert in einem Bereich von pH 6,5–8,0 aufweist, frei von humanem Serumalbumin ist und das hydrophobe Protein in einer Konzentration von 80 bis 120 μg/ml, bezogen auf das Gesamtvolumen der stabilisierten Lösung, in der stabilisierten Lösung enthalten ist.
- Stabilisierte Lösung gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die Lösung zur Stabilisierung außer mindestens einem mehrwertigen Alkohol keine weiteren Stoffe zur Stabilisierung enthält.
- Stabilisierte Lösung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass das hydrophobe Protein ein humanes oder tierisches hydrophobes Protein ist.
- Stabilisierte Lösung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der mehrwertige Alkohol mindestens zwei OH- Gruppen und einen hydrophilen und hydrophoben Bereich aufweist.
- Stabilisierte Lösung gemäß Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass der mehrwertige Alkohol, ausgewählt ist aus der Gruppe Ethylenglycol, Propylenglycol, Glycerin, Butylenglykol, Pentandiol und/oder Mischungen hiervon.
- Stabilisierte Lösung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die stabilisierte Lösung zusätzlich ein Puffermedium umfasst.
- Stabilisierte Lösung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass das Puffermedium eine gepufferte Salzlösung, insbesondere ein Na-Phosphatpuffer, ist.
- Stabilisierte Lösung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die stabilisierte Lösung aus mindestens einem hydrophoben Protein, mindestens einem mehrwertigen Alkohol zur Stabilisierung und mindestens einem Puffermedium besteht.
- Verfahren zur Herstellung einer stabilisierten Lösung gemäß den Ansprüchen 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass es die folgenden Schritte umfasst: a) Kultivierung der das jeweilige hydrophobe Protein produzierenden Zellen in einer Medienmischung enthaltend mindestens einen mehrwertigen Alkohol bei einem pH-Wert in einem Bereich von pH 6,5–8,0, b) Aufarbeitung des das hydrophobe Protein enthaltenden Zellkulturüberstandes durch Affinitäts-Säulenchromatographie, wobei die Säulenmat rix mit dem hydrophoben Protein hydrophobe Wechselwirkungen ausbildet, und c) Aufarbeitung des aus Schritt b) erhaltenen Eluats durch Affinitäts-Säulenchromatographie, wobei die Säulenmatrix mit dem Eluat Metallchelatkomplexe ausbildet, und d) Aufarbeitung des aus Schritt c) erhaltenen Eluats durch Gelfiltrations-Säulenchromatographie e) Stabilisierung des zuvor erhaltenen hydrophoben Proteins.
- Verfahren gemäß Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, dass in Schritt b) eine Cibacron Blue-Sepharose- und in Schritt c) eine Zink-Chelat-Säule verwendet wird.
- Verfahren gemäß einem der Ansprüche 9 oder 10, dadurch gekennzeichnet, dass in Schritt c) das aus Schritt b) erhaltene Eluat mit einer Lösung enthaltend mindestens einen mehrwertigen Alkohol auf einen pH-Wert in einem Bereich von pH 6,5–8,0 eingestellt, nach dem Auftrag auf die Säule mit einem neutralen Waschpuffer enthaltend mindestens einen mehrwertigen Alkohol gewaschen und anschließend mit einem Elutionsmittel von der Säule eluiert wird.
- Verfahren gemäß einem der Ansprüche 9–11, dadurch gekennzeichnet, dass die Gelfiltration des aus Schritt c) erhaltenen Eluats bei einem neutralen pH-Wert erfolgt und ein Laufmittel enthaltend mindestens einen mehrwertigen Alkohol verwendet wird.
- Verfahren gemäß einem der Ansprüche 9–12, dadurch gekennzeichnet, dass das aus Schritt b), c) oder d) erhaltene Eluat mit mindestens einem mehrwertigen Alkohol bei einem pH-Wert in einem Bereich von pH 6,5–8,0 stabilisiert wird.
- Verfahren gemäß einem der Ansprüche 9–13, dadurch gekennzeichnet, dass der mehrwertige Alkohol ausgewählt ist aus der Gruppe Ethylenglykol, Propylenglykol, Glycerin, Butylenglycol, Pentandiol und/oder Mischungen hiervon.
- Arzneimittel in Form einer stabilisierten Lösung gemäß einem der Ansprüche 1–8, dadurch gekennzeichnet, dass das hydrophobe Protein in einer Menge von 5 bis 300 μg pro Dosis in dem Arzneimittel enthalten ist.
- Arzneimittel nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, dass das Arzneimittel ein Lyophilisat ist.
- Verwendung einer stabilisierten Lösung gemäß einem der Ansprüche 1–8 zur Behandlung von Diabetes, Anämie, Virusinfektionen, Tumoren, Autoimmunerkrankungen und/oder Kombinationen dieser Erkrankungen.
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