DE10015156A1 - Recovering biological object from biological material located on support, comprises dissolving away object from material by irradiating it using laser beam, and catapulting from support to collecting device - Google Patents

Abstract

Recovering a biological object from a biological material located on a support (3) comprises dissolving away the object from the material by irradiating it using a laser beam; and catapulting from the support to a collecting device (2). An independent claim is also included for a device for recovering a biological object from a biological material comprising a support (3) for holding the biological material; a laser source (4) for irradiating the material; a collecting device (2) for collecting the biological object; and an adjusting device (7) for adjusting the laser beam produced by the laser source. Preferred Features: Irradiation of the biological object is carried out in the form of laser blast. To catapult the biological object from the support to the collecting device, the object is radiated with a laser beam having an energy which is higher compared with the energy used to cut the biological material.

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Ge­ winnung eines biologischen Objekts aus einer biologischen Masse nach dem Oberbegriff des Anspruches 1 sowie eine entsprechende Vorrichtung nach dem Oberbegriff des Anspru­ ches 11.The present invention relates to a method for Ge extraction of a biological object from a biological Mass according to the preamble of claim 1 and one corresponding device according to the preamble of claim ches 11.

Zur Materialinjektion in lebende Zellen ist die Verwendung von sogenannten Mikrokapillaren bekannt, die über einen meist pneumatisch oder hydraulisch bewegten Mikromanipula­ tor gesteuert werden. Die gewünschten Substanzen werden unter großer mechanischer Belastung in die einzelne Zelle injiziert. Die Herstellung der sterilen Mikrokapillaren ist zeitaufwendig und kostenintensiv.The use is for material injection into living cells known from so-called microcapillaries that over a mostly pneumatically or hydraulically moved micromanipula gate controlled. The desired substances will be into the single cell under great mechanical stress injected. The production of sterile microcapillaries is time consuming and costly.

Aus diesem Grund wurde die Verwendung eines fokussierten Laserstrahls vorgeschlagen, um kleine selbstheilende Lö­ cher ohne mechanischen Kontakt in die Zellmembran zu boh­ ren. Die kurze Öffnungszeit reicht aus, um das in der um­ gebenden Flüssigkeit gelöste Material in die Zelle einzu­ schleusen. Ein mit dieser Methode verbundenes Problem be­ steht jedoch darin, dass für eine präzise Laser- Mikroinjektion die Zielobjekte sowohl lateral, d. h. in x- und y-Richtung, als auch vertikal, d. h. in z-Richtung, mit Nanometer-Genauigkeit angefahren werden müssen. Ein weiteres Problem besteht darin, die erfolgreich injizierten Zellen von den anderen Zellen zu isolieren bzw. für die weiteren Untersuchungen zu präparieren.For this reason, the use of a focused one Laser beam suggested to small self-healing Lö without mechanical contact into the cell membrane ren. The short opening time is enough to do that in the um the liquid to give dissolved material into the cell lock. A problem associated with this method is, however, that for a precise laser Microinjection the target objects both laterally, i.e. H. in x- and y direction, as well as vertical, d. H. in the z direction, with Nanometer accuracy must be approached. Another one  Problem is getting injected successfully To isolate cells from the other cells or for the to prepare further examinations.

Zur Separierung einzelner Zellen aus einer großen Zahl von in einer Flüssigkeit dispergierten biologischen Objekten sind geeignete Trenn- bzw. Sortiervorrichtungen kommmerzi­ ell erhältlich. Während bei der fluoreszenz-aktivierten Zellsortierung ("Fluorescence Activated Cell Sorter", FACS) elektrostatische Prinzipien zur räumlichen Separati­ on zum Einsatz kommen, wird bei der magnetisch aktivierten Zellsortierung ("Magnetic Activated Cell Sorter", MACS) mit magnetischen Kräften gearbeitet. Hierbei liegen die Zellen jedoch nicht auf einem planaren Träger nebeneinan­ der. Überdies haben beide Methoden den Nachteil, dass sich manche Objekte nur eingeschränkt (FACS) oder überhaupt nicht getrennt voneinander absondern lassen (MACS).For separating individual cells from a large number of biological objects dispersed in a liquid are suitable separation or sorting devices ell available. While in the fluorescence-activated Cell sorting ("Fluorescence Activated Cell Sorter", FACS) electrostatic principles for spatial separation on are used for the magnetically activated Cell sorting ("Magnetic Activated Cell Sorter", MACS) worked with magnetic forces. Here are the However, cells do not sit side by side on a planar support the. Furthermore, both methods have the disadvantage that some objects only limited (FACS) or at all do not separate separately (MACS).

Die zuvor beschriebenen Methoden können keine einzelnen Zellen aus einem Zellverband, wie etwa einem Gewebe oder einem histologischen Gewebepräparat, lösen.The methods described above cannot be used individually Cells from a cell cluster, such as a tissue or a histological tissue specimen.

In der WO 97/29355 A der Anmelderin wurde daher ein neuar­ tiges Verfahren zum Sortieren und zur Gewinnung von ein­ zelnen biologischen Objekten, die auf einem planaren Trä­ ger angeordnet sind, vorgeschlagen. Dabei wird vorgeschla­ gen, ein selektiertes biologisches Objekt von der umgeben­ den weiteren biologischen Masse durch einen Laserstrahl abzutrennen, so dass das selektierte biologische Objekt von der weiteren biologischen Masse frei präpariert ist. Das somit frei präparierte biologische Objekt wird an­ schließend mit Hilfe eines Laserschusses von dem Träger zu einer Auffangvorrichtung katapultiert, wobei es sich bei der Auffangvorrichtung beispielsweise um ein Auf­ fangsubstrat handeln kann. Als Träger der biologischen Masse kann eine das Laserlicht absorbierende Polymerfolie verwendet werden. In WO 97/29355 A the applicant has therefore a new process for sorting and extracting a individual biological objects on a planar surface ger are proposed. It is suggested gene, a selected biological object surrounded by the the further biological mass by a laser beam separate so that the selected biological object is freely prepared from the further biological mass. The biological object thus prepared is turned on closing with a laser shot from the wearer a fall arrester catapulted, which is at the fall arrester, for example, by an opening catch substrate can act. As a carrier of biological The mass can be a polymer film that absorbs the laser light be used.  

Ein zu separierendes biologisches Objekt einer auf dem Träger aufgebrachten biologischen Masse wird somit zu­ nächst selektiert, aus der biologischen Masse ausgeschnit­ ten und anschließend durch einen laserinduzierten Trans­ portprozess zu der Auffangvorrichtung geschleudert. Unter "biologischen Objekten" werden dabei im Rahmen der vorlie­ genden Anmeldung vor allem lebende oder fixierte biologi­ sche Zellen oder Zellbestandteile verstanden, die Bestand­ teil eines flüssigen oder festen biologischen Materials, wie beispielsweise eines Zellgewebes, sind.A biological object to be separated one on the The biological mass applied to the carrier thus becomes next selected, cut from the biological mass ten and then by a laser-induced trans port process flung to the catcher. Under "biological objects" are in the context of this registration above all living or fixed biological cells or cell components understood the existence part of a liquid or solid biological material, such as a cellular tissue.

Mit Hilfe des zuvor beschriebenen Verfahrens, welches dem Oberbegriff des Anspruches 1 zugrundeliegt, können be­ stimmte biologische Objekte gezielt mit einer ausgewählten Substanz durch berührungslose Laser-Mikroinjektion beladen und anschließend die erfolgreich injizierten biologischen Objekte aussortiert werden. Die biologischen Objekte kön­ nen nebeneinander auf einem festen planaren Träger aufge­ bracht sein, wobei der Vorgang des Absonderns innerhalb kurzer Zeit und berührungslos durchgeführt werden kann. Die Überlebensfähigkeit bzw. die Morphologie der biologi­ schen Objekte wird gewährleistet, d. h. die biologischen Objekte werden durch den Mikroinjektionsvorgang und durch den Abtrennprozess nicht geschädigt bzw. beeinträchtigt.With the help of the method described above, which the Preamble of claim 1 is based, can be specifically matched biological objects with a selected one Load substance by non-contact laser microinjection and then the successfully injected biological Objects are sorted out. The biological objects can NEN side by side on a solid planar support be brought, the process of secretion within can be carried out in a short time and without contact. The survivability or the morphology of the biological objects is guaranteed, d. H. the biological Objects are made through the microinjection process and through does not damage or impair the separation process.

Das zuvor beschriebene Verfahren kann jedoch manuell nur relativ aufwendig mit der gewollten Präzision durchgeführt werden, da ein abzutrennendes biologisches Objekt nach dem Schneidevorgang präzise gegenüber dem Laser positioniert bzw. ausgerichtet werden muss, um anschließend durch einen weiteren Laserimpuls bzw. Laserschuss zu der Auffangvor­ richtung katapultiert werden zu können. D. h. nach dem Schneidevorgang muss der Mittelpunkt des gewünschten bio­ logischen Objekts möglichst exakt angefahren werden. Zudem ist bei einer manuellen Durchführung dieses Verfahrens ei­ ne mehrmalige Wiederholung ein und desselben Schneidevorgangs/Katapultiervorgangs nicht mit hoher Genauigkeit mög­ lich.However, the method described above can only be done manually performed relatively complex with the desired precision because a biological object to be separated after the Cutting process precisely positioned in relation to the laser or must be aligned in order to be followed by a another laser pulse or laser shot to the catch direction to be catapulted. That is, after this Cutting process must be the center of the desired bio logical object as precisely as possible. In addition is manual when performing this procedure ne repeated repetition of the same cutting process / catapulting process  not possible with high accuracy Lich.

Bei der aus der zuvor beschriebenen Druckschrift bekannten Vorgehensweise ist zudem nachteilig, dass zum Separieren und Sammeln einzelner biologischer Objekte eines biologi­ schen Materials diese zunächst mit einer ersten Laserbe­ strahlung aus dem jeweiligen biologischen Material ausge­ schnitten und anschließend in einem zweiten Arbeitsschritt durch einen weiteren Laserschuss von dem Träger in die Auffangvorrichtung katapultiert werden müssen. Da zum Sam­ meln der einzelnen biologischen Objekte zwei separate Ar­ beitsschritte erforderlich sind, ist diese Vorgehensweise sowohl bei einer manuellen als auch bei einer automati­ sierten Durchführung des Verfahrens zeitaufwendig. Zudem ist der Steueraufwand bei der automatisierten Durchführung des Verfahrens relativ hoch.In the known from the previously described document Procedure is also disadvantageous for separating and collecting individual biological objects from a biological first of all with a first laser radiation from the respective biological material cut and then in a second step by another laser shot from the carrier into the Fall arrester must be catapulted. There for Sam of the individual biological objects two separate ares steps are required, this is the procedure with both a manual and an automatic The implementation of the procedure was time-consuming. In addition is the tax expense for automated execution the procedure is relatively high.

Der vorliegenden Erfindung liegt daher die Aufgabe zugrun­ de, ein Verfahren sowie eine entsprechende Vorrichtung zur Gewinnung eines biologischen Objekts aus einer biologi­ schen Masse vorzuschlagen, wobei das biologische Objekt einfacher und schneller aus der biologischen Masse gewon­ nen werden kann.The present invention is therefore based on the object de, a method and a corresponding device for Obtaining a biological object from a biological propose mass, the biological object Easier and faster gained from the biological mass can be.

Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß durch ein Verfahren mit den Merkmalen des Anspruches 1 bzw. eine Vorrichtung mit den Merkmalen des Anspruches 11 gelöst. Die Unteransprüche definieren jeweils bevorzugte und vorteilhafte Ausfüh­ rungsformen der vorliegenden Erfindung.This object is achieved by a method with the features of claim 1 or a device with solved the features of claim 11. The subclaims define preferred and advantageous execution Forms of the present invention.

Bei umfangreichen Untersuchungen hat sich herausgestellt, dass aus einer biologischen Masse, wie beispielsweise ei­ nem Zellgewebe oder einer Flüssigkeit, ein bestimmtes bio­ logisches Objekt, wie beispielsweise eine lebende Zelle, auch ohne vorheriges Ausschneiden mit Hilfe einer Laserbe­ strahlung direkt aus der biologischen Masse herauskatapultiert werden kann, wenn die Bestrahlungsenergie und/oder die Fokussierung des Laserstrahls entsprechend eingestellt wird. D. h. ein biologisches Objekt einer biologischen Mas­ se kann durch eine einzige Laserbestrahlung sowohl aus der auf einem Träger befindlichen biologischen Masse herausge­ löst und von dem Träger zu einer entsprechenden Auffang­ vorrichtung katapultiert werden.Extensive investigations have shown that that from a biological mass, such as egg cell tissue or a liquid, a certain bio logical object, such as a living cell, even without cutting out with the help of a laserbe radiation catapulted directly out of the biological mass  can be when the radiation energy and / or the focus of the laser beam is adjusted accordingly becomes. That is, a biological object of a biological mas can be obtained from the laser beam by a single laser biological mass located on a carrier releases and from the carrier to a corresponding catch device to be catapulted.

Die Laserbestrahlung, mit der das gewünschte biologische Objekt herauskatapultiert wird, erfolgt vorzugsweise in Form eines Laserschusses, der lediglich ein oder zwei La­ serimpulse umfasst.The laser radiation with which the desired biological The object is catapulted out, preferably in Form of a laser shot that only one or two La serimpulse includes.

Es empfiehlt sich, für das Katapultieren die Laserenergie im Vergleich zu einem mit demselben Laser durchgeführten Schneidevorgang der entsprechenden biologischen Masse um ca. 10-25%, vorzugsweise um 15-25%, zu erhöhen. Ebenso empfiehlt es sich, den Laserstrahl im Vergleich zu einem Schneidevorgang gegenüber der Objektebene, auf der die zu bearbeitende biologische Masse angeordnet ist, zu defokus­ sieren, wobei insbesondere die Defokussierung prozentual ähnlich zur Erhöhung der Bestrahlungsenergie gewählt wer­ den kann. Besonders vorteilhaft hat sich eine Verstellung des Brennpunktes des Laserstrahls um ca. 1-2 µm in Bezug auf die Objektebene erwiesen.It is advisable to catapult the laser energy compared to one performed with the same laser Cutting process of the corresponding biological mass about 10-25%, preferably by 15-25%. As well it is recommended to compare the laser beam to one Cutting process compared to the object plane on which the editing biological mass is arranged to be defocused sieren, in particular the defocusing as a percentage similar to who increases the radiation energy that can. An adjustment has been particularly advantageous the focal point of the laser beam in relation to approx. 1-2 µm proven on the object level.

Da mit Hilfe der vorliegenden Erfindung der separate Schritt des Ausschneidens des zu katapultierenden biologi­ schen Objekts aus der umgebenden biologischen Masse weg­ fällt, ist die erfindungsgemäße Vorgehensweise deutlich zeitsparender und ermöglicht insbesondere eine Automati­ sierung mit geringem Steueraufwand. Das erfindungsgemäße Verfahren kann somit besonders vorteilhaft rechnergestützt durchgeführt werden, wobei ein oder mehrere biologische Objekte rechnergestützt ausgewählt, deren entsprechenden Positionen innerhalb der umgebenden biologischen Masse ge­ speichert und anschließend rechnergestützt angefahren und mit einem Laserschuss bestrahlt werden, um die einzelnen ausgewählten biologischen Objekte von dem Träger zu der Auffangvorrichtung zu katapultieren.Since with the help of the present invention, the separate Step of cutting out the biological to be catapulted object from the surrounding biological mass falls, the procedure according to the invention is clear saves time and in particular enables automation sation with low tax expenditure. The invention The method can thus be particularly advantageously computer-aided be carried out with one or more biological Objects selected with computer assistance, their corresponding Positions within the surrounding biological mass saves and then started with computer support and  be irradiated with a laser shot to the individual selected biological objects from the carrier to the Catapult fall arrest device.

Die vorliegende Erfindung eignet sich beispielsweise dazu, bestimmte Substanzen in einzelnen biologischen Objekten, beispielsweise Zellen, zu mikroinjizieren und anschließend diese durch Herauskatapultieren auszusortieren. Des weite­ ren können mit Hilfe der vorliegenden Erfindung sehr ein­ fach einzelne Objekte aus einer sehr großen Zahl von bio­ logischen Objekten (z. B. in der Größenordnung 10 ⁵-10 ⁹) räumlich abgetrennt (d. h. separiert) und gleichzeitig aus­ gesondert werden. Die Abtrennung von gehäuften Zellen als Gesamteinheit ist ebenso möglich. Unter "biologischen Ob­ jekten" werden im Rahmen der vorliegenden Erfindung vor allem lebende oder fixierte biologische Zellen oder Zell­ bestandteile verstanden, welche sich in einem festen oder flüssigen biologischen Material, beispielsweise einem Zellgewebe, befinden, das auf einem vorzugsweise planaren Träger aufgebracht ist.The present invention is suitable, for example, for microinjecting certain substances in individual biological objects, for example cells, and then sorting them out by catapulting them out. Furthermore, with the help of the present invention, very simple individual objects can be spatially separated (ie separated) from a very large number of biological objects (for example in the order of 10 ⁵ - 10 ⁹ ) and at the same time separated out. The separation of clustered cells as a whole is also possible. In the context of the present invention, “biological objects” are understood to mean above all living or fixed biological cells or cell components which are in a solid or liquid biological material, for example a cell tissue, which is applied to a preferably planar carrier.

Zum Katapultieren der biologischen Objekte eignet sich beispielsweise ein gepulster UV-Stickstofflaser mit einer Wellenlänge von 337 nm. Als Träger kann eine aus einer UV- absorbierenden Polymerfolie bestehende Trägerfolie verwen­ det werden, deren Absorptionsverhalten an die Wellenlänge des Lasers angepasst ist, also zumindest in der Umgebung der Laserwellenlänge ein Absorptionsmaximum besitzt. Als Auffangvorrichtung kann eine Folie oder Platte verwendet werden, die abhängig von der Richtung der Laserbestrahlung ober- oder unterhalb von dem Träger, vorzugsweise parallel dazu, angebracht ist. Diese Platte oder Folie wird vor­ zugsweise mit einer adhäsiven Schicht versehen. Durch eine feuchte Klebeschicht können die herauskatapultierten Ob­ jekte auf der entsprechenden Platte oder Folie fixiert werden. Die Auffangvorrichtung kann aber auch in Form ei­ nes topfförmigen Behälters ausgebildet sein. Diesbezüglich kommt insbesondere die Verwendung von sogenannten Mikro­ zentrifugenbehältern, beispielsweise einer Mikrotiterplat­ te mit 90 bis 500 Vertiefungen ("wells"), infrage, wie sie in der Molekularbiologie verwendet werden. Bei Verwendung einer derartigen Mikrotiterplatte können mehrere nachein­ ander herauskatapultiere biologische Objekte in separaten Vertiefungen aufgefangen werden. Selbstverständlich ist jedoch auch möglich, mehrere biologische Objekte in ein und derselben Vertiefung einer derartigen Mikrotiterplatte zu sammeln.Suitable for catapulting the biological objects for example a pulsed UV nitrogen laser with a Wavelength of 337 nm. As a carrier, one from a UV absorbent polymer film use existing carrier film det, their absorption behavior to the wavelength adapted to the laser, at least in the area the laser wavelength has an absorption maximum. As A catcher can be a sheet or plate that are dependent on the direction of laser radiation above or below the carrier, preferably in parallel to this, is appropriate. This plate or slide will be in front preferably provided with an adhesive layer. By a damp adhesive layer can the catapulted out Ob objects on the corresponding plate or film become. The collecting device can also be in the form of an egg nes pot-shaped container. In this regard  comes in particular the use of so-called micro centrifuge containers, for example a microtiter plate te with 90 to 500 wells, questionable like them be used in molecular biology. Using Such a microtiter plate can have several in succession other catapult biological objects into separate ones Wells are caught. It goes without saying however, it is also possible to have multiple biological objects in one and the same well of such a microtiter plate to collect.

Die Erfindung wird nachfolgend unter Bezugnahme auf die beigefügte Zeichnung anhand bevorzugter Ausführungsbei­ spiele näher erläutert.The invention is described below with reference to the attached drawing based on preferred embodiment games explained.

Fig. 1 zeigt den prinzipiellen Aufbau einer Vorrichtung zur Realisierung der vorliegenden Erfindung, Fig. 1 shows the basic structure of an apparatus for implementing the present invention,

Fig. 2 zeigt ein Bedienpaneel eines in Fig. 1 gezeigten Lasers, FIG. 2 shows an operating panel of a laser shown in FIG. 1,

Fig. 3 zeigt ein auf einem in Fig. 1 gezeigten Bild­ schirm dargestelltes Menüfenster, mit dem ein Menüfenster zur automatischen Steuerung eines Trägertisches, ein Menü­ fenster zur automatischen Steuerung von Schneide- und/oder Katapultiervorgängen und ein Menüfenster zur automatischen Steuerung einer in Fig. 1 gezeigten Auffangvorrichtung aufgerufen werden können, Fig. 3 shows a menu screen shown on a screen shown in Fig. 1, with which a menu window for automatic control of a carrier table, a menu window for automatic control of cutting and / or catapulting operations and a menu window for automatic control of a in Fig. 1 can be called up,

Fig. 4 zeigt das Menüfenster zur automatischen Steuerung des Trägertisches, Fig. 4 shows the menu window for the automatic control of the supporting table,

Fig. 5 zeigt das Menüfenster zur automatischen Steuerung von Schneide- und/oder Kalibriervorgängen, Fig. 5 shows the menu window for automatic control of cutting and / or calibration procedures,

Fig. 6 zeigt das Menüfenster zur automatischen Verstel­ lung der Auffangvorrichtung, Fig. 6 shows the menu window for automatic Verstel development of the collecting device,

Fig. 7 zeigt ein Menüfenster zur Einstellung einer Laser­ markierung, die auf dem in Fig. 1 gezeigten Bildschirm dargestellt wird, Fig. 7 shows a menu window for setting a laser marking, which is shown on the screen shown in Fig. 1,

Fig. 8A-Fig. 8C zeigen Darstellungen zur Verdeutli­ chung eines rechnergestützten Schneidevorgangs bei dem in Fig. 1 gezeigten System, FIG. 8A to FIG. 8C are diagrams for Verdeutli monitoring a computer-aided cutting operation in which, in Fig. 1 system shown,

Fig. 9A und Fig. 9B zeigen Darstellungen zur Verdeutli­ chung eines rechnergestützten Katapultiervorgangs bei dem in Fig. 1 gezeigten System für ein zuvor gemäß Fig. 8A-8C geschnittenes biologisches Objekt, und FIG. 9A and FIG. 9B show diagrams for Verdeutli monitoring a computerized Katapultiervorgangs in the example shown in Fig. 1 system for a previously shown in FIG. 8A-8C cut biological object, and

Fig. 10A und Fig. 10B zeigen Darstellungen zur Verdeut­ lichung des rechnergestützten direkten Katapultierens meh­ rerer biologischer Objekte, ohne dass diese zuvor mittels Laserbestrahlung aus der umgebenden biologischen Masse herausgeschnitten worden sind. FIG. 10A and FIG. 10B are diagrams for Verdeut lichung of the computer-aided direct catapulting meh of exemplary biological objects, without having been previously cut out this by means of laser irradiation from the surrounding biological mass.

In Fig. 1 ist der Aufbau eines Laser-Mikroskop-Systems dargestellt, wie es zur Realisierung der vorliegenden Er­ findung eingesetzt werden kann. Das System ist modular aufgebaut und kann somit an unterschiedliche experimentel­ le Anforderungen individuell angepasst werden.In Fig. 1, the structure of a laser microscope system is shown how it can be used to implement the present invention. The system has a modular structure and can therefore be individually adapted to different experimental requirements.

Wesentlicher Bestandteil des in Fig. 1 gezeigten Systems ist eine Laservorrichtung 4, in der eine Laserlichtquelle zur Erzeugung eines Laserstrahls untergebracht ist. Des weiteren ist in der Laservorrichtung 4 die Optik 5, 6 un­ tergebracht, die erforderlich ist, um den Laserstrahl in ein Mikroskop 1 einzukoppeln und den Laserfokus in der Ob­ jektebene auf den optischen Fokus des Mikroskops 1 abzu­ stimmen. Im vorliegenden Fall handelt es sich um einen ge­ pulsten UV-Stickstofflaser, dessen Wellenlänge 337 nm und dessen Impulsenergie mindestens 270 µJ beträgt. Die Impulsdauer beträgt 3 ms, während die Impulsfrequenz 1-30 Impulse pro Sekunde beträgt.An essential component of the system shown in FIG. 1 is a laser device 4 , in which a laser light source for generating a laser beam is accommodated. Furthermore, the optics 5 , 6 is accommodated in the laser device 4 , which is required to couple the laser beam into a microscope 1 and to tune the laser focus in the object plane to the optical focus of the microscope 1 . In the present case, it is a pulsed UV nitrogen laser, the wavelength of which is 337 nm and the pulse energy is at least 270 µJ. The pulse duration is 3 ms, while the pulse frequency is 1-30 pulses per second.

Zur Steuerung der Laservorrichtung 4 ist das in Fig. 2 gezeigte Steuerpaneel vorgesehen. Der Stickstofflaser emittiert einen Laserstrahl mit einer festen Laserenergie. Für eine präzise Laser-Mikromanipulation ist jedoch eine präzise Verstellung der Laserenergie erforderlich. Aus diesem Grund ist ein Quarzfilter 5 senkrecht zum Laser­ strahlpfad angeordnet. Dieser Quarzfilter wird von einem Gleichstrommotor gedreht, der über einen am Steuerpaneel befindlichen Potentiometerknopf 12 gesteuert werden kann, um somit die Laserenergie entsprechend einzustellen. Die augenblicklich eingestellte Laserenergie wird in einer LCD-Anzeige 17 dargestellt. Zudem ist an der Seite der La­ servorrichtung 4 ein Verstellknopf zur manuellen Verstel­ lung des Quarzfilters 5 vorgesehen, wobei jedoch für diese manuelle Verstellung keine LCD-Anzeige vorgesehen ist.The control panel shown in FIG. 2 is provided for controlling the laser device 4 . The nitrogen laser emits a laser beam with a fixed laser energy. However, precise laser micromanipulation requires precise adjustment of the laser energy. For this reason, a quartz filter 5 is arranged perpendicular to the laser beam path. This quartz filter is rotated by a direct current motor, which can be controlled via a potentiometer button 12 located on the control panel, in order to adjust the laser energy accordingly. The laser energy currently set is shown on an LCD display 17 . In addition, an adjustment button for manual adjustment of the quartz filter 5 is provided on the side of the loader device 4 , but no LCD display is provided for this manual adjustment.

Neben der Einstellung der Laserenergie kann auch der La­ serfokus unabhängig von dem Mikroskopfokus eingestellt werden, d. h. der Brennpunkt des Lasers kann in z-Richtung relativ zur Objektebene des Mikroskops 1 verschoben wer­ den. Zu diesem Zweck ist ebenfalls ein Schrittmotor vorge­ sehen, der die in Fig. 1 gezeigten Linsen 6 bewegt. Die Fokussierung bzw. der Schrittmotor kann durch einen weite­ ren, in Fig. 2 gezeigten Potentiometerknopf 11 gesteuert werden, wobei die augenblickliche Einstellung des Laserfo­ kus in einer weiteren LCD-Anzeige 16 dargestellt wird. Auch die Linsen 6 können über einen an der Seite der La­ servorrichtung 4 vorgesehenen Einstellknopf manuell ver­ stellt werden, wobei für diese manuelle Einstellung analog zum Fall der Einstellung der Laserenergie keine LCD- Anzeige vorhanden ist.In addition to setting the laser energy, the laser focus can also be set independently of the microscope focus, ie the focal point of the laser can be shifted in the z direction relative to the object plane of the microscope 1 . For this purpose, a stepper motor is also provided, which moves the lenses 6 shown in FIG. 1. The focusing or the stepper motor can be controlled by a further ren, shown in Fig. 2 potentiometer knob 11 , the current setting of the Laserfo kus is shown in a further LCD display 16 . The lenses 6 can be adjusted manually via a setting button provided on the side of the laser servo 4 , whereby for this manual setting, analogously to the case of setting the laser energy, there is no LCD display.

Über einen Schalter 13 des Steuerpaneels kann zwischen ei­ nem automatischen Betrieb und einem manuellen Betrieb der Laservorrichtung 4 umgeschaltet werden. Des weiteren ist ein Potentiometerknopf 14 zur Einstellung der Impulsrate des Lasers (1-30 Impulse pro Sekunde) vorgesehen. Eine An­ zeige 15 informiert darüber, ob die Laservorrichtung 4 au­ genblicklich eingeschaltet ist.A switch 13 of the control panel can be used to switch between automatic operation and manual operation of the laser device 4 . Furthermore, a potentiometer button 14 is provided for setting the pulse rate of the laser (1-30 pulses per second). A display 15 informs whether the laser device 4 is switched on immediately.

Der Laserstrahl wird über mehrere beschichtete Strahltei­ ler in das Mikroskop 1 eingekoppelt und zu einem Objektiv 18 hin abgelenkt. Der Durchmesser des auf der Objektebene auftreffenden Laserstrahls ist maßgeblich von der numeri­ schen Apparatur des Objektivs 18 abhängig. Ein Objektiv mit einer relativ hohen numerischen Apparatur ermöglicht Laserstrahldurchmesser kleiner als 1 µm. Zudem sollte dar­ auf geachtet werden, dass das jeweils verwendete Objektiv 18 eine hohe Durchlässigkeit für die jeweilige Laserwel­ lenlänge aufweist, um Energieverluste zu minimieren.The laser beam is coupled into the microscope 1 via a plurality of coated beam splitters and deflected toward an objective 18 . The diameter of the laser beam impinging on the object plane is largely dependent on the numerical apparatus of the objective 18 . A lens with a relatively high numerical apparatus enables laser beam diameters smaller than 1 µm. In addition, care should be taken to ensure that the lens 18 used in each case has a high permeability for the respective laser shaft length in order to minimize energy losses.

Der über das Objektiv 18 emittierte Laserstrahl trifft schließlich auf einen motorisierten und computergesteuer­ ten Mikroskop- oder Trägertisch 3, auf dem ein Träger mit einer zu bearbeitenden biologischen Masse angeordnet ist. Oberhalb des Trägertisches 3 befindet sich ein ebenfalls motorisierter und computergesteuerter Manipulator 2. Die Komponenten 2 und 3 ermöglichen eine exakte Objektpositio­ nierung mit Nanometer-Präzision sowie die automatische Durchführung von Mikro-Manipulationsprozeduren.The laser beam emitted via the lens 18 finally strikes a motorized and computer-controlled microscope or carrier table 3 on which a carrier with a biological mass to be processed is arranged. Above the carrier table 3 there is also a motorized and computer-controlled manipulator 2 . Components 2 and 3 enable precise object positioning with nanometer precision and the automatic execution of micro-manipulation procedures.

Der motorisierte Trägertisch 3 ist entlang zweier linearer Achsen (x- und y-Richtung) verfahrbar. Zu diesem Zweck sind zwei Hybrid-Schrittmotoren mit vier Schritten pro 360°/Umdrehung vorgesehen. Die minimale Schrittgröße be­ trägt 20 nm, so dass der auf dem Trägertisch 3 befindliche Träger mit sehr hoher Genauigkeit positioniert werden kann.The motorized carrier table 3 can be moved along two linear axes (x and y direction). For this purpose, two hybrid stepper motors with four steps per 360 ° / revolution are provided. The minimum step size is 20 nm, so that the support located on the support table 3 can be positioned with very high accuracy.

An dem motorisierten Manipulator 2 kann beispielsweise ei­ ne Nadel oder Mikropipette zur Mikroinjektion angebracht sein. Im Rahmen der vorliegenden Erfindung wird jedoch da­ von ausgegangen, dass an dem Manipulator 2 eine Auffang­ vorrichtung angebracht ist, um von dem Träger wegkatapul­ tierte biologische Objekte aufzufangen. Der motorisierte Manipulator 2 kann sowohl in x- und y-Richtung als auch in z-Richtung verfahren werden. Zu diesem Zweck sind drei Schrittmotoren vorgesehen, welche dieselbe Präzision wie die für den Trägertisch 3 vorgesehenen Schrittmotoren auf­ weisen.For example, a needle or micropipette for microinjection can be attached to the motorized manipulator 2 . In the context of the present invention, however, it is assumed that a manipulation device is attached to the manipulator 2 in order to collect biological objects catapulted away from the carrier. The motorized manipulator 2 can be moved both in the x and y directions and in the z direction. For this purpose, three stepper motors are provided, which have the same precision as the stepper motors provided for the carrier table 3 .

Vorzugsweise ist sowohl der Trägertisch 3 als auch der Ma­ nipulator 2 mit Endschaltern ausgestattet, die gewährlei­ sten, dass der jeweilige Antriebsmotor automatisch ge­ stoppt wird, falls eine Achse bis zu dem entsprechenden Endschalter verfahren wird.Both the carrier table 3 and the manipulator 2 are preferably equipped with limit switches which ensure that the respective drive motor is automatically stopped if an axis is moved up to the corresponding limit switch.

Auch die Einstellung des Laserfokus kann begrenzt werden, um Schäden am Objektiv 18 zu vermeiden.The setting of the laser focus can also be limited in order to avoid damage to the lens 18 .

Bei dem Mikroskop 1 kann es sich um ein beliebig ausge­ staltetes Mikroskop handeln. Insbesondere ist sowohl die Verwendung eines inversen als auch eines aufrechten Mikro­ skops oder eines Lasermikroskops denkbar. Das Mikroskop 1 ist mit einer Videokamera, insbesondere einer CCD- Videokamera ("Charge Coupled Device") ausgestattet, die den Bereich des Trägers 3 oberhalb des Objektivs 18 auf­ nimmt. Das Videosignal dieser Videokamera wird einem han­ delsüblichen Computer ("Personal Computer") 7 zugeführt und dort mit einer Framegrapper-Karte verarbeitet, so dass das entspechende Videobild in Echtzeit auf dem Bildschirm oder dem Monitor 8 des Computers 7 dargestellt werden kann. Ebenso ist ein Speichern einzelner Videobilder auf einem geeigneten Speichermedium des Computers 7 möglich. Des weiteren kann mit dem Computer 7 auch ein analoger oder digitaler Videorekorder zum Aufzeichnen der von der Videokamera gelieferten Videobilder gekoppelt sein. Wie nachfolgend noch näher beschrieben wird, sind auf dem Computer 7 bzw. der darauf ablaufenden Software verschiedene Funktionen implementiert, die sowohl eine rechnergestütz­ te, d. h. automatische, Ansteuerung der Laservorrichtung 4 als auch des Mikroskops 1 ermöglichen, so dass beispiels­ weise der Laser automatisch aktiviert und der Manipulator 2 bzw. der Trägertisch 3 automatisch verfahren werden kön­ nen. Zur Einstellung bzw. Auswahl dieser Funktionen sind herkömmliche Eingabemittel, wie beispielsweise eine Tasta­ tur 9 oder eine Computermaus 10, vorgesehen. Des weiteren ist der Laservorrichtung 4 ein Fußschalter 67 zugeordnet, durch dessen Betätigung der Laser manuell aktiviert werden kann.The microscope 1 can be any microscope. In particular, both the use of an inverse and an upright microscope or a laser microscope is conceivable. The microscope 1 is equipped with a video camera, in particular a CCD video camera ("Charge Coupled Device"), which takes up the area of the carrier 3 above the lens 18 . The video signal from this video camera is fed to a commercially available computer (“personal computer”) 7 and processed there with a frame grabber card, so that the corresponding video image can be displayed in real time on the screen or monitor 8 of computer 7 . It is also possible to store individual video images on a suitable storage medium of the computer 7 . Furthermore, an analog or digital video recorder for recording the video images supplied by the video camera can also be coupled to the computer 7 . As will be described in more detail below, various functions are implemented on the computer 7 or the software running thereon, which enable computer-aided, ie automatic, control of the laser device 4 and of the microscope 1 , so that, for example, the laser is automatically activated and the manipulator 2 or the carrier table 3 can be moved automatically. Conventional input means, such as a keyboard 9 or a computer mouse 10 , are provided for setting or selecting these functions. Furthermore, a foot switch 67 is assigned to the laser device 4 , by means of which the laser can be activated manually.

Nachfolgend sollen die bei dem in Fig. 1 gezeigten System zur Steuerung des Mikroskops 1 bzw. des Trägertisches 3 und des Manipulators 2 sowie des Lasers 4 vorgesehenen Funktionen näher erläutert werden.The functions provided in the system shown in FIG. 1 for controlling the microscope 1 or the support table 3 and the manipulator 2 and the laser 4 are explained in more detail below.

Nach dem Einschalten des Computers 7 wird auf dem Bild­ schirm 8 das von der Videokamera augenblicklich aufgenom­ mene Mikroskopbild mit einer Markierung für den Laser- Zielpunkt dargestellt. Am unteren Bildschirmrand erscheint ein Statusfenster, während am oberen Bildschirm ein in Fig. 3 näher dargestelltes Menüfenster 19 zum Aufrufen wei­ terer Menüfenster geöffnet wird. Das Steuerprogramm wird im wesentlichen über die in Fig. 1 gezeigte Computermaus 10, vorzugsweise eine Drei-Tasten-Maus gesteuert, wobei jedoch auch einige Funktionen durch entsprechende Tasten­ kombinationen der Tastatur 9 aufgerufen werden können.After switching on the computer 7 , the image of the microscope image immediately recorded by the video camera 8 is shown on the screen 8 with a marking for the laser target point. A status window appears at the bottom of the screen, while a menu window 19 shown in more detail in FIG. 3 is opened on the upper screen for calling further menu windows. The control program is essentially controlled via the computer mouse 10 shown in FIG. 1, preferably a three-button mouse, although some functions can also be called up by corresponding key combinations on the keyboard 9 .

Im wesentlichen kann zwischen zwei unterschiedlichen Be­ triebsmodi unterschieden werden. Im sogenannten Cursor- Modus können mit Hilfe der Maus Menüs geöffnet, entspre­ chende Menüfunktionen ausgewählt und sogenannte Buttons angeklickt werden. Im Verfahr-Modus werden hingegen Bewe­ gungen der Maus 10 direkt in entsprechende Verstellsignale und somit entsprechende mechanische Bewegungen des Trägertisches 3 oder des Manipulators 2 umgesetzt. Im Cursor- Modus können der Manipulator 2 oder der Trägertisch 3 nicht durch Hin- und Herbewegen der Maus 10 bewegt werden. Durch Betätigen beispielsweise der mittleren Maustaste kann zwischen dem Cursor- und dem Verfahr-Modus hin- und hergeschaltet werden. Der Verfahr-Modus besitzt verschie­ dene Varianten, zwischen denen durch Betätigen beispiels­ weise der rechten Maustaste hin- und hergeschaltet werden kann. So kann in einer ersten Variante des Verfahr-Modus durch Bewegen der Maus 10 der Trägertisch 3 in xy-Richtung verschoben werden. D. h. durch Verschieben der Maus 10 nach oben wird entsprechend der Trägertisch 3 in dieselbe Rich­ tung verschoben, was auf dem Bildschirm 8 anhand des je­ weils in Echtzeit aktualisierten Videobilds nachvollzogen werden kann. Diese Zuordnung kann jedoch auch umgekehrt werden, um beispielsweise beim Betrachten der Probe eine Übereinstimmung zwischen der Verschiebung des sichtbaren Videobilds und der Mausbewegung herbeizuführen. In einer zweiten Variante des Verfahr-Modus wird der Manipulator 2 entsprechend der Mausbewegung in xy-Richtung verschoben, wobei hinsichtlich der Ansteuerung des Manipulators 2 die vorhergehenden Bemerkungen analog Gültigkeit besitzen. In einer dritten Variante des Verfahr-Modus kann der Manipu­ lator 2 entsprechend der Mausbewegung in z-Richtung ver­ schoben werden, so dass der Abstand zwischen dem Träger­ tisch 3 und dem Manipulator 2 entsprechend verändert wird. Vorzugsweise ist immer ein XY-Verfahr-Modus, d. h. entweder der Trägertisch-XY-Modus oder der Manipulator-XY-Modus, vorgewählt. Solange der Verfahr-Modus im Hintergrund zwar gewählt, jedoch noch nicht aktiviert ist, befindet sich die Steuerung im Cursor-Modus.A distinction can essentially be made between two different operating modes. In the so-called cursor mode, menus can be opened with the mouse, appropriate menu functions selected and so-called buttons clicked. In the travel mode, on the other hand, movements of the mouse 10 are converted directly into corresponding adjustment signals and thus corresponding mechanical movements of the carrier table 3 or the manipulator 2 . In the cursor mode, the manipulator 2 or the carrier table 3 cannot be moved by moving the mouse 10 back and forth. By pressing the middle mouse button, for example, you can switch back and forth between the cursor mode and the travel mode. The traversing mode has different variants, between which you can toggle by pressing the right mouse button, for example. In a first variant of the travel mode, the carrier table 3 can be moved in the xy direction by moving the mouse 10 . That is, by moving the mouse 10 upwards, the carrier table 3 is moved in the same direction, which can be reproduced on the screen 8 on the basis of the video image updated in real time. However, this assignment can also be reversed in order, for example, to bring about a match between the displacement of the visible video image and the mouse movement when viewing the sample. In a second variant of the traversing mode, the manipulator 2 is shifted in the xy direction in accordance with the mouse movement, the previous remarks being valid analogously with regard to the actuation of the manipulator 2 . In a third variant of the travel mode, the manipulator 2 can be moved in accordance with the mouse movement in the z direction, so that the distance between the carrier table 3 and the manipulator 2 is changed accordingly. Preferably, an XY traversing mode, ie either the carrier table XY mode or the manipulator XY mode, is always preselected. As long as the traversing mode is selected in the background but not yet activated, the control is in cursor mode.

Das Statusfenster ist immer am unteren Bildschirmrand sichtbar und kann (im Cursor-Modus) angeklickt und mit der Maus 10 verschoben werden. Im Statusfenster wird unter an­ derem angezeigt, ob sich die Steuerung augenblicklich im Cursor-Modus oder im Verfahr-Modus befindet. Befindet sich die Steuerung im Verfahr-Modus, wird zudem die augenblick­ lich aktivierte Variante des Verfahr-Modus (Trägertisch- XY-Modus, Manipulator-XY-Modus oder Manipulator-Z-Modus) angezeigt. Des weiteren wird im Statusfenster die Anzahl der für den Trägertisch 3 augenblicklich gespeicherten Po­ sitionswerte sowie der augenblicklich ausgewählte Träger­ tisch-Positionswert angezeigt. Des weiteren wird im Sta­ tusfenster angezeigt, welcher von drei möglichen Geschwin­ digkeitsbereichen für die Verstellung des Trägertisches 3 augenblicklich ausgewählt ist. Eine weitere Anzeige des Statusfensters gibt den in der Steuerung augenblicklich ablaufenden aktiven Steuerbefehl wieder. Zudem werden im Statusfenster die X- und Y-Koordinaten angezeigt, welche die absolute Position (in µm) des Mikroskop- bzw. Träger­ tisches, bezogen auf die beim Programmstart vorgefundene Null-Position, definieren. Schließlich ist in dem Status­ fenster auch der Radius (in µm) eines mit einer nachfol­ gend noch näher beschriebenen Funktion gezeichneten Krei­ ses zum automatischen Ausschneiden eines auf dem Träger befindlichen biologischen Objekts dargestellt.The status window is always visible at the bottom of the screen and can be clicked (in cursor mode) and moved with the mouse 10 . The status window shows whether the control is currently in cursor mode or in traversing mode. If the control is in the traversing mode, the currently activated variant of the traversing mode (carrier table XY mode, manipulator XY mode or manipulator Z mode) is also displayed. Furthermore, the number of position values currently stored for the carrier table 3 and the currently selected carrier table position value are displayed in the status window. Furthermore, the status window shows which of three possible speed ranges for the adjustment of the carrier table 3 is currently selected. Another display of the status window shows the active control command currently running in the control. In addition, the X and Y coordinates are displayed in the status window, which define the absolute position (in µm) of the microscope or carrier table, based on the zero position found when the program was started. Finally, the status window also shows the radius (in µm) of a circle drawn with a function described in more detail below for the automatic cutting out of a biological object located on the carrier.

Nachfolgend sollen die im Cursor-Modus zur Verfügung ste­ henden Steuerfunktionen näher erläutert werden.In the following, they should be available in cursor mode Control functions are explained in more detail.

Wie bereits zuvor erwähnt worden ist, wird in der Regel nach dem Einschalten des Computers 7 auf dem Bildschirm 8 das in Fig. 3 gezeigte Menüfenster 19 dargestellt, wel­ ches drei sogenannte Buttons 20-22 aufweist. Durch Anklic­ ken dieser Buttons 20-22 mit der Maus kann jeweils ein weiteres, dem angeklickten Button zugewiesenes Menüfenster aufgerufen und auf dem Bildschirm 8 geöffnet werden. Durch Anklicken des Buttons 20 kann ein in Fig. 4 gezeigtes Menüfenster geöffnet werden, welches die wesentlichen zur Steuerung des Trägertisches 3 vorgesehenen Steuerfunktio­ nen beinhaltet. Durch Anklicken des Buttons 21 kann ein in Fig. 5 näher dargestelltes Menüfenster geöffnet werden, welches automatische Schneide- und/oder Katapultierfunktionen beinhaltet. Durch Anklicken des Buttons 22 kann schließlich ein in Fig. 6 dargestelltes Menüfenster ge­ öffnet werden, welches Steuerfunktionen für den in Fig. 1 gezeigten Manipulator 2 aufweist.As has already been mentioned above, the menu window 19 shown in FIG. 3, which has three so-called buttons 20-22 , is generally shown on the screen 8 after the computer 7 is switched on. By clicking these buttons 20-22 with the mouse, a further menu window assigned to the clicked button can be called up and opened on the screen 8 . By clicking the button 20 , a menu window shown in FIG. 4 can be opened, which contains the essential control functions provided for controlling the carrier table 3 . By clicking the button 21 , a menu window shown in FIG. 5 can be opened, which contains automatic cutting and / or catapulting functions. By clicking the button 22 , a menu window shown in FIG. 6 can finally be opened, which has control functions for the manipulator 2 shown in FIG. 1.

Nachfolgend sollen die einzelnen Funktionen des in Fig. 4 gezeigten Menüfensters 23 näher erläutert werden.The individual functions of the menu window 23 shown in FIG. 4 are to be explained in more detail below.

Wie bereits zuvor erwähnt worden ist, kann der Trägertisch im Verfahr-Modus durch eine einfache Mausbewegung beliebig verfahren bzw. verstellt werden. Befindet sich der Träger­ tisch 3 in einer gewünschten Position, kann wieder in den Cursor-Modus gewechselt und mit der Maus der in Fig. 4 gezeigte Button 24 angeklickt werden, so daß die aktuelle Position des Trägertisches 3 gespeichert wird. Gleichzei­ tig wird der bereits zuvor erwähnte Positionszähler im Statusfenster um 1 erhöht. Diese Schritte können beliebig wiederholt werden, wenn weitere neue Positionswerte abge­ speichert werden sollen. Um einzelne Positionswerte leich­ ter wiederauffinden zu können, kann beim Speichern jeder einzelne Positionswert mit einem positionsspezifischen Kommentar versehen werden. Zu diesem Zweck ist der Button 25 vorgesehen, bei dessen Anklicken mit der Maus 10 ein Kommentar-Fenster geöffnet wird, in welches ein der jewei­ ligen Position entsprechender Kommentar eingegeben und ab­ gespeichert werden kann. Durch Anklicken des Buttons 26 wird ein Auswahlfenster für die gespeicherten Positions­ werte geöffnet, so dass der Benutzer mit der Maus einen gewünschten Punkt bzw. eine gewünschte Position auswählen kann, die anschließend durch Erzeugung entsprechender Ver­ stellsignale für die den Trägertisch 3 verstellenden Moto­ ren angefahren wird. Gleichzeitig wird im Statusfenster der angefahrene Positionswert mit seiner fortlaufenden Nummer und dem gespeicherten Kommentar angezeigt.As has already been mentioned above, the carrier table can be moved or adjusted as desired by simply moving the mouse. If the carrier table 3 is in a desired position, the cursor mode can be changed again and the button 24 shown in FIG. 4 can be clicked with the mouse, so that the current position of the carrier table 3 is saved. At the same time, the previously mentioned position counter in the status window is increased by 1. These steps can be repeated any number of times if further new position values are to be saved. To make it easier to find individual position values, each individual position value can be provided with a position-specific comment when it is saved. For this purpose, the button 25 is provided, when it is clicked with the mouse 10, a comment window is opened, in which a comment corresponding to the respective position can be entered and saved. By clicking the button 26 , a selection window for the stored position values is opened, so that the user can use the mouse to select a desired point or a desired position, which is then approached by generating corresponding adjustment signals for the motors which adjust the support table 3 . At the same time, the position value approached is displayed in the status window with its consecutive number and the saved comment.

Durch die in Fig. 4 gezeigten Buttons 27 und 28 des Menü­ fensters 23 können die gespeicherten Positionswerte nacheinander aufgerufen und angefahren werden. Mit jedem An­ klicken des Buttons 27 wird der jeweils nächste Positions­ wert aus der Liste angefahren, während durch Anklicken des Buttons 28 der jeweils vorhergehende Positionswert in der Liste angefahren wird. Mit Hilfe der beiden Buttons 29 und 30 können gespeicherte Positionswerte gelöscht werden, wo­ bei durch Anklicken des Buttons 29 lediglich der augen­ blickliche Positionswert in der Liste gelöscht wird, wäh­ rend durch Anklicken des Buttons 30 sämtliche in der Liste enthaltenen Positionswerte gelöscht werden.The stored position values can be called up and approached one after the other by means of the buttons 27 and 28 of the menu window 23 shown in FIG. 4. Each time the button 27 is clicked, the next position value from the list is approached, while the previous position value in the list is approached by clicking the button 28 . With the help of the two buttons 29 and 30 , stored position values can be deleted, where by clicking the button 29 only the current position value in the list is deleted, while by clicking the button 30 all position values contained in the list are deleted.

Durch Anklicken des Buttons 31 kann ein Fenster aufgerufen werden, in dem für das Anfahren gespeicherter Positions­ werte eine Geschwindigkeit festgelegt wird. Auch der in Fig. 4 gezeigte Bereich 34 dient zur Einstellung der Ge­ schwindigkeit, wobei durch Auswählen einer der drei darge­ stellten Geschwindigkeitsstufen für den Verfahr-Modus die Geschwindigkeit für die Umsetzung der Mausbewegung in eine entsprechende Trägertischbewegung ausgewählt werden kann. Der darunter befindliche Einstellbereich 35 erlaubt dies­ bezüglich eine Geschwindigkeit-Feineinstellung für die Um­ setzung der Mausbewegung im Verfahr-Modus.By clicking the button 31 , a window can be called up in which a speed is set for moving to stored position values. The area 34 shown in FIG. 4 is used to set the speed, and by selecting one of the three illustrated speed levels for the travel mode, the speed for converting the mouse movement into a corresponding carrier table movement can be selected. The adjustment area 35 located below allows this with regard to fine speed adjustment for the implementation of the mouse movement in the travel mode.

Durch Anklicken des Buttons 32 kann ein vorgegebener Be­ reich des auf dem Träger befindlichen biologischen Materi­ als mäanderförmig abgefahren werden. Nach Anklicken des Buttons 32 wird hierzu ein Fenster geöffnet, in dem die Breite des abzufahrenden Bereichs in x-Richtung und die Tiefe des abzufahrenden Bereichs in y-Richtung eingegeben werden kann (in µm). Des weiteren kann die Anzahl der Hin- und Herbewegungen, mit denen der ausgewählte Bereich abge­ fahren werden soll, sowie die Geschwindigkeit für das Ab­ fahren eingestellt werden. Nach Eingabe dieser Werte kann durch Anklicken einer START-Taste dieses Fensters das au­ tomatische Abfahren vom aktuellen Punkt ausgehend gestar­ tet werden. Das automatische Abfahren kann jederzeit durch Betätigen einer beliebigen Taste unterbrochen werden. By clicking the button 32 , a predetermined range of the biological material on the carrier can be meandered. After clicking the button 32 , a window is opened in which the width of the area to be traversed in the x direction and the depth of the area to be traversed in the y direction can be entered (in μm). Furthermore, the number of back and forth movements with which the selected area is to be traversed and the speed for the traversing can be set. After entering these values, the automatic departure from the current point can be started by clicking a START button in this window. The automatic shutdown can be interrupted at any time by pressing any key.

Durch Anklicken eines in dem Fenster dargestellten CONTINUE-Buttons kann das automatische Abfahren von der zuletzt erreichten Position aus fortgeführt werden. Durch Anklicken eines QUIT-Buttons kann das automatische Abfah­ ren beendet und das entsprechende Fenster geschlossen wer­ den.By clicking one shown in the window CONTINUE buttons can automatically shutdown the last position reached. By Clicking a QUIT button can automatically shutdown and the corresponding window is closed the.

Der in Fig. 4 gezeigte Button 33 dient zur Korrektur ei­ ner infolge eines Objektivwechsels eintretenden Positions­ verschiebung der optischen Abbildung. Bei einem Objekti­ vwechsel kommt es aufgrund der nicht genau übereinstimmen­ den optischen Achsen der beiden Objektive zu einer Ver­ schiebung des Zentrums der Bildschirmabbildung. Die Posi­ tion des Trägertisches 3 bleibt erhalten, es verschiebt sich lediglich der Mittelpunkt der Bildschirmabbildung. Um diese Verschiebung der Bildschirmabbildung zu korrigieren, empfiehlt es sich, den Trägertisch 3 vor einem Objekti­ vwechsel in eine vordefinierte Position zu fahren. Dies kann beispielsweise dadurch erreicht werden, dass die auf dem Bildschirm 8 dargestellte Laser-Markierung mit einem markanten Punkt des auf dem Träger befindlichen biologi­ schen Materials zur Deckung gebracht wird. Anschließend kann das Objektiv gewechselt werden. Befindet sich danach die Laser-Markierung nicht über dem zuvor gewählten mar­ kanten Punkt des biologischen Materials, ist infolge des Objektivwechsels eine Positionsverschiebung der optischen Abbildung eingetreten. Wird nunmehr der Trägertisch 3 er­ neut in die zuvor gewählte vordefinierte Position gefah­ ren, so dass sich die Laser-Markierung über dem gewählten markanten Punkt befindet, ist diese Verschiebung ein Maß für die infolge des Objektivwechsels eingetretene Positi­ onsverschiebung der optischen Abbildung. Durch anschlie­ ßendes Anklicken des Buttons 33 wird diese nach dem Objek­ tivwechsel durchgeführte Verschiebung des Trägertisches 3 erfasst und alle zuvor gespeicherten Positionswerte bzw. die jeweils entsprechenden X- und Y-Koordinaten um die er­ fasste XY-Verschiebung korrigiert. Anschließend entsprechen alle gespeicherten Positionswerte bzw. Positionskoor­ dinaten des Trägertisches 3 wieder den gleichen charakte­ ristischen Punkten.The button 33 shown in Fig. 4 is used to correct egg ner due to a lens change occurring position shift of the optical image. In the event of a lens change, the center of the screen image is shifted due to the fact that the optical axes of the two lenses do not match exactly. The position of the support table 3 is retained, it only shifts the center of the screen image. To correct this shift in the screen shot, it is recommended to drive the support table 3 in front of a Objekti vwechsel to a predefined position. This can be achieved, for example, by aligning the laser marking shown on the screen 8 with a prominent point of the biological material on the carrier. The lens can then be changed. If the laser marking is not located above the previously selected point of the biological material, a change in the position of the optical image has occurred due to the change of objective. If the carrier table 3 is now moved again into the previously selected predefined position so that the laser marking is above the selected prominent point, this shift is a measure of the shift in position of the optical image which occurs as a result of the lens change. This tivwechsel performed by following the OBJEK displacement is detected of the supporting table 3, and corrects all position values or previously stored each corresponding X and Y coordinates for which he took XY displacement by subsequent ßendes clicking the button 33rd Then all stored position values or position coordinates of the carrier table 3 again correspond to the same characteristic points.

Nach einem nachfolgend noch näher beschriebenen Katapul­ tieren eines biologischen Objekts aus dem auf dem Träger befindlichen Material zu der an dem Manipulator 2 befind­ lichen Aufhangvorrichtung ("Cap"), ist es sinnvoll, durch Fokussieren auf das "Cap" zu begutachten, ob das herauska­ tapultierte biologische Objekt tatsächlich in dem "Cap" gefangen wurde. Um die Auffangvorrichtung bzw. das "Cap" mit dem Mikroskop betrachten zu können, muss der Träger­ tisch 3 so verschoben werden, dass sich einerseits das Mi­ kroskop-Objektiv frei bewegen kann und andererseits das biologische Material nicht beschädigt wird. Durch Anklic­ ken des Buttons 36 wird der Trägertisch 3 automatisch auf einen vorher definierten, als "Checkpoint" bezeichneten Punkt gefahren, der derart festgelegt worden ist, dass die zuvor beschriebenen Kriterien erfüllt sind und das "Cap" mit dem Mikroskop betrachtet werden kann.After a catapult described in more detail below, a biological object from the material on the carrier to the manipulator 2 located suspension device ("cap"), it is useful to assess by focusing on the "cap" whether this can be found out taped biological object was actually caught in the "cap". In order to be able to view the collecting device or the "cap" with the microscope, the carrier table 3 has to be moved so that the microscope lens can move freely on the one hand and the biological material is not damaged on the other hand. By clicking the button 36 , the carrier table 3 is automatically moved to a previously defined point, referred to as a "checkpoint", which has been defined in such a way that the previously described criteria are met and the "cap" can be viewed with the microscope.

Im folgenden wird das in Fig. 5 gezeigte Menüfenster 37, welches Steuerfunktionen zur automatischen Steuerung von Schneid- und/oder Katapultiervorgängen mittels Laserbe­ strahlung enthält, erläutert. Dieses Menüfenster 37 ent­ hält unter anderem Funktionen zum Zeichnen von Kurvenver­ läufen sowie zum Messen von Distanzen im Bildschirmfen­ ster. Ein mit Hilfe dieses Menüfensters 37 definierter Kurvenverlauf kann automatisch, d. h. rechnergestützt, in eine äquivalente Bewegung des Trägertisches 3 umgesetzt werden, so dass es möglich ist, den Trägertisch 3 derart relativ zu dem Laser zu verfahren, dass die tatsächliche Schnittlinie dem zuvor definierten Kurvenverlauf folgt. Die Geschwindigkeit und Anzahl der Wiederholungen des Schneidevorgangs lassen sich einstellen. Dasselbe gilt auch für das rechnergestützt durchgeführte Katapultieren, wobei auf analoge Art und Weise am Bildschirm zu katapultierende biologische Objekte ausgewählt und markiert wer­ den können, die anschließend automatisch durch entspre­ chendes Verschieben des Trägertisches 3 über den Laser ge­ fahren und mit Hilfe eines automatisch oder manuell ausge­ lösten Laserschusses herauskatapultiert werden können.The menu window 37 shown in FIG. 5, which contains control functions for automatically controlling cutting and / or catapulting processes by means of laser radiation, is explained below. This menu window 37 contains , among other things, functions for drawing curve profiles and for measuring distances in the screen window. A curve shape defined with the help of this menu window 37 can be automatically, ie computer-aided, converted into an equivalent movement of the carrier table 3 , so that it is possible to move the carrier table 3 relative to the laser in such a way that the actual cutting line follows the previously defined curve profile . The speed and number of repetitions of the cutting process can be set. The same also applies to computer-assisted catapulting, biological objects to be catapulted can be selected and marked in an analogous manner on the screen, who can then move automatically by correspondingly moving the carrier table 3 via the laser and with the aid of an automatic or manual one triggered laser shot can be catapulted out.

Nach jedem Objektiv- oder Kamerawechsel sollte die Bewe­ gung des Trägertisches 3 vor Verwendung der in dem Menü­ fenster 37 angebotenen Steuerfunktionen kalibriert werden. Durch dieses Kalibrieren wird die Bildschirm- und Träger­ tisch-ebene zur Deckung gebracht, d. h. es wird eine Über­ einstimmung des auf dem Bildschirm dargestellten Video­ bilds mit der realen Trägertischposition hergestellt. Die Kalibrierung kann durch Anklicken des in Fig. 5 gezeigten Buttons 38 gestartet werden. Anschließend wird auf dem Bildschirm 8 ein Kreuz dargestellt. Der Benutzer muss nun­ mehr in den Verfahr-Modus wechseln und durch entsprechende Mausbewegung den Trägertisch 3 so verschieben, dass ein markanter Punkt des biologischen Materials unter dem dar­ gestellten Kreuz zu liegen kommt. Anschließend muss der Benutzer wieder in den Cursor-Modus zurückkehren und bei­ spielsweise durch Drücken der linken Maustaste das Anfah­ ren des markanten Punktes bestätigen. Dieser Vorgang wird insgesamt viermal wiederholt, so dass insgesamt vier auf dem Bildschirm 8 dargestellte Kreuze mit dem jeweils ge­ wählten markanten Bildpunkt zur Deckung gebracht werden. Diese vier mit dem gewählten markanten Bildpunkt zur Dec­ kung zu bringenden Kreuze bilden die Eckpunkte eines auf der Spitze stehenden Quadrats. Die auf diese Weise gewon­ nen Kalibrierungsinformationen werden gespeichert und bleiben auch nach Aus- und Einschalten des Systems erhal­ ten. Bei jedem Wechsel des Objektivs am Mikroskop oder der Videokamera bzw. beim Umschalten auf eine andere Videoka­ mera muss eine erneute Kalibrierung durchgeführt werden, wobei die Zeilen der jeweils aktiven Videokamera derart ausgerichtet sein müssen, dass sie mit den Bildschirmzei­ len übereinstimmen. Ergänzend wird darauf hingewiesen, dass die zuvor bestimmte Kalibrierung im Prinzip auch dann durchgeführt werden kann, wenn lediglich zwei auf dem Bildschirm 8 dargestellten Kreuze mit einem markanten Bildpunkt zur Deckung gebracht werden. Durch das viermali­ ge Anfahren dieses markanten Bildpunkts kann jedoch die Genauigkeit der Kalibrierung erhöht werden.After each lens or camera change, the movement of the carrier table 3 should be calibrated before using the control functions offered in the menu window 37 . By calibrating the screen and carrier table level is brought to congruence, ie there is an agreement between the video image shown on the screen with the real carrier table position. The calibration can be started by clicking the button 38 shown in FIG. 5. A cross is then displayed on the screen 8 . The user must now switch more to the travel mode and move the support table 3 by moving the mouse so that a striking point of the biological material comes to lie under the cross shown. The user must then return to cursor mode and, for example, by pressing the left mouse button, confirm moving to the prominent point. This process is repeated a total of four times, so that a total of four crosses shown on the screen 8 are brought to congruence with the respective distinctive pixel. These four crosses to be brought to the ceiling with the selected distinctive pixel form the corner points of a square standing on the top. The calibration information obtained in this way is saved and is retained even after the system has been switched off and on. Each time the lens is changed on the microscope or video camera or when switching to another video camera, a new calibration must be carried out Lines of the active video camera must be aligned so that they match the lines on the screen. In addition, it is pointed out that the previously determined calibration can in principle also be carried out if only two crosses shown on the screen 8 are brought to coincide with a striking pixel. By approaching this striking pixel four times, however, the accuracy of the calibration can be increased.

Wie bereits erwähnt worden ist, kann mit Hilfe des in Fig. 5 gezeigten Menüfensters 37 ein beliebiger Kurvenver­ lauf definiert werden, der anschließend als Grundlage für einen automatisch gesteuerten Schnittvorgang mit Hilfe der Laserbestrahlung dient. Durch Anklicken des Buttons 42 kann auf dem Bildschirm 8 eine kreisförmige Schnittlinie gezeichnet werden. Zu diesem Zweck muss nach Anklicken des Buttons 42 der auf dem Bildschirm 8 dargestellte Cursor mit Hilfe der Maus 10 auf den gewünschten Kreismittelpunkt gefahren und anschließend nach Drücken einer Maustaste der Cursor auf den gewünschten Kreisdurchmesser aufgezogen werden. Durch Betätigen der rechten Maustaste kann die Farbe der kreisförmigen Schnittlinie gewählt oder auch der gezeichnete Kreis gelöscht werden. Ebenso ist es möglich, die von einem gezeichneten Kreis umschlossene Fläche bere­ chen zu lassen, was ebenfalls über das nach Betätigen der rechten Maustaste angebotene Menü möglich ist. Nach er­ folgter Berechnung wird der ermittelte Flächeninhalt in einem separaten Fenster angezeigt. Auf analoge Art und Weise kann durch Anklicken des Buttons 43 eine Freihand­ kurve auf dem Bildschirm 8 gezeichnet werden, die an­ schließend als Schnittkurve für ein automatisch durchge­ führtes Schneiden des auf dem Träger befindlichen biologi­ schen Materials verwendet wird. Dies soll nachfolgend nä­ her anhand der Darstellungen in Fig. 8A-8C erläutert wer­ den.As has already been mentioned, with the help of the menu window 37 shown in FIG. 5, any curve run can be defined, which then serves as the basis for an automatically controlled cutting process with the aid of laser radiation. By clicking the button 42 , a circular section line can be drawn on the screen 8 . For this purpose, after clicking the button 42, the cursor shown on the screen 8 must be moved with the mouse 10 to the desired center of the circle and then, after pressing a mouse button, the cursor must be drawn to the desired circle diameter. By clicking the right mouse button, the color of the circular section line can be selected or the drawn circle can be deleted. It is also possible to have the area enclosed by a circle drawn, which is also possible via the menu offered by pressing the right mouse button. After the calculation has been carried out, the determined area is displayed in a separate window. In an analogous manner, a freehand curve can be drawn on the screen 8 by clicking the button 43 , which is then used as a cutting curve for an automatically performed cutting of the biological material on the carrier. This will be explained in more detail below with reference to the representations in FIGS. 8A-8C.

Fig. 8A zeigt die Bildschirmdarstellung bzw. das Video­ bild vor dem Zeichnen einer Schnittlinie. Im vorliegenden Fall handelt es sich beim dargestellten biologischen Material um eine Bakterienpopulation, die planar auf dem Trä­ ger aufgebracht ist. Durch Anklicken des Buttons 43 kann der Benutzer mit Hilfe einer entsprechenden Mausbewegung den Cursor auf dem Bildschirm 8 bewegen, so dass eine der Cursorbewegung folgende Freihandkurve 62 gezeichnet wird, die in Fig. 8B strichpunktiert dargestellt ist. Auch hin­ sichtlich einer bereits gezeichneten Freihandlinie kann diese durch Betätigen der rechten Maustaste wieder ge­ löscht oder die Farbe der auf dem Bildschirm 8 dargestell­ ten Freihandkurve eingestellt werden. Zudem kann analog zu dem Fall einer kreisförmigen Kurve die von der Freihand­ kurve umschlossene Fläche berechnet und angezeigt werden. Durch Anklicken des in Fig. 5 gezeigten Buttons 44 kann eine Radiergummifunktion aktiviert werden, mit dessen Hil­ fe Teile der gezeichneten Freihandkurve 62 gelöscht werden können. Zu diesem Zweck ist insbesondere der Anfangspunkt für das Radieren und der Endpunkt für das Radieren anzu­ klicken, woraufhin der zu radierende Kurventeil markiert und nach Bestätigung durch den Benutzer gelöscht wird. Fig. 8A shows the screen display or the video image before drawing a cut line. In the present case, the biological material shown is a bacterial population that is applied planar on the carrier. By clicking the button 43 , the user can move the cursor on the screen 8 with the aid of a corresponding mouse movement, so that a freehand curve 62 following the cursor movement is drawn, which is shown in broken lines in FIG. 8B. Also with regard to an already drawn freehand line, this can be deleted again by pressing the right mouse button or the color of the freehand curve shown on the screen 8 can be set. In addition, analogously to the case of a circular curve, the area enclosed by the freehand curve can be calculated and displayed. By clicking the button 44 shown in FIG. 5, an eraser function can be activated, with the aid of which parts of the drawn freehand curve 62 can be deleted. For this purpose, the starting point for the erasing and the end point for the erasing must be clicked, whereupon the curve part to be erased is marked and deleted after confirmation by the user.

Anschließend kann durch Betätigen des Buttons 39 ein auto­ matischer Schneidevorgang entlang der auf dem Bildschirm 8 gezeichneten Kurve 62 durchgeführt werden, d. h. der Compu­ ter 7 erzeugt automatisch Verstellsignale für den Träger­ tisch 3, so dass dieser entsprechend der gezeichneten Freihandkurve 62 über den Laserstrahl bewegt wird. In dem biologischen Material wird somit durch die Laserbestrah­ lung eine Schnittlinie 63 ausgebildet, die auch auf der Bildschirmdarstellung sichtbar ist und ein zuvor durch die gezeichnete Freihandkurve 62 ausgewähltes biologisches Ob­ jekt 64 umgibt und dieses von dem umgebenden biologischen Material trennt. Die Geschwindigkeit, mit der dieser La­ serschnitt durchgeführt wird, kann in einem Auswahlbereich 47 des Menüfensters 37 eingestellt werden. Durch Betätigen bzw. Anklicken des Buttons 40 kann der zuletzt durchge­ führte Schneidevorgang wiederholt werden, d. h. der Träger­ tisch 3 wird automatisch nochmals entlang desselben Kurvenlaufs verfahren. Des weiteren kann über den Einstellbe­ reich 48 die Anzahl der Wiederholungen beim automatisch Schneiden festgelegt werden, so dass ein und derselbe Schneidevorgang automatisch mehrmals nacheinander durchge­ führt wird.This is moved according to the drawn freehand curve 62 via the laser beam can then by pressing the button 39 an auto matic cutting operation can be performed along the drawn on the screen 8 the curve 62, the Compu ie ter 7 automatically generates adjustment signals for the carrier table 3, so that . A cut line 63 is thus formed in the biological material by the laser irradiation, which is also visible on the screen display and surrounds a biological object 64 previously selected by the drawn freehand curve 62 and separates it from the surrounding biological material. The speed at which this laser cut is carried out can be set in a selection area 47 of the menu window 37 . By pressing or clicking the button 40 , the last cutting process carried out can be repeated, ie the carrier table 3 is automatically moved again along the same curve. Furthermore, the number of repetitions during automatic cutting can be defined via the setting area 48 , so that one and the same cutting process is carried out automatically several times in succession.

Es ist zu beachten, dass vor dem automatischen Schneide­ vorgang die Laserleistung und/oder der Fokus des Laser­ strahls in Abhängigkeit von der zu bearbeitenden Probe eingestellt werden muss. Dies kann, wie bereits zuvor er­ läutert worden ist, über das in Fig. 2 gezeigte Steuerpa­ neel erfolgen.It should be noted that the laser power and / or the focus of the laser beam must be adjusted depending on the sample to be processed before the automatic cutting process. This can, as has already been explained above, be done via the control panel shown in FIG. 2.

Das gemäß Fig. 8C ausgeschnittene biologische Objekt 64 kann nunmehr mit Hilfe einer weiteren Laserbestrahlung aus der biologischen Masse zu der an dem Manipulator 2 befind­ lichen Auffangvorrichtung katapultiert werden. Zu diesem Zweck sollte die in Fig. 9A durch ein schwarzes Dreieck dargestellte und auf dem Bildschirm 8 sichtbare Lasermar­ kierung 66 zu dem physikalischen Mittelpunkt des zu kata­ pultierenden biologischen Objekts 64 bewegt werden. An­ schließend sollte die Laserenergie gegenüber der zum Schneiden verwendeten Laserenergie erhöht und/oder der La­ serstrahl gegenüber dem zum Schneiden verwendeten Laser­ strahl defokussiert werden, um den angestrebten Photo­ neneffekt zu erhalten, der zum Herausschleudern des ge­ wünschten biologischen Objekts 64 führt. Ein einzelner La­ serimpuls oder Laserschuss, der durch einen kurzen Druck auf den in Fig. 1 gezeigten Fußschalter 67 ausgelöst wer­ den kann, führt anschließend zum Herauskatapultieren des gewünschten biologischen Objekts 64. Statt einer derarti­ gen manuellen Aktivierung des Laserimpulses ist auch eine von dem Computer 7 bzw. der darauf implementierten Steue­ rung durchgeführte automatische Aktivierung des Laserim­ pulses denkbar, wobei insbesondere auch die Laserenergie und/oder der Laserfokus automatisch entsprechend einge­ stellt werden kann. The biological object 64 cut out according to FIG. 8C can now be catapulted from the biological mass to the collecting device located on the manipulator 2 with the aid of a further laser irradiation. For this purpose, the laser marking 66 represented by a black triangle in FIG. 9A and visible on the screen 8 should be moved to the physical center of the biological object 64 to be catapulted. At closing, the laser energy should be increased compared to the laser energy used for cutting and / or the laser beam should be defocused compared to the laser beam used for cutting in order to obtain the desired photo effect that leads to the ejection of the desired biological object 64 . A single laser pulse or laser shot, which can be triggered by briefly pressing the foot switch 67 shown in FIG. 1, then leads to the desired biological object 64 being catapulted out . Instead of such a manual activation of the laser pulse, an automatic activation of the laser pulse carried out by the computer 7 or the control implemented thereon is also conceivable, wherein in particular the laser energy and / or the laser focus can also be set automatically accordingly.

Wie in Fig. 9B gezeigt ist, bleibt nach dem Herauskata­ pultieren des gewünschten biologischen Objekts 64 eine entsprechende Lücke 65 in dem auf dem Träger befindlichen biologischen Material zurück. Da das entsprechende biolo­ gische Objekt 64 zuvor aus der umgebenden biologischen Masse herausgeschnitten worden ist, weist das biologische Objekt 64 bzw. die Lücke 65 eine sehr saubere Schnittlinie auf.As shown in FIG. 9B, after the desired biological object 64 has been extracted, a corresponding gap 65 remains in the biological material on the carrier. Since the corresponding biological object 64 has previously been cut out of the surrounding biological mass, the biological object 64 or the gap 65 has a very clean cutting line.

Nur der Vollständigkeit halber sei an dieser Stelle darauf hingewiesen, dass selbstverständlich auch bereits sepa­ rierte biologische Objekte 64 von dem Träger zu der an dem Manipulator 2 befindlichen Auffangvorrichtung (beispiels­ weise in Form eines Mikrozentrifugenbehälters) katapul­ tiert werden können. Für die Mikrodissektion einzelner Zellen oder einzelner biologischer Objekte ist in der Re­ gel eine geringere Schneide- und Katapultierenergie erfor­ derlich.For the sake of completeness, it should be pointed out here that, of course, already separated biological objects 64 can also be catapulted from the carrier to the collecting device located on the manipulator 2 (for example in the form of a microcentrifuge container). As a rule, less cutting and catapulting energy is required for microdissection of individual cells or individual biological objects.

Das Katapultieren ausgewählter biologischer Objekte 64 kann bei dem in Fig. 9A gezeigten System auch automatisch durchgeführt werden. Durch Anklicken des in Fig. 5 ge­ zeigten Buttons 41 kann eine beliebige Anzahl von biologi­ schen Objekten markiert werden, die anschließend automa­ tisch katapultiert werden sollen. Zu diesem Zweck muss mit Hilfe der Computermaus 10 ein nach dem Anklicken des But­ tons 41 auf dem Bildschirm 8 sichtbarer Marker auf das je­ weils gewünschte biologische Objekt bewegt und die Auswahl dieses biologischen Objekts beispielsweise durch Betätigen der linken Maustaste bestätigt werden. Das auf diese Weise für den nachfolgenden automatischen Katapultiervorgang ausgewählte biologische Objekt erscheint anschließend ent­ sprechend markiert in dem auf dem Bildschirm 8 dargestell­ ten Videobild. Dieser Vorgang kann mehrmals wiederholt werden, so dass auf dem Bildschirm 8 eine entsprechende Anzahl von ausgewählten biologischen Objekten 66 markiert werden, wie es in Fig. 10A gezeigt ist. Im Statusfenster wird die Anzahl der markierten biologischen Objekte 66 an­ gezeigt.The catapulting of selected biological objects 64 can also be carried out automatically in the system shown in FIG. 9A. By clicking on the button 41 shown in FIG. 5, any number of biological objects can be marked which are then to be catapulted automatically. For this purpose, with the help of the computer mouse 10, a marker visible after clicking the button 41 on the screen 8 has to be moved onto the desired biological object and the selection of this biological object has to be confirmed, for example, by pressing the left mouse button. The biological object selected in this way for the subsequent automatic catapulting process then appears accordingly marked in the video image shown on the screen 8 . This process can be repeated several times, so that a corresponding number of selected biological objects 66 are marked on the screen 8 , as shown in FIG. 10A. The number of marked biological objects 66 is shown in the status window.

Für das Katapultieren der ausgewählten biologischen Objek­ te 66 ist es nicht unbedingt erforderlich, dass diese zu­ vor aus der umgebenden biologischen Masse herausgeschnit­ ten worden sind. Vielmehr haben Untersuchungen ergeben, dass es grundsätzlich auch möglich ist, durch eine ent­ sprechende Laserbestrahlung einzelne biologische Objekte direkt aus der umgebenden biologischen Masse herauszukata­ pultieren. Zum direkten Katapultieren einzelner biologi­ scher Objekte muss die Laserenergie gegenüber einer zum Schneiden des entsprechenden biologischen Materials geeig­ neten Laserenergie um ca. 10-25%, vorzugsweise um 15-25%, erhöht werden. Ebenso sollte die Fokussierung des Laser­ strahls gegenüber einem zum Schneiden geeigneten Laser­ strahl entsprechend prozentual verschoben werden, wobei insbesondere gute Ergebnisse erzielt werden können, wenn der Brennpunkt des Lasers um ca. 1-2 µm gegenüber der Ob­ jektebene (insbesondere nach unten) verschoben wird. Durch die Erhöhung der Laserenergie und/oder durch die Defokus­ sierung des Laserstrahls kann der gewünschte Photonenef­ fekt erzielt werden, der das direkte Katapultieren von in einer biologischen Masse befindlichen biologischen Objek­ ten ermöglicht.It is not absolutely necessary for the selected biological objects 66 to be catapulted that they have previously been cut out of the surrounding biological mass. Rather, studies have shown that it is also possible, in principle, to use individual laser radiation to podium individual biological objects directly from the surrounding biological mass. For direct catapulting of individual biological objects, the laser energy has to be increased by approx. 10-25%, preferably by 15-25%, compared to a laser energy suitable for cutting the corresponding biological material. Likewise, the focusing of the laser beam should be shifted correspondingly in percent compared to a laser beam suitable for cutting, and in particular good results can be achieved if the focal point of the laser is shifted by approximately 1-2 μm relative to the object plane (in particular downwards) . By increasing the laser energy and / or by defocusing the laser beam, the desired photon effect can be achieved, which enables the direct catapulting of biological objects in a biological mass.

Zum Katapultieren muss - wie zuvor beschrieben worden ist - die Laserenergie und/oder die Fokussierung des Laser­ strahls entsprechend eingestellt werden. Dies kann sowohl manuell über das in Fig. 2 gezeigte Steuerpaneel als auch automatisch erfolgen. Durch Anklicken des in Fig. 5 ge­ zeigten Buttons 39 werden dann die zuvor auf dem Bild­ schirm markierten biologischen Objekte 66 nacheinander herauskatapultiert, wobei zu diesem Zweck jedes einzelne markierte biologische Objekt 66 durch automatische Erzeu­ gung entsprechender Verstellsignale für den Trägertisch 3 über den Laser gefahren und anschließend bei maximal ein­ gestellter Pulsrate der Laser für einen bis zwei Laserim­ pulse aktiviert wird. Nachdem auf diese Weise eines der markierten biologischen Objekte 66 herauskatapultiert wor­ den ist, wird automatisch das nächste markierte biologi­ sche Objekt 66 angefahren und der Katapultiervorgang wie­ derholt. In Fig. 10B ist die Darstellung des Bildschirms 8 nach Herauskatapultieren sämtlicher zuvor markierter biologischer Objekte 66 dargestellt. Es ist ersichtlich, dass in dem biologischen Material entsprechende Lücken 65 zurückbleiben. Diese Lücken 65 weisen eine unebene oder aufgerauhte Schnittlinie auf, was darauf zurückgeht, dass die entsprechenden biologischen Objekte 66 nicht zuvor aus der umgebenden biologischen Masse herausgeschnitten, son­ dern direkt aus dieser herauskatapultiert worden sind.For catapulting - as described above - the laser energy and / or the focusing of the laser beam must be set accordingly. This can be done either manually via the control panel shown in FIG. 2 or automatically. By clicking on the button 39 shown in FIG. 5, the biological objects 66 previously marked on the screen are catapulted out one after the other, for which purpose each individual marked biological object 66 is moved by the automatic generation of corresponding adjustment signals for the carrier table 3 via the laser and then at a maximum pulse rate set, the laser is activated for one to two laser pulses. After one of the marked biological objects 66 has been catapulted out in this way, the next marked biological object 66 is automatically approached and the catapulting process is repeated. In Fig. 10B, the view of the screen 8 after catapulting all previously labeled biological objects 66 is shown. It can be seen that corresponding gaps 65 remain in the biological material. These gaps 65 have an uneven or roughened cutting line, which is due to the fact that the corresponding biological objects 66 have not previously been cut out of the surrounding biological mass, but have instead been catapulted directly out of it.

Durch Anklicken des in Fig. 5 gezeigten Buttons 40 kann analog zum automatischen Schneidevorgang der zuvor durch­ geführte Katapultiervorgang wiederholt werden, so dass für alle zuvor markierten biologischen Objekte 66 (vergleiche Fig. 10A) ein erneuter Katapultiervorgang ausgelöst wird. Dies ist insbesondere dann sinnvoll, wenn einzelne der zu­ vor markierten biologischen Objekte 66 beim ersten Versuch nicht vollständig aus der umgebenden biologischen Masse herauskatapultiert werden konnten.By clicking the button 40 shown in FIG. 5, the catapulting process previously carried out can be repeated analogously to the automatic cutting process, so that a new catapulting process is triggered for all previously marked biological objects 66 (see FIG. 10A). This is particularly useful if some of the biological objects 66 previously marked in the first attempt could not be completely catapulted out of the surrounding biological mass.

Wie bereits zuvor erläutert worden ist, sollte zum Kata­ pultieren der Laserstrahl stets auf den physikalischen Mittelpunkt des gewünschten biologischen Objekts bewegt werden. Statt dessen ist jedoch auch möglich, beim Aus­ schneiden des entsprechenden biologischen Objekts eine ca. 1-2 µm dünne Verbindung zwischen dem gewünschten biologi­ schen Objekt und der umgebenden biologischen Masse zu las­ sen und anschließend zum Katapultieren den Laser exakt über diese dünne Verbindung zu fahren, wobei der anschlie­ ßende Katapultiervorgang insbesondere auch ohne Defokus­ sierung des Laserstrahls durchgeführt werden kann. Diese Vorgehensweise besitzt den Vorteil, dass vor dem Katapul­ tiervorgang ein ungewollten Herausfallen oder Verschieben des zuvor ausgeschnittenen biologischen Objekts vermieden werden kann.As has already been explained, the Kata the laser beam always pult on the physical Moves the center of the desired biological object become. Instead, however, it is also possible to go out cut the corresponding biological object an approx. 1-2 µm thin connection between the desired biological object and the surrounding biological mass and then laser the catapult exactly to drive over this thin connection, the connecting Catapulting process especially without defocus sation of the laser beam can be performed. This  Procedure has the advantage that in front of the catapult an unwanted falling out or moving of the previously cut out biological object can be.

Eine besondere Funktion stellt der in Fig. 5 gezeigte Button 45 dar. Durch Anklicken dieses Buttons kann eine Distanzmessung eingeschaltet werden. Wird anschließend beispielsweise durch Betätigen der linken Maustaste ein Anfangspunkt auf dem dargestellten Videobild angewählt und der Cursor bei weiterhin gedrückter linker Maustaste zu einem gewünschten Endpunkt bewegt, wird nach Loslassen der entsprechenden Maustaste automatisch die Distanz zwischen dem gewählten Anfangspunkt und dem gewählten Endpunkt er­ mittelt und auf dem Bildschirm 8 dargestellt. Durch erneu­ tes Anklicken des Buttons 45 kann die Distanzmessungsfunk­ tion wieder ausgeschaltet werden.The button 45 shown in FIG. 5 represents a special function. By clicking this button, a distance measurement can be switched on. If, for example, a start point is selected on the displayed video image by pressing the left mouse button and the cursor is moved to a desired end point while the left mouse button is still pressed, the distance between the selected start point and the selected end point is automatically determined and released after releasing the corresponding mouse button shown on the screen 8 . The distance measuring function can be switched off again by clicking the button 45 again.

Der ebenfalls in Fig. 5 gezeigte Button 46 hat das Lö­ schen sämtlicher Markierungen auf dem Bildschirm 8 zur Folge. D. h. nach Anklicken des Buttons 46 werden alle auf dem Bildschirm 8 gezeichneten Schnittkurven und alle zum Katapultieren markierten Punkte gelöscht.The button 46 also shown in FIG. 5 results in the deletion of all markings on the screen 8 . That is, after clicking the button 46 , all intersection curves drawn on the screen 8 and all points marked for catapulting are deleted.

Des weiteren ist in Fig. 5 ein Anzeigenbereich 49 darge­ stellt, wobei in diesem Anzeigenbereich 49 stets die lau­ fende Nummer des aktuell angefahrenen Punktes bei einer zum Katapultieren zuvor markierten Punkteschar dargestellt wird.Furthermore, a display area 49 is shown in FIG. 5, wherein in this display area 49 the running number of the point currently approached is always shown with a group of points previously marked for catapulting.

Da die zum Schneiden bzw. Katapultieren benötigte Energie u. a. auch von der Beschaffenheit des jeweils verwendeten Objektivs 18 abhängt, ist es besonders vorteilhaft, wenn für verschiedene Objektive entsprechende Energieeinstel­ lungen und/oder Fokuseinstellungen des Laserstrahls abge­ speichert werden können. Diese Einstellwerte können dabei vorzugsweise in Bezug auf entsprechende Bearbeitungsposition abgespeichert werden, so daß bei Verwendung eines be­ stimmten Objektivs die gewünschten Bearbeitungsbereiche oder Bearbeitungspunkte automatisch angefahren und die je­ weils zum Schneiden oder Katapultieren geeignete Bestrah­ lungsenergie und/oder Fokussierung automatisch eingestellt werden.Since the energy required for cutting or catapulting also depends, inter alia, on the nature of the lens 18 used in each case, it is particularly advantageous if corresponding energy settings and / or focus settings of the laser beam can be stored for various lenses. These setting values can preferably be stored in relation to the corresponding machining position, so that when using a certain lens the desired machining areas or machining points are automatically approached and the radiation energy and / or focusing suitable for cutting or catapulting are automatically set.

Nachfolgend sollen kurz die Steuerfunktionen des zur Steuerung des Manipulators 2 vorgesehenen Menüfensters er­ läutert werden, welches durch Anklicken des in Fig. 3 ge­ zeigten Buttons 22 aufgerufen bzw. geöffnet werden kann. Das entsprechende Menüfenster 50 ist in Fig. 6 darge­ stellt.The control functions of the menu window provided for controlling the manipulator 2 are briefly explained below, which can be called up or opened by clicking the button 22 shown in FIG. 3. The corresponding menu window 50 is shown in Fig. 6 Darge.

Durch Anklicken des in Fig. 6 gezeigten Buttons 51 kann der Manipulator 2 in eine zuvor definierte und abgespei­ cherte Home-Position gefahren werden. Diese Home-Position entspricht einer Position des Manipulators 2, bei der sich der Manipulator 2 außerhalb des Sichtfeldes befindet und bestückt werden kann. Entsprechend kann durch Anklicken des Buttons 52 der Manipulator 2 in die sogenannte Target- Position gefahren werden, welche der eigentlichen Arbeits­ position des Manipulators 2 entspricht und insbesondere zum Aufsammeln von herauskatapultierten biologischen Ob­ jekten verwendet wird. In dieser Target-Position befindet sich der Manipulator 2 bzw. die daran befestigte Auffang­ vorrichtung im Sichtfeld über dem Träger des biologischen Materials. Über dem unter den Buttons 51 und 52 befindli­ chen Einstellbereich 53 kann analog zu dem in Fig. 4 ge­ zeigten Menüfenster 23 die Geschwindigkeit der automati­ schen Manipulatorbewegung in drei Geschwindigkeitsstufen grob eingestellt werden. Mit Hilfe des darunter befindli­ chen Schiebers 54 kann zusätzliche eine Feineinstellung der Anfahrgeschwindigkeit von 1-100% vorgenommen werden. Der Zahlenwert unterhalb des Schiebers 54 zeigt den je­ weils aktuell eingestellten Prozentsatz an. By clicking the button 51 shown in FIG. 6, the manipulator 2 can be moved into a previously defined and stored home position. This home position corresponds to a position of the manipulator 2 , in which the manipulator 2 is outside the field of view and can be equipped. Accordingly, by clicking the button 52, the manipulator 2 can be moved into the so-called target position, which corresponds to the actual working position of the manipulator 2 and is used in particular to collect biological objects catapulted out. In this target position, the manipulator 2 or the collecting device attached to it is in the field of view above the carrier of the biological material. Via the setting area 53 located under the buttons 51 and 52, the speed of the automatic manipulator movement can be roughly set in three speed levels, analogously to the menu window 23 shown in FIG. 4. With the help of the slider 54 located beneath it, an additional fine adjustment of the approach speed of 1-100% can be carried out. The numerical value below the slider 54 indicates the percentage currently set.

Die in den Fig. 4-6 gezeigten und zuvor erläuterten Menüfenster 23, 37 bzw. 50 fassen die wichtigsten Steuer­ funktionen des in Fig. 1 gezeigten Systems zusammen und dienen dazu, dass auch ein unerfahrener Anwender möglichst rasch auf diese Steuerfunktionen zugreifen kann. Neben diesen Menüfenstern wird am oberen Bildschirmrand ständig eine Menüleiste angeboten, welche mehrere nebeneinander angeordnete Menüpunkte aufweist, bei deren Anklicken Un­ termenüs (sogenannte "Pull-Down-Menüs") geöffnet werden, um weitere Einstellungen vorzunehmen. Alle Steuerfunktio­ nen der in Fig. 4-6 gezeigten Menüfenster sind auch in diesen "Pull-Down-Menüs" enthalten.The menu windows 23 , 37 and 50 shown in FIGS. 4-6 and explained above summarize the most important control functions of the system shown in FIG. 1 and serve to ensure that even an inexperienced user can access these control functions as quickly as possible. In addition to these menu windows, there is always a menu bar at the top of the screen, which has several menu items arranged next to one another, when clicked on sub-menus (so-called "pull-down menus") are opened to make further settings. All control functions of the menu windows shown in Fig. 4-6 are also included in these "pull-down menus".

So enthält diese Menüleiste beispielsweise einen Menüpunkt "File", bei dessen Anklicken Informationen über die aktu­ elle Programmversion aufgerufen, das aktuelle Video- bzw. Kamerabild auf einem ausgewählten Speichermedium gespei­ chert oder das Steuerprogramm beendet werden kann. Des weiteren weist die Menüleiste einen Menüpunkt "Optik" auf, der Funktionen zur Konfiguration der Bildschirmwiedergabe des Kamerabilds enthält. Unter diesem Menüpunkt kann bei­ spielsweise die Wiedergabe der drei Grundfarben Rot, Grün und Blau sowie der Kontrast und die Helligkeit der Bild­ schirmdarstellung verändert werden, wobei die unter diesem Menüpunkt vorgenommenen Einstellungen auch Einfluss auf die als Datei gespeicherte Kamerabilder haben.For example, this menu bar contains a menu item "File", when clicked, information about the current elle program version called, the current video or Camera image saved on a selected storage medium or the control program can be ended. Of the menu bar also has a menu item "optics", the functions for configuring the screen display contains the camera image. Under this menu item at for example, the rendering of the three primary colors red, green and blue as well as the contrast and brightness of the image screen display can be changed, the under this Settings made in the menu item also affect that have camera images saved as a file.

Ein weiterer Menüpunkt "Stage" der am oberen Bildschirm­ rand dargestellten Menüleiste umfasst einige Funktionen der in Fig. 4 und Fig. 5 gezeigten Menüfenster. Zudem kann unter diesem Menüpunkt die automatische Bewegung des Trägertisches 3 derart konfiguriert werden, dass die Bewe­ gung auf eine wählbare Koordinatenachse beschränkt bleibt oder eine horizontale Mausbewegung in eine seitenverkehrte horizontale Bewegung des Trägertisches 3 umgesetzt wird. Für das automatische Schneiden können die entsprechenden Steuerparameter (Radius der Kreisbewegung in µm, Anzahl der Wiederholungen, Schnittgeschwindigkeit etc.) einge­ stellt werden. Darüber hinaus kann unter diesem Menüpunkt auch das Rechteck konfiguriert werden, welches für ein mä­ anderförmiges Abfahren der auf dem Träger befindlichen biologischen Masse verwendet wird (vergleiche den in Fig. 4 gezeigten Button 32). Zusätzlich kann unter diesem Menüpunkt eine bestimmte Verfahrposition des Trägertisches 3 als Referenzposition für alle gespeicherten Positions­ werte definiert werden. Sollte zu einem späteren Zeitpunkt dieselbe biologische Probe wiederverwendet werden, lässt sich somit der Bezug zu früher gespeicherten Koordinaten wiederherstellen. Damit die Referenzposition auf der bio­ logischen Probe wiedergefunden werden kann, sollte sie dauerhaft gekennzeichnet sein (beispielsweise durch eine entsprechende Lasermarkierung).Another menu item "Stage" of the edge at the top of the screen menu bar illustrated includes some functions of the menu window shown in Fig. 4 and Fig. 5. In addition, the automatic movement of the carrier table 3 can be configured under this menu item in such a way that the movement remains limited to a selectable coordinate axis or a horizontal mouse movement is converted into a reverse horizontal movement of the carrier table 3 . The corresponding control parameters (radius of the circular movement in µm, number of repetitions, cutting speed etc.) can be set for automatic cutting. In addition, the rectangle can also be configured under this menu item, which is used for a meandering movement of the biological mass located on the carrier (compare button 32 shown in FIG. 4). In addition, a specific travel position of the carrier table 3 can be defined as a reference position for all stored position values under this menu item. If the same biological sample is reused at a later point in time, the reference to previously saved coordinates can be restored. So that the reference position can be found on the biological sample, it should be permanently marked (for example, with a suitable laser marking).

Ein weiterer Menüpunkt "Manipulator" der am oberen Bild­ schirmrand dargestellten Menüleiste betrifft die Steuerung des Manipulators 2 und umfasst sämtliche der in Fig. 6 gezeigten Steuerfunktionen. Zudem kann unter diesem Menüpunkt die aktuelle Manipulatorfunktion als Target- Position oder Home-Position gespeichert werden (vergleiche die in Fig. 6 gezeigten Buttons 51 und 52, mit denen die­ se Positionen automatisch wiederangefahren werden können). Des weiteren kann unter diesem Menüpunkt festgelegt wer­ den, in welcher Reihenfolge die drei Koordinatenachsen bei der Bewegung des Manipulators 2 von und zur Home-Position abgefahren werden sollen. Durch eine geeignete Wahl dieser Einstellung kann der Manipulator 2 veranlasst werden, Hin­ dernisse zu umfahren, so dass verhindert werden kann, dass der Manipulator 2 die daran befestigte Auffangvorrichtung oder die auf dem Träger befindliche biologische Probe durch eine Bewegung des Manipulators beschädigt wird. Um eine Beschädigung der Probe zu verhindern, sollte die z- Richtung beim Herausfahren des Manipulators 2 als erste und beim Hereinfahren des Manipulators 2 als letzte gefah­ ren werden. Zudem kann unter diesem Menüpunkt auch die Zuordnung zwischen der Mausbewegung und der Manipulatorbewe­ gung hinsichtlich der X-, Y- und Z-Koordinate umgekehrt werden.Another menu item "manipulator" of the menu bar shown at the top of the screen relates to the control of the manipulator 2 and includes all of the control functions shown in FIG. 6. In addition, the current manipulator function can be saved as a target position or home position under this menu item (compare buttons 51 and 52 shown in FIG. 6, with which these positions can be automatically restarted). Furthermore, this menu item can be used to determine the order in which the three coordinate axes are to be moved from and to the home position when the manipulator 2 is moved . By a suitable choice of this setting, the manipulator 2 can be caused to bypass obstacles, so that the manipulator 2 can be prevented from being damaged by a movement of the manipulator, the collecting device attached thereto or the biological sample located on the carrier. To prevent damage to the sample, the z-direction when retracting the manipulator 2 as the first and while entering driving the manipulator 2 as last gefah ren should be. In addition, the assignment between the mouse movement and the manipulator movement with regard to the X, Y and Z coordinates can be reversed under this menu item.

Die Menüleiste weist des weiteren einen "Lasermarker"- Menüpunkt auf, über den die Bildschirmdarstellung des La­ sermarkers konfiguriert werden kann. Der Lasermarker zeigt denjenigen Ort an, an dem der Laserstrahl bei Auslösung auf die auf dem Träger befindliche Probe trifft. Durch An­ klicken dieses Menüpunkts kann beispielsweise das in Fig. 7 gezeigte Konfigurationsfenster 55 geöffnet werden. Mit Hilfe des Auswahlbereichs 56 kann das zur Darstellung des Laserauftreffpunktes gewählte Symbol, mit dem der Laser auf dem Bildschirm 8 dargestellt wird, ausgewählt werden. Beim dargestellten Beispiel ist als Lasermarkierung ein Fadenkreuz ausgewählt. Ist das Kästchen 57 aktiviert, wird die Darstellung des Lasermarkers auf dem Bildschirm 8 nach Anklicken des Buttons 60 gelöscht. Durch Aktivierung des Kästchens 58 kann nach anschließendem Anklicken des But­ tons 60 der Lasermarker mit der Maus verschoben werden. Es erscheint dann ein durch Bewegung der Maus verschiebbares Positionierungskreuz, wobei beispielsweise durch Drücken der linken Maustaste die aktuelle Position dieses Positio­ nierungskreuzes als neue Lasermarkerposition übernommen werden kann. Durch Anklicken des Buttons 59 kann ein Fen­ ster zur Auswahl der Darstellungsfarbe des Lasermarkers geöffnet werden. Durch Anklicken des Buttons 61 können schließlich alle vorgenommenen Änderungen verworfen und die im Speicher befindliche Position des Lasermarkers ge­ laden werden. Anschließend wird das Fenster 55 geschlos­ sen.The menu bar also has a "laser marker" menu item, via which the screen display of the laser marker can be configured. The laser marker shows the location where the laser beam hits the sample on the carrier when triggered. By clicking on this menu item, for example, the configuration window 55 shown in FIG. 7 can be opened. With the help of the selection area 56 , the symbol selected for representing the laser impact point, with which the laser is displayed on the screen 8 , can be selected. In the example shown, a crosshair is selected as the laser marking. If the box 57 is activated, the representation of the laser marker on the screen 8 is deleted after clicking the button 60 . By activating the box 58 , the laser marker can be moved with the mouse after clicking the button 60 . A positioning cross that can be moved by moving the mouse then appears, for example by pressing the left mouse button the current position of this positioning cross can be adopted as the new laser marker position. By clicking the button 59 , a window can be opened for selecting the display color of the laser marker. By clicking the button 61 , all changes made can finally be discarded and the position of the laser marker in the memory can be loaded. Then the window 55 is closed.

Die Menüleiste weist schließlich auch einen Menüpunkt "Cut" auf, in dem sämtliche Steuerfunktionen des in Fig. 5 gezeigten Menüfensters 37 zusammengefasst sind, die ins­ besondere zum automatischen Schneiden und/oder Katapultie­ ren dienen.Finally, the menu bar also has a "Cut" menu item, in which all the control functions of the menu window 37 shown in FIG. 5 are summarized, which serve in particular for automatic cutting and / or catapulting.

Claims (18)

1. Verfahren zur Gewinnung eines biologischen Objekts aus einer biologischen Masse, wobei sich die biologische Masse auf einem Träger (3) be­ findet, dadurch gekennzeichnet, dass ein bestimmtes biologisches Objekt (64) der biologi­ schen Masse durch ein und dieselbe Bestrahlung eines bio­ logischen Objekts (64) mit einem Laserstrahl aus der bio­ logischen Masse herausgelöst und von dem Träger (3) zu ei­ ner Auffangvorrichtung (2) katapultiert wird.1. A method for obtaining a biological object from a biological mass, wherein the biological mass is on a carrier ( 3 ) be, characterized in that a specific biological object ( 64 ) of the biological mass by one and the same radiation of a biological Object ( 64 ) with a laser beam from the biological mass and catapulted from the carrier ( 3 ) to a collecting device ( 2 ). 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die Bestrahlung des biologischen Objekts (64) zum Ka­ tapultieren desselben von dem Träger (3) zu der Auffang­ vorrichtung (2) in Form eines Laserschusses erfolgt.2. The method according to claim 1, characterized in that the irradiation of the biological object ( 64 ) for Ka tapulieren the same from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ) in the form of a laser shot. 3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass zum Katapultieren des biologischen Objekts (64) von dem Träger (3) zu der Auffangvorrichtung (2) das biologi­ sche Objekt (64) mit einem Laserstrahl bestrahlt wird, dessen Laserenergie im Vergleich zu der zum Schneiden der biologischen Masse benötigen Laserenergie erhöht wird.3. The method according to claim 1 or 2, characterized in that for catapulting the biological object ( 64 ) from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ), the biological object ( 64 ) is irradiated with a laser beam, the laser energy in comparison to which laser energy required to cut the biological mass is increased. 4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, dass die Laserenergie des Laserstrahls zum Katapultieren des biologischen Objekts (64) von dem Träger (3) zu der Auffangvorrichtung (2) im Vergleich zu der zum Schneiden der biologischen Masse benötigten Laserenergie um ca. 10- 25% erhöht wird.4. The method according to claim 3, characterized in that the laser energy of the laser beam for catapulting the biological object ( 64 ) from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ) compared to the laser energy required to cut the biological mass by about 10 - 25% is increased. 5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass die Laserenergie des Laserstrahls zum Katapultieren des biologischen Objekts (64) von dem Träger (3) zu der Auffangvorrichtung (2) im Vergleich zu der zum Schneiden der biologischen Masse benötigten Laserenergie um ca. 15- 25% erhöht wird.5. The method according to claim 4, characterized in that the laser energy of the laser beam for catapulting the biological object ( 64 ) from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ) compared to the laser energy required to cut the biological mass by about 15 - 25% is increased. 6. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass zum Katapultieren des biologischen Objekts (64) von dem Träger (3) zu der Auffangvorrichtung (2) das biologi­ sche Objekt mit einem Laserstrahl bestrahlt wird, der im Vergleich zu einer zum Schneiden der biologischen Masse durchgeführten Laserbestrahlung in Bezug auf die Ebene der biologischen Masse defokussiert wird.6. The method according to any one of the preceding claims, characterized in that for catapulting the biological object ( 64 ) from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ), the biological object is irradiated with a laser beam, which compared to one for cutting the biological mass laser radiation is defocused with respect to the level of the biological mass. 7. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass zum Katapultieren des biologischen Objekts (64) von dem Träger (3) zu der Auffangvorrichtung (2) der Brenn­ punkt des Laserstrahls im Vergleich zu einem zum Schneiden der biologischen Masse geeigneten Laserstrahls um ca. 1-2 µm gegenüber der Ebene der biologischen Masse verstellt wird.7. The method according to claim 6, characterized in that for catapulting the biological object ( 64 ) from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ) the focal point of the laser beam compared to a laser beam suitable for cutting the biological mass by approx. 1-2 µm compared to the level of the biological mass. 8. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die Bestrahlung des zu katapultierenden biologischen Objekts (64) mit dem Laserstrahl und damit das Katapultie­ ren des biologischen Objekts (64) von dem Träger (3) zu der Auffangvorrichtung (2) rechnergestützt erfolgt.8. The method according to any one of the preceding claims, characterized in that the irradiation of the biological object to be catapulted ( 64 ) with the laser beam and thus the catapulting ren of the biological object ( 64 ) from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ) computer-supported he follows. 9. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet,
dass mindestens ein zu katapultierendes biologisches Ob­ jekt (64) ausgewählt und die Position des ausgewählten biologischen Objekts (64) innerhalb der umgebenden biolo­ gischen Masse gespeichert wird,
dass anschließend die biologische Masse entsprechend der gespeicherten Position des biologischen Objekts gegenüber dem Laserstrahl rechnergestützt ausgerichtet und mit dem Laserstrahl bestrahlt wird, um das biologische Objekt (64) von dem Träger (3) zu der Auffangvorrichtung (2) zu kata­ pultieren.9. The method according to claim 8, characterized in
that is stored within the surrounding biolo gical mass at least ject to katapultierendes biological Ob (64) and the selected position of the selected biological object (64),
that the biological mass is then computer-aided in accordance with the stored position of the biological object with respect to the laser beam and irradiated with the laser beam in order to catapult the biological object ( 64 ) from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ). 10. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet,
dass mehrere zu katapultierende biologische Objekte (64) ausgewählt und die einzelnen Positionen (66) der ausge­ wählten biologischen Objekte (64) innerhalb der biologi­ schen Masse gespeichert werden, und
dass die biologische Masse rechnergestützt entsprechend der einzelnen gespeicherten Positionen gegenüber dem La­ serstrahl ausgerichtet und mit dem Laserstrahl bestrahlt wird, um die an den gespeicherten Positionen befindlichen biologischen Objekte (64) nacheinander von dem Träger (3) zu der Auffangvorrichtung (2) zu katapultieren.10. The method according to claim 9, characterized in
that several biological objects ( 64 ) to be catapulted are selected and the individual positions ( 66 ) of the selected biological objects ( 64 ) are stored within the biological mass, and
that the biological mass is computer-aided aligned with the laser beam in accordance with the individual stored positions and is irradiated with the laser beam in order to catapult the biological objects ( 64 ) located in the stored positions one after the other from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ). 11. Vorrichtung zur Gewinnung eines biologischen Ob­ jekts aus einer biologischen Masse,
mit einem Träger (3) zur Aufnahme der biologischen Masse,
mit einer Laserlichtquelle (4) zur Erzeugung eines Laser­ strahls, mit dem die biologische Masse zu bestrahlen ist, und
mit einer Auffangvorrichtung (2) zum Auffangen eines aus der biologischen Masse herauskatapultierten biologischen Objekts (64),
dadurch gekennzeichnet,
dass Einstellmittel (7, 11, 12) vorgesehen sind, um den von der Laserlichtquelle (4) erzeugten Laserstrahl derart einzustellen, dass bei Bestrahlung eines bestimmten biolo­ gischen Objekts (64) der biologischen Masse mit dem Laser­ strahl dieses biologische Objekt (64) infolge dieser einen Bestrahlung sowohl aus der biologischen Masse herausgelöst als auch von dem Träger (3) zu der Auffangvorrichtung (2) katapultiert wird.11. Device for obtaining a biological object from a biological mass,
with a carrier ( 3 ) for receiving the biological mass,
with a laser light source ( 4 ) for generating a laser beam with which the biological mass is to be irradiated, and
with a collecting device ( 2 ) for collecting a biological object ( 64 ) catapulted out of the biological mass,
characterized,
that adjusting means ( 7 , 11 , 12 ) are provided in order to adjust the laser beam generated by the laser light source ( 4 ) in such a way that when a certain biological object ( 64 ) is irradiated, the biological mass with the laser beam results in this biological object ( 64 ) this one radiation is both released from the biological mass and catapulted from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ). 12. Vorrichtung nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, dass die Vorrichtung zur Durchführung des Verfahrens nach einem der Ansprüche 1-10 ausgestaltet ist.12. The device according to claim 11, characterized,  that the device for performing the method after one of claims 1-10 is configured. 13. Vorrichtung nach Anspruch 11 oder 12, dadurch gekennzeichnet, dass die Einstellmittel Mittel zum Aktivieren der Laser­ lichtquelle (4) zur Erzeugung eines Laserstrahls in Form eines Laserschusses umfassen, um das gewünschte biologi­ sche Objekt (64) von dem Träger (3) zu der Auffangvorrich­ tung (2) zu katapultieren.13. The apparatus of claim 11 or 12, characterized in that the setting means comprise means for activating the laser light source ( 4 ) for generating a laser beam in the form of a laser shot to the desired biological object ( 64 ) from the carrier ( 3 ) the Auffangvorrich device ( 2 ) to catapult. 14. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 11-13, dadurch gekennzeichnet, dass die Einstellmittel Mittel (12) zur Einstellung der Laserenergie des von der Laserlichtquelle (4) erzeugten Laserstrahls umfassen.14. Device according to one of claims 11-13, characterized in that the setting means comprise means ( 12 ) for setting the laser energy of the laser beam generated by the laser light source ( 4 ). 15. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 11-14, dadurch gekennzeichnet, dass die Einstellmittel Mittel (11) zur Verstellung der Fokussierung des Laserstrahls in Bezug auf die Ebene der auf dem Träger (3) befindlichen biologischen Masse umfas­ sen.15. Device according to one of claims 11-14, characterized in that the adjusting means comprise means ( 11 ) for adjusting the focusing of the laser beam in relation to the plane of the biological mass located on the carrier ( 3 ). 16. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 13-15, dadurch gekennzeichnet, dass die Mittel zur Aktivierung der Laserlichtquelle (4) die Mittel (12) zur Einstellung der Laserenergie und/oder die Mittel (11) zur Fokussierung des Laserstrahls rechner­ gestützt angesteuert sind.16. The device according to any one of claims 13-15, characterized in that the means for activating the laser light source ( 4 ), the means ( 12 ) for setting the laser energy and / or the means ( 11 ) for focusing the laser beam are controlled by a computer. 17. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 11-16, dadurch gekennzeichnet,
dass die Vorrichtung von einem Computersystem (7) gesteu­ ert ist,
dass das Computersystem (7) Auswahlmittel zur Auswahl min­ destens eines aus der biologischen Masse herauszukatapul­ tierenden biologischen Objekts (64) umfasst,
dass das Computersystem (7) Steuermittel zur automatischen Ansteuerung der Laserlichtquelle (4) umfasst, um das aus­ gewählte biologische Objekt (64) mit dem Laserstrahl zu bestrahlen und somit von dem Träger (3) zu der Auffangvor­ richtung (2) zu katapultieren.17. Device according to one of claims 11-16, characterized in that
that the device is controlled by a computer system ( 7 ),
that the computer system ( 7 ) comprises selection means for selecting at least one biological object ( 64 ) to be catapulted out of the biological mass,
that the computer system ( 7 ) comprises control means for automatically controlling the laser light source ( 4 ) in order to irradiate the selected biological object ( 64 ) with the laser beam and thus catapult it from the carrier ( 3 ) to the collecting device ( 2 ). 18. Vorrichtung nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet,
dass das Computersystem (7) Speichermittel zum Speichern der Positionen (66) von mehreren über die Auswahlmittel ausgewählten biologischen Objekten (64), die aus der bio­ logischen Masse herauskatapultiert werden sollen, umfasst, und
dass die Steuermittel des Computersystems (7) derart aus­ gestaltet sind, dass sie entsprechend den gespeicherten Positionen der ausgewählten biologischen Objekte (64) Ver­ stellmittel zur Herbeiführung einer entsprechenden Rela­ tivbewegung zwischen dem Träger (3) und dem Laserstrahl ansteuern, um die den ausgewählten biologischen Objekten (64) entsprechenden Positionen (66) der auf dem Träger (3) befindlichen biologischen Masse gegenüber dem Laserstrahl auszurichten und anschließend durch automatische Aktivie­ rung der Laserlichtquelle (4) das jeweils gegenüber dem Laserstrahl ausgerichtete biologische Objekt (64) von dem Träger (3) zu der Auffangvorrichtung (2) zu katapultieren.18. The apparatus according to claim 17, characterized in
that the computer system ( 7 ) includes storage means for storing the positions ( 66 ) of a plurality of biological objects ( 64 ) selected via the selection means, which are to be catapulted out of the biological mass, and
that the control means of the computer system ( 7 ) are designed in such a way that they actuate adjusting means in accordance with the stored positions of the selected biological objects ( 64 ) to bring about a corresponding relative movement between the carrier ( 3 ) and the laser beam in order to control the selected biological ones Align objects ( 64 ) corresponding positions ( 66 ) of the biological mass on the carrier ( 3 ) with respect to the laser beam and then by automatic activation of the laser light source ( 4 ) the respective biological object ( 64 ) aligned with the laser beam from the carrier ( 3 ) to catapult the catcher ( 2 ).