CZ9904238A3 - Kyanoguanidiny jako inhibitory buněčné proliferace - Google Patents

Abstract

Řešení se týká dosud neznámých sloučenin charakterizovaných vzorcem I, nebo jejich tautomemích forem, přičemž připojení pyridinového kruhu bývá v poloze 3 nebo 4, a v kterých R představuje jeden nebo více , substituentů, které mohou být stejné nebo různé a jsou vybrané ze skupiny obsahující vodík, halogen, trifluorometyl, * , Ci.4alkyl, alkoxy nebo alkyloxykarbonyl, nitro, amino nebo ; kyano substituenty, a X představuje přímou vazbu, substituovaný Cň^cykloalkylen, divalentní heterocyklický kruh (sjedním nebo více atomy dusíku, kyslíku nebo síry), arylen, kyslík, jeden nebo dva atomy síry nebo amino skupiny, které mohou být substituované vodíkem nebo C].4alkylem; a Qi a Q2 představuje C™ divalentní uhlovodíkový radikál, který může být alifatický, větveným cyklický, nasycený nebo nenasycený; a jejich farmaceuticky přijatelné netoxické sole a N-oxidy. Tyto sloučeniny mají význam v humánní i ; '. veterinární lékařské praxi při onemocněních charakterizovaných nežádoucí buněčnou proliferací

Description

Kyanoguanidiny jako inhibitory buněčné proliferace • · ·· ·0

4444

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká dosud neznámé třídy sloučenin, která vykazuje silnou inhibiční aktivitu na nežádoucí buněčnou proliferaci, například buněk kůže a nádorových buněk. Předkládaný vynález se dále týká farmaceutických preparátů obsahujících tyto sloučeniny, dávkovačích jednotek těchto preparátů a jejich použití v léčbě a profylaxi nemocí charakterizovaných abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferaci, jako jsou například psoriáza a nádorová onemocnění.

Popis vynálezu

Sloučeniny předkládaného vynálezu jsou reprezentovány obecným

nebo jejich tauťomerními formami, přičemž připojení pyridinového kruhu bývá v poloze 3 nebo 4, a v kterých R představuje jeden nebo více substituentů, které mohou být stejné nebo různé a jsou vybrané ze skupiny obsahující vodík, halogen, trifluorometyl, Ci-₄alkyl, alkoxy nebo alkyloxykarbonyl, nitro, amino, nebo kyano substituenty, a X představuje přímou vazbu, substituovaný C₃-₇cykloalkylen, divalentní heterocyklický kruh (s jedním nebo více atomy dusíku, kyslíku nebo síry), arylen, kyslík, jeden nebo dva atomy síry nebo amino skupiny, které mohou být substituované vodíkem nebo Ci-₄ alkylem; a Qi a Q₂ představuje Ci-Ci₀ divalentní uhlovodíkový radikál, který může být alifatický, větvený, cyklický, nasycený nebo nenasycený.

ÍII

< • ·, • 2 .2.

• · 9 9 • 9 ·· • · •

· · · 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9

Pokud předkládané sloučeniny obsahují jeden nebo více asymetrických uhlíkových atomů, mohou tvořit optické izomery nebo diastereomery. Předkládaný vynález zahrnuje také takovéto izomery i jejich směsi.

Předkládané soli sloučenin charakterizovaných vzorcem I mohou být tvořeny farmaceuticky přijatelnými anorganickými nebo organickými kyselinami, jako jsou například kyselina chlorovodíková, bromovodíková a jodovodíková, kyselina fosforečná, sírová, dusičná, 4-toluensulfonová, metansulfonová, mravenčí, octová, propionová, citrónová, vinná, jantarová, benzoová a maleinová.

Dokonce i v případě, že předkládané sloučeniny se po perorálním podání dobře absorbují, může být někdy výhodné připravit vhodné bioreverziblní deriváty sloučenin předkládaného vynálezu, t j . připravit takzvané pro-léky, nejlépe deriváty, jejichž fyzikálně-chemické vlastnosti vedou ke zlepšené rozpustnosti při fyziologickém pH, a/nebo ke zlepšené absorpci, a/nebo zlepšené bio-dostupnosti dané sloučeniny.

Takové deriváty jsou například pyridyl N-oxid deriváty sloučenin předkládaného vynálezu, které jsou připravovány oxidací pyridyl N vhodnou oxidační látkou, například kyselinou 3-chloroperbenzoovou v inertním rozpouštědle, například dichlormetanu.

Ke zlepšení fyzikálně-chemických vlastností a/nebo rozpustnosti daných sloučenin mohou být použity také jiné vhodné metody.

N-alkyl-N'-kyano-N-pyridylguanidiny, popsané v patentu United Kingdom Patent No. 1489879, jsou silnými aktivátory draslíkových kanálů s vyjádřeným prekapilárním vazodilatačním účinkem, snižujícím tak celkovou periferní rezistenci u zvířat i člověka. Tímto jsou tyto látky užitečné jako

Tímto

00··

00 :0 0 ·0 > ^r« 0 ·

,. · >>-0 0 0 • 00 000 0 0 · ♦ · antihypertenzíva. Jak je uvedeno v mezinárodním patentu International Patent No. PCT/DK93/00291, datum registrace 13. září 1993, Publication No. WO 94/06770, vedlo zavedení aryloxyobsahujících radikálů do alifatických skupin výše citovaného U.K. patentu ke vzniku sloučenin vykazujících specifičtější farmakologické účinky na izolované tkáně a buňky s žádnými nebo zanedbatelnými účinky na ⁸⁶Rb-eflux z draslíkových kanálů, ve srovnání se známými účinky sloučenin definovaných ve výše zmíněném U.K. patentu.

Sloučeniny předkládaného vynálezu inhibují proliferaci různých nádorových buněčných linií v kulturách při nižších koncentracích než při použití známých sloučenin (srovnej s tabulkou 1 uvedenou níže), což z těchto sloučenin činí potencionálně užitečná antineoplastická chemoterapeutika.

Inhibice nádorové proliferace byla studována na různých typech lidských nádorových buněčných linií. Tyto zkoumané buněčné linie' zahrnovaly buněčné linie malobuněčného plicního karcinomu (NYH), nemalobuněčného plicního karcinomu (NCI-H460). a karcinomu prsu (MCF-7) za použití následujícího obecného postupu:

Buňky byly kultivovány in vitro po dobu 24 hodin za přítomnosti sloučenin předkládaného vynálezu. DNA syntéza byla měřena pomocí inkorporace [3H] thymidinu a byl vypočítáván medián inhibičních koncentrací sloučenin (IC₅₀) .

0» :0 · 0 0 • 0 » 0 •00 000

Tabulka 1

Inhibice proliferace nádorových buněk in vitro v buněčných liniích karcinomu prsu (MCF-7), lidského malobuněčného karcinomu (NYH) a lidského nemalobuněčného karcinomu (NCI-H460) pomocí sloučenin následujících příkladů předkládaného vynálezu.

Sloučenina z	MCF-7; IC50(nm)	NYH; IC50(nm) ‘	NCI-H460; IC50(nm)
Příklad č.6	26	4,4	65
Příklad č.8	6, 6	0, 91	65
Příklad č.14	13	0,5	69
Předchozí studie A	920	380	>1000
Předchozí studie B	250	45	67

A: N-kyano-N'-(4-fenoxybutyl) -N-4-pyridylguanidin, v PCT/ PK93/00291, příklad 14.

B: N-kyano-N'-(5-fenoxypentyl) -N-4-pyridylguanidin, v PCT/ DK93/00291, příklad 18.

Tyto výsledky ukazují, že sloučeniny předkládaného vynálezu jsou schopné inhibovat proliferaci nádorových buněk in vitro ve stejných nebo nižších koncentracích než při použití sloučenin A a B z PCT/DK93/00291.

Sloučeniny předkládaného vynálezu jsou dobře tolerovány, nejsou toxické a vykazují popsané prospěšné aktivity s žádným nebo minimálním účinkem na systémový tlak krve. Tyto sloučeniny mohou být obecně podány perorálně, intravenózně, intraperitoneálně, intranazálně nebo transdermálně.

Předkládaný vynález se také týká metod přípravy požadovaných sloučenin charakterizovaných obecným vzorcem I. Sloučeniny charakterizované vzorcem I mohou být snadno připraveny standardními postupy detailně známými v oboru. Na následujícím reakčním schématu jsou znázorněny použitelné postupy.

·· ·· ,· · · « • · · · ··· ··<

• · ·« ··

NH S.CH₃ + NHz-Qr-X^-NHz Ν ΠΙ

II

^NHx.NH-Q₁-X-Q₂_NH NH

Τ ϊ' ,s _s

IV

^RSř>X^NH\/^{SH +} NH2-Q,-X-Q₂-nh₂ -tí ^nM> y

III

NH NH-O^X-q^nh _ΝΗ __ r

Υ ... Υ ο

Ν.

s==N

R, X/ Qi a Q₂ viz výše

a) DMAP, Et₃N, Pyridin, 95°C, 6 h (Obecný postup 1).

b) DCCD, NH₂, Et₃N, DMF, 4 dny (Obecný postup 2) .

c) Díizopropyletylenamin, DCCD, DMF, 2 dny (Obecný postup 3)

Předkládané sloučeniny jsou zamýšleny k použití ve farmaceutických preparátech užitečných v léčbě výše zmíněných onemocnění.

Požadované množství sloučeniny charakterizované vzorcem (I) (tímto považované za aktivní složku) pro terapeutický efekt se samozřejmě liší v závislosti na specifické sloučenině, způsobu podání a typu savce, který je léčen. Vhodná dávka sloučeniny charakterizované vzorcem (I) pro systémovou léčbu je 0,1 až 400 ···· · 99 99 99 »9 9· 9 *9« mg na kilogram tělesné váhy, nejlépe 1,0 až 100 na kilogram tělesné váhy, například .5 až 20 mg/kg; podáno jedenkrát či vícekrát denně.

Denní dávka (pro dospělé) může dosahovat 1 mg až 10000 mg, nejlépe 70-5000 mg, což ve veterinární praxi odpovídá dávkám od 0,1 až 400 mg/kg tělesné váhy.

Ačkoli je možné podávat aktivní složku samotnou jako nezpracovanou chemickou sloučeninu, je doporučováno podávat ji ve formě farmaceutického preparátu, který může být tvořen aktivní složkou ve koncentraci od 0,1% do 99% jeho váhy. Dávkovači jednotky preparátu obsahují mezi 0,5 mg a 1 g aktivní látky. Pro topické podání tvoří aktivní složka nejlépe od 1% do 20% váhy preparátu, ale aktivní složka může tvořit až 50% w/w. Preparáty vhodné pro nazální nebo bukální podání mohou obsahovat 0,1% až 20% w/w, například 2% w/w, aktivní složky.

Termínem „dávkovači ' jednotka,, je míněna jednotka, tj . jedna dávka, kterou je možno podat pacientovi, a s kterou může být jednoduše manipulováno při zachováni fyzikální a chemické stability jednotkové dávky tvořené buď aktivním materiálem jako takovým, nebo jeho směsí . s pevnými nebo tekutými farmaceutickými diluenty nebo nosiči.

Preparáty veterinární i pro použití v humánní medicíně, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, jsou tvořeny aktivní složkou s farmaceuticky přijatelným nosičem a případně dalšími složkami. Nosič (e) musí být „přijatelné,, ve smyslu kompatibility s ostatními složkami preparátů a nesmí mít škodlivé účinky pro příjemce takového preparátu.

Preparáty zahrnují formy vhodné pro perorální, rektální, parenterální (včetně subkutánního, intramuskulárního, intravenózního a intraperitoneálního) podání.

·· ·* 99

9 4 9 9 4 4

9 9 9 9 9 • · · 994444

9 4 4

944 9944 99 99

4499

999

Preparáty mohou být snadno prezentovány ve formě dávkovačích jednotek a mohou být připraveny jakoukoli z metod známých ve farmacii. Všechny metody zahrnují krok navázání aktivní složky na nosič, který tvoří jednu nebo více složek. Obecně mohou být preparáty jednotně připraveny přidáním aktivní složky k tekutému nosiči, nebo rozdělit pevný nosič, a nebo použít obě metody, a poté v případě nutnosti upravit produkt do požadovaného preparátu.

Preparáty předkládaného vynálezu, které jsou vhodné k perorálnímu podání, mohou být ve formě oddělených jednotek jako jsou kapsle, sáčky, tablety nebo pastilky, každá obsahujíc předem určené množství aktivní složky; ve formě prášku nebo granul, ve formě roztoku nebo suspenze ve vodné nebo nevodné kapalině, nebo ve formě olejové emulze ve vodě, nebo vodné emulze v oleji. Aktivní složka může být také podána ve formě bolu, lektvaru, nebo pasty.

Preparáty·určené pro rektální podání mohou být ve formě čípků obsahující aktivní složku a nosič, jako je například kakaové máslo, nebo mohou být ve formě náplavu.

Preparáty vhodné k parenterálnímu podání jsou tvořeny sterilním olejovým nebo vodným preparátem s aktivní složkou, která je nejlépe izotonická s krví příjemce preparátu.

Navíc k výše zmíněným složkám mohou preparáty tohoto vynálezu obsahovat jednu nebo více dalších složek, jako jsou například diluenty, pufry, dochucující látky, vazebné látky, povrchově aktivní látky, zpevňující látky, lubrikanty, konzervační látky, například metylhydroxybenzoát (včetně antioxidačních látek), emulzifikující látky a podobně.

Preparáty mohou dále obsahovat další terapeuticky aktivní sloučeniny, které jsou obvykle aplikovány v léčbě výše zmíněných patologických stavů, například antineoplastické a ···· · ·· ·* ·· «· · a· a · · · t · a aaa · a · · · · • · · · β · ··· ··· • ® · · · · ··· ··· aaa aaaa ·· ·· látky, které mohou vést k synergickým účinkům na nádorové buňky.

Příklady provedení vynálezu

Předkládaný vynález bude nyní popsán následujícími obecnými postupy a příklady:

Příklady sloučenin I jsou zobrazeny v Tabulce 2.

Tabulka 2

Sloučenina č.	Příklad č.	R	3- nebo 4- pyridyl	Qi	q2	X
101	1	H	4	1-CH2	4-CH2	Fenylen
102	2	H	4	(CHZ) 5	(CH2) 4	-
103	3	H	3	(CH2)3	(CH2)4	-
104	4	H	3	(CH2) 2	(CH2)2	s-s
105	5	H	3	(CH2)3	(CH2) 3	-
106	6	H	3	(CH2)6	(CH2) 6	-
107	7	H	3	(ch2)4	(CH2) 4	-
108	8	H	4	(CH2)5	(CH2) 5	_ -
109	9	H	4	(CH2)4	(ch2)4	-
110	10	H	4	i-ch2	4-CH2	cyklohexylen
111	11	H	4	(CH2)3	(CH2) 3	-
112	12	H	3	(CH2)2	ch2	-
113	13	H	3	ch2	ch2	-
114	14	H	4	(CH2) 6	(CH2)6	-
115	15	H	3	(CH2) 5	(CH2)s	-
116	16	2,6-Cl2	4	(CH2)5	(CH2)5	-
117	17	6-OCH3	3	(CH2)5	(CH2) 5	—

Všechny body tání jsou neopraveny. Pro ^XH NMR (nukleárně magnetická rezonanční) spektra (300 MHz) jsou citovány hodnoty chemického posunu (δ) pro roztoky hexadeuterodimetylsulfoxidu relativně k vnitřnímu tetrametylsilanu (δ 0,00)(pokud není jinak specifikováno). Je uváděna hodnota pro multiplet (m), buďto definovaná (dublet (d) , triplet (t), kvartet (q) , nebo nedefinovaná v přibližném středovém bodě (pokud není uváděno rozpětí)(s singlet, b rozmezí). Jsou používány následující

zkratky a vzorce: DCCD (Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimid), NH₂CN (kyanamid), ET₃N (trietylamin), DMF (dimetylformamid), DMAP (dimetylaminopyridin) , MeOH (metanol) , CH₂C1₂ (metylenchlorid) a DMSO-d₆ (hexadeuterodimetylsulfoxid).

Obecný postup 1: Spojení sloučenin charakterizovaných obecným vzorcem II se sloučeninami charakterizovanými obecným vzorcem

III vedoucí ke vzniku sloučenin charakterizovaných obecným vzorcem I.

Sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem II (6 mmol), sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem III (3 mmol) a trietylamin (6 mmol) byly míchány při pokojové teplotě. Poté byl přidán 4-dimetylaminopyridin (DMAP, 10 mg) a roztok byl míchán při teplotě 95°C po dobu 6 hodin.

Ke směsi byl přidán éter ,(10 ml) a výsledná suspenze byla zfiltrována a promyta éterem, což vedlo ke vzniku krystalického produktu charakterizovaného vzorcem I.

Obecný postup 2: Konverze sloučenin charakterizovaných obecným vzorcem IV na sloučeniny charakterizované obecným vzorcem I,

Ke sloučenině charakterizované obecným vzorcem IV (4 mmol) v dimetylformamidu (3 ml) byl přidán dicyklohexylkarbodiimid (12 mmol), kyanamid (12 mmol) a trietylamin (0,4 ml). Reakční směs byla inkubována při pokojové teplotě po dobu 4 dnů a poté byla odpařena ve vakuu (0,5 mm Hg).

Reziduum bylo rozetřeno 3 porcemi petroléteru. Po stočení byla pevná složka promíchána s acetonem (15 ml) a suspenze byla zfiltrována a promyta acetonem, což vedlo ke vzniku produktu charakterizovaného obecným vzorcem I a Ν,Ν'-dicyklohexylurey. Extrakce ředěnou kyselinou chlorovodíkovou (1 A, 16 ml) a reprecipitace filtrátu naředěným hydroxidem sodným vedla ke • ·

vzniku hrubého produktu charakterizovaného obecným vzorcem I, který byl krystalizován z etanolu.

Obecný postup 3: Spojeni sloučenin charakterizovaných obecným vzorcem V se sloučeninami charakterizovanými obecným vzorcem III vedoucí ke vzniku sloučenin charakterizovaných obecným vzorcem I.

Sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem V (15 mmol), sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem III (7,5 mmol) a diizopropyletylamin (15 mmol) v dimetylformamidu (10 ml) byly míchány při pokojové teplotě. K výslednému roztoku byl přidán dicyklohexylkarbodiimid (16,5 mmol). Vytvořená suspenze byla míchána po dobu 2 dnů při pokojové teplotě a poté byla odpařena ve vakuu (0,5 mm Hg). Reziduum bylo rozetřeno 3 porcemi pétroléteru (40 ml). Po stočení byla pevná složka promíchána s vodou (100 ml) obsahující kyselinu chlorovodíkovou (4 A, 6 ml). Po filtraci bylo pH vodného filtrátu upraveno na ' 7, 5 pomocí 2N hydroxidu sodného. Precipitát byl promíchán při teplotě 0°C a sbírán filtrací a promytím vodou. Rekrystalizace z vodného acetonu ' vedla ke . vzniku čisté sloučeniny charakterizované obecným vzorcem I.

Příklad 1:

α,α'-bis (Ν'-kyano-Ν'4-pyridylguanidino)4-xylen (Sloučenina

101)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-4-pyridylizothiourea. Výchozí sloučenina III: 4-xylendiamin.

Purifikace: K reakční směsi byl přidán aceton. Filtrace a promytí acetonem vedlo ke vzniku čistého krystalického produktu.

²Η NMR (DMSO-de) :δ 9,38 (bs, 2H) , 8,37 (d, 4H) , 8,37 (bs, 2H) ,

7,32 (s, 4H) , 7,19 (d, 4H) , 4,47 (bs, 4H) .

Příklad 2:

1,9-bis (Ν'-kyano-Ν''- 4-pyridylguanidino)nonan (Sloučenina 102)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-4-pyridylizothiourea. Výchozí sloučenina III: 1,9-diaminononan.

Purifikace: Rekrystalizace z vodného acetonu.

^TH NMR (DMSO-de) :δ 9,35 (bs, 2H) , 8,38 (m, 4H) , 7,82 (bs, 2H) ,

7,20 (bd, 4H) , 3,26 (bt, 4H) , 1,52 (m, 4H) , 1,28 (bs, 10H) .

Příklad 3:

1,7-bis (W-kyano-N- 4-pyridylguanidino)heptan (Sloučenina

103)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-W'-3-pyridylizothiourea. Výchozí sloučenina III: 1,7-diaminoheptan.

Purifikace: Produkt byl suspendován v acetonu, zfiltrován a promyt acetonem.

^XH NMR (DMSO-de) :δ 9,06 (bs, 2H) , 8,45 (d, 4H) , 8,33 (dd, 2H) , 7,66 (m, 2H), 7,43 (bt, 2H) , 7,37 (dd, 2H) , 3,21 (q, 4H) , 1,51 (m, 4H), 1,29 (bs, 6H).

Příklad 4:

2,2'-bis (AI-kyano-N''- 3-pyridylguanidino) dietylsulfoxid (Sloučenina 104)

Obecný postup 1. Byly použity 4 ekvivalenty trietylaminu. Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-3-pyridylizothiourea.

• ·

Výchozí sloučenina III: bis (2-aminoetyl)disulf id, dihydrochlorid.

Purifikace: Rekrystalizace z vodného acetonu.

'H NMR (DMSO-ds) :δ 9,25 (bs, 2H) , 8,48 (d, 2H) , 8,36 (dd, 2H) , 7,67 (m, 2H) , 7,54 (bt, 2H) , 7,39 (dd, 2H) , 3,52 (q, 4Ή) , 2,92 (t, 4H).

Příklad 5:

1,6-bis (N'-kyano-N - 3-pyridylguanidino) hexan (Sloučenina

105) Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-3-pyridylizothiourea. Výchozí sloučenina III: 1,6-diaminohexan.

Purifikace:	Krystalický produkt	byl
zfiltrován a	promyt acetonem.
*Η NMR (DMSO·	-d6) :δ 8,98 (bs,	2H) ,	8,46
7,66 (m, 2H)	, 7,44 (bs, 2H) ,	7,37	(dd,

(m, 4H) , 1,30 (m /4H) .

suspendován v acetonu, (d, 2H), 8,33 (dd, 2H),

2H) , 3,22 (m, 4H), 1,52

Příklad 6:

1,12-bis (Ν'-kyano-N- 3-pyridylguanidino) dodekan (Sloučenina

106)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-3-pyridylizothiourea. Výchozí sloučenina III: 1,12-diaminododekan.

Purifikace: Rekrystalizace z vodného acetonu.

^TH NMR (DMSO-ds) :δ 9,06 (bs, 2H) , 8,45 (d, 2H) , 8,33 (m, 2H) , 7,66 (m, 2H), 7,43 (bs, 2H) , 7,37 (dd, 2H) , 3,21 (bs, 4H) , 1,50 (m, 4H) , 1,26 (bs 4H) .

• ·

Příklad 7: '

1,8-bis (N'~kyano-N- 3-pyridylguanidino) oktan (Sloučenina

107)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-3-pyridylizothiourea. Výchozí sloučenina III: 1,8-diaminooktan.

Purifikace: Rekrystalizace z vodného acetonu.

³H NMR (DMSO-de) :δ 9,06 (bs, 2H) , 8,45 (d, 2H) , 8,33 (m, 2H) , 7,66 (m, 2H) , 7,41 (bt, 2H) , 7,36 (dd, 2H) , 3,21 (q, 4H) , 1,51 (m, 4H), 1,29 (bs 8H).

Příklad 8:

1,10-bis (N-kyano-N'3-pyridylguanidino) děkan (Sloučenina

108)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-3-pyridylizothiourea. Výchozí sloučenina III: 1,8-diaminodekan.

Purifikace: Rekrystalizace z vodného acetonu.

³H NMR (DMSO-d₆) :δ ~10 (bs, 2H) , 8,42 (d, 4H) , 8,02 (bt, 2H) , 7,29 (bd, 4H) , 3,29 (q, 4H) , 1,52 (m, 4H) , 1,27 (bs, 12H) .

Příklad 9:

1,8-bis (Ν'-kyano-N- 3-pyridylguanidino) oktan (Sloučenina

109)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-3-pyridylizothiourea. Výchozí sloučenina III: 1,8-diaminooktan.

Purifikace: Rekrystalizace z vodného metanolu.

NMR (DMSO-d₆) :δ 9,34 (bs, 2H) , 8,38 (m, 4H) , 7,82 (bs, 2H) , 7,20 (bd, 4H), 3,26 (t, 4H) , 1,52 (m, 4H) , 1,29 (bs, 8H) .

• · • · ·

Přiklad 10:

1, 4-bis_(Ν'-kyano-N-_3-pyridylguanidino)_cyklohexan (Sloučenina 110)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N’-3-pyridylizothiourea. Výchozí sloučenina III: 1,4-bis(aminometyl)cyklohexan.

Purifikace: Krystalický produkt zfiltrován a promyt metanolem.	byl	suspendován v	metanolu,
TH NMR (DMSO-ds) :δ 9,00	(bs, 2H),	8,38	(m, 2H), 7,81	(bs, 2H),
7, 19 (m, 4H) , 3, 15 (d,	4H) , 1,76	(m,	4H), 1,60-1,30	(m, 2H) ,

0,93 (m, 4H) .

Příklad 11:

1,6-bis (N-kyano-N- 3-pyridylguanidino) hexan (Sloučenina

111) ...... .............

Obecný postup 2.

Výchozí sloučenina IV: 1,6-bis (Ν'-4-pyridylthioureido)hexan. Purifikace: Chromatografie (silica gel, elueht 0-22% MeOH v CH₂C1₂ s následnou krystalizaci z éteru/acetonu.

^!H NMR (DMSO-ds) :δ 9,39 (bs, 2H) , 8,38 (bd, 4H) , 7,84 (bs, 2H) ,

7,21 (m, 4H) , 3,27 (m, 4H) , 1,53 (m, 4H) , 1,32 (m, 4H) .

Příklad 12:

1,3-bis (N-kyano-N - 3-pyridylguanidino) propan (Sloučenina 112)

Obecný postup 3.

Výchozí sloučenina V: N-kyano-N'-3-pyridylthiourea. Výchozí sloučenina III: 1,3-diaminopropan. Purifikace: Obecný postup.

• · · · · · 0

M.p. (bod tání) 148-148,5°C ^XH NMR (DMSO-ds) :δ 9,14 (bs, 2H) , 8,55 (d, 2H) , 8,42 (dd, 2H) ,

7,80 (m, 2H), 7,60-7,30 (m, 4H), 3,46 (t, 4H), 1,78 (m, 2H).

Příklad 13:

1,2-bis (N-kyano-N- 3-pyridylguanidino) etan (Sloučenina 113)

Obecný postup 3.

Výchozí sloučenina V: N-kyano-N'-3-pyridylthiourea.

Výchozí sloučenina III: 1,2-diaminoetan.

Purifikace: Obecný postup.

M.p. (bod tání) 146,5-147,5°C /H NMR (DMSO-ds) :δ 9,16' (bs, 2H) , 8,48 (d, 2H) , 8,38 (dd, 2H) ,

7,69 (bd, 2H), 7,43 (bs, 2H), 7,41 (dd, 2H), 3,38 (bs, 4H).

Příklad 14:

1,12-bis (N'-kyano-N~ 3-pyridylguanidino) dodekan (Sloučenina

114)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-4-pyridylizothiourea. Výchozí sloučenina III: 1,12-diaminododekan.

Purifikace: Chromatografie (silica gel, eluent 0-20% MeOH v CH₂C1₂ s následnou krystalizací z metanolu/éteru.

^XH NMR (DMSO-ds) :δ 9,35 (bs, 2H) , 8,38 (m, 4H) , 7,83 (bt, 2H) ,

7,21 (bs, 4H) , 3,26 (cg, 4H) , 1,51 (m, 4H) , 1,25 (bs, 16H) .

Příklad 15:

1,10-bis (N'-kyano-N~ 3-pyridylguanidino) děkan (Sloučenina

115)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-3-pyridylizothiourea.

Výchozí sloučenina III: 1,10-diaminodekan.

Purifikace: Rekrystalizace z vodného acetonu.

NMR (DMSO-d₆) :δ 9,06 (bs, 2H) , 8,45 (d, 2H) , 8,33 (dd, 2H) ,

7,66 (m, 2H), 7,37 (m, 2H) , 3,21 (q, 4H) , 1,50 (m, 4H) , 1,27 (m,. 12H) .

Příklad 16:

1,10-bis (Ν'-kyano-M'(2,6-dichloro-4-pyridyl)guanidino) děkan (Sloučenina 116)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-(2, 6-dichloro-4pyridyl)izothiourea.

Výchozí sloučenina III: 1,10-diaminodekan. _

Purifikace: Rekrystalizace z vodného acetonu a aceton/éteru.

'H NMR (DMSO-d₆) :δ 9,82 (bs, 2H), 8,13 (bs, 2H) , 7,31 (bs, 4H) , 3,27 (m, 4H), 1,51 (m, 4H) , 1,27 (m, 12H) .

Příklad 17;

1,10-bis (N-kyano-N - (2-metoxy-5-pyridyl)guanidino) děkan (Sloučenina 117)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: S-metyl N-kyano-N'-(2-metoxy-5pyridyl)izothiourea.

Výchozí sloučenina III: 1,10-diaminodekan.

Purifikace: Chromatografie v CH2C12) .	(eluent 1%	NH3(aq)	a 0-	-30%	MeOH
4H NMR (DMSO-ds) :δ 8,80 (bs,	2H), 8,00	(d, 2H),	7,55	(dd,	2H) ,
7,06 (bt, 2H), 6,82 (d, 2H)	, 3,84 (s,	6H), 3,14	(q.	4H) ,	1,46

(m, 4H), (m, 12H).

• ·

Příklad 18:

Kapsle kapsle obsahuje:

1,10-bis	(N'-kyano-N-4-pyridylguanidino)	děkan (aktivní
sloučenina)		100 mg
Polyetylén	glykol	962 mg
Želatinová	kapsle č. 00
Želatina		122 mg

Příklad 19:

Tablety

Výroba 10000 tablet

I	1, 10-bis (N'-kyano-N-4-pyridylguanidino) sloučenina) Crosscarmellose sodium	děkan 10,000 0,300	(aktivní kg kg
II	Hydroxypropylmetyl celulóza, typ s nízkou	viskozitou
		0,200	kg
	Sorbimacrogol oleát	0, 010	kg
	Purifikovaná voda	q.s.
III	Crosscarmellose sodium	0,200	kg
	Koloidní bezvodá silica	0, 050	kg
	Magnesium stearát	0,050	kg
Směs	I je dokonale promíchána ve vysoce	účinném	mixéru,
namočena do směsi II a granulována do vytvoření vlhké hmoty.
Vlhký granulát je vysoušen v sušičce při	vstupní	teplotě
vzduchu 60°C až do dosažení aktivity granulátu	ve vodě	0,3-0,4
(= v	rovnováze se vzduchem o 30-40% R.H.).

Vysušený granulát je protlačen přes síto s velikostí otvorů 850 um.

Získaný granulát je nakonec smíšen se směsí III v kónickém mixéru. Hotový granulát je stlačen do tablet o hmotnosti 1071 mg a dostatečné tvrdosti.

Claims (8)

1,12-bis (N'-kyano-N- 4-metoxy-5-pyridylguanidino)dododekan;

.a jejich solemi a čistými ejianciomerními formami. _{__}_______ .

1,10-bis (W'-kyano-N- 4-metoxy-5-pyridylguanidino)děkan;

1, 12-bis (N'-kyano-N- 3-metoxy-5-pyridylguanidino)dodekan;

1. Sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem I nebo její tautomerní formy, přičemž připojení pyridinového kruhu bývá v poloze 3 nebo 4, a v kterých R představuje jeden nebo více substituentů, které mohou být stejné nebo různé a jsou vybrané ze skupiny obsahující vodík, halogen, trif luorometyl, Ci-₄alkyl, alkoxy nebo alkyloxykarbonyl, nitro, amino nebo kyano substituenty, a X představuje přímou vazbu, substituovaný C₃_₇ cykloalkylen, divalentní heterocyklický kruh (s jedním nebo více atomy dusíku, kyslíku nebo síry), arylen, kyslík, jeden nebo dva atomy síry nebo amino skupiny, které mohou být substituované vodíkem nebo Ci_₄alkylem; a Q_x a Q₂ představuje Ci-Cio divalentní uhlovodíkový radikál, který může být alifatický, větvený, cyklický, nasycený nebo nenasycený; a jejich farmaceuticky přijatelné netoxické sole a N-oxidy.

2. Sloučenina charakterizovaná vzorcem I patentového nároku 1, v které je pyridinový kruh připojen v poloze 4, a v kterém R představuje vodík a X představuje přímou vazbu, substituovaný C₃-₇ cykloalkylen, arylen, nebo jeden či dva atomy síry, a Qi a Q₂ představuje Ci-Cio divalentní uhlovodíkový radikál, který může být alifatický, větvený, cyklický, nasycený nebo nenasycený; a jejich farmaceuticky přijatelné netoxické sole a N-oxidy.

3. Sůl definovaná v patentovém nároku 1, kde sůl je vybrána ze skupiny obsahující sole vytvořené kyselinou chlorovodíkovou, bromovodíkovou a jodovodíkovou, kyselinou fosforečnou, »··· »

»·· ··· • · kyselinou sírovou, kyselinou dusičnou, kyselinou ptoluensulfonovou, kyselinou metansulfonovou, kyselinou mravenčí, kyselinou octovou, kyselinou propionovou, kyselinou citrónovou, kyselinou vinnou, a kyselinou maleinovou, a dále solemi lithia, sodíku, draslíku, hořčíku a vápníku, stejně tak jako amonnými solemi, Ci-₆ alkylaminy, Ci-₆ alkanoaminy, prokainem, cykloalkylaminy, benzylaminy a heterocyklickými aminy.

4. Sloučenina definovaná v patentovém nároku 1, která je vybrána ze skupiny tvořené sloučeninami:

5. Farmaceutický preparát obsahující sloučeninu definovanou v jakémkoli z patentových nároků 1-4, a to buď samotný, nebo dohromady s nezbytnými přídatnými látkami.

6. Metoda léčby pacientů potřebujících léčbu, která je charakterizována podáním účinného množství jedné nebo více sloučenin definovaných v jakémkoli z patentových nároků 1-5 řečeným pacientům, a pokud je to nezbytné společně nebo souběžně s jednou nebo více jinými terapeuticky účinnými látkami.

7. Metoda definovaná v patentovém nároku 6 pro léčbu a profylaxi nemocí charakterizovaných nežádoucí buněčnou proliferací, například buněk kůže a nádorových buněk.

8. Metoda přípravy sloučeniny charakterizované vzorcem I a definované v patentovém nároku 1, v které

c) sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem II • · β ·

II kde R je stejné, jako je uvedeno výše, je podrobena reakci se sloučeninou charakterizovanou obecným vzorcem III

NH₂-Qi-X-Q₂-NH₂

III kde Qi, Q₂ a X jsou stejné, jako je uvedeno výše, v přítomnosti trietylaminu nebo jiného terciárního aminu a 4dimetylaminopyridinu v pyridinu nebo inertním rozpouštědle při pokojové nebo vyšší teplotě; nebo

e) sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem II

NH NH-Ch-X-Ck-NH NH ,-< R > Y Y YYn

IV

Qi, Q₂ X a R jsou stejné, jako je uvedeno výše, je podrobena reakci s dicyklohexylkarbodiimidem a kyanamidem v přítomnosti trietylaminu nebo jiného terciárního aminu v acetonitrilu nebo jiném inertním solventu při pokojové nebo vyšší teplotě; nebo »· • · · ··· ··· • · ·· ··

g) sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem V kde Ř je stejné, jako je uvedeno výše, je, podrobena reakci se sloučeninou charakterizovanou obecným vzorcem III

NH2-Q1-X-Q2-NH2

III kde Qi, Q₂ a X jsou stejné, 'jako je uvedeno výše, v přítomnosti diizopropylenetylaminu nebo jiného terciárního aminu v dimetylformamidu nebo inertním rozpouštědle při pokojové nebo vyšší teplotě.......9. Použití sloučeniny definované v patentovém nároku 1 ve výrobě léku pro terapii a profylaxi řady onemocnění charakterizovaných nežádoucí buněčnou proliferací, například buněk kůže a nádorových buněk.