CZ388799A3 - Inhibitory proteasy - Google Patents

Abstract

Řešení se týká 3-hydroxy- a 3-ketocykloheterosubstituovaných leucinových sloučenin, kteréjsou inhibitory cystein proteas, obzvláště kathepsinuKajsou užitečné při léčbě nemocí, při kterýchje faktoreminhibice ztráty kostí. 3- Hydroxy- nebo 3-ketoskupinaje navázána na tetrahydrothiofenový, tetrahydrothiopyranový, tetrahydrofuranový nebo tetrahydropyranovýkruh.

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká nových inhibitorů proteasy, obzvláště inhibitorů cystein a serin proteas, zvláště sloučenin, které inhibuji cystein proteasy. Sloučeniny podle tohoto vynálezu se zvláště týkáji sloučenin, které inhibuji cystein proteasy z nadtřidy papainu, a zvláště proteas z třídy kathepsinu. V nejvýhodnějším ztělesnění s tento vynález týká sloučenin, které inhibuji kathepsin K. Takové sloučeniny jsou obzvláště použitelné pro léčbu nemocí, ve kterých mají účast cystein proteasy, obzvláště nemocí vyznačujících se nadměrnou ztrátou kosti nebo chrupavky, např. osteoporózy, periodontitidy a artritidy.

Dosavadní stav techniky l

Kathepsin K je členem třídy enzymů, které jsou částí papainové nadtřidy cystein proteas. V literatuře byly popsány kathepsiny Β, H, L, N a S. Nedávno byl polypeptid kathepsinu K a cDNA kódující takový polypeptid zveřejněny v US patentu č. 5 501 969 (je tam nazýván kathepsin 0). Kathepsin K je v současností exprimován, vyčištěn a charakterizován. Bossard M. J. a kol., J. Biol. Chem., 271, 12517 12524 (1996), Drake F. H. a kol., J. Biol. Chem., 271,

12511 - 12516 (1996), Bromme D. a kol., J. Biol. Chem.,

271, 2126 - 2132 (1996).

Kathepsin K byl v literatuře označován různě jako kathepsin 0, kathepsin X nebo kathepsin 02. Označení ka• ·

- 2 thepsin K je považováno za vhodnější (označení přiděleno Nomenklaturní komisí Mezinárodního svazu biochemie a molekulární biologie (Nomenclature Committee of the International Union of Biochemistry and Molecular Biology)).

Kathepsiny z papainové nadtřídy cystein proteas fungují v normálním fyziologickém procesu degradace proteinů u živočichů, včetně lidí, např. při degradaci pojivových tkání. Zvýšené hladiny těchto enzymů v těle však mohou vyústit do patologických podmínek vedoucích k nemoci. Kathepsiny jsou tedy účastny různých chorobných stavů, včetně, ale nikoli pouze, infekcí způsobených Pneumocystis carinii, Trypsanoma cruzi, Trypsanoma brucei brucei a Crithidia fusiculata, stejně jako schistosomiasy, malárie, metastázy nádorů, metachromatické leukodystrofie, svalové dystrofie, amytrofie apod., viz dokument mezinárodního publikačního čísla WO 94/04172, publikováno 3. března 1994, a odkazy tam citované, viz také Evropskou patentovou přihlášku EP 0 603 873 Al a odkazy tam citované. Dvě bakteriální cystein proteasy z P. gingivallis, zvané gingipainy, se účastnily pathogenesy gingivitidy, Potempa J a kol., Perspectives in Drug Discovery and Design, 2, 445 - 458 (1994).

O kathepsinu K se věří, že hraje příčinnou roli u nemocí s nadměrnou ztrátou kosti nebo chrupavky. Kost se skládá z proteinové matrix, níž jsou inkorporovány jehličkoví té nebo ploché krystaly hydroxyapatitu. Kolagen typu I představuje hlavní strukturní protein kosti zahrnující přibližně 90 % strukturních proteinů. Zbývajících 10 % matrix se skládá z mnoha nekolagenových proteinů, včetně osteokalcinu, proteoglykanů, osteopontinu, osteonektinu, thrombospondinu, fibronektinu a kostního sialoproteinu. Kosterní kost podléhá během života na jednotlivých místech remodelaφ ·

- 3 ci. Tato místa neboli remodelující jednotky, podstupují cyklus sestávající z fáze kostní resorpce následované fází nahrazování kosti.

Kostní resorpci provádějí osteoklasty, což jsou mnohojaderné buňky krvetvorné řady. Osteoklasty adherují na povrch kosti a vytvářejí pevně uzavřenou zónu, po čemž následuje silné svraštění membrán na jejich apikálním (tj. resorbčním) povrchu. To vytváří uzavřený extracelulární kompartment na povrchu kosti, který je acidifikován protonovými pumpami ze svraštěné membrány, a do kterého osteoklast vylučuje proteolytické enzymy. Nízké pH kompartmentu rozpouští krystaly hydroxyapatitu na povrchu kosti, zatímco proteolytické enzymy tráví proteinovou matrix. Tímto způsobem je vytvořena resorpční lakuna neboli důlek. Na konci této fáze cyklu položí novou osteoblastovou proteinovou matrix, která je následně mineralizována. U několika chorobných stavů, jako je osteoporóza, Pagetova choroba, je normální rovnováha mezi kostní resorpci a tvorbou narušena a v každém cyklu dochází v konečném součtu ke ztrátě kosti. To nakonec vede k oslabení kosti a může vyústit ve zvýšeném riziku zlomenin při minimálním úrazu.

Nadměrná selektivní exprese kathepsinu K v osteoklastech silně ukazuje na to, že tento enzym je nezbytný pro kostní resorpci. Selektivní inhibice kathepsinu K může tedy poskytnout účinnou léčbu nemocí s nadměrnou ztrátou kosti včetně, ale nikoli pouze, osteoporózy, nemocí dásní jako je gingivitida a periodontitida, Pagetova choroba, hyperkalcémie při nádorových onemocněních a metabolická nemoc kostí. Zvýšené hladiny kathepsinu K byly také demonstrovány v chondroklastech osteoartritického synovia. Selektivní inhibice kathepsinu K může tedy být užitečná při léčbě ne4 4 • · 4 ·

4

- 4 mocí s nadměrnou degradací chrupavky nebo matrix, včetně, ale nikoli pouze, osteoartritidy a revmatoidní artritidy. Metastatické neoplastické buňky také typicky vykazují vysoké hladiny proteolytických enzymů, které degradují obklopující matrix. Selektivní inhibice kathepsinu K může tedy být užitečná při léčbě jistých neoplastických nemocí.

Nyní bylo nalezeno, že nová třída sloučenin jsou inhibitory proteas, nejvíce specificky inhibitory kathepsinu K a tyto sloučeniny jsou užitečné při léčbě nemocí, při kterých je indikována inhibice kostní resorpce, jako jsou osteoporóza a periodontální nemoc.

Podstata vynálezu

Předmětem tohoto vynálezu je poskytnutí inhibitorů proteas, jako inhibitorů cystein a serin proteas. Tento vynález se zvláště týká sloučenin, které inhibují cystein proteasy, zejména cystein proteasy z nadtřídy papainu. Výhodně se tento vynález týká sloučenin, které inhibijí cystein proteasy z třídy kathepsinu, zvláště sloučenin, které inhibují kathepsin K. Sloučeniny podle předloženého bynálezu jsou užitečné při léčbě nemocí, které mohou být terapeuticky ovlivněny narušením aktivity takových proteas.

Tudíž, z prvního hlediska, poskytuje tento vynález sloučeninu podle obecného vzorce (I):

• « • · • · . · · ·

... · ··

- 5 Z jiného hlediska poskytuje tento vynález farmaceutický přípravek obsahující sloučeninu obecného vzorce (I) a farmaceuticky přijatelný nosič.

Z ještě dalšího hlediska poskytuje tento vynález způsob léčení nemocí, u kterých může být patologie nemoci terapeuticky modifikována inhibici proteas, jako cystein a serin proteas. Zvláště způsob zahrnuje léčení nemocí inhibicí cystein proteas, zvláště cystein proteas z nadtřídy papainu. Zejména je popsána inhibice cystein proteas z třídy kathepsinu, jako je kathepsin K.

Z jiného hlediska jsou sloučeniny podle tohoto vynálezu obzvláště užitečné při léčbě nemocí charakterizovaných ztrátou kosti, jako je osteoporóza, onemocnění dásní, jako je gingivitida a periodontitida, nebo nadměrnou degradací chrupavky nebo matrix, jako jsou osteoartritida a revmatoidní artritida.

Detailní popis vynálezu

Předložený vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce (I)

ve kterém je R, RC(O), RC(S), RSO₂, ROC(O), RR'NC(O) • * • # • ·

- 6 nebo ROC (0) NR'CH (R⁶) C (0) ,

R² je H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl,

R³ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, C₂_₆alkinyl, C₃_₆cykloalkyl-Co_₆alkyl, Ar-C₀__éalkyl nebo Het-C₀__galkyl,

R⁴ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo

Het-C₀.₆alkyl, každé R⁵ je nezávisle H, C₁_₆alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀._galkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

R⁶ je H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, C₃.₆cycloalkyl-C₀._g_

-alkyl, Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

R' je H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀.₆alkyl nebo

Het-C₀._galkyl,

R je C^alkyl, Ar-C₀_₆alkyl, Het-C₀_₆alkyl, Ar-C₂._galkenyl nebo Het-C₂__galkenyl,

X je O nebo S, a n je 1, 2 nebo 3, nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl.

Předložený vynález zahrnuje všechny hydráty, solváty, komplexy a prekursory léčiva sloučenin podle tohoto vynálezu. Prekursory léčiva jsou jakékoli kovalentně vá- 7 zané sloučeniny, které in vivo uvolňují aktivní matečnou látku obecného vzorce (I). Pokud je ve sloučenině podle předloženého vynálezu přítomno chirální centrum nebo jiná forma isomerního centra, je záměrem chránit zde všechny formy takového isomeru nebo isomerů, včetně enantiomerů a diastereoisomerů. Vynalezené sloučeniny obsahující chirální centrum mohou být použity jako racemická směs, jako enantiomerně obohacená směs nebo může být racemická směs oddělena za použití dobře známých technik a může být použit jednotlivý enantiomer samotný. Podle předloženého vynálezu je u sloučenin obecného vzorce (I) výhodná S-forma na spojení furanového kruhu.

V případech, kdy sloučeniny mají nenasycené dvojné vazby mezi dvěma atomy uhlíku, spadají do oblasti vynálezu jak cis (Z), tak trans (E) isomery. V případech, kde mohou sloučeniny existovat v tautomerních formách, jako jsou keto-enol tautomery, je každá tautomerní forma zamýšlena jako zahrnutá do vynálezu ať už existují v rovnováze anebo převážně v jedné z forem.

Význam jakéhokoli substituentu při jakémkoli výskytu v obecném vzorci (I) nebo jakémkoli jeho podvzorci je nezávislý na jeho významu nebo na významu jakéhokoli jiného substituentu při jakémkoli jiném výskytu, pokud není specifikováno jinak.

S ohledem na obecný vzorec (I):

Vhodně R² a R⁴ jsou H a R³je C_x_₆alkyl nebo C₂_₆alkenyl. Výhodně je R³ isobutyl.

Vhodně každé R⁵ je H.

• φ

Vhodně R¹ je R”OC(O), RSO₂ nebo RC(O), kde R je Ar-C₀_₆alkyl nebo Het-C₀_₆alkyl a nej výhodně ji je R

ve kterých B₂ je OH, CN, OCF₃, OC^alkyl, OAr, SO^^alkyl, C^alkyl nebo halogen.

Vhodně n je 1 nebo 2. Výhodně n je 1.

Vhodně X je O.

V jednom zvláštním ztělesnění je tento vynález sloučeninou obecného vzorce (II):

Výhodně je sloučenina obecného vzorce (I) podle

- 9 tohoto vynálezu sloučeninou obecného vzorce (Ila):

(Ha).

Alternativně je sloučenina obecného vzorce (I) podle tohoto vynálezu sloučeninou obecného vzorce (lib):

V jiném ztělesnění obecného vzorce (líc):

je tento vynález sloučeninou

(Hc).

Specifickými representativními sloučeninami podle tohoto vynálezu jsou:

4-(R,S)-amino-N- [ (3,4-methylendioxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4- (R, S) -amino-N-[(3,4-dichlorbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4- (R, S) -amino-N-[(2-chinolinkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-[(8-chinolinkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrof uran-3-on,

4-(R, S)-amino-N- [ (benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-2,2-dibenzyltetrahydrofuran-3-on,

4- (R, S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-[(3,4-dimethoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-[(indol-6-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-[(benzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrof uran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-[(5-aminobenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-[(5-chlorbenzofuran-2-yikarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-[(5-methoxybenzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4- (R, S) -amino-N-[(3-brombenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4- (R, S) -amino-N-[ (4-brombenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R,S)-amino-N-[(5-chlorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R,S)-amino-N-[(4-fluorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R,S)-amino-N- [ {4-fenoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N- [ (4-fenylbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4- (R, S)-amino-N-[(6-trifluormethylbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4- (R, S) -amino-N-[(4-ethyllbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-[{4-(terč.-butyl)benzoyl)-S-leucin]tetrahydrof uran-3-on,

4-(R,S)-amino-N-[(5-methoxybenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N- [ (4-nitrobenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on, • •ΦΦ

• φ • Φ ·· • · ⁴ • φ « • · * φφ ··

- 12 4-(R, S)-amino-N- [ (β-brombenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R,S) -amino-N-[(5-brombenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-( (6-methoxybenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(benzo [b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-R-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(2-naftoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-R-amino-N-[(2-naftoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(chinolin-2-karbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-R-amino-N-[(chinolin-2-karbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(S-methoxybenzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[((4-pyrid-3-yl)benzoyl)-S-leucin)-tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[((4-pyrid-2-yl)benzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on, ···· »·

• ·

- 13 *· ·· »· · ··

4-S-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(3,4-dimethoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(benzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrof uran- 3 -on,

4-S-amino-N-[ (4 — [6-methylpyrid-3-yl]benzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(5-chlorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl) -S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[((4-pyrid-4-yl)benzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(2-chlorbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(4-brombenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(4-chlorbenzo [b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(4-benzylpiperidin-l-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-S-amino-N-[(3,4-dichlorbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on, ·· *♦·* ·· • · » · • · • ·

• · ··· *

4-S-amino-N-[(3-chlorbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

4-(R,S)-amino-N-[(3,4-dimethoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on,

4-(R,S)-amino-N- [ (4-fenoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on,

4-(R,S)-amino-N- [ (chinolin-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on,

4-(R, S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on,

4-(R,S)-amino-N-[(benzo [b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on a

4-(R, S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrothiofen-3-on nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.

V ještě dalším ohledu poskytuje tento vynález nové meziprodukty užitečné při přípravě sloučenin obecného vzorce (I) představované obecnými vzorci (III), (IV) a (V):

,3 .4

Ό (ΙΠ)

- 15 99 9 9999 9 99 9 β 999 «999

9 999 9 « 9999

999 9994

9999 99 999 99 99 ve kterém

R¹ je R, RC(O), RC(S), RSO₂, ROC(O), RR'NC(O) nebo ROC (0) NR' CH (R⁶) C (0) ,

R² je H, C^alkyl, C₂-₆alkenyl, Ar-C₀.₆alkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl,

R³ je H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, C₂_₆alkinyl, C₃.₆cykloalkyl-C₀_₆alkyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

R⁴ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀__salkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl, každé R⁵ je nezávisle H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀._galkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

R⁶ je H, C^alkyl, C₂-₆alkenyl, C₃__scykloalkyl-C₀_₆-alkyl,

Ar-C₀_₆alkyl, Het-C₀_₆alkyl,

R' je H, C_x.₆alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo

Het-C₀.₆alkyl,

R je C₁.₆alkyl, Ar-C₀__galkyl, Het-C₀_₆alkyl, Ar-C₂-₆alkenyl nebo Het-C₂_₆alkenyl, a n je 1, 2 nebo 3, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo

Φ

9- ·

ve kterém

R¹ je R, RC(O), RC(S), RSO₂, ROC(O), RR'NC(O) nebo ROC (0) NR' CH (R⁶) C (0) ,

R² je H, Ci.galkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl,

R³ je H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, C₂_₆alkinyl, C₃.₆cykloalkyl-C₀_₆alkyl, Ar-C₀.₆alkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

R“ je H, C₁_₆alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀.₆alkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl, každé R⁵je nezávisle H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀.₆alkyl nebo Het-C₀_₆alkyl;

R⁶ je H, C_walkyl, C₂_₆alkenyl, C₃_₆cycloalkyl-C₀_₆-alkyl,

Ar-C₀_₆alkyl, Het-C₀_₆alkyl,

R' je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl,

R je Cj.galkyl, Ar-C₀__galkyl, Het-C₀__galkyl, Ar-C₂_₆alkenyl nebo Het-C₂.₆alkenyl a n je 1, 2 nebo 3, «· · · · t> · · · v · • · ··· Φ · · · • € 9. · * ······ • · ··· · · 9 · • · · · 9 · · · · · · 4· nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo

ve kterém

R¹ je R, RC(O), RC(S), RSO₂, ROC(O), RR'NC(O) nebo ROC (O) NR'CH (R⁶) C (0) ,

R³ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, C₂_₆alkinyl, C₃_₆cykloalkyl-C₀_₆alkyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

R⁴ je H, C₁.₆alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀.₆alkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl, každé R⁵je nezávisle H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

R⁶ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, C₃_₆cycloalkyl-C₀.₆-alkyl,

Ar-C₀_₆alkyl, Het-C₀_₆alkyl,

R' je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl,

R je Ci.galkyl, Ar-C₀__galkyl, Het-C₀_₆alkyl, Ar-C₂_₆alkenyl nebo Het-C₂.₆alkenyl;

X je O nebo S, a

r • ·· ·· • · » · · · • » · · · • « · · · · • 9 · 9 9

999 β· 99

- 18 n je 1, 2 nebo 3, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

Representativními meziprodukty podle tohoto vynálezu jsou:

trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N- [ (terč.-butoxykarbonyl)-S-leucin)-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N- (S-leucin)-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N-[ (3,4-methylendioxybenzoyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(3,4-dichlorbenzoyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(2-chinolinkarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N-((benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl) -S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran;

trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S• · · · • · 0

* · • · · ·

9 9 9

0 99

- 19 leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N- [ (indole-6-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N- [ (5-aminobenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl) -S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-amino-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-3-hydroxy-4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuran,

4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuran-3-on,

3.3- dimethoxy-4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuran,

3.3- dimethoxy-4-aminotetrahydrofuran, trans-4-S-amino-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(benzyloxykarbonyl]-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-(S-leucin)-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N- [ (3,4-dichlorbenzoyl)-S-leucin]-3-R-hydrexytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N- [ (2-chinolinkarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[ (benzo(b]thiofen-2-ylkarbonyl) -S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, • · · · · ·· · «· ·· • · · ·<·· · · · i te · ··· ···· • te ··· te·· ··· ·· ··· ···· «·»· ·· · ·· · · ·· trans-4-S-amino-N-[(benzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(2-naftoyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(5-methoxybenzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytecrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(5-chlorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(4-chlorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(4-brombenzoyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(4-(pyrid-2-yl)benzoyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(4-(pyrid-3-yl)benzoyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(3,4-dimethoxybenzoyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-amino-3-hydroxytetrahydropyran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran, ··9* · · · «9 ··

9 9999 99*9 « «99 9999

9 999 999 99 9

999 9999

9999 99 999 99 99 trans-4- (R, S) -amino-N- (S-leucin) -3-hydroxytetrahydropyran, trans-4-(R,S)-amino-N-[ (benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl) -S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran, methylester N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucinu,

N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucin, ethylester N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucin-S-(methoxykarbonylmethyl)-L,D-cysteinu a

2-methoxykarbonyl-4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrothiofen-3-on nebo jejích solí.

Tyto meziprodukty se připraví za použití metod analogických s těmi, které jsou popsány ve schématech 1 až 4 a v příkladech popsaných níže.

Prekurzory léčiva sloučenin podle předloženého vynálezu mohou být prekurzorem léčiva ketonové funkční skupiny sloučenin obecného vzorce (I), specificky ketalů nebo hemiketalů obecného vzorce (VI):

X (VI) • · · · · ·· · φ β ·· « · · e · · · * · · · · · · 4 9 · · * • · * · Φ ·»···· • · · · · · · · · • Φ * Φ · · · · · 9 9 9 9

- 22 ve kterém

R¹ je R, RC(O), RC(S), RSO₂, ROC(O), RR'NC(O) nebo ROC(O)NR'CH(R⁶)C(O) ,

R² je H, C^alkyl, C₂-_galkenyl, Ar-C₀._galkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl,

R³ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, C₂.₆alkinyl, C₃__gcykloalkyl-C₀_₆alkyl, Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀__galkyl,

R⁴ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl, každé R⁵ je nezávisle H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo Het-C₀__gaikyl,

R⁶ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, C₃_₆cycloalkyl-C₀_₆-alkyl,

Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀.₆alkyl,

R' je H, C^alkyl, C₂._galkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo

Het-C₀_₆alkyl,

R je C^alkyl, Ar-C₀__galkyl, Het-C₀_₆alkyl, Ar-C₂_₆alkenyl nebo Het-C₂_₆alkenyl,

X je 0 nebo S, a n je 1, 2 nebo 3,

R^a a R^a' jsou nezávisle H nebo C^alkyl, za předpokladu, že když jeden z R^a nebo R^a'je H, je druhý C^alkyl nebo jsou dohromady (CH₂)₂-₃ tvořící 5- nebo 6-členný kruh

nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.

K popisu sloučenin předloženého vynálezu jsou použity zkratky a symboly běžně používané v oboru chemie a peptidů. Zkratky aminokyselin se obecně řídí nomenklaturou IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature, která je popsána v Eur. J. Biochem., 9, 158 (1984). Pojem aminokyselina jak je zde používán se vztahuje na D- nebo L-isomery alaninu, argininu, asparaginu, kyseliny asparagové, cysteinu, glutaminu, kyseliny glutamové, glycinu, histidinu, isoleucinu, leucinu, lysinu, methioninu, fenylalaninu, prolinu, šeřinu, threoninu, tryptofanu, tyrosinu a valinu.

C^gAlkyl jak je zde používán, má zahrnovat substituovaný a nesubstituovaný methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl a terč.-butyl, pentyl, n-pentyl, isopentyl, neopentyl a hexyl a jeho jednoduché alifatické isomery. Kterákoli C^alkylová skupina může být případně substituována nezávisle jedním nebo dvěma halogeny, SR', OR', N(R')₂, C(O)N(R')₂, karbamyl nebo Coalkyl, kde R'je H nebo Coalkyl. C_oalkyl znamená, že v části není přítomna žádná alkylová skupina. Ar-C_oalkyl je tedy ekvivalentní Ar.

C₃-₆Cykloalkyl jak je zde používán, má zahrnovat substituovaný (tj. alkylem, OR, SR nebo halogenem) a nesubstituovaný cyklopropan, cyklobutan, cyklopentan a cyklohexan.

C₂_₆A1 kenyl jak je zde používán, znamená alkylovou skupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, kde jednoduchá

vazba mezi dvěma atomy uhlíku je nahrazena dvojnou vazbou mezi dvěma atomy uhlíku. C₂-₆Alkenyl zahrnuje ethylen, 1-propen, 2-propen, 1-buten, 2-buten, isobuten a několik isomerních pentenů a hexenů. Zahrnuty jsou jak cis, tak trans isomery.

Co.gAlkinyl znamená alkylovou skupinu 2 až 6 atomy uhlíku, kde jednoduchá vazba mezi dvěma atomy uhlíku je nahrazena trojnou vazbou mezi dvěma atomy uhlíku. C₂_₆A1“ kinyl zahrnuje acetylen, 1-propin, 2-propin, 1-butin, 2-butin, 3-butin a jednoduché isomery pentinu a hexinu.

Halogen nebo halo znamená F, Cl, Br, a I.

Ar nebo aryl znamená nesubstítuovaný fenyl nebo naftyl, nebo fenyl nebo naftyl substituovaný jednou nebo více Ph-C₀.₆al kýlovými skupinami, Het-C₀.₆alkylovými skupinami, C^alkoxyskupinami, Ph-C₀_₆alkoxyskupinami, Het-C₀_₆alkoxyskupinami, skupinami vzorce OH, (CH₂) ^NR'R’, (CH₂) !-₆NR' R' , kde každé R' je nezávisle H, C^alkyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo Het-C₀_₆alkyl, nebo fenyl nebo naftyl substituovaný jednou až třemi skupinami zvolenými z C^alkylové skupiny, skupiny vzorce OR', N(R’)₂, SR', CF₃, N0₂, CN, CO₂R', CON(R')₂, F, Cl, Br a I, nebo substituovaný methylendioxyskupinou.

Jak je zde používáno, Het nebo heterocyklický představuje stabilní 5- až 7-členný monocyklický nebo stabilní 7- až 10-členný bicyklický heterocyklický kruh, který je buď nasycený nebo nenasycený, a který sestává z atomů uhlíku a z 1 až 4 heteroatomů zvolených ze skupiny sestávající z N, 0 a S a kde heteroatomy dusíku a síry mohou být případně oxidovány a heteroatom dusíku může být

případně kvarternizován, a zahrnující jakoukoli bicyklickou skupinu, ve které kterýkoli z výše definovaných heterocyklických kruhů je spojen s benzenovým kruhem. Heterocyklický kruh může být připojen na kterémkoli heteroatomů nebo atomu uhlíku, což povede k vytvoření stabilní struktury a případně může být substituován jednou nebo dvěma skupinami zvolenými ze skupin vzorce C₁.₄alkyl, OR', N(R')₂, SR', CF₃, N0₂, CN, CO₂R', CON(R')₂, F, Cl, Br a I, kde R' odpovídá tomu, jak je definován výše. Příklady takových heterocyklu zahrnují piperidinyl, piperazinyl, 2-oxopiperazinyl, 2-oxopiperidinyl, 2-oxopyrrolidinyl, 2-oxoazepinyl, azepinyl, thienyl, pyrrolyl, 4-piperidonyl, pyrrolidinyl, pyrazolyl, pyrazolidinyl, imidazolyl, pyridyl, pyrazinyl, oxazolidinyl, oxazolinyl, oxazolyl, isoxazolyl, morfolinyl, thiazolidinyl, thiazolinyl, isothiazolyl, thiazolyl, chinuklidinyl, indolyl, chinolyl, ísochinolyl, benzimidazolyl, benzothienyl, benzopyranyl, benzoxazolyl, benzofuranyl, furyl, pyranyl, tetrahydrofuryl, tetrahydropyranyl, thienyl, benzoxazolyl, thiamorfolinylsulfoxid, thiamorfolinylsulfon, oxadiazolyl, benzothiazolyl, benzoisothiazolyl, benzisoxazolyl, pyrimidinyl, cinnolyl, chinazolyl, chinoxalyl, 1,5-naftyridinyl, 1,6-naftyridinyl, 1,7-naftyridinyl, 1,8-naftyridinyl, tetrazolyl, 1,2,3-triazolyl a 1,2,4-triazolyl.

Některé radikálové skupiny jsou zde uvedeny zkratkou. t-Bu odkazuje na terciární butylovou skupinu, Boc nebo BOC odkazuje na terč.-butyloxykarbonylovou skupinu, Fmoc odkazuje na fluorfenylmethoxykarbonylovou skupinu, Ph odkazuje na fenylovou skupinu, Cbz nebo-li CBZ odkazuje na benzyloxykarbonylovou skupinu.

Některá činidla jsou zde někdy uvedena zkratkou.

···«· ·· · *♦ ·· ·· · · · · · 9 « · · · · · · ···· • 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 99 9 9 9 9

DCC odkazuje na dicyklohexylkarbodiimid, EDC nebo EDCI odkazuje na N-ethyl-N(dimethylaminopropyl)karboimid. HOBT nebo HOBt odkazuje na 1-hydroxybenzotriazol, DMF odkazuje na dimethylformamid, DIEA odkazuje na diisopropylethylamin, Lawessonovo činidlo je 2,4-bis(4-methoxyfenyl)-1,3-dithia-2,4-difosfetan-2,4-disulfid, TFA odkazuje na kyselinu trifluoroctovou a THF odkazuje na tetrahydrofuran.

Sloučeniny obecného vzorce (I) se obecně připraví:

(i) reakcí sloučeniny obecného vzorce (III):

(III) ve kterém

R¹, R², R³, R⁴, R⁵ a n mají význam definovaný v obecném vzorci (I), kde jsou kterékoli reaktivní funkční skupiny chráněny, s oxidačním činidlem nebo (ii) dekarboxylací sloučeniny obecného vzorce (IV):

(IV) ve kterém

R¹, R², R³, R⁴, R⁵ a n mají význam definovaný v obecném vzorci (I), kde jsou kterékoli reaktivní funkční skupiny chráněny nebo (iii) reakcí sloučeniny obecného vzorce (V):

(V) ve kterém

R¹, R², R³, R⁴, R⁵ a n mají význam definovaný v obecném vzorci (I), kde jsou kterékoli reaktivní funkční skupiny chráněny, s kyselinou, a následným odstraněním každé z chránících skupin a případným vytvořením farmaceuticky přijatelné soli.

Sloučeniny obecného vzorce (I) se připraví postupy analogickými těm popsaným v syntetickém postupu v roztoku ze schématu 1 nebo v postupu na pevné látce ze schématu 2 nebo v syntetickém postupu v roztoku ze schématu » · · · · • · · · • · ·

3.

Schéma 1

α ·· ·

Ν \\ . Ν Λ

ΟΗ

HCI HjN+ _χΟΗ

Ď >-/ c

ZI

a) NaN₃, chlorid amonný, methanol:voda,

b) 10% Pd/C, EtOH, H₂, ethanolická HCI,

c) trimethylacetylchlorid, N-BOC-leucin, DIEA, CH₂C1₂,

d) TFA, CH₂C1₂,

e) RCOC1, hydrogenuhličitan sodný, 1,4-dioxan,

f) Dess-Martinův perjodinan, CH₂C1₂ • · · · 9 9 • 9 · · • · · ·· ··

I 9 9 I > · · 4

- 29 Sloučeniny obecného vzorce (I), ve kterém n je 1 a R^xje R’’C(O) se připraví postupy ukázanými ve schématu 1. Působení azidem sodným a chloridem amonným ve vodném methanolu za zvýšených teplot na známý epoxid 1 ze schématu 1 se získá azid 2 ze schématu 1. Redukcí azidu 2 ze schématu 1 za použití postupů známých v oboru, jako je redukce palladiem na uhlí v ethanolu ve vodíkové atmosféře, se po působení ethanolickým chlorovodíkem získá amoniová sůl 3. ze schématu 1. Amoniová sůl 3. ze schématu 1 se může kondenzovat s karboxylovou kyselinou postupy známými v oboru, jako je acylace chloridem kyseliny nebo kondenzace s kyselinou za přítomnosti EDC a HOBT, aby se získal amid 4. ze schématu 1. terč.-Butoxykarbonylová skupina se může odstranit působením silné kyseliny, jako je TFA v aprotickém rozpouštědle, jako je dichlormethan, aby se získala sůl 5. ze schématu 1. Sůl 5. ze schématu 1 se může acylovat chloridem kyseliny v 1,4-dioxanu za přítomnosti vodné báze, jako je nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného, aby se získal alkohol 6 ze schématu 1. Alkohol 6 ze schématu 1 se může oxidovat postupy známými v oboru, jako působením Dess-Martinova perjodinanu v aprotickém rozpouštědle, jako je dichlormethan .

Schéma 2

d)

9999

99

9 9 9

9 9 9

9 9 9 • •9 9

999

R‘ COOH

EDC, HOAt

(5) ft« · ·« ·· • · »· · ftft · • · · · · · · • · · ftftft· • ft «·· ·· ftft

Sloučeniny obecného vzorce (I), ve kterém íVje C(O)R', R²je H, R⁴ je H, R⁵je Η, X je 0 a n je 1, se připraví postupem syntézy na pevné látce (SPS) ukázané ve schématu 2 . V detailu se v prvním kroku přidá triacetoxyborohydrid sodný k míchanému roztoku Ellmanovy pryskyřice v DMF obsahujícímu 1 % HOAc a potom se přidá methylester alfa-aminokyseliny, aby vznikla sloučenina 2 ze schématu 2. Aminoskupina se kondenzuje s karboxylovou kyselinou použitím známých postupů, jako je přidání karboxylové kyseliny s EDC, aby vznikl amid 2 ze schématu 2. Poté se esterová skupina hydrolyzuje, například trimethylsilanoatem draselným v THF a uvolněná kyselá skupina se kondenzuje 3,3-dimethoxy-4-amino-tetrahydrofuranem za použití například EDC v NMP, aby se získala sloučenina 4. ze schématu 2. Blokační skupina se potom odstraní známými štěpícími postupy, jako je přidání směsi TFA/CH₂C1₂/H₂O v poměru 7:2:1, aby se získala požadovaná sloučenina 5. ze schématu 2.

Sloučeniny obecného vzorce (I), ve kterém R¹ je C(O)R', R² je H, R⁴ je H, R⁵ je Η, X je 0 a n je 2, se připraví postupem syntézy na pevné látce (SPS) ukázené ve schématu 2 s tím rozdílem, že místo 3,3-dimethoxy-4-aminotetrahydrofuranu se použije 3,3-dimethoxy-4-aminotetrahydropyran.

Schéma 3

COCI

• 4

4 4 4 • *

9 • ·

4 4 4 · • 4 4 4 I · · »4 ' • «441

444 4 4 4 4

COOH

a) methylester L-Leu, ⁱPr₂NEt, CH₂C1₂,

b) LiOH, THF/H,O,

c) (i)ClCO/Pr, Et₃N, CH₂C1₂, (ii) ethylester L-Cys, (iii) BrCH₂CO₂Me,

d) (i) NaOMe, (ii) AcOH/HCl, H₂O • φ !

φφφ ♦ * « ·

Ο ♦ <* φ φ

Φ · · 9

Φ Φ Φ Φ

Schéma 4 uvedené níže ukazuje přípravu jistých sloučenin obecného vzorce (I), které jsou S-diastereomery na spojení furanového kruhu.

Schéma 4

jako ve schématu 1

- 34 φ » φ • · · • · · * * · «

R-Diastereoisomer se připraví identickým způsobem z opačného enantiomeru 3-azido-4-hydroxytetrahydrofuranu vzorce:

Meziprodukty podle předloženého vynálezu, jako je 3,3-dimethoxy-4-aminotetrahydrofuran, mohou být připraveny podle postupu ze schématu 5.

Schéma 5

CBzCI ca 70%

CbzHN \

OH /

bělidlo

TEMPO ca 90 %

CbzHN (MeO)₃CH pTSA ca 70%

H₂N

H₂,Pd/C ca 95%

OMe

Í^OMe ·

• · • 4·· ·

J *’ • * • · t

« » 4 4 f>

• 4 4 4

Jr* 4 4 4 4

4 4 4

4 4 · 4 4

- 35 Kroky ve schématu 5 jsou předloženy následovně.

Za prvé se reakcí 3-hydroxy-4-aminotetrahydrofuranu s benzylchloroformiatem v dioxanu obsahujícím vodný uhličitan sodný zavede skupina chránící dusík. Poté se známými postupy, jako je přidání bělidla obsahujícího hydrogenuhličitan sodný za přítomnosti bromidu sodného a TEMPO v EtOAc, toluenu a vody, oxiduje alkoholová skupina, aby se získal keton. Keton se převede na dimethylketal přidáním trimethyl-orthoformiatu za přítomnosti kyseliny para-toluensulfonové v methanolu. Nakonec se odstraní chrínicí skupina hydrogenaci za použití například palladia na uhlí za přítomnosti ethanolu ve vodíkové atmosféře.

Výchozí materiály zde použité jsou komerčně dostupnými aminokyselinami nebo jsou připravovány rutinními metodami dobře známými těm, kteří mají běžné dovednosti v oboru a mohou být nalezeny ve standardních refernčních knihách, jako je COMPENDIUM OF ORGANIC SYNTHETIC METHODS, díl I až IV (vydal Wiley-Interscience).

Kondenzační postupy, které zde mají vytvořit amidové vazby jsou v oboru obecně známy. Postupy syntézy peptidů obecně navržené Bodanskym a kol., THE PRACTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS, Springer-Verlag, Berlin, 1984, E.

Grossem a J. Meienhoferem, THE PEPTIDES, díl 1, 1 - 284 (1979) a J. M. Stewartem a J. D. Youngem, SOLID PHASE PEPTIDE SYNTHESIS, 2. vydání, Pierce Chemical Co.,

Rockford, 111. (1984) techniku obecně ilustrují a jsou zde zahrnuty jako odkazy.

Syntetické postupy přípravy sloučenin podle tohoto vynálezu často využívají ochranné skupiny, aby zakryly reakční funkční skupiny nebo minimalizovaly nežádoucí ved• · · · • · • ·

«» * • · ♦♦ • · * 1 • · * ι • ·« * • · · 9 • · · ·

- 36 lejší reakce. Takové ochranné skupiny jsou obecně popsány v Green T. W., PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, John Wiley & Sons, New York (1981). Pojem skupina chránící aminoskupinu obecně odkazuje na Boc, acetyl, benzoyl, Fmoc a Cbz skupinu a jejich deriváty tak, jak je známo v oboru. Způsoby ochrany a odstranění ochrany a nahrazení skupiny chránící aminoskupinu jinou částí jsou v oboru dobře známy.

Adiční soli sloučenin obecného vzorce (I) s kyselinou se připravují standardním způsobem ve vhodném rozpouštědle z matečné sloučeniny a v nadbytku kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, bromovodíková, fluorovodíková, sírová, fosforečná, octová, trifluoroctová, maleinová, jantarová a methansulfonová. Jisté z těchto sloučenin tvoří vnitřní soli neboli zwitteriony, které mohou být přijatelné. Kationové soli se připravují tím, že na matečnou sloučeninu působí nadbytek zásaditého reagencia, jako je hydroxid, uhličitan nebo alkoxid, obsahující příslušný kation, nebo působí příslušným organickým aminem. Kationty jako Li⁺, Na⁺, K⁺, Ca⁺⁺, Mg⁺⁺a NH/ jsou specifickými příklady kationtů přítomných ve farmaceuticky přijatelných solích. Halogenidy, sulfát, fosfát, alkanoaty (jako jsou acetat a trifluoroacetat), benzoaty a sulfonaty (jako je mesylat) jsou příklady aniontů přítomných ve farmaceuticky přijatelných solích.

Tento vynález také poskytuje farmaceutický přípravek, který zahrnuje sloučeninu obecného vzorce (I) a farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo excipient. Podle toho může být sloučenina obecného vzorce (I) použita při výrobě léku. Farmaceutický přípravek ze sloučeniny obecného vzorce (I) připravený tak, jak zde bylo dříve popsáno může být formulován jako roztoky nebo lyofilizované • ΦΦΦ • · ♦ ··

·. ·· φφ • φ » · · * • φφφ* « 9 9 9 9 · • a · » Φ φ φ Φ Μ ♦ *

- 37 prášky pro parenterální podávání. Prášky mohou být před použitím rekonstituovány přidáním vhodného ředidla nebo jiného farmaceuticky přijatelného nosiče. Kapalné formulace mohou být pufrované, isotonisované vodné roztoky. Příklady vhodných ředidel jsou normální isotonický roztok chloridu sodného, standardní 5% dextrosa ve vodě nebo pufrovaný roztok octanu sodného nebo amonného. Taková formulace je obzvláště vhodná pro parenterální podání, ale může být také použita k orálnímu podání nebo obsažena v inhalátoru s dávkovačem nebo nebulizéru pro inhalaci. Může být žádoucí přidat excipiencia jako je polyvinylpyrrolidon, želatina, hydroxyceluloza, arabská guma, polyethylenglykol, mannitol, chlorid sodný nebo citrát sodný.

Alternativně mohou tyto sloučeniny být vloženy do kapslí, tabletovány nebo připraveny do emulse nebo sirupu pro orální podávání. Farmaceuticky přijatelné pevné nebo kapalné nosiče mohou být přidány k podpoření nebo stabilizaci přípravku nebo k usnadnění přípravy přípravku. Pevné nosiče zahrnují škrob, laktosu, dihydrát síranu vápenatého, bílou hlinku, stearat hořečnatý nebo kyselinu stearovou, mastek, pektin, arabskou gumu, agar nebo želatinu. Kapalné nosiče zahrnují sirup, olej z podzemnice olejně, olivový olej, roztok chloridu sodného a vodu. Nosič může také zahrnovat materiál navozující pomalé uvolňování, jako je glycerylmonostearat nebo glyceryldistearat, samotné nebo s voskem. Množství pevného nosiče se mění, ale výhodně bude mezi asi 20 mg až asi 1 g na dávkovou jednotku. Farmaceutické přípravky jsou vyráběny podle konvenčních technik farmacie zahrnujících mletí, míchání, granulací a lisování, pokud je to nezbytné, pro tabletové formy nebo mletí, míchání a plnění pro formy tuhých želatinových kapslí. Pokud je použit kapalný nosič, bude přípravek vyroben ve formě sirupu, elir · · · · ζ · · φ · ♦ · * * » φ · · · * 4 φ · · · • I Φ · · . · · » ·»· · ··· ·* ♦*

- 38 xíru, emulse nebo vodné nebo nevodné suspenze. Takový kapalný přípravek může být podáván přímo orálně nebo plněn do měkké želatinové kapsle.

Pro rektální podání mohou být sloučeniny podle tohoto vynálezu také kombinovány s excipiencii jako je kakaové máslo, glycerin, želatina nebo polyethylenglykoly a vytvarovány do čípku.

Použití předloženého vynálezu

Sloučeniny obecného vzorce (I) jsou užitečné jako inhibitory proteas, obzvláště jako inhibitory cystein a šeřin proteas, specifičtěji jako inhibitory cystein proteas, ještě specifičtěji jako inhibitory cystein proteas z nadtřídy papainu, a ještě více specificky jako inhibitory cystein proteas z třídy kathepsinu, nejspecifičtěji jako inhibitory kathepsinu K. Předložený vynález také poskytuje užitečné přípravky a formulace uvedených sloučenin, včetně farmaceutických přípravků a formulací uvedených sloučenin.

Předložené sloučeniny jsou užitečné při léčbě nemocí, kterých jsou účastny cystein proteasy, včetně infekcí Pneumocystis carinii, Trypsanoma cruzi, Trypsanoma brucei a Crithidia fusiculata, stejně jako při schistosomiase, malárii, metastázi nádorů, metachromatické leukodystrofii, svalové dystrofii, amytrofii a obzvláště nemocí, kterých je účasten kathepsin K, nejspecifičtěji nemocí s nadměrnou ztrátou kosti nebo chrupavky včetně osteoporózy, nemocí dásní včetně gingivitidy a periodontitidy, artritidy, specifičtěji osteoartritidy a revmatoidní artritidy, Pagetovy nemoci, hyperkalcémie při nádorových onemocněních a metabolické nemoci kostí.

Metastatické neoplastické buňky také typicky vykazují vysoké hladiny proteolytických enzymů, které degradují obklopující matrix, jisté tumory a metastatické novotvary tedy mohou být účinně léčeny sloučeninami podle tohoto vynálezu.

Předložený vynález také poskytuje způsoby léčení nemocí zapříčiněných patologickými hladinami proteas, obzvláště cystein a serin proteas, specifičtěji cystein proteas, ještě specifičtěji cystein proteas z nadtřídy papainu, a ještě více specificky cystein proteas z třídy kathepsinu, kterýžto způsob zahrnuje podávání sloučeniny podle předloženého vynálezu zvířeti, obzvláště savci, nejspecifičtěji člověku, při její potřebě. Předložený vynález obzvláště poskytuje způsoby léčby nemocí zapříčiněných patologickými hladinami kathepsinu K, kteréžto způsoby zahrnují podávání inhibitoru kathepsinu K včetně sloučeniny podle předloženého vynálezu zvířeti, obzvláště savci, nejspecifičtěji člověku, při její potřebě. Předložený vynález obzvláště poskytuje způsoby léčení nemocí, při kterých jsou účastny cystein proteasy, včetně infekcí Pneumocystis carinii, Trypsanoma cruzi, Trypsanoma brucei a Crithidia fusiculata, stejně jako při schistosomiase, malárii, metastázi nádorů, metachromatické leukodystrofii, svalové dystrofii, amytrofii a obzvláště nemocí, kterých je účasten kathepsin K, nej specifičtěji nemocí s nadměrnou ztrátou kosti nebo chrupavky včetně osteoporózy, nemocí dásní včetně gingivitidy a periodontitidy, artritidy, specifičtěji osteoartritidy a revmatoidní artritidy, Pagetovy nemoci, hyperkalcémie při nádorových onemocněních a metabolické nemoci kostí.

• · · φ * 9 φ · · ·

9 9 9 • ·

9

9 ·

*Φ·

Tento vynález dále poskytuje způsob léčení osteoporózy nebo inhibice ztráty kosti, která zahrnuje vnitřní podávání pacientovi účinného množství sloučeniny obecného vzorce (I), samotné nebo v kombinaci s jinými inhibitory kostní resorpce, jako jsou bisfosfonáty (tj. alendronát), substituční hormonální léčba, antiestrogeny nebo kalcitonin. Při prevenci ztráty kosti nebo ke zvýšení kostní hmoty může navíc být použita léčba sloučeninou podle tohoto vynálezu a anabolickou látkou, jako je kostní morfogenetický protein, iproflavon.

V souladu s tímto vynálezem se podává účinné množství sloučenin obecného vzorce (I), aby se inhibovala proteasa spojená s určitým stavem nebo nemocí. Dávkové množství bude samozřejmě dále modifikováno podle typu podávání sloučeniny. Například účinné množství pro akutní terapii dává přednost parenterálnímu podání sloučeniny obecného vzorce (I). Intravenózní infuze této sloučeniny v 5% dextrose ve vodě nebo normálním fyziologickém roztoku nebo podobná formulace s vhodným excipienciem, je nej účinnější, ačkoliv intramuskulární bolusová injekce je také užitečná. Typicky bude parenterální dávka okolo 0,01 až okolo 100 mg/kg, výhodněji mezi 0,1 a 20 mg/kg, podávaná takovým způsobem, aby se v plasmě udržela koncentrace léčiva na koncentraci účinné k inhibici kathepsinu K. Sloučeniny jsou podávány jednou až čtyřikrát denně na takové úrovni, aby se dosáhlo celkové denní dávky asi 0,4 až asi 400 mg/kg za den. Přesné množství vynalezené sloučeniny, které je terapeuticky účinné a nejvhodnější cestu podávání rychle určí odborník s běžnými dovednostmi v oboru srovnáním krevních hladin látky s koncentracemi požadovanými k dosažení terapeutického účinku.

• ·

- 41 Prekursory léčiv sloučenin podle předloženého vynálezu mohou být připraveny jakýmkoli vhodným postupem. U těch sloučenin, kde skupinou prekursory léčiva je ketonová funkce, specificky ketaly a/nebo hemiketaly, může být převedení provedeno v souladu s konvenčními postupy.

Sloučeniny tohoto vynálezu mohou být pacientovi podávány také orálně takovým způsobem, aby koncentrace léčiva byla dostatečná k inhibici resorpce kosti nebo jakékoli jiné terapeutické indikaci, jak je zde zveřejněno. Typicky se farmaceutický přípravek obsahující sloučeninu podává orálně v dávce asi 0,1 až asi 50 mg/kg způsobem konsistentním se stavem pacienta. Výhodně by měla být dávka podávaná orálně přibližně 0,5 až zhruba 20 mg/kg.

Neočekávají se žádné nepřijatelné toxikologické účinky, pokud jsou sloučeniny podle předloženého vynálezu podávány v souladu s tímto vynálezem.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být testovány jednou z několika biologických zkoušek k určení koncentrace sloučeniny, která je vyžadována k dosažení daného farmakoiogického účinku.

Stanovení proteolytické katalytické aktivity kathepsinu K

Všechna stanovení kathepsinu K byla prováděna pomocí lidského rekombinantního enzymu. Standardní podmínky zkoušky ke stanovení kinetických konstant využívaly fluorogenní peptidový substrát, typicky Cbz-Phe-Arg-AMC, a byly stanoveny ve 100 mM octanu sodném o pH 5,5 obsahujícím 20 mM cysteinu a 5 mM EDTA. Základní roztoky substrátu byly připraveny v koncentracích 10 nebo 20 mM v DMSO s konečnou • ·

» · · · »	9 · 9 •	• 9 9 «	• •	• •	* •
• « • *	« «
• ♦	9	•	•	•	9	9
• · ·		*	·· *	«

- 42 koncentrací substrátu při zkoušce 20 μΜ. Všechny zkoušky obsahovaly 10% DMSO. Nezávislé experimenty odhalily, že tato hladina DMSO neměla žádný účinek na ezymovou aktivitu nebo kinetické konstanty. Všechny zkoušky byly prováděny za teploty místnosti. Fluorescence produktu (excitace při 360 nm, emise při 460 nm) byla monitorována pomocí deskového snímače fluorescence Perceptive Biosystems Cytofluor II. Křivky vývoje produktu byly generovány během 20 až 30 minut po vytvoření AMC produktu.

Inhibiční studie

Potenciální inhibitory byly vyhodnocovány za použití metody vývojové křivky. Zkoušky byly prováděny za přítomnosti různých koncentrací testované sloučeniny.

Reakce byly zahájeny přidáním enzymu k pufrovaným roztokům inhibitoru a substrátu. Anylýza dat byla prováděna podle jednoho ze dvou postupů v závislosti na vzhledu vývojových křivek za přítomnosti inhibitorů. Pro ty sloučeniny, jejichž vývojové křivky byly lineární, byly vypočítány zřejmé inhibiční konstanty (K_i(app) podle vztahu 1 (Brand a kol., Biochemistry, 28., 140 (1989)):

v = V^A/tKJl + I/K_i(app) + A] (1) kde v je rychlost reakce s maximální rychlostí reakce V_m,

A je koncentrace substrátu s Michaelisovou konstantou K_aa I je koncentrace inhibitoru.

Pro ty sloučeniny, jejichž vývojové křivky vykázaly sestupné zakřivení charakteristiky inhibice závislé na čase, byl údaj z jednotlivých sestav analyzován, aby poskytl k_obs podle vztahu 2:

• · • · • · · ♦ « t

- 43 [AMC] = v_sst + (vO - v_3S) [1 - exp(-k_obst) ]/k_ob3 (2) kde [AMC] je koncentrace produktu vytvořeného za čas t, vO je počáteční reakční rychlost a v_3Sje rychlost za konečného rovnovážného stavu. Hodnoty pro k_obs byly potom analyzovány jako lineární funkce koncentrace inhibitoru, aby se získala zřejmá inhibiční konstanta druhého řádu (k_obs/koncentrace inhibitoru nebo K_obs/ [I] ) popisující inhibici závislou na čase. Úplná diskuse tohoto kinetického zpracování je plně popsána (Morrison a kol., Adv. Enzymol. Relat. Areas Mol. Biol., 61, 201 (1988)).

Odborník v oboru by považoval jakoukoli sloučeninu s K_bmenším než 50 μΜ za potenciální sloučeninu olova. Výhodně sloučeniny používané v postupu podle předloženého vynálezu mají hodnotu K menší než 1 mikromolární. Nejvýhodněji mají uvedené sloučeniny hodnotu Kimenší než 100 nanomolární. 4-(R,S)-amino-N-[(8chinolinsulfonyl)-S-leucin]-3-tetrahydrofuran-3-on, sloučenina obecného vzorce (I) , má hodnotu K_iz která je větší než 10 mikromolární.

Stanovení resorpce lidských osteoklastů

Alikvoty suspenze buněk odvozených od osteoklastomů se vyjmou ze skladování v kapalném dusíku, rychle zahřejí na 37 °C a promyji 1-krát v mediu RPMI-1640 odstředěním (frekvence otáček 1000 za minutu, 5 minut při 4 °C). Medium se odsaje a nahradí myšími protilátkami anti-HLA-DR, naředěnými 1:3 v mediu RPMI-1640, a inkubuje se 30 minut na ledu. Buněčná suspenze se často míchá.

* · · · φ φ φ ♦ φ · · φ φ » · ♦ *φ ♦ · · ·

Φ 9 9 9 9 ΦΦΦ* φ 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 φ·Φ 9 9 9 9

999 9 ΦΦ 99 9 Φ * ··

- 44 Buňky se 2-krát promyjí studeným RPMI-1640 odstředěním (frekvence otáček 1000 za minutu, 5 minut při 4 °C) a potom se přenesou do sterilní zkumavky do odstředivky o objemu 15 ml. Počet mononukleárních buněk byl spočítán ve vylepšené Neubauerově čítači komoře.

Dostatek magnetických kuliček (5 na 1 mononukleární buňku), potažených kozím protimyším IgG, se vyjme ze zásobní lahve a umístí se do 5 ml čerstvého media (tím se vymyje toxické azidové konzervans). Medium se odstraní znehybnšním kuliček na magnetu a nahrazením čerstvým mediem.

Kuličky se smíchají s buňkami a suspenze se inkubuje 30 minut na ledu. Suspenze se často míchá. Kuličkami obalené buňky se znehybní na magnetu a zbývající buňky (frakce bohatá na osteoklasty) se slijí do sterilní zkumavky do odstředivky o objemu 50 ml. Ke kuličkami obaleným buňkám se přidá čerstvé medium, aby se uvolnily veškeré zachycené osteoklasty. Tento promývací proces se opakuje 10-krát. Kuličkami obalené buňky se odstraní.

Osteoklasty se spočítají v čítači komoře za použití plastické pasteurovy pipety na jedno použití s velkým otvorem k naplnění komory vzorkem. Buňky se odstředěním zformují do kuliček a hustota osteoklastů se upraví na l,5xl0⁴/ml v mediu EMEM, doplněným 10% fetálním telecím sérem a hydrogenuhličitanem sodným o koncentraci 1,7 g/1. 3ml alikvoty buněčné suspenze (na stanovení) se vlije do zkumavek do odstředivky o objemu 15 ml. Buňky se odstředěním zformuji do pelet. Do každé zkumavky se přidají 3 ml příslušného prostředku (naředěného na 50 μΜ v mediu EMEM). Také se zahrnuly kontroly příslušných vehikul,

4· · 44 44

444 ♦ ♦· · « 4 4 4 4 4 4 • 9

4 4

4 4 4 4 4

4 444 4* · · pozitivní kontrola (87MEM1 naředěna na 100 pg/ml) izotopová kontrola (IgG2a, naředěno na 100 pg/ml) se inkubují 30 minut při 37 °C.

a

Zkumavky

0,5 ml alikvotů buněk se zasadí na sterilní dentinové řezy na plotně se 48 jamkami a inkubuje 2 hodiny při 37 °C. Každé provedení se čtyřnásobně sleduje. Řezy se promyjí v šesti výměnách teplého PBS (10 ml na jamku na plotně o 6 jamkách) a potom se umístí do čerstvého prostředku nebo kontroly a inkubuje se 48 hodin při 37 °C. Řezy se potom promyjí roztokem chloridu sodného pufrovaným fosfátem a 5 minut fixují ve 2% glutaraldehydu (ve 0,2M kakodylatu sodném), po čemž se promyjí ve vodě a 5 minut inkubují v pufru při 37 °C. Řezy se potom promyjí ve studené vodě a inkubují se 5 minut ve studeném octanovém pufru/stálé granátové červeni při 4 °C. Nadbytečný pufr se odsaje a po promytí vodou se řezy usuší na vzduchu.

Světelným mikroskopem se spočítají TRAP pozitivní osteoklasty a potom se odstraní z povrchu dentinu ultrazvukem. Objemy prohlubní se stanoví za použití konfokálního mikroskopu Nikon/Lasertec ILM21W.

Příklady provedení vynálezu

V následujících příkladech syntézy, pokud není uvedeno jinak, byly veškeré výchozí materiály získány z komerčních zdrojů. Má se za to, že bez dalšího zpracování může odborník v oboru za použití předcházejícího popisu využít předložený vynález v jeho plné šíři. Tyto příklady jsou uvedeny k ilustraci vynálezu, nikoli k omezení jeho rozsahu. Odkazuje se na patentové nároky v tom, co je níže vyhrazeno pro původce.

Příklad 1

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(3,4-methylendioxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

a) trans-4-Azido-3-hydroxytetrahydrofuran

3,4-Epoxytetrahydrofuran (9 g, 105 mmol) se přidá k míchanému roztoku azidu sodného (27 g, 415 mmol) a chloridu amonného (9 g, 159 mmol) ve vodném methanolu (95%, 200 ml) . Reakční směs se 20 hodin zahřívá na 75 °C a míchá. Reakční směs se ochladí, zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku. Odparek se naředí vodou a extrahuje se ethylacetatem, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se získal sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bezbarvý olej, 10 g, výtěžek 74 %.

kH NMR delta (CDC1₃) 4,32 (m, 1H) , 4,09 (dd, 1H, J = 4,8,

9,9	Hz) ,	3,99	(dd,	1H, J = 4,3, 10,1	Hz) 3,94	(m,	1H) ,
3,81	(dd,	1H,	J =	2,1, 9,9 Hz), 3,73	(dd, 1H,	J =	1,8,
10,1	Hz) ,	2,72	(d,	1H, J = 4,6 Hz) .

b) Hydrochlorid trans-4-amino-3-hydroxytetrahydrofuranu

Směs trans-4-azido-3-hydroxytetrahydrofuranu (10 g, 77 mmol) a 10% palladia na uhlí (1 g) v ethanolu (150 ml) se 12 hodin míchá ve vodíkové atmosféře (249,29 kPa). Směs se zfiltruje a vystaví působení 100 ml ethanolické HCl, aby se po odpaření za sníženého tlaku získala sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako hnědá tuhá látka, 10,5 g, 97% výtěžek, teplota tání 132 °C.

9· *99 9

9 9 ·

Ή NMR delta (d₆DMSO) 8,37 (s, 3H), 4,13 (m, 1H), 3,84 (dd, 1H, J = 4,9 a 14,3 Hz), 3,76 (dd, 1H, J = 5,5, 10,0 Hz), 3,58 (dd, 1H, J = 2,7, 10,0 Hz), 3,34 (m, 3H).

c) trans-4-(R,S)-amino-N-[(terč.-butoxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran

Trimethylacetylchlorid (3,5 ml, 29 mmol) se přidá k míchanému roztoku N-Boc-L-leucinu (7,3 g, 31 mmol) a diisopropylethylaminu (9 ml, 52 mmol) v dichlormethanu (200 ml) . Za 1 hodinu se přidá hydrochlorid trans-4-amino-3-hydroxytetrahydrofuranu (4 g, 28 mmol) a tato směs se nechá míchat přes noc. Reakční směs se vlije do vody a extrahuje se dichlormethanem. Spojené organické vrstvy se promyjí 0,5N HCl, nasyceným roztokem uhličitanu sodného, roztoku chloridu sodného a vysuší se. Odpařením za sníženého tlaku se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako žlutá pěna, 5 g, 44% výtěžek.

Ή NMR delta (CDC1₃) 8,08 (d, 0,5 H, J = 4,8 Hz), 7,89 (d, 0,5H, J = 7,4 Hz), 6,20 (d, 0,5H, J = 8,3 Hz), 6,09 (delta, 0,5H, J = 8,7 Hz), 4,81 (d, 1H, J = 16,0 Hz), 4,40 (m, 2H), 4,20 (m, 2H), 3,77 (m, 2H), 1,60 (m, 3H), 1,50 (s, 9H), 0,92 (m, 6H) .

d) Sůl trans-4-(R,S)-amino-N-(S-leucin)-3-hydroxytetrahydrofuranu s TFA, trans-4-Amino-N-[(terč.-butoxykarbonyl)-S-leucin] -3-hydroxytetrahydrofuran (2,5 g 8,0 mmol) se přidá k míchanému roztoku 20% kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu (100 ml). Po 2 hodinách se reakční směs odpaří za • •9 9 99 · 99 99 • 9 9 9 9 · 9 9 ·

9 9 9 9999 ·· 999 9999

999 9 99 999 99 99 sníženého tlaku, aby se získala sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá guma 2,6 g, 100% výtěžek.

^XH NMR delta (MeOD) 4,18 (m, 2H) , 4,08 (m, 2H) , 3,97 (m,

2H) , 3,86 (zřejmý t, 2H, J = 7,1 Hz) 3,69 (dd, 2H, J = 1,6, 7,4 Hz) , 1, 68 (m, 3H), 0,99 (d, 6H, J = 2,1 Hz) .

e) trans-4-(R,S)-Amino-N-[(3,4-methylendioxybenzoyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran

Piperonyloylchlorid (400 mg, 2,2 mmol) se přidá k míchanému roztoku soli trans-4-amino-N-(S-leucin)-3-hydroxytetrahydrofuranu s TFA (380 mg, 1,1 mmol) v nasyceném roztoku hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a 1,4-dioxanu (10 ml). Reakční směs se nechá 1 hodinu míchat a potom se naředí etherem. Organická vrstva se promyje IN kyselinou chlorovodíkovou, hydrogenuhličitanem sodným, roztokem chloridu sodného a vysuší se. Odpařením rozpouštědla se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá pěna, 250 mg, 60% výtěžek.

Ή NMR delta (CDC13	) 8,23 (d, 0,	5H, J = 4,8	Hz) ,	8,15	(d,
0,5H,	J = 7,4 Hz)	, 7,85 (d, 0,	5H, J = 7,6	Hz) ,	7,3	(m,
2H) ,	6,66 (dd, 1H,	J = 8,1, 11,	5 Hz), 5,92	(d,	2H, J	= 6,2
HZ) ,	4,78 (m, 1H),	4,50 (s, 1H)	, 4,2 (s, 1H), 4	,08-3	,75 (m
4H) ,	3,74-3,48 (m,	3H), 1,82-1,	48 (m, 3H) ,	0, 90	(m,	6H) .
MS vy	'počítané pro	(C18H24N2O5+ H) +	: 365, nalez	eno:	365.

f) 4-(R,S)-amino-N-[(3,4-methylendioxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on

Dess-Martinův perjodinan (500 mg, 1,2 mmol) se

přidá k míchanému roztoku trans-4-(R,S)-amino-N— [ (3,4-methylendioxybenzoyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuranu (220 mg, 0,60 mmol) v dichlormethanu (10 ml). Po 1 hodině se přidá ether a potom thiosíran sodný (570 mg, 3,6 mmol) . Po dalších 15 minutách se reakční směs promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, roztokem chloridu sodného a vysuší se. Odpařením rozpouštědla se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá pěna, 200 mg, 100% výtěžek.

XH	NMR delta (CDC13)	8,14 (d, 0,5H, J = 6,2	Hz) ,	7,90	(d,
o,	5H, J = 5,9 Hz),	7,54 (d, 0,5H, J = 7,3	Hz) ,	7,46	(d,
o,	5H, J = 5,1 Hz), 7	,23 (d, 1H, J = 6,6 Hz)	7,	14 (s,	1H) ,
6,	67 (m, 1H), 5,93	(s, 2H) , 4,73 (m, 1H),	4,37	-3,71	(m,
5H	), 1,68 (m, 3H),	0,85 (m, 6H).
MS	vypočítané pro (C	18H22N2O6+ H)+: 363, nalez	eno:	363.

Příklad 2

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(3,4-dichlorbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu l(e-f), s tím rozdílem, že místo piperonyloylchloridu se použije 3,4-dichlorbenzoylchlorid se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

^XH NMR delta (MeOD) (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,75 (dd, 1H, J = 2,0, 8,3 Hz), 7,61 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 4,60 (m, 1H) , 4,50-3,84 (m, 5H), 1,66 (m, 3H), 1,00 (m, 6H).

• 9

- 50 MS vypočítané pro (C₁₇Cl₂H₂₀N₂O₄+ H)⁺: 387 a 389, nalezeno: 387 a 389.

Příklad 3

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(2-chinolinkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu l(e-f), s tím rozdílem, že místo piperonyloylchloridu se použije 2-chinolinkarbonylchlorid, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá pěna.

Ή NMR delta (CDC1₃) 8,57 (dd, 1H, J = 1,5, 5,1 Hz), 8,20 (m, 3H), 7,77 (m, 2H), 7,62 (m, ÍH), 7,40 (d, ÍH, = 6,2 Hz), 4,80 (m, ÍH), 4,57 (m, ÍH), 4,30 (m, ÍH), 4,26-3,87 (m, 3H), 1,96-1,71 (m, 3H), 1,0 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₂₀H₂₃N₃O₄+ H)⁺: 370, nalezeno: 370.

Příklad 4

Příprava 4- (R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu 1, s tím rozdílem, že místo N-BOC-leucinu se použije N-CBZ-leucin, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá pěna.

^XH NMR delta (CDC1₃) 7,31 (m, 5H) , 5,71 (zřejmě dd, ÍH, J = 8,4, 14,8 Hz), 5,06 (m, 2H), 4,50 (dd, 1H, J = 8,9, 18,0 Hz), 4,30-3,88 (m, 4H), 3,80 (zřejmě t, ÍH, J = 9,6 Hz),

9 9

• 9 99 · 9 * · • · · 9 · · · ·· ····· 9 • · · » · · · *9 999 99 99

- 51 1,64 (m, 3H) , 0,91 (m, 6H) .

MS vypočítané pro (C₁₈H₂₄N₂O₅+ H)⁺: 349, nalezeno: 349.

Příklad 5

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[ (3,4-methylendioxybenzoyl) -S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu 1, s tím rozdílem, že místo piperonyloylchloridu se použije 3,4-methylendioxybenzoylchlorid, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Příklad 6

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(8-chinolinkarbonyl)-S-leucin] tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu l(e-f), s tím rozdílem, že místo piperonyloylchloridu se použije 8-chinolinkarbonylchlorid, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá pěna. Teplota tání: 123 °C (HCI sůl).

¹H NMR delta (CDC1₃) 11,54 (m, IH) , 8,84 (d, IH, J = 1,5 Hz), 8,65 (d, IH, J = 7,2 Hz), 8,17 (d, IH, J = 8,0 Hz),

7,86 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,7 (s, IH), 7,54 (t, IH, J =

7,7 Hz), 7,40 (dd, IH, J = 3,8, 7,7 Hz), 4,78 (dd, IH, J =

7,5, 13,6 Hz), 4,47 (dd, IH, J = 8,6, 13,6 Hz), 4,18 (m,

IH) , 4,16-3,79 (m, 3H), 1,88 (m, 3H), 0,88 (m, 6H).

·

- 52 MS vypočítané pro (C₂₀H₂₃N₃O₄+ H)⁺: 370, nalezeno: 370.

Příklad 7

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(8-chinolinsulfonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu 1(e-f), s tím rozdílem, že místo piperonyloylchloridu se použije 8-chinolinsulfonylchlorid, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako hnědá tuhá látka. Teplota tání: 98 °C (HC1 sůl) .

^XH NMR delta (CDC1₃) 9,07 (dd, 1H, J = 1,7 a 4,3 Hz), 8,40 (m, 1H), 8,30 (m, 1H), 8,00 (m, 1H), 7,66 (m, 2H), 7,11 (d, 0,5H, J = 5,9 Hz), 6,96 (d, 0,5H, J = 5,7 Hz), 4,51 (t, 0,5H, d = 8,8 Hz), 4,39 (t, 0,5H, J = 8,7 Hz), 4,12-3,71 (m, 4,5H), 3,53 (dd, O,5H, J = 1,0, 5,9 Hz), 1,43 (m, 2H) , 0,64 (m, 3H) , 0,33 (m, 3H) .

MS vypočítáno pro (C₁₉H₂₃N₃0₅S+ Η)⁺: 406, nalezeno: 406.

Příklad 8

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[((4-methyl-3-pyridyl)karbonyl) -S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu l(e-f), s tím rozdílem, že místo piperonyloylchloridu se použije (4-methyl-3-pyridyl)karbonylchlorid, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

* « ··· ·

- 53 Příklad 9

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin] -2,2-dibenzyltetrahydrofuran-3-onu

K míchanému roztoku 4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu (300 mg, 0,9 mmol) a benzylbromidu (0,4 ml, 3,4 mmol) v methanolu (5 ml) se přidá methoxid sodný (140 mg, 2,6 mmol) . Po 12 hodinách se reakční směs vlije do etheru (100 ml), promyje se vodou, roztokem chloridu sodného a vysuší se. Odpařením za sníženého tlaku a vyčištěním bleskovou sloupcovou chromatografií (30% ethyl-acetat-hexan) se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bezbarvá gumovitá látka, 250 mg, 55% výtěžek.

XH NMR delta	(CDC13) 7,34-7,25	(m, 10H),	7,24-7,0	(široký s
5H), 6,56 (s,	0,5H), 6,37 (s,	0,5H), 5,18	(d, 1H,	J = 11,5
Hz), 5,07 (m,	2H), 4,48-4,42	(m, 1H), 4,	20-3,98	(m, 4H),
3,12 (dd, 1H,	J = 12,5 a 1,25	Hz), 2,88	(dd, 1H,	J = 12,5
a 12,5 Hz), 1	,72-1,32 (m, 3H)	, 0,92-0,76	(m, 6H)

f

MS vypočítané pro (C₃2H3₆N₂0₅ = C₇H₇)⁺: 439, zjištěno: 439.

Příklad 10

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl) -S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu l(e-f), s tím rozdílem,

•	··· ·	·« ·	·«	··
• ·	•	•		•	··	•	•	•	•
•	•	•		•	•	•	•	•	•
•	• 4								•
•	•	•		•	•	•	•	e	•
···	•		··		• · ·	• ·			• ·

- 54 že místo piperonyloylchloridu se použije benzo[b]thiofen-2-ylkarbonylchlorid, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

^XH NMR delta (CDC1₃) 8,33 (d, ÍH) , 7,78 (m, 4H), 7,38 (m, (m, 5H), 1,88 (m, 3H), 1,00

0,5H, J = 6,6 Hz], 8,00 (m, 2,5H), 4,87 (m, ÍH), 4,63-3,88 (m, 6H) .

MS vypočítané pro ( c₁₉h₂₂n₂o₄s

H)⁺: 373, nalezeno: 373.

Příklad 11

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(3,4-dimethoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu dle postupu z příkladu l(e-f), s tím rozdílem, že místo piperonyloylchloridu se použije 3,4-dimethoxybenzoylchlorid, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή NMR delta (CDC1₃) 7,58 (d, 0,5H, J = 6,7 Hz), 7,47 (d,

0,5H, J = ,6,2Hz), 7,33 (m, 2H) , 7,04 (d, 0,5H, J = 8,0 Hz), 6,92 (d, 0,5H, J = 8,0 Hz), 6,83 (d, 0,5H, J = 8,4 Hz),

4,77 (m, ÍH), 4,53-3,67(m, 5H), 1,68 (m, 3H), 0,85 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₆N₂0₆ - H)⁺: 377, nalezeno: 377.

Příklad 12

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(indol-6-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu • **·> ** ·· r · · « « · · • · · · · • · · · ·· · · ·· • ·<· ·· «· · · · « • · · « · • · · · · « • · · · · ·«· ·* ··

Podle postupu z příkladu l(e-f), s tím rozdílem, že místo piperonyloylchloridu se použije indol-6-ylkarbonylchlorid, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

^XH NMR delta (d₆ DMSO) 8,57-7,48 (m, 7H) , 6,43 (s, 1H) , 4,48-3,55 (m, 6H) , 1, 80-1,48 (m, 3H), 0,98-0,82 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₃N₃O₄ - H)⁺: 356, nalezeno: 356.

Příklad 13

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(benzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu l(e-f), s tím rozdílem, že místo piperonyloylchloridu se použije benzofuran-2-ylkarbonylchlorid, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή	NMR delta (CDC13)	8,00-7,25 (m,	7H), 4,90-4,78	(m,	1H) ,
4,	53-4,48 (m, 1H) ,	4,38-4,21 (m,	1H), 4,25-3,92	(m,	3H) ,
1,	88 (m, 3H), 1,68	(m, 3H), 0,97	(m, 6H) .

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₂N₂O₅ - H)⁺: 357, nalezeno: 357.

Příklad 14

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(5-aminobenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl) -S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu l(e-f), s tím rozdílem, φ · φ · φ ·»

- 56 že místo piperonyloylchloridu se použije 5-aminobenzo [b] thiofen-2-ylkarbonylchlorid, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή NMR delta	(CDC13)	8,00-7,71 (m, 1H), 7,60 (d, 1H, J=
Hz) ,	7,53 (dd	., 1H,	J =	8,5 a 4,0 Hz) ,	7,47-6,74 (m,	3H) ,
4,77	(m, 1H),	4,43	(m,	1H), 4,38-3,50	(m, 4H), 1,77	(m,
3H) ,	0,85 (m,	6H) .

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₃N₃O₄S + H)⁺: 390, nalezeno: 390.

Příklad 15

Příprava cyklických alkoxyketonů syntézou na pevné látce

a) 3-trans-Hydroxy-4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuran

Benzylchlorformiat (20 ml) se po kapkách přidává k míchanému roztoku trans-4-amino-3-hydroxytetrahydrofuranu (5 g, 20,6 mmol) v dioxanu (100 ml) obsahujícímu 10% vodný roztok uhličitanu sodného (200 ml). Po 3 hodinách se směs odpaří, aby se odstranil dioxan a potom se extrahuje EtOAc. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, roztokem chloridu sodného a vysuší se (MgSOJ . Odpařením za sníženého tlaku a vyčištěním odparku sloupcovou chromatografií se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílé krystaly, 8,00 g, 70% výtěžek.

Ή NMR delta (CDC1₃) 7,35 (s, 5H) , 5,30 (s, 2H) , 4,91 (široký s, 1H), 4,32 (široký s, lH), 4,12-4,00 (m, 3H),

3,71-3,62 (m, 2H), 2,72 (s, 1H).

- 57 b) 4-Benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuran-3-on

Roztok bělícího činidla (100 ml) obsahující hydrogenuhličitan sodný (7,34 g) se po kapkách přidá k rychle míchané směsi 3-hydroxy-4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuranu (21 g, 88 mmol), bromidu sodného (9,4 g), TEMPO (50 mg) v EtOAc (140 ml), toluenu (140 ml) a vody (40 ml). Poté, co se vyvinula přetrvávající oranžová barva, se směs extrahuje EtOAc a spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, roztokem chloridu sodného a vysuší se (MgSOJ . Odpařením za sníženého tlaku a vyčištěním odparku sloupcovou chromatografií se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílé krystaly, 18 g, 87% výtěžek.

^XH NMR delta (CDC1₃) 7,35 (s, 5H) , 5,30 (s, 1H) , 5,11 (s,

2H) , 4,70 (zřejmý t, 1H, J = 8,9 Hz), 4,36-4,17 (m, 2H), 3,96-3,76 (2H).

c) 3,3-Dimethoxy-4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuran

Trimethylorthoformiat (29 ml) se po kapkách přidá k roztoku 4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuran-3-onu (18g, 78 mmol) a PTSA (500 mg) v MeOH (100 ml) udržovanému při zpětném toku. Po 3 hodinách se reakční směs zfiltruje a odpaří, aby se po sloupcové chromatografií získala sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako žlutý olej, 16,2 g, 76% výtěžek.

^XH NMR delta (CDC1₃) 7,35 (s, 5H) , 5,30 (s, 1H) , 5,11 (s,

2H) , 4,70 (zřejmý t, 1H, J = 8,9 Hz), 4,36-4,17 (m, 2H) , 3,96-3,76 (2H).

* · • · t · >·· ·· • * ϊ • ϊ ί • ♦ * ·

- 58 d) 3,3-Dimethoxy-4-amino-tetrahydrofuran

Směs 3,3-dimethoxy-4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuranu (16 g, 57 mmol) a 10% palladia na uhlí (2 g) v ethanolu (200 ml) se ve vodíkové atmosféře (351,85 kPa) 12 hodin míchá. Směs se zfiltruje a odpaří, aby se získala sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako žlutý olej, 8 g, 100% výtěžek.

^XH NMR delta (CDC1₃) 7,04 (s, 5H) , 4,22-4,04 (m, 5H) , 3,83-3,69 (m, 2H), 3,36 (s, 3H), 3,33 (s, 3H).

e) SPS za použití Ellmanova linkeru

Krok A:

Triacetoxyborohydrid sodný (10 ekvivalentů) se přidá k míchanému roztoku Ellmanovy pryskyřice (odkaz: C.G. Boojamra, K.M. Burow, L.A. Thompson a J.A. Ellman, J. Org. Chem., 62, 1240 (1997)) v DMF obsahujícím 1 % HOAc. Po 5 minutách se přidá methylester alfa-aminokyseliny (10 ekvivalentů) a směs se 1 hodinu protřepává. Pryskyřice se pak promyje DMF (7x), CH₂C1₂ (7x), etherem (2x) a suší se do konstantní hmotnosti.

Krok B:

Ke směsi výše uvedené pryskyřice, karboxylové kyseliny (10 ekvivalentů) a EDC (10 ekvivalentů) se přidá NMP. Směs se potom 3 hodiny protřepává a potom se promyje DMF (3x), CH₂Cl₂(3x), MeOH (2x) a etherem (2x) . Pryskyřice se potom znovu vystaví výše uvedeným reakčním podmínkám a φφ • · • * • · • · • ·

- 59 po 3 hodinách se znovu promyje.

Krok C:

K protřepávané směsi výše uvedené pryskyřice v THF se přidá trimethylsilanoat draselný (10 ekvivalentů).

Po 18 hodinách se pryskyřice promyje 5% kyselinou citrónovou v THF (2x) , THF (2x) , THF-H,0 (2x) , H₂0 (2x) , THF-H₂O (2x) a nakonec THF (2x) .

Krok D:

Ke směsi výše uvedené pryskyřice a EDC (3 ekvivalenty) se přidá 3,3-dimethoxy-4-aminotetrahydrofuran (3 ekvivalenty). Po 3 hodinách se pryskyřice promyje DMF (7x), CH₂C1₂ (7x) a etherem (2x). Pryskyřice se potom znovu na 3 hodiny vystaví reakčním podmínkám a potom se znovu promyje jak je uvedeno výše.

Krok E: Štěpení

Směs TFA/CH₂C1₂/H₂O v poměru 7:2:1 se přidá k výše uvedené pryskyřici. Po 2 hodinách se směs zfiltruje a pryskyřice se dále promyje CH₂C1₂. Odstraněním rozpouštědla se získá požadovaný tetrahydrofuran-3-on.

Příklad 16

Příprava 4-(R, S)-amino-N-[(5-chlorbenzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle obecných detailů z příkladu 15, za použití • ·

- 60 příslušného methylesteru aminokyseliny a karboxylové kyseliny jako reagencií konsistentních s konečným produktem, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

^XH NMR delta (CDC1₃) 7,62-7,05 (m, 6H) , 4,81-4,64 (m, 1H) , 4,62-4,54 (m, 1H), 4,43-3,81 (m, 4H), 1,90-1,60 (m, 3H), 1,08-0,81 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₁N₂O5C1 + H)⁺: 393, nalezeno: 393.

Příklad 17

Příprava 4- (R, S)-amino-N-[(5-methoxybenzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle obecných detailů z příkladu 15, za použití příslušného methylesteru aminokyseliny a karboxylové kyseliny jako reagencií konsistentních s konečným produktem, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή NMR delta (CDC1₃) 7,65-6, 84 (m, 6H) , 4,83-4,54 (m, 1H) , 4,53-4,48 (m, 1H) , 4,46-3,68 (m, 4H), 1, 90-1, 62 (m, 3H),

1,08-0,81 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₂₀H₂₄N₂0₆ + H)⁺: 389, nalezeno: 389.

Příklad 18

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(4-brombenzoyl)-S-leucin]tetrahydrof uran-3 -onu

Podle obecných detailů z příkladu 15, za použití • · • * · • · « • · »

- 61 příslušného methylesteru aminokyseliny a karboxylové kyseliny jako reagencií konsistentních s konečným produktem, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή NMR delta (CDC1₃) 7,64 (zřejmý d, 2H, J (zřejmý d, 2H, J = 8,5 Hz), 4,81-4,67 (m, (m, 1H) , 3,36-4,19 (m, 1H) , 4,18-3,78 (m, (m, 3H), 1,05-0,80 (m, 6H).

= 8,5Hz), 7,60 1H), 4,62-4,48 3H), 1,81-1,59

MS vypočítané pro (CiYHjiNjO^Br)

397, nalezeno: 397.

Příklad 19

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(4-brombenzoyl)-S-leucin]tetrahydrof uran-3 -onu

Podle obecných detailů z příkladu 15, za použití příslušného methylesteru aminokyseliny a karboxylové kyseliny jako reagencií konsistentních s konečným produktem, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή	NMR delta	(CDC13)	7,91 (m,	1H)	, 7,76-7,59 (m,	2H)	/
7,	39-7,18	(m,	1H) ,	7,04-6,89	(m,	1H), 7,84-6,68	(m,	1H) ,
4,	89-4,68	(m,	1H) ,	4,66-4,5 6	(m,	1H) , 4,27-3,76	(m,	4H) ,
1,	88-1,68	(m,	3H) ,	1,03-0,78	(m,	6H) .

MS vypočítané pro (C₁₇H₂₁N₂O₄Br)⁺: 397, nalezeno: 397.

Příklad 20

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(5-chlorbenzo[b]thiofen-2·· « • · • · • ·

• ·

- 62 -ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle obecných detailů z příkladu 15, za použití příslušného methylesteru aminokyseliny a karboxylové kyseliny jako reagencií konsistentních s konečným produktem, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή NMR delta (CDC1₃) 4,81 (široký d, 1H, 8,8 Hz), 4,43-4,30 (m, 3H), 1,05-0,82

7,88-7,67 (m, 5H), 7,48-7,38 (m, 1H), J = 6,7 Hz), 4,60 (zřejmý t, 1H, J = (m, 1H), 4,28-3,84 (m, 3H), 1,86-1,62 (m, 6H) .

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₁N₂O₄SC1 - H)⁺: 408, nalezeno: 408.

Příklad 21

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(4-fluorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyi)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle obecných detailů z příkladu 15, za použití příslušného methylesteru aminokyseliny a karboxylové kyseliny jako reagencií konsistentních s konečným produktem, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή NMR delta (CDC1₃) 7,96 (s, 1H) , 7,68-7,58 (m, 2H) , 7,48-7,32 (m, 1H), 7,06 (dd, 1H, J = 9,0 Hz a 9,0 Hz), 4,89-4,72 (m, 1H) , 4,65-4,55 (zřejmý t, 1H, J = 8,8 Hz), 4,35 (zřejmý q, 1H, J = 8,2 Hz), 4,28-3,82 (m, 3H), 1,88-1,62 (m, 3H), 1,05-0,82 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₁N₂O₄SF + H)⁺: 393, nalezeno: 393.

• 4

- 63 Příklady 22 až 66

Příprava cyklických alkoxyketonů

Postupy analogickými těm, které byly popsány bud v příkladu 1 nebo v příkladu 15, za použití příslušné aminokyseliny a kyseliny nebo chloridu kyseliny jako reagencií konsistentních s konečnými produkty, se připraví sloučenina z tabulky 1. Ή NMR spektra a/nebo hmotnostní spektra byly konsistentní se strukturami v tabulce 1.

Tabulka 1

Příklad	R3	R postup	syntézy
22	Λ	3,4-difluorfenyl	roztok
23	1 »1	4-benzylpiperidin-l-yl	roztok
24	H	4-benzylpiperazin-l-yl	roztok
25	rr	4- (3,4-methylendioxybenzyl) piperazin-l-yl	roztok
26	π	4-(terč.-bytoxykarbonyl)- piperazin-l-yl	roztok
27	v*	piperazin-l-yl	roztok
28	K	benzimidazol-5-yl	roztok
29	IV	6-chinolyl	roztok
30	ff	5-indolyl	roztok

Φ Φ 9 · • · · * • · 9 ·

9 9 9 · • · · · • Φ ··

- 64 Tabulka 1 - pokračování

Příklad	R3	R postup	syntézy
31	II	2-naftyl	roztok
32	VI	2-pyridyl	roztok
33	II	4-benzyloxyfenyl	roztok
34	IV	3-benzyloxyfenyl	roztok
35	II	4-hydroxyfenyl	roztok
36	II	5-nitrobenzo[b]thiofen-2-yl	roztok
37	II	2-(thien-2-yl)ethen-l-yl	roztok
38	II	4-methoxyfenyl	SPS
39	II	3-methoxyfenyl	SPS
40	IV	7-ethoxybenzofuran-l-yl	SPS
41	II	5-nitrobenzofuran-l-yl	SPS
42	II	4-(2-methoxyfenyl)fenyl	SPS
43	IV	3-(2-methoxyfenyl)fenyl	SPS
44	II	4-kyanfenyl	SPS
45	II	3-nitrofenyl	SPS
46	IV	3-(dimethylaminoethyl)-4- -methoxyfenyl	SPS
47	tl	2- (2-chlorfenyl)ethen-l-yl	SPS
48	II	4-trifluormethoxyfenyl	SPS
49	IV	4-methansulfonylfenyl	SPS
50	II	4-jodfenyl	SPS
51	II	4-chlorbenzo[b]thiofen-2-yl	SPS
52	11	5,6-dimethoxybenzo[b]thiofen-2-yl	SPS
53	IV	5,6-methylendioxybenzo[b]- thiofen-2-yl	SPS
54	11	7-chlorbenzo[b]thiofen-2-yl	SPS

- 65 Tabulka 1 -pokračování

Příklad	R3	R	postup syntézy
Ph
55		benzo[b]thiofen-2-yl	SPS
56	II	2-thienyl	SPS
57	II	3,4-dimethoxyfenyl	SPS
58	II	4-bromfenyl	SPS
59	II	chinolin-2-yl	SPS
60 /		2-thienyl	SPS
61 S	II	ch3	SPS
62 \	λ	benzo[b]thiofen-2-yl	SPS
63	II	2-thienyl	SPS
64	II	3,4-dimethoxyfenyl	SPS
65	II	4-bromfenyl	SPS
66	II	chinolin-2-yl	SPS

Příklad 67

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-onu

a) Hydrochlorid trans-4-amino-3-hydroxytetrahydropyranu

Podle postupu z příkladů 1 (a) a 1 (b), s tím • ·

- 66 rozdílem, že místo 3,4-epoxytetrahydrofuranu se použije 3,4-epoxytetrahydropyran, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

b) trans-4-(R,S)-amino-N-[ (benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran

Pivaloylchlorid (5,28 ml, 43 mmol) se přidá k roztoku N-karbobenzyloxy-L-leucinu (12,48 g, 47 mmol) v dichlormethanu (300 ml). Po 1 hodině se přidá směs hydrochloridu trans-4-amino-3-hydroxytetrahydropyranu (6 g, 39 mmol) a triethylaminu (10,8 ml, 79 mmol) v dichlormethanu (100 ml) a směs se nechá přes noc míchat. Reakční směs se promyje IN HCl, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysuší se. Odpařením za sníženého tlaku se získá světlý olej. Vyčištěním chromatografii (eluent ethylacetat/hexan) se získá trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran jako bílá pasta, 5,5 g, 39% výtěžek.

^;H NMR delta (CDC1₃) 7,35 (s, 5H) , 5,0 (m, 3H) , 4,16-3,89 (m, 4H), 3,44-3,36 (m, 2H), 3,13 (t, 1H) 1,84-1,53 (m,

2H), 1,28-1,22 (m, 3H), 0,93 (m, 6H).

c) 4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on

Podle postupu z příkladu l(f), s tím rozdílem, že místo 4-(R,S)-amino-N- [ (3,4-methylendioxybenzoyl)-Sleucin]-3-hydroxytetrahydrofuranu se použije 4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

• · • ·· ·

- 67 ^XH NMR delta (d₆DMSO) 8,15 (d, IH), 7,39-7,29 (m, 5H), 5,02 (d, 2H), 4,63 (m, IH), 4,14-4,10 (m, 2H), 3,97-3,83 (m,

3H), 2,10 (m, IH), 1,92 (m, IH), 1,61 (m, IH), 1,45 (m,

IH), 0,95 (m, 6H) .

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₆N₂0₅ + H)⁺: 363, zjištěno 363.

Příklad 68

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-onu

a) Hydrochlorid trans-4-(R,S)-amino-N-(S-leucin)-3-hydroxytetrahydropyranu

Směs 4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyranu (2,8 g, 7,75 mmol) a 10% paladia na uhlí (300 mg) v ethanolu (100 ml) se 12 hodin míchá ve vodíkové atmosféře (351,85 kPa). Směs se zfiltruje a působí se na ni etherickým HCI, aby po odpaření za sníženého tlaku vznikla sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako hnědá látka, 1,40 g, 68% výtěžek.

^XH NMR delta (CDC1₃) 8,30 (m, 2H) , 8,02 (m, IH) , 4,06-3,92 (m, 4H), 3,50-3,35 (m, 2H), 3,12 (t, IH), 1,89-1,54 (m,

2H) , 1,23 (m, 3H), 0,93 (m, 6H).

b) trans-4-(R,S)-Amino-N-[ (benzothiofen-2-karbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran

Benzothiofen-2-karbonylchlorid (442 mg, 2,25 mmol) se přidá k roztoku trans-4-(R,S)-amino-N-(S• · ♦ ·

- 68 -leucin)-3-hydroxytetrahydropyranu (133 mg, 0,5 mmol) vdioxanu (7 ml) a nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (7 ml). Po 30 minutách se reakční směs naředí ethylacetátem, organická vrstva se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se a odpaří za sníženého tlaku, aby se získala bílá tuhá látka. Vyčištěním chromatografií (ethylacetat/hexan eluent) se získá trans-4-(R,S)-amino-N- [ (benzothiofen-2-karbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran jako bílá tuhá látka, 160 mg, 84% výtěžek.

c) 4-(R,S)-Amino-N-[(benzothiofen-2-karbonyl)-Š-leucin]-tetrahydropyran-3-on

Podle postupu z příkladu l(f), s tím rozdílem, že místo 4-(R,S)-amino-N-[(3,4-methylendioxybenzoyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuranu se použije trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzothiofen-2-karbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

^XH NMR delta (CDC1₃) 7,84-7,76 (m, 2H) , 7,41 (m, 2H) , 7,05 (m, 1H), 4,83-4,61 (m, 2H), 4,18-3,77 (m, 4H), 2,73-2,53 (m, 1H), 1,98-1,75 (m, 2H), 1,26 (m, 3H), 0,92 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₂₀H₂₄N₂O₄S + H)⁺: 389, zjištěno 389.

Příklad 69

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(4-fenoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

- 69 Postupem analogickým tomu, který byl detailně popsán v příkladu 15, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή NMR delta (CDC1₃, 250 MHz) 7,74 (d, 2H, J = 10,9 Hz),

7,37 (dd, 2H, J = 7,7 a 7,7 Hz), 7,20 (dd, 1H, J = 7,5 a

7,5 Hz), 7,03 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 7,0 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 6,98-6, 82 (m, 2H) , 4,83-4,68 (m, 1H), 4,66-4,45 (m,

1H), 4,34-3,70 (m, 4H) , 1, 98-1, 54 (m, 3H), 1, 08-0,78 (m,

6H) .

MS vypočítané pro (C₂₃H₂₆N₂O₅ - H)⁺: 409, nalezeno: 409.

Příklad 70

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(4-fenylbenzoyl)-S-leucin] tetrahydrofuran-3-onu

Postupem analogickým tomu, který byl detailně popsán v příkladu 15, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή NMR delta (CDC1₃, 250 MHz) 7,83 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,70-50 (m, 4H), 7,48-7,32 (m, 4H), 7,30-7,12 (m, 1H),

6, 88-6, 72 (m, 1H) , 4,88-4,70 (m, 1H), 4,65-52 (m, 1H), 4,38-3,78 (m, 4H), 1,92-1,60 (m, 3H), 1,08-0,78 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₂₃H₂₆N₂0₄

H) ⁺

393, nalezeno: 393.

Příklad 71 • · ·::; ···· .:. : ·· .......

- 70 Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(6-trifluormethyibenzo[b]thiofen-2-yikarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Postupem analogickým tomu, který byl detailně popsán v příkladu 15, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

^XH NMR delta (DMSO, d₆, 250 MHz) 8,82 (d, 1H, J = 6,0 Hz),

8,43 (s,	1H) ,	8,48	-8,44 (m, 0,5H), 8	,34 (d, 0,5	H, J = 7,8
Hz), 8,23	(s,	1H) ,	8,04 (d, 1H, J =	8,4 Hz), 7,	60 (dd, 1H,
J = 1,5 a	8,5	Hz) ,	4,49-4,38 (m, 1H)	, 4,26-3,68	(m, 5H),
1,70-1,36	(m,	3H) ,	0,80 (d, 3H, J =	6 Hz) , 0, 76	(d, 3H, J
6,0 Hz)
MS vypočí	tané	pro	(C20H21F3N2O4S - H)+:	443, naleze	no: 443.

Příklad 72

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(4-ethyllbenzoyi)-S-leucín]tetrahydrofuran-3-onu

Postupem analogickým tomu, který byl detailně popsán v příkladu 15, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

XH NMR delta (CDC13,	250	MHz) 7,	76	(d,	2H, J = 8,0 Hz),
7,62-7,42 (m, 1H),	7,22	(d, 2H,	J	= 7	,8 Hz), 7,04-6,80 (m,
1H), 4,91-4,73 (m,	1H) ,	4,61-4,	45	(m,	1H), 4,36-3,72 (m,
4H), 2,68 (q, 2H,	J =	7,6 Hz) ,	1,	88-	1,58 (m, 3H), 1,23 (t,

3H, J = 7,6 Hz), 0,98-0,88 (m, 6H).

·< «« • «· · • · · · • · · · • · · · ·· ·· • · te · • · te · • · ·· tetete ·

- 71 MS vypočítané pro (C₁₉H₂₆N₂O₄ - H)⁺: 345, nalezeno: 345.

Příklad 73

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(4-(terč.-butyl)benzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Postupem analogickým tomu, který byl detailně popsán v příkladu 15, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

7,76 (široký d, 2H, J = 7,5 7,5 Hz), 6, 92-6, 76 (m, 2H) , (m, 1H), 4,37-3,71 (m, 4H), 9H), 1,00-0,82 (m, 6H).

Έ NMR delta (CDC1₃, 250 MHz) Hz), 7,46 (široký d, 2H, J = 4,88-4,68 (m, 1H), 4,58-4,43 1,82-1,57 (m, 3H), 1,32 (s,

MS vypočítané pro (C₂₁H₃₀N₂O₄ + H)⁺: 375, nalezeno: 375.

Příklad 74

Příprava 4- (R,S)-amino-N-[(5-methoxybenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Postupem analogickým tomu, který byl detailně popsán v příkladu 15, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ti NMR delta (CDC1₃, 250 MHz) 7,84-7,54 (m, 2H) , 7,20 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,10 (d, 1H, J = 2,3 Hz), 7,06 (d, 1H, J = 2,3 Hz), 6,78 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 4,82-4,68 (m, 1H, 4,59 (zřejmý t, 1H, J = 8,8 Hz), 4,49-3,61 (m, 4H),

- 72 3,84 (s, 3H) , 1,82-1,58 (m, 3H) , 1,08-0,72 (m, 6H) .

MS vypočítané pro (C₂₀H₂₄N₂O₅S - H)⁺: 403, nalezeno: 403.

Příklad 75

Příprava 4- (R, S)-amino-N-[(4-nitrobenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Postupem analogickým tomu, který byl detailně popsán v příkladu 15, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ti NMR delta (CDC1₃, 250 MHz) 8,31 (s, 1H) , 7,96 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 7,62-7,18 (m, 4H), 4,84 (zřejmý d, 1H, J = 7,5 Hz), 4,70-3,72 (m, 5H), 1,94-1,60 (m, 3H), 1,11-0,80 (m,

6H) .

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₁N₃O₆S - NO₂)⁺: 373, nalezeno: 373.

Příklad 76

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(6-brombenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Postupem analogickým tomu, který byl detailně popsán v přikladu 15, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ti NMR delta (CDC1₃, 250 MHz) 8,03 (s, 1H) , 7,81-7,58 (m, 2H), 7,54-7,40 (m, 1H), 7,22-6,98 (m, 2H), 4,74 (zřejmý d, ·· · β· *· * » · · φ · · · • · 9 · · · ·

9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 »» 9 9

- 73 1Η, J = 7,5 Hz), 4,59 (zřejmý q, 1H, J = 7,5 a 14,0 Hz), 4,48-3, 74 (m, 4H) , 1, 85-1,58 (m, 3H), 1,10-0,78 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₁BrN₂O₄S - H)⁺: 452, nalezeno: 452'

Příklad 77

Příprava 4-(R, S)-amino-N-[(5-brombenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Postupem analogickým tomu, který byl detailně popsán v příkladu 15, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή NMR delta (CDC1₃, 250 MHz) 8,04-7,90 (m, 1H) , 7,88-7,18 (m, 5H), 4,88-4,68 (m, 1H), 4,68-4,52 (m, 1H), 4,46-3,88 (m, 4H), 1,92-1,52 (m, 3H), 1,08-0,80 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₁BrN₂O₄S - H)⁺: 452, nalezeno: 452.

Příklad 78

Příprava

4-(R, S)-amino-N-[(6-methoxybenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Postupem analogickým tomu, který byl detailně popsán v příkladu 15, se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Ή NMR delta (CDC1₃, 250 MHz) 7,79-7,61 (m, 2H) , 7,32-7,14 • · · · φ ♦ · · φ φ φ e • · « iV • · • φ·φφ φφφ · * * φ

- 74 (m, 2Η), 7,00 (dd, 1Η, J = 1,5 a 8,8 Hz), 6,89-6,67 (m,

1H) , 4,75 ( zřejmý q, 1H, J = 8,2 a 16,2 Hz), 4,57 (zřejmý t, 1H, J = 8,6 a 17,4 Hz), 4,49-3,71 (m, 4H), 3,85 (s, 3H), 1,92-1,52 (m, 3H), 1,08-0,78 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₂₀H₂₄N₂O₅S - H)⁺: 403, nalezeno: 403.

Příklady 79 až 93

Postupy analogickými těm, které byly popsány v příkladu 15, za použití příslušné aminokyseliny a kyseliny a chloridu kyseliny jako reagencii konsistentních s konečným produktem, se také připraví sloučeniny z tabulky 2. ^XH NMR spektra a/nebo hmotnostní spektra byly konsistentní se strukturami v tabulce 2.

Tabulka 2

'0

4 4 4 4 · · · * * ·

4« 4 4444 4444

Λ 4 444 44«·

4 44 4 444 44 4 «44 4444 •444 44 4 4 4 44 44

Příklad	R3	R postup	syntézy
79	A	fenyl	SPS
80	1 u	3-chlorfenyl	SPS
81	IV	2-fenylethylen-l-yl	SPS
82	lf	3-fluorfenyl	SPS
83	lf	3-hydroxyfenyl	SPS
84	lf	4-methylfenyl	SPS
85	ff	4-isopropylfenyl	SPS
86	lf	4-trifluormethylfenyl	SPS
87	ff	4-methylthiofenyl	SPS
88	ff	4-(benzylsulfonylamino)fenyl	SPS
89	ff	4-(diethylaminosilfonyl)fenyl	SPS
90	ff	4-(acetylamino)fenyl	SPS
91	ff	4-benzoylfenyl	SPS
92	lf	4-acetylfenyl	SPS
93	ff	4-(4-oxopent-l-yl)fenyl	SPS

Příklad 94

Příprava 4-S-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu «··· ·· · ·· ·· • * · · · · ·· · • ··· · « « *

• · · ♦ ·· · · · ·» · ·

a) Hydrochlorid trans-4-S-amino-3-R-hydroxytetrahydrofuranu

Směs trans-4-S-azido-3-R-hydroxytetrahydrofuranu (odkaz L.E. Martinez, J.L. Leighton, D.E. Carsten a E.N. Jacobsen, J. Amer. Chem. Soc., 117, 5897 (1995)) (10 g, 77 mmol) a 10% palladia na uhlí (1 g) v ethanolu (150 ml) se 12 hodin míchá ve vodíkové atmosféře (351,85 kPa) . Směs se zfiltruje a vystaví se působení 100 ml ethanolické HCI, aby se po odpaření za sníženého tlaku získala sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako hnědá tuhá látka, 10,5 g, 97% výtěžek, teplota tání 132 °C.

Ή NMR delta (D₂0) 4,54-4,52 (m, 1H) , 4,24-4,13 (m, 2H) , 3,98-3,61 (m, 3H) .

(b) trans-4-S-amino-N- [ (benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran

Trimethylacetylchlorid (5,4 ml, 44 mmol) se přidá k míchanému roztoku N-Cbz-L-leucinu (12,7 g, 48 mmol) a triethylaminu (14 ml, 52 mmol) v THF (200 ml). Po 1 hodině se přidá hydrochlorid trans-4-S-amino-3-R-hydroxytetrahydrofuranu (5,58 g, 40 mmol) a směs se nechá 16 hodin míchat při zpětném toku. Reakční směs se zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku. Bleskovou sloupcovou chromatografií (80% ethylacetate-hexan) se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá pěna, 10,6 g, 76% výtěžek.

^XH NMR delta (CDC1₃) 7,76 (d, 1H, J = 5,3 Hz), 7,33-7,20 (m, 5 Η) , 6,43 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 5,01 (zřejmý d, 2H, J =

3,0 Hz), 4,60-3,65 (m, 6H), 1,61-1,42 (m, 3H), 0,93- 0,88 (m, 6H)

(c) Hydrochlorid trans-4-S-amino-N-(S-leucin)-3-R-hydroxytetrahydrofuranu

Směs trans-4-S-amino-N-[(karbobenzyloxy)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuranu (2,0 g, 5,7 mmol) a 10% palladia na uhlí (500 mg) v ethanolu (100 ml) se ve vodíkové atmosféře (351,85 kPa) 12 hodin míchá. Reakční směs se potom zfiltruje, zředí etherickou HC1 (100 ml, IM) a odpaří za sníženého tlaku, aby se získala sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá pěna, 1,5 g, 100% výtěžek.

²H NMR delta (D₂O) 4,20-4,05 (m, 2H) , 4,06-4,00 (m, 1H) , 3,90-3,83 (m, 2H) , 3,68-3,52 (m, 2H) , 1, 65-1,47 (m, 3H) , 0,86-0,78 (m, 6H).

(d) trans-4-S-amino-N-[(2-benzo(b)thiofenkarbonyl)-S-leucin-3-R-hydroxytetrahydrofuran

N, N-Diisopropylethylamin (0,4 ml, 2,0 mmol) se přidá k míchanému roztoku hydrochloridové soli trans-4-S-amino-N-(S-leucin)-3-R-hydroxytetrahydrofuranu (380 mg,

1,1 mmol) v dichlormethanu (10 ml). Po 5 minutách se přidá benzo[b]thiofen-2-karbonylchlorid (196 mg, 1,0 mmol) s směs se nechá 1 hodinu míchat, potom se odpaří za sníženého tlaku. Bleskovou sloupcovou chromatografií (40% aceton/hexan) se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá pěna, 271 mg, 75% výtěžek.

^XH NMR delta (d₆DMSO, 400 MHz) 8,72 (d, 1H, J = 8,5 Hz),

8,25 (s, 1H), 8,04 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,95 (d, 1H, J =

8,5 Hz), 7,46-7,43 (m, 2H), 5,23 (d, 1H, J = 3,94 Hz), 4,544,47 (m, 1H) , 4,03-4,00 (m, 2H), 3,90 (dd, 1H, J= 5,4 a 8,9 Hz), 3,82 (dd, 1H, J = 4,4 a 9,3 Hz), 3,53- 3,48 (m, • · ♦ ·

- 78 2H) , 1,72-1,66 (m, 2Η), 1, 52-1, 48 (m, 1Η), 0,91 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,88 (d, 3H, J = 6,4 Hz).

MS vypočítané pro (C₁₈H₂₄N₂O₅ + H)⁺: 365, nalezeno: 365.

(e) 4-S-amino-N- [ (2-benzo(b)thiofenkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on

Dess-Martinův perjodinan (200 mg, 0,5 mmol) se přidá k míchanému roztoku trans-4-S-amino-N-[(2-benzo(b) thiofenkarbonyl)-S-leucin-3-R-hydroxytetrahydrofuranu (150 mg, 0,40 mmol) v dichlormethanu (10 ml). Po 1 hodině se přidá ether (20 ml) a následuje thiosíran sodný (1 g) . Po dalších 15 minutách se reakční směs promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, roztokem chloridu sodného a vysuší se. Odpařením rozpouštědla se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá pěna, 147 mg, 100% výtěžek.

Ή NMR delta (d6 DMSO, 400 MHz) 8,82
8,	46 (d,	ÍH,	J =	4,0 Hz), 8,28 (s,
4,	0 Hz) ,	7,98 (d,	ÍH, J = 4,0 Hz) ,
4,	54-4,51	(m,	ÍH) ,	4,33-4,18 (m, 3H)
1,	74-1,67	(m,	2H) ,	1,58-1,56 (m, ÍH)
Hz), 0,88	(d,	3H,	J = 6,4 Hz).

(d, ÍH, J = 4,0 Hz),

ÍH), 8,05 (d, ÍH, J = 7,47-7,44 (m, 2H), , 4,08-3,80 (m, 3H), , 0,92 (d, 3H, J = 6,4

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₂N₂O₄- H)⁺:

373, nalezeno: 373.

Příklad 95

Příprava 4-R-amino-N- [ (2-benzo[b]thiofenkarbonyl)-S-leucinl]tetrahydrofuran-3-onu • ·

- 79 Podle postupu z příkladu 94 (a-e), ale s tím rozdílem, že se v postupu z příkladu 94 (a) vychází z trans-4-R-azido-3-S-hydroxytetrahydrofuranu (odkaz L.E. Martinez, J.L. Leighton, D.E. Carsten a E.N. Jacobsen, J. Amer. Chem. Soc. 117. 5897 (1995)), se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví ^XH NMR delta (d₆DMSO, 400 MHz) 8,82 (d, ÍH, J = 4,0 Hz),

8,52 (d, ÍH, J = 4,0 Hz), 8,28 (s, ÍH), 8,01 (d, ÍH, J =

4,0 Hz), 7,95 (d, ÍH, J = 4,0 Hz), 7,47-7,44 (m, 2H), 4,54-4,51 (m, ÍH), 4,33-4,18 (m, 3H), 4,33 (zřejmý t, 1H, J = 8,5 Hz), 4,22 (dd, ÍH, J = 8,7 a 16,0 Hz), 4,07 (zřejmý d, ÍH, J = 16,6 Hz), 3,90 (zřejmý d, ÍH, J = 16,6 Hz), 3,81 (zřejmý t, ÍH, J = 8,5 Hz), 1,74-1,67 (m, 2H), 1,58-1,56 (m, ÍH), 0,92 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,88 (d, 3H, J = 6,4 Hz) .

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₂N₂O₄ - H)⁺: 373, nalezeno: 373.

Příklad 96

Příprava 4-S-amino-N-[(2-naftoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu 94, za použití chloridu příslušné karbyxylové kyseliny a 4-azido-3-hydroxytetrahydrofuranu takové požadované stereochemie, aby byl konsistentní s konečným produktem, připraví se následující sloučenina.

^XH NMR delta (d₆ DMSO, 400 MHz) 8,64 (d, ÍH, J = 3,8 Hz),

9 9 9

- 80 8,54 (s, 1H) , 8,42 (d, ÍH, J = 3,8 Hz), 8,03 (d, ÍH, J =

3,8 Hz), 8,02-7,95 (m, 3H), 7,62-7,58 (m, 2H), 4,63-4,60 (m, ÍH), 4,35-4,27 (m, 2H), 4,08 (zřejmý d, ÍH, J= 16,8 Hz), 3,86 (zřejmý d, 1H, J = 16,8Hz), 3,82 (zřejmý t, 1H, J = 8,0 Hz), 1,75-1, 64 (m, 2H) , 1, 62-1, 55 (m, ÍH) , 0,92 (d, 3H, J = 6,0 Hz), 0,88 (d, 3H, J = 6,0 Hz).

MS vypočítané pro (C₂₁H₂₄N₂O₄ - H)⁺: 367, nalezeno: 367,

Příklad 97

Příprava 4-R-N-[(2-naftoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu 94, za použití chloridu příslušné karbyxylové kyseliny a 4-azido-3-hydroxytetrahydrofuranu takové požadované stereochemie, aby byl konsistentní s konečným produktem, připraví se následující sloučenina.

^XH NMR delta (d₆ DMSO, 400 MHz) 8,62 (d, ÍH, J = 3,8 Hz), 8,52 (s, ÍH), 8,50 (d, ÍH, J = 3,8 Hz), 8,04 (d, ÍH, J =

3,8 Hz), 8,02-7,95 (m, 3H), 7,62-7,58 (m, 2H), 4,63-4,60 (m, ÍH) , 4,32 (zřejmý t, ÍH, J = 8,8 Hz), 4,23 (ddd, ÍH, J = 8,8 a 16,0 Hz), 4,04 (zřejmý d, 1H, J = 16,4 Hz), 3,86 (zřejmý d, ÍH, J = 16,4 Hz), 3,81 (zřejmý t, ÍH, J = 8,0 Hz), 1, 75-1, 64 (m, 2H) , 1, 62-1, 55 (m, ÍH) , 0,92 (d, 3H, J = 6,0 Hz), 0,88 (d, 3H, J = 6,0 Hz).

MS vypočítané pro (C₂₁H₂₄N₂O₄ - H)⁺: 367, nalezeno: 367.

Příklad 98 • · · ·

- 81 Příprava 4-S-amino-N-[(chinolin-2-karbonyl)-S-leucin] tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu 94, za použití chloridu příslušné karbyxylové kyseliny a 4-azido-3-hydroxytetrahydrofuranu takové požadované stereochemie, aby byl konsistentní s konečným produktem, připraví se následující sloučenina.

Ή NMR delta (d₆DMSO, 400 MHz) 8,80 (d, ÍH, J = 9,0 Hz), 8,70 (d, ÍH, J = 6,9 Hz), 8,63 (d, ÍH, J = 8,5 Hz), 8,39 (d, ÍH, J = 2,5 Hz), 8,27 (d, ÍH, J = 2,5 Hz), 8,21 (d, ÍH, J = 7,9 Hz), 7,95 (zřejmý t, ÍH, J = 8,2 Hz), 7,77 (zřejmý t, ÍH, J = 7,1 Hz), 4,75-4,66 (m, ÍH), 4,41-4,26 (m, 2H), 4,16-3,79 (m, 3H), 1,82-1,63 (m, 3H), 0,97-0,88 (m, 6H).

MS vypčítané pro (C₂₀H₂₃N₃O₄ + H)⁺: 370, nalezeno: 370.

Příklad 99

Příprava 4-R-amino-N-[(chinolin-2-karbonyll-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu 94, za použití chloridu příslušné karbyxylové kyseliny a 4-azido-3-hydroxytetrahydrofuranu takové požadované stereochemie, aby byl konsistentní s konečným produktem, připraví se následující sloučenina.

Ή NMR delta (d₆DMSO, 400 MHz) 8,88 (d, ÍH, J = 9,0 Hz), 8,82 (d, ÍH, J = 6,7 Hz), 8,70 (d, ÍH, 1 = 8,5 Hz), 8,30

9 9 9

·9

- 82 (d, 1Η, J = 2,5 Hz), 8,27 (d, 1H, J = 2,5 Hz), 8,21 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,02 (zřejmý t, 1H, J = 7,0 Hz), 7,87 (zřejmý t, 1H, J = 7,0 Hz), 4,82-4,73 (m, 1H), 4,48-3,88 (m, 5H) 1,88-1,70 (m, 3H), 1,05-1,02 (m, 6H).

MS vypočítané pro (C₂₀H₂₃N₃O₄ + H)⁺: 370, nalezeno: 370.

Příklad 100

Příprava 4-S-amino-N-[(5-methoxybenzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-onu

Podle postupu z příkladu 94, za použití chloridu příslušné karbyxylové kyseliny a 4-azido-3-hydroxytetrahydrofuranu takové požadované stereochemie, aby byl konsistentní s konečným produktem, připraví se následující sloučenina.

Ή NMR	delta	(d6DMSO,	400	MHz) 8,73	(d,	1H,	J =	8,4 Hz),
8,52 (	d, 1H,	J = 7,0	Hz) ,	7,65-7,62	(m,	2H)	, 7,	33 (d, 1H, J
= 2,6	Hz), 7	,12 (dd,	1H,	J = 2,6 a	9,2	Hz)	, 4,	64-4,55 (m,

1H), 4,42-4,30 (m, 2H), 4,18-3,87 (m, 3H), 3,86 (s, 3H) , 1,84-1,57 (m, 3H) , 0, 98-0,87 (m, 6H) .

MS vypočítané pro (C₂₀H₂₄N₂O₆ + H)⁺: 38 9, nalezeno: 38 9·

Příklady 101 až 108

Postupy analogickými těm, které byly popsány v příkladu 15, za použití příslušné aminokyseliny a kyseliny a chloridu kyseliny jako reagencií konsistentních s

99

9 9 9 ·· 999

- 83 konečným produktem, se také připraví sloučeniny z tabulky 3. Ή NMR spektra a/nebo hmotnostní spektra byly konsistentní se strukturami v tabulce 3.

Tabulka 3

102 5-hydroxybenzo[b]thiofen-2-yl SPS

103 4-(3-hydroxymehtyl)fenyl)fenyl SPS

104 3-fenylfenyl SPS

105 4-(3-oxofenyl)fenyl SPS

Příklady 109 až 126

Podle postupů z příkladu 94, za použití chloridu ·· · ·· ·· • · ·· · · · · • · · · · · · ·· ΦΦΦΦφ « • · · · · · · ·· ΦΦ· ΦΦ ·Φ příslušné karboxylové kyseliny a 4-azido-3-hydroxytetrahydrofuranu takové požadované stereochemie, aby byl konsistentní s konečnými produkty, se připraví příklady 109 až 126. ²H NMR spektra a/nebo hmotnostní spektra byly konsistentní se strukturami v tabulce 4.

Tabulka 4

Příklad	l3	R	stereochemie na pozici 4
109 /	s	4-(pyrid-3-yl)fenyl	S
110	f	4-(pyrid-2-yl)fenyl	S
111		4-acetylfenyl	S
112		benzyloxy	S
113		3,4-dimethoxyfenyl	S
114		benzofuran-2-yl	S
115		4-(6-methylpyrid-3-yl)fenyl	S
116		5-chlorbenzo[b]thiofen-2-yl	s
117		4-(pyrid-4-yl)fenyl	s

- 85 Tabulka 4 - pokračování

Příklad	R3	R	stereochemie na pozici 4
118	II	2-chlorfenyl	S
119	II	4-bromfenyl	S
120	If	4-chlorbenzo[b]thiofen-2-yl	S
121	II	4-benzylpiperidin-l-yl	S
122	If	3,4-dichlorfenyl	S
123	ff	3,4-dimethoxyfenyl	R
124	ff	benzofuran-2-yl	R
125	If	3-chlorfenyl	S
126	II	5-chlorbenzo[b]thiofen-2-yl	R

Příklady 127 až 129

Za použití SPS postupu z příkladu 15, s tím rozdílem že místo 3,3-dimethoxy-4-aminotetrahydrofuranu se použije 3,3-dimethoxy-4-aminotetrahydropyran a za použití příslušné aminokyseliny a karboxylové kyseliny jako reagencií konsistentních s konečným produktem, se také připraví příklady 127 až 129. *H NMR spektra a/nebo hmotnostní spektra byly konsistentní se strukturami v tabulce 5.

Tabulka 5

«« · *· ·· • ··· * · t · • · · · · · · * · *··»·· • · · · · · · ·· ·«· «· ··

Příklad R^{* 3} R postup syntézy

127	1 4-fenoxyfenyl	SPS
128	rr	chínolin-2-yl	SPS
129	M	3,4-dimethoxyfenyl	SPS

Příklad 130

Příprava 4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrothiofen-3-onu (a) Methylester N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucinu

Benzo[b]thiofen-2-karbonylchlorid (4,9 g, 25 mmol) se přidá k míchanému roztoku methylesteru L-leucinu (4,5 g, 25 mmol) a diisopropylethylaminu (9 ml, 51 mmol) v DCM (200 ml). Po 2 hodinách míchání při teplotě místnosti se směs vlije do vody a promyje se roztokem chloridu sodného a vysuší (MgSO₄) . Odpařením za sníženého tlaku se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako tuhá bílá látka, 7,6 g, 100% výtěžnost.

³H NMR delta (CDC1₃, 250 MHz) 7,88-7,78 (m, 3H) , 7,44-7,38 (m, 2H), 6,53 (d, 1H, J=7,6Hz), 4,91-4,82 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 1,82-1,60 (m, 3H), 1,00 (zřejmý t, 6H, J = 5,9 Hz) .

·· ·«· ··· • «· · e« ·«· · * · ·

- 87 • <9 (b) N-Benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucin

Hydroxid lithný (1,41 g, 59 mmol) se v jedné dávce přidá k míchanému roztoku methylesteru N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucin (8,99 g, 29,4 mmol) v THF/H₂O (1:1, 300 ml). Po 12 hodinách míchání při teplotě místnosti se směs vlije do vody a okyselí na pH 1 pomocí koncentrované HCl a extrahuje se Et₂O (2x) . Odpařením za sníženého tlaku se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jao žlutá tuhá látka, 6,1 g, 71% výtěžek.

Ή NMR delta (d₆DMSO, 250 MHz) 8,78 (d, 1H, J = 9,1 Hz), 8,12 (s, 1H), 7,92-7,83 (m, 2H) , 7,36-7,30 (m, 2H), 4,37-4,28 (m, 1H) , 1, 88-1,47 (m, 3H), 0,82 (d, 3H, J= 6,0 Hz) , 0,78 (d, 3H, J = 6,0 Hz) .

(c) Methylester N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucin-S-(methoxykarbonylmethyl)-L,D-cysteinu

Isopropylchlorformiat (5,9 ml, l,0M v toluenu) se přidá k míchanému roztoku N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucinu (1,65 g, 5,7 mmol) a triethylaminu (1,6 ml,

11,8 mmol) v DCM (20 ml). Po 1 hodině míchání při teplotě místnosti s přidá ethylester L-cysteinu a následně triethylamin (1,6 ml, 11,8 mmol) a směs se nechá dalších 6 hodin míchat. Přidá se methylbromacetat (0,6 ml, 6,3 mmol) a před tím, než se vlije do vody, extrahuje se EtOAc (3x), a nechá další 0,5 hodiny stát. Spojené organické vrstvy se promyjí roztokem chloridu sodného, vysuší (MgSOJ a odpaří za sníženého tlaku. Bleskovou sloupcovou chromatografií (40% hexan-Et,O) se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví • · f · ·»· ·· φ »· • · φ 9 9 9· 9 · 9 • · ··· · · Λ

- 88 jako bílá tuhá látka, 1,6 g, 70% výtěžek.

¹-H NMR delta (CDC1₃, 250 MHz) 7,84-7,77 (m, 3H) , 7,66 (d, 0,5H, J = 8,4 Hz), 7,52 (d, 0,5 H, J = 8,4 Hz), 7,40-7,35 (m, 2H), 7,24 (d, 0,5 H, J = 8,4 Hz), 7,16 (d, 0,5 H, J =

8.4 Hz), 4,88-4,82 (m, 2H) , 4,23-4,15 (m, 2H), 3,70 (s, 1,5H) 3,69 (s, 1, H), 3,36-3,22 (m, 2H) , 3,15-3,08 (m, 2H), 1,82-1,75 (m, 3H), 1,28 (t, 1,5 H, J = 4,5 Hz), 1,23 (t,

1.5 H, J = 4,5 Hz), 0,98-0,95 (m, 6H) .

(d) 4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrothiofen-3-on

Čerstvě připravený roztok methoxidu sodného (ze 75 mg sodíku a 2 ml methanolu) se přidá k ethylesteru N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucin-S-(karbomethoxymethyl) -L,D-cysteinu (1,5 g, 3,2 mmol) v methanolu (2 ml) při teplotě místnosti. Po 1 hodině se přidá Et₂O (80 ml), roztok se potom ochladí na 0 °C a vzniklá bílá tuhá látka se odfiltruje. Tuhá látka se rozpustí v 15 ml ledové kyseliny octové, 10 ml koncentrované HCl a 15 ml H₂O. Tato směs se za zpětného toku 0,5 hodiny míchá, potom se ochladí na teplotu místnosti a extrahuje se CHC1₃ (5x). Spojené organické vrstvy se promyjí NaHCO₃, roztokem chloridu sodného, vysuší (MgSO₄) a odpaří za sníženého tlaku. Bleskouvou sloupcovou chromatografii (40% hexan-Et₂O) se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá tuhá látka, 120 mg, 10% výtěžek.

Ή NMR delta (CDC1₃, 400 MHz) 7,88-7,78 (m, 3H) , 7,58 (d, 0,5H, J = 6,4 Hz), 7,54 (d, 0,5 H, J = 6,4 Hz), 7,42-7,35 (m, 3H), 4,85-4,80 (m, 1H), 4,43-4,34 (m, 1H), 3,34-3,23 (m, 3H), 3,02-2,91 (m, 1H), 1,76-1, 74 (m, 3H) , 0,98-0,85

A ·

- 89 (m, 6H) .

MS vypočítané pro (C₁₉H₂₂N₂O₃S + Η)^4-: 391, nalezeno: 391.

Příklad 131

Příprava diastereomerů 1 4-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3,3-dimethoxytetrahydrofuranu

a) 4-(R, S)-Amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3,3-dimethoxytetrahydrofuran

4-(R,S)-amino-3,3-dimethoxytetrahydrofuran (2,2 g, 15 mmol), N-benzyloxykarbonyl-L-leucin (3,98 g, 15 mmol), EDC (3,17 g, 16,5 mmol) a hydroxyaminobenztriazol (0,45 g, 3,3 mmol) se 12 hodin míchají dohromady ve směsi dichlormethanu a tetrahydrofuranu (1:1, 100 ml) při teplotě místnosti. Směs se přidá k ethylacetátu (300 ml), promyje se vodou (2x100 ml), vysuší (MgSO₄) a odpaří do sucha. Chromatografií vzniklého oleje na silikagelu (ethylacetat/hexan, gradient 1:3 až 1:1) se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako olej, 5,27 g, 89% výtěžek.

^XH NMR delta (CDC1₃) 7,34 (s, 5H) , 6,55 (d, 1H) , 5,11 (m,

3H) ,	4,34 (q,	1H,	J = 6,7	Hz) ,	4,20	(m, 2H), 3,	,77	(s, 2H),
3,51	(m, 1H),	3,26	(d, 3H,	J =	2,3 Hz	), 3,20(d,	3H,	J = 4,7
Hz) ,	1,54 (m,	3H) ,	0,95 (s,	, 3H)	, 0,93	(s, 3H) .

b) Oddělení diastereomerů 4-amino-N-(S-leucin)-3,3-dimethoxytetrahydrofuranu

4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3,3-dimethoxytetrahydrofuran (5,27g, 13,4 mmol) se vystaví hydrogenaci při tlaku 351,85 kPa v methanolu obsahujícím 10 % palladia na uhlí. Po 3,5 hodinách se směs zfiltruje přes celit a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Chromatografií vzniklého oleje (3,5 g) na silikagelu (MeOH obsahující CH₂C1₂, gradient 0-4 %) se dělí sloučenina pojmenovaná v záhlaví na dva čisté samotné diastereomery:

diasteromer 1 (pohybující se rychleji) (0,63 g) ^XH NMR delta (CDC1₃) 7,76 (d, 1H, J = 7,3Hz), 4,36 (dd, 1H,

J = 6,3, 7,2 Hz), 4,21 (dd, 1H, J = 6,4, 9,0 Hz), 3,80 (s, 2H) , 3,57 (dd, 1H, J = 5,3, 9,1 Hz), 3,41 (dd, 1H, J = 3,8, 10,1 Hz), 3,30 (s, 3H), 3,24 (s, 3H), 1,73 (m, 2H), 1,35 (m, 1H), 0,96 (d, 3H, J = 6,7 Hz), 0,94 (d, 3H, J = 6, 6 Hz) .

diastereomer 2 (pohybující se pomaleji) (0,91 g)

Ή NMR delta (CDC1₃) 7,77 (d, 1H, J = 7,1 Hz), 4,36 (dd, lH, J = 6,4, 12,9 Hz), 4,21 (dd, 1H, J = 6,5, 9,1 Hz), 3,80 (s, 2H), 3,55 (dd, 1H, J = 5,3, 9,0 Hz), 3,38 (dd, 1H, J = 4,0, 10,0 Hz), 3,30 (s, 3H), 3,25 (s, 3H), 1,72 (m, 2H), 1,38 (m, 1H), 0,96 (d, 3H, 1 = 6,7 Hz), 0,94 (d, 3H, J = 6,8 Hz) .

c) Diastereomer 1 4-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl) -S-leucin]-3,3-dimethoxytetrahydrofuranu

Nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (5 ml) se přidá k roztoku diastereomeru 1 4-amino-N-(S-leucin)91

-3,3-dimethoxytetrahydrofuranu (0,13 g, 0,5 mmol) v 1,4-dioxanu (5 ml), potom se přidá benzo[b]thiofen-2-ylkarbonylchlorid (0,39 g, 2 mmol). Po 45 minutách se směs přidá k ethylacetátu, promyje se vodou, roztokem hydrogenuhliČitanu sodného a vodou. Organický roztok se potom vysuší (MgSO₄) a odpaří, aby se získala bílá tuhá látka (0,47 g) . Chromatografií na silikagelu (MeOH obsahující CH₂C1₂, gradient 0-5 %) se získá sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá tuhá látka 0,18g, 89% výtěžek.

di NMR	delta (	CDC13	) 7,88 (s,	1H) ,	. 7,74 (m,	3H), 7,34 (m,
2H), 7	,18 (d,	1H,	J = 7,1 Hz	), 4,	.82 (m, 1H	[) , 4,38 (dd, 1H,
J = 6,	4, 12,3	Hz) ,	4,21 (dd,	1H,	1 = 6,5,	9,2 Hz), 3,78
(ABq,	2H, J =	3,8,	9,8 Hz),	3,62	(dd, 1H,	J = 5,2,9,1
Hz), 1	,78 (m,	3H) ,	0,99 (s,	3H) ,	0,96 (s,	3H) .

Příklady 132 až 142

Postupy analogickými těm, které byly popsány v příkladu 131, za použití příslušného diastereomerů 4-amíno-N-(S-leucin)-3,3-dimethoxytetrahydrofuranu a halogenidu karboxylové kyseliny jako reagencií konsistentních s konečným produktem, se také připraví sloučeniny z tabulky 6. ³H NMR spektra a/nebo hmotnostní spektra byly konsistentní se strukturami v tabulce 6.

Tabulka 6

- 92 .a

OR

Příklad	R3	R	Ra	Ra'	diastereomer
132 /	Ί	benzo[b]- thiofen-2-yl	Me	Me	2
133	TI	indol-5yl	IV	IV	1
134	Tl	II	TV	IV	2
135	1»	chinolin-2-yl	IV	vv	1
136	II	II	IV	vv	2
137	II	3-bromfenyl	II	IV	1
138	II	II	II	vv	2
139	1»	4-fenoxyfenyl	II	vv	1
140	II	IV	IV	vv	2
141	II	indol-6-yl	IV	vv	2
142	IV	benzimidazol-5	-yi		1

Příklad 143

Příprava diastereomeru 1 4-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3,3-dimethoxytetrahydropyranu

a) 4-(R,S)-Amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3, 3-dimethoxytetrahydropyran

4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]• ·

- 93 tetrahydropyran-3-on (příklad 67c, 3,1 g, 8,6 mmol) se 12 hodin zahřívá ke zpětnému toku s trimethylorthoformiatem (2,8 ml) a kyselinou p-toluensulfonovou (0,080 g) v methanolu (50 ml). Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se vzniklý olej podrobí chromatografii na silikagelu (ethylacetat/hexan, gradient), aby se získala sloučenina pojmenovaná v záhlaví jako bílá tuhá látka 2,89 g, 80% výtěžek.

^XH NMR delta (CDC1₃) 7,29 (s, 5H), 6,99 (m, 1H) , 6,15 (m,

1H) , 5,07 (s, 2H), 4,28 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 3,52 (m 4H), 3,19 (s, 3H), 3,14 (s, 3H), 1,85 (m, 1H), 1,63 (m, 4H),

0,93 (s, 6H).

b) Oddělení diastereomerů 4-amino-N-(S-leucin)-3,3-dimethoxytetrahydropyranu

4-(R,S)-Amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3,3-dimethoxytetrahydropyran se hydrogenuje jako v příkladu 131 b, aby se po chromatografii získaly čisté samotné diastereomery sloučeniny pojmenované v záhlaví:

diastereomer 1: XH	NMR delta	(CDC13) 7,75 (d, 1H	., J = 8,1
Hz), 4,17	(m, 1H),	3,58	(m,	3H), 3,41 (dd, 1H,	J = 3,5, 9,7
Hz), 3,28	(s, 3H),	3,24	(s,	3H), 1,92 (m, 1H),	1,71 (m,
4H), 1,30	(m, 1H),	0,97	(d,	3H, J = 6,4 Hz), 0,	94 (d, 3H, J
= 6,3 Hz) .
diastereomer 2: XH	NMR delta	(CDC13) 7,8 (s, 1H)	, 4,16 (m,
1H), 3,59	(m, 3H) ,	3,49	(m,	1H), 3,28 (s, 3H),	3,24 (s,
3H) , 1,92	(m, 1H),	1, 72	(m,	4H), 1,41 (m, 1H),	0,97 (d, 3H,
J= 6,1 Hz)	, 0,95 (d, 3H,	J =	= 6,0 Hz) .

c) Diasteromer 1 4-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3,3-dimethoxytetrahydropyranu

Diastereomer 1 4-amino-N-(S-leucin)-3,3-dimethoxytetrahydropyranu se nechá reagovat s benzo[b]thiofen-2-ylkarbonylchloridem jako v příkladu 131c, aby se získala sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

XH NMR delta	(CDC13)	7	,98	(d, ÍH,	J = 8,3 Hz), 7	,93	(s,
ÍH) ,	7,78 (d,	1H, J	=	7,7	Hz), 7,	71 (d, 1H, J =	8,3	Hz) ,
7,33	(m, 3H),	4,83	(m,	ÍH)	, 4,19	(m, ÍH), 3,69	(m,	ÍH) ,
3,57	(m, 2H),	3,40	(d,	ÍH,	J = 13	Hz), 3,23 (s,	3H),	3,13

(s, 3H), 1,85 (m, 5H), 0,98 (d, 3H, J = 4,8 Hz), 0,96 (d, 3H, J = 5,2 Hz).

Příklad 144

Příprava diastereomeru 2 4-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3,3-dimethoxytetrahydropyranu

Za použití diastereomeru 2 4-amino-N-(S-leucin)-3,3-dimethoxytetrahydropyranu v postupu z příkladu 143c se připraví sloučenina pojmenovaná v záhlaví.

Výše uvedený popis a příklady plně ukazuji jak vyrobit a používat sloučeniny podle předloženého vynálezu. Předložený vynález však není omezen na zvláštní výše popsaná ztělesnění, ale zahrnuje všechny jeho modifikace v rozsahu následujících patentových nároků. Rozličné odkazy na časopisy, patenty a jiné publikace, které jsou zde citovány, zahrnují stav techniky a jsou zde zahrnuty formou odkazů jako kdyby byly plně uvedeny.

Claims (34)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Sloučenina obecného vzorce (I) :

   ve kterém

   R¹

   R²

   R⁴ (I) je R, R”C(O), RC(S), RSO₂, ROC(O), RR'NC(O) nebo ROC(O)NR'CH(R⁶)C(O) , je H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀_₆alkyl, je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, C₂.₆alkinyl, C₃__gcykloalkyl-C₀.₆alkyl, Ar-C₀._galkyl nebo Het-C₀^alkyl, je H, C₁.₆alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀_₆alkyl, každé R⁵ je nezávisle H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

   R⁶ je H, C^galkyl, C₂.₆alkenyl, C₃_₆cycloalkyl-C₀-₆-alkyl, Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀__galkyl,

   R' je H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo

   Het-C₀__galkyl, • 9

   - 96 R je C^alkyl, Ar-C₀__galkyl, Het-C₀__galkyl,' Ar-C₂_₆alke nyl nebo Het-C₂__galkenyl,

   X je O nebo S, a n je 1, 2 nebo 3, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
2. 2. Sloučenina podle nároku 1, kde R² a R⁴ jsou každý H.
3. 3. Sloučenina podle nároku 1, kde R³ je C^alkyl nebo C₂_₆alkenyl.
4. 4. Sloučenina podle nároku3, kde R³ je isobutyl.
5. 5. Sloučenina podle nároku 1, kde R¹ je ROC(O), RS0₂nebo

   RC(O), kde R je Ar-C₀-_galkyl nebo Het-C₀__galkyl.
6. 6. Sloučenina podle nároku 5, kde skupina R je kde B₂je OH, CN, OCF₃,

   OCi^alkyl

   nebo 0— TY ^! 0^ U¹ ' OAr, SO₂C₁.₆alkyl, C^alkyl

   φ φ φ φ

   - 97 nebo halogen.
7. 7. Sloučenina podle nároku 1, kde n je 1 nebo 2
8. 8. Sloučenina podle nároku 7, kde n je 1.
9. 9. Sloučenina podle nároku 1, kde X je 0.
10. 10. Sloučenina podle nároku 1, kde každé R⁵je H
11. 11. Sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce (Ha) :

    (Ha).
12. 12. Sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce (lib):

    (Hb).
13. 13. Sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce (líc):
14. 14. Sloučenina podle nároku 1, kterou je:

    (HC).

    9 9 9 9 9 99 9 99 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 · 9 9 • 9 • 9 9 9 9 9 9 9 9 999 9 9 9 9

    4-(R,S)-amino-N-[(3,4-methylendioxybenzoyl) -S-leucin] tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R,S)-amino-N- [ (benzyloxykarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[ (3,4-dichlorbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(2-chinolinkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[ (8-chinolinkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R,S)-amino-N- [ (benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-2,2-dibenzyltetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(3,4-dimethoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N- [ (indol-6-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[ (benzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(5-aminobenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on, • 9999 99 9 99 99

    99 · 9 · 99 9 9 · 9 • · · · · · · · 9 • 9 · · 9 9 9 9 · 9 · ·· 9 · · 999·

    999 9 99 999 99 99

    4- (R, S)-amino-N- [ (5-chlorbenzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4- (R, S)-amino-N-[(5-methoxybenzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4- (R, S)-amino-N-[(3-brombenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R,S)-amino-N-[(4-brombenzoyl)-S-leucin]-tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(5-chlorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(4-fluorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[{4-fenoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(4-fenylbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(6-trifluormethylbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(4-ethyllbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[{4-(terč.-butyl)benzoyl)-S-leucin]tetrahydrof uran-3-on, ·· • φφφφ φφ φ φ*

    9 9 Φ ΦΦΦΦ 9 9 9 9

    9 9 9 9 9 9 9 9 9

    Φ Φ »ΦΦ ΦΦΦΦΦΦ • Φ ΦΦΦ ΦΦΦΦ • ΦΦ · ΦΦ ΦΦΦ ΦΦ ··

    - 100 4-(R, S)-amino-N- [ (5-methoxybenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R,S) -amino-N- [·(4-nitrobenzo [b] thiofen-2-ylkarbonyl) -S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(6-brombenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R,S)-amino-N-[(5-brombenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-((6-methoxybenzo(b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N- [ (benzo(b)thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-R-amino-N- [ (benzo(b)thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N-[(2-naftoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-R-amino-N-[ (2-naftoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N- [ (chinolin-2-karbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-R-amino-N-[(chinolin-2-karbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N-[ (S-methoxybenzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on, « · • ft

    - 101 4-S-amino-N-[((4-pyrid-3-yl)benzoyl)-S-leucin)-tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N-[((4-pyrid-2-yl)benzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N- [ (3,4-dimethoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N-[(benzofuran-2-yikarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran- 3-on,

    4-S-amino-N-((4- [6-methylpyrid-3-yl)benzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N-[(5-chlorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl) -Sleucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N- [ ( (4-pyrid-4-yl)benzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N-[(2-chlorbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3on,

    4-S-amino-N-[(4-brombenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N-[(4-chlorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on, * φ

    - 102 4-S-amino-N-[ (4-benzylpiperidin-l-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N-[(3,4-dichlorbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3-on,

    4-S-amino-N-[ (3-chlorbenzoyl)-S-leucin]tetrahydrofuran-3on,

    4-(R, S)-amino-N-[(3,4-dimethoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(4-fenoxybenzoyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(chinolin-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on,

    4-(R, S)-amino-N- [ (benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydropyran-3-on nebo

    4-(R, S)-amino-N-((benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrothiofen-3-on nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.
15. 15. Farmaceutický přípravek vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle některého z nároků 1 až • · · ·

    - 103 14 a farmaceuticky přijatelný nosič.
16. 16. Způsob inhibice cystein proteasy, vyznačuj ící se t í m, že pacientovi, který ji potřebuje, se podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
17. 17. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že cystein proteasou je kathepsin K.
18. 18. Způsob inhibice ztráty kosti, vyznačuj ící se t í m, že pacientovi, který ji potřebuje, se podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
19. 19. Způsob léčení osteoporózy, vyznačuj ící se t í m, že pacientovi, který jej potřebuje, se podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
20. 20. Způsob léčení gingivální nebo periodontální nemoci, v y značující se tím, že pacientovi, který jej potřebuje, se podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
21. 21. Způsob léčení nemoci charakterizovanou nadměrnou degradací chrupavky nebo matrix, vyznačující se tím, že pacientovi, který jej potřebuje, se podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
22. 22. Způsob podle nároku 21, vyznačující se tím, že uvedenou nemocí je osteoartritida nebo revmatoidní artritida.
23. 23. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 14 pro použití jako léčivo.

    • · · ·
24. 24. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 k výrobě léčiva pro léčení nemocí, kde inhibice cystein proteasy je faktorem.

    9» · « · · ♦ · · • « « · · • > · · ♦ *) · • · · · · • ·· e··

    - 104
25. 25. Použití sloučeniny podle nároku 24, kde cystein proteasou je kathepsin K.
26. 26. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 k výrobě léčiva pro inhibici ztráty kosti.
27. 27. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 k výrobě léčiva pro léčení osteoporózy.
28. 28. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 k výrobě léčiva pro léčení gingivální nebo periodontální nemoci..
29. 29. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 k výrobě léčiva pro léčení nemocí charakterizovaných nadměrnou degradací chrupavky nebo matrix.
30. 30. Použití sloučeniny podle nároku 29, kde nemocí charakterizovanou nadměrnou degradací chrupavky nebo matrix je osteoartritida nebo revmatoidní artritida.
31. 31. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce (I), podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje (i) reakci sloučeniny obecného vzorce (III):

    • 9 9 ·

    99 99 ♦ «9 9

    9 9 9 9

    9 9 9 9 9

    9 9 9 9

    9 9 9 9 (m)

    R¹, R², R³, R⁴, R⁵ a n jsou jak je definováno v obecném vzorci (I) z nároku 1, kde je jakákoli reaktivní funkční skupina chráněna, s oxidačním činidlem, nebo (ii) dekarboxylaci sloučeniny obecného vzorce (IV):

    ve kterém

    R¹, R², R³, R⁴, R⁵ a n jsou jak je definováno v obecném vzorci (I) z nároku 1, kde je jakákoli reaktivní funjcční skupina chráněna, nebo (iii) reakci sloučeniny obecného vzorce (V):

    (V) ve kterém

    R¹, R², R³, R⁴, R⁵ a n jsou jak je definováno v obecném vzorci (I) z nároku 1, kde je jakákoli reaktivní funkční

    9 9 9

    9 9

    9 9 «99 » • 9 « *» 9» • · · · 9 *· · • 9 9 9 · 9 · • 9 »·9«9 9 • 9 9 9 9 · 9 »9 99» 99 99

    - 106 skupina chráněna, s kyselinou a následně odstranění jakékoli chránící skupiny a případně vytvoření farmaceuticky přijatelné soli.
32. 32. Sloučenina obecného vzorce (III):

    (ΙΠ) ve kterém

    R¹ je R, R”C(O), RC(S), RSO₂, ROC(O), RR'NC(O) nebo ROC(O)NR'CH(R⁶)C(O) ,

    R² je H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀__galkyl. nebo

    Het-C₀_₆alkyl,

    R³ je H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, C₂.₆alkinyl, C₃._gcykloalkyl-C₀_₆alkyl, Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀__galkyl,

    R⁴ je H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo

    Het-C₀__galkyl, φφφφ

    - 107 každé R⁵ je nezávisle H, C^alkyl, C₂.₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

    R⁶ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, C₃_gCycloalkyl-C₀_₆-alkyl,

    Ar-C₀_₆alkyl nebo Het-C₀__galkyl,

    R' je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo

    Het-C₀_₆alkyl,

    R je C^alkyl, Ar-C₀-₆alkyl, Het-C₀_₆alkyl, Ar-C₂.₆alkenyl nebo Het-C₂_₆alkenyl, a n je 1, 2 nebo 3, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

    R¹ je R, RC(O), RC(S), RSO₂, R0C(O), RR'NC(O) nebo ROC(O)NR'CH(R⁶)C(O) ,

    R² je H, Ci.galkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C^alkyl nebo

    Het-C₀.₆alkyl,

    R³ je H, C^galkyl, C₂_₆alkenyl, C₂.₆alkinyl, C₃.₆cykloalkyl-C₀_galkyi, Ar-C₀.₆alkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

    - 108 R⁴ je H, Coalkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo

    Het-C₀_₆alkyl, každé R⁵je nezávisle H, (^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo Het-C₀__galkyl,

    R⁶ je H, Coalkyl, C₂_₆alkenyl, C₃_₆cycloalkyl-Co_₆-alkyl,

    Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀_₆alkyl,

    R' je H, Coalkyl, C₂__galkenyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo

    Het-C₀_₆alkyl,

    R je Coalkyl, Ar-C₀_₆alkyl, Het-C₀.₆alkyl, Ar-C₂_₆alkenyl nebo Het-C₂.₆alkenyl, a n je 1, 2 nebo 3, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

    ve kterém

    R¹ je R, RC(O), R”C(S), RSO₂, ROC(O), RR'NC(O) nebo ROC(O)NR'CH(R⁶)C(O) ,

    R³ je H, Coalkyl, C₂.₆alkenyl, C₂.₆alkinyl, C₃_₆cykloalkyl-C₀.₆alkyl, Ar-C₀_₆alkyl nebo Het-C₀.₆alkyl, ·· ·· • · · · • » · * • · · · • · · · • · · ♦

    - 109 R⁴ je H, Ci.galkyl, C₂__galkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo

    Het-C₀._galkyl, každé R⁵je nezávisle H, C^alkyl, C₂__galkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀__galkyl,

    R⁶ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, C₃__gcycloalkyl-C₀_₆-alkyl,

    Ar-C₀._galkyl nebo Het-C₀__galkyl,

    R' je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀._galkyl nebo

    Het-C₀__galkyl,

    R je Cx.galkyl, Ar-C₀._galkyl, Het-C₀__galkyl, Ar-C₂__galkenyl nebo Het-C₂__galkenyl,

    X je O nebo S, a n je 1, 2 nebo 3;

    nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
33. 35. Sloučenina, která je zvolena ze skupiny obsahující:

    trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R, S)-amino-N-[(terč.-butoxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N-(S-leucin)-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(3,4-methylendioxybenzoyl)-S- • · ·

    - 110 -leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N- [ (3,4-dichlorbenzoyl)-S-leucin]-3-ydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(2-chinolinkarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxyletrahydropyran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N- [ (indole-6-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(5-aminobenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-amino-3-hydroxytetrahydrofuran, trans-3-hydroxy-4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuran,

    4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuran-3-on,

    3,3-dimethoxy-4-benzyloxykarbonylaminotetrahydrofuran,

    3,3-dimethoxy-4-amino-tetrahydrofuran,

    • 9 · 9 9 • · 9 9 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 • 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

    - 111 trans- 4-S-amino-3-R-hydroxytetrahydrof uran, trans-4-S-amino-N-[(benzyloxykarbonyl]-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-(S-leucin)-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[ (3,4-dichlorbenzoyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N- [ (2-chinolinkarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N- [ (benzo(b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(benzofuran-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amíno-N-[(2-naftoyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[ (5-methoxybenzofuran-2-ylkarbonyl) -S-leucin]-3-R-hydroxytecrahydrofuran, trans-4-S-amino-N- [ (5-chlorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(4-chlorbenzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N- [ (4-brombenzoyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran,

    - 112 trans-4-S-amino-N-[(4-(pyrid-2-yl)benzoyl)-S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[(4-(pyrid-3-yl)benzoyl) -S-leucin]-3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-S-amino-N-[ (3,4-dimethoxybenzoyl) -S-leucin] -3-R-hydroxytetrahydrofuran, trans-4-amino-3-hydroxytetrahydropyran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzyloxykarbonyl)-S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran, trans-4-(R,S)-amino-N-(S-leucin)-3-hydroxytetrahydropyran, trans-4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl) -S-leucin]-3-hydroxytetrahydropyran, methylester N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucinu,

    N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucin, ethylester N-benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl-L-leucin-S- (methoxykarbonylmethyl)-L,D-cysteinu nebo

    2-methoxykarbonyl-4-(R,S)-amino-N-[(benzo[b]thiofen-2-ylkarbonyl)-S-leucin]tetrahydrothiofen-3-on, nebo jejich soli.
34. 36. Sloučenina obecného vzorce (VI):

    • · · ·

    - 113 - ve kterém

    R¹ je R, R’’C(O), RC(S), RSO₂, ROC(O), RR'NC(O) nebo ROC(O)NR'CH(R⁶)C(O) ,

    R² je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀._galkyl nebo

    Het-C₀_₆alkyl,

    R³ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, C₂_₆alkinyl, C₃._gcykloalkyl-C₀_₆alkyl, Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀__galkyl,

    R⁴ je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo

    Het-C₀_₆alkyl, každé R⁵je nezávisle H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀__salkyl,

    R⁶ je H, C^alkyl, C₂__galkenyl, C₃_₆cycloalkyl-C₀_₆-alkyl,

    Ar-C₀__galkyl nebo Het-C₀._galkyl,

    R' je H, C^alkyl, C₂_₆alkenyl, Ar-C₀__galkyl nebo

    Het-C₀_₆alkyl,

    R je C^alkyl, Ar-C₀__galkyl, Het-C₀._galkyl, Ar-C₂__galkenyl nebo Het-C₂_₆alkenyl,

    X je O nebo S, a

    • ··· · • · ·· ·· · • • • · • • • • • · • • • • • • • • • · • • • • • • • ··· · • · ·« · • · ··

    - 114 n je 1, 2 nebo 3,

    R^a a R^a' jsou nezávisle H nebo C^alkyl, za předpokladu, že když jeden z R^a nebo R^a'je H, je druhý C₁.₂alkyl nebo jsou dohromady (CH₂)₂_₃ tvořící 5- nebo 6-členný kruh nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.