CZ20031833A3

CZ20031833A3 - Tetralonové deriváty jako protinádorová činidla

Info

Publication number: CZ20031833A3
Application number: CZ20031833A
Authority: CZ
Inventors: Guy Georges; Adelbert Grossmann; Tim Sattelkau; Wolfgang Schaefer; Ulrich Tibes
Original assignee: F. Hoffmann-La Roche Ag
Priority date: 2000-12-07
Filing date: 2001-12-06
Publication date: 2004-02-18
Also published as: NZ526051A; CA2430355A1; ECSP034642A; US20020065282A1; HUP0400579A2; PL365324A1; ZA200304262B; NO20032531D0; MXPA03004947A; HK1060875A1; BG107889A; KR20030077551A; JP2004515488A; RU2288220C2; AR035659A1; MA26972A1; NO20032531L; CN100340545C; CN1478072A; BR0115988A

Description

Tetralonové deriváty jako protinádorová činidla

Předkládaný vynález souvisí s hydroxamidy {l-oxo-1,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-alkanové kyseliny nebo jejich farmaceuticky přijatelnými solemi. Bylo zjištěno, že tyto sloučeniny disponují aktivitou proti prolíferaci buněk, takovou, jako protinádorová aktivita a jsou tedy užitečné ve způsobech léčby člověka nebo zvířete. Vynález také souvisí s postupy pro výrobu řečených hydroxamidů {l-oxo1,2 , 3, 4-tetrahydro-naf’talen-2-yl) -alkanové kyseliny pro farmaceutické směsi, které je obsahují, a s jejich použitím při výrobě léků, používaných pro vyvolání účinku proti proliferaci buněk v teplokrevném živočichu, takovém, jako je lidské stvoření.

Dosavadní stav techniky:

Transkripční regulace je v buněčné diferenciaci, proliferaci a apoptose hlavním procesem. Transkripční aktivace řady genů určuje osud buňky a z těchto důvodů je transkripce těsně regulována řadou faktorů. Jedním z regulačních mechanismů, zahrnutých v tomto postupu, je změna v terciární struktuře DNA, která ovlivňuje transkripci pomocí změny přístupnosti transkripčních faktorů k jejích cílovým segmentům DNA. Nukleosomální integrita je regulována stavem acetylace histonů jádra. V hypoacetylovaném stavu jsou nukleosomy těsně stlačeny a proto jsou pro transkripci nepermisivní. Na druhé straně, jsou nukleosomy uvolněny acetylací jaderných histonů, což má za následek, že se stávají pro transkripci permisivní. Stav acetylace histonů je řízen rovnovážným stavem aktivit histonacetyltransferasy (HAT) a histondeacetylasy (HDAC). Nedávno bylo zjištěno, že inhibitory HDAC zastavují růst a apoptosu v několika typech nádorových buněk, včetně rakoviny tlustého střeva, lymfomu T-buněk a erytroleukemických buněk. Jelikož apoptosa je klíčový faktor pro vývoj nádoru, jsou inhibitory HDAC slibnými činidly pro léčbu nádoru, jako účinné induktory apoptosy.

V literatuře bylo popsáno několik strukturních tříd inhibitorů HDAC a byly shrnuty v přehledovém článku Marks, P.M., et al., J. Nati. Cancer Inst. 15 {2000} 1210-1216. Sloučeniny hydroxamové kyseliny, které mají HDAC inhibiční aktivitu, jsou také popsány v WO 98/55449 a US Patentu č. 5,369,108.

Bylo zjištěno, že hydroxamidy (1-oxo-l,2,3,4-tetrahydronaf talen-2-yl) -alkanové kyseliny působí proti proliferaci buněk, které vyplývají z jejich HDAC inhibiční aktivity. HDAC inhibiční aktivita několika hydroxamidů (1-oxo1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)-alkanové kyseliny, popsaná v předkládané aplikaci, je vyšší než ΞΑΗΑ (suberoylanilid hydroxamová kyselina, která byla ukázána, že má HDAC inhibiční aktivitu (US Patent č. 5,369, 108}) .

Popis vynálezu:

Předkládaný vynález souvisí s novými sloučeninami obecného vzorce (I) a jejich použitím jako protinádorových činidel:

OH (i) kde:

Rl je vybrán z vodíku, (1-4C)alkylu, COOH, COO(14C)alkylu;

R2, R3, R4, R5 jsou nezávisle vybrány z vodíku, halogenového atomu, (1-4C)alkyl-, trifluormethyl-, hydroxy-, (1-4C)alkoxy-, aryloxy-, arylalkyloxy-, nitro-, amino-, (1-4C)alkylamino-, di[(1-4C)alkyl]-amino-, piperidino, morfolino, pyrolidino, {1-4C)alkanoylamino-, nebo arylové skupiny, nebo heteroarylové skupiny, nebo R2 a R3 společně nebo R3 a R4 společně nebo R4 a R5 společně mohou vytvářet (1-3C) alkylendioxy kruh nebo R2 a R3 společně nebo R3 a R4 společně nebo R4 a R5 společně mohou vytvářet (3-5C)alkylenový řetězec ;

Y je -CH₂-CH₂;

X je alkylenový řetězec 4 až 10 uhlíkových atomů, které mohou být saturované nebo nesaturované jednou nebo dvěma dvojnými vazbami nebo jednou nebo dvěma trojnými vazbami nebo jednou dvojnou a jednou trojnou vazbou a které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené nebo přerušené (3-7C) cykloalkylovým kruhem.

Enantiomery sloučenin vzorce (I), jejich diastereoisomery, racemáty a jejich směsi jsou také zahrnuty v předkládaném vynálezu, spolu se solemi . sloučenin vzorce (I) s farmaceuticky přijatelnými kyselinami a zásadami.

Mělo by být také zřejmé, že mohou existovat určité deriváty vzorce I v solvatovaných a nesolvatovaných formách, takových, jako například hydratované formy. Mělo by být také zřejmé, že vynález zahrnuje všechny takové solvatované formy, které vykazují protinádorovou aktivitu.

Přednostní sloučeniny vzorce (I) jsou ty, ve kterých R2 a R5 je vodík. Obzvláště přednostní sloučeniny vzorce (I) jsou ty, ve kterých tři ze čtyř radikálů R2, R3, R4 a R5 jsou vodík.

Vhodnou skupinou pro substituent, je-li to atom halogenu, je například fluoro, chloro, bromo a jodo; je-li to (ΙΙΟ) alkyl je například methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sek-butyl; je-li to (l-4C)alkoxy je například methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy nebo butoxy, je-li to (1-4C)alkylamino je například methylamino, ethylamino nebo isopropylamino; je-li to di-[(1• · · ·

4C)alkylamino je například dimethylamino, N-ethyl-Nmethylamino, diethylamino, N-methyl-N-propylamino nebo dipropylamino; je-li to (1-4C)alkanoylamino je například formylamido, acetamido, propionamido nebo butyramido; je-li to (1-3C)alkylendioxy je například methylendioxy, ethylendioxy nebo propylendioxy.

Arylová skupina je systém konjugovaného karbocyklického kruhu, například fenyl, naftyl, výhodně fenyl, který může být nesubstituovaný nebo substituovaný 1, 2 nebo 3 substituenty, nezávisle vybranými z atomu halogenu, (14C}alkyl-, trifluoromethyl-, hydroxy-, (1-4C)alkoxy-, arylalkyloxy-, 'aryloxy, (1-3C)alkylenedioxy-, nitro-, amino-, (1-4C)alkylamino-, di[(1-4C)alkyl]amino- nebo (14C)alkanoylamino-skupiny, jak je definována shora.

Heteroarylová skupina je buď systém 5 nebo 6 členného cyklického kruhu nebo dvěma heteroatomy, bicyklický chinolylsystém jako indolyl-, které mohou být 2 nebo 3 s jedním nezávisle vybranými z dusíku, kyslíku a síry, například pyridinyl, thiofenyl, furyl nebo pyrolyl nebo anelovaný konjugovaný kruhový nebo isochinolyl-, nesubstituované nebo substituované 1, substituenty, nezávisle vybranými z atomu halogenu, (14C)aíkyl-, trifluormethyl-, hydroxy-, (1-4C)alkoxy-, arylalkyloxy-, aryloxy, (1-3C)alkylendioxy-, nitro-, amino-, (1-4C)alkylamino-, di[(1-4C)alkyl]amino- nebo (14C)alkanoylamino-skupiny, jak je definováno výše.

Přednostní skupinou pro arylalkyloxy- radikál je benzyloxy.

Přednostní (3-7C) cykloalkylový kruh je cyklopropyl nebo cyklobutyl, kde kruh je k řetězci navázán spojením 1,1' .

Přednostními skupinami pro řetězec X jsou -(CH₂)_n~ θ -CH-=CH(CH₂)_n-2-, ve kterých n je celé číslo od 3 do 7, nej výhodněji od 4 do 6. Dalšímu přednostními skupinami jsou -(CH₂)_n_iCH(CH₃)-, - (CH₂) n-1-C (CH₃)₂’ nebo - (CH₂) n-iC (-CH₂. CH₂-) - , ve kterých n je celé číslo od 3 do 7, nejvýhodněji od 4 do 6.

Podle dalšího aspektu vynálezu, je zde poskytnuta farmaceutická směs, která zahrnuje farmaceuticky účinné množství jedné nebo více sloučenin vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelnou sůl, jak bylo definováno výše, ve spojení s farmaceutíčky přijatelným rozpouštědlem, excipientní látkou nebo nosičem. Směs může být ve formě vhodné pro orální podávání, například jako tableta nebo kapsle, pro parenterální injikování (včetně intravenózního, subkutánního, intramuskulárního, intravaskulárního nebo infuzí) jako sterilní roztok, suspenze nebo emulze, pro topikální podávání jako mast nebo krém nebo pro rektální podávání jako čípek. Výše uvedené směsi mohou být obecně připraveny použitím běžných excipientních látek.

Tyto farmaceutické směsi mohou být podávány orálně, například ve formě tablet, potahovaných tablet, tvrdých nebo měkkých želatinových kapslí, roztoků, emulzí nebo suspenzí. Mohou být také podávány rektálně, například ve formě čípků nebo parenterálně, například ve formě roztoků k inj ikování.

Farmaceutické směsi předkládaného vynálezu, zahrnující sloučeniny vzorce I, jejich diastereomery, racemáty a směsí nebo jejich soli, mohou být vyrobeny způsobem, který je v oboru známý, např., běžnými postupy míchání, enkapsulování, rozpouštění, granulování, emulgování, zachycení v matrici, potahování tablet nebo lyof il i zování . Tyto farmaceutické preparáty mohou být připraveny s terapeuticky inertními, anorganickými nebo organickými nosiči. Pro tablety, potahované tablety, pastilky a tvrdé želatinové kapsle mohou být jako takové nosiče, * * · · β použity laktosa, kukuřičný škrob nebo jeho deriváty, mastek, sterická kyselina nebo její soli. Vhodné nosiče pro měkké želatinové kapsle jsou rostlinné oleje, vosky, tuky, polotuhý nebo pevný polyol. V závislosti na povaze aktivního materiálu, není obecně v případě měkkých želatinových kapslí potřeba žádných nosičů. Vhodné nosiče pro výrobu roztoků a sirupů jsou voda, polyoly, sacharóza, invertní cukr a glukóza. Vhodné nosiče pro injikování jsou voda, alkoholy, polyoly, glycerin, rostlinné oleje, fosfolipidy a surfaktanty. Vhodné nosiče pro čípky jsou přirozené nebo ztužené oleje, vosky, tuky a polotekuté polyoly.

Farmaceutické přípravky mohou také obsahovat konzervační činidla, solubilizační činidla, stabilizátory, zvlhčovadla, emulgátory, sladidla, ochucovadla, soli pro změnu osmotického tlaku, pufry, potahovací činidla nebo antioxidanty. Mohou také obsahovat další terapeuticky významné látky, včetně dalších aktivních složek, jiných, než těch, vzorce I.

Hydroxamid (1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)alkanové kyseliny bude teplokrevnému živočichu obvykle podáván v jednotkové dávce v rozmezí mezi 5-5000 mg na čtvereční metr tělesné plochy živočicha, t.j. přibližně 0,1-100 mg/kg a toto běžně poskytuje terapeuticky účinnou dávku. Jednotkové dávkovači forma, taková, jako tableta nebo kapsle, bude obvykle obsahovat například 1-250 mg aktivní složky. Výhodně se užívá denní dávka o rozmezí 1100 mg/kg. Denní dávka se však bude nutně měnit, v závislosti na léčeném pacientu, konkrétním způsobu podávání a závažnosti léčeného onemocnění. Optimální dávka může být stanovena praktickým lékařem, který léčí konkrétního pacienta.

Podle dalšího aspektu předkládaného vynálezu je poskytnut

*« · a sloučeniny předkládaného vynalezu vykazuji proti buněčné proliferaci, vyplývající histondeacetylasové inhibiční aktivity. Podle sloučeniny předkládaného vynálezu užitečné ve derivát hydroxamidu (1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2yi)-alkanové kyseliny vzorce I, jak je zde definováno výše, pro použití ve způsobu léčby lidského nebo zvířecího těla terapii. My jsme nyní zjistili, že vlastnosti z jej ich toho, jsou způsobu pro léčbu proliferace maligních buněk. Podle toho se dá očekávat, že sloučeniny předkládaného vynálezu budou užitečné při léčbě rakoviny poskytnutím protiproliferačního účinku, zejména při léčbě rakovin prsu, plic, střeva, konečníku, žaludku, prostaty, močového měchýře, slinivky břišní a vaječníků. Kromě toho, se očekává, že derivát předkládaného vynálezu bude vykazovat aktivitu proti řadě leukémií, lymfoidních malignit a pevných nádorů takových, jako rakovin a sarkomů v takových tkáních, jako játra, ledviny, prostata a slinivka.

Podle tohoto aspektu vynálezu je zde tedy poskytnuto použití derivátu hydroxamidu(1-oxo-l, 2,3, 4-tetrahydronaftalen-2-yl}-alkanové kyseliny vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelné solí, jak je zde definováno ve výrobě léku pro použití při tvorbě protiproliferačního účinku na buňky v teplokrevném živočichu, takovém, jako lidské stvoření.

Podle dalšího rysu tohoto aspektu vynálezu je poskytnut způsob pro vytvoření účinku proti buněčné proliferaci v teplokrevném živočichu, takovém, jako člověk, který potřebuje takovou léčbu, která zahrnuje podávání účinného množství hydroxamidového derivátu (1-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-alkanové kyseliny řečenému živočichu, jak je zde definováno výše.

karboplatin mikrotubulů, inhibitorů nebo j iné skládání taxany;

napři klad například tamoxifen nebo (4'-kyano-3-(4Léčba proti buněčné proliferaci definována výše, může být aplikována jako jediná terapie nebo může zahrnovat, kromě hydroxamidového derivátu vynálezu (1-oxo-1,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-alkanové kyseliny, jeden nebo více jiných protinádorových látek, například těch, vybraných z například inhibitorů mitózy, například vinblastin; alkylačních činidel, například cis-platin, a cyklofosfamid;

jako paclitaxel antimetabolitů, například 5-fluoruracil, kapecitabin, cytosinarabinosid a hydroxymočovina, nebo například interkalačních antibiotik, například adriamycin a bleomycin; imunostimulantů, například trastuzumab; inhibitorů syntézy DNA, např. gemcitabin; enzymů, například asparaginasa; inhibitorů topoisomerasy, například etoposid; modifíkátorů biologické odezvy, například interferon; a anti-hormonů, antiestrogeny, takové jako antiandrogenů, takových jako fluorfenylsulfonyl)-2-hydroxy-2-methyl-3'(trifluormethyl)propionanilid nebo dalších terapeutických činidel a principů, jak je popsáno například v Cancer: Principles & Practice of Oncology, Vincent T. DeVita, Jr., Samuel Hellmann, Steven A. Rosenberg; 5^th Ed., LippincottRaven Publishers (1997). Takové spojené léčby může být dosaženo způsobem simultánního, postupného nebo odděleného dávkování jednotlivých složek léčby. Podle tohoto aspektu vynálezu je poskytnut farmaceutický produkt zahrnující hydroxamidový derivát (1-oxo-l,2,3,4,-tetrahydronaftalen-2yl)-alkanové kyseliny vzorce I, jak je zde definováno výše a další protinádorová látka, jak je zde definováno výše, pro spojenou léčbu rakoviny.

Příklady fyziologicky přijatelných solí sloučenin vzorce I jsou solí s fyziologicky přijatelnými bázemi. Tyto soli mohou být, mezi jinými, alkalické, alkalických zemin, amonium a alkylamoniové soli, například sodíkové, draslíkové, vápníkové, tetramethylamoniové soli.

Oddělení racemických sloučenin na jejich enantiomery může být provedeno chromatografíí v analytickém, semipreparativním nebo preparativním měřítku, použitím vhodných opticky aktivních stacionárních fází s vhodnými eluenty. Vhodné opticky aktivní stacionární fáze zahrnují, ale nejsou omezeny na, oxid křemičitý (např. ChiraSper™, Merck; Chiralpak™ OT/OP, Baker), estery celulosy nebo karbamáty (např. Chiracel™ OB/OY,Baker) nebo jiné (např. Crownpak™, Daicel™ nebo Chiracel™ OJ-R, Baker). Mohou být také aplikovány další způsoby pro oddělení enantiomérů, jako tvorba diastereomerních sloučenin ze sloučenin vzorce I, spolu s dalšími opticky aktivními sloučeninami, např. kyselina kafrsulfonová nebo brucin a oddělení těchto diastereomerických sloučenin, následované uvolněním opticky aktivního činidla. Enantiomericky obohacené nebo čisté sloučeniny vzorce I lze také získat použitím opticky aktivních výchozích materiálů.

Příprava sloučenin vynálezu:

Sloučeniny vzorce (I) mohou být připraveny známými způsoby, jak je popsáno v literatuře (např., ve standardních učebnicích, takových, jako Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Georg Thieme Verlag, Stuttgart; Organic Reactions, John Wiley & Sons, lne., New York) a v referencích citovaných v příkladech a jmenovitě za reakčních podmínek, které jsou známé z vhodné pro řečené reakce. Mohou být také použity známé varianty, které zde nejsou detailněji zmíněny. Sloučeniny vzorce (I) mohou být připraveny jakýmkoliv postupem, který je známý tím, že je aplikovatelný pro přípravu chemicky podobných sloučenin. Kromě toho, může být sloučenina vzorce (I) přeměněna známými způsoby na jinou sloučeniny vzorce (I).

Takové postupy, jsou-li použity pro přípravu hydroxamidového derivátu (1-oxo-l, 2,3 , 4-tetrahydronaf talen-2-yl)-alkanové kyseliny nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli, jsou poskytnuty jako další rys vynálezu a jsou demonstrovány následujícími charakteristickými příklady, ve kterých, pokud není uvedeno jinak, mají X, Y, Rl, R2, R3, R4, R5 a n jakýkoliv význam definovaný výše. Nezbytný výchozí materiál může být získán standardními postupy organické chemie. Příprava takových výchozích materiálů je popsána v doprovodných neomezujících příkladech. Nezbytné výchozí materiály jsou alternativně získatelňé pomocí postupů, které jsou analogické těm ukázaným, které jsou běžnou praxí organické chemie.

(A) Jeden přednostní způsob pro přípravu sloučeniny vzorce I je odchránění sloučenin vzorce II

kde PG je vhodná chránící skupina a ve které má Rí, R2, R3, R4, R5, X a Y shora uvedený smysl.

Sloučeniny vzorce (II) jsou nové a jsou zahrnuty v předkládaném vynálezu.

Vhodné PG chránící skupiny jsou například benzyl-, pmethoxybenzyl-, terč. butyloxykarbonyl-, trityl- nebo silylové skupiny takové, jako trimethylsilyl- nebo dímethylterc.butylsilyl-skupina. Reakční podmínky pro odchránění závisí na typu chránící skupiny. Je-li chránící skupina benzyl- nebo p-methoxybenzyl skupina, je reakce provedena hydrogenolýzou v inertním rozpouštědle takovém, jako alkohol jako methanol nebo ethanol, za přítomnosti ušlechtilého kovového katalyzátoru, takového, jako paladium nebo platina na vhodném nosiči takovém, jako uhlík, barium trimethylsilyl’ síran, nebo uhličitan barnatý, při okolní teplotě a tlaku. Je-li chránící skupina terč. butyloxykarbonyl- nebo tritylskupina, je reakce provedena za přítomnosti kyselin při teplotě mezi -20°C až 60°C, výhodně mezi 0°C a okolní teplotou. Kyselina může být roztok kyseliny chlorovodíkové v inertním rozpouštědle, takovém, jako diethylether nebo dioxan nebo trifluoroctová kyselina v dichlormethanu. li chránící skupina silyl skupina, taková, nebo dimethyl-terc.butylsilyl-skupina,

Jejako je reakce výhodně provedena za přítomnosti zdroje fluoridu, takového, jako fluorid sodný nebo fluorid tetrabutylamonný v inertním rozpouštědle, takovém, jako dichlormethan.

Sloučeniny vzorce (II), ve kterých Rl je COOH, mohou být připraveny ze sloučenin vzorce (II), ve kterých Rl je COO(1-4C)alkyl, hydrolýzou esterové části. Dosažení této přeměny prováděných reakcí závisí na typu (l-4C)alkylskupiny. Je-li (1-4C)alkyl-skupina methyl nebo ethyl skupina, je reakce provedena za přítomnosti báze, například hydroxidu litného, hydroxidu sodného nebo hydroxidu draselného v inertním rozpouštědle nebo naředěné například v methanolu nebo ethanolu nebo tetrahydrofuranu. Je-li (14C) alkyl-skupina teřc.butyl skupina je reakce provedena za přítomnosti kyseliny, například roztoku kyseliny chlorovodíkové v inertním rozpouštědle takovém, jako diethylether nebo dioxan nebo kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu. Sloučeniny vzorce (II), ve kterých Rl je H, mohou být připraveny ze sloučenin vzorce (II), ve kterých Rl je COOH, pomocí tepelné dekarboxylace. Toho může být dosaženo zahříváním v inertním rozpouštědle po 1 až 48h, výhodně 5 až 9h při teplotě mezi 60 až 200 °C, výhodně mezi 80 až 120°C.

Sloučeniny vzorce (II), ve kterých Rl je (1-4C)alkyl nebo COO(1-4C)alkyl mohou být získány reakcí sloučeniny vzorce (III), • ·

(III) ve které R2, R3, R4, R5 a Y mají shora uvedený význam a

G1 je (l-4C)alkyl nebo C00(1-4C)alkyl, se sloučeninou vzorce (IV)

O

A-X^ _zPG

N-O /

^H (IV) kde A je a nahraditelná skupina, PG má dříve definovaný význam a X má shora uvedený význam, za nepřítomnosti nebo přítomnosti báze.

Vhodná nahraditelná skupina A je například halogeno nebo sulfonyloxy skupina, například chloro, bromo, methanesulfonyloxy nebo toluen-p-sulfonyloxy skupina. Vhodná báze je například organická aminová báze, taková, jako například pyridin, 2,6-lutidin, kolidin, 4dimethylaminopyridin, triethylamin, morfolin, Nmethylmorfolin nebo diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en nebo například uhličitan alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin nebo hydroxid, například uhličitan sodný, uhličitan draselný, uhličitan vápenatý, hydroxid sodný nebo hydroxid draselný.

Reakce je obvykle provedena za přítomnosti vhodného inertního rozpouštědla nebo ředidla například alkanolu nebo esteru takového, jako methanol ethanol, isopropanol nebo ethylacetát, halogenovaného rozpouštědla takového, jako methylenchlorid, chloroform nebo tetrachlormethan , etheru takového, jako tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxan, aromatického rozpouštědla takového, jako toluen nebo dipolárního aprotického rozpouštědla takového jako N,Ndimethylformamid, N,N-dimethylacetamid, N-ethylpyrolidin-2on nebo dimethylsulfoxid. Reakce je vhodně provedena při ^r _y j íooíiíc

50-150°C.

Sloučeniny vzorce. (II), ve kterých R1 je vodík, (1-4C)alkyl nebo C00(1-4C)alkyl mohou být také získány reakcí sloučeniny vzorce (V)

ve které R2, R3, R4, R5, X a Y mají výše uvedený význam a G2 je vodík, (1-4C)alkyl nebo C00(1-4C)alkyl se sloučeninou vzorce (VI) h₂nPG (VI) kde PG je a vhodná chránící skupina, jak je popsáno výše. Tato reakce typicky zahrnuje dvoukrokový jednonádobkový postup. V prvním kroku se aktivuje karboxylát vzorce (V) . Tato reakce je prováděna v inertním rozpouštědle nebo ředidle, například v dichlormethanu, dioxanu, nebo tetrahydrofuranu, za přítomnosti aktivačního činidla. Vhodný reakční derivát kyseliny je například acylhalid například acylchlorid vytvořený reakcí kyseliny a chloridu anorganické kyseliny, například thionylchloridu; směsný anhydrid, například anhydridem vytvořeným reakcí kyseliny a chlormravenčanu takového, jako chlormravenčan isobutylnatý; aktivní ester, například ester vytvořený reakcí kyseliny a φ ··· fenolu takového, jako pentafluorfenol; aktivní ester vytvořený reakcí kyseliny a N-hydroxybenzotriazolu; acylazid, například azid vytvořený reakcí kyseliny a azidu takového, jako difenylfosforylazid; acylkyanid, například kyanid vytvořený reakcí kyseliny diethylfosforylkyanid; nebo a kyanidu takového, jako produkt reakce kyseliny a karboimidu, takového, jako dicyklohexylkarbodíimid nebo produkt reakce kyseliny a bis-(2-oxo-3-oxazolidinyl)fosforylchloridu. Reakce je provedeno mezi -30°C a 60°C, vhodně při nebo pod 0°C. Ve druhém kroku je k roztoku přidán hydroxylamin při teplotě použité pro aktivaci a teplota je pomalu upravena na teplotu okolí. Tyto způsoby jsou dobře známy těm, kteří jsou orientováni v oboru. Principielně jsou také aplikovatelné všechny způsoby pro syntézu amidů, používaných v peptidové chemii, jak je popsáno v např. Methoden der organischen Chemie (HoubenWeyl) Vol. XV71 a XV/2.

·· rfrfrfrf

J5 ·*· ·

Sloučeniny vzorce (V) jsou připraveny ze sloučenin vzorce (VII)

R3

R4

R2

Y

R5

Rfi (VII) kde X, Y, R2, R3, R4 a R5 mají význam definovaný zde dříve a G3 je vodík nebo (1-4C) alkyl a R6 je alkyl skupina, například methyl, ethyl nebo terc.butyl skupina nebo benzyl skupina, hydrolýzou. Podmínky, za kterých je provedena hydrolýza závisí na charakteru skupiny R6. Je-li R6 methyl nebo ethyl skupina, je reakce provedena za přítomnosti báze například hydroxidu litného, hydroxidu sodného nebo hydroxidu draselného v inertním rozpouštědle nebo ředidle například v methanolu nebo ethanolu. Je-li R6 terc.butyl skupina je reakce provedena za přítomnosti kyseliny například roztoku kyseliny chlorovodíkové v inertním rozpouštědle, takovém, jako diethylether nebo dioxan, nebo kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu. Je-li R6 benzyl skupina je reakce provedena hydrogenolýzou za přítomnosti ušlechtilého kovového katalyzátoru, takového, jako paladium nebo platina na vhodném nosiči, takovém, jako uhlík.

Sloučeniny vzorce (VII) jsou připraveny ze sloučenin vzorce (VIII),

ve kterých R2, R3, R4, R5, Y a G3 mají význam definovaný zde (

VIII) ·» ···· • · ···· * výše, reakcí se sloučeninami vzorce (IX)

A—X

O-R6 (IX) kde A, X a R6 mají shora definovaný význam, za nepřítomnosti nebo přítomnosti vhodné báze. Vhodná báze je například organická aminová báze taková, jako například pyridin, 2,6-lutidin, kolidin, 4-dimethylaminopyridin, triethylamin, morfolin, N-methylmorfolin nebo diazabicyklo [5.4.0]undec-7-en nebo například uhličitan nebo hydroxid kovu nebo kovu alkalických zemin například uhličitan sodný, uhličitan draselný, uhličitan vápenatý, hydroxid sodný nebo hydroxid draselný nebo hydrid například hydrid sodný.

Reakce je vhodně provedena za přítomnosti vhodného inertního rozpouštědla nebo ředidla například alkanolu nebo esteru, takového, jako methanol, ethanol, isopropanol nebo ethylacetát, halogenovaného rozpouštědla takového, jako methylenchlorid, chloroform nebo tetrachlormethan, etheru takového, jako tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxan, aromatického rozpouštědla takového, jako toluen nebo dipolárního aprotického rozpouštědla takového, jako N,Ndimethylformamid, N,N-dimethylacetamid, N-ethylpyrolidin-2on nebo dimethylsulfoxid. Reakce je prakticky provedena při

teplotě 50-150°C	v rozmezí	například	10	až	250°C, výhodně	v rozmezí
Příprava	sloučenin	vzorce (VII)	ze	sloučenin vzorce (VIII)
je také	popsána v	Ugi, I.,	et	al.	, Liebigs Ann.	Chem. 641

(1961) 63-70.

(B) Další přednostní způsob pro přípravu sloučenin vzorce I je reakce sloučeniny vzorce (V) s hydroxylaminem.

♦ · • · * «

Tato reakce typicky zahrnuje dvoukrokový jednonádobkový postup. V prvním kroku se aktivuje karboxylát vzorce (V) . Tato reakce je prováděna v inertním rozpouštědle nebo ředidle, například v dichlormethanu, díoxanu, nebo tetrahydrofuranu, za přítomnosti aktivačního činidla. Vhodný reakční derivát kyseliny je například acylhalid například acylchlorid, vytvořený reakcí kyseliny a chloridu anorganické kyseliny, například thionylchloridu; směsný anhydrid, například anhydridem vytvořeným reakcí kyseliny a chlormravenčanu takového, jako chlormravenčan isobutylnatý; aktivní ester, například ester vytvořený reakcí kyseliny a fenolu takového, jako pentafluorfenol; aktivní ester vytvořený reakcí kyseliny a N-hydroxybenzotríazolu; acylazid, například azid vytvořený reakcí kyseliny a azidu takového, jako difenylfosforylazid; acylkyanid, například kyanid vytvořený reakcí kyseliny a kyanidu takového, jako diethylfosforylkyanid; nebo produkt reakce kyseliny a karboimidu, takového, jako dicyklohexylkarbodiimid nebo produkt reakce kyseliny a bis-(2-oxO“3-oxazolidinyl)fosforylchloridu. Reakce je provedeno mezi -30°C a 60°C, vhodně při nebo pod 0°C. Ve druhém kroku je k roztoku přidán hydroxylamin při teplotě použité pro aktivaci a teplota je pomalu upravena na teplotu okolí. Tyto způsoby jsou dobře známy těm, kteří jsou orientováni v oboru. Principielně jsou také aplikovatelné všechny způsoby pro syntézu amidů, používaných v peptidové chemii, jak je popsáno v např. Methoden der organischen Chemie (HoubenWeyl) Vol. XV71 a XV/2.

(C) Třetí přednostní způsob pro produkci sloučeniny vzorce (I) zahrnuje reakci sloučenin vzorce (X) • 9

kde X, Υ, R2, R3, R4 a R5 mají shora definovaný význam a G4 je vodík nebo a (1-4C)alkyl skupina nebo COOt.butoxy a R7 je a (1-4C)alkyl skupina, výhodně methyl nebo ethyl skupina, s hydroxylaminem za přítomnosti vhodné báze. Reakce je provedena v inertním rozpouštědle nebo ředidle, takovém, jako methanol nebo ethanol při teplotách mezi 0°C a 100°C, běžně při nebo blízko okolní teploty, a při pH mezi 10 a 12. Vhodná báze je například alkoholát, například methylát sodný. Sloučeniny vzorce (X) jsou připraveny analogickým způsobem, jako ten, který byl popsán pro sloučeniny vzorce (VII).

Vynález bude nyní doložen následujícími neomezujícími příklady, ve kterých, pokud není uvedeno jinak :

(i) odpaření bylo provedeno na rotační odparce ve vakuu a postupy rozpracování byly provedeny po odstranění zbytkových pevných látek, tak, jako sušící činidla filtrací;

(ii) operace byly prováděny při okolní teplotě, což je v rozmezí 18-25°C a pod atmosférou inertního plynu, takového, jako dusík;

(iii) kolonová chromatografie (bleskovým postupem) a vysokotlaká kapalinová chromatografie (HPLC) byly provedena na Merck Kieselgel oxidu křemičitém nebo Merck Lichroprep™ RP-18 reverzní fázi oxidu křemičitého získané z E. Merck, Darmstadt,Germany, (iv) výtěžky jsou dány pouze pro demonstraci a nepředstavují nutně dosažitelné maximum;

(v) body tání jsou stanoveny použitím přístroji bodu tání Buchi 510.

(vi) struktury koncových produktů vzorce I byly potvrzeny nukleární (obecně protonovou) magnetickou rezonancí (NMR) a hmotově spektrálními technikami;

(vii) meziprodukty nebyly obecně plně charakterizovány a čistota byla odhadnuta tenkovrstvou chromatografií (TLC);

(viii) byly použity následující zkratky:

DMF, N,N-dimethylformamid;

DMSO, dimethylsulfoxid';

THF, tetrahydrofuran;

MeOH, methanol;

HC1, kyselina chlorovodíková;

NaH, hydrid sodný CH2CI2, dichlormethan;

H2SO4, kyselina sírová sat., saturovaný roz., roztok rt, laboratorní teplota

Příklad 1

Hydroxamid 5-(1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentanové kyseliny (Id)

K roztoku 5,0g (22,9 mmol) ethylesteru 1-oxo-l,2,3,4tetxahydro-nafthalen-2-karboxylové kyseliny (la) (Pradeep, K. , and Saravanan, K., Tetrahedron 54 (1998) 2161-2168) a

5,79 g ethyl-5-brom~pentanoátu (27,7mmol) v 10 ml ethanolu při refluxu je přidán čerstvě připravený roztok 0,53g sodíku v 15 ml ethanolu. Po 10 h při refluxu je přidáno dostatečné množství vody, aby se rozpustil precipitát. Rozpouštědlo je odpařeno, zbytek je rozpuštěn v roztoku 3,85 g KOH v 7 ml MeOH a 5 ml H₂O a refluxován po dalších • 444

h. Po ochlazení je roztok nalit do 25 ml ledově studené 4N HC1 a extrahován CH₂C1₂. Po odpaření rozpouštědla zůstává zbytek surové 5-(1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-nafthalen-2-yl)pentanové kyseliny (lb), která je rozpuštěna ve 100 ml

T^. _Λ 1.___1. . i · ·Ur: yi loaiid pcix Xdjjeh n2OV«5 ct IUZLUK. Jtí T1OC refluxován. Po přídavku roztoku uhličitanu sodného je odpařeno rozpouštědlo a zbytek je podroben kolonové chromatografii, za výtěžku 1, 9g methyl-(5-(1-oxo-l,2,3,4tetrahydro-nafthalen-2-yl)-pentanoátu) (lc). K roztoku 1, 6g (23 mmol) hydroxylaminhydrochloridu ve 40 ml MeOH je přidáno 15 ml roztoku 0,8g (35 mmol) sodíku ve 30 ml MeOH. K tomu je přidán roztok 3,0 g (11,5 mmol) methyl-(5-(1-oxo-l,2,3,4tetrahydro-nafthalen-2-yl)-pentanoátu) (lc) ve 20 ml MeOH a poté je přidáno zbývajících 15 ml roztoku methylátu sodného. Po 6 h míchání při rt je odpařeno rozpouštědlo, okyseleno 2 N HC1 a extrahováno CH₂C1₂. Zbytek po odpaření je purifikován kolonovou chromatografíí, s výtěžkem 2,2 g sloučeniny, uvedené v nadpisu, jako oleje, MS (APCI): 260,1 (M-l).

Příklad 2:

Hydroxyamid 5-(6-methoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen2-yl)-pentanové kyseliny (2d)

5-(6-methoxy-1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentanové kyselina (2b) je připravena z ethylesteru 6methoxy-1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-nafta len-2 - karboxylove kyseliny (2a) (Basu, B., et al., Synth. Commun., 11, 10,

1981, 803-810) způsobem analogickým tomu, který byl popsán pro lb v Příkladu 1. 6,6g (24,3mmol) lb je rozpuštěno ve 140 ml CH₂C1₂. K tomuto roztoku jsou • · · ·

postupně přidány 3,3 ml triethylaminu, 6,9 g bis-(2oxo-3-oxazolidinyl)-fosforylchloridu, 3,0g 0benzylhydroxylaminu a dalších 10,2 ml triethylaminu. Po míchání přes noc je roztok promyt 2N HC1, poté sat. roz. NaCl a odpařen. Po upravení diethyletherem je získáno 8,5 g benzyloxyamid 5-(6-methoxy-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydronaf talen-2-yl)-pentanové kyseliny (2c), jako světlé krystaly. Hydrogenace 0,5g 2c v methanolu, s Pd/BaCC^/Pb jako katalyzátoru, poskytla, po odpaření a úpravě diethyletherem, 0,3 g sloučeniny z nadpisu, MP 118 - 120°C.

Enantiomery 2d byly odděleny semipreparativní HPLC, použitím Chiracel OJ-R a vody/methanolu, jako mobilní fáze. Čistota byla stanovena analytickou HPLC (Chiracel OJ-R kolona [15 cm, 4,6 mm, velikost částice 5 pm] použitím vody 35 / methanolu 65 v/v při rychlosti průtoku 0,6 ml/min, nástřik 5 μΙ-vzorků). Retenční čas a %ee každého enantiomeru byl 17,53min (91%ee) a 21,96 min (84%ee).

Příklad 3:

Hydroxyamid 6-{6-chlor-l-oxo-l,2,3, 4-tetrahydro-naftalen2-yl)-hexanové kyseliny (3c)

6-(6-chlor-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl}hexanové kyselina (3b) je připravena z ethylesteru 6chlor-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny (3a) (WO 98/54350) způsobem analogickým tomu, který je popsán pro 1b v Příkladu 1, použitím ethyl-6-bromhexanoátu místo ethy.l-6-brom-hexanoátu. K 1,6 g 3b ve 20 ml CH₂C1₂ je přidáno 3,7 ml triethylaminu a l,5g 9 g bis( 2-oxo - 3-oxa zo 1 i diny 1) f osf orylchloridu . Po 30 min « * míchání je přidáno 1,7 g O-tritylhydroxylaminu a míchání pokračovalo přes noc. Roztok je extrahován 2 N HCl a odpařen za zisku 2,9g oleje. Tento je znovu rozpuštěn ve 20 ml CH₂C1₂ a 10 ml trifluoroctové kyselině a míchán po 4 h. Po promytí vodou a odpaření rozpouštědla, je surový produkt podroben kolonové chromatografií, za výtěžku 60 mg sloučeniny, uvedené v nadpisu, jako oleje, MS (APCI): 308,1 (M-l).

Příklad 4:

Hydroxyamid 6-(2-methyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen2-yl)-hexanové kyselina (4c)

K suspenzi 0,7g NaH ve 40 ml suchého THF jsou přidány 4,0 g 2-methyl-l-tetralonu ve 20 ml THF. Po 30 min míchání je přidáno 5,5 g ethyl-6-brom-hexanoátu v 10 ml THF a směs je refluxována po 6 h. Po odpaření rozpouštědla je zbytek rozpuštěn v roztoku 4,16 g hydroxidu draselného v 50 ml MeOH a 20 ml H₂O a zahřát přes noc na reflux. Po odpaření MeOH je vodná fáze extrahována ethylacetátem, okyselena 2 N HCl a znovu extrahována ethylacetátem. Tento druhý extrakt je odpařen za zisku 4,2 g surové 6-(2-methyl-l-oxo1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl-hexanové kyseliny (4a). Způsobem analogickým tomu, který je popsán pro přeměnu 3b na 3c v Příkladu 3,4a je přeměněna na sloučeninu, uvedenou v nadpisu, 4c. 4c je olej MS (APCI): 288,1 (M-l).

Enantiomery 4c byly odděleny semipreparativní HPLC, použitím Chiracel OJ-R a vody/methanolu, jako mobilní fáze, Čistota byla stanovena analytickou HPLC (Chiracel OJ-R kolona [15 cm, 4,6 mm, velikost částice 5 pm] použitím vody 40 / methanolu 60 v/v při rychlosti průtoku 0, 6 • · · · » · · ••rf · ·· ··· ·· ·· ml/min, nástřik 10 μΐ vzorků) . Retenční čas a %ee každého enantiomeru byl 16,75min (100%ee) a 20,25min (87%ee).

Příklad 5:

Hydroxyamid 6-(1-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yi) hexanové kyselina (5c)

Hydroxyamid 6-(1-oxo-l, 2,3, 4-tetrahydro-naftalen-2-yl}hexanové kyseliny {5a) je připraven z ethylesteru 1-oxo1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny (la) , způsobem analogickým tomu, který je popsán pro přeměnu 3a na 3c v příkladu 3. Výtěžek v posledním kroku je 10%, MS (APCI): 274,1 (M-l).

Příklad 6:

Hydroxyamid 5- (2-methyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen2-yl)-pentanové kyselina (6b)

K suspenzi 0,86 g NaH ve 40 ml suchého THF je přidáno 5,0 g 2-methyl-l-tetralonu ve 20 ml THF. Po 30 min míchání je přidáno 7,5g ethyl-5-brom-pentanoátu ve 20 ml THF a směs je refluxována po 6 h. Vychlazená směs je nalita do vody a extrahována ethylacetátem. Extrakt je odpařen za zisku surového ethyl-5- ( 2-methyl-1 -oxo-1, 2,3, 4-tetrahydronaf talen-2-yl)-pentanoátu (6a), který je purifikován kolonovou chromatografií, za zisku 3,6 g čistého 6a. 6a je přeměněn na 6b způsobem, analogickým tomu, který byl popsán pro přeměnu lc na ld v příkladu 1. 6b byl získán * · · · * · » ·« * «« » « · » « · · · fc · * · · .1 · ♦♦···

Z 4 *»* · ·*«*· · · ·· jako olej, MS (APCI): 274,1 (M-l).

Enantiomery 6b byly odděleny semipreparativni HPLC, použitím Chiracel OJ-R a vody/methanolu, jako mobilní fáze. Čistota byla stanovena analytickou HPLC (Chiracel OJ-R kolona [15 cm, 4,6 mm, velikost částice 5 pm] použitím vody 40 / methanolu 60 v/v při rychlosti průtoku 0, 6 ml/min, nástřik 10 μΐ vzorků) . Retenční čas a %ee každého enantiomeru byl 11,48 min (100%ee) a 13.86min (95%ee).

Příklad 7:

Hydroxyamid 6-(2-methyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen2-yl)-hex-5-enoové kyselina (7c)

K 1,55 ml diisopropylaminu ve 40 ml THF je přidán roztok 4,36 ml n-butyllithia (2,5 M) v hexanu při -78°C. Po lOmin je přidáno 1,63 g 2-methyl-l-tetralonu v 5 ml THF a roztok je míchán po 50 min. Poté, je po kapkách přidáno 1,60 g methylesteru 6-oxo-hexanové kyseliny v 5 ml THF a míchání pokračuje po 15 min. Poté je odstraněna ochlazovací lázeň a směs je ponechána, aby dosáhla rt. Je přidán konc. roz. amoniumchloridu a extrahován ethylacetátem. Zbytek po odpaření je purifikován kolonovou chromatografií za zisku 0,8 g methylesteru 6-hydroxy-6-(2-methyl-l-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny (7a). 2,5g tohoto alkoholu 8a je rozpuštěno v 50 ml dichlormethanu a je přidáno 2,27 ml triethylaminu. Po ochlazení na 0°C, je po kapkách přidáno 2,86g anhydridu methansulfonové kyseliny ve 20 ml dichlormethanu. Poté, co je přidávání dokončeno, je ochlazovací lázeň odstraněna a míchání pokračovalo přes noc. Roztok je promyt 2N HCl a vodou, oddělen, vysušen a odpařen.

Surový produkt 1,6 g 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undecen-7-en (DBU) je rozpuštěn v 60 ml toluenu a zahříván na refluxu po 24h. Směs je nalita do 2N HC1 a extrahována dichlormethanem. Po odpaření a kolonové chromatografií je získáno 0,6g methylesteru 6-(2-methyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen2-yl)-hexenové kyseliny (7b) . 7b je přeměněn na 7c způsobem analogickým tomu, který je popsán pro přeměnu lc na ld v příkladu 1. 7c byl získán jako olej, MS (APCI): 286,1 (M-l).

Příklad 8:

Hydroxamid 5-(5-methoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen2-yl)-hexanové kyselina (8f)

Ethylester 5-methoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2karboxylové kyseliny (2,34g; 8a) (Genet, J.P., et al.,

Tetrahedron Lett. 35 (1994) 4559-4562) je upraven ethyl-6brom-hexanoátem způsobem analogickým tomu, který je popsán pro přeměnu 3a v přikladu 3. To mělo za výsledek směs 6-(5methoxy-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny (8b) a ethylesteru 2-(5-karboxy-pentyl)-5-methoxyl-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny (8c) v poměru přibližně 1:1. Tato směs kyselina je upravena O-benzylhydroxylaminem podobným způsobem, který je popsán pro přeměnu 2b na 2c v Příkladu 2. Surový produkt je podroben kolonové chromatografií za zisku neoddělitelné směsi ethylesteru 2-(5-benzyloxykarbamoyl-pentyl)-5-methoxyl-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny (8d) a benzyloxyamidu 6-(5-methoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)-hexanové kyseliny (8e). Tato směs je hydrogenována v methanolu s Pd/C/BaSO₄ jako katalyzátorem.

»· · ·

Výsledný surový produkt hmotností 305 poskytlo (APCI): 306,1 (M+l).

je purifikován LC/MS. Sběr frakcí s sloučeninu uvedenou v nadpisu, MS

Příklad 9:

Ethylester 2-(5-hydroxykarbamoyl-pentyl)-5-methoxy-l-oxo1,2,3, 4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny (9a).

Ze stejné LC/MS separace, která je popsána v příkladu 8, byla získána frakce s hmotností 377, poskytující sloučeninu, uvedenou v nadpisu, MS (APCI): 378,3 (M+l).

WO 02/46144

Příklad 10:

Ethylester 2-(7-hydroxykarbamoylheptyl)-5,7-dimethyl-loxo-1,2,3j4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny (10d)

Ethylester 5,7-dimethyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen2-karboxylové kyseliny (10a) byl připraven z 5,7-dimethyl1-tetralonu běžným způsobem. K roztoku 3,5g 10a a 4,5g methyl-8-brom-oktanoátu ve 30 ml ethanolu za refluxu je přidán čerstvě připravený roztok 0,35g sodíku v 15 ml ethanolu. Po 15 h refluxu je ethanol odpařen a je přidán dichlormethan a voda. Po oddělení kolonovou chromatografií jsou získány 4,0 g žlutého oleje. Tento zbytek je rozpuštěn v roztoku 690 mg KOH v 10 ml vody a 10 ml MeOH a refluxován po dalších 13 h. Poté je ochlazený roztok okyselen 2N HC1 a extrahován CH2CI2. Po odpaření zůstal zbytek surového ethylesteru 2- (7-karboxy-heptyl) -5,7-dimethyl-l-oxo1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny (10b), který je purifikován kolonovou chromatografií, poskytující 1,2 g 10b. 630mg kyseliny 10b je rozpuštěno v ml diethyletheru a je přidáno 0,3 ml N-methylmorfolinu a 0,33 ml isobutylchlorformiátu, a následně 270 mg 0benzylhydroxylaminu. Obvyklý pracovní postup poskytl 600 mg (71%) ethylesteru 2-(7-benzyloxykarbamoyl-heptyl)-5,7dimethyl-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny (10c). 10c je přeměněn na sloučeninu, uvedenou v nadpisu, způsobem podobným tomu, který je popsán pro přeměnu 2c na 2d v příklad 2. MS (APCI): 402,52 (M-l).

Příklad 11:

Způsobem analogickým tomu, který byl popsán v Příkladech 1-10 a použitím známých způsobů, popsaných v literatuře (např. ve standardních pracích takových, jako HoubenWeyl,Methoden der Organischen Chemie, Georg Thieme Verlag, Stuttgart; Organic Reakces, John Wiley & Sons, lne., New York) jsou připraveny následující sloučeniny:

a) hydroxyamid 5-(6,7-dimethoxy-l-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-pentanové kyseliny

b) hydroxyamid 6- (6-dimethylarnino-2-methyl-l-oxo1,2,3.4-tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

c) hydroxyamid 6-(6, 7-dimethoxy-2-methyl-l-oxo-l, 2,3, 4tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

d) hydroxyamid 5-(6, 7-dimethoxy-2-methyl-l-oxo-l,2,3,428 tetrahydro-naftalen-2-yl)-pentanové kyseliny

e) hydroxyamid 6-(6-diel+iylajnino-2-methyl-l -oxc1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

f) hydroxyamid 6-{2-methyl-l-oxo-6-pyrrolidin-l-yl1,2,3, 4-tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

g) hydroxyamid 6-(2-methyl-l-oxo-6-piperidin-l-yl1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

h) hydroxyamid 6-(2-methyl-l-oxo-6-fenyl-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

i) hydroxyamid 6-(6-brom-2-methyl-l-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

j) hydroxyamid 5-(7-methoxy-l-oxo-l, 2,3, 4-tetrahydronaftalen-2-yl)-pentanové kyseliny

k) hydroxyamid 5-(5-methoxy-l-oxo-l, 2, 3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)-pentanové kyseliny

l) hydroxyamid 5-(5,7-dimethyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)-pentanové kyseliny

m) hydroxyamid 6-(2-methyl-l-oxo-6-pyridin-2-yl-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny n} hydroxyamid 6-(2-methyl-l-oxo-6-pyridin-3-yl-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

o) hydroxyamid 6-(2-methyl-l-oxo-6-pyridin-4-yl-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

p) hydroxyamid 5-{7-dimethylamino-l-oxo-l, 2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-pentanové kyseliny

q) hydroxyamid 5-(7-amino-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)-pentanové kyseliny

r) hydroxyamid 6-(2,6-dimethyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

s) hydroxyamid 5-(2-ethyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)-pentanové kyseliny

t) hydroxyamid 6-(2,5,8-trimethyl-l-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

u) hydroxyamid 5-(6,7-dímethoxy-l-oxo-l, 2, 3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)-pentanové kyseliny

v) methylester 2-(4-hydroxykarbamoyl-butyl)-5,7-dimethyl29

1- oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny

w) methylester 2-(5-hydroxykarbamoyl-pentyl)-6-methyl-loxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny

x) 2-(4-hydroxykarbamoyl-butyl)-1-oxo-l, 2,3,4-tetrahydronaf talene-2-karboxylová kyselina

y) hydroxyamid 5-(7-dimethylamino-2-methyi-l-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-2,2-dimethyl-pentanové kyseliny

z) 2-methyl-5-(2-methyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen2- yl)-pentanové kyselina aa) hydroxyamid 1-[3-(2-methyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydronaf talen-2-yl) -propyl]-cyklopropankarboxylové kyseliny bb) hydroxyamid 5-(2-methyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydronaf talen-2-yl) -pent-4-enoové kyseliny cc) hydroxyamid 6-(7-chlor-2-methyl-l-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny dd) ethylester 2-(5-hydroxykarbamoyl-pentyl)-5,7-dimethyl1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny

Příklad 12:

Vyhodnocení inhibičních vlastností sloučenin vynálezu

Pro měření inhibičních vlastností sloučenin vynálezu bylo zavedeno testovací měření použitím aminokumarinové derivátu omega-acetylovaného lysinu jako substrátu pro enzym. Tento test je detailně popsán v Hoffmann, K., et al., Nucleic Acid Research 27 (1999) 2057-2058). Použitím protokolu, popsaného v této publikaci, byl inhibiční účinek nové sloučeniny stanoven při koncentraci 10 nM. Pozorovaná míra inhibice pro vybrané sloučeniny je ukázána v Tabulce 1:

·· »···

Tabulka 1:

Sloučenina uvedená v názvu v Příkladu č.	8	4	2	7	9	10
Inhibični účinek	72	71	64	60	57	55
při 10 mM v %

Ve stejném testu vykazuje suberanilohydroxamiová kyselina (SAHA) (reference na straně 2) inhibični účinek 42% při 10 nM.

Přiklad 13:

Složení tablety

Položka Složky

Sloučenina 2d

Bezvodá laktosa

Kroskarmellosa Povidon K30

Sodný

Stearát horečnatý Celková hmotnost mg/Tableta

140

100

150

Sloučenina 2d je popsána v Příkladu 2.

Výrobní postup:

1. Míchej Položky 1,2 a 3 ve vhodném mixeru po 15 minut.

2. Granuluj práškovou směs z Kroku 1 20% roztokem Povidonu K30 (Položka 4).

3. Vysuš granulát z Kroku 2 při 50° C.

4. Převeď granulát z Kroku 3 přes vhodné mlecí zařízení.

5. Přidej Položku 5 k namletému granulátu z Kroku 4 a a míchej po 3 minuty.

··· ·

6. Stlač granulát z Kroku 5 ve vhodném lisu. Příklad 14:

Složení kapsle

Položka	Složka	mg/kapsle
1	Sloučenina 2d	50	100
2	Bezvodá laktosa	123	148
3	Kukuřičný škrob	35	40
4	Mastek	15	10
5	Stearát hořečnatý	2	2
	Celková hmotnost plnění	225	300

Výrobní postup:

1. Míchej Položky 1,2 a 3 ve vhodném mixeru po 15 minut.

2. Přidej Položky 4 & 5 a míchej 3 minuty.

3. Naplň vhodnou kapsli.

·44 · *

Seznam citací

Basu, B., et al., Synth. Commun., 11,10,1981, 803-810 Genet, J.P., et al., Tetrahedron Lett 35 (1994) 4559-4562

Cancer: Principles & Practice of Oncology, Vincent T.

DeVita, Jr., Samuel Hellmann, Steven A. Rosenberg; 5^thEd., Lippincott-Raven Publishers (1997)

Hoffmann, K. , 2058	et al., Nucleíc Acid Research 27	(1999)	2057-
Houben-Weyl,	Methoden der organischen Chemie,	Vol.	XV/1 a
XV/2
Houben-Weyl,	Methoden der Organischen Chemie,	Georg	Thieme
Verlag,	Stuttgart
Marks, P.M.,	et al., J. Nad. Cancer Inst 15	(2000)	1210-
1216

Organic Reakces, John Wiley & Sons, lne., New York

Pradeep, K., a Saravanan, K., Tetrahedron 54 (1998) 21612168

Ugi, I., et al., Liebigs Ann. Chem. 641 (1961) 63-70 US Patent No. 5,369,108

Claims

Patentové nároky

i.

OH

0) kde:

R1 je vybrán z vodíku, (1-4C)alkylu, COOH, COO(14C)alkylu;

R
2, R
3, R4, R5 jsou nezávisle vybrány z vodíku, halogenového atomu, (1-4C)alkyl-, trifluormethyl-, hydroxy-, (1-4C)alkoxy-, aryloxy-, arylalkyloxy-, nitro-, amino-, (1-4C)alkylamino-, di[(1-4C)alkyl]amino-, piperidino, morfolíno, pyrolidino, (14C)alkanoylamino-, nebo arylové skupiny, nebo heteroarylové skupiny, nebo R2 a R3 společně nebo R3 a R4 společně nebo R4 a R5 společně mohou vytvářet (1-3C)alkylenedioxy kruh nebo R2 a R3 společně nebo R3 a R4 společně nebo R4 a R5 společně mohou vytvářet (35C)alkylénový řetězec ;

Y je -CH2-CH2;

X je alkylénový řetězec 4 až 10 uhlíkových atomů, které mohou být saturované nebo nesaturované jednou nebo dvěma dvojnými vazbami nebo jednou nebo dvěma trojnými vazbami nebo jednou dvojitou a jednou trojitou a které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené nebo přerušené (3—7C) cykloalkylovým kruhem.

její enantioméry, díastereoisoméry a racemáty, stejně jako její soli s farmaceuticky přijatelnými, kyselinami a zásadami.

Sloučenina vzorce I, podle nároku 1, kde R1 je vodík nebo (1-4C) alkyl nebo COOR, ve kterém R je vodík nebo (1-4C) alkyl.

Sloučenina vzorce I, podle nároku 1, kde R2, R3, R4 a R5 jsou nezávisle vodík nebo tři z nich jsou vodík nebo R2 a R5 jsou vodík.

Sloučenina vzorce I podle nároku 1, kde X je (CH₂)_n- nebo -CH=CH-(CH₂) _η-₂-, ve které n je celé číslo od 3 do 7.

Sloučenina vzorce I podle nároku 1, kde X je (CH₂) „ . ,-CH (CH₃) - , -(CH₂)_n__lz -C(CH₃)₂- nebo -(CH₂)_n-iC (-CH₂-CH₂-)-/ ve které n je celé číslo od 3 do 7.

Sloučenina vzorce I podle nároku 1, vybraná ze skupiny, sestávající z

Hydroxamidu 5-(1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro yl)-pentanové kyseliny

Hydroxyamidu 5-(6-methoxy-l-oxo-l,2,3,4 naftalen-2-yl}-pentanové kyseliny Hydroxyamidu 6-{6-chlor-l-oxo-l,2,3,4naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny Hydroxyamidu 6- (2-methyl-1-oxo-l, 2,3,4naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

-naftalen-2-tetrahydro-tetrahydro-tetrahydroHydroxyamidu 6- (1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2yl)-hexanové kyseliny

Hydroxyamidu 5-(2-methyl-l-oxo-l, 2,3,4naftalen-2-yl)-pentanové kyseliny Hydroxyamidu 6 (2-methyl-l-oxo-l, 2,3,4naftalen-2-yl)-hex-5-enoové kyseliny Hydroxamide 5-(5-methoxy-l-oxo-l,2, 3,4tetrahydrotetrahydro-tetrahydro*44 44 ·· ·« 4
4 4 4 · 4 44*

44*444 4 * «4 4 *

-} < 4» 444444

Jj *44 4 4*444* *· * 4 naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

Ethylesteru 2-(
5-hydroxykarbamoyl-pentyl)-5-methoxy1-oxo-1,2)3, 4-tetrahydro-naftalen-2-karboxylové kyseliny

Ethylesteru 2-{7-hydroxykarbamoyl-heptyl)-5,7dimethyl-l-oxo-1,2,3j4-tetrahydro-naftalen-2karboxylové kyseliny

Hydroxyamidu
6-(
7-chloro-2-methyl-l-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexanové kyseliny

7.

Postup výroby sloučeniny vzorce I kde:

R1 je vybrán z vodíku, (1-4C)alkylu, COOH, COO(14C)alkylu;

R2, R3, R4, R5 jsou nezávisle vybrány z vodíku, halogenového atomu, (1-4C)alkyl-, trifluormethyl-, hydroxy-, (1-4C)alkoxy-, aryloxy-, arylalkyloxy-, nitro-, amino-, (1-4C)alkylamino-, di[(1-4C)alkyl]amino-, piperidino, morfolino, pyrolidino, (14C)alkanoylamíno-, nebo arylové skupiny, nebo heteroarylové skupiny, nebo R2 a R3 společně nebo R3 a R4 společně nebo R4 a R5 společně mohou vytvářet (1-3C) alkylenedioxy kruh nebo R2 a R3 společně nebo R3 a R4 společně nebo R4 a R5 společně mohou vytvářet {35C)alkylénový řetězec ;

Y je -CH2-CH2;

X je alkylénový řetězec 4 až 10 uhlíkových atomů, které *· tt·· • 4 · · · 4 4 4 • * 4 4 · • 4 4 · · • «44 4 4 44 mohou být saturované nebo nesaturované jednou nebo dvěma dvojnými vazbami nebo jednou nebo dvěma trojnými vazbami nebo jednou dvojitou a jednou trojitou a které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené nebo přerušené (3-7C) cykloalkylovým kruhem.

její enantioméry, diastereoisoméry a racemáty, stejně jako její soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami a zásadami.

Zreagováním sloučeniny vzorce III (III) kde Rl, R2, R3, R4, R5 a Y mají shora uvedený význam a sloučeniny vzorce IV

O

PG ^l-o ^H (IV) kde

A je nahraditelná skupina, PG je chránící skupina a X má shora uvedený význam.
8. Farmaceutická směs obsahující jako aktivní složku sloučeninu vzorce I podle nároků 1 až uve směsi s farmaceuticky přijatelným nosičem, excipientními látkami nebo ředidly

Použití sloučeniny podle nároků 1 až 6 pro

44 444*

4 44 ·· 4 4 4

4 4 4 4 4 4 4 • 444 » 4 4«·4 4

4 4 4 4 4 4 4

4 4 444 ·4· 44 44 přípravu léku, který má aktivitu jako inhibitor histondeacetylásy (HDAC).
10. Použití sloučeniny podle nároku 9, jako induktoru apoptózy nebo inhibitoru buněčné proliferace.