CS230889B1 - Production method of alpha amylase enzyme - Google Patents

Production method of alpha amylase enzyme Download PDF

Info

Publication number
CS230889B1
CS230889B1 CS15083A CS15083A CS230889B1 CS 230889 B1 CS230889 B1 CS 230889B1 CS 15083 A CS15083 A CS 15083A CS 15083 A CS15083 A CS 15083A CS 230889 B1 CS230889 B1 CS 230889B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
enzyme
alpha
alpha amylase
maltose
blastobotrys
Prior art date
Application number
CS15083A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Inventor
Jiri Zemek
Ludovit Kuniak
Ludmila Marvanova
Original Assignee
Jiri Zemek
Ludovit Kuniak
Ludmila Marvanova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiri Zemek, Ludovit Kuniak, Ludmila Marvanova filed Critical Jiri Zemek
Priority to CS15083A priority Critical patent/CS230889B1/cs
Publication of CS230889B1 publication Critical patent/CS230889B1/cs

Links

Landscapes

  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Description

230889 3
Vynález sa týká spósobu produkcie enzý-mu alfa amylázy (alfa-l,4-glukán glukáno-tíydroláza EC 3.2.1.1) pomocou mikrosko-pické]· huby Blastobotrys proliferans kulti-váciou na vhodných pódach.
Pre priemyselnú produkciu. alfa-amylázysa používajú najčastejšie následovně mikro-organizmy: Bacillus subtilis, Bacillus amylo-liqueficiens, Streptomyces aureofaciens, As-pergillus niger, Aspergillus oryzae a pod. Sú však aj iné mikroorganizmy, u ktorýchdoteraz nebola známá schopnost produkovatalfa amylázu. Pomocou gélovej metody (A. O.č. 18Θ059) testovania mikroorganizmov naalfa amylolytickú aktivitu sme zistili výraz-nú produkciu alfa amylolytickej aktivity mi-kroskopickou hubou blastobotrys proliferans.
Blastobotrys proliferans je novopopísanýdruh rodu Blastobotrys Klopotek čelade Mo-niliaceae rodu Moniliales, triedy Deuteromy-cetes [Marvanová L.: Two new Blastobotrysspecies. Transactions of the British Mycolo-gical Society 68, 217 (1976) ] izolovaný z pa-ra orechov (Bertholletia excelsa) z poško-deného jadra. O produkcii hydroláz polysa-charidov uvedeným druhom Blastobotrysproliferans nie je zatial nič známe.
Podstata vynálezu spočívá v tom, že kulti-váciou kmeňa Blastobotrys proliferans CCMF--493, deponovaný ako CBS 522-75 v Holand-sku a ATCC 34 216 v zbierke typových kul-túr USA na živnej pode obsahujúcej 1->4)-α--D-glukán ako induktor enzýmu pri teplote37 °C a hodnotě pH 4,8 po dobu 48 až 120 ho-din produkuje enzým alfa amylázu, ktorý sazíská v surovom stave odpařením rastovejpódy připadne v zušfachtenom stave zráža-ním síranom amonným, alebo organickýmirozpúšťadlami, s výhodou etanolu a acetonu. K ďalšej purifikácii nového enzýmu možnopoužit například afinitnej metody.
Uvedený kmeň Blastobotrys proliferanspředstavuje alternativně využitie v proce-soch produkcie alfa amylázy, například sa-charifikácie polysacharidov škrobu. Použitietakto získanej alfa amylázy, predovšetkýmv čistom stave, je vhodné pri výrobě alter-natívnych sladidiel, a to s ohfadom na vyso-ké zastúpenie maltózy a maltotriózy v enzy-matickom hydrolyzáte (až 55 %). Tátoskutočnosť zvýhodňuje využitie enzýmovéhoproduktu tam, kde vysoký obsah glukózy vhydrolyzáte nie je želaný (dietná stravapre fenylketonurikov, bombonársky sirupa pod.). Výhodné zloženie hydrolyzátu před-určuje enzymatickú hydrolýzu pomocou alfaamylázy Blastobotrys proliferans k prípravevzácných oligosacharidov maltózového typu.Na druhej straně výhodou je skutočnosť, ženový preparát obsahuje aj alfa glukozidázu(alfa-glukozid glukohydroláza EC 3.2.1.20]a možno preto neprečistený enzým využit ksacharifikácii [l->4)-«-D-glukánov škrobu ažna glukózu. Příklad 1
Blastobotrys proliferans CCMF-493 sa po-množí na rastovej pode obsahujúcej 2 g gélupřipraveného sletováním amylázy (A. O. čís.186 059) ponořeného do polovice výšky doYaest Nitrogen Base rastovej pode (Oxoid),pH 4,8, 0,6 g/100 ml a kultivuje sa povrchovopo dobu 48 hodin pri teplote 37 °C, kedy do-chádza k stekuteniu gélu. Nahromaděná bio-masa (0,07 g) sa použije k fermentácii napode obsahujúcej 22 g kukuřičného výluhua 2 g zemiakového škrobu a 0,5 g KH2PO4 na1 liter vody (pH 4,8) po dobu 72 hodin. Po72. hodinách sa biomasa Blastobotrys proli-ferans odfiltruje a surový enzým alfa amy-láza sa získá odpařením fermentačnej pódyna vakuovej odparke (celková aktivita 1,8nkat/1 1, špecifická aktivita 2,6 nkat/1 mgproteinu). Příklad 2
Postup podlá příkladu 1 s tým rozdielom,že ako fermentačná póda sa použijú gluténo-vé vypalky (18 %), 3 g škrobu a 0,5 g KH2PO4v 1 1 vody (pH 4,8), pričom fermentácia běžípo dobu 120 hodin. Surový enzým alfa amy-láza má celkovú aktivitu 2,2 ,ukat/l 1 a Špe-cifickú aktivitu 3,5 nkat/1 mg proteinu. Příklad 3
Postup podlá příkladu 1 s tým rozdielom,že získaná fermentačná podá sa spracovávasrážaním etanolom v objemových pomerochetanol ku fermentačnej póde 2 : 1. Získanýprecipiitát po presušení sa spracováva afinit-nou metodou (A. O. č. 157 955) a zušlachte-ná alfa amyláza má aktivitu 1,6 ,ukat a špe-cifickú aktivitu 4,0 nkat/mg, pričom neob-sahuje viac ako 0,05 nkat a-glukozidázovejaktivity. Příklad 4
Postup podlá příkladu 3 s tým rozdielom,že k zrážaniu enzýmu sa použije aceton.Získaná zušlachtená alfa amyláza má aktivi-tu tak, ako je uvedené v příklade 3. P r í k 1 a d 5
Postup podlá příkladu 3 s tým rozdielom,že k zrážaniu sa rpoužije síran amónny ostupni saturácie 0,7. Získaná zušlachtenáalfa amyláza má aktivitu a špecifickú akti-vitu tak, ako je uvedené v příklade 3.
Vynález má využitie jednak pri prípravealfa amylázy osobitných vlastností pre zá-kladný výskům, príprave vzácných cukrov,resp. príprave zmesných cukrov pre potra-vinářské a farmaceutické účely.

Claims (1)

  1. 230889 5 6 PREDMET Sposob produkcie enzýmu alfa amylázypomocou mikroskopické] huby Blastobotrysproliferans, vyznačený tým, že sa kultivujekmeň Blastobotrys proliferans CCMF-493 naživnej pode obsahujúcej (l-*4)-a-D-glukánako induktor enzýmu pri teplote 37 °C a hod-notě pH 4,8 po dobu 48 až 120 hodin a en- vynAlezu zým alfa amylázá sa získává v surovom sta-ve odpařením rastovej p8dy, připadne v pre-čistenom stave zrážaním síranom amonným,alebo organickými rozpúšťadlami, s výhodouetanolom alebo acetónom a v čistom stavepoužitím afinitnej metody.
CS15083A 1983-01-10 1983-01-10 Production method of alpha amylase enzyme CS230889B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS15083A CS230889B1 (en) 1983-01-10 1983-01-10 Production method of alpha amylase enzyme

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS15083A CS230889B1 (en) 1983-01-10 1983-01-10 Production method of alpha amylase enzyme

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS230889B1 true CS230889B1 (en) 1984-08-13

Family

ID=5333156

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS15083A CS230889B1 (en) 1983-01-10 1983-01-10 Production method of alpha amylase enzyme

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS230889B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
USRE32153E (en) Highly thermostable glucoamylaseand process for its production
US3565765A (en) Preparation of high maltose conversion products
Nishimura et al. Purification and some properties of α-amylase from Bacillus subtilis X-23 that glucosylates phenolic compounds such as hydroquinone
Takasaki Productions and utilizations of β-amylase and pullulanase from Bacillus cereus var. mycoides
US4591560A (en) Process for saccharification of starch using enzyme produced by fungus belonging to genus Chalara
Ueda et al. Production of isoamylase by Escherichia intermedia
CA2019756C (en) Novel thermoduric and aciduric pullulanese enzyme and method for its production
US4211842A (en) Starch-degrading benzymes derived from Clacosporium resinae
US4657865A (en) Pullulanase-like enzyme, method for preparation thereof, and method for saccharification of starch therewith
Michelena et al. Production of amylase by Aspergillus foetidus on rice flour medium and characterization of the enzyme
US3998696A (en) Method for producing maltose
US4745067A (en) L-aminoacylases
JP3490481B2 (ja) オリゴ糖の製造方法
US3806421A (en) Amylase inhibitor and method of producing the same
Attyia et al. Biodegradation of agro-industrial orange waste under solid state fermentation and natural environmental conditions
CA1081633A (en) Heat and acid-stable alpha-amylase enzymes and processes for producing the same
JP3761236B2 (ja) 新規なβ−グルコシダーゼ、その製造法および用途
CS230889B1 (en) Production method of alpha amylase enzyme
US5334524A (en) Process for producing levan sucrase using Bacillus licheniformis
US3713983A (en) Method for preparing a thermostable and alkali-stable protease
US3737383A (en) Process for production of enzyme alkaline dextranase
US4591561A (en) Process for the preparation of maltopentaose
Antranikian The formation of extracellular, thermoactive amylase and pullulanase in batch culture by Thermoanaerobacter finnii
US6355467B1 (en) Saccharification enzymes from hyperthermophilic bacteria and processes for their production
US2742399A (en) Production of dextranase